ES2993363T3

ES2993363T3 - Combination therapy for the treatment of estrogen-receptor positive breast cancer

Info

Publication number: ES2993363T3
Application number: ES19861171T
Authority: ES
Inventors: Eric Campeau; Olesya Kharenko; Der Horst Edward Van
Original assignee: Zenith Epigenetics Ltd
Current assignee: Zenith Epigenetics Ltd
Priority date: 2018-09-13
Filing date: 2019-09-13
Publication date: 2024-12-27
Anticipated expiration: 2039-09-13
Also published as: CN112912078A; US20220047563A1; TW202023552A; WO2020053664A1; CA3110788A1; EP3849550A4; EP3849550A1; EP3849550B1; JP7441213B2; TWI841598B; JP2022500423A; CN112912078B; WO2020053664A8

Abstract

Métodos para tratar el cáncer de mama con receptores de estrógeno positivos (ER+), que comprenden administrar a un sujeto que lo necesite, un inhibidor del bromodominio BET en combinación con un segundo agente, seleccionado entre un degradador selectivo del receptor de estrógeno (SERD), un modulador selectivo del receptor de estrógeno (SERM) y un inhibidor selectivo de CDK4/6. El inhibidor del bromodominio BET se selecciona entre 1-bencil-6-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-N-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (Compuesto I), 1-bencil-6-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-amina y sales/cocristales farmacéuticamente aceptables de los mismos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Terapia de combinación para el tratamiento de cáncer de mama con receptor de estrógeno positivo

[0001] La presente invención se refiere al tratamiento del cáncer de mama y es tal como se define en las reivindicaciones.

ANTECEDENTES

[0002] Más de 200.000 mujeres son diagnosticadas con cáncer de mama cada año en los Estados Unidos. Aproximadamente el 80 % de estos casos son receptores de estrógeno positivos (ER+), que se caracterizan por la regulación positiva de la señalización de ER. Las líneas actuales de terapias incluyen terapias endocrinas que han dado como resultado grandes mejoras en el tratamiento del cáncer de mama ER+. Desafortunadamente, con el tiempo tiene lugar la resistencia a estas terapias y se necesita el desarrollo de estrategias terapéuticas adicionales. Recientemente, se demostró que las proteínas del bromodominio y extra terminal (BET) BRD3 y BRD4 están involucradas en la transcripción de ER (Feng et al., 2014). El tratamiento con algún inhibidor de BET puede suprimir la señalización mediada por ER, lo que ofrece una posible estrategia para superar la resistencia endocrina mediante una mayor supresión de la señalización de ER independientemente del estado de mutación de ESR1 (Feng et al., 2014; Ladd et al., 2016; Nagarajan et al., 2014; Sengupta et al., 2015). Sin embargo, sigue sin estar claro si BRD3 y/o BRD4 están involucrados en los mecanismos de resistencia a las terapias endocrinas en pacientes, y si el inhibidor de BET puede inhibir de forma potente la proliferación de células de cáncer de mama ER+ que son resistentes a los inhibidores de CDK4/6. Los inhibidores de CDK4/6 son el estándar de atención en el cáncer de mama metastásico ER+ de primera y segunda línea, y una combinación de un inhibidor de CDK4/6 y un inhibidor de BET puede ser la siguiente línea de terapia para sujetos que desarrollan resistencia a la monoterapia con CDK4/6.

[0003] Sin embargo, en este momento, no está claro qué inhibidores de BET, si los hay, producirán un beneficio clínico cuando se administren a sujetos con cáncer de mama ER+. Tampoco está claro qué inhibidores de BET, si los hay, se combinarán de manera sinérgica con otros fármacos, tales como un degradador selectivo del receptor de estrógeno (SERD,selective-estrogen receptor degrader),un modulador selectivo del receptor de estrógeno (SERM,selectiveestrogen receptor modulator),un inhibidor de la aromatasa (AI) o un inhibidor selectivo de CDK4/6, en el tratamiento del cáncer de mama; qué nivel de sinergia se requiere; y qué segundo agente terapéutico será el mejor compañero de combinación para cada inhibidor de BET, lo que producirá un beneficio clínico cuando se administre a pacientes con cáncer de mama. Además de un beneficio clínico, la combinación también tiene que ser segura y bien tolerada en las dosis eficaces. En este momento, no se puede predecir qué combinación mostrará el mejor perfil general.

Kharenko et al (Cancer Res (2018) 78 (4_Suplemento): Resumen P3-06-07) describe que el inhibidor del bromodominio de BET ZEN-3694 actúa sobre varios mecanismos de resistencia a las terapias endocrinas en modelos preclínicos de cánceres de mama ER+. Attwell et al (2015-aacr-eortc, 1 de enero de 2015 (2015-01-01), páginas 1-1) describe la eficacia de ZEN-3694 en el tratamiento de una variedad de tumores sólidos y neoplasias hematológicas, solo o en combinación con otras terapias.Sammons et al. (Targeted Oncology (2019) 14:1-12)) se refiere a la terapia combinada basada en fulvestrant para el tratamiento de segunda línea del cáncer de mama avanzado con receptor hormonal positivo.

CARACTERÍSTICAS DE LA INVENCIÓN

[0004] La presente invención se define en las reivindicaciones. En particular, la presente invención da a conocer un inhibidor del bromodominio de BET seleccionado entre 1-bencil-6-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-N-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (Compuesto I) y sales/cocristales farmacéuticamente aceptables del mismo, para su uso en un procedimiento de tratamiento de cáncer de mama con receptor de estrógeno positivo (ER+) en un paciente, comprendiendo el procedimiento la administración de dicho inhibidor del bromodominio de BET en combinación con un segundo agente terapéutico, en el que el segundo agente terapéutico es fulvestrant o el segundo agente terapéutico es abemaciclib.

DESCRIPCION DETALLADA

[0005] La información técnica que se expone a continuación puede, en algunos aspectos, ir más allá del alcance de la presente invención, que se define en las reivindicaciones adjuntas. La información técnica adicional se proporciona para situar la invención real en un contexto técnico más amplio y para ilustrar posibles desarrollos técnicos relacionados. Cualquier referencia incidental a procedimientos para el tratamiento del cuerpo humano o animal mediante cirugía o terapia y procedimientos de diagnóstico practicados en el cuerpo humano o animal no debe interpretarse como una reivindicación de protección para dichos procedimientos como tales, sino que debe interpretarse como una referencia a productos, en particular sustancias o composiciones, para su uso en cualquiera de estos procedimientos.

[0006] La presente invención se refiere al tratamiento del cáncer de mama con receptores de estrógeno positivos (ER+) mediante la administración concomitante de un inhibidor del bromodominiocde BET, o una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable de un inhibidor del bromodominio de BET, y un segundo agente terapéutico a un sujeto que lo necesite. En la presente invención, el inhibidor del bromodominio de BET es 1-bencil-e-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-N-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (Compuesto I) y el segundo agente terapéutico es fulvestrant o abemaciclib.

[0007] En algunas realizaciones de la presente invención, el procedimiento para tratar el cáncer de mama ER+ es una terapia de combinación triple que comprende la administración de un inhibidor del bromodominio de BET, un segundo agente terapéutico y un modulador del receptor de estrógeno.

[0008] En algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET se administra simultáneamente con el segundo agente terapéutico y opcionalmente con el modulador del receptor de estrógeno. En algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET se administra secuencialmente con el segundo agente terapéutico y opcionalmente con el modulador del receptor de estrógeno. En algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET se administra en una única composición farmacéutica con el segundo agente terapéutico y opcionalmente con el modulador del receptor de estrógeno. En algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET y el segundo agente terapéutico y opcionalmente el modulador del receptor de estrógeno se administran como composiciones separadas. En algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET y el segundo agente terapéutico están en una única composición y el modulador del receptor de estrógeno opcional está en una composición separada.

[0009] Tal como se describe en general en el presente documento, un inhibidor del bromodominio de BET puede ser

o un estereoisómero, tautómero, sal farmacéuticamente aceptable o cocristal del mismo, en el que:

Elanillo Ay elanillo Bpueden estar opcionalmente sustituidos con grupos seleccionados independientemente entre hidrógeno, deuterio, -NH<2 ,>amino, heterociclo (C<4>- C<e>), carbociclo (C<4>- C<e>), halógeno, -CN, -OH, -CF<3>, alquilo (C<1>- C<e>), tioalquilo (C<1>- C<e>), alquenilo (C<1>- C<e>) y alcoxi (C<1>- C<e>);

Xse selecciona entre -NH-, -CH<2>-, -CH<2>CH<2>-, -CH<2>CH<2>CH<2>-, -CH<2>CH<2>O-, -CH<2>CH<2>NH-, -CH<2>CH<2>S-, -C(O)-, -C(O)CH<2>-, -C(O)CH<2>CH<2>-, -CH<2>C(O)-, -CH<2>CH<2>C(O)-, -C(O)NH-, -C(O)O-, -C(O)S-, -C(O)NHCH<2>-, -C(O)OCH<2>-<,>-C(O)SCH<2>-, en los que uno o más hidrógenos pueden reemplazarse independientemente por deuterio, hidroxilo, metilo, halógeno, -CF<3>, cetona, y en los que S puede estar oxidado a sulfóxido o sulfona;

R4 se selecciona entre carbociclos y heterociclos de 3 a 7 miembros opcionalmente sustituidos; y

Di se selecciona entre los siguientes heterociclos monocíclicos de 5 miembros:

t t t

que están opcionalmente sustituidos con hidrógeno, deuterio, alquilo (C- C<4>), alcoxi (C<1>- C<4>), amino, halógeno,

amida, -CF<3>, -CN, -N<3>, cetona (C<1>- C<4>), -S(O)Alquil(C<1>- C<4>), -SO<2>alquilo (C<1>- C<4>), -tioal éster, cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con hidrógeno, F, Cl, Br, -OH, -NH<2>, -NHMe, -OMe, -SMe, oxo, y/o tio/oxo.

[0010] En la presente invención, el inhibidor del bromodominio de BET es como se define en las reivindicaciones. Por consiguiente, en algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET es un compuesto de Fórmula 1a que es

1-bencil-6-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-N-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridina-2-amina (Compuesto I), que tiene la siguiente fórmula:

[0011] En algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET es una sal o cocristal farmacéuticamente aceptable del Compuesto I. En algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET es una sal de mseilato/cocristal de la Forma I del Compuesto I.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS

[0012]

Figura 1.Combinación sinérgica del compuesto I con abemaciclib en células WT-MCF7. CI = 0,08

Figura 2.Combinación sinérgica del Compuesto I con abemaciclib en células Palbo-R-MCF7. CI = 0,20

Figura 3.Combinación sinérgica del Compuesto I con abemaciclib en células ZR-75-1. CI = 0,14

Figura 4. Combinación sinérgica del Compuesto I con abemaciclib en células Palbo-R ZR-75-1. CI = 0,35

Figura 5.Combinación sinérgica del Compuesto I con abemaciclib en células Abema-R MCF7. CI = 0,30

Figura 6.Combinación sinérgica del Compuesto I con fulvestrant en células WT-MCF7. CI = 0,51.

Lafigura 7muestra un difractograma de rayos X en polvo (XRPD) de una sal de mesilato/cocristal del Compuesto I.

Lafigura 8muestra una curva de calorímetro de barrido diferencial (DSC) de una sal de mesilato/cocristal del Compuesto I.

Lafigura 9muestra un análisis termogravimétrico (TGA) de una sal de mesilato/cocristal del Compuesto I.

Definiciones

[0013] Tal como se utiliza en el presente documento, "tratamiento" o "tratar" se refiere a una mejora de una enfermedad

o trastorno, o al menos un síntoma discernible del mismo. En otra realización, "tratamiento" o "tratar" se refiere a una

mejora de al menos un parámetro físico medible, no necesariamente discernible por el paciente. En aún otra realización, "tratamiento" o "tratar" se refiere a inhibir la progresión de una enfermedad o trastorno, ya sea físicamente,

por ejemplo, la estabilización de un síntoma discernible, fisiológicamente, por ejemplo, la estabilización de un parámetro físico, o ambos. En aún otra realización, "tratamiento" o "tratar" se refiere a retrasar la aparición de una enfermedad o trastorno.

[0014] Por "opcional" u "opcionalmente" se entiende que el evento o circunstancia descrito posteriormente puede o no

tener lugar, y que la descripción incluye casos en los que el evento o circunstancia tiene lugar y casos en los que no

tiene lugar . Por ejemplo, "arilo opcionalmente sustituido" abarca tanto "arilo" como "arilo sustituido", tal como se define

a continuación. Los expertos en la materia entenderán, con respecto a cualquier grupo que contenga uno o más sustituyentes, que dichos grupos no pretenden introducir ninguna sustitución o patrones de sustitución que sean estéricamente imprácticos, sintéticamente no factibles y/o inherentemente inestables.

[0015] Tal como se utiliza en el presente documento, el término "hidrato" se refiere a una forma cristalina con una cantidad estequiométrica o no estequiométrica de agua incorporada en la estructura cristalina.

[0016] El término "alquenilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un hidrocarburo lineal o ramificado insaturado que tiene al menos un doble enlace carbono-carbono, tal como un grupo lineal o ramificado de

2 a 8 átomos de carbono, denominado en el presente documento como alquenilo (C2 - Ce). Los grupos alquenilo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, vinilo, alilo, butenilo, pentenilo, hexenilo, butadienilo, pentadienilo, hexadienilo,

2-etilhexenilo, 2-propil-2-butenilo y 4-(2-metil-3-buteno)-pentenilo.

[0017] El término "alcoxi", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo unido a un oxígeno (-O-alquilo-). Los grupos "alcoxi" también incluyen un grupo alquenilo unido a un oxígeno ("alqueniloxi") o un grupo alquinilo unido a un grupo oxígeno ("alquiniloxi"). Los grupos alcoxi de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, grupos con un grupo alquilo, alquenilo o alquinilo de 1-8 átomos de carbono, denominados en el presente documento como alcoxi (C<1>- C<e>). Los grupos alcoxi de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, metoxi y etoxi.

[0018] El término "alquilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un hidrocarburo saturado lineal o ramificado, tal como un grupo lineal o ramificado de 1 a 8 átomos de carbono, denominado en el presente documento alquilo (C<1>- C<e>). Los grupos alquilo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, propilo, isopropilo, 2-metil-1 -propilo, 2-metil-2-propilo, 2-metil-1 -butilo, 3-metil-1-butilo, 2-metil-3-butilo, 2,2-dimetil-1-propilo, 2-metil-1 -pentilo, 3-metil-1-pentilo, 4-metil-1 -pentilo, 2-metil-2-pentilo, 3-metil-2-pentilo, 4-metil-2-pentilo, 2,2-dimetil-1-butilo, 3,3-dimetil-1 -butilo, 2-etil-1 -butilo, butilo, isobutilo, t-butilo, pentilo, isopentilo, neopentilo, hexilo, heptilo y octilo.

[0019] El término "amida", tal como se utiliza en el presente documento se refiere a -NR<a>C(O)(R)- o -C(O)NRR<c>, en las que R<a>, Ry R<c>se seleccionan cada uno independientemente de alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo e hidrógeno. La amida puede estar unida a otro grupo a través del carbono, el nitrógeno, Ro R<c>. La amida también puede ser cíclica, por ejemplo, Ry R<c>pueden estar unidos para formar un anillo de 3 a 8 miembros, tal como un anillo de 5 o 6 miembros. El término "amida" abarca grupos, tales como sulfonamida, urea, ureido, carbamato, ácido carbámico y versiones cíclicas de los mismos. El término "amida" también abarca un grupo amida unido a un grupo carboxi, por ejemplo, -amida-COOH o sales, tales como -amida-COONa, un grupo amino unido a un grupo carboxi (por ejemplo, -amino-COOH o sales, tales como -amino-COONa).

[0020] El término "amina" o "amino", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a la forma -NR<d>R<e>o -N(R<d>)R<e>-, en las que R<d>y R<e>se seleccionan independientemente de alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, arilalquilo, carbamato, cicloalquilo, haloalquilo, heteroarilo, heterociclo e hidrógeno. El amino puede estar unido al grupo molecular original a través del nitrógeno. El amino también puede ser cíclico, por ejemplo, dos cualquiera de R<d>y R<e>pueden estar unidos entre sí o con el N para formar un anillo de 3 a 12 miembros (por ejemplo, morfolino o piperidinilo). El término amino también incluye la sal de amonio cuaternario correspondiente de cualquier grupo amino. Los grupos amino de ejemplo incluyen grupos alquilamino, en los que al menos uno de R<d>o R<e>es un grupo alquilo. En algunas realizaciones, R<d>y R<e>pueden estar opcionalmente sustituidos cada uno con hidroxilo, halógeno, alcoxi, éster o amino.

[0021] El término "arilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un sistema de anillo aromático mono-, bi- u otro multi-carbocíclico. El grupo arilo puede estar opcionalmente fusionado a uno o más anillos seleccionados entre arilos, cicloalquilos y heterociclilos. Los grupos arilo de la presente divulgación pueden estar sustituidos con grupos seleccionados entre alcoxi, ariloxi, alquilo, alquenilo, alquinilo, amida, amino, arilo, arilalquilo, carbamato, carboxi, ciano, cicloalquilo, éster, éter, formilo, halógeno, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo, hidroxilo, cetona, nitro, fosfato, sulfuro, sulfinilo, sulfonilo, ácido sulfónico, sulfonamida y tiocetona. Los grupos arilo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, fenilo, tolilo, antracenilo, fluorenilo, indenilo, azulenilo y naftilo, así como restos carbocíclicos fusionados con benzo, tales como 5,6,7,8-tetrahidronaftilo. Los grupos arilo de ejemplo también incluyen, pero no se limitan a, un sistema de anillo aromático monocíclico, en el que el anillo comprende 6 átomos de carbono, denominado en el presente documento "arilo (C<6>)".

[0022] El término "arilalquilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo que tiene al menos un sustituyente arilo (por ejemplo, -aril-alquilo-). Los grupos arilalquilo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, arilalquilos que tienen un sistema de anillo aromático monocíclico, en donde el anillo comprende 6 átomos de carbono, denominados en el presente documento "arilalquilo (C<6>)”.

[0023] El término "carbamato", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a la forma -R<g>OC(O)N(R<h>)-, -R<g>OC(O)N(R<h>)R-, o -OC(O)NR<h>R, en la que R<g>, R<h>y Rse seleccionan cada uno independientemente de alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo e hidrógeno. Los carbamatos de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, arilcarbamatos o heteroarilcarbamatos (por ejemplo, en los que al menos uno de R<g>, R<h>y Rse seleccionan independientemente de arilo o heteroarilo, tales como piridina, piridazina, pirimidina y pirazina).

[0024] El término "carbociclo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo arilo o cicloalquilo.

[0025] El término "carboxi", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a -COOH o sus sales de carboxilato correspondientes (por ejemplo, -COONa). El término carboxi también incluye "carboxicarbonilo", por ejemplo, un grupo carboxi unido a un grupo carbonilo, por ejemplo, -C(O)-COOH o sales, tales como -C(O)-COONa.

[0026] El término "cicloalcoxi", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo cicloalquilo unido a un oxígeno.

[0027] El término "cicloalquilo"', tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo hidrocarburo cíclico, bicíclico o bicíclico con puente, saturado o insaturado, de 3 a 12 carbonos, o de 3 a 8 carbonos, denominado en el presente documento "cicloalquilo (C<3>- C<e>)", derivado de un cicloalcano. Los grupos cicloalquilo de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, ciclohexanos, ciclohexenos, ciclopentanos y ciclopentenos. Los grupos cicloalquilo pueden estar sustituidos con alcoxi, ariloxi, alquilo, alquenilo, alquinilo, amida, amino, arilo, arilalquilo, carbamato, carboxi, ciano, cicloalquilo, éster, éter, formilo, halógeno, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo, hidroxilo, cetona, nitro, fosfato, sulfuro, sulfinilo, sulfonilo, ácido sulfónico, sulfonamida y tiocetona. Los grupos cicloalquilo pueden estar fusionados a otros grupos cicloalquilo, saturados o insaturados, arilo o heterociclilo.

[0028] El término "ácido dicarboxílico", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo que contiene al menos dos grupos de ácido carboxílico, tales como ácidos dicarboxílicos de hidrocarburos saturados e insaturados y sales de los mismos. Los ácidos dicarboxílicos de ejemplo incluyen ácidos dicarboxílicos de alquilo. Los ácidos dicarboxílicos pueden estar sustituidos con alcoxi, ariloxi, alquilo, alquenilo, alquinilo, amida, amino, arilo, arilalquilo, carbamato, carboxi, ciano, cicloalquilo, éster, éter, formilo, halógeno, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo, hidrógeno, hidroxilo, cetona, nitro, fosfato, sulfuro, sulfinilo, sulfonilo, ácido sulfónico, sulfonamida y tiocetona. Los ácidos dicarboxílicos incluyen, pero no se limitan a, ácido succínico, ácido glutárico, ácido adípico, ácido subérico, ácido sebácico, ácido azelaico, ácido maleico, ácido ftálico, ácido aspártico, ácido glutámico, ácido malónico, ácido fumárico, ácido (+)/(-)-málico, ácido (+)/(-) tartárico, ácido isoftálico y ácido tereftálico. Los ácidos dicarboxílicos incluyen además derivados de ácido carboxílico de los mismos, tales como anhídridos, imidas, hidrazidas (por ejemplo, anhídrido succínico y succinimida).

[0029] El término "éster" se refiere a la estructura -C(O)O-, -C(O)OR<j ->, -R<k>C(O)OR<j->o -R<k>C(O)O-, donde O no está unido a hidrógeno, y R<j>y R<k>pueden seleccionarse independientemente entre alcoxi, ariloxi, alquilo, alquenilo, alquinilo, amida, amino, arilo, arilalquilo, cicloalquilo, éter, haloalquilo, heteroarilo y heterociclilo. R<k>puede ser un hidrógeno, pero R<j>no puede ser hidrógeno. El éster puede ser cíclico, por ejemplo el átomo de carbono y R<j>, el átomo de oxígeno y R<k>, o R<j>y R<k>pueden estar unidos para formar un anillo de 3 a 12 miembros. Los ésteres de ejemplo incluyen, pero no se limitan a, ésteres de alquilo en los que al menos uno de Rj o Rk es alquilo, tal como -OC(O)-alquilo, -C(O)-O-alquilo- y -alquil-C(O)-O-alquilo-. Los ésteres de ejemplo también incluyen ésteres de arilo o heteroarilo, por ejemplo, en los que al menos uno de Rj o Rk es un grupo heteroarilo, tal como piridina, piridazina, pirimidina y pirazina, tal como un éster de nicotinato. Los ésteres de ejemplo también incluyen ésteres inversos que tienen la estructura -R<k>C(O)O-, en la que el oxígeno está unido a la molécula original. Los ésteres inversos de ejemplo incluyen succinato, D-argininato, L-argininato, L-lisinato y D-lisinato. Los ésteres también incluyen anhídridos de ácido carboxílico y haluros de ácido.

[0030] Los términos "halo " o "halógeno", tal como se utilizan en el presente documento, se refieren a F, Cl, Br o I.

[0031] El término "haloalquilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno o más átomos de halógeno. Los "haloalquilos" también abarcan grupos alquenilo o alquinilo sustituidos con uno o más átomos de halógeno.

[0032] El término "heteroarilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un sistema de anillo aromático mono-, bi- o multi-cíclico que contiene uno o más heteroátomos, por ejemplo 1-3 heteroátomos, tales como nitrógeno, oxígeno y azufre. Los heteroarilos pueden sustituirse con uno o más sustituyentes que incluyen alcoxi, ariloxi, alquilo, alquenilo, alquinilo, amida, amino, arilo, arilalquilo, carbamato, carboxi, ciano, cicloalquilo, éster, éter, formilo, halógeno, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo, hidroxilo, cetona, nitro, fosfato, sulfuro, sulfinilo, sulfonilo, ácido sulfónico, sulfonamida y tiocetona. Los heteroarilos también pueden fusionarse a anillos no aromáticos. Entre los ejemplos ilustrativos de grupos heteroarilo se incluyen, pero no se limitan a, piridinilo, piridazinilo, pirimidilo, pirazilo, triazinilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, (1,2,3)- y (1,2,4)-triazolilo, pirazinilo, pirimidililo, tetrazolilo, furilo, tienilo, isoxazolilo, tiazolilo, furilo, fenilo, isoxazolilo y oxazolilo. Entre los ejemplos de grupos heteroarilo se incluyen, pero no se limitan a, un anillo aromático monocíclico, en donde el anillo comprende de 2 a 5 átomos de carbono y de 1 a 3 heteroátomos, denominado en el presente documento "heteroarilo (C<2>- C<5>)".

[0033] Los términos "heterociclo", "heterociclilo" o "heterocíclico", tal como se utilizan en el presente documento, se refieren a un anillo saturado o insaturado de 3, 4, 5, 6 o 7 miembros que contiene uno, dos o tres heteroátomos seleccionados independientemente entre nitrógeno, oxígeno y azufre. Los heterociclos pueden ser aromáticos (heteroarilos) o no aromáticos. Los heterociclos pueden estar sustituidos con uno o más sustituyentes que incluyen alcoxi, ariloxi, alquilo, alquenilo, alquinilo, amida, amino, arilo, arilalquilo, carbamato, carboxi, ciano, cicloalquilo, éster, éter, formilo, halógeno, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo, hidroxilo, cetona, nitro, fosfato, sulfuro, sulfinilo, sulfonilo, ácido sulfónico, sulfonamida y tiocetona. Los heterociclos también incluyen grupos bicíclicos, tricíclicos y tetracíclicos en los que cualquiera de los anillos heterocíclicos anteriores está fusionado a uno o dos anillos seleccionados independientemente entre arilos, cicloalquilos y heterociclos. Los heterociclos de ejemplo incluyen acridinilo, bencimidazolilo, benzofurilo, benzotiazolilo, benzotienilo, benzoxazolilo, biotinilo, cinolinilo, dihidrofurilo, dihidroindolilo, dihidropiranilo, dihidrotienilo, ditiazolilo, furilo, homopiperidinilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, imidazolilo, indolilo, isoquinolilo, isotiazolidinilo, isotiazolilo, isoxazolidinilo, isoxazolilo, morfolinilo, oxadiazolilo, oxazolidinilo, oxazolilo, piperazinilo, piperidinilo, piranilo, pirazolidinilo, pirazinilo, pirazolilo, pirazolinilo, piridazinilo, piridilo, pirimidinilo, pirimidilo, pirrolidinilo, pirrolidin-2-onilo, pirrolinilo, pirrolilo, quinolinilo, quinoxaloilo, tetrahidrofurilo, tetrahidroisoquinolilo, tetrahidropiranilo, tetrahidroquinolilo, tetrazolilo, tiadiazolilo, tiazolidinilo, tiazolilo, tienilo, tiomorfolinilo, tiopiranilo y triazolilo.

[0034] Los términos "hidroxi" e "hidroxilo", tal como se utilizan en el presente documento, se refieren a -OH.

[0035] El término "hidroxialquilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un hidroxi unido a un grupo alquilo.

[0036] El término "hidroxiarilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un hidroxi unido a un grupo arilo.

[0037] El término "cetona", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a la estructura -C(O)-Rn (tal como acetilo, -C(O)CH<3>) o -R<n>-C(O)-R<o>-. La cetona puede estar unida a otro grupo a través de R<n>o R<o>. R<n>o R<o>pueden ser alquilo, alquenilo, alquinilo, cicloalquilo, heterociclilo o arilo, o R<n>o R<o>pueden estar unidos para formar un anillo de 3 a 12 miembros.

[0038] El término "fenilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un anillo aromático carbocíclico de 6 miembros. El grupo fenilo también puede estar fusionado a un anillo de ciclohexano o ciclopentano. El fenilo puede estar sustituido con uno o más sustituyentes, incluidos alcoxi, ariloxi, alquilo, alquenilo, alquinilo, amida, amino, arilo, arilalquilo, carbamato, carboxi, ciano, cicloalquilo, éster, éter, formilo, halógeno, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo, hidroxilo, cetona, fosfato, sulfuro, sulfinilo, sulfonilo, ácido sulfónico, sulfonamida y tiocetona.

[0039] El término "tioalquilo", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo unido a un azufre (-S-alquilo-).

[0040] Los grupos "alquilo", "alquenilo", "alquinilo", "alcoxi", "amino" y "amida" pueden estar opcionalmente sustituidos con o interrumpidos por o ramificados con al menos un grupo seleccionado entre alcoxi, ariloxi, alquilo, alquenilo, alquinilo, amida, amino, arilo, arilalquilo, carbamato, carbonilo, carboxi, ciano, cicloalquilo, éster, éter, formilo, halógeno, haloalquilo, heteroarilo, heterociclilo, hidroxilo, cetona, fosfato, sulfuro, sulfinilo, sulfonilo, ácido sulfónico, sulfonamida, tiocetona, ureido y N. Los sustituyentes pueden estar ramificados para formar un heterociclo o cicloalquilo sustituido o no sustituido.

[0041] Tal como se utiliza en el presente documento, una sustitución adecuada en un sustituyente opcionalmente sustituido se refiere a un grupo que no anula la utilidad sintética o farmacéutica de los compuestos de la presente divulgación o los intermedios útiles para prepararlos. Entre los ejemplos de sustituciones adecuadas se incluyen, pero no se limitan a: alquilo, alquenilo o alquinilo C; arilo C<1-6>, heteroarilo C<2-5>; cicloalquilo C<3.7>; alcoxi C; ariloxi C<6>; -CN; -OH; oxo; halo, carboxi; amino, tal como -NH(alquilo C), -N(alquilo C)<2>, -NH(arilo (C<6>) o -N(arilo (C<6>)<2>; formilo; cetonas, tales como -CO(alquilo C), ésteres -CO((arilo C<6>), tales como -CO<2>(alquilo C) y -CO<2>(arilo C<6>). Un experto en la materia puede elegir fácilmente una sustitución adecuada basándose en la estabilidad y la actividad farmacológica y sintética del compuesto de la presente divulgación.

[0042] El término "composición farmacéuticamente aceptable", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a una composición que comprende al menos un compuesto tal como se describe en el presente documento formulado junto con uno o más portadores farmacéuticamente aceptables.

[0043] El término "portador farmacéuticamente aceptable", tal como se utiliza en el presente documento, se refiere a todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes isotónicos y retardantes de la absorción, y similares, que son compatibles con la administración farmacéutica. El uso de dichos medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en la técnica. Las composiciones también pueden contener otros compuestos activos que proporcionan funciones terapéuticas complementarias, adicionales o mejoradas.

[0044] Tal como se resumió anteriormente, el cáncer de mama ER+ se puede tratar con una terapia de combinación que comprende la administración de un inhibidor del bromodominio de BET de Fórmula la o Fórmula Ib, o un estereoisómero, tautómero o sal/cocristal farmacéuticamente aceptable del mismo, y un segundo agente terapéutico a un sujeto que lo necesite:

en las que:

Di se selecciona entre los siguientes heterociclos monocíclicos de 5 miembros:

que están opcionalmente sustituidos con hidrógeno, deuterio, alquilo (C<1>- C<4>), alcoxi (C<1>- C<4>), amino, halógeno, amida, -CF<3>, -CN, -N<3>, cetona (C<1>- C<4>), -S(O)Alquil(C- C<4>), -SO<2>alquilo (C<1>- C<4>), -tioalquilo éster, cada uno de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con hidrógeno, F, Cl, Br, -OH, -NH<2>, -NHMe, -OMe, -SMe, oxo, y/o tio/oxo.

[0045] Los compuestos de Fórmula la y Ib, incluido el Compuesto I, se han descrito previamente en la Publicación de Patente Internacional WO 2015/002754, y particularmente su descripción de los compuestos de Fórmula la y Fórmula Ib, incluido el Compuesto I, su síntesis y la demostración de su actividad inhibidora del bromodominio de b Et .

[004e] La presente invención se refiere al tratamiento del cáncer de mama ER+ que comprende administrar a un sujeto que lo necesita, un compuesto seleccionado entre 1-bencil-e-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-N-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (Compuesto I) y sales o cocristales farmacéuticamente aceptables del mismo, concomitantemente con otro agente terapéutico, tal como se define en las reivindicaciones.

[0047] En una realización, el inhibidor del bromodominio de BET administrado en la presente invención es la sal de mesilato o cocristal de 1-bencil-e-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-N-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (Compuesto I).

[0048] En una realización, un compuesto seleccionado de 1-bencil-e-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-N-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (Compuesto I) y sales o cocristales farmacéuticamente aceptables del mismo, se dosifica con un segundo agente terapéutico sin provocar trombocitopenia como toxicidad limitante de la dosis.

[0049] Un segundo agente terapéutico adecuado puede ser un degradador selectivo del receptor de estrógeno (SERD). Por consiguiente, en algunas realizaciones, el segundo agente terapéutico es fulvestrant.

[0050] En algunas realizaciones, el sujeto ha sido tratado previamente con un inhibidor de la aromatasa.

[0051] En algunas realizaciones según la invención, el segundo agente terapéutico es fulvestrant.

[0052] Un segundo agente terapéutico adecuado puede ser un inhibidor de CDK4/6. Por consiguiente, en algunas realizaciones de acuerdo con la invención, el segundo agente terapéutico es abemaciclib.

[0053] En algunas realizaciones, el segundo agente terapéutico es abemaciclib.

[0054] En algunas realizaciones, el sujeto ha sido tratado previamente con una terapia contra el cáncer de mama. En algunas realizaciones, la terapia previa contra el cáncer de mama es quimioterapia. En algunas realizaciones, la terapia previa contra el cáncer de mama es tratamiento con un inhibidor de CDK4/6. En algunas realizaciones, la terapia previa contra el cáncer de mama es inmunoterapia.

[0055] En algunas realizaciones, el sujeto es un ser humano.

[0056] En algunas realizaciones, el inhibidor del bromodominio de BET, tal como se describe en el presente documento, se administra concomitantemente con el segundo agente terapéutico. "Concomitantemente", tal como se usa en el presente documento, significa que el inhibidor del bromodominio de BET y el segundo agente terapéutico se administran con una separación de tiempo de unos pocos segundos (por ejemplo, 15 segundos, 30 segundos, 45 segundos, 60 segundos o menos), varios minutos (por ejemplo, 1 minuto, 2 minutos, 5 minutos o menos, 10 minutos o menos, 15 minutos o menos) o 1-12 horas. Cuando se administran concomitantemente, el inhibidor del bromodominio de BET y el otro agente terapéutico pueden administrarse en dos o más administraciones, y pueden estar contenidos en composiciones o formas de dosificación separadas, que pueden estar contenidas en el mismo envase o envases diferentes.

LISTA DE REFERENCIAS

[0057]

Chou, T.C. and Talalay, P. (2984), Quantitative analysis of dose-effect relationships: The combined effects of multiple drugs or enzyme inhibitors. Advances in Enzyme Regulation 22, 27-55.

Feng, Q., Zhang, Z., Shea, M.J., Creighton, C.J., Coarfa, C., Hilsenbeck, S.G., Lanz, R., He, B., Wang, L., Fu, X., et al. (2014). An epigenomic approach to therapy for tamoxifen-resistant breast cancer. Cell Res 24, 809-819.

Ladd, B., Mazzola, A.M., Bihani, T., Lai, Z., Bradford, J., Collins, M., Barry, E., Goeppert, A.U., Weir, H.M., Hearne, K., et al. (2016). Effective combination therapies in preclinical endocrine resistant breast cancer models harboring ER mutations. Oncotarget 7, 54120-54136.

Nagarajan, S., Hossan, T., Alawi, M., Najafova, Z., Indenbirken, D., Bedi, U., Taipaleenmaki, H., Ben-Batalla, I., Scheller, M., Loges, S., et al. (2014). Bromodomain Protein BRD4 Is Required for Estrogen Receptor-Dependent Enhancer Activation and Gene Transcription. Cell reports 8, 460-469.

Sengupta, S., Biarnes, M., Clarke, R., and Jordan, V.C. (2015). Inhibition of BET proteins impairs estrogen-mediated growth and transcription in breast cancers by pausing RNA polymerase advancement. Breast Cancer Res Treat 150, 265-278.

EJEMPLOS

[0058] Los medios de cultivo de tejidos y los reactivos se obtuvieron de ThermoFisher Scientific. El fulvestrant se obtuvo de Sigma, el abemaciclib y el palbociclib se obtuvieron de Selleckchem.

Ejemplo 1: Síntesis del compuesto 1

Etapa A: Síntesis de 5-bromo-N3-(fenilmetilen)piridina-2,3-diamina (compuesto B)

[0059]

[0060] El material de partida A se disolvió en metanol y ácido acético. La solución se enfrió hasta 0-5 °C y se añadió benzaldehído gota a gota. Una vez completada la reacción, se añadió agua del proceso y una solución de NaHCO3 gota a gota, manteniendo la temperatura baja (0-5 °C). El sólido se separó por filtración y se lavó con metanol/agua 1:1, seguido de secado, dejando el Compuesto B con un rendimiento del 94 % y una pureza del 99 % por HPLC. 1H-RMN (DMSO-da): 88,75 (1H), 8,04 (2H), 7,93 (1H), 7,65 (1H), 7,50-7,60 (3H).

Etapa B: Síntesis de N3-Bencil-5-bromopiridina-2,3-diamina (Compuesto C)

[0061]

[0062] El compuestoBse disolvió en etanol y se añadió NaBH4 en porciones manteniendo la temperatura entre 15 25 °C. La mezcla de reacción se agitó durante 8-15 horas hasta que se completó la reacción, tal como se monitorizó por HPLC. Se añadió una solución de HCl, ajustando el pH a 6-7, seguido de agua del proceso, manteniendo la temperatura entre 15-25 °C. La mezcla se agitó durante 1-5 horas, se filtró y se lavó con una mezcla de etanol/agua. Después de secar a ~60 °C durante 15-20 horas, se obtuvo el compuesto C. 1H-RMN (DMSO-d6): d 7,2-7,4 (6 H), 6,55 (1 H), 5,70-5,83 (3 H), 4,30 (2 H).

Etapa C: Síntesis de N3-Bencil-5-(3,5-dimetil-1,2-oxazol-4-il)piridina-2,3-diamina (Compuesto D)

[0063]

[0064] El CompuestoC, el CompuestoGy el fosfato de potasio tribásico trihidratado se mezclaron, seguido de la adición de 1,4-dioxano y agua del proceso. La mezcla resultante se purgó completamente con nitrógeno. Se añadió tetrakis(trifenilfosfina)paladio(0) y la mezcla se calentó hasta > 90 °C hasta que la relación del CompuestoCcon respecto al CompuestoDno fue mayor que el 1 %. Después de enfriar, la mezcla de reacción se filtró, el sólido se lavó con 1,4-dioxano y a continuación se concentró. Se añadió agua del proceso y la mezcla se agitó hasta que la cantidad de CompuestoDrestante en las aguas madres no fue mayor que el 0,5 %. El CompuestoDse aisló por filtración y se lavó secuencialmente con 1,4-dioxano/agua y éter t-butilmetílico. La torta húmeda se mezcló en cloruro de metileno y gel de sílice. Después de agitar, la mezcla se filtró y a continuación se concentró. La mezcla se enfrió y se añadió éter t-butilmetílico. El producto se aisló por filtración y se secó hasta que los niveles de cloruro de metileno, éter t-butilmetílico y humedad no superaron el 0,5 %. 1H-RMN (DMSO-d6): 87,30-7,45 (4 H), 7,20-7,25 (2 H), 6,35 (1 H), 5,65-5,80 (3 H), 4,30-4,40 (2 H), 2,15 (3 H), 1,95 (3 H).

Etapa D: Síntesis de 1-bencil-6-(3,5-dimetil-1,2-oxazol-4-il)-3H-imidazo[4,5-b]piridin-2-ona (compuesto E)

[0065]

[0066] Se añadió carbonildiimidazol sólido a una mezcla en agitación del CompuestoDy dimetilsulfóxido. La mezcla se calentó hasta que la relación del CompuestoDcon respecto al CompuestoEfue de no más del 0,5 %. La mezcla se enfrió y se añadió agua del proceso durante varias horas. La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante al menos 2 h. El producto se aisló por filtración y se lavó con agua del proceso. Se verificó que el dimetilsulfóxido era de NMT 0,5 % antes del secado utilizando calor y vacío. El secado se completó cuando el nivel de humedad fue de no más del 0,5 %, dejando el Compuesto E. 1H-RMN (DMSO-da): 811,85 (1 H), 7,90 (1 H), 7,20-7,45 (6 H), 5,05 (2 H), 3,57 (3 H), 2,35 (3 H), 2,15 (3 H).

Etapa E: Síntesis de 4-[1-bencN-2-doro-1H-imidazo[4,5-b]piridma-6-M]-3,5-dimetiM,2-oxazol (compuesto F)

[0067]

[0068] El compuesto E y el oxicloruro de fósforo se mezclaron y, a continuación, se trataron con diisopropiletilamina (DIPEA), que se puede agregar gota a gota. La mezcla resultante se calentó durante varias horas, se enfrió y se tomaron muestras para determinar la finalización de la reacción. Si la relación del compuesto E con respecto compuesto F no era mayor que 0,5 %, entonces la reacción estaba completa. De lo contrario, la reacción se calentó durante más tiempo y se tomaron muestras como antes. Una vez completada la reacción, la mezcla se concentró y a continuación se enfrió. Se añadió acetato de etilo y la mezcla se concentró al vacío varias veces. Se añadió acetato de etilo (EtOAc) al concentrado, la mezcla se enfrió y a continuación se añadió a bicarbonato de sodio acuoso. La fase orgánica se separó y la capa orgánica se lavó con bicarbonato de sodio acuoso y a continuación agua. La fase orgánica se concentró, se añadió acetato de etilo y la mezcla se concentró para asegurar que el nivel de humedad no fuera mayor que 0,2 %. La mezcla en acetato de etilo se decoloró con carbón. La mezcla se concentró y se añadió nheptano. El producto se aisló por filtración y se secó al vacío. El secado se completó cuando la humedad residual, el acetato de etilo y el n-heptano no superaron el 0,5 %. 1H-RMN (MeOH-d4): 88,40 (1 H), 7,90 (1 H), 7,25-7,45 (5 H), 5,65 (2 H), 2,37 (3 H), 2,22 (3 H).

Etapa F: Síntesis de 1-bencil-6-(3,5-dimetil-1,2-oxazol-4-il)-N-metil-1H-imidazo[4,5-b]piridina-2-amina (Compuesto I)

[0069]

[0070] El compuesto F se mezcló con metilamina en tetrahidrofurano (THF) y se agitó a temperatura ambiente hasta que la relación del compuesto F con respecto al compuesto I fue del no más del 1 % según HPLC. Después de completarse la reacción, la mezcla se concentró al vacío, se añadió agua del proceso y el producto se aisló por filtración. La torta de filtración se lavó con agua del proceso. La torta húmeda se disolvió en ácido clorhídrico y la solución resultante se lavó con cloruro de metileno para eliminar las impurezas. La solución acuosa se neutralizó con una solución de hidróxido de sodio y el compuesto I se aisló por filtración, se lavó con agua del proceso y se secó al vacío. Si es necesario, para eliminar cualquier resto de ácido clorhídrico, el material seco se puede disolver en etanol, tratar con una solución de hidróxido de sodio en etanol, seguido de la adición de agua del proceso para precipitar el producto. El compuesto I se aisló por filtración, se lavó con agua del proceso y se secó.<1>H-RMN (DMSO-d<6>) 87,96 (d, 1H, 2,0 Hz), 7,42 (d, 1H, 2,0 Hz), 7,37 (q, 1H, 4,2 Hz), 7,32 (m, 2H), 7,26 (m, 1H), 7,24 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 3,00 (d, 3H, 4,5 Hz), 2,34 (s, 3H), 2,16 (s, 3H).<13>C-RMN (DMSO-d<a>): 8164,8, 158,4, 157,7, 156,0, 141,1, 136,4, 128,6 (2C), 127,5, 127,4, 127,2 (2C), 115,8, 114,2 (2C), 44,5, 29,3, 11,2, 10,3.

Ejemplo 2: Mesilato cristalino del compuesto I

[0071] Se disolvieron aproximadamente 5 g del Compuesto I en etanol (115 mL) y se añadió una solución de ácido metanosulfónico en etanol (10 mL, 158,7 mg/mL), según una relación molar de 1:1. La mezcla se agitó a 50 °C durante 2 h antes de concentrarla a la mitad del volumen y agitarla durante la noche. El sólido formado (sal de mesilato/cocristal de la Forma I del Compuesto I) se aisló, se secó y se caracterizó.

[0072] La sal de mesilato/cocristal de la Forma I del Compuesto I también se obtuvo a partir de otros disolventes y mezclas de disolventes, incluyendo acetona y acetonitrilo.

[0073] La sal de mesilato/cocristal de la Forma I del Compuesto I se caracterizó por XRPD que comprendía los siguientes picos, en términos de 2-theta, a 8,4 ± 0,2, 10,6 ± 0,2, 11,7 ± 0,2, 14,5 ± 0,2, 15,3 ± 0,2, 16,9 ± 0,2, 18,2 ± 0,2, 19,0 ± 0,2, 19,9 ± 0,2, 20,5 ± 0,2, 22,6 ± 0,2, 23,8 ± 0,2, 24,5 ± 0,2 y 27,6 ± 0,2 grados, según se determinó en un difractómetro utilizando un tubo de radiación Cu-K<a>(Figura 7).

[0074] La sal de mesilato/cocristal de la Forma I del Compuesto I se caracterizó por DSC teniendo un pico endotérmico a una temperatura de aproximadamente 207 °C (Figura 8).

[0075] La sal de mesilato/cocristal de la Forma I del Compuesto I se caracterizó por TGA, teniendo un termograma tal como se muestra en la Figura 9, lo que confirma que la Forma I del Compuesto I es una forma anhidra.

Ejemplo 3: Inhibición sinérgica de la viabilidad de la línea celular de cáncer de mama ER+ mediante la combinación del Compuesto I con abemaciclib

[0076] Las células MCF7, Palbo-R-MCF7, ZR-75-1, Abema-R MCF7 y Palbo-R ZR-75-1 se sembraron a una densidad de 7500 células por pocillo en placas de fondo plano de 96 pocillos en medio 1640-RPMI que contenía FBS al 10 % y penicilina/estreptomicina y se incubaron durante 24 horas a 37 °C, 5 % de CO<2>. El medio se reemplazó por 1640-RPMI que contenía FBS al 10 % con proporciones constantes de Compuesto I o abemaciclib como agentes únicos, o una combinación de ambos fármacos en cuatro concentraciones diferentes (2X IC50, 1X IC50, 0,5X IC50, 0,25X IC50), y se incubaron a 37 °C, 5 % de CO<2>durante 7 días. Las células se volvieron a tratar tal como se describió anteriormente el tercer o cuarto día. Se utilizaron pocillos por triplicado para cada concentración y los pocillos que contenían solo medio con DMSO al 0,1 % se utilizaron como control. Para medir la viabilidad celular, se añadieron 100 pL de una dilución 1:100 de sustrato GF-AFC en el tampón de ensayo (ensayo de viabilidad celular CellTiter Fluor (Promega)) a cada pocillo y se incubaron a 37 °C, 5 % de CO<2>durante 30-90 minutos adicionales. La fluorescencia a 380-400 nm de excitación/505 nm de emisión se leyó en un fluorómetro y se calculó el porcentaje de título celular en relación con las células tratadas con DMSO después de corregir el fondo restando la señal del pocillo en blanco. Los valores de IC50 para agentes individuales se calcularon utilizando el software GraphPad Prism. La cuantificación de la sinergia se realizó calculando los índices de combinación (CI,combination indices)utilizando el software CalcuSyn (Biosoft) basado en el algoritmo Chou-Talalay (Chou y Talalay, 1984), y promediando los valores de Cl para las dosis efectivas (ED) 50, 75 y 90. Tal como se muestra en las FIGURAS 1-5, la adición del Compuesto I a abemaciclib resultó en una mejor inhibición de la viabilidad celular en comparación con cualquiera de los agentes individuales, con un valor de Cl promedio de 0,08 a 0,35 dependiendo de la línea celular.

Ejemplo 4: Inhibición sinérgica de la viabilidad de las células MCF7 mediante la combinación del compuesto I con fulvestrant

[0077] Las células MCF7 se sembraron a una densidad de 7.500 células por pocillo en placas de fondo plano de 96 pocillos en medio 1640-RPMI sin rojo fenol que contenía FBS al 10 % sin carbón y penicilina/estreptomicina y se incubaron durante 24 horas a 37 °C, 5 % de CO<2>. El medio se reemplazó con medio 1640-RPMI sin rojo fenol que contenía FBS al 10 % sin carbón y penicilina/estreptomicina tratado con proporciones constantes de Compuesto I o fulvestrant como agentes individuales, o una combinación de ambos fármacos en cuatro concentraciones diferentes (2X IC50, 1X IC50, 0,5X IC50, 0,25X IC50), y se incubaron a 37 °C, 5 % de CO<2>durante 7 días. Las células se volvieron a tratar como se describió anteriormente el tercer o cuarto día. Se utilizaron pocillos triplicados para cada concentración y los pocilios que contenían solo medios con DMSO al 0,1% seutilizaron como control. Para medir la viabilidad celular, se añadieron 100 pL de una dilución 1:100 del sustrato GF-AFC en el tampón de ensayo (ensayo de viabilidad celular CellTiter Fluor (Promega)) a cada pocillo y se incubaron a 37 °C, 5 % de CO2 durante 30-90 minutos adicionales. La fluorescencia a 380-400 nm de excitación/505 nm de emisión se leyó en un fluorómetro y se calculó el porcentaje de título celular en relación con las células tratadas con DMSO después de corregir el fondo restando la señal del pocillo en blanco. Los valores de IC50 para agentes individuales se calcularon utilizando el software GraphPad Prism. La cuantificación de la sinergia se realizó calculando los índices de combinación (CI) utilizando el software CalcuSyn (Biosoft) basado en el algoritmo Chou-Talalay (Chou y Talalay, 1984), y promediando los valores de Cl para las dosis efectivas (ED) 50, 75 y 90. Tal como se muestra en la Figura 6, la adición del Compuesto I al fulvestrant resultó en una mejor inhibición de la viabilidad celular en comparación con cualquiera de los agentes individuales con un valor Cl promedio de 0,51.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Inhibidor del bromodominio de BET seleccionado entre 1-bencil-6-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-N-metiMH-imidazo[4,5-b]piridin-2-amina (Compuesto I) y sales/cocristales farmacéuticamente aceptables del mismo, para su uso en un procedimiento de tratamiento de cáncer de mama con receptor de estrógeno positivo (ER+) en un paciente, comprendiendo el procedimiento la administración de dicho inhibidor del bromodominio de BET en combinación con un segundo agente terapéutico, en el que el segundo agente terapéutico es fulvestrant o el segundo agente terapéutico es abemaciclib.

2. Inhibidor para su uso, según la reivindicación 1, en el que el paciente ha sido tratado previamente con una terapia contra el cáncer de mama.

3. Inhibidor para su uso, según la reivindicación 1, en el que el paciente ha sido tratado previamente con un inhibidor de CDK4/6.

4. Inhibidor para su uso, según la reivindicación 1, en el que el paciente ha sido tratado previamente con quimioterapia.

5. Inhibidor para su uso, según cualquiera de las reivindicaciones 1-2, en el que el paciente ha sido tratado previamente con inmunoterapia.

6. Inhibidor para su uso, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el paciente es un ser humano.

7. Inhibidor para su uso, según la reivindicación 1, en el que el inhibidor del bromodominio de BET se dosifica con un segundo agente terapéutico sin dar como resultado trombocitopenia como toxicidad limitante de la dosis, en el que el segundo agente terapéutico es fulvestrant o abemaciclib.