CN114680077A - 一种制备机械压力抑制增生性瘢痕大鼠模型的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种制备机械压力抑制增生性瘢痕大鼠模型的方法，包括：(1)选取鼠尾背侧正中造有全层皮肤创面的大鼠，将大鼠尾部固定在金属环上，创面位于金属环弧形中轴，利用金属环作为牵引源，牵拉所述创面，直至创面愈合形成瘢痕；(2)根据鼠尾周径和直径，设计和裁剪弹力套，并植入压力探测芯片，所述弹力套安装在所述大鼠的所述瘢痕处，定时测定所述瘢痕处的压力值，确保瘢痕处的压力值保持在15mm Hg‑20mm Hg，如果压力值上升，则拆除弹力套，在鼠尾的瘢痕处重新裁剪和安装弹力套，确保新弹力套产生的压力值不变，直至建模结束。本发明所述方法制备的鼠尾模型更容易获得抗体进行分子水平验证，更能保证试验的客观性。
Description
技术领域
本发明涉及动物建模领域，具体而言，涉及一种制备机械压力抑制增生性瘢痕大鼠模型的方法。
背景技术
压力疗法抑制人病理性瘢痕已经获得广泛认可，但是目前没有公认的、可用分子生物技术验证的动物模型用于基础研究，受抗体种属限制，关于压力抑制增生性瘢痕的动物模型无法进行分子水平验证，模型更加不完善。有鉴于此，特提供本发明。
发明内容
本发明提供一种制备机械压力抑制增生性瘢痕大鼠模型的方法，包括：
(1)选取鼠尾背侧正中造有全层皮肤创面的大鼠，将大鼠尾部固定在金属环上，创面位于金属环弧形中轴，利用金属环作为牵引源，牵拉所述创面，直至创面愈合形成瘢痕；
(2)根据鼠尾周径和直径，设计和裁剪弹力套，并植入压力探测芯片，所述弹力套安装在所述大鼠的所述瘢痕处，定时测定所述瘢痕处的压力值，确保瘢痕处的压力值保持在15mm Hg-20mm Hg，如果压力值上升，则拆除弹力套，在鼠尾的瘢痕处重新裁剪和安装弹力套，确保新弹力套产生的压力值不变，直至建模结束。
在一些具体的实施方式中，所述方法同时制备多个压力抑制增生性瘢痕大鼠模型，通过裁剪设计和安装植入压力探测芯片保证施加所述弹力套时，每个大鼠瘢痕模型接受相同的压力。
在一些具体的实施方式中，所述方法还包括在步骤(2)期间，检测到因鼠尾生长速度不同导致的弹力套压力改变时，及时拆除并调整弹力套；同时，安装弹力套期间，所述瘢痕处如需给药，拆除所述弹力套以及给药，并在给药后重新安装弹力套继续加压。
在一些具体的实施方式中，步骤(1)所述牵引的时间为12～16天；步骤(2)所述弹力套的加压时间为6～8天。
在一些具体的实施方式中，步骤(1)所述牵引的时间为14天；步骤(2)所述弹力套的加压时间为7天。
在一些具体的实施方式中，所述创面为6×6mm。
在一些具体的实施方式中，所述弹力套的材质包括氨纶和锦纶。
在一些具体的实施方式中，所述弹力套由28％氨纶和72％锦纶组成。
有益效果
与现有技术相比，本发明所述制备机械压力抑制增生性瘢痕大鼠模型的方法，至少存在以下有益效果：
(1)大鼠为典型的模型动物，研究广泛，保证抗体来源丰富，可开展丰度的分子水平验证，增加动物模型的正确性，突破了目前没有用于分子水平验证的针对压力疗法抑制增生性瘢痕动物模型的限制；
(2)压力疗法抑制人增生性瘢痕是目前公认的增生性瘢痕标准预防和治疗方案，本发明所述方法利用弹力套对瘢痕进行加压处理，模拟弹力衣抑制人增生性瘢痕的条件，获得的模型更贴近实际临床治疗方案。
(3)本发明创造性地在模型制备过程中，在弹力套中植入压力探测芯片，定时检测和调整弹力套，确保在整个建模过程中，虽然鼠尾在长大，但瘢痕处接受的压力值大小不变，以及确保在同时制备多个大鼠模型时，多个大鼠接受的压力值大小相同，保证试验的客观性。
(4)本发明所述方法制备的弹力套与临床所用抑制瘢痕的弹力套原理、材质相同，更贴近实际临床治疗方案，鼠尾模型更容易获得抗体进行分子水平验证，更能保证试验的客观性。
附图说明
图1A为压力抑制增生性瘢痕大鼠动物模型示意图；
图1B为牵拉力诱导鼠尾增生瘢痕动物模型；
图1C为FlexiForce测压；
图1D为增生性瘢痕外观，和弹力套治疗1周后瘢痕外观；
图1E为HE、Masson染色结果。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1机械压力抑制增生性瘢痕大鼠模型的构建方法
1.取6-8周、体重在160-180g左右的雄性Sprague Dawley(SD)大鼠，编号，距离鼠尾根部4.5cm处标记，制备大小为6×6mm的全层创面。
2.采用直径为2cm的金属环为牵拉力来源，胶布捆绑，使创面位于金属环弧形中心，保证牵拉力。
3.鼠尾生长会导致胶布捆绑过紧，因此间隔3天更换捆绑金属环胶布，注意创面愈合情况及鼠尾是否水肿。
4.建模14天左右创面愈合。
5.创面愈合后，根据距鼠尾根部不同距离的鼠尾周径，裁剪由28％氨纶+72％锦纶定制的鼠尾弹力套，将Flexiforce压力探测芯片植入弹力套中，使用FlexiForce压力测定装置测压，保证每次裁剪后的弹力套压力值相同以及所有鼠尾瘢痕接受局部压力值相同。继续金属环牵拉所述瘢痕至实验结束(参见图1B，图1C和图1D)。
6.在每次裁剪完，安装弹力套后，会采用Flexiforce压力探测装置测压，同时每隔24小时进行压力检测，随着鼠尾生长，压力值增大时，撤除原有弹力套，根据尺寸重新定制新的弹力套。
7.弹力套加压1周后取材，如需药物干预，可拆除弹力套注射药物，然后继续弹力套加压。在整个加压过程中，确保压力值保持在15mm Hg-20mm Hg范围内。
8.模型构建好，对鼠尾瘢痕处进行HE和Masson染色(参见图1E)。
最后应当说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，但本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (8)
1.一种制备机械压力抑制增生性瘢痕大鼠模型的方法，其特征在于，包括：
(1)选取鼠尾背侧正中造有全层皮肤创面的大鼠，将大鼠尾部固定在金属环上，创面位于金属环弧形中轴，利用金属环作为牵引源，牵拉所述创面，直至创面愈合形成瘢痕；
(2)根据鼠尾周径和直径，设计和裁剪弹力套，并植入压力探测芯片，所述弹力套安装在所述大鼠的所述瘢痕处，定时测定所述瘢痕处的压力值，确保瘢痕处的压力值保持在15mm Hg-20mm Hg，如果压力值上升，则拆除弹力套，在鼠尾的瘢痕处重新裁剪和安装弹力套，确保新弹力套产生的压力值不变，直至建模结束。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法同时制备多个压力抑制增生性瘢痕大鼠模型，通过裁剪设计和安装植入压力探测芯片保证施加所述弹力套时，每个大鼠瘢痕模型接受相同的压力。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括在步骤(2)期间，检测到因鼠尾生长速度不同导致的弹力套压力改变时，及时拆除并调整弹力套；同时，安装弹力套期间，所述瘢痕处如需给药，拆除所述弹力套以及给药，并在给药后重新安装弹力套继续加压。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述牵引的时间为12～16天；步骤(2)所述弹力套的加压时间为6～8天。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述牵引的时间为14天；步骤(2)所述弹力套的加压时间为7天。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述创面为6×6mm。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述弹力套的材质包括氨纶和锦纶。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述弹力套由28％氨纶和72％锦纶组成。
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