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CN100523190C - 除草剂抗性的棉花植物及生产和鉴定其的方法 - Google Patents

除草剂抗性的棉花植物及生产和鉴定其的方法 Download PDF

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CN100523190C CNB028173813A CN02817381A CN100523190C CN 100523190 C CN100523190 C CN 100523190C CN B028173813 A CNB028173813 A CN B028173813A CN 02817381 A CN02817381 A CN 02817381A CN 100523190 C CN100523190 C CN 100523190C
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Abstract

本发明涉及转基因棉花植物、植物材料和种子，其特征在于：在棉花基因组的特定位置包含特定转化事件，特别是存在编码赋予除草剂抗性的蛋白质的基因。本发明的棉花植物将除草剂抗性表型和最佳农艺性状结合在一起。

Description

除草剂抗性的棉花植物及生产和鉴定其的方法
技术领域
本发明涉及转基因棉花植物，植物材料和种子，其特征在于：在棉花基因组的特定位置包含特定的转化事件，特别是存在编码赋予除草剂抗性的蛋白质的基因。本发明的棉花植物将除草剂抗性表型和在缺乏杂草压力的情况下等同于非转化棉花株系的农艺性状、遗传稳定性和对不同遗传背景的适应性结合在一起。
在此，并入这里所引用的所有文献为参考文献。
背景技术
植物中转基因的表型表达不仅取决于基因本身的结构还取决于基因在植物基因组中的位置。同时，转基因在基因组中不同位置的存在将以不同的方式影响植物的整体表型。通过遗传操作向植物中引入商业有意义的性状并在农业或工业水平上获得成功，这一过程由于不同的因素而可能是漫长的。遗传转化植物的实际转化和再生仅仅是一系列筛选步骤的第一步，所述一系列筛选步骤包括广范的遗传鉴定、育种和大田试验的评估。
棉花纤维是世界上一种最重要的纺织原料。每年全球收获大约8千万英亩的棉花。在美国，按照面积产量，棉花是第五大农作物，2000年种植的棉花超过1500万英亩。主要的棉花杂草物种是番薯属(Ipomoea sp.)(牵牛花)，苋属(Amaranthus spp.)(苋)，莎草属(Cyperus spp.)(nutsedge)，苍耳属(Xanthium spp.)(苍耳)和高梁属(Sorghum spp.)(约翰逊草)。在可以用于生长中的棉花田的阔叶除草剂引入前，种植者利用非选择性除草剂直接萌后施用，施用同时注意不让除草剂接触生长中的作物。因为这种施用要求杂草和农作物高度的差异，所以该种施用方法不总是可行的。特别是对于小的棉花，该种施用费时，并且潜在地伤害农作物。
bar基因(Thompson等，1987，EMBO J 6：2519-2523；Deblock等，.1987，EMBO J.6：2513-2518)是编码膦丝菌素乙酰转移酶(PAT)的基因，当它在植物中表达时，赋予了对除草剂化合物膦丝菌素(也称为草铵膦(glufosinate))或双丙氨酰膦(也参见例如美国专利5,646,024和5,561,236)及其盐和旋光异构体的抗性。膦丝菌素控制阔叶杂草，包括牵牛花，并且具有广谱应用。
通过许多方法，包括棉花外植体的农杆菌感染(Firoozabady等，1987，Plant Molecular Biology 10：105-116；Umbeck等，1987，Bio/Technology5：263-266和WO 00/71733，US5,004,863，和US 5,159,135中)，及通过微粒轰击棉花分生组织实现的直接基因转移(Finer和Mc Mullen，1990，PlantCell Reports，5：586-589；McCabe和Martinell，1993，Bio/Technology11：596-598，WO92/15675，EP0 531 506)已经获得了棉花的成功遗传转化。已经报道了利用Hansen等(1994，Proc.Nat.Acad.Sci.91：7603-7607)，Veluthambi等(1989，Journal of Bacteriology 171：3696-3703)和WO00/71733所述方法可以增加农杆菌转化的转化效率。
也已经描述了用于棉花植物再生的不同方法(WO 89/05344，US5,244,802，US 5,583,036，WO 89/12102，WO98/15622，和WO97/12512)。
然而，前述文献均未教导或提示本发明。
发明概述
本发明涉及转基因棉花植物，或者其种子、细胞或组织，它们包含稳定整合进其基因组的包含除草剂抗性基因的表达盒子，该除草剂抗性基因含有bar基因编码序列(如本文实施例1.1所述)，其中所述转基因棉花棉物、其种子、细胞或组织不仅具有除草剂抗性，而且在缺乏杂草压力的情况下与非转基因等株系(isoline)具有实质上等同的农艺性状。在杂草压力和适当的LibertyTM处理的情况下，该植物比非转基因植物具有更优良的农艺表型。
在本发明的一个实施方式中，棉花植物或其种子、细胞或组织包含pGSV71表达盒子(如本文实施例1.1，表1所述)。在本发明优选的实施方式中，棉花植物或其种子、细胞或组织包含原种事件(elite event)EE-GH1。
在本发明另一个实施方式中，转基因棉花植物或其种子、细胞或组织：
(i)在其基因组中包含事件EE-GH1；或
(ii)包含事件EE-GH1，但条件是用于此事件的bar基因被替换成能在严格条件下与bar基因互补序列杂交的核酸序列。
更具体地，本发明涉及转基因棉花植物，其种子、细胞或组织，它们的基因组DNA可通过如下事实来表征：当用分别指向EE-GH1的5’或3’侧翼区和外源DNA的两个引物，在如这里所述的PCR鉴定方法中分析所述基因组DNA时，可以产生针对EE-GH1的特异片段。优选地，引物分别指向SEQ ID NO：1内的5’侧翼区域和外源DNA；最优选地，引物分别含有SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3的核苷酸序列，并且产生250至290bp，优选约269bp的DNA片段。
在ATCC已经保藏了包含本发明原种事件的标准种子(referenceseed)，保藏号为PTA-3343。因此，本发明一个优选的实施方式是包含原种事件EE-GH1的种子，该种子保藏在ATCC，保藏号为PTA-3343，该种子可以长成抗草铵膦的棉花植物。ATCC保藏号PTA-3343的种子是由约50％非转基因核和50％转基因核(对转基因而言为半合子)组成的种批，其包含本发明的原种事件，该种子可以长成抗草铵膦的植物。如这里所述，可以播种种子，并且用PPT或LibertyTM处理生长的植物以获得100％的包含本发明原种事件的草铵膦抗性植物。本发明进一步涉及来源于包含本发明原种事件的植物的细胞、组织、子代及后裔，其中所述植物由保藏在ATCC，具有保藏号PTA-3343的种子长成。本发明进一步涉及通过对包含本发明原种事件的棉花植物进行繁殖和/或育种可获得的植物，其中所述棉花植物由保藏在ATCC，具有保藏号PTA-3343的种子长成。
本发明进一步涉及包含外源DNA序列，优选地如这里所述的除草剂抗性基因的植物、种子、细胞或组织，所述外源DNA序列在包含SEQ ID NO：1和/或SEQ ID NO：4的植物DNA序列，更优选地包含SEQ ID NO：5的DNA序列或者在严格条件下与如下序列杂交的序列的区域中整合进入染色体DNA，其中所述如下序列是与包含SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：4和/或SEQID NO：5的植物DNA序列的序列互补的序列。
本发明还提供了生产转基因棉花植物细胞的方法，该方法包括将重组DNA分子插入棉花细胞、组织或愈伤组织的染色体DNA区域，该染色体DNA区域包含SEQ ID NO：1和/或SEQ ID NO：4的植物DNA序列，或者包含能在严格条件下与如下序列杂交的序列，所述如下序列是与包含SEQID NO：1和/或SEQ ID NO：4的植物DNA序列的序列互补的序列。
本发明还涉及鉴定包含原种事件EE-GH1的转基因植物或者其细胞或组织的方法，该方法以鉴定转基因植物、细胞或组织中这种DNA序列编码的特征DNA序列或氨基酸的存在为基础。根据本发明优选的实施方式，这种特征DNA序列是15bp，优选20bp，最优选30bp或更长的序列，其包含事件的插入位点，即一部分外源DNA和与之邻接的一部分棉花基因组(5’或3’侧翼区)，从而允许插入事件的特异鉴定。
根据本发明的另一个方面，公开了DNA序列，其包含事件的插入位点及足够长度的棉花基因组DNA和外源DNA(转基因)多核苷酸，以致于可以用作EE-GH1检测的引物或探针。优选地，这种序列在插入位点的两侧分别包含EE-GH1的棉花基因组DNA的至少9个核苷酸和相似数目的外源DNA(转基因)核苷酸。最优选地，这种DNA序列包含在SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4中与插入位点邻接的棉花基因组DNA的至少9个核苷酸和相似数目的外源DNA核苷酸。
根据本发明的另一个优选方面，鉴定包含原种事件EE-GH1的转基因植物或者其细胞或组织的方法包括：利用聚合酶链式反应，用至少两个引物扩增生物样品中存在的核酸序列，所述引物之一识别EE-GH1的5’或3’侧翼区中的植物DNA，另一个引物识别外源DNA内的序列。优选地，利用分别识别EE-GH1的植物5’侧翼区内的序列，最优选地SEQ ID NO：1的植物DNA序列内的序列和外源DNA内的序列的引物分析基因组DNA。特别优选地，根据这里所述的PCR鉴定方法分析基因组DNA，由此，识别5’侧翼区中的序列的引物包含SEQ ID NO：2的核苷酸序列。特别地，识别5’侧翼区中的序列的引物包含SEQ ID NO：2的核苷酸序列而识别外源DNA中的序列的引物包含SEQ ID NO：3的核苷酸序列，由此，扩增的片段优选是250至290bp，更优选地是260至270bp，最优选地是约269bp。
因此，本发明涉及根据上述EE-GH1鉴定方法可以鉴定的转基因植物，其细胞或组织。
本发明涉及鉴定生物样品中原种事件EE-GH1的方法，该方法以特异识别EE-GH1的5’和/或3’侧翼序列的引物或探针为基础。在本发明优选实施方式中，这些方法以识别SEQ ID NO：1和/或SEQ ID NO：4中的序列的引物或探针为基础，更特别地以包含SEQ ID NO：2的序列的引物或探针为基础。根据本发明的另一个实施方式，这种方法以识别EE-GH1的特征序列的引物或探针为基础，所述特征序列是包含事件插入位点的DNA序列，该序列包括足够数量的5’或3’侧翼DNA核苷酸和随之的外源DNA核苷酸以致于可以用于事件的诊断。最特别地，这种方法以包含SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4中足够数量的5’或3’侧翼DNA核苷酸和随之的外源DNA核苷酸的序列为基础。这种方法是本领域已知的，并且包括但不限于Lyamichev等(1999，Nature Biotechn17：292-296)所述的方法。
本发明还涉及这里所述的EE-GH1的特异侧翼序列，其可以用于开发生物样品中EE-GH1的特异鉴定方法。更具体地，本发明涉及EE-GH1的5’和/或3’侧翼区，其可以用于特异引物和探针的开发；并涉及从EE-GH1的5’和/或3’侧翼序列及与其邻接的插入位点开发的特异引物和探针。本发明还涉及基于这种特异引物或探针的使用来鉴定生物样品中EE-GH1的存在的方法。
因此，本发明也涉及用于鉴定生物样品中原种事件EE-GH1的试剂盒，该试剂盒包含至少一个特异识别EE-GH1的5’或3’侧翼区的引物或探针。
优选地，为了用在PCR鉴定方法中，本发明的试剂盒除了包含特异识别EE-GH1的5’或3’侧翼区的引物外，还包含特异识别EE-GH1的外源DNA中的序列的第二引物。优选地，本发明试剂盒包含两个(或更多个)特异引物，其中一个引物识别EE-GH1的5’侧翼区内的序列，更优选SEQID NO：1的植物DNA区内的序列，而另一个引物识别外源DNA内的序列。特别优选地，识别5’侧翼区内植物DNA序列的引物包含SEQ ID NO：2的核苷酸序列。特别地，识别5’侧翼区内植物DNA序列的引物包含SEQ IDNO：2的核苷酸序列而识别外源DNA的引物包含这里所述的SEQ ID NO：3的核苷酸序列。
根据另一实施方式，本发明涉及用于鉴定生物样品中原种事件EE-GH1的试剂盒，其中所述试剂盒包含至少一个特异引物或者探针，该特异引物或探针具有与在严格条件下能和EE-GH1的特异或特征区杂交的序列相应(或者互补)的序列。优选地，探针序列相应于包含一部分外源DNA和与之邻接的EE-GH1的一部分5’或3’侧翼区(植物DNA)的特异区域。最优选地，特异探针包含(或者互补于)能在严格条件下与SEQ IDNO：1或SEQ ID NO：4内跨越插入位点的15到30个核苷酸的序列杂交的序列，所述插入位点位于外源DNA的5’或3’区。特别优选地，特异探针包含(或者互补于)能在严格条件下与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4中具有邻接插入位点的9个植物DNA核苷酸和相似数目的外源DNA核苷酸的序列杂交的序列。根据一个特定的实施方式，这种引物包含SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4中具有邻接插入位点的9个植物DNA核苷酸和相似数目的外源DNA核苷酸的序列。
本发明包括的方法和试剂盒可以用于不同的目的，例如，但不限于：鉴定植物、植物材料或产品，如，但不限于包含或来源于植物材料的食品或饲料产品(新鲜或加工的)中的EE-GH1。此外或者可替代地，本发明的方法和试剂盒可以用于鉴定转基因植物材料，从而使转基因和非转基因材料分离；此外或者可替代地，本发明方法和试剂盒可以用于检测包含EE-GH1的植物材料的质量(即纯材料的百分率)。
本发明还涉及在将原种事件EE-GH1引入不同品种中后跟踪基因组中包含原种事件EE-GH1的植物的方法。
应理解，可以通过这里引用的从属权利要求描述本发明特定的实施方式。
附图简述
可以结合并入此处的附图作为参考，以理解通过举例方式给出的下面的详细描述，这些例子不意味着将本发明限制于所述的特定实施方式，其中：
图1：利用EE-GH1PCR鉴定方法对原种事件EE-GH1和其它事件的PCR分析。凝胶上样顺序：泳道1：分子量标准参照物(100bp梯)，泳道2：来源于包含转基因事件EE-GH1的棉花植物的DNA样品，泳道3：来源于包含另一个转基因事件的棉花植物的DNA样品，泳道4：来源于野生型棉花的DNA，泳道5：野生型+1拷贝BamHI消化的pGSV71(阳性对照)，泳道6：阴性对照(没有模板)，泳道8：分子量标准参照物(100bp梯)。
优选实施方式的详述
这里所用术语“基因”指包含几个可操作连接的DNA片断，如启动子区、5’非翻译区(5’UTR)、编码区(其可以编码或不编码蛋白质)和包含聚腺苷酸化位点的3’非翻译区(3’UTR)的任何DNA序列。通常在植物细胞中，5’UTR、编码区和3’UTR转录为RNA，对于蛋白质编码基因而言，编码区的RNA被翻译为蛋白质。基因可以包含另外的DNA片段如，内含子。如这里所用的基因座是植物基因组中给定基因的位置。
当术语“嵌合”指基因或DNA序列时，用于指包含至少两个功能相关DNA片段(如启动子、5’UTR、编码区、3’UTR、内含子)的基因或DNA序列，所述功能相关DNA片段在天然情况下不相关联和/或来源于例如不同来源。与植物物种相对而言的“外源”基因或DNA序列被用于表示该基因或DNA序列不是在该植物物种中天然存在的，或者不是在该植物物种的所述基因座中天然存在的基因或DNA序列。这里术语“外源DNA”指通过转化已经掺入了植物基因组的DNA序列。这里所用的“转化DNA”指用于转化过程的重组DNA分子。转化DNA通常包含至少一个“目的基因”(例如嵌合基因)，所述目的基因具有赋予被转化的植物一种或多种特异特征的能力。术语“重组DNA分子”用于举例说明并因此可包括分离的核酸分子，该分离的核酸分子可以是DNA并可以通过重组或其它方法获得。
这里所用术语“转基因”指掺入植物基因组中的目的基因(或外源DNA的整体)。“转基因植物”指在所有细胞的基因组中都包含至少一个转基因的植物。
优选地，本发明植物中存在的外源DNA将包含除草剂抗性基因，更具体地是35S-bar基因作为目的基因。
这里所用的“除草剂抗性”基因指能赋予植物对除草剂的抗性的基因。除草剂抗性基因的例子是包含位于组成型启动子控制下的编码膦丝菌素乙酰转移酶的序列的基因，该酶可以解除膦丝菌素的毒性。更具体地，在本发明原种事件中，除草剂抗性基因包含花椰菜花叶病毒35S启动子(Odell等，(1985)，Nature 313：810-812)控制下的吸水链霉菌(Streptomyceshygroscopicus)双丙氨酰膦抗性基因(bar)的编码序列(Thompson等.(1987)EMBO J6：2519-2523)，这里也称为“35S-bar”。35S-bar基因的表达赋予了对除草剂化合物膦丝菌素或双丙氨酰膦或草铵膦或者更一般地谷氨酰胺合成酶抑制剂或者其盐或旋光异构体的抗性，该抗性这里通常称为“草铵膦抗性”。
在“严格条件”下杂交意指Sambrook等(1989)(Molecular Cloning：ALaboratory Manual，第二版，Cold Spring Harbour Laboratory Press，NY)所述的常规杂交条件，该杂交条件例如可以包括下列步骤：1)在滤膜上固定植物基因组DNA片断，2)在42℃，50％甲酰胺、5X SSPE、2X Denhardt’试剂和0.1％SDS中预杂交滤膜1到2小时，或者在68℃，在6X SSC、2X Denhardt’试剂和0.1％SDS中预杂交滤膜1到2小时，3)加入标记的杂交探针，4)温育16到24小时，5)在室温，在1X SSC、0.1％SDS中洗滤膜20分钟，6)在68℃，在0.2X SSC、0.1％SDS中洗滤膜3次，每次20分钟，和7)在-70℃，用增感屏以滤膜曝光X射线胶片24到48小时。
植物基因组中重组DNA分子的掺入通常通过细胞、组织或愈伤组织的转化来实现(或由其它基因操作来实现)。掺入的具体位点既可以是随机的也可以是预先确定的位置(如果利用定向整合的方法)。
通过重组DNA或“转化DNA”转化植物细胞或组织而引入植物基因组中的DNA此后称为“外源DNA”，其可以包含一个或多个“转基因”。因此，外源DNA既可以包括重组DNA也可以包括新引入的重新排列的植物DNA。然而，本发明上下文中术语“植物DNA”指在相应野生型植物的相同基因座中通常存在的植物DNA。
可以通过重组DNA分子在植物基因组中的掺入位点的位置和构型来表征外源DNA。重组DNA分子在植物基因组中的插入位点也称为“插入位点”或“靶位点”。重组DNA插入植物基因组中可能会涉及称为“靶位点缺失”的植物DNA缺失。这里所用的“侧翼区”或“侧翼序列”指至少20bp，优选至少50bp，及多达5000bp的植物基因组序列，其位于外源DNA的紧上游并且邻接外源DNA，或者其位于外源DNA的紧下游并且邻接外源DNA。引起外源DNA随机整合的转化方法将产生具有不同侧翼区的转化体，所述侧翼区对每个转化体都是特征性和独特的。当通过传统杂交方法(crossing)将转基因植物中存在的重组DNA引入不同植物中时，重组DNA在植物基因组中的插入位点和它的侧翼区通常将不会改变(除了由于突变或交换和转座子引起的偶然改变外)。这里所用的“插入区”指对应于至少40bp，优选至少100bp，及多达10000bp以上的区域的区，其中，所述区域在(未转化的)植物基因组中被包含外源DNA的上游和/或下游侧翼区的序列包围(并且包含插入位点和可能的靶位点缺失)。考虑到由于物种内突变引起的小差异，在该物种的具体植物中，插入区将保留同包含外源DNA的上游和下游侧翼区的序列至少85％，优选90％，更优选95％，最优选100％的序列同一性。
目的基因的表达指基因赋予植物一种或多种表型性状(例如，除草剂抗性)的事实，其中所述性状的赋予旨在通过转化期间所用的重组DNA分子——转化DNA的引入(基于部分或所有目的基因的结构和功能)来实现。
“事件”(也称为转化事件)定义为作为基因工程结果的(人工)基因座，其携带有包含至少一个目的基因拷贝的外源DNA。通过转基因的表达可以在表型上表征事件。在遗传水平上，事件是植物遗传组成的一部分。在分子水平上，可以通过限制性图谱(例如，通过Southern印迹测定)和/或通过外源DNA的上游和/或下游侧翼序列和/或包含转基因的外源DNA的分子构型来表征事件。通常，当用转化DNA转化植物细胞、组织或愈伤组织时，可产生大量事件，每个事件都是独特的。
这里所用的“原种事件”是根据转基因的表型表达和稳定性，从通过用相同的转化DNA进行转化或与此转化所导致的植物进行回交而获得的一组事件中选出的事件，该事件将对包含它(即，选定的转化事件)的植物的农艺性状不产生负面的影响。因此，原种事件的筛选标准是下面的一个或多个，优选地为两个或多个，有利地为下面的所有标准：
a)植物中外源DNA的存在不损害植物的其它期望特征，例如与农艺性状或商业价值有关的特征；
b)事件可以通过十分明确的分子构型来表征，而且所述分子构型能稳定遗传，并且可以针对该分子构型开发出适当的诊断手段以实现事件身份的控制；
c)在事件以纯合子形式存在的情况下，目的基因显示出适当的且稳定的空间和时间表型表达，这种表型表达在一系列环境中均可以达到商业上可接受的水平，其中所述环境为带有该事件的植物于正常的农业应用中所可能接触到的一系列环境。
优选外源DNA与植物基因组中的如下位置相关，所述植物基因组位置允许外源DNA渐渗进入期望的商业遗传背景。
通过原种事件在不同相关遗传背景中的渐渗现象和所观察到的事件对上述一个、两个或所有标准(例如上述a)，b)和c))的满足情况可以确认作为原种事件的事件状态。
因此，“原种事件”指满足上述标准的包含外源DNA的基因座。植物、植物材料或子代如种子在其基因组中可以包含一个或多个原种事件。因此，当涉及在其基因组中包含原种事件EE-GH1的植物、种子细胞或组织时，意指植物、种子细胞或组织包含这里所述的外源DNA(包含35S-bar基因)，该外源DNA通过这里所述的整合位点整合在基因组中。
可以基于原种事件特异的基因组特征开发用于鉴定原种事件或包含原种事件的植物或植物材料或包含含有原种事件的植物材料的产品的手段，所述特异基因组特征是例如包含外源DNA的基因组区的特异限制性图谱、分子量标准参照物或外源DNA的侧翼区序列。
一旦测序了外源DNA的一个或两个侧翼区，就可以通过分子生物学技术，研制特异识别样品核酸(DNA或RNA)中的这个(这些)序列的引物和探针。例如可以开发PCR方法以鉴定生物样品(如植物、植物材料或包含植物材料的产品的样品)中的原种事件。这种PCR以至少两个特异性“引物”为基础，其中一个引物识别原种事件的5’或3’侧翼区内的序列，另一个引物识别外源DNA内的序列。优选地，引物有15至35个核苷酸的序列，在优化的PCR条件下，该引物分别“特异识别”原种事件的5’或3’侧翼区内的序列和外源DNA内的序列，以致从包含原种事件的核酸样品可以扩增出特异性片段(“整合片段”)。这意味着在优化的PCR条件下仅仅扩增定向整合片段，而不扩增植物基因组或外源DNA中(该大小的)其它序列。
优选地，整合片段有50至500个核苷酸长，最优选地100至350个核苷酸长。优选地，特异性引物分别具有与原种事件的5’或3’侧翼区内序列和原种事件的外源DNA内序列有80％至100％同一性的序列，前提是错配仍旧允许在优化的PCR条件下实现原种事件的特异鉴定。然而，可允许的错配范围可以容易地实验测定，并且是本领域技术人员已知的。
因为用于原种事件的引物序列和它们识别的基因组序列是独特的，所以将仅仅在包含原种事件(核酸)的生物样品中出现整合片段的扩增。优选地，当利用PCR鉴定未知样品中EE-GH1的存在时，包括如下一套对照引物在内，所述对照引物可以扩增包含事件的植物物种的“持家基因”内的片段。持家基因是在大多数细胞类型中表达的基因，其与所有细胞共有的基本代谢活动有关。优选地，从持家基因扩增的片段是比扩增的整合片段大的片段。根据待分析的样品的不同，可以包括其它对照。
在现有技术中已描述了标准的PCR方法，参见如′PCR ApplicationsManual＂(Roche Molecular Biochemicals，第二版，1999)。在“PCR鉴定方法”中详述了每个原种事件的最佳PCR条件，包括特异性引物的序列。然而，可以理解，为适应具体的实验室条件，可能需要调整PCR鉴定方法中的多个参数，并且可以稍微修改这些参数以获得相似的结果。例如，针对不同的DNA制备方法的应用，可能需要调整例如所用引物及聚合酶的量和退火条件。相似地，其它引物的选择也可能为PCR鉴定方法规定其它的最适条件。然而，这些调整对本领域技术人员将是显而易见的，并且在目前的PCR应用指南如上述指南中详述了这些调整。
可替代地，可以利用特异性引物扩增整合片段，该整合片段可以用作鉴定生物样品中EE-GH1的“特异性探针”。在允许探针与生物样品核酸中的对应片段杂交的条件下，用探针接触生物样品的核酸，将引起核酸/探针杂交体的形成。可以检测该杂交体的形成(例如，标记核酸或探针)，由该杂交体的形成指示EE-GH1的存在。现有技术中已描述了(在固相载体上或溶液中)基于与特异性探针的杂交的这种鉴定方法。优选地，特异性探针是在优化的条件下能特异地与包含原种事件的部分5’或3’侧翼区以及与之邻接的部分外源DNA的区域(此后也称为事件的“特异区域”)杂交的序列。根据所用的方法，这种特异性探针可以包含15至30bp或50至500bp，优选100至350bp的序列，所述序列在严格条件下能与特异区域的核苷酸序列(或这种序列的互补序列)杂交。优选地，特异性探针将包含与原种事件特异区域相同(或互补)的约15到约100个连续核苷酸的序列。最优选地，这种探针包含至少9个与3’或5’侧翼区相同(或互补)的核苷酸和相似数目的与之邻接的外源DNA中的核苷酸。最优选地，这种探针包含至少9个与SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4的3’或5’侧翼区相同(或互补)的核苷酸和相似数目的在SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：4中与之邻接的外源DNA核苷酸。
这里所用的“限制性图谱”指用一个或一组特定限制性酶切割植物基因组DNA(和/或包含于其内的外源DNA)，并且与探针在标准严格条件下杂交后获得的一组Southern印迹图，其中所述探针与外源DNA具有序列相似性。这里所用的标准严格条件指本文所述的杂交条件或指Sambrook等.(1989)(Molecular Cloning：A Laboratory Manual，第二版，ColdSpring Harbour Laboratory Press，NY)所述的常规杂交条件，该杂交条件例如可以包括下列步骤：1)在滤膜上固定植物基因组DNA片断，2)在42℃，50％甲酰胺，5X SSPE，2X Denhardt’试剂和0.1％SDS中预杂交滤膜1到2小时，或者在68℃，在6X SSC，2X Denhardt试剂和0.1％SDS中预杂交滤膜1到2小时，3)加入标记的杂交探针，4)温育16到24小时，5)在室温，在1X SSC，0.1％SDS中洗滤膜20分钟，6)在68℃，在0.2X SSC，0.1％SDS中洗滤膜3次，每次20分钟，和7)在-70℃，用增感屏以滤膜曝光X射线胶片24到48小时。
由于在外源DNA掺入前植物基因组中存在(内源)限制性位点，故外源DNA的插入将改变该基因组的特异限制性图谱。因此，可以通过一个或多个特异限制性谱鉴定特定的转化体或源于其的子代。
可替代地，可以根据PCR鉴定方法，通过实验鉴定包含原种事件的植物或植物材料。所述PCR是特异识别原种事件的PCR。实质上，可以开发一套PCR引物，其识别a)原种事件3’或5’侧翼序列内的序列和b)外源DNA内的序列，其中引物扩增优选100至300个核苷酸的片段(整合片段)。优选地，包括一套可以扩增该植物物种“持家基因”内的片段(优选比扩增的整合片段大的片段)的对照引物。在“PCR鉴定方法”中详述了最适PCR条件，包括特异性引物的序列。
本发明也设想到鉴定包含原种事件EE-GH1的植物、植物材料或包含植物材料的产品的其它方法。这些方法包括基于用特异性探针检测原种事件的侧翼序列和外源DNA序列的所有方法。更具体地，设想了基于芯片的技术，如Hacia等.1996(Nat Genet 14(4)：441-447)和Shoemaker等.1996(Nat Genet 14(4)：450-456)所述的方法。这些方法通过利用固定的探针阵列或通过用寡核苷酸给基因加尾，随后通过杂交进行筛选，允许以高密度阵列形式分离靶分子。作为备选方案，设想到third wave检测方法，如Lyamichev等.(1999，上引文)描述的方法。
通过现有技术中描述的经典蛋白质检测方法，如基于蛋白质的层析或电磁特性或基于特异单克隆抗体的检测的那些方法(如在“Guide to proteinpurification”，Murray P.Deutscher编者中所述)可以完成原种事件的外源DNA所编码的蛋白质的鉴定。
这里所用“试剂盒”指用于实施本发明方法，更具体地，用于生物样品中原种事件EE-GH1鉴定的一套试剂。更特别地，本发明试剂盒优选的实施方式包含至少一个或两个上述特异性引物。任选地，试剂盒可以进一步包含这里所述的PCR鉴定方法中的任何其它试剂。
可替代地，根据本发明另一个实施方式，试剂盒可以包含上述特异性探针，所述探针可以与生物样品的核酸特异性杂交以鉴定其中存在的EE-GH1。任选地，该试剂盒可以进一步包含利用特异性探针鉴定生物样品中EE-GH1时用到的其它任何试剂(例如，但不限于杂交缓冲液，标记物)。
可以利用本发明试剂盒，并且可以具体地调整其成分，以实现质量控制(例如种批的纯度)或植物材料或者包含或源于植物材料的材料(如，但不限于食品或饲料产品)中原种事件的检测。
本发明涉及棉花中原种事件EE-GH1的开发，涉及包含该事件的植物及从这些植物获得的子代及源于该事件的植物细胞或者植物材料。如实施例1中所述，通过用pGSV71转化获得了包含原种事件EE-GH1的植物。
根据本文实施例4中所述的EE-GH1的PCR鉴定方法可以鉴定包含EE-GH1的棉花植物或植物材料。简而言之，用特异识别EE-GH1之5’或3’侧翼序列内的序列的引物，特别是具有SEQ ID NO：2的序列的引物和识别外源DNA内的序列的引物，特别是具有SEQ ID NO：3的序列的引物，通过PCR扩增棉花基因组DNA。利用内源棉花DNA引物作为对照。如果植物材料产生250至290bp，优选约269bp的片段，则可以确定该棉花植物含有原种事件EE-GH1。
含有EE-GH1的植物可以通过其草铵膦抗性来表征，在本发明上下文中，草铵膦抗性包括植物对除草剂LibertyTM的抗性。可以用不同方式检测对LibertyTM的抗性。当希望鉴定抗性和敏感性植物，但是不想杀死敏感性植物时，本文所述的叶片涂抹方法是最有用的。可替代地，可以通过LibertyTM喷雾施用检测抗性。为了得到最好结果，应该在V3和V4叶期(leafstage)之间进行喷雾处理。通过用至少200g活性组分/公顷(g.a.i./ha)，优选400g.a.i./ha，和可能地多达1600g.a.i./ha(4X正常大田比率)进行植物喷雾而不杀死植物的事实来表征抗性植物。撒施应该以28-34盎司LibertyTM的比率进行。最好利用扇形雾喷嘴，以每英亩20加仑水体积施用，同时注意不要直接喷雾至植物的轮生体内以避免叶片上表面活性剂灼烧。除草剂的作用应该在48小时内出现，并且在5-7天内清楚可见。
此外，可以通过植物细胞中膦丝菌素乙酰转移酶的存在来表征含有EE-GH1的植物，其中可以通过PAT测定法测定所述膦丝菌素乙烯转移酶的存在(De Block等，1987，上引文)。
例如，可以通过保藏在ATCC，保藏号为PTA-3343的种子获得含有EE-GH1的植物，所述种子含有50％的对原种事件而言为半合子的核。可以进一步繁殖这种植物以将本发明原种事件引入相同植物物种的其它品种中。从这些植物获得的选定的种子将包含稳定掺入它们基因组的原种事件。本发明还涉及包含EE-GH1、来源于ATCC保藏号PTA-3343的植物。这里的术语“来源于”表示植物是相关的，即它们都是通过杂交来自相同转化体的子代(直接的子代或两代或更多代后的子代)。
在无杂草压力和不使用LibertyTM进行杂草控制的情况下，也可以通过植物所具有的与美国商业棉花品种可比较的农艺特征来表征含有EE-GH1的植物。已经观察到在本文所述的棉花植物基因组插入区中存在外源DNA可以赋予包含这种事件的植物特别有意义的表型和分子特征。更具体地，外源DNA在这些植物基因组的该特定区域中的存在可以使植物显示出目的基因的稳定表型表达，而又不显著地损害植物的任何期望农艺性状。由此，证明与包含SEQ ID NO：1和/或SEQ ID NO：4的植物DNA的序列对应的插入区域，更优选与SEQ ID NO：5相应序列对应的插入区域，最优选与其中的EE-GH1插入位点相对应的插入区域特别适于目的基因的引入。更特别地，EE-GH1的插入区域(对应于SEQ ID NO：5内至少40bp的棉花基因组DNA序列，或在严格条件下与SEQ ID NO：5的互补序列杂交的至少40bp序列)特别适于包含除草剂抗性基因的外源DNA的引入，在该区域的引入可以确保这些基因能在植物中表达而不损害农艺性状。
通过定向插入方法可以在插入区域特异地插入重组DNA分子。这种方法对本领域技术人员是已知的，并且包括，例如利用重组酶如，但不限于来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的FLP重组酶(公开的PCT申请WO99/25821)、来源于大肠杆菌(Escherichia coli)噬菌体P1的CRE重组酶(公开的PCT申请WO99/25840)、来源于Saccharomyces rouxii的pSR1的重组酶(Araki等.1985，J Mol Biol 182：191-203)、噬菌体Mu的Gin/gix系统(Maeser和Kahlmann，1991，Mol Gen Genetics 230：170-176)或者λ噬菌体重组系统(如美国专利4,673,640中所述)的同源重组。
这里所用的“序列同一性”当涉及核苷酸序列(DNA或RNA)时指具有相同核苷酸的位置的数目除以两个序列中较短序列的核苷酸数目。利用20个核苷酸的视窗大小、4个核苷酸的字长及空位罚分4，通过Wilbur和Lipmann算法(Wilbur和Lipmann，1983，Proc Nat Acad Sci USA80：726)进行两个核苷酸序列的比对。可以例如利用Wisconsin包的程序(来源于Genetics Computer Group，Inc)方便地进行计算机辅助的分析和序列数据的解释，包括上述的序列比对。当序列具有至少约75％，特别是至少约80％，更特别是至少约85％，十分特别是约90％，尤其是约95％，更尤其是约100％序列同一性，且非常尤其是当序列相同时，该序列被称为“基本相似”。当说RNA序列与DNA序列基本相似或有一定程度的序列同一性时，很清楚的是，将DNA序列中的胸腺嘧啶(T)与RNA序列中的尿嘧啶(U)视为等同。这里所用的“互补于”指核苷酸序列中A和T(U)，及G和C核苷酸间的互补性。
这里所用的“生物样品”是植物、植物材料或包含植物材料的产品的样品。术语“植物”意指包括处于任何成熟阶段的棉花(如，但不限于陆地棉(Gossypium hirsutum))植物组织，及取自或源于任何这种植物的细胞、组织或器官，包括但不限于任何种子、叶片、茎、花、根、单细胞、配子、细胞培养物、组织培养物或原生质体。这里所用的“植物材料”指从植物获得或源于植物的材料。包含植物材料的产品涉及用植物材料生产或者可能被植物材料污染的食品，饲料或其它产品。可以理解，在本发明上下文中，优选检测这种生物样品中EE-GH1特异性核酸的存在，意即样品中核酸的存在。因此，这里提到的鉴定生物样品中原种事件EE-GH1的方法优选涉及对生物样品中包含原种事件的核酸的鉴定。
这里所用的“包含”被解释为规定了所提到的特征、整数、步骤或成分的存在，但是不排除一个或多个特征，整数、步骤或成分或其组合的存在或添加。因此，例如包含数个核苷酸或氨基酸的核酸或蛋白质可以包含比实际提到的更多的核苷酸或氨基酸，即处于更大的核酸或蛋白质中。包含功能或结构明确的DNA序列的嵌合基因也可以包含另外的DNA序列，等等。
下面的实施例描述了含有原种事件EE-GH1的棉花植物的产生和特征，及用于生物样品中原种事件EE-GH1鉴定的工具的开发。
除非另有叙述，否则根据Sambrook等.(1989)Molecular Cloning：ALaboratory Manual，第二版，Cold Spring Harbour Laboratory Press，NY和Ausubel等，(1994)Current Protocols in Molecular Biology，CurrentProtocols，USA第1和2卷中所述的标准方法实施所有重组DNA技术。在BIOS Scientific Publications Ltd(UK)和Blackwell ScientificPublications，UK出版的，R.D.D.Croy的Plant Molecular Biology Labfax(1993)中描述了用于植物分子工作的标准材料和方法。
在说明书和实施例中，涉及到下列序列：
SEQ ID NO：1：     含有5’侧翼区的序列
SEQ ID NO：2：     引物GHI06
SEQ ID NO：3：     引物GHI05
SEQ ID NO：4：     含有3’侧翼区的序列
SEQ ID NO：5：     插入区域
SEQ ID NO：6：     质粒pGSV71
SEQ ID NO：7：     质粒pRVA44
SEQ ID NO：8       引物MDB327
SEQ ID NO：9：     引物MLD015
SEQ ID NO：10：    引物MLD016
SEQ ID NO：11：    引物MDB612
SEQ ID NO：12：    引物MDB053
SEQ ID NO：13：    引物MDB356
SEQ ID NO：14：    引物DPA017
SEQ ID NO：15：    引物MLD019
SEQ ID NO：16：    包含靶位点缺失的序列
SEQ ID NO：17：    引物GHI01
SEQ ID NO：18：    引物GHI02
实施例
实施例1 用除草剂抗性基因转化棉花
1.1包含组成型启动子控制下的bar基因的嵌合DNA的构建
按照标准方法构建质粒pGSV71，表1中给出了质粒pGSV71的遗传元件的顺序(SEQ ID NO：6)：
表1：pGSV71中遗传元件的核苷酸位置
 
核苷酸位置 缩写 说明和参考文献
198-222 来自pTiB6S3的TL-DNA右边界重复(Gielen等，1984，EMBO J.3：835-846)
223-249 多接头
250-1634 P35S3 花椰菜花叶病毒35S RNA启动子(Odell等，(1985)，Nature 313：810-812)
1635-2186 bar 编码来自吸水链霉菌的膦丝菌素乙酰转移酶的编码序列(Thompson等，(1987)EMBO J.6：2519-2523)。野生型bar编码区N-末端的两个密码子已经分别置换为密码子ATG和GAC。
2187-2205 - 多接头
2206-2465 3’nos 来源于pTiT37之T-DNA的胭脂碱合成酶基因3’非翻译区的260bp TaqI片段(Depicker等，1982，J.Mol.Appl.Genet.1：561-573)
2466-2519 - 多接头
2520-2544 - 来自pTiB6S3的TL-DNA左边界重复(Gielen等，1984，EMBO J.3：835-846)
1.2.陆地棉(Gossypium hirsutum)的转化
利用农杆菌转化法(US 5,986,181)，用pGSV71转化Coker312植物的棉花组织，并且在适当培养基中再生成植物。
转移选择性再生培养基上出现的小植物到新的萌发培养基上(所有培养基都无激素)。然后转移幼苗到生长室或温室中。
除了幼苗再生外，在所有其它阶段在膦丝菌素(PPT)上进行筛选，而幼苗再生为加速生长是在缺乏PPT的情况下进行的。这产生了一组初级的转化体(T0代植物)。
实施例2：事件的开发
2.1.带有事件性状的株系的开发
将T0小苗转移到温室土壤，用PAT ELISA(Steffens BiotechnischeAnalysen GmbH，Ebringen，Germany)筛选植物的PAT酶的存在并筛选植物的草铵膦抗性。
在温室中生长T1到T3植物，以2X的比率(通过喷雾56盎司/ha)检测LibertyTM抗性。利用Deblock等.1987(EMBO J.6：2513-2518)所述的Pat测定法检测阳性植物的bar基因表达。
通过Southern印迹分析检查外源DNA的存在和拷贝数。根据Doyle等(1987，Phytochem.Bull.19：11)的CETAB方法从1g叶片组织分离总基因组DNA，并且用EcoRI限制酶消化总基因组DNA。
如下的探针用于Southern分析：
“bar”探针：质粒pDE110(WO 92/09696)的474bp KpnI-BglI消化物
“35S”探针：质粒pRVA44(SEQ ID NO：7)的892bp NcoI-MunI消化物
此外，与非转基因的等基因系比较评估了T2植物总的表型特征。在以后的子代中，与野生型比较，筛选了如下株系，所述株系在存在半合子或纯合子形式的转基因的情况下未观察到表型或农艺性状受到负面影响。
在大田中生长T4材料，根据不同程序，在大田条件下检测LibertyTM抗性。
在之后的子代中，比较植物和商业品种的产量、纤维质量和植物图谱数据。评估农艺特征，如植物高度、节高、棉铃保留、直立、茁壮长势、纤维长度、纤维强度和棉绒产量。
确定了一个事件有等同或好于相应审核标准(check)的表现，并且确定了对于该事件而言产量取决于背景而不是转基因的存在。
2.2.原种事件的筛选
该筛选方法产生了一个原种事件，该原种事件显示了35S-bar基因的最佳表达，即对草铵膦的抗性，而对农艺性状和产量没有损害。该原种事件命名为EE-GH1。
2.3.在具有不同遗传背景和位于不同区域的棉花品种中检测EE-GH1将选定的事件引入不同商业遗传背景中，包括FM989，FM832，FM958和FM966，并且比较4个不同场所的大田试验结果。利用不同的处理(1x3-5叶期，4x，3-5叶期，1x+1x，3-5叶期，4x+4x，3-5叶期，0作为对照)，用1600g.a.i./ha喷雾植物。
原种事件的出苗率和活力评定非常好。
不管施用除草剂时植物发育的速率和阶段如何，在施用后，从来没有观察到可见的因除草剂施用引起的损害。除草剂施用对植物的形态学和生长习性均没有有害的影响。
而且，在多种遗传背景中，事件具有正常的叶、花和棉铃形态学，优良的能育性，并且未显示出疾病或异常的昆虫敏感性。在向多种遗传背景的渐渗过程中，经过4代没有观察到异常的问题或反常。
2.4.基因座的遗传分析
经过几代在子代植物中，通过分子和表型分析检查EE-GH1事件的插入的遗传稳定性。
对于EE-GH1事件，比较了T1、T2和T3代植物的Southern印迹分析。发现获得的印迹图在不同代中是相同的。这证明EE-GH1中外源DNA的分子构型是稳定的。
在至少随后3代中，EE-GH1事件作为单基因座显示了转基因的孟德尔分离，表明该插入是稳定的。
实施例3：原种事件EE-GH1的表征
3.1.基因座的深入分子和遗传分析
在鉴定EE-GH1事件为获得了最佳的转基因表达和整体农艺性状的事件之后，在分子水平上详细分析转基因的基因座。这包括转基因侧翼区的测序。
利用Liu等.(1995，Plant J.8(3)：457-463)所述的TAIL-PCR方法，检测EE-GH1事件中插入的转基因的侧翼区域的序列。
a)5’侧翼区的检测
所用引物是：
Figure C02817381D00261
其中，N＝A，C，T或g；S＝C或g；W＝A或T
利用MDB327-GHI05扩增的片段是用于测序的约1200bp(5’侧翼：SEQ ID NO：1)。在bp1和bp677间的序列包含植物DNA，而bp678和bp850间的序列对应于pGSV71 DNA。
b)3’侧翼区的检测
所用引物是：
Figure C02817381D00262
其中，N＝A，C，T或g；S＝C或g；W＝A或T
利用MDB612-DPA017扩增的片段是约400bp，测定了其完整的序列(SEQ ID NO：4)。核苷酸第1位和179位间的序列对应于T-DNA，而核苷酸第180位和426位间的序列对应于植物DNA。
c)靶位点缺失的鉴定
利用对应于转基因侧翼区内序列的引物，以野生型陆地棉(Gossypiumhirsutum)作为模板，鉴定转基因的插入位点。
利用下面的引物：
       序列(5’→3’)           5’侧翼中位置  3’侧翼中位置
                               (SEQ ID NO：1) (SEQ ID NO：
                                              4)
       TTg.CAC.CAT.CTA.gCT.C
       AC.TC                    815→795      -----
GHI06
       (SEQ ID NO：2)
       CAA.gAT.gCg.AgC.AAC.TA
MLD019                            -----         285→266
      T.gT(SEQ ID NO：15)
这产生了200bp的片段(SEQ ID NO：16)，其中bp85到122对应于靶位点缺失。
因此，所测序的插入区(SEQ ID NO：5)包含：
1-677：5’侧翼区         SEQ ID NO：1的bp1到677
678-714：靶位点缺失      SEQ ID NO：16的bp85到122
715-916：3’侧翼区       SEQ ID NO：4的bp180到426
3.2基因座的遗传分析
经过几代在子代植物中进行分子和表型分析从而检测了插入的遗传稳定性。比较了T0、T1和T2代EE-GH1棉花植物的草铵膦抗性植物的Southern印迹分析，发现它们是相同的。这证明在含有EE-GH1的植物中转基因的分子构型是稳定的。
在至少随后3代中，EE-GH1事件作为单基因座显示了转基因的孟德尔分离，表明该插入是稳定的。
在上述结果的基础上，鉴定EE-GH1为原种事件。
实施例4：用于事件身份控制的诊断工具的开发
已开发EE-GH1原种事件PCR鉴定方法以鉴定植物、植物材料或生物样品中EE-GH1的存在。
EE-GH1原种事件聚合酶链式反应鉴定方法
在试图筛选未知样品以前必须利用所有适当对照进行试行实验。本方法可能需要针对实验室间可能存在差异的成分进行优化(所述成分为模板DNA制备，Taq DNA聚合酶，引物的质量，dNTP，热循环仪等)。
内源序列的扩增在该方法中起了重要作用。人们必须获得能扩增已知转基因基因组DNA模板中等摩尔量的内源和转基因序列的PCR和热循环条件。如果通过琼脂糖凝胶电泳判定，没有扩增出靶内源片段或扩增出的靶序列不具有相同的溴乙锭染色强度，则可能需要进行PCR条件的优化。
模板DNA
根据Doyle和Doyle(1987，Phytochem.Bull.19：11)所述的CTAB方法制备模板DNA。当利用通过其它方法制备的DNA时，应该利用不同量模板进行试行实验。通常50ng基因组模板DNA产生最好的结果。
指定阳性和阴性对照
下面的阳性和阴性对照应该包括在PCR运行中：
-母混合物对照(DNA阴性对照)。这是没有向反应中添加DNA的PCR。当观察到预期结果，即没有PCR产物时，表明靶DNA没有污染此PCR混合物。
-DNA阳性对照(已知含有转基因序列的基因组DNA样品)。该阳性对照的成功扩增证明PCR是在允许靶序列扩增的条件下进行的。
-野生型DNA对照。这是所提供的模板DNA是从非转基因植物制备的基因组DNA的PCR。当观察到预期结果，即没有转基因PCR产物的扩增，但是有内源PCR产物的扩增时，表明在基因组DNA样品中没有可检测的转基因背景扩增。
引物
利用下面特异识别转基因和EE-GH1侧翼序列的引物：
 
引物 序列(5’→3’) 在SEQ IDNO：1中的位置 靶
GHI05 ggA.CCg.TTA.TAC.ACA.ACg.Tag(SEQ ID NO：3) 815→795 pGSV71序列
GHI06 TTg.CAC.CAT.CTA.gCT.CAC.TC(SEQ ID NO：2) 547→566 植物DNA序列
靶向内源序列的引物总是被包含在PCR混合物中。这些引物在未知样品和DNA阳性对照中起到内对照的作用。内源引物对的阳性结果证明在基因组DNA制品中有充足DNA，该DNA质量足以用于产生PCR产物。
所用的内源引物是：
GHI01：5’-AAC.CTA.ggC.TgC.TgA.Agg.AgC-3’(SEQ ID NO：17)
(醇脱氢酶基因Acc.NO：AF036569，1070→1090)
GHI02：5’-CAA.CTC.CTC.CAg.TCA.TCT.CCg-3’(SEQ ID NO：18)
(醇脱氢酶基因Acc.NO：AF036569，1515→1495)
扩增的片段
PCR反应中预期的扩增片段是：
对于引物对GHI01-GHI02：  445bp(内源对照)
对于引物对GHI05-GHI06：  269bp(EE-GH1原种事件)
PCR条件
50μl反应的PCR混合物包含：
             5μl模板DNA
5μl10x扩增缓冲液(与Taq聚合酶一起提供)
1μl10mM dNTP
0.5μl GHI01(10pmoles/μl)
0.5μl GHI02(10pmoles/μl)
1μl GHI05(10pmoles/μl)
1μl GHI06(10pmoles/μl)
0.2μl Taq DNA聚合酶(5单位/μl)
加水到50μl
下面是获得最佳结果的热循环模式：
            95℃，4分钟
接着：      95℃，1分钟
            57℃，1分钟
            72℃，2分钟
            5个循环
接着：      92℃，30秒
            57℃，30秒
            72℃，1分钟
            25个循环
接着：      72℃，5分钟
琼脂糖凝胶分析
在1.5％琼脂糖凝胶上(Tris-硼酸盐缓冲液)上样适当分子量标准参照物(例如，100bp序列梯PHARMACIA)和10至20μl PCR样品。
结果的确认
除了1)DNA阳性对照显示预期的PCR产物(转基因片段和内源片段)，2)DNA阴性对照为PCR扩增阴性(没有片段)和3)野生型DNA对照显示预期的结果(内源片段扩增)外，不应该接受来源于单次PCR运行和单一PCR混合物的有关转基因植物DNA样品的数据。
显示出预期大小的可见量转基因和内源PCR产物的泳道表明用于制备该基因组模板DNA的相应植物遗传了EE-GH1原种事件。没有显示出可见量转基因PCR产物但显示了可见量内源PCR产物的泳道表明用于制备该基因组模板DNA的相应植物不含有原种事件。没有显示可见量内源和转基因PCR产物的泳道表明该基因组DNA的质和/或量不允许PCR产物产生。这些植物不能被计算在内。应该重复基因组DNA的制备并且必须利用适当对照进行新的PCR运行。
应用区别PCR方法来鉴定EE-GH1
根据上述方法检测来源于包含不同转基因事件的棉花植物的叶片材料(样品1到4)。来源于野生型棉花的样品作为阴性对照。
在图1中示例了PCR分析的结果。样品1被辨别出包含原种事件EE-GH1。所用其它受试株系不包含该原种事件。
实施例5：EE-GH1向优选品种中的渐渗
通过重复回交将原种事件EE-GH1引入下面商业棉花品种：FM5013，FM5015，FM5017，FM989，FM832，FM966和FM958中。
观察到转基因的表达通过草铵膦抗性测定满足了商业可接受的水平，并观察到原种事件向这些品种中的渐渗未显著影响这些品种的任何期望表型和农艺特征(无连锁拖累(linkage drag))。这证实了事件EE-GH1作为原种事件的状态。
如下面权利要求中所用，除非清楚地另外指明，所用的术语“植物”意在包括任何成熟阶段的植物组织及取自或来源于任何这种植物的细胞、组织或器官，包括但不限于任何种子、叶、茎、花、根、单细胞、配子、细胞培养物、组织培养物或原生质体。
在2001年4月26日，在ATCC(10801University Blvd.，Manassas，VA20110-2209)保藏了包含原种事件EE-GH1的标准种子，ATCC保藏号为PTA-3343。
如下面权利要求中所用，除非清楚地另外指明，所用的术语“植物”意在包括任何成熟阶段的植物组织及取自或来源于任何这种植物的细胞、组织或器官，包括但不限于任何种子、叶、茎、花、根、单细胞、配子、细胞培养物、组织培养物或原生质体。
本方面的上述描述意在示例而非限制。本领域技术人员可以想到所述实施方式中的各种变化或修改。可以进行这些变化或修改而不背离本发明的精神或范围。
序列表
<110>拜尔生物科学公司
<120>除草剂抗性的棉花植物及生产和鉴定其的方法
<130>EE-GH1
<150>US09/921,922
<151>2001-08-06
<160>18
<170>PatentIn version 3.1
<210>1
<211>850
<212>DNA
<213>人工序列：包含5’侧翼区的序列
<400>1
Figure C02817381D00331
<210>2
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列：引物GHI06
<400>2
Figure C02817381D00332
<210>3
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列：引物GHI05
<400>3
Figure C02817381D00341
<210>4
<211>426
<212>DNA
<213>人工序列：包含3′侧翼区的序列
<400>4
Figure C02817381D00342
<210>5
<211>961
<212>DNA
<213>陆地棉(Gossypium hirsutum)：插入区
<400>5
Figure C02817381D00343
Figure C02817381D00351
<210>6
<211>9555
<212>DNA
<213>人工序列：质粒pGSV71
<400>6
Figure C02817381D00361
Figure C02817381D00371
Figure C02817381D00381
Figure C02817381D00391
<210>7
<211>4182
<212>DNA
<213>人工序列：质粒pRVA44
<400>7
Figure C02817381D00402
Figure C02817381D00411
Figure C02817381D00421
<210>8
<211>16
<212>DNA
<213>人工序列：引物MDB327
<220>
<221>misc_feature
<222>(1)..(16)
<223>＂n＂＝a，c，t或g；＂s＂＝c或g；＂w＂＝a或t
<400>8
Figure C02817381D00431
<210>9
<211>22
<212>DNA
<213>人工序列：引物MLD015
<400>9
Figure C02817381D00432
<210>10
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列：引物MLD016
<400>10
Figure C02817381D00433
<210>11
<211>16
<212>DNA
<213>人工序列：引物MDB612
<220>
<221>misc_feature
<222>(1)..(16)
<223>＂n＂＝a，c，t或g；＂s＂＝c或g；＂w＂＝a或t
<400>11
Figure C02817381D00434
<210>12
<211>22
<212>DNA
<213>人工序列：引物MDB053
<400>12
Figure C02817381D00435
<210>13
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列：引物MDB356
<400>13
Figure C02817381D00436
<210>14
<211>22
<212>DNA
<213>人工序列：引物DPA017
<400>14
<210>15
<211>20
<212>DNA
<213>人工序列：引物MLD019
<400>15
Figure C02817381D00442
<210>16
<211>200
<212>DNA
<213>人工序列：包含靶位点缺失的序列
<400>16
<210>17
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列：引物GHI01
<400>17
Figure C02817381D00444
<210>18
<211>21
<212>DNA
<213>人工序列：引物GHI02
<400>18
Figure C02817381D00445

Claims (18)

1、携带原种事件EE-GH1的转基因棉花植物细胞，特征在于：自所述细胞的基因组DNA使用两条引物通过聚合酶链反应能够扩增出250至290bp之间的EE-GH1特异的DNA片段，其中所述两条引物分别具有SEQID NO：2和SEQ ID NO：3的核苷酸序列，所述聚合酶链反应是在包含5μl模板DNA、5μl 10X扩增缓冲液、1μl 10mM dNTPs、每一所述10pmoles/μl的引物各1μl、0.2μl的5单位/μl Taq DNA聚合酶的50μl PCR混合液中，于95℃ 4分钟；然后95℃ 1分钟，57℃ 1分钟，72℃ 2分钟，5个循环；然后92℃ 30秒，57℃ 30秒，72℃ 1分钟，25个循环；然后72℃ 5分钟的热循环特性下实施的。
2、如权利要求1所述的细胞，其中所述DNA片段是260和270bp之间的片段。
3、通过对生长自保藏在ATCC、保藏号为PTA-3343的种子的棉花植物进行繁殖和/或育种而获得的棉花植物细胞。
4、作为保藏在ATCC、保藏号PTA-3343的种子的子代的棉花植物细胞。
5、鉴定生物样品中原种事件EE-GH1的方法，其中所述原种事件EE-GH1根据权利要求1表征，包含所述原种事件的标准种子保藏在ATCC，保藏号为PTA-3343，所述方法包括利用聚合酶链式反应，用至少两个引物从所述生物样品中存在的核酸扩增100至350bp的DNA片段，其中一个引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之间的序列或SEQ IDNO：4的核苷酸180-426之间的序列，另一个引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸678-850之间的序列或SEQ ID NO：4的核苷酸1-179之间的序列。
6、如权利要求5所述的方法，其中所述一个引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之内的序列，而所述另一引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸678-850之内的序列。
7、如权利要求6所述的方法，其中所述识别SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之内的序列的引物包含SEQ ID NO：2的序列。
8、如权利要求5到7任一项所述的方法，其中所述识别SEQ ID NO：1的核苷酸678-850之内的序列的引物包含SEQ ID NO：3的序列，并且其中所述扩增的DNA片段进一步通过DNA测序表征。
9、鉴定包含原种事件EE-GH1的转基因植物或其细胞或组织的方法，其中所述原种事件EE-GH1根据权利要求1表征，包含所述原种事件的标准种子保藏在ATCC，保藏号为PTA-3343，该方法包括确立根据PCR鉴定法，利用两个分别具有SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：2的核苷酸序列的引物进行聚合酶链式反应，基因组DNA是否可以用于扩增250至290bp的DNA片段，并且其中所述扩增的DNA片段进一步通过DNA测序表征。
10、鉴定生物样品中原种事件EE-GH1的试剂盒，其中所述原种事件EE-GH1根据权利要求1表征，包含所述原种事件的标准种子保藏在ATCC，保藏号为PTA-3343，所述试剂盒包含至少两个PCR引物，其中一个PCR引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之间的序列或SEQ IDNO：4的核苷酸180-426之间的序列，另一个PCR引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸678-850之间的序列或SEQ ID NO：4的核苷酸1-179之间的序列。
11、如权利要求10所述的试剂盒，其中所述的一个PCR引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之间的序列。
12、如权利要求11所述的试剂盒，其中所述识别SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之间的序列的引物包含SEQ ID NO：2的序列。
13、如权利要求10到12任一项所述的试剂盒，其中所述识别SEQ IDNO：1的核苷酸678-850之间的序列的引物包含SEQ ID NO：3的序列。
14、验证种子纯度的方法，该方法包括：在种子样品中，用至少两个特异性引物检测根据权利要求1表征的EE-GH1特异的DNA序列，其中一个特异性引物特异识别SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之间的序列或SEQ ID NO：4的核苷酸180-426之间的序列，另一个特异性引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸678-850之间的序列或SEQ ID NO：4的核苷酸1-179之间的序列，包含所述原种事件的标准种子保藏在ATCC，保藏号为PTA-3343。
15、筛选存在根据权利要求1表征的EE-GH1的种子的方法，包含所述原种事件的标准种子保藏在ATCC，保藏号为PTA-3343，该方法包括：在种批样品中，用至少两个特异性引物检测根据权利要求1表征的EE-GH1特异的DNA序列，其中一个特异性引物特异识别SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之间的序列或SEQ ID NO：4的核苷酸180-426之间的序列，另一个特异性引物识别SEQ ID NO：1的核苷酸678-850之间的序列或SEQID NO：4的核苷酸1-179之间的序列。
16、可以利用一套引物从包含根据权利要求1表征的原种事件EE-GH1的棉花的核酸样品中扩增的DNA分子，包含所述原种事件的标准种子保藏在ATCC，保藏号为PTA-3343，其中第一引物包含SEQ ID NO：1的核苷酸1-677之间的15到30个核苷酸的序列，第二引物包含所述棉花核酸样品中存在的与SEQ ID NO：1的核苷酸678-850之间的序列互补的序列，或者第一引物包含与SEQ ID NO：4的核苷酸180-426之间的序列互补的15到30个核苷酸的序列，第二引物包含所述棉花核酸样品中存在的SEQ ID NO：4的核苷酸1-179之间的序列。
17、如权利要求16所述的DNA分子，其可以利用一套引物从棉花核酸样品扩增产生，其中第一引物包含SEQ ID NO：2，第二引物包含SEQ IDNO：3。
18、包含权利要求16或17的DNA的检测试剂盒。
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Families Citing this family (402)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6818807B2 (en) * 2001-08-06 2004-11-16 Bayer Bioscience N.V. Herbicide tolerant cotton plants having event EE-GH1
EP2298921B1 (en) 2003-02-12 2016-12-21 Monsanto Technology LLC Cotton event mon 88913 and compositions and methods for detection thereof
AU2004295386A1 (en) 2003-12-01 2005-06-16 Syngenta Participations Ag Insect resistant cotton plants and methods of detecting the same
AU2004318788B2 (en) * 2004-03-26 2011-12-22 Corteva Agriscience Llc Cry1F and Cry1Ac transgenic cotton lines and event-specific identification thereof
US20070197474A1 (en) * 2004-03-30 2007-08-23 Clinton William P Methods for controlling plants pathogens using N-phosphonomethylglycine
EP2319932B2 (en) 2004-04-30 2016-10-19 Dow AgroSciences LLC Novel herbicide resistance gene
US7312383B2 (en) * 2004-08-05 2007-12-25 Bayer Cropscience Gmbh Acala ULTIMA EF cultivar plant and seed
US7579528B2 (en) 2005-02-03 2009-08-25 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organization (Csiro) Cotton variety FM 800B2R
US7667102B2 (en) * 2005-02-03 2010-02-23 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organization Cotton variety FM 989B2R
US7667103B2 (en) * 2005-02-03 2010-02-23 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organization Cotton variety FM 991B2R
US7626092B2 (en) * 2005-02-03 2009-12-01 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organization (Csiro) Cotton variety FM 960B2R
US7247773B2 (en) * 2005-02-15 2007-07-24 Bayer Cropscience Gmbh Hammer cotton cultivar plant and seed
CN101151373B (zh) * 2005-04-08 2016-02-24 拜尔作物科学公司 原种事件a2704-12以及用于鉴定生物样品中此事件的方法和试剂盒
PT1885176T (pt) 2005-05-27 2016-11-28 Monsanto Technology Llc Evento mon89788 de soja e métodos para a sua deteção
BRPI0614693A2 (pt) 2005-07-29 2011-04-12 Monsanto Technology Llc desenvolvimento de germoplasma usando segregados de cruzamentos transgênicos
US7932439B2 (en) * 2005-08-08 2011-04-26 Bayer Bioscience N.V. Herbicide tolerant cotton plants and methods for identifying the same
JP5155869B2 (ja) 2005-10-28 2013-03-06 ダウ アグロサイエンシズ リミテッド ライアビリティー カンパニー 除草剤抵抗性遺伝子
US7626093B2 (en) * 2006-03-14 2009-12-01 Bayer Cropscience Ag Cotton cultivar 04Y341
US7928296B2 (en) * 2006-10-30 2011-04-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Maize event DP-098140-6 and compositions and methods for the identification and/or detection thereof
US7897846B2 (en) 2006-10-30 2011-03-01 Pioneer Hi-Bred Int'l, Inc. Maize event DP-098140-6 and compositions and methods for the identification and/or detection thereof
US7622649B2 (en) * 2006-12-22 2009-11-24 Bayer Cropscience Lp Cotton variety STX0502RF
US7622652B2 (en) 2006-12-22 2009-11-24 Bayer Cropscience Lp Cotton variety ST 5327B2RF
US7622651B2 (en) 2006-12-22 2009-11-24 Bayer Cropscience Lp Cotton variety ST 4427B2RF
US7622650B2 (en) * 2006-12-22 2009-11-24 Bayer Cropscience Lp Cotton variety ST 5283RF
BRPI0810786B1 (pt) * 2007-04-05 2018-10-30 Bayer Bioscience Nv " método para produção de uma planta de algodão ou semente compreendendo um evento elite, dna genômico de algodão, kit par identificação do evento elite, par de iniciadores, sonda específica, molécula de ácido nucleico isolada, fragmento de ácido nucleico isolado, método para seleção e detecção de sementes com relação à presença do evento elite, método para determinação do estado de zigosidade de uma planta, material de planta ou semente compreendendo o evento elite".
AU2008261312B2 (en) * 2007-06-11 2013-09-05 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Insect resistant cotton plants comprising elite event EE-GH6 and methods for identifying same
CL2008001865A1 (es) * 2007-06-22 2008-12-26 Monsanto Technology Llc Método para identificar una muestra de germoplasma vegetal con un genotipo que modula el rendimiento de una caracteristica, y célula vegetal que contiene al menos una región genómatica identificada para modular el rendiemiento de transgenes.
US7619144B2 (en) 2007-08-17 2009-11-17 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 02T15
US7626097B2 (en) * 2007-08-20 2009-12-01 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 05X460
US7622656B2 (en) 2007-08-20 2009-11-24 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 05Y063
US7622655B2 (en) * 2007-08-20 2009-11-24 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 04W019
US7622654B2 (en) * 2007-08-20 2009-11-24 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 03Y062
US7622657B2 (en) * 2007-08-20 2009-11-24 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 05Z629
US7619145B2 (en) * 2007-08-20 2009-11-17 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 03Y056
US7709704B2 (en) 2007-08-20 2010-05-04 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 04T048
US7622653B2 (en) 2007-08-20 2009-11-24 Bayer Cropscience Ag Cotton variety 03Y047
EP2245169A2 (en) 2008-02-14 2010-11-03 Pioneer Hi-Bred International Inc. Plant genomic dna flanking spt event and methods for identifying spt event
EP3260543A1 (en) 2008-02-15 2017-12-27 Monsanto Technology LLC Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87769 and methods for detection thereof
US8247661B2 (en) * 2008-04-08 2012-08-21 Bayer Cropscience Ag Cotton variety FM 9150F
US8188344B2 (en) * 2008-04-08 2012-05-29 Bayer Cropscience Ag Cotton variety FM 9180B2F
US8143498B2 (en) * 2008-05-08 2012-03-27 Bayer Cropscience Ag Cotton variety FM 1740B2F
US8143499B2 (en) * 2008-05-08 2012-03-27 Bayer Cropscience Ag Cotton variety FM 840B2F
WO2010024976A1 (en) 2008-08-29 2010-03-04 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87754 and methods for detection thereof
JP5767585B2 (ja) 2008-09-29 2015-08-19 モンサント テクノロジー エルエルシー 大豆遺伝子組換え事象ｍｏｎ８７７０５およびその検出方法
US8188346B2 (en) * 2008-10-27 2012-05-29 Bayer Cropscience Lp Cotton variety ST 4498B2RF
US8188345B2 (en) * 2008-10-27 2012-05-29 Bayer Cropscience Lp Cotton variety ST 5458B2RF
WO2010135324A1 (en) 2009-05-18 2010-11-25 Monsanto Technology Llc Use of glyphosate for disease suppression and yield enhancement in soybean
WO2011028929A2 (en) * 2009-09-03 2011-03-10 The Regents Of The University Of California Nitrate-responsive promoter
AU2010295864C1 (en) 2009-09-17 2015-04-30 Monsanto Technology Llc Soybean transgenic event MON 87708 and methods of use thereof
US8912403B2 (en) * 2009-09-28 2014-12-16 Bayer Cropscience Ag Cotton variety FM 9160B2F
US8907185B2 (en) * 2009-11-06 2014-12-09 Bayer Cropscience Lp Cotton variety ST 4288B2F
US8933308B2 (en) * 2009-11-18 2015-01-13 Bayer Cropscience Ag Cotton variety FM 1845LLB2
US8581046B2 (en) 2010-11-24 2013-11-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Brassica gat event DP-073496-4 and compositions and methods for the identification and/or detection thereof
EA022553B1 (ru) 2010-01-22 2016-01-29 Байер Интеллектуэль Проперти Гмбх Применение комбинации биологически активных веществ, набор и средство, содержащие комбинацию биологически активных веществ, для борьбы с вредителями животного происхождения и способ улучшения использования продукционного потенциала трансгенного растения
US8692081B2 (en) * 2010-05-18 2014-04-08 Bayer Cropscience Ag Cotton variety FM 9101GT
NZ603506A (en) 2010-06-04 2013-11-29 Monsanto Technology Llc Transgenic brassica event mon 88302 and methods of use thereof
JP6092100B2 (ja) * 2010-06-09 2017-03-08 バイエル・クロップサイエンス・エヌ・ヴェーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ｎ．Ｖ． 植物ゲノム工学に一般的に使用されるヌクレオチド配列において植物ゲノムを改変するための方法および手段
KR20130119438A (ko) 2010-10-12 2013-10-31 몬산토 테크놀로지 엘엘씨 유전자도입 이벤트 mon87712에 상응하는 대두 식물과 종자, 그리고 이들의 검출을 위한 방법
US8575431B2 (en) 2010-11-24 2013-11-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Brassica GAT event DP-061061-7 and compositions and methods for the identification and/or detection thereof
MX2013005643A (es) 2010-11-29 2013-07-03 Bayer Ip Gmbh Iminas alfa, beta-insaturadas.
EP2460407A1 (de) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe
KR20130123416A (ko) 2010-12-01 2013-11-12 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 작물에서 선충류를 구제하고 수확량을 증가시키기 위한 플루오피람의 용도
EP2683239A1 (en) 2011-03-10 2014-01-15 Bayer Intellectual Property GmbH Use of lipochito-oligosaccharide compounds for safeguarding seed safety of treated seeds
ES2663632T3 (es) 2011-03-23 2018-04-16 Bayer Intellectual Property Gmbh Combinaciones de compuestos activos
CN103597079B (zh) * 2011-03-30 2017-04-05 孟山都技术公司 棉花转基因事件mon88701及其使用方法
CN103517900A (zh) 2011-04-08 2014-01-15 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌剂肟基-四唑衍生物
EP2699093B1 (en) 2011-04-22 2015-11-04 Bayer Intellectual Property GmbH Active compound combinations comprising a carboximide derivative and a fungicidal compound
US9035142B2 (en) * 2011-05-03 2015-05-19 Bayer Cropscience Ag Cotton variety FM 2011GT
ES2699258T3 (es) 2011-06-14 2019-02-08 Bayer Cropscience Ag Uso de un compuesto de enaminocarbonilo en combinación con un agente de control biológico
US9265252B2 (en) 2011-08-10 2016-02-23 Bayer Intellectual Property Gmbh Active compound combinations comprising specific tetramic acid derivatives
CN103890181A (zh) 2011-08-22 2014-06-25 拜尔作物科学公司 修饰植物基因组的方法和手段
EP2561759A1 (en) 2011-08-26 2013-02-27 Bayer Cropscience AG Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth
EP2755949B1 (en) 2011-09-12 2015-10-21 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicidal 4-substituted-3-{phenyl[(heterocyclylmethoxy)imino]methyl}-1,2,4-oxadizol-5(4h)-one derivatives
EA029850B9 (ru) 2011-09-16 2018-12-28 Байер Интеллектуэль Проперти Гмбх Применение изоксадифен-этила или изоксадифена для повышения урожайности растений
CN103929956B (zh) 2011-09-16 2017-02-22 拜耳知识产权有限责任公司 酰基磺酰胺用于改善植物产量的用途
JP6100265B2 (ja) 2011-09-16 2017-03-22 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ 植物収量を向上させるためのフェニルピラゾリン−３−カルボン酸化合物の使用
CN103842507A (zh) 2011-10-04 2014-06-04 拜耳知识产权有限责任公司 通过抑制酵母氨酸脱氢酶基因控制真菌和卵菌的RNAi
AR088363A1 (es) 2011-10-18 2014-05-28 Dow Agrosciences Llc MATERIALES Y METODOS PARA LA DETECCION DEL EVENTO pDAB4472-1606 QUE CONTIENE EL GEN ARILOXIALCANOATO DIOXIGENASA (AAD-12) EN PLANTAS
JP2014533666A (ja) 2011-11-21 2014-12-15 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー 殺菌剤ｎ−［（トリ置換シリル）メチル］−カルボキサミド誘導体
CN105906567B (zh) 2011-11-30 2019-01-22 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌的n-二环烷基和n-三环烷基(硫代)羧酰胺衍生物
AU2012357896B9 (en) 2011-12-19 2016-12-15 Bayer Cropscience Ag Use of anthranilic acid diamide derivatives for pest control in transgenic crops
JP5976837B2 (ja) 2011-12-29 2016-08-24 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ 殺菌性３−［（１，３−チアゾール−４−イルメトキシイミノ）（フェニル）メチル］−２−置換−１，２，４−オキサジアゾール−５（２ｈ）−オン誘導体
EP2797891B1 (en) 2011-12-29 2015-09-30 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicidal 3-[(pyridin-2-ylmethoxyimino)(phenyl)methyl]-2-substituted-1,2,4-oxadiazol-5(2h)-one derivatives
US9353381B2 (en) 2012-01-23 2016-05-31 Dow Agrosciences Llc Cotton event pDAB4468.19.10.3 detection method
CN102577857B (zh) * 2012-01-24 2013-11-06 中国农业科学院棉花研究所 棉花叶片棉球定位鉴定除草剂抗性的方法
WO2013110594A1 (en) 2012-01-25 2013-08-01 Bayer Intellectual Property Gmbh Active compound combinations containing fluopyram and biological control agent
CA2862166A1 (en) 2012-01-25 2013-08-01 Bayer Intellectual Property Gmbh Active compounds combination containing fluopyram bacillus and biologically control agent
PT2819518T (pt) 2012-02-27 2017-12-11 Bayer Ip Gmbh Combinações de compostos activos contendo uma tiazoilisoxazolina e um fungicida
WO2013139949A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Bayer Intellectual Property Gmbh Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield
JP2015517996A (ja) 2012-04-12 2015-06-25 バイエル・クロップサイエンス・アーゲーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ａｇ 殺真菌剤として有用なｎ−アシル−２−（シクロ）アルキルピロリジンおよびピペリジン
US20130276163A1 (en) 2012-04-17 2013-10-17 Bayer Cropscience Ag Cotton variety st 5445llb2
UA115663C2 (uk) 2012-04-20 2017-12-11 Байєр Кропсайнс Аг (тіо)карбоксамідні похідні n-циклоалкіл-n-[(гетероциклілфеніл)метилену]
WO2013156560A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-n-[(trisubstitutedsilylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
EP2662360A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides
EP2662362A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole indanyl carboxamides
EP2662364A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides
EP2662370A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides
CN104768934B (zh) 2012-05-09 2017-11-28 拜耳农作物科学股份公司 吡唑茚满基甲酰胺
EP2662363A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides
EP2662361A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazol indanyl carboxamides
US9375005B2 (en) 2012-05-09 2016-06-28 Bayer Cropscience Ag 5-halogenopyrazole indanyl carboxamides
AR091104A1 (es) 2012-05-22 2015-01-14 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida
AR091202A1 (es) 2012-05-30 2015-01-21 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende un agente de control biologico y un insecticida
MX356531B (es) 2012-05-30 2018-06-01 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende un agente de control biologico y un fungicida seleccionado de inhibidores de la cadena respiratoria en el complejo iii.
US9386773B2 (en) 2012-05-30 2016-07-12 Bayer Cropscience Ag Compositions comprising a biological control agent and a fungicide from the group consisting of inhibitors of the respiratory chain at complex I or II
KR20150023475A (ko) 2012-05-30 2015-03-05 바이엘 크롭사이언스 아게 생물학적 방제제, 및 지질막 합성, 멜라닌 생합성, 핵산 합성 또는 신호 전달의 억제제로부터 선택된 살진균제를 포함하는 조성물
CN109247339A (zh) 2012-05-30 2019-01-22 拜耳作物科学股份公司 包含生物防治剂和杀真菌剂的组合物作为杀真菌剂的用途
KR20150023474A (ko) 2012-05-30 2015-03-05 바이엘 크롭사이언스 아게 생물학적 방제제, 및 아미노산 또는 단백질 생합성의 억제제, atp 생산의 억제제 및 세포벽 합성의 억제제로부터 선택된 살진균제를 포함하는 조성물
CN104507316B (zh) 2012-05-30 2018-03-06 拜尔农作物科学股份公司 包含生物防治剂和杀真菌剂的组合物
EP2854535A1 (en) 2012-05-30 2015-04-08 Bayer Cropscience AG Compositions comprising a biological control agent and an insecticide
BR112015002176A2 (pt) 2012-07-31 2017-07-04 Bayer Cropscience Ag composições que compreendem uma mistura pesticida de terpeno e um inseticida
WO2014043435A1 (en) 2012-09-14 2014-03-20 Bayer Cropscience Lp Hppd variants and methods of use
EP2719280A1 (en) 2012-10-11 2014-04-16 Bayer CropScience AG Use of N-phenylethylpyrazole carboxamide derivatives or salts thereof for resistance management of phytopathogenic fungi
JP6153619B2 (ja) 2012-10-19 2017-06-28 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト カルボキサミド誘導体を含む活性化合物の組み合わせ
MX381528B (es) 2012-10-19 2025-03-12 Bayer Cropscience Ag Método para mejorar la tolerancia al estrés abiótico en plantas usando derivados de carboxamida o tiocarboxamida.
WO2014060518A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Bayer Cropscience Ag Method of plant growth promotion using carboxamide derivatives
BR112015008798B1 (pt) 2012-10-19 2020-03-17 Bayer Cropscience Ag Método para o tratamento de plantas contra fungos fitopatogênicos resistentes a um fungicida SDHI
EP2735231A1 (en) 2012-11-23 2014-05-28 Bayer CropScience AG Active compound combinations
PL2925134T3 (pl) 2012-11-30 2020-06-29 Bayer Cropscience Ag Trójskładnikowe mieszaniny grzybobójcze
EA201890495A3 (ru) 2012-11-30 2019-01-31 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Тройные фунгицидные и пестицидные смеси
CA2892702A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary fungicidal or pesticidal mixture
WO2014083031A2 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary pesticidal and fungicidal mixtures
CA3082683A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary fungicidal mixtures
MX2015006631A (es) 2012-12-03 2015-08-05 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende un agente de control biologico y un insecticida.
WO2014086753A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising biological control agents
US9763454B2 (en) 2012-12-03 2017-09-19 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and a fungicide
CA2893077A1 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and a fungicide
CA2893027A1 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising biological control agents
WO2014086749A2 (en) 2012-12-03 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Composition comprising a biological control agent and an insecticide
MX2015006578A (es) 2012-12-03 2015-08-05 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende un agente de control biologico y un fungicida.
EP2925144A2 (en) 2012-12-03 2015-10-07 Bayer CropScience AG Composition comprising a biological control agent and an insecticide
WO2014090765A1 (en) 2012-12-12 2014-06-19 Bayer Cropscience Ag Use of 1-[2-fluoro-4-methyl-5-(2,2,2-trifluoroethylsulfinyl)phenyl]-5-amino-3-trifluoromethyl)-1 h-1,2,4 tfia zole for controlling nematodes in nematode-resistant crops
AR093996A1 (es) 2012-12-18 2015-07-01 Bayer Cropscience Ag Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias
CN104995174A (zh) 2012-12-19 2015-10-21 拜耳作物科学股份公司 二氟甲基-烟酰-四氢萘基胺
CN103013938B (zh) * 2012-12-25 2014-12-17 北京大北农科技集团股份有限公司 除草剂抗性蛋白质、其编码基因及用途
WO2014124375A1 (en) 2013-02-11 2014-08-14 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising gougerotin and a biological control agent
AU2014214628A1 (en) 2013-02-11 2015-08-13 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising gougerotin and an insecticide
CA2898795A1 (en) 2013-02-11 2014-08-14 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising a streptomyces-based biological control agent and a fungicide
US20140245475A1 (en) 2013-02-27 2014-08-28 Bayer Cropscience Lp Cotton variety st 4946glb2
US20140245476A1 (en) 2013-02-27 2014-08-28 Bayer Cropscience Lp Cotton variety st 6448glb2
MX369500B (es) 2013-03-07 2019-11-11 Athenix Corp Genes de toxinas y métodos para su uso.
JP2016519687A (ja) 2013-04-19 2016-07-07 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト バイナリー殺虫または農薬混合物
US20160058001A1 (en) 2013-04-19 2016-03-03 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
TW201507722A (zh) 2013-04-30 2015-03-01 Bayer Cropscience Ag 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類
WO2014177514A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Bayer Cropscience Ag Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides
US9770022B2 (en) 2013-06-26 2017-09-26 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-N-[(bicyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
MX2016004595A (es) 2013-10-09 2016-08-01 Monsanto Technology Llc Evento de maiz transgenico mon87403 y metodos para su deteccion.
EP3077377B1 (en) 2013-12-05 2020-01-22 Bayer CropScience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-n-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives
TW201609661A (zh) 2013-12-05 2016-03-16 拜耳作物科學公司 Ｎ－環烷基－ｎ－｛［２－（１－經取代環烷基）苯基］亞甲基｝－（硫代）甲醯胺衍生物
EP2885970A1 (en) 2013-12-21 2015-06-24 Bayer CropScience AG Fungicide compositions comprising compound I, at least one succinate dehydrogenase (SDH) inhibitor and at least one triazole fungicide
CA2942171C (en) 2014-03-11 2023-05-09 Bayer Cropscience Lp Hppd variants and methods of use
PE20211797A1 (es) 2014-03-20 2021-09-13 Monsanto Technology Llc Evento de maiz transgenico mon 87419 y metodos para su uso
WO2015160618A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a biological control agent
WO2015160619A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a fungicide
WO2015160620A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and an insecticide
CA2967128A1 (en) 2014-11-14 2016-05-19 Basf Plant Science Company Gmbh Brassica events lbflfk and methods for detection thereof
EP3081085A1 (en) 2015-04-14 2016-10-19 Bayer CropScience AG Method for improving earliness in cotton
US10214510B2 (en) 2015-04-13 2019-02-26 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-N-(biheterocyclylethylene)-(thio)carboxamide derivatives
EP3097782A1 (en) 2015-05-29 2016-11-30 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Methods for controlling phytopathogenic nematodes by combination of fluopyram and biological control agents
MX391266B (es) 2015-09-11 2025-03-19 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Variantes de hppd y metodos de uso.
MA44716A (fr) 2016-04-20 2019-02-27 Bayer Cropscience Lp Événement élite ee-gh7, procédés et kits d'identification de cet événement dans des échantillons biologiques
EP3490379A1 (en) 2016-07-29 2019-06-05 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Active compound combinations and methods to protect the propagation material of plants
US11091772B2 (en) 2016-11-23 2021-08-17 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC AXMI669 and AXMI991 toxin genes and methods for their use
WO2018114393A1 (en) 2016-12-19 2018-06-28 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
BR112019014727A2 (pt) 2017-01-18 2020-04-07 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC molécula de ácido nucleico, vector, célula, planta, semente, polipeptídeo, composição, métodos para o controle de uma população de pragas, para matar uma praga, para produzir um polipeptídeo, para proteger uma planta e para aumentar o rendimento em uma planta, uso do ácido nucleico e produto de base
AR110756A1 (es) 2017-01-18 2019-05-02 Bayer Cropscience Lp Uso de bp005 para el control de patógenos de planta
US20170156280A1 (en) 2017-02-13 2017-06-08 Bayer Cropscience Lp Cotton variety st 5517gltp
US20170150690A1 (en) 2017-02-13 2017-06-01 Bayer Cropscience Lp Cotton variety fm 1888gl
BR112019015338B1 (pt) 2017-02-21 2023-03-14 Basf Se Compostos de fórmula i, composição agroquímica, semente revestida, uso dos compostos e método para combater fungos nocivos fitopatogênicos
WO2018165091A1 (en) 2017-03-07 2018-09-13 Bayer Cropscience Lp Hppd variants and methods of use
WO2018184970A1 (en) 2017-04-07 2018-10-11 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018188962A1 (en) 2017-04-11 2018-10-18 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
CA3061009A1 (en) 2017-04-21 2018-10-25 Bayer Cropscience Lp Method of improving crop safety
BR112019022137A2 (pt) 2017-05-04 2020-05-12 Basf Se Usos de compostos, compostos da fórmula i, composição agroquímica e método para combater fungos nocivos fitopatogênicos
WO2018202491A1 (en) 2017-05-04 2018-11-08 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2018219797A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 Basf Se Substituted oxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
EP3642187A1 (en) 2017-06-19 2020-04-29 Basf Se 2-[[5-(trifluoromethyl)-1,2,4-oxadiazol-3-yl]aryloxy](thio)acetamides for combating phytopathogenic fungi
MX2020000971A (es) 2017-07-27 2020-07-13 Basf Se Uso de composiciones herbicidas a base de l-glufosinato en cultivos de campo tolerantes.
WO2019025250A1 (en) 2017-08-04 2019-02-07 Basf Se SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR COMBATING PHYTOPATHOGENIC FUNGI
WO2019038042A1 (en) 2017-08-21 2019-02-28 Basf Se SUBSTITUTED TRIFLUOROMETHYLOXADIAZOLES FOR THE CONTROL OF PHYTOPATHOGENIC FUNGI
EP3684761A1 (en) 2017-09-18 2020-07-29 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019068811A1 (en) 2017-10-06 2019-04-11 Bayer Aktiengesellschaft COMPOSITIONS COMPRISING FLUOPYRAM AND TIOXAZAFENE
WO2019083810A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Basf Se IMPROVING HERBICIDE TOLERANCE FOR 4-HYDROXYPHENYLPYRUVATE DIOXYGENASE (HPPD) INHIBITORS BY NEGATIVE REGULATION OF HPPD EXPRESSION IN SOYBEANS
WO2019083808A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Basf Se IMPROVING HERBICIDE TOLERANCE AGAINST HPPD INHIBITORS BY REGULATION OF PUTATIVE REDUCED 4-HYDROXYPHENYLPYRUVATE REDUCES IN SOYBEANS
EP3713936B1 (en) 2017-11-23 2021-10-20 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
AU2018375795A1 (en) 2017-11-30 2020-07-02 Boragen, Inc. Benzoxaborole compounds and formulations thereof
WO2019121143A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Basf Se Substituted cyclopropyl derivatives
WO2019137995A1 (en) 2018-01-11 2019-07-18 Basf Se Novel pyridazine compounds for controlling invertebrate pests
WO2019145221A1 (en) 2018-01-29 2019-08-01 BASF Agro B.V. New agrochemical formulations
JP2021512887A (ja) 2018-02-07 2021-05-20 ビーエイエスエフ・ソシエタス・エウロパエアＢａｓｆ Ｓｅ 新規ピリジンカルボキサミド
WO2019154665A1 (en) 2018-02-07 2019-08-15 Basf Se New pyridine carboxamides
US10966384B2 (en) 2018-02-19 2021-04-06 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Cotton variety FM 2498GLT
WO2019166257A1 (en) 2018-03-01 2019-09-06 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions of mefentrifluconazole
US10470428B2 (en) 2018-03-07 2019-11-12 Basf Agricultural Solutions Seed, Us Llc Cotton variety ST 5471GLTP
US20190274268A1 (en) 2018-03-07 2019-09-12 Bayer Cropscience Lp Cotton variety st 5122glt
US11109559B2 (en) 2018-03-09 2021-09-07 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Cotton variety ST 5818GLT
US11116171B2 (en) 2018-03-09 2021-09-14 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Cotton variety FM 2574GLT
CN108575645A (zh) * 2018-04-03 2018-09-28 中国农业科学院棉花研究所 一种田间快速评价棉花对除草剂耐受性的方法
WO2019219464A1 (en) 2018-05-15 2019-11-21 Basf Se Substituted trifluoromethyloxadiazoles for combating phytopathogenic fungi
WO2019224092A1 (en) 2018-05-22 2019-11-28 Basf Se Pesticidally active c15-derivatives of ginkgolides
WO2019226938A1 (en) 2018-05-23 2019-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture Fruit-specific promoters
EP3802521A1 (de) 2018-06-04 2021-04-14 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame bizyklische benzoylpyrazole
AU2019325436B2 (en) 2018-08-18 2023-10-26 5Metis, Inc. Solid forms of substituted benzoxaborole and compositions thereof
EP3613736A1 (en) 2018-08-22 2020-02-26 Basf Se Substituted glutarimide derivatives
EP3628158A1 (en) 2018-09-28 2020-04-01 Basf Se Pesticidal mixture comprising a mesoionic compound and a biopesticide
KR20210082473A (ko) 2018-10-23 2021-07-05 바스프 에스이 트리시클릭 살충 화합물
EP3643705A1 (en) 2018-10-24 2020-04-29 Basf Se Pesticidal compounds
EP3670501A1 (en) 2018-12-17 2020-06-24 Basf Se Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides
EP3908584B1 (en) 2019-01-11 2023-04-26 Basf Se Crystalline forms of 1-(1,2-dimethylpropyl)-n-ethyl-5-methyl-n-pyridazin-4-yl-pyrazole-4-carboxamide
EP3696177A1 (en) 2019-02-12 2020-08-19 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
US11213003B2 (en) 2019-02-12 2022-01-04 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Cotton variety ST 4550GLTP
US11284595B2 (en) 2019-02-12 2022-03-29 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Cotton variety FM 2398GLTP
US11234407B2 (en) 2019-02-12 2022-02-01 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Cotton variety FM 1621GL
WO2020231751A1 (en) 2019-05-10 2020-11-19 Bayer Cropscience Lp Active compound combinations
CN113923987B (zh) 2019-05-29 2024-10-01 巴斯夫欧洲公司 用于防除动物害虫的介离子咪唑鎓化合物和衍生物
EP3769623A1 (en) 2019-07-22 2021-01-27 Basf Se Mesoionic imidazolium compounds and derivatives for combating animal pests
CN113993847A (zh) 2019-06-06 2022-01-28 巴斯夫欧洲公司 杀真菌的n-(吡啶-3-基)羧酰胺类
WO2020244970A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Basf Se New carbocyclic pyridine carboxamides
WO2020244969A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Basf Se Pyridine derivatives and their use as fungicides
EP3766879A1 (en) 2019-07-19 2021-01-20 Basf Se Pesticidal pyrazole derivatives
CN114341116A (zh) 2019-07-22 2022-04-12 拜耳公司 5-氨基取代的吡唑和三唑作为杀虫剂
CN118496198A (zh) 2019-07-23 2024-08-16 拜耳公司 作为农药的新的杂芳基-三唑化合物
MY208580A (en) 2019-07-23 2025-05-16 Bayer Ag Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides
EP4007494A1 (en) 2019-08-01 2022-06-08 Bayer CropScience LP Method of improving cold stress tolerance and crop safety
EP3701796A1 (en) 2019-08-08 2020-09-02 Bayer AG Active compound combinations
WO2021058659A1 (en) 2019-09-26 2021-04-01 Bayer Aktiengesellschaft Rnai-mediated pest control
WO2021063736A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Basf Se Bicyclic pyridine derivatives
WO2021063735A1 (en) 2019-10-02 2021-04-08 Basf Se New bicyclic pyridine derivatives
CN114760842A (zh) 2019-10-02 2022-07-15 拜耳公司 包含脂肪酸的活性化合物结合物
AU2020363864A1 (en) 2019-10-09 2022-04-21 Bayer Aktiengesellschaft Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides
PH12022550862A1 (en) 2019-10-09 2023-04-24 Bayer Ag Novel heteroaryl-triazole compounds as pesticides
US20230242935A1 (en) 2019-10-14 2023-08-03 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Novel insect resistant genes and methods of use
BR112022007131A2 (pt) 2019-10-14 2022-07-05 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Molécula de ácido nucleico, ácido nucleico, polipeptídeos, vetor, célula hospedeira, plantas, semente, composição, métodos para controlar uma população de pragas, matar uma praga, produzir um polipeptídeo, proteger uma planta e aumentar o rendimento em uma planta, uso do ácido nucleico e produto básico
EP4055010A1 (de) 2019-11-07 2022-09-14 Bayer Aktiengesellschaft Substituierte sulfonylamide zur bekämpfung tierischer schädlinge
WO2021097162A1 (en) 2019-11-13 2021-05-20 Bayer Cropscience Lp Beneficial combinations with paenibacillus
EP4061131A1 (en) 2019-11-18 2022-09-28 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations comprising fatty acids
TW202134226A (zh) 2019-11-18 2021-09-16 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
TW202136248A (zh) 2019-11-25 2021-10-01 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基-三唑化合物
WO2021155084A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Pairwise Plants Services, Inc. Suppression of shade avoidance response in plants
EP4107151A1 (en) 2020-02-18 2022-12-28 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-triazole compounds as pesticides
EP3708565A1 (en) 2020-03-04 2020-09-16 Bayer AG Pyrimidinyloxyphenylamidines and the use thereof as fungicides
US20230212600A1 (en) 2020-04-16 2023-07-06 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
WO2021209490A1 (en) 2020-04-16 2021-10-21 Bayer Aktiengesellschaft Cyclaminephenylaminoquinolines as fungicides
US20230212163A1 (en) 2020-04-21 2023-07-06 Bayer Aktiengesellschaft 2-(het)aryl-substituted condensed heterocyclic derivatives as pest control agents
EP3903582A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ii
EP3903583A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iii
EP3903584A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors iv
EP3903581A1 (en) 2020-04-28 2021-11-03 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors i
BR112022021631A2 (pt) 2020-04-28 2022-12-06 Basf Se Compostos, composição, métodos para combater ou controlar pragas invertebradas, para proteger plantas em crescimento e para tratar ou proteger um animal, semente e uso de um composto
JP2023538713A (ja) 2020-05-06 2023-09-11 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト 殺真菌性化合物としてのピリジン（チオ）アミド
TW202528307A (zh) 2020-05-06 2025-07-16 德商拜耳廠股份有限公司 作為殺蟲劑之新穎雜芳基三唑化合物
EP4149929A1 (en) 2020-05-12 2023-03-22 Bayer Aktiengesellschaft Triazine and pyrimidine (thio)amides as fungicidal compounds
EP3909950A1 (en) 2020-05-13 2021-11-17 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
JP2023529294A (ja) 2020-05-19 2023-07-10 バイエル、アクチエンゲゼルシャフト、（ディビジョン、クロップサイエンス） 殺真菌性化合物としてのアザ二環式（チオ）アミド
US12410438B2 (en) 2020-06-02 2025-09-09 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
WO2021245087A1 (en) 2020-06-04 2021-12-09 Bayer Aktiengesellschaft Heterocyclyl pyrimidines and triazines as novel fungicides
WO2021249800A1 (en) 2020-06-10 2021-12-16 Basf Se Substituted [1,2,4]triazole compounds as fungicides
EP3945089A1 (en) 2020-07-31 2022-02-02 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors v
BR112022024413A2 (pt) 2020-06-10 2023-02-07 Bayer Ag Heterociclos substituídos com azabiciclila como fungicidas inovadores
EP4168558A1 (en) 2020-06-17 2023-04-26 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for controlling meristem size for crop improvement
WO2021255071A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 3-(pyridazin-4-yl)-5,6-dihydro-4h-1,2,4-oxadiazine derivatives as fungicides for crop protection
BR112022025344A2 (pt) 2020-06-18 2023-01-03 Bayer Ag Composição para uso na agricultura
UY39276A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag Uso de compuestos de 1,3,4–oxadiazol–2–ilpirimidina para controlar microorganismos fitopatógenos, métodos de uso y composiciones.
WO2021255089A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,3,4-oxadiazole pyrimidines and 1,3,4-oxadiazole pyridines as fungicides
WO2021255091A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,3,4-oxadiazoles and their derivatives as fungicides
UY39275A (es) 2020-06-19 2022-01-31 Bayer Ag 1,3,4-oxadiazol pirimidinas como fungicidas, procesos e intermediarios para su preparación, métodos de uso y usos de los mismos
EP3929189A1 (en) 2020-06-25 2021-12-29 Bayer Animal Health GmbH Novel heteroaryl-substituted pyrazine derivatives as pesticides
JP2023532548A (ja) 2020-07-02 2023-07-28 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト 有害生物防除剤としてのヘテロサイクレン誘導体
EP3960727A1 (en) 2020-08-28 2022-03-02 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors vi
EP3939961A1 (en) 2020-07-16 2022-01-19 Basf Se Strobilurin type compounds and their use for combating phytopathogenic fungi
WO2022017836A1 (en) 2020-07-20 2022-01-27 BASF Agro B.V. Fungicidal compositions comprising (r)-2-[4-(4-chlorophenoxy)-2-(trifluoromethyl)phenyl]-1- (1,2,4-triazol-1-yl)propan-2-ol
EP3970494A1 (en) 2020-09-21 2022-03-23 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors viii
WO2022033991A1 (de) 2020-08-13 2022-02-17 Bayer Aktiengesellschaft 5-amino substituierte triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022053453A1 (de) 2020-09-09 2022-03-17 Bayer Aktiengesellschaft Azolcarboxamide als schädlingsbekämpfungsmittel
WO2022058327A1 (en) 2020-09-15 2022-03-24 Bayer Aktiengesellschaft Substituted ureas and derivatives as new antifungal agents
EP3974414A1 (de) 2020-09-25 2022-03-30 Bayer AG 5-amino substituierte pyrazole und triazole als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4236691A1 (en) 2020-10-27 2023-09-06 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
WO2022090069A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Basf Se Compositions comprising mefenpyr-diethyl
WO2022090071A1 (en) 2020-11-02 2022-05-05 Basf Se Use of mefenpyr-diethyl for controlling phytopathogenic fungi
WO2022106304A1 (en) 2020-11-23 2022-05-27 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
WO2022128524A1 (en) 2020-12-14 2022-06-23 Basf Se Sulfoximine pesticides
EP3915971A1 (en) 2020-12-16 2021-12-01 Bayer Aktiengesellschaft Phenyl-s(o)n-phenylamidines and the use thereof as fungicides
JP2023554063A (ja) 2020-12-18 2023-12-26 バイエル・アクチエンゲゼルシヤフト 作物における耐性植物病原性真菌を防除するためのｄｈｏｄｈ阻害剤の使用
WO2022129188A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft 1,2,4-oxadiazol-3-yl pyrimidines as fungicides
WO2022129190A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft (hetero)aryl substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
WO2022129196A1 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Bayer Aktiengesellschaft Heterobicycle substituted 1,2,4-oxadiazoles as fungicides
EP4036083A1 (de) 2021-02-02 2022-08-03 Bayer Aktiengesellschaft 5-oxy substituierte hetereozyklen, als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4043444A1 (en) 2021-02-11 2022-08-17 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
WO2022173885A1 (en) 2021-02-11 2022-08-18 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying cytokinin oxidase levels in plants
US12121002B2 (en) 2021-02-24 2024-10-22 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Cotton variety FM 1730GLTP
WO2022182834A1 (en) 2021-02-25 2022-09-01 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying root architecture in plants
BR112023019400A2 (pt) 2021-03-30 2023-12-05 Bayer Ag 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida
BR112023019788A2 (pt) 2021-03-30 2023-11-07 Bayer Ag 3-(hetero)aril-5-clorodifluorometil-1,2,4-oxadiazol como fungicida
WO2022233758A1 (en) 2021-05-03 2022-11-10 Basf Se Additives for enhancing the pesticidal effectiveness of pesticidal microorganisms
KR20240005019A (ko) 2021-05-06 2024-01-11 바이엘 악티엔게젤샤프트 알킬아미드 치환된, 환형 이미다졸 및 살충제로서의 이의 용도
TW202311258A (zh) 2021-05-12 2023-03-16 德商拜耳廠股份有限公司 作為除蟲劑之經2-(雜)芳基取代之稠合雜環衍生物
EP4091451A1 (en) 2021-05-17 2022-11-23 BASF Agro B.V. Compositions comprising mefentrifluconazole
CN117355519A (zh) 2021-05-18 2024-01-05 巴斯夫欧洲公司 用作杀真菌剂的新型取代吡啶类
BR112023023989A2 (pt) 2021-05-18 2024-01-30 Basf Se Compostos, composição, método para combater fungos fitopatogênicos e semente
CA3218889A1 (en) 2021-05-18 2022-11-24 Wassilios Grammenos New substituted pyridines as fungicides
CN117897050A (zh) 2021-06-17 2024-04-16 成对植物服务股份有限公司 大豆中生长调节因子家族转录因子的修饰
UY39827A (es) 2021-06-24 2023-01-31 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de ubiquitina ligasa e3 hect para mejorar los rasgos de rendimiento
US20230027468A1 (en) 2021-07-01 2023-01-26 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for enhancing root system development
EP4119547A1 (en) 2021-07-12 2023-01-18 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
KR20240042626A (ko) 2021-08-02 2024-04-02 바스프 에스이 (3-퀴놀릴)-퀴나졸린
CN117794907A (zh) 2021-08-02 2024-03-29 巴斯夫欧洲公司 (3-吡啶基)-喹唑啉
CN118076742A (zh) 2021-08-12 2024-05-24 成对植物服务股份有限公司 修饰油菜素内酯受体基因以改善产量性状
EP4384016B1 (en) 2021-08-13 2025-09-03 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations and fungicide compositions comprising those
UY39902A (es) 2021-08-17 2023-03-31 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar genes de histidina quinasa receptores de citoquinina en plant
EP4140986A1 (en) 2021-08-23 2023-03-01 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
CA3229873A1 (en) 2021-08-25 2023-03-02 Bayer Aktiengesellschaft Novel pyrazinyl-triazole compounds as pesticides
EP4140995A1 (en) 2021-08-27 2023-03-01 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
WO2023034731A1 (en) 2021-08-30 2023-03-09 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of ubiquitin binding peptidase genes in plants for yield trait improvement
AR126938A1 (es) 2021-09-02 2023-11-29 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar la arquitectura de las plantas y los rasgos de rendimiento
EP4144739A1 (de) 2021-09-02 2023-03-08 Bayer Aktiengesellschaft Anellierte pyrazole als schädlingsbekämpfungsmittel
EP4151631A1 (en) 2021-09-20 2023-03-22 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
CA3232804A1 (en) 2021-09-21 2023-03-30 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for reducing pod shatter in canola
EP4413127A1 (en) 2021-10-04 2024-08-14 Pairwise Plants Services, Inc. Methods for improving floret fertility and seed yield
UY39970A (es) 2021-10-07 2023-04-28 Pairwise Plants Services Inc Métodos para mejorar la fertilidad de la flor y el rendimiento de semillas
WO2023072671A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors ix
WO2023072670A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors x
US20250064060A1 (en) 2021-11-03 2025-02-27 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether (thio)amides as fungicidal compounds
EP4441049A1 (en) 2021-11-30 2024-10-09 Bayer Aktiengesellschaft Bis(hetero)aryl thioether oxadiazines as fungicidal compounds
EP4194453A1 (en) 2021-12-08 2023-06-14 Basf Se Pyrazine compounds for the control of invertebrate pests
AR127904A1 (es) 2021-12-09 2024-03-06 Pairwise Plants Services Inc Métodos para mejorar la fertilidad de floretes y el rendimiento de semillas
EP4198033A1 (en) 2021-12-14 2023-06-21 Basf Se Heterocyclic compounds for the control of invertebrate pests
EP4198023A1 (en) 2021-12-16 2023-06-21 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
AR128372A1 (es) 2022-01-31 2024-04-24 Pairwise Plants Services Inc Supresión de la respuesta de evitación de la sombra en las plantas
CN119325338A (zh) 2022-02-01 2025-01-17 环球化学股份有限公司 控制棉花上害虫的方法和组合物
PE20250350A1 (es) 2022-02-01 2025-02-06 Globachem Nv Metodos y composiciones para el control de plagas
WO2023156402A1 (en) 2022-02-17 2023-08-24 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
WO2023168217A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 Pairwise Plants Services, Inc. Modification of brassinosteroid receptor genes to improve yield traits
EP4238971A1 (en) 2022-03-02 2023-09-06 Basf Se Substituted isoxazoline derivatives
AU2023243430A1 (en) 2022-03-31 2024-10-24 Pairwise Plants Services, Inc. Early flowering rosaceae plants with improved characteristics.
WO2023196886A1 (en) 2022-04-07 2023-10-12 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving resistance to fusarium head blight
WO2023205714A1 (en) 2022-04-21 2023-10-26 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield traits
WO2023215704A1 (en) 2022-05-02 2023-11-09 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for enhancing yield and disease resistance
US20250304566A1 (en) 2022-05-03 2025-10-02 Bayer Aktiengesellschaft Crystalline forms of (5s)-3-[3-(3-chloro-2-fluorophenoxy)-6-methylpyridazin-4-yl]-5-(2-chloro-4-methylbenzyl)-5,6-dihydro-4h-1,2,4-oxadiazine
WO2023213626A1 (en) 2022-05-03 2023-11-09 Bayer Aktiengesellschaft Use of (5s)-3-[3-(3-chloro-2-fluorophenoxy)-6-methylpyridazin-4-yl]-5-(2-chloro-4-methylbenzyl)-5,6-dihydro-4h-1,2,4-oxadiazine for controlling unwanted microorganisms
EP4519289A1 (en) 2022-05-05 2025-03-12 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for modifying root architecture and/or improving plant yield traits
AR129709A1 (es) 2022-06-27 2024-09-18 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar el escape a la sombra en plantas
WO2024006792A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement
US20240000031A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement
JP2025525848A (ja) 2022-08-02 2025-08-07 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア ピラゾロ殺有害生物化合物
CN119768514A (zh) 2022-08-04 2025-04-04 成对植物服务股份有限公司 用于改善产量性状的方法和组合物
EP4568477A1 (en) 2022-08-11 2025-06-18 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for controlling meristem size for crop improvement
US20240090466A1 (en) 2022-09-08 2024-03-21 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield characteristics in plants
EP4342885A1 (en) 2022-09-20 2024-03-27 Basf Se N-(3-(aminomethyl)-phenyl)-5-(4-phenyl)-5-(trifluoromethyl)-4,5-dihydroisoxazol-3-amine derivatives and similar compounds as pesticides
EP4295688A1 (en) 2022-09-28 2023-12-27 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combination
WO2024068518A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-heteroaryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068519A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068517A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
WO2024068520A1 (en) 2022-09-28 2024-04-04 Bayer Aktiengesellschaft 3-(hetero)aryl-5-chlorodifluoromethyl-1,2,4-oxadiazole as fungicide
EP4361126A1 (en) 2022-10-24 2024-05-01 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xv
CN120202194A (zh) 2022-11-16 2025-06-24 巴斯夫欧洲公司 作为杀真菌剂的取代的四氢苯并二氮杂䓬
EP4619399A1 (en) 2022-11-16 2025-09-24 Basf Se New substituted tetrahydrobenzoxazepine
CN120202195A (zh) 2022-11-16 2025-06-24 巴斯夫欧洲公司 作为杀真菌剂的取代的苯并二氮杂䓬类
WO2024104818A1 (en) 2022-11-16 2024-05-23 Basf Se Substituted benzodiazepines as fungicides
EP4385326A1 (en) 2022-12-15 2024-06-19 Kimitec Biogorup Biopesticide composition and method for controlling and treating broad spectrum of pests and diseases in plants
WO2024137438A2 (en) 2022-12-19 2024-06-27 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Insect toxin genes and methods for their use
EP4389210A1 (en) 2022-12-21 2024-06-26 Basf Se Heteroaryl compounds for the control of invertebrate pests
WO2024165343A1 (en) 2023-02-08 2024-08-15 Basf Se New substituted quinoline compounds for combatitng phytopathogenic fungi
CN120603841A (zh) 2023-02-16 2025-09-05 成对植物服务股份有限公司 用于改变植物避荫性的方法和组合物
AR132019A1 (es) 2023-03-02 2025-05-21 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la evitación de la sombra en plantas
AR132071A1 (es) 2023-03-09 2025-05-21 Pairwise Plants Services Inc Modificación de genes de la vía de señalización de brasinoesteroide para mejorar rasgos de rendimiento en plantas
WO2024194038A1 (en) 2023-03-17 2024-09-26 Basf Se Substituted pyridyl/pyrazidyl dihydrobenzothiazepine compounds for combatting phytopathogenic fungi
EP4455137A1 (en) 2023-04-24 2024-10-30 Basf Se Pyrimidine compounds for the control of invertebrate pests
WO2024223034A1 (en) 2023-04-26 2024-10-31 Basf Se Use of strobilurin type compounds for combating phytopathogenic fungi containing an amino acid substitution f129l in the mitochondrial cytochrome b protein conferring resistance to qo inhibitors xvi
AR132715A1 (es) 2023-05-18 2025-07-23 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para mejorar las características de rendimiento de las plantas
EP4467535A1 (en) 2023-05-25 2024-11-27 Basf Se Lactam pesticidal compounds
WO2025008447A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
WO2025008227A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Basf Se Substituted pyridyl/pyrazinyl dihydropyrrolotriazine compounds for combatting phytopath-ogenic fungi
WO2025008446A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Bayer Aktiengesellschaft Composition for use in agriculture
WO2025008226A1 (en) 2023-07-05 2025-01-09 Basf Se Substituted quinolyl/quinoxalyl dihydropyrrolotriazine compounds for combatting phyto-pathogenic fungi
EP4488270A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4488269A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
EP4488273A1 (en) 2023-07-06 2025-01-08 Basf Se Triazole compounds for the control of invertebrate pests
AR133164A1 (es) 2023-07-18 2025-09-03 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar la arquitectura radicular en plantas
AR133310A1 (es) 2023-07-27 2025-09-17 Pairwise Plants Services Inc Métodos y composiciones para modificar rasgos de rendimiento de las plantas
WO2025026738A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Bayer Aktiengesellschaft 6-[5-(ethylsulfonyl)-1-methyl-1h-imidazol-4-yl]-7-methyl-3-(pentafluoroethyl)-7h-imidazo[4,5-c]pyridazine derivatives as pesticides
EP4501112A1 (en) 2023-08-01 2025-02-05 Globachem NV Plant defense elicitors
WO2025026815A1 (en) 2023-08-01 2025-02-06 Globachem Nv Insecticidal mixtures
WO2025031668A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Bayer Aktiengesellschaft Azaheterobiaryl-substituted 4,5-dihydro-1h-2,4,5-oxadiazines as novel fungicides
WO2025031843A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Basf Se New substituted benzoxazine picolinonitrile compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025032038A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Bayer Aktiengesellschaft Pyridazin-4-yloxadiazines as novel fungicides
WO2025031842A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 Basf Se New substituted benzoxazepine picolinonitrile compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025064734A1 (en) 2023-09-21 2025-03-27 Pairwise Plants Services, Inc. Early flowering black raspberry plants with improved characteristics
WO2025068226A2 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Basf Se Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur and selected terpenes
WO2025078183A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Basf Se Fungicidal mixture comprising substituted quinazolyl quinolines
WO2025078181A1 (en) 2023-10-09 2025-04-17 Basf Se Fungicidal mixture comprising substituted pyridines
WO2025078128A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Bayer Aktiengesellschaft Pyridazin-3-one-4-yloxadiazines as novel fungicides
US20250122522A1 (en) 2023-10-11 2025-04-17 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving crop yield traits
WO2025098874A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having fungicidal/insecticidal/acaricidal properties
WO2025098876A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025098875A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties
WO2025131902A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Basf Se Methods for protecting plants using mixtures comprising sulfur, selected terpenes and phosphites.
EP4574819A1 (en) 2023-12-22 2025-06-25 Basf Se Diazinone compounds for the control of invertebrate pests
WO2025168620A1 (en) 2024-02-07 2025-08-14 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted 4,5-dihydro-1h-2,4,5-oxadiazines as novel fungicides
US20250270578A1 (en) 2024-02-22 2025-08-28 Pairwise Plants Services, Inc. Methods and compositions for improving yield characteristics in plants
WO2025180964A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 Basf Se New substituted benzoxazepine compounds for combatting phytopathogenic fungi
WO2025186065A1 (en) 2024-03-05 2025-09-12 Bayer Aktiengesellschaft Heteroaryl-substituted (aza)quinoxaline derivatives as pesticides
WO2025190927A1 (en) 2024-03-14 2025-09-18 Bayer Aktiengesellschaft Active compound combinations having insecticidal/acaricidal properties

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000026345A1 (en) * 1998-11-03 2000-05-11 Aventis Cropscience N.V. Glufosinate tolerant rice
WO2001031042A2 (en) * 1999-10-29 2001-05-03 Aventis Cropscience N.V. Male-sterile brassica plants and methods for producing same

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5004863B2 (en) 1986-12-03 2000-10-17 Agracetus Genetic engineering of cotton plants and lines
DK0558676T3 (da) 1990-11-23 2000-09-25 Aventis Cropscience Nv Fremgangsmåde til transformering af enkimbladede planter
US5452625A (en) * 1993-09-29 1995-09-26 United Technologies Corporation Energy storage flywheel device
CA2234119C (en) * 1996-09-03 2010-01-05 Plant Genetic Systems, N.V. Improved barstar gene
US5986181A (en) 1996-10-10 1999-11-16 Southplains Biotechnologies, Inc. Transformation and regeneration of fertile cotton plants
WO2000026356A1 (en) 1998-11-03 2000-05-11 Aventis Cropscience N. V. Glufosinate tolerant rice
WO2000071733A1 (en) 1999-05-19 2000-11-30 Aventis Cropscience N.V. Improved method for agrobacterium mediated transformation of cotton
US6395485B1 (en) 2000-01-11 2002-05-28 Aventis Cropscience N.V. Methods and kits for identifying elite event GAT-ZM1 in biological samples
US6723451B1 (en) * 2000-07-14 2004-04-20 3M Innovative Properties Company Aluminum matrix composite wires, cables, and method
US6818807B2 (en) 2001-08-06 2004-11-16 Bayer Bioscience N.V. Herbicide tolerant cotton plants having event EE-GH1
US20040035547A1 (en) * 2002-08-20 2004-02-26 3M Innovative Properties Company Metal matrix composites, and methods for making the same

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000026345A1 (en) * 1998-11-03 2000-05-11 Aventis Cropscience N.V. Glufosinate tolerant rice
WO2001031042A2 (en) * 1999-10-29 2001-05-03 Aventis Cropscience N.V. Male-sterile brassica plants and methods for producing same

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Transgenic cotton resistant to herbicide bialaphos. Greg Keller et al.Transgenic Research. 1997 *

Also Published As

Publication number Publication date
AR100106A2 (es) 2016-09-14
US6818807B2 (en) 2004-11-16
ES2373434T3 (es) 2012-02-03
BRPI0211726B1 (pt) 2015-12-29
CN1551920A (zh) 2004-12-01
US20050005334A1 (en) 2005-01-06
AR036209A1 (es) 2004-08-18
EP1417312B1 (en) 2011-09-14
ATE524550T1 (de) 2011-09-15
WO2003013224A2 (en) 2003-02-20
AU2002333260B2 (en) 2007-08-23
US7442504B2 (en) 2008-10-28
ZA200400644B (en) 2005-03-30
BR0211726A (pt) 2004-09-21
AR100107A2 (es) 2016-09-14
US7834168B2 (en) 2010-11-16
EP1417312A2 (en) 2004-05-12
MXPA04001108A (es) 2005-02-17
US20030097687A1 (en) 2003-05-22
WO2003013224A3 (en) 2003-10-09
BR122014009174B1 (pt) 2015-12-01
US20090087853A1 (en) 2009-04-02

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