HU230184B1 - Gombaellenes és/vagy antibakteriális és/vagy antivirális vegyületek új alkalmazása - Google Patents

Description

A találmány a növények patpgén szervezetekkel szembeni fiziológiás válaszainak (például a növényeknek a petogén ágensek elleni védekezési válaszainak) erősítőiként ható (potenciroző) egy vagy több gombae.llenes és/vagy antíbakteriális és/vagy vírusellenes vegyület áj alkalmazására vonatkozik. A növényeknél indukált természetes védekezési mechanizmusok — melynek típus-modeii je a hiperszenzlbiiítási reakció .(MR) egy összetett eseménysorozatból állnak, amely magában foglalta a mikroba vagy egy mikroba eredetű vegyület (eiicitor) növény általi észlelését, az érintett sejtek pusztulását, és különböző kémiai jelzések és messengerek létrehozását. Ezek a kémiai jelzések ss messengerek az aktív védekezéshez kapcsolódó metabolikus változásokat indukálnak: a feniialanit-ammónialiás (PAi) aktiválását, mely enzim az antibiotikus hatásé aromás vegyűletek (ziteaievinsk), a jelző molekulák — úgymint szalicilsav (AS) - vagy a szerkezeti molekulák (lignin) bioszintéziséhez vezető fenilpropános út kulcsenzímo; valamint az oktadekános út és különösen a liporidáz U..0X; enzim — mely képes a sejtbaláiban szerepet játszó hidroperozídók és szabad gyökök vagy a jelző molekulák (úgymint jázmonsav) létrehozására — aktiválását.

Potensiroző hatás alatt a növénynek vagy a sejteknek egy későbbi ingérkaltés: (például egy elieitorral való kezelés) ha&

fására jelentkező, nagymértékben felerősített válaszadás ra vonatkozó szenzibiUtalási aktivitását értjük. A potencirotó tehát olyan vegyűiet (molekula} és/vagy vegyület-eiegy, amely egy (vagy több; másik elicitor molekula alkalmazása esetén, felerősített válaszadásra serkenti a növényt.. Megállapítottuk, hogy maga a potencirotó is rendelkezhet elicitor tulajdonságokkal.

A Bioíogöcsi .Mustracka egyik cikkében g/oí. lááá, Philadelphia, lé, C?SA,* sbs'£r.a.ct bb. íüoűiá) B. Ksesfcner et al. bizonyos elicitoroknak, mint az íeoníkotínsavnak, a staiicilsavnak, vagy egy benzotiadiázol vegyületnek íBTHj egy ellenállást kiváltó incuktorrel való egyidejű alkalmazását közölték. Ez a cikk megemlíti, begy az ilyen alkalmazás 'lehetővé teszi a kitmáznak az uborka általi termelését, vagyis á növény egy védekező válaszát. Ez a dokumentum. 'megemlíti az ironikötinsav potetoirozó hatásét Is az. ofoorkanövény fiziológiai válaszára. Ez a: dokumentum azonban hallgat az ízen lkot insavt öl eltérd más vegyületek potencírozó hatásáról.

Most kimutattuk, hogy bizonyos gombáéilenes és/vagy antibakteriális és/vagy antiviráiis 3 vegyületek lehetővé teszik az A elicitorok egyedüli alkalmazásával nyert válaszok erősítését .

A találmány egy vagy több - egyidejűleg pet eme írodóként nem alkalmazható - A elicitor alkalmazása után kapott növények, patogén szervezetekkel szembeni fiziológiás válaszainak (például a növények védekezési válaszainak) erősítőiként ható

S..O'V® (potencirozó), a foszfonsav vagy annak származékai, valamint annak alkálifém- vagy alká11földfém-sói, acíbenzolar-S-metil, kitozán, és amino-vajsav közül kiválasztott egy vagy több gombaellenes és/vagy antibaktériális és/vagy víruséilenes S vegyulát alkalmazására vonatkozik.

A találmány szerint az izenikotinsavat INA néven is lehet nevezni, míg az amino-vajsavat BASA néven is.

Az aoibenzoiar-S-metil BiorfR BTH vagy CGA 243704 óéven is ismert.

A kit szán Eleza^M néven is ismert.

A 8 potencírozó vegyületet a foszforossavst, annak származékéit, valamint annak alkálifém- vagy alkáli földfém-sóit, aoibenzoiar-S-met11f_f kitszánt és amino-vaj savat tartalmazó iistábéi választjuk ki.

A találmány elsősorban a feszítrossav és/vagy egyik származékának a növények védekezési. válaszai erősítőjeként (potenelrozéként) való áj alkalmazására vonatkozik.

A fesztorossav származékai előnyösen fém foséiltok, amelyek közül a: fösetyi-Al vagy íosetyl-Na választása előnyös.

Az A élleltor vegyületet előnyösen fehérjék, oligoszaoharidok (mint például a trehalőz), políszooharidok (mint például a kitozán), lipioek, giikolípidek, glikoprozeinek, peptidek, növényi anyagokból. és/vagy gombákból származó sejtfalkivonatok, gombák, acibenzolar-S-m.efcil vagy annak valamelyik analógja, élesztő kivonatok, szalicilsav és/vagy egy vagy több észtere, vagy egy vagy több aigakivonat közül választjuk.

~ íí . 07·? /' se:

A ·'*

Előnyösen, ez A el leitor vegyület egy {vagy több) algakivonat {hibrolizátum.), mint például ez itt hivatkozásként szereplő, WO38/47375 számú szabadalmi iratban leirt oligopektinek.

bég előnyösebben, a jelen találmány keretében alkalmazható algák listája a teljesség igénye nélkül az Agrooean vállalat által adott esetben ajánlott algák, úgymint például az Agrimer 110, CAL, Agroionic, Laminaria sp. (lamináris áig-taiis, laminaria aaooharina, laminaria hyperöorea/, Aseophyilum sp. (Asegphylluia nodosum), Eimanthalla sp. (Kimas!thaila elongataj, Ondaria sp. (öhdaria pinna ti fiba) ? Fucus sp. (Fűczs veri colom), Ülve sp., Chondrus sp., Enteremorphe sp.

A találmány elsősorban a foszforossavnak (H3FÖ3) éa a fesetyi-ha-nak valamint a Eion™-nak a dohány védekezési válaszaira — a különböző jellegű «11 ci torok, úgymint fi) a. Phytopótióra megasperma (Ffög) sejtfalából izolált b~glükán típusú oiigoszachar idők, ü) pektin-oligomerek,. iii) a ó-magaspermin, a P. megasperma H.2ö által kiválasztott fehérje alkalmazása után gyakorolt potenciroző hatására (FAL, LOX aktivitások indokálása, AS-termelés) vonatkozik.

A találmány elsősorban a foszt orossavnak fH.₃P-ö₃j és a fosetyl-AI-nak {de az Fleza^-nek is) a biológiai kísérletek során a különböző jellegű eiícitorok — algakivonat, hiéna™. Bion¹/ szalicilsav és/vagy észtere, élesztőkívonat, trehaloz, nem telepedő gomba elölt vagy élő spórái {árpa!isztharmatspórák) — alkalmazásának eredményeképpen kapott válaszokra

Ű,277/SS gyakorolt póténeiroző hatására vonatkozik.

Természetesen a találmány keretébe tartozik, hogy az előzőekben leírt alkalmazás adott esetben kiegészülhet egy ismert gombáé Hetes készítménnyel való klasszá tus gomoaölö kezeléssel, és ez a kezelés az A és/vagy a B készítmények alkalmazásával egyidejűleg vagy azoktól elkülönülve történhet,

A találmány tárgyát képezi a növénykultúrák fztopatogén gombáival és/vagy a baktériumokkal és/vagy a vírusokkal szembeni megelőzési célú eljárás is, azzal, jellemezve, hogy a növények tőid feletti részeit, egy vagy több A komponenst, és B komponenst például egy a találmány szerinti gombaellenes és/vagy antibakteríáiis és/vagy antivirálís készítményben tartalmaző kombináció hatásos és nem titotoxikus mennyiségével kezeljük.

Továbbá a teljes eljárás része lehet egy ismert gombaelienes szerrel végzett kiegészítő kezelés is, és ezt a gombaellenes szart az: A és/vagy a B vegyül etekkel egy időben vagy azottól időben elválasztva alkalmazzak.

A. növényi kultúrák ezen eljárással támadható fitopatogén gombái nevezetesen, a kővetkező csoportokból kerülnek ki:

a. petespdrás gombák csoportja:

a Aőyiccözrcra raj; például Ahyfopbtbora pbaseolí, yzopbtrorz cítrophthora_z Abytzyzhthors capsici, cactoru®., Phyfophthoca paimivora, oinnamoni.

Adyt ophthóra

Ahytophthora

Ah y t oph t hoz: a pa r a s i t i oa,

Ahyfcpph thora megasperma _z Fhy t oph t ó o ra £ ragra r í a e _z

m.erese

Phyzgpht.hora porti,

Fhytopaóbora cryp t og&a,

Fhyíopbcbora: nicotianae, Fbytgpbfhora infestsna (a fourgonyaféXék, nevezetesen a burgonya vagy a paradicsom peronoszpörája);

a U-eronospórafélék családja, nevezetesen különösen a Piassiopara cmmtm s' „ ' p-' 'm 'm-u PXasmppara bal s lene.: {napraforgő per onoszpora) Fseudgperono apóra: sp {nevezetesen a tökfélék perenoszpérá ja {Fsándoperonospora cubensisl és a komié peronoszpöraja {bse adópere no spóra hamuid j, Sremda lset sose ( salátaper onoszpöra) _z Ferono;spora tahaolnae (dohányperoneszpöra), Perctosporg dest tudor (bagyitaperonoszpóra):, Feronospora parasztira (káposztaperonosspőre) Feronoazpőra farmosa (endivíaperonoszpőra: és répaperonos spóra) ..

a tömlösgombák (asccmioetes; csoportja:

az: Alternarí,fej, például Alternazia sodani (a buzgó nyafé lék és nevezetesen a páredzcsőm és a burgonya alternáriás betegsége), a Güzgrnrdra faj, nevezetesen duXgnardia h.idifze.lÍ.Xi (a szőlő feketerothadása) , a Ventorra faj, például Vmtrrie inaagoalis, kenturia pXrina fáz almafáfc vagy körtefák venturiás varasodéaa) , az Öidium faj, példáni a szőlő lisztharmat betegsége fdnoinula necator); a zöldség--kultúrák. lisztharmat '•‘ϊ betegségei, úgymint Srysip.be polygoni (a keresztesvirágzat lisztharmat betegségei; Levei!is.is faurloa, Sryslpbe siohereessrab, Spbeerotheca tbiigene (a tökreiék, a fészkesvírágúak, a paradicsom lísztharmat betegségei; Sryaipne cerrros (répa- és kápcsz- a-.21 aszna reá 1) / rrysipbe pisi (a borsó, a Iucerna iieztbarmaf betegsége) ; Brysiphe polypbaga (a. bab és az uborka ii szobámat betegségei; Llyaipbe utöel! ifers ram (az ernycsvirágtak, nevezetesen a sárgarépa lisztharmat betegsége) ; Spbaerothecs éuzsuli (a komló lisztharmat betegsége; ; a búza és az árpa liszt harmat betegsége (úrysipbe gramnis fonta spécié ériélei és Srysiphe graminls forma spécié bordái), a lépd r ina faj, például bapdr ina deforrars (az őszé barackfa tafrinás levélfodrosodása), a őeptorfa faj, például Septoria nodornm vagy Septoria tríciti (a gabonák szsezőriás foltossága), a úclerctinia faj, például Sclerotinta seleroéirium, a Fseudocercosporolia faj, például a p, herpct.ric.foöl<~ des (gabonafélék szártörése), a Botrytfs dineren fai (szőlő, zöldség- és konyhakerti kultúrák, foorsö, a Pcomopsie vikicola faj (a szőlő exooriőzisa), a foaziőiumos gombák csoportja;

a Puccinia faj, például a Puccinié; leconaita vágy n orvsa strürbrrnis (búzs-vörösrozsda), Puccinid tritícina, áu co ΐ n i a h oz tfei ,, a Ehizoctcnía spp család, például a örizoctoni» soha ni.

Ezzel az eljárással támadható baktériumos és vírusos eredetű betegségek nevezetesen a következők:

tűreIhalás, krcíniz amyiovora;

a csonthéjas gyümölcsfák baktériumos foltossága, ka n t h omo na s campes t rIs;

a körtefák baktériumos virág- és ha jtáseihalása,

Pseudomonaa pyrlngaa;

a rizs és a gabonafélék bakteriőzisa? a rizsen, a zöldség- és a. gabonakultúrákon lévő vírusok'..

A találmány keretében vizsgáit növényi kultúrák előnyösen a gabonafélék {búza, árpa, kukorica, rizs) és a zöldségfélék (bab, ragya, tökfelék, káposzta, burgonya, paradicsom, paprika, spenót, borsó, saláta, zeller, endívia), a gyümölcskultúrák íföid.leper, málna) , a fás kultúrák (alma-, körte-, cseresznyefák, ginzeng, citromfa, kőkuszpáimu, kakaőcserje, diófa, kaucaukfs, olajfa, nyárfa, banánfa), a szőlő, napraforgó, cukorrépa, dohány és a dísznövények.

A következő osztályozás a vizsgált gombákat vagy baktériumokat és a célba vett növényeket egyaránt figyelembe veszi;

szőlő: risztharmat féfecinula necafor), peronoszpőta fPlasmöpuru vitiocia), rothadás fSotrytis eineraai, e x c o r i ő: zás fán om gpa i s vi t i col a 1 é s a f e k e t e - r o t h a dá s

71,277/30 (Go.ignardia bidveilii) , bu r g on y a fél e k: peronősz pő r >?, (Phy t qph t o r a i s bs n s 1 , alté máriás betegség (Aitefnária soiari/ és rothadás (Boíryrrs oinsrea)_z zöldségfélék: peronos zebrák (Peronospora sp., Bremia iacts/cae,. Pseudoperonospora sp), alternáríás betegség (Airernsria sp) , fehérrothaoss (Scisrotrnia; sp; , rothadás fBotxytf s cfn-ereai, a szár vagy a gyökerek rothadása (Bőizootonia spp.) liszt.harmat (őrysrpte sp ,_f Spba ero theos f aliginea) , fatermessiás: varssodás: (Ven torié inaegoaiis_z V, pirims) , bakteriamos betegségek (Brivinia anyióvóra, kantbomonas campestris, .Psendomoras sy r.: nga e) , iíszthermat (Bodospéaera lercotrióba) és non illa (.fon i 1 í a ír rőt i gen e) , citromfélek: varasodé® (Bislnoe íazreítij, meianözls (Bhomopsis eitri) és a Pnytepttnora sp. betegségek, búza; a magok kővetkező betegségeinek leküzdésével kapósolatban: furáriózis (Mi crotíochinm nivele és brsariam roseomj_z gaboreüszog (Tilietia esries, fiiletia costwwrsa vagy Fiiletia indioa) _z szeptőrlás foltosság /Sepfccria noctorissj, búza; a növény föld feietti részei betegségeinek leküzdésével kapcsolatban: szártörés (Ρορπύοοοηοοοροrella őerpotricőoides.) _z torsgomba (Gaeamanno.mvces graminfai, íezáriumos tőbetegség (F. onimortm, F.

277/30 grassínearubj» a gyökérpenész éRhizoctcnís cerealísd, liszt harmat iSrysipne gpsíHinis forma ppecie triilcij _f búzarozsdák (Puccinia aíriiförmis és Pucolnia recondita/ és a szeptőrzés levéllelcosságok (Se;: Lozia triói ti és Septcria^: nodorun) , a búza és az árpa, a baktériumos és a vírusos betegségekkel (például az árpa-törperozsda; szembeni védelem vonatzoza sáfár;, árpa; a magok betegségeinek leküzdésével kapcsolatban: a holmin tospor 1. ázások (Pyreropnera gramzrea, dipoierin, Pyrengplora teres és Couh-río.bolus sativus.) árpa repülőüszög (Üstílagc ouda) éa a fez árié z lsek (Mi erőébenium ni vele és Fuser iám roseuiBj , árpa, a növény föld feletti részel betegségei leküzdésével kapcsolatban: szártörés (Fsandocereosporeils herpozrichoddssi, a helmintosporiőzisok (Pyrenoptora teres és Ceebiiebolus sativusi, lísztharmaf (Frysipbe gramtnis forma spécié hortíeiJ, árpatörperozsda (Puccinié tördeli és a rhynchosporiózis (Füynororporiezi secaizs; ;

burgonya; a gumó betegségeinek leküzdésével kapcsolatban: (nevezetesen a soiani,

Fnema tufeercea, Fdisocfonia solani, éssarlóm seiani és bizonyos vírusos betegségek (Y virusj;

gyapot; a magokból kifejlődő palánták betegségeinek ~ remiim il leküzdésével kaposolatban: a vetemény-pasztulás és a tő üszkösödése /kbizoctönla solani, FrsariaSí exyspozord, a gyökerek fekete rothadása (Tóieiavzopsis hasic ed a/, borsó; a mag betegségeinek leküzdésével kapcsolat. bán: antzaknbzis íAscocryza pisi, éycoapreereiia pinodes; , fuzáriózis (IPsazim oxyrpcrozb , szür kerothadás füot rytis cineres/ és a borsórozsda (Urzsiycas pisid, repce; a. magok betegségeinek leküzdésével kapcsolatban: Phoma lingam és Aiternsria brassicae, rothadás /Botcgftis cine.reai és a fehérpenészes rothadás (Scierotinia soierotiriamj, kukorica; a magok betegségeinek leküzdésével kapcsolatban (shiroprs sp._? Penicillin sp., fricbödetma .sp·.. _# Aapergiilus sp, és Slbberelia fujivaréi), a helmíntospóriumos levélfoltosság (Bipoláris), a fnzáriózis (fPsarirm ozysporam) _z rizs: a szár vagy a gyökerek rothadása fühizoctosia sppd, len; a magok betegségeinek leküzdésével kapcsolatban:

Alté ma ri a 1 i n i col a bán á r: cerco apőri óz í s fMycosphaere11a figi en s i a ) , pázsit: rozsdásodás, lisztharmat, helmintosporiozís, talajbeksgségek (Microdoohlrm nivale, Pytbium sp ., Bhízactonia solani, Solerotinia homeooarpa, , erdöaikotó fák, a vetemény-püsztnlásokkal szembeni küzdelem

71.077/30 vonatkozásában (Fősáriám oxysporun> Ahi retteni a sóiani>.

A következő példákat csupán a találmány szemléltetése céljából adjuk meg, és ezek a példák a találmány körét, semmilyen módon, nem korlátozzák.

A kísérleteket a dohány-sejtkaitárákban a védekezési válaszokban előidézett fiziológiás hatásokon, az enzim- (úgymint PAh és LOX) és a szaiioilsav-termelés mérésével hajtottuk végre, a búza lisztharoat betegsége és a szolé peronoszpóra betegsége alkotta páros esetében pedig a gombaellenes 'védőhatásokon végeztük el a kísérleteket,

A biológiai, gyakorlatban potenci rozéként elsősorban az fossfcyi-Al-t és a foszíbrossavat részesitertek előnyben, de a fosetyi-Ai-nek a dohány-s?ejt kultúrára gyakorolt toxikus hatása miatt a sejtvizsgáiatainkban mi ezt fosetyl-da-val helyettesitettük,.

Az egyszerűsített. mode 11 rendszer (úgymint a küibobőzö jellegi eiicitörökkel kezelt sejtkultúrát; alkalmazása lehetővé teszi a HR tökéletes írni tálasát (kiküszöbölve a teljes növényből eredi térkomponens zavaró hatását) és a korai inrracelluiér1s jelzés-jelenségek elérését. Ebben a találmánybari foglal kozunk a vegyi anyagok által kiváltott védekezési r e a ko i ők p o fce η ci r o z á s á n a k p r ob1éma köréve i.

Az A elioltorokat a fehérjék és a cukrok különböző csoportjai közül választottük ki, de ezek nem ugyanazok a növényeken végzett sejt- es biológiai vizsgálatokban.

Az acibenzolar-S-metil a kiválasztott elleitor referen71.ZVV3V cis-anyag, és emiatt az elvégzett előzetes biológiai munkákban a iisztharmat/büsa párt fogadtuk el.

Egyrészt a B poteneirozó, másrészt az A ellcitor alkalmazása következtében fellépő jelenségek feltárása érdekében az összes előzetes vizsgálat a. potencírozöval és az eiioitorokkal való egymás utáni Illőben szétválasztott) kezelésekre vonatkozik. Ez nem zárja ki azt, hogy a két vegyuiettipust elegyekbe vigyük, vagy hogy a két vegyuiettipust egy időben alkalmazzuk (természetesen nem összekeverve;.

A. különböző elieitorokat (Fhyfitphrhora megasperms H20 sejtfsl-fragmentumok, pektin-oiigomerek, F. megasperma által eiö&llitotr elicitin, a β-megaspermin) vízben készítjük el. áz oldatok pH-ját szükség esetén S, 5 körüli értékre állítjuk be,

á. fosziorossavat, a fosetyl-öa-t, a fösetyl-Ái-t, a szállcilsav-észtert és a kitozánt vízben készítjük el.

Az acibenzoiar-C-m-tilf a dohánysejfékén végzett vizsgálatokhoz oMSO-fcan állítjuk, elő, a növényeken végzett vizsgálatok során pedig a kereskedelmi forgalomban kapható Blon^w< formájában a 1 ka Ima z z.u.k..

élettani, hatások,

1) A biokémiai aatkaxak kiválasztása eksbáay sejtek»©..

♦ a BAL· (feniíalanín-ammőnium-liáz) - a feniipropános üt és különösen a növények védekezési reakcióiban szerepet játszó lignitlkáciő (elfásodás) kulesenzime — aktivitásának mérése (különösen az egyszikű növényeknél).

0.-07/30 * a .szaliciisav mérése: jeizőmölekula.

«· a 10X (lipoxigenáz) - a jázmonsav (egy másik jelzőmolekula) szintértsének kuicsenzlme - aktivitásának mérése

A kísérletekhez a Washington State University-rői (Pullman, USA) származó Wiootiara taőacrm 3i (Srigth Yeiioc;

sej tszuszpenziókat használtuk. A szuszpenziókat sötétben, 24 ’^:''C hőmérsékleten, kever tét és (Izö zord. /perc) mellett tenyésztettük, és minden 7. napon eloltottak, lö ml kultúra 70 vő. friss táptalajba való átvitelével.

A táptalaj összetétele 1 literre vonatkoztatva:

Murashtge és Skoog sók (Duchefs) 4,3 g g

ítiamn)

Incéitől

Opááj

A pú értékét 5,8-ra állítják be.

mg 100 mg

1, 4 7 mM

A sejteket á tolta s után S nappal (az expo.ne.no tál is növekedési fázis vége) előkezelj ük, és a 6. napon ellettéljuk. Az előkezelés előtt 2 órával 10 ml sejt-szaszpenziöt teszünk 25 mi térfogatú erienmeyer lombikokba. A feni latanin-ammóniumlláz (PÁL) és a lipoxigenáx (LOM) aktivitásainak méréséhez valamint a szaliciisav (ŐA) meghatározásához a sejteket a kívánt időpontban áafhman 3M szűrőpapíron való szűréssel elválasztjuk, folyékony nitrogénben lefagyasztjuk, és a vizsgálatig 3 0 ''‘C hőmérsékleten tároljuk.

tr. erőse

3) FeaxlalaBin-'aaffla6nitW“'liáiJK (PÁL) aktivitás.

ö, 5 g sejtmintát 0,1b pH-8,5 értékű borát-pufserben aktív szén és kvarc jelenlétében darálunk. Az őrlési arány 1:5 (tömeg/térfogat;. Centrifugálsz után ICO mi sejtextrakfumot 1 órán át. 37 1/ hőmérsékleten 2ÖQ ml 0,1 Μ pH-8,8 értékű borát-puffer és ICO ml őseztérfogatú 0,1 M pH—3, δ borát- és 500 ab L-fenilalanir: puff ere légy (jelzett és hideg puff érj jelenlétében inkufoálunk. A végső oldat 513 OCC cpm/ml specifikus aktiult á s saI rendelkenik.

A reakciót néhány csepp 4,5 b IbSCn hozzáadásával leállltjuk . Ezután 2. ml vizet adunk hozzá. A reá kelőt érméké két 2 ml térfogatú 1:1 térfogatarányú éter/ci.klohszán elegy hozzáadásával extraháljuk, bével a f eni i-aianin néz; oldódik ebben az elegyben, a reakció számlálását „mui,ti-purpose^w szcxntllláoiős folyadék jelenlétében, 1 ml térfogatén végezzük.

4) LipmTgenáz <LÖX) aktivitás „

2:50 mg sejtmintát 0,5 ml extrakciós puffezben kvarc jelenlét éb e n meg őr1un k.

Az extrakciós puffét összetétele:

0,1 b ρΗΜΐ,δ trés puffér

Iá (mjvj kW

0,04% Ha₂SA?₅

0,5 mb PbOF mb ZSTA

0,17 (v/vj Triton

Az őrleményt 15 percig 4 °C hőmérsékleten 13 ÖÖO zord./perc

VZ,2~OVBö

4* sebességgel centrifugáljuk.. A sejtkívonathoz 2,S“ ml 0,1 E pu^:==^:6,ű Trls puffért, majd 3ö pl 10 mh llnoiénsavat adunk. Keverés után 234 nm-en követjük et optikai sűrűség alakulását,

5) A ssslicilsav (SA) ©xfcrakciója és tartalmi ,

A sejtmintákat lo 5 g) vagy dohányleveled folyékony nitrogénben megörlünk, majd az Őrless 0,8 ml 90% metanolban folytatjuk. Az eiegyhez ^;í'C-nei jelzett ismert mennyiségű szalicilsav fi nCi, fa mCi/mol, Sígmaj adunk, az endogén szaiicilsav kinyerési arányának megbecsüléséhez. A jelzett szaiicilsav hozzáadott mennyisége kisebb a vizsgálat kimutatási küszöbértékénél. A metanolos eztraktúrnőket erőteljesen kevertjük, és 20 percen át 13 Ö0Ü főrá./perc sebességgel centrifugáljuk. A felüiűszö részt kinyerjük, és az üledéket iöé% metanollal másodszor is extraháljuk. Centrifugálás után a két feiniúszőt egyesi tjük. Ezután a mintákat váfcuumbepárlóban szárazra pároljuk.. A száraz extraktumokat 0,3 mi 8Q Ü hőmérsékletű vízbe vesszük fel.

A minták pE-ját 2E KCI hozzáadásával prűd értékre állítjuk be, majd 1 órán ár 80 “C hőmérsékleten melegítjük. Ezután a mintákat 2 térfogat éterrel kétszer egymás után extraháljuk. Extrahéiás után az éteres fázisokat egyesítjük, és az étert n1tro gén áram a1 a11 elpárolog!afguk. A száraz ®rabéköt kŐrü1belül 150 pl outferoidatban ·20 re p;f==5 nátrium-ecetét és acetonitr.il 9:1 térfogatarányú elegyej oldjuk. A maradék radioaktivitás méréséhez a kapott oldatból kiveszünk 20 ml-fc, és 3 ml szorntiliációs folyadékot (áeady Gél, Beckmann) adunk hozzá. A

ZZ. Zt/3® maradék radioaktivitás mérése lehetővé teszi a szalicilsav kinyerési százalékának a kiszámítását. A meghatározott összes szarrollsav-tartaimák megfelelnek a szabad formában valamint a konjugáit tornában jelenlévő arai lei Isav-tartaimak Összegének, mivel a szaircilsav felszabadul a hidrolízis során.

Kvanfcifcafclv asaliris PPAC fcec&aijfeával

Pufieroidatcan oldott 50 μί mintát 971 nátríum-acetáfbéi (20 mM, pH-ö.i és 31 aeetonitriibői állá, 1 ml/perc áramlási sebességű puffereleggyel kiegyensúlyozott, inverz fázisú ^1%C oszlopra (Nova pák katers, 3,9 x 150 mm) injektálunk, a. futtatás Waters HPLC rendszeren, ízokratikus rendszerben 10 percre van programozva, Ezután az aeetonitri1-arány 2 perc alatt főára növekszik, és ez az arány 10 percen át fennmarad, lehetővé téve az oszlop átmosását. Majd az oszlopot '5 percen át a kiindulási eléggyel átőblitve, ismét egyensúlyi állapotba hozzuk egy újabb injektálás előtt. A szalicilsav mennyiségét a finorimetriás módszerével határozzuk meg (Őgserssrés ^::: 315 nm, áoío.fiso.íi — 403 nm) . A szaiiclisav-molekulának megfelelő csúcs azonosítása a retenoiöá idő és a referencia szalícilsavboz (30 ng) tartozó retenclős idő összehasonlításával történik. A beiajektáit szallcilsev-mennyíségeket a szellői (.savnak megfelelő csúcsok területe és a foeinjektált standard molekula csúcsa alatti terület Összehasonló sásával számítjuk ki. Majd a minták szaticilsav tartalmát a kinyerési arány figyelembevételével határozzuk meg.

v.r: v

δ)Kezelési kinetika.

A potencirozóval való előkezelés minden esetben 18 órával az ai.icitorra'i való kezelés előtt t ^-erok, A fiziológiás hatások vizsgálatához a mintavételeket az eiieitálás után 4 órával, 12 órával vagy 24 órával végezzük, Az egyedül potencirozásnak vagy egyedül eiicitálásnak megfelelő ellenőrző minták szisztématikásán szerepeinek minden mintavételnél.

Breetoéisyek: a leírás végen található 1-9., számú ábrákra hivatkozunk, mely ábrákhoz a következő magyarázatokat adjuk:

1. ábra

A. dohány sejt-kultúrát tt Pún-val való kondicionálásának hatása a kAh-aktlvitás indukálására, izolált oiigoszaeharídos Pmg eiioitorrai való elicitálás után,

A se átkai túrákat 18 órán át 5 mM kabin-val kondicionáltuk (előkezelési és 10 pg/mi β-giükán típusú öligoszacharidos eiioitorrai indukáltuk. Maga az eiicitáláa a PAL-aktivitás átmeneti növekedését idézi elő, amely az eiioitor alkalmazása után δ órával visszaáll az eredeti szintjére, A HACn-vai (5 méh való előkezelés egyértelműen felerősíti az elleitorra adott választ (elioitálhatőságí és megnöveli a jelenség tartósságát ,

2. ábra

A Pún hatása, a dohány-sejtkultúrák lipoxigenáz (PGX; aktivitására izolált oiigoszacharidös: Pmg eiícitorral való indakálás után,

A POX-aktivitást a 10 pg/ml koncentrációjú ú-glükán tipu7i. tv? » lő sű oligöszachatidoo elicitorral való eiicitáiás: után 21 órával mértük, A sejtek fhPöyvnl való előkezelésének hatása a sejtek a Hol tárhat óság ára jelentős, mert körülbelül 4-szeres 1CXaktivítás indukálást test lehetővé a megfelelő összehasonlító mentához képest. A LCX-ektlvitás kismértékű indukáló hatása észlelhető 39 órával (IS óra előkezelés s 31 óra) a IjPCy egyedüli alkalmazása után.

3, ábra

A dohány-sejt kultúrák í-pPCu-vsl való kondicionálásának hat á s a a PÁL-a k11vi tá s 1n du ká1á sára, pe kt í n-ο11geme r e kke i va lő eiicitáiás után,

A sejtkultúrákat lé órán át 5 mX H₃.BO3-vai kondicionál tok és 2ö pg/ml pekt fr~oKgomerekkel elicizáitck. Az elicitorral való kezelés a PÁL-aktivitás átmeneti növekedését okozza, amely az eiicitáiás: után 8 órával visszaáll az eredeti szintjére., A sejtek ibPÖg-val való: kondicionálása az eiicitáiás után a PAL~aktivitás jelentős növekedését eredményezi, amely a kísérlet. teljes időtartama alatt magas szinten marad, A mPCy egyedüli alkalmazásé után a PAL-aktivitásra vonatkozóan semmilyen jelentős indukciós hatás nem mutatható ki,

4, ábra

Szaiíoiisav-akkumuiáoiö: íLPCa-val előkezelt vagy kezeletlen, és pektin-oligomerekkei elicitelt dohánysejt-keltűrákban.

A 20 yg/ml pektin-ollgomerekkel velő eiicitáiás hatására az szalicilsav csak átmenetileg és nagyon kis mértékben dúsul fel. A sejtek lé órával az eiicitáiás előtt történő, HaPO^-val zr.s^:~7VsSö való kondicionálása s szaiícllsav-szintézis mértékének jelentős növekedését eredményezi a nem. kondicionált sejtekhez képest.

5. ábra

A dohányáé jt-kultnrák mPCg-val és fosét yi-Ns -mai való kondicionálásának hatása a kAL-aktivitás indukáiasára, pektin~ oligomerekkel való el.leitálás után.

A sejt kultúrákat 18 órán át 5 md H3.FO3.~val vagy fosetylha-mal kondicionáltuk ás 20 pg/ml pektin-oligomerekkei «licitáltuk. A sejtek elieitorral való kezelése a PAr-aktivítás átmeneti növekedését okozza, amely az ©licitálás után ti órával visszaáll az eredeti szintjére. A sejtek íbPöa-vsl való kondicionálása az elicitálás után a PAL-aktiv.itás növekedését eredményezi, amely nagyobb, mint a nem kondicionált sejtekben észlelt aktivitás. A fosetyl-ba az elicitálás után 11 órával ítartóssági hatás) magas szinten tartja a PAL-aktívitást. A fosstyi-ba. egyedüli alkalmazása után a PAL-aktivításra vonatkozóan. semmilyen jelentős indukciós hatás nem mutatható ki..

6. ábra

A öohánysej t~kultúrák ígACn-val való kondicionálásának hatása a PA.L-aktivltás indukálására, 2 md k-megasoerminnei való elicitálás után.

A sejtkultúrákat 13 órán át 5 md H_skCh~vai kondicionáltuk és 2 nd β-megasperminnel «licitáltuk. Egyedül az elieitorral való kezelés a PAL-aktivítás növekedését eredményezi, amely az elicitálás után 3 órával stabilizálódik. A H-_?P0.í-vai előkezelt sejtek PÁL-aktivitása az elicitálás után lineárisan növekszik,

és eléri a nem kondicionált sejtekben észlelt szint 4-szeresét.

7, ábra

A H3PO3 hatása a dohányse j (.-kait órák lipoxigenáz-aktivitására (LOX) , 2 níf ü-megasperminnel való indukálás után .

A hOX-aktivitást 12 órával a 2 nd β-megaspermínnel való eliei hálás után mértük. A sejtek BiPOyval való előkezelésének (18 órai hatása a sejtek elieitál.hatóságára nagyon jelentős, mert a megfelelő összehasonlító mintához -h?.„..n. körülbelül 28szoros bOX-aktivitás indukálását teszi, lehetővé, b LOX-aktivitás semmiféle Indukáló hatása nem észlelhető: 30 órával.

(18 óra előkezelés a 12 órai! a J-hlCh egyedüli alkalmazása után.

8. ábra

Szalieilssv-akkamoláciő RPCa-val siókezeit vagy kezeletlen, és 0 nél β-megas permi nnel elieitált dohányse jt-kultúrákban.

A szalicilsav átmenetileg feldúsul az 5 nM f-megasperminnel való elioitálás következtében.. A sejtek 18 étával az eiieitálás előtt történő, R?Q-:~val való kondicionálása a sza1 í cl 1 s a v - s z i n t é z i s mé r te kének j ele n t ős n öv e k e. d é s ét. e re ómén y e z í a nem kondicionált sejtekhez képest, és ezt a hatást tartóssá teszi.

b dohánysej: t-kui t érák lll-el. és f osetyl-ha-mal való kondicionálásának hatása a PbL-aktívitás indukál, á sóra, 2 nM k-megasperminnel való eliei.tálás után.

A sejtkuitúrákat 18 órán át 5 W K₃PCn-raI vagy fosetylha-vai kondicionáltuk, és 2 nM 8-meg a sperma, nnel elicitáltük.

ó.t'nmtí

Az elíeltálás egyedüli alkalmazása a PAL-aktívitás növekedését eredményezi, ami az éliclbor alkalmazása arán 8 órával stabilizálcoik, A HHCn-mal vagy fcsetyl~ha~mai előkezelt sejtek PÁL—aktivitása mindig nagyobb, mint a nem kondicionált sejtekben észlelt aktivitás.

Vegköwt&ez^fces: Ezek a kísérletek bizonyítják g HaPöe-nak vagy a fosetyl-ba-nak a dohány védekezési válaszadásaira gyakorolt potenoirozó hatását. A H;;PCh és a fosetyi-Ea önmagában semmilyen hatással sincs a PAL-aktivitásra, a LOX-aktívitásra vagy a szalioiisev-színtézisre. A kondicionálás érzékennyé teszi a sejtküitűhákat az eiicitorok kis koncentrációira való válaszadásra, vagy növeli a sejtek élicltorral szembeni érzékenységét.

1> Liszthazmab /búsa /Erysiphe graminis £, sp. trióit!):

A Victo fajtájú bűzamagokat fforgaimazza a Pioneer genetikai vállalat): lü *C hőmíérsékletű hidegszobákban, 9Ö% relatív páratartalom mellett nevelünk, és 12 órás fányperiődusoknak tesszük ki.

A körülbelül három hetes növényeket. ?2 jól fejlett levéllel rendelkező növekedési stádium) a kezelés előtt 1 napig 20 “C. hőmérsékletű üveg házban kondicionáljuk és lőcsöljük.

A vegyületeket vagy egymás után szakaszosan vagy keverékben alkalmazzuk,

A különböző: készítményekből vízben való oldással hakráíz.znrs&

romként 250 liter permetező folyadéknak megfelelő térfogatú hl g s..tu s zpe n ti 6 kát kés z 11 ün k.

Szakaszos kezelés esetén a potenoírozőt 24 órával vagy

4.8 óiaval az elicitor előtt alkalmazzuk.

A fertőzés 2, 4 vagy § nappal az elicitorral való kezelés után történik. A megfertőzést úgy végezzük, hogy a növényeket az előző héten megfertőzött, és porzó fconlőium réteggel (a szabad vizet nem térő obligát patogén) rendelkező húaanövényekke1 érintkezzenjük (’ ’ rs g1egyez zük”}.

E fcontaminálaé után a búzanővénveket 7 napon át 20 ő hőmérsékletű és 351 relatív páratartalmú légtérben ínkubáljck.

2) Λ sss©!© peronoszpóra foefeagséga <Alásmopara viilcoiző

Chardonnsy fajtájú szölődugványokaf (Vitis vinlfera) konténerekben, üvegházban nevelünk. Amikor a növények 2 hőnapos kort érnek el (4-5 levelű állapot) , akkor a kezelés előtt: I hétre 20 °C hőmérsékletű üvegnázfcan aiulöntözésben tar'*' ',.k, a stressz-hatások elkerülése érdekében.

A vegyületeket vagy egymás után szakaszosan vagy keverékbe n a 1 ka Ima z zu fc.

A különböző készítményekből vízben való oldással hektáronként 500 liter permetezd folyadéknak megfelelő térfogatú híg szuszpenziókat készítünk.

Szakaszos kezelés esetén a pctenoírozőt 6 nappal az elicitor előtt alkalmazzuk.

A fertőzés 6 nappal az elicitorral való kezelés áfán történik. A megfertőzést a 7 nappal korábban megfertőzött spórás

t.,2W© levelekből nyert Plssmopsra vitiools spórák vizes szuszpenziőjavai történő· permetezéssel végezzük. Ezekből a spórákból 100 000 egység/cmu koneentráoiőjé szuszpenziót készítünk.

Ezután a kontaminált növényeket 7 napon át 18 °C - 20 t közötti hőmérsékletű, köd-típusú nedves atmoszférában Ínkubáljuk,

A leolvasást 7 nappal a koszáéinslás után végezzük el, a nem kezelt, de fertőzött összehasonlító növényekkel való öszszehasonlitásban. Vizuálisan megvizsgáljuk az alsó levelük alatt a gomba spőrásodásának megfelelő fehéres pelyhe! mutató

1evele k felületét.

A. .spórával borított Ievélfeiület-aránybői az Abbott-képlet segítségévei kiszámít juk a kezeléshez alkalmazott készítmény vagy készítmények hatásosságát, növényenként 3 levélen és vizsgálati faktoronként három növényen.

Ezt kővetően az esetleges szinergiát az 1. E. iő.mpei, ?.

H. Sohuidt és D. hars·ont, Eroc. NEW1C, 16, 48-53 (1962), által definiált módszer alkalmazásával igazoltuk, az alábbi (Colhyképletnek is nevezett) összefüggés alkalmazásával:

E - X a Y - XY/100, amely képlétben:

E jelentése a gomba növekedésének várt inhibíoíős. százaléka, két meghatározott (a Illetve b) dózisé A és B gombáéi lenes készítmény elegyének alkalmazásának hatására;

X jelentése az a dózisban alkalmazott A gombaeilen.es és/vagy antibaktsrlális és/vagy antivirálls vegyület hatására tapasztalt inhíbiciős százalék, i .rozsa

Y jelentése a b dózisban alkalmazott B gorsbaellenes és/vagy <rt á ak⁺1 ϊ - él· s rs/YöOi mmuralis veovOct -atásjra tapasztalt i.nhifoíciós százalék.

Árúkor az elegy hatására tapasztalt inhibíclös százalék nagyobb, mint S, akkor szinergiáról beszélünk.

a .leírás «égén található 10-20. ábrákra hivatkozunk, amelyekhez a következő magyaré zabokat fűzzük:

10. ábra

A büzspalánta 1 kg/ha mennyiségű fosetyI~Al~lsI (Aiiette W üöi) történő kondicionálásának hatása a lisztharmat kifejlődésére, 1% szénhidrát típusú elicitort és 0,1% ÁSS nedvesitőszer adalékot tartalmazc perwetlév-el végzett indukálás után.

A vizsgálat körülményei között a Coiby-anaiizis szineralkus hatást mutat ki a iosetyi-AI és az RS6 adalékot tartalma zo őiexa^7X közöst, a bú.zaiísztharmattal {Erysiphe gratanis f. sp. triói t i) szemben.

	fosstyl~Al (1 kg/ha) X 1%: Eiexa- á ö, 1% R56
észlelt hatékonyság %	72
elméleti Colby	5C,3
szinergia	e

11> ábra

Az 1 kg/ha mennyiségben alkalmazott fosétyl-AI vagy az 1 kg/ha vagy 2 kg/ha mennyiségben alkalmazóét Η_?ΡΗΟ·₅ és a felhasznált permetlében 0,1% R56 3oa-ckzt :3,-t>e.ó ?,1\

í. a?'?/ss

Elexs®* eiíeitor között fellépő^ színergífcus hatás a búza1. is 21 ha r ma xt a. 1 s z emb e n,

Ebben a vizsgálatban a azlmotózó kát a három cserépben elosztott 24 bűzapalánta első, második és harmadik levőién olvastuk le; a pctencírozó (fosetyl-AI vagy í-bPPCh) alkalmazása és a 0,1% Röö adalékot tartalmazó Ö,l% Elexa™ eiisitor alkalmazása között 11 éra telt el.

	fosatyi-Al {1 kg/hal X 1% Eieza™ a 1,1% B6	&«Ö·?· (I kg/ha; X Ö,il Élez a'™ e 0,11 116	%RHCy (2 kg/ha) X 0, 11 Elexa??: 4 0,1% E56
észlelt hatékonyság %	21	öl	37
e1®é1 ex 1 Colby	Ír, 7	20,7	20,7
szinergia	4	'f··	4

12, ábra

Az 1 kg/ha vagy 2 kg/ha közötti mennyiségben alkalmazott fosetyl-AI pőrénélrozó hatása a szölö-peronoszpórával szemben, az alkalmazott permetlében. 0,1% köb adalékot tartalmazó 0, !i Elexa³* készítménnyel való elbeitálas után.

Két egymástól független esetben a fosetyi-Ál X 0,1% Elexa®⁸ (4 0,1% Roö) kombinációi Coiby szerinti szinergiáját tapasztaljuk.

	; fosetyl-AI (1kg/ha) X 0,1% Elexa™ 4- 0,1% R56 :................11, vizsgálati	fosetyl-AI (2 kg/ha) X ö,l% Slexa™ 4 0,1% R56 (2. vizsgálat)
észlelt hatékonyság %	91	56
elméleti Coiby	57,4	0
szinergia	’t	4

13, ábra

A fosetyl--Ai (fosl, 1 kg./ha) hatása a búza lisztharmattal szembeni védelmében, 1 g/1 e_es2tókivcr,/ íyeast IE) tipusű eiicitorrai való redukálás után.

Colby .szerinti szinergikus hatást mutattunk ki a fosetyiAi és az élesgtökivonat által alkotott asszociáció esetében, bút sírsz t ha r ma t tál, s zenben.

	fosetyl-Al (1 kg/ha) X 1 g 1 élesztő-; kivonat íysasz extract Étied*;
észlelt hatékonyság %	00
elméleti Colby	38,4
színe r g ia	y.

14. ábra

3'uzanövány fosety1-ái-lal vagy foszfoxossavval (mkbCn) veié kondicionálásának hatása a búza lisztharmat betegségére, az: árpa-iisztharmetért felelős nem telepedd gomba /dtcysiohe grsmlnts f. sp. bordér) elölt vagy élő spórát típusú elioi tör r al val ó: ettcitálás után.

	fosetyl-Al (1 kg/ha) X Erysipbo eraminis f. sp.hordel	ibPHO? (1 kg/ha) X Erysipbe grsrdnzs f.sp,hordoz
és2lelt házékonyaág %	?i	78
elméleti Colby	43	4 0, 5
szinergia	····	'T··

Colby szerinti szinergikus hatást mutattunk ki abban a két esetben, amelyben a potencirozd a fosetyi-AI vagy a H₂EHO₃ n,nt®8 volt, az elicitor. pedig egy s búzán nem telepedő gomba spóráiból állt.

15. ábra

Az 1 kg/ba mennyiségben alkalmazott tAPHO? hatása a búzanövények lisztharmattat szembeni védelmére, 15 g/1 oiigoszaehariő típusú ~ úgymint a trenaioz ikrolabeó ···· elicltorral való indukálás után,

	HjPKCp fi tg/ha; X 15 g/i trahalöz (Prólából
/ jé s z 1 e 11 ha tókorr ys ág %	1®
jelréleti Cclby	ú
js zinergia	+

Cö.lby szerinti szinerglkus hatást észlelünk a búzalisztharmattal szemben, ha á foszfonssv potencirozo hatását és a trehalős el lei tor hatását egyesítjük,.

16. ábra

A 2 kg/ba mennyiségben alkalmazott fosetyl-Al. hatása a szőlö-peronsszpórára, egy oligoszaeharid típusú — úgymint a 15 g/I mennyiségben alkalmatett fcréhaléz tlzolaboi el lei torral való^: inán kai ás után.

	fosetyl-Al (2 kg/ha) X 15 g/1 trehalóz (Prclabo)
észlelt hatékonyság i	11:
elméleti Cclby	..................................... ©
szinergia	A

Cclby szerinti százeralkus hatást észlelünk a szóló peronoszpóra betegségével szemben, ha a fosetyl-Al pczencirozó .ón/se hatását és a i z< al, -t.tusa^T e?y?.-.; _uk.

BUÉB

Az '1 kg/ha vagy 2 kg/ha mennyiségben alkalmazott fosetyl-AI vagy ah 1 kg/ha. vagy 2 kg/ha mennyiségben alkalmazott HzPRCb hatása a búzaiisztharmatra, a 48 órával a petencl.rozé után. és 4 nappal a kontamináció, előtt 1 g/i konoentráeióban alkalmazott szalicíLsawal való indukálás után.

	fosétyl-A1 (1 kg/ha;· X szalicilsav-észtér ii g/11	foset.yl-Al (2 kg/ha) X í 7 5 0 X “· sav-észter n g/il	WAncy (1 kg/ha) X szalicilsav-észtér (1 g/1)	ikk«b3 /2 kg/ha) X szallelitevés z tér Ο ő/O:
észlelt hatékonyság /	47	53	57	.53
elméleti Coiby	25,2	37,k		25,2
szinergia	'i'		a	♦

A fosetyl-AI. vagy a színérőlkusan erősíti a száll.cilsav elieitor hatását.

13.ábra

Az 1 kg/ha mennyiségben alkalmazott HAPHIA vagy az 1 kg/ha. vagy 2 kg/ha mennyiségben alkalmazott fosetyl-AI hatása a buza-1isatharmatra, a 43 órával a potencírozó után és 48 órával vagy & nappal, vagy 5 nappal: a kent ami.ráció előtt 3-0 g/ha dózisban alkalmazott Sión™ (ΕΤΗ) típusú eliei torral való índufcáíás után.

7i .ezivsí)

	1. v i z s ~ gálát	2. vizsgálat
kombináció	tstaöj 11 kg/haj X 3'Ϊ.Ή	fosetyl-AI lí kg/haí X Bib	fosetyl-AI \2 kg/ha) X BTH	Bsbüó® /1 kg/ha j X ...............BTH...............	iónt (2 kg/haj X BTH
ielic./kostám, közti ÍŐö	1 nap	4 3 óra	5 nap	48 óra	5 nap	48 óra	5 nap	45 óra
észlelt hatékonyság %	63	ro	73	7 9	84	71	84:	93
elméleti Colby	oá	23	53, 4	52,4	53, 4	36, 1	35, 7	36,5
szinergia	’l·	e		-r	s		t	e

Colby szerinti szinergiát észlelünk a búzalisztharmattál szemben azon különböző kombinációk esetében, ahol a fosetylAl vagy a HsBHO® alkalmazását a Báoo™~mel kapcsoljak össze, í^-ÍSSi

Egy Eion--zipusü (10 g/ha mennyiségben alkalmazott ETA) elioitor alkalmazásával összekapcsolt 2 kg/ha mennyiségben alkalma zott fosetyi-Ai hatása a szőlő peronosspóra betegségére.

	fosetyl-Al (2 kq/ha) X 3ő g/ha Bion/K
észlelt hatékonyság 5	7Ú
e íme .1 e t i Col by	34
szinergia	-r

Golby szerinti szinergíkas hatást őszi elünk a szőlő peronos zpőra. betegségével szemben, ha a fosetyl-Al potencirozó hatását és a Bion™ elioitor hatását egyesítjük.

ZininBe

20, ábra

Egy Bion™ típusú (30 g/he mennyiségben alkalmazott B1H; elíoltorral vagy 1 g/I szal.ibilsav-észterrel történő beteléssel összekapcsolt, és 0,14 R56 adalékot tartalmazó 0,13 Eiaza^ (itt potencírozöí permetlé alkalmazásának hatása a búza lisztharmat betegségére.

Az 1. vizsgálatban 4 nap választja el az élicltorrá1 való kezelést és a kontaminációt, míg a 2, vizsgálatban az elieitor alkalmazása és a kontamináció közötti idő vagy 48 óra vagy 5 nap. Mindkét esetben 48 óra választja el egymáscöi a potencírozöval illetve az elícitorral végzett kezeléseket.

kombináció	0, 11 EIeza;>' X 3TH	0,í% Eiaxa®* X szál,sav észter	0,1% Elexa™ X BTH
ellő.ikontam. közti idő	4 nap (1. vlzsg.·	4 nap (1. viz . s g b!	48 ó (2a. vizsg.)	5 nap (2b.vizsg,)i
észlelt hatékonyság %	53	42	64	8 9
elméleti Coiby	41, 8	2 4, 5	42, 5	54,4
szinergia	a	•4*··	......τ...........	..................é....................

Minden esetben Coiby szerinti szinergikus hatást tapasztalunk. Az Eleza™ minden esetben erősiti a STB vagy a szelicilsav ©licitáló válaszát..

A búzán és a szőlőn végzett biológiai vizsgálatok során Coiby szerinti szinergikus hatásokat mutattunk ki a fosétyi-Al és származékai valamint a különböző elícitor-csoportok — úgymint poliszacharibok (Eieza™), egyszerű .cukrok (trehalóz) , s tál i tilsa v és/vagy észterei, Bion®’ (BToj vagy nem. telepedő

gombaspórák í.őrys rphs graminis hordoz) - között, Ugyanakkor sz energikus hatásokat igazoltunk az Blexa.-¹ és az olyan elícltorok, mint a Bion'®⁵ vagy szailcilsav és/vagy észterei között, .

Ezek a példák kregészitik és igazolják a dohányáéjteken kimutatott fiziológiás hatásokat. A dohány esetében kimutattok a Bion®^5, (BTH) általi poteneírozó hatást is egy pektin-oligomerre! vaio eiicitáiás során (lásd 21, ábra:.

Sár^&áiaaye (eacámxs. meló, xocheb variáns) lis2áfeaxma.t. ferysip&e cxc&oxraü&nxm^ betegségén levélkéreléssel végzett, szábasiföidi vizsgáiét.

A fosetyi-- aiyakivgnat asszociáció alkalmazása a gombatámadás széleskörű, szignifikáns csökkenését eredményezi az azonos dózisokban önmagukban alkalmazott készítményekhez képest,. amint ezt az alábbi táblázatok eredményei is mutatják.

Gombsciészerként a f ösetyi-Al-t. (WG, 1,25 kg/ha azaz lööb g hatöanyag/ha dózis; alkalmazzuk, az algakivonat (LC oldat, 1 1/ha. mennyiségben alkalmazva) pedig az Agrimer vállalat Agrimer 540 típusé készítménye.

Az összes készítményt 1000 g/ha dózisban alkalmazzuk, és két kezelés (TI és '.2, amelyek között 7 nap időintervallum za·' .ő ... 5 nyal 'ξοη tai t ....... ··. a betegség által megtámadott növények százalékát.

7:1.:2 77VSU

	Megtámadott % Ti + 15 nap időpontban	Megtámadnia % T2 + 15 nap időpontban
Kezeletlen összehasonlító minta	31, 7	S 5, u
fosetyi-Ai	30,0	30,d
Agrimer 520	SS, 0	30,7
fosetyl-AI + Agrimer Sió	48,3	48,3

Bűxa (tritiesam .aestiwíf wiater variáns) lissthax^afc.

fZiysip&e gxáísims) betegségén levélkezeléwel végx&fct sxabadföldi vizsgálat.

A fosetyi-Al t algakivonat asszociáció alkalmazása. a gombatámadás szignifikáns csökkenését eredményezi az azonos dózisokban önmagukban alkalmazott készítményekhez képest, amint ezt. az alábbi táblázatok eredményei is mutatják.

Gombáélőszérként a fosetyl-AIt (WG, 1,25 kg/ha azaz ÍÖOő g hatóanyag/ba dózisban) alkalmazzuk, az algakivonaf (LG oldat, Ί 1/ha mennyiségben alkalmazva) pedig az Agrimer vállalat borimén 540- típusú készítménye..

Az összes készítményt löOO g/ha dózisban alkalmazzuk, és meghatározzuk a betegség által megtámadott növény-százalékot (elpusztult levelek %-os aránya) egyrészt egy fél-gyógyító kezelést kapott levélszinten (a leolvasás a T kezelés után 22 '-nye t^rte^tk' c« tt.u os. l eg\ -’^oyb.·' ·<? et a a\efcstt levéiszinten (a leolvasás a T kezelés után 27 nappal történik) .

~rz~z/im

	(elpusztult levél % T * 22 nap időpontban, fel-gyógyító;	(elpusztult levél 1 f e 21 nap időpontban, gyógyító;
Kezeletlen Összehason11tő minta	öl, 1	1©S
fesetyl-Al	17,8	»Ö
Agrlmer 540	77,3	188
főse ty 1 -Ale.Agr isier 5 4 Q:	31,1	93,3

71,.077/00

Claims (11)

1. Egy vagy több B gombaellenes és/vagy antibakterlálls és/vagy antivirális a foszforossav és származékai és ezek alkálifém- vagy alkáliföldfém-sói, az acibenzolar~S~met.il, a kitozán és az amíno-vajsav kezűi kiválasztott ··.···· vegyüiet alkalmazása a növények ^:........egy vagy több A elíoltor alkalmazása után adott — fiziológiás válaszainak S”' (potencirozó/, ahol az eiieitor egyidejűleg nem alkalmazható ρ o t s n c Ϊ ro tóként,

2. Az 1, igénypont szerinti, alkalmazás, azzal jellemezve, hogy az A eiieitor vegyeletet a fehérjék, az oiigoszacba.r idők., a poi iszaohariaok, a zsírok, giikolipidek, gii.koproteidek, a pepiidet, a növényi anyagból és/vagy gombákból származó sejtfal-kivonatok, a gombák, az scifoenz.oiar-5-metii vagy analógjai, az éleszt oki vonat ok, a szalioilsav és/vagy egy vagy több észtere és egy vagy tdbb algakivonat közöl választjuk ki,

3. Az 1, vagy 2. igénypont szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a B potencirozó vegyüiet egy íém-foszfit.

4. A 3. igénypont szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a B potenoirozö vegyüiet fosétyl-Al vagy fosetyl-ha.

5. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a B vegyüiet fcszforossav,

6. Az 1. vagy 2, .igénypont szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a B vegyüiet acibenzoiar-S-metii.

7Ϊ .077 /30

77 Α.ζ 1. vágy 2. igénypont szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy a B vegyüiet kitozán.

7 Az előző igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy A jelentése::

ii Púvtonhtnora megasperma {Pmg) sejtfalából izolált β-glúkán típusú oi1goszaoharid, ii) pektin-olzgomer vagy íii) β-megasperomn.

9. óz 1-7. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy A jelentése kitozán, aoibenzoIar-Smetíl, szaiiciisav vagy ennek egy vagy több észtere, élesztökivonat, tréhalőz, egy nem te.lepesedö gomba spórái.

10. Az előző igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, azzal jellemezve, hogy adott esetben kiegészülhet egy ismert gomfeaellenes készítménnyel való: klasszikus gombaöib kezeléssel., és ez a kezelés az A és a B készítmények alkalmazásával egyidejűleg· vagy azoktól elkülönülve történhet.

11. A növénykultúrák fi topáregén gombáivai és/vagy a baktériumokkal és/vagy a vírusokkal szembeni megelőzési célú védekezési eljárás, azzal jellemezve, hogy a növények föld feletti részeit egy vagy több A komponenst és legalább egy 8 komponenst (A és 8 jelentései megegyeznek az 1-9. i gé n yρ ο n t o kb a n m e gh a t á r ο z o 11 a k k a1) t a r t a ima z ö komb i nác i ő hatásos és nem fitotoxikus mennyiségével kezeljük.

12. A 11. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy gabona.....kultúrákat (búza, árpa, kukorica, rizs), zöldségh.hiss kultúrákat (bab, hagyma., tökfélék, káposzta, burgonya, paradicsom, paprika, spenót, borsó, saláta, zeller, endivia), gyümöica-kultűrákat (földieper, málna) , fás kultúrákat (alma-, körte·-, cseresznyefák, ginzeng, citromfa, kökuszpáima, pékárka, kakaócserje, diófa, kanosukra, olajfa, nyárfa, banánra), szólót, napraforgót, oukorrépát, dohányt és di s znövénveket kezelőn k..