CN101443336B

CN101443336B - 环丙基稠合的[吲哚]并[苯并氮杂*]hcv ns5b抑制剂

Info

Publication number: CN101443336B
Application number: CN2007800177584A
Authority: CN
Inventors: 约翰·A·本德; 丁敏; 罗伯特·G·金特尔斯; 皮亚塞纳·赫瓦瓦萨姆
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2006-05-17
Filing date: 2007-05-04
Publication date: 2012-07-04
Anticipated expiration: 2027-05-04
Also published as: CN101443336A

Abstract

本发明涵盖式I化合物以及使用所述化合物的组合物和方法。所述化合物具有抵抗丙型肝炎病毒(HCV)的活性，且可用于治疗被HCV感染的患者。

Description

环丙基稠合的[吲哚]并[苯并氮杂*]HCV NS5B抑制剂

对相关申请的交叉引用

本申请要求2006年5月17日提出申请的美国临时申请序号60/801,125、2006年5月19日提出申请的60/802,005、2006年10月16日提出申请的60/852,084及2007年3月14日提出申请的60/894,757的优先权。

背景技术

丙型肝炎病毒(HCV)为一种主要人类病原，感染全世界经估计1亿7千万人—此约略五倍于被人类免疫缺陷病毒1型感染的数目。大部分这些经HCV感染之个体系发展严重进行性肝病，包括肝硬化与肝细胞癌(Lauer，G.M.；Walker，B.D.N.Engl.J.Med.2001，345，41-52)。

HCV为正链RNA病毒。以所推论氨基酸序列的比较及在5’-非翻译区域中的广泛类似性为基础，HCV已被分类为黄病毒科中的个别种属。黄病毒科的所有成员都具有包封的病毒粒子，其含有经由单一的不间断的可读框进行翻译而对所有已知病毒特异性蛋白进行编码的正链RNA基因组。

相当可观的异源性被发现于整个HCV基因组中的核苷酸及经编码的氨基酸序列内。至少六种主要基因型已被表征，且超过50种亚型已被描述。HCV的主要基因型在其全世界的分布上有差异，且HCV基因异源性的临床重要性仍然难以捉摸，虽然针对基因型对病理与疗法的可能作用已作过许多研究。

单股HCV RNA基因组为大约9500个核苷酸长度，且具有对约3000个氨基酸的单一的大的多蛋白进行编码的单一的可读框(ORF)。在受感染细胞中，此多蛋白在多个位置被细胞蛋白酶与病毒蛋白酶裂解，以产生结构性蛋白质与非结构性(NS)蛋白质。在HCV的情况下，成熟的非结构性蛋白质(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A及NS5B)的产生通过两种病毒蛋白酶来达成。相信第一种病毒蛋白酶为金属蛋白酶，且在NS2-NS3接合处进行裂解；第二种病毒蛋白酶为被包含在NS3 N-末端区域内的丝氨酸蛋白酶(亦被称为NS3蛋白酶)，且介导NS3下游的所有后续裂解，在NS3-NS4A位置以顺式进行裂解，而在其余的NS4A-NS4B、NS4B-NS5A和NS5A-NS5B位置以反式进行裂解。NS4A蛋白质似乎发挥多重功能，充作NS3蛋白酶的辅因子，且可能帮助NS3及其它病毒复制酶成份的细胞膜定位。NS3蛋白质与NS4A的复合物形成对于处理事件似乎是必须的，这提升了所有位置上的蛋白质分解效率。NS3蛋白质亦显示出核苷三磷酸酶与RNA解螺旋酶活性。NS5B(亦被称为HCV聚合酶)为RNA依赖性RNA聚合酶，其涉及HCV的复制。HCV NS5B蛋白质被描述于“Structural Analysis of the HepatitisC Virus RNA Polymerase in Complex with Ribonucleotides”(Bressanelli；S.etal.，Journal of Virology 2002，3482-3492和Defrancesco and Rice，Clinics inLiver Disease 2003，7，211-242)中。

目前，最有效的HCV疗法系采用α-干扰素与利巴韦林的组合，在40％患者中导致持续的功效(Poynard，T.et al.Lancet 1998，352，1426-1432)。最近的临床结果证实，作为单一疗法，经PEG化的α-干扰素系优于未修饰的α-干扰素(Zeuzem，S.et al.N.Engl.J.Med.2000，343，1666-1672)。但是，即使就涉及经PEG化的α-干扰素与利巴韦林的组合的实验性治疗给药方案而言，大部分患者在病毒负载方面并未出现持续的降低。因此，对于开发有效治疗剂以治疗HCV感染有清楚且重要的需求。

发明内容

本发明的一个方面为式I化合物：

其中

R¹为CO₂R⁵或CONR⁶R⁷；

R²为

或

R³为氢、卤素、烷基、烯基、羟基、苄基氧基、烷氧基或卤代烷氧基；

R⁴为环烷基；

R⁵为氢或烷基；

R⁶为氢、烷基、烷基SO₂、环烷基SO₂、卤代烷基SO₂、(R⁹)₂NSO₂或(R¹⁰)SO₂；

R⁷为氢或烷基；

R⁸为氢、烷基、环烷基、(环烷基)烷基、烷基羰基、环烷基羰基、卤代烷基羰基、烷氧基羰基、烷基SO₂、环烷基SO₂、卤代烷基SO₂、氨基羰基、(烷基氨基)羰基、(二烷基氨基)羰基、苄基、苄基氧基羰基或吡啶基；

R⁹为氢、烷基或环烷基；且

R¹⁰为氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌啶基或高吗啉基，且被0-3个烷基取代基取代；

或其可药用盐。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中

R¹为CO₂R⁵或CONR⁶R⁷；

R²为

或

R³为氢、卤素、烷基、烯基、羟基、苄基氧基或烷氧基；

R⁴为环烷基；

R⁵为氢或烷基；

R⁷为氢或烷基；

R⁸为氢、烷基、环烷基、(环烷基)烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、苄基、苄基氧基羰基或吡啶基；

R⁹为氢或烷基；且

R¹⁰为氮杂环丁基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(烷基)哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌啶基或高吗啉基；

或其可药用盐。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中R¹为CONR⁶R⁷；R⁶为烷基SO₂、环烷基SO₂、卤代烷基SO₂、(R⁹)₂NSO₂或(R¹⁰)SO₂；且R⁷为氢。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中R³为氢。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中R³为甲氧基。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中R⁴为环己基。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中R⁶为(R⁹)₂NSO₂或(R¹⁰)SO₂。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中R⁶为(二甲基氨基)SO₂。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中R⁶为烷基SO₂。

本发明的另一个方面为式I化合物，其中R⁶为异丙基SO₂。

本发明的另一个方面为根据以下立体化学的式I化合物。

本发明的另一个方面为根据以下立体化学的式I化合物。

任何变量(包括R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹或R¹⁰)的任何范围可独立地与变量的任何其它情况的范围一起使用。

除非另有说明，否则这些术语具有下述意义。“烷基”的意思是由1至6个碳所组成的直链或支链烷基。“烯基”的意思是由2至6个碳所组成且具有至少一个双键的直链或支链烷基。“环烷基”的意思是由3至7个碳所组成的单环状环系统。“羟基烷基”、“烷氧基”及具有经取代烷基部份的其它术语包括由该烷基部份的1至6个碳原子所组成的直链与支链异构体。“卤代烷基”与“卤代烷氧基”包括所有卤化异构体，从单卤素取代的烷基至全卤素取代的烷基。“芳基”包括碳环芳族取代基与杂环芳族取代基。括号与多重括号术语意在对本领域技术人员阐明结合关系。例如，譬如((R)烷基)一词的意思是进一步被取代基R取代的烷基取代基。

本发明包括所述化合物的所有可药用盐形式。可药用盐为其中抗衡离子不会显著地助长化合物的生理活性或毒性且其本身充作药理等价物的可药用盐。这些盐可根据一般有机技术采用商购试剂来制成。一些阴离子盐形式包括醋酸盐、醋硬脂酸盐(acistrate)、苯磺酸盐、溴化物、樟脑磺酸盐、氯化物、柠檬酸盐、富马酸盐、葡萄糖醛酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及昔萘酸盐(xinofoate)。一些阳离子盐形式包括铵盐、铝盐、苄星(benzathine)盐、铋盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、锂盐、镁盐、葡甲胺盐、4-苯基环己胺盐、哌嗪盐、钾盐、钠盐、丁三醇胺盐及锌盐。

一些本发明化合物具有不对称碳原子(参见例如下文结构)。本发明包括所有立体异构形式，包括对映异构体与非对映异构体，以及立体异构体的混合物，譬如外消旋体。一些立体异构体可使用本领域中已知的方法来制成。所述化合物与相关中间体的立体异构混合物可根据本领域中一般已知的方法而被分离成单一异构体。在以下方案与表格中，在分子结构的描绘中使用的星号仅意在指示相对立体化学，而不应被解释成暗示绝对立体化学指定。

合成方法

所述化合物可通过本领域中已知的方法(包括下文所述)来制成。一些试剂与中间体为本领域中所已知。其它试剂与中间体可通过本领域中已知的方法使用容易取得的物质来制成。用于说明化合物合成的变量(例如经编号的“R”取代基)仅意在说明如何制造，而不应该与权利要求书中或本专利说明书的其它段落中所使用的变量混淆。在方案中所使用的缩写一般性地按照本领域中所使用的惯用缩写。

2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯可被水解成2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸(参见方案1)。在无水THF中，使用例如1，1’-羰二咪唑及1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯，上述化合物可与多种磺酰脲类缩合。可使用例如苏楚基(Suzuki)偶联条件，使所得到的酰基磺酰胺与多种2-甲酰基硼酸或酯进行已知的偶联反应，以提供所描绘类型的环状半缩醛胺中间体。这些化合物可被转化成[吲哚]并[苯并氮杂

]衍生物，其方式是在DMF中，在碳酸铯的影响下，经由连续的Michael与Horner Emmons反应，以2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯处理。

相关的稠合环丙基酯衍生物可通过本领域中已知的方法来产生，包括[吲哚]并[苯并氮杂

Figure 2007800177584100002G2007800177584D0005150400QIETU

]酯在DMSO中在强碱性条件下以碘化三甲基氧化锍(trimethylsulfoxonium iodide)处理。残留在所得到的稠合环丙烷中的脂族酯残基可被水解，且产物酸可与多种烷基桥接的哌嗪缩合。例如，在DMSO中的四氟硼酸O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基

与二异丙基乙胺可获得烷基桥接的哌嗪羧酰胺。

方案1

N受保护的哌嗪亦可被偶联至中间体[吲哚]并[苯并氮杂

]酸，且所得到的哌嗪羧酰胺可使用本领域中已知的方法来脱保护，及使用各种合成方案来衍生化，其一些说明性实施例显示在下文中(参见方案2)。

方案2

可用于合成一些本发明化合物的中间体涉及方案3中所示叔丁酯[吲哚]并[苯并氮杂

Figure 2007800177584100002G2007800177584D0006150533QIETU

]的制备。

方案3

此操作法涉及所显示吲哚甲酯的碱催化水解，接着其与亚硫酰氯及叔丁醇钾反应，或与碳酸银和叔丁基溴进行烷基化反应。所得到的化合物可使用类似先前所概述的化学方法来转化，以提供上文所示的混合酯[吲哚]并[苯并氮杂

]。

这些中间体可用于可替换的程序中，其可被采用于制备酰基磺酰胺与酰基磺酰胺烷基桥接的哌嗪，如方案4中所示。中间体叔丁酯[吲哚]并[苯并氮杂

]的环丙烷化及随后叔丁酯基的裂解可产生酸，其可被偶联至多种磺酰胺与磺酰脲。后续水解作用获得相关的脂肪酸，其可与多种烷基桥接的哌嗪偶联。例如，在DMSO中的四氟硼酸O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基

与二异丙基乙胺可获得烷基桥接的哌嗪羧酰胺。

方案4

一些实施例以立体异构混合物存在。本发明涵盖所述化合物的所有立体异构体。分离立体异构混合物的方法为本领域中所熟知，且包括但不限于制备性手性超临界流体色谱(SFC)与手性高效液相色谱(HPLC)。使用此处理方式的实施例显示在方案5中。

方案5

达成此种分离的另一种方法涉及制备非对映异构体的混合物，其可使用多种本领域中已知的方法来分离。此处理方式的一个实施例显示在下文中(方案6)。

方案6

通过反相HPLC分离非对映异构体

一些非对映异构酰胺可使用反相HPLC来分离。在水解作用后，所得到的光学活性酸可与桥接的哌嗪衍生物偶联(方案6)。例如，在DMSO中的四氟硼酸O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基

Figure 2007800177584100002G2007800177584D0008150601QIETU

与二异丙基乙胺可用于获得烷基桥接的哌嗪羧酰胺。亦可使用其它标准酰胺偶联方法，以获得光学活性羧酰胺。

方案6

方案7-9说明了制造中间体与化合物的其它方法。

方案7

方案8

方案9

生物学方法

当在下文HCV RdRp检测中测定时，所述化合物展现了抵抗HCV NS5B的活性。

HCV NS5B RdRp的克隆、表达及纯化

对HCV基因型1b的NS5B蛋白质进行编码的cDNA被克隆至pET21a表达载体中。此蛋白质被表达成18个氨基酸C-末端截头(truncation)，以提高溶解度。大肠杆菌活力细胞系BL21(DE3)用于蛋白质的表达。培养物在37℃生长约4小时，直到培养物在600纳米达到光密度2.0为止。使培养物冷却至20℃，并以1mM IPTG诱导。添加新的氨苄青霉素至最终浓度为50微克/毫升，并使细胞在20℃生长过夜。

使细胞沉淀(3升)溶解以供纯化，得到15-24毫克经纯化的NS5B。溶胞缓冲液包含20mM Tris-HCl(pH 7.4)、500mM NaCl、0.5％triton X-100、1mMDTT、1mM EDTA、20％甘油、0.5毫克/毫升溶菌酶、10mM MgCl₂、15微克/毫升脱氧核糖核酸酶I及完全TM蛋白酶抑制剂药片(Roche)。在添加溶胞缓冲液之后，使用组织匀浆器，使经冷冻的细胞沉淀再悬浮。为降低试样的黏度，使用经连接至Branson超声处理器的微尖头，使溶胞产物的等分液在冰上超声处理。使经超声处理的溶胞产物在4℃在100,000×g离心1小时，并经过0.2微米滤器单元(Corning)过滤。

使用三个连续色谱步骤来纯化蛋白质：肝素琼脂糖CL-6B、polyU琼脂糖4B及HiTrap SP琼脂糖(Pharmacia)。色谱缓冲液与溶胞缓冲液相同，但不含有溶菌酶、脱氧核糖核酸酶I、MgCl₂或蛋白酶抑制剂，且缓冲液的NaCl浓度根据将蛋白质装填至色谱柱上的需要而调整。将各色谱柱以NaCl梯度液洗脱，其在5至50个色谱柱体积之间改变，依色谱柱类型而定。在最终色谱步骤后，所得到的酶纯度>90％，以SDS-PAGE分析为基础。将酶分成等分液，并储存在-80℃。

标准HCV NS5B RdRp酶检测

在最终体积为60微升并且在96孔板(Costar 3912)中进行HCV RdRp基因型1b检测。检测缓冲液由20mM Hepes(pH 7.5)、2.5mM KCl、2.5mM MgCl₂、1mM DTT、1.6单位RNase抑制剂(Promega N2515)、0.1毫克/毫升BSA(Promega R3961)及2％甘油所组成。将所有化合物在DMSO中连续稀释(3-倍)，并进一步在水中稀释，以使DMSO在检测中的最终浓度为2％。HCVRdRp基因型1b酶在最终浓度为28nM时使用。polyA模板在6nM时使用，且经生物素化的寡-dT12引物在最终浓度为180nM时使用。模板系市购而得(Amersham 27-4110)。生物素化引物由Sigma Genosys制备。3H-UTP在0.6μCi(0.29μM总UTP)时使用。反应通过添加酶来引发，在30℃培养60分钟，并通过添加25微升含有SPA珠粒的50mM EDTA(4毫克/毫升，AmershamRPNQ 0007)而停止。在室温培养>1小时之后，将板在Packard Top Count NXT上读取。

经修改的HCV NS5B RdRp酶检测

经修改的酶检测基本上按关于标准酶检测所述来进行，不同的是，使经生物素化的寡dT12引物预捕获在抗生物素蛋白链菌素(streptavidin)涂覆的SPA珠粒上，其方式是将引物与珠粒在检测缓冲液中混合，并在室温培养一小时。在离心后，除去未结合的引物。使引物结合的珠粒再悬浮在20mMHepes缓冲液(pH 7.5)中，并在最终浓度为20nM引物与0.67微克/微升珠粒时用于检测。在检测中的添加顺序：将酶(14nM)添加至经稀释的化合物中，接着添加模板(0.2nM)、3H-UTP(0.6μCi，0.29μM)及引物结合的珠粒的混合物，以引发反应，所给浓度为最终浓度。允许反应在30℃进行4小时。

化合物的IC₅₀值使用七种不同[I]来测得。IC₅₀值计算自抑制作用，其使用公式y＝A+((B-A)/(1+((C/x)＾D)))。

FRET检测制剂

为了进行HCV FRET筛选检测，使用96孔细胞培养板。FRET肽(Anaspec公司)(Taliani et al.，Anal.Biochem.1996，240，60-67)含有接近该肽一端的荧光供体EDANS与接近另一端的受体DABCYL。通过供体与受体间的分子间共振能转移(RET)，使该肽的荧光淬灭，但当NS3蛋白酶使该肽裂解时，产物不再发生RET淬灭，且供体的荧光变得显而易见。检测试剂按下述制成：将得自Promega(#E153A)的5X细胞荧光素酶细胞培养物溶胞试剂以H₂O稀释至1X，添加NaCl至最终为150mM，将FRET肽自2mM储备液稀释至最终20μM。

为了制备板，使带有或不带有海紫罗兰属荧光素酶(Renilla luciferase)报告子基因的HCV复制子细胞经胰蛋白酶化，并置于96-孔板的各孔中，其中经滴定的待测化合物添加在第3至12列中；列1与2含有对照化合物(HCV蛋白酶抑制剂)，且底部行含有未具有化合物的细胞。然后，将板置于37℃的CO₂培养器中。

检测

在添加上述待测化合物(FRET检测制剂)之后，在不同时间将板取出，且每孔添加Alamar蓝色溶液(Trek Diagnostics，#00-100)，作为细胞毒性的一种测量方式。在Cytoflour 4000仪器(PE Biosystems)中读取后，将板以PBS冲洗，然后通过每孔添加30微升上述FRET肽检测试剂(FRET检测制剂)而用于FRET检测。接着，将板置于Cytoflour 4000仪器中，其已被设定成340激发/490发射，自动模式历经20次循环，且板在动态模式中读取。典型地，在读取后使用终点分析的信号对噪声为至少三倍。或者，在Alamar蓝色读取后，将板以PBS冲洗，添加未具有酚红的50微升DMEM(高葡萄糖)，然后使用Promega Dual-Glo Luciferase Assay System，将板用于荧光素酶检测。

化合物分析通过对相对HCV复制子抑制作用与相对细胞毒性值进行定量而确定。为了计算细胞毒性值，将得自对照孔的平均Alamar蓝色荧光信号设定为100％无毒性。接着，将各化合物试验孔中的各个信号除以平均对照组信号并乘以100％，以确定百分比细胞毒性。为了计算HCV复制子抑制值，平均背景值得自在检测期间结束时含有最高量HCV蛋白酶抑制剂的两个孔。这些值类似于得自天然Huh-7细胞的值。

然后，将背景值从得自对照孔的平均信号中扣除，且此值作为100％活性使用。接着，将各化合物试验孔中的各个信号除以背景扣除后的平均对照值并乘以100％，以确定百分比活性。将蛋白酶抑制剂滴定的EC₅₀值计算成可在FRET或荧光素酶活性中造成50％降低的浓度。针对化合物板所得到的两个值即百分比细胞毒性与百分比活性用于确定待进一步分析的重要化合物。

化合物的代表性数据被报告在表1中。

表1

A>0.5μM；B为0.001μM-0.5μM；C<0.02μM，但确切值并未确定；D>0.04μM，但确切值并未确定；IC₅₀值使用预培养方案来确定。EC₅₀值使用FRET检测来确定。

药物组合物与治疗方法

所述化合物展现了抵抗HCV NS5B的活性，且可用于治疗HCV与HCV感染。因此，本发明的另一个方面为一种组合物，其包含本发明的化合物或其可药用盐及可药用载体。

本发明的另一个方面为一种组合物，其进一步包含具有抗HCV活性的化合物。

本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物为干扰素。在本发明的另一个方面，所述干扰素选自干扰素α2B、经PEG化的干扰素α、同感干扰素(consensus interferon)、干扰素α2A及淋巴细胞样干扰素τ。

本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物为环孢菌素。在本发明的另一个方面，所述环孢菌素为环孢菌素A。

本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物选自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、可提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、Imiqimod、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺及金刚乙胺。

本发明的另一个方面为一种组合物，其中具有抗HCV活性的化合物可有效地抑制靶标的功能，所述靶标选自HCV金属蛋白酶(HCVmetalloprotease)、HCV丝氨酸蛋白酶(HCV serine protease)、HCV聚合酶(HCVpolymerase)、HCV解螺旋酶(HCV helicase)、HCV NS4B蛋白质(HCV NS4Bprotein)、HCV进入(HCV entry)、HCV组装(HCV assembly)、HCV释出(HCVegress)、HCV NS5A蛋白质(HCV NS5A protein)、IMPDH及核苷类似物(nucleoside analog)，以治疗HCV感染。

本发明的另一个方面为一种组合物，其包含本发明的化合物或其可药用盐、可药用载体、干扰素及利巴韦林。

本发明的另一个方面为一种抑制HCV复制子(HCV replicon)功能的方法，其包括使HCV复制子与本发明的化合物或其可药用盐接触。

本发明的另一个方面为一种抑制HCV NS5B蛋白质功能的方法，其包括使HCV NS5B蛋白质与本发明的化合物或其可药用盐接触。

本发明的另一个方面为一种在患者中治疗HCV感染的方法，其包括对所述患者给予治疗有效量的本发明化合物或其可药用盐。在另一个实施方案中，本发明的化合物可有效地抑制HCV复制子的功能。在另一个实施方案中，本发明的化合物可有效地抑制HCV NS5B蛋白质的功能。

本发明的另一个方面为一种在患者中治疗HCV感染的方法，其包括对所述患者给予治疗有效量的本发明化合物或其可药用盐，并且给予(之前、之后或同时)其它具有抗HCV活性的化合物。

本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物为干扰素的方法。

本发明的另一个方面为其中所述干扰素选自干扰素α2B、经PEG化的干扰素α、同感干扰素、干扰素α2A及淋巴细胞样干扰素τ的方法。

本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物为环孢菌素的方法。

本发明的另一个方面为其中所述环孢菌素为环孢菌素A的方法。

本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物选自白细胞介素2、白细胞介素6、白细胞介素12、可提高1型辅助T细胞应答发展的化合物、干扰RNA、反义RNA、Imiqimod、利巴韦林、5’-单磷酸肌苷脱氢酶抑制剂、金刚烷胺及金刚乙胺的方法。

本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效地抑制靶标功能的方法，所述靶标选自HCV金属蛋白酶、HCV丝氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCV NS4B蛋白质、HCV进入、HCV组装、HCV释出、HCV NS5A蛋白质、IMPDH及核苷类似物，以治疗HCV感染。

本发明的另一个方面为其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效地抑制HCV生命循环中的靶标而非HCV NS5B蛋白质的功能的方法。

“治疗有效”的意思是提供有意义的患者利益所需要的药物的量，如肝炎与HCV感染领域中的执业医师所理解的那样。

“患者”的意思是被HCV病毒感染且适合治疗的人们，如肝炎与HCV感染领域中的执业医师所理解的那样。

“治疗”、“疗法”、“给药方案”、“HCV感染”及相关术语如肝炎与HCV感染领域中的执业医师所理解的那样被使用。

本发明化合物一般以药物组合物的形式来给予，所述组合物包含治疗有效量的本发明化合物或其可药用盐及可药用载体，且可含有常规赋形剂。治疗有效量为提供有意义的患者利益所需要的量。可药用载体为具有可接受安全性的常规已知载体。组合物涵盖所有常见固体与液体形式，包括胶囊剂、片剂、锭剂与粉末剂以及液体混悬剂、糖浆剂、酏剂及溶液剂。组合物使用一般配方技术来制成，且常规赋形剂(譬如粘合剂与润湿剂)与介质(譬如水与醇)通常用于组合物。

固体组合物通常被调配成剂量单位，且每剂量提供约1至1000毫克活性成份的组合物为较佳。剂量的一些实施例为1毫克、10毫克、100毫克、250毫克、500毫克及1000毫克。一般而言，其它药物的单位范围类似于临床上使用的经典单位范围。典型地，此为0.25-1000毫克/单位。

液体组合物通常呈剂量单位范围。一般而言，液体组合物的单位剂量范围为1-100毫克/毫升。剂量的一些实施例为1毫克/毫升、10毫克/毫升、25毫克/毫升、50毫克/毫升及100毫克/毫升。一般而言，其它药物的单位范围类似于临床上使用的经典单位范围。典型地，此为1-100毫克/毫升。

本发明涵盖所有常规给药模式；口服与非经肠方法为较佳。一般而言，给药方案类似于临床上使用的其它药物。典型地，日服剂量为每日1-100毫克/公斤体重。一般而言，口服方式需要较多的化合物，而非经肠方式需要较少的化合物。但是，具体的给药方案由医师使用安全可靠的医疗判断来确定。

本发明亦涵盖其中本发明化合物在组合疗法中使用的方法。即所述化合物可并用可用于治疗肝炎与HCV感染的其它药物，但所述化合物不同于所述其它药物。在这些组合方法中，所述化合物通常搭配其它药物，以日服剂量为每日1-100毫克/公斤体重来给予。其它药物一般以治疗上所使用的量来给予。但是，具体的给药方案由医师使用安全可靠的医疗判断来确定。

适合组合物的化合物与方法的一些实施例列在表2中。

表2

商标名称	抑制剂类型或靶标类型	来源公司
			Omega IFN	IFN-ω	Intarcia Therapeutics
BILN-2061	丝氨酸蛋白酶抑制剂	Boehringer Ingelheim Pharma KG，Ingelheim，Germany
			Summetrel	抗病毒	Endo Pharmaceuticals Holdings Inc.，Chadds Ford，PA
Roferon A	IFN-α2A	F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel，Switzerland
			Pegasys	经PEG化的IFN-α2A	F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel，Switzerland

商标名称	抑制剂类型或靶标类型	来源公司
			Pegasys and Ribavirin	经PEG化的IFN-α2A/利巴韦林	F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel，Switzerland
CellCept	HCV IgG免疫抑制剂	F.Hoffmann-La Roche LTD，Basel，Switzerland
			Wellferon	淋巴细胞样IFN-αN1	GlaxoSmithKline plc，Uxbridge，UK
Albuferon-α	白蛋白IFN-α2B	Human Genome Sciences Inc.，Rockville，MD
			Levovirin	利巴韦林	ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，CA
IDN-6556	半胱天冬酶(caspase)抑制剂	Idun Pharmaceuticals Inc.，San Diego，CA
			IP-501	抗纤维变性	Indevus Pharmaceuticals Inc.，Lexington，MA
Actimmune	INF-γ	InterMune Inc.，Brisbane，CA
			Infergen A	IFN α-1	InterMune Pharmaceuticals Inc.，Brisbane，CA
ISIS 14803	反义物	ISIS Pharmaceuticals Inc，Carlsbad，CA/Elan Phamaceuticals Inc.，NewYork，NY
			JTK-003	RdRp抑制剂	Japan Tobacco Inc.，Tokyo，Japan
Pegasys and Ceplene	经PEG化的IFN-α2A/免疫调节剂	Maxim Pharmaceuticals Inc.，SanDiego，CA
			Ceplene	免疫调节剂	Maxim Pharmaceuticals Inc.，SanDiego，CA
Civacir	HCV IgG免疫抑制剂	Nabi Biopharmaceuticals Inc.，BocaRaton，FL
			Intron A and Zadaxin	IFN-α2B/α1-胸腺素	RegeneRx Biopharmiceuticals Inc.，Bethesda，MD/SciClonePharmaceuticals Inc，San Mateo，CA
Levovirin	IMPDH抑制剂	Ribapharm Inc.，Costa Mesa，CA
			Viramidine	利巴韦林前体药物	Ribapharm Inc.，Costa Mesa，CA
Heptazyme	核酶	Ribozyme Pharmaceuticals Inc.，Boulder，CO
			Intron A	IFN-α2B	Schering-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
PEG-Intron	经PEG化的IFN-α2B	Schering-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
			Rebetron	IFN-α2B/利巴韦林	Schering-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
Ribavirin	利巴韦林	Schering-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
			PEG-Intron/Ribavirin	经PEG化的IFN-α2B/利巴韦林	Schering-Plough Corporation，Kenilworth，NJ
Zadazim	免疫调节剂	SciClone Pharmaceuticals Inc.，SanMateo，CA
			Rebif	IFN-β1A	Serono，Geneva，Switzerland
IFN-β and EMZ701	IFN-β与EMZ701	Transition Therapeutics Inc.，Ontario，Canada
			Batabulin(T67)	β-微管蛋白抑制剂	Tularik Inc.，South San Francisco，CA
Merimepodib(VX-497)	IMPDH抑制剂	Vertex Pharmaceuticals Inc.，Cambridge，MA
			Telaprevir(VX-950，LY-570310)	NS3丝氨酸蛋白酶抑制剂	Vertex Pharmaceuticals Inc.，Cambridge，MA/Eli Lilly and Co.Inc.，Indianapolis，IN
Omniferon	天然IFN-α	Viragen Inc.，Plantation，FL

商标名称	抑制剂类型或靶标类型	来源公司
			XTL-6865(XTL-002)	单克隆抗体	XTL Biopharmaceuticals Ltd.，Rehovot，Isreal
HCV-796	NS5B复制酶抑制剂	Wyeth/Viropharma
			NM-283	NS5B复制酶抑制剂	Idenix/Novartis
GL-59728	NS5B复制酶抑制剂	Gene Labs/Novartis
			GL-60667	NS5B复制酶抑制剂	Gene Labs/Novartis
2’C MeA	NS5B复制酶抑制剂	Gilead
			PSI 6130	NS5B复制酶抑制剂	Roche
R1626	NS5B复制酶抑制剂	Roche
			SCH 503034	丝氨酸蛋白酶抑制剂	Schering Plough
NIM811	环菲林(cyclophilin)抑制剂	Novartis
			Suvus	亚甲基蓝	Bioenvision
Multiferon	长效IFN	Viragen/Valentis
			Actilon(CPG10101)	TLR9激动剂	Coley
Interferon-β	干扰素-β-1A	Serono
			Zadaxin	免疫调节剂	Sciclone
Pyrazolopyrimidinecompounds and saltsFrom WO-200504728826 May 2005	HCV抑制剂	Arrow Therapeutics Ltd.
			2’C Methyl adenosine	NS5B复制酶抑制剂	Merck
GS-9132(ACH-806)	HCV抑制剂	Achillion/Gilead

具体实施方式

除非另有说明，否则使用以下色谱柱与条件来获得关于下述中间体与实施例的分析性LCMS数据。停止时间：梯度液时间+1分钟；开始浓度：0％B，除非另有说明；洗脱剂A：含有10mM NH₄OAc的5％CH₃CN/95％H₂O(用于色谱柱A、D及E)或含有0.1％TFA的10％MeOH/90％H₂O(用于色谱柱B与C)；洗脱剂B：含有10mM NH₄OAc的95％CH₃CN/5％H₂O(用于色谱柱A、D及E)或含有0.1％TFA的90％MeOH/10％H₂O(用于色谱柱B与C)；色谱柱A：Phenomenex 10μ4.6×50毫米C18；色谱柱B：Phenomenex C18 10μ3.0×50毫米；色谱柱C：Phenomenex 4.6×50毫米C18 10μ；色谱柱D：Phenomenex Lina C185μ3.0×50毫米；色谱柱E：Phenomenex 5μ4.6×50毫米C18。

中间体1

2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯

在2℃将刚重结晶的三溴化吡锭(pyridinium tribromide)(自热AcOH(每1克5毫升)重结晶，以冷AcOH冲洗，并在高真空下以KOH干燥)分次添加(历经10分钟)至3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(60克，233毫摩尔)(使用WO2004/065367中所述程序来制成)在CHCl₃/THF(1:1，1.25升)中的正在搅拌溶液内。将反应溶液在0-5℃搅拌2.5小时，并以饱和NaHSO₃水溶液(1升)、1N HCl(1升)及盐水(1升)洗涤。使有机层干燥(MgSO₄)，并浓缩。将所得到的红色油以Et₂O稀释，及浓缩。使所得到的粉红色固体溶于Et₂O(200毫升)中，以己烷(300毫升)处理，且部份浓缩。通过过滤来收集固体，并以己烷冲洗。使母液浓缩至干，且重复此程序。将固体合并，得到2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(64克，190毫摩尔，82％)，为绒毛状粉红色固体，使用之而无需进一步纯化。¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.47(br s，1H)，8.03(d，J＝1.4Hz，1H)，7.74(dd，J＝1.4，8.8Hz，1H)，7.69(d，J＝8.8Hz，1H)，3.92(s，3H)，2.82(tt，J＝3.7，11.7Hz，1H)，1.98-1.72(m，7H)，1.50-1.27(m，3H)。¹³C NMR(75MHz，CDCl3)δ168.2，135.6，130.2，123.1，120.8，120.3，118.7，112.8，110.7，52.1，37.0，32.2(2)，27.0(2)，26.1。LCMS：m/e 334(M-H)^-，保留时间3.34分钟，色谱柱A，4分钟梯度。

中间体2

2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸

将2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(20克，60毫摩尔)与LiOH(3.8克，160毫摩尔)在MeOH/THF/H₂O(1:1:1，300毫升)中的溶液在90℃加热2小时。使反应混合物在冰/H₂O浴中冷却，以1M HCl(约160毫升)中和，以H₂O(250毫升)稀释，并在室温搅拌1小时。通过过滤来收集沉淀物，以H₂O冲洗，并干燥，得到2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸(定量)，使用之而无需进一步纯化。

可用于提供2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸的替代程序描述于下文：

将2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(117克，349毫摩尔)与LiOH·H₂O(26.4克，629毫摩尔)在MeOH/THF/H₂O(1:1:1，1.8升)中的溶液回流加热3小时。使反应混合物在冰/H₂O浴中冷却至约2℃，以1M HCl(约650毫升)(在使温度不超过5℃的速率下添加)中和，以H₂O(1升)稀释，并搅拌，同时温热至环境温度。通过过滤来收集沉淀物，以H₂O冲洗，并干燥，得到2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸的单THF溶剂化物(135.5克，345毫摩尔，99％)，为黄色固体，使用之而无需进一步纯化。¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ11.01(br s，1H)，8.77(s，1H)，8.07(d，J＝1.5Hz，1H)，7.82(dd，J＝1.5，8.8Hz，1H)，7.72(d，J＝8.8Hz，1H)，3.84-3.74(m，4H)，2.89(m，1H)，1.98-1.72(m，11H)，1.50-1.24(m，3H)。¹³C NMR(75 MHz，CDCl3)δ172.7，135.5，130.7，122.3，120.9(2)，118.8，113.3，111.1，67.9(2)，37.0，32.2(2)，27.0(2)，26.1，25.5(2)。LCMS：m/e 320(M-H)^-，保留时间2.21分钟，色谱柱A，4分钟梯度。

中间体3

2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1H-吲哚-6-羧酰胺

在22℃将1，1’-羰二咪唑(1.17克，7.2毫摩尔)添加至2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸(2.03克，6.3毫摩尔)在THF(6毫升)中的经搅拌溶液内。实时释出CO₂，且当其减缓时，将溶液在50℃加热1小时，然后冷却至22℃。添加N，N-二甲基磺酰胺(0.94克，7.56毫摩尔)，接着逐滴添加DBU(1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯)(1.34克，8.8毫摩尔)在THF(4毫升)中的溶液。持续搅拌24小时。使混合物在醋酸乙酯与稀HCl之间作分配处理。将醋酸乙酯层以水洗涤，接着以盐水洗涤，并以Na₂SO₄干燥。使萃取液浓缩至干，留下标题产物，为淡黄色易碎泡沫物(2.0克，74％，自NMR估计的纯度>90％)。¹HNMR(300MHz，DMSO-D6)δppm 1.28-1.49(m，3H)1.59-2.04(m，7H)2.74-2.82(m，1H)2.88(s，6H)7.57(dd，J＝8.42，1.46Hz，1H)7.74(d，J＝8.78Hz，1H)7.91(s，1H)11.71(s，1H)12.08(s，1H)。

关于制备2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1H-吲哚-6-羧酰胺的替代方法描述于下文中。

在N₂下在装有机械搅拌器、温度控制器、N₂入口管及冷凝器的1升四颈圆底烧瓶中添加2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸(102.0克，0.259摩尔)与无水THF(300毫升)。在搅拌10分钟后，分次添加CDI(1，1’-羰二咪唑)(50.3克，0.31摩尔)。然后，将反应混合物加热至50℃，保持2小时。在冷却至30℃后，一次性添加N，N-二甲基氨基磺酰胺(41.7克，0.336摩尔)，接着逐滴添加DBU(54.1毫升，0.362摩尔)，历经1小时。然后，将反应混合物在室温搅拌20小时。在真空中除去溶剂，并使残留物在EtOAc与1N HCl(1:1，2升)之间作分配处理。分离有机层，并以EtOAc(500毫升)萃取水层。将合并的有机层以盐水(1.5升)洗涤，并以MgSO₄干燥，过滤溶液，及在真空中浓缩，得到粗产物(111.0克)。在60℃使粗产物悬浮在EtOAc(400毫升)中。在此悬浮液中慢慢添加庚烷(2升)。将所得到的悬浮液搅拌，并冷却至0℃。然后将其过滤。将滤饼以少量庚烷冲洗，且在真空中风干2天。收集产物，为白色固体(92.0克，83％)。¹H NMR(MeOD，300MHz)δ7.89(s，H)，7.77(d，J＝8.4Hz，1H)，7.55(dd，J＝8.4与1.8Hz，1H)，3.01(s，6H)，2.73-2.95(m，1H)，1.81-2.05(m，8H)，1.39-1.50(m，2H)；m/z 429(M+H)+。

中间体4

3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-羧酰胺

将2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1H-吲哚-6-羧酰胺(4.28克，0.01摩尔)、4-甲氧基-2-甲酰基苯基硼酸(2.7克，0.015摩尔)、2-二环己基膦基-2’，6’-二甲氧基-联苯(41毫克，0.0001摩尔)、醋酸钯(11.2毫克)及经微细研磨的碳酸钾(4.24克，0.02摩尔)在甲苯(30毫升)中的混合物在回流及氮气下搅拌30分钟，此时LC/MS分析显示反应已完成。然后，将反应混合物以醋酸乙酯与水稀释，接着以过量稀HCl酸化。然后收集醋酸乙酯层，并以稀HCl、水及盐水洗涤。接着，使有机溶液干燥(硫酸镁)，过滤，及浓缩，得到胶状物。将胶状物以己烷(250毫升)与醋酸乙酯(25毫升)稀释，并将混合物在22℃搅拌20小时，在此段时间内，产物转化成鲜明黄色粒状固体(4.8克)，将其直接使用而无需进一步纯化。

关于制备3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-羧酰胺的替代程序提供于下文中。

在2-溴-3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-吲哚-6-羧酰胺(54.0克，126毫摩尔)、4-甲氧基-2-甲酰基苯基硼酸(29.5克，164毫摩尔)及LiCl(13.3克，315毫摩尔)在EtOH/甲苯(1:1，1升)中的浆化溶液内添加Na₂CO₃(40.1克，379毫摩尔)在水(380毫升)中的溶液。将反应混合物搅拌10分钟，然后添加Pd(PPh₃)₄(11.3克，10.0毫摩尔)。将反应溶液以氮气冲洗，并在70℃(内部监测)加热过夜，然后冷却至室温。以EtOAc(1升)与EtOH(100毫升)稀释反应物，以1N HCl水溶液(1升)与盐水(500毫升)小心地洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，及浓缩。将残留固体与Et₂O(600毫升)一起搅拌1小时，且通过过滤来收集，得到3-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-羧酰胺(52.8克，109毫摩尔，87％)，为黄色粉末，使用之而无需进一步纯化。¹H NMR(300MHz，d6-DMSO)δ11.66(s，1H)，8.17(s，1H)，7.75(d，J＝8.4Hz，1H)，7.74(d，J＝8.4Hz，1H)，7.59(dd，J＝1.4，8.4Hz，1H)，7.23-7.16(m，2H)，7.08(dd，J＝2.6，8.4Hz，1H)，6.54(d，J＝8.8Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.22-3.08(m，1H)，2.91(s，6H)，2.00-1.74(m，7H)，1.60-1.38(m，3H)。¹³C NMR(75MHz，CDCl3)δ165.7，158.8，147.2，139.1，134.3，132.0，123.4，122.0，119.2，118.2，114.8，112.3，110.4，109.8，79.6，45.9，37.2(2)，34.7，32.0(2)，25.9(2)，24.9。LCMS：m/e 482(M-H)^-，保留时间2.56分钟，色谱柱A，4分钟梯度。

中间体5

11-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-6-乙氧基-8-甲氧基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-羧酰胺

在装有温度控制器、冷凝器、N₂入口管及机械搅拌器的5升四颈圆底烧瓶中添加甲苯(900毫升)、EtOH(900毫升)、2-溴-3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-1H-吲哚-6-羧酰胺(90克，0.21摩尔)、2-甲酰基-4-甲氧基苯基硼酸(49.2克，0.273摩尔)及LiCl(22.1克，0.525摩尔)。使所得到的溶液以N2起泡15分钟。添加Na₂CO₃(66.8克，0.63摩尔)在H₂O(675毫升)中的溶液，并使反应混合物以N₂再起泡10分钟。添加Pd(PPh₃)₄(7.0克，6.3毫摩尔)，并将反应混合物加热至70℃，保持20小时。在冷却至35℃后，慢慢添加1N HCl的溶液(1.5升)。将所得到的混合物转移至6升分液漏斗中，并以EtOAc(2×1.5升)萃取。将合并的有机萃取液以盐水(2升)洗涤，以MgSO₄干燥，过滤，及在真空中浓缩，得到黄色固体，将其与己烷中的20％EtOAc(450毫升，50℃至0℃)一起研制，得到11-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-6-乙氧基-8-甲氧基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-羧酰胺(65.9克)，为黄色固体。HPLC纯度为98％。

使得自研制的母液在真空中浓缩。使残留物与EtOH(50毫升)一起回流3小时。然后，使溶液冷却至0℃。过滤沉淀物，并以经冷却的TBME(叔丁基甲醚)(5℃)(20毫升)洗涤。使滤饼在真空中风干，得到另外量的标题化合物，为白色固体(16.0克)。HPLC纯度为99％。¹H NMR(CDCl3，300MHz)δ8.75(s，1H)，7.96(s，1H)，7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.67(d，J＝8.4Hz，1H)，7.45(dd，J＝8.4与1.4Hz，1H)，7.09(d，J＝2.2Hz，1H)，6.98(dd，J＝8.4与2.2Hz，1H)，6.50(s，1H)，3.86(s，3H)，3.05(s，6H)，2.92-3.13(m，3H)，1.85-1.93(m，7H)，1.40-1.42(m，3H)，1.05(t，J＝7.1Hz，3H)。m/z 512(M+H)+。

中间体6

使11-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-6-乙氧基-8-甲氧基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-羧酰胺溶于THF(75毫升)中。在此溶液中添加2N HCl的溶液(300毫升)。将混合物在室温及N₂下剧烈搅拌16小时。过滤所得到的悬浮液，并以经冷却的TBME(2×30毫升)洗涤。使滤饼真空风干过夜，得到标题化合物，为黄色固体。HPLC纯度为99％。¹H NMR(DMSO-d6，300MHz)δ11.65(s，1H)，8.16(s，1H)，7.76(d，J＝5.9Hz，1H)，7.73(d，J＝5.9Hz，1H)，7.58(dd，J＝8.5与1.5Hz，1H)，7.17-7.20(m，2H)，7.08(dd，J＝8.5与1.4Hz，1H)，6.55(d，J＝8.6Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.14-3.18(m，1H)，2.91(s，6H)，1.75-1.99(m，7H)，1.48-1.60(m，3H)；m/z 484(M+H)+。

中间体7

13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-6-羧酸甲酯

将3-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-羧酰胺(4.8克，0.01摩尔)、2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(9.7克，0.02摩尔)及碳酸铯(7.1克，0.02摩尔)在DMF(28毫升)中的混合物在55℃的油浴温度搅拌20小时。将混合物倒入冰水中，并以稀HCl酸化，沉淀粗产物。收集固体，干燥，并在SiO₂(110克)上进行快速色谱，使用含有2％醋酸的醋酸乙酯与二氯甲烷(1:10)溶液。合并均质的洗脱馏分，并蒸发，得到标题化合物，为淡黄色固体(3.9克，71％产率)。MS：552(M＝H+)。

关于制备13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-6-羧酸甲酯的替代程序提供于下文中。

将11-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-6-羟基-8-甲氧基-6H-异吲哚并[2，1-a]吲哚-3-羧酰胺(环状半缩醛胺)(63.0克，130毫摩尔)、2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(60克，261毫摩尔)和碳酸铯(106克，326毫摩尔)在DMF(400毫升)中的溶液在60℃(浴温)下加热4.5小时。添加另外的2-(二甲氧基磷酰基)丙烯酸甲酯(15克，65毫摩尔)与碳酸铯(21.2克，65毫摩尔)，并将反应物在60℃加热过夜，然后冷却至室温。将搅拌中的反应混合物以H₂O(1升)稀释，以1N HCl水溶液(800毫升)慢慢地中和，搅拌3小时，接着通过过滤来收集沉淀物。将固体与Et₂O(800毫升)一起研制，并干燥，得到13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

Figure 2007800177584100002G2007800177584D0034154101QIETU

-6-羧酸甲酯(70.2克，127毫摩尔，98％)，为黄色固体，使用之而无需进一步纯化。¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.67(s，1H)，8.09(s，1H)，7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，7.42(d，J＝8.8Hz，1H)，7.08(dd，J＝2.6，8.8Hz，1H)，6.98(d，J＝2.6Hz，1H)，5.75-5.51(m，1H)，4.29-4.01(m，1H)，3.89(s，3H)，3.82(s，3H)，3.05(s，6H)，2.87-2.73(m，1H)，2.11-1.12(m，10H)。LCMS：m/e550(M-H)-，保留时间3.21分钟，色谱柱A，4分钟梯度。

中间体8

(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯

在圆底烧瓶中将DMSO(5毫升)添加至碘化三甲基氧化锍(199毫克，0.906毫摩尔)与NaH(38毫克，在60％油分散液中，0.953毫摩尔)的混合物内。将反应混合物在室温搅拌0.5小时。然后添加13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-(甲氧基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-6-羧酸甲酯(125毫克，0.227毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌3小时，且接着在50℃再搅拌3小时。以水使反应淬灭，并以1N HCl溶液酸化。然后，粗产物以淡黄色固体的形式沉淀，其通过过滤来收集，及风干(106毫克，83％产率)。接着，使6毫克此物质通过制备性HPLC来纯化，得到标题化合物，为淡黄色固体(1.8毫克)。MS m/z 566(MH⁺)，保留时间为3.850分钟。¹HNMR(500MHz，MeOD)δppm 0.28(m，0.36H)1.19-2.20(m，11.64H)2.70-3.02(m，2H)3.03(s，2.16H)3.05(s，3.84H)3.49(d，J＝15.26Hz，0.64H)3.54(s，1.92H)3.83(s，1.08H)3.91(s，3H)4.08(d，J＝15.26Hz，0.36H)5.29(d，J＝15.26Hz，0.36H)5.50(d，J＝14.95Hz，0.64H)6.98-7.06(m，1H)7.16(d，J＝2.44Hz，0.36H)7.23(d，J＝2.44Hz，0.64H)7.30(d，J＝8.55Hz，0.64H)7.34(d，J＝8.55Hz，0.36H)7.56(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.64H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.36H)7.88(d，J＝8.55Hz，0.64H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.36H)8.12(s，0.36H)8.33(d，J＝1.53Hz，0.64H)。

关于制备标题化合物的替代程序提供于下文中。

在N₂下在装有机械搅拌器、N₂入口管及温度计的经火焰干燥过的四颈1升圆底烧瓶中添加氢化钠(95％)(3.09克，129.2毫摩尔)与无水DMF(200毫升)。伴随着剧烈搅拌，分次添加碘化三甲基氧化锍(32.5克，147.3毫摩尔)，在此段时间内，温度上升至30℃。在搅拌30分钟后，迅速添加13-环己基-10-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-(甲氧基)-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-6-羧酸甲酯(33.8克，61.3毫摩尔)在无水DMF(70毫升)中的溶液。将反应混合物在30℃以下搅拌30分钟，然后分次倒入1N HCl(130毫升)在H2O(2升)中的冰冷溶液内。在将所得到的悬浮液以机械方式搅拌1小时后，过滤沉淀物，并以H₂O(100毫升)洗涤滤饼。使滤饼在EtOAc与0.5N HCl(1:1，4升)之间作分配处理。分离有机相，以H₂O(1升)与盐水(1升)洗涤，以MgSO₄干燥，过滤，及在真空中浓缩。使残留物溶于EtOAc(150毫升)中，并使溶液经过硅胶垫(300克，在己烷中)过滤，且以己烷中的50％EtOAc(5升)冲洗。使滤液在真空中浓缩，得到微黄色固体，将其与50℃至0℃的TBME中的10％EtOAc(220毫升)一起研制，得到(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯，为白色固体(26.1克，75％产率)。HPLC纯度为100％。¹H NMR(DMSO-d₆，300MHz)δ11.61(s，1H)，8.47(s，0.5H)，8.25(s，0.5H)，7.81-7.88(m，1H)，7.57-7.63(m，1H)，7.23-7.29(m，2H)，7.01-7.07(m，1H)，5.43(d，J＝15.0Hz，0.5H)，5.22(d，J＝15Hz，0.5H)，4.04(dd，J＝15.4与6.6Hz，0.5H)，3.83(s，3H)，3.75(s，1H)，3.08-3.47(m，0.5H)，3.29(s，3H)，2.73-2.92(m，8H)，1.11-1.99(m，10.5H)，0.20(m，0.5H)；m/z 566(M+H)+。

中间体9

(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯

使(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯的样品以50毫克/毫升的浓度溶于EtOH/CH₃CN1/1+0.5％DEA中(DEA的添加确保所述化合物在注入过程期间仍然留在溶液中)。然后在下文所示的条件下将此溶液注射至Thar SFC-350制备性SFC上。

在Thar SFC-350上的制备条件：色谱柱为Chiralcel OJ-H 5×25厘米；流动相为在CO₂中的25％MeOH/CH3CN(1/1)；压力(巴)为100；流速(毫升/分钟)为240；溶液浓度(毫克/毫升)为50；注射量(毫升)为4.5-5；循环时间(分钟/注射)为6.5-7；温度(℃)为45；通过量(克/小时)为约2；检测器波长(纳米)为254。

自371.4克外消旋起始原料得到总计177.3克所要第二洗脱的(-)异构体，含有约1摩尔当量二乙胺。此物质使用下述程序来纯化。将已溶于二氯甲烷(800毫升)中的混合物(24.7克)以0.5N HCl(1×400毫升，1×240毫升)、H₂O(2×240毫升)及盐水(2×240毫升)相继洗涤。然后，使有机层干燥(无水Na₂SO₄)，过滤，并蒸发，得到22.33克(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯，，为黄色固体(92％回收)。HPLC¹>99％(保留时间2.38分钟)；LC/MS(ES⁺)566.51(M+H，100)；[α]_D ^25C-194.64°(c 1.03，MeOH)。对C₃₀H₃₅N₃O₆S·0.33H₂O的分析计算值：C，63.04、H，6.29、N，7.35、S，5.61、H₂O，1.04；实测值：C，63.07、H，6.01、N，7.24、S，5.58、H₂O，1.03。NMR显示不存在Et₂NH。此物质的EE使用下述分析性HPLC程序来测定(>99％)。

在Thar分析性SFC上测定EE的分析条件：分析性色谱柱为ChiralcelOJ(0.46×25厘米，10微升)；BPR压力为100巴；温度为35℃；流速为3.0毫升/分钟；流动相为在CO₂中的15％MeOH/CH₃CN(1/1)；检测器波长为254纳米；保留时间(分钟)为4和6.5。

中间体10

-1a(2H)-羧酸

在(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯(22.33克，39.5毫摩尔)在MeOH(300毫升)中的溶液内慢慢添加1N NaOH(120毫升)，历经20分钟，同时保持反应温度<30℃。将混合物在室温及N₂下搅拌18小时。HPLC显示反应已完成。在反应溶液中添加1N HCl(130毫升)。在添加完成后，反应混合物的pH值为约2。蒸发反应混合物中的甲醇。将水(300毫升)添加至混合物中，然后将其以CH₂Cl₂(1×600毫升，1×200毫升)萃取。以H₂O(2×300毫升)及盐水(2×300毫升)洗涤合并的萃取液，干燥(Na₂SO₄)，并蒸发，得到20.82克(96％产率)标题化合物，为黄色固体。HPLC条件：色谱柱为PhenomenoexSynergi Polar-RP 4微米4.6×50毫米；UV为220纳米；梯度时间为4分钟；流速为4毫升/分钟，75-100％B；溶剂A为含有0.2％H₃PO₄的10％MeOH/90％H₂O，溶剂B为含有0.2％H₃PO₄的90％MeOH/10％H₂O。HPLC>99％(保留时间1.80分钟)。LC/MS(ES⁺)552.25(M+H，100)；[α]_D ^25C-166.99°(c 1.00，MeOH)。GC分析：CH₂Cl₂4.94％；对C₂₉H₃₃N₃O₆S·0.16H₂O·0.35CH₂Cl₂的分析计算值：C，60.37、H，5.87、N，7.20、S，5.49、H₂O，0.49、CH₂Cl₂，5.02；实测值：C，59.95、H，5.89、N，7.03、S，5.38、H₂O，0.47、CH₂Cl₂，4.94。

中间体11

-1a(2H)-羧酸

在(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯(100毫克，0.177毫摩尔)在THF/甲醇混合物(2.0毫升/2.0毫升)中的溶液内添加2N NaOH溶液(1.0毫升)。在微波条件下将反应混合物在90℃加热5分钟。然后使其浓缩，以1N HCl溶液酸化，并以醋酸乙酯(2×20毫升)萃取。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，及浓缩。使残留物通过制备性HPLC来纯化，得到所要产物，为淡黄色固体(59毫克，60％产率)。MS m/z552(MH⁺)，保留时间为3.850分钟。¹H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.25(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.69-2.98(m，2H)3.02(s，2.28H)3.02(s，3.72H)3.41(d，J＝15.00Hz，0.62H)3.88(s，3H)4.01(d，J＝15.00Hz，0.38H)5.26(d，J＝15.00Hz，0.38H)5.45(d，J＝14.64Hz，0.62H)6.94-7.02(m，1H)7.13(d，J＝2.56Hz，0.38H)7.21(d，J＝2.20Hz，0.62H)7.26(d，J＝8.42Hz，0.62H)7.30(d，J＝8.78Hz，0.38H)7.53(dd，J＝8.42，1.46Hz，0.62H)7.61(dd，J＝8.60，1.65Hz，0.38H)7.85(d，J＝8.42Hz，0.62H)7.89(d，J＝8.42Hz，0.38H)8.10(s，0.38H)8.28(d，J＝1.46Hz，0.62H)。

中间体12

(1aR)-[部分]-8-环己基-N⁵-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N^1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酰胺

将TBTU(437毫克，1.36毫摩尔)与DIPEA(二异丙基乙胺)(0.95毫升，5.436毫摩尔)添加至(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸(500毫克，0.906毫摩尔)在DMSO(20.0毫升)中的溶液内。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后添加(2S，3R)-3-氨基-1，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-醇(280毫克，1.36毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。以水使反应混合物淬灭，并以1N HCl溶液酸化。分离褐色固体，其通过过滤来收集。接着，此物质在下述条件下通过制备性HPLC来分离：色谱柱为Waters Sunfire19毫米×100毫米；溶剂A为10％CH₃CN-90％H₂O-0.1％TFA；溶剂B为90％CH₃CN-10％H₂O-0.1％TFA；程序为以65％溶剂B开始，最初维持时间为5分钟，然后在30分钟内逐渐增加至90％溶剂B，流速为25毫升/分钟。加载量为50-60毫克/操作。

在上述HPLC条件下洗脱(1aR)-[部分]-8-环己基-N⁵-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N^1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酰胺，接着洗脱(1aS)-[部分]-8-环己基-N⁵-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N^1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酰胺。所得产物为淡黄色固体(230毫克，36％产率)。MS m/703(MH⁺)，保留时间为3.936分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.14-0.24(m，2.64H)0.51(s，2.46H)0.72-2.21(m，20.9H)2.49(m，0.18H)2.62(m，0.82H)2.85(m，0.18H)2.96(m，0.82H)3.03(s，6H)3.39(m，0.82H)3.49-3.58(m，1.64H)3.71-3.80(m，0.36H)3.90(s，3H)4.17(d，J＝14.65Hz，0.18H)5.06(d，J＝14.65Hz，0.18H)5.37(d，J＝14.95Hz，0.82H)6.73(d，J＝5.49Hz，0.82H)6.98-7.05(m，1H)7.08(d，J＝4.58Hz，0.18H)7.10(d，J＝2.44Hz，0.18H)7.21(d，J＝2.44Hz，0.82H)7.31(d，J＝8.55Hz，0.82H)7.34(d，J＝8.55Hz，0.18H)7.59-7.64(m，1H)7.87-7.93(m，1H)7.99(s，0.18H)8.09(d，J＝1.22Hz，0.82H)。

中间体13

(1aS)-[部分]-8-环己基-N⁵-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N^1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酰胺

将TBTU(437毫克，1.36毫摩尔)与DIPEA(0.95毫升，5.436毫摩尔)添加至(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸(500毫克，0.906毫摩尔)在DMSO(20.0毫升)中的溶液内。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后添加(2S，3R)-3-氨基-1，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-醇(280毫克，1.36毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。以水使反应混合物淬灭，接着以1N HCl溶液酸化。分离带有褐色的固体，其通过过滤来收集。接着，将此物质在下述条件下通过制备性HPLC来分离：色谱柱为Waters Sunfire 19毫米×100毫米；溶剂A为10％CH₃CN-90％H₂O-0.1％TFA；溶剂B为90％CH₃CN-10％H₂O-0.1％TFA；程序为以65％溶剂B开始，最初维持时间为5分钟，接着在30分钟内逐渐增加至90％溶剂B，流速为25毫升/分钟；加载量为50-60毫克/操作。

在上述HPLC条件下，在(1aR)-[部分]-8-环己基-N⁵-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N^1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酰胺后洗脱(1aS)-[部分]-8-环己基-N⁵-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N^1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酰胺。所得产物为淡黄色固体(215毫克，34％产率)。MS m/703(MH⁺)，保留时间为4.038分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.20(m，0.38H)0.75(s，1.86H)0.76(s，1.86H)0.84(s，1.86H)0.85(s，1.14H)0.89-2.18(m，18.9H)2.52(m，0.38H)2.70(m，0.62H)2.85(m，0.38H)2.97(m，0.62H)3.03(s，2.28H)3.04(s，3.72H)3.33-3.39(m，0.62H)3.43-3.51(m，1.24H)3.73-3.77(m，0.38H)3.78-3.84(m，0.38H)3.90(s，1.86H)3.90(s，1.14H)4.14(d，J＝14.65Hz，0.38H)5.11(d，J＝14.65Hz，0.38H)5.44(d，J＝15.26Hz，0.62H)6.68(d，J＝4.88Hz，0.62H)6.96-7.03(m，1H)7.07(d，J＝5.19Hz，0.38H)7.12(d，J＝2.44Hz，0.38H)7.23(d，J＝2.14Hz，0.62H)7.27(d，J＝8.54Hz，0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz，0.38H)7.55(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.62(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.38H)7.87(d，J＝8.54Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.08(d，J＝1.22Hz，0.38H)8.10(d，J＝1.22Hz，0.62H)。

中间体14

(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-羧酸

将10N NaOH(2.0毫升，20毫摩尔)溶液与4毫升水添加至(1aR)-[部分]-8-环己基-N⁵-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N^1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酰胺(160毫克，0.228毫摩尔)在THF/MeOH(7毫升/7毫升)中的溶液内。在微波条件下将反应混合物在120℃加热1小时。然后使其浓缩，以浓HCl溶液酸化，并以醋酸乙酯(2×30毫升)萃取两次。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，及在真空中浓缩成橘色油。接着，使粗产物通过制备性HPLC色谱柱来纯化，得到产物，为淡黄色固体(80毫克，64％产率)。平均旋光率(average specific rotation)-130.85°(溶剂MeOH；波长589纳米；50厘米样品池)。MS m/552(MH⁺)，保留时间为3.760分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm0.27(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.76(m，0.38H)2.80-2.92(m，1H)2.92-3.09(m，6.62H)3.45(d，J＝14.95Hz，0.62H)3.90(s，1.86H)3.91(s，1.14H)4.04(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.28(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.47(d，J＝15.26Hz，0.62H)6.95-7.05(m，1H)7.15(d，J＝2.75Hz，0.38H)7.23(d，J＝1.83Hz，0.62H)7.28(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz，0.38H)7.54(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.38H)7.86(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.11(d，J＝1.22Hz，0.62H)8.29(d，J＝1.22Hz，0.38H)。

中间体15

(+)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸

将10N NaOH(1.8毫升，18毫摩尔)溶液与4毫升水添加至(1aS)-[部分]-8-环己基-N⁵-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，12b-二氢-N^1a-[(2R，3S)-3-羟基-4，7，7-三甲基二环并[2.2.1]庚-2-基]-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酰胺(130毫克，0.185毫摩尔)在THF/MeOH(7毫升/7毫升)中的溶液内。在微波条件下将反应混合物在120℃加热1小时。使其浓缩，以浓HCl溶液酸化，并以醋酸乙酯(2×30毫升)萃取两次。合并有机层，干燥(MgSO₄)，过滤，及在真空中浓缩，得到橘色油。然后，使粗产物通过制备性HPLC色谱柱来纯化，得到产物，为淡黄色固体(68毫克，67％产率)。平均旋光率+174.73°(溶剂MeOH；波长589纳米；50厘米样品池)。MSm/552(MH⁺)，保留时间为3.773分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.27(m，0.38H)1.14-2.22(m，11.62H)2.76(m，0.38H)2.80-2.92(m，1H)2.92-3.09(m，6.62H)3.45(d，J＝14.95Hz，0.62H)3.90(s，1.86H)3.91(s，1.14H)4.04(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.28(d，J＝15.26Hz，0.38H)5.47(d，J＝15.26Hz，0.62H)6.95-7.05(m，1H)7.15(d，J＝2.75Hz，0.38H)7.23(d，J＝1.83Hz，0.62H)7.28(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.33(d，J＝8.54Hz，0.38H)7.54(dd，J＝8.39，1.68Hz，0.62H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.38H)7.86(d，J＝8.55Hz，0.62H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.38H)8.11(d，J＝1.22Hz，0.62H)8.29(d，J＝1.22Hz，0.38H)。

中间体16

2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸1，1-二甲基乙酯

在2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸(80克，0.24摩尔)在无水二氯甲烷(1.2升)与THF(100毫升)中的经机械方式搅拌的溶液内添加活化的分子筛(4A，80克)与碳酸银(275克，0.99摩尔)。使反应混合物冷却至0℃，并逐滴添加叔丁基溴(142克，1.04摩尔)。将混合物在室温搅拌过夜，并通过TLC(己烷-醋酸乙酯80:20，R_f(产物)＝0.7)来监测。若有任何溴酸未经转化，则进一步添加10％碳酸银，并再持续搅拌2-4小时。在完成时，使反应混合物经过硅藻土薄床过滤。将滤液以二氯甲烷(500毫升)洗涤。在真空中浓缩合并的滤液，并使如此得到的粗产物通过硅胶色谱来纯化(230-400目，以醋酸乙酯在石油醚中的0-2％梯度洗脱)。合并均质的洗脱馏分，及在减压下蒸发，得到80克(85％)标题化合物。HPLC：90.1％(RT＝6.56分钟)，色谱柱为C18 BDS(50×4.6毫米)，流动相为0.1％TFA(三氟乙酸)在水:ACN(乙腈)(30→100→30)中的梯度，流速为0.8毫升/分钟。LCMS：99.8％(RT＝4.44分钟)，色谱柱为Geneis C1850×4.6毫米，流动相为0.1％甲酸在水：ACN(70→95→70)中的梯度，流速为0.8毫升/分钟；M-1＝376.5；¹H NMR(CDCl₃)(400MHz)δ1.37-1.40(m，3H，环己基)，1.62(s，9H，叔丁基)，1.80-1.94(两组多重峰，分别为3H和4H，环己基部分)，2.81(m，1H，环己基-苄基的CH)，7.70-7.75(m，2H，吲哚-H_4和5)，8.04(s，1H，吲哚-H₇)，8.52(s，1H，吲哚-NH)。

中间体17

3-环己基-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-羧酸1，1-二甲基乙酯

使2-溴-3-环己基-1H-吲哚-6-羧酸叔丁酯(72克，0.19摩尔)溶于甲苯与乙醇的1:1混合物(720毫升)中，并脱气。然后添加LiCl(23.9克，0.51摩尔)，接着添加碳酸钠(720毫升，1.0M溶液，另外经脱气)与Pd-肆(Pd-tetrakis)(13.1克，0.011摩尔)。在搅拌0.25小时后，添加2-甲酰基-4-甲氧基苯基硼酸(41.1克，0.22摩尔)，并将反应混合物加热至85℃，保持4小时。然后，反应通过TLC(己烷-醋酸乙酯80:20，R_f(产物)＝0.55)来监测。在完成时，使反应混合物冷却至室温，并添加水(1.0升)，接着添加醋酸乙酯(1.0升)。将有机层以盐水洗涤，并干燥，及在真空下浓缩，得到标题化合物，为黄色固体。产量75克(74％)。HPLC：99.7％(RT＝6.30分钟)，色谱柱为C18 BDS(4.6×50毫米)，SC-307，流动相为0.1％TFA在水:ACN(30→100→30)中的梯度，流速0.8毫升/分钟。LCMS：98.0％(RT＝5.28分钟)，色谱柱为Geneis C18(50×4.6毫米)，流动相为0.1％甲酸在水:ACN(70→95→70)中的梯度，流速为0.8毫升/分钟；M-1＝432.2；¹H NMR(DMSO-d₆)(400MHz)δ1.40-1.48(m，3H，环己基)，1.57(s，9H，叔丁基)，1.84-1.90(m，7H，环己基部分)，3.09(m，1H，环己基-苄基的CH)，3.84(s，3H，OCH₃)，6.55(d，J＝4Hz，1H，芳基H_2’)，7.06(d，1H，芳基H_3’)，7.08(s，1H，芳基H_6’)，7.23(d，1H，吲哚-H₅)，7.53(d，J＝8Hz，1H，吲哚-H₄)，7.70-7.75(m，2H，NH+吲哚-H₇)，8.06(s，1H，CHO)。

中间体18

13-环己基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-6，10-二羧酸10-(1，1-二甲基乙酯)6-甲酯

使3-环己基-2-(2-甲酰基-4-甲氧基苯基)-1H-吲哚-6-羧酸叔丁酯(62.5克，0.144摩尔)溶于无水DMF(1.2升)中，并以机械方式搅拌。然后添加碳酸铯(84克，0.17摩尔)与2-(二甲氧基膦酰基)丙烯酸甲酯(65-70％GC纯，56.2克，0.18摩尔)，并将反应混合物加热至65℃，保持4小时，且反应通过TLC(己烷-醋酸乙酯80:20，R_f(产物)＝0.7)来监测。在完成时，使混合物冷却至室温，然后以水(1.0升)使反应淬灭。黄色固体沉淀，其通过过滤来收集，并风干。然后，将此物质在甲醇中配成浆液，过滤，及在真空下干燥，得到产物，为黄色粉末(70克，90％)。HPLC：99.1％(RT＝6.45分钟)，色谱柱为C18BDS(4.6×50毫米)，流动相为0.1％TFA在水:ACN(30→100→30)中的梯度，流速0.8毫升/分钟。LCMS：100％(RT＝7.00分钟)，色谱柱为Geneis C18(50×4.6毫米)，流动相为0.1％甲酸在水:ACN(70→95→70)中的梯度，流速为0.8毫升/分钟；M+1＝502.2。¹H NMR(CDCl₃)(400MHz)δ1.10-1.30(m，3H，环己基)，1.64(s，9H，叔丁基)，1.77-2.07(m，7H，环己基部分)，2.80(m，1H，环己基-苄基的CH)，3.84(s，3H，OCH₃)，3.93(s，3H，COOCH₃)，4.15和5.65(两个宽峰，各1H，烯丙基CH₂)，6.95(s，1H，芳基H_6’)，7.01(d，1H，芳基H_2’)，7.53(d，J＝8Hz，1H，芳基H_3’)，7.70(d，J＝4Hz，1H，吲哚-H₅)，7.84(s+d，2H，烯烃H+吲哚-H₄)，8.24(s，1H，吲哚-H₇)；¹³C NMR(CDCl₃)(100.0MHz)δ166.92，165.71，158.96，142.28，136.47，13.50，134.61，132.43，132.01，129.73，124.78，124.68，120.33，119.39，119.04，115.62，115.05，111.27，80.27，55.49，52.50，39.09，36.81，33.40，28.38，27.15，26.28.

中间体19

2-(二甲氧基膦酰基)-2-丙烯酸甲酯

在装有机械搅拌器、冷凝器、温度控制器及N₂入口管的5升四颈圆底烧瓶中添加多聚甲醛(paraformaldehyde)(40.5克，1.35摩尔)、MeOH(2升)及哌啶(2毫升)。将反应混合物在N₂下加热至回流，保持3小时。在冷却至50℃后，一次性添加醋酸2-(二甲氧基膦酰基)酯(150克，0.824摩尔)。使反应混合物持续回流18小时。在冷却至室温后，在真空中浓缩反应溶液，得到透明无色油。在装有温度控制器、N₂入口管、磁搅拌器及迪安-斯达克分水器(Dean-Stark apparatus)的3升四颈圆底烧瓶中，使以上油溶于无水甲苯(1升)中。在此溶液中添加TsOH·H₂O(5.2克)。然后，使反应混合物以共沸方式回流18小时，除去甲醇。在冷却至室温后，使溶液在真空中浓缩，得到黄色油，使其在150-155℃/0.2毫米汞柱下真空蒸馏，得到产物，为无色油(135.0克)。纯度90％，基于¹H NMR。¹H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.0(dd，J＝42.4与1.5Hz，1H)，6.73(dd，J＝20.5与1.8Hz，1H)，3.80(s，6H)，3.76(s，3H)。

中间体20

(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酸5-(1，1-二甲基乙酯)1a-甲基酯

在氮气下将氢化钠(96毫克，4毫摩尔)添加至氯化三甲基氧化锍(567毫克，4.4毫摩尔)在无水DMSO(10毫升)中的经搅拌悬浮液内。将所得到的混合物在室温搅拌30-45分钟，然后以小份分次添加纯净的13-环己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-6，10-二羧酸10-(1，1-二甲基乙酯)6-甲酯(1.0克，2毫摩尔)。将此悬浮液以DMSO(5毫升)稀释，并在50℃加热3-4小时。使反应混合物冷却至室温，并添加水。分离固体，其通过过滤来收集，并以水洗涤，接着风干过夜，得到1.15克粗产物。使此物质通过快速柱色谱来纯化(硅胶，在DCM中的3％MeOH)，得到纯标题化合物(0.96克)。LC/MS：保留时间3.816分钟；m/e 516(MH⁺)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：基于化合物的NMR光谱，发现产物以相互转化的旋转异构体(rotamer)的形式存在。

下述程序为达成解析外消旋(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酸5-(1，1-二甲基乙酯)1a-甲酯的方法实施例。使(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a，5(2H)-二羧酸5-(1，1-二甲基乙酯)1a-甲基酯的样品溶于异丙醇与乙腈的混合物(8:2)中，得到最终浓度为20毫克/毫升。将此混合物注射于制备性手性SFC色谱系统上，使用下述条件：Chiralcel OJ-H色谱柱，4.6×250毫米，5微米；流动相为在CO₂中的8％MeOH；温度为35℃；流速为2毫升/分钟，历经16分钟；UV监测在260纳米；注射5微升IPA:ACN(8:2)，约20.0毫克/毫升。

中间体21

-1a，5(2H)-二羧酸1a-甲基酯

将TFA(5毫升)添加至(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酸叔丁酯(515毫克，1毫摩尔)在无水DCM(二氯甲烷)(10毫升)中的溶液内。将所得到的溶液在室温搅拌大约8至12小时。然后，使反应物蒸发至干，得到标题化合物(0.47克，100％)。LC/MS：保留时间2.245分钟；m/e 460(MH⁺).¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：基于化合物NMR光谱，发现产物以相互转化旋转异构体的混合物存在。

中间体22

8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯

将8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酸(140毫克，0.31毫摩尔)与CDI(64毫克，0.40毫摩尔)在THF(3毫升)中的溶液在60℃搅拌1小时。添加N-甲基磺酰胺(68毫克，0.62毫摩尔)与DBU(71.6毫克，0.47毫摩尔)，并将混合物在60℃搅拌过夜。然后，将反应物倒入冷水中，以稀盐酸酸化，并在醋酸乙酯中萃取。将萃取液以稀盐酸(0.1N)与盐水相继洗涤，接着干燥(无水硫酸钠)，过滤，及蒸发，得到标题化合物，为褐色固体。ESI-MS m/e 552(MH⁺)。使用此物质而无需进一步纯化。

中间体23

8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-1a(2H)-羧酸

使8-环己基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯溶于THF和MeOH的混合物(2毫升，2毫升)中。然后添加2.5M NaOH(水溶液)(1.2毫升，3毫摩尔)，并使反应物在22℃振荡2小时。接着以1M HCl(水溶液)(3毫升)使溶液中和，及浓缩，以除去有机溶剂。将残留物以H₂O配成浆液，并通过过滤来收集固体，以H₂O洗涤，且干燥，得到标题化合物(160毫克，0.30毫摩尔)。ESI-MSm/e 538(MH⁺)。使用此物质而无需进一步纯化。

中间体24

(+/-)-8-环己基-5-[[[(苄基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-(甲氧基)-12-(甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯

将(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酸(200毫克，0.44毫摩尔)与CDI(92毫克，0.57毫摩尔)在THF(5毫升)中的溶液在60℃搅拌1小时。然后添加N-苄基磺酰胺(164毫克，0.88毫摩尔)与DBU(100毫克，0.66毫摩尔)，并将所得到的混合物在60℃搅拌过夜。接着，将反应物倒入冷水中，以稀盐酸酸化，并在醋酸乙酯中萃取。将有机相以盐酸(0.1N)及盐水洗涤，并干燥(硫酸钠)，及在真空中蒸发，得到标题化合物，为褐色固体。ESI-MS m/e 628(MH⁺)。

中间体25

(+/-)-8-环己基-1，12b-二氢-11-甲氧基-5-[[[[(苯基甲基)氨基]磺酰基]氨基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸

标题化合物使用类似于关于8-环己基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸所述程序，自(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(甲氧羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酸开始而制成。ESI-MS m/e613(MH+)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 1.22-2.20(m，13H)3.27-3.31(m，1H)3.47(d，J＝14.95Hz，0.6H)3.92(d，J＝2.44Hz，3H)4.04(d，0.4H)4.31(d，J＝2.75Hz，2H)5.24(d，0.4H)5.48(d，0.6H)7.02(d，1H)7.17(d，J＝2.75Hz，1H)7.19-7.35(m，5H)7.39(t，J＝7.48Hz，2H)7.45-7.52(m，1H)7.80(d，J＝1.53Hz，0.4H)7.85(dd，J＝8.39，6.87Hz，1H)8.22(d，J＝1.53Hz，0.6H)。

中间体26

(+/-)-8-环己基-5-[[(环丙基磺酰基)氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸

-5-羧酸(1当量)与羰二咪唑(1.5当量)在无水THF中的混合物在50℃加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续添加1当量环丙磺酰胺与1，8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯(2当量)。将所得到的混合物在室温搅拌过夜。在酸性水溶液处理后，使经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化。接着，使用THF-MeOH中的1N NaOH来水解中间体酯，得到标题化合物。LC/MS：保留时间为2.030分钟；m/e 549(MH⁺)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：基于化合物的NMR光谱，发现产物以相互转化旋转异构体存在。

中间体27

3-甲基-8-(苯基甲基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷

在装有机械搅拌器、回流冷凝管及温度计的3颈5升圆底烧瓶中使顺式-1-苄基-2，5-二(氯甲基)吡咯烷盐酸盐(37.5克，0.13摩尔)(按已公告的PCT专利申请WO200232902中所述来制成)混悬在CH₃CN(900毫升)中。使经搅拌的悬浮液温热至50℃，添加NaHCO₃(97克，1.1摩尔)，并使此悬浮液温热至70℃。添加NaI(50克，0.33摩尔)，并在70℃搅拌5分钟，此时将添液漏斗附加在冷凝器顶上。在添液漏斗中添加850毫升CH₃CN中的48毫升40％MeNH₂水溶液(0.55摩尔)，并逐滴添加此溶液(添加的速率保持在10-15毫升/分钟之间)。在75分钟后添加完成，此时使反应物冷却至室温，滤出固体，并使溶剂浓缩成约800毫升。将反应物倒入EtOAc(800毫升)中，且以1N NaOH(2×100毫升)洗涤。以EtOAc(2×100毫升)再萃取水相，使合并的有机相以Na₂SO₄干燥，及浓缩。将所得到的残留物加载至硅胶(620克)上，并以CHCl₃中的2.8％MeOH/0.4％浓NH₄OH(总计6升)洗脱。从2升至4升收集纯洗脱馏分。浓缩得到8.76克(32％产率)标题化合物，为褐色油。¹H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 1.79-1.87(m，2H)1.92-1.99(m，2H)2.23(s，3H)2.27-2.37(m，2H)2.54-2.63(m，2H)3.10(s，2H)3.52(s，2H)7.20-7.26(m，1H)7.30(t，J＝7.30Hz，2H)7.36-7.42(m，2H)。LC方法：溶剂A＝10％MeOH/90％H₂O/0.1％TFA，溶剂B＝90％MeOH/10％H₂O/0.1％TFA，开始％B＝0％，最终％B＝100％，流速＝4毫升/分钟，梯度时间＝2分钟，操作时间＝3分钟，色谱柱为Phenomenex-Luna 10微米C1850毫米×3.0毫米，Rt＝0.23分钟；MS：(ES+)m/z(M+H)+＝217.3。自色谱柱得到另一份6.1克混合洗脱馏分(纯度>80％，基于¹H NMR积分)。

中间体28

3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷二盐酸盐

使N-甲基-N-苄基二环二胺(14.22克，65.7毫摩尔)溶于650毫升甲醇中，并添加17毫升12M盐酸水溶液。在氮气下将溶液置于2升帕尔瓶(Parr bottle)中，并将3.66克20％氢氧化钯/碳添加至反应物中。将混合物在60psi氢气下置于帕尔振荡器上，保持17小时。通过TLC分析，判断反应已完成(硅胶板以经溶于90个体积份数的氯仿中的10个体积份数的2M氨在甲醇中的溶液洗脱)。使反应物经过硅藻土填充柱过滤，然后将其相继以水与甲醇冲洗。在真空中浓缩合并的滤液，并添加甲醇与苯，直到得到均匀溶液为止。然后添加75毫升乙醚中的2.0M盐酸。使挥发性物质在真空中自产物溶液除去，使用甲醇/苯混合物来使水自产物溶液重复共沸，由此最终得到淡黄色固体。使固体产物3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷在真空中干燥过夜，得到11.98克(91％)吸湿性固体。将产物自烧瓶取出，并在氮气下在手套袋中装瓶，此由于其吸湿性质。¹H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 1.96-2.14(m，2H)2.34(d，J＝8.24Hz，2H)2.66(s，3H)3.46(d，J＝11.90Hz，2H)3.58(s，3H，含有H₂O)4.17(s，2H)9.92(s，1H)10.21(s，1H)11.39(s，1H)；¹³C NMR(126MHz，DMSO-D6)δppm24.04(s，1C)43.49(s，1C)52.50(s，1C)54.47(s，1C)。

中间体29与30

3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-羧酸苯基甲酯与3-(苯基甲基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷

将三乙胺(1.44毫升，10.363毫摩尔)添加至8-叔丁氧羰基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷(2.0克，9.421毫摩尔)在CH₂Cl₂(20毫升)中的溶液内，在0℃逐滴添加氯甲酸苄酯(1.46毫升，10.363毫摩尔)，并将反应混合物在0℃搅拌0.5小时，然后使其温热至室温，且持续搅拌3天。然后以水使反应混合物淬灭，并以1N HCl溶液酸化。分离有机层，以盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，及浓缩，得到无色浓稠油，为粗产物。然后，使70毫克此物质溶于1，2-二氯乙烷(2毫升)中，并添加TFA(0.5毫升)。将反应混合物在室温搅拌2小时。接着，使溶剂与TFA蒸发，得到两种标题化合物的混合物，为无色浓稠油。

中间体31

关于制造磺酰胺的一般程序

将酸(1当量)与羰二咪唑(1.5当量)在无水THF中的混合物在50℃加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续添加1当量硫酰胺(R＝NR₂)或磺酰胺(R＝烷基或芳基)与DBU(2当量)。将所得到的混合物在室温搅拌过夜。在酸性水溶液处理后，使经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化，得到标题中间体。

中间体32

关于制造酸的一般程序

甲酯使用THF-MeOH中的1N NaOH来水解。

中间体33

将纯净的CDI(0.049克，0.302毫摩尔)添加至酸(0.092克，0.200毫摩尔)在THF(1毫升)中的经搅拌溶液内，并将混合物在50℃加热30分钟，然后使其冷却至室温。然后连续添加N-环丙基-N-甲基磺酰胺(0.0451克，0.300毫摩尔)与DBU(0.060毫升，0.400毫摩尔)。使混合物超声处理1-2小时，接着在室温搅拌过夜。以MeOH(0.5毫升)使反应淬灭，然后以1N HCl酸化，并以EtOAc(2×25毫升)萃取，以水和盐水洗涤，及干燥(Na₂SO₄)。使粗产物(0.123克)通过硅胶快速色谱来纯化(在DCM中的5％MeOH)，得到所期望的产物。产物为灰白色固体(0.101克，85％)。

中间体34

在氮气下将1N NaOH(2毫升，2.000毫摩尔)添加至甲酯(0.098克，0.166毫摩尔)在THF-MeOH中的经搅拌溶液内。将混合物在室温搅拌2小时，然后以1N HCl(3毫升)酸化，以EtOAc(2×25毫升)萃取，以水和盐水洗涤，及干燥(MgSO₄)。蒸发溶剂，得到酸，为灰白色固体(0.0942克，98％)。LC/MS：m/e 578(MH+)。LC/MS方法：开始％B为0，最终％B为100；梯度时间为3分钟；停止时间为4分钟；流速为4毫升/分钟；波长为220；溶剂A为10％MeOH/90％H₂O/0.1％三氟醋酸；溶剂B为10％H₂O/90％MeOH/0.1％三氟醋酸；色谱柱为XBridge 4.6×50毫米S5。

中间体35

在0℃将叔丁醇(1.35毫升，14毫摩尔)逐滴添加至CSI(1.24毫升，14毫摩尔)在CH₂Cl₂(10毫升)中的溶液内。将所产生的溶液在0℃搅拌2小时。逐滴添加N-甲基丙-2-胺(1.57毫升，14.13毫摩尔)与TEA(2.167毫升，15.54毫摩尔)在CH₂Cl₂(3毫升)中的溶液。将所产生的反应混合物在室温搅拌2小时，以EtOAc稀释反应混合物，并以冷1N HCl和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，除去溶剂，且使残留物通过Biotage 40M色谱柱来纯化(EtOAc-MeOH(90-10)/己烷5％至100％)，得到产物，为无色胶状物(2.3克，65％)。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.19(d，J＝6.55Hz，6H)1.49(s，9H)2.90(s，3H)4.05-4.26(m，1H)7.02(宽单峰，1H)。

中间体36

在N-异丙基-N-甲基氨磺酰基氨基甲酸叔丁酯(2.3克，9.12毫摩尔)中添加冷HCl(6毫升，24.00毫摩尔)，并在室温搅拌2小时，除去溶剂，得到产物，为淡黄褐色的固体(1.38克，99％)。¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.16(d，J＝6.80Hz，5H)2.72(s，3H)4.16(dt，J＝13.53，6.70Hz，1H)4.43(宽单峰，1H)。

中间体37

使用CDI与DBU，产物(0.261克，81％)制自酸(0.25克，0.54毫摩尔)与胺。LC-MS保留时间为3.635分钟；MS m/z(M+H)594。¹H NMR显示化合物以旋转异构体(约4/3)存在。LC/MS方法：开始％B为0，最终％B为100；梯度时间为3分钟；停止时间为4分钟；流速为4毫升/分钟；波长为220；溶剂A为10％MeOH/90％H₂O/0.1％三氟醋酸；溶剂B为10％H₂O/90％MeOH/0.1％三氟醋酸；色谱柱为XBridge 4.6×50毫米S5。

中间体38

使用THF/MeOH中的NaOH，此酸(0.22克，87％)制自酯(0.258克，0.435毫摩尔)。酸被分离为淡黄色固体。LC-MS保留时间为3.608分钟；MSm/z(M+H)580。LC/MS方法：开始％B为0，最终％B为100；梯度时间为3分钟；停止时间为4分钟；流速为4毫升/分钟；波长为220；溶剂A为10％MeOH/90％H₂O/0.1％三氟醋酸；溶剂B为10％H₂O/90％MeOH/0.1％三氟醋酸；色谱柱为XBridge 4.6×50毫米S5。¹H NMR显示存在旋转异构体(约1/2)。主要异构体的¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 0.41(t，J＝6.30Hz，1H)1.08-2.15(m，17H)2.63-2.80(m，1H)2.84-2.96(m，1H)3.04(s，3H)3.84(s，3H)4.03(d，J＝14.86Hz，1H)4.22-4.41(m，1H)5.35(d，J＝15.11Hz，1H)6.86(dd，J＝8.44，2.39Hz，1H)6.98(d，J＝2.27Hz，1H)7.20(d，J＝8.56Hz，1H)7.67(d，J＝8.31Hz，1H)7.81-7.89(m，1H)8.10(s，1H)。

关于制造一些实施例酰胺的一般程序

将酸衍生物(1当量)与相应的胺(1.2当量)、三乙胺(2-3当量)及TBTU(1.3当量)在无水DMF中合并，并在室温搅拌1-2小时，直到完成酰胺偶联为止。使经分离的粗产物通过制备性HPLC来纯化，得到所要酰胺。

实施例1

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

将TBTU(43.7毫克，0.136毫摩尔)与DIPEA(0.095毫升，0.544毫摩尔)添加至(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸(50毫克，0.0906毫摩尔)在DMSO(2.0毫升)中的溶液内。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后添加3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷二盐酸盐{J & W PharmLab，LLCMorrisville，PA 19067-3620}(27.1毫克，0.136毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌3小时。然后使其浓缩，并使残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到最终产物，为黄色固体(32毫克，46％产率)。MS m/z 660(MH⁺)，保留时间为2.445分钟，¹H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.20(m，0.23H)1.11-2.25(m，15.77H)2.58(m，0.23H)2.69(m，0.77H)2.75-3.11(m，10H)3.28-3.75(m，5H)3.91(s，2.31H)3.92(s，0.69H)4.15-4.37(m，1H)4.68(m，br，1H)4.94-5.00(m，0.23H)5.16(d，J＝15.00Hz，0.77H)7.00-7.09(m，1H)7.18(d，J＝2.56Hz，0.23H)7.21(d，J＝2.56Hz，0.77H)7.33(d，J＝8.41Hz，0.77H)7.35(d，J＝8.42Hz，0.23H)7.57(dd，J＝8.42，1.46Hz，0.77H)7.62(dd，J＝8.78，1.46Hz，0.23H)7.91(d，J＝8.42Hz，0.77H)7.93(d，J＝8.42Hz，0.23H)8.00(s，0.77H)8.07(s，0.23H)。

实施例2

(+/-)-3-[[8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂基-1a(2H)-基]羰基]-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-羧酸1，1-二甲基乙酯

将TBTU(131毫克，0.408毫摩尔)与DIPEA(0.237毫升，1.36毫摩尔)添加至(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸(150毫克，0.272毫摩尔)在DMSO(4.0毫升)中的溶液内。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后添加8-叔丁氧羰基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷(86.7毫克，0.408毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。然后使其浓缩，并使残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到标题产物，为淡黄色固体(110毫克，54％产率)。MS m/z746(MH⁺)，保留时间为3.040分钟。¹H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.17(m，0.25H)1.08(m，0.25H)1.17-2.28(m，24.5H)2.38-3.12(m，8H)3.43-4.43(m，10H)4.76-4.85(m，0.25H)4.96-5.19(m，0.75H)7.02(dd，J＝8.60，2.38Hz，1H)7.17(d，J＝2.19Hz，0.25H)7.20(d，J＝2.20Hz，0.75H)7.26-7.39(m，1H)7.49-7.70(m，1H)7.80-8.00(m，1.75H)8.12(s，0.25H)。

实施例3

(+/-)-8-环己基-1a-(3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-基羰基)-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-羧酰胺

将TFA(2毫升)添加至(+/-)-3-[[8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

基-1a(2H)-基]羰基]-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-羧酸1，1-二甲基乙酯(98毫克，0.131毫摩尔)在1，2-二氯乙烷(3毫升)中的溶液内。将反应混合物在室温搅拌2小时。然后使其浓缩，得到所要产物，为带有褐色的固体(100毫克，100％产率)。MSm/646(MH⁺)，保留时间为2.478分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm0.24(m，0.28H)1.14(m，0.28H)1.19-2.23(m，15.22H)2.57(m，0.28H)2.69(m，0.72H)2.81-3.09(m，8H)3.30-3.40(m，1H)3.67(d，J＝15.87Hz，0.72H)3.91(s，2.16H)3.93(s，0.84H)3.90-4.27(m，4.28H)4.88-4.91(m，0.28H)5.11(d，J＝15.56Hz，0.72H)7.00-7.09(m，1H)7.19(d，J＝2.75Hz，0.28H)7.21(d，J＝2.14Hz，0.72H)7.34(d，J＝8.54Hz，0.72H)7.37(d，J＝8.55Hz，0.28H)7.59(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.72H)7.63(dd，J＝8.39，1.37Hz，0.28H)7.92(d，J＝8.55Hz，0.72H)7.94-7.99(m，1H)8.10(s，0.281H)。

实施例4

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(8-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

在(+/-)-8-环己基-1a-(3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-基羰基)-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺(54毫克，0.071毫摩尔)在甲醇(3毫升)中的溶液内添加多聚甲醛(6.4毫克，0.213毫摩尔)、ZnCl₂(29毫克，0.213毫摩尔)及Na(CN)BH₃(13.4毫克，0.213毫摩尔)。将所得到的混合物在60℃加热2小时，然后冷却至室温。通过过滤来除去存在的固体，并使滤液在真空下浓缩，且使残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到标题化合物，为带有淡黄色的固体(37毫克，67％产率)。MS m/660(MH⁺)，保留时间为2.495分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.21(m，0.3H)1.13(m，0.3H)1.18-2.22(m，15.4H)2.58(m，0.3H)2.68(m，0.7H)2.76-3.11(m，11H)3.32-3.37(m，1H)3.63(d，J＝15.56Hz，0.7H)3.82-4.32(m，7.3H)4.88-4.92(m，0.3H)5.08(d，J＝15.56Hz，0.7H)7.00-7.08(m，1H)7.18(d，J＝2.14Hz，0.3H)7.21(d，J＝2.14Hz，0.7H)7.32(d，J＝8.55Hz，0.7H)7.35(d，J＝8.55Hz，0.3H)7.57(d，J＝7.93Hz，0.7H)7.62(dd，J＝8.39，1.37Hz，0.3H)7.91(d，J＝8.55Hz，0.7H)7.93-7.99(m，1H)8.09(s，0.3H)。

实施例5

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[[8-(1-甲基乙基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

-5-羧酰胺(40毫克，0.071毫摩尔)在甲醇(3毫升)中的溶液内添加丙酮(1毫升)、ZnCl₂(29毫克，0.213毫摩尔)及Na(CN)BH₃(13.4毫克，0.213毫摩尔)。将反应混合物在60℃加热过夜，然后冷却至室温。通过过滤来除去存在的固体，并使滤液在真空下浓缩，且使残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到标题化合物，为带有淡黄色的固体(29毫克，69％产率)。MS m/688(MH⁺)，保留时间为2.477分钟。¹H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.20(m，0.23H)1.12(m，0.23H)1.18-2.41(m，21.54H)2.51-3.18(m，10H)3.64(d，J＝15.37Hz，0.77H)3.79-4.51(m，8.23H)4.81-4.88(m，0.23H)5.07(d，J＝14.27Hz，0.77H)6.99-7.08(m，1H)7.17-7.23(m，1H)7.28-7.36(m，1H)7.57(dd，J＝8.42，1.10Hz，0.77H)7.61(dd，J＝8.42，1.47Hz，0.23H)7.83-8.00(m，1.77H)8.09(s，0.23H)。

实施例6

(1aR，12bS)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

-1a(2H)-羧酸(204毫克，0.37毫摩尔)在DMSO(8.0毫升)中的溶液内添加TBTU(178毫克，0.555毫摩尔)与DIPEA(0.39毫升，2.22毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后添加3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷二盐酸盐(111毫克，0.555毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌2小时。然后使其浓缩，并使残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到黄色固体，为最终TFA盐(265毫克，92％产率)。平均旋光率为-53.56°(溶剂MeOH；波长589纳米；50厘米样品池)。MS m/z 660(MH⁺)，保留时间为3.035分钟。¹H NMR(300MHz，MeOD)δppm 0.20(m，0.23H)1.11-2.25(m，15.77H)2.58(m，0.23H)2.69(m，0.77H)2.75-3.11(m，10H)3.28-3.75(m，5H)3.91(s，2.31H)3.92(s，0.69H)4.15-4.37(m，1H)4.68(m，br，1H)4.94-5.00(m，0.23H)5.16(d，J＝15.00Hz，0.77H)7.00-7.09(m，1H)7.18(d，J＝2.56Hz，0.23H)7.21(d，J＝2.56Hz，0.77H)7.33(d，J＝8.41Hz，0.77H)7.35(d，J＝8.42Hz，0.23H)7.57(dd，J＝8.42，1.46Hz，0.77H)7.62(dd，J＝8.78，1.46Hz，0.23H)7.91(d，J＝8.42Hz，0.77H)7.93(d，J＝8.42Hz，0.23H)8.00(s，0.77H)8.07(s，0.23H)。

关于合成(1aR，12bS)-相对-(-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺的替代程序提供于下文中。在N₂下在(-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸(25.2克，45.68毫摩尔)与3-甲基-3，8-二氮杂二环-[3.2.1]辛烷二盐酸盐(10.0克，50.22毫摩尔)在无水MeCN(乙腈)(300毫升)中的混合物内添加DIPEA(23.62克，182.72毫摩尔)。15分钟后，添加TBTU(16.12克，50.22毫摩尔)。将反应溶液在N₂下搅拌30分钟。HPLC显示起始原料消失。蒸发溶液中的溶剂，得到泡沫物。使其溶于EtOAc(2.5升)中，以H₂O(1.5升)、H₂O/盐水(8:2)(1.5升)和盐水(1.5升)洗涤，以Na₂SO₄干燥，并蒸发，得到28.8克粗产物。将此固体与得自五次另外反应的45.4克物质汇集，得到总计74.2克粗产物。使其通过硅胶垫(E.Merck 230-400目，1公斤)，以MeOH/CH₂Cl₂(2.5:97.5)洗脱。在蒸发后，得到泡沫物，其以EtOAc与己烷处理而转化成固体。在50℃及真空下干燥7小时后，GC分析显示其具有各1.4％的EtOAc与己烷。在61-64℃进一步干燥后，GC分析显示其仍然具有1.0％己烷与1.4％EtOAc。使产物溶于Et₂O中，并在真空中慢慢蒸发三次，在60℃及真空下干燥3小时，得到68.3克。将其以H₂O(900毫升)洗涤，并在68℃及真空下再干燥7小时，得到67.1克(77％产率)实施例6的化合物。GC分析显示其具有0.97％Et₂O。HPLC条件：色谱柱为Cadenza CD-C18 3×250毫米；UV为257与220纳米；25℃；流速为0.5毫升/分钟；梯度时间为38分钟，0-80％B(0-35分钟)及80％B(35-38分钟)；溶剂A为pH为4.7的在水中的25nM CH₃COONH₄，溶剂B为MeCN；HPLC纯度99.7％(保留时间26.54分钟)。手性HPLC条件：色谱柱为Regis(S，S)Whelk-O1250×4.6毫米；UV 258纳米；35℃；流速2.0毫升/分钟；流动相CO₂/MeOH；梯度时间20分钟，30％MeOH(0-1分钟)，30-48％MeOH(1-19分钟)，48％MeOH(19-20分钟)；手性HPLC纯度>99.8％(保留时间16.60分钟)；LC/MS(ES⁺)660.36(M+H，100)；HRMS：计算值660.3220，实测值660.3197；[α]_D ^25C-79.66°(c1.06，MeOH)；对C₃₆H₄₅N₅O₅S·0.6H₂O·0.09Et₂O的分析计算值：C，64.53、H，7.00、N，10.35、S，4.74、H₂O，1.51、Et₂O，0.97；实测值：C，64.50、H，7.12、N，10.41、S，5.14、H₂O，1.52、Et₂O，0.97。(1aR，12bS)-相对-(-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺的绝对立体化学如上文所画出，且通过基于(R)-樟脑磺酸盐所得到的x-射线晶体结构来确定。

此外，制备以下盐：盐酸盐、磷酸盐、醋酸盐、硫酸盐、樟脑磺酸盐、钠盐、钙盐及镁盐。其盐酸盐具有下述特征：在DSC中具有从25℃至75℃的小的宽的吸热及峰在253℃与258℃之间的可能的熔化/降解吸热；在TGA中具有从25℃至75℃的在0.003％与1.5％之间的早期失重及在大约200℃开始的降解失重。

实施例7

(+/-)-8-环己基-N-(环丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

将(+/-)-8-环己基-5-(环丙基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a-羧酸(1当量)与3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷(1.2当量)、三乙胺(3当量)及TBTU(1.3当量)在无水DMF中合并，并在室温搅拌大约2小时，直到通过LCMS分析发现反应进行至完成为止。然后，产物通过制备性反相HPLC来分离，得到所要标题化合物的单TFA盐，为米黄色固体。LC/MS：保留时间为2.986分钟；m/e 657(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(400MHz，氯仿-D)：δppm 0.22-0.36(m，1H)，1.09-1.20(m，J＝8.06Hz，3H)，1.18-1.30(m，2H)1.29-1.48(m，5H)，1.48-1.67(m，1H)，1.68-1.86(m，3H)，1.87-2.09(m，5H)，2.11-2.40(m，1H)，2.42-2.67(m，1H)，2.67-2.88(m，J＝4.78Hz，1H)，2.86-3.02(m，2H)，3.02-3.28(m，2H)，3.42-3.55(m，1H)，3.55-3.77(m，2H)，3.83-3.92(m，3H)，3.93-4.15(m，1H)，4.28-4.58(m，1H)，4.61-4.99(m，J＝106.26Hz，1H)，5.04-5.26(m，1H)，6.90-7.03(m，1H)，7.07-7.15(m，J＝2.52Hz，1H)，7.27-7.36(m，1H)，7.42-7.68(m，1H)，7.82-7.96(m，J＝8.56Hz，1H)，8.01-8.18(m，1H)。

实施例8

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[[3-(苯基甲基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

在8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸(40毫克，0.0725毫摩尔)在DMSO(1.0毫升)中的溶液内添加TBTU(35毫克，0.109毫摩尔)与DIPEA(0.076毫升，0.435毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后，添加得自上述3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-羧酸苄酯的制备的混合物，并将反应物在室温搅拌过夜。然后使其浓缩，并使残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到产物，为淡黄色固体(12.5毫克，20％产率)。MS m/z 736(MH⁺)，保留时间为2.631分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.20(m，0.16H)1.11-2.25(m，15.84H)2.57(m，0.16H)2.70(m，0.84H)2.85(m，0.16H)2.80-3.60(m，11.84H)3.65(d，J＝15.26Hz，0.84H)3.92(s，3H)4.22(d，J＝14.95Hz，0.16H)4.33-4.76(m，3H)4.96(m，0.16H)5.08-5.33(m，0.84H)6.97-7.10(m，1H)7.17(d，J＝2.44Hz，0.16H)7.22(d，J＝2.44Hz，0.84H)7.28-7.42(m，1H)7.43-7.74(m，6H)7.87-7.96(m，1H)7.99-8.19(m，1H)。

实施例9

(+/-)-8-[[8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

基-1a(2H)-基]羰基]-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-羧酸苯基甲酯

-1a(2H)-羧酸(40毫克，0.0725毫摩尔)在DMSO(1.0毫升)中的溶液内添加TBTU(35毫克，0.109毫摩尔)与DIPEA(0.076毫升，0.435毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌15分钟。然后添加得自3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-羧酸苄酯的制备的混合物，并将反应物在室温搅拌过夜。接着，使所得到的混合物在真空中浓缩，且使残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到产物，为淡黄色固体(42毫克，74％产率)。MS m/z 780(MH⁺)，保留时间为3.070分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm0.14(m，0.22H)1.06-2.20(m，15.78H)2.51(m，0.22H)2.58-3.23(m，9.78H)3.54-4.07(m，6.78H)4.16(d，J＝14.65Hz，0.22H)4.31-4.59(m，br，1H)4.96(m，0.22H)5.02-5.23(m，2.78H)6.94-7.07(m，1H)7.16(d，J＝2.44Hz，0.22H)7.21(s，0.78H)7.26-7.45(m，6H)7.50-7.65(m，1H)7.82-8.04(m，1.78H)8.10(s，0.22H)。

实施例10

(+/-)-8-环己基-1a-(3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基羰基)-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

在8-[[8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

基-1a(2H)-基]羰基]-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-3-羧酸苯基甲酯(360毫克，0.462毫摩尔)在甲醇/醋酸乙酯(20毫升/20毫升)中的溶液内添加10％Pd/碳(40毫克)。将反应混合物在氢气(1大气压)下搅拌过夜。然后，使混合物经过硅藻土过滤，并将滤液以甲醇与醋酸乙酯洗涤。浓缩合并的滤液，得到产物，为黄色固体(275毫克，92％产率)。MS m/z 646(MH⁺)，保留时间为2.983分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm0.20(m，0.2H)1.12-2.29(m，15.8H)2.52-2.86(m，1.2H)2.99(m，0.8H)3.02(s，4.8H)3.03(s，1.2H)3.09-3.49(m，5H)3.68(d，J＝15.26Hz，0.8H)3.91(s，2.4H)3.92(s，0.6H)4.03-4.26(m，0.4H)4.62-4.85(m，1H)5.17(d，J＝13.71Hz，0.8H)6.99-7.11(m，1H)7.19(s，0.2H)7.23(s，0.8H)7.32-7.40(m，1H)7.59(d，J＝8.24Hz，0.8H)7.63(d，J＝8.24Hz，0.2H)7.89-7.96(m，1H)7.98(s，0.8H)8.09(s，0.2H)。

实施例11

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1a-[(3-乙基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

在(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺(30毫克，0.0465毫摩尔)在甲醇(2毫升)中的溶液内添加乙醛(0.013毫克，0.232毫摩尔)、ZnCl₂(19毫克，0.14毫摩尔)及Na(CN)BH₃(8.8毫克，0.14毫摩尔)。将所得到的混合物在室温搅拌过夜，在此段时间内，形成沉淀物。此固体通过过滤来除去，并在真空下浓缩滤液。然后，使残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到标题化合物的TFA盐，为淡黄色固体(35毫克，96％产率)。MS m/z 674(MH⁺)，保留时间为3.013分钟。¹HNMR(500MHz，MeOD)δppm 0.22(m，0.16H)1.09-2.29(m，18.84H)2.59(m，0.16H)2.70(m，0.84H)2.86(m，0.16H)2.97-3.03(m，5.88H)3.03(s，0.96H)3.11-3.81(m，7H)3.92(s，2.52H)3.93(s，0.48H)4.22(d，J＝14.95Hz，0.16H)4.39(s，br，0.84H)4.60-4.85(m，1.16H)5.20(d，J＝14.64Hz，0.84H)7.01-7.09(m，1H)7.20(d，J＝2.75Hz，0.16H)7.22(d，J＝2.44Hz，0.84H)7.33-7.38(m，1H)7.59(dd，J＝8.39，1.37Hz，0.84H)7.63(dd，J＝8.55，1.53Hz，0.16H)7.90-7.96(m，1H)8.02(s，0.84H)8.09(s，0.16H)。

实施例12

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[[3-(1-甲基乙基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

-5-羧酰胺(30毫克，0.0465毫摩尔)在甲醇(2毫升)中的溶液内添加丙酮(0.010毫克，0.14毫摩尔)与ZnCl₂(19毫克，0.14毫摩尔)。将反应混合物在50℃加热1小时。然后添加Na(CN)BH₃(8.8毫克，0.14毫摩尔)，并使反应物在50℃保持过夜，在此段时间内，形成沉淀物。通过过滤来除去此物质，接着在真空中浓缩滤液。然后，使所得到的残留物通过制备性HPLC色谱柱来纯化，得到标题化合物的TFA盐，为淡黄色固体(35毫克，94％产率)。MS m/z688(MH⁺)，保留时间为3.011分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.21(m，0.19H)1.11-2.24(m，21.81H)2.58(m，0.19H)2.72(m，0.81H)2.85(m，0.19H)2.93-3.03(m，5.67H)3.03(s，1.14H)3.14-3.73(m，6H)3.91(s，2.43H)3.93(s，0.57H)4.22(d，J＝14.95Hz，0.19H)4.39(s，br，0.81H)4.58-4.80(m，br，1H)4.84(m，0.19H)5.19(d，J＝15.26Hz，0.81H)6.99-7.09(m，1H)7.20(d，J＝2.44Hz，0.19H)7.23(d，J＝2.44Hz，0.81H)7.31-7.39(m，1H)7.58(d，J＝8.55Hz，0.81H)7.63(d，J＝8.55Hz，0.19H)7.93(d，J＝8.24Hz，1H)8.01(s，0.81H)8.11(s，0.19H)。

实施例13

(+/-)-8-环己基-1a-[[3-(环丙基甲基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基]羰基]-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

-5-羧酰胺(20毫克，0.031毫摩尔)在甲醇(2毫升)中的溶液内添加环丙甲醛(cycloporpanecarboxaldehyde)(0.007毫克，0.093毫摩尔)、ZnCl₂(12.7毫克，0.093毫摩尔)及Na(CN)BH₃(5.8毫克，0.093毫摩尔)。将混合物在室温搅拌2小时，然后通过过滤来除去不溶性固体。使滤液在真空中浓缩，并使所得到的残留物通过制备性反相HPLC来纯化，得到标题化合物的TFA盐，为淡黄色固体(10毫克，40％产率)。MS m/z 700(MH⁺)，保留时间为3.033分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.21(m，0.18H)0.47(s，br，2H)0.69-0.85(m，2H)0.93-2.29(m，16.82H)2.58(m，0.18H)2.71(m，0.82H)2.86(m，0.18H)2.94-3.80(m，13.82H)3.91(s，2.46H)3.93(s，0.54H)4.23(d，J＝14.95Hz，0.18H)4.41(s，br，0.82H)4.61-4.79(m，1H)4.98(m，0.18H)5.19(d，J＝14.35Hz，0.82H)7.01-7.09(m，1H)7.19(d，J＝2.75Hz，0.18H)7.22(d，J＝2.44Hz，0.82H)7.32-7.39(m，1H)7.58(d，J＝8.24Hz，0.82H)7.63(d，J＝8.24Hz，0.18H)7.90-7.96(m，1H)8.02(s，0.82H)8.09(s，0.18H)。

实施例14

(+/-)-1a-[(3-乙酰基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

将TBTU(15毫克，0.0465毫摩尔)与DIPEA(0.027毫升，0.155毫摩尔)添加至醋酸(3毫克，0.0465毫摩尔)在DMSO(1.0毫升)中的溶液内，并将混合物在室温搅拌15分钟。然后添加(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺(20毫克，0.031毫摩尔)，并将反应物在室温搅拌过夜。然后使其浓缩，并使残留物通过制备性HPLC色谱柱来纯化，得到标题化合物，为淡黄色固体(7毫克，33％产率)。MS m/z 688(MH⁺)，保留时间为3.278分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.18(m，0.2H)1.07-2.27(m，18.8H)2.55(m，0.2H)2.72(m，0.8H)2.86(m，0.2H)2.95-3.08(m，6.8H)3.15-3.78(m，5H)3.91(s，2.4H)3.93(s，0.6H)4.05-4.29(m，1H)4.40-4.59(m，1H)4.93(m，0.2H)5.16(m，0.8H)6.99-7.10(m，1H)7.19(m，0.2H)7.23(d，J＝2.14Hz，0.8H)7.30-7.41(m，1H)7.59(d，J＝8.85Hz，0.8H)7.64(d，J＝8.24Hz，0.2H)7.86-8.06(m，1.8H)8.13(s，0.2H)。

实施例15

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[[3-(2-吡啶基)-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基]羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

在微波反应管件中，在氮气下添加(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺(20毫克，0.031毫摩尔)、Pd₂(dba)₃(0.6毫克，2摩尔％)、1，3-二(二苯基膦基)丙烷(0.5毫克，4摩尔％)、叔丁醇钠(8.9毫克，0.093毫摩尔)及2-溴吡啶(0.006毫升，0.062毫摩尔)。然后，将反应管件密封，并添加二氧六环(1毫升)，接着将反应混合物在油浴中在70℃加热过夜。然后过滤反应物，及浓缩，并使残留物通过制备性HPLC色谱柱来纯化，得到标题化合物的TFA盐，为灰白色固体(2.2毫克，7.5％产率)。MS m/z 723(MH⁺)，保留时间为3.048分钟。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.25(m，0.2H)1.11-2.23(m，15.8H)2.60(m，0.2H)2.76(m，0.8H)2.79-3.10(m，7H)3.13-4.00(m，8H)4.27(d，J＝15.26Hz，0.2H)4.46(s，br，0.8H)4.63-4.81(m，1H)4.99(m，0.2H)5.26(d，J＝15.26Hz，0.8H)7.02-7.16(m，2H)7.20-7.27(m，1H)7.32-7.68(m，3H)7.77(d，J＝7.93Hz，0.2H)7.85-8.18(m，3.8H)。

实施例16

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

使(+/-)-8-环己基-5-[[[(二甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸(496毫克，0.79毫摩尔)溶于7毫升DMF中，并添加TBTU(392毫克，1.22毫摩尔)，且将反应物在室温及氮气下搅拌1小时，然后添加DMAP(525毫克，4.29毫摩尔)，接着添加3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷二盐酸盐(196毫克，0.98毫摩尔)。将反应物在室温及氮气下搅拌17小时，然后倒入100毫升水中。将含水混合物以醋酸乙酯萃取。将有机萃取液以水洗涤两次，接着以盐水洗涤两次，并以硫酸镁干燥。在真空中除去挥发性物质，得到615毫克粗产物，使其吸附于1.5克硅胶上，并在18克硅胶上进行色谱分离，以二氯甲烷中的3％甲醇洗脱。合并纯产物洗脱馏分，并在真空中除去挥发性物质，得到216毫克(37％)接近无色的无定形固体。¹H NMR(500MHz，氯仿-D)δppm 0.27(t，J＝5.80Hz，0.4H)1.14-1.30(m，2.9H)1.30-1.48(m，3.7H)1.57(d，J＝15.26Hz，2.3H)1.63-1.87(m，11.2H)1.85-2.20(m，8.4H)2.30(s，1.3H)2.39(s，0.9H)2.69(s，1.2H)2.79(s，1.2H)2.85-3.01(m，1.9H)3.01-3.11(m，6.0H)3.25-3.51(m，1.8H)3.59(d，J＝15.26Hz，1.2H)4.14(d，J＝14.95Hz，0.4H)4.40(s，0.9H)4.75(d，J＝13.73Hz，0.4H)5.07-5.21(m，2.8H)6.92-7.11(m，1.5H)7.21(d，J＝2.75Hz，1.0H)7.27-7.49(m，7.0H)7.53(d，J＝7.93Hz，0.6H)7.87(dd，J＝8.55，4.88Hz，1.0H)7.91-8.03(m，0.9H)8.83(s，0.2H)9.67(s，0.3H)。

实施例17

(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-11-羟基-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

利用加热，将(+/-)-8-环己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-1，1a，2，12b-四氢-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-11-(苯基甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺(189毫克，0.26毫摩尔)溶于5毫升甲醇与2毫升不含抑制剂的THF的混合物中。在冷却时，一些物质沉淀析出。添加1N盐酸水溶液(0.3毫升，0.3毫摩尔)来帮助溶解。在添加20％氢氧化钯/碳(46毫克)之前，将反应物置于氮气下。使反应在室温及氢气(大气压)(气瓶)下进行6.75小时。使反应物经过硅藻土填充柱过滤。在真空中除去滤液中的挥发性物质，得到161毫克(92％)产物，为淡黄色固体。¹H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 0.01(t，J＝5.34Hz，0.3H)0.39(s，0.3H)1.08-1.60(m，6.6H)1.62-1.83(m，2.9H)1.82-2.20(m，6.3H)2.58-2.84(m，4.9H)2.84-2.96(m，6.9H)3.07-3.19(m，1.0H)3.20-3.29(m，1.6H)3.34(s，10.0H，H₂O)3.42(s，0.9H)3.58(d，J＝14.65Hz，0.8H)4.13(d，J＝14.95Hz，0.4H)4.31-4.62(m，0.8H)4.91(d，J＝14.95Hz，0.3H)4.98-5.21(m，0.7H)6.85(t，J＝8.55Hz，1.1H)6.99(s，1.0H)7.09-7.25(m，1.0H)7.62(d，J＝20.14Hz，1.0H)7.72-7.91(m，1.0H)7.92-8.29(m，0.9H)9.92(s，1.0H)10.16(d，J＝56.15Hz，0.8H)11.63(d，J＝10.68Hz，0.9H)。

实施例18

(-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-N-[(甲基氨基)磺酰基]-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

将8-环己基-5-[[[(甲基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸(158毫克，0.29毫摩尔)、3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷二盐酸盐(59毫克，0.29毫摩尔)、二异丙基乙胺(0.15毫升)及TBTU(112毫克，0.35毫摩尔)在DMF(1.5毫升)中的溶液在22℃搅拌1小时，并通过制备性HPLC来纯化，得到标题化合物，为淡黄色固体(150毫克，80.1％)。ESI-MS m/e 646(MH⁺)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 0.93-2.08(m，16H)2.49-2.53(m，1H)2.55(s，3H)2.60-2.93(m，4H)3.15(s，3H)3.24(m，2H)3.73(s，3H)3.88-4.18(m，1H)4.41-4.56(m，1H)4.86-5.03(m，1H)6.86(d，J＝8.24Hz，1H)6.97-7.06(m，1H)7.09-7.20(m，1H)7.37-7.49(m，1H)7.73(d，J＝8.24Hz，1H)7.77-7.94(m，1H)。

实施例19

(+/-)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-N-[[(苯基甲基)氨基]磺酰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

(+/-)-8-环己基-N-((苄基氨基)磺酰基)-1a-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基)-11-(甲氧基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺以类似于关于合成(-)-8-环己基-N-((甲基氨基)磺酰基)-1a-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基)-11-(甲氧基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺所述方式自(+/-)-8-环己基-5-[[[(苄基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-1，12b-二氢-11-(甲氧基)-12-(甲氧基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a(2H)-羧酸甲酯开始而制成。ESI-MSm/e722(MH+)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 1.14-2.20(m，16H)2.56-3.08(m，7H)3.39-3.72(m，3H)3.89-3.96(m，3H)4.21-4.37(m，3H)4.60-4.74(m，1H)5.11-5.22(m，1H)7.06(dd，J＝8.55，2.44Hz，1H)7.17-7.24(m，2H)7.28(t，J＝7.63Hz，2H)7.33-7.43(m，3H)7.45-7.56(m，1H)7.86-8.00(m，2H)。

实施例20

(+/-)-N-(氨基磺酰基)-8-环己基-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-[(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基]-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

将10％钯/碳(40毫克，0.038毫摩尔)添加至(+/-)-8-环己基-N-((苄基氨基)磺酰基)-1a-((3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛-8-基)羰基)-11-(甲氧基)-1，1a，2，12b-四氢环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺(20毫克，0.028毫摩尔)在EtOH(10毫升)中的溶液内，并使反应混合物相继接受真空和氮气冲洗，如此三次，接着将其置于氢气(1大气压)下。将反应混合物在室温搅拌两天，然后使其经过硅藻土垫过滤，及浓缩。使残留物通过制备性HPLC来纯化(含有TFA缓冲液的乙腈/H₂O)，得到标题化合物，为白色薄膜。ESI-MS m/e 632(MH⁺)。¹H NMR(500MHz，MeOD)δppm 1.13-2.23(m，16H)2.48-3.11(m，9H)3.54-3.75(m，1H)3.86-3.97(m，3H)4.15-4.37(m，1H)4.62(s，1H)5.19(s，1H)7.05(s，1H)7.16-7.24(m，1H)7.31-7.39(m，1H)7.55-7.67(m，1H)7.88-7.97(m，1H)7.99-8.12(m，1H)。

实施例20-31通过下述LC/MS方法来分析。分析条件：色谱柱为PHENOMENNEX-LUNA 3.0×50毫米S10；流动相为(A)10:90甲醇-水和(B)90:10甲醇-水；缓冲液为0.1％TFA；梯度范围为0-100％B；梯度时间为2分钟；流速为4毫升/分钟；分析时间为3分钟。检测条件：检测器1为UV，在220纳米；检测器2为MS(ESI+)。

实施例21

(+/-)-8-环己基-5-(吗啉代磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a-羧酸

使产物通过制备性HPLC来纯化，并分离为米黄色固体。LC/MS：保留时间为1.968分钟；m/e 460(MH⁺)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：发现化合物以相互转化旋转异构体存在。

实施例22

(+/-)-8-环己基-5-(4-甲基哌嗪-1-基磺酰基氨甲酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-1a-羧酸

使产物通过制备性HPLC来纯化，并以单TFA盐形式分离，为米黄色固体。LC/MS：保留时间为1.687分钟；m/e 607(MH⁺)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)：发现化合物以相互转化旋转异构体存在。

实施例23

(+/-)-8-环己基-N-(吗啉代磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-羧酰胺

使产物通过制备性HPLC来纯化，并以TFA盐分离。LC/MS：保留时间为1.770分钟；m/e 702(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(500MHz，氯仿-D)：δppm1.14-1.59(m，7H)，1.69-1.88(m，3H)，1.87-2.15(m，6H)，2.49-2.66(m，1H)，2.80-3.02(m，3H)，3.05-3.32(m，1H)，3.41-3.55(m，5H)，3.58-3.68(m，J＝15.56Hz，1H)，3.70-3.81(m，4H)，3.83-3.93(m，3H)，3.94-4.14(m，1H)，4.43-4.71(m，3H)，4.75-4.87(m，1H)，5.18(s，1H)，6.90-7.02(m，1H)，7.07-7.15(m，J＝2.75Hz，1H)，7.27-7.36(m，J＝9.16，9.16Hz，1H)，7.37-7.60(m，1H)，7.83-7.95(m，J＝8.39，8.39Hz，1H)，8.03(s，1H)，9.47(s，1H)。

实施例24

(+/-)-8-环己基-N-(吡咯烷-1-基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

使产物通过制备性HPLC来纯化，并以TFA盐分离。LC/MS：保留时间为2.873分钟；m/e 686(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(500MHz，氯仿-D)：δppm 1.12-1.30(m，3H)，1.29-1.45(m，3H)，1.45-1.60(m，2H)，1.71-1.86(m，3H)，1.86-1.98(m，J＝6.17，6.17Hz，6H)，1.97-2.12(m，J＝23.42Hz，3H)，2.12-2.32(m，1H)，2.56-2.72(m，1H)，2.80-2.88(m，J＝4.78Hz，1H)，2.88-3.02(m，2H)，3.07-3.23(m，1H)，3.45-3.52(m，1H)，3.51-3.60(m，4H)，3.60-3.74(m，2H)，3.85-3.93(m，3H)，4.02-4.18(m，1H)，4.50-4.64(m，1H)，4.78-4.92(m，1H)，5.10-5.26(m，1H)，6.90-7.02(m，1H)，7.07-7.16(m，J＝2.52Hz，1H)，7.26-7.34(m，J＝9.19，9.19Hz，1H)，7.48-7.64(m，1H)，7.82-7.97(m，J＝9.19，9.19Hz，1H)，8.08-8.27(m，1H)，9.52(s，1H)。

实施例25

(+/-)-8-环己基-N-(哌啶-1-基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

使产物通过制备性HPLC来纯化，并以TFA盐分离。LC/MS：保留时间为1.882分钟；m/e 700(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(500MHz，氯仿-D)：δppm 1.17-1.30(m，2H)，1.30-1.46(m，J＝14.23，6.92Hz，4H)，1.47-1.61(m，J＝11.33Hz，4H)，1.61-1.72(m，J＝4.03Hz，4H)，1.71-1.86(m，3H)，1.86-2.11(m，J＝10.32Hz，6H)，2.21-2.38(m，1H)，2.51-2.68(m，1H)，2.77-3.02(m，3H)，3.33-3.47(m，4H)，3.47-3.52(m，1H)，3.58-3.73(m，2H)，3.86-3.93(m，3H)，3.93-4.13(m，1H)，4.57-4.77(m，2H)，5.06-5.23(m，1H)，6.91-7.02(m，1H)，7.06-7.16(m，J＝2.52Hz，1H)，7.26-7.33(m，1H)，7.37-7.56(m，1H)，7.82-7.94(m，1H)，7.98-8.12(m，1H)，9.03(s，1H)。

实施例26

(+/-)-8-环己基-N-((2S，6R)-2，6-二甲基吗啉代磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

使产物通过制备性HPLC来纯化，并以TFA盐分离。LC/MS：保留时间为2.911分钟；m/e 730(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(500MHz，氯仿-D)：δppm 1.13-1.23(m，5H)，1.22-1.31(m，J＝5.29Hz，1H)，1.31-1.47(m，J＝7.30，7.30Hz，3H)，1.47-1.62(m，1H)，1.74-1.91(m，J＝20.90Hz，1H)，1.91-2.10(m，2H)，2.70-2.92(m，4H)，3.02-3.12(m，1H)，3.18-3.39(m，6H)，3.44-3.52(m，3H)，3.58-3.79(m，8H)，3.90(s，3H)，3.92-4.01(m，1H)，4.00-4.11(m，1H)，4.30-4.47(m，1H)，4.80-4.93(m，1H)，5.09-5.23(m，1H)，6.92-7.02(m，2H)，7.08-7.14(m，J＝2.52Hz，1H)，7.29(d，J＝8.31Hz，1H)，7.85-7.93(m，1H)，7.94-8.02(m，1H)，8.85(s，1H)。

实施例27

(+/-)-8-环己基-N-4-(4-甲基哌嗪-1-基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

使产物通过制备性HPLC来纯化，并以二TFA盐分离。LC/MS：保留时间为1.563分钟；m/e 715(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(500MHz，氯仿-D)：δppm 0.23-0.33(m，1H)，1.14-1.30(m，2H)，1.28-1.46(m，3H)，1.45-1.61(m，1H)，1.63-1.86(m，3H)，1.85-2.09(m，5H)，2.50-2.66(m，1H)，2.77-2.90(m，4H)，2.88-3.17(m，4H)，3.44-3.54(m，2H)，3.52-3.75(m，5H)，3.84-3.94(m，3H)，3.95-4.19(m，4H)，4.31-4.52(m，1H)，4.55-4.70(m，1H)，4.73-4.87(m，1H)，5.00-5.23(m，1H)，6.89-7.05(m，2H)，7.05-7.15(m，1H)，7.25-7.32(m，1H)，7.45-7.64(m，1H)，7.78-7.91(m，1H)，7.95-8.13(m，1H)。

实施例28

(+/-)-8-环己基-N-(异丙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

使产物通过制备性HPLC来纯化，并以单TFA盐形式分离，为米黄色固体。LC/MS：保留时间为1.818分钟；m/e 659(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(500MHz，氯仿-D)：δppm1.11-1.29(m，2H)，1.28-1.66(m，8H)，1.67-1.87(m，3H)，1.86-2.11(m，5H)，2.12-2.42(m，2H)，2.43-2.72(m，2H)，2.72-3.04(m，4H)，3.05-3.30(m，J＝7.55，4.28Hz，2H)，3.31-3.57(m，2H)，3.57-3.78(m，J＝18.63Hz，2H)，3.85-3.93(m，3H)，3.96-4.15(m，2H)，4.37-4.76(m，J＝71.51Hz，1H)，5.04-5.25(m，1H)，6.86-7.02(m，1H)，7.07-7.16(m，J＝2.52Hz，1H)，7.26-7.36(m，J＝8.31，8.31Hz，1H)，7.44-7.69(m，1H)，7.90(d，J＝8.56Hz，1H)，8.00-8.29(m，J＝48.09Hz，1H)，9.33(s，1H)。

实施例29

(+/-)-8-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-二氟甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

产物通过相应酚性衍生物(phenolic derivative)的二氟甲基化作用(difluoromethylation)(ClCHF₂，1N NaOH，丙酮-异丙醇，室温)而制成，并通过制备性HPLC来纯化，且以单TFA盐形式分离，为米黄色固体。LC/MS：保留时间为1.798分钟；m/e 696(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(500MHz，氯仿-D)：δppm 0.25-0.81(m，3H)，0.81-1.33(m，6H)，1.29-1.64(m，4H)，1.78(s，2H)，1.85-2.17(m，J＝4.58Hz，4H)，2.36-2.59(m，2H)，2.79(t，J＝11.90Hz，2H)，2.84-2.93(m，1H)，2.97-3.10(m，5H)，3.08-3.23(m，1H)，3.45(s，1H)，4.40(s，1H)，5.07(s，1H)，6.44-6.66(m，1H)，6.73-6.86(m，J＝14.34Hz，1H)，7.17(d，J＝1.83Hz，1H)，7.28(dd，J＝8.55，2.44Hz，1H)，7.42-7.60(m，2H)，7.92(d，J＝8.55Hz，1H)，8.09(s，1H)，8.91(s，1H)。

实施例30

(+/-)-8-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-N-甲基-5-羧酰胺

产物在Mitsonobu条件(Ph₃P(三苯基膦)，DEAD，MeOH-THF，0-23℃)下通过(+/-)-8-环己基-N-(N，N-二甲基氨磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺的N-甲基化作用而制成，并通过制备性HPLC来纯化，且以单TFA盐形式分离，为米黄色固体。LC/MS：保留时间为1.828分钟；m/e674(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：1HNMR(400MHz，氯仿-D)：δppm 1.12-1.62(m，6H)，1.65-2.32(m，8H)，2.46(d，J＝5.29Hz，2H)，2.69-2.91(m，3H)，2.90-2.99(m，7H)，2.96-3.19(m，2H)，3.25-3.34(m，3H)，3.33-3.43(m，1H)，3.49(s，1H)，3.63(d，J＝15.36Hz，1H)，3.67-3.84(m，J＝1.51Hz，1H)，3.89(s，3H)，3.93-4.20(m，1H)，4.44-4.67(m，1H)，5.09-5.27(m，1H)，6.92-7.02(m，J＝8.69，2.64Hz，1H)，7.06-7.14(m，J＝2.52Hz，1H)，7.26-7.33(m，2H)，7.64(s，1H)，7.89(d，J＝8.31Hz，1H)。

实施例31

(+/-)-8-环己基-N-(N-环丙基氨磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-N-甲基-5-羧酰胺

使产物通过制备性HPLC来纯化，并以单TFA盐形式分离，为米黄色固体。LC/MS：保留时间为2.751分钟；m/e 672(MH⁺)。通过以下¹H NMR发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(400MHz，氯仿-D)：δppm0.55-0.96(m，3H)，1.05-1.59(m，6H)，1.60-2.19(m，8H)，2.22-2.45(m，2H)，2.44-2.81(m，6H)，2.81-3.09(m，4H)，3.36-3.52(m，J＝25.68Hz，1H)，3.59-3.80(m，2H)，3.82-3.94(m，3H)，3.97-4.19(m，1H)，5.14-5.29(m，1H)，5.99(s，1H)，6.90-7.02(m，J＝8.44，2.90Hz，1H)，7.06-7.14(m，J＝2.52Hz，1H)，7.26-7.35(m，1H)，7.53-7.71(m，1H)，7.93(d，J＝8.56Hz，1H)，8.23(s，1H)，9.95(s，1H)。

实施例32-36通过下述LC/MS方法分析：开始％B为0；最终％B为100；梯度时间为3分钟；停止时间为4分钟；流速为4毫升/分钟；波长为220；溶剂A为10％MeOH/90％H₂O/0.1％三氟醋酸；溶剂B为10％H₂O/90％MeOH/0.1％三氟醋酸；色谱柱为XBridge 4.6×50毫米S5。

实施例32

(+/-)-8-环己基-N-(甲基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-羧酰胺

将吲哚羧酸-环丙基酯(1.3克，2.83毫摩尔)与CDI(0.64克，3.97毫摩尔)在THF(20毫升)中的混合物在50℃加热0.5小时，冷却下来，并添加甲基磺酰胺(0.4克，4.2毫摩尔)与DBU(0.264毫升，1.77毫摩尔)。将混合物搅拌20小时，并以EtOAc稀释，以冷1N HCl(2×)和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，除去溶剂，且通过快速色谱(Biotage 40M)来纯化，得到化合物1-2(1.28克，85％)，为淡黄色固体。LC-MS保留时间为3.51；MS m/z 537(M+H)。发现磺酰胺以相互转化旋转异构体存在。主要异构体：¹H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm1.11-2.17(m，12H)，2.84-2.98(m，2H)，3.43(d，J＝14.86Hz，1H)，3.49(s，3H)，3.55(s，3H)，3.89(s，3H)，5.40(d，J＝15.11Hz，1H)，6.91-6.96(m，1H)，7.13(d，J＝2.52Hz，1H)，7.22-7.27(m，1H)，7.39(dd，J＝8.31，1.51Hz，1H)，7.85(d，J＝8.81Hz，1H)，8.23(d，J＝1.26Hz，1H)，8.75(s，1H)。

在磺酰胺-酯(1.28克，2.4毫摩尔)在THF(5毫升)与MeOH(5毫升)中的溶液内添加NaOH(1N，12毫升，12毫摩尔)。将其在室温搅拌3小时后，将混合物以EtOAc稀释，以冷1N HCl和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，及在真空中除去溶剂，得到酸，为米黄色固体(1.20克，96％)。LC-MS保留时间为3.46；MS m/z 523(M+H)。通过¹H NMR(400MHz，氯仿-D)发现化合物1-2以相互转化旋转异构体(约1/1)存在。

在酸(0.060克，0.11毫摩尔)与3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷二盐酸盐(0.034克，0.17毫摩尔)在DMC(1.5毫升)中的混合物内添加Et₃N(三乙胺)(0.096毫升，0.69毫摩尔)与HBTU(0.065克，0.17毫摩尔)。将混合物在室温搅拌0.5小时，以MeOH稀释，除去溶剂。使残留物溶于甲醇中，过滤，及通过制备性HPLC来纯化，得到产物的TFA盐(0.0378克，82％)。LC-MS保留时间为2.96；MS m/z 631(M+H)。发现产物以相互转化旋转异构体存在。¹H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 1.04-1.61(m，8H)，1.68-2.38(m，10H)，2.48-3.03(m，6H)，3.09-3.20(m，1H)3.30-3.78(m，2H)，3.41(s，3H)，3.88(s，3H)，4.05(d，J＝14.10Hz，1H)，5.06-5.28(m，1H)，6.97(dd，J＝8.81，2.27Hz，1H)，7.11(d，J＝2.27Hz，1H)，7.24-7.34(m，1H)，7.54-7.73(m，1H)，7.82-7.94(m，J＝7.18，5.41Hz，1H)，8.17(s，1H)。

实施例33

(+/-)-8-环己基-N-(乙基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

以类似于上文的方式制备产物：磺酰胺(0.47克，44％)；LC-MS保留时间为3.54分钟；MS m/z 551(M+H)；酸(0.43克，94％)；LC-MS保留时间为3.49分钟；MS m/z 537(M+H)。制备产物的TFA盐(0.0378克，71％)。LC-MS保留时间为3.028分钟；MS m/z 645(M+H)。发现产物以相互转化旋转异构体存在，主要异构体：¹H NMR(500MHz)ppm 1.12-2.37(m，19H)，2.51-2.66(m，1H)，2.69-3.03(m，4H)，3.08-3.22(m，1H)，3.21-3.83(m，8H)，3.90(s，3H)，5.11-5.28(m，1H)，6.87-6.95(m，1H)，6.97-7.00(m，1H)，7.12(d，J＝2.14Hz，1H)，7.30(d，J＝8.85Hz，1H)，7.88-7.96(m，1H)，8.08(s，1H)。

实施例34

(+/-)-8-环己基-N-(氮杂环丁烷-1-基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

以类似于上述的方式制备产物：磺酰胺(0.96克，59％)；LC-MS保留时间为3.58分钟；MS m/z 578(M+H)。发现化合物以相互转化旋转异构体(3/4)存在。主要异构体：¹H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 1.16-1.59(m，4H)，1.72(dd，J＝9.44，4.15Hz，3H)，1.88-2.12(m，4H)，2.24-2.36(m，2H)，2.75-2.97(m，2H)，3.44(d，J＝14.86Hz，1H)，3.56(s，3H)，3.89(s，3H)，4.09(d，1H)，4.24-4.37(m，4H)，5.41(d，J＝14.86Hz，1H)，6.92-6.96(m，1H)，7.13(d，J＝2.01Hz，1H)，7.24-7.30(m，1H)，7.39(dd，J＝8.31，1.51Hz，1H)，7.84-7.88(m，1H)，8.24(d，J＝1.51Hz，1H)；酸(0.93克，100％)；LC-MS保留时间为3.51分钟；MS m/z564(M+H)。发现化合物以相互转化旋转异构体(约3/4)存在。主要异构体：¹H NMR(400MHz)ppm 0.34-0.42(m，1H)，1.15-2.10(m，11H)，2.22-2.38(m，2H)，2.65-2.78(m，1H)，2.84-2.94(m，J＝3.02Hz，1H)，3.84(s，3H)，4.03(d，J＝15.11Hz，1H)，4.21-4.43(m，4H)，5.34(d，J＝14.86Hz，1H)，6.87(dd，J＝8.56，2.77Hz，1H)，6.98(d，J＝2.52Hz，1H)，7.21(d，J＝8.31Hz，1H)，7.69-7.75(m，1H)，7.86-7.90(m，1H)，8.13(s，1H)。制备产物的TFA盐：LC-MS保留时间为3.51分钟；MS m/z672(M+H)。基于¹H NMR(400MHz，氯仿-D)发现标题化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(400MHz)ppm 1.02-1.63(m，8H)，1.72-2.36(m，10H)，2.47-3.23(m，6H)，3.45(d，J＝29.46Hz，2H)，3.59-3.75(m，2H)，3.89(s，3H)，4.12-4.38(m，4H)，4.38-4.98(m，2H)，5.12-5.30(m，1H)，6.90-7.03(m，2H)，7.12(d，J＝2.52Hz，1H)，7.27-7.35(m，J＝9.06，9.06Hz，1H)，7.59-7.75(m，1H)，7.84-7.96(m，1H)。

实施例35

(+/-)-8-环己基-N-(N-乙基-N-甲氨基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂

-5-羧酰胺

以类似于如上文所述的方法制自酸。磺酰胺(0.109克，67％)。LC-MS保留时间为3.60分钟；MS m/z 580(M+H)。发现化合物以相互转化旋转异构体(约5/4)存在。主要异构体：¹H NMR(400MHz)ppm 1.16-2.09(m，14H)，2.73-2.93(m，2H)，3.07(s，3H)，3.31-3.52(m，3H)，3.76(s，3H)，3.88(s，3H)，4.05-4.10(m，1H)，5.40(d，J＝15.11Hz，1H)，6.88-6.93(m，1H)，7.13(d，J＝2.27Hz，1H)，7.22-7.29(m，1H)，7.33-7.42(m，1H)，7.82-7.86(m，1H)，8.19(d，J＝1.51Hz，1H)。酸(0.108克，100％)。LC-MS保留时间为3.55分钟；MS m/z 566(M+H)。制备产物的TFA盐(0.0437克，54％)。LC-MS保留时间为3.10分钟；MS m/z674(M+H)。¹H NMR(500MHz)ppm 1.14-1.62(m，6H)，1.22(t，J＝7.17Hz，3H)，1.69-2.21(m，10H)，2.25-3.31(m，11H)，3.02(s，3H)，3.43(q，J＝7.02Hz，2H)，3.55-3.80(m，1H)，3.89(s，3H)，5.08-5.29(m，1H)，6.93-7.00(m，1H)，7.11(d，J＝2.44Hz，1H)，7.28-7.31(m，1H)，7.39-7.56(m，1H)，7.85-7.91(m，1H)，8.04(s，1H)。

实施例36

(+/-)-8-环己基-N-(N，N-二乙基氨基磺酰基)-1，1a，2，12b-四氢-11-甲氧基-1a-(3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷-8-羰基)-环丙并[d]吲哚并[2，1-a][2]苯并氮杂-5-羧酰胺

以类似于如上文所述的方法，制自酸。磺酰胺(0.127克，67％)；LC-MS保留时间为3.64分钟；MS m/z 594(M+H)。发现化合物以相互转化旋转异构体存在：¹H NMR(400MHz)ppm 1.11-2.13(m，18H)，2.64(dd，J＝10.07，6.80Hz，1H)，2.84-2.96(m，1H)，3.34-3.67(m，4H)，3.75(s，3H)，3.88(s，3H)，4.03-4.10(m，1H)，5.40(d，J＝15.36Hz，1H)，6.90-6.95(m，1H)，7.13(d，J＝2.01Hz，1H)，7.21-7.29(m，1H)，7.33-7.39(m，1H)，7.83(d，J＝8.06Hz，1H)，8.20(d，J＝1.26Hz，1H)。酸：(0.126克，100％)。LC-MS保留时间为3.57分钟；MS m/z 580(M+H)。制备产物的TFA盐(0.431克，52％)。LC-MS保留时间为3.18分钟；MS m/z688(M+H)。¹H NMR(400MHz，氯仿-D)ppm 1.13-1.55(m，6H)，1.21(t，J＝7.18Hz，6H)，2.31-3.55(m，11H)，2.41-3.29(m，10H)，3.49(q，J＝7.05Hz，4H)，3.59-3.67(m，1H)，3.89(s，3H)，5.02-5.29(m，1H)，6.97(dd，J＝8.81，2.27Hz，1H)，7.10(d，J＝2.52Hz，1H)，7.28(d，J＝8.56Hz，1H)，7.36-7.49(m，1H)，7.83-7.91(m，1H)，7.95-8.06(m，1H)。

实施例37

在氮气下将纯净的四氟硼酸2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基

(0.0535克，0.167毫摩尔)添加至化合物1-4(0.0774克，0.128毫摩尔)、3-甲基-3，8-二氮杂二环[3.2.1]辛烷2HCl(0.026.4克，0.128毫摩尔)及TEA(0.071毫升，0.512毫摩尔)在DCM(2毫升)中的经搅拌混合物内。将混合物在室温搅拌1小时，并以MeOH(0.5毫升)使反应淬灭，然后蒸发至干，且通过反相HPLC来纯化，得到分离产物的单TFA盐形式(0.0613克，60％)，为米黄色固体。LC/MS：m/e 686(MH+)。LC/MS方法：开始％B为0，最终％B为100；梯度时间为3分钟；停止时间为4分钟；流速为4毫升/分钟；波长为220；溶剂A为10％MeOH/90％H₂O/0.1％三氟醋酸；溶剂B为10％H₂O/90％MeOH/0.1％三氟醋酸；色谱柱为XBridge 4.6×50毫米S5。

实施例38

使用二氯甲烷中的HBTU与TEA，酰胺的TFA盐(0.0465克，56％)制自酸(0.060克，0.104毫摩尔)与胺。LC-MS保留时间为3.146分钟；MSm/z(M+H)688。LC/MS方法：开始％B为0，最终％B为100；梯度时间为3分钟；停止时间为4分钟；流速为4毫升/分钟；波长为220；溶剂A为10％MeOH/90％H₂O/0.1％三氟醋酸；溶剂B为10％H₂O/90％MeOH/0.1％三氟醋酸；色谱柱为XBridge 4.6×50毫米S5。¹H NMR显示，存在旋转异构体，主要形式：¹H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.14-1.18(m，6H)1.19-2.12(m，16H)2.19-3.77(m，9H)2.95(s，3H)3.89(s，3H)3.95-5.02(m，4H)5.03-5.24(m，1H)6.97(dd，J＝8.81，2.77Hz，1H)7.11(d，J＝2.52Hz，1H)7.28(d，J＝8.56Hz，1H)7.40-7.64(m，1H)7.88(d，J＝8.31Hz，1H)8.07(宽单峰，1H)。