NL9000773A - Werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen. - Google Patents
Werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen. Download PDFInfo
- Publication number
- NL9000773A NL9000773A NL9000773A NL9000773A NL9000773A NL 9000773 A NL9000773 A NL 9000773A NL 9000773 A NL9000773 A NL 9000773A NL 9000773 A NL9000773 A NL 9000773A NL 9000773 A NL9000773 A NL 9000773A
- Authority
- NL
- Netherlands
- Prior art keywords
- gene
- plant
- sequence
- avirulence
- sequence according
- Prior art date
Links
- 244000052769 pathogen Species 0.000 title claims abstract description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 99
- 230000000680 avirulence Effects 0.000 claims abstract description 26
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 25
- 239000005712 elicitor Substances 0.000 claims abstract description 22
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims abstract description 17
- 244000000003 plant pathogen Species 0.000 claims abstract 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 50
- 230000003993 interaction Effects 0.000 claims description 18
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 17
- 241000227653 Lycopersicon Species 0.000 claims description 14
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 13
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 13
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 12
- 241000222291 Passalora fulva Species 0.000 claims description 8
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 7
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 5
- 241000208292 Solanaceae Species 0.000 claims description 4
- 235000002262 Lycopersicon Nutrition 0.000 claims description 3
- 241001233957 eudicotyledons Species 0.000 claims description 3
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 claims description 3
- 235000002634 Solanum Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000207763 Solanum Species 0.000 claims description 2
- 244000000005 bacterial plant pathogen Species 0.000 claims description 2
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 claims 1
- 244000000004 fungal plant pathogen Species 0.000 claims 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 claims 1
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 claims 1
- 230000008261 resistance mechanism Effects 0.000 claims 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims 1
- 244000000006 viral plant pathogen Species 0.000 claims 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 5
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 abstract 2
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 abstract 2
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 abstract 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 20
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 14
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 9
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 8
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 description 6
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 5
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 241000208317 Petroselinum Species 0.000 description 4
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 4
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 3
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 3
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 3
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 3
- 235000011197 perejil Nutrition 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 101000611441 Solanum lycopersicum Pathogenesis-related leaf protein 6 Proteins 0.000 description 2
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 2
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- YLDCUKJMEKGGFI-QCSRICIXSA-N 4-acetamidobenzoic acid;9-[(2r,3r,4s,5r)-3,4-dihydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-3h-purin-6-one;1-(dimethylamino)propan-2-ol Chemical compound CC(O)CN(C)C.CC(O)CN(C)C.CC(O)CN(C)C.CC(=O)NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1.CC(=O)NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1.CC(=O)NC1=CC=C(C(O)=O)C=C1.O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 YLDCUKJMEKGGFI-QCSRICIXSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 108091036407 Polyadenylation Proteins 0.000 description 1
- 108020004518 RNA Probes Proteins 0.000 description 1
- 239000003391 RNA probe Substances 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000010668 complexation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 239000005546 dideoxynucleotide Substances 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 244000053095 fungal pathogen Species 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000000575 pesticide Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 230000009495 transient activation Effects 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/37—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from fungi
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
- C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
- C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
- C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
- C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Harvester Elements (AREA)
- Semiconductor Lasers (AREA)
- Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
Werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen
De uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen, op de DNA-sequentie van een pathogeen (die codeert voor tenminste het gedeelte van het elicitor-eiwitmolecuul dat specifiek kan binden met receptor (r)) die bij deze werkwijze gebruikt kan worden.
Vele schimmels en bacteriën die voor planten pathogeen zijn hebben zich in de loop van de evolutie gespecialiseerd in slechts één gastheer-soort of soms slechts in een variëteit van die soort. Zo zijn er patho-geenrassen te vinden die slechts bepaalde cultivars van de gastheer koloniseren maar andere cultivars niet. In het laatste geval zijn cultivars resistent door middel van een snel induceerbaar afweermechanisme .
Om een geslaagde kolonisering van de plant uit te voeren moet het pathogeen het bestaande afweermechanisme van de plant ontwijken, onderdrukken of teniet doen. In genetische termen kunnen de specifieke ras-cultivar-interacties beschreven worden door een gen-om-gen-model, waarbij een eiwit-elicitormolecuul (e) gecodeerd door een avirulentie-gen (E) van het pathogeen interacteert met een receptor-eiwitmolecuul (r) gecodeerd door een resistentie-gen (R) van de plant en aldus het afweermechanisme in gang zet dat fenotypisch vaak zichtbaar wordt in de vorm van een overgevoeligheidsreactie ook wel bekend onder de naam hypersensitieve respons (HR): het lokaal doodgaan van enkele plantecellen waarmee tegelijkertijd het pathogeen te gronde gaat (De Wit, 1988).
De genetica van gen-om-gen-interacties is in de literatuur goed beschreven, vooral voor interacties tussen pathogene schimmels en planten (I.R. Crute, 1985). doch van de biochemische en de moleculaire mechanismen is nog vrij weinig bekend (De Wit, 1987. Collinge en Slusarenko, 1987)*
Een pathogeen dat het avirulentie-gen niet heeft of waarbij het avirulentie-gen niet tot expressie komt zet het afweersysteem van de gastheer niet in werking, zodat een geslaagde kolonisatie kan optreden: in dit geval is de gastheerplant vatbaar.
Er zijn diverse rasspecifieke avirulentie-genen gekloneerd uit diverse plant-pathogene bacteriën waarbij virulente rassen getransformeerd werden met genomische klonen van avirulente rassen en vervolgens werden getoetst voor avirulentie op plantgenotypes met het juiste resistentie-gen. (Staskawicz et al., '84, Staskawicz et al. '87.
Shintaku M.W. et al., ’89, Vivian et al. '89, Hitchin et al. '89) Deze wijze van isolatie van bacteriële avirulentiegenen is echter niet bruikbaar bij schimmel-avirulentiegenen vanwege de lage transformatie-effi-ciëntie en het gebrek aan geschikte kloneringssystemen zoals cosmide vectoren met een breed gastheergebied. De enige schimmel waarvoor een efficiënt transformatiesysteem met autonoom replicerende vectoren vastgesteld is, is Ustilago maydis (Leong, 1989).
Er zijn in het gehele plantenrijk pathogeen induceerbare plant-promotoren bekend die door alle pathogenen en door door pathogenen geproduceerde aspecifieke elicitoren geïnduceerd worden. Er zijn tevens dergelijke plantpromotoren bekend die daarbij slechts zeer lokaal en nooit systemisch tot expressie komen. Matton en Brisson (1989), bijvoorbeeld beschrijven de nucleotidevolgorde van een cDNA-kloon (pSTH-2) die overeenkomt met mRNA sequenties die specifiek in aardappel accumuleren na elicitatie (Marineau et al., 1987) alsmede een daaraan nauw verwante kloon pSTH-21 die grote gelijkenis qua aminozuurvolgorde vertoont met de cDNA-klonen die overeenkomen met de door elicitor en pathogeen geïnduceerde PR-proteïnen uit de erwt (42 %) (Fritensky et al. 1988) en uit peterselie (37 %) (Somssisch 1988). Matton en Brisson (1989) beschrijven eveneens de accumulatie van mRNA's die overeenkomen met de genoemde klonen pSTH-2 en pSTH-21 in diverse aardappelweefsels en in tomatenbladeren. Somssisch (1986) beschrijft hoe de de novo synthese van PR-(pathogenese gerelateerde) proteïnen in gekweekte peterseliecellen door behandeling met schimmelelicitor bereikt kan worden. In dit systeem wordt PR-proteïne-synthese voorafgegaan door mRNA synthese resulterend uit snelle en tijdelijke activering van de overeenkomstige genen. Dergelijke activering wordt eveneens bij intacte peterselieplanten waargenomen bij fungale infectie (Somssisch, 1988) en gaat gepaard met massale doch lokale mRNA accumulatie rond de infectieplaatsen.
Gevonden is nu dat planten een brede bescherming tegen pathogenen kan worden geboden door in het genetische materiaal van de plant die het resistentiegen (R) bevat tenminste een deel van een bijpassend avirulen-tiegen (E) van een pathogeen in te bouwen, welk gen (E) of deel daarvan codeert voor een elicitor-eiwit (e) of deel daarvan dat specifieke interactie vertoont met een afweer-receptor (r) van de plant, waarbij het gen (E) of deel daarvan zodanig wordt ingebouwd dat het wordt bestuurd door een door alle pathogenen induceerbare plantpromotor (P).
Van de pathogeen-induceerbare plantpromotor (P) wordt geeist, dat: a) deze door alle pathogenen en door pathogenen geproduceerde aspecifieke elicitoren geïnduceerd wordt; b) deze vrijwel alleen door pathogenen geïnduceerd kan worden en niet of nauwelijks geïnduceerd wordt door andere uitwendige prikkels; c) de genen die onder de controle van de promotor staan slechts zeer lokaal en nimmer systemisch tot expressie kunnen komen.
Voorbeelden van dergelijke plantpromotoren zijn in het hele plantenrijk bekend, zowel de monocotyle als de dicotyle planten bezitten dergelijke plantpromotoren. De hiervoor reeds beschreven plantpromotoren die tot de familie der Solanaceae en in het bijzonder tot het geslacht Lycoper-sicon of Solanum behoren zijn goede voorbeelden van dergelijke plantpromotoren.
Er is tevens een werkwijze gevonden voor het opsporen van een resistentiegen (R) uit een plant, waarvan het produkt (r) interactie vertoont met een specifiek elicitor-eiwitmolecuul (e) dat gecodeerd wordt door een avirulentiegen (E) van een pathogeen. Bij deze werkwijze wordt met behulp van het produkt van een avirulentiegen (E), een specifiek elicitor-eiwit (e) een resistentiegenprodukt (r) en vervolgens een resistentiegen (R) geïsoleerd. In principe kan deze werkwijze worden toegepast voor de isolatie van elk resistentiegenprodukt (r) en het coderende resistentiegen (R) wanneer het bijpassende avirulentiegen (E) en zijn produkt (e) bekend zijn. De werkwijze kan als volgt weergegeven worden; men maakt een cDNA-bank van een plant met het resistentiegen (R) in een expressievector waarbij het produkt van (R), de receptor (r), geproduceerd wordt. Men spoort een positieve kloon uit de cDNA-bibliotheek op door middel van binding van een specifiek elicitor-eiwitmolecuul (e) aan het receptoreiwit (r). Men maakt de binding (complexering van (e) aan (r) zichtbaar door (e) van een detecteerbaar label te voorzien. Deze positieve cDNA-kloon bevat de coderende sequentie voor het resistentiegen. Met deze cDNA-kloon kan het intakte gen (R) opgespoord worden uit de genomische bibliotheek voor de plant die het resistentiegen bevat. Met behulp van de cDNA of genomische kloon kan een plant zonder resistentiegen getransformeerd worden; positieve transformanten worden gescreend op het bezit van het resistentiegen door inoculatie (besmetting) met het desbetreffende pathogeen. Het gekloneerde gen (R) kan in planten worden ingebracht, hetzij door middel van genetische manipulatietechnieken hetzij door middel van kruising.
Bij aanwezigheid van het resistentiegen (R) in de plant die beschermd moet worden tegen pathogenen is het slechts nodig voor het verkrijgen van de resistentie volgens de werkwijze van de vinding het overeenkomstige avirulentiegen (E) van het gen-om-gen model in de plant te brengen in de vorm van een DNA-sequentie, die tenminste de sequentie van een van een pathogeen afkomstig avirulentiegen (E) dat voor een specifiek elicitoreiwitmolecuul (e) codeert en een door alle pathogenen induceerbare plantpromotor (P) omvat, zodanig dat de sequentie die voor het produkt van gen (E) codeert onder regulatie staat van de plantpromotor (P).
Tegen het tweecomponentensensorsysteem volgens de uitvinding, dat enerzijds de component resistentiegen (R) en anderzijds avirulentiegen (E) gekoppeld aan plantpromotor (P) omvat, kan niet snel resistentie optreden omdat aspecifieke, door alle pathogenen induceerbare plantpromotoren gebruikt worden om de expressie van het voor het pathogeen dodelijke avirulentiegen (E) te induceren. De eigenschap van deze pathogeen-induceerbare plantpromotoren dat ze de expressie van het achterliggende gen slechts zeer lokaal induceren is essentieel bij combinatie met een avirulentiegen volgens de uitvinding, aangezien daardoor slechts een zeer beperkt aantal plantecellen tengevolge van de in werking gezette hypersensitieve respons te gronde gaan. Mocht deze promotor niet slechts lokaal induceerbaar zijn dan zal dit het te gronde gaan van de gehele plant tot gevolg hebben hetgeen uiteraard niet gewenst wordt.
Doordat het tweecomponentensensorsysteem volgens de uitvinding met elk avirulentiegen-resistentiegencombinatie kan worden uitgevoerd in elke plant waarin het avirulentiegen en het resistentiegen tot expressie gebracht kunnen worden, is het zeer breed inzetbaar tegen vele zo niet alle pathogenen uit het plantenrijk.
Het tweecomponentensensorsysteem biedt een oplossing bij uitstek om het gebruik van de nu frequent tegen pathogenen toegepaste bestrijdingsmiddelen terug te dringen. Dit zal op termijn het milieu voor een groot deel van deze middelen kunnen ontlasten.
Hieronder volgt bij wijze van voorbeeld een beschrijving van de bereiding van een tweecomponentensensorsysteem volgens de werkwijze van de vinding, waarbij men als avirulentiegen een avirulentiegen van Cladosporium fulvum (met name het A9 avirulentiegen) toepast in combinatie met het daarbij behorende resistentiegen Cf9 dat van nature in een tomaatcultivar aanwezig is. Dit tweecomponentensensorsysteem kan in ieder geval door middel van kruising in het geslacht Lycopersicon en een deel van de familie van de Solanaceae worden verspreid en desgewenst via genetische manipulatietechnieken daarin of in andere families worden ingebouwd. Er zijn diverse door schimmel gecodeerde rasspecifieke elicitormoleculen geïdentificeerd die necrose induceren op tomaat-cultivars met de overeenkomstige resistentiegenen (De Wit en Spikman 1982; De Wit et al. 1985)· Een dergelijk rasspecifiek elicitormolecuul, het produkt van avirulentiegen A9 is tot homogeniteit gezuiverd. Het gezuiverde eiwit induceerde snelle en lokale necrose wanneer het in bladeren van tomategenotypen die het resistentiegen Cf9 bevatten, werd geïnjecteerd. In genotypen die andere Cf-genen bevatten vond dit niet plaats. De aminozuurvolgorde van het gezuiverde elicitormolecuul werd bepaald (Scholtens-Toma en De Wit 1988). Het elicitormolecuul werd gevormd bij alle compatibele interacties tussen tomaat-C. fulvum, waarbij rassen van schimmels betrokken waren die avirulent waren op tomaat Cf9 genotypes, echter bij geen enkele interactie waarbij rassen van schimmels betrokken waren, die virulent zijn op Cf9 genotypes (Schol tens-Torna et al. 1989)· Teneinde het mRNA te detecteren dat voor het necrose inducerende eiwit codeerde, werden 4 oligonucleotideprobes gesynthetiseerd die afgeleid waren van de aminozuursequentie (Fig. 1). De oligonucleotiden bevatten hetzij mengsels van nucleotiden (zoals in probe B) of inosinen (zoals in probe D) of een combinatie van beide (zoals in probes A en C). Alle vier oligonucleotiden werden aan de 5'“ uiteinden gelabeld en gehybridiseerd met identieke Northern Blots die gelijke hoeveelheden poly(A)-RNA bevatten afkomstig uit gezonde tomateplanten, in vitro gekweekte C.fulvum en 3 verschillende compatibele tomaat-C.fulvum interacties. Fig. 2 toont dat probe B specifiek hybridiseerde met een mRNA van ongeveer 600 nucleotiden dat bij twee compatibele interacties aanwezig was, namelijk: cultivar Cf4/ras 4 (kolom 3) en cultivar Cf5~ras 5 (kolom 4). Dit mRNA werd noch bij tomateplanten die niet geïnfecteerd waren (kolom 1), noch bij in vitro gekweekte C. fulvum (kolom 2) gevonden. Er werd eveneens geen hybridisatie waargenomen bij de interactie van cultivar Cf5 met ras 2.4.5·9·11 (kolom 5) zoals verwacht kon worden voor een interactie van een ras dat virulent is op tomaat Cf9 genotypes. Er werd aldus geconcludeerd dat probe B mRNA voor het necrose inducerende eiwit detecteerde. Probes A, C en D detecteerden geen specifieke mRNA's zoals getoond in Fig. 2.
Oligonucleotideprobe B werd gebruikt in een primer-verlengings-proef. Het oligonucleotide werd aan het 5'-uiteinde gelabeld en gehybridiseerd met gelijke hoeveelheden poly(A)-RNA afkomstig uit compatibele interacties van cultivar Cf5 met hetzij ras 5 hetzij ras 2.4.5·9·11 (weergegeven in Fig. 1, kolommen 4 en 5 resp.). De primer werd verlengd met reverse transcriptase en de verlengingsprodukten werden geanalyseerd op een PAGE-gel. Fig. 3 toont dat een specifiek verlengingsprodukt gevormd werd op poly(A)-RNA afkomstig uit de interactie van cultivar
Cf5/ras 5 (kolom 1) echter niet op poly(A)-RNA afkomstig uit de interactie cultivar Cf5/ras 2.4.5·9*11 (kolom 2). De grootte van het verlen-gingsprodukt bedroeg ongeveer 270 nucleotiden hetgeen aanduidde dat A9 mRNA ongeveer 200 nucleotiden bezit voor de sequentie die voor het necrose inducerende eiwit codeert.
Poly(A)-RNA afkomstig uit de interactie Cf5/ras 5 (weergegeven in Fig. 2, kolom 4) werd toegepast om een cDNA bibliotheek in lambda gtll te bereiden. Er werd een bibliotheek verkregen die 100.000 onafhankelijke recombinanten bevatte. Het onderzoeken van filters die 5000 fagen bevatten met oligonucleotideprobe B dat aan het uiteinde gelabeld was resulteerde in de isolatie van twee mogelijke candidaten één die zwak hybridiseerde (faag A9-1), en één die beduidend beter hybridiseerde (faag A9~2). Beide fagen werden gezuiverd en het DNA ervan geïsoleerd. De faag DNA's werden gelabeld en gehybridiseerd aan blots die identiek waren aan de blot die in Fig. 2 getoond wordt. Faag A9~l hybridiseerde met een mRNA dat ongeveer 1500 nucleotiden bevatte, en in kleine hoeveelheid aanwezig was bij de drie interacties tussen tomaat- en C.fulvum. Deze faag bevatte geen cDNA dat overeenkwam met het mRNA dat waargenomen was in Fig. 2 en werd niet verder geanalyseerd.
Het gelabelde DNA van faag A9-2 hybridiseerde met een mRNA van ongeveer 600 nucleotiden dat slechts aanwezig was in de compatibele interacties cultivar Cf4/ras 4 en cultivar Cf5/ras 5 dat wil zeggen in een patroon overeenkomstig met de hybridisatie die met oligonucleotideprobe B werd waargenomen. Derhalve bevatte faag A9-2 een kopie van het mRNA dat voor het necrose inducerende eiwit codeert. Het cDNA dat in faag A9-2 aanwezig was werd gesubkloneerd en de sequentie werd bepaald. De insertie was 405 baseparen lang en kwam overeen met het 3'-uiteinde van het mRNA waaronder een poly(A)-staart van 20 nucleotiden. De insertie codeerde de gehele sequentie van het necrose inducerende eiwit en was omvat binnen een langer open reading frame. Uit de positie van de oligonucleotideprobe B in de DNA sequentie en de grootte van het primer-verlengingsprodukt werd geschat dat de insertie van kloon A9-2 ongeveer 110 baseparen van het 5'-uiteinde van het mRNA miste. Teneinde een cDNA-kloon met volledige lengte te verkrijgen werd met de cDNA-bibliotheek nogmaals onderzocht met een gelabelde RNA-probe die 70 nucleotiden van 5'-uiteinde van de insertie van kloon A9-2 bevatte. Drie verschillende fagen A9-3, A9~5 en A9-8 werden verkregen en de inserties daarvan werden gesubkloneerd en gesequenced. De sequentie van de drie klonen was volledig identiek aan de sequentie van kloon A9-2 in de overlappende gebieden. De 4 klonen bevatten poly(A)-staarten die op verschillende plaatsen in de sequentie aanvingen. Uit de primerverlengingsproef die in Fig. 3 wordt getoond werd afgeleid dat de grootste kloon (A9~3) ongeveer 35 nucleotiden miste. Derhalve werd een nieuwe primer ontworpen, die hybri-diseerde bij plaats 75~100. Deze primer werd gebruikt bij een primerverlengingsproef op poly{A)-RNA bij aanwezigheid van dideoxynucleotiden. Deze RNA-sequentie leidde tot de toevoeging van nog 2k nucleotiden voor de insertie van A9~3· Er werden nog andere eindprodukten waargenomen die 5-20 nucleotiden langer waren dan het hoofdverlengingsprodukt. De diverse eindprodukten van de primerverlenging werden niet veroorzaakt door afbraak van mRNA, aangezien een verlengingsproef met een primer voor een ander mRNA slechts één discreet verlengingsprodukt met de juiste grootte gaf. De sequentie van het A9 mRNA en de structuur van de overeenkomstige cDNA-klonen wordt getoond in Fig. k. De isolatie en karakterisatie van de cDNA-klonen onthulde dat het necrose inducerende eiwit gevormd wordt als een precursoreiwit van tenminste 63 aminozuren. Verrassenderwijs vertoonde de DNA sequentie een additioneel histidine-codon bij het C-uiteinde van de sequentie van het volwaardige elicitor-molecuul. Er was eerder beschreven dat het elicitormolecuul 27 aminozuren lang was (Scholtens-Toma en De Wit, 1988). Heronderzoek van de eiwitsequentiegegevens bevestigde echter de aanwezigheid van een extra histidine-residu of plaats 28. Dit residu was over het hoofd gezien tijdens de oorspronkelijke analyse van het eiwitsequentie vanwege een laag signaal dat met dit aminozuur verkregen wordt. Molecuulgewicht van het volwaardige A9 elicitor-eiwitmolecuul is 3189 Dalton.
Referenties 1. Collinge, D.B. and Slusarenko, A.J. 1987, Plant gene expression in response to pathogens,, Plant.Mol.Biol. 2.» 389-410 2. Crute I.R. (1985). The genetic basis of relationships between microbial parasites and their hosts. "Mechanisms of resistance to plant diseases", (Ed. Fraser R.S.S.), 80-142, M.Nijhoff/Dr.W.Junk Uitg.Mij., Dordrecht 3. De Wit P.J.G.M. and Spikman G. (1982), Physiol.Plant Pathol. 21, 1-11 4. Fristensky B., Horovitz D., and Hadwiger L.A. (1988). cDNA Sequences for pea disease resistance response genes. Plant Molecular Biology 11, 713-715 5. Hitchin F.E. et al. (1989) Physiol. Molec. Plant Pathol. 25» 335— 344.
6. Leong S.A. and Holden (1989), Annu.Rev.Phytopathol. 2£, 463-481.
7. Marineau, C., Matton D.P., and Brisson, N. 1987· Differential Accumulation of potato tuber mRNA’s during the hypersensitive response induced by arachidonic acid elicitor. Plant Mol.Biol. 2.» 335-342.
8. Matton D.P. en Brisson N. (1989). Cloning, expression, and sequence conservation of pathogenesis-related gene transcripts of potato. Molecular Plant-Microbe Interactions 2, 325“331· 9. Scholtens-Toma I.M.J. and De Wit P.J.G.M. (1988) Physiol.Molec. Plant Pathol. 22» 59“67 10. Scholtens-Toma I.M.J., De Wit G.J.M. en De Wit P.J.G.M. (1989) Neth.J. Plant Pathol. 25* suppl.l, 161-168.
11. Shintaku M.H. et al. (1989) Physiol. Molec.Plant Pathol. 25» 313“ 322.
12. Somssisch I.E., Schmelzer E., Bollmann J. and Hahlbrock K. 1986. Rapid activation by fungal elicitor of genes encoding "pathogenesis-related" proteins in cultured parsley cells. Proc.Natl. Acad.Sci. USA 82, 2427-2430.
13. Somssich I.E., Schmelzer E., Kawlleck P. en K. Hahlbrock (1988). Gene structure and in situ transcript localization of pathogenesis-related protein 1 in parsley. Molecular and General Genetics 213, 93—98.
14. Staskawicz B.J., DahlbeckD., Keen N.T. (1984) Proc.Natl.Acad.Sci. USA 81, 6024-6028.
15· Staskawicz B. et al. (1987) J.Bacter. 169. 5789-5794.
16. Vivian A. et al. (1989) Physiol. Molec. Plant Pathol. 25» 335-344.
17. de Wit P.J.G.M. en Hofman J.E. en Velthuis G.C.M. en Kuc J.A. 1985 - Plant fysiol vol. 77 blz. 642-647 Isolation and characterisation of an elicitor of nedrosis isolated from intercellular fluids of compatible interactions of clad* fulvum (syn. fulvia, fulva) and tomato.
18. de Wit P.J.G.M. - specificity of active resistance mechanisms in plant- fungus interactions in: "fungal infection of plants ed. G.F. Pegg en P.G. Ayres blz. 1 - 24 Cambr. University Press.
Claims (20)
1. DNA sequentie die tenminste de sequentie van een van een patho-geen afkomstig avirulentiegen (E) dat voor een specifiek elicitor-eiwit-molecuul (e) of een deel daarvan welk deel specifiek kan binden aan receptor (r) codeert en een door alle pathogenen induceerbare plantpromotor (P) omvat, zodanig dat de sequentie die voor het produkt van gen (E) codeert onder regulatie staat van de plantpromotor (P).
2. Sequentie volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het gen (E) bij plantpathogene schimmels voorkomt.
3· Sequentie volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het gen (E) bij plantpathogene bacteriën voorkomt.
4. Sequentie volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het gen (E) bij plantpathogene virussen voorkomt.
5. Sequentie volgens conclusies 1 en 2, met het kenmerk, dat het gen (E) bij Cladosporium fulvum voorkomt.
6. Sequentie volgens conclusie 5. met het kenmerk, dat het gen (E) het bij C. fulvum voorkomend avirulentiegen A9 omvat.
7. Sequentie volgens conclusie 6, met het kenmerk, dat avirulentiegen A9 de nucleotidevolgorde omvat zoals weergegeven in Fig. 4.
8. Sequentie volgens conclusies 1-7. met het kenmerk, dat de plantpromotor plaatselijk en alleen tijdens de aanval door een pathogeen tot expressie komt.
9· Sequentie volgens conclusies 1-8, met het kenmerk, dat men de plantpromotor kiest uit een dicotyle plant behorend tot de familie der Solanaceae.
10. Sequentie volgens conclusie 9» met het kenmerk, dat men de plantpromoter kiest uit een dicotyle plant behorend tot het geslacht Lycopersicon of Solanum.
11. Werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen, met het kenmerk, dat men in het genetische materiaal van een plant, die een resistentiegen (R) bevat dat voor een receptor (r) van een elicitor-eiwitmolecuul (e) codeert en bij de interactie met (e) het natuurlijke afweermechanisme van de plant activeert waaronder de overgevoeligheidsreactie, een DNA-sequentie volgens conclusie 1 aanbrengt.
12. Werkwijze volgens conclusie 11, met het kenmerk, dat men gen(R) in de plant heeft aangebracht.
13. Werkwijze volgens conclusie 12, met het kenmerk, dat men het gen (R) door middel van een kruising heeft aangebracht.
14. Werkwijze volgens conclusie 12, met het kenmerk, dat men het gen (R) onder toepassing van genetische manipulatietechnieken heeft aangebracht.
15· Werkwijze volgens een of meer der conclusie 11-14, met het kenmerk, dat het resistentiegen (R) afkomstig is uit een plant waarvoor een bijpassend (interacterend) avirulentiegen (E) met zijn produkt (e) bestaat.
16. Werkwijze volgens conclusie 15, met het kenmerk, dat men als resistentiegen (R) een resistentiegen (R) toepast dat voorkomt bij de familie der Solanaceae.
17. Werkwijze volgens conclusie 16, met het kenmerk, dat men als resistentiegen (R) een resistentiegen (R) toepast dat voorkomt bij de soort Lycopersicon esculentum.
18. Werkwijze volgens conclusie 17, met het kenmerk, dat het resistentiegen (R) Cf9 is.
19. Werkwijze volgens conclusie 18, met het kenmerk, dat het avirulentiegen (E) A9 is.
20. Plant beschermd tegen pathogenen volgens de werkwijze van de conclusies 11-18. Behoort bij octrooiaanvrage No. 90.00773 t.n.v. Rijkslandbouwuniversiteit Wageningen Wij zigingsblad Gaarne de onderstaande wijzigingen aanbrengen in de oorspronkelijk ingediende tekst: Blz. 8a aanvullen met: "19. De Wit, P.J.G.M. (1988) Elicitation of active resistance mechanisms. In: "Biology and molecular biology of plant-pathogen interactions". Ed. J. Bailey, NATO ASI Series, Vol. HI, blz. 1^9-169, Springer Verlag, Berlijn-Heidelberg" ; blz. 10, regel 19 "conclusies 11-18" moet zijn: "conclusies 11-19·"·
Priority Applications (18)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL9000773A NL9000773A (nl) | 1990-04-02 | 1990-04-02 | Werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen. |
| EP98200559A EP0874055A3 (en) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Method for the protection of plants against pathogens |
| ES91907897T ES2128318T3 (es) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Metodo para la proteccion de plantas contra patogenos. |
| CA002056439A CA2056439A1 (en) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Method for the protection of plants against pathogens |
| AU76845/91A AU642252B2 (en) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Method for the protection of plants against pathogens |
| PCT/NL1991/000052 WO1991015585A1 (en) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Method for the protection of plants against pathogens |
| EP91907897A EP0474857B1 (en) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Method for the protection of plants against pathogens |
| DE69130660T DE69130660T2 (de) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Verfahren zur beschützung von pflanzen gegen pathogene |
| JP3507720A JPH05505110A (ja) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | 植物の病原からの保護方法 |
| DK91907897T DK0474857T3 (da) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Fremgangsmåde til beskyttelse af planter mod patogener |
| AT91907897T ATE174931T1 (de) | 1990-04-02 | 1991-03-27 | Verfahren zur beschützung von pflanzen gegen pathogene |
| IE19990337A IE990337A1 (en) | 1990-04-02 | 1991-03-28 | Method for the Protection of Plants against Pathogens |
| IE108391A IE911083A1 (en) | 1990-04-02 | 1991-03-28 | Method for the protection of plants against pathogens |
| IL9773691A IL97736A (en) | 1990-04-02 | 1991-03-31 | Method for the protection of plants against pathogens |
| PT97230A PT97230B (pt) | 1990-04-02 | 1991-04-02 | Metodo para a proteccao de plantas contra patogenos mediante introducao de um gene de avirulenica ou uma sua porcao no genoma de uma planta |
| IE111091A IE911110A1 (en) | 1990-04-02 | 1991-04-03 | Method for the protection of plants against pathogens |
| US08/199,984 US5866776A (en) | 1990-04-02 | 1994-02-22 | Method for the protection of plants against pathogens |
| GR990400548T GR3029461T3 (en) | 1990-04-02 | 1999-02-19 | Method for the protection of plants against pathogens |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NL9000773 | 1990-04-02 | ||
| NL9000773A NL9000773A (nl) | 1990-04-02 | 1990-04-02 | Werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen. |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NL9000773A true NL9000773A (nl) | 1991-11-01 |
Family
ID=19856851
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NL9000773A NL9000773A (nl) | 1990-04-02 | 1990-04-02 | Werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen. |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5866776A (nl) |
| EP (2) | EP0474857B1 (nl) |
| JP (1) | JPH05505110A (nl) |
| AT (1) | ATE174931T1 (nl) |
| AU (1) | AU642252B2 (nl) |
| CA (1) | CA2056439A1 (nl) |
| DE (1) | DE69130660T2 (nl) |
| DK (1) | DK0474857T3 (nl) |
| ES (1) | ES2128318T3 (nl) |
| GR (1) | GR3029461T3 (nl) |
| IE (3) | IE990337A1 (nl) |
| IL (1) | IL97736A (nl) |
| NL (1) | NL9000773A (nl) |
| PT (1) | PT97230B (nl) |
| WO (1) | WO1991015585A1 (nl) |
Families Citing this family (48)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5378819A (en) * | 1990-05-25 | 1995-01-03 | Washington State University Research Foundation | Systemin, an inducer of plant defense proteins, and methods of use |
| US5883076A (en) * | 1990-05-25 | 1999-03-16 | Washington State University Research Foundation, Inc. | Systemin |
| ATE255639T1 (de) * | 1992-03-20 | 2003-12-15 | Max Planck Gesellschaft | Auf fungus reagierendes chimaeres gen |
| FR2703054B1 (fr) * | 1993-03-23 | 1995-06-16 | Sanofi Elf | Promoteur vegetal inductible au stress et cellules vegetales contenant une unite d'expression d'une proteine d'interet comprenant ledit promoteur. |
| CA2178488A1 (en) * | 1993-12-24 | 1995-07-06 | Jonathan Dallas George Jones | Plant pathogen resistance genes and uses thereof |
| US5981730A (en) * | 1994-04-13 | 1999-11-09 | The General Hospital Corporation | RPS gene family, primers, probes, and detection methods |
| WO1995031564A2 (en) * | 1994-05-11 | 1995-11-23 | John Innes Centre Innovations Limited | Method of introducing pathogen resistance in plants |
| AUPN283495A0 (en) * | 1995-05-05 | 1995-06-01 | Australian National University, The | Plant promoter activated by fungal infection |
| US6100451A (en) * | 1995-05-18 | 2000-08-08 | Board Of Trustees Of The University Of Kentucky | Pathogen-inducible regulatory element |
| US5981843A (en) | 1995-05-18 | 1999-11-09 | Board Of Trustee Of The University Of Kentucky | Elicitin-mediated plant resistance |
| DE19621572A1 (de) * | 1996-05-29 | 1997-12-04 | Max Planck Gesellschaft | Lokalisierter Zelltod in Pflanzen |
| US6235974B1 (en) * | 1996-12-05 | 2001-05-22 | Cornell Research Foundation, Inc. | Hypersensitive response induced resistance in plants by seed treatment with a hypersensitive response elicitor |
| US6392119B1 (en) | 1997-01-24 | 2002-05-21 | Dna Plant Technology Corporation | Two component plant cell lethality methods and compositions |
| EP1006780A4 (en) * | 1997-01-24 | 2005-03-09 | Dna Plant Techn Corp | PROCESS AND 2-COMPONENT COMPOSITIONS THAT INTRODUCE THE LETALITY OF PLANT CELLS |
| US6022739A (en) * | 1997-07-09 | 2000-02-08 | Washington State University Research Foundation, Inc. | Systemin |
| ID27274A (id) * | 1998-02-25 | 2001-03-22 | Wisconsin Alumni Res Found | Gen spesifitas kultivar dari patogen padi magnaporthe grisea, dan metode-metode penggunaannya |
| WO1999043823A1 (en) * | 1998-02-26 | 1999-09-02 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods for enhancing disease resistance in plants |
| US6476292B1 (en) | 1998-02-26 | 2002-11-05 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods for enhancing disease resistance in plants |
| AU759037B2 (en) | 1998-03-06 | 2003-04-03 | Syngenta Mogen Bv | Method for the induction of pathogen resistance in plants |
| EP1078090A1 (en) * | 1998-05-12 | 2001-02-28 | Institute of Molecular Agrobiology | Disease resistant transgenic plants |
| US6156954A (en) * | 1998-07-21 | 2000-12-05 | The Salk Institute For Biological Studies | Receptor-like protein kinase, RKN, and method of use for increasing growth and yield in plants |
| US6479731B1 (en) * | 1998-08-04 | 2002-11-12 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Pi-ta gene conferring fungal disease resistance to plants |
| WO2000014260A1 (en) * | 1998-09-03 | 2000-03-16 | University Of Florida | Methods for controlling viral diseases in plants |
| FR2791360B1 (fr) * | 1999-03-22 | 2003-10-10 | Aventis Cropscience Sa | Promoteur inductible, comtii, gene chimere le comprenant et plantes transformees |
| FR2791359A1 (fr) * | 1999-03-22 | 2000-09-29 | Rhone Poulenc Agrochimie | Promoteur inductible comtii, gene chimere le comprenant et plantes transformees |
| EP1041148A1 (en) * | 1999-04-02 | 2000-10-04 | Mogen International N.V. | Pathogen inducible promoter |
| GB0006244D0 (en) * | 2000-03-15 | 2000-05-03 | Zeneca Ltd | Method for combating attack and spread of fungal pathogens in plants |
| US20020059658A1 (en) * | 2000-06-15 | 2002-05-16 | Zhong-Min Wei | Methods of improving the effectiveness of transgenic plants |
| AU7061101A (en) * | 2000-07-03 | 2002-01-14 | Syngenta Mogen Bv | Elicitor from cladosporium |
| JP2002325519A (ja) * | 2000-09-07 | 2002-11-12 | Japan Tobacco Inc | 病害抵抗性植物及びその作出方法 |
| US6743969B2 (en) | 2000-11-14 | 2004-06-01 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Modification of PI-TA gene conferring fungal disease resistance to plants |
| WO2002061043A2 (en) | 2001-01-29 | 2002-08-08 | Cargill, Incorporated | Fungal resistant transgenic plants |
| EP1334979A1 (en) | 2002-02-08 | 2003-08-13 | Kweek-en Researchbedrijf Agrico B.V. | Gene conferring resistance to Phytophthera infestans (late-blight) in Solanaceae |
| JP4552021B2 (ja) * | 2002-12-03 | 2010-09-29 | 財団法人名古屋産業科学研究所 | 病原菌応答性プロモータ |
| KR100559080B1 (ko) * | 2003-10-02 | 2006-03-10 | 삼성에버랜드 주식회사 | 잔디 생장 촉진물질 및 잔디 생장 촉진물질의 검정 유전자 |
| EP1781784A2 (en) | 2004-08-02 | 2007-05-09 | BASF Plant Science GmbH | Method for isolation of transcription termination sequences |
| US10787673B2 (en) | 2007-02-01 | 2020-09-29 | Enza Zaden Beheer B.V. | Disease resistant Brassica plants |
| WO2008092505A1 (en) | 2007-02-01 | 2008-08-07 | Enza Zaden Beheer B.V. | Disease resistant plants |
| EP2455473B2 (en) | 2007-02-01 | 2021-08-11 | Enza Zaden Beheer B.V. | Disease resistant plants |
| US11685926B2 (en) | 2007-02-01 | 2023-06-27 | Enza Zaden Beheer B.V. | Disease resistant onion plants |
| US10501754B2 (en) | 2007-02-01 | 2019-12-10 | Enza Zaden Beheer B.V. | Disease resistant potato plants |
| US8043242B2 (en) * | 2008-06-16 | 2011-10-25 | Thermotek, Inc. | Method of and system for joint therapy and stabilization |
| DE102012003848A1 (de) * | 2012-02-29 | 2013-08-29 | Kws Saat Ag | Pathogenresistente transgene Pflanze |
| HUE069815T2 (hu) | 2013-07-22 | 2025-04-28 | Enza Zaden Beheer Bv | A peronoszpóra elleni rezisztenciát biztosító gének napraforgóknál |
| US12173302B2 (en) | 2014-01-14 | 2024-12-24 | Enza Zaden Beheer B.V. | Disease resistant petunia plants |
| ES2886551T3 (es) | 2014-06-18 | 2021-12-20 | Enza Zaden Beheer Bv | Plantas resistentes a Phytophthora pertenecientes a la familia Solanaceae |
| WO2018101824A1 (en) | 2016-11-30 | 2018-06-07 | Universiteit Van Amsterdam | Plants comprising pathogen effector constructs |
| US20210071195A1 (en) | 2017-08-29 | 2021-03-11 | Scienza Biotechnologies 3 B.V. | Soybean plants resistant to phytophthora sojae |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3650756T2 (de) * | 1985-03-21 | 2001-10-04 | Cornell Research Foundation, Inc. | Vom parasit abgeleiteter widerstand |
| ATE205253T1 (de) * | 1987-07-10 | 2001-09-15 | Syngenta Participations Ag | Induzierbare virusresistenz bei pflanzen |
| NL8800725A (nl) * | 1988-03-23 | 1989-10-16 | Mogen International N V En Rij | Recombinant dna; getransformeerde microorganismen, plantecellen en planten; werkwijze voor het produceren van een polypeptide of eiwit m.b.v. planten of plantecellen; werkwijze voor het produceren van planten met virusresistentie. |
-
1990
- 1990-04-02 NL NL9000773A patent/NL9000773A/nl not_active Application Discontinuation
-
1991
- 1991-03-27 EP EP91907897A patent/EP0474857B1/en not_active Revoked
- 1991-03-27 AU AU76845/91A patent/AU642252B2/en not_active Expired
- 1991-03-27 CA CA002056439A patent/CA2056439A1/en not_active Abandoned
- 1991-03-27 WO PCT/NL1991/000052 patent/WO1991015585A1/en not_active Application Discontinuation
- 1991-03-27 AT AT91907897T patent/ATE174931T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-03-27 EP EP98200559A patent/EP0874055A3/en not_active Withdrawn
- 1991-03-27 ES ES91907897T patent/ES2128318T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-27 JP JP3507720A patent/JPH05505110A/ja active Pending
- 1991-03-27 DE DE69130660T patent/DE69130660T2/de not_active Revoked
- 1991-03-27 DK DK91907897T patent/DK0474857T3/da active
- 1991-03-28 IE IE19990337A patent/IE990337A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-03-28 IE IE108391A patent/IE911083A1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-03-31 IL IL9773691A patent/IL97736A/xx not_active IP Right Cessation
- 1991-04-02 PT PT97230A patent/PT97230B/pt not_active IP Right Cessation
- 1991-04-03 IE IE111091A patent/IE911110A1/en unknown
-
1994
- 1994-02-22 US US08/199,984 patent/US5866776A/en not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-02-19 GR GR990400548T patent/GR3029461T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL97736A (en) | 2000-02-17 |
| GR3029461T3 (en) | 1999-05-28 |
| JPH05505110A (ja) | 1993-08-05 |
| DK0474857T3 (da) | 1999-08-23 |
| WO1991015585A1 (en) | 1991-10-17 |
| PT97230B (pt) | 1998-07-31 |
| DE69130660T2 (de) | 1999-06-17 |
| IE911083A1 (en) | 1991-10-09 |
| EP0874055A2 (en) | 1998-10-28 |
| AU642252B2 (en) | 1993-10-14 |
| AU7684591A (en) | 1991-10-30 |
| ATE174931T1 (de) | 1999-01-15 |
| PT97230A (pt) | 1991-12-31 |
| IE990337A1 (en) | 2000-11-15 |
| IE911110A1 (en) | 1991-10-09 |
| DE69130660D1 (de) | 1999-02-04 |
| EP0874055A3 (en) | 1999-06-02 |
| CA2056439A1 (en) | 1991-10-03 |
| ES2128318T3 (es) | 1999-05-16 |
| US5866776A (en) | 1999-02-02 |
| IL97736A0 (en) | 1992-06-21 |
| EP0474857A1 (en) | 1992-03-18 |
| EP0474857B1 (en) | 1998-12-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NL9000773A (nl) | Werkwijze voor het beschermen van planten tegen pathogenen. | |
| Kirsch et al. | A highly specific pathogen‐responsive promoter element from the immediate‐early activated CMPG1 gene in Petroselinum crispum | |
| Maimbo et al. | Induction of a small heat shock protein and its functional roles in Nicotiana plants in the defense response against Ralstonia solanacearum | |
| Zeidler et al. | Innate immunity in Arabidopsis thaliana: lipopolysaccharides activate nitric oxide synthase (NOS) and induce defense genes | |
| Schäfer et al. | Random primer dependent PCR differentiates aggressive from non‐aggressive isolates of the oilseed rape pathogen Phoma lingam (Leptosphaeria maculans) | |
| Hugot et al. | Coordinated regulation of genes for secretion in tobacco at late developmental stages: association with resistance against oomycetes | |
| EP2268819B1 (de) | Verfahren zur erzeugung einer breitband-resistenz gegenüber pilzen in transgenen pflanzen | |
| Sävenstrand et al. | Molecular markers for ozone stress isolated by suppression subtractive hybridization: specificity of gene expression and identification of a novel stress‐regulated gene | |
| Raacke et al. | Yeast increases resistance in Arabidopsis against Pseudomonas syringae and Botrytis cinerea by salicylic acid-dependent as well as-independent mechanisms | |
| Zhan et al. | Identification and characterization of putative effectors from Plasmodiophora brassicae that suppress or induce cell death in Nicotiana benthamiana | |
| US20210388376A1 (en) | Plants and methods for controlling fungal plant pathogens | |
| Ton et al. | The Arabidopsis ISR1 locus is required for rhizobacteria-mediated induced systemic resistance against different pathogens | |
| Reimann-Philipp et al. | The mechanism (s) of coat protein-mediated resistance against tobacco mosaic virus | |
| WO2001009174A2 (en) | Plant defensin variants | |
| Narusaka et al. | High-throughput screening for plant defense activators using a β-glucuronidase-reporter gene assay in Arabidopsis thaliana | |
| Kuehnle et al. | Novel approaches for genetic resistance to bacterial pathogens in flower crops | |
| Dowd et al. | A maize gene coding for a chimeric superlectin reduces growth of maize fungal pathogens and insect pests when expressed transgenically in maize callus | |
| Huang et al. | Research on the interaction mechanism between α mino-phosphonate derivative QR and harpin-binding protein 1 in tobacco (Nicotiana tabacum) plants | |
| Aseel et al. | Evaluation of some defensin genes against tomv in different tomato cultivars using pathogenesis related protein genes | |
| US20240084302A1 (en) | RNAi TARGETING OF FUNGAL PATHOGEN TETRASPANIN PROTEINS | |
| Ramamoorthy | CRISPR/Cas techniques for developing biotic stress-tolerant plants: Advances, limitations, and future perspectives | |
| WO2025155526A1 (en) | Pesticidal proteins and metohds of use | |
| DE4442179C2 (de) | Pathogenresistente Pflanzen und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| Salamini | Where do we go from this point | |
| Chu et al. | Isolation of salicylic acid-induced genes in Brassica napus by subtractive hybridization |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A1B | A search report has been drawn up | ||
| BV | The patent application has lapsed |