[go: up one dir, main page]

HU229062B1 - Eljárás dokozahexaénsav és dokozapentaénsav elõállítására - Google Patents

Eljárás dokozahexaénsav és dokozapentaénsav elõállítására Download PDF

Info

Publication number
HU229062B1
HU229062B1 HU9903703A HUP9903703A HU229062B1 HU 229062 B1 HU229062 B1 HU 229062B1 HU 9903703 A HU9903703 A HU 9903703A HU P9903703 A HUP9903703 A HU P9903703A HU 229062 B1 HU229062 B1 HU 229062B1
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
acid
lipids
fatty acids
weight
dha
Prior art date
Application number
HU9903703A
Other languages
English (en)
Inventor
Shigeaki Fujikawa
Sakayu Shimizu
Tsutomu Sogo
Satohiro Tanaka
Toshiaki Yaguchi
Original Assignee
Nagase & Co
Nagase Chemtex Corp
Suntory Holdings Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nagase & Co, Nagase Chemtex Corp, Suntory Holdings Ltd filed Critical Nagase & Co
Publication of HUP9903703A2 publication Critical patent/HUP9903703A2/hu
Publication of HUP9903703A3 publication Critical patent/HUP9903703A3/hu
Publication of HU229062B1 publication Critical patent/HU229062B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C12P7/6434—Docosahexenoic acids [DHA]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23D—EDIBLE OILS OR FATS, e.g. MARGARINES, SHORTENINGS OR COOKING OILS
    • A23D9/00—Other edible oils or fats, e.g. shortenings or cooking oils
    • A23D9/007—Other edible oils or fats, e.g. shortenings or cooking oils characterised by ingredients other than fatty acid triglycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23K—FODDER
    • A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10—Organic substances
    • A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/115—Fatty acids or derivatives thereof; Fats or oils
    • A23L33/12—Fatty acids or derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11C—FATTY ACIDS FROM FATS, OILS OR WAXES; CANDLES; FATS, OILS OR FATTY ACIDS BY CHEMICAL MODIFICATION OF FATS, OILS, OR FATTY ACIDS OBTAINED THEREFROM
    • C11C1/00—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids
    • C11C1/02—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils
    • C11C1/04—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by hydrolysis
    • C11C1/045—Preparation of fatty acids from fats, fatty oils, or waxes; Refining the fatty acids from fats or fatty oils by hydrolysis using enzymes or microorganisms, living or dead
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
    • C12N1/125—Unicellular algae isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungal isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6409—Fatty acids
    • C12P7/6427—Polyunsaturated fatty acids [PUFA], i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/64—Fats; Fatty oils; Ester-type waxes; Higher fatty acids, i.e. having at least seven carbon atoms in an unbroken chain bound to a carboxyl group; Oxidised oils or fats
    • C12P7/6436—Fatty acid esters
    • C12P7/6445—Glycerides
    • C12P7/6472—Glycerides containing polyunsaturated fatty acid [PUFA] residues, i.e. having two or more double bonds in their backbone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/89—Algae ; Processes using algae

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Eljárás dokozahexaénsav és dokozapentaénsav előállítására
A találmány tárgya eljárás dokczahexaénsavaí (a továbbiakban DHA) és/vagy dokozapentaénsavat (a továbbiakban DPA) tartalmazó ilpidek mikrobiológiai előállítására, valamint eljárás a DHA és/vagy DPA íipidekből történő előállítására. A találmány tárgyát képezi az Uíkenía nemzetségbe (genus) tartozó lipideket termelő mikroorganizmus is.
A DHA az un. kék halak csoportjába tartozó halak olajában található. Közelebbről· a DHA a szardínia vagy a tonhal olajában található, melynek DHA tartalma % körül van.
Jelenleg, a DHA-t nagy koncentrációban tartalmazó halanyagok - mint amilyen a tonhal szemének zsiradéké - felfedezésének és a nagytisztaságú zsírsavak fejlett elöálHíásí technológiájának köszönhetően intenzív erőfeszítések történnek a DHA fizclógiai funkciójának kiderítését és a gyakorlati használhatóságát illetően. Kiderült, hogy a DHA fiziológiai hatásai közé tartozik, a koleszterinszínt csökkentése, a véralvadásgátló hatás és a karoinosztatíkus hatás. Az agy metabolikus rendszerével kapcsolatban felfedezték, hogy a DHA javítja az emlékezési és tanulási folyamatokat, megelőzi az aggkori gyengeelméjűséget és gyógyítja az AlzeheimerA DPA-röl szintén ismert, hogy batolajban található, noha rendkívülien alacsony mennyiségben. A DPA fiziológiai í egyetlen ismert funkciója, hogy vivöanyagként használható gyógy íclőinak legtöbbje még nem ismert. Az om (Kokéi) No. 61-204136 ható azonban annak megállapítása, hogy a DPA fiziológiai szerepet játszik az állati szervezetben, minthogy ismert, hogy a DPA mennyiség növekszik a OKA hiány az
J.
Neűrocbem,, 51:45 (1988); Hamm és munkatársai, Biochem. J., 245:907 (1987); Rebhung és munkatársai, Bioscí, Biotech. Biochem., 58:314 (1994)|
A DHA és/vagy DPA halolajból való kinyerése több nehézséggel jár, amit például a kívánt zsírsavak alacsony koncentrációja, a halak vándorlásából adódóban a haloiaj biztos forrásának hiánya okoz. Nehéz továbbá megbízható minőségű ilpldekhez jutni, minthogy a haloiaj más telítetlen zsírsavakat is tartalmaz, például arachidonsavat (ARA) és eíkozapenfaénsavat (EPA), melyek a lipideket az oxidációra érzékennyé teszik.
A haioiajak mellett a DHA-t és/vagy DPA-t termelő mikoorganizmusok sejtjeiben felgyűlt lípídek is számításba jönnek, mint DHA és/vagy DPA forrás. Például az alábbi mikroorganizmusokról ismert, hogy DHA-t és/vagy DPA-t termelnek: a mélytengeri Vibrio marinus baktérium, ATCC 15381, a mélytengeri halak beiéből izolált Vibrio baktériumok, ostoros gombák, mint amilyen a Thraustochytrium aereum ATCC 34304, Thraustochytrium sp. ATCC 28211, ATCC 20890 és ATCC 20891,
Schízochytnum sp. ATCC 20888 és ATCC 20889 (5 340 742 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalom), Thraustochytrium SR21 törzs (Nippon Nogei Kagaku Kaishi, 89. köt, különkiadás, 1995. július 5.) és Japonochytrím sp. ATCC .28207 (Japán szabadalom (Kohyo) No. 1-199588 (1989)1, míkro-algák közül például Cyclotella oryptica, CrypthecodWum cohntí (Japán szabadalom (Kohyo) No, 5-503425 (1993)] és Ernlllania sp. (Japán szabadalom (Kokat) No. 5-308978 (1993)).
Azonban bármelyik fent említett mikroorganizmus alkalmazásánál több probléma adódik, amit például a DMA és/vagy DPA alacsony hozama vagy a termeléshez szükséges specifikus tápközeg vagy tenyésztési körülmények okoznak. Amikor algát, például Emiliania sp -t használunk a termeléshez, elérhető a magas hozamú DHA termelés, de hátrányt jelent, hogy a tenyésztés fényt igényel, következésképpen ez az eljárás nem alkalmas ipari termelésre.
A jelen találmány előnye, hogy olyan eljárással szolgál, mellyel alacsony költséggel, a szokásos tápközeg télhasználásával egyszerű előállítási lépéseken keresztül, rövid idő alatt és magas hozammal állíthatunk elő DHA-t és/vagy DPA-t, valamint DHA-t és/vagy DPA~t tartalmazó lipideket.
A jelen találmány eljárást nyújt DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó iipidek előállítására, ami abból áll, hogy tápközeghen egy Uíkenia nemzetségbe tartozó, DHA-t és/vagy DPA-t termelő mikroorganizmust tenyésztünk és a tenyészetből kinyerjük a lipideket
A jelen találmány továbbá eljárás nyújt DHA és/vagy DPA termelésére, ami abból áll, hogy tápközegben egy Ulkenía nemzetségbe tartozó, DHA-t és/vagy DPA-t termelelö mikroorganizmust tenyésztünk, a lipideket kinyerjük a tenyészetből és a tő! elválaszt!uk a DHA-t é imazo hpidex eioai ra szolgáló, jelen találmány szennti eljárás abból áll, hogy tápközegben egy Ulkenia nemzetségbe tartozó, dokozahexaénsavat és dokozapentaénsavat tartalmazó lipideket termelő mlkoorganlzmust tenyésztőnk és a lipic bői.
nyerjük a tenyészetA dokozahexaebsavfíőáOltására szolgáló, jelen találmány szerinti eljárás abyés Ar—A bői áll, hogy tápközegben egy Ulkenia genushoz tartözördbkbzahexaensavatr'tartaimaző lipideket termelő mikroorganizmust tenyésztünk, a lipideket kinyerjük a tenyészetből és a dokozahexaénsavat elkülönítjük a llpidektői.
A-A-v abból áll, hogy lipi igben egy Ulkenia genushojjadőzo, dokoí termelő j>tkroorgánjzmust tenyésztünk, a hpk
A jelen találmány zé lipideket termelő, az U A jelen találmány' dokozahexaénsavat és rat és/vagy dokozapentaénsavat tartalmatartozó mikroorganizmussal szolgái.
I 2179 törzssel szolgál, mely képes tartalmazó lipideket termelni.
A jelen találmány tápanyag kiegészítővel, kisgyermekek táplálására alkalmas készítménnyel, fejletlen kisgyermekek táplálására alkalmas készítményekkel, csecsemő tápszerrel, várandós vagy szoptató anyák tápszerével, öregek táplálékául szolgáló készítménnyel, a táplálkozást elősegítő enteráiis szerekkel, állati tápokkal, állati táplálékok adalékanyagával és a haleledelül használt mikroorganizmusok tápjával szolgál, melyek a; fent említett eljárások bármelyike szerint nyert lipideket tar♦ » falmazzák.
A dokozahexaénsavat és dokozapentaénsavai tartalmazó szerkezeti lipldek előállítására szolgáló jelen találmány szerinti eljárás abból áll, hogy egy Ulkenia nemzetséghez tartozó mikroorganizmust, mely dokozahexaénsavat és dokozapentaénsavat tartalmazó Iípideket termel, tápközegben tenyésztünk, a nevezett iípideket a tenyészetből kinyerjük és a nevezett lipideket az 1. és 3. helyen ható gombalipázzal kezeljük, átalakítva a zsírsavakat közepes láncú zsírsavakká [C: 812, Seíkagakujiien, második kiadás, 334. oldal, Tokyo Kagakudojín (1991)}.
Az 1. ábrán a jelen találmány szerint nyert semleges Íipidekben lévő tríaoil-gliceroiok folyadékkromatográfiás kromatogramját mutatjuk be.
Az alábbiakban részletesebben leírjuk a találmányt. A dökozahexaénsav vagy DMA kifejezésen a dokozahexaénsav fn~3) sorozatát, a dokozapentaénsav vagy ”DPA kifejezésen a dokozapentaénsav (n-3) és/vagy (n-8) sorozatát értjük. Azonos értelemben használjuk a zsírok, lipldek és “olaj kifejezéseket.
Az Uíkenia nemzetségbe tartozó bármelyik mikroorganizmus felhasználható a jelen találmány szerinti eljárásban mindaddig, amíg az képes DHA-t és/vagy DPA-t termelni, így például a jelen feltalálók által a tengervízből izolált Ulkenia sp. SAM 2180 és SAM 2179 törzsek alkalmazhatók. Ezek közül a törzsek közül a SAM 2179 törzs ügy a DHA-t, mint a DPA-t nagyobb mértékben termeli. Ezt a törzset letétbe helyeztük a National Instifute of Bioscience and Human-Teohnology, Agency of Industrial Science and Technology (cím: 1-3, Higashí 1 chome Tsukuba-si, Ibarakí-ken 305, Japán) Intézetben 1998. július 23~án FERM BP-58Ö1 letéti számon.
Az Ulkenia sp. SAM 2179 és SAM 2180 törzsek mikológiái jellemzőit az alábbiakban foglaljuk össze. Amikor ezeket a törzseket KMV folyékony közegben (Fuíler
X Λ
Μ. és A. Jaworski szerk,: Zoospohc Fungi in leaching and Research VII, 303. oldal 1987, Southeastern Publishíng Corporation, Athén) 2Ö°C hőmérsékleten sötétben tenyésztjük, gömbölyded vagy ovális sejteket láthatunk és kétostoros zoospőrák szintén megfigyelhetők. Nem látható azonban ektoplazmaszálak hálózata. Következésképpen ezek a mikroorganízumusok a Thraustochybialesekhez tartoznak Yoslo Köbayasi és Kazuko Konno dokumentuma szerint plcons of the dapanese Water Mould wlth Precise Explanation'fj 189. oldal, rnagánkiadás, 1988], Továbbá ezek a mikroorganizmusok rhlzoldokat képeznek, hiányoznak az apofizisek és KMV folyékony közegben amöboid sejteket hoznak létre. Ezért az Ulkenia nemzetséghez tartozó gombaként határoztok meg őket, és az Ulkenia sp, SAM 2179 és SAM 2180 elnevezést nyerték.
A találmány szerinti eljárásban használt, az Ulkenia nemzetséghez tartozó mikroorganizmus nem korlátozodik a vad típusú törzsre, hanem kiterjed a mutánsokra vagy a rekombináns törzsekre is. Ezek szerint a DHA-t és/vagy DPA-t hatékonyan termelő mutáns vagy rekombináns törzsek a jelen találmány oltalmi körébe esnek. Ezeket a mutánsokat vagy rekombináns törzseket azzal a céllal hozzuk létre, hogy az eredeti vad törzsekhez képest, ugyanazokat a szubsztrátokat felhasználva, a lipidekben nagyobb százalékban forduljon elő a DHA és/vagy DPA, nagyobb összmennyiségű íipld keletkezzen vagy, hogy mindkét cél megvalósuljon. A jelen találmány szerinti vad típus törzs a lipidekben legalább 25 % DHA-t és/vagy 5 % DPA-t, előnyösen 40-48 % DHA-t és/vagy 8-13 % DPA-t tartalmaz. Továbbá, a jelen találmány szerinti vad típusú törzs 1 liter tenyészete legalább 3 g DHA-t és/vagy 0,5 g DPA-t, előnyösen 5 g DHA-t és/vagy 1 g DPA-t tartalmaz, A megfelelő vad típusú törzssel összehasonlítható mennyiségű DHA-t és/vagy DPA-t termelő « φ Φ κ* * * 1 *♦ * < ♦ * » * * X > Φ ν Φ Φ** « X ♦ φ φ « ΦΧ Α « Α « « « «Φ mikroorganizmusoknak pedig úgy kell hasznosítaniuk a szubsztrátot, hogy a költségek tekintetében jobb teljesítményt nyújtsanak.
A jelen találmány szerinti mikroorganizmusokat úgy tenyésztjük, hogy a mikroorganizmus eíotenyészetéveí folyékony vagy szilárd tápközeget oltunk be. A tápközeg tartalmazhat természetes vagy mesterséges tengervizet, de történhet a tenyésztés tengervíz nélkül is.
Szénforrásként bármelyik szokásos szénforrást hozzáadhatjuk a közeghez; alkalmazhatunk például szénhidrátokat, mint amilyen a glükóz, fruktóz, xilóz, szacharóz, maitöz, oldható keményítő, fokőz, glükozamin, és dextrán, továbbá olajsavat, zsírokat, például szójaolajat, glufaminsavsf melaszt, glicerint, mannitot vagy nátnum-acetáíöt
Természetes nitrogénforrás például a pepton, élésztőkivonat, maiátaklvonat, savval hidrolizált kazein és kukohcalekvár, szójahszt; szerves nitrogénforrás, például a náthum-gíütamát és karbamid, szervetlen nitrogénforrás az ammónium-acetát, ammónium-szulfát, ammónium-kloriá és ammónium-nitrát.
Ha szükséges, kiegészítő mikrotápkéní adhatunk foszfátokat, például kálium-foszfátot és kálium-dihidrogén-foszfátot, szervetlen sókat, például ammónfom-szulfátot, nátrium-szulfátot, magnézium-szulfátot, vas-szulfátot, réz-szulfátot, magnézfom-kiohdot és kaleium-klohdot, valamint vitaminokat.
A tápközeg komponenseinek mennyisége nem kifejezetten meghatározott, amíg a koncentrációjuk kedvezőtlenül nem befolyásolja a mikroorganizmusok növekedését. Általában a szénforrásből 20-180 g-ot, a nitrogénforrásbói 0,8-6 g-ot adunk a tápközeg 1 literéhez. Előnyösen a nitrogénforrás mennyisége a szénforrás növekvő mennyiségével összhangban növekszik.
» Χχe « » « « » * « ** *» ft X XX X
X ft * ·» ft »*
X ft X * « {··, **» * -ft Λ «-ft ft #4 o
A tápközeg elkészítése után a kémhatását pH = 3,0-8,0, előnyösen 3,5-5,0, még előnyösebben 3,5-4,5 értékek közé állítjuk be megfelelő savval vagy bázissal, majd autoklávban vagy hasonló módon sterilizáljuk. A mikroorganizmus tenyésztése 10-35°C, előnyösen 17~3Ö°C hőmérsékleten 2-7, előnyösen 2-5 napon át történik, levegőztetett, rázott vagy álló állapotban lévő tenyészetekben.
A DHA és/vagy DPA termelés meggyorsítására DHA és/vagy DPA előanyagokat adhatunk a tápközeghez. Ezek lehetnek például szénhidrátok, például tetradekán, hexadekán és oktadekán, szénhidrátok, például olajsav, íenolajsav és α-lenolajsav vagy ezek sói vagy észterei (például nátrium- vagy káhumsóí). Adhatunk továbbá olyan zsírokat a táptalajhoz, melyek ezeket a zsírsavakat tartalmazzák (például olívaolaj, szójaolaj, gyapotmagolaj és pálmaolaj}. Ezeket az alkotórészeket adhatjuk önmagukban vagy egymással kombinálva.
Hogy a DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó lípldeket a gyakorlati szempontból megfelelő hozamban kapjuk meg, előnyös folyékony tápközeget alkalmazni és a tenyészetet levegőztetéssel kevertetek Alkalmazhatók a szokásos tevegöztetéses fermentorok vagy az átbuborékoltatott oszlopfermentorok.
A fentiekben leírt tenyésztésnél a DHA-t és/vagy DFA-ΐ tartalmazó iipidek a sejtekben termelődnek és gyűlnek fel. Amikor folyékony tápközeget használunk, a DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó Iipidek kinyerhetők a tenyészetből vagy a sterilizált tenyészetből a tenyésztési periódus alatt, a tenyésztés végén vagy a vagy megszárított sejtekből, melyeket a fent említett kultúrák bármelyíkébő tünk össze. A kultúra”, tenyészet” kifejezésen a tenyésztett sejteket, a szárított tenyésztett sejteket, valamint a sejteket és a felülúszót tartalmazó tenyésztevet értjük.
kapott DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó lípídekbol a
Α V ΦΦ β « Φ ♦ * ♦ ♦> X Φ
J ♦ « X « Φ Φ Φ ♦ * ♦ ΧΧΦ Φ « φ « X Φ
DHA-t és/vagy DPA-t az alábbiak szerint nyerhetjük ki, A tenyésztés után a sejteket a szilárd anyag/folyadék szokásos elválasztási módszerek valamelyikével - például cenírifugálással vagy szűréssel - kinyerjük, A sejteket alaposan mossuk vízzel, majd
- előnyösen - megszárítjuk, A sejtek szárítása történhet fagyasztva szárítással, légszárítással és hasonló módon. A szárított sejteket összezúzzuk, például dyno-malommal vagy ultrahangos kezeléssel, és a lípldeket - előnyösen nitrogéngáz alatt
- szerves oldószerrel kivonjuk a sejtekből. Szerves oldószer lehet például a dietiléter, hexán, metanol, etanol, kloroform, diklór-metán vagy petroléter. Extrahálhatunk egymást követően metanollá és petroléterrel vagy alkalmazhatunk kloroform/metanol/víz oldószerkeveréket is. Nagy koncentrációban kapjuk meg a DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó íipideket a szerves oldószer csökkentett nyomáson történő eipárlásával.
Alternatív módon, a kivonás történhet nedves sejttel is. Ebben az esetben a vízzel elegyedő oldószerek használhatók, például metanol vagy etanol vagy alkohol(oka)t és vizet és/vagy más oldószereket tartalmazó, vízzel elegyedő oldószerkeverék, Más eljárásokat a fentiekben leírtunk. A fent leírt módon kapott lipidekben lévő DMA mennyisége legalább 5 kg/liter, előnyösen 3 kg/líter tenyészet, a DPA mennyisége legalább 0,7 g, előnyösen 1,0 g/líter tenyészet.
A fentiekben leírt módon kapott lipidekben a DHA és/vagy DPA neutrális lipidek (például triaeil-glicenn) vagy poláris lipidek (például foszfatidil-kolin, foszfatídíl-etano!~amín vagy foszíatldll-incziíol) alakjában vannak jelen, A tenyészetből nyert, DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó típldekből a DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó tnacii-gSicerinek tisztítása a szokásos módszerekkel történik, például hűtéses elválasztással vagy oszlcpkromafográfiával.
0 * »4 4 »0 » «
0*
A jelen találmány szerinti Iipidekben a neutrális lipidek koncentrációja általában nagyon magas (a lipidek összmennylségének több. mint 90 %-a). A neutrális iipidekben a reprezentatív zsírsavösszetétel az alábbi: palmitínsav 30-38 %; (n-3)
DHA: 40-48 %; (n-6) DPA: 8-13 %; (n-3) EPA: 0-1 %; ARA: 0-0,6 más zsírsavak:
10-20 %.
A jelen találmány szerinti lipidek neutrális ilpidjeinek legalább a 66 %-a, előnyösen 90 %-a fhacíl-glicerin. A diadl- vagy monoacil-glieerinek mennyisége a semleges Iipidekben nagyon kevés. 1-6 %-ban szabad szterinek vagy szterin-észterek is előfordulnak. A thacil-glicerínekben tipikusan az alábbi molekulafajták találhatók: 18:0-16:0-22:6, 16,0-16,0:0:22:6, 16:0-22:6-22:8, 18:0-22:6-22:8,
22:5-22:6-22:6 és 22:6-22:6-22:8, ahol például a 18:0 egy 16 szénatomos zsírsavat jelent, amelyben nincs (0”) kettős kötés. Érdekes, hogy a jelen találmányban szereplő iipidekben csak többszörösen telítetlen zsírsavak szerepelnek a thacíi-glicerinekben.
A DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó lípídekhől a DHA és/vagy DPA kinyerése a lipidek hidrolízisével, majd betöményítésével és a kapott zsírsavak vagy ezekből készített zsírsavészterek szokásos módon történő elválasztásával - például karbamld hozzáadásával, hütéses elválasztással vagy oszlöpkromalögráfíával - történik,
A fent leírt módon nyert DHA és/vagy DPA, valamint DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó lipidek hozzáadhatok a különféle élelmekhez, takarmányokhoz, haltápokböz, hogy a DHA és/vagy DPA hiányt ellensúlyozzuk. Az élelmek közé tartoznak például a tápanyag kiegészítő élelmek, a kisgyermekek vagy fejletlen kisgyermekek táplálására szolgáló készítmények, az egészség fenntartását célzó élelmek, a funkcionális élelmek (például a táplálkozást elősegítő enterálls szerek), a cseosmotápok, fcfcv* **** * fcfcfc* < ♦ * fcfcfc*
4. * X fc X** * X· fc K >· % - * X· * ·♦ ·' » fc V a várandós és szoptatós anyák élelmei, az idősek számára készített élelmek, A takarmányok közé tartoznak a háziállatok, például sertések és szarvasmarhák élelmei, a szárnyasok, például csirkék tápjai, a kedvenc állatok, például kutyák, macskák, stb, tápjai, a beltenyészetek tápjai, ide tartoznak azok a tápanyagok, melyeket a tenyésztett halak és rákok táplálására szolgáló mikroorganizmusok (úgynevezett zooplanktonok) tenyésztésére használunk.
Ami a tápokat és a haltápokat illeti, a jelen találmány szerinti mikroorganizmusok tenyészetének felhasználása különösen előnyös és gazdaságos, vonatkozik ez a tenyészetből kinyert sejtekre vagy a lipldek kinyerése utáni sejtmaradékra. A DHA-t és/vagy DPA~t termelő mikroorganizmusok sejtjei például közvetlenül, felhasználhatók halivadékok (fiatal halak) tápjaként, ahelyett, hogy közvetve zöopianktonokkal vagy más módon táplálnánk őket. Ezek az anyagok - ha szükséges - felhasználhatók szárítás vagy sterilizálás után is.
A jelen találmány szerinti lipldek felhasználhatók azzal a céllal, hogy DHA-vaí és/vagy DPA-val dúsított baromfitojásokat termeljünk, melyekhez úgy jutunk, hogy a baromfiakat (elsősorban tyúkokat), melyektől a tojásokat gyűjtjük, a jelen találmány szerinti lipideket tartalmazó táppal etetjük. DHA-vaí és/vagy DPA-val dúsított tojássárgájának olaját is előállíthatjuk, ha az ilyen baromfi tojásából vagy tojássárgájából a szokásos módon kinyerjük az olajat. Figyelemre méltóak azok a kisgyermekek, fejletlen kisgyermekek, csecsemők, várandós és szoptató anyák étkezéséhez használt készítmények, melyek ilyen tojássárgája-olajat tartalmaznak.
Régóta történnek próbálkozások az Irányban, hogy csecsemők számára az anyatejhez hasonló összetételű porított tejkészítményeket hozzanak létre. Különösen fontos olyan készítményt előállítani, melyben a fő alkotórészek (azaz fehérje, * « <»»» **' fc fc xfcf * ' * K ·* 6 «· >
« -v ·* « « » v > « » * * * V * ' fc <
zsír és cukor) hasonlóak az anyatejben levőkhöz. A Iipidek vonatkozásában nehézséget jelent, hogy a szokásos tejporok hiányosak az anyatejre jellemző, többszörösen telítetlen zsírsavakat illetően. Az anyatej telítetlen zsírsavainak összetételével néhány közlemény foglalkozik [amerikai, európai és afrikai anyatejeknél lásd: ÍNFORM, 6(8):940-946 (1996): japán anyatejnél JJPEN 13(8):766-772 (1991)].
Újabban kimutatták, hogy az anyatejben lévő ARA és DHA hat a csecsemők növekedésére j” Advanoes ín Polyunsaturated Fatty Acid Research”, Elsevier Science Pubiishers, 261-264 (1993)}. Ugyancsak leírták az ARA és a DHA jelentőségét a magasság növekedésében és az agy kifejlődésében (Proc. Mail. Ácad. Sci. USA 90:1073-1077 (1993); Láncét, 344:1319-1322 (1994)1.
Ezek szerint nagy jelentősége van az ARA és DHA hozzáadásának a módosított tejhez. A kereskedelmi forgalomban van már olyan módosított tej, mely DHA forrásként halolajat tartalmaz. A halolaj EPA-t Is tartalmaz, ami alig található az anyatejben, és amelyikről Ismert, hogy negatív hatással van a fejletlen kisgyermekek növekedésére ΓAdvanoes In Polyunsaturated Fatty Acid Research’’, Elsevier Science Pubiishers, 261-264 (1993)1. A jelen találmány szerinti ilpidek alkalmasak a módosított tej adalékanyagaként való alkalmazására, minthogy az EPA rendkívüli alacsony koncentrációban fordul elő bennük. A jelen találmány szerinti iipidek cse~ csemötáphoz is adhatók.
A jelen találmány szerinti iipidek hozzáadhatok a DHA és/vagy DPA kiegészítésére vagy az egészség fenntartására élelemhez, mint amilyen a tápanyagkiegészítő élelem, az idősek számára készült élelem, vagy az egészségi szempontok szerint összeállított élelem. A tápkészítmények lehetnek szilárd vagy folyékony táplálék vagy olajokat tartalmazó táplálék alakjában. Az élelem lipídkoneentráciőja
* φ
Ί ό milyen az az élelem, melyhez a
0,001-50 tömeg%, attól fü llpldeket hozzáadjuk.
Olajat tartalmazó élelem például az olajat jellemzően tartalmazó természetes élelmiszerek (például hús, hal vagy dió), azok az ételek, melyek elkészítéséhez zsírokat adunk (például leves), azok az ételek, melyek elkészítésénél a melegítő közeg zsírok (például a fánk), azok az élelmek, melyek összeállításánál zsírokat használunk (például édes tészták), zsiradék élelmiszerek (például vaj) vagy azok az ételek, melyek elkészítésének teljessé tételéhez zsírokat használunk vagy melyeket zsiradékkal bepermetezünk (például kétszersült). Á jelen találmány szerinti llpldeket (vagy a kinyert DHA-t és/vagy DFA-t) hozzáadhatjuk növényi eredetű élelmekhez, fermentációval nyert élelmekhez, állatokból készült élelmekhez, tengeri ételekhez vagy Italokhoz, melyek különben nem tartalmaznak zsírokat.
Ettől eítérőíeg, a jelen találmány szerinti llpldeket hozzáadhatjuk olyan funkcionális céllal alkalmazott élelmekhez, melyek DMA és/vagy DPA fiziológiai hatást j a szervezet csökkent funkciójának helyreállításában vagy a funkció csökkenésének megelőzésében. A jelen találmány szerinti funkcionális élelmek lehetnek gyógyszerkészítmények alakjában vagy megformált alakban (például a táplálkozást segítő enterálls ágens, por, granulátum, tasak, belsőleg használt oldat, szuszpenzió, emulzió, szirup, stb,), melyekben a jelen találmány szerinti lípideket fehérjével, szachariddal, lipiddel, nyomelemekkel, vitaminokkal, emulgeálószerekkel vagy illatosítószerrel kombinálva használjuk.
Továbbá a jelen találmány szerinti lipidek felhasználhatók adalékanyag! kozmetikai szereknél, íemosóknál vagy felhasználhatók gyógyszerként alkalmazott származékaik előállításánál, mint kiindulási anyag.
fcfcfc
Az szemlei' s az alábbiakban példákat adunk meg. A pé dák kizárólag szemléltető eéfeatűak és a találmány oltalmi korét nem befolyásolják.
Az Ulkenia sp. SAM 2180 és SAM 2179 törzseket 5 literes fermentorokban (széles szájú üvegfermentorban) 3 liter tápközegben tenyésztjük.
A tápközeq összetétele:
15 glükóz 60 q/l w
2) kálium-foszfát 3 g/i
3) ammónium-szulfát 2 g/l
4) kukoricalekvár 0,7 g/l
S) 50 %-os mesterséges tengervíz 1 1
a táp Ta.y. ‘közeg kémhatása, pH ~ 4, 3.
i Ss 1) esziesss svOíusmenyeK, hőmérséklet 28°C
2) levegőztetés 0,8 térfogat/perc
3) kevertetés 3ÖÖ rpm
4) kémhatás: pH = 4 értéken tartva Ii
-hidroxid-oldattai vagy 1 M kénsavval. A tenyésztés után a sejteket centnguáíással összegyűjtjük és szárítjuk, majd megmérjük az egy liter táj eső sejtek tömegét. A
összeroncsoljuk, a lipideket kloroform/metanol, 2:1 (téri.) eiegyében kivonjuk, a száraz sejtek egy tömegegységéhez löö térfogategység oldószerelegyef adva és a keveréket üveggyöngyök jelenlétében homogenizálva. Miután a kivonatot a Főien módszerrel mostuk, az oldószert elpároijuk és megmérjük a visszamaradt tisztított llpidek tömegét.
A zsírsavösszetétel meghatározása céljából a kapott tisztított lipldekóen lévő zsírsavak mefil-észterelf készítjük el. Ehhez a llpidek egy részét 10 % sósavat tartalmazó metanol és diklőr-metán azonos térfogatú elegyében oldjuk, és az oldatot 6Ö°C hőmérsékleten tartjuk 2 órán át. Az észtereket gázkromatográfiával analizáljuk az alábbi elválasztási körülmények között:
1) oszlop:TC-70 kapilláris oszlop (ÖL belső átmérő: 0,25 mm, bosszúság
2)
4)
5)
Co., Ltd.) : 30 m;
áramlási sebesség; 0,8 ml/perc, 100 kPa (oszlopfejnyomás) vivőgáz: nitrogéngáz oszlophőmérséklet.: emelkedő, 172-22(70 (4’C/perc) detektálás: FID.
Az eredményeket az 1. és 2. táblázatban foglaltuk össze,
1. Táblázat törzs össz- lipld meny- DHA DPA mennyiSAM2130 3 23,2
SAM 2179 3 19,5 tömeg/liter közeg ** a szárazsejt
11,9
5,5
0,2
1,3
2. T á b S á z a t törzs
14:0 15:0 16:0 17:0 18:0 20:4 20:5 22:5 22:6
SAM 2130 2,7 2,4 55,0 1,0 1,4
0,2 6,7 28,7 ♦ *
SAM 2179 2,4 0,9 37,2 0,3 0,8 0,4 0,8 10,6 46,2
Ζ példa
Az Ulkenía sp. SAM 2179 törzset 3 liter tápközegben tenyésztjük egy 5 literes (széles szájú fermenforban)
1) glükóz 60 g/l
2) kálium-foszfát 3 g/l
3) ammómum-szuifát 2 g/l
4) magnézium-kforid 1,3 g/l
5) nátrium-szulfát 1 g/l
5) kalciüm-klorld 0,3 g/l
7) kukoricalekvár 0,7 g/l pH ™ 4,0.
Tenyésztési körülmények;
1)
2)
3)
4) :
hőmérséklet 28*C
levegőztetés 0,5
kevertetés 300 rpm
kém hatás beáll ítása; pH - 4-sn tartva 10 %
-hldroxld-oldattal és 1 M kénsawal
A tenyésztés után a sejteket oentriguálással összegyűjtjük és fagyasztva szárítjuk, majd megmérjük az egy liter tápközegre eső sejtek tömegét. A sejteket összeroncsoljuk, a lipideket kloroform/melanol, 2:1 (tért.) elegyében kivonjuk, a száraz sejtek egy tömegegységéhez 100 térfogategység oldöszerelegyef adva és a kemódszerrel mostuk, az oldószert elpároljuk és megmérjük a visszamaradt tisztított
Iipidek tömegét.
A zsírsavősszetétel meghatározása céljából a kapott tisztított lípídekben lévő zsírsavak meiíl-észtereit készítjük el. Ehhez a Iipidek egy részét 10 % sósavat tartalmazó metanol és diklór-metán azonos térfogatú eiegyében oldjuk, és az oldatot 60°C hőmérsékleten tartjuk 2 órán át. Az észtereket gázkromatográfiával analizáljuk az 1, példában ismertetett körüíménvek. között.
Az eredményeket a 3. és 4. táblázatban foglaltuk össze
3, Táblázat
törzs tenyészidő szárazsejt lipid ossz- lipid meny- DHA DPA
(nap) (g< menylség nyiség mennyi- í-q/!)* rtömeg%r* séqe mennyi- ség
SAM 2179 3 21 12,0 56 5,5 1,5
* tömeg/iiter közeg ** a szárazsejt tőmeg%-ában kifejezve
4, Táblázat törzs 14:0 15:0 18:0 17:0 18:0 20:4 20:5 22:5 22:6
Az 1. példában leírtak szerint nyert lipídekböl elválasztjuk a neutrális lipideket és a poláris lipideket. Az elválasztáshoz a szokásos folyadék-folyadék megoszlásos technikát alkalmazzuk, hexánt és 90 %-os metanolt alkalmazva. 1 g lipidből 0,92 g neutrális lípidet és 0,05 g poláris lipldet kapunk. A kapott neutrális és poláris llpídeket vékonyréteg-kromatográtlávaí analizáljuk; A színes előhívást kénsavval végezzük, majd a keletkezett foltokat standard lípídek R? értékei alapján azonosítjuk.
A neutrális zsírok több. mint 90 %-a tríaoíl-glíoerin. A poláris lípídék foszfafídil-kollnt (60-80 %}, foszfatidil-etanol-amlnt (5-20 %) és íoszfatidii-inozítolt (2-8 %) tartalmaznak.
A neutrális zsírokban lévő tríaoikglieenneket tovább analizáljuk az egyes komponenseket folyadék-kromatográfiával szétválasztva (oszlop; ODS oszlop; mozgó fázis aoeton/acetonitnl, 3:2., detektálás: differenciál refraktométerrel) (lásd 1. ábra). A kapott csúcsokat elkülönítjük, a terméket hidroíízálás után metil-észterré alakítjuk. A zsi'rsavmaradékok meghatározásához gáz-folyadék kromatográfiát használunk.
Az öt fő csúcsot az 5. táblázatban bemutatott komponensekként azonosítottuk, A tnaeii-gíicennek 12,8 % I^J-tn-dokozahexaénoíl-giíoerin-észtert és 8,0 % 1-dokozapentaénoil-2;3-dl~dokozahexaénoli-glicerin~észtert tartalmaznak. A tríacil-glicerin-észterek összmennyiségének kb. 20 %-a olyan Inaeíl-gíicebn-észterböl áll, melyet többszörösen telítetlen zsírsavak alkotnak.
csúcs észterösszetétei arány (%)
1 22;o-22;c-22;6 12,6
2 22::5-22:6-22:6 8,0
3 18:0-22:6-22:8 16.3
4 16:0-22:5-22:8 8,1
5 16:0-18:0-22:8 10,8
fcfc * * helyeit az alábbiak szerint határozzuk meg, A 3. példa szerint nyert, triacil-gíieerin-észtereket (18 0-16:0-22:6) megszárítjuk és az 1,3 helyre specifikus íípázzal (Rhizopus japoníousbőí származik) reagáltatjuk. A zsírsavakat GC/MS analízissel azonosítjuk, miután a kapott S-monoacíhgíícerin-észtert trimetil-szilíleztük. A íipázos kezelés 2 mi 60 mM acetát-pufferben (pH = 5,5) történik 35X hőmérsékleten 30 perc alatt, 1000 egység íípáz felhasználásával. A reakoioiermékeket dietil-éterrel kivonjuk és a szokásos trimetíl-szililező ágenssel származékot képzőnk.
A fragmens csúcs komponense megfelelt a 22:6 zsírsavval észterezett monoacll-glicehn-észter molekulatömegének, jelezve, hogy a triaclí-glícerln-észter 18:0-22:6-18:0 szerkezetű, vagyis a 22:8 zsírsavmaradék a glicerinlánc 2-es helyéhez kapcsolódik.
100 g porított tejhez hozzáadunk 0,44 g, az 1. példa szerint előállított iipidkeveréket, ami 46,2 % DHA-t és 10,8 % DPA-t tartalmaz.
A kapott készítményben a zsírsavak összmennyíségének 0,80 %-a, illetve 0,19 %~a a DHA, illetve a DPA, ami hasonló az anyatej összetételéhez.
6. példa
DHA-t és DPA-t tártál mázó struktúrás Is H piriek előállítása ml iipázoldatot (5600 egység/ml, 1,3- helyre specifikus llpáz a Rhizopus deíemar mikroorganizmusból nyerve) összekeverünk 2,5 g kalcium-karbonát
Χ-> » ♦ csapjuk. A kapott immobiiízált enzim specifikus aktivitása 9,3 egység/mg. 120 mg immobiiízált enzimpreparátumot összekeverünk 1 g DHA-t és DPA-t tartalmazó, az 1. példában ieirtak szerint SAM 2180 törzsből nyert lipídekkel, 2 g kapriísav és SÖ mg vízzel és 8 órán át kevertetjük 3Ö°C hőmérsékleten. A szokásos módszerrel kinyerjük a reakciókeverékböi a triacll-giicerin-észtereket és meghatározzuk a zsírsav összetevőit. Az eredményeket a 8. táblázatban foglaltuk össze.
8:0 14:0 15:0 160 17:0 18:0 20:4 20:5 22:5 22:6 (AA) (EPA) (DPA) (DHA) nem kezelt 0,0 2,7 2,4 55,0 1,0 1,4 0,0 0,2 8,7 28,7 lipázzal kezelt 36,2 1,8 1,2 17,8 1,0 1,8 0,0 0,2 7,3 30,4
A tnaeil-glícerin-észterek több, mint 30 %-ánái az SN2 helyen kapcsolódó zsírsavak többszörösen telítetlenek, így ezek a lipidek alkalmasak strutűrálís lipideket képezni, melyek a glicerin SN1 és SN3 helyén közepes lánchosszú zsírsavakat és az SN2 helyen többszörösen telítetlen zsírsavat tartalmaznak.
/pan a/ka/mazhatóság
A jelen találmány szerinti eljárással olyan lipldek nyerhetők, melyek nagymennyiségű DHA-t és/vagy DPA-t és klsmennylsegü EP.A-t tartalmaznak. A DHA és/vagy DPA ki ís nyerhető ezekből a lípídekből.
A jelen találmány szerinti DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó lipidek, az elválasztott DMA és az elválasztott DPA felhasználható adalékanyagként élelmiszerekhez, tápokhoz, gyógyszerekhez, sth, Tápokhoz és haltápokhoz a DHA-t és/vagy DPA-t tartalmazó, a jelen találmány szerint nyert sejtek használhatók fel. A jelen találmány szerinti táppal etetett baromfiaktól DHA-ban és/vagy DPA-ban gazdag tojást vagy tojássárgáját nyerünk.

Claims (25)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás doközahexaénsavat és/vagy dokozapentaénsavat tartalmazó Hpldek előállítására, azzal jellemezve, hegy egy, az Uikenla nemzetséghez tartozó·, dokozahexaénsav és/vagy deközapentaénsav termelésére képes mikroorganizmust egy közegben tenyésztünk, majd az említett llpídeket a tenyészetből kinyerjük,
  2. 2. Eljárás dokozahexaénsav és/vagy dckozaheptaénsav előállítására, előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. Igénypont szenntí eljárást elvégezzük, majd a doközahexaénsavat vagy dokozapentaénsavat az említett íipldekbői elkülönítjük.
  3. 3. Eljárás doközahexaénsavat és/vagy dokozapentaénsavat tartalmazó strukturált íipidek előállítására, azzal jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti eljárást elvégezzük, majd további lépésként az említett llpídeket fungálls lípázzal kezelve az 1-es és 3-as pozícióban található zsírsavakat 8-12 szénatómos szénlánccat rendelkező zsírsavakká alakítjuk át.
  4. 4. Uíkenia nemzetséghez tartozó, mikroorganizmus-sejtek, amelyekben olyan semleges íipidek találhatók, amelyek az összes jelenlévő zsírsav mennyiségére vonatkoztatva 30-38 tömeg% paímltínsavat, 40-48 tömeg% doközahexaénsavat, 8-13 tömeg% dokozapentaénsavat, 0-1 tömeg% eíkozapentaénsavat, 0-0,6 tömeg% araohídonsavat és 10-20 tömeg% egyéb zsírsavat tartalmaznak.
  5. 5. A 4. igénypont szerinti Ulkenía nemzetséghez tartozó mikroorganizmus· sejtek, amelyekben olyan lípídek találhatók, amelyek doközahexaénsavat és/vagy dokozapentaénsavat tartalmaznak, ahol az említett sejtekben olyan semleges íipidek találhatók, amelyek tríacil-glíoerineket tartalmaznak, amely triacll-gíicerínek kizárólag pók-telítetlen zsírsavakból állnak.
    'X *
    XX
    X X X
    X X Κ « « X * y » χ χ χ
    X X X * Λ « X x * XXX* XX X
    8, Α 4. vagy 5, igénypont szerinti sejtek, ahol a semleges lipidek legalább 85 tömeglé, előnyösen 90 tömeglé tnacil-giicerínt tartalmaznak.
  6. 7. Lipidek termelésére képes Ulkenia sp, SAM2179 (FERM BP-5801) törzs, amely lipidek olyan neutrális lipídeket tartalmaznak, amely neutrális lipidek az Őszszes jelenlévő zsírsav mennyiségére vonatkoztatva 30-38 tömeglé palmitínsavat, 40-80 tömeglé dokozahexaénsavat, 8-13 tömeglé dokozapentaénsavat, 0-1 tömeglé eikozapentaénsevat, 0-0,8 tömeglé araohidonsavat és 10-20 tömeglé egyéb zsírsavat tartalmaznak.
  7. 8. Az 1, igénypont szerint előállított, az Ulkenia nemzetséghez tartozó mikroorganlzmusböl nyerhető íipld extraktum, amely lipid extraktum az összes jelenlévő zsírsav mennyiségére vonatkoztatva 30-38 tömeglé palmitínsavat, 40-48 tömegéé dokozahexaénsavat, 8-13 tömeglé dokozapentaénsavat, 0,1 tömeglé eiközapentaénsavat, 0-0,8 tömeglé arachidonsavat és 10-20 tömeglé egyéb zsírsavat tartalmaznak.
  8. 9. A 8. igénypont szerinti lipid extraktum, amely olyan lipideket tartalmaz, amelyek dokozahexaénsavat és/vagy dokozapentaénsavat tartalmaznak, és amely lipid extraktum olyan semleges lipideket tartalmaz, amelyek kizárólag pöii-telitetlen zsírsavakból álló tnacil-gSieennekel tartalmaznak.
  9. 10. A 8, vagy 9, igénypont szerinti lipid extraktum, ahol a semleges lipidek legalább 85 tömeglé, előnyösen 90 tömeglé iriadi-glicerínt tartalmaznak,
  10. 11. Valamely, az Ulkenia nemzetséghez tartozó mikroorganizmusból az 1. igénypont szerinti eljárással nyerhető lipid extraktum, amely olyan lipideket tartalmaz, amelyek dokozahexaénsavat és/vagy dokozapentaénsavat tartalmaznak és amely lipid extraktum olyan semleges lipideket tartalmaz, amelyek 20 tömeglé, kizárólag poli-telitetien zsírsavakból álló tdacii-gücenneket tartalmaznak.
    > X
    X t φ*
    Φ — Τ Γ> » ♦ φ » ί φ φ ««φ» φ « φ φ * X < Φ φ Φφ X
  11. 12. Strukturált íípid-készítmény, amelynek előállítása során a 9-12. igénypontok bármelyike szerinti lipid extraktumot íungátís íípázzal kezelve az 1-es és 3-as pozícióban található zsírsavakat 8-12 szénatomos szénlánccal rendelkező zsírsavakká alakítjuk.
  12. 13. Tápanyag-kiegészítő élelem, amely a 8-11, igénypontok bármelyike szerinti Hóid extraktumot tartalmazza.
  13. 14. Á 8-11. Igénypontok bármelyike szerinti lipid extraktom alkalmazása fejletlen csecsemő, csecsemő vagy bébi táplálására alkalmas élelmiszer termékben,
  14. 15. A 8-11. igénypontok bármelyike szerinti lipid extraktom alkalmazása öregkornak számára alkalmas élelemként, táplálkozást segítő enteráiis extraktumként vagy várandós vagy szoptatós anyák táplálékaként.
  15. 16. A 8-11. igénypontok bármelyike szerinti lipid extraklum alkalmazása állati takarmányként, állati takarmány-adalékként vagy takarmányozásra szolgáló állati planktonok tápjaként,
  16. 17. Valamely, az Ulkenia nemzetségbe tartozó, dokozahexaénsavat és/vagy dokozapentaénsavat tartalmazó lipidek termelésére képes mikroorganizmus tápéielmiszeradalékként történő alkalmazása.
  17. 18, A 8-11. igénypontok bármelyike szennti lipid extarktum tápanyagkiegészítő éielmiszeradalékként történő alkalmazása.
  18. 19, A 12. igénypont szerinti strukturált lipidekből álló készítmény tápanyag-kiegészítő élelmiszeradalékként történő alkalmazása,
  19. 20, A 18. vagy 10. igénypont szerinti alkalmazás, ahol az élelmiszer-adalékot egy várandós vagy szoptatós anya, bébi, fejletlen csecsemő, csecsemő vagy öregkorú számára alkalmas élelmiszertermék tartalmazza.
  20. 21. 18-20.
    bármelyike szerinti, tápiá segítő enteráiis szer24 *« X * ·<' ♦ 9 4 -* * « φ * « φ « ·» ft 9 ft >X»ft ftft x ként történő alkalmazás.
  21. 22, A 17-20. igénypontok bármelyike szerinti, állati takarmányként történő alkalmazás.
  22. 23, A 17. Igénypont szerinti, takarmányozásra szolgáló állati planktonok tápjaként történő alkalmazás,
  23. 24, A 22. igénypont szerinti alkalmazás, ahol az Ulkenia nemzetséghez tartozó mikroorganizmust szárítás vagy sterilizálás után használjuk,
  24. 25, Ulkenia nemzetséghez tartozó mikroorganizmus-sejtek, amelyek dokozahexaénsavat és/vagy dokozapentaénsavat tartalmazó lípldeket tartalmaznak,
  25. 26, A FERM 8P-5601 számon letétbe helyezett Ulkenia sp. SAM2179 törzs, amely dokozahexaénsavat. és dokozapentaénsavat tartalmazó Iipidek termelésére képes
HU9903703A 1996-07-23 1997-06-06 Eljárás dokozahexaénsav és dokozapentaénsav elõállítására HU229062B1 (hu)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP19351696 1996-07-23
PCT/JP1997/001946 WO1998003671A1 (en) 1996-07-23 1997-06-06 Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP9903703A2 HUP9903703A2 (hu) 2000-03-28
HUP9903703A3 HUP9903703A3 (en) 2001-09-28
HU229062B1 true HU229062B1 (hu) 2013-07-29

Family

ID=16309374

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9903703A HU229062B1 (hu) 1996-07-23 1997-06-06 Eljárás dokozahexaénsav és dokozapentaénsav elõállítására

Country Status (24)

Country Link
US (2) US6509178B1 (hu)
EP (3) EP0935667B1 (hu)
JP (2) JP3343358B2 (hu)
AT (2) ATE347607T1 (hu)
AU (1) AU723553C (hu)
BR (1) BR9710394A (hu)
CA (1) CA2261231C (hu)
CZ (2) CZ299658B6 (hu)
DE (2) DE69737063T2 (hu)
DK (2) DK0935667T3 (hu)
EE (1) EE04063B1 (hu)
ES (2) ES2281913T3 (hu)
HU (1) HU229062B1 (hu)
ID (1) ID17466A (hu)
IL (2) IL128166A (hu)
LT (1) LT4550B (hu)
LV (1) LV12329B (hu)
NO (2) NO323173B1 (hu)
PL (1) PL193818B1 (hu)
PT (2) PT935667E (hu)
RU (1) RU2226216C2 (hu)
SI (1) SI0935667T1 (hu)
TR (1) TR199900130T2 (hu)
WO (1) WO1998003671A1 (hu)

Families Citing this family (103)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5340742A (en) * 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids
US20060094089A1 (en) * 1988-09-07 2006-05-04 Martek Biosciences Corporation Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids
US6509178B1 (en) * 1996-07-23 2003-01-21 Suntory Ltd. Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid with ulkenia
JP2001512029A (ja) * 1997-08-01 2001-08-21 マーテック・バイオサイエンスィズ・コーポレーション Ｄｈａ含有栄養組成物およびそれらの製造方法
JP4283351B2 (ja) * 1998-08-27 2009-06-24 サントリー酒類株式会社 新規な油脂組成物の製造方法および用途
KR100504324B1 (ko) 1999-03-04 2005-07-28 산토리 가부시키가이샤 도코사펜타엔산 함유물질의 이용
MX350779B (es) 2000-01-19 2017-09-18 Dsm Ip Assets B V * Procedimiento de extraccion sin solvente.
AU2008229885B2 (en) * 2000-01-19 2011-11-17 Dsm Ip Assets B.V. Solventless extraction process
WO2001054510A1 (en) * 2000-01-28 2001-08-02 Omegatech, Inc. Enhanced production of lipids containing polyenoic fatty acids by high density cultures of eukaryotic microbes in fermentors
DE60020271T2 (de) * 2000-03-29 2006-03-23 Council Of Scientific And Industrial Research Verfahren zur erhöhung von mehrfachungesättigten fettsäuren in thraustochytriden
US6410282B1 (en) * 2000-03-30 2002-06-25 Council Of Scientific And Industrial Research Method for enhancing levels of polyunsaturated fatty acids in thraustochytrid fungi
EP1178118A1 (en) 2000-08-02 2002-02-06 Dsm N.V. Isolation of microbial oils
ATE463560T1 (de) 2000-09-28 2010-04-15 Bioriginal Food & Science Corp Fad4, fad5, fad5-2, and fad6, mitglieder der fettsäuredesaturasefamilie und ihre verwendungen
EP2239028A1 (en) 2001-12-12 2010-10-13 Martek Biosciences Corporation Extraction and Winterization of Lipids From Oilseed and Microbial Sources
CN1665495A (zh) * 2002-06-17 2005-09-07 梅迪斯蒂研究及生产股份有限公司 长链不饱和氧化化合物及其在治疗、化妆品的制营养品的领域中的应用
JP3840459B2 (ja) * 2003-03-20 2006-11-01 裕司 島田 グリセリドおよびその製造方法
US8921422B2 (en) * 2003-10-01 2014-12-30 The Iams Company Methods and kits for enhancing ability to learn in a puppy or kitten
KR101761164B1 (ko) 2003-10-02 2017-07-25 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. 변형량의 염소 및 칼륨을 사용하는 미세조류 중에 고농도 디에치에이의 생산
DE10352838A1 (de) * 2003-11-10 2005-07-07 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Kultivierung von Mikroorganismen der Gattung Thraustochytriales unter Verwendung eines optimierten Niedrigsalzmediums
DE10352837A1 (de) * 2003-11-10 2005-07-07 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Prozess zur Kultivierung von Mikroorganismen der Gattung Thraustochytriales
EP1537871A1 (en) * 2003-12-04 2005-06-08 Aventis Pharma S.A. Enoxaparin for the treatment of cancer
DE102004017369A1 (de) 2004-04-08 2005-11-03 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Screeningverfahren zur Identifizierung von PUFA-PKS in Proben
DE102004022015A1 (de) * 2004-05-03 2005-12-01 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Fischfutter für Aquafarmen auf Basis fermentativ gewonnener mehrfach ungesättigter Fettsäuren
US7550286B2 (en) * 2004-11-04 2009-06-23 E. I. Du Pont De Nemours And Company Docosahexaenoic acid producing strains of Yarrowia lipolytica
DE102004062141A1 (de) * 2004-12-23 2006-07-06 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Herstellung eines Rohöls aus Gemischen von Mikroorganismen und Pflanzen, das so hergestellte Öl sowie die spezifischen Verwendungen des so hergestellten und gegebenenfalls zusätzlich raffinierten Öls
DE102005003625A1 (de) * 2005-01-26 2006-07-27 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Verfahren zur Herstellung einer DHA-haltigen Fettsäure-Zusammensetzung
DE102005003624A1 (de) * 2005-01-26 2006-07-27 Nutrinova Nutrition Specialties & Food Ingredients Gmbh Herstellung und Anwendung eines antioxidativ wirksamen Extraktes aus Crypthecodinium sp.
WO2006127620A2 (en) * 2005-05-23 2006-11-30 Massachusetts Institute Of Technology Compositions containing pufa and methods of use thereof
PT2468847T (pt) 2005-06-07 2017-06-01 Dsm Nutritional Products Ag Microrganismos eucarióticos para produzir lípidos e antioxidantes
KR20130101596A (ko) * 2005-07-08 2013-09-13 마텍 바이오싸이언스스 코포레이션 치매 및 치매-전단계와 관련된 용태의 치료를 위한 다중불포화 지방산
WO2007035870A2 (en) * 2005-09-20 2007-03-29 Prolacta Bioscience, Inc. A method for testing milk
DE102005054577A1 (de) 2005-11-16 2007-05-24 Cognis Ip Management Gmbh Verwendung von Estern ungesättigter, physiologisch aktiver Fettsäuren als Nährmedien für Zellkulturen
ES2384701T3 (es) * 2005-12-21 2014-07-02 Brudy Technology, S.L. Utilización del DHA para el tratamiento de una patología asociada con el daño celular oxidativo
ES2277557B1 (es) 2005-12-21 2008-07-01 Proyecto Empresarial Brudy, S.L. Utilizacion de acido docosahexaenoico para el tratamiento del daño celular oxidativo.
WO2007079147A2 (en) 2005-12-28 2007-07-12 Advanced Bionutrition Corporation A delivery vehicle for probiotic bacteria comprising a dry matrix of polysaccharides, saccharides and polyols in a glass form and methods of making same
US8968721B2 (en) 2005-12-28 2015-03-03 Advanced Bionutrition Corporation Delivery vehicle for probiotic bacteria comprising a dry matrix of polysaccharides, saccharides and polyols in a glass form and methods of making same
US20100086638A1 (en) * 2006-04-03 2010-04-08 Kyle David J Feed formulations containing docosahexaenoic acid
GB2437909A (en) * 2006-05-12 2007-11-14 Advanced Bionutrition Inc Animal feed comprising docosahexaenois acid from a microbial source
EP1886680A1 (en) * 2006-05-23 2008-02-13 Nestec S.A. Maternal supplement
MX2009001346A (es) * 2006-08-01 2009-04-17 Ocean Nutrition Canada Ltd Microbios productores de aceite y metodos de modificacion de los mismos.
AU2007289233A1 (en) * 2006-08-29 2008-03-06 Dsm Ip Assets B.V. Use of DPA(n-6) oils in infant formula
KR100684642B1 (ko) * 2006-09-14 2007-02-22 주식회사 일신웰스 어유 유래 글리세라이드 유지 조성물 및 이의 제조방법
WO2008049512A1 (en) * 2006-10-27 2008-05-02 Lonza Ag Production of omega-3 fatty acids in microflora of thraustochytriales using modified media
JP5285617B2 (ja) 2006-12-18 2013-09-11 アドバンスド バイオニュートリション コーポレーション 生きたプロバイオティクスを含む乾燥食物製品
US20080234377A1 (en) * 2007-03-23 2008-09-25 Martek Biosciences Corporation Polyunsaturated fatty acids for treatment of dementia and pre-dementia-related conditions
CA2692355C (en) * 2007-06-29 2018-09-11 Martek Biosciences Corporation Production and purification of esters of polyunsaturated fatty acids
EP2071019A1 (en) 2007-12-15 2009-06-17 Lonza AG Method for the cultivation of microoranisms of the order thraustochytriales
EP2105506A1 (de) 2008-03-26 2009-09-30 Lonza Ag Verfahren zur Herstellung PUFAs enthaltender Öle unter Verwendung von Mikroorganismen der Ordnung Labyrinthulomycota
EP2145942A1 (de) * 2008-07-15 2010-01-20 Lonza Ltd. Verfahren zur Isolierung von Ölen aus Zellen und Biomasse
US20100077654A1 (en) * 2008-09-23 2010-04-01 LiveFuels, Inc. Systems and methods for producing biofuels from algae
JP5762393B2 (ja) * 2009-03-19 2015-08-12 ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． ヤブレツボカビ、脂肪酸組成物、ならびにその作出および使用の方法
US8207363B2 (en) * 2009-03-19 2012-06-26 Martek Biosciences Corporation Thraustochytrids, fatty acid compositions, and methods of making and uses thereof
EP3266448B1 (en) 2009-03-27 2022-02-16 Intervet International B.V. Microparticulated vaccines for the oral or nasal vaccination and boostering of animals including fish
WO2010121094A1 (en) 2009-04-17 2010-10-21 Livefuels. Inc. Systems and methods for culturing algae with bivalves
MX2011012586A (es) 2009-05-26 2012-03-26 Advanced Bionutrition Corp Composicion de polvo seco estable que comprende microorganismos biologicamente activos y/o materiales bioactivos y metodos de elaboracion.
US20120137574A1 (en) * 2009-06-16 2012-06-07 LiveFuels, Inc. Systems and methods for harvesting algae
BR122015020119B8 (pt) 2010-01-19 2021-05-04 Dsm Ip Assets Bv óleo microbiano, produtos alimentícios para um animal não humano e biomassa isolada
US9504750B2 (en) 2010-01-28 2016-11-29 Advanced Bionutrition Corporation Stabilizing composition for biological materials
CN102725393B (zh) 2010-01-28 2015-12-02 先进生物营养公司 包含生物活性材料的干燥玻璃质组合物
AU2011242843A1 (en) 2010-04-22 2012-09-27 E. I. Du Pont De Nemours And Company Method for obtaining polyunsaturated fatty acid-containing compositions from microbial biomass
ES2758782T3 (es) 2010-06-01 2020-05-06 Dsm Ip Assets Bv Extracción de lípido de células y productos del mismo
US20120040076A1 (en) 2010-08-11 2012-02-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Aquaculture feed compositions
AU2011289384A1 (en) 2010-08-11 2013-01-24 E. I. Du Pont De Nemours And Company A sustainable aquaculture feeding strategy
US20120207912A1 (en) 2010-08-11 2012-08-16 E.I. Du Pont De Nemours And Company Aquaculture meat products
ES2676656T3 (es) 2010-08-13 2018-07-23 Advanced Bionutrition Corp. Composición estabilizante de almacenamiento en seco para materiales biológicos
KR101115357B1 (ko) 2010-09-03 2012-03-06 대상 주식회사 습식 상태의 미세조류로부터 조오일을 추출하는 방법
US8973531B2 (en) * 2010-12-09 2015-03-10 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Automated continuous zooplankton culture system
US9487716B2 (en) 2011-05-06 2016-11-08 LiveFuels, Inc. Sourcing phosphorus and other nutrients from the ocean via ocean thermal energy conversion systems
BR112014001126B1 (pt) 2011-07-21 2022-05-10 Dsm Ip Assets B.V Composição contendo óleo microbiano refinado e forma de dosagem oral
WO2014074772A1 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Heliae Development, Llc Mixotrophic, phototrophic, and heterotrophic combination methods and systems
WO2014074770A2 (en) 2012-11-09 2014-05-15 Heliae Development, Llc Balanced mixotrophy methods
WO2014096024A1 (de) * 2012-12-19 2014-06-26 Lonza Ltd Verfahren zur herstellung einer lipid-reichen zusammensetzung aus mikroorganismen
ES2666895T3 (es) 2013-03-13 2018-05-08 Dsm Nutritional Products Ag Modificación genética de microorganismos
FR3005860B1 (fr) * 2013-05-21 2016-01-22 Oreal Compositions comprenant de l'huile d'ulkenia et leurs utilisations pour ameliorer et/ou renforcer la fonction barriere
FR3007652B1 (fr) * 2013-06-28 2015-07-17 Oreal Composition comprenant de l'acide docosahexaenoique et du pentaerythrityl tetra-di-t-butyl hydroxyhydrocinnamate
RU2537252C1 (ru) * 2013-06-29 2014-12-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук Способ получения докозагексаеновой кислоты
EP2826384A1 (de) 2013-07-16 2015-01-21 Evonik Industries AG Verfahren zur Trocknung von Biomasse
AR098896A1 (es) 2013-12-20 2016-06-22 Dsm Ip Assets Bv Proceso para obtener aceite microbiano a partir de células microbianas
SG11201605066WA (en) 2013-12-20 2016-07-28 Dsm Ip Assets Bv Processes for obtaining microbial oil from microbial cells
MX370871B (es) 2013-12-20 2020-01-08 Dsm Nutritional Products Ag Métodos para extraer aceite de microorganismos.
CN115109804A (zh) 2013-12-20 2022-09-27 玛拉可再生能源公司 从微生物中回收油的方法
PL3082793T3 (pl) 2013-12-20 2020-10-05 Dsm Ip Assets B.V. Sposoby otrzymywania oleju drobnoustrojowego z komórek drobnoustrojowych
ES2953836T3 (es) 2013-12-20 2023-11-16 Dsm Ip Assets Bv Procedimiento para la obtención de aceite microbiano a partir de células microbianas
KR102435269B1 (ko) 2013-12-20 2022-08-22 디에스엠 아이피 어셋츠 비.브이. 미생물 세포로부터의 미생물 오일의 수득 방법
CZ307271B6 (cs) * 2014-08-26 2018-05-09 Vysoká škola chemicko - technologická v Praze Způsob kultivace mořských protistů, zejména mikroorganismů rodu Thraustochytriales, na médiu obsahujícím odpadní solný roztok z demineralizace sladké mléčné syrovátky
WO2016050556A1 (de) 2014-10-02 2016-04-07 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur anzucht von tieren
BR112017006838B1 (pt) 2014-10-02 2021-07-06 Evonik Operations Gmbh Processo para produzir um alimento para animais compreendendo biomassa contendo pufa, alimento para animais e método para criar animais
US11464244B2 (en) 2014-10-02 2022-10-11 Evonik Operations Gmbh Feedstuff of high abrasion resistance and good stability in water, containing PUFAs
EP3200606B1 (de) 2014-10-02 2021-03-31 Evonik Operations GmbH Verfahren zur herstellung eines pufas enthaltenden futtermittels durch extrusion einer pufas enthaltenden biomasse des typs labyrinthulomycetes
AR104042A1 (es) 2015-03-26 2017-06-21 Mara Renewables Corp Producción de alta densidad de biomasa y aceite utilizando glicerol en bruto
HK1254383A1 (zh) 2015-07-13 2019-07-19 MARA Renewables Corporation 增强木糖的微藻代谢
EP3328215B1 (en) 2015-07-29 2021-07-07 Advanced BioNutrition Corp. Stable dry probiotic compositions for special dietary uses
JPWO2017094804A1 (ja) 2015-12-01 2018-09-13 日本水産株式会社 ドコサヘキサエン酸含有油及びその製造方法
US10851395B2 (en) 2016-06-10 2020-12-01 MARA Renewables Corporation Method of making lipids with improved cold flow properties
EP3559206A4 (en) 2016-12-22 2020-12-30 Mara Renewables Corporation PROCESSES FOR THE PRODUCTION OF BIOMASS RICH IN DHA, PALMITIC ACID AND PROTEIN USING A MICRO-ORGANISM EUKARYOTE
JP6938163B2 (ja) * 2017-02-06 2021-09-22 長瀬産業株式会社 脂質組成物、その用途及びその製造方法
NL2019436B1 (en) 2017-08-23 2019-03-07 Newtricious Bv Composition comprising a xantophyll and an omega-3 fatty acid and method of use thereof
EP3865127A4 (en) * 2018-06-21 2023-01-11 Maruha Nichiro Corporation Kidney function maintenance and protection agent, and method for evaluating effect thereof
JP7013416B2 (ja) * 2018-06-21 2022-01-31 マルハニチロ株式会社 腎機能維持及び保護剤、並びに、その効果評価方法
FR3085962B1 (fr) 2018-09-14 2021-06-18 Fermentalg Procede d'extracton d'une huile riche en pufa
CN119453383A (zh) * 2019-02-01 2025-02-18 马斯公司 猫科动物食品组合物
EP4125403A4 (en) 2020-04-03 2025-04-02 Mara Renewables Corporation Microbial oils high in omega-3 fatty acids
JPWO2023140321A1 (hu) * 2022-01-20 2023-07-27

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US539759A (en) * 1895-05-21 Laroy s
US161864A (en) * 1875-04-13 Improvement in methods of killing vermin
US4670285A (en) * 1982-08-06 1987-06-02 The University Of Toronto Innovations Foundation Infant formula
JPH075484B2 (ja) 1985-03-06 1995-01-25 帝人株式会社 血液脳関門通過性医薬品組成物
WO1989000606A1 (en) * 1987-07-20 1989-01-26 Maricultura, Incorporated Microorganism production of omega-3 (n-3) lipids
JP2582622B2 (ja) 1987-10-27 1997-02-19 日東化学工業株式会社 糸状菌による高度不飽和脂肪酸の製造法
US5340742A (en) * 1988-09-07 1994-08-23 Omegatech Inc. Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids
US5130242A (en) * 1988-09-07 1992-07-14 Phycotech, Inc. Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids
US5407957A (en) 1990-02-13 1995-04-18 Martek Corporation Production of docosahexaenoic acid by dinoflagellates
JPH05308978A (ja) 1992-05-11 1993-11-22 Onoda Cement Co Ltd 藻類によるドコサヘキサエン酸の製造方法
US6582941B1 (en) * 1995-04-17 2003-06-24 Japan As Represented By Director-General Of Agency Of Industrial Science And Technology Microorganisms capable of producing highly unsaturated fatty acids and process for producing highly unsaturated fatty acids by using the microorganisms
JPH0930962A (ja) * 1995-07-21 1997-02-04 Nisshin Oil Mills Ltd:The 医療用油脂含有組成物
US6509178B1 (en) 1996-07-23 2003-01-21 Suntory Ltd. Process for preparing docosahexaenoic acid and docosapentaenoic acid with ulkenia

Also Published As

Publication number Publication date
HUP9903703A3 (en) 2001-09-28
SI0935667T1 (sl) 2007-10-31
JP3538418B2 (ja) 2004-06-14
CZ299658B6 (cs) 2008-10-08
EP1785492B1 (en) 2010-05-26
PL331326A1 (en) 1999-07-05
PL193818B1 (pl) 2007-03-30
US6509178B1 (en) 2003-01-21
LT4550B (lt) 1999-10-25
ATE347607T1 (de) 2006-12-15
IL187179A0 (en) 2008-02-09
ES2362476T3 (es) 2011-07-06
CA2261231A1 (en) 1998-01-29
JP3343358B2 (ja) 2002-11-11
ES2281913T3 (es) 2007-10-01
IL128166A0 (en) 1999-11-30
AU723553B2 (en) 2000-08-31
PT1785492E (pt) 2010-07-06
IL128166A (en) 2011-06-30
DE69737063T2 (de) 2007-07-19
ID17466A (id) 1998-01-08
DK0935667T3 (da) 2007-04-10
NO990270L (no) 1999-03-18
AU2979897A (en) 1998-02-10
LT99005A (en) 1999-06-25
EP0935667A1 (en) 1999-08-18
RU2226216C2 (ru) 2004-03-27
US7514244B2 (en) 2009-04-07
US20030161864A1 (en) 2003-08-28
WO1998003671A1 (en) 1998-01-29
LV12329A (lv) 1999-08-20
DE69739894D1 (de) 2010-07-08
CA2261231C (en) 2012-11-27
AU723553C (en) 2005-04-14
LV12329B (lv) 2000-02-20
JP2002345452A (ja) 2002-12-03
EE9900026A (et) 1999-08-16
PT935667E (pt) 2007-02-28
NO20063977L (no) 1999-03-18
EE04063B1 (et) 2003-06-16
NO990270D0 (no) 1999-01-21
JP2000513575A (ja) 2000-10-17
EP0935667B1 (en) 2006-12-06
DE69737063D1 (de) 2007-01-18
CZ300277B6 (cs) 2009-04-08
TR199900130T2 (xx) 1999-04-21
CZ19999A3 (cs) 1999-07-14
ATE469244T1 (de) 2010-06-15
EP1785492A2 (en) 2007-05-16
HUP9903703A2 (hu) 2000-03-28
NO323173B1 (no) 2007-01-15
EP1785492A3 (en) 2007-06-27
BR9710394A (pt) 2000-01-11
DK1785492T3 (da) 2010-07-26
EP2213750A1 (en) 2010-08-04
NO326902B1 (no) 2009-03-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU229062B1 (hu) Eljárás dokozahexaénsav és dokozapentaénsav elõállítására
US6582941B1 (en) Microorganisms capable of producing highly unsaturated fatty acids and process for producing highly unsaturated fatty acids by using the microorganisms
US6958229B2 (en) Method for producing highly unsaturated fatty acids and lipid containing same
JP3985035B2 (ja) （ｎ−６）系ドコサペンタエン酸含有油脂ならびに該油脂の製造方法および用途
CA2362515C (en) Utilization of material containing docosapentaenoic acid
AU759623B2 (en) Process for producing unsaturated fatty acid-containing oils
CN1089561C (zh) 高度不饱和脂肪酸含量高的家禽蛋,其制造方法及其用途
JP2004215668A (ja) ドコサヘキサエン酸およびドコサヘキサエン酸を含む化合物
JP2004147620A (ja) 栄養強化飼料

Legal Events

Date Code Title Description
NF4A Restoration of patent protection
MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees