FI94088C - Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista - Google Patents
Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista Download PDFInfo
- Publication number
- FI94088C FI94088C FI921097A FI921097A FI94088C FI 94088 C FI94088 C FI 94088C FI 921097 A FI921097 A FI 921097A FI 921097 A FI921097 A FI 921097A FI 94088 C FI94088 C FI 94088C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- protein
- phenylalanine
- process according
- hydrolyzate
- resin
- Prior art date
Links
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 title claims description 51
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 48
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 28
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 63
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 63
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 63
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 34
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 34
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 claims description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 19
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 claims description 7
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 claims description 7
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 claims description 7
- 239000012466 permeate Substances 0.000 claims description 7
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 claims description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 6
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 6
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims description 5
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims description 5
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 claims description 5
- 235000021119 whey protein Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 28
- 239000000047 product Substances 0.000 description 24
- 201000011252 Phenylketonuria Diseases 0.000 description 21
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 17
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 10
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 7
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 5
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 3
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 3
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 3
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 2
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 2
- 206010013911 Dysgeusia Diseases 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 2
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 2
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 description 2
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 description 2
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 description 2
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000000909 electrodialysis Methods 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 2
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 2
- 230000007065 protein hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000027205 Congenital disease Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 208000012661 Dyskinesia Diseases 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 102000018389 Exopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010091443 Exopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 208000015592 Involuntary movements Diseases 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JFLIEFSWGNOPJJ-JTQLQIEISA-N N(2)-phenylacetyl-L-glutamine Chemical compound NC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CC1=CC=CC=C1 JFLIEFSWGNOPJJ-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 108010069013 Phenylalanine Hydroxylase Proteins 0.000 description 1
- 102100038223 Phenylalanine-4-hydroxylase Human genes 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010059712 Pronase Proteins 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- -1 aromatic amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 230000036765 blood level Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 229940071162 caseinate Drugs 0.000 description 1
- 210000001175 cerebrospinal fluid Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N hcl hcl Chemical compound Cl.Cl IXCSERBJSXMMFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000017311 musculoskeletal movement, spinal reflex action Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 201000009868 osmotic diarrhea Diseases 0.000 description 1
- 208000028719 osmotic diarrheal disease Diseases 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 238000007788 roughening Methods 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 235000013403 specialized food Nutrition 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000012609 strong anion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 238000004148 unit process Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
- A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
- A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
- A23J3/341—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins
- A23J3/343—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins of dairy proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
- A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
- A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
- A23J3/346—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of vegetable proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
- A23L5/27—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by chemical treatment, by adsorption or by absorption
- A23L5/273—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by chemical treatment, by adsorption or by absorption using adsorption or absorption agents, resins, synthetic polymers, or ion exchangers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
- A61K38/011—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
- A61K38/012—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals
- A61K38/018—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from animals from milk
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Botany (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
94088
Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoi-sista koostumuksista
Keksinnön kohteena on menetelmä fenyylialaniinin 5 poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista, jolloin saadaan hyvänmakuisia, ainakin lähes fenyylialaniinittömiä proteiinihydrolysaattikoostumuksia.
Saatu proteiinipitoinen koostumus, josta fenyyli-alaniini on poistettu joko kokonaan tai ainakin suurelta 10 osin, sopii käytettäväksi erikoisravintovalmisteena tai sen komponenttina, erityisesti fenyyliketonuriaa (PKU) sairastavien potilaiden ruokavaliossa.
Proteiinilähteen valinnalla ei voida vähentää fenyylialaniinin saantia ravinnosta, koska fenyylialaniinia 15 on kaikissa eläin- ja kasviproteiineissa noin 4-6 %. PKU-potilaan onkin syytä välttää runsaasti proteiinia sisältäviä ruoka-aineita kuten kananmunaa, kalaa, lihaa ja juustoa. Muiden välttämättömien aminohappojen tarpeen tyydyttämiseksi potilaan tulisikin käyttää kliinisiä proteiini-20 valmisteita, joista fenyylialaniini on joko kokonaan tai osittain poistettu.
Fenyyliketonuria on synnynnäinen sairaus, joka hoitamattomana aiheuttaa jo muutaman viikon kuluttua syntymästä vakavia aivovaurioita ja usein myös kuoleman. Poti-; 25 laalta puuttuu kyky tuottaa fenyylialaniinihydroksylaasia (EC 1. 14.16.1), joka muuttaa ravinnosta saatavan aminohapon, fenyylialaniinin tyrosiiniksi. Fenyylialaniinin ja sen pyruvaatti-, laktaatti- ja asetaattijohdannaisten kertyminen vereen ja selkäydinnesteeseen aiheuttaa pakkoliik-30 keitä, anemiaa, ihon karhenemista ja lopulta aivovaurioita. Taudin voi todeta myös potilaan virtsan kohonneesta fenyyliasetyyliglutamiinipitoisuudesta, mistä tauti onkin saanut nimensä.
2 94088
Yhdysvalloissa sekä suuressa osassa Eurooppaa yksi vastasyntynyt 11 000 - 15 000:sta sairastaa fenyyliketon-uriaa. Irlannissa tauti on yleisempi, siellä yksi lapsi 4500:sta on PKU-potilas. Suomessa fenyyliketonuria on 5 erittäin harvinainen eikä vastasyntyneiden taipumusta fe-nyyliketonuriaan tutkita. Maissa, joissa PKU:aa esiintyy, jokainen lapsi testataan 1-2 viikon kuluessa syntymästä seuraamalla veren fenyylialaniinipitoisuutta. Jos fenyyli-alaniinin määrä veressä kohoaa jatkuvasti, taudin hoitami-10 nen on syytä aloittaa viimeistään kolmen viikon kuluttua syntymästä.
Tarkasti valvottu dieetti on toistaiseksi ainoa käytännöllinen hoitokeino. Kun ravinnosta saatavan fenyy-lialaniinin määrä pystytään pitämään tietyissä rajoissa, 15 potilaan veren fenyylialaniinipitoisuus pysyy sallituissa rajoissa (20-40 mg/1). Fenyylialaniinin sietokyky kasvaa iän myötä, ja dieetti on yleensä voitu lopettaa noin 8 vuoden iässä. Uusimpien tutkimustulosten mukaan dieettiä pitäisi kuitenkin jatkaa pidempään, mikä asettaa entistä 20 suurempia vaatimuksia erikoisravintovalmisteen maulle.
Taudin hoitoon valmistetaan aminohapposeoksia, joista puuttuu fenyylialaniini. Tällaisesta "PKU-proteii-nista" tehdään vastasyntyneille maitoa lisäämällä proteiiniin tarvittavat muut komponentit, kuten rasva, vesi, lak-• 25 toosi yms.. PKU-proteiinista voidaan tehdä myös muita val miita PKU-valmisteita korvaamalla elintarvikkeen valmistuksessa käytettävä proteiini fenyylialaniinittomalla ami-nohapposeoksella.
Tällainen kaupallinen valmiste on esimerkiksi PK 30 AID III -niminen tuote (valmistaja Scientific Hospital : Supplies, Englanti). Tällaiset oleellisesti vain vapaista aminohapoista koostuvat valmisteet maistuvat kitkeriltä ja ne saattavat aiheuttaa osmoottista ripulia. Lisäksi vapaat aminohapot imeytyvät elimistöön huonommin kuin esimerkiksi 35 di- ja tripeptidit.
94088 3
Joitakin menetelmiä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiineista tai proteiinipitoisista koostumuksista jo tunnetaan. Vanhimmassa näistä tunnetuista menetelmistä proteiini ensin pilkotaan vapaiksi aminohapoiksi happohyd-5 rolyysillä, minkä jälkeen fenyylialaniini poistetaan seoksesta aktiivihiilellä (ks. esim. DD-patenttijulkaisu 283 256). Tämän tunnetun prosessin heikkoutena on kuitenkin huono saanto, sillä yleensä vain korkeintaan 50 % aminohapoista saadaan talteen loppujen aminohappojen adsor-10 hoituessa aktiivihiileen. Usein myös muut hydrofobiset aminohapot adsorboituvat lähes kokonaan aktiivihiileen, jolloin niitä on lisättävä jälkeenpäin tuotteeseen. Adsor-benttina käytettyä aktiivihiiltä ei myöskään kyetä regeneroimaan, joten menetelmä on erittäin kallis.
15 Fenyylialaniini on saatu poistetuksi proteiinin happohydrolysaatista myös vahvaa anioninvaihtohartsia käyttäen (US-patenttijulkaisu 4 384 136 ja GB-patenttijulkaisu 2 103 221 A). Anioninvaihtohartsi ei kuitenkaan sovellu hyvin teolliseen tuotantoon, koska sen käyttö vaatii 20 puskuriliuosten käyttöä.
Lopez-Bajoneron et ai. esittivät julkaisussa J. Food Sei., 56(4) (1991) 938-942 menetelmän, jossa fenyyli-alaniinia poistettiin proteiinipitoisista koostumuksista. Tällöin rasvatonta maitojauhetta tai kaseinaattia hydroly- · 25 soitiin ensin Aspergillus oryzae-kannan tuottamalla prote- aasilla ja sen jälkeen papaiinilla. Hydrolysaattia käsiteltiin proteiiniin nähden kolminkertaisella määrällä aktiivihiiltä, jolloin 92 % fenyylialaniinista poistui 50 % proteiinisaannolla.
30 Mockenberg et ai. puolestaan esittivät julkaisussa t Research in Food Science and Nutrition, 3 (1983) 3-4 mene- » »« telmän, jossa happohydrolyysi korvattiin kaksivaiheisella subtilisiini-Pronase -entsyymihydrolyysillä, jonka tarkoituksena oli vapauttaa C-terminaaliset aromaattiset amino-35 hapot vapaiksi aminohapoiksi. Fenyylialaniini poistui kui- 4 94088 tenkin kokonaan vasta 425 % aktiivihiilimäärällä, jolloin myös proteiinitypestä hävisi 50 %.
Japanissa ryhdyttiin 1970-luvun alussa tutkimaan mahdollisuuksia tuottaa PKU-proteiinia entsymaattisin me-5 netelmin. Tavoitteena oli parantaa makua sekä tehdä tuotteesta "proteiinimaisempaa". Useita toimivia prosesseja onkin kehitetty laboratoriomittakaavassa [ks. Yamashita et ai., J. Food Sei., 41 (1976) 1029-1032; Fujimaki et ai., US-patenttijulkaisu 4 016 147; Mowlah et ai. Raportti, 10 Technical Research Institute, Snow Brand Milk Products Co., Ltd., Japani (1985) 29-39; Arai et ai., Agric. Biol. Chem., 50 (1986) 2929-2931; Owada et ai., Advances in Neonatal Screening, Elsevier Science Publishers B.V., 1987, s. 205-208; Maeda et ai., Agric. Biol. Chem., 51 (1987) 15 1501-1507]. Prosessien haittapuolia ovat kuitenkin kalliit erikoisentsyymit sekä geelisuodatuksen soveltumattomuus tuotantomittakaavaan.
Em. menetelmiin sisältyvässä kaksivaiheisessa prosessissa käytetään ensin pepsiiniä, joka pilkkoo raaka-20 aineena käytetyn heraproteiinin spesifisesti niin, että fenyylialaniini jää peptidin karboksyylipäähän. Fenyyli-alaniini vapautetaan edelleen vapaaksi aminohapoksi karboksipeptidaasilla tai kaupallisella entsyymivalmis-teella, joka sisältää karboksipeptidaasiaktiivisuutta 25 (esim. subtilisiini, Pronase).
Em. menetelmiin sisältyvässä yksivaiheisessa proteiinin hydrolyysissä puolestaan käytetään entsyymiä, joka sisältää sekä endo- että eksopeptidaasiaktiivisuuksia. Fenyylialaniini erotetaan seoksesta geelikromatografiällä.
30 Tunnetut menetelmät fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista eivät toistaiseksi ole olleet tyydyttäviä teollista tuotantoa ajatellen. On siten jatkuvasti tarve teollisessa mitassa toimivasta, taloudellisesti aikaisempaa edullisemmasta ja tehokkaammasta mene-35 telmästä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiineista tai 5 94088 proteiinipitoisista koostumuksista, jolla menetelmällä saataisiin myös aikaisempaa paremman makuista, oleellisesti fenyylialaniinitöntä proteiinituotetta.
Nyt on yllättäen keksitty tapa, jolla yllä esitetyt 5 ongelmat voidaan välttää ja samalla saadaan hyvällä saannolla fysiologisesti hyvälaatuista ja erinomaisen makuista PKU-proteiinihydrolysaattia.
Keksinnön mukaisella menetelmällä saadaan oleellisesti fenyylialaniinitöntä proteiinikoostumusta, joka si-10 sältää runsaasti ravitsemuksellisesti arvokkaita di- ja tripeptidejä ja vain noin 25 paino-% vapaita aminohappoja. Tämä tuote on maultaan erinomainen eikä se maistu kitkerältä. Lisäksi se liukenee hyvin lämpimään veteen.
Lisäksi keksinnön mukainen menetelmä soveltuu hyvin 15 teolliseen tuotantoon ja se koostuu yksinkertaisista yksikköprosesseista. Menetelmä on varsinaisesti kaksi-vai-heinen. Ensimmäisessä vaiheessa proteiinipitoinen koostumus hydrolysoidaan entsymaattisesti ja toisessa vaiheessa näin saatua proteiinihydrolysaattia käsitellään adsorptio-20 hartsilla. Lisäksi tässä menetelmässä käytetty adsoptio-hartsi voidaan regeneroida yksinkertaisesti elintarviketeollisuudessa yleisesti käytettävällä lipeällä, jolloin hartsi on heti valmis uudelleenkäytettäväksi. Hartsin ad-sorptiokyvyssä ei ole todettu heikentymistä useiden kymme-25 nien hydrolysaattipanos-regenerointisyklien jälkeen.
0 0
Keksinnön kohteena on siten menetelmä fenyyliala-niinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista, jolle menetelmälle on tunnusomaista, että a) proteiinipitoisen koostumuksen sisältämä prote- 30 iini pilkotaan entsymaattisesti proteolyyttisellä entsyy- t millä proteiinihydrolysaatiksi, jonka hydrolysoitumisaste on noin 30 - 60 %, b) näin saatu proteiinihydrolysaatti ultrasuodate-taan ja permeaatti otetaan talteen, 35 c) haluttaessa liuoksen pH:ta säädetään alueella 2 - 10 suolahapolla tai lipeällä, • 6 94088 d) näin saatu proteiinihydrolysaatti johdetaan ad-sorptiohartsilla täytetyn pylvään läpi lineaarivirtausno-peudella 0,1 - 1,3 m/h lämpötilassa 5 - 65 °C, e) pylvästä eluoidaan vedellä lineaarivirtausnopeu-5 della 0,1 - 1,3 m/h, f) otetaan talteen jae, josta fenyylialaniini on poistettu, g) tarvittaessa talteenotetusta jakeesta poistetaan suoloja, ja 10 h) lopuksi talteenotettu jae konsentroidaan kuiva- ainepitoisuuteen 70 - 80 paino-% ja haluttaessa kuivataan.
Kaikissa eläin- ja kasviproteiineissa on todettu olevan noin 4-6 paino-% fenyylialaniinia proteiinin kokonaismäärästä laskettuna.
15 Prosessin ensimmäisessä vaiheessa proteiinipitoisen koostumuksen sisältämä proteiini pilkotaan entsymaattisesti proteolyyttisellä entsyymillä siten, että hydrolysoitu-misaste on n. 30 - 60 %.
Käsiteltävä proteiinipitoinen koostumus voi olla 20 mikä tahansa muitakin välttämättömiä aminohappoja kuin fenyylialaniinia sisältävä proteiinipitoinen koostumus, esimerkiksi heraproteiini tai soijaproteiinikonsentraatti. Heraproteiinissa proteiinipitoisuus voi vaihdella välillä 35 - 85 paino-%. Soijaproteiinikonsentraatin tyypillinen .· 25 proteiinipitoisuus on noin 52 paino-%.
Lähtöaineen proteiinipitoisuus vaikuttaa tuotteen proteiinipitoisuuteen. Koska on suotavaa, että tuote sisältää mahdollisimman paljon proteiinia, lähtöaineen proteiinipitoisuuden tulisi olla mahdollisimman korkea, suo-30 tavimmin yli 70 paino-%.
Proteolyyttisenä entsyyminä käytetään edullisesti pankreatiinia, jonka sopiva käyttömäärä on noin 3 paino-% proteiinin määrästä laskettuna.
Entsymaattisessa käsittelyssä fenyylialaniini va-35 pautuu vapaiksi aminohapoiksi noin 70 - 90-%risesti. Saa- • · 94088 7 dun proteiinihydrolysaatin proteiinista n. 3,6 - 3,8 % on fenyylialaniinia.
Entsymaattisen hydrolyysin jälkeen proteiinihydro-lysaatti ultrasuodatetaan pilkkoutumattoman proteiinin ja 5 suurimolekyylisten peptidien poistamiseksi ja permeaatti otetaan talteen.
Talteenotettu permeaatti konsentroidaan haihduttamalla kuiva-ainepitoisuuteen 20 - 60 paino-%. Näin saatu konsentraatti voidaan johtaa suoraan jatkokäsittelyyn tai 10 sitä voidaan säilöä +5 °C:ssa ennen jatkokäsittelyä. Kuiva-ainepitoisuuden 20 - 60 paino-% omaava konsentraatti voidaan haluttaessa myös kuivata esimerkiksi sumutuskui-vaimella ennen jatkokäsittelyä. .
Ennen adsorptiohartsikäsittelyä proteiinihydroly-15 saattikonsentraatti tai -jauhe liuotetaan kuumaan veteen siten, että liuoksen kuiva-ainepitoisuudeksi tulee 20 - 30 paino-%.
Adsorptiohartsikäsittely voidaan suorittaa liuoksen pH:n ollessa 2 - 10, mutta edullisinta on käsitellä hart-20 silla neutraalia liuosta, jonka pH on 6,5 - 7,0. Tällöin ei tarvita pH-säätöä hydrolyysivaiheen jälkeen. Haluttaessa liuoksen pH:ta voidaan kuitenkin säätää elintarvikelaa-tuisella suolahapolla (HC1) tai lipeällä (NaOH).
Prosessin toisessa vaiheessa proteiinihydrolysaatti : 25 johdetaan adsorptiohartsilla täytetyn pylvään läpi lineaa- rivirtausnopeudella 0,1 - 1,3 m/h. Adsorboitumisprosessi vaatii tietyn minimireaktioajan, jonka kokeellisesti on määritetty olevan riittävä, kun lineaarivirtaus ei ole suurempi kuin 1,3 m/h. Adsorptio paranee hieman tätä alem-30 pia lineaarivirtausnopeuksia käytettäessä, mutta prosessiin kuluva aika vastaavasti pitenee, mikä nostaa kustannuksia.
Adsorptiohartsina käytetään edullisesti hydrofobista polystyreenirunkoista hartsia. Sopivia hartseja ovat 35 mm. Amberlite XAD 4 ja Amberlite XAD 16, joita valmistaa Rohm & Haas (Ranska).
8 94088
Hartsikäsittely voidaan yleensä suorittaa lämpötilassa 5 - 65 eC. Fenyylialaniini ja sitä sisältävät peptidit nimittäin adsorboituvat hartsiin pH:n ollessa 2-10 ja lämpötilan ollessa 5-65 °C. Edullisin hartsikäsitte-5 lylämpötila on noin 30 eC, jolloin liuoksen jäähdytykseen tai lämmitykseen ei tarvitse käyttää lisäenergiaa.
Näin käsiteltyä hartsilla täytettyä pylvästä eluoi-daan vedellä samalla virtausnopeudella, jolla proteiini-hydrolysaattia edellä johdettiin ko. pylvääseen. PKU-pro-10 teiini eluoituu pylväästä ennen fenyylialaniinia ja fenyy- lialaniinia sisältäviä peptidejä siten, että lähes fenyy-lialaniiniton jae saadaan eristetyksi. Kuvassa 1 on esitetty graafisesti fenyylialaniinin ja fenyylialaniinia sisältävien peptidien erottuminen proteiinihydrolysaatista 15 adsorptiohartsipylvään avulla.
Tarvittaessa talteenotetusta, lähes fenyylialanii-nittömästä jakeesta poistetaan suoloja, kuten ylimääräistä kloridia tai natriumia esimerkiksi elektrodialyysillä.
Lopuksi lähes fenyylialaniinitön tuotejae konsent-20 roidaan kuiva-ainepitoisuuteen 70 - 80 paino-%. Tuotejae voidaan haluttaessa kuivata jauheeksi kylmä- tai sumutus-kuivauksella .
Fenyylialaniinin poistumisaste proteiinikoostumuk-sesta on n. 92 - 100 %. Täten menetelmällä voidaan valmis-: 25 taa PKU-proteiinia, jonka fenyylialaniinipitoisuus on al haisempi kuin aiemmin käytetyissä proteiinin hydrolyysiin perustuvissa menetelmissä (fenyylialaniinin poistumisaste 90 - 95 %). Prosessin kokonaisproteiinisaanto on 45 - 65 % sen mukaan, kuinka fenyylialaniinitön tuotteesta halutaan. 30 Tietyllä poistumisasteella saanto on joka tapauksessa parempi kuin kirjallisuudessa esitetyissä menetelmissä.
Menetelmä voidaan toteuttaa joko siten, että hart-sikäsittely suoritetaan välittömästi hydrolysointivaiheen jälkeen tai siten, että hartsikäsittely suoritetaan myö-35 hemmin.
94088 9
Keksinnön mukaisen menetelmän edullisuutta lisää se, että käytetty adsorptiohartsi voidaan regeneroida 4 % ' lipeällä, minkä jälkeen hartsia voidaan käyttää uudelleen.
Keksinnön mukaisella menetelmällä saadun oleelli-5 sesti fenyylialaniinittömän proteiinituotteen aminohappo-profiili on välttämättömien aminohappojen osalta hyvä (taulukko 1). Ainoastaan tyrosiinin ja metioniinin lisäykset ovat välttämättömiä. Tuote sisältää runsaasti ravitsemuksellisesti arvokkaita di-ja tripeptidejä sekä n. 25 % 10 vapaita aminohappoja. Tuotteen maku on markkinoilla oleviin tuotteisiin verrattuna erinomainen. Lisäksi jauhe liukenee hyvin lämpimään veteen.
Keksinnön mukaisesti saatua proteiinipitoista koostumusta, josta fenyylialaniini on poistettu joko koko-15 naan tai ainakin suurelta osin, voidaan käyttää erikois-ravintovalmisteena tai erikoisravintovalmisteen valmistuksessa.
Seuraavissa esimerkeissä kuvataan keksintöä yksityiskohtaisemmin.
20 Esimerkki 1
Liuotettiin 100 kg 35 - 90 paino-% proteiinia sisältävää heraproteiinikonsentraattia (Kuivamaito Oy, Lapinlahti) 1900 litraan lämmintä vettä (5 % liuos kuiva-aineen suhteen). Kuumennettiin jatkuvasti sekoittaen 20 25 min 65 °C kontaminaatioiden eliminoimiseksi. Jäähdytettiin 50 °C:een ja pH säädettiin 8,5:een 5 M Ca(0H)2:lla. Lisättiin 3 paino-% pankreatiinia proteiinin määrästä laskettuna ja hydrolysoitiin 6 tuntia. pH: n annettiin laskea 7,0tään, missä se pidettiin 5 M Ca(0H)2:lla. Hydrolyysin 30 jälkeen liuos pastöroitiin (95 °C, 5 min), jäähdytettiin ja ultrasuodatettiin 40 °C:ssa cut-off 20 000 -kalvoilla. Permeaatti otettiin talteen ja konsentroitiin haihduttamalla n. 50 % kuiva-ainepitoisuuteen.
Konsentroitu proteiinihydrolysaatti kuivattiin jau-35 heeksi sumutuskuivaamalla.
10 94088
Esimerkki 2
Toimittiin kuten esimerkissä 1, mutta kuivaamisen sijasta 50 % kuiva-ainepitoisuuteen konsentroitua per-meaattia säilöttiin 5 °C:ssa jatkotoimenpiteitä varten.
5 Prosessin kokonaissaanto oli parempi kuin esimer kissä 1 koska vältyttiin hydrolysaatin sumutuskuivaukseen liittyvältä hävikiltä.
Esimerkki 3
Liuotettiin 12,5 g esimerkin 1 mukaan tehtyä prote-10 iinihydrolysaattijauhetta 37,5 cm3:iin 80 - 90 °C vettä. Saadun proteiinihydrolysaattiliuoksen pH oli n. 6,5 - 7,0, jolloin pH-säätöä ei tässä vaiheessa tarvittu lainkaan. Liuos, joka sisälsi 25 paino-% kuiva-ainetta, josta noin 70 % oli proteiinia, pumpattiin 30 °C:ssa 180 cm3 XAD-4 -15 adsorptiohartsipylvääseen tilavuusvirtausnopeudella 60 cm3/h, mikä vastasi lineaarivirtausnopeutta 0,3 m/h. Prote-iinihydrolysaattiliuospanoksen syötön jälkeen pylvästä eluoitiin vedellä samalla virtausnopeudella.
Proteiinisaanto oli n. 50 %. Tuotejakeen proteii-20 nista oli fenyylialaniinia n. 0,5 %.
Esimerkki 4
Liuotettiin 7,5 g esimerkin 1 mukaan tehtyä prote-iinihydrolysaattijauhetta 30 cm3:iin 80 - 90 °C vettä. 20 % liuos (pH 6,5 - 7,0) pumpattiin 180 cm3 XAD-16 -adsorp-j' 25 tiohartsipylvääseen lineaarivirtausnopeudella 0,9 m/h läm pötilassa 30 °C. Proteiinihydrolysaattiliuospanoksen syötön jälkeen pylvästä eluoitiin vedellä samalla virtausnopeudella.
Proteiinisaanto oli n. 50 % ja kuiva-ainesaanto n.
30 55 %. Tuotejakeen proteiinista oli fenyylialaniinia n. 0,4 %.
i
Esimerkki 5
Toimittiin muuten samoin kuin esimerkissä 4, mutta lämpötila oli 65 °C. Lämpötilan nostaminen paransi hartsi-35 pylvään mikrobiologista säilyvyyttä, mutta lisäsi energia- • · 4 11 94088 kustannuksia sekä pienensi mahdollisesti hartsin elinikää. Tuotteen laatu ja saanto pysyivät ennallaan.
Esimerkki 6
Toimittiin muuten samoin kuin esimerkissä 4, mutta 5 lämpötila oli 5 °C. Lämpötilan alentaminen paransi hartsi-pylvään mikrobiologista säilyvyyttä, mutta lisäsi energiakustannuksia. Tuotteen laatu ja saanto pysyivät ennallaan. Esimerkki 7
Liuotettiin 2,1 kg esimerkin 1 mukaan tehtyä prote-10 iinihydrolysaattijauhetta 10,5 litraan 80 - 90 °C vettä.
20 % liuos (pH 6,5 - 7,0) pumpattiin 50 1 XAD-16 -adsorp- tiohartsipylvääseen lineaarivirtausnopeudella 1,3 m/h lämpötilassa 55 °C. Proteiinihydrolysaattiliuospanoksen syötön jälkeen pylvästä eluoitiin vedellä samalla virtausno-15 peudella.
Proteiinisaannolla 50 % fenyylialaniinia oli proteiinin määrästä n. 0,3 %, saannolla 45 % saatiin jae, joka ei sisältänyt lainkaan fenyylialaniinia. Tiedot tuoteja-keen (50 % proteiinisaannolla) koostumuksesta on esitetty 20 taulukoissa 1 ja 2.
» ♦ 12 94088
Taulukko 1: Esimerkin 7 mukaan tehdyn, sumutus- kuivatun PKU-proteiinihydrolysaatin aminohappokoostumus 5 Aminohappo mg/g %
Asp 88,4 12,6
Thr 49,41 7,0
Ser 37,87 5,4
Glu 156,38 22,3 10 Gly 11,01 1,6
Ala 36,64 5,2
Vai 45,7 6,5
Cys 12,07 1,7
Met 12,63 1,8 15 Ile 31 4,4
Leu 57,95 8,3
Tyr 20,65 2,9
Phe 2,37 0,3
Lys 90,96 13,0 20 His 12,92 1,8
Arg 18,36 2,6
Pro 16,87 2,4
Trp + + 25 Yhteensä 701,19 100 • · 94088 13
Taulukko 2: Esimerkin 7 mukaan tehdyn, sumutus- kuivatun PKU-proteiinihydrolysaatin koostumus
Proteiini 66,0 % 5 Tuhka 6,0 %
Vesi 4,4 %
Laktoosi 12,1 %
Natrium 12,7 g/kg proteiinia 10 Kalium 26,1 g/kg proteiinia
Kalsium 5,8 g/kg proteiinia
Kloridi 6,1 g/kg proteiinia
Fosfori 3,2 g/kg proteiinia 15 Esimerkki 8
Mitattiin 4,2 kg esimerkin 2 mukaisesti tehtyä pro-teiinihydrolysaattikonsentraattia 6,3 kg:aan vettä. Saatu liuos, jonka kuiva-ainepitoisuus oli 20 paino-% ja pH 6,7, pumpattiin 50 1 XAD-16 -adsorptiohartsipylvääseen lineaa-20 rivirtausnopeudella 1,3 m/h lämpötilassa 55 °C. Proteii-nihydrolysaattiliuospanoksen syötön jälkeen pylvästä elu-oitiin vedellä samalla virtausnopeudella.
Proteiinisaanto oli n. 50 % ja kuiva-ainesaanto n.
55 %. Tuotejakeen proteiinista oli fenyylialaniinia n. 0,3 ·.. 25 %.
Esimerkki 9
Liuotettiin 22 g esimerkin 1 mukaan tehtyä proteii-nihydrolysaattijauhetta 88 cm3:iin 80 - 90 °C vettä. Liuoksen pH säädettiin 30 % HCl:llä pH 3,5:een ja liuos pumpat-30 tiin 180 cm3 XAD-16 -adsorptiohartsipylvääseen lineaari-virtausnopeudella 0,9 m/h lämpötilassa 65 °C. Proteiini-hydrolysaattiliuospanoksen syötön jälkeen pylvästä eluoi-tiin vedellä samalla virtausnopeudella.
Proteiinisaanto oli n. 52 %. Tuotejakeen proteii-35 nista oli fenyylialaniinia n. 0,1 %.
14 94088
Ylimääräisen kloridin poistamiseksi tuoteliuos elektrodialysoitiin, minkä jälkeen se kuivattiin sumutus-kuivauksella .
Esimerkki 10 5 Toimittiin vastaavasti kuin esimerkissä 4, paitsi että liuoksen pH nostettiin 10,0reen 10 % NaOHrlla ennen hartsikäsittelyä. Voimakkaasti emäksisenä liuos ei tarvinnut voimakasta kuumennuskäsittelyä kirkastuakseen.
Proteiinisaanto oli n. 45 %. Tuoteliuoksessa fenyy-10 lialaniinia oli proteiinista 0,4 %.
Ylimääräinen natrium poistettiin liuoksesta elekt-rodialyysillä, minkä jälkeen liuos kuivattiin kylmäkui-vauksella.
Esimerkki 11 15 Liuotettiin 104 g soijaproteiinijauhoa (52 % prote iinipitoisuus) 1400 cm3:iin vettä. Kuumennettiin 65 °C:ssä 20 min, minkä jälkeen jäähdytettiin 50 °C:een. pH säädettiin 5 M Ca(OH)2:lla 8,5:een. Lisättiin 1,62 g pankreatii-nia (3 % proteiinin määrästä). pH:n annettiin laskea 7,0-20 :aan, minkä jälkeen hydrolysoitiin pH 7,0:ssa 5 h. pH säädettiin hydrolyysin aikana 5 M Ca(0H)2:lla. Hydrolysaatti ultrasuodatettiin cut-off 10 000 -kalvolla, permeaatti otettiin talteen ja konsentroitiin kuiva-aineeltaan 20 %-:iseksi.
25 Esimerkki 12
Mitattiin 38 cm3 esimerkin 11 mukaisesti tehtyä pro-teiinihydrolysaattia. Liuoksen pH säädettiin 30 % HClrllä arvoon 6,8 ja liuos pumpattiin 180 cm3 XAD-16 -adsorptio-hartsipylvääseen lineaarivirtausnopeudella 0,9 m/h lämpö-30 tilassa 65 °C. Proteiinihydrolysaattiliuospanoksen syötön jälkeen pylvästä eluoitiin vedellä samalla virtausnopeudella.
Proteiinisaanto oli n. 55 %, fenyylialaniinia 0,3 % proteiinista (taulukko 3). Tuote oli hyvän makuinen eikä 35 lainkaan kitkerä.
94088 15
Taulukko 3: Soijaproteiinin ja soijaproteiinista valmistetun PKU-proteiinin aminohappokoostumus (%) 5 Soijaproteiini PKU-proteiini (% proteiinista) (% proteiinista)
Asp 12,3 12,9
Thr 4,2 4,3
Ser 5,4 6,0 10 Glu 20,9 22,9
Gly 4,5 3,7
Ala 4,6 6,1
Vai 4,8 4,9
Cys 1,1 0,3 15 Met 1,2 0,8
Ile 4,7 2,5
Leu 7,7 3,5
Tyr 2,8 4,2
Phe 5,0 0,3 20 Lys 6,6 10,3
His 2,8 2,3
Arg 6,8 11,1
Pro 4,8 2,0 #> 25 Tot 100,0 100,0
Esimerkki 13 PK AID III:n, pankreatiinihydrolysaatin sekä hart-sikäsitellyn pankreatiinihydrolysaatin makuvertailussa 30 testiin osallistujat (6 kpl) antoivat pisteitä 0-3 seuraa-van asteikon mukaisesti: 0 = ei lainkaan kitkerä 1 = hieman kitkerä 2 = selvästi kitkerä 35 3 = erittäin kitkerä.
16 94088
Patenttihakemuksessa kuvatulla menetelmällä valmistetun PKU-proteiinin pisteiden keskiarvo oli 0,2, PK AID III:n 1,8 ja entsyymikäsitellyn proteiinin 3,0. Kaikkien osallistujien mielestä patenttihakemuksessa kuvatulla me-5 netelmällä valmistettu PKU-proteiini oli selvästi vähiten kitkerä, viiden osallistujan mielestä ei lainkaan kitkerä.
Claims (9)
- 94088
- 1. Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi prote-iinipitoisista koostumuksista, tunnettu siitä, 5 että a) proteiinipitoisen koostumuksen sisältämä proteiini pilkotaan entsymaattisesti proteolyyttisellä entsyymillä proteiinihydrolysaatiksi, jonka hydrolysoitumisaste on noin 30 - 60 %, 10 b) näin saatu proteiinihydrolysaatti ultrasuodate- taan ja permeaatti otetaan talteen, c) haluttaessa liuoksen pH:ta säädetään alueella 2 - 10 suolahapolla tai lipeällä, d) näin saatu proteiinihydrolysaatti johdetaan 15 adsorptiohartsilla täytetyn pylvään läpi lineaarivirtaus- nopeudella 0,1 - 1,3 m/h, lämpötilassa 5-65 °C, e) pylvästä eluoidaan vedellä lineaarivirtaus-nopeudella 0,1 - 1,3 m/h, f) otetaan talteen jae, josta fenyylialaniini on 20 poistettu, g) tarvittaessa talteenotetusta jakeesta poistetaan suoloja, ja h) lopuksi talteenotettu jae konsentroidaan kuiva-ainepitoisuuteen 70 - 80 paino-% ja haluttaessa kuivataan. ..25 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että proteiinipitoinen koostumus on heraproteiinia tai soijaproteiinia.
- 3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että proteolyyttinen entsyymi on 30 pankreatiini.
- 4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pankreatiinia käytetään noin 3 paino-% proteiinin määrästä laskettuna.
- 5. Jonkin patenttivaatimuksista 1-4 mukainen me- 35 netelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa b) tai- • · 94088 teenotettu permeaatti konsentroidaan ja kuivataan edullisesti sumutuskuivauksella jauheeksi, joka ennen jatkokäsittelyä liuotetaan kuumaan veteen.
- 6. Jonkin patenttivaatimuksista 1-5 mukainen me-5 netelmä, tunnettu siitä, että adsorptiohartsina käytetään hydrofobista polystyreenirunkoista hartsia.
- 7. Jonkin patenttivaatimuksista 1-6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että adsorptiohartsilla täytetyn pylvään läpi johdetaan proteiinihydrolysaatti- 10 liuosta, jonka pH on 6,5 - 7,0.
- 8. Jonkin patenttivaatimuksista 1-7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että hartsikäsittelyläm-pötila on noin 30 °C. *
- 9. U 8 8
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI921097A FI94088C (fi) | 1992-03-13 | 1992-03-13 | Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista |
| PCT/FI1993/000086 WO1993017581A1 (en) | 1992-03-13 | 1993-03-10 | A method for removing phenylalanine from proteinaceous compositions, a product so obtained and use thereof |
| AU36340/93A AU3634093A (en) | 1992-03-13 | 1993-03-10 | A method for removing phenylalanine from proteinaceous compositions, a product so obtained and use thereof |
| US08/295,784 US5547687A (en) | 1992-03-13 | 1993-03-10 | Method for removing phenylalanine from proteinaceous compositions, a product so obtained and use thereof |
| TR00187/93A TR28539A (tr) | 1992-03-13 | 1993-03-12 | Proteinli kompozisyonlardan fenilalaninin bertaraf edilmesi icin bir metod, ve böylece elde edilen bir ürün ve bu ürünün kullanilmasi. |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI921097A FI94088C (fi) | 1992-03-13 | 1992-03-13 | Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista |
| FI921097 | 1992-03-13 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI921097A0 FI921097A0 (fi) | 1992-03-13 |
| FI921097L FI921097L (fi) | 1993-09-14 |
| FI94088B FI94088B (fi) | 1995-04-13 |
| FI94088C true FI94088C (fi) | 1995-07-25 |
Family
ID=8534920
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI921097A FI94088C (fi) | 1992-03-13 | 1992-03-13 | Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5547687A (fi) |
| FI (1) | FI94088C (fi) |
| TR (1) | TR28539A (fi) |
| WO (1) | WO1993017581A1 (fi) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FI94088C (fi) * | 1992-03-13 | 1995-07-25 | Valio Oy | Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista |
| WO1995018224A1 (en) * | 1993-12-29 | 1995-07-06 | Gene Pharming Europe Bv | Recombinant production of modified proteins lacking certain amino acids |
| DE4442668C2 (de) * | 1994-11-30 | 1997-09-18 | Milupa Ag | Verfahren zur Herstellung einer phenylalaninfreien Säuglings- und Kleinkindernahrung |
| US5837312A (en) * | 1996-09-20 | 1998-11-17 | Abbott Laboratories | Debittered protein product having improved antigenicity and method for manufacture |
| AU712430B2 (en) | 1996-10-01 | 1999-11-04 | Massey University | Process for isolating high purity glycomacropeptide from dairy products |
| JP3028411B2 (ja) * | 1997-09-26 | 2000-04-04 | カルピス株式会社 | トリペプチド高生産性ラクトバチルス・ヘルベチカス乳酸菌 |
| DE60022859T3 (de) | 1999-01-11 | 2010-05-06 | Calpis Co., Ltd. | Verfahren zur herstellung von sauermilch enthaltend ein inhibitionspeptid fuer ein angiotensin konvertierendes enzym sowie ein verfahren zur herstellung von milchserum |
| JP4633876B2 (ja) | 1999-11-11 | 2011-02-16 | カルピス株式会社 | トリペプチドの製造方法 |
| JP2002193817A (ja) | 2000-12-28 | 2002-07-10 | Calpis Co Ltd | 整腸剤 |
| US6589574B2 (en) * | 2001-03-19 | 2003-07-08 | Council Of Scientific & Industrial Research | Process for preparation of protein-hydrolysate from milk protein |
| US20040213838A1 (en) * | 2003-04-24 | 2004-10-28 | Mazer Terrence B. | Medical food tablets containing free amino acids |
| RU2376893C1 (ru) * | 2008-06-04 | 2009-12-27 | Александр Юрьевич Просеков | Способ получения белкового эквивалента продукта, предназначенного для лечения больных фенилкетонурией |
| WO2017117121A1 (en) | 2015-12-28 | 2017-07-06 | Abbott Laboratories | Nutritional compositions comprising hydrolyzed protein and a modified fat system and uses thereof |
| CN110229858A (zh) * | 2019-06-04 | 2019-09-13 | 兰州天禾生物催化技术有限公司 | 用于苯丙酮尿症药用食物的生物多肽的制备方法及其用途 |
| CN113785972B (zh) * | 2021-09-17 | 2023-10-24 | 江苏冬泽特医食品有限公司 | 用于罕见病苯丙酮尿症的营养粉、制备方法及用途 |
| CN114028839A (zh) * | 2021-10-28 | 2022-02-11 | 中国农业大学 | 一种降低产品中苯丙氨酸含量的方法 |
| CN116440883B (zh) * | 2023-02-20 | 2023-11-07 | 江苏恰瑞生物科技有限公司 | 一种血液灌流器填料的制备方法 |
| CN116114787A (zh) * | 2023-03-16 | 2023-05-16 | 中国农业科学院农产品加工研究所 | 一种高效脱除蛋白原料中苯丙氨酸的方法 |
| CN117730944A (zh) * | 2023-12-27 | 2024-03-22 | 荆楚理工学院 | 一种富含低苯丙氨酸膳食 |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE147615C (fi) * | ||||
| DE921097C (de) * | 1951-10-28 | 1954-12-09 | Newag Maschinen | Kipprost |
| DE2319581C2 (de) * | 1973-04-18 | 1975-03-27 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren zur chromatographischen Fraktionierung von Molke |
| JPS585672B2 (ja) * | 1975-01-16 | 1983-02-01 | フシセイユ カブシキガイシヤ | テイフエニルアラニンプラステインノセイゾウホウ |
| DE2906034C2 (de) * | 1979-02-16 | 1985-03-28 | Maggi AG, Kempttal | Verfahren zur Gewinnung von L-Leucin, L-Phenylalanin, L-Tyrosin, L-Cystin und von Gemischen aus L-Leucin und L-Isoleucin |
| CH636248A5 (fr) * | 1979-03-09 | 1983-05-31 | Nestle Sa | Procede de preparation d'un hydrolysat de proteines purifie. |
| DD157258A1 (de) * | 1979-11-29 | 1982-10-27 | Baerbel Lieske | Verfahren zur herstellung salz-und phenylalaninfreier proteinhydrolysate |
| HU194487B (en) * | 1979-12-28 | 1988-02-29 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet | Process for producing food-preparation suitable for feeding sicks of phenylketoneurea from protein hydrolysates |
| FR2487642B2 (fr) * | 1980-07-31 | 1985-10-18 | Bel Fromageries | Procede de preparation de fractions proteiques par ultrafiltration et chromatographie d'exclusion et d'echange d'ions |
| DK589785A (da) * | 1985-12-18 | 1987-06-19 | Samuelsson Ernst Gunnar | Peptidpraeparat, fremgangsmaade til fremstilling deraf samt anvendelse af peptidpraeparatet |
| DD283256A7 (de) * | 1988-07-25 | 1990-10-10 | Veb Berlin-Chemie,Dd | Verfahren zur herstellung phenylalaninfreier proteinhydrolysate mit guten sensorischen eigenschaften |
| US5411757A (en) * | 1989-11-09 | 1995-05-02 | Buist; Neil R. M. | Palatable balanced amino acid-modified diet |
| US5242697A (en) * | 1990-10-26 | 1993-09-07 | Maurizio Luca | Method of preparing nutrified food products |
| JPH04341193A (ja) * | 1991-05-14 | 1992-11-27 | Kanebo Ltd | ペプチド又はその塩の取得方法 |
| DE4128260C2 (de) * | 1991-08-26 | 1995-09-14 | Milupa Ag | Verfahren zur Herstellung eines phenylalaninfreien Diätetikums in Dragee- oder Tablettenform |
| FI94088C (fi) * | 1992-03-13 | 1995-07-25 | Valio Oy | Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista |
-
1992
- 1992-03-13 FI FI921097A patent/FI94088C/fi active
-
1993
- 1993-03-10 US US08/295,784 patent/US5547687A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-03-10 WO PCT/FI1993/000086 patent/WO1993017581A1/en active Application Filing
- 1993-03-12 TR TR00187/93A patent/TR28539A/xx unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US5547687A (en) | 1996-08-20 |
| FI921097L (fi) | 1993-09-14 |
| FI94088B (fi) | 1995-04-13 |
| WO1993017581A1 (en) | 1993-09-16 |
| TR28539A (tr) | 1996-10-01 |
| FI921097A0 (fi) | 1992-03-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI94088C (fi) | Menetelmä fenyylialaniinin poistamiseksi proteiinipitoisista koostumuksista | |
| KR940003938B1 (ko) | 펩타이드 제제의 제조방법 | |
| CA1178908A (en) | Method for treating a casein-based raw material containing phosphocaseinates of monovalent cations or derivatives thereof, resulting products and applications thereof | |
| EP0511970B1 (fr) | Procede pour preparer un hydrolysat enzymatique | |
| FI68503C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av enzymatiskt totalhydrolysatav vassleproteiner | |
| JPH06505162A (ja) | えんどう豆の蛋白質水解物、その製造方法およびそれらの使用 | |
| NZ506866A (en) | Bioactive whey protein hydrolysate free of bitter flavours wherein the enzyme used is a heat labile protease | |
| KR20040026683A (ko) | 우유 단백질의 가수분해 방법 | |
| JP2004519204A (ja) | 抗高血圧ペプチドの生成のための乳漿タンパク質の酵素処理、得られた産物、および哺乳動物における高血圧の処置 | |
| CA2359606A1 (en) | Cysteine/glycine rich peptides | |
| JPS5854786B2 (ja) | 乳漿蛋白質から蛋白質水解物を製造する方法 | |
| JPH0556753A (ja) | 塩酸ガスを使用して加水分解された植物タンパク質を製造する方法および該方法で得られた生成物 | |
| CA2105673C (en) | Method for production of a vegetable protein hydrolyzate and a use thereof | |
| JP3183945B2 (ja) | 高フィッシャー比ペプチド混合物、その製造法、および肝疾患患者用栄養補給組成物 | |
| JPH0160017B2 (fi) | ||
| CA2431842C (en) | Method for preparing tryptophan rich peptides | |
| JP2986764B2 (ja) | 苦味の少ないアミノ酸組成が人乳に近い高フィッシャー比ペプチドの調製方法 | |
| JPH02265441A (ja) | 牛乳乳清蛋白質中のβ―ラクトログロブリンの選択的酵素分解方法 | |
| JPH0254070B2 (fi) | ||
| JP3448344B2 (ja) | ペプチド組成物 | |
| CA1181282A (en) | Process for preparing modified protein compositions | |
| JP3437738B2 (ja) | 臭気の低減された蛋白質加水分解物の製造方法 | |
| NL9400418A (nl) | Werkwijzen voor de bereiding van glutaminerijke peptiden en voedingspreparaten daarmee gemaakt. | |
| JP3682994B2 (ja) | フェニルアラニン含量の少ないペプチド混合物の製造法 | |
| US7335722B2 (en) | Peptides used as angiotensin converting enzyme inhibitor and preparation process thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| HC | Name/ company changed in application |
Owner name: VALIO OY |
|
| BB | Publication of examined application |