CN102309448B - 一种肺部给药的环丙沙星药用组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物和药剂学领域，涉及一种肺部给药的环丙沙星药用组合物。具体地，所述组合物以PEG修饰的脂质体作为药物载体，所述PEG修饰的脂质体是将PEG分子直接连接脂质体，或者用PEG分子包衣脂质体。本发明还涉及所述组合物的制备方法。本发明的组合物稳定性好，延长了作用时间，取得了更好的抗菌效果；并且能够快速达到肺部有效治疗浓度，生物利用度高，携带方便，可以自主用药。

Description

一种肺部给药的环丙沙星药用组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于药物和药剂学领域，涉及一种肺部给药的环丙沙星药用组合物及其制备方法。

背景技术

环丙沙星为第三代喹诺酮类抗菌药物，具抗菌谱广、抗菌力强、结构简单、给药方便等诸多特点。它通过作用于细菌DNA螺旋酶的A亚单位，抑制DNA的合成和复制而导致细菌死亡。环丙沙星具有广谱抗菌作用，对革兰氏阴性菌的抗菌活性很强。对下列细菌在体外具有良好的抗菌作用：肠杆菌科的大部分细菌，包括枸橼酸杆菌属，阴沟、产气肠杆菌等肠杆菌属，大肠埃希菌，克雷伯菌属，变形杆菌属，沙门氏菌属，志贺菌属，弧菌属和耶耳森菌属等。对多重耐药菌也具有抗菌活性，如对青霉素耐药的淋病奈瑟菌、产酶流感嗜血杆菌和莫拉菌属均有高度的抗菌活性。对铜绿假单胞菌(即俗称的绿脓杆菌)等假单胞菌属的大多数菌株具抗菌作用。对甲氧西林敏感的葡萄球菌也具抗菌活性，对肺炎链球菌、溶血性链球菌和粪肠球菌具中等抗菌活性。对沙眼衣原体、支原体、军团菌具良好的抗微生物作用，对分支杆菌和非典型分支杆菌也有抗菌活性；对厌氧菌的抗菌活性则较差。

环丙沙星口服给药起效慢，注射给药患者顺应性差。而肺部给药具有吸收表面积大，吸收部位血流丰富，避免肝脏的首过效应，，酶活性低，上皮屏障较薄及膜通透性高等特点，因此，能快速达到肺部有效治疗浓度，生物利用度高。肺部吸入给药新剂型主要有气雾剂、喷雾剂和粉雾剂，吸入给药具有使用方便、起效迅速的特点。粉雾剂为呼吸主动，克服了药物释放与吸入不协调的问题。

脂质体作为肺部给药的载体具有以下特点：肺泡表面活性物质主要由磷脂组成，主要成分为二棕榈酰磷脂酰胆碱。脂质体同样是由磷脂双分子层形成，与肺部内源性物质相同，因而两者有很好的生物相容性；在局部治疗中，使药物直接作用于靶点、起效快、剂量低，作用时间长，进入体循环的药物量少，副作用低；药物用脂质体包封后，可降低药物毒性，减轻肺部给药后的局部刺激和肺损伤。

已有加拿大文献公开了一种环丙沙星脂质体用于肺部吸入给药的制剂(Desai，T.R.et al.2003.Delivery of liposomes in drypowder form：a erodynamic dispersion properties.Eur.J.Pharm.Sci.20，459-467；Jonathan P.Wong，et al.2003.Liposomedelivery of ciprofloxacin against intracellular Francisellatularensis infection.Journal of Controlled Release.92，265-273.)，其由卵磷脂或二棕榈酰磷脂酰胆碱与胆固醇制备形成环丙沙星脂质体之后，喷雾冻干制得的粉末与乳糖混合，制成肺部干粉吸入剂或直接将环丙沙星脂质体制成喷雾剂(Lyle G.Sweeney et al.2005.Spray-freeze-dried liposomal ciprofloxacin powder for inhaledaerosol drug deliveryInternational Journal ofPharmaceutics.305，180-185；Tejas R.Desai et al.2001.Determination of surface free energy of interactive dry powderliposome formulations using capillary penetration technique.Colloids and Surfaces B：Biointerfaces.22，107-113；W.H.Finlay，J.P.Wong，1998，Regional lung deposition of nebulizediposome-encapsulated iprofloxacin.International Journal ofPharmaceutics.167，121-127.)。此法制得的脂质体不够稳定，易发生脂质体的渗漏，进而影响制剂质量。

本发明通过将磷脂材料直接连接PEG分子或用PEG分子包衣脂质体，获得PEG化的脂质体，以提高脂质体的稳定性，延长作用时间。本发明同时加入吸收促进剂，减少肺部清除率，利于环丙沙星的肺部吸收。

发明内容

本发明的一个方面涉及一种肺部给药的环丙沙星药用组合物，其以PEG修饰的脂质体作为环丙沙星的载体。具体地，所述PEG修饰的脂质体是PEG分子通过共价键与磷脂分子上的含氮碱基结合后制备脂质体，或者将制备所得脂质体注入到PEG溶液中形成包衣脂质体。

在本发明的一个实施方案中，所述PEG为PEG1500、PEG2000、或PEG4000，具体地，为PEG2000。

在本发明的一个实施方案中，所述环丙沙星为盐酸环丙沙星、或乳酸环丙沙星，具体地，为盐酸环丙沙星。

在本发明的一个实施方案中，所述脂质体为磷脂或其与其它物质连接形成的复合物，所述磷脂选自卵磷脂酰胆碱(EPC)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、二肉豆寇酰磷脂酰胆碱(DMPC)、二肉豆寇酰磷脂酰甘油(DMPG)中的一种或多种，所述复合物选自EPC-PEG、DPPC-PEG、DMPC-PEG、DMPG-PEG中的一种或多种。所述其它物质可以是，例如，胆固醇。所述环丙沙星与磷脂和/或磷脂复合物的摩尔比为1/1至1/10，具体地，为1/5。

在本发明的一个实施方案中，所述组合物为气雾剂、喷雾剂、或粉雾剂，具体地，为粉雾剂。

在本发明的一个实施方案中，所述组合物还包括抛射剂、助溶剂、表面活性剂、吸收促进剂、或赋形剂。

在本发明的一个实施方案中，所述抛射剂为四氟乙烷(HFA134a)、和/或七氟丙烷(HFA227)，所述助溶剂为乙醇、和/或丙二醇，所述表面活性剂选自吐温80、司盘85、油酸、磷脂酰胆碱中的一种或多种，所述吸收促进剂选自胆酸钠、辛酸钠、苄泽78、稀土化合物氯化钆中的一种或多种。

在本发明的一个实施方案中，所述赋形剂选自乳糖、甘露醇、氨基酸、或磷脂，具体地，为乳糖，并且所述环丙沙星与赋形剂乳糖的质量比为1/3至1/10，优选1/5。

在本发明的一个实施方案中，所述组合物的粒度范围为100μm至200μm，具体地，为150μm。本发明通过使用纳米粒度和Zeta电位及分子量分析仪测定乳糖的粒度，选择其粒度范围为100μm至200μm，优选150μm，以达到乳糖作为粉雾剂载体的需求。

本发明的还一个方面涉及上述的组合物的制备方法，包括将PEG分子通过共价键与磷脂分子上的含氮碱基结合后再制备脂质体，或者或者将制备所得脂质体注入到PEG溶液中形成包衣脂质体。

发明的有益效果

1)本发明的组合物克服了现有肺部给药的环丙沙星组合物中脂质体不够稳定，易发生脂质体渗漏的不足，组合物(包括组合物中的脂质体)的稳定性好，并且延长了作用时间，取得了更好的抗菌效果；

2)本发明克服了环丙沙星口服给药起效慢，注射给药患者顺应性差的缺点，能够快速达到肺部有效治疗浓度，生物利用度高，并且携带方便，可以自主用药。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

实施例1：对照样品的制备

参照如下文献制备对照样品：

Tejas R.Desai et al.2001.Determination of surface freeenergy of interactive dry powder liposome formulations usingcapillary penetration technique.Colloids and Surfaces B：Biointerfaces.22，107-113；W.H.Finlay，J.P.Wong，1998，Regional lung deposition of nebulized iposome-encapsulatediprofloxacin.International Journal of Pharmaceutics.167，121-127.

具体地，处方如下：

盐酸环丙沙星            0.11g

DPPC                    0.55g

胆固醇                  0.45g

乳糖                    2.2g

0.6M硫酸铵水溶液        20ml

制备方法：取处方量的DPPC和胆固醇溶于氯仿减压蒸发，用0.6M的硫酸铵水合，超声整粒，用一定量生理盐水透析12h，加入处方量的药物，50℃水浴孵化5min，冻干后制成极细的粉末，将粉末与乳糖混合均匀装入特定容器即得样品1。

实施例2：本发明的喷雾剂剂型样品的制备

处方如下：

盐酸环丙沙星            0.11g

DPPC-PEG2000            0.55g

胆固醇                  0.45g

吐温                    800.1ml

0.6M硫酸铵水溶液        20ml

制备方法：取处方量的DPPC-PEG2000和胆固醇溶于氯仿减压蒸发，用0.6M的硫酸铵水合，超声整粒，用一定量生理盐水透析12h，加入处方量的药物，50℃水浴孵化5min。将此样品与吐温80混合均匀装入特定喷瓶中即得样品2。

实施例3：本发明的气雾剂剂型样品的制备

处方如下：

盐酸环丙沙星                0.11g

DPPC-PEG2000                0.55g

胆固醇                      0.45g

吐温80                      0.1ml

四氟乙烷(HFA134a)           3ml

0.6M硫酸铵水溶液            20ml

制得方法：取处方量的DPPC-PEG2000和胆固醇溶于氯仿减压蒸发，用0.6M的硫酸铵水合，超声整粒，用一定量生理盐水透析12h，加入处方量的药物，50℃水浴孵化5min。将此样品与吐温80混合均匀装入特定容器后，充填四氟甲烷即得样品3。

实施例4：本发明的粉雾剂剂型样品的制备

处方如下：

盐酸环丙沙星                0.11g

DPPC-PEG2000                0.55g

胆固醇                      0.45g

0.6M硫酸铵水溶液            20ml

乳糖                        2.2g

制备方法：取处方量的DPPC-PEG2000和胆固醇溶于氯仿减压蒸发，用0.6M的硫酸铵水合，超声整粒，用一定量生理盐水透析12h，加入处方量的药物，50℃水浴孵化5min，喷雾冻干后制成极细的粉末，将粉末与乳糖混合均匀装入特定容器即得样品4。

实施例5：肺炎链球菌抗菌试验

1.所用材料和试剂

动物：昆明种小鼠体重18-22g，雌雄各半。

菌株：肺炎链球菌。

受试药组：给药为样品4。

对照组：给药为样品1。

肺炎链球菌组：给生理盐水。

2.试验方法

(1)菌株的MLD的测定：将临床分离菌株在试验前一天培养于肉汤培养基上，用5％酵母溶液制成一定浓度的菌悬液，取小鼠若干，腹腔注射5％酵母，不同浓度的肺炎链球菌，注射体积为0.5ml/只，记录一周的动物死亡数，找出上述动物死亡的MLD。测得肺炎链球菌的MLD为10⁶/ml。

(2)抗菌试验：取110只小鼠，体重18-22g，雌雄各半，随机分成11组，每组10只。将本发明受试药组和阳性对照药组，在感染前四天通过吸入给药装置给予药物，每天给药一次，共四天。肺炎链球菌腹腔感染量为10⁶个/毫升上述5％酵母溶液制成一定浓度的菌悬液。然后观察1周，记录动物存活情况，计算ED₅₀及95％可信限。

3.抗菌试验结果

表1：对肺炎链球菌感染小鼠的抗菌结果

表1的结果表明，本发明具有抗肺炎链球菌的作用，且其抗菌效果优于对照药。

实施例6：金黄色葡萄球菌抗菌试验

本实施例中，除了所用菌株为金黄色葡萄球菌，其余试验材料和方法与实施例5中一样。测得金黄色葡萄球菌的MLD为10⁶个/ml。金黄色葡萄球菌感染量为10⁶个/ml。结果如下面的表2所示。

表2：对金黄色葡萄球菌感染小鼠的抗菌结果

表2的结果表明，本发明有抗金黄色葡萄球菌感染的作用，且效果优于对照药。

实施例7：伯肺炎杆菌抗菌试验

本实施例中，除了所用菌株为伯肺炎杆菌，其余试验材料和方法与实施例5中一样。测得伯肺炎杆菌的MLD为10⁵个/ml。伯肺炎杆菌感染量为10⁵个/ml。结果如下面的表3所示。

表3：对伯肺炎杆菌感染小鼠的抗菌结果

表3的结果表明，本发明有抗伯肺炎杆菌感染的作用，且效果优于对照药。

尽管本发明的具体实施方式已经得到详细的描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些改变均在本发明的保护范围之内。本发明的全部范围由所附权利要求及其任何等同物给出。

Claims (2)

1.一种肺部给药的环丙沙星药用组合物，其为粉雾剂，并且其组成如下：

2.权利要求1所述的肺部给药的环丙沙星药用组合物的制备方法，包括下述步骤：

取DPPC-PEG2000和胆固醇溶于氯仿减压蒸发，用0.6M的硫酸铵水溶液水合，超声整粒，用一定量生理盐水透析12h，加入盐酸环丙沙星，50℃水浴孵化5min，喷雾冻干后制成极细的粉末，将粉末与乳糖混合均匀装入特定容器即得。