DE69626203T2

DE69626203T2 - Isothiazolone

Info

Publication number: DE69626203T2
Application number: DE69626203T
Authority: DE
Inventors: Louis Bolton; Michael Domagala; Faith Elslager; Dean Gogliotti; Stoeber Purchase; Peter Sanchez; Kalidas Trivedi
Original assignee: Warner Lambert Co LLC
Current assignee: Warner Lambert Co LLC
Priority date: 1995-05-31
Filing date: 1996-04-26
Publication date: 2003-11-20
Anticipated expiration: 2016-04-27
Also published as: AU723233B2; US6133270A; OA10745A; ATE232385T1; EA199700444A1; SV1996000026A; MX9707948A; CZ373997A3; HRP960216A2; NZ307023A; UY24244A1; DK0828488T3; ZA964441B; CO4700292A1; BG62792B1; SK162297A3; PT828488E; PL323683A1; HUP9900917A3; CA2218253A1

Description

GEBIET DER ERFINDUNG

Durch die vorliegende Erfindung erfolgt die Bereitstellung von Isothiazolonderivaten, die als antivirale Mittel, entzündungshemmende Mittel und Anti-Atherosklerosemittel verwendbar sind. Die Erfindung ist insbesondere auf bicyclische und polycyclische Isothiazolone gerichtet, die zur Behandlung von Retroviren, die das Myeloblastenleukämie-assozierte Virus, Rous-Sarkom-Virus, humane T-Zellen- Leukämie-Virus und HIV umfassen, verwendbar sind. Die Verbindungen sind auch zur Behandlung von Entzündung und Atherosklerose wirksam.

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

Man kennt bestimmte Isothiazolone, die verschiedene pharmazeutische Verwendbarkeit, insbesondere antimikrobielle Aktivität besitzen. Okachi et al., J. Med. Chem., 1985; 28: 1772-1779, beschreiben mehrere 1,2-Benzisothiazolone, die eine marginale antibiotische Aktivität besitzen und die primär als Zwischenprodukte bei der Synthese von 2,2'-Dithiobis(benzamid)derivaten verwendet wurden. Carmellino et al., Eur. J. Med. Chem., 1994; 29 : 743-751, offenbaren eine Vielzahl von 1,2-Benzisothiazolonen als antibakterielle und Antifungusmittel. Miller et al., US-Patent 3 517 022, offenbaren 2-Carbamoyl-1,2-benzisothiazolone, die gegen Bakterien, Pilze und Algen wirksam sein sollen. Morley beschreibt im US-Patent 3 012 039 2-Alkyl-1,2-benzisothiazolone, die als antibakterielle Mittel und Antifungusmittel verwendbar sind. Sherba et al., US-Patent 5 219 875, beschreiben synergistische antimikrobielle Zusammensetzungen, die 2-unsubstituiertes 1,2-Benzisothiazolin-3-on und Iodpropargylbutylcarbamat umfassen. Laber et al., US-Patent 4 049 817, beschreiben synergistische antimikrobielle Zusammensetzungen, die eine Vielzahl von 2-substituierten und 2-unsubstituierten Benzisothiazolinonen enthalten.
Grivos, US-Patent 3 761 489, beschreibt eine Reihe von substituierten N-Alkyl-benzisothiazolinonen, die gegen Bakterien, Pilze und Hefen wirksam sein sollen. Grivos, US- Patent 3 661 974, beschreibt die Synthese von verschiedenen 2-substituierten 1,2-Benzisothiazolin-3-onen aus 2-Carbalkoxy-phenyl-sulfonamiden. Die Thiazolinone sollen als antibakterielle Mittel und antiseptische Mittel verwendbar sein.
Keine der Isothiazolone beschreibenden Literaturstellen hat offenbart, dass diese Verbindungen zur Behandlung und Prophylaxe von Virusinfektionen, Entzündung oder Atherosklerose verwendet werden können. Wir fanden nun heraus, dass Isothiazolone wirksame Anti-Retrovirusmittel sind, und eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung von pharmazeutischen Mitteln zur Prophylaxe und Behandlung von Viruserkrankungen, die Krankheiten umfassen, die durch das humane T-Zellen-Leukämie-Virus, Rous-Sarkom- Virus, das Myeloblastenleukämie-assoziierte Virus, verschiedene Tierretroviren sowie HIV verursacht sind. Eine weitere Aufgabe der Erfindung ist die Bereitstellung bestimmter Isothiazolone, die neue Verbindungen sind, und die zur Behandlung von durch HIV verursachten Erkrankungen besonders geeignet sind. Eine weitere Aufgabe ist die Bereitstellung von Isothiazolon-Arzneimitteln zur Behandlung von Entzündung und Atherosklerose.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Durch die vorliegende Erfindung erfolgt die Bereitstellung von neuen Verbindungen der Formel Ia
worin:
R¹ und R² unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, Het(CR&sup6;R&sup7;)m-, Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m-, O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, Hydroxy, Nitro, Cyano, NR³R&sup4;, NR³OR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, SO&sub3;H, S(O)mNR³Rq, COR³ sind oder zusammen Oxo (O=) oder Methylendioxy (-O-CH&sub2;-O-) bedeuten;
m 0, 1 oder 2 ist;
R³ und R&sup4; unabhängig voneinander Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, Het(CR&sup6;R)m- oder Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m- sind;
R&sup6; und R' unabhängig voneinander Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, CO&sub2;R³, Hydroxy, CONR³R&sup4; oder Cyano sind;
R&sup5; Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, CO-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m-, Het(CR&sup6;R&sup7;)m- bedeutet, und wobei die im vorhergehenden genannten Alkyl-, Cycloalkyl-, Phenyl- und Het-Gruppen optional substituiert sein können mit 1 bis 3 Gruppen, die ausgewählt sind aus Halogen, Hydroxy, Nitro, NR³R&sup4;, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, S(O)mNR³R&sup4; und COR³, wobei m, R³ und R&sup4; wie im vorhergehenden definiert sind, mit dem Vorbehalt, dass, wenn R¹ und R² beide Wasserstoff sind, R&sub5; dann nicht Wasserstoff, unsubstituiertes Phenyl oder Phenyl, das substituiert ist mit C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl-COO-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl-COOH, -COOH, -COO-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, -O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl-COOH oder Halogen, sein kann,
und den pharmazeutisch akzeptablen Salzen und Solvaten derselben.
Eine weitere Aufgabe der Erfindung ist die Verwendung von Verbindungen der Formel I
worin:
R¹ und R² unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, substituiertes oder unsubstituiertes Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m-, substituiertes oder unsubstituiertes Het(CR&sup6;R&sup7;)m-, O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, Hydroxy, Cyano; Nitro, NR³R&sup4;, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, SO&sub3;H, S(O)mNR³R&sup4;, COR³ sind oder zusammen Oxo (O=) oder Methylendioxy (-O-CH&sub2;-O-) bedeuten;
m 0, 1 oder 2 ist;
R³ und R&sup4; unabhängig voneinander Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, Het(CR&sup6;R&sup7;)m- oder Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m- sind;
R&sup5; Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, CO-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, unsubstituiertes oder substituiertes Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m-, unsubstituiertes oder substituiertes Het(CR&sup6;R&sup7;)m-, wobei die Alkyl-, Cycloalkyl-, Phenyl- und Het-Gruppen optional substituiert sein können mit Halogen, Hydroxy, NR³R&sup4;, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, SO&sub3;H, S(O)mNR³R&sup4; und COR³, ist;
R&sup6; und R&sup7; unabhängig voneinander Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, CO&sub2;R³, Hydroxy, CONR³R&sup4; oder Cyano sind;
und den pharmazeutisch akzeptablen Salzen und Solvaten derselben zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Prävention oder Behandlung von Retrovirusinfektionen.
Bevorzugt sind Verbindungen der Formel I, worin R&sup5;
bedeutet.
Verwandte Verbindungen einer Thiazolonstruktur wurden offenbart in:
- EP-A-572 259 (D1)
- Farmaco, Edizione Scientifica, Band 39, Nr. 9, 1984, S. 788-896 (D2)
- Farmaco, Edizione Scientifica, Band 44, Nr. 9, 1989, S. 789-807 (D3)
- C.A. Band 76, Nr. 1 (D4) Abstr. 254
- I. Med. Chem., Band 37, Nr. 19, S. 3071-3078 (D5)
- C.A. Band 109, Nr. 23, 1988, Abstr. Nr. 2 110 389 (D6)
- FR-A-2 555 450 (D7)
- DE-27 18 707 (D8a)
- US-A-3 965 107 (D8b)
- FR-A-2 492 376 (D9)
- THL Band 34, Nr. 51 (D10), S. 8213-8216
- EP-A-0 051 193 (D11)
Jedoch liegt keines der obigen Dokumente mit Ausnahme von D1 eine Anti-HIV-Aktivität oder allgemein antivirale Wirkungen nahe. Die Struktur der Verbindungen von (D1) unterscheidet sich in mindestens zwei verschiedenen Richtungen von den Verbindungen der vorliegenden Erfindung.
In einer bevorzugten Ausführungsform sind die Isothiazolone der Erfindung Benzisothiazolin-3-one der Formel I, worin R¹ und R² unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl oder O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl bedeuten und R&sup5; C&sub1;-C&sub6;- Alkyl, substituiertes C&sub1;-C&sub6;-Alkyl oder unsubstituiertes oder substituiertes Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m- bedeutet.
Besonders bevorzugte Arzneimittel zur Behandlung von Virusinfektionen verwenden Verbindungen der Formel II
worin R¹ Wasserstoff, Halogen, Alkyl oder Alkoxy bedeutet und R&sup5; C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, das mit einer oder 2 CO&sub2;R³-Gruppen substituiert ist, oder Phenyl, das mit S(O)mNR³R&sup4;, worin R³ und R&sup4; wie oben definiert sind, substituiert ist, bedeutet.
Durch die vorliegende Erfindung erfolgt ferner die Bereitstellung der Verwendung der obigen Verbindungen zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung von Erkrankungen, die durch Retroviren, insbesondere HIV verursacht sind.
Eine bevorzugte Gruppe von Verbindungen, die durch die Erfindung bereitgestellt werden, besitzen die Formel IV
worin X CH bedeutet und R¹, R², R³ und R&sup4; wie oben definiert sind.
Eine weitere bevorzugte Gruppe von Verbindungen besitzen die Formel V
worin X CH bedeutet und R¹ Wasserstoff, Halogen, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl oder O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl bedeutet.
Eine weitere bevorzugte Gruppe von Verbindungen besitzen die Formel VI
worin X, R¹ und R² wie oben definiert sind und R&sup5; C&sub1;-C&sub6;- Alkyl, das mit einer oder zwei CO&sub2;R³-Gruppen, worin R³ wie oben definiert ist und vorzugsweise Wasserstoff oder Alkyl bedeutet, substituiert ist, ist.
Eine besonders bevorzugte Gruppe von Verbindungen sind Verbindungen mit einer carboxysubstituierten Alkylgruppe für R&sup5;, beispielsweise Verbindungen der Formel VII,
worin R¹ und R² wie oben definiert sind, X CH bedeutet und R&sup5; C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, das mit einer oder zwei Carboxygruppen substituiert ist und optional mit Hydroxy oder Amino substituiert ist, bedeutet. Besonders bevorzugt sind die Verbindungen, worin R&sup5; einen Rest einer α-Aminosäure bedeutet, wobei die Aminogruppe der α-Aminosäure ein Teil des Isothiazolonrings ist. Typische Aminosäurereste sind die von Glycin, Alanin, Valin, Leucin, Isoleucin, Serin, Threonin, Lysin, δ-Hydroxylysin, Asparaginsäure, Glutaminsäure und dergleichen.
In einer weiteren bevorzugten Gruppe von Verbindungen der Formel I ist R&sup5;
In einer weiteren bevorzugten Gruppe von Verbindungen der Formel I ist R&sup5;

DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG

"C&sub1;-C&sub6;-Alkyl" bedeutet eine gerade oder verzweigte aliphatische Gruppe mit 1-6 Kohlenstoffatomen. Beispiele umfassen Methyl, Ethyl, Isobutyl, n-Pentyl und Isohexyl.
Der Ausdruck "O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl" bedeutet die im vorhergehenden genannten Alkylreste, die über Sauerstoff gebunden sind, wobei Beispiele hierfür Methoxy, Ethoxy, Isopropoxy, tert.-Butoxy u. dgl. umfassen. Typische "C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl"- Gruppen umfassen Cyclopropyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl und dergleichen.
"Het" ist ein cyclischer oder bicyclischer Ring mit 4 bis 10 Atomen, von denen ein bis vier aus O, S oder N ausgewählt sind. Het umfasst nicht-aromatische Gruppen, wie Morpholino und Pyrrolidino. Bevorzugte Het-Gruppen sind 5- oder 6-gliedrige monocyclische aromatische Ringe mit 1 oder 2 Heteroatomen. Het umfasst bicyclische Ringe, wie Benzofuran, Isothiazolon und Indol. Typische durch Het dargestellte Gruppen umfassen
und dergleichen. Andere typische bevorzugte Het-Gruppen umfassen Pyrimidin, Pyridazin, Pyrazin, Oxazol, Pyrazol und Thiazol.
Wie im vorhergehenden angegeben können die Alkyl-, Cycloalkyl-, Phenyl- und Het-Gruppen, die von den Definitionen von R¹, R², R³, R&sup4; und R&sup5; umfasst werden, mit 1 bis 3 Gruppen, die aus Halogen, Hydroxy, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, NR³R&sup4;, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, SO&sub3;H, S(O)mNR³R&sup4; und COR³, worin m, R³ und R&sup4; wie oben definiert sind, ausgewählt sind, substituiert sein. Typische substituierte Alkylgruppen umfassen daher Chlormethyl, 3-Brompropyl, Trifluormethyl, 4-Hydroxyhexyl, 1-Carboxy-2-methylbutyl, 3-Methylthiobutyl, 4-Methylsulfonylbutyl, Dimethylaminomethyl, 2,3-Dibrombutyl, 2-Amino-3- chlor-4-carboxybutyl, 3-Acetamidopropyl, 2-Acetylethyl, 2-Methoxycarbonylethyl, 1,1-Diacetylpropyl und dergleichen.
Bevorzugte substituierte Alkylgruppen sind diejenigen mit 1, 2 oder 3 Substituenten, die aus Halogen, Hydroxy und Carboxy ausgewählt sind. Diese bevorzugten Gruppen umfassen 1-Brom-2-hydroxypropyl, 1,1-Dimethyl-3-hydroxypropyl, 1-Hydroxymethyl-2-fluormethyl-3-carboxybutyl, 1-Carboxy-2-methylbutyl, 1-Carboxy-3-methylbutyl, 1,2,3- Trihydroxypentyl und dergleichen.
Typische substituierte Cycloalkylgruppen umfassen 2- Fluorcyclopropyl, 2,2-Dibromcyclopropyl, 2- Carboxycyclobutyl, 2-Aminosulfonylcyclopentyl, 2-Amino-3- carboxycyclopentyl und 3-Isopropylsulfinylcyclohexyl.
In den obigen Formeln können R¹ und R² Halogen sein, wobei dieser Ausdruck Fluor, Chlor, Brom und Iod umfasst. R¹, R² und R&sup5; können die Gruppe Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m- umfassen, wobei das Phenyl unsubstituiert oder mit Halogen, Hydroxy, NR³R&sup4;, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, S(O)mNR³R&sup4;, SO&sub3;H und COR³ substituiert sein kann. Typische NR³R&sup4;-Substituenten umfassen Amino, Methylamino, Dimethylamino, Ethyl-isohexylamino, Cyclopropylamino, 3-Pyridylamino, N-Methyl- 2-thienylamino, Benzylamino und 3-Chlorbenzylamino.
Typische durch NR³COR&sup4; definierte Substituenten umfassen Cyclopropylcarbonylamino, N-Isobutyl-N-cyclohexylcarbonylamino, Acetamido und dergleichen. Typische durch CO&sub2;R³ definierte Gruppen umfassen die freie Carbonsäure, wenn R³ Wasserstoff ist, und Ester, wie C&sub1;-C&sub6;-Alkylester, Benzylester, Cyclobutylester und dergleichen. Amidsubstituenten sind durch CONR³R&sup4; definiert und sie umfassen Carboxamid, N-Methyl-carboxamid und N,N-Diethylcarboxamid. Typische S(O)mR³-Substituentengruppen umfassen Methylthio, Ethylsulfinyl, Cyclopropylsulfonyl und dergleichen. Sulfonamidsubstituenten S(O)mNR³R&sup4; umfassen N-Methylsufonamid, N,N-Dimethylsulfonamid und dergleichen. Typische Phenyl- (CR&sup6;R&sup7;)m-Gruppen, die mit den genannten Substituentengruppen substituiert sind, umfassen daher:
Typisches substituiertes Het-(CR&sup6;R&sup7;)m- umfasst:
Die Verbindungen gemäß der vorliegenden Erfindung können nach einem von mehreren Syntheseverfahren unter Verwendung bekannter Verfahrensweisen hergestellt werden. Beispielsweise kann ein O-Halogensulfenylbenzoylhalogenid mit einem Amin gemäß dem folgenden Reaktionsschema, das das allgemeine Verfahren von Fisher und Hurni, Arzneimittel Forsch., 1964; 14: 1301, ist, umgesetzt werden:
worin R¹, R² und R&sup5; wie oben definiert sind und "halo" Chlor, Brom, Iod und dergleichen umfasst. Typischerweise werden das Amin und Halogensulfenylbenzoylhalogenid in etwa äquimolaren Mengen verwendet; jedoch kann gegebenenfalls ein Überschuss des Amins verwendet werden. Die Reaktion ist im allgemeinen innerhalb von 1-8 h im wesentlichen vollständig, wenn sie in einem gemeinsamen Lösemittel, wie Toluol, Ethylendichlorid oder Methylenchlorid, bei einer Temperatur von etwa 0ºC bis 45ºC durchgeführt wird. Säurefänger, wie Triethylamin, können nach Bedarf verwendet werden. Das Produkt Isothiazolon wird durch Entfernen des Reaktionslösemittels problemlos isoliert, und eine weitere Reinigung kann durch Kristallisation oder Chromatographie nach Bedarf durchgeführt werden.
Ein alternatives Syntheseverfahren umfasst die Reaktion eines 2-unsubstituierten Isothiazolons mit einer Verbindung R&sub5;L, wobei L eine abspaltbare Gruppe, wie Halogen, ist und A ein Benzolring ist. Diese Reaktion lässt sich wie folgt angeben:
Spezielle Reaktionsbedingungen, wie die Wahl von Lösemitteln, Temperatur und Molverhältnissen, Säurefängern und dergleichen, sind ähnlich zu dem im vorhergehenden beschriebenen Verfahren und einem Fachmann geläufig.
Ein bevorzugtes Verfahren zur Herstellung der Isothiazolone umfasst die Disproportionierung eines 2,2'-Dithiobisarylamids durch Reaktion mit einem Oxidationsmittel, wie Chlor oder Brom, gemäß dem folgenden Reaktionsschema:
worin A, R¹, R² und R&sup5; wie oben definiert sind. Diese Disproportionierungsreaktion erfordert ein 2,2'-Dithiobisarylamid als Ausgangsverbindung, und diese werden problemlos aus 2,2'-Dithiobisarylcarbonsäuren durch Reaktion der Säure mit einer Chlorierungsmittl, wie Oxalylchlorid oder Thionylchlorid unter Bildung des entsprechenden Säurechlorids und die anschließende Reaktion des Säurechlorids mit einem Amin R&sub5;NH&sub2; hergestellt. Eine typische Synthese folgt dem folgenden Reaktionsschema:
Die für die obige Synthese erforderlichen 2,2'-Dithiobisarylcarbonsäuren sind einschlägig bekannt oder werden ohne weiteres nach Routineverfahren hergestellt. Die üblicherweise verwendeten Arylcarbonsäuren sind diejenigen der folgenden allgemeinen Struktur:
Die 2,2'-Dithio-bisarylcarbonsäuren werden durch Reaktion mit einem Chlorierungsmittel, wie Thionylchlorid oder Oxalylchlorid, ohne weiteres in die entsprechenden Säurechloride umgewandelt. Die Reaktion kann pur oder in einem reaktionsinerten organischen Lösemittel, wie Dichlormethan, Tetrahydrofuran, Diethylether, Dimethylformamid oder dergleichen, durchgeführt werden. Die Reaktion ist im allgemeinen innerhalb von etwa 1 bis etwa 8 h vollständig, wenn sie bei einer Temperatur von etwa 0ºC bis etwa 100ºC durchgeführt wird. Die Säurechloridprodukte werden einfach durch Entfernen des Reaktionslösemittels und von überschüssigem Chlorierungsmittel durch beispielsweise Verdampfen unter vermindertem Druck ohne weiteres isoliert.
Die 2,2'-Dithio-bisarylcarbonsäurechloride werden als nächstes durch Reaktion mit einem primären Amin der Formel R&sup5;NH&sub2; in 2,2'-Dithio-bisarylamide umgewandelt. Typische üblicherweise verwendete primäre Amine umfassen Alkylamine und substituierte Alkylamine, wie Methylamin, Leucin, Isoleucin, Serin, Threonin, Lysin, Asparagin und dergleichen. Anilin und substituierte Aniline können ebenfalls verwendet werden, beispielsweise 4-Hydroxyanilin, 3-Aminoanilin, 3- Methylthioanilin, 4-Dimethylsulfamoylanilin und dergleichen. Das Amin und Säurechlorid werden im allgemeinen in etwa äquimolaren Mengen in einem gemeinsamen Lösemittel, wie Aceton, Dichlormethan, Tetrahydrofuran, Methanol u. dgl., gemischt. Säurefänger, wie Pyridin, Triethylamin, N-Methylmorpholin und dergleichen, können nach Bedarf verwendet werden. Die Reaktion ist im allgemeinen innerhalb von etwa 1 bis etwa 18 h vollständig, wenn sie bei einer Temperatur von etwa 0ºC bis etwa 100ºC durchgeführt wird. Die gebildeten 2,2'-Dithio-bisarylamide werden durch einfaches Entfernen der Reaktionslösemittel und etwaiger überschüssiger Reaktionsteilnehmer durch Verdampfen unter vermindertem Druck ohne weiteres isoliert und eine weitere Reinigung ist im allgemeinen nicht erforderlich.
Die 2,2'-Dithiobisarylcarboxamide können auf einem von zwei Wegen in die Isothiazolone der Erfindung umgewandelt werden. Die Carboxamide reagieren ohne weiteres mit Oxidationsmittel, wie Brom oder Chlor, wobei eine Cyclisierung der entsprechende Isothiazolone bewirkt wird. Die Oxidation wird im allgemeinen durch Mischen eines Überschusses von Chlor oder Brom mit dem Carboxamid in einem geeigneten Lösemittel, wie einem halogenierten Kohlenwasserstoff, Dimethylsulfoxid, Dimethylformamid oder dergleichen, typischerweise bei einer verminderten Temperatur von etwa 0ºC bis etwa 5ºC durchgeführt. Das Isothiazolonprodukt ist im allgemeinen bei Raumtemperatur fest und fällt normalerweise aus dem Reaktionsgemisch aus. Es kann durch Filtration gewonnen und bei Bedarf durch Routineverfahren, wie Waschen, beispielsweise mit einer wässrigen Natriumbicarbonatlösung oder dergleichen, weiter gereinigt und aus üblichen Lösemitteln, wie Aceton, Ethanol, Ethylacetat und dergleichen, kristallisiert werden.
Ein alternatives Verfahren zur Herstellung der Isothiazolone aus den 2,2'-Dithiobisarylcarboxamiden umfasst zunächst die Umwandlung des Dithiobiszwischenprodukts in das entsprechende Arylthiolcarboxamidderivat und die anschließende Cyclisierung des Thiols und Carboxamids unter Bildung des Endprodukts. Dieses Reaktionsschema ist im folgenden angegeben:
Die Dithiobiszwischenprodukte werden mit einem Reduktionsmittel, wie Dithiothreit (DTT), in einem gemeinsamen Lösemittel, wie Dimethylformamid, Dimethylsulfoxid, Dioxan und dergleichen, umgesetzt. Die Reduktion wird typischerweise bei einer Temperatur von etwa 10ºC bis etwa 30ºC durchgeführt und sie ist normalerweise innerhalb von etwa 0,5 bis etwa 4 h vollständig. Das Arylthiolcarboxamid-Produkt wird im allgemeinen außer dem Entfernen eines Reaktionslösemittels durch Abdampfen nicht isoliert.
Das Arylthiolcarboxamid kann auch aus ohne weiteres verfügbaren 2-Hydroxycarbonsäuren gemäß dem folgenden Reaktionsschema hergestellt werden:
Bei diesem Verfahren wird eine 2-Hydroxycarbonsäure mit einem Überschuss eines üblichen Chlorierungsmittels, wie Thionylchlorid oder Phosphorpentachlorid, in einem reaktionsinerten organischen Lösemittel, wie Ethylendichlorid, Chloroform, Ethylchlorid, Toluol oder dergleichen, typischerweise bei einer Temperatur von etwa 25ºC bis etwa 60ºC umgesetzt. Das Produkt, ein 2-Chlorsäurechloridderivat, wird im allgemeinen durch einfaches Entfernen des Reaktionslösemittels und von überschüssigem Chlorierungsmittels, beispielsweise durch Abdampfen unter vermindertem Druck, isoliert. Das Chlorsäurechlorid wird dann mit einem primären Amin R&sup5;NH&sub2; in einem reaktionsinerten organischen Lösemittel, wie Chloroform, Methylenchlorid, Ethylchlorid oder dergleichen, umgesetzt. Typische, üblicherweise verwendete primäre Amine umfassen natürliche α-Aminsäuren, wie Glycin, Leucin, Isoleucin, Lysin, Asparaginsäure und dergleichen. Tertiäre und aromatische Amine, wie Triethylamin, Pyridin oder N-Methylmorpholin, können zugesetzt werden, damit sie als Säurefänger für die während der Reaktion gebildete Salzsäure wirken. Das gebildete Chlorcarboxamid wird durch Entfernen des Reaktionslösemittels ohne weiteres isoliert, und eine weitere Reinigung kann durch Routineverfahren, wie Kristallisieren, Chromatographie und dergleichen, durchgeführt werden. Das Chlorcarboxamid wird als nächstes mit Natriumhydrogensulfid in einem polaren Lösemittel, wie Methanol, Ethanol, Isopropanol oder dergleichen, umgesetzt, wobei das entsprechende 2-Thiolcarboxamidderivat erhalten wird.
Das Arylthiolcarboxamid wird als nächstes mit einem Mittel zum Bewirken der Cyclisierung umgesetzt. Typische routinemäßig verwendete Mittel umfassen Chlorcarbonylsulfenylchlorid, Iod, Brom und dergleichen. Die Cyclisierung wird durch Mischen äquimolarer Mengen des Thiolcarboxamids und des Cyclisierungsmittels in einem reaktionsinerten organischen Lösemittel, wie Tetrahydrofuran oder dergleichen, und Rühren des Gemischs während etwa 0,5 bis etwa 18 h bei einer Temperatur von etwa 0ºC bis etwa 30ºC durchgeführt. Das Isothiazolonprodukt fällt, wenn es gebildet wird, typischerweise aus, und es wird durch Filtration ohne weiteres gewonnen und nach Bedarf durch Kristallisieren, Chromatographie und dergleichen weiter gereinigt.
Viele der von Formel I umfassten Verbindungen können funktionelle Substituentengruppen (beispielsweise R¹ und R²) besitzen, die gegebenenfalls derivatisiert werden müssen, um unerwünschte Nebenreaktionen während der Synthese zu vermeiden. Derartige funktionelle Substituentengruppen umfassen beispielsweise Hydroxygruppen, Aminogruppen, insbesondere primäre und sekundäre Aminogruppen, und Carbonsäuregruppen. Beispielsweise müssen Hydroxygruppen, um unerwünschte Nebenreaktionen zu vermeiden, im allgemeinen in geschützte Hydroxygruppen, wie Ether oder Ester, während chemischer Reaktionen an anderen Stellen im Molekül umgewandelt werden. Die Hydroxyschutzgruppe wird anschließend unter Bildung der freien Hydroxygruppe entfernt. Aminogruppen und Carbonsäuregruppen werden in ähnlicher Weise derivatisiert, um sie gegen unerwünschte Nebenreaktionen zu schützen. Carboxygruppen werden im allgemeinen in Ester, wie tert.-Butylester, Benzyl- oder p-Nitrobenzylester und dergleichen umgewandelt. Aminogruppen werden typischerweise, beispielsweise mit Acetylchlorid oder dergleichen, acyliert oder mit Trimethylsilyl- oder tert.-Butyldimethylsilylgruppen silyliert. Typische Schutzgruppen und Verfahren zum Anbringen und Abspalten derselben werden vollständig bei Greene und Wuts in "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley and Sons, New York (2. Auflage, 1991) und McOmie, Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, New York, 1973, beschrieben.
Viele der Isothiazolone der Formel I können pharmazeutisch akzeptable Salze, die Säureadditionssalze, Basesalze umfassen, sowie Solvate, wie Hydrate und Alkoholate, bilden. Alle diese pharmazeutischen Formen werden durch die vorliegende Erfindung betrachtet und hierdurch umfasst. Säureadditionssalze werden ohne weiteres gebildet, wenn eine Verbindung der Formel I Aminosubstituentengruppen enthält oder Stickstoffatome im A-Ringsystem vorhanden sind. Basesalze können gebildet werden, wenn Carbonsäuresubstituentengruppen vorhanden sind, wenn beispielsweise R&sup5; ein carboxysubstituiertes Alkyl, wie Carboxymethyl oder dergleichen, ist.
Pharmazeutisch akzeptable Säureadditionssalze der Verbindungen der Formel I umfassen Salze, die von anorganischen Säuren, wie Salzsäure, Salpetersäure, Phosphorsäure, Schwefelsäure, Bromwasserstoffsäure, Iodwasserstoffsäure, Phosphorsäure und dergleichen, abgeleitet sind, sowie die Salze, die von organischen Säuren, wie aliphatischen Mono- und Dicarbonsäuren, phenylsubstituierten Alkansäuren, Hydroxyalkansäuren, Alkandisäuren, aromatischen Säuren, aliphatischen und aromatischen Sulfonsäuren und dergleichen, abgeleitet sind. Diese Salze umfassen daher Sulfat, Pyrosulfat, Bisulfat, Sulfit, Bisulfit, Nitrat, Phosphat, Monohydrogenphosphat, Dihydrogenphosphat, Metaphosphat, Pyrophosphat, Chlorid, Bromid, Iodid, Acetat, Propionat, Caprylat, Isobutyrat, Oxalat, Malonat, Succinat, Suberat, Sebacat, Fumarat, Maleat, Mandelat, Benzoat, Chlorflenzoat, Methylbenzoat, Dinitrobenzoat, Phthalat, Benzolsulfonat, Toluolsulfonat, Phenylacetat, Citrat, Lactat, Maleat, Tartrat, Methansulfonat und dergleichen. Ebenfalls betrachtet werden Salze von Aminosäuren, wie Arginat und dergleichen, und Gluconat, Galacturonat (siehe beispielsweise S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Salts", J. of Pharmaceutical Science, 1977; 66: 1-19).
Die Säureadditionssalze von basischen Verbindungen werden durch Kontaktieren der Form der freien Base mit einer ausreichenden Menge der gewünschten Säure zur Bildung des Salzes auf herkömmliche Weise hergestellt. Die Form der freien Base kann durch Kontaktieren der Salzform mit einer Base und Isolieren der freien Base auf die herkömmliche Weise regeneriert werden. Die Formen der freien Base unterscheiden sich von ihren jeweiligen Salzformen in gewisser Weise hinsichtlich bestimmter physikalischer Eigenschaften, wie Löslichkeit in polaren Lösemitteln, doch ansonsten sind die Salze für die Zwecke der vorliegenden Erfindung zu ihrer jeweiligen freien Base äquivalent.
Pharmazeutisch akzeptable Baseadditionssalze werden mit Metallen oder Aminen, wie Alkali- und Erdalkalimetallen oder organischen Aminen, gebildet. Beispiele für als Kationen verwendete Metalle sind Natrium, Kalium, Magnesium, Calcium und dergleichen. Beispiele für geeignete Amine sind N,N'-Dibenzylethylendiamin, Chlorprocain, Cholin, Diethanolamin, Ethylendiamin, N-Methylglucamin und Procain (siehe beispielsweise S. M. Berge et al., "Pharmaceutical Salts", J. of Pharmaceutical Science, 1977; 66 : 1-19).
Die Baseadditionssalze von sauren Verbindungen werden durch Kontaktieren der Form der freien Säure mit einer ausreichenden Menge der gewünschten Base zur Bildung des Salzes auf die herkömmliche Weise hergestellt. Die Form der freien Säure kann durch Kontaktieren der Salzform mit einer Säure und Isolieren der freien Säure auf die herkömmliche Weise regeneriert werden. Die Formen der freien Säure unterscheiden sich von ihren jeweiligen Salzformen in gewisser Weise hinsichtlich bestimmter physikalischer Eigenschaften, wie Löslichkeit in polaren Lösemitteln, doch ansonsten sind die Salze für die Zwecke der vorliegenden Erfindung zu ihrer jeweiligen freien Säure äquivalent.
Viele der Isothiazolone der Formel I enthalten ein oder mehrere asymmetrische Kohlenstoffatome und sie können als solche in optisch aktiven Formen existieren. Beispielsweise sind eine bevorzugte Gruppe von Verbindungen Verbindungen, worin R&sup5; ein Rest einer α-Aminosäure, wie Alanin, Valin, Leucin, Threonin und dergleichen ist. Diese Gruppen besitzen ein oder mehrere asymmetrische Zentren. Die Racemate können in ihre jeweiligen Enantiomere durch Routineverfahren, die fraktionierte Kristallisation, Hochleistungsflüssigkeitschromatographie, assymetrische Synthese und dergleichen umfassen, aufgetrennt werden. Die Racemate und individuellen Enantiomere werden durch die vorliegende Erfindung in gleicher Weise betrachtet.
Während die Formen der Erfindung hier derzeit bevorzugte Ausführungsformen bilden, sind viele andere möglich. Es sollen hier nicht alle möglichen äquivalenten Formen oder Abzweigungen der Erfindung genannt werden. Es ist klar, dass die hier verwendeten Ausdrücke lediglich der Beschreibung und nicht der Beschränkung dienen und dass verschiedene Änderungen ohne Abweichen von der Idee oder dem Umfang der Erfindung gemacht werden können.
Die folgenden detaillierten Beispiel erläutern spezielle Ausführungsformen der Erfindung. Die Beispiele sollen eine allgemeine Erläuterung für die Herstellung und Verwendung der Erfindung sein und in keinster Weise beschränkend sein.
Falls nicht anders angegeben, wurden alle Reagenzien von Handelslieferanten erhalten. Viele der Arylthiolcarboxamide, die als Ausgangsmaterialien verwendet werden, sind bekannt oder nach Verfahren zugänglich, die beispielsweise bei Bell, J. Am. Chem. Soc., 1942: 2905, Carmellino et al., Eur. J. Med. Chem., 1994; 29: 743-751, Bennett et al., Organic Prep. and Proced. Int., 1974; 6(6): 287-293 und Vitali et al., Il Farmao Ed. Sc., 1968; 23: 468-476, beschrieben sind. Diese Literaturstellen sind hier mit ihrer Lehre von Syntheseverfahren für Arylthiocarboxamide als Bezug aufgenommen.

Herstellungsbeispiel 1

2,2'-Dithiobisbenzoylchlorid

Ein Gemisch von 2,2'-Dithiobisbenzoesäure (25 g, 81,6 mmol) in 350 ml Thionylchlorid wurde 18 h lang unter Rückflusskühlung erhitzt. Die entstandene Lösung wurde gekühlt und überschüssiges Thionylchlorid wurde unter Vakuum entfernt. Der rohe Feststoff wurde in Hexan aufgeschlämmt und die Titelverbindung wurde durch Filtration gewonnen, wobei 21,2 g, Fp 150-151ºC, erhalten wurden. Diese Verbindung wurde ohne weitere Reinigung verwendet.

Herstellungsbeispiel 2

2,2'-Dithiobis[5-fluorbenzoylchlorid]

Ein Gemisch von 2,2'-Dithiobis[5-fluorbenzoesäure] (5,0 g, 14,6 mmol) und Thionylchlorid (40 ml) wurde gemäß dem oben beschriebenen Verfahren umgesetzt, wobei 4,9 g 2,2'-Dithiobis[5-fluorbenzoylchlorid] erhalten wurden. Diese Verbindung wurde ohne weitere Reinigung verwendet.

Herstellungsbeispiel 3

2,2'-Dithiobis[5-methoxybenzoylchlorid]

Ein Gemisch von 2,2'-Dithiobis[5-methoxybenzoesäure] (0,8 g, 2,0 mmol) und Thionylchlorid (10 ml) wurde gemäß dem oben beschriebenen Verfahren umgesetzt, wobei 0,8 g 2,2'-Dithiobis[5-methoxybenzoylchlorid] erhalten wurden. Diese Verbindung wurde ohne weitere Reinigung verwendet.

Herstellungsbeispiel 4

2,2'-Dithiobis[5-methylbenzoesäure]

Ein Gemisch von 2,2'-Dithiobis[5-methylbenzoesäure] (0,6 g, 1,8 mmol) und Thionylchlorid (10 ml) wurde gemäß dem oben beschriebenen Verfahren umgesetzt, wobei 0,3 g 2,2'-Dithiobis[5-methoxybenzoylchlorid] erhalten wurden. Diese Verbindung wurde ohne weitere Reinigung verwendet.

Herstellungsbeispiel 5

2,2'-Dithiobis[4-fluorbenzoylchlorid]

Ein Gemisch von 2,2'-Dithiobis[4-fluorbenzoesäure] (5,0 g, 14,6 mmol) und Thionylchlorid wurde gemäß dem oben beschriebenen Verfahren umgesetzt, wobei 4,1 g 2,2'-Dithiobis[4-Fluornenzoylchlorid] erhalten wurden. Diese Verbindung wurde ohne weitere Reinigung verwendet.

Herstellungsbeispiel 6

2,2'-Dithiobis[4-methoxybenzoylchlorid]

Ein Gemisch von 2,2'-Dithiobis[4-methoxybenzoesäure] (2,2 g, 6,6 mmol) und Thionylchlorid (20 ml) wurde gemäß dem oben beschriebenen Verfahren umgesetzt, wobei 2,1 g 2,2'-Dithiobis[4-methoxybenzoylchlorid] erhalten wurden. Keine weitere Reinigung war erforderlich.

Herstellungsbeispiel 7

2,2'-Dithiobis[4-methylbenzoylchlorid]

Ein Gemisch von 2,21-Dithiobis[4-methylbenzoesäure] (3,8 g, 11,9 mmol) und Thionylchlorid (50 ml) wurde gemäß dem oben beschriebenen Verfahren umgesetzt, wobei 3,6 g 2,2'-Dithiobis[4-methylbenzoylchlorid] erhalten wurden. Diese Verbindung wurde ohne weitere Reinigung verwendet.

Herstellungsbeispiel 8

2,2'-Dithiobis[4'-sulfamoylbenzanilid] (allgemeines Verfahren

Eine Lösung von 2,2'-Dithiobisbenzoylchlorid (5,0 g, 14,0 mmol) aus Herstellungsbeispiel 1 in 50 ml Dichlormethan wurde tropfenweise zu einer Lösung von 4-(Aminosulfonyl)anilin (5,2 g, 36,0 mmol) in 125 ml Pyridin, die auf 0ºC gekühlt war, gegeben. Das Gemisch wurde 18 h lang gerührt und der entstandene Feststoff wurde durch Filtration entfernt, mit 1 N HCl und Wasser gewaschen und unter Vakuum getrocknet, wobei 7,6 g rohes Produkt erhalten wurden. Dieses rohe Material (6,5 g) wurde in 50 ml Dimethylformamid/50 ml Ethanol suspendiert, filtriert und durch Zugabe von 10 ml 4-%iger wässriger NaHCO&sub3;-Lösung aus der filtrierten Lösung gefällt. Das Produkt wurde durch Filtration gewonnen, mit Ethanol und Wasser gewaschen, wobei 4,3 g der Titelverbindung, Fp 311-312ºC, erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 9

2,2'-Dithiobis[4'-sulfamoyl(4-methoxybenzanilid)]

Diese Verbindung wurde gemäß dem bei Herstellungsbeispiel 8 beschriebenen allgemeinen Verfahren unter Verwendung von 2,2'-Dithiobis[4-methoxybenzoylchlorid] (1,1 g, 2, 7 mmol) in Dichlormethan (10 ml) und 4- (Aminosulfonyl)- anilin (1,1 g, 6,8 mmol) in Pyridin (15 ml) hergestellt. Das rohe Produkt wurde aus Dimethylformamid, Ethanol und Wasser umkristallisiert, wobei 0,8 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 10

2,2'-Dithiobis[4'-sulfamoyl(4-methylbenzanilid)]

Diese Verbindung wurde gemäß dem bei Herstellungsbeispiel 8 beschriebenen allgemeinen Verfahren unter Verwendung von 2,2'-Dithiobis[4-methylbenzoylchlorid] (2,0 g, 5,5 mmol) in Dichlormethan (20 ml) und 4-(Aminosulfonyl)-anilin (3,4 g, 19,9 mmol) in Pyridin (40 ml) hergestellt. Das rohe Produkt wurde aus Dimethylformamid, Ethanol und Wasser umkristallisiert, wobei 2,1 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 11

2,2'-Dithiobis[4'-sulfamoyl(4-fluorbenzanilid)]

Diese Verbindung wurde gemäß dem bei Herstellungsbeispiel 8 beschriebenen allgemeinen Verfahren unter Verwendung von 2,2'-Dithiobis[4-fluorbenzoylchlorid] (2,0 g, 5,2 mmol) in Dichlormethan (20 ml) und 4-(Aminosulfonyl)-anilin (2,2 g, 13,0 mmol) in Pyridin (30 ml) hergestellt. Das rohe Produkt wurde aus Dimethylformamid, Ethanol und Wasser umkristallisiert, wobei 2,6 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 12

2,2'-Dithiobis[4'-sulfamoyl(5-methylbenzanilid)]

Diese Verbindung wurde gemäß dem bei Herstellungsbeispiel 8 beschriebenen allgemeinen Verfahren unter Verwendung von 2,2'-Dithiobis[5-methylbenzoylchlorid] (2,0 g, 5,3 mmol) in Dichlormethan (20 ml) und 4-(Aminosulfonyl)-anilin (2,3 g, 13,3 mmol) in Pyridin (30 ml) hergestellt. Das rohe Produkt wurde aus Dimethylformamid, Ethanol und Wasser umkristallisiert, wobei 1,8 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 13

[S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-tert.-Butoxycarbonyl-3-methyl- butylcarbamoyl)-5-methoxy-phenyldisulfanyl]-4-methoxy- benzoylamino]-4-methyl-pentansäure-tert.-butylester (allgemeines Verfahren)

Eine Lösung von 2,2'-Dithiobis[4-methoxybenzoyl- chlorid] (1,1 g, 2,7 mmol) aus Herstellungsbeispiel 8 in 10 ml Dichlormethan wurde tropfenweise, zu einer Lösung von L-Leucin-tert.-butylester-monohydrochlorid (1,5 g, 6,8 mmol) und N-Methylmorpholin (1,6 ml, 14,0 mmol) in 25 ml Dichlormethan, die auf 0ºC bis 5ºC gekühlt war, gegeben. Die entstandene Lösung wurde 18 h lang gerührt und dann auf Umgebungstemperatur (25ºC) erwärmt. Das Gemisch wurde mit 0,5N HCl, Wasser, einer 8%igen wässrigen NaHCO&sub3;-Lösung und Kochsalzlösung extrahiert. Die organische Schicht wurde mit MgSO&sub4; getrocknet, filtriert und unter Vakuum eingeengt. Das rohe Produkt wurde aus Ethylacetat umkristallisiert, wobei 1,2 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 14

[S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-tert.-Butoxycarbonyl-3-methyl- butylcarbamoyl)-4-fluor-phenyldisulfanyl]-5-fluor- benzoylamino]-4-methyl-pentansäure-tert.-butylester

Diese Verbindung wurde gemäß dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel 13 unter Verwendung von 2,2'-Dithiobis[5-fluorbenzoylchlorid] (2,0 g, 5,2 mmol) in 20 ml Dichlormethan, L-Leucin-tert.-butylester-monohydrochlorid (2,5 g, 11,4 mmol) und N-Methylmorpholin (1,4 ml, 12,5 mmol) in 30 ml Dichlormethan hergestellt. Das rohe Produkt wurde aus Ethylacetat umkristallisiert, wobei 1,8 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 15

[S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-tert.-Butoxycarbonyl-3-methyl- butylcarbamoyl)-5-methylphenyldisulfanyl]-4-methyl- benzoylamino]-4-methyl-pentansäure-tert.-butylester

Diese Verbindung wurde gemäß dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel 13 unter Verwendung von 2,2'-Dithiobis[4-methylbenzoylchlorid] (1,8 g, 7,8 mmol) in 20 ml Dichlormethan, L-Leucin-tert.-butylester-monohydrochlorid (4,0 g, 17,9 mmol) und N-Methylmorpholin (4,6 ml, 41 mmol) in 60 ml Dichlormethan hergestellt. Das rohe Produkt wurde aus Ethylacetat umkristallisiert, wobei 1,9 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 16

[S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-Carboxy-2-methylbutylcarbamoyl)- phenyldisulfanyl]-benzoylamino]-3-methylpentansäure-tert.- butylester

Eine Lösung von 10,0 g (53,2 mmol) L-Isoleucin-tert.- butylester in 100 ml Dichlormethan wurde mit 5,6 g (55,0 mmol) N-Methylmorpholin gemischt. Die entstandene Lösung wurde auf 0ºC gekühlt und durch rasche tropfenweise Zugabe einer Lösung von 8,3 g (24,2 mmol) 2,2'-Dithiobisbenzoylchlorid (aus Herstellungsbeispiel 1) in 100 ml Dichlormethan reagieren gelassen, wobei die Temperatur unter 0ºC gehalten wurde. Das Gemisch wurde 1 h lang bei 0ºC gerührt und dann 18 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Der Feststoff, der sich gebildet hatte, wurde durch Filtration entfernt, mit Wasser gewaschen und unter Vakuum getrocknet, wobei 6,5 g der Titelverbindung erhalten wurden. Das Filtrat wurde mit Wasser, 0,5 M Salzsäure und Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;), filtriert und unter Vakuum eingedampft, wobei weitere 6,9 g der Titelverbindung mit vergleichbarer Reinheit erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 17

[S-(R*,R*)]-2-(2-[2-(1-Carboxy-2-methylbutylcarbamoyl)- phenyldisulfanyl]-benzoylamino]-3-methylpentansäure

Eine Lösung von 13,2 g (20,5 mmol) des tert.-Butylesters (aus Herstellungsbeispiel 16) in 50 ml Trifluoressigsäure wurde 18 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Das tosemittel wurde unter Vakuum entfernt und der Rückstand wurde 50 ml Dichlormethan gelöst. Das Dichlormethan wurde unter Vakuum entfernt und der Rückstand wurde mit 150 ml Diethylether/Pentan (2 : 1 V/V) verrieben und der entstandene Feststoff wurde durch Filtration entfernt. Nach dem Waschen mit 50 ml Diethylether/Pentan (2 : 1) und anschließend mit Pentan wurde der Feststoff unter Vakuum getrocknet und als 9,9 g der Titelverbindung, Fp 211-213ºC, identifiziert.

Herstellungsbeispiel 18

[S-(R*,R*)]-2-(2-[2-(1-Carboxy-3-methylbutylcarbamoyl)-5- methoxy-phenyldisulfanyl)-4-methoxybenzoylamino)-4-methylpentansäure (allgemeines Verfahren)

Eine Lösung von [S-(R*,R* )]-2-[2-[2-(1-tert.-Butoxycarbonyl-3-methylbutylcarbamoyl)-5-methoxy-phenyldisufanyl]-4-methoxybenzoylamino]-4-methylpentansäure-tert.- butylester (1,2 g, 1,7 mmol) und Anisol (1 ml) in 10 ml Dichlormethan, die auf 0ºC gekühlt war, wurde tropfenweise mit 10 ml Trifluoressigsäure behandelt. Das Gemisch wurde sich auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Nach 4 h wurden 5 ml Toluol zugegeben und die Lösemittel unter Vakuum entfernt. Das rohe Produkt wurde aus Methanol/Wasser umkristallisiert, wobei 0,7 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 19

[S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-Carboxy-3-methylbutylcarbamoyl)-4- fluor-phenyldisulfanyl]-5-fluorbenzoylamino)-4-methyl- pentansäure

Dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel 18 wurde gefolgt, wobei [S-(R*,R* )]-2-[2-[2-(1-tert.-Butoxycarbonyl-3-methylbutylcarbamoyl)-4-fluor-phenyldisufanyl]- 5-fluorbenzoylamino]-4-methylpentansäure-tert.-butylester (1,8 g, 2,6 mmol) in 20 ml Dichlormethan, Anisol (2 ml) und 20 ml Trifluoressigsäure verwendet wurden. Das rohe Produkt wurde aus Methanol/Wasser umkristallisiert, wobei 0,9 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 20

[S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-Carboxy-3-methyl-butylcarbamoyl)-5- methylphenyldisulfanyl]-4-methylbenzoylamino]-4-methylpentansäure

Dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel 18 wurde gefolgt, wobei [S-(R*,R* )]-2-[2-[2-(1-tert.-Butoxycarbonyl-3-methyl-butylcarbamoyl)-5-methyl-phenyldisufanyl]-4-methylbenzoylamino]-4-methylpentansäure-tert.- butylester (1,9 g, 2,8 mmol) in 20 ml Dichlormethan, Anisol (2,0 ml) und 10 ml Trifluoressigsäure verwendet wurden. Das rohe Produkt wurde aus Methanol/Wasser umkristallisiert, wobei 1,1 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 21

2-Chlor-5-nitrobenzamid

Ein Gemisch von 2-Chlor-5-nitrobenzoesäure (15,0 g, 74,0 mmol) und 200 ml Dichlormethan wurde mit Oxalylchlorid (16,2 ml, 186,0 mmol) und einer katalytischen Menge Dimethylformamid umgesetzt. Das Gemisch wurde 3 h lang bei 25 ºC gerührt. Das Lösemittel wurde unter Vakuum entfernt und der Rückstand wurde in 200 ml Dichlormethan gelöst. Die Lösung wurde auf 0ºC gekühlt und Ammoniak wurde 5 min lang durch die kalte Lösung perlen gelassen, wobei das Produkt unter Bildung einer Lösung ausfiel. Das Produkt wurde durch Filtration gewonnen, wobei 6,8 g, Fp 174-175ºC, erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 22

2,2'-Dithiobis(5-nitrobenzamid)

Zu einer rückfließenden Lösung von 2-Chlor-5-nitrobenzamid (6,8 g, 33,0 mmol) aus Herstellungsbeispiel 21 in 90 ml Ethanol wurden portionsweise Natriumsulfidhydrat Na&sub2;S(9H&sub2;O) (2,6 g, 20,5 mmol) und Schwefel (0,7 g, 20,5 mmol) gegeben. Das Gemisch wurde 1 h lang unter Rückflusskühlung erhitzt und dann auf Raumtemperatur gekühlt, wobei sich ein Feststoff bildete. Der Feststoff wurde durch Filtration gewonnen, wobei 2,6 g der Titelverbindung, Fp 266- 269ºC, erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 23

2,2'-Dithiobis(5-aminobenzamid)

2,2'-Dithiobis(5-nitrobenzamid) (2,6 g, 7,0 mmol) wurde portionsweise zu einer rückfließenden Aufschlämmung von reduziertem Eisen (8,7 g) in 65 ml Wasser, das 0,1 ml Essigsäure enthielt, gegeben. Die entstandene Aufschlämmung wurde 2 h lang unter Rückflusskühlung erhitzt und anschließend auf Raumtemperatur gekühlt. Die Aufschlämmung wurde durch die Zugabe von 14 ml 1 N NaOH stark basisch (pH-Wert 11) gemacht. Das alkalische Gemisch wurde filtriert und Essigsäure wurde zur Einstellung des pH-Werts auf 7,0 zu der Lösung gegeben. Unter Hindurchperlenlassen von Sauerstoff durch die Lösung wurde ein pH-Wert von 6-7 durch Zugabe von Essigsäure aufrechterhalten. Wenn sich der pH-Wert zu stabilisieren beginnt, bildet sich allmählich ein Feststoff. Das Produkt (1,1 g) wurde durch Filtration gewonnen, Fp 188-190ºC.

Herstellungsbeispiel 24

2,2'-Dithiobis(5-acetylamino)benzamid

2,2'-Dithiobis(5-aminobenzamid) (1,1 g, 3,4 mmol) wurde in 6 ml Eisessig auf einem Dampfbad gelöst und mit Essigsäureanhydrid (0,7 ml, 7,2 mmol) umgesetzt. Beim Kühlen fiel das Produkt aus der Lösung aus. Weitere 4 ml Eisessig und 0,1 ml Essigsäureanhydrid wurden zugegeben und das Gemisch wurde 30 min lang unter Rückflusskühlung erhitzt und dann auf Raumtemperatur gekühlt. Das rohe Produkt wurde durch Filtration gewonnen und aus Dimethylformamid/Dimethylsulfoxid/Wasser umkristallisiert, wobei 0,8 g des Titelprodukts, Fp 301-303ºC, erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 25

2,2'-Dithiobis[N-[4-[(acetylamino)sulfonyl]phenyl]benzamid]

Die Verbindung wurde gemäß dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel 8 unter Verwendung von 2,2'-Dithiobisbenzoylchlorid (3,0 g, 8,0 mmol) in 30 ml Dichlormethan und 4-[(Acetylamino)sulfonyl]anilin (5,6 g, 26,0 mmol) in 100 ml Pyridin hergestellt. Das rohe Produkt wurde auf einer Silicagelsäule unter Verwendung von Chloroform/ Methanol (1 : 1 V/V) als mobile Phase gereinigt. Die reinen Fraktionen wurden gepoolt, unter Vakuum eingeengt und der Feststoff wurde aus Ethanol/Waser (1 : 1 V/V) kristallisiert, wobei 0,5 g der Titelverbindung, Fp 180-182ºC, erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 26

2-Mercapto-N-(4-sulfamoylphenyl)benzamid

2,2'-Dithiobis[4'-sulfamoylbenzanilid] (0,1 g, 0,2 mmol) wurde in 4 ml Dimethylformamid und 1,6 ml einer 2,7- %igen wässrigen NaH&sub2;PO&sub4;-Lösung gelöst. Dithiothreit (0,1 g, 0,7 mmol) wurde zugegeben und das Gemisch wurde 0,5 h lang bei 25ºC gerührt. Ameisensäure (10 ml, 10%, wässrig) wurde zum Ausfällen des Produkts zugegeben, das dann durch Filtration gewonnen und mit Wasser und mit Diethylether gewaschen wurde, wobei 72 mg der Titelverbindung, Fp 230- 231ºC, erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 27

2-[2-[2-(1-Carboxymethylcarbamoyl)-phenyldisulfanyl]- benzoylamino]essigsäure

Zu 18 g (0,24 mol) Glycin in 75 ml absolutem Ethanol wurden 100 ml Natriumethoxidlösung, die durch Auflösen von 4,6 g (0,2 mol) Natrium hergestellt wurde, gegeben. Das Gemisch wurde auf -60ºC gekühlt und 17,2 g (0,05 mol) 2,2'- Dithiobisbenzoylchlorid wurden portionsweise zugegeben. Das Gemisch wurde auf Raumtemperatur gebracht und über Nacht gerührt. Die Feststoffe wurden durch Filtration entfernt und das Filtrat wurde mit 2 N HCl angesäuert. Die Feststoffe wurden gewonnen, in Natriumbicarbonatlösung gelöst und die Lösung wurde filtriert. Das Filtrat wurde mit HCl angesäuert und die Feststoffe wurden gewonnen und 24 h lang bei 110ºC getrocknet, wobei 6,8 g der Titelverbindung, Fp 13-215ºC, erhalten wurden.

Herstellungsbeispiel 28

2-[2-[2-(1-Carboxy-2-methylpropylcarbamoyl)-phenyldisulfanyl]-benzoylamino]-3-methylbutansäure

Unter Verwendung des in Herstellungsbeispiel 27 verwendeten Verfahrens wurden 17,8 g (0,15 mol) D,L-Valin mit 17,2 g (0,05 mol) 2,2'-Dithiobisbenzoylchlorid umgesetzt, wobei 11,4 g der Titelverbindung nach dem Umkristallisieren aus Essigsäure erhalten wurden, Fp 226,5-227,5ºC.

Herstellungsbeispiel 29

4-[2-[2-(3-Carboxypropylcarbamoyl)-phenyldisulfanyl]- benzoylamino]-butansäure

Gemäß dem Verfahren in Herstellungsbeispiel 27 wurden 16 g (0,15 mol) 4-Amino-butansäure mit 10,8 g (0,03 mol) 2,2'-Dithiobisbenzoylchlorid umgesetzt, wobei 7,14 g der Titelverbindung erhalten wurden,

Beispiel 1

4-(3-Oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid

Zu einer auf 0ºC gekühlten Lösung von 60 ml Methanol und 60 ml Tetrahydrofuran wurden tropfenweise 3,9 g (30,0 mmol) Chlorcarbonylsulfenylchlorid gegeben. Das Gemisch wurde 20 min lang bei 0ºC gerührt und dann durch Zugabe von 9,0 g (29,2 mmol) 2-Thio-N-(4-sulfamoylphenyl)benzamid verdünnt. Das Reaktionsgemisch wurde 0,5 h lang bei 0ºC gerührt, auf Raumtemperatur erwärmt und 18 h lang gerührt. Die Suspension wurde mit 200 ml Diethylether verdünnt, 1 h lang gerührt und der Feststoff wurde durch Filtration entfernt. Nach dem Waschen mit frischem Diethylether wurde der Feststoff unter Vakuum getrocknet, wobei 7,8 g der Titelverbindung erhalten wurden. Weitere 2,2 g wurden durch Einengen der Mutterlaugen und Verreiben des Rückstands mit Diethylether erhalten. Der Fp beider Fraktionen betrug 283-285ºC.

Beispiel 2

[S-(R*,R*)]-3-Methyl-2-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)- pentansäure

Zu einer gerührten Suspension von 5,3 g (10,0 mmol) [S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-Carboxy-2-methylbutylcarbamoyl)- phenyldisulfanylbenzoylamino]-3-methylpentansäure (aus Herstellungsbeispiel 17) in 200 ml Dichlormethan wurden tropfenweise 2,4 g (15,0 mmol) flüssiges Brom gegeben. Das Reaktionsgemisch wurde 2 h lang bei Raumtemperatur gerührt und unter Vakuum zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wurde mit Dichlormethan verrieben. Das Dichlormethan wurde durch Eindampfen unter Vakuum entfernt, wobei überschüssiges Brom entfernt wurde. Der Rückstand wurde zwischen Dichlormethan/5%ige wässrige Natriumbicarbonatlösung (jeweils 200 ml) verteilt. Die wässrige Schicht wurde abgetrennt, mit frischem Dichlormethan gewaschen und mit 6,0 M Salzsäure auf einen pH-Wert von 1,5 angesäuert. Die saure wässrige Lösung wurde mit Dichlormethan (2 · 75 ml) extrahiert. Die organischen Schichten wurden vereinigt, mit Wasser gewaschen, getrocknet (MgSO&sub4;), filtriert und unter Vakuum zur Trockene eingeengt, wobei 4,8 g der Titelverbindung, Fp 50-52ºC, erhalten wurden.

Beispiel 3

N-Acetyl-4-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid (allgemeines Verfahren)

Eine Lösung von 2,2'-Dithiobis-N-[4-[[acetylamino]- sulfonyl]phenyl]benzamid (1,0 g, 1,5 mmol) in 1 ml Dimethylformamid wurde mit 20 ml Dichlormethan verdünnt, wobei sich ein feiner Niederschlag bildete. Brom (0,3 g, 1,8 mmol) in 5 ml Dichlormethan wurde tropfenweise zu dem Gemisch gegeben. Es bildete sich allmählich eine homogene Lösung und danach erneut ein Feststoff. Der Feststoff wurde durch Filtration gewonnen und aus Essigsäure/Wasser (1 : 1 V/V) umkristallisiert, wobei 0,6 g der Titelverbindung, Fp 254-255ºC, gebildet wurden.

Beispiel 4

N-(3-Oxd-2,3-dihydro-benzo[d]isothiazol-2-yl)-acetamid

Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 3 wurde eine Aufschlämmung von 2,2'-Dithiobis[5-acetylamino]benzamid (2,0 g, 4,8 mmol) in 4 ml Dimethylsulfoxid und 20 ml Dichlormethan mit Brom (0,8 g, 5,0 mmol) in 10 ml Dichlormethan umgesetzt. Das feste Produkt wurde durch Filtration gewonnen und aus 5 ml heißer Essigsäure umkristallisiert, wobei 0,8 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Beispiel 5

4-(5-Methoxy-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid

Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 3 wurde eine Aufschlämmung von 2,2'-Dithiobis(4-sulfamoyl(5-methoxybenzanilid))]benzamid (0,8 g, 1,2 mmol) in 2 ml Dimethylsulfoxid und 20 ml Dichlormethan mit Brom (0,2 g, 1,3 mmol) in 10 ml Dichlormethan umgesetzt. Das rohe Produkt wurde aus Methanol/Wasser umkristallisiert, wobei 0,2 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Beispiel 6

4-(6-Methyl-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid

Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 3 wurde eine Aufschlämmung von 2,2'-Dithiobis(4'-sulfamoyl(4- methylbenzanilid)]benzamid (2,1 g, 3,2 mmol) (aus Herstellungsbeispiel 10) in 4 ml Dimethylformamid/40 ml Dichlormethan mit Brom (0,6 g, 3,6 mmol) in 15 ml Dichlormethan umgesetzt. Das rohe Produkt wurde aus Dimethylformamid/Wasser umkristallisiert, wobei 0,9 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Beispiel 7

4-(6-Fluor-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid

Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 3 wurde eine Aufschlämmung von 2,2'-Dithiobis[4'-sulfamoyl(4- fluorbenzanilid)]benzamid (1,8 g, 2,7 mmol) (aus Herstellungsbeispiel 11) in 4 ml Dimethylformamid und 30 ml Dichlormethan mit Brom (0,5 g, 3,2 mmol) in 20 ml Dichlormethan umgesetzt. Das rohe Produkt wurde aus Dimethylformamid/Wasser umkristallisiert, wobei 1,1 g der Titelverbindung, Fp 265-266ºC, erhalten wurden.

Beispiel 8

4-(5-Methyl-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid

Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 3 wurde eine Aufschlämmung von 2,2'-Dithiobis[4'-sulfamoyl(5-methylbenzanilid)]benzamid (1,1 g, 1,7 mmol) (aus Herstellungsbeispiel 12) in 2 ml Dimethylformamid und 20 ml Dichlormethan mit Brom (0,3 g, 1,9 mmol) in 10 ml Dichlormethan umgesetzt. Das rohe Produkt wurde aus Dimethylformamid/Wasser umkristallisiert, wobei 0,4 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Beispiel 9

(S)-4-Methyl-2-(6-methoxy-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2- yl)-pentansäure

Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 3 wurde eine Aufschlämmung von {[S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-Carboxy-3- methylbutylcarbamoyl)-5-methoxy-phenyldisulfanyl]-4-methoxybenzoylamino}]-4-methylpentansäure (1,4 g, 2,3 mmol) (aus Herstellungsbeispiel 18) in 4 ml Acetonitril und 10 ml Dichlormethan mit Brom (0,4 g, 2,6 mmol) in 10 ml Dichlormethan behandelt. Das rohe Produkt wurde aus Methanol/Wasser umkristallisiert, wobei 0,8 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Beispiel 10

(S)-4-Methyl-2-(5-fluor-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)- pentansäure

Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 3 wurde eine Aufschlämmung von {S-(R*,R*)]-2-{-[2-(1-Carboxy-3- methylbutylcarbamoyl)-4-fluorphenyldisulfanyl]-5-fluorbenzoylamino}-4-methylpentansäure (2,1 g, 3,6 mmol) (aus Herstellungsbeispiel 19) in 8 ml Acetonitril und 25 ml Dichlormethan mit Brom (0,7 g, 4,4 mmol) in 15 ml Dichlormethan behandelt. Das rohe Produkt wurde aus Methanol/Wasser umkristallisiert, wobei 1,4 g der Titelverbindung, Fp 161-162ºC, erhalten wurden.

Beispiel 11

(S)-4-Methyl-2-(6-methyl-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2- yl)-pentansäure

Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 3 wurde eine Aufschlämmung von [S-(R*,R*)]-2-[2-[2-(1-Carboxy-3- methylbutylcarbamoyl)-4-methylphenyldisulfanyl]-5-methylbenzoylamino}]-4-methyl-pentansäure (1,8 g, 3,2 mmol) (aus Herstellungsbeispiel 20) in 5 ml Acetonitril und 20 ml Dichlormethan mit Brom (0,6 g, 3,7 mmol) in 10 ml Dichlormethan behandelt. Das rohe Produkt wurde aus Methanol/Wasser umkristallisiert, wobei 1,3 g der Titelverbindung erhalten wurden.

Beispiel 12

2-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-essigsäure

Zu in 50 ml CCl&sub4; suspendierten 6,0 g (13,3 mmol) [2-[2-(2-Carboxylmethylcarbamoyl] phenyldisulfanyl]-benzoylamino)-essigsäure (aus Herstellungsbeispiel 27) wurden tropfenweise 0,83 ml (16,1 mmol) Brom in 15 ml CCl&sub4; während 1 h gegeben. Die Feststoffe wurden durch Filtration entfernt. Eine Portion von 6,0 g wurde 1 h lang in 25 ml Essigsäure unter Rückflusskühlung erhitzt. Das Gemisch wurde gekühlt und die Feststoffe wurden durch Filtration gewonnen. Umkristallisieren aus 90% Methylcellosolve und anschließendes Trocknen bei 50ºC während 24 h ergaben 3,0 g der Titelverbindung, Fp 236-238ºC.

Beispiel 13

3-Methyl-2-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-butansäure

Gemäß dem Verfahren von Beispiel 12 wurden 6,0 g (13,6 mmol) 2-[2-[2-(1-Carboxy-3-methylbutylcarbamoyl)- phenyldisulfanyl]-benzoylamino]-3-methylbutansäure mit Brom umgesetzt, wobei 2,25 g der Titelverbindung, Fp 166-168 ºC erhalten wurden.

Beispiel 14

2-Ehenyl-3-oxo-3H-benz[d]isothiazol

Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 12 wurden 20 g (43,7 mmol) 2,2'-Dithiobisbenzanilid (das gemäß der Beschreibung in J. Med. Chem., 1985; 28: 1772 hergestellt wurde) mit Brom umgesetzt, wobei 10,55 g rohes Isothiazol erhalten wurden. Kristallisation aus absolutem Ethanol und anschließend Isopropanol ergab 5,4 g 3-Phenyl-3-oxo-3H- benz[d]isothiazol, Fp 143-145ºC.

Beispiel 15

2-(4-Acetylphenyl)-3-oxo-3H-benz[d]isothiazol

Zu 7,0 g (12,9 mmol) 2,2'-Dithiobis[4'48-acetyl(benzanilid)] in 50 ml CClq wurde tropfenweise während 1 h eine Lösung von 0,7 ml (13,5 mmol) Brom in 5 ml CCl&sub4; gegeben. Der feste Niederschlag wurde durch Filtration gewonnen. Eine Portion von 1,3 g des Feststoffs wurde in einer Natriumbicarbonatlösung 30 min lang aufgeschlämmt. Der Feststoff wurde durch Filtration gewonnen und 24 h lang bei 70ºC getrocknet, wobei 0,87 g der Titelverbindung, Fp 183 -185ºC, erhalten wurden.

Beispiel 16

4-(3-Oxo-3H-benzo[d]isothiaz-2-yl)butansäure

Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 12 wurden 2,4 g (5,0 mmol) 4-[2-[2-(3-Carboxypropylcarbamoyl)-phenyldisulfanyl]-benzoylamino]-butänsäure (aus Herstellungsbeispiel 29) mit Brom umgesetzt, wobei 0,85 g des rohen Isthiazolons erhalten wurden, das dann aus Isopropanol umkristallisiert wurde, wobei 0,76 der Titelverbindung, Fp 97-99ºC, erhalten wurden.

Beispiel 17

2-(4-Methylpyridin-2-yl)-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol

Unter Verwendung des Verfahrens von Fischer und Hurni (Arzneimittel Forsch., 1964; 14: 1301) wurden 5,4 g (0,05 mol) 2-Amino-4-methylpyridin in 50 ml Pyridin bei 10ºC mit 10,3 g (0,05 mol) 2-Chlorsulfenylbenzoylchlorid umgesetzt. Das Gemisch wurde auf 50ºC erhitzt und 2 h lang bei dieser Temperatur gehalten. Das Gemisch wurde auf 25ºC gekühlt und filtriert. Der Feststoff wurde aus Benzol umkristallisiert, wobei 4,5 g der Titelverbindung, Fp 195-196,5ºC, erhalten wurden.

Beispiel 18

4-(3-Oxo-3H-benzo[d]isothiaz-2-yl)phenylessigsäure

Zu einem Gemisch von 7,55 g (0,05 mol) 4-Aminophenylessigsäure und 15,15 g (0,15 mol) Triethylamin in 25 ml Ethylcellosolve wurden 10,3 g (0,05 mol) 2-Chlorsulfenylbenzoylchlorid gegeben (Arzneimittel Forsch., 1964; 14: 1301). Das Gemisch wurde 3 h lang bei Raumtemperatur gerührt, unter Vakuum eingeengt und der Rückstand wurde mit Wasser versetzt. Das Gemisch wurde mit HCl angesäuert und filtriert, wobei 9,9 g der Titelverbindung, Fp 173-175 ºC, erhalten wurden.

Beispiel 19

4-(3-Oxo-3H-benz[d]isothiaz-2-yl)phenylessigsäure

Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 12 wurden 1,5 g (2,6 mmol) 4-[2-[2-(4-Carboxymethylphenylcarbamoyl)- phenyldisulfanyl]-benzoylamino]-phenylessigsäure mit Brom umgesetzt, wobei 0,62 g der Titelverbindung, Fp 173-175 ºC, erhalten wurden.

Beispiel 20

(S)-2,6-Bis-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-hexansäuremethylester

Unter Verwendung des Verfahrens von Beispiel 17 wurden 0,77 g (3,3 mmol) Lysinmethylesterdihydrochlorid und 2,1 ml (15 mmol) Triethylamin in 60 ml Dichlormethan mit 1 g (3,0 mmol) 2-Chlorsulfenylbenzoylchlorid umgesetzt. Das Gemisch wurde 18 h lang bei Raumtemperatur gerührt und danach wurde die Lösung mit 1 N HCl, einer gesättigten NaHCO&sub3;-Lösung und Kochsalzlösung gewaschen. Die Lösung wurde getrocknet und eingeengt, wobei 1 g des Öls erhalten wurde. Die Verbindung wurde durch Chromatographie (SiO&sub2;, CHCl&sub3;-CHCl&sub3;/MeOH; 98/2) gereinigt, wobei 0,16 g der Titelverbindung als Glas erhalten wurden.
NMR (DMSO): δ 8,03 (m, 2H), 7,61 (m, 2H), 7,50 (m, 2H), 7,41 (m, 2H), 5,42 (m, 1H), 3,88 (t, 2H), 3,75 (s, 3H), 2,24 (m, 1H), 2,11 (m, 1H), 1,87 (m, 2H), 1,44 (m, 2H).
Weitere Isothiazolone, die unter Verwendung der im vorhergehenden beschriebenen Verfahren hergestellt werden können, umfassen die folgenden:
Weitere spezielle Isothiazolone gemäß der vorliegenden Erfindung umfassen die folgenden:
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung bewirken das Herausziehen von Zink aus dem Nukleokapsidprotein (NCp7) von HIV-1. Das NC-Protein ist bei allen Retroviren stark konserviert (T. South, P. Blake et al., Biochemistry, 1990; 29 : 7786) und es ist für die Virusinfektiosität essentiell (A. Aldovini und R. Young, J. Virology, 1990: 64: 1920 und R. Gorelick, S. Nigida et al., J. Virology, 1990; 64: 3207). Das Zink wird in NC-Proteinen normalerweise von 1 oder 2 Zinkfingern gehalten. Im Falle von HIV-1 sind 2 Zinkfinger vorhanden (M. Summers, T. South et al., Biochemistry, 1990; 29: 329) und insbesondere an der PSI- Stelle auf Virus-RNA, die die Verpackung von Virus-RNA steuert, beteiligt. Eine Störung dieser Verpackung bewirkt die Bildung nicht-infektiöser Virionen (J. Dannull, A. Surovoy et al., EMBO, 1994; 13: 1525). Es wurde bereits aufgezeigt, dass Verbindungen, die ein Herausziehen von Zink bewirken, eine starke Anti-HIV-Aktivität bei mehreren Zelllinien und gegen alle Retroviren besitzen (W. Rice, C. Schaeffer et al., Nature, 1993; 361: 471).
Ein Test auf Fluoreszenzbasis wurde zur Überwachung des Austreibens von Zink aus gereinigtem HIV-1-NCp7 entwickelt. Der Fluorophor N-(6-Methoxy-8-chinolyl)-p-toluolsulfonamid (TSQ) besitzt, wenn er Zinkionen in Lösung bindet, ein verstärktes Fluoreszenzsignal. Das 2 Zn-Finger und 2 Zn-Ionen enthaltende NCp7-Protein wird mit einem Arzneimittel, das das Austreiben von Zn-Ionen bewirkt, inkubiert. Das freigesetzte Zn wird dann durch das TSQ abgefangen und die erhöhte Fluoreszenz in Bezug auf die Kontrolle überwacht. Der Test wurde wie folgt durchgeführt: 10 uM Verbindung wurden zu 2,8 uM NCp7 und 47 uM TSQ in 20 ul eines Puffers des pH-Werts 7,4 bei 26ºC während 90 min gegeben. Die Fluoreszenz (Anregung: 355 nm, Emission 400 nm) wurde gegen die Zeit aufgezeichnet. Kontrollen waren NCp7 unter Testbedingungen ohne Arzneimittel und apo NCp7 (kein Zn) mit Arzneimittel. Das prozentuale Austreiben von Zn wurde auf der Grundlage der tatsächlich gemessenen Fluoreszenz geteilt durch die Fluoreszenz des gesamten theoretisch extrudierten Zn (5,6 uM) · 100 berechnet.
Eine Elektrosprayionisierung-Massenspektralanalyse wurde ebenfalls durchgeführt. Unter Verwendung von 40 uM NCp7 in Ammoniumacetatpuffer bei pH 6 wurden 320 uM 4-(3- Oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid (Beispiel 1) in Acetonitril zugegeben. Nach 3 min trat ein Massenpeak bei 6360 (100%), der apo NCp7 entsprach (Verlust von 2 Zn), auf. Ferner trat ein Peak bei 6740, der NCp7 + 308 + Zn entsprach, auf. Dieser Peak stellt ein NCp7 dar, beidem ein Zink ausgetrieben und eine Verbindung eines MG von 308, das exakt dem MG von Beispiel 1 entspricht, kovalent gebunden ist, was das Austreiben von Zink und die Bildung einer kovalenten Bindung zwischen dem Cystein des Zinkfingers und dem Isothiazolon anzeigt.
Die zur Feststellung der zellulären antiviralen Aktivität der Isothiazolone der Formel I verwendeten Testsysteme sind einschlägig bekannt und werden für diesen Zweck routinemäßig angewandt. Beispielsweise ist der zur Bewertung der Aktivität der Verbindungen gegenüber dem HIV-Virus verwendete Test der vom U.S. National Cancer Institute verwendete Test gemäß der Beschreibung durch O. S. Weislow et al., J. Natl. Cancer Inst., 1989; 81: 577-586, der hier als Bezug aufgenommen ist.
Das Verfahren ist so gestaltet, dass es Mittel, die in einem beliebigen Stadium des Reproduktionszyklus des Virus wirken, erfasst. Der Test umfasst grundlegend das Abtöten von T4-Lymphocyten durch HIV. Geringe Mengen von HIV werden zu den Zellen gegeben und mindestens zwei komplette Zyklen der Virusreproduktion sind notwendig, um das erforderliche Abtöten von Zellen zu erhalten. Mittel, die mit Virionen, Zellen oder Virusgenprodukten unter Störung der Virusaktivitäten wechselwirken, schützen Zellen vor Cytolyse. Das System ist hinsichtlich mehrerer Merkmale automatisiert, damit es für eine große Zahl von fraglichen Mitteln passt, und es ist allgemein so gestaltet, dass es Anti-HIV- Aktivität erfasst. Jedoch können Verbindungen, die unter den Kulturbedingungen degenerieren oder rasch verstoffwechselt werden, bei diesem Screening keine Aktivität zeigen.
Ein weiteres Testsystem, das zur Bewertung der Verbindungen der Erfindung verwendet wird, wird als HIV-H9-Test bezeichnet. Der HIV-H9-Zelltest ermittelt die zur Unterdrückung der HIV-1-Virusreplikation erforderliche Inhibitorkonzentration. Bei diesem System erfolgt ein Viruswachstum über mehrere Runden des Lebenszyklus. Jede Schmälerung der Replikationskinetik führt zu einer geometrischen Abnahme der Virusproduktion. Infolgedessen ist dieser Test ein empfindliches Mittel zur Messung der Fähigkeit einer Verbindung zur Hemmung der HTV-1-Virusreplikation.
Die H9-T-Zelllinie wird mit HIV-Virus mit einem MOI- Wert von 0,01 einmalig infiziert. Nach 2-stündiger Absorption werden die Zellen gewaschen, in RPMI-1640/10%iges Kalbsfetusserum resuspendiert und mit 5 · 103 Zellen/Vertiefung einer 96-Vertiefungen-Platte ausgesät. Ein Doppel der Platte mit nicht-infizierten H9-Zellen wird für den Cytotoxizitätstest vorbereitet. Arzneimittel werden 1/3.16 in DMSO-Reihen verdünnt, mit einer 8 · -Konzentration in Medien übertragen und dann dreifach zu den Kulturen gegeben. Die Endkonzentration von DMSO beträgt 0,002 (0,2%).
Die Virusproduktion wird durch einen RT-Test ermittelt und die Cytotoxizität wird durch einen XTT-Test 7 Tage nach der Infektion ermittelt. Der RT-Test wird als Modifizierung von Borroto-Esoda und Boone, J. Virol., 1991; 65 : 1952-1959, durchgeführt und unter Verwendung eines Molecular Dynamics Phosphoimager mit Imagequant-Software quantitativ erfasst.
Der XTT-Test wird als Modifizierung von Roehm et al., J. Immuno. Methods, 1991; 142 : 257-265, durchgeführt und unter Verwendung eines Molecular Devices Thermomax-Plattenlesegeräts mit Softmax-Software quantitativ erfasst.
Die Daten werden zur Analyse elektronisch in eine Microsoft Excel-Tabelle übertragen. 50% und 90% Hemmung der Virusproduktion entsprechende RT-Testwerte werden ausgehend von den unbehandelten Kontrollen berechnet. Die zum Bewirken dieser Werte erforderlichen Inhibitorkonzentrationen (IC&sub5;&sub0; und IC&sub9;&sub0;) werden aus Datenpunkten, die diese RT- Aktivitäten flankieren, interpoliert. Die 50% Cytotoxizität entsprechenden XTT-Testwerte werden ausgehend von den unbehandelten Kontrollen berechnet. Die zum Bewirken dieses Werts erforderlichen Inhibitorkonzentrationen werden aus Datenpunkten, die diese XTT-Werte flankieren, berechnet.
Ein weiteres Testsystem, das zur Bestimmung der antiviralen Aktivität verwendet wird, wird als CEM-Zelltest bezeichnet.
T4-Lymphocyten (CEM-Zelllinie) werden HIV mit einem Virus/Zellen-Verhältnis von etwa 0,05 ausgesetzt und zusammen mit nicht-infizierten Kontrollzellen in 96-Vertiefungen-Mikrotiterplatten ausplattiert.
Ein fragliches Mittel wird in Dimethylsulfoxid (falls nicht anders angegeben) gelöst und dann 1 : 200 in Zellkulturmedium verdünnt. Weitere (halblogarithmische&sub1;&sub0;) Verdünnungen werden hergestellt und dann zu einem gleichen Volumen Medium, das entweder infizierte oder nicht-infizierte Zellen enthält, gegeben.
Die Kulturen werden bei 37º in einer 5-%igen Kohlendioxidatmosphäre während 6 oder 7 Tagen inkubiert. Das Tetrazoliumsalz, XTT, wird zu allen Vertiefungen gegeben und die Kulturen werden inkubiert, wobei durch lebende Zellen eine Formazanfarbentwicklung erfolgt, J. National Chancer Institute, 1989; 81: 577-586. Die einzelnen Vertiefungen werden spektrophotometrisch zur quantitativen Bestimmung der Formazanbildung analysiert und anschließend mikroskopisch zum Nachweis von lebenden Zellen als Bestätigung der Schutzwirkung betrachtet.
Mit Arzneimittel getestete virusinfizierte Zellen werden mit arzneimittelbehandelten, nicht-infizierten Zellen und mit anderen entsprechenden Kontrollen (unbehandelte infizierte und unbehandelte nicht-infizierte Zellen, arzneimittelhaltige Vertiefungen ohne Zellen und dergleichen) auf der gleichen Platte verglichen. Die Daten werden im Vergleich mit anderen gleichzeitig durchgeführten Tests zusammengefasst und es erfolgt eine Bestimmung der Aktivität.
Die folgende Tabelle 1 zeigt die Ergebnisse des Tests von mehreren der erfindungsgemäßen Verbindungen im im vohergehenden beschriebenen Zinkaustreibungstest. Die Verbindungen wurden im Hinblick auf ihre Fähigkeit zum Bewirken des Austreibens von Zink aus dem Nukleokapsidprotein NCp7 (die als %-Wert in Bezug auf die Kontrolle angegeben ist) bewertet. TABELLE 1. Zn-Austreibung aus den Zn-Fingern von HIV-1- Nukleokapsidprotein (NCp7)
a EDTA entfernt etwa 10% des Zn aus dem Zn-Finger während 24 h (W. Rice und C. Schaeffer et al., Nature, 1993; 361: 473)
Die folgende Tabelle 2 gibt Daten für mehrere erfindungsgemäße Verbindungen, die im H9- und CEM-Zelltest bewertet wurden, an. Die Daten stellen sicher, dass die Verbindungen der vorliegenden Erfindung bei einer Bewertung in beiden Testsystemen wirksam gegen das HIV-Virus sind. TABELLE 2. Anti-HIV-Aktivität
a Wirksame Konzentration, die Zellen vor viralen cytopathischen Wirkungen schützt.
b Toxische Konzentration, die das Wachstum von Zellen 50% in Bezug auf die Kontrolle hemmt.
Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung besitzen Verwendbarkeit gegen einen breiten Bereich von Retrovirusinfektionen und daher einen breiten Anwendungsbereich, Beispiele für mögliche Viren, die für eine Behandlung unter Verwendung der vorliegenden Erfindung geeignet sein können, umfassen Typ-C- und Typ-D-Retroviren, HTLV-1, HTLV-2, FLV, SIV, MLV, BLV, BIV, infektiöse Viren bei Pferden, Anämieviren, Sarkomviren bei Vögeln und dergleichen.
Die Isothiazolone der Formel I sind auch zur Behandlung von Entzündung und Atherosklerose wirksam. Ein charakteristisches Merkmal von Atherosklerose ist die Ansammlung von Cholesterylester, die von Schaumzellen verstopft wird. Schaumzellen leiten sich von zirkulierenden Monocyten ab, die als Reaktion auf Hypercholesterinämie in Arterienwände eindringen und zu Gewebemakrophagen reifen. Das Enzym 15- Lipoxygenase (15-LO) ist an entzündlichen Erkrankungen und am Ursprung und der Rekrutierung von Schaumzellen beteiligt (siehe Harats et al., Trends Cardioivasc. Med., 1995; 5(1): 29-36). Dieses Enzym kann veresterte "polylnoic fatty acids", wie sie bei Phospholipiden gefunden werden, oxidieren. Die Behandlung von Versuchstieren mit Antioxidantien, die durch 15-LO produzierte Hydroperoxide reduzieren, verzögert nachweislich das Fortschreiten atherosklerotischer Läsionen. Daher ist die Verabreichung von Verbindungen, die 15-LO hemmen, ein wirksamer Weg zur Behandlung und Prophylaxe von Atherosklerose. Die Isothiazolone der Formel I sind wirksame Inhibitoren von 15-LO, wenn sie in Standardtests, die routinemäßig zur Ermittlung der 15-LO-Aktivität verwendet werden, bewertet werden. Insbesondere wurden repräsentative Verbindungen durch die Verfahren gemäß der Beschreibung bei Auerbach et al., Analytical Biochemistry, 1992; 201: 375-380, bewertet. Zwei In-vitro-Tests wurden verwendet, die beide Kaninchen-Reticulocyten-15-LO und Linolsäure als Substrat verwenden, um ein als 13(S)-HPODE bekanntes Peroxidoxidationsprodukt enzymatisch herzustellen. N-Benzoyl-leucomethylenblau wurde als kolorimetrisches Reagens zum Nachweis und zur quantitativen Bestimmung der Peroxidbildung verwendet. Auch wurde HPLC zur quantitativen Bestimmung der Oxidation nach einer 10-minütigen Inkubation bei 4ºC verwendet.
Die 15-LO-Hemmaktivität repräsentativer Isothiazolone ist in Tabelle 3 angegeben.
Tabelle 3 gibt die prozentuale Hemmung der 15-LO- Aktivität bei Bewertung nach dem kolorimetrischen Verfahren an. TABELLE 3. Kolorimetrischer Test der 15-LO-Hemmung Verbindung von Beispiel % Hemmung
Die Verbindungen der Formel I sind daher zur Behandlung von Atherosklerose aufgrund ihrer Fähigkeit zur Hemmung von 15-LO verwendbar.
In einer weiteren Ausführungsform der vorliegenden Erfindung können die Verbindungen in Zusammensetzungen formuliert werden, die zur Applikation auf Oberflächen, wie Holz, Metall, Keramik und dergleichen, und zur Verabreichung an Lebewesen einschließlich des Menschen zur Behandlung und Prophylaxe von durch Viren verursachten Erkrankungen, sowie Entzündung und Atherosklerose geeignet sind. Die Verbindungen können zur Verabreichung auf einem beliebigen Weg, beispielsweise oral, parenteral, topisch und rektal formuliert werden. Zur oralen Verabreichung kann beispielsweise eine erfindungsgemäße Verbindung mit einem inerten Verdünnungsmittel oder mit einem assimilierbaren essbaren Träger gemischt werden oder sie kann in eine Gelatinekapsel mit harter oder weicher Hülle eingeschlossen werden oder sie kann zu Tabletten gepresst werden oder sie kann direkt in das Lebensmittel der Nahrung eingearbeitet werden. Zur oralen therapeutischen Verabreichung kann die aktive Verbindung mit Streckmitteln eingearbeitet werden und in der Form von einnehmbaren Tabletten, Lutschtabletten, Pastillen, Kapseln, Elixieren, Suspensionen, Sirupen, Oblaten und dergleichen verwendet werden. Derartige Zusammensetzungen und Zubereitungen sollten mindestens 1 Gew.-% der aktiven Verbindung enthalten. Der Prozentgehalt der Zusammensetzungen und Zubereitungen kann natürlich variiert werden und in geeigneter Weise zwischen etwa 5% und etwa 80% des Gewichts der Einheit betragen. Die Menge der aktiven Verbindung in derartigen therapeutisch verwendbaren Zusammensetzungen ist derart, dass eine therapeutisch wirksame Dosis erhalten wird. Bevorzugte Zusammensetzungen oder Zubereitungen gemäß der vorliegenden Erfindung werden so zubereitet, dass eine orale Dosiseinheitsform zwischen etwa 5 und 1000 mg der aktiven Verbindung und idealerweise etwa 25 bis etwa 750 mg enthält.
Die Tabletten, Pastillen, Pillen, Kapseln und dergleichen können auch übliche pharmazeutische Streckmittel, wie Bindemittel, Süßungsmittel und dergleichen enthalten. Typische Bindemittel umfassen Tragantgummi, Akaziengummi, Maisstärke und Gelatine sowie Streckmittel, wie Dicalciumphosphat. Typische, den Zerfall fördernde Mittel umfassen Maisstärke, Kartoffelstärke, Alginsäure und dergleichen. Ein üblicherweise verwendetes Gleitmittel ist Magnesiumstearat. Typische Süßungsmittel sind Saccharose, Lactose oder Saccharin, und Aromatisierungsmittel, wie Pfefferminz, Wintergrünöl oder Kirschgeschmack können verwendet werden. Wenn die Dosiseinheitsform eine Kapsel ist, kann sie zusätzlich zu Materialien des obigen Typs einen flüssigen Träger enthalten. Verschiedene andere Materialien können als Überzüge oder zur sonstigen Modifizierung der physischen Form der Dosiseinheit vorhanden sein. Beispielsweise können Tabletten, Pillen oder Kapseln mit Schellack, Zucker oder beidem überzogen sein. Ein Sirup oder Elixier kann die aktive Verbindung, Saccharose als Süßungsmittel, Methyl- und Propylparabene als Konservierungsstoffe, einen Farbstoff und einen Aromatisierungsstoff, wie Kirsch- oder Orangengeschmack, enthalten. Natürlich sollte jedes bei der Herstellung einer Dosiseinheitsform verwendete Material pharmazeutisch rein und in den verwendeten Mengen im wesentlichen nicht-toxisch sein.
Die Isothiazolonverbindungen der Erfindung können zur topischen Verabreichung auch beispielsweise als Pflaster, Salben, Cremes, Einreibungen und dergleichen formuliert werden. Mittel, die üblicherweise zum Verstärken der transdermalen Passage verwendet werden, können ebenfalls verwendet werden. Die Verbindungen können auch mit Wachsen und dergleichen zur passenden rektalen Verabreichung formuliert werden.
Die aktive Verbindung kann auch parenteral oder intraperitoneal verabreicht werden. Dispersionen können auch in Glycerin, flüssigen Polyethylenglykolen und Gemischen derselben und in Ölen hergestellt werden. Unter üblichen Lagerungs- und Verwendungsbedingungen können diese Zubereitungen ein Konservierungsmittel enthalten, um das Wachstum von Mikroorganismen zu verhindern.
Die zur Verwendung als Injektionen geeigneten pharmazeutischen Formen umfassen sterile wässrige Lösungen (wenn sie wasserlöslich sind) oder Dispersionen und sterile Pulver zur unvorbereiteten Herstellung steriler injizierbarer Lösungen oder Dispersionen. In allen Fällen muß die Form steril und in einem Maße fluid sein, dass die problemlose Handhabung mit einer Spritze gegeben ist. Sie muss unter den Herstellungs- und Lagerungsbedingungen stabil sein und gegenüber der Kontaminierungswirkung von Mikroorganismen, wie Bakterien und Pilzen konserviert sein. Der Träger kann ein Lösungsmittel oder Dispersionsmedium sein, das beispielsweise Wasser, Ethanol, ein Polyol (beispielsweise Glycerin, Propylenglykol und flüssigen Polyethylenglykol und dergleichen), geeignete Gemische derselben und pflanzliche Öle enthält. Die passende Fluidität kann beispielsweise durch die Verwendung eines Überzugs, wie Lecithin, das Aufrechterhalten der erforderlichen Teilchengröße im Falle einer Dispersion und durch die Verwendung von Netzmitteln aufrechterhalten werden. Die Verhinderung der Wirkung von Mikroorganismen kann durch verschiedene antibakterielle und Antifungusmittel, beispielsweise Parabene, Chlorbutanol Phenol, Sorbinsäure, Thimerosal und dergleichen, beigebracht werden. In vielen Fällen werden vorzugsweise isotonische Mittel, beispielsweise Zucker oder Natriumchlorid eingearbeitet. Eine verlängerte Absorption der injizierbaren Zusammensetzungen kann durch die Verwendung von absorptionsverzögernden Mitteln, beispielsweise Aluminiummonosteatat und Gelatine, in den Zusammensetzungen beigebracht werden.
Sterile injizierbare Lösungen werden durch Einarbeiten der aktiven Verbindung in der erforderlichen Menge in das entsprechende Lösemittel mit gegebenenfalls verschiedenen der im vorhergehenden aufgezählten Bestandteile und anschließende Sterilfiltration hergestellt. Im allgemeinen werden Dispersionen durch Einarbeiten der verschiedenen sterilisierten Wirkstoffe in ein steriles Vehikel, das das Grunddispersionsmedium und die erforderlichen anderen Bestandteile der oben aufgezählten enthält, hergestellt. Im Falle steriler Pulver zur Herstellung von sterilen injizierbaren Lösungen sind die bevorzugten Herstellungsverfahren Vakuumtrocknung und Gefriertrockungsverfahren, die ein Pulver des Wirkstoffs plus eines weiteren gewünschten Bestandteils aus der zuvor sterilfiltrierten Lösung derselben ergeben.
Der hier verwendete Ausdruck "pharmazeutisch akzeptabler Träger" umfasst beliebige Lösemittel, Dispersionsmedien, Überzüge, antibakterielle und Antipilzmittel, isotonische und absorptionsverzögernde Mittel und dergleichen. Die Verwendung derartiger Medien und Mittel für pharmazeutisch wirksame Substanzen ist einschlägig bekannt. Mit Ausnahme der Inkompatibilität eines herkömmlichen Mediums oder Mittels mit dem Wirkstoff wird deren Verwendung in den therapeutischen Zusammensetzungen betrachtet. Zusätzliche Wirkstoffe können ebenfalls in die Zusammensetzungen eingearbeitet werden.
Es ist besonders vorteilhaft, parenterale Zusammensetzungen in Dosiseinheitsform zur leichteren Verabreichung und Gleichförmigkeit der Dosierung zu formulieren. Die hier verwendete Dosiseinheitsform bezeichnet physisch diskrete Einheiten, die als Einheitsdosierungen für die zu behandelnden Säugetiere geeignet sind; wobei jede Einheit eine vorgegebene Menge des aktiven Materials enthält, die so berechnet ist, dass die gewünschte therapeutische Wirkung in Verbindung mit dem erforderlichen pharmazeutischen Träger erzeugt wird. Die Spezifizierung für die neuen Dosiseinheitsformen der Erfindung werden diktiert und sind direkt abhängig von
(a) den jeweiligen Eigenschaften des aktiven Materials und der zu erreichenden speziellen therapeutischen Wirkung und
(b) den inhärenten Beschränkungen auf dem Gebiet der Kompoundierung eines derartigen aktiven Materials zur Behandlung einer Erkrankung an lebenden Objekten mit einem Krankheitszustand, bei dem die körperliche Gesundheit beeinträchtigt ist,
wie hier im Detail offenbart ist.
Der Hauptwirkstoff wird für eine geeignete und wirksame Verabreichung in wirksamen Mengen mit einem geeigneten pharmazeutisch akzeptablen Träger in Dosiseinheitsform, wie im vorhergehenden offenbart, kompoundiert. Der Ausdruck "wirksame Menge" bedeutet die Isothiazolonmenge, die eine positive therapeutische Wirkung bei der Behandlung der Virusinfektion, der Entzündung oder der Atherosklerose, die das zu behandelnde Säugetier betrifft, hat. Eine Einheitsdosisform kann beispielsweise die Hauptwirkverbindung in Mengen im Bereich von etwa 5 bis etwa 1000 mg, wobei etwa 25 bis etwa 750 mg bevorzugt sind, enthalten. Eine typische Dosis beträgt etwa 50 bis etwa 500 mg. Im Falle von Zusammensetzungen, die weitere Wirkstoffe enthalten, bestimmen sich die Dosierungen unter Bezug auf die übliche Dosis und Art und Weise der Verabreichung der Bestandteile. Die Einheitsdosierungen werden typischerweise ein- bis viermal pro Tag oder wie es ansonsten zur wirksamen Behandlung des Krankheitszustandes notwendig ist, verabreicht.
In einer weiteren Ausführungsform werden die Isothiazolone in Kombination mit anderen Mitteln mit antiviraler Aktivität verwendet. Beispielsweise umfassen üblicherweise verwendete Mittel Acyclovir, AZT (Azidothymidin, Zidovudin), Ribavirin, Vidarabin, Ganciclovir, Dideoxyinosin (ddI) und dergleichen. Die Isothiazolone werden in Kombination mit derartigen anderen antiviralen Mitteln im allgemeinen nach deren jeweiligen normalen Dosierungsprotokollen verabreicht. Die speziell zu verwendenden Kombinationen, die jeweils verabreichten Mengen und die Dosierungsfrequenz werden natürlich im Hinblick auf die verwendeten speziellen Mittel, den speziellen behandelten. Zustand und die Schwere der Erkrankung vom zuständigen medizinischen Personal oder Arzt bestimmt.
Die folgenden Beispiele erläutern die Formulierungen der vorliegenden Erfindung weiter.

Beispiel A

Weichgelatinekapseln wurden unter Verwendung der folgenden Bestandteile hergestellt:
Menge mg/Kapsel
Verbindung von Beispiel 1 250,0
Butyliertes Hydroxyanisol B.P. 0,05
Fraktioniertes Kokosnussöl B.P. 70,0
320,05
Die oben genannten Bestandteile wurden gemischt und in eine Weichgelatinekapsel gefüllt, deren Hüllekomponenten Gelatine und Glycerin waren. Die Kapseln werden mit einer Rate von ein- bis viermal pro Tag verabreicht.

Beispiel B

Tabletten wurden unter Verwendung der folgenden Komponenten hergestellt:
Verbindung von Beispiel 5 500 mg
Mikrokristalline Cellulose 200 mg
Natriumcarboxymethylstärke 20 mg
Magnesiumstearat 4 mg
Butyliertes Hydroxyanisol B. P. 0,002 mg
Die Bestandteile wurden bis zur Gleichförmigkeit gemischt und zur oralen Verabreichung zu einer Tablette gepresst. Eine bis vier Tabletten werden pro Tag zur Behandlung von Virusinfektionen verabreicht.

Beispiel C

Ein Aerosol wird wie folgt hergestellt:
Verbindung von Beispiel 4 100 mg
Propylenglykol 20 mg
Dichlortetrafluorethan (Treibmittel 14) 600 mg
Dichlordifluormethan (Treibmittel 12) 500 mg
Die Komponenten werden bei -20ºC gemischt und in eine mit einer Dosierungsvorrichtung ausgestattete hermetisch verschlossene Dose gegeben.

Beispiel D

Eine Lösung wird wie folgt hergestellt:
Verbindung von Beispiel 6 5 mg
Wasser 1 l
1N HCl 20 ml
Die Bestandteile werden zu einer Lösung gemischt, die zum Waschen von Duschkabinen zur Verhinderung und Beseitigung von Bakterienwachstum verwendet werden können.
Die Verbindungen der Formel I sind zur Behandlung, Prophylaxe und Bekämpfung von Virusinfektionen verwendbar. Das Verfahren umfasst die Verabreichung einer antiviral wirksamen Menge einer Verbindung der vorliegenden Erfindung an ein Objekt oder eine Oberfläche. Beispielsweise können die Verbindungen der Formel I an Duschkabinen und öffentlichen Plätzen appliziert werden, um ein Viruswachstum zu verhindern, zu kontrollieren und zu bekämpfen. Die Verbindungen können an Lebewesen, insbesondere Menschen zur Behandlung und Prophylaxe von Virusinfektionen verabreicht werden. Wie im vorhergehenden angegeben beträgt eine wirksame Menge der aktiven Verbindung im allgemeinen etwa 5 bis etwa 1000 mg pro Dosiseinheit und idealerweise etwa 25 bis etwa 750 mg.
Die Wirkstoffe der therapeutischen Zusammensetzungen und die Verbindungen der vorliegenden Erfindung zeigen eine hervorragende Aktiv-Retrovirus-Aktivität, wenn sie in Mengen im Bereich von etwa 1,0 bis etwa 100 mg/kg Körpergewicht pro Tag verabreicht werden. Ein bevorzugtes Dosierungsprotokoll für optimale Ergebnisse besteht aus etwa 2,0 bis etwa 50 mg/kg Körpergewicht pro Tag, und diese Dosiseinheiten werden so verabreicht, dass insgesamt etwa 0,2 bis etwa 3,0 g der aktiven Verbindung für ein Objekt von etwa 70 kg Körpergewicht in einem Zeitraum von 24 h verabreicht werden. Dieses Dosierungsprotokoll kann so eingestellt werden, dass es das optimale therapeutische Ansprechen ergibt, und vorzugsweise erfolgt die Verabreichung ein- bis viermal pro Tag in Dosismengen von etwa 250 bis etwa 750 mg pro Verabreichung. Beispielsweise können mehrere Teildosen pro Tag verabreicht werden oder die Dosis kann, wie es durch die Erfordernisse der therapeutischen Situation angezeigt ist, proportional vermindert werden. Ein klarer praktischer Vorteil besteht darin, dass die aktive Verbindung auf eine passende Weise, beispielsweise auf oralem, intravenösem (wenn sie wasserlöslich ist), intramuskulärem oder subkutanem Weg verabreicht werden kann.
Die aktiven Verbindungen können als wässrige Lösungen und Suspensionen zum Abwaschen von Oberflächen, wie Holz, Stahl, Keramik und dergleichen, zur Beseitigung und Kontrolle eines Wachstums aufgrund von Viren formuliert werden.
Eine weitere Ausführungsform sind pharmazeutische Zusammensetzungen zur Behandlung von Atherosklerose bei Säugetieren, die daran leiden und einer Behandlung bedürfen. Die Verbindungen bewirken eine Hemmung der Aktivität von 15-Lipoxygenase, und sie können daher als solche an ein Säugetier einschließlich des Menschen verabreicht werden, um Atherosklerose wirksam zu vermindern und zu behandeln. Die Verbindungen werden mit einer Dosis, die zur Behandlung von Atherosklerose wirksam ist, typischerweise etwa 1,0 bis etwa 100 mg/kg Körpergewicht des zu behandelnden Objekts verabreicht.
Die Verbindungen sind auch zur Behandlung einer Entzündung, beispielsweise einer Schwellung aufgrund von Verletzungen, einer Schwellung um Knochen und Gelenke und dergleichen verwendbar. Die Verbindungen werden an ein an einer Entzündung leidendes Lebewesen in einer Menge, die zur Behandlung der Entzündung wirksam ist, verabreicht. Typische Dosierungen betragen von etwa 1,0 bis etwa 100 mg/kg Körpergewicht.

Claims

1. Verbindung der Formel I

worin:

R¹ und R² unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, Het(CR&sup6;R&sup7;)m-, Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m-, O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, Hydroxy, Nitro, Cyano, NR³R&sup4;, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, SO&sub3;H, S(O)mNR³R&sup4;, COR³ sind oder zusammen Oxo (O=) oder Methylendioxy (-O-CH&sub2;-O-) bedeuten;

m 0, 1 oder 2 ist;

R³ und R&sup4; unabhängig voneinander Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, Het(CR&sup6;R&sup7;)m- oder Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m- sind; R&sup6; und R&sup7; unabhängig voneinander Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, CO&sub2;R³, Hydroxy, CONR³R&sup4; oder Cyano sind;

R&sup5; Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, CO-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m-, Het(CR&sup6;R&sup7;)m- bedeutet, wobei Het ein cyclischer oder bicyclischer Ring mit 4-10 Atomen, von denen ein bis vier Atome aus O, S oder N ausgewählt sind, ist, und

wobei die im vorhergehenden genannten Alkyl-, Cycloalkyl-, Phenyl- und Het-Gruppen optional substituiert sein können mit 1 bis 3 Gruppen, die ausgewählt sind aus Halogen, Hydroxy, Nitro, NR³R&sup4;, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, S(O)mNR³R&sup4; und COR³, wobei m, R³ und R&sup4; wie im vorhergehenden definiert sind, mit dem Vorbehalt, dass, wenn R¹ und R² beide Wasserstoff sind, R&sup5; dann nicht Wasserstoff, unsubstituiertes Phenyl oder Phenyl, das substituiert ist mit C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl-COO-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl-COOH, -COOH, -COO-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, -O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl-COOH oder Halogen, sein kann,

und die pharmazeutisch akzeptablen Salze und Solvate derselben.

2. Verbindung nach Anspruch 1, worin R Wasserstoff ist.

3. Verbindung nach Anspruch 1 oder 2, worin R&sup5; C&sub1;-C&sub6;- Alkyl, substituiertes C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m- oder substituiertes Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m- ist.

4. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, worin R&sup5;

5. Verbindung nach Anspruch 1 bis 4, nämlich:

[S-(R*,R*)]-3-Methyl-2-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)- pentansäure;

2-(6-Methoxy-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-pentansäure;

(S)-4-Methyl-2-(5-fluor-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)- pentansäure und

(S)-4-Methyl-2-(6-methyl-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)- pentansäure, und

N-(3-Oxo-2, 3-dihydro-benzo[d]isothiazol-5-yl)-acetamid.

6. Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, worin R&sup5;

ist.

7. Verbindung nach Anspruch 6, nämlich:

4-(3-Oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid;

N-Acetyl-4-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid;

4-(5-Methoxy-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid;

4-(6-Methyl-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid;

4-(6-Fluor-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid;

4-(5-Methyl-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid.

8. Verwendung einer Verbindung mit der Formel I

worin:

R¹ und R² unabhängig voneinander Wasserstoff, Halogen, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, substituiertes oder unsubstituiertes Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m-, substituiertes oder unsubstituiertes Het(CR&sup6;R&sup7;)m-, O-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, Hydroxy, Cyano, Nitro, NR³R&sup4;, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, SO&sub3;H, S(O)mNR³R&sup4;, COR³ sind oder zusammen Oxo (O=) oder Methylendioxy (-O-CH&sub2;-O-) bedeuten;

m 0, 1 oder 2 ist;

R³ und R&sup4; unabhängig voneinander Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, Het(CR&sup6;R&sup7;)m- oder Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m- sind, wobei Het ein cyclischer oder bicyclischer Ring mit 4-10 Atomen, von denen ein bis vier Atome aus O, S oder N ausgewählt sind, ist;

R&sup5; Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, CO-C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, C&sub3;-C&sub6;-Cycloalkyl, unsubstituiertes oder substituiertes Phenyl-(CR&sup6;R&sup7;)m-, unsubstituiertes oder substituiertes Het(CR&sup6;R&sup7;)m-, wobei die Alkyl-, Cycloalkyl-, Phenyl- und Het-Gruppen optional substituiert sein können mit Halogen, Hydroxy, NR³R&sup4;, NR³COR&sup4;, CO&sub2;R³, CONR³R&sup4;, S(O)mR³, SO&sub3;H, S(O)mNR³R&sup4; und COR³ ist;

R&sup6; und R&sup7; unabhängig voneinander Wasserstoff, C&sub1;-C&sub6;-Alkyl, CO&sub2;R³, Hydroxy, CONR³R&sup4; oder Cyano sind;

und der pharmazeutisch akzeptablen Salze und Solvate derselben zur Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung zur Prävention oder Behandlung von Retrovirusinfektionen.

9. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 9, wobei R² Wasserstoff ist.

10. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 8 bis 10, wobei R&sup5;

ist.

11. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 8 bis 10, nämlich

[S-(R*,R*)]-3-Methyl-2-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)- pentansäure;

2-(6-Methoxy-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-pentansäure;

(S)-4-Methyl-2-(5-fluor-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)- pentansäure und

(S)-4-Methyl-2-(6-methyl-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)- pentansäure.

12. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 8 bis 10, wobei R&sup5;

ist.

13. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 12, wobei R³ Wasserstoff ist.

14. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 13, nämlich N-Acetyl-4-(3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid.

15. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 13, worin R&sup4; Wasserstoff ist.

16. Verwendung einer Verbindung nach Anspruch 15, nämlich 4-(3-Oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)benzolsulfonamid;

4-(5-Methoxy-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid;

4-(6-Methyl-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid;

4-(6-Fluor-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid;

4-(5-Methyl-3-oxo-3H-benzo[d]isothiazol-2-yl)-benzolsulfonamid.

17. Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 7 und einen pharmazeutisch akzeptablen Träger hierfür umfasst.