[go: up one dir, main page]

HUP0500643A2 - Eljárások endogén eritropoetin szintjének növelésére - Google Patents

Eljárások endogén eritropoetin szintjének növelésére Download PDF

Info

Publication number
HUP0500643A2
HUP0500643A2 HU0500643A HUP0500643A HUP0500643A2 HU P0500643 A2 HUP0500643 A2 HU P0500643A2 HU 0500643 A HU0500643 A HU 0500643A HU P0500643 A HUP0500643 A HU P0500643A HU P0500643 A2 HUP0500643 A2 HU P0500643A2
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
alkyl
compound
alkoxy
activity
carbonyl
Prior art date
Application number
HU0500643A
Other languages
English (en)
Inventor
Stephen J. Klaus
Al Y. Lin
Thomas B. Neff
Qingjian Wang
Volkmar Guenzler-Pukall
Michael P. Arend
Lee A. Flippin
Original Assignee
Fibrogen, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27502557&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HUP0500643(A2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Fibrogen, Inc. filed Critical Fibrogen, Inc.
Publication of HUP0500643A2 publication Critical patent/HUP0500643A2/hu
Publication of HUP0500643A3 publication Critical patent/HUP0500643A3/hu
Publication of HU229475B1 publication Critical patent/HU229475B1/hu

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/17—Amides, e.g. hydroxamic acids having the group >N—C(O)—N< or >N—C(S)—N<, e.g. urea, thiourea, carmustine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4418—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cyproheptadine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/63—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
    • C07K14/505—Erythropoietin [EPO]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
    • G01N33/746—Erythropoetin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)

Abstract

A találmány tárgyát eljárások képezik endogén eritropoetinszint (EPO-szint) ex vivo és in vivo növelésére, amelyek során stabilizálják ahipoxia által indukálható faktor alfa-alegységét (HIFa); gátolják aHIFa hidroxileződését; gátolják 2-oxoglutarát dioxigenáz enzimaktivitását; és/vagy gátolják a HIF prolil hidroxiláz enzimaktivitását. A találmány tárgyát képezik továbbá az eljárásokbanalkalmazható vegyületek, azok gyógyászati alkalmazásai és eljárásokendogén EPO-szintet növelő vegyület azonosítására. A találmányszerinti megoldás alkalmazható eritropoetinnel kapcsolatos betegségek,anémiák, neurológiai rendellenességek kezelése és vizsgálata terén,továbbá oxigénfelhasználás növelésére.

Description

ϊ ·.:· .:.:::
p p L Π Π fi Z y
100578-14371 Γ J v ~
Eljárások endogén eritropoetin szintjének növelésére
A találmány tárgyát eljárások kepezik endogén eritropoetinszint sx vivo és in vivo növelésére, valamint az eljárásokban alkalmazható vegyületek és alkalmazásaik.
Az eritropoetin (EPO) a természetben előforduló hormon, amely stimulálja a test- ben az oxigént szállító vörösvértestek (eritrociták) termelődését. Az EPO normális esetben a vesében termelődik, és az endogén EPO szintézis csökkent oxigénszint (hipoxiás körülmények) mellett emelkedik. Az anémia valamennyi típusát a vér csökkent oxigénszállító kapacitása jellemzi, ezért hasonló jelekkel és tünetekkel járnak, például a bőr sápadtságá10 val és a nyálkahártyák hal ványságával, gyengeséggel, szédüléssel, fáradékonysággal és aluszékonysággal, amelyek együttesen az életminőség romlásához vezetnek. Súlyos anémiában szenvedő egyének nehézlégzésre és szívműködési rendellenességekre panaszkodnak. Az anémián olyan állapotokat értünk, amikor a vérben csökken a vörösvértestek száma vagy a hemoglobinszint.
Az anémia leggyakoribb okai a vashiány, Bi2-vitaminhiány vagy folsavhiány.
Ugyancsak anémia alakulhat ki krónikus betegségekben, például gyulladásos betegségekben, mint például a csontvelő következményes gyulladásos szupressziójával járó állapotokban, stb. Anémiát okozhat vérveszteség, például baleset, sebészeti beavatkozás, vagy gyógyszerek, például aszpirin vagy ibuprofen szedését követően jelentkező gyomor- bélrendszeri vérzés. Jelentős vérveszteség alakulhat ki nőknél erős menstruációs vérzés miatt; gyomorfekélyben, duodenális (patkóbél-) fekélyben szenvedő betegeknél, aranyeres egyéneknél, gyomor- vagy vastagbéltumoros betegeknél, stb.
Az eritrociták szétesését (hemolízist) okozhatják különböző állapotok, ezáltal anémiához vezetve. Hemolízist okozhatnak bakteriális toxinok vagy különböző kémiai 25 ágensek, például szulfonamidok és benzének által kiváltott allergiás reakciók. Hemolitikus anémiát gyakran váltanak ki mérgezések kémiai anyagokkal, paraziták, fertőzések vagy sarlósejtes vérszegénység. Ezen felül, egyes esetekben a szervezet ellenanyagokat tennel sajat vorösvértestjei ellen, és így okoz hemolízist. A csontvelőt károsító bármely betegség vagy sérülés okozhat anémiát, mivel ez az a szövet, ahol az eritropoezis végbemegy, azaz 30 ahol az eritrociták termelődnek. Besugárzás, betegségek, különböző kémiai ágensek szintén csontvelőkárosodást okozhatnak, aplasztikus anémiához vezetve. Kemoterápiás kezelésben részesülő tumoros betegeknél gyakran alakul ki aplasztikus anémia. Anémiával jár továbbá a vese működészavara, ahol az anémia súlyossága szoros összefüggést mutat a f >
100578-14371
-2funkciózavar mértékével. A veseelégtelenségben szenvedő, dialízisre szoruló betegek többsége krónikus anémiában szenved.
A vesén felül eritropoetin a központi idegrendszer („central nervous system, CNS) asztrocitáiban és neuronjaiban is termelődik, és EPO és EPO-receptorok expresszálódnak az agy felszínén található kapillárisok felszínén. Ezen felül, szisztémás úton adagolt EPO átjut a vér-agy gáton, és csökkenti a mechanikus trauma, epilepszia, excitoxinok bejutása, és idegrendszeri gyulladások által okozott cerebrális és spinális, ischaemiás idegsejtkárosodást [Sakanaka: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95, 4635 (1998); Celik és mtsai.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99, 2258 (2002); Brines és mtsai.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, 10526 (2000); Calapai és mtsai.: Eur. J. Pharmacol. 401, 349 (2000); valamint Siren és mtsai.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 98, 4044 (2001).
Az 1980-as évek végén, Amgen géntechnológiai úton létrehozott EPO-t juttatott krónikus veseelégtelenségben szenvedő betegekbe, az anémia kezelésére. EPO-t sugárterápiában és/vagy kemoterápiában részesült tumoros betegeknek is beadtak, ezáltal csökkentették a szükséges vértranszfúziók számát. EPO-t alkalmaztak HIV-fertőzéssel vagy azidotimidin (AZT) terápiával asszociált anémiában szenvedő betegekben. Bár az EPOterápia iránti igény egyre növekszik, a kereslet növekedésének korlátot szab a termék magas ára. A rekombináns EPO-terápia EPO intravénás beadását igényli hetente egy-három alkalommal, akár tizenkét héten át, amely terápiás beadási rend korlátozza a szer önálló alkalmazását, és kényelmetlen a beteg számára. A hurhán EPO mérete a jelentős mértékű és variábilis glikozilezés következtében heterogenitást mutat, amelyet rekombináns humán EPO esetében eddig nem utánoztak le.
A rekombináns EPO előállításával és alkalmazásával járó nehézségek tükrében szükség van eritropoetin-asszociált rendellenességek, például anémia, mint például diabétesszel, fekéllyel, veseelégtelenséggel, tumorral, fertőzéssel, dialízissel, sebészeti beavatkozással és kemoterápiával asszociált anémia kezelésére hatékonyan alkalmazható új eljárásokra és készítményekre. Közelebbről, a technika állása szerint igény mutatkozik endogén eritropoetinszint növelésére alkalmas eljárásokra és készítményekre.
Az alábbiakban összefoglaljuk a találmány szerinti megoldás lényegét
Általánosságban, a találmány tárgyát eljárások képezik endogén eritropoetinszint növelésére. A találmány egy szempontja szerint, a találmány tárgyát eljárások képezik endogén eritropoetin (EPO) szint növelésére egyedekben, amely eljárásokban stabilizáljuk a hipoxia által indukált faktor alfa-alegységét (HIFa). A találmány egy további szempontja szerint, a találmány tárgyát eljárások képezik endogén eritropoetin (EPO) szint növelésére
100578-14371
-3egy egyedben, ahol a HIFa hidroxileződését gátoljuk. A találmány egy még további szempontja szerint, az endogén EPO-szint növelését a 2-oxiglutarát dioxigenáz enzim aktivitásának gátlásával érjük el. A találmány egy további szempontja szerint, a találmány tárgyát képezi eljárás az endogén EPO-szint növelésére, ahol a HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitását gátoljuk az egyedben.
A találmány előnyös megvalósítási módjai szerint, az endogén EPO-szintet állatban, emberben, sejtben, szövetben vagy szervben, stb. növeljük.
A találmány egy szempontja szerint, a találmány tárgyát eljárás képezi endogén EPO-szint növelésére, a HIFa in vivo stabilizálásával. Szintén a találmány tárgyát képezi eljárás endogén EPO-szint növelésére, ahol a HIFa-t in vitro stabilizáljuk.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az endogén HIF-1α-, HIF2α-, HIF-3a-faktort vagy annak bármely fragmentumát stabilizáljuk. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a HIFa endogén az egyedhez képest.
A találmány szerinti eljárásokban az EGLN1, EGLN2, EGLN3, prokollagén prolii 4-hidroxiláz, prokollagén prolii 3-hidroxiláz, prokollagén lizil hidroxiláz, PHD4 vagy FIH1 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitását és/vagy azok bármely alegységének vagy fragmentumának aktivitását gátoljuk. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, az endogén EPO-szintet a HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitásának gátlásával érjük el úgy, hogy az EGLN1, EGLN2 vagy EGLN3 HIF prolii hidroxiláz enzimet vagy annak alegységét vagy fragmentumát gátoljuk.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az endogén EPO-szint növekedését úgy érjük el, hogy az endogén EPO-szintet növelő hatóanyagot adunk be az egyednek. A találmány egy szempontja szerint, a hatóanyag stabilizálja a HIFa-t. A találmány egy további szempontja szerint, a hatóanyag a HIFa hidroxileződését gátolja. A találmány egy még további szempontja szerint, a hatóanyag a 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitását gátolja. A találmány egy még további szempontja szerint, a hatóanyag a HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitását gátolja.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány tárgyát eljárás képezi endogén EPO-szint növelésére egy egyedben, ahol az egyednek heterociklusos karboxamidokat, fentantrolinokat, hidroxamátokat, vagy azokból származtatott fiziológiásán aktív sókat vagy prodrogokat adunk be. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a hatóanyag heterociklusos karboxamid, ezen belül piridin karboxamid, kinolin karboxamid, izokinolin karboxamid, cinnolin karboxamid vagy béta-karbolin karboxamid.
100578-14371
-4A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a hatóanyagot orális úton adagolható készítményben adjuk be az egyednek. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a hatóanyagot transzdermális úton adjuk be.
A találmány tárgyát különböző eljárások képezik EPO-asszociált betegségek kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére. A találmány egy szempontja szerint, a találmány tárgyát eljárások képezik EPO-asszociált betegségek kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére, ahol az endogén EPO-szintet növeljük. A találmány egy további szempontja szerint, a találmány tárgyát eljárások képezik EPO-asszociált betegségek kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére, ahol a HIFa-faktort stabilizáljuk. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány tárgyát eljárások képezik EPO-asszociált betegségek kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére egy egyedben, ahol a HIFa hidroxileződését gátoljuk. A találmány egy még további szempontja szerint, a találmány tárgyát eljárás képezi EPO-asszociált betegségek kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére egy egyedben, ahol a 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitását gátoljuk. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az EPO-asszociált betegségek kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére a HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitását gátoljuk.
Közelebbről, a találmány tárgyát eljárások képezik anémia kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére egy egyedben. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az endogén EPO szintjét növeljük például a HIFa stabilizálásával, 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitásának gátlásával, a HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitásának gátlásával, stb.
A találmány egy szempontja szerint, a találmány tárgyát eljárások képezik anémia kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére / a kezelés pre-kondícionálására egy egyedben, ahol az anémia hemoglobin- vagy eritrocita-rendellenességgel asszociált. A találmány egy további szempontja szerint, az anémia diabétesszel, tumorral, fekélyekkel, vesebetegségekkel, immunszupresszív betegségekkel, fertőzéssel vagy gyulladással kapcsolatos. A találmány egy további szempontja szerint, az anémia sugárterápiával, kemoterápiával, dialízissel vagy sebészeti beavatkozással asszociált. A találmány egy még további szempontja szerint, a találmány tárgyát képezi eljárás anémia kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére / a kezelés pre-kondícionálására egy egyedben, ahol az anémia vérveszteséggel kapcsolatos. A találmány egy közelebbi szempontja szerint, a vérveszteséget vérzékenységgel járó betegség, trauma, sebészeti beavatkozás, stb. váltotta ki. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az anémiát vastranszporttal, vas átalakítással
100578-14371
-5vagy vasfelhasználással kapcsolatos rendellenesség okozza. Szintén a találmány tárgyát képezik eljárások anémia kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére / a kezelés prekondícionálására, ahol az endogén EPO-szintet növeljük, és az egyednek például vastartalmú hatóanyagot, Bi2-vitamint, folsavat, exogén eritropoetint vagy granulocita-kolónia stimuláló faktort, stb. adunk be.
Ugyancsak a találmány tárgyát képezi eljárás neurológiai rendellenesség kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére egy egyedben, ahol az endogén EPO-szintet növeljük. A találmány különböző előnyös megvalósítási módjai szerint, a HIfa-faktort stabilizáljuk, a 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitását gátoljuk, vagy HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitását gátoljuk. A találmány egy további szempontja szerint, az eljárást neurológiai rendellenességek, például stroke, trauma, epilepszia vagy neurodegeneratív betegség kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére alkalmazzuk.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány tárgyát eljárás képezi oxigénfelhasználás növelésére egy egyedben, ahol az endogén EPO szintjét növeljük.
Ugyancsak a találmány tárgyát képezik eljárások az egyedben az endogén EPOszintet növelő hatóanyagok azonosítására. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány tárgyát képezi eljárások az endogén EPO-szintézist növelő hatóanyagok azonosítására, amelyekben a hatóanyagot beadjuk az egyednek; mérjük az EPO-szintet az egyedben vagy attól származó mintában; és a minta EPO-szintjét standarddal hasonlítjuk össze, ahol az EPO-szint növekedését a standardhoz képest az egyedben vagy attól származó mintában az endogén EPO-szint növekedését annak jeleként értékeljük, hogy a hatóanyag növeli az endogén EPO-szintet.
A találmány szerinti eljárásokban, az endogén eritropoetinszintet növelhetjük ex vivo, például sejttenyészetben; vagy in vivo, például egy állatban/emberben. Előnyösen, az endogén eritropoetinszintet emlősben, például macskában vagy kutyában, előnyösebben emberben növeljük. A találmány egy közelebbi előnyös megvalósítási módja szerint, az endogén eritropoetin-szintézist növeljük szövetekben, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, vese- máj-, hematopoetikus (vérképzőrendszeri) és/vagy idegszövetben. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti eljárásokat eritropoetin-asszociált betegségek, például neurológiai rendellenességek és/vagy anémia megelőzésére, előkezelésére vagy kezelésére alkalmazzuk. Anémiával járó eritropoetin-asszociált állapotok például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: policisztás vesebetegség, krónikus veseelégtelenség, diabé f
100578-14371
-6tesz, tumorok, fekélyek vagy immunszupresszív állapotok, például AIDS. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti eljárásokat eljárások alkalmazásával vagy kezelésekkel kapcsolatos anémia kezelésére alkalmazzuk, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, sugárkezeléssel, kemoterápiával, vesedialízissel vagy sebészeti beavatkozással kapcsolatos rendellenességek kezelésére alkalmazzuk. A találmány egy közelebbi előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti eljárásokat endogén eritropoetinszint növelésére alkalmazzuk HIV-fertőzött, zidovudinnal vagy más reverz transzkriptáz inhibitorral kezelt anémiás egyedekben. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, az eljárást endogén eritropoetinszint növelésére alkalmazzuk tumoros, ciklikus cisplatinnal vagy nem cisplatin tartalmú kemoterápiás szerrel kezelt anémiás betegekben. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, az eljárást endogén eritropoetinszint növelésére alkalmazzuk elektív, nem szív- és nem érsebészeti beavatkozás előtt álló anémiás betegekben, ezáltal csökkentjük az igényt allogén vértranszfuzióra, vagy megkönnyítjük a vér bankolásának lehetőségét a sebészeti beavatkozás előtt. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az eljárást endogén eritropoetinszint növelésére alkalmazzuk különböző eljárások alkalmazását megelőzően, például aortahunt kialakítását szükségessé tevő sebészeti beavatkozások, például a mellkas és has megnyitásával járó aortaműtétek előtt. A találmány további egy előnyös megvalósítási módja szerint, az eljárást endogén eritropoetinszint növelésére alkalmazzuk in vitro, sejtekben.
A találmány egy további szempontja szerint, a találmány tárgyát endogén eritropoetin plazmaszintjét növelő hatóanyagok képezik. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sójának terápiásán hatásos mennyiségét adjuk be, egymagában vagy kombinációban, gyógyászatilag elfogadható kötőanyaggal együtt eritropoetin-asszociált állapotban szenvedő egyednek. A találmány egy további szempontja szerint, a vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sójának terápiásán hatásos mennyiségét adjuk be, egymagában vagy kombinációban, gyógyászatilag elfogadható kötőanyaggal együtt anémiás egyednek.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyületet orális vagy transzdermális úton adjuk be. Ez előnyökkel járhat a jelenleg alkalmazott terápiás eljárásokhoz képest, mivel a beadás egyszerűbb, a hatóanyagot a beteg saját maga adagolhatja, az eljárás kevésbé költséges, az orvosnál tett látogatások száma csökken, és a fertőzésveszély és immunogén komplikációk száma mérséklődik, minimálisra csökkentve az egyes betegeknél rekombináns EPO adagolását követően jelentkező káros mellékhatásokat. A
I.
100578-14371
-7találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az endogén eritropoetmszintet növelő hatóanyagot orális úton adjuk be. Szintén a találmány tárgyát képezi tehát orális úton adagolható készítmény, amely a találmány szerinti hatóanyagot tartalmaz. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, az endogén eritropoetinszintet növelő hatóanyagot transzdermális úton adjuk be. Ennek megfelelően, a találmány tárgyát képezi a találmány szerinti hatóanyagot tartalmazó transzdermális tapasz vagy párna.
A találmány egy további szempontja szerint, a találmány tárgyát képezik az endogén eritropoetinszintézist tenyésztett sejtekben növelő hatóanyagok, valamint eljárások, amelyekben a hatóanyagok alkalmazásával in vitro sejttenyésztő eljárásokban növeljük az endogén eritropoetinszintézist. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a hatóanyagot vagy annak gyógyászatilag elfogadható sóját tenyésztett sejtekhez adjuk az eritropoetin termelődését lehetővé tevő körülmények mellett, majd a termelődött eritropoetint kinyerjük és tisztítjuk. Eritropoetint in vivo termelő sejtek például májsejtek, mint például Hep3B-hepatokarcinoma sejtek.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti eljárásban az (I) általános képletű vegyületet alkalmazzuk:
R1
R
Hl © ^NH-A-B
N X ahol:
A jelentése 1,2-arilidén, 1,3-arilidén, 1,4-arilidén; vagy (Ci-C4)-alkilén, amely adott esetben az alábbiak közül eggyel vagy kettővel szubsztituált: halogén-, ciano-, nitro-, trifluormetil-, (Ci-Ce)-alkil-, (Ci-Ce)-hidroxialkil-, (Ci-Cgj-alkoxi-csoport, -O-[CH2]XCfH(2f+i-g)Halg-csoport, (Ci-Cöj-fluoralkoxi-, (Ci-Cs)-fluoralkeniloxi-, (Ci-Cs)fluoralkiniloxi-, -OCF2C1- vagy -O-CF2-CHFCl-csoport; (CrCf,)-alkilmerkapto-, (Ci-C6)alkilszulfmil-, (Ci-Cej-alkilszulfonil-, (Ci-Cöj-alkilkarbonil-, (Ci-Cőj-alkoxikarbonil-, karbamoil-, N-(Ci-C4)-alkilkarbamoil-, N,N-di-(Ci-C4)-alkilkarbamoil-, (Ci-C6)alkilkarboniloxi-, (C3-C8)-cikloalkil-, fenil-, benzil-, fenoxi-, beniloxi-, anilino-, Nmezilanilino-, fenilmerkapto-, fenilszulfonil-, fenilszulfmil-, szulfamoil-, N-(Ci-C4)
100578-14371
-8alkilszulfamoil-, N,N-di-(Ci-C4)-alkilszulfamoil-csoport; vagy szubsztituált (C6-Ci2)ariloxi-, (C7-Cn)-aralkiloxi-, (C6-Ci2)-aril-, (C7-Cn)-aralkil-csoport, amely az aril egységben egy-öt azonos vagy különböző szubsztituenst hordoz az alábbiak közül: halogén, ciano, nitro, trifluormetil, (Cli-Cö)-alkil, (Cli-Cój-alkoxi, -O-[CH2]x-CfH(2f+i-g)Halg, OCF2C1, -O-CF2-CHFC1; (Ci-Céj-alkilmerkapto, (Ci-Cőj-alkilszulfmil, (Ci-C6)-alkilszulfonil, (Ci-C6)-alkilkarbonil, (Ci-C6)-alkoxikarbonil, karbamoil, N-(Ci-C4)-alkilkarbamoil, N,N-di-(Ci-C4)-alkilkarbamoil, (Ci-C6)-alkilkarboniloxi, (C3-C8)-cikloalkil, szulfamoil, N-(Ci-C4)-alkilszulfamoil, N,N-di-(Ci-C4)-alkilszulfamoil; vagy
A jelentése -CR5R6, és R5 és R6 jelentése egymástól függetlenül hidrogén, (CiCö)-alkil, (C3-C7)-cikloalkil, aril, vagy egy aminosav «.-szénatomjának szubsztituense, ahol az aminosav természetben előforduló L-aminosav vagy annak D-izomerje.
B jelentése -CO2H, -NH2-, NHSO2CF3, terazolil, imidazolil, 3-hidroxizoxazolil, CONHCOR’”, -CONHSOR’”, CONHSO2R’”, ahol R jelentése aril, heteroaril, (C3-C7)cikloalkil, vagy (Ci-C4)-alkil, adott esetben (C6-Ci2)-aril, heteroaril, OH, SH, (Ci-C4)-alkil, (Ci-C4)-alkoxi, (Ci-C4)-tioalkil, (Ci-C4)-szulfmil, CF3, Cl, Br, F, I, NO2-, COOH, (C2-C5)alkoxikarbonil, NH2, mono-(Ci-C4-alkil)-amino, di-(Ci-C4-alkil)-amino vagy (Ci-C4)perfluoralkil csoporttal egyszeresen szubsztituálva; vagy B jelentése CO2-G karboxi csoport, ahol G G-OH alkohol gyöke, és G jelentése (Ci-C2o)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (C2C2o)-alkenil, (C3-C8)-cikloalkenil, retinil, (C2-C80)-alkinil, (C4-C20)-alkinil, (C4-C20)alkenil, ahol az alkenil, cikloalkenil, alkinil és alkenil csoport egy vagy több többszörös kötést tartalmaz; (Ce-Ciéj-karbociklusos aril csoport, (C7-Ci6)-karbociklusos aralkil csoport, heteroaril, vagy heteroalkil csoport, ahol a heterolaril csoport vagy a heteroalkil csoport heteroaril csoportja 5 vagy 6 gyűrűatomot tartalmaz; és ahol a G csoport egy vagy több alábbi csoporttal van szubsztituálva: hidroxi, halogén, ciano, trifluormetil, nitro, karboxi, (Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (C3-C8)-cikloalkenil, (Ce-Ci2)-aril, (C7-Ciö)aralkil, (C2-Ci2)-alkenil, (C2-Ci2)-alkinil, (C2-Ci2)-alkoxi, (C2-Ci2)-alkoxi-(C2-Ci2)-alkil, (C2-Ci2)-alkoxi-(C2-Ci2)-alkoxi, (C2-Ci2)-ariloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxi, (Ci-C8)-hidroxialkil, -O-[CH2]x-CfH(2f+i-g)Fg, -OCF2CI, -O-CF2-CHFCI; (Ci-Ci2)-alkilkarbonil, (C3-C8)cikloalkilkarbonil, (C6-Ci2)-arilkarbonil, (C7-Ci6)-aralkilkarbonil, cinnamoil, (C2-Ci2)alkenilkarbonil, (C2-Ci2)-alkinilkarbonil, (Ci-Ci2)-alkoxikarbonil, (Ci-Ci2)-alkoxi-(CiCi2)-alkoxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxikarbonil, (C7-Ci6)-aralkoxikarbonil, (C3-C8)cikloalkiloxikarbonil, (C2-Ci2)-alkeniloxikarbonil, (C2-Ci2)-alkiniloxikarbonil, aciloxi, (Cr Ci2)-alkoxikarboniloxi, (Ci-Ci2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxikarboniloxi, (C6-Ci2)-ariloxikarboniloxi, (C7-C]6)-aralkiloxikarboniloxi, (C3-C8)-cikloalkoxikarboniloxi, (C2-Ci2)
ΐ.
100578-14371
-9alkeniloxikarboniloxi, (C2-Ci2)-alkiniloxikarboniloxi, karbamotl, N-(Ci-C!2)alkilkarbamoil, N,N-di-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoil, N(C3-C8)-cikloalkil-karbamoil, N-(C6Ci6)-arilkarbamoil, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C6-Ci6)-arilkarbamoil, N-(C]-Cio)-alkil-N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoil, N-((CrCio)-alkoxi-(C6-Cio)alkil)-karbamoil, N-((C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-Cio)alkil)-karbamoil, N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(CiCio)-alkil)-karbamoil, N-((Ci-Cio)-alkil-N-(Ci-Cio)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoil, N(Ci-Cio)-alkil-N-((C6-Ci6)-ariloxi-(Ci-Cio)-alkil))-karbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C7-Ci6)aralkoxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoil, karbamoiloxi, N-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoiloxi, N,N,-di(Ci-Ci2)alkilkarbamoiloxi, N-(C3-C8)-cikloalkilkarbamoiloxi, N-(C6-Ci2)-arilkarbamoiloxi, N-(C7-Ci6)-arilkarbamoiIoxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C6-Ci7)-arilkarbamo N(Ci-CI0)alkil-N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoiloxi, N-((Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-((C6-Ci2)-ariloxi(Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Cr Cio)-alkil-N-((Ci-Cio)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C6-Ci2)ariloxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Cio)alkil)-karbamoiloxi, amino, (Ci-Ci2)-alkilamino, di-(C]-Ci2)-alkilamino, (C3-C8)-cikloalkilamino, (C3-Ci2)-alkenilamino, (C3-Ci2)-aIkinilamino, N-(C6-Ci2)-ariIamino, N-(C7Cn)-aralkilamino, N-alkilaralkilamino, N-alkil-arilamino, (Ci-Ci2)-alkoxiamino, (Ci-Ci2)alkoxi-N-(Ci-Cio)-alkilamino,(Ci-C]2)-alkilkarbonilamino, (C3-C8)-cikloalkilkarbonilamino, (C6-Ci2)-arilkarbonilamino, (C7-Ci6)-alkilkarbonilamino, (Ci-Ci2)-alkilkarbonil-N(Ci-Cio)-alkilamino, (C3-C8)-cikloalkilkarbonil-N-(Ci-Ci0)-alkilamino, (C6-Ci2)-arilkarbonil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C7-Cn)-aralkilkarbonil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C1-C12)alkilkarbonilamino-(Ci-C8)-alkil, (C3-C8)-cikloalkilkarbonilamino-(Ci-C8)-alkil, (C6-Ci2)arilkarbonilamino-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci6)-aralkilkarbonilamino-(Ci-C8)-alkil, amino-(CiCio)-alkil, N-(Ci-Cio)-alkilamino-(Ci-Cio)alkil, N,N-di-(Ci-Cio)-alkilamino-(Ci-Cio)-alkil, (C3-C8)-cikloalkilamino-(Ci-Cio)-alkil, (Ci-Ci2)-alkilmerkapto, (Ci-Ci2)-alkilszulfmil, (CiCi2)-alkilszulfonil, (C6-Ci2)-arilmerkapto, (C6-Ci2)-arilszulfmil, (C6-Ci2)-arilszulfonil, (C7Ci6)-aralkilmerkapto, (C7-Ci6)-aralkilszulfmil, vagy (C7-Ci6)-aralkilszulfonil;
X jelentése O vagy S atom;
Q jelentése O, S atom, NR', vagy egy kémiai kötés;
ahol, amennyiben Q kémiai kötés, R4 jelentése halogén, nitril, vagy trifluorometil;
vagy amennyiben Q jelentése O, S atom, vagy NR', R4 jelentése hidrogén, (CiCio)-alkil, (C2-Cio)-alkenil, (C2-Cio)-alkinil, ahol az alkenil vagy alkinil csoport egy vagy két többszörös C-C kötést tartalmaz; a -[CH2]x-CfH(2f+i-g)-Fg általános képletű helyettesítetlen fluoroalkil csoport, (Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil csoport, (Ci-C6)-alkoxi-(Ci-C4)
100578-14371
-10alkoxi-(Ci-C4)-alkil csoport, aril csoport, heteroaril csoport, (C7-Cn)-aralkil csoport, vagy a Z általános képletű csoport:
-[CH2]v-[O]w-[CH2]rE (Z) ahol:
E jelentése heteroaril csoport, (C3-C8)-cikloalkil csoport, vagy az F általános képletű fenil csoport:
v értéke 0-6. bármely egész szám;
w értéke 0 vagy 1;
t értéke 0-3. bármely egész szám, és
R7 R8, R9, R10, és R11 azonos vagy különböző, és jelentésük hidrogén, halogén, ciano, nitro, trifluorometil, (Ci-Ce)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (Ci-Ce)-alkoxi, -O-[CH2]XCfH(2f+i-g)-Fg, -OCF2-CI, -O-CF2-CHFCI, (Ci-C6)-alkilmerkapto, (Ci-C6)-hidroxialkiI, (CiC6)-alkoxi-(Ci-C6)-alkoxi, (Ci-C6)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (Ci-C6)-alkilszulfmil, (Ci-C6)alkilszulfonil, (Ci-C6)-alkilkarbonil, (Ci-C8)-alkoxikarbonil, karbamoil, N-(Ci-Cg)alkilkarbamoil, N,N-di-(Ci-Cg)-alkilkarbamoil, vagy (C7-Cn)-aralkilkarbamoil, adott esetben fluorin, klorin, bromin, trifluorometil, (Ci-C6)-alkoxi, N-(C3-Cg)-cikloalkilkarbamoil, N-(C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C4)-alkilkarbamoil, (Ci-Cőj-alkilkarboniloxi, fenil, benzil, fenoxi, benziloxi, NR R csoporttal szubsztiuálva, ahol R és R egymástól függetlenül hidrogén, (Ci-Ci2)-alkil, (Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-C12)-aralkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C6-Ci2)ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (C3-Cio)-cikloalkil, (C3-Ci2)-alkenil, (C3-Ci2)-alkinil, (Ce-C^j-aril, (C7-Cn)-aralkil, (Ci-Ci2)-alkoxi, (C7-Ci2)aralkoxi, (Ci-Ci2)-alkilkarbonil, (C3-C8)cikloalkilkarbonil, (C6-Ci2)arilkarbonil, (C7-Ci6)-aralkilkarbonil; vagy ahol RYés Rz együttesen -[CH2]h, amelyben a CH2 csoport O, S atommal vagy N-(Ci-C4)-alkilkarbonilimino, vagy N-(Ci-C4)-alkoxikarbonilimino csoporttal helyettesíthető; fenilmerkapto, fenilszulfonil, fenilszulfinil, szulfamoil, N-(Ci-C8)-alkilszulfamoil, vagy N,N-di-(Ci-C8)alkilszulfamoil; vagy R7 és R8, R8 és R9, R9és R10, vagy R10 és R11, együttesen -[CH2]nvagy -CH-CH-CH-CH- lánc, ahol a lánc egy CH2 csoportja adott esetben O, S atommal
100578-14371
-11vagy SO, SO2 vagy NRy csoporttal van helyettesítve; és n értéke 3, 4 vagy 5; és amennyiben E heteroaril csoport, az 1-3 az R7-Rn jelentésénél megadott szubsztituenst hordozhat, vagy ha E jelentése cikloalkil csoport, egy, az egy, az R7-Rn jelentésénél megadott szubsztituenst hordozhat;
vagy ha Q jelentése NR', R4 jelentése R lehet, ahol R' és R azonosak vagy különbözőek, és jelentésük hidrogén, (C6-Ci2)-aril, (CyCYj-aralkil, (Ci-C8)-alkil, (Ci-C8)alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci2)-aralkoxi-(Ci-C8)-alkil, (Ci-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (CjCio)-alkilkarbonil, adott esetben (C7-Ci6)-aralkilkarbonil csoporttal szubsztituálva, vagy adott esetben C6-Ci2)-arilkarbonil csoporttal szubsztituálva; vagy R' és R együttesen [CH2]h, ahol a CH2 csoport O, S atommal vagy N-acilimino, vagy N-(Ci-Cio)alkoxikarbonilimino csoporttal lehet szubsztituálva, és h értéke 3-7. bármely egész szám.
Y jelentése N vagy CR3;
R1, R2 és R3 azonos vagy különböző, és jelentésük hidrogén, hidroxil, halogén, ciano, trifluorometil, nitro, karboxil, (Ci-C20)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (C3-C8)cikloalkil(Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8)-cikloalkoxi, (C3-C8)-Cikloalkil-(Ci-Ci2)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil(Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8)-cikloalkiloxi-(Ci-Ci2)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C8)-alkil-(CiC6)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkiloxi-(Ci-C8)alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkoxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkoxi, (C6-Ci2)-aril, (C7Ci6)-aralkil, (C7-Ci6)-aralkenil, (C7-Ci6)-aralkinil, (C2-C20)-alkenil, (C2-C20)-alkinil, (CiC20)-alkoxi, (C2-C20)-alkeniloxi, (C2-C20)-alkiniloxi, retiniloxi, (Ci-C20)-alkoxi-(Ci-Ci2)alkil, (C]-Ci2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxi, (C]-Ci2)-alkoxi-(C]-C8)-alkoxi-(C]-C8)-alkil, (C6Ci2)-ariloxi, (C7-Cie)-aralkiloxi, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C6)-alkoxi, (C7-Ci6)-aralkoxi-(CiCőj-alkoxi, (Cő-Ciöj-hidroxialkil, (C6-Ci6)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci6)-aralkoxi-(Ci-C8)alkil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C7-Ci2)-aralkiloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(CiC6)alkil, (C2-C20)-alkeniloxi-(Ci-C6)-alkil, (C2-C20)-alkiniloxi-(Ci-C6)-alkil, (C2-C20)retiniloxi-(Ci-C6)-alkil, -O-[CH2]xCfH(2f+i.g)Fg, -OCF2CHFC1, (Ci-C20)-alkilkarbonil, (C3C8)-cikloalkilkarbonil, (C6-C]2)-arilkarbonil, (C7-C16)-aralkilkarbonil, cinnamoil, (C2-C20)alkenilkarbonil, (C2-C20)-alkinilkarbonil, (Ci-C20)-alkoxikarbonil, (Ci-Ci2)-alkoxi-(CiCi2)-alkoxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxikarbonil, (C7-Ci6)-aralkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkoxikarbonil, (C2-C20)-alkeniloxikarbonil, retiniloxikarbonil, (C2-C20)-alkiniloxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C7-Ci0)-aralkoxi-(Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkoxi-(C]-C6)alkoxikarbonil, (Ci-Ci2)-alkilkarboniloxi, (C3-C8)-cikloalkilkarboniloxi, (C6-Ci2)arilkarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkilkarboniloxi, cinnamoiloxi, (C2-Ci2)-alkenilkarboniloxi,
100578-14371
-12(C2-Ci2)-alkinilkarboniloxi, (Ci-Ci2)-alkoxikarboniloxi, (Ci-Ci2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxikarboniloxi, (C6-Ci2)-ariloxikarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxikarboniloxi, (C3-C8)cikloalkoxikarboniloxi, (C2-C12)-alkeniloxikarboniloxi, (C2-C12)-alkiniloxikarboniloxi, karbamoil, N-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoil, N,N-di-(Ci-Ci2)-alkilkarbam N-(C3-C8)cikloalkilkarbamoil, N,N-diciklo-(C3-C8)-alkilkarbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C3-C8)cikloalkilkarbamoil, N-((C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkil)-karbamoil, N-(C[-C6)-alkil-N((C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkil)-karbamoil, N-(+)-dehidroabietilkarbamoil, N-(Ci-C6)alkil-N-(+)-dehidroabietilkarbamoil, N-(C6-Ci2)-arilkarbamoil, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C6-Ci6)-arilkarbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C7-C16)aralkilkarbamoil, N-CCCrCisj-alkoxi-CCi-Cioj-alkilj-karbamoil, N-((C6-Ci6)-ariloxi-(CiCio)-alkil)-karbamoil, N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Ci0)-alkil)-karbamoil, N-(Ci-Cio)-alkilN-((Ci-Cio)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C6-Ci2)-ariloxi-(CiCio)-alkil)-karbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoil; CON(CH2)h, amelyben a CH2 csoport O, S atommal vagy N-(Ci-C8)-alkilimino, N-(C3C8)-cikloalkilimino, N-(C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C4)-alkilimino, N-(C6-Ci2)-arilimino, N-(C7Ci6)-aralkilimino, N-(C1-C4)-alkoxi-(Ci-C6)-alkilimino csoporttal helyettesíthető, és h értéke 3-7. bármely egész szám; az (R) általános képletű karbamoil csoport:
ahol:
Rx és Rv egymástól függetlenül hidrogén, (Ci-C6)-alkil, (C3-C7)-cikloalkil, aril, vagy egy alfa-aminosav alfa szénatomjának szubsztituense, amely lehet L- vagy Daminosav, s értéke 1-5. bármely egész szám;
T jelentése OH, vagy NR*R**, és R*, R** és R*** azonosak vagy különbözőek, és jelentésük (C6-Ci2)-aril, (C7-Cn)-aralkil, (Ci-C8)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (+)dehidroabietil, (Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci2)-aralkoxi-(C]-C8)-alkil, (C6-C]2)ariloxi-(C]-C8)-alkil, (Ci-Cio)-alkanoil, adott esetben (C7-Ci6)-aralkanoil csoporttal szubsztituálva, adott esetben (C6-Ci2)-aroil csoporttal szubsztituálva; vagy R* és R** együttesen -[CH2]h, ahol egy CH2 csoport O, S atommal vagy SO, SO2, N-acilamino, NV.
100578-14371
-13(Ci-Cio)-alkoxikarbonilimino, N-(Ci-C8)-alkilimino, N-(C3-C8)-cikloalkilimmo, N-(CjC8)-cikloalkil-(Ci-C4)-alkilimino, N-(C6-Ci2)-arilimino, N-(C7-Ci6)-aralkilimino, N-(Cr C4)-alkoxi-(Ci-C6)-alkilimino csoporttal lehet szubsztituálva, és h értéke 3-7. bármely egész szám;
karbamoiloxi, N-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoiloxi, N,N-di-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoiloxi, N-(C3-C8)-cikloalkilkarbamoiloxi, N-(Ci-Ci2)-arilkarbamoiloxi, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C6-Ci2)-arilkarbamoiloxi, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C7-Ci6)aralkilkarbamoiloxi, N-((Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-((C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoiloxi, N-((C7-C 16)-aralkiloxi-(C i -Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(C i -C io)-alkil-N((Ci-Cio)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C6-Ci2)-ariloxi-(CiCio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoiloxiamino, (Ci-Ci2)-alkilamino, di-(Ci-Ci2)-alkilamino, (C3-C8)-cikloalkilamino, (C3-C]2)-alkenilamino, (C3-Ci2)-alkinilamino, N-(C6-Ci2)-arilamino, N-(C7-Cn)aralkilamino, N-alkil-aralkilamino, N-alkil-arilamino, (Ci-Ci2)-alkoxiamino, (Ci-Ci2)alkoxi-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (Ci-Ci2)-alkanoilamino, (C3-C8)-cikloalkanoilamino, (C6Ci2)-aroilamino, (C7-Ci6)-aralkanoilammo, (Ci-C!2)-alkanoil-N-(Ci-Ci0)-alkilamino, (C3C8)-cikloalkanoil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C6-Ci2)-aroil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C7-Cn)aralkanoil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (Ci-C]2)-alkanoilamino-(Ci-C8)-alkil, (C3-C8)cikloalkanoilamino-(Ci-C8)-alkil, (C6-Ci2)-aroilamino-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci6)aralkanoilamino-(Ci-C8)-alkil, amino-(Ci-Cio)-alkil, N-(Ci-Ci0)-alkilamino-(Ci-Ci0)-alkil, N,N-di(Ci-Cio)-alkilamino-(Ci-Cio)-alkil, (C3-C8)-cikloalkilamino(Ci-Cio)-alkil, (Ci-C20)alkilmerkapto, (Ci-C2o)-alkilszulfmil, (Ci-C20)-alkilszulfonil, (C6-Ci2)-arilmerkapto, (C6Ci2)-arilszulfinil, (C6-Ci2)-arilszulfonil, (C7-Ci6)-aralkilmerkapto, (C7-Ci6)-aralkilszulfmil, (C7-C]6)-aralkilszulfonil, (Ci-Ci2)-alkilmerkapto-(Ci-C6)-alkil, (Ci-Ci2)-alkilszulfinil-(CiC6)-alkil, (Ci-Ci2)-alkilszulfonil-(Ci-C6)-alkil, (C6-Ci2)-arilmerkapto-(Ci-C6)-alkil, (C6Ci2)-arilszulfmil-(Ci-C6)-alkil, (C6-Ci2)-arilszulfonil-(Ci-C6)-alkil, (C7-Ci6)-aralkilmerkapto-(Ci-C6)-alkil, (C7-Ci6)-aralkilszulfmil-(Ci-C6)-alkil, (C7-Ci6)-aralkilszulfonil(Ci-C6)-alkil, szulfamoil, N-(Ci-Ci0)-alkilszulfamoil, N,N-di-(Ci-Cio)-alkilszulfamoil, (C3C8)-cikloalkilszulfamoil, N-(C6-Ci2)-arilszulfamoil, N-(C7-Ci6)-aralkilszulfamoil, N-(CiCio)-alkil-N-(C6-Ci2)-arilszulfamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C7-Ci6)-aralkilszulfamoil, (CiCio)-alkilszulfonamido, N-((Ci-Cio)-alkil)-(Ci-Cio)-alkilszulfonamido, (C7-Ci6)aralkilszulfonamido, és N-((Ci-Cio)-alkil-(C7-Ci6)-aralkilszulfonamido; ahol egy aril csoport 1-5 szubsztituenssel lehet szubsztituálva hidroxil, halogén, ciano, trifluorometil, nitro, karboxil, (C2-Cie)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8) *,
100578-14371
-14cikloalkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-Ci2)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8)cikloalkiloxi-(Ci-Ci2)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C8)-alkil-(Ci-C6)-alkoxi, (C3-C8)cikloalki(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkiloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkoxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkoxi, (Có-Ci2)-aril, (C7-Ci6)-aralkil, (C2-Ciö)alkenil, (C2-Ci2)-alkinil, (Ci-Ci6)-alkoxi, (Ci-Ci6)-alkeniloxi, (CrCi2)-alkoxi-(Ci-Ci2)alkil, (Ci-Ci2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxi, (Ci-Ci2)-alkoxi(C|-C8)-alkoxi-(C’i-C8)-alkil, (C6Ci2)-ariloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxi, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C6)-alkoxi, (C7-Ci6)-aralkoxi-(CiC6)-alkoxi, (Ci-C8)-hidroxialkil, (C6-Ci6)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci6)-aralkoxi-(Ci-C8)alkil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C7-Ci2)-aralkiloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(CiC6)-alkil, -O-[CH2]xCfH(2f+i-g)Fg, -OCF2C1, -OCF2-CHFC1, (Ci-Ci2)-alkilkarbonil, (C3C8)-cikloalkilkarbonil, (C6-Ci2)-arilkarbonil, (C7-Ci6)-aralkilkarbonil, (Ci-Ci2)alkoxikarbonil, (Ci-Ci2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxikarbonil, (C7-Ci6)aralkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkoxikarbonil, (C2-Ci2)-alkeniloxikarbonil, (C2-Ci2)alkiniloxikarbonil, (C6-C i2)-ariloxi-(C j-C6)-alkoxikarbonil, (C7-C16)-aralkoxi-(Ci -C6)alkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkoxi-(Ci-C6)alkoxikarbonil, (Ci-Ci2)-alkilkarboniloxi, (C3-C8)-cikloalkilkarboniloxi, (C6-Ci2)arilkarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkilkarboniloxi, cinnamoiloxi, (C2-Ci2)-alkenilkarboniloxi, (C2-C i2)-alkinilkarboniloxi, (Ci -Ci2)-alkoxikarboniloxi, (Ci -C] 2)-alkoxi-(C i -C i2)alkoxikarboniloxi, (C6-Ci2)-ariloxikarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxikarboniloxi, (C3-C8)cikloalkoxikarboniloxi, (C2-Ci2)-alkeniloxikarboniloxi, (C2-Ci2)-alkiniloxikarboniloxi, karbamoil, N-(Ci-C]2)-alkilkarbamoil, N,N-di(Ci-Ci2)-alkilkarbamoil, N-(C3-C8)cikloalkilkarbamoil, N,N-diciklo-(C3-C8)-alkilkarbamoil, N-(Ci -Cw)-alkil-N-(C3-C8)cikloalkilkarbamoil, N-((C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkil)karbamoil, N-(Ci-C6)-alkil-N((C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkil)karbamoil, N-(+)-dehidroabietilkarbamoil, N-(Ci-C6)alkil-N-(+)-dehidroabietilkarbamoil, N-(C6-Ci2)-arilkarbanioil, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C6-Ci6)-arilkarbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C7-Ci6)aralkilkarbamoil, N-((Ci-Ci6)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoil, N-((C6-Ci6)-ariloxi-(CiCio)-alkil)karbamoil, N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N((Ci-Cio)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-((C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-Cio)alkil)kaxbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Ci0)-alkil)-karbamoil, CON(CH2)h csoportok közül, amelyben egy CH2 csoport O, S atommal vagy N-(Ci-C8)alkilimino, N-(C3-C8)-cikloalkilimino, N-(C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C4)-alkilimino, N-(CóCi2)-arilimino, N-(C7-Ci6)-aralkilimino, N-(Ci-C4)-alkoxi-(Ci-C6)-alkilimino csoporttal lehet helyettesítve, és h értéke 3-7. bármely egész szám; karbamoiloxi, N-(Ci-Ci2) t
100578-14371
-15alkilkarbamoiloxi, N,N-di-(C i -C i2)-alkilkarbamoiloxi, N-(C3-C8)-cikloalkilkarbamoiloxi, N-(C6-Ci6)-arilkarbamoiloxi, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C6-Ci2)arilkarbamoiloxi, N-(C1-Cio)-alkil-N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoiloxi, N-((Ci-Cw)alkil)karbamoiloxi, N-((C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoiloxi, N-((C7-Ci6)aralkiloxi-(C i -C10)-alkil)karbamoiloxi, N-(C i-C10)-alkil-N-((C i -C io)-alkoxi-(C i-Cio)alkil)karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-Cio)-aIkil)karbamoiloxi, N(Ci-Cio)-alkil-N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoiloxi, amino, (Ci-Ci2)-alkilamino, di-(Ci-Ci2)-alkilamino, (C3-C8)-cikloalkilamino, (C3-Ci2)-alkenilamino, (C3-Ci2)alkinilamino, N-(C6-Ci2)-arilamino, N-(C7-Cn)-aralkilamino, N-alkil-aralkilamino, Nalkil-arilamino, (Ci-Ci2)-alkoxiamino, (Ci-Cl2)-alkoxi-N-(Ci-Cio)-alkilam (C1-C12)alkanoilamino, (C3-C8)-cikloalkanoilamino, (C6-Ci2)-aroilamino, (C7-Ci6)-aralkanoilamino, (C1 -C 12)-alkanoil-N-(Ci-C i0)-alkilamino, (C3-C8)-cikloalkanoil-N-(Ci -C 10)alkilamino,(C6-Ci2)-aroil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C7-Cn)-aralkanoil-N-(Ci-C10)-alkilamino, (Ci-Ci2)-alkanoilamino-(C]-C8)-alkil, (C3-C8)-cikloalkanoilamino-(Ci-C8)-alkil, (C6-Ci2)-aroilamino-(C3 - C 8) - alkil, (C7-Ci6)-aralkanoilamino-(C 1 -C8)-alkil, amino-(C i-C 10)alkil, N-(Ci-Cio)-alkilamino-(Ci-Cio)-alkil, N,N-di-(Ci-Cio)-alkilamino-(Ci-Cio)-alkil, (C3C8)-cikloalkilamino-(Ci-Cio)-alkil, (Ci-Ci2)-alkilmerkapto, (Ci-Ci2)-alkilszulfinil, (CiCi2)-alkilszulfonil, (C6-Ci6)-arilmerkapto, (C6-Ci6)-arilszulfinil, (C6-Ci6)-arilszulfonil, (C7Ci6)-aralkilmerkapto, (C7-Ci6)-aralkilszulfínil vagy (C7-Ci6)-aralkilszulfonil csoporttal lehet szubsztituálva;
vagy amennyiben R1 és R2, vagy R2 és R3 [CH2]0 láncot képez, amely telített vagy C-C kettőskötéseket tartalmaz és telítetlen, amelyben 1 vagy 2 CH2 csoport adott esetben O, S atommal vagy SO, SO2, vagy NR' csoporttal van helyettesítve, és R1 jelentése hidrogén, (C6-Ci2)-aril, (Ci-C8)-alkil, (Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci2)-aralkoxi-(Ci-C8)alkil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (Ci-Cio)-alkanoil, adott esetben (C7-Ci6)-aralkanoilszubsztituálva, vagy adott esetben (C6-Ci2)-aroil -szubsztituálva; és o értéke 3, 4 vagy 5;
vagy R1 és R2, vagy R2 és R3, az azokat hordozó piridinnel vagy piridazinnel együtt, 5,6,7,8-tetrahidroizokinolin, 5,6,7,8-tetrahidrokinolin vagy 5,6,7,8-tetrahidrocinnolin gyűrűt képez;
vagy R1 és R2, vagy R2 és R3 karbociklusos vagy heterociklusos 5- vagy 6-tagú aromás gyűrűt képez;
vagy R1 és R2, vagy R2 és R3, az azokat hordozó piridinnel vagy piridazinnel együtt, adott esetben szubsztituált tienopiridin, furanopiridin, piridopiridin, pimimidopiridin, imidazopiridin,m tiazopiridin, oxazolopiridin, kinolin, izokinolin vagy
100578-14371
-16cinnolin heterociklusos gyűrűrendszert képez, ahol kinolin, izokinolin vagy cinnolin előnyösen az (la), (Ib) vagy (Ic) általános képletű;
(W
és R12-R23 szubsztituensek egymástól függetlenül az R1, R2 □ , és R jelentésénél megadottak;
vagy R1 és R2, az azokat hordozó piridinnel együtt, az (Id) általános képletű vegyületet képez:
ahol V jelentése S, O atom vagy NRk, és Rk lehet hidrogén, (Ci-Cój-alkil-, arilvagy benzoilcsoport, ahol egy arilcsoport adott esetben 1-5 fentiekben megadott szubsztituenssel lehet szubsztituálva;
és
R24, R25, R26 és R27 jelentése egymástól függetlenül az R1, R2 és R3 esetében megadottak valamelyike;
f értéke 1-8. bármely egész szám;
g értéke 0 vagy 1-től (2f+l)-ig bármely egész szám, x értéke 0-3. bármely egész szám;
h értéke 3-7. bármely egész szám;
valamint azok fiziológiásán aktív sói és prodrogjai.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az (I) általános képletű vegyületek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők:
100578-14371
-17N-((6-(l-butiloxi)-3-hidroxikinolin-2-il)-karbonil)-glicin; N-((6-klór-3-hidroxikinolm-2il)-karbonil)-glicin; N-((3-hidroxi-6-(2-propiloxi)-kinolin-2-il)-karbonil)-glicin; és N-((7klór-3-hidroxikinolin-2-il)-karbonil)-glicin; [(3-metoxi-piridin-2-karbonil)-amino]-ecetsav; 3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((hexadeciloxi)-karbonil)-metil)-amid hidroklorid, 3metoxipiridin-2-karbonsav N-(((l -oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-metoxipiridin-2karbonsav N-(((hexiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((noniloxi)-karbonil)metil)-amid racemat, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((heptiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N-(((oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 5 -(((3-( l-butiloxi)-propil)-amino)karbonil)-3-metoxipiridin-2-karbonsav N-((benziloxikarbonil)-metil)-amid, 5-(((3-( 1 butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-metoxipiridin-2-karbonsav N-((( 1 -butiloxi)-karbonil)metil)-amid, 5-(((3-lauriloxi)-propil)amino)-karbonil)-3-metoxipiridin-2-karbonsav N(((benziloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3 -hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((hexadeciloxi)karbonil)-metil)-amid hidroklorid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((l-oktiloxi)-karbonil)metil)-amid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((hexiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3 -hidroxipiridin-2karbonsav N-(((2-noniloxi)-karbonil)-metil)-amid racemát, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((heptiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N-(((oktiloxi)karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)-metil)amid, 5-(((3-(1 -butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N((benziloxikarbonil)-metil)-amid, 5-(((3-(l-butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((l-butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, és 5-(((3-lauriloxi)propil)amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((benziloxi)-karbonil)-metil)amid. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, az (la) általános képletű vegyületek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, az alább felsoroltak: N-((6-(l -butiloxi)-3-hidroxikinolin-2-il)-karbonil)-glicin, N-((6-klór-3hidroxikinolin-2-il)-karbonil)-glicin, N-((3-hidroxi-6-(2-propiloxi)-kinolin-2-il)-karbonil)glicin, N-((7-klór-3-hidroxi-kinoline-2-karbonil)-ammo]-ecetsav, [(3-benziloxi-7-klórkinoline-2-karbonil)-amino]-ecetsav, [(3-hidroxi-6-izopropoxi-kinoline-2-karbonil)amino]-ecetsav, [(3-hidroxi-6-phenoxi-kinoline-2-karbonil)-amino]-ecetsav, és [(3-hidroxi6-trifluorometoxi-kinoline-2-karbonil)-amino]-ecetsav. A találmány egy még további előnyös megvalósítási módja szerint, az (Ib) általános képletű vegyület például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, az N-((l-klór-4-hidroxi-7-(2
100578-14371
-18propiloxi)izokinolin-3-il)-karbonil)-glicin, N-((7-bróm-4-hidroxi-izokinoline-3-karbonil)amino)-ecetsav, N-((l-klór-4-hidroxi-6-(2-propiloxi)izokinolin-3-il)-karbonil)-glicin, N((1 -klór-4-hidroxi-7-metoxiizokinolin-3-il)-karbonil)-glicin, N-((l-klór-4-hidroxi-6metoxiizokinolin-3-il)-karbonil)-gIicin, [(7-butoxi-1 -klór-4-hidroxi-izokinoline-3karbonil)-amino]-ecetsav, N-((7-benziloxi-l-klór-4-hidroxi-izokinolin-3-il)-karbonil)glicin, N-((6-benziloxi-1 -klór-4-hidroxiizokinolin-3-il)-karbonil)-glicin, [(1 -klór-4hidroxiizokinoline-3-karbonil)-amino]-ecetsav, N-((8-klór-4-hidroxi-izokinolin-3-il)karbonil)-glicin, és [(7-butoxi-4-hidroxi-izokinoline-3-karbonil)-amino]-ecetsav.
A találmány egy szempontja szerint, a találmány szerinti vegyület oly módon fokozza az endogén eritropoetin-plazmaszintet, hogy in vivo vagy ex vivo fokozza az eritropoetin-szintézisét a szövetekben, például vese- máj-, hemoatopoetikus és/vagy idegszövetekben. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület oly módon fokozza az eritropoetinszintézist, hogy gátolja a hipoxia által indukált faktor alfaalegységének (HIFa) hidroxileződését, ezáltal stabilizálja a HIF-faktort a sejtben. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület a HIF-laP564 aminosav, vagy más HIFa-izoformban található homológ prolin hidroxileződését gátolja. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a hatóanyag a HIF-laP402 aminosav, vagy más HIFa-izoformban található homológ prolin hidroxileződését gátolja. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület a HIFa aszparagin aminosavak hidroxileződését is gátolhatja. A találmány egy közelebbi előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület HIF-laNso3 aminosav, vagy más HIFa-izoformban található homolog aszparagin hidroxileződését gátolja.
Az említetteken felül, a találmány tárgyát eljárások képezik az endogén eritropoetin plazmaszintjét növelő vegyületek azonosítására, amelyekben a vegyületet például állatnak beadjuk, vagy tenyésztett sejtekhez adjuk, és mérjük az eritropoetinszintet a vérben vagy kondicionált tenyésztő tápközegben. Az EPO-szint növekedéséből a kezelt állatban vagy sejttenyésztő közegben a kezeletlen kontrolihoz képest az endogén EPOszintet növelő vegyületre következtetünk. Az eljárással az endogén eritropoetinszintet indirekt módon, a sejtekben a HIFa stabilizálásával növelő vegyületet is azonosíthatunk.
A találmány szerinti eljárások és vegyületek más terápiás eljárásokkal/vegyületekkel kombinálhatok. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyületet vaspótló készítménnyel, például vas-szulfáttal, B12-vitaminnal és/vagy folsawal együtt adjuk be. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a
100578-14371
-19vegyületet exogén eritropoetinnel, például rekombináns, humán eritropoetinnel és/vagy granulocita-kolónia stimuláló faktorral (G-CSF), például rekombináns G-CSF-faktorral együtt adjuk be.
A találmány fenti és egyéb előnyös megvalósítási módjai szakember számára nyilvánvalóak a leírás alapján, es azok szintén a találmány tárgyát képezik.
Az alábbiakban röviden ismertetjük a leíráshoz csatolt ábrákat.
Az 1. ábrán eritropoetin in vitro indukcióját mutatjuk be a találmány szerinti vegyülettel. Tenyésztett sejteket kezeltünk a vegyülettel a jelölt koncentrációban. Az ábrán hepatocelluláris karcinomából származó humán máj sejtek (Hep3B) válaszreakcióját szemléltetjük.
A 2.A, 2.B és 2.C ábrákon eritropoetin indukcióját, és a hematokritszint következményes emelkedését mutatjuk be a találmány szerinti vegyülettel kezelt állatokban. A 2.A ábrán eritropoetin-transzkriptum expresszióját ábrázoltuk az állatok májában és veséjében, miután azokat 3 napig hordozóanyag kontrollal (0 mg vegyület/testsúly-kg/nap) vagy a találmány szerinti vegyülettel kezeltük. A 2.B ábrán az eritropoetin-plazmaszinteket ábrázoltuk, a 2.C ábrán pedig a vér hematokritszintjét mutattuk be a 2.A ábrán szereplő állatoktól származó, az utolsó kezelést követően 4 órával levett vérmintákban.
A 3.A és 3.B ábrákon plazma eritropoetinszint növekedését és a hematokrit következményes emelkedését mutatjuk be a találmány szerinti készítménnyel kezelt állatokban. A 3.A ábrán a plazma eritropoetinszint növekedését ábrázoltuk a találmány szerinti vegyülettel végzett két napos kezelést követően. A 3.B ábrán a hematokrit emelkedését mutatjuk be 2 illetve 7 nappal a találmány szerinti különböző vegyületekkel végzett kezelést követően.
A 4.A, 4.B, 4.C és 4.D ábrákon a szérum eritropoetinszint, a keringő vérben található retikulocitaszám, és a hematokrit változását szemléltetjük az állatokban a találmány szerinti vegyület különböző dózisaival végzett kezelést követően.
Az 5.A és 5.B ábrán a szérum eritropoetinszint, a keringő vérben található retikulocitaszám változását szemléltetjük egyetlen dózis cisplatinnal, majd a találmány szerinti vegyülettel kezelt állatokban.
A 6.A, 6.B és 6.C ábrákon eritropoetin-transzkriptumok expresszióját mutatjuk be a találmány szerinti vegyülettel kezelt állatok agyában, májában és veséjében.
A 7. ábrán az endogén eritropoetinszint növekedését ábrázoltuk kísérletes célból műtött és kétoldali veseeltávolításnak alávetett, a találmány szerinti vegyülettel kezelt álla
100578-14371
-20tokban, összehasonlítva a kezeletlen BN- (kétoldali veseeltávolításnak alávetett) és placebo műtött kontrollokkal.
Az alábbiakban összefoglaljuk a találmány szerinti megoldást
Mielőtt a találmány szerinti készítményeket és eljárásokat ismertetnénk, hangsúlyozzuk, hogy a találmány nem korlátozódik a leírásban ismertetett meghatározott eljárásokra, protokollokra, sejtvonalak, tesztek és reagensek alkalmazására, hanem azok a leírásban szereplőktől eltérőek is lehetnek. Ugyancsak nyilvánvaló, hogy a leírásban alkalmazott kifejezések a találmány előnyös megvalósítási módjainak szemléltetésére szolgálnak, és nem korlátozó érvényűek a találmány oltalmi köre vagy a csatolt igénypontok vonatkozásában.
Megjegyzendő, hogy a leírásban és csatolt igényekben az „egy” „a” névelő használata, hacsak kifejezetten másképp nem kötjük ki, a többes számú formákra értendő. A „fragmentum” kifejezés például vonatkozik több ilyen fragmentumra is, és az „ellenanyag” kifejezésen egy vagy több ellenanyag, valamint azok szakember számára ismert egyenértékű változatai is értendők, stb.
Hacsak kifejezetten másképp nem kötjük ki, a leírásban használt szakkifejezéseket szakember számára ismert értelemben használjuk. Bár a találmány gyakorlatba vétele vagy tesztelése során hasonló vagy egyenértékű eljárások és anyagok is használhatók, az alábbiakban a találmány előnyös megvalósítási módjai szerint alkalmazható eszközöket, anyagokat és eljárásokat ismertetünk. A leírásban idézett szakirodalmi hivatkozások teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik, mintha azokat teljes egészükben közöltük volna az azokban szereplő, a találmány szerinti megoldással összhangban alkalmazható eljárások, reagensek és eszközök szemléltetésére. A leírásban szereplő semmilyen információ nem értelmezhető annak beismeréseként, hogy a találmány feltárásához nem járulhat hozzá egy ilyen korábbi kitanítás amiatt, hogy az korábbi találmány része.
A találmány gyakorlatba vétele során, hacsak kifejezetten másképp nem kötjük ki, szakember számára ismert szokásos kémiai, biokémiai, molekuláris biológiai, sejtbiológiai, genetikai, immunológiai és gyógyszertani eljárásokat alkalmazunk. Ilyen technológiák részletes leírása megtalálható a szakirodalomban. [Lásd például Gennaro A.R. (szerk.): „Remington Pharmaceutical Sciences”, 18. kiadás, Mack Publishing Co.; Colowick S. és mtsai.: „Methods in Enzymology”, Academic Press, Inc.; „Handbook of Experimental Immunology”, I-IV. kötet (Weir D.M. és Blackwell C.C. (szerk.), Blackwell Scientific Publications (1986); Maniatis T. (szerk.): „Molecular Cloning, A Laboratory Manual”, 2. kiadás, I-III. kötet, Cold Spring Harbor Laboratory Press (1989); Ausubel F.M. és mtsai.:
100578-14371 -21' „Short Protocols in Molecular Biology”, 4. kiadás, John Wiley & Sons, Inc. (1999); Ream és mtsai.: „Molecular Biology Technoques: An Intensive Laboratory Course”, Academic Press (1998); PCR (Introduction to Biotechniques Series), 2. kiadás, Newton & Graham, (szerk.) Springer Verlag (1997).
A leírásban alkalmazott kifejezések könnyebb értelmezhetősége kedvéért a következő meghatározásokat adjuk meg.
A leírás szerinti értelemben „anémián” a hemoglobin vagy eritrocitaszám rendellenességeit értjük, amelyek a vér oxigénszintjének csökkenéséhez vezetnek. Anémia aszszociálódhat az eritrociták és/vagy hemoglobin rendellenes termelődésével, érésével vagy minőségével. Az anémia kifejezés vonatkozik a vörösvértestek számának csökkenésére és/vagy a hemoglobinszint csökkenésére a vérben kimutatható normális szintekhez képest.
Anémiát okozhatnak különböző állapotok, például akut vagy krónikus vesebetegségek, fertőzések, gyulladások, tumorok, toxinok, diabétesz vagy sebészeti beavatkozások. A fertőzés lehet például vírusos, bakteriális és/vagy parazitás fertőzés, stb. A gyulladás oka lehet fertőzés, autoimmun rendellenesség, például reumatoid artritisz, stb. Anémia járhat továbbá vérveszteséggel, például gyomorfekély, duodenális fekély, aranyér, a gyomorvagy vastagbéltumoros betegsége, trauma, sérülés, sebészeti beavatkozás, stb. következtében. Anémia asszociálódhat sugárkezeléssel, kemoterápiával, vesedialízissel. Anémia előfordulhat HIV-fertőzött, azidotimidinnel (zidovudinnal) vagy más reverz transzkriptáz inhibitorral kezelt betegeknél, és például ciklikus cisplatinnal vagy nem cisplatin tartalmú kemoterápiás szerrel kezelt rákos betegeknél. Az aplasztikus anémia és myelodisplasiás szindróma a csontvelő rendellenes működésével kapcsolatos, és szintén az eritrociták csökkent termelődéséhez vezethet. Ezen felül, anémiát okozhat a hemoglobin vagy eritrociták defektív vagy rendellenes termelődése, például mikrocitás anémiában, hipochrom anémiában, stb. További lehetőség szerint, az anémiát a vastranszporttal, a vas átalakításával vagy a vasfelhasználással kapcsolatos rendellenesség okozza, például sideroblastos anémiában, stb.
A leírás szerinti értelemben a „rendellenesség”, „betegség” vagy „állapot” kifejezéseket egymással felcserélhető módon használjuk bármely, a normálistól eltérő állapotra / formára vonatkoztatva.
Az „anémiás állapot” és „anémiás rendellenesség” kifejezések bármely vérszegénységgel járó állapotra, betegségre vagy rendellenességre vonatkoznak. Ilyen rendellenességek, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a fentiekben felsoroltak. Ezen felül, anémiás rendellenességek például, de anélkül, hogy igényünket a
100578-14371
-22felsoroltakra korlátoznánk, aplasztikus anémia, autoimmun hemolitikus anémia, csontvelőtranszplantációt kísérő anémia, Churg-Strauss szindróma, Diamond Blackfan anémia, Fanconi anémia, Felty szindróma, „graft versus host” betegség, hematopoetikus őssejtek transzplantációját kísérő anémia, hemolitikus urémiás szindróma, myelodysplasiás szindróma, noctumális paroxizmális hemoglobinuria, osteomyelofibrosis, pancytopenia, csak a vörösvértestek termelődésére vonatkozó aplázia, Schoenlein-Henoch szideroblasztos anémia, blasztos sejtek feleslegével járó refrakter anémia, reumatoid artritisz, Schwachman szindróma, sarlósejtes betegség, thalassemia major, thalassemia minor, trombocitopeniás purpura, stb.
„Eritropoetin-asszociált állapoton” értünk bármely állapotot, amely az eritropoetinszint normális alatti, rendellenes vagy elégtelen szabályozásával jár. Eritropoetinasszociált állapoton értünk bármely állapotot, amelyben az EPO-szint növelése terápiás hatású. Az ilyen állapotokban tapasztalható eritropoetinszinteket szakember számára ismert és szokásosan alkalmazott eljárásokkal mérhetjük. Eritropoetin-asszociált állapotok például a fentiekben felsorolt anémiás állapotok.
Eritropoetin-asszociált állapoton értünk továbbá neurológiai rendellenességeket és/vagy sérüléseket, például a következőket: stroke, trauma, epilepszia vagy neurodegeneratív betegségek, stb., ahol eritropoetin adagolása neuroporotektív hatású lehet. A leírás szerinti értelemben neurodegeneratív betegségek például az Alzheimer betegség, Parkinson betegség, Huntington betegség, és hasonlók.
Eritropoetinen értünk rekombináns vagy természetben előforduló eritropoetineket, például humán eritropoetint [GenBank nyilvántartási szám: AAA52400; Lin és mtsai.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82, 7580 (1985)], EPOETIN humán rekombináns eritropoetint (Amgen, Inc., Thousnad Oaks CA); ARANESP humán rekombináns eritropoetint (Amgen), PROCRIT humán rekombináns eritropoetint (Ortho Biotech Products, L.P., Raritan NJ), stb.
A leírás szerinti értelemben „HIFa” faktoron a hipoxia által indukált faktor alfaalegységét (HIFa) értjük A HIFa lehet humán vagy állati eredetű protein, vagy annak fragmentuma, ezen belül humán HIF-Ια (GenBank nyilvántartási szám: Q16665), HIF-2a (GenBank nyilvántartási szám: AAB41495) vagy HIF-3a (GenBank nyilvántartási szám: AAD22668); egér HIF-Ια (GenBank nyilvántartási szám: Q61221), HIF-2a (GenBank nyilvántartási szám: BAA20130 és AAB41496), és HIF-3a (GenBank nyilvántartási szám: AAC72734), patkány HIF-Ια (GenBank nyilvántartási szám: CAA70701), HIF-2a
100578-14371 (GenBank nyilvántartási szám: CAB96612), és HIF-3a (GenBank nyilvántartási szám: CAB96611) vagy szarvasmarha HIF-la (GenBank nyilvántartási szám: BAA78675). A HIF-lcc lehet továbbá nem emlős protein vagy annak fragmentuma is, például Xenopus laevis HIF-la (GenBank nyilvántartási szám: CAB96628), Drosophila melanogaster HIFla (GenBank nyilvántartási szám: JC4851) vagy csirke HIF-la (GenBank nyilvántartási szám: BAA34234). HIF-la-génszekvenciákat szokásos klónozó technológiákkal kaphatunk, például a fent ismertetett HIF-la-génszekvencia egészének vagy részének próbaként történő felhasználásával, ezáltal más fajokból kinyerhetjük és meghatározhatjuk a HIFa génszekvenciáj át.
A HIFa fragmentumán értjük a protein bármely, annak legalább egy funkcionális vagy strukturális jellemzőjét megtartó fragmentumait. HIFa ilyen fragmentuma lehet például a humán HIF-la 401-603. aminosavait magában foglaló régió [Huang és mtsai.: lásd fent], 531-575. aminosavait magában foglaló régió [Jiang és mtsai.: J. Biol. Chem. 272, 19 253 (1997)], 556-575. aminosavait magában foglaló régió [Tanimoto és mtsai.: lásd fent], 557-571. aminosavait magában foglaló régió [Srinivas és mtsai.: Biochem Biophys. Rés. Commun. 260, 557 (1999)], vagy 556-575. aminosavait magában foglaló régió [Ivan és Kaelin: Science 292, 464 (2001)]. Ezen felül, HIFa-fragmentum lehet az LXXLAP elemet, például a HIF-la natív szekvenciájában előforduló L397TLLAP és L559EMLAP elemet legalább egy példányban tartalmazó fragmentum. Például, a 9. példában ismertetett szűrővizsgálatban alkalmazott HIF-peptid tartalmazhatja a [metoxikumarin]DLDLEAÉAPYIPADDDFQL-AMID (5. azonosítószámú szekvencia) szekvenciát.
A leírás szerinti értelemben, HIFa-polipeptid vagy annak fragmentuma vonatkozásában „aminosav-szekvencián” vagy „polipeptiden” oligopeptid-, peptid- vagy proteinszekvenciát értünk, vagy azok fragmentumát értjük; a kifejezés vonatkozik természetben előforduló és szintetikus molekulákra. A leírás szerinti értelemben „fragmentumon” annak egy, a protein legalább egy strukturális vagy funkcionális jellemzőjét megtartó részét értjük. Immunogén fragmentumok vagy antigénfragmentumokon a polipeptid fragmentumait, előnyösen annak körülbelül öt-tizenöt aminosav hosszúságú fragmentumait értjük, amely a polipeptid legalább egy biológiai vagy immunológiai aktivitását megtartja. „Aminosavszekvencián” természetben előforduló proteinmolekula polipeptid-szekvenciáját értjük; az aminosav-szekvencia és hasonló kifejezések nem korlátozódnak az adott proteinmolekula teljes natív szekvenciájára.
100578-14371
A leírásban, például a HIFa prolii hidroxilázzal rokon proteinek vonatkozásában használt „rokon proteinek” kifejezést más 2-oxoglutarát dioxigenáz enzimekre, közelebbről, a hidroláz aktivitás fenntartásához szintén Fe2+ és oxigén jelenlétét igénylő enzimcsalád tagjaira vonatkoztatva használjuk. Ilyen enzimek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: prokollagén lizil hidroxiláz, prokollagén prolii 4-hidroxiláz, és HIF-gátló faktor (FIH), egy, a HIFa transzaktivációját szabályozó aszparagil hidroxiláz (GenBank nyilvántartási szám: AAL27308; Mahon és mtsai.: Genes Dev. 15, 2675 (2001); Lando és mtsai.: Science 295, 858 (2002); Lando és mtsai.: Genes Dev. 16, 1466 (2002). Lásd még Elkins és mtsai.: J. Biol. Chern. C200644200 (2002), stb.
A leírás szerinti értelemben „HIF prolii hidroxiláz” és „HIF PH” kifejezéseken a HIF-protein prolin aminosavának hidroxilezésére képes enzimet értünk. Előnyösen, A HIF PH által hidroxilezett prolin aminosav az LXXLAP elemen belül található prolin, például a humán HIF-la natív szekvenciájának L397TLLAP és L559EMLAP szekvenciájában található prolin. A HIF PH magában foglalja az Egl-Nine (EGLN) géncsalád tagjait [lásd Taylor: Gene 275, 125 (2001); az Aravind és Koonin által jellemzett enzimeket [Genome Bioi. 2, Research 0007 (2001)], Epstein és mtsai. által leírt enzimeket [Cell 107, 43 (2001)], valamint Bruick és McKnight [ Science 294, 1337 (2001)] által leírt enzimeket. HIF PH-enzimek például a humán SM-20 (EGLN1) (GenBank nyilvántartási szám: AAG33965; Dupuy és mtsai.: Genomics 69, 348 (2000); EGLN2 izoform-1 [GenBank nyilvántartási szám: CAC42510; Taylor: lásd fent]; EGLN2 izoform-2 [GenBank nyilvántartási szám: NP_060025) és EGLN3 (GenBank nyilvántartási szám: CAC42511; Taylor: lásd fent]; egér EGLN1 (GenBank nyilvántartási szám: CAC42515); EGLN2 (GenBank nyilvántartási szám: CAC42511); valamint EGLN3 (SM-20) (GenBank nyilvántartási szám: CAC42517) valamint patkány SM-20 (GenBank nyilvántartási szám: AAA19321). A HIF PH-enzimek közé soroljuk még a következőket: Caenorhabditis elegáns EGL-9 (GenBank nyilvántartási szám: AAD56365); Drosophila melanogaster CGI 114 géntermék (GenBank nyilvántartási szám: AAF52050). A HIF PH magában foglalja a fenti teljes hosszúságú protein legalább egy strukturális vagy funkcionális jellemzőt megtartott fragmentumait.
A leírás szerinti értelemben „agonistán” adott molekula hatását fokozó vagy elnyújtó molekulát értünk. Az agonista lehet protein, nukleinsav, szénhidrát, vagy bármely más, a célmolekula hatását (hatásait) fokozó molekula.
100578-14371
-25„Antagonistán” adott molekula biológiai vagy immunológiai aktivitásának mértékét vagy hatástartamát csökkentő molekulát értünk. Antagonista lehet protein, nukleinsav, szénhidrát, ellenanyag, vagy bármely más, a célmolekula hatását (hatásait) csökkentő molekula.
A leírás szerinti értelemben „mikroarray-n” nukleinsavak, aminosavak, ellenanyagok, stb. sorozatát értjük szubsztráton fixálva. A szubsztrát bármilyen hordozó lehet, például szemcse, papír, nitrocellulóz, nylon, vagy bármely más megfelelő membrán, stb. A szubsztrát lehet merev, félmerev hordozó, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, membrán, filter, ostya, lapka („chip”), tárgylemez, rost, szemcse, például mágneses vagy nem mágneses szemcse, gél, cső, lemez, polimer, mikrorészecske, kapilláris, stb. A szubsztrát bevonható felszínnel rendelkezhet, és/vagy felszíne különböző formájú lehet, például lyuk, pálca, vájat, csatorna, pórus, amelyhez nukleinsavak, aminosavak stb. köthetők.
A leírás szerinti értelemben „kötőanyagon” gyógyászati készítmények vagy más tabletták előállítására alkalmazott inert vagy inaktív komponenst értünk, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, kötőanyagként, dezintegráló anyagként, bevonatként, tömörítő/kapszulázó segédanyagként, krémként vagy lotionként, síkosítóként, parenterális vivőanyagként, édesítő- vagy ízesítőszerként, szuszpendáló/gélesítő vagy nedves szemcsésítő anyagként alkalmazott komponenseket. A kötőanyag lehet például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, karbopol, povidone, xantángumi, stb.; a bevonat lehet például cellulóz-acetát, ftalát-etilcellulóz, gellán, maltodextrin, stb.; a tömörítő/kapszulázó segédanyag lehet például kalcium-karbonát, dextróz, fruktóz, méz, laktóz (anhidrát vagy monohidrát; adott esetben aszpartámmal, cellulózzal vagy mikrokristályos cellulózzal kombinálva), keményítő, szacharóz, stb.; dezintegráló szerként alkalmazhatunk például nátrium-kroszkarmellózt, gellánt, nátrium keményítő glikolátot, stb.; krémekben és lotionokban alkalmazhatunk például maltodextrint, karragént, stb.; síkosítóként alkalmazhatunk például magnézium-sztearátot, sztearinsavat, nátrium-sztearilfumarátot, stb.; rágótablettákban alkalmazhatunk dextrózt, fruktózt, laktózt (anhidrátot vagy monohidrátot; adott esetben aszpartámmal vagy cellulózzal kombinálva); parenterális úton adagolandó készítményekben alkalmazhatunk mannitolt, povidont, stb.; lágyítószerként alkalmazhatunk például dibutil-sebacátot, polivinil-acetát-ftalátot, stb.; szuszpendáló/gélesítő szerként alkalmazhatunk például karragént, nátrium keményítő glikolátot, xantángumit,stb.; édesítőszerként alkalmazhatunk például aszpartámot, dextrózt, fruktózt,
100578-14371
-26szorbitot szacharózt, stb.; nedves szemcsesitoszerkent alkalmazhatunk például kalciumkarbonátot, maltodextrint, mikrokristályos cellulózt, stb.
A leírás szerinti értelemben „telítő dózison” a kezdetben adagolt egy vagy több dózist értjük, amellyel a kívánt farmakológiái szintet gyorsan el kívánjuk emi. Például, a találmány szerinti eljárással összefüggésben a telítő dózis a kezdeti adagolási rendre vonatkozik, amely gyorsan növeli, például a találmány szerinti vegyület plazmakoncentrációját a farmakológiailag aktív szintre.
A leírás szerinti értelemben „indukciós dózison” a kívánt fiziológiás válasz elérésére kezdetben adagolt, ismétlődő dózisokat értünk. Például, a találmány szerinti eljárással összhangban, indukciós dózison kezdeti adagolási rendet értünk, amely a hematokrit- vagy hemoglobinszintet gyorsan a kívánt tartományon belüli értékre növeli, amely lehet a normális hematokrít-/hemoglobinszinten, vagy az alatt vagy felett.
A leírás szerinti értelemben a „minta” kifejezést a lehető legtágabb értelemben használjuk. Minta bármely forrásból származhat, például testfolyadékokból, például szekrétumokból, szövetekből, sejtekből vagy tenyészett sejtekből, az lehet például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, nyál, vér, vizelet, szérum, plazma, üvegtest, szinoviális folyadék, liquor, amnionfolyadék, származhat szervekből (például biopsziás szövetmintából); kromoszómákból, organellumokból, vagy más, sejtekből izolált membránokból; a minta lehet genomi DNS, cDNS, RNS, mRNS, stb.; származhat tisztított sejtekből vagy szövetekből; vagy lehet ilyen sejtek, szövetek blotja vagy lenyomata. Minta bármely forrásból származhat, például humán egyénből, nem humán emlősből, stb. Ugyancsak a találmány tárgykörébe tartoznak betegséget utánzó állatmodellből származó minták. A minta lehet oldatban, vagy például fixált, vagy szubsztráthoz kötött formában. A minta kifejezés vonatkozhat bármely eritropoetin vagy HIFa vagy azok fragmentuma jelenlétének tesztelésre alkalmas anyagra; vagy endogén eritropoetinszintet vagy HIFa-szintet vagy azok fragmentumának szintjét növelő molekulák jelenlétére történő szűrésre érdemes anyagra. Ilyen minták levételének módja szakember számára ismert.
Az „egyed” kifejezést a lehető legtágabb értelemben használjuk. Az „egyed” lehet izolált, prokriota vagy eukariota sejt, vagy tenyészetben növekvő szövet. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az egyed állat, közelebbről emlős, például patkány, nyúl, marha, juh, sertés, kutya, macska, egér, ló, vagy főemlős, közelebbről ember.
Szintén a találmány tárgyát képezik eljárások endogén eritropoetinszint (EPO) növelésére. Az eljárást alkalmazhatjuk in vivo, például vérplazmában, vagy in vitro, például kondicionált sejttenyésző tápközegben. Ugyancsak a találmány tárgyát képezik eljárások
100578-14371
-27endogén EPO-szint növelésére, EPO-asszociált állapotok, például anémiával vagy neurológiai rendellenességekkel kapcsolatos állapotok megelőzésére, előkezelésére vagy kezelésére. Anémiával járó állapotok például a következők: akut vagy krónikus vesebetegség, diabétesz, tumor, fekély, vírusfertőzés, például HIV-fertőzés, bakteriális vagy parazitafertőzés; gyulladás, stb. Az anémia összefüggésben lehet különböző eljárások vagy kezelések alkalmazásával, például sugárterápiával, kemoterápiával, dialízissel vagy sebészeti beavatkozással. A már említetteken felül, anémiát okozhat a hemoglobin és/vagy eritrociták rendellenessége, például mikrocitás anémiában, hipochrom anémiában, aplastikus anémiában, stb.
A találmány szerinti eljárás alkalmazható endogén eritropoetinszint növelésére bizonyos kezeléseknek vagy eljárásoknak alávetett egyénekben, profilaktikusan vagy az egyéb kezeléssel párhuzamosan, például HIV-fertőzött, azidotimidinnel (zidovudinnal) vagy más reverz transzkriptáz inhibitorral kezelt betegeknél; például ciklikus cisplatinnal vagy nem cisplatin tartalmú kemoterápiás szerrel kezelt rákos betegeknél; vagy sebészeti beavatkozás előtt álló betegeknél. Az EPO-szintet növelő eljárást idegkárosodással vagy idegrendszeri szövet degnerációval járó EPO-asszociált állapotok megelőzésére, előkezelésére vagy kezelésére is alkalmazhatjuk, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, stroke, trauma, epilepszia, gerincvelői károsodás vagy neurodegeneratív betegségek kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére.
Ezeken felül, az eljárások alkalmazhatók endogén eritropoetinszint növelésére sebészeti beavatkozás előtt álló anémiás vagy nem anémiás betegeknél, csökkentve az igényt allogén vér transzfuziójára, vagy megkönnyítve a vér bankolásának lehetőségét a sebészeti beavatkozás előtt. A sebészeti beavatkozás előtt alkalmazott allogén vértranszfuziót követően tipikusan jelentkező kismértékű hematokritcsökkenés nem váltja ki az endogén EPOszint növekedését, vagy az eritropoezis kompenzatorikus fokozódását. Az endogén EPOszint preoperatív növelése azonban magasabb hematokritszint fenntartása mellett, hatékonyan növelné az eritrocitatömeget és a rendelkezésre álló autológ vérmennyiséget, és ilyen eljárások szintén a találmány tárgykörébe tartoznak. Bizonyos sebészeti beavatkozásoknál, különösen olyan egyéneknél, akik a beavatkozás során 2 liternél több vért vesztettek, a találmány szerinti eljárások alkalmazhatók a szükséges allogén vértranszfúzió mennyiségének csökkentésére. [Crosby: Amer. J. Therap. 9, 371 (2002)].
Az eljárás alkalmazható még sportteljesítmény növelésére, javítva a fizikai teljesítményt és az oxigénellátottságot. Ilyen eljárások alkalmazhatók például atlétáknál az edzések megkönnyítésére, vagy katonáknál, például az állóképesség és kitartás növelésére.
100578-14371
-28A találmány szerinti eljárások bizonyítottan növelik az eritropoetinszintet in vitro kezelt, tenyésztett sejtek tápközegében, és in vivo kezelt állatok plazmájában. Bár a szervezetben az eritropoetin elsősorban a veséből származik, megfelelő stimuláció hatására más szervek, például az agy, máj, és csontvelő is szintetizálhatnak eritropoetint. A találmány szerinti eljárások alkalmazásával az endogén eritropoetinszintézis növelhető a test különböző szerveiben, például az agyban, májban vagy csontvelőben. A találmány szerinti eljárások akár kétoldali veseeltávolításon átesett állatokban is képesek az endogén eritropoetinszint növelésére.
A találmány szerinti eljárás károsodott veseműködés esetén is alkalmas az eritropoetinszint növelésére. Bár a találmány szerinti megoldás nem korlátozódik az eritropoetin-termelés növelésére, a vesemüködési zavar esetén tipikusan megfigyelhető csökkent eritropoetin-szekréció oka lehet a veseszövet megnövekedett átáramlása/reperfüziója következtében fellépő hiperoxiája [Priyadarshi és mtsai.: Kidney Int. 61, 542 (2002)].
A találmány szerinti eljárás alkalmas továbbá a hematokrit és vér hemoglobinszint növelésére in vivo kezelt állatokban. A plazma EPO-szint, hematokrit és vér hemoglobinszint dózisfuggő módon emelkedik a találmány szerinti eljárásban alkalmazott hatóanyagok hatására; megállapíthatók azonban olyan adagolási rendek, amelyekkel a fenti paraméterek állandó, szabályozott szinten tarthatók. A találmány szerinti vegyületekkel végzett kezelés előnyösen befolyásolhatja például a toxikus vegyületek által, például a cisplatin elnevezésű kemoterápiás szer kiváltott anémiát, vagy vérveszteség, például trauma, sérülés, parazitafertőzés vagy sebészeti beavatkozás által kiváltott anémiát.
A találmány szerinti vegyületekkel kezelt állatokban megfigyelhető hematokrit- és vér hemoglobinszint emelkedést a vérben az éretlen vörösvértestek (retikulociták) százalékos arányának növekedése előzi meg. Ennek megfelelően, szintén a találmány tárgyát képezi a találmány szerinti vegyületek alkalmazása a retikulociták arányának növelésére az állatok vérében, sejtmentes retikulocita-lizátumok előállítása céljából [lásd például Pelham és Jackson: Eur. J. Biochem. 67, 247 (1976)]. A találmány szerinti vegyületekkel történő kezelés - egymagában vagy más hatóanyagokkal, például acetilfenilhidrazinnal, stb. kombinálva - növeli retikulociták arányát a keringésben, például nyulaknál, stb. A vért leveszszük, és a retikulocitákat centrifugálással ülepítjük, majd desztillált vízzel lizáljuk. Az extraktumok szakember számára ismert eljárásokkal feldolgozhatok [lásd Jackson és Hunt: Methods Enzymol. 96, 50 (1983)].
100578-14371
-29Α fentieken felül, a találmány tárgyát képezik eljárások a vastranszport, vasátalakítás vagy a vasfelhasználás javítására (lásd jelen bejelentők számú, függőben lévő, „Stabilization of Hypoxia Inducible Factor (HIF) Alpha” című, jelen bejelentéssel egyidejűleg bejelentett amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentését, amely teljes terjedelmében a kitanítás részét képezi.) Közelebbről, a találmány szerinti eljárás alkalmas a vasfelvétellel, vastranszporttal vagy vasfeldolgozással kapcsolatos enzimek és proteinek aktivitásának növelésére. Ilyen enzimek és proteinek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: transzferrin és transzferrinreceptor, amelyek együttesen a vastranszportot és vasfelvételt segítik elő például az eritroid szövetekbe; a cöruloplazmin, amely a ferro vas ferri formába történő oxidálásához szükséges ferroxidáz. Mivel a traszferrin csak a ferri vasat képes megkötni és szállítani, a cöruloplazmin fontos a szövetek vasellátása szempontjából. Tekintve, hogy a találmány szerinti eljárással végzett kezelés mind az endogén eritropoetinszintet, mind a vastranszportot és vasfelhasználást képes javítani, annak alkalmazása előnyökkel jár a jelenleg anémia kezelésére alkalmazott terápiás eljárásokhoz, például a rekombináns eritropoetin adagolásához képest az anémiás rendellenességek, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, reumatoid artritisz, szideroblasztos anémia, stb. kezelésében.
Bár a találmány szerinti megoldás nem korlátozódik az eritropoetin-termelés indukálására, a találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület a hipoxia által indukált HIF faktor alfa-alegysége (HIFa) hidroxileződésének gátlásával növeli az endogén eritropoetinszintet. Közelebbről, a vegyület HIFa-protein aminosavainak, például HIF1αΡ564 aminosav, vagy más HIFa-izoformban található homológ prolin hidroxileződését gátolja; vagy a HIF-laP402 aminosav, vagy más HIFa-izoformban található homológ prolin hidroxileződését gátolja. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület a HIFa-proteinben található aszparagin aminosavak hidroxileződését gátolja, például a HIF-laN8o3 aminosav, vagy más HIFa-izoformban található homológ aszparagin hidroxileződését gátolja.
Mivel a HIFa hidroxilezéssel módosított, ami Fe2+és oxigén jelenlétét igénylő reakció, a találmány egy szempontja szerint a HIFa hodroxileződéséért felelős enzimet a 2oxoglutarát dioxigenáz család tagjának tartjuk. Ilyen enzimek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: prokollagén lizil hidroxiláz, prokollagén prolii 3-hidroxiláz prokollagén prolii 4-hidroxiláz a(I) és a(II), timidin 7hidroxiláz, aszpartil (aszparagil) β-hidroxiláz, ε-Ν-trimetillizin hidroxiláz, γ-butirobetain
100578-14371 -3°hidroxiláz, stb. Ezek az enzimek oxigén, Fe2+ és aszkorbinsav jelenlétét igénylik a hidroxiláz aktivitás kifejtéséhez [lásd például Majamaa és mtsai.: Biochem. J. 229, 127 (1985); Myllyharju és Kivirikko: EMBO J. 16, 1173 (1977); Thornburg és mtsai.: 32, 14 023 (1993); valamint Jia és mtsai.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91, 7227 (1994).
A prolii 4-hidroxiláz néhány kis méretű molekulájú inhibitorát azonosították [lásd például Majamaa és mtsai.: lásd fent; Kivirikko és Myllyharju: Matrix Bioi. 16, 357 (1998); Hepatology 28, 404 (1998); Friedman és mtsai.: Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, 4736 (2000); valamint Franklin és mtsai.: Biochem. J. 353, 333 (2001)]. A fenti hatóanyagok alkalmazása a találmány szerinti eljárásokban szintén a találmány tárgykörébe tartozik.
A találmány szerinti eljárásokban alkalmazható vegyületek például a 2oxoglutarát strukturális mimetikumai. Ilyen vegyületek a 2-oxoglutarát dioxigenáz család tagjainak aktivitását kompetitív módon gátolhatják 2-oxoglutarát vonatkozásában, és nem kompetitív módon vas vonatkozásában [Majamaa és mtsai.: Eur. J. Biochem. 138. 239 (1984); valamint Majamaa és mtsai.: lásd fent].
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti eljárásban az (I) általános képletű vegyületet alkalmazzuk:
0) ahol:
A jelentése 1,2-arilidén, 1,3-arilidén, 1,4-arilidén; vagy (C|-C4)-alkilén, amely adott esetben az alábbiak közül eggyel vagy kettővel szubsztituált: halogén-, ciano-, nitro-, trifluormetil-, (Cj-Cej-alkil-, (Ci-Cój-hidroxialkil-, (Ci-Cőj-alkoxi-csoport, -O-[CH2]XCfH(2f+i-g)Halg-csoport, (Ci-Có)-fluoralkoxi-, (Ci-Csj-fluoralkeniloxi-, (C|-C8)fluoralkiniloxi-, -OCF2C1- vagy -O-CF2-CHFCl-csoport; (Ci-C6)-alkilmerkapto-, (Ci-C6)alkilszulfinil-, (Ci-Cöj-alkilszulfonil-, (Ci-C6)-alkilkarbonil-, (Ci-Cőj-alkoxikarbonil-, karbamoil-, N-(Ci-C4)-alkilkarbamoil-, N,N-di-(Ci-C4)-alkilkarbamoil-, (Ci-C6)alkilkarboniloxi-, (C3-C8)-cikloalkil-, fenil-, benzil-, fenoxi-, beniloxi-, anilino-, Nmezilanilino-, fenilmerkapto-, fenilszulfonil-, fenilszulfínil-, szulfamoil-, N-(Ci-C4)
100578-14371 -31alkilszulfamoil-, N,N-di-(Ci-C4)-alkilszulfamoil-csoport; vagy szubsztituált (C6-Ci2)ariloxi-, (C7-Cn)-aralkiloxi-, (C6-Ci2)-aril-, (C7-Cn)-aralkil-csoport, amely az aril egységben egy-öt azonos vagy különböző szubsztituenst hordoz az alábbiak közül: halogén, ciano, nitro, trifluormetil, (Cli-C6)-alkil, (Cli-C6)-alkoxi, -O-[CH2]x-CfH(2f+i.g)Halg, OCF2C1, -O-CF2-CHFC1; (Ci-Céj-alkilmerkapto, (Ci-Cej-alkilszulfmil, (Ci-C6)-alkilszulfonil, (Ci-Cój-alkilkarbonil, (Ci-Cej-alkoxikarbonil, karbamoil, N-(Ci-C4)alkilkarbamoil, N,N-di-(Ci-C4)-alkilkarbamoil, (Ci-Cój-alkilkarboniloxi, (C3-C8)-cikloalkil, szulfamoil, N-(Ci-C4)-alkilszulfamoil, N,N-di-(Ci-C4)-alkilszulfamoil; vagy
A jelentése -CR5R6, és R5 és R6 jelentése egymástól függetlenül hidrogén, (CiC6)-alkil, (C3-C7)-cikloalkil, aril, vagy egy aminosav α-szénatomjának szubsztituense, ahol az aminosav természetben előforduló L-aminosav vagy annak D-izomerje.
B jelentése -CO2H, -NH2-, NHSO2CF3, terazolil, imidazolil, 3-hidroxizoxazolil, CONHCOR’”, -CONHSOR’”, CONHSO2R”’, ahol R jelentése aril, heteroaril, (C3-C7)cikloalkil, vagy (Ci-C4)-alkil, adott esetben (C6-Ci2)-aril, heteroaril, OH, SH, (Ci-C4)-alkil, (Ci-C4)-alkoxi, (Ci-C4)-tioalkil, (Ci-C4)-szulfmil, CF3, Cl, Br, F, I, NO2-, COOH, (C2-C5)alkoxikarbonil, NH2, mono-(Ci-C4-alkil)-amino, di-(Ci-C4-alkil)-amino vagy (C1-C4)perfluoralkil csoporttal egyszeresen szubsztituálva; vagy B jelentése CO2-G karboxi csoport, ahol G G-OH alkohol gyöke, és G jelentése (Ci-C20)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (C2C20)-alkenil, (C3-C8)-cikloalkenil, retinil, (C2-C80)-alkinil, (C4-C20)-alkinil, (C4-C20)alkenil, ahol az alkenil, cikloalkenil, alkinil és alkenil csoport egy vagy több többszörös kötést tartalmaz; (C6-C|6)-karbociklusos aril csoport, (C7-Ci6)-karbociklusos aralkil csoport, heteroaril, vagy heteroalkil csoport, ahol a heterolaril csoport vagy a heteroalkil csoport heteroaril csoportja 5 vagy 6 gyűrűatomot tartalmaz; és ahol a G jelentésénél megadott csoportok egy vagy több alábbi csoporttal vannak szubsztituálva: hidroxi, halogén, ciano, trifluormetil, nitro, karboxi, (Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (C3-C8)-cikloalkenil, (C6Ci2)-aril, (C7-Ci6)-aralkil, (C2-Ci2)-alkenil, (C2-Ci2)-alkinil, (C2-Ci2)-alkoxi, (C2-Ci2)alkoxi-(C2-Ci2)-alkil, (C2-Ci2)-alkoxi-(C2-Ci2)-alkoxi, (C2-Ci2)-ariloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxi, (Ci-C8)-hidroxialkil, -O-[CH2]x-CfH(2f+i.g)Fg, -OCF2C1, -O-CF2-CHFC1; (Ci-C]2)alkilkarbonil, (C3-C8)-cikloalkilkarbonil, (C6-Ci2)-ariIkarbonil, (C7-C]6)-aralkilkarbonil, cinnamoil, (C2-Ci2)-alkenilkarbonil, (C2-Ci2)-alkinilkarbonil, (Ci-Ci2)-alkoxikarbonil, (CiCt2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxikarbonil, (C7-Ci6)-aralkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkiloxikarbonil, (C2-C!2)-alkeniloxikarbonil, (C2-Ci 2)-alkiniloxikarbonil, aciloxi, (Ci-Ci2)-alkoxikarboniloxi, (Ci-Ci2)-alkoxi-(C]-Ci2)-alkoxikarbo (C6-Ci2)ariloxikarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxikarboniloxi, (C3-C8)-cikloalkoxikarboniloxi, (C2100578-14371 -32Ci2)-alkeniloxikarboniloxi, (C2-Ci2)-alkiniloxikarboniloxi, karbamoil, N-(Ci-Ci2)alkilkarbamoil, N^-di-CCrC^-alkilkarbamoil, N(C3-C8)-cikloalkil-karbamoil, N-(C6Ci6)-arilkarbamoil, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C6-Ci6)-arilkarbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoil, N-((Ci-Ci0)-alkoxi-(C6-Ci0)5 alkil)-karbamoil, N-((C6-C12)-ariloxi-(Ci-C10)alkil)-karbamoil, N-((C7-C16)-aralkiloxi-(C1C10)-alkil)-karbamoil, N-tfQ-Cwj-alkil-N-CCi-C.o)^^ N.
(Ci-Cio)-alkil-N-((C6-Ci6)-ariloxi-(Ci-Ci0)-alkil))-karbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C7-C16)aralkoxi-(Ci-Ci0)-alkil)-karbamoil, karbamoiloxi, N-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoiloxi, N,N,-di(Ci-Ci2)alkilkarbamoiloxi, N-(C3-C8)-cikloalkilkarbamoiloxi, N-(C6-Ci2)-arilkarbamoiloxi, 10 N-(C7-C16)-arilkarbamoiloxi, N-(Ci-C10)-alkil-N-(C6-C17)-arilkarbamoiloxi, NiCrCio)alkil-N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoiloxi, N-((Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-((C6-Ci2)-ariloxi(Cj-Cjoj-alkilj-karbamoiloxi, N-((C7-C16)-aralkiloxi-(Ci-Ci0)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Cr
Cio)-alkil-N-((Ci-Cio)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C6-Ci2)ariloxi-(Ci-C10)-alkil)-karbamoiloxi, N-^-Cioj-alkil-N-a^-C^ alkil)-karbamoiloxi, amino, (Ci-C12)-alkilamino, di-fCrCi^-alkilamino, (C3-C8)cikloalkilamino, (C3-CI2)-alkenilamino, (C3-C12)-alkinilamino, N-(C6-C12)-arilamino, N(C7-C11)-aralkilamino, N-alkilaralkilamino, N-alkil-arilamino, (Ci-C12)-alkoxiamino, (CiCi2)-alkoxi-N-(Ci-Cio)-alkilamino,(Ci-Ci2)-alkilkarbonilamino, (C3-C8)-cikloalkilkarbonilamino, (C6-Ci2)-arilkarbonilamino, (C7-Ci6)-alkilkarbonilamino, (Ci-Ci2)-alkil20 karbonil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C3-C8)-cikloalkilkarbonil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C6C12)-arilkarbonil-N- (C i -C i o)-alkilamino, (C7-C1 i)-aralkilkarbonil-N-(C i -C i o)-alkilamino, (Ci-Ci2)-alkilkarbonilamino-(Ci-C8)-alkil, (C3-C8)-cikloalkilkarbonilam^ (C6-C12)-arilkarbonilamino-(Ci-C8)-alkil, (C7-CI6)-aralkilkarbonilamino-(Ci-C8)-alkil, amino-(Ci-Ci0)-alkil, N-(Ci-Ci0)-aIkilamino-(Ci-Ci0)alkil, N,N-di-(Ci-Ci0)-alkilamino25 (Ci-C10)-alkil, (C3-C8)-cikloalkilamino-(Ci-C10)-alkil, (CrCi^-alkilmerkapto, (C,-Ci2)alkilszulfmil, (Ci-Ci2)-alkilszulfonil, (C6-Ci2)-arilmerkapto, (C6-Ci2)-arilszulfinil, (C6C)2)-arilszulfonil, (C7-Ci6)-aralkilmerkapto, (C7-Ci6)-aralkilszulfinil, vagy (C7-C16)-aralkilszulfonil;
X jelentése O vagy S atom;
Q jelentése O, S atom, NR', vagy egy kémiai kötés;
ahol, amennyiben Q kémiai kötés, R4 jelentése halogén, nitril, vagy trifluorometil;
vagy amennyiben Q jelentése O, S atom, vagy NR', R4 jelentése hidrogén, (Cr
Cio)-alkrl, (C2-Ci0)-alkenil, (C2-Ci0)-alkinil, ahol az alkenil vagy alkinil csoport egy vagy két többszörös C-C kötést tartalmaz; a -[CH2]x-CÍH(2f+l-g)-Fg általános képletű helyette
100578-14371 -33sítetlen fluoroalkil csoport, (Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil csoport, (Ci-C6)-alkoxi-(Ci-C4)alkoxi-(Ci-C4)-alkil csoport, aril csoport, heteroaril csoport, (C7-Cn)-aralkil csoport, vagy a Z általános képletű csoport:
-[CH2]v-[O]w-[CH2]rE (Z) ahol:
E jelentése heteroaril csoport, (C3-C8)-cikloalkil csoport, vagy az F általános képletű fenil csoport:
v értéke 0-6. bármely egész szám;
w értéke 0 vagy 1;
t értéke 0-3. bármely egész szám, és
R7 R8, R9, R10, és R11 jelentése azonos vagy különböző, és jelentésük hidrogén, halogén, ciano, nitro, trifluorometil, (Ci-C6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (Ci-C6)-alkoxi, -O[CH2]x-CfH(2f+i-g)-Fg, -OCF2-C1, -O-CF2-CHFC1, (Ci-Cej-alkilmerkapto, (Ci-Có)hidroxialkil, (Ci-C6)-alkoxi-(Ci-C6)-alkoxi, (Ci-Ce)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (Ci-C6)alkilszulfinil, (Ci-C6)-alkilszulfonil, (Ci-C6)-alkilkarbonil, (Ci-C8)-alkoxikarbonil, karbamoil, N-(Ci-C8)-alkilkarbamoil, N,N-di-(Ci-C8)-alkilkarbamoil, vagy (C7-Cn)aralkilkarbamoil, adott esetben fluorin, klorin, bromin, trifluorometil, (Ci-C6)-alkoxi, N(C3-C8)-cikloalkilkarbamoil, N-(C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C4)-alkilkarbamoil, (Ci-C6)-alkilkarboniloxi, fenil, benzil, fenoxi, benziloxi, NRYRZ csoporttal szubsztiuálva, ahol RY és Rz egymástól függetlenül hidrogén, (Ci-Ci2)-alkil, (Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci2)aralkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (C3-Ci0)-cikloalkil, (C3-C]2)-alkenil, (C3-Ci2)-alkinil, (C6-Ci2)-aril, (C7-Cn)-aralkil, (Ci-Ci2)-alkoxi, (C7-Ci2)aralkoxi, (Ci-Ci2)alkilkarbonil, (C3-C8)-cikloalkilkarbonil, (C6-Ci2)arilkarbonil, (C7-Ci6)-aralkilkarbonil; vagy ahol RYés Rz együttesen -[CH2]h, amelyben a CH2 csoport O, S atommal vagy N-(Cr C4)-alkilkarbonilimino, vagy N-(Ci-C4)-alkoxikarbonilimino csoporttal helyettesíthető; fenilmerkapto, fenilszulfonil, fenilszulfmil, szulfamoil, N-(Ci-C8)-alkilszulfamoil, vagy N,N-di-(Ci-C8)-alkilszulfamoil; vagy R7 és R8, R8 és R9, R9és R10, vagy R10 és R11, együt
100578-14371 -34tesen -[CH2]n- vagy -CH-CH-CH-CH- lánc, ahol a lánc egy CH2 csoportja adott esetben O, S atommal vagy SO, SO2 vagy NRy csoporttal van helyettesítve; és n értéke 3, 4 vagy 5; és amennyiben E heteroaril csoport, az 1-3 az R7-Rn jelentésénél megadott szubsztituenst hordozhat, vagy ha E jelentése cikloalkil csoport, egy, az egy, az R7-Rn jelentésénél megadott szubsztituenst hordozhat;
vagy ha Q jelentése NR', R4 jelentése R lehet, ahol R' és R azonosak vagy különbözőek, és jelentésük hidrogén, (C6-Ci2)-aril, (C7-Cn)-aralkil, (Ci-C8)-alkil, (Ci-C8)alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci2)-aralkoxi-(Ci-C8)-alkil, (Ci-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (CiCio)-alkilkarbonil, adott esetben (C7-Ci6)-aralkilkarbonil csoporttal szubsztituálva, vagy adott esetben C6-Ci2)-arilkarbonil csoporttal szubsztituálva; vagy R' és R együttesen [CH2]h, ahol a CH2 csoport O, S atommal vagy N-acilimino, vagy N-(Ci-Ci0)alkoxikarbonilimino csoporttal lehet szubsztituálva, és h értéke 3-7. bármely egész szám.
Y jelentése N vagy CR3;
R , R és R azonos vagy különböző, és jelentésük hidrogén, hidroxil, halogén^ ciano, trifluorometil, nitro, karboxil, (Ci-C20)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (C3-C8)cikloalkil(Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8)-cikloalkoxi, (C3-C8)-Cikloalkil-(Ci-Ci2)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil(C i -C12)-alkil, (C3-C8)-cikloalkiloxi-(C 1 -Ci2)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(C 1 -C8)-alkil-(Ci C6)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkiloxi-(Ci-C8)alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkoxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkoxi, (C6-Ci2)-aril, (C7Ci6)-aralkil, (C7-Ci6)-aralkenil, (C7-Ci6)-aralkinil, (C2-C20)-alkenil, (C2-C20)-alkinil, (CiC20)-alkoxi, (C2-C20)-alkeniloxi, (C2-C20)-alkiniloxi, retiniloxi, (Ci-C20)-alkoxi-(Ci-Ci2)alkil, (Ci-Ci2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxi, (Ci-C]2)-alkoxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkiI, (C6Ci2)-ariloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxi, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C6)-alkoxi, (C7-Ci6)-aralkoxi-(CiC6)-alkoxi, (C6-Ci6)-hidroxialkil, (C6-Ci6)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci6)-aralkoxi-(Ci-C8)alkil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C7-Ci2)-aralkiloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(CiC6)alkil, (C2-C20)-alkeniloxi-(Ci-C6)-alkil, (C2-C20)-alkiniloxi-(Ci-C6)-alkil, (C2-C20)retiniloxi-(Ci-C6)-alkil, -O-[CH2]xCfH(2f+i-g)Fg, -OCF2CHFC1, (Ci-C20)-alkilkarbonil, (C3C8)-cikloalkilkarbonil, (C6-Ci2)-arilkarbonil, (C7-Ci6)-aralkilkarbonil, cinnamoil, (C2-C20)alkenilkarbonil, (C2-C20)-alkinilkarbonil, (Ci-C20)-alkoxikarbonil, (Ci-Ci2)-alkoxi-(CiCi2)-alkoxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxikarbonil, (C7-Ci6)-aralkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkoxikarbonil, (C2-C20)-alkeniloxikarbonil, retiniloxikarbonil, (C2-C20)-alkiniloxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C7-Ci0)-aralkoxi-(Ci-C6)alkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkil-(CI-C6)-alkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkoxi-(Ci-C6)alkoxikarbonil, (Ci-Ci2)-alkilkarboniloxi, (C3-C8)-cikloalkilkarboniloxi, (C6-Ci2)
100578-14371 -35arilkarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkilkarboniloxi, cinnamoiloxi, (C2-Ci2)-alkenilkarboniloxi, (C2-C12)-alkinilkarboniloxi, (C1 -C12)-alkoxikarboniloxi, (C1 -C12)-alkoxi-(C1 -C12)-alkoxikarboniloxi, (C6-Ci2)-ariloxikarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxikarboniloxi, (C3-C8)cikloalkoxikarboniloxi, (C2-Ci2)-alkeniloxikarboniloxi, (C2-Ci2)-alkiniloxikarboniloxi, karbamoil, N-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoil, N,N-di-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoil, N-(C3-C8)cikloalkilkarbamoil, N,N-diciklo-(C3-C8)-alkilkarbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C3-C8)cikloalkilkarbamoil, N-((C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkil)-karbamoil, N-(Ci-C6)-alkil-N((C3-C8)-cikloalkil-(C]-C6)-alkil)-karbamoil, N-(+)-dehidroabietilkarbamoil, N-(Ci-Cs)alkil-N-(+)-dehidroabietilkarbamoil, N-(C6-Ci2)-arilkarbamoil, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C6-Ci6)-arilkarbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C7-Ci6)aralkilkarbamoil, N-((C 1 -C18)-alkoxi-(C 1 -C1 o)-alkil)-karbamoil, N-((Cő-C 16)-ariloxi-(C 1 C io)-alkil)-karbamoil, N-((C7-C 16)-aralkiloxi-(C 1 -C io)-alkil)-karbamoil, N-(Ci-Cio)-alkilN-((CrCio)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoil, N-(Ci-C10)-alkil-N-((C6-Ci2)-ariloxi-(CiCio)-alkil)-karbamoil, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoil; CON(CH2)h, amelyben a CH2 csoport O, S atommal vagy N-(Ci-C8)-alkilimino, N-(C3C8)-cikloalkilimino, N-(C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C4)-alkilimino, N-(C6-C]2)-arilimino, N-(C7Ci6)-aralkilimino, N-(Ci-C4)-alkoxi-(Ci-C6)-alkilimino csoporttal helyettesíthető, és h értéke 3-7. bármely egész szám; az (R) általános képletű karbamoil csoport:
ahol:
Rx és Rv egymástól függetlenül hidrogén, (C]-C6)-alkil, (C3-C7)-cikloalkil, aril, vagy egy alfa-aminosav alfa szénatomjának szubsztituense, amely lehet L- vagy Daminosav, s értéke 1-5. bármely egész szám;
T jelentése OH, vagy NR*R**, és R*, R** és R*** azonosak vagy különbözőek, és jelentésük (C6-Ci2)-aril, (C7-Cn)-aralkil, (Ci-C8)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (+)dehidroabietil, (Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci2)-aralkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C6-Ci2)ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (Ci-Cio)-alkanoil, adott esetben (C7-Ci6)-aralkanoil csoporttal szubsztituálva, adott esetben (C6-C|2)-aroil csoporttal szubsztituálva; vagy R* és R**
100578-14371 -36együttesen -[CH2]h, ahol egy CH2 csoport O, S atommal vagy SO, SO2, N-acilamino, N(Ci-Cio)-alkoxikarbonilimino, N-(Ci-C8)-alkilimino, N-(C3-C8)-cikloalkilimino, N-(C3C8)-cikloalkil-(Ci-C4)-alkilimino, N-(C6-Ci2)-arilimino, N-(C7-Ci6)-aralkilimino, N-(CiC4)-alkoxi-(Ci-C6)-alkilimino csoporttal lehet szubsztituálva, és h értéke 3-7. bármely 5 egész szám;
karbamoiloxi, N-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoiloxi, N,N-di-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoiloxi, N-(C3-C8)-cikloalkilkarbamoiloxi, N-(Ci-C12)-arilkarbamoiloxi, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C6-Ci2)-arilkarbamoiloxi, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C7-Ci6)aralkilkarbamoiloxi, N-((Ci-Ci0)-alkil)-karbamoiloxi, N-((C6-C12)-ariloxi-(Ci-Ci0)-alkil)10 karbamoiloxi, N-((C7-Ci6)-aralkiloxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N((Ci-Cio)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)-karbamoiloxi, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-((C6-Ci2)-ariloxi-(CiCio)-alkil)-karbamoiloxi, N-CCi-Cioj-alkil-N-tfC^C^-a^^ karbamoiloxiamino, (Ci-C12)-alkilamino, di-(Ci-C12)-alkilamino, (C3-C8)-cikloalkilamino, (C3-Ci2)-alkenilamino, (C3-Ci2)-alkinilamino, N-(C6-Ci2)-arilamino, N-(C7-Cn)15 aralkilamino, N-alkil-aralkilamino, N-alkil-arilamino, (Ci-Ci2)-alkoxiamino, (CrCi2)alkoxi-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (Ci-Ci2)-alkanoilamino, (C3-C8)-cikloalkanoilamino, (C6C12)-aroilamino, (C7-Ci6)-aralkanoilamino, (Ci-Ci2)-alkanoil-N-(Ci-Ci0)-alkilamino, (C3C8)-cikloalkanoil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C6-Ci2)-aroil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C7-Ci,)aralkanoil-N-(C i -Ci o)-alkilamino, (C i -C12)-alkanoilamino-(Ci -C8)-alkil, (C3 -C8)-ciklo20 alkanoilamino-(Ci-C8)-alkil, (C6-Ci2)-aroilamino-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci6)-aralkanoilamino(Ci-C8)-alkil, amino-(Ci-Cio)-alkil, N-(Ci-Ci0)-alkilamino-(Ci-Ci0)-alkil, N,N-di(C]-Ci0)aIkilamino-(Ci-Cio)-alkil, (C3-C8)-cikloalkilamino(Ci-Cio)-alkil, (Ci-C20)-alkilmerkapto, (Ci-C2o)-alkilszulfmil, (Ci-C20)-alkilszulfonil, (C6-Ci2)-arilmerkapto, (Cg-C^j-arilszulfmil, (C6-Ci2)-arilszulfonil, (C7-C]6)-aralkilmerkapto, (C7-Ci6)-aralkilszulfínil, (C725 Cl6)-aralkilszulfonil, (Q-C^-alkilmerkapto-ÍCrC^^^ (Cj-C^-alkilszulfmil-CCialkil, (Ci-Ci2)-alkilszulfonil-(Ci-Cé)-alkil, (C6-Ci2)-arilmerkapto-(Ci-C6)-alkil, (Cg-C^)arilszulfmil-fCi -C6)-alkil, (Cg-C^-arilszulfonil-tq -C6)-alkil, (Ο7-Ο]6)-aralkilmerkapto(Ci-Cgj-alkil, (C7-Ci6)-aralkilszulfínil-(Ci-C6)-alkil, (C7-Ci6)-aralkilszulfonil-(Ci-C6)-alkil, szulfamoil, N-(Ci-Ci0)-alkilszulfamoil, N,N-di-(Ci-Cw)-alkilszulfamoil, (C3-C8)30 cikloalkilszulfamoil, N-(C6-C12)-arilszulfamoil, N-(C7-C16)-aralkilszulfamoil, bHQ-Qo)alkil-N-(C6-C12)-arilszulfamoil, N-(Ci-C10)-alkil-N-(C7-C16)-aralkilszulfamoil, (Ci-C10)alkilszulfonamido, N-((Ci-C.o)-alkil)-(C|-Cio)-alkilszulfonamido, (C7-Ci6)-aralkilszulfonamido, és N-CCQ-Cwj-alkil-CCrC^-a^ ώοΐ egy aril csoport 1-5 szubsztituenssel lehet szubsztituálva hidroxil, halogén, ciano, trifluorometil, nitro,
100578-14371
-37karboxil, (C2-Ci6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkil, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8> cikloalkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-Ci2)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkii-(Ci-Ci2)-alkil, (C3-C8)cikloalkiloxi-(Ci-C]2)-alkoxi, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C8)-alkil-(Ci-C6)-alkoxi, (C3-C8)cikloalki(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C3-C8)-cikloalkiloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, 5 (C3-C8)-cikloalkoxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkoxi, (C6-C12)-aril, (C7-Ci6)-aralkil, (C2-Ci6)alkenil, (C2-Ci2)-alkinil, (C,-Ci6)-alkoxi, (Ci-Ci6)-alkeniloxi, (Ci-C]2)-alkoxi-(Ci-Ci2)alkil, (Ci-Ci2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxi, (Ci-Ci2)-alkoxi(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C6Ci2)-ariloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxi, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C6)-alkoxi, (C7-C16)-aralkoxi-(CiC6)-alkoxi, (Ci-C8)-hidroxialkil, (C6-C16)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci6)-aralkoxi-(Ci-C8)10 alkil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C6)-alkil, (C7-Ci2)-aralkiloxi-(Ci-C8)-alkoxi-(CiC6)-alkil, -O-[CH2]xCfH(2f+i-g)Fg, -OCF2C1, -OCF2-CHFC1, (Ci-Ci2)-alkilkarbonil, (C3C8)-cikloalkilkarbonil, (C6-C]2)-arilkarbonil, (C7-Ci6)-aralkilkarbonil, (Ci-C12> alkoxikarbonil, (Ci-C]2)-alkoxi-(Ci-Ci2)-alkoxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxikarbonil, (C7-Ci6)aralkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkoxikarbonil, (C2-Ci2)-alkeniloxikarbonil, (C2-Ci2)15 alkiniloxikarbonil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C7-Ci6)-aralkoxi-(Ci-C6)alkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C3-C8)-cikloalkoxi-(Ci-C6)alkoxikarbonil, (Ci-Ci2)-alkilkarboniloxi, (C3-C8)-cikloalkilkarboniloxi, (C6-Ci2)arilkarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkilkarboniloxi, cinnamoiloxi, (C2-Ci2)-alkenilkarboniloxi, (C2-Ci2)-alkinilkarboniloxi, (Ci-Ci2)-alkoxikarboniloxi, (Ci-Ci2)-alkoxi-(Ci-Ci2)20 alkoxikarboniloxi, (C6-Ci2)-ariloxikarboniloxi, (C7-Ci6)-aralkiloxikarboniloxi, (C3-C8)cikloalkoxikarboniloxi, (C2-Ci2)-alkeniloxikarboniloxi, (C2-Ci2)-alkiniloxikarboniloxi, karbamoil, N-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoil, N,N-di(Ci-Ci2)-alkilkarbamoil, N-(C3-C8)cikloalkilkarbamoil, N,N-diciklo-(C3-C8)-alkilkarbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C3-C8)cikloalkilkarbamoil, N-((C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkil)karbainoil, N-iCj-C^-alkil-N25 ((C3-C8)-cikloalkil-(Ci-C6)-alkil)karbamoil, N-(+)-dehidroabietilkarbamoil, N-(Ci-C6)alkil-N-(+)-dehidroabietilkarbamoil, N-(C6-Ci2)-arilkarbamoil, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C6-Ci6)-arilkarbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-(C7-Ci6)aralkilkarbamoil, N-CCCj-C^-alkoxi-CCrC^-al^ N-((C6-Ci6)-ariloxi-(CiCio)-alkil)karbamoil, N-^-Cmj-aralkiloxi-iCrCwj-alkiDkarbamoil, N-(C,-Ci0)-alkil-N30 ((Ci-Ci0)-alkoxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoil, N-(Ci-Ci0)-alkil-N-((C6-C^^ alkil)karbamoil, N-(CrC10)-alkil-N-((C7-Ci6)-a^^^
CON(CH2)h csoportok közül, amelyben egy CH2 csoport O, S atommal vagy N-(Ci-C8)alkilimino, N-(C3-C8)-cikloalkilimino, N-(C3-C8)-cikloalkil-(C1-C4)-alkilimino, N-(C6C12)-arilimino, N-(C7-C16)-aralkilimino, N-(Ci-C4)-alkoxi-(Ci-C6)-alkilimino csoporttal
100578-14371 -38lehet helyettesítve, és h értéke 3-7. bármely egész szám; karbamoiloxi, N-(Ci-Ci2)alkilkarbamoiloxi, N,N-di-(Ci-Ci2)-alkilkarbamoiloxi, N-(C3-C8)-cikloalkilkarbamoiloxi, N-(C6-Ci6)-arilkarbamoiloxi, N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-(C6-Ci2)arilkarbamoiloxi, N-(C]-Cio)-alkil-N-(C7-Ci6)-aralkilkarbamoiloxi, N-((C[-Cio)alkil)karbamoiloxi, N-((C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoiloxi, N-((C7-Ci6)aralkiloxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((Ci-Cio)-alkoxi-(Ci-Cio)alkil)karbamoiloxi, N-(Ci-Cio)-alkil-N-((C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-Cio)-alkil)karbamoiloxi, N(C i -C i o)-alkil-N-((C7-C 16)-aralkiloxi-(C i -Cio)-alkil)karbamoiloxi, amino, (C i -C i2)alkilamino, di-(Ci-Ci2)-alkilamino, (C3-Cg)-cikloalkilamino, (C3-Ci2)-alkenilamino, (C3Ci2)-alkinilamino, N-(C6-Ci2)-arilamino, N-(C7-Cn)-aralkilamino, N-alkil-aralkilamino, N-alkil-arilamino, (Ci-Ci2)-alkoxiamino, (Ci-Ci2)-alkoxi-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (Ci-Ci2)alkanoilamino, (C3-C8)-cikloalkanoilamino, (C6-Ci2)-aroilamino, (C7-C16)aralkanoilamino, (Ci-Ci2)-alkanoil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C3-C8)-cikloalkanoil-N-(CiCio)-alkilamino,(C6-Ci2)-aroil-N-(Ci-Cio)-alkilamino, (C7-Cn)-aralkanoil-N-(Ci-Ci0)alkilamino, (C1 -C12)-alkanoilamino-(C 1 -C8)-alkil, (C3-C8)-cikloaIkanoiIamino-(C 1 -C8)alkil, (C6-Ci2)-aroilamino-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci6)-aralkanoilamino-(Ci-C8)-alkil, amino(Ci-Cio)-alkil, N-(Ci-Ci0)-alkiíamino-(Ci-Ci0)-alkil, N,N-di-(Ci-Ci0)-alkilamino-(Ci-Ci0)alkil, (C3-C8)-cikloalkilamino-(Ci-Cio)-alkil, (Ci-Ci2)-alkilmerkapto, (C1-C12)alkilszulfmil, (Ci-Ci2)-alkilszulfonil, (C6-Ci6)-arilmerkapto, (C6-Ci6)-arilszulfinil, (C6Ci6)-arilszulfonil, (C7-Ci6)-aralkilmerkapto, (C7-Ci6)-aralkilszulfinil vagy (C7-Ci6)aralkilszulfonil csoporttal lehet szubsztituálva;
vagy amennyiben R1 és R2, vagy R2 és R3 [CH2]o láncot képez, amely telített vagy C-C kettőskötéseket tartalmaz és telítetlen, amelyben 1 vagy 2 CH2 csoport adott esetben O, S atommal vagy SO, SO2, vagy NR' csoporttal van helyettesítve, és R' jelentése hidrogén, (C6-Ci2)-aril, (Ci-C8)-alkil, (Ci-C8)-alkoxi-(Ci-C8)-alkil, (C7-Ci2)-aralkoxi-(Ci-C8)alkil, (C6-Ci2)-ariloxi-(Ci-C8)-alkil, (Ci-Cio)-alkanoil, adott esetben (C7-Ci6)-aralkanoilszubsztituálva, vagy adott esetben (C6-Ci2)-aroil -szubsztituálva; és o értéke 3, 4 vagy 5;
vagy R1 és R2, vagy R2 és R3, az azokat hordozó piridinnel vagy piridazinnel együtt, 5,6,7,8-tetrahidroizokinolin, 5,6,7,8-tetrahidrokinolin vagy 5,6,7,8-tetrahidrocinnolin gyűrűt képez;
vagy R1 és R2, vagy R2 és R3 karbociklusos vagy heterociklusos 5- vagy 6-tagú aromás gyűrűt képez;
100578-14371
-39vagy R1 és R2, vagy R2 és R3, az azokat hordozó piridinnel vagy piridazinnel együtt, adott esetben szubsztituált tienopiridin, furanopiridin, piridopiridin, pimimidopiridin, imidazopiridin,m tiazopiridin, oxazolopiridin, kinolin, izokinolin vagy cinnolin heterociklusos gyűrűrendszert képez, ahol kinolin, izokinolin vagy cinnolin előnyösen az (la), (Ib) vagy (Ic) általános képletű;
és R12-R23 szubsztituensek egymástól függetlenül az R1, R2 és R3 jelentésénél megadottak;
vagy R1 és R2, az azokat hordozó piridinnel együtt, az (Id) általános képletű ve gyületet képez:
ahol V jelentése S, O atom vagy NRk, és Rk jelentése hidrogén, (Ci-C6)-alkil-, aril- vagy benzoilcsoport, ahol egy arilcsoport adott esetben 1-5 fentiekben megadott szubsztituenssel lehet szubsztituálva;
és
R24, R25, R26 és R27 jelentése egymástól függetlenül az R1, R2 és R3 jelentésénél megadottak valamelyike;
f értéke 1-8. bármely egész szám;
g értéke 0 vagy 1-től (2f+l)-ig bármely egész szám, x értéke 0-3. bármely egész szám;
h értéke 3-7. bármely egész szám;
100578-14371 -40valamint azok fiziológiásán aktív sói és prodrogjai.
Az (I) általános képletű vegyületek például az EP0650960 és EP0650961 számú európai szabadalmi leírásban ismertetettek. Az EP0650960 és EP0650961 számú európai szabadalmi leírásban ismertetett valamennyi vegyület, közelebbről, a csatolt igénypontokban felsorolt vegyületek és a példákban leírt végtermékek teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik. Ilyen vegyület például a [(3-metoxi-piridin-2-karbonil)-amino]-ecetsav.
Az (I) általános képletű vegyületek ismertetése található továbbá az 5 658 933 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban. Az 5 658 933 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett valamennyi vegyület, közelebbről, a csatolt igénypontokban felsorolt vegyületek és a példákban leírt végtermékek teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik. Az (I) általános képletű vegyületek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: 3-metoxipiridin-2karbonsav N-(((hexadeciloxi)-karbonil)-metil)-amid hidroklorid, 3-metoxipiridin-2karbonsav N-(((l-oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N(((hexiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)metil)-amid, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((noniloxi)-karbonil)-metil)-amid racemát, 3metoxipiridin-2-karbonsav N-(((heptiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2karbonsav N-(((oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 5-(((3-(l-butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-metoxipiridin-2-karbonsav N-((benziloxikarbonil)-metil)-amid, 5-(((3-(l-butiloxi)-propil)amino)-karbonil)-3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((l-butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 5(((3-lauriloxi)-propil)amino)-karbonil)-3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((benziloxi)karbonil)-metil)-amid, 3 -hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((hexadeciloxi)-karbonil)-metil)amid hidroklorid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((l-oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((hexiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-hidroxipiridin-2karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((2noniloxi)-karbonil)-metil)-amid racemát, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((heptiloxi)karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N-(((oktiloxi)-karbonil)-metil)amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 5-(((3-(1butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-((benziloxikarbonil)metil)-amid, 5-(((3-( 1 -butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N(((l-butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, és 5-(((3-lauriloxi)-propil)amino)-karbonil)-3hidroxipiri din-2-karbonsav N-(((benziloxi)-karbonil)-metil)-amid.
100578-14371
-41A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, az (I) általános képletű vegyületek az 5 620 995 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett szubsztituált, heterociklusos karboxamidok; a 6 00 350 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett 3-hidroxipiridin-25 karboxamidészterek; az 5 607 954 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett szulfonamidokarbonilpiridin-2-karboxamidok; valamint az 5 610 172 és 5 620 996 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban ismertetett szulfonamidokarbonil-piridin-2-karboxamidok és szulfonamidokarbonil-piridin-2-karboxészteramidok. A fenti szabadalmi leírásokban ismertetett valamennyi vegyület, közelebb10 ről, a csatolt igénypontokban felsorolt vegyületek és a példákban leírt végtermékek teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik. Az (I) általános képletű vegyületek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: 3-metoxipiridin-2karbonsav N-(((hexadeciloxi)-karbonil)-metil)-amid hidroklorid, 3-metoxipiridin-2karbonsav N-(((l-oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N15 (((hexiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)metil)-amid, 3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((noniloxi)-karbonil)-metil)-amid racemát, 3metoxipiridin-2-karbonsav N-(((heptiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2karbonsav N-(((oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 5-(((3-(l-butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-metoxi20 pmdin-2-karbonsav N-((benziIoxikarbonil)-metil)-amid, 5-(((3 -(l-butiloxi)-propil)amino)-karbonil)-3-metoxipiridin-2-karbonsav N-((( 1 -butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 5(((3-IauriIoxi)-propil)amino)-karbonil)-3-metoxipiridin-2-karbonsav N-(((benziloxi)karbonil)-metil)-amid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((hexadeciloxi)-karbonil)-metil)amid hidroklorid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((l-oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 325 hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((hexiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-hidroxipiridin-2karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((2noniloxi)-karbonil)-metil)-amid racemát, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((heptiloxi)karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N-(((oktiloxi)-karbonil)-metil)amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 5-(((3-(130 butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-((benziloxikarbonil)metil)-amid, 5-(((3-(1 -butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N(((l-butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, és 5-(((3-lauriloxi)-propiI)amino)-karbonil)-3hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((benziloxi)-karbonil)-metil)-amid.
100578-14371
-42Ezen felül, az (I) általános képletű vegyületek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N(((hexadeciloxi)-karbonil)-metil)-amid hidroklorid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((loktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((hexiloxi)-karbonil)metil)-amid, 3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)-metiI)-amid, 3hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((noniloxi)-karbonil)-metil)-amid racemát, 3-hidroxipiridin2-karbonsav N-(((heptiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziIoxipiridin-2-karbonsav N(((oktiloxi)-karbonil)-metil)-amid, 3-benziloxipiridin-2-karbonsav N-(((butiloxi)-karbonil)metil)-amid, 5-(((3-(1 -butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-hidroxipiridm-2-karbonsav N((benziloxikarbonil)-metil)-amid, 5-(((3-(l-butiloxi)-propil)-amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((l-butiloxi)-karbonil)-metil)-amid, és 5-(((3-lauriloxi)propil)amino)-karbonil)-3-hidroxipiridin-2-karbonsav N-(((benziloxi)-karbonil)-metil)amid.
Az (la) általános képletű vegyületek leírása található például az 5 719 164 és 5 726 305 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban. A fenti szabadalmi leírásokban ismertetett valamennyi vegyület, közelebbről, a csatolt igénypontokban felsorolt vegyületek és a példákban leírt végtermékek teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik. Az (la) általános képletű vegyületek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, az alább felsoroltak: N-((6-(l-butiloxi)-3-hidroxikinolin-2-il)karbonil)-glicin, N-((6-klór-3-hidroxikinolin-2-il)-karbonil)-glicin, N-((3-hidroxi-6-(2propiloxi)-kinolin-2-il)-karbonil)-glicin, N-((7-klór-3-hidroxi-kinoline-2-karbonil)-amino]ecetsav, [(3-benziloxi-7-klór-kinoline-2-karbonil)-amino]-ecetsav (D vegyület), [(3hidroxi-6-izopropoxi-kinoline-2-karbonil)-amino]-ecetsav (E vegyület), [(3-hidroxi-6phenoxi-kinoline-2-karbonil)-amino]-ecetsav (F vegyület), és [(3-hidroxi-6-trifluorometoxi-kinoline-2-karbonil)-amino]-ecetsav (G vegyület).
Az (Ib) általános képletű vegyület ismertetése található például a 6 093 730 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban. A 6 093 730 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban ismertetett valamennyi vegyület, közelebbről, a csatolt igénypontokban felsorolt vegyületek és a példákban leírt végtermékek teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik. Az (Ib) általános képletű vegyület például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: N-((l-klór-4-hidroxi-7-(2propiloxi)izokinolin-3-il)-karbonil)-glicin, N-((7-bróm-4-hidroxi-izokinoline-3-karbonil)amino)-ecetsav, N-(( 1 -klór-4-hidroxi-6-(2-propiloxi)izokinolin-3-il)-karbonil)-glicin, N((l-klór-4-hidroxi-7-metoxiizokinolin-3-il)-karbonil)-glicin (J vegyület), N-((l-klór-4100578-14371
-43hidroxi-6-metoxiizokinolin-3-il)-karbonil)-glicin, [(7-butoxi-1 -klór-4-hidroxi-izokinoline3-karbonil)-amino]-ecetsav, N-((7-benziloxi-1 -klór-4-hidroxi-izokinolin-3-il)-karbonil)glicin, N-((6-benziloxi-1 -klór-4-hidroxiizokino!in-3 -il)-karbonil)-glicin, [(1 -klór-4hidroxiizokinoline-3-karbonil)-amino]-ecetsav (C vegyület), N-((8-klór-4-hidroxiizokinolin-3-il)-karbonil)-glicin, [(4-hidroxi-7-izoporopoxi-izokinolin-3-karbonil)-amino]ecetsav (H vegyület), [(7-butoxi-4-hidroxi-izokinoline-3-karbonil)-amino]-ecetsav (I vegyület), és [(l-klór-4-hidroxi-7-izopropoxi-izokinolin-3-karbonil)-amino]-ecetsav (K vegyület).
A találmány szerinti eljárásban alkalmazható vegyületeket ismertetnem Majamaa és munkatársai [Eur. J. Biochem. 138, 239 (1984); valamint Biochem J. 229. 127 (1985)], Kivirikko és Myllyharju [Matrix Bioi. 16, 357 (1988)], Bickel és mtsai. [Hepatology 28, 404 (1998)], Friedman és mtsai. [Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97, 4736 (2000); valamint Franklin és mtsai.: Biochem. J. 353, 333 (2001)], amelyek amely teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik. Szintén a találmány tárgyát képezik további vegyületek, ahol az A és B pozíció jelentése együttesen például hexánsav, cianometil, 2-aminoetil, benzoesav, lH-benzoimidazol-2-ilmetil, stb.
A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti eljárásban a (II) általános képletű vegyületű vegyületet alkalmazunk.
ahol:
R28 jelentése hidrogén, nitro, amino, ciano, halogén, (Ci-C4)-alkil, karboxi vagy annak metabolikusan labilis észterszármazéka; (Ci-C4)-alkilamino, di-(Ci-C4)-alkilamino, (Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C2-C4)-alkanoil, hidroxi-(Ci-C4)-aíkil, karbamoil, N-(Ci-C4)alkilkarbamoil, (Ci-C4)-alkiltio, (Ci-C4)-alkilszulfínil, (Ci-C4)-alkilszuIfonil, feniltio, fenilszulfinil, fenilszulfonil, ahol az fenil vagy fenilcsoport adott esetben 1-4 azonos vagy különböző halogénnel van szubsztituálva, (Ci-C4)-alkioxi, (C]-C4)-alkil, ciano, hidroxi, trifluorometil, fluoro-(Ci-C4)-alkiltio, fluoro-(Ci-C4)-alkilszulfinil, fluoro-(Ci-C4)alkilszulfonil, (Ci-C4)-alkoxi-(C2-C4)-alkoxikarbonil, N,N-di-[(Ci-C4)-alkil]karbamoil-(Ci100578-14371
-44C4)-alkoxikarbonil, (C i -C4)-alkilamino-(C2-C4)-alkoxikarbonil, di-(C i -C4)-alkilamino-(C2C4)-alkoxikarbonil, (Ci-C4)-alkoxi-(C2-C4)-alkoxi-(C2-C4)-alkoxikarbonil, (C2-C4)alkanoiloxi-Ci-C4)-alkil, vagy N-[amino-(C2-C8)-alkil]-karbamoil;
R29 jelentése hidrogén, hidroxi, amino, ciano, halogén, (Ci-C4)-alkil, karboxi vagy annak metabolikusan labilis észterszármazéka, (Ci-C4)-alkilamino, di-(Ci-C4)-alkilamino, (Ci-C6)-alkoxikarbonil, (C2-C4)-alkanoil, (Ci-C4)-alkoxi, karboxi-(Ci-C4)-alkoxi, (C1-C4)alkoxikarbonil-(Ci-C4)-alkoxi, karbamoil, N-(Ci-C8)-alkilkarbamoil, N,N-di-(C|-C8)alkilkarbamoil, N-[amino-(C2-C8)-alkil]-karbamoil, N-[(Ci-C4)-alkilamino-(Ci-C8)-alkil]karbamoil, N-[di-(Ci-C4)-alkilamino-(Ci-C8)-alkil)]-karbamoil, N-ciklohexilkarbamoil, N[ciklopentil]-karbamoil, N-(Ci-C4)-alkilciklohexilkarbamoil, N-(Ci-C4)-alkilciklohexilkarbamoil, N-fenilkarbamoil, N-(Ci-C4)-alkil-N-fenilkarbamoil, Ν,Ν-difenilkarbamoil, N[fenil-(Ci-C4)-alkil]-karbamoil, N-(Ci-C4)-alkil-N-[fenil-(Ci-C4)-alkil]-karbamoil, vagy N,N-di-[fenil-(Ci-C4)-alkil]-karbamoil, ahol a fenil vagy fenilcsoport adott esetben 1-4 azonos vagy különböző halogénnel van szubsztituálva, (Ci-C4)-alkioxi, (Ci-C4)-alkil, ciano, hidroxi, trifluorometil, N-[(C2-C4)-alkanoil]-karbamoil, N-[(Ci-C4)-alkoxikarbonil]karbamoil, N- [fluoro-(C2-C6)-alkil] -karbamoil, N,N- [fluoro-(C2-C6)-alkil]-N-(C 1-C4)alkilkarbamoil, N,N-[di-fluoro-(C2-C6)-alkil]karbamoil, pirrolidin-l-ilkarbonil, piperidinokarbonil, piperazin-1-ilkarbonil, morfolinokarbonil, ahol a heterociklusos csoport adott esetben 1-4 (Ci-C4)-alkil, benzil, l,2,3,4-tetrahidro-izokinolin-2-ilkarbonil, N,N-[di-(CiC4)-alkil]-tiokarbamoil, N-(C2-C4)-alkanoilamino, vagy N-[(Ci-C4)-alkoxikarbonil]-amino csoporttal van szubsztituálva;
R30 jelentése hidrogén, (Ci-C4)-alkil, (C2-C4)-alkoxi, halo, nitro, hidroxi, fluoro(l-4C)alkil, vagy piridinil;
R31 jelentése hidrogén, (Ci-C4)-alkil, (C2-C4)-alkoxi, halo, nitro, hidroxi, fluoro(Ci-C4)-alkil, piridinil, vagy metoxi;
R32 jelentése hidrogén, hidroxi, amino, (Ci-C4)-alkilamino, di-(Ci-C4)-alkilamino, halo, (Ci-C4)-alkoxi-(C2-C4)-alkoxi, fluoro-(Ci-C6)-alkoxi, pirrolidin-l-il, piperidino, piperazin-l-il, vagy morfolino, ahol a heterociklusos csoport adott esetben 1-4 azonos vagy különböző (Ci-C4)-alkil vagy benzil csoporttal van szubsztituálva; és
R33 és R34 jelentése egymástól függetlenül hidrogén, (Ci-C4)-alkil, és (C1-C4)alkoxi; valamint azok gyógyászatilag elfogadható sói vagy prodrog származékai.
A (II) általános képletű vegyületek leírását találjuk például az 5 916 898 és 6 200 974 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban, és a WO 99/21 860 számú nemzetközi közzétételi iratban. A fenti szabadalmi leírásokban és
100578-14371
-45közleményekben ismertetett valamennyi vegyület, közelebbről, a csatolt igénypontokban felsorolt vegyületek és a példákban leírt végtermékek teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik. Ilyen vegyületek például a 3-karboxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,10-fenantrolin [lásd például Seki és mtsai.: Chem. Abstracts 81, 424 (1974)], 3-karboxi-5-hidroxi-4-oxo-3,4dihidro-l,10-fenantrolin, 3-karboxi-5-metoxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,10-fenantrolin (A vegyület), és 3-karboxi-8-hidroxi-4-oxo-3,4-dihidro-l,10-fenantrolin.
A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti eljárásokban a (III) általános képletű vegyületet alkalmazzuk:
vagy annak gyógyászatilag elfogadható sói, ahol:
a értéke 1-4. bármely egész szám;
b értéke 0-4. bármely egész szám;
c értéke 0-4. bármely egész szám;
Z jelentése (C3-Cio)cikloalkil, (C3-Cio)cikloalkil egymástól függetlenül egy vagy több Y’-csoporttal szubsztituálva; 3-10 tagú heterocikloalkil és 3-10 tagú heterocikloalkil egymástól függetlenül egy vagy több Alcsoporttal szubsztituálva; (Cs-C2o)aril és (C5C2o)aril egymástól függetlenül egy vagy több Υ’-csoporttal szubsztituálva; 5-20 tagú heteroaril és 5-20 tagú heteroaril egymástól függetlenül egy vagy több Y1 -csoporttal szubsztituálva; Ar1 jelentése (C5-C2o)aril és (C5-C2o)aril egymástól függetlenül egy vagy több Y2-csoporttal szubsztituálva; 5-20 tagú heteroaril és 5-20 tagú heteroaril egymástól függetlenül egy vagy több Y2-csoporttal szubsztituálva;
Y1 egymástól függetlenül lipofil funkcionális csoport, (C5-C2o)aril, (C6C26)alkaryl, 5-20 tagú heteroaril és 6-26 tagú alk-heteroaril;
Y2 jelentése egymástól függetlenül -R', -OR', -OR, -SR', -SR, -NR'R’, -NO2, CN, -halogén, -trihalometil, trihalometoxi, -C(O)R', -C(O)OR', -C(O)NR'R', -(O)NR'OR', C(NR'R')-NOR', -NR'-C(O)R', -SO2R', -SO2R', -NR'-SO2-R', -NR'C(0)-NR'R', tetrazol-5il, -NR'C(O)-OR', -C(NR'R')-NR', -S(O)-R', -S(0)-R, és -NR'-C(S)-NR'R'; és
R' jelentése egymástól függetlenül -H, (Ci-C8)alkil, (C2-C8)alkenil, és (C2C8)alkinil; és
100578-14371
-46R jelentése egymástól függetlenül (C5-C2o)aril és (C5-C2o)aril egymástól függetlenül egy vagy több -OR', -SR', -NR'R', -NO2, -CN, halogén vagy trihalometil csoporttal szubsztituálva, vagy ha c értéke 0 and Ar1 jelentése N'-szubsztituált urea-aril, a vegyület a (Illa) általános képletű:
vagy annak gyógyászatilag elfogadható sója; ahol:
a, b, és Z értéke, illetve jelentése a fentiekben megadott; and
R35 és R36 jelentése egymástól függetlenül hidrogén, (Ci-C8)alkil, (C2-C8)alkenil, (C2-C8)alkinil, (C3-Cio)cikloalkil, (C5-C2o)aril, (C5-C20) szubsztituált aril, (C6-C26)alkaril, (C6-C26) szubsztituált alkaril, 5-20 tagú heteroaril, 5-20 tagú szubsztituált heteroaril, 6-26 tagú alk-heteroaril, and 6-26 tagú szubsztituált alk-heteroaril; and
R37 jelentése egymástól függetlenül hidrogén, (Ci-C8)alkil, (C2-C8)alkenil, and (C2-C8)alkinil.
A (III) általános képletű vegyületek ismertetését találjuk például a WO 00/50390 számú nemzetközi közzétételi iratban. A fenti közzétételi iratban ismertetett valamennyi vegyület, közelebbről, a csatolt igénypontokban felsorolt vegyületek és a példákban leírt végtermékek teljes terjedelmükben a kitanítás részét képezik. A (III) általános képletű vegyületek például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a következők: 3-{[4-(3,3-dibenzil-ureido)-benzénszulfonil]-[2-(4-metoxi-fenil)-etil]-amino}-N-hidroxipropionamid (B vegyület), 3-{{4-[3-(4-klór-fenil)-ureido]-benzénszulfonil}-[2-(4-metoxifenil)-etil]-amino} -N-hidroxi-propionamid, és 3-{{4-[3-(l,2-difenil-etil)-ureido]-benzénszulfonil}-[2-(4-metoxi-fenil)-etil]-amino}-N-hidroxi-propionamid.
Ennek megfelelően, a találmány tárgyát képezik eljárások eritropoetin-asszociált állapotok, például anémiás és neurológiai rendellenességek kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére. Közelebbről, a találmány tárgyát képezik eljárások, amelyekben a találmány szerinti vegyületeket alkalmazzuk. Ezen felül, a találmány tárgyát képezik eljárások bizonyos kezelésekkel, például kemoterápiával vagy dialízissel, stb. kapcsolatosan kialakult anémiában szenvedő betegek kezelésére. A találmány egy közelebbi előnyös megvalósítási módja szerint, az eljárásokban a találmány szerinti vegyületeket alkalmazzuk. Szintén a
100578-14371
-47találmány tárgyát képezik eljárások endogén eritropoetin előállítására in vitro sejttenyésztő technológiák alkalmazásával. Ugyancsak a találmány tárgyát képezik eljárások a keringésben található retikulocitaszám növelésére, hírvivő RNS in vitro transzlálására alkalmazható sejtmentes retikulocita-lizátum előállítása céljából.
Eljárások a találmány szerinti vegyületek alkalmazásával
A találmány tárgyát képezik eljárások az endogén eritropoetinszint növelésére, ezáltal az eritropoezis fokozására. Az eljárások alkalmazhatók eritropoetin-asszociált állapotok, például anémiás és neurológiai rendellenességek, stb. megelőzésére, kezelésére vagy előkezelésére. Ilyen állapotok és például a fentiekben felsoroltak.
Szintén a találmány tárgyát képezik eljárások az endogén eritropoetinszint növelésére, ezáltal neurológiai rendellenességek, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, stroke, trauma, epilepszia, gerincvelői károsodás, és krónikus betegségek, például neurodegeneratív betegség kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére. Az eljárások alkalmazhatók beavatkozásokkal, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, a mellkas és has megnyitásával járó aortaműtétekkel kapcsolatos neurológiai rendellenességek kezelésére.
Szintén a találmány tárgyát képezik a fenti eljárásokban alkalmazható vegyületek. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sójának terápiásán hatásos mennyiségét adjuk be, egymagában vagy kombinációban, gyógyászatilag elfogadható kötőanyaggal együtt eritropoetin-asszociált állapot, például anémia kockázatának kitett egyednek. Az anémiát okozhatja valamilyen állapot vagy rendellenesség, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, krónikus vesebetegség, diabétesz, tumor, fekély, vírusfertőzés, bakteriális vagy parazitafertőzés; gyulladás, stb.; vagy az anémia összefüggésben lehet különböző eljárások vagy kezelések alkalmazásával, például sugárterápiával, kemoterápiával, vesedialízissel vagy sebészeti beavatkozással, stb.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sójának terápiásán hatásos mennyiségét, egymagában vagy gyógyászatilag elfogadható kötőanyaggal együtt HIV-fertőzött, zidovudinnal vagy más reverz transzkriptáz inhibitorral kezelt betegnek adjuk be. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület vagy gyógyászatilag elfogadható sójának terápiásán hatásos mennyiségét, egymagában vagy gyógyászatilag elfogadható kötőanyaggal együtt tumoros, ciklikus cisplatinnal vagy nem cisplatin tartalmú kemoterápiás szerrel kezelt anémiás betegnek adjuk be. A találmány egy még további előnyös megvalósítási módja szerint, a ve
100578-14371
-48gyület vagy gyógyászatilag elfogadható sójának terápiásán hatásos mennyiségét, egymagában vagy gyógyászatilag elfogadható kötőanyaggal együtt sebészeti beavatkozás előtt álló anémiás vagy nem anémiás betegnek adjuk be az allogén vértranszfúzió iránti igény csökkentésére.
A vegyületet beadhatjuk orális vagy transzdermális úton. Ez előnyökkel járhat a jelenleg alkalmazott EPO-pótló terápiás eljárásokhoz képest, mivel a beadás egyszerűbb, a hatóanyagot a beteg saját maga adagolhatja, az eljárás kevésbé költséges, az orvosnál tett látogatások száma csökken, és a fertőzésveszély és immunogén komplikációk száma mérséklődik, minimálisra csökkentve az egyes betegeknél rekombináns EPO adagolását követően jelentkező káros mellékhatásokat.
A találmány egy szempontja szerint, a vegyület a 2-oxoglutarát dioxigenáz enzimcsalád egy vagy több tagjának aktivitását gátolja. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület a 2-oxoglutarát dioxigenáz enzimcsalád legalább két tagjának aktivitását gátolja, például a HIF prolii hidroxiláz és HIF aszparagin hidroxiláz (FIH-1), stb. enzimeket gátolja azonos vagy különböző specifitással. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyület egy 2-oxoglutarát dioxigenázra, például HIF prolii hidroxilázra specifikus, és kis mértékű specifitást mutat vagy nem mutat specifitást az enzimcsalád más tagjaival szemben.
A találmány szerinti vegyületek adagolása más terápiás megközelítési módokkal kombinálható. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a vegyületet más 2oxoglutarát dioxigenáz inhibitorra együtt adjuk be, ahol a két vegyület különböző specifitást mutat a 2-oxoglutarát dioxigenáz enzimcsalád egyes tagjaival szemben. A két vegyületet beadhatjuk egy időben, az egyiknek másikhoz viszonyított meghatározott aránya mellett. Az adott kezelési rendben, adott egyénnél alkalmazható arányt szakember ismert módon határozhatja mag. További lehetőség szerint, két vegyületet beadhatunk egymást követően a kezelés során, például szívinfarktust követően. A találmány egy közelebbi előnyös megvalósítási módja szerint, az egyik vegyület specifikus módon HIF prolii hidroxiláz enzimaktivitást gátolja, a második vegyület pedig specifikus módon a prokollagén 4-hidroxiláz enzim aktivitását gátolja. A találmány egy további előnyös megvalósítási módja szerint, az egyik vegyület specifikus módon HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitását gátolja, a másik pedig specifikus módon a HIF aszpargil-hidroxiláz enzim aktivitását gátolja. Az ismertetetteken felül, a vegyületet beadhatjuk más hatóanyaggal, például vastartalmú hatóanyaggal, mint például vas-szulfáttal, Bi2-vitaminnal és/vagy folsawal, stb. A vegyületet beadhatjuk exogén eritropoetinnel is, például EPOGEN vagy ARANESP
100578-14371
-49rekombináns, humán eritropoetinnel (Amgen, Inc., Thousand Oaks, CA) és/vagy granulocita-kolónia stimuláló faktorral (G-CSF), például NEUPOGEN vagy NEULASTA rekombináns G-CSF-faktorral együtt (Amgen).
Gyógyászati készítmények, és beadási utak azok adagolására
A találmány szerinti készítmények beadhatók közvetlenül, vagy gyógyászati készítményekben szakember számára ismert módon, megfelelő hordozóanyagokkal, kötőanyagokkal együtt. A találmány szerinti kezelési eljárásokban a találmány szerinti vegyületeket adjuk be hatásos mennyiségben, például krónikus vesebetegség, diabétesz, tumor, AIDS, sugárterápia, kemoterápia, vesedialízis vagy sebészeti beavatkozás miatt anémiás vagy anémia kialakulása szempontjából veszélyeztetetett egyednek. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, az egyed emlős, legelőnyösebben ember.
A hatóanyag hatásos mennyisége, a legkényelmesebb és legeredményesebb beadási út, valamint a legelőnyösebb formula szakember számára ismert módon, kísérletes úton könnyen meghatározható. Ilyen formulák és beadási rendszerek leírása megtalálható a szakirodalomban. [Lásd például Gennaro A.R. (szerk.): „Remington Pharmaceutical Sciences”, lásd fent].
A készítményt beadhatjuk például szájon át, végbélen át, nyálkahártyán át, nazális, intesztinalis, parenterális, úton, például intramuszkuláris, szubkutan, intramedulláris injektálással, vagy intrathecalis, közvetlen intraventricularis, intravénás, intraperitoneális, intranazális vagy intraokularis injektálással.
A vegyületet vagy azt tartalmazó készítményt szisztémás adagolás helyett bejuttathatjuk lokális adagolással is. Megfelelő hatóanyag beadható injektálással vagy célzott hatóanyag-szállítórendszerrel, például depot vagy elnyújtott hatású készítményben.
A találmány szerinti gyógyászati készítmények bármely, a technika állása szerint jól ismert eljárással előállíthatok, például szokásos módon végzett elegyítéssel, oldással szemcsésítéssel, drazsírozással, őrléssel, emulgeálással, kapszulázással, felfogással, vagy liofilezéssel. A fentiekben ismertetettek szerint, a találmány szerinti készítmények tartalmazhatnak egy vagy több fiziológiásán elfogadható hordozóanyagot, például az aktív molekulák gyógyászati készítménnyé történő alakítását megkönnyítő kötőanyagokat és/vagy adalékanyagokat.
A megfelelő formulázás a választott beadási úttól függ. Például injektálásra a készítmény formulázható vizes oldatként, előnyösen fiziológiásán kompatibilis pufferekben, például Hanks-féle oldatban vagy Ringer oldatban.; vagy pufferolt fiziológiás sóoldatban. Nyálkahártyán át vagy nasalis úton történő beadásra az áthatolni kívánt barriertől függő
100578-14371
-50áthatolószert alkalmazhatunk a készítményben. Ilyen áthatolószerek a technika állása szerint ismertek. A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti vegyületeket orális úton történő beadásra formulázzuk. Orális úton történő beadásra, a vegyületeket úgy formulázhatjuk, hogy az aktív összetevőt a technika állása szerint ismert gyógyászatilag elfogadható hordozóanyagokkal elegyítjük. A hordozóanyag lehetővé teszi, hogy a vegyületet az egyednek orális úton adagolható tablettává, pirulává, drazsévá, kapszulává, folyadékká, géllé, sziruppá, sűrű szuszpenzióvá, szuszpenzióvá, és hasonló készítményekké formulázzuk. A készítményeket előállíthatjuk végbélen át (rectalis) úton történő adagolásra alkalmas formában is, például szokásos kúp alapanyagokat, például kakaó vaj at vagy glicerideket tartalmazó kúpokként vagy retenciós beöntésként.
Orális úton adagolható gyógyászati készítményeket kaphatunk szilárd halmazállapotú kötőanyagok alkalmazásával is, adott esetben úgy, hogy a kapott elegyet megőröljük, és a szemcsék elegyét kívánt esetben megfelelő adalékanyagok hozzáadását követően tablettákká vagy drazsémagokká alakítjuk. Közelebbről, kötőanyagokként alkalmazhatunk például töltőanyagokat, például cukrokat, például laktózt, szacharózt, mannitot, vagy szorbitot; cellulózkészítményeket, például kukoricakeményítőt, búzakeményítőt, rizskeményítőt, burgonyakeményítőt, zselatint, tragantmézgát, metilcellulózt, hidroxipropilmetilcellulózt, nátrium-karboximetilcellulózt, és/vagy polivinilpirrolidont (PVP). Kívánt esetben, dezintegráló szereket is adhatunk a készítményhez, például keresztkötésekkel összekapcsolt polivinil-pirrolidont, agart, alginsavat vagy annak sóját, például nátrium-alginátot. A készítményhez adhatunk még nedvesítőszereket, például nátrium-dodecil-szulfátot.
A drazsémagot megfelelő bevonattal vonhatjuk be. Ehhez, koncentrált cukoroldatokat alkalmazhatunk, amelyek adott esetben tartalmazhatnak gumiarábikumot, talkumot, polivinil-pirrolidont, karbopolgélt, polietilénglikolt, és/vagy titánium-dioxidot, lakk oldatokat, és megfelelő szerves oldószereket vagy azok elegyét. A tablettákhoz vagy drazsébevonatokhoz, azok azonosításának vagy az aktív hatóanyagot különböző dózisokban tartalmazó formulák felismerésének megkönnyítésére adhatunk színezékeket vagy pigmenteket
Orális úton adagolható gyógyászati készítmények például zselatinból álló „pushfit” kapszulák, valamint zselatinból, lágyítószerből, például glicerinből vagy szorbitból álló lágy, zárt kapszulák. A „push-fit” kapszulák az aktív hatóanyagot tartalmazhatják töltőanyaggal, például laktózzal, kötőanyaggal, például keményítőkkel és/vagy síkosítószerekkel, például talkummal vagy magnézium-sztearáttal, és adott esetben stabilizálószerekkel elegyítve. A lágy kapszulákban, az aktív hatóanyag lehet megfelelő folyadékban, például zsíros olajokban, folyékony paraffinban, vagy folyékony polietilén-glikolókban
100578-14371
-51oldva vagy szuszpendálva. A készítményekhez stabilizálószereket is adhatunk. Az orális úton történő beadásra szánt készítmények az ilyen úton történő beadásra alkalmas dózist kell, hogy tartalmazzanak.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, a találmány szerinti vegyületeket transzdermális úton, például bőrre helyezett tapasszal vagy lokális úton adhatjuk be. A találmány egy szempontja szerint, a találmány szerinti, transzdermális vagy lokális úton adagolható készítmény adott esetben egy vagy több, a penetrációt megkönnyítő segédanyagot vagy más adalékanyagot is tartalmazhat, például a bejuttatott vegyület eloszlását elősegítő komponenseket. Transzdermális vagy lokális úton adagolás előnyös például akkor, ha a hatóanyagot meghatározott helyre kívánjuk eljuttatni.
Inhalációs beadásra, a találmány szerinti vegyületeket tipikusan aeroszol spray formájában adjuk be, nyomás alá helyezett palackból vagy nebulizerből, megfelelő hajtógáz, például diklór-difluormetán, triklór-trifluor-metán, diklór-tetrafluor-etán, széndioxid, vagy más alkalmas gáz alkalmazásával. Nagy nyomású hajtógázt tartalmazó aeroszolok esetében, a megfelelő dózis meghatározott mennyiséget adagoló szelep segítségével állítható be. Előállíthatok az inahalátorban vagy inszufflátorban alkalmazható kapszulák és cserélhető egységek, például zselatinból. Ezek tipikusan a vegyületet és megfelelő porforma vivőanyagot, például laktózt vagy keményítőt tartalmazó porkeveréket tartalmaznak
Parenterális úton, injektálással történő adagolásra alkalmas készítmények például bolusinjekciók vagy folyamatos infúziók egységnyi dózist tartalmazó kiszerelési formában állíthatók elő, például ampullákban vagy több dózist tartalmazó tartályokban, hozzáadott tartósítókkal együtt. A készítmény formulázható szuszpenzióként, oldatként vagy emulzióként olajos vagy vizes vivőanyagban, és tartalmazhat a formulázást megkönnyítő komponenseket, például szuszpendáló, stabilizáló és/vagy diszpergálószereket. Parenterális úton adagolható készítmények lehetnek például vizes oldatok vagy egyéb vízoldékony készítmények.
Az aktív hatóanyagokat tartalmazó szuszpenziókat olajos injekció formájában is előállíthatjuk. Lipofil oldószerek vagy vivőanyagok zsíros olajok, például szezámolaj, szintetikus zsírsavészterek, például etil-oleátok vagy trigliceridek, vagy liposzómák. Injektálható vizes oldatok tartalmazhatnak a szuszpenzió viszkozitását növelő összetevőket például nátrium-karboximetil-cellulózt, szorbitot vagy dextránt. Adott esetben, a szuszpenzió stabilizálószereket vagy az összetevők oldékonyságát fokozó szereket tartalmazhat, amelyek lehetővé teszik magas koncentrációjú oldatok előállítását. Az aktív hatóanyag
100578-14371
-52lehet por formájában is, ebben az esetben az felhasználás előtt megfelelő vivőanyaggal, például steril, pirogénmentes vízzel rekonstituálható.
Az említettek szerint, a találmány szerinti készítmény depot készítményként is formulázható. Ilyen elnyújtott hatású készítmények beadhatók (például szubkután vagy intramuszkulárisan) implantátumokként, vagy intramuszkuláris injektálással. A találmány szerinti készítmények formulázhatók megfelelő polimerrel vagy hidrofób összetevővel (például emulzióként, megfelelő olajban), vagy ioncserélő gyantával, vagy rosszul oldódó származékokként, például rosszul oldódó sókként.
A találmány szerinti hidrofób molekulákkal alkalmazható hordozóanyagok a technika állása szerint jól ismertek, ilyenek például benzilalkoholt, nem poláris szurfaktánsokat, vízzel elegyedő szerves polimereket és vizes fázist tartalmazó ko-szolvens rendszerek. A ko-szolvens rendszer lehet a VPD ko-szolvens rendszer. A VPD 3 vegyes-% benzilalkoholt, 8 vegyes-Yo nem poláris poliszorbát-80-szurfaktánst és 65 vegyes-% polietilénglikol-300-at tartalmaz abszolút etanolban. A VPD ko-szolvens rendszer (VPD:5W) VPD-t tartalmaz 1.1 arányban 5% vizes dextrózzal hígítva. Ez a ko-szolvens rendszer alkalmas hidrofób komponensek oldására, és szisztémás úton adagolva alacsony toxicitású. Természetesen, a ko-szolvens rendszer összetevőinek aránya jelentős mértékben változhat anélkül, hogy a változatás a szolubilitást és a toxicitást hátrányosan befolyásolná. A ko-szolvens rendszer egyes komponensei is változtathatók. Poliszorbát-80 helyett alkalmazhatunk például más alacsony toxicitású, nem poláris szurfaktánst, változhat a polietilén-glikol frakció mérete, a polietilén-glikol egyéb biokompatibilis polimerekkel, például polivinil-pirrolidonnal, más helyettesíthető, és a dextróz más cukrokkal vagy poliszacharidokkal helyettesíthető.
Hidrofób molekulák más szállítórendszerekkel is bejuttathatok. Ilyen, hidrofób drogok esetében alkalmazható jól ismert szállítóeszközök például liposzómák és emulziók. Liposzóma szállítórendszereket a fentiekben már említettünk a génszállító rendszerek vonatkozásában. Bizonyos szerves oldószerek, például dimetilszulfoxid szintén alkalmazhatók, bár rendszerint magasabb toxicitás árán. Ezen felül, a vegyületek bejuttathatok a hatóanyag elnyújtott felszabadulását biztosító rendszerekkel, például a beadandó készítményt hatásos mennyiségben tartalmazó szemipermeabilis mátrixokként vagy szilárd, hidrofób polimerekként. Szakember számára különböző, a hatóanyag elnyújtott felszabadulását biztosító rendszerek ismertek. Elnyújtott hatású kapszulák, kémiai természetüktől függően, a vegyületeket néhány hét vagy akár 100 nap alatt adják le. A terápiás reagens kémiai termé
100578-14371
-53szetétől és biológiai stabilitásától függően további, proteinstabilizáló stratégiákat is alkalmazhatunk.
A találmány szerinti eljárásokban alkalmazott készítmények esetében, a terápiásán hatásos dózis a technika állása szerint ismert technológiákkal határozható meg. Például, állatmodellekben alkalmazható dózisok megállapítását sejttenyészetekben végezhetjük, hogy a sejtenyészetben megállapított IC5o-koncentrációt figyelembe vevő koncentrációt érjünk el a keringésben. Humán egyénekben alkalmazható dózistartományokat például sejttenyészetekben vagy más állatkísérletekben kapott adatok alapján határozhatunk meg.
A leírás szerinti értelemben, egy hatóanyag „terápiásán hatásos dózisán” a hatóanyag azon mennyiségét értjük, amely a tünetek enyhülését vagy a túlélési idő meghoszszabbodását eredményezi az egyedben. Ilyen molekulák toxicitása és terápiás hatékonysága a gyógyászatban szokásos eljárásokkal határozható meg sejttenyészetekben vagy kísérleti állatokban, például az LD50 (a populáció 50%-ának pusztulását okozó dózis) és az ED50 (a populáció 50%-ában terápiásán hatékony dózis) megállapításával. A toxikus és terápiás hatású dózisok aránya a terápiás index, amely az LD50/ED50 képlettel fejezhető ki. Magas terápiás indexű hatóanyagok alkalmazása előnyös.
Az alkalmazott dózis előnyösen olyan koncentrációt eredményez a keringésben, amely az ED50-et eléri, de kis mértékű toxicitást vált ki, vagy nem toxikus. A dózisok a fenti tartományon belül változhatnak az alkalmazott adagolási formák és beadási utak függvényében. Az adott formula, beadási út és dózis a technika állása szerint ismert eljárásokkal választható ki a kezelendő egyed állapotától függően.
A beadott dózis és a dózisok közt eltelt idő egyedenként állapítható meg, hogy az aktív hatóanyag plazmaszinte elérje a kívánt endogén eritropoetin-plazmaszint beállításához szükséges koncentrációt; ezt a koncentrációt minimális hatékony koncentrációnak {„minimal effective concentration”, MEC) nevezzük. A MEC vegyületenként változhat, de meghatározható például in vitro adatok alapján. A MEC eléréséhez szükséges dózis függ az egyed jellemzőitől és a beadás útjától. A hatóanyag vagy azt tartalmazó készítmény olyan beadási rend szerint adagolandó, amely a plazmaszintet a MEC fölött tartja a kezelés időtartamának körülbelül 10-90%-a alatt, előnyösebben körülbelül 30-90%-a alatt, és legelőnyösebben körülbelül 50-90%-a alatt. Lokális adagolás vagy szelektív felvétel esetén, a hatóanyag hatékony lokális koncentrációja nem feltétlenül mutat összefüggést a plazmakoncentrációval. Az endogén eritropoetinszintet stimulálhatjuk továbbá: 1) telítő dózis, majd fenntartó dózis beadásával; 2) indukciós dózis beadásával, amely a célzott tartományba eső eritropoetinszint gyors elérését biztosítja, majd alacsonyabb, fenntartó dózis
100578-14371
-54beadásával, amely a hematokritot a kívánt tartományban tartja; vagy 3) ismételt, intermittáló adagolással.
A hatóanyag vagy készítmény mennyisége természetesen több faktortól függ, például a kezelendő egyed nemétől, életkorától, testtömegétől, az állapot súlyosságától, a beadás módjától, és a kezelőorvos megítélésétől.
A találmány szerinti készítmény kívánt esetben, az aktív összetevő egy vagy több egységnyi dózisát tartalmazó csomagban vagy diszpenzer (adagoló) eszközben is kiszerelhető. Ilyen csomag vagy eszköz tartalmazhat például fém- vagy műanyagfóliát, például „blister” formájában. A csomaghoz vagy adagolóeszközhöz használati útmutatót mellékelhetünk. Előállíthatunk a találmány szerinti vegyületeket kompatibilis, gyógyászatilag elfogadható hordozóanyagban tartalmazó készítményeket, megfelelő tartályba helyezve, és címkével ellátva, amelyen a kezelendő állapotot (indikációt) feltüntettük. A címkén feltüntetett állapot olyan állapot, rendellenesség vagy betegség lehet, ahol az anémia a fő indikáció.
Vegyületek szűrése és azonosítása
Ugyancsak a találmány tárgyát képezik eljárások az endogén eritropoetinszintet növelő további vegyületek szűrésére és azonosítására. Közelebbről, a találmány tárgyát képezik eljárások endogén EPO-plazmaszintet növelő vegyületek azonosítására. Különböző eljárások, például az alábbiakban ismertetett ilyen eljárások és szűrőtechnológiák alkalmazhatók az endogén eritropoetinszintet növelő kis molekulájú vegyületek azonosítására. Egy különösen előnyösen alkalmazható eljárás szerint, állatokat kezelünk az adott vegyülettel, és mérjük az eritropoetinszintet a plazmában (lásd például a 2. példában ismertetetteket). A vizsgálati eljárások tipikusan kimutatható szignált eredményeznek a reakció szubsztrátjának felhasználódásával vagy reakció termék keletkezésével arányosan. A kimutatást végezhetjük például fluoroforok, radioaktív izotópok, enzimkonjugátumok, és a technika állása szerint ismert más kimutatható jelölőanyagok alkalmazásával. Az eredmények lehetnek kvalitatív vagy kvantitatív eredmények. A reakciótermék izolálását jelölőanyag, például biotin vagy hisztidincímke alkalmazásával könnyíthetjük meg, amely precipitáció vagy affinitásos kromatográfia alkalmazásával lehetővé teszi annak tisztítását más reakciókomponensektől.
A találmány egy előnyös megvalósítási módja szerint, ahol az endogén eritropoetinszintet a HIFoc stabilizálásával növeljük a sejtekben, a találmány tárgyát képezik eljárások a HIFa aktivitását szabályozó kis molekulájú vegyületek azonosítására. A
100578-14371
-55HIFa hidroxilezés meghatározása történhet a HIFa-proteinben vagy fragmentumában jelenlévő hidroxilezett prolin vagy aszparagin aminosavak kimutatásával, vagy a 2oxoglutarátból enzim és HIFa vagy fragmentuma jelenlétében keletkező szukcinát meghatározásával. [Lásd például Palmerini és mtsai.: J. Chromatogr. 339, 285 (1985); Cunliffe és mtsai.: Biochem J. 240, 617 (1986).] HIFa hidroxileződésének mérésére alkalmas eljárás ismertetését találjuk például Ivan és mtsai. közleményében (lásd fent) és az alábbi, 9. példában. A 2-oxoglutarátból keletkező szukcinát meghatározására alkalmas eljárást írnak le például Kaule és Gunzler [Anal. Biochem. 184, 291 (1990)]. Szubsztrátmolekulaként szolgálhat HIFa vagy annak fragmentuma, például HIF(556-575); az eljárásban alkalmazható szubsztrát leírását találjuk az alábbiakban, a 7. példában [metoxikumarin]DLDLEALAPYIPADDDFQL-amid (5. azonosítószámú szekvencia).
Az enzim lehet például bármely forrásból származó HIFa prolii hidroxiláz (lásd GenBank nyilvántartási szám: AAG33965, stb.). Az enzim jelen lehet nyers sejtlizátumban, vagy lehet részlegesen tisztítva abból. A vegyület jelenlétében és annak hiányában mért enzimaktivitás összehasonlítása alapján HIfa hidroxileződését gátló vegyületeket azonosíthatunk.
A fentieken felül, és a már ismertetett eljárásokkal kombinálva, a találmány szerinti vegyületek azonosíthatók a technika állása szerint ismert különböző szűrőtechnológiákkal. Ilyen szűrőtechnológiákban a cél polipeptid vagy a vegyületek lehetnek szabadon oldatban; szilárd hordozóhoz kötve, sejtfelszínen expresszáltatva, sejtben, stb. Például, a tesztvegyületek jelen lehetnek valamilyen felszínen elrendezve, és azok a technika állása szerint újabban elterjedt „array” technológiához hasonló módon aktivitásra analizálhatók. [Lásd például Shalon és mtsai.: WO 95/35 505 számú nemzetközi közzétételi irat (1995); Baldeschweiler és mtsai.: WO 95/251 116 számú nemzetközi közzétételi irat (1995); Brennan és mtsai.: 5 474 796 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (1995); valamint Heller és mtsai.: 5 605 662 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (1997)].
Endogén eritropoetin előállítása in vitro a találmány tárgyát képezik eljárások endogén eritropoetin előállítására in vitro sejttenyésztő technológiák alkalmazásával. Közelebbről, endogén eritropoetint állítunk elő úgy, hogy állati szövetből, előnyösen a találmány szerinti vegyületekkel stimulálva eritropoetin expresszálására képes humán szövetből származó sejteket tenyésztünk szakember számára ismert technológiákkal. Ilyen eljárásokban alkalmazhatók például májsej
100578-14371
-56tek, hematopoetikus sejtek, vesesejtek és idegsejtek, stb. A találmány szerinti eljárásban endogén eritropoetin előállítására alkalmazható sejtek például a máj szövet eredetű Hep3Bsejtek.
Sejttenyésztő technológiák a technika állása szerint ismertek, és alkalmazhatunk bármely a sejtek életképességét fenntartó, és endogén proteinek expresszióját elősegítő eljárást. A sejteket tipikusan a sejtek szaporodása, életképessége és proteintermelése szempontjából optimalizált tenyésztő tápközegben tenyésztjük. A sejtek lehetnek szuszpenzióban, vagy szubsztráthoz kitapadva, és a tápközeg összetevőit pótolhatjuk szakaszosan vagy átáramlásos rendszerben folyamatosan. A találmány szerinti vegyületeket a tenyésztő tápközeghez adjuk az eritropoetin-termelést stimuláló, de a sejtek életképességét nem károsító mennyiségben. A sejtek által termelt eritropoetin a sejttenyésztő tápközegbe szekretálódik. A tápközeget összegyűjtjük, és az eritropoetint a technika állása szerint ismert eljárásokkal kinyerjük. [Lásd például Lai és mtsai.: 4 667 016 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (1987); valamint Egrié: 4 558 006 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (1985).]
A találmány fenti és egyéb megvalósítási módjai a leírás alapján szakember számára nyilvánvalóak, és azok szintén a találmány oltalmi körébe tartoznak.
A találmány szerinti megoldást a továbbiakban a pontosabb értelmezhetőség céljából konkrét megvalósítási példákon keresztül kívánjuk szemléltetni, anélkül azonban, hogy igényünket az ismertetettekre korlátoznánk. A találmány oltalmi köre nem korlátozódik a csatolt példákban ismertetettekre, azok csupán a találmány egy-egy szempontjának szemléltetését szolgálják. A találmány tárgyát képezik a fenti eljárásokkal funkcionálisan egyenértékű eljárások is. Szakember a leírásban és csatolt ábrákon ismertetettekhez képest képes különböző módosítások végrehajtására. Ilyen módosítások szintén a találmány oltalmi körébe tartoznak.
1. példa
Az endogén erítropoetinszint növelése in vitro hepatokarcinoma (HEp3) szövetből származó humán sejteket (lásd például „American Type Culture Collection”, Manassas, VA) oltottunk ki 35 mm átmérőjű tenyésztő edényekbe, és szaporítottunk 37°C-on, 20% O2 és 5% CO2 mellett Earle féle kiegyensúlyozott sóoldattal, 1 mm nátrium-piruváttal és 10% FBS-sel kiegészített „Minimál Essential Medium” (MEM) tápközegben. Amikor a sejtek folyamatos réteget képeztek, a tápközeget OPTI-MEM-tápközegre cseréltük (Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA), és a sejtréteget körülbelül 24 órán át, 20% O2 és 5% CO2 mellett 37°C-on tenyésztet
100578-14371
-57tük. Ezután, a tápközeghez a találmány szerinti vegyületet (az A-I vegyületek valamelyikét) vagy 1% DMSO-t (negatív kontroll) adtunk, és az inkubálást egy éjszakán át folytattuk.
Az inkubációt követően, a kondicionált tápközeget a sejttenyészetből összegyűjtöttük, és QUANTIKINE immunoassayvel (R&D Systems, Inc. Minneapolis MN) a gyártó utasításai szerint eljárva eritropoetin-expresszióra analizáltuk. Amint az az 1. ábrán látható, a találmány szerinti vegyülettel történő kezelést követően a májeredetű sejtekben (Hep3) szignifikánsan nőtt az eritropoetin-expresszió. A találmány szerinti vegyületek tehát az állatokban normálisan eritropoetint termelő szövetből származó sejtekben, in vitro fokozzák az eritropoetin-expressziót.
2. példa
Endogén eritropoetinszint növelése in vivo
I. kísérlet
Húsz (20) „Swiss Webster” hím egeret (30-32 g) szereztünk be a Simonson Inc. cégtől (Gilroy, CA), és kezeltünk nyelőcsőszondán át naponta kétszer, összesen 2,5 napig (5 dózisban) 4 ml/kg 0,5% karboximetil-cellulózzal (CMC; Sigma-Aldrich, St. Louis MO) (0mg/kg/nap) vagy 2,5% C vegyülettel (25 mg/ml 0,5% CMC-ben) (200 mg/kg/nap). Négy órával az utolsó dózist követően, az állatokat izofluránnal anesztetizáltuk, és a hasi vénából két vérmintát vettünk. Az egyik vérmintát MICROTAINER szérumszeparátor csőbe vettük le (Beckton-Dickinson, Franklin Lakes, NJ), és 30 percig szobahőmérsékleten inkubáltuk, majd 10 percig, 4°C-on 8 000 ford./perc mellett centrifugáltuk. A szérumfrakciót eltávolítottuk, és QUANTIKINE immunoassayvel (R&D Systems), a gyártó utasításai szerint eljárva eritropoetin- (EPO-) koncentrációra analizáltuk. A második vérmintát MICROTAINER EDTA-2K csőbe vettük le (Beckton-Dickinson) hematokrit meghatározására. A hematokritot úgy határoztuk meg, hogy az EDTA-val kezelt vért 75 mm x 1,11,2 m belső átmérőjű kapilláriscsőbe töltöttük (Chase Scientific Glass, Inc., Rockwood TN) körülbelül % hosszúságig. A cső egyik végét CRITOSEAL-tömítővel lezártuk (Sherwood Medical Company), és a csövet 5 percig, J-503M MICROHEMATOCRIT centrifugában (Jorgensen Laboratories, Inc. Loveland CO), 12 000 ford./perc mellett centrifugáltuk. A hematokritot leolvasó skála mellett olvastuk le. Ezután, az egereket leöltük, és körülbelül 150 mg máj és veseszövetet eltávolítottunk, és -20°C-on RNALATER oldatban (Ambion) tároltunk.
RNS-t az alábbiak szerint izoláltunk. Szövetdarabokat kis darabkákra vágtunk, azokhoz 1,75 ml RTL-lízispuffert (RNEASY készlet; Qiagen Inc., Valencia, CA) adtunk, és a szövetdarabokat körülbelül 20 másodpercig „rotor-stator POLYTRON” homogenizá
100578-14371
-58torral (Kinematica, Inc., Cincinnati, OH) homogenizáltuk. Körülbelül 350 μΐ homogenizátumot 3 percig mikrocentrifugában centrifugáltunk, hogy az oldhatatlan komponenseket kiülepítsük, majd a felülúszót másik csőbe vittük át, és abból RNS-t izoláltunk az RNEASY készlet (Qiagen) alkalmazásával, a gyártó utasításai szerint eljárva. Az RNS-t 80 μΐ vízben eluáltuk, és RIBOGREEN reagenssel (Molecular Probes, Eugene, OR) annak mennyiségét meghatároztuk. Ezután, a genomi DNS-t az RNS-készítményből DNA-FREE készlettel (Ambion Inc., Austin TX), a gyártó utasításai szerint eljárva eltávolítottuk. A fényelnyelést 260 és 280 nm hullámhosszon lemértük, hogy az RNS tisztaságát és koncentrációját meghatározzuk.
Random hexamer láncindító (1 μιηοΐ/l), 1 pg teljes RNS és OMNISCRIPT reverz transzkriptáz (Qiagen) alkalmazásával cDNS-t szintetizáltunk a gyártó utasításai szerint eljárva. A kapott cDNS-t vízzel 5-szőrösére hígítottuk, hogy 100 μΐ végtérfogatú oldatot kapjunk. Az eritropoetin génexpresszió relatív szintjét kvantitatív PCR-eljárassal, FASTSTART DNA MASTER SYBR GREEN I készlet (Roche) és génspecifikus láncindítók alkalmazásával, LIGHTCYCLER rendszerben (Roche) határoztuk meg a gyártó utasításai szerint eljárva. A mintákat 6 perig 94°C-on hevítettük, majd a következő ciklusokat ismételtük összesen 42 cikluson át: 15 másodperc 95°C-on; 5 másodperc 60°C-on, és 10 másodperc 72°C-on.
Az alábbi eritropoetin-specifikus láncindítókat alkalmaztuk:
mEPO-R3 TTCTGGCCCCGAGGATGTCA (1. azonosítószámú szekvencia); és mEPO-F3 ACGAACTTGCTCCCCGTCACTG (2. azonosítószámú szekvencia). Kontrollként a 18S riboszomális RNS gén expressziójának relatív szintjét határoztuk meg. Kvantitatív PCR-t végeztünk QUANTITECT SYBR GREEN PCR készlet (Qiagen) és génspecifikus láncindítók alkalmazásával, LIGHTCYCLER rendszerben (Roche) a gyártó utasításai szerint eljárva. A mintákat 15 perig 95°C-on hevítettük, majd a következő ciklusokat ismételtük összesen 42 cikluson át: 15 másodperc 94°C-on; 20 másodperc 60°C-on, és 10 másodperc 72°C-on. A következő riboszomális RNS specifikus láncindítókat alkalmaztuk:
18S-rat-2B TAGGCACGGCGACTACCATCGA (3. azonosítószámú szekvencia);
18S-rat-2A CGGCGGCTTTGGTGACTCTAGAT ( 4. azonosítószámú szekvencia).
100578-14371
-59A PCR-reakcióban standard görbét vettünk fel, és csak vizet tartalmazó vakot is alkalmaztunk. Ezen felül, mindegyik PCR-reakciót követően olvadási görbét vettünk fel az amplifíkáció specifitásának igazolására. Az eritropoetingén-expressziót a mintában található 18S riboszomális RNS expressziós szintjére normalizáltuk.
Amint az a 2.A ábrán látható, az eritropoetingén-expresszió a kezelt állatok veséjében és májában egyaránt indukálódott a kezeletlen kontrollokhoz képest. A májban mintegy 32-szeresére, a vesében mintegy 580-szorosára nőtt az EPO-transzkripció szintje a kezeletlen állatok májához és veséjéhez képest (az y-tengelyen jelölt egységek önkényesen választott egységek). A 2.B ábrán bemutatottak szerint, a kezelt csoportban az állatok eritropoetin-plazmaszintje szignifikánsan nőtt a kezeletlen kontroliokéhoz képest. A 2.C ábrán látható, hogy az endogén eritropoetinszint találmány szerinti vegyületekkel indukált növekedése szignifikáns mértékben fokozta a hematokritot a kezelt állatokban a kezeletlen kontrollok hematokrit értékeihez képest.
IL kísérlet „Webster Swiss” hím egeret (29-34 g) a Simonson Inc. cégtől szereztünk be, és azokat nyelőcsőszondán át naponta egyszer, összesen 2,5 napig (5 dózisban) 4 ml/kg 0,5% karboximetil-cellulózzal (CMC; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) (0 mg/kg/nap) vagy 100 mg/kg/nap E vagy K vegyülettel kezeltünk 3 napon át. A vérminták levételét és a szövetminták feldolgozását az I. kísérletnél ismertetett módon végeztük (lásd fent). Egy további kísérletben, egereket 0,5% CMC-vel vagy 60 mg/kg/nap F vagy J vegyülettel kezeltünk 5 napon át. Negyvennyolc (48) órával az utolsó kezelést követően vérmintákat vettünk, az egereket leöltük, és a szöveteket a fentiekben ismertetettek szerint feldolgoztuk.
Amint az a 3.A ábrán látható, a találmány szerinti vegyületekkel végzett 2 napos kezelést követően a plazma eritropoetinszintek a kontroliban mérhető értékek fölé növekedtek. A 3.B ábrán az is megfigyelhető, hogy a kezelt állatokban 2 és 7 nappal később mért hematokritértékek egyértelműen magasabbak voltak a kezeletlen kontrollok hasonló értékeinél.
3. példa
In vivo meghatározott dózis-válasz görbe
Húsz (20) „Sprague Dawley” hím patkányt (körülbelül 260 g) szereztünk be a „Charles River Laboratories”, Inc. cégtől, és kezeltünk nyelőcsőszondán át a következők szerint: (1) négy patkányt az 1-7. napokon, naponta 0,5% karboximetil-cellulózzal (CMC; Sigma-Aldrich, St. Louis MO) (0 mg/kg/nap) kezeltünk, a 8-14. napok között nem kezeltünk, majd a 15-19. napokon, naponta 0,5% karboximetil-cellulózzal kezel
100578-14371
-60tünk(0 mg/kg/nap); (2) négy állatot a 0. és 3. napokon összesen 7 ml/kg/nap 5,0% koncentrációjú C vegyülettel kezeltünk (50 mg/ml 0,5% CMC-ben) (350 mg/kg), a 8-14. napok között nem kezeltünk, majd a 15-19. napokon 3% C-vegyülettel kezeltünk (30 mg/ml 0,5% CMC-ben) (60 mg/kg); és (3) négy állatot az 1-7. napokon összesen 4 ml/kg/nap 2,5% koncentrációjú C vegyülettel kezeltünk (25 mg/ml 0,5% CMC-ben) (100 mg/kg), a 8-14. napok között nem kezeltünk, majd a 15-19. napokon 3% C-vegyülettel kezeltünk (60 mg/kg/nap). A (2) és (3) csoport tagjai tehát összesen 700 mg C vegyületet kaptak az első 7 napon testtömeg-kilogrammonként, nem részesültek kezelésben a 7-14. napokon, majd 60 mg/kg/nap C vegyületet kaptak további 5 napon át. Az állatoknál követtük a testtömeg változását, és figyeltük a toxicitásra utaló jeleket. Vérmintákat (2x0,5 ml) vettünk az 1., 3., 7., 10., 17. és 21. napokon a következőképp. Az állatokat izofluránnal anesztetizáltuk, és a farokvénából 0,5-0,5 ml vérmintát vettünk két MICROTAINER EDTA-2K csőbe (Beckton-Dickinson). A vérmintákban a fent leírtak szerint meghatároztuk az eritropoetinszintet, hemoglobint és hematokritot.
Amint az a 4.A ábrán látható, a vegyület már 1 napos kezelés követően szignifikáns mértékben fokozta a szérum-eritropoetinszintet. A 4.B ábrán bemutatottak szerint, a szérum EPO-szint emelkedése az éretlen vérsejtek (retikulociták) arányának emelkedéséhez vezetett, igazolva, hogy a vegyület stimulálja az új vörösvértestek képződését. A 4.C és 4.D ábrákon megfigyelhető, hogy a vegyület növelte a vérben mérhető hemoglobin- és hematokritszinteket. Ezen felül, a vegyület alacsonyabb dózisainak alkalmazását követően a hemoglobon- és hematokritszint tartósan magasabb szinten maradt. A fenti eredmények szerint, a találmány szerinti vegyület szabályozott módon a vörösvértestek számának emelkedését eredményezi, és a válaszkészség a vegyületre hosszabb ideig megmarad az állatokban.
4. példa
Cisplatinnal kiváltott anémia kezelése
A találmány szerinti vegyületek azon tulajdonságát, hogy képesek post-ischeamiás akut veseelégtelenséggel járó anémia kezelésére Vaziri és mtsai. által leírtak szerint vizsgáltuk [Am. J. Physiol. 266(3 Pt 2):F360-6 (1994)]. Tizenöt (15) „Sprague Dawley” hím patkányt (280-300 G) szereztünk be a „Charles River Laboratories” állatházából. A 0. napon a patkányokat intraperitoneálisan fiziológiás sóoldattal injektáltuk (kontroll; n=3) 8 ml/kg mennyiségben; vagy cisplatinnal (CP; Bedford Laboratories, Bedford, OH) kezeltük 7 mg/kg (7 ml/kg; n=6) vagy 10 mg/kg (10 ml/kg; n=6) mennyiségben. Vérmintákat (0,2 ml) vettünk az 5., 9. és 16. napokon az alább ismertetettek szerint. Az állatokat
100578-14371
-61izoflurannal anesztetizáltuk, és a farokvénából 0,2 ml vért vettünk MICROTAINER EDTA-2K csőbe (Beckton-Dickinson). Az állatokban kialakult anémia fokának megállapítására a vérmintákban meghatároztuk a hematokritot.
A 19. nappal kezdődően, a cisplatinnal kezelt csoport felét (n=3x2) és a teljes kontrollcsoportot nyelőcsőszondán át, naponta egyszer, 5 egymást követő napon 2 ml/kg 0,5% CMC-vel (Sigma-Aldrich) kezeltük. A cisplatinnal kezelt csoport másik felét (n=3x2) nyelőcsőszondán át, naponta egyszer, 5 egymást követő napon 2 ml/kg 2,5% koncentrációjú C vegyülettel kezeltünk (25 mg/ml 0,5% CMC-ben) (350 mg/kg). Vérmintákat (0,5 ml) a fentiekben ismertetettek szerint vettünk a kezelés megkezdését megelőzően, és 4 nappal a kezelés megkezdése után. A vérmintákban a fent leírtak szerint meghatároztuk a CBC- és retikulocitaszámot. Az orális kezelés megkezdését követő 9. napon vérmintát (0,1 ml) vettünk, és abban a hematokritot a fent ismertetettek szerint meghatároztuk.
Az 5.A ábrán látható, hogy a találmány szerinti vegyülettel végzett kezelés megkezdését megelőzően, 7 mg/kg és 10 mg/kg cisplatin adagolása a 19. napra 14%-kal illetve 22%-kal csökkentette a hematokritot a kontrollokban mért értékekhez képest. A találmány szerinti vegyület adagolása azonban 4 nappal a kezelés megkezdését követően már növelte a hematokritszintet a CP-kezelt állatokban, és a hematokrit értékek 9 nappal a kezelés megkezdését követően szignifikánsan meghaladták a kezeletlen csoportban mért értékeket. Az 5.A ábrán megfigyelhető, hogy a 7 mg/kg CP-vel, majd a találmány szerinti vegyülettel kezelt állatokban mért hematokritszintek a 9. napra a normális kontroll értékekre vagy afolé emelkedtek. Az 5.B ábrán bemutatottak szerint, a hematokrit emelkedése új vörösvértestek képződésének következménye, mivel a keringésben található retikulociták száma szintén emelkedett a vegyülettel kezelt állatokban.
5. példa
Hemolitikus anémia kezelése
Hemolitikus anémiát számos faktor okozhat, például, de anélkül, hogy igényünket a felsoroltakra korlátoznánk, toxinok, hemodialízis, stb. A találmány szerinti vegyület azon tulajdonságát, hogy képes hemolitikus anémia kezelésére, Rencricca és mtsai. eljárásával vizsgáltuk [Blood 36, 764 (1970)]. Röviden, egereket nyelőcsőszondán át, naponta kétszer, összesen 5 napig 2 ml/kg 0,5% CMC-vel (Sigma-Aldrich) kezeltünk (A csoport); vagy a találmány szerinti vegyülettel kezeltünk. A 3. nappal kezdődően, az egereket 3 egymást követő napon, naponta, szubkután injektálással fiziológiás sóoldattal vagy 60 mg/kg fenilhidrazinnal (PHZ) kezeltük. A 8. napon a kísérletbe bevont egerektől szívpunkcióval vért vettünk, és a hematokritot a vérmintákban meghatároztuk. A legalacsonyabb
100578-14371
-62hematokritértékeket (a kontroll körülbelül 50%-a) a csak PHZ-t kapott állatokban mértük 4 nappal az első PHZ-dózis beadását követően. A hematokrit körülbelül 8 nappal később értei el újból a normális értéket. A találmány szerinti vegyülettel végzett kezelés minimálisra csökkentette a hematokritesést az egerekben a vivőanyaggal kezelt kontrollokhoz képest.
Egy további kísérletben, patkányokat Criswell és mtsai. eljárásával kezeltünk [J. Appl. Toxicol. 20, 25 (2000)]. Az eljárás lényegében megegyezett a fentiekben ismertetettekkel, azzal az eltéréssel, hogy egerek helyett patkányokat kezeltünk 50 mg/kg PHZ-vel, szubkután helyett intraperitoneális injektálással. A vörösvértestek számának maximális csökkenését (68%) a 3 napon várhatjuk a PHZ-kezelt állatokban.
6. példa
Veseelégtelenséggel kapcsolatos anémia kezelése
A találmány szerinti vegyület azon tulajdonságát, hogy képes poszt-ischaemiás akut veseelégtelenséggel járó anémia kezelésére Tan és mtsai. által leírtak szerint vizsgáltuk [Kidney Int. 50, 1958 (1996)]. Röviden, a patkányokban egy órára, egy oldalon elszorítottuk a bal odali veseartériát. Ezután, az artériafogót eltávolítottuk, és a sebet zártuk. A patkányokat nyelőcsőszondán át, naponta kétszer 2 ml/kg 0,5% CMC-vei (Sigma-Aldrich) kezeltük (A csoport), vagy 5% koncentrációban a találmány szerinti vegyülettel kezeltük. Az artériafogó eltávolítását követően 2 órával, 24 órával és 1 héttel vért vettünk hematokrit meghatározására. A vivőanyaggal kezelt patkányokban mért hematokritértékek várhatóan az álműtött kontroll patkányokban mért értékek körülbelül 85%-át, 90%-át és 93%-át érik el az adott időpontokban.
A fent ismertetetteken felül, a találmány szerinti vegyület azon tulajdonságát, hogy képes poszt-ischaemiás akut veseelégtelenséggel járó anémia kezelésére Nemoto és mtsai. eljárásával is vizsgáltuk [Kidney Int. 59, 246 (2001)]. Röviden, patkányokat nyelőcsőszondán át, naponta kétszer 2 ml/kg 0,5% CMC-vel (Sigma-Aldrich) kezeltünk (A csoport), vagy a találmány szerinti vegyülettel kezeltünk. A patkányokban a jobb oldali veseartériát érfogóval leszorítottuk, és ezzel párhuzamosan a bal oldali vesét eltávolítottuk. Ezután, az érszorítót 30 perc (mérsékelt ischaemia) vagy 45 perc (súlyos ischaemia) eltávolítottuk, és a reperfúziót megfigyeltük.
7. példa
Eritropoetin expresszáltatása in vivo
Huszonöt (25) „Webster Swiss” hím egeret (35-38 g) a Simonson Inc. cégtől szereztünk be, és azokat nyelőcsőszondán át naponta egyszer, összesen 2,5 napig (5 dózisban)
100578-14371
-634 ml/kg 0,5% karboximetil-cellulózzal (CMC; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) (0 mg/kg/nap), vagy 30 mg/kg vagy 100mg/kg/nap C vegyülettel kezeltünk 4 napon át; vagy anémia kiváltására a fent leírtak szerint naponta vért vettünk az állatoktól. Vérmintákat vettünk, és vese-, máj-, agy-, tüdő-, szív- és harántcsíkolt izom szöveteket távolítottunk el és dolgoztunk fel a 2. példában leírtak szerint (lásd fent).
RNS-t az alábbiak szerint izoláltunk. Az egyes szervekből 50 mg darabkákat összevagdostunk, ehhez 875 μΐ RTL-lízispuffert (RNEASY készlet; Qiagen Inc., Valencia, CA) adtunk, és a szövetdarabokat körülbelül 20 másodpercig „rotor-stator POLYTRON” homogenizátorral (Kinematica, Inc., Cincinnati, OH) homogenizáltuk. A homogenizátumot 3 percig mikrocentrifugában centrifugáltunk, hogy az oldhatatlan komponenseket kiülepítsük, majd a felülúszót új csőbe vittük át, és abból RNS-t izoláltunk az RNEASY készlet (Qiagen) alkalmazásával, a gyártó utasításai szerint eljárva. Az RNS-t 80 μΐ vízben eluáltuk, és RIBOGREEN reagenssel (Molecular Probes, Eugene, OR) annak mennyiségét meghatároztuk. Ezután, a genomi DNS-t az RNS-készítményből DNA-FREE készlettel (Ambion Inc., Austin TX), a gyártó utasításai szerint eljárva eltávolítottuk. A fényelnyelést 260 és 280 nm hullámhosszon lemértük, hogy az RNS tisztaságát és koncentrációját meghatározzuk.
Az RNS-t 0,3 mol/1 nátrium-acetát (pH=5,2), 50 ng/ml glikogén és 2,5 térfogat etanol összetételű pufferrel egy óra alatt, -20°C-on precipitáltuk. A mintákat centrifugáltuk, és az üledéket 80%-os etanollal mostuk, szárítottuk, majd vízben szuszpendáltuk. Kettősszálú DNS-t szintetizáltunk T7-(dT)24 első szál láncindító (Affymetrix, Inc., Santa Carla, CA) és SUPERSCRIPT CHOICE rendszer (Invitrogen) alkalmazásával. A kapott cDNS-t egyenlő térfogatú 25:24:1 arányú fenol:kloroform:izoamilalkohol eleggyel extraháltuk PHASE LOCK GEL inszert (Brinkman, Inc., Westbury, NY) alkalmazásával. A vizes fázist kinyertük, és a cDNS-t 0,5 térfogat 7,5 mol/1 ammónium-acetát és 2,5 térfogat etanol hozzáadásával precipitáltuk. Más lehetőség szerint, a cDNS-t GENCHIP mintatisztító modullal (Affymetrix) tisztíthatjuk a gyártó utasításai szerint eljárva.
A cDNS alapján biotinnal jelölt cRNS-t szintetizáltunk in vitro transzlációs (IVT) reakcióval a „BIOARRAY HighYield RNA transcription labeling kit” (Enzo Diagnostics, Inc., Farmingdale, NY) alkalmazásával, a gyártó utasításai szerint eljárva. A jelölt végterméket GENCHIP mintatisztító modullal (Affymetrix) tisztítottuk és íragmentáltuk a gyártó utasításai szerint eljárva.
100578-14371
-64Hibridizációs koktélt készítetünk úgy, hogy 5 μg próbát lx hibridizációs puffer [100 mmol/1 MES; 1 mmol/1 [Na+], 20 mmol/1 EDTA, 0,01% Tween-20], 100μg/ml heringsperma-DNS, 500 μg/ml acetilált BSA, 0,03 nmol/1 kontrol oligo B2 (Affymetrix) és lxGENECHIP eukariota hibridizációs kontrol hozzáadásával 100 μΐ-re egészítettünk ki. A koktélt 99°C-on 5 percig, majd 45°C-on 5 percig inkubáltuk, végül 5 percig centrifugáltuk. A „Murine genome U74AV2” arrayt (MG-U74Av2; Affymetrix) hagytuk szobahőmérsékletre melegedni, majd 10 percig, 45°C-on, keveres mellett lx hibridizációs pufferrel prehibridizáltattuk. Ezután, a puffért 80 μΐ hibridizációs koktélra cseréltük, és az arrayt 16 órán át, 45°C-on, 60 ford./perc mellett ellensúly alkalmazásával hibridizáltattuk. A hibridizációt követően, az arrayket 6xSSPE, 0,1% Tween-20 összetételű pufferrel egyszer mostuk, öblítettük, majd R-fikoeritrin-konjugált streptavidinnel (Molecular Probes, Eugen, OR), kecskében termelt anti-streptavidin ellenanyaggal (Vector Laboratories, Burlingame, CA), „GENECHIP Fluidics Station 400” készülék alkalmazásával a gyártó (Affymetrix) micro_lVl készlethez mellékelt utasításai szerint eljárva festettük. Az arrayket GENEARRAY pásztázó (Affymetrix) és Microarray Suite programcsomag alkalmazásával értékeltük.
A „Murine genome U74AV2” arrayn (Affymetrix) a „Mouse UniGene build 74” (Nationale Center for Biotechnology Information, Bethesda, MD) adatbázisában található valamennyi funkcionálisan jellemzett szekvencia («6000 ) és körülbelül 6000 még nem jellemzett expresszióval jelölt szekvencia {„expressed sequence tag, EST) klaszter képviseltetve van.
A 6.A, 6.B és 6.C ábrán látható, hogy az eritropoetin-transzkriptumok szintje dózisfüggő módon nőtt az agy-, vese- és máj szövetben. Az expresszió szintje megfelelt az ugyanezen szövetekben vérveszteséggel kiváltott anémiában szenvedő állatokban megfigyelt szintnek, vagy meghaladta azt. A találmány szerinti eljárásban alkalmazott vegyületek tehát bejutnak az állatokban normális körülmények mellett eritropoetint termelő szövetekbe, és ott indukálják az endogén eritropoetinszintézist.
8. példa
Eritropoetintermelés vizsgálata kétoldali veseeltávolítást követően
A találmány szerinti vegyület azon tulajdonságát, hogy funkcionális vese hiányában képes az endogén eritropoetinszintézis növelésére, Jacobson és mtsai. által leírtak szerint vizsgáltuk [Nature 179, 633 (1957)]. Röviden, a patkányokat izofluránnal anesztetizáltunk, és steril körülmények mellett metszést ejtettünk a has középvonalában. A vesetokot lefej
100578-14371
-65tettük, az összeköttetéseket leszorítottuk, és mindkét vesét eltávolítottuk. Ezután, a hasat zártuk, és az állatot hagytuk regenerálódni.
Az állatokat 2 és 20 órával a sebészeti beavatkozást követően nyelőcsőszondán át 0,5% karboximetil-cellulózzal (CMC; Sigma-Aldrich, St. Louis MO), vagy 100 mg/kg vagy 150 mg/kg C vegyülettel kezeltük. Huszonnégy (24) órával később vérmintákat (0,6 ml) vettünk. Az állatokat izofluránnal anesztetizáltuk, és a farokvénából vérmintát vettünk MICROTAINER EDTA-2K csőbe (Beckton-Dickinson). A vérmintákban a 2. példában leírtak szerint meghatároztuk az eritropoetinszintet és a hematokritot. Az IDEXX állatorvosi szolgáltató rendszerrel (W. Sacramento, CA) teljes vérképet határoztattunk meg („Complete Blood Count”, CBC-analízis), ezen belül meghatároztuk a hemoglobinszintet, retikulocitaszámot és hematokritot.
Amint az a 7 ábrán látható, a vegyület szignifikáns mértékben növelte a szérum eritropoetinszintet a placeboműtéten átesett álaltokban. Ezen felül, a szérum eritropoetinszintek egyértelműen növekedtek vegyülettel kezelt, kétoldali veseeltávolításon átesett álatokban a kezeletlen BN (kétoldali veseeltávolításnak alávetett) és placebo műtött kontrollokhoz képest (7. ábra).
9. példa
Szűrővizsgálat
Az endogén eritropoetinszintet növelő vegyületeket azonosíthatunk az 1. példában ismertetett eljárással. A HIF-specifikus prolii hidroxiláz aktivitást gátló és HIFa-t stabilizáló, az eritropoetinszintet növelő további vegyületeket azonosíthatunk és jellemezhetünk a következőkben ismertetettek szerint. Ötven (50) μΐ, 4mg/ml BSA, 0,1 mol/1 TrisHCl (pH=7,2), 2 mmol/1 aszkorbát 80 μmol/l vas-szulfát, 0,2 mmol/1 2-oxoglutarát, 600 egység/ml kataláz összetételű reakcióelegyet - 100 μmol/l HIFa-peptiddel kiegészítve vagy anélkül - 50 μΐ HeLa sejtextraktummal vagy tisztított HIF prolii hidroxilázzal elegyítettünk, és 1,5 órán át, 37°C-on inkubáltunk. Az inkubációt követően, az elegyhez 50 μΐ streptavidingyöngyöt adtunk, és azt 1 órán át, rázatás mellett 4°C-on inkubáltuk. Az elegyet csövekbe vittük át, és alacsony fordulatszámon centrifugáltuk, hogy a gyöngyöket kiülepítsük. A gyöngyöket 0,5-1 ml 20 mmol/1 Tris HC1 (pH=7,2) pufferrel háromszor mostuk. Ezután, a pepiidet 5 μΐ 2 mmol/1 biotinnal, 20 mmol/1 Tris HCl-pufferben (pH=7,2) 1 óra alatt eluáltuk a gyöngyökről. A csöveket centrifugáltuk, hogy a szemcséket kiülepítsük, majd 40-50 μΐ felülúszót eltávolítottunk, és az elegyhez azonos térfogató acetonitrilt adtunk. Eljárhatunk úgy is, hogy a pepiidet metoxikumarinhoz, egy pH100578-14371
-66inszenzitív fluoroforhoz kapcsoljuk. A fluorofor nyers sejtlizátumok alkalmazása esetén a szenzitivitás és specifitás növekedését eredményezheti. A szűrővizsgálatban HIFpeptidként alkalmazható például a [metoxikumarin]-DLDLEALAPYIPADDDFQL-amid (5. azonosítószámú szekvencia). Ezután, a nem hidroxilezett és hidroxilezett peptideket 5 reverz fázisú HPLC-eljárással választhatjuk szét C18-oszlopon, 214nm-en végzett UVdetektálás mellett.
A találmány ismertetett előnyös megvalósítási módjaihoz képest különböző módosítások a leírás alapján szakember számára nyilvánvalóak, és azok szintén a találmány oltalmi körébe tartoznak.
a leírásban idézett valamennyi szakirodalmi hivatkozás teljes terjedelmében a kitanítás részét képezi.
100578-14371
-67SZEKVENCIALISTA
A szekvencialistában szereplő kötetlen szövegrész (223-as kód) fordítása:
<210> 5 <223> szintetikus peptid

Claims (24)

100578-14371
-68SZABADALMI IGÉNYPONTOK
1. Eljárás endogén eritropoetin-szint növelésére egyedben, azzal jellemezve, hogy végrehajtjuk az alábbi lépesek legalább egyikét:
stabilizáljuk a hipoxia által indukálható faktor alfa-alegységét (HIFa);
gátoljuk a HIFa hidroxileződését;
gátoljuk 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitását; és/vagy gátoljuk a HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitását.
2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a HIFa a HIF-1α-, HIF2α-, HIF-3a-faktorok bármelyike vagy azok bármely fragmentuma és/vagy HIFa endogén a személy szempontjából.
3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitásként EGLN1, EGLN2, EGLN3, prokollagén prolii 4-hidroxiláz, prokollagén prolii 3-hidroxiláz, prokollagén lizil hidroxiláz, PHD4, vagy FIH-1 2oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitását és/vagy azok bármely alegységének vagy fragmentumának aktivitását gátoljuk.
4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitásként EGLN1, EGLN2 vagy EGLN3 HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitását és/vagy azok bármely alegységének vagy fragmentumának aktivitását gátoljuk.
5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az endogén EPO-szintet emelő vegyületet adunk be.
6. Az endogén EPO-szint emelésére képes vegyület; a HIFa stabilizálására képes vegyület; a HIFa hidroxileződésének gátlására képes vegyület; a 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitásának gátlására képes vegyület; és/vagy a HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitásának gátlására képes vegyület alkalmazása egyedben EPO-asszociált rendellenesség kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
7. Endogén EPO-szint növelésére képes vegyület alkalmazása egyedben anémia kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
100578-14371
8. A 7. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a vegyület:
képes HIFa stabilizálására; és/vagy képes 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitásának gátlására; és/vagy képes HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitásának gátlására.
9. A 7. vagy 8. igénypont szerinti alkalmazás, ahol az anémia:
hemoglobin- vagy eritrocita-rendelleneséggel; vagy diabétesszel, tumorral, fekéllyel, vesebetegséggel, immunszupresszív állapottal, fertőzéssel vagy gyulladással; vagy beavatkozással vagy kezeléssel, például sugárterápiával, kemoterápiával, dialízissel vagy sebészeti beavatkozással; vagy vérveszteséggel; vagy vastranszporttal, vasátalakítással vagy vasfelhasználással kapcsolatos.
10. A 9. igénypont szerinti alkalmazás, ahol az anémia vérzékenység, trauma, sérülés vagy sebészeti beavatkozás által okozott vérveszteséggel kapcsolatos.
11. A 9. vagy 10. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a gyógyászati készítmény vastartalmú hatóanyagot, Bi2-vitamint, folsavat, exogén eritropoetint vagy granulocitakolónia stimuláló faktort is tartalmaz.
12. Endogén EPO-szint növelésére képes vegyület alkalmazása egyedben neurológiai rendellenesség kezelésére, megelőzésére vagy előkezelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
13. A 12. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a vegyület:
képes HIFa stabilizálására; és/vagy képes 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitásának gátlására; és/vagy képes HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitásának gátlására.
14. A 12. vagy 13. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a neurológiai rendellenesség stroke, trauma, epilepszia vagy neurodegeneratív betegség.
15. Endogén EPO-szint növelésére képes vegyület alkalmazása egy egyedben az oxigénfelhasználás növelésére alkalmas gyógyászati készítmény előállítására.
16. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy:
a HIFa stabilizálására; és/vagy a HIFa hidroxileződésének gátlására; és/vagy a 2-oxoglutarát dioxigenáz enzim aktivitásának gátlására; és/vagy
HIF prolii hidroxiláz enzim aktivitásának gátlására képes vegyületet adunk be.
100578-14371
17. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy heterociklusos karboxamidokat, fentantrolinokat, hidroxamátokat, vagy azokból származtatott fiziológiásán aktív sókat vagy prodrogokat adunk be.
18. A 17. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy heterociklusos karboxamidként piridin karboxamidot, kinolin karboxamidot, izokinolin karboxamidot, cinnolin karboxamidot vagy béta-karbolin karboxamidot adunk be.
19. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a vegyületet orális úton vagy transzdermálisan adagolható készítménnyel adjuk be.
20. Eljárás endogén EPO-szintet növelő vegyület azonosítására, azzal jellemezve, hogy: (a) az egyednek egy vegyületet adunk be; (b) mérjük az EPO-szintet az egyedben vagy attól származó mintában; és (c) az egyedben vagy mintában meghatározott EPOszintet standarddal hasonlítjuk össze, ahol az EPO-szint növekedését a standardhoz képest az egyedben vagy attól származó mintában annak jeleként értékeljük, hogy a hatóanyag növeli az endogén EPO-szintet.
21. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a HIFa-t in vivo stabilizáljuk.
22. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a HIFa-t in vitro stabilizáljuk.
23. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az eritropoetinszintet állatban, előnyösen főemlősben, előnyösebben emberben növeljük.
24. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az eritropoetinszintet sejtben növeljük.
A meghatalmazott:
DANUBIA
Szabadalmi és Védjegy Iroda Kft.
Dr. Svingor Ádám szabadalmi ügyvivő
HU0500643A 2001-12-06 2002-12-06 Methods of increasing endogenous erythropoietin (epo) HU229475B1 (en)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US33708201P 2001-12-06 2001-12-06
US34965902P 2002-01-16 2002-01-16
US35968302P 2002-02-25 2002-02-25
US38648802P 2002-06-05 2002-06-05
PCT/US2002/039163 WO2003053997A2 (en) 2001-12-06 2002-12-06 Methods of increasing endogenous erythropoietin (epo)

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP0500643A2 true HUP0500643A2 (hu) 2005-10-28
HUP0500643A3 HUP0500643A3 (en) 2010-03-29
HU229475B1 HU229475B1 (en) 2014-01-28

Family

ID=27502557

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0500643A HU229475B1 (en) 2001-12-06 2002-12-06 Methods of increasing endogenous erythropoietin (epo)

Country Status (12)

Country Link
US (15) US20030176317A1 (hu)
EP (7) EP2298301B2 (hu)
JP (5) JP5341293B2 (hu)
CN (7) CN102552261A (hu)
AU (3) AU2002362065B2 (hu)
CA (4) CA2468083C (hu)
DK (3) DK2298301T3 (hu)
ES (3) ES2414706T3 (hu)
HU (1) HU229475B1 (hu)
IL (2) IL162085A0 (hu)
NO (1) NO343732B1 (hu)
WO (2) WO2003049686A2 (hu)

Families Citing this family (135)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6855510B2 (en) * 2001-03-20 2005-02-15 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Pharmaceuticals and methods for treating hypoxia and screening methods therefor
AU2002241154A1 (en) * 2001-03-21 2002-10-03 Isis Innovation Ltd. Assays, methods and means relating to hypoxia inducible factor (hif) hydroxylase
CA2468083C (en) * 2001-12-06 2016-02-23 Fibrogen, Inc. Use of heterocyclic carboxamides to treat anemia
US8318703B2 (en) 2001-12-06 2012-11-27 Fibrogen, Inc. Methods for improving kidney function
EP2295060B1 (en) 2001-12-06 2018-10-31 Fibrogen, Inc. Treatment or prevention of ischemic or hypoxic conditions
US8124582B2 (en) * 2002-12-06 2012-02-28 Fibrogen, Inc. Treatment of diabetes
US7618940B2 (en) 2002-12-06 2009-11-17 Fibrogen, Inc. Fat regulation
US8614204B2 (en) 2003-06-06 2013-12-24 Fibrogen, Inc. Enhanced erythropoiesis and iron metabolism
JP2006527200A (ja) 2003-06-06 2006-11-30 ファイブロゲン インコーポレイティッド 窒素含有ヘテロアリール化合物および内因性エリトロポエチンを増加させる際のそれらの使用方法
WO2005007192A2 (en) * 2003-06-06 2005-01-27 Fibrogen, Inc. Cytoprotection through the use of hif hydroxylase inhibitors
WO2005011696A1 (en) * 2003-08-01 2005-02-10 Fibrogen, Inc. Inhibitors of 2-oxoglutarate dioxygenase as gamma globin inducers
WO2005034929A2 (en) * 2003-10-10 2005-04-21 Fibrogen, Inc. Tissue remodeling and vascularization
AU2004285468B2 (en) * 2003-10-22 2011-02-24 Fred Hutchinson Cancer Research Center Methods, compositions and devices for inducing stasis in cells, tissues, organs, and organisms
US20050170019A1 (en) * 2003-10-22 2005-08-04 Fred Hutchinson Cancer Research Center Methods, compositions and devices for inducing stasis in cells
US20050136125A1 (en) * 2003-10-22 2005-06-23 Roth Mark B. Methods, compositions and devices for inducing stasis in cells, tissues, organs, and organisms
US7248843B2 (en) * 2003-11-07 2007-07-24 Ge Medical Systems Information Technologies, Inc. Antenna selection system and method
EP1548031A1 (en) * 2003-12-22 2005-06-29 Dubai Genetics FZ-LLC Nature-identical erythropoietin
US20050282751A1 (en) * 2004-03-19 2005-12-22 Ajinomoto Co., Inc. Therapeutic agent for renal anemia
US7638295B2 (en) * 2004-03-26 2009-12-29 Isis Innovation Limited Assays for identifying modulators of the hydroxylation of ankyrin repeat proteins by 2-oxoglutarate dependent oxygenase and methods of using the same
NZ551632A (en) * 2004-05-28 2009-09-25 Fibrogen Inc HIF prolyl hydroxylase activity assay
US7718624B2 (en) * 2004-09-01 2010-05-18 Sitkovsky Michail V Modulation of immune response and inflammation by targeting hypoxia inducible factors
US20060074182A1 (en) * 2004-09-30 2006-04-06 Depuy Products, Inc. Hydrogel composition and methods for making the same
WO2006084210A2 (en) * 2005-02-04 2006-08-10 Regents Of The University Of California, San Diego Hif modulating compounds and methods of use thereof
US8703795B2 (en) 2005-03-02 2014-04-22 Fibrogen, Inc. Thienopyridine compounds, and methods of use thereof
AR055319A1 (es) * 2005-03-17 2007-08-15 Wyeth Corp Derivados de isoquinoleina, composiciones farmaceuticas y usos
EP1879599B1 (en) * 2005-04-20 2013-10-16 Fred Hutchinson Cancer Research Center Methods, compositions and articles of manufacture for enhancing survivability of cells, tissues, organs, and organisms
DE102005019712A1 (de) * 2005-04-28 2006-11-09 Bayer Healthcare Ag Dipyridyl-dihydropyrazolone und ihre Verwendung
EP1893186A2 (en) * 2005-06-06 2008-03-05 Fibrogen, Inc. Improved treatment for anemia using a hif-alpha stabilising agent
MX2007016160A (es) * 2005-06-15 2008-03-07 Fibrogen Inc Uso de moduladoers de hif-1 alfa para el tratamiento contra el cancer.
GB0519605D0 (en) * 2005-09-26 2005-11-02 Isis Innovation Assay
WO2007038571A2 (en) * 2005-09-26 2007-04-05 Smithkline Beecham Corporation Prolyl hydroxylase antagonists
US20090176726A1 (en) * 2005-10-11 2009-07-09 Fisher David E Methods for treating mitf-related disorders
CN100418574C (zh) * 2005-10-26 2008-09-17 王成球 一类封闭人类HIF-1α基因和调控网络中下游相关基因的染色质肽
EP2329837B1 (en) 2005-11-23 2014-04-30 Acceleron Pharma Inc. Anti-activin A or B antibodies and use thereof for promoting bone growth
US8128933B2 (en) 2005-11-23 2012-03-06 Acceleron Pharma, Inc. Method of promoting bone growth by an anti-activin B antibody
US20070122448A1 (en) * 2005-11-28 2007-05-31 Alireza Rezania Compositions and methods to create a vascularized environment for cellular transplantation
ES2446416T3 (es) * 2005-12-09 2014-03-07 Amgen, Inc. Compuestos basados en quinolona que presentan actividad inhibidora de prolil hidroxilasa, composiciones y usos de los mismos
CN102351791B (zh) 2006-01-27 2014-10-29 菲布罗根有限公司 使低氧诱导因子(hif)稳定的氰基异喹啉化合物
US20070185045A1 (en) * 2006-02-06 2007-08-09 Ratcliffe Peter J Inhibitors of 2-oxoglutarate dioxygenase as gamma globin inducers
EP1991269A1 (en) * 2006-02-16 2008-11-19 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of stroke
US7588924B2 (en) * 2006-03-07 2009-09-15 Procter & Gamble Company Crystal of hypoxia inducible factor 1 alpha prolyl hydroxylase
RU2461557C2 (ru) * 2006-04-04 2012-09-20 Файброджен, Инк. Соединения пирроло- и тиазолопиридина (варианты) и фармацевтическая композиция на их основе
US7713986B2 (en) * 2006-06-15 2010-05-11 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of chemotherapy-induced anemia
US20070293575A1 (en) * 2006-06-15 2007-12-20 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for treatment of cancer-related anemia
AR061570A1 (es) 2006-06-23 2008-09-03 Smithkline Beecham Corp Compuesto de glicina sustituido en el n heteroaromatico composicion farmaceutica que lo comprende, su uso para preparar un medicamento, procedimientos para preparar dicha composicion farmaceutica y para preparar el compuesto
DK3357911T3 (da) 2006-06-26 2022-07-04 Akebia Therapeutics Inc Prolylhydroxylaseinhibitorer og fremgangsmåder til anvendelse
KR101449587B1 (ko) 2006-09-14 2014-10-10 메드제닉스 메디칼 이스라엘 리미티드 장기 지속형 약물 제형
US8454948B2 (en) 2006-09-14 2013-06-04 Medgenics Medical Israel Ltd. Long lasting drug formulations
US20090011051A1 (en) * 2006-09-28 2009-01-08 Roth Mark B Methods, Compositions and Articles of Manufacture for HIF Modulating Compounds
US8895016B2 (en) 2006-12-18 2014-11-25 Acceleron Pharma, Inc. Antagonists of activin-actriia and uses for increasing red blood cell levels
US8048892B2 (en) 2006-12-18 2011-11-01 Amgen Inc. Azaquinolone based compounds exhibiting prolyl hydroxylase inhibitory activity, compositions, and uses thereof
AU2007334323B2 (en) * 2006-12-18 2011-03-10 Amgen Inc. Naphthalenone compounds exhibiting prolyl hydroxylase inhibitory activity, compositions, and uses thereof
CN101610782A (zh) * 2007-01-10 2009-12-23 爱迪生药物公司 使用具有促红细胞生成素或血小板生成素活性的化合物治疗呼吸链紊乱
CL2008000066A1 (es) 2007-01-12 2008-08-01 Smithkline Beecham Corp Compuestos derivados de (5-hidroxi-3-oxo-2,3-dihidropiridazina-4-carbonil)glicina, inhibidores de hif prolil hidroxilasas; procedimiento de preparacion; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y su uso en el tratamiento de la anem
CL2008000065A1 (es) * 2007-01-12 2008-09-22 Smithkline Beecham Corp Compuestos derivados de glicina n-sustituida, inhibidores de hif prolil hidroxilasas; su proceso de preparacion; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y su uso en el tratamiento de la anemia.
US7601399B2 (en) 2007-01-31 2009-10-13 Surface Modification Systems, Inc. High density low pressure plasma sprayed focal tracks for X-ray anodes
TW202021980A (zh) 2007-02-02 2020-06-16 美商艾瑟勒朗法瑪公司 衍生自ActRIIB的變體與其用途
US7618938B2 (en) * 2007-02-07 2009-11-17 Academia Sinica Treating cerebrovascular diseases with erythropoietin and granulocyte-colony stimulating factor jointly
ES2442847T3 (es) * 2007-04-18 2014-02-13 Amgen, Inc Quinolonas y azaquinolonas que inhiben la prolil hidroxilasa
CA2683738C (en) 2007-04-18 2012-03-20 Amgen Inc. Indanone derivatives that inhibit prolyl hydroxylase
CA2685216C (en) * 2007-05-04 2014-07-08 Amgen Inc. Thienopyridine and thiazolopyridine derivatives that inhibit prolyl hydroxylase activity
US8097620B2 (en) 2007-05-04 2012-01-17 Amgen Inc. Diazaquinolones that inhibit prolyl hydroxylase activity
FI20075320A0 (fi) * 2007-05-07 2007-05-07 Panu Jaakkola Uusia käyttökelpoisia inhibiittoreita
US8962530B2 (en) 2007-06-27 2015-02-24 Regents Of The University Of Colorado Inflammatory bowel disease therapies
EP2199283A1 (en) 2007-09-27 2010-06-23 Kowa Company, Ltd. Prophylactic and/or therapeutic agent for anemia, comprising tetrahydroquinoline compound as active ingredient
JP2010539978A (ja) 2007-10-02 2010-12-24 アムジェン インコーポレイテッド マイクロ−ｒｎａおよびその前駆体にハイブリダイズしうる核酸を用いるエリスロポエチンの増加
WO2009058403A1 (en) * 2007-11-02 2009-05-07 Fibrogen, Inc. Methods for reducing blood pressure
AU2008329746A1 (en) * 2007-11-30 2009-06-04 Glaxosmithkline Llc Prolyl hydroxylase inhibitors
EA201000915A1 (ru) * 2007-11-30 2011-02-28 ГЛЭКСОСМИТКЛАЙН ЭлЭлСи Ингибиторы пролилгидроксилазы
EP2227475B1 (en) 2007-12-03 2014-02-19 Fibrogen, Inc. Isoxazolopyridine derivatives for use in the treatment of hif-mediated conditions
US8536123B2 (en) * 2008-01-09 2013-09-17 Health Onvector Inc. Use of blood flow parameters to monitor or control the dosing of erythropoiesis-stimulating agents
EP2252619B1 (en) 2008-01-11 2013-10-09 Fibrogen, Inc. Isothiazole-pyridine derivatives as modulators of hif (hypoxia inducible factor) activity
WO2009100250A1 (en) 2008-02-05 2009-08-13 Fibrogen, Inc. Chromene derivatives and use thereof as hif hydroxylase activity inhibitors
EP2257170B1 (en) * 2008-02-25 2012-12-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetrahydrofuropyridones
US20090291092A1 (en) * 2008-05-22 2009-11-26 Miller Guy M Treatment of mitochondrial diseases with an erythropoietin mimetic
HUE045456T2 (hu) 2008-08-14 2019-12-30 Acceleron Pharma Inc GDF csapdák anémia kezelésére történõ alkalmazásra
US8216997B2 (en) 2008-08-14 2012-07-10 Acceleron Pharma, Inc. Methods for increasing red blood cell levels and treating anemia using a combination of GDF traps and erythropoietin receptor activators
US8217043B2 (en) * 2008-08-20 2012-07-10 Fibrogen, Inc. Compounds and methods for their use
WO2010024911A1 (en) * 2008-08-26 2010-03-04 Fibrogen, Inc. Methods for increasing neurogenesis
US20110263642A1 (en) * 2008-08-26 2011-10-27 Fibrogen, Inc. Methods for treatment of multiple sclerosis
US10098857B2 (en) 2008-10-10 2018-10-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Topical and transdermal delivery of HIF-1 modulators to prevent and treat chronic wounds
NZ592741A (en) 2008-11-14 2013-03-28 Fibrogen Inc Thiochromene derivatives as hif hydroxylase inhibitors
WO2010065792A2 (en) 2008-12-04 2010-06-10 Curna, Inc. Treatment of erythropoietin (epo) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to epo
US8791090B2 (en) 2009-03-31 2014-07-29 Kowa Company, Ltd. Prophylactic and/or therapeutic agent for anemia comprising tetrahydroquinoline compound as active ingredient
EP3845239A1 (en) 2009-06-08 2021-07-07 Acceleron Pharma Inc. Use of anti-actriib proteins for increasing thermogenic adipocytes
WO2010151426A1 (en) 2009-06-12 2010-12-29 Acceleron Pharma Inc. Truncated actriib-fc fusion proteins
EP3117829B1 (en) * 2009-08-13 2020-10-07 Acceleron Pharma Inc. Combined use of gdf traps and erythropoietin receptor activators to increase red blood cell levels
CN102639700A (zh) 2009-09-30 2012-08-15 哈佛大学校长及研究员协会 通过调节自噬增强基因产物调节自噬的方法
WO2011048611A1 (en) 2009-10-07 2011-04-28 Torrent Pharmaceuticals Limited Novel fused pyridazine derivatives
WO2011044492A1 (en) * 2009-10-09 2011-04-14 University Of Rochester Methods of treatment and screening assays for hif-1alpha regulation
TWI500623B (zh) 2009-10-13 2015-09-21 Torrent Pharmaceuticals Ltd 新穎稠合噻唑及噁唑嘧啶酮
CA2780533C (en) 2009-10-21 2015-01-13 Daiichi Sankyo Company, Limited 5-hydroxypyrimidine-4-carboxamide derivative
WO2011056725A1 (en) * 2009-11-05 2011-05-12 Crystalgenomics, Inc. Pyridine derivatives and methods of use thereof
RS52870B (en) * 2009-11-06 2013-12-31 Aerpio Therapeutics Inc. INHIBITOR PROLIL HYDROXYLASE
EP2501400B1 (en) 2009-11-17 2017-11-01 Acceleron Pharma, Inc. Actriib proteins and variants and uses therefore relating to utrophin induction for muscular dystrophy therapy
US8541430B2 (en) 2009-11-27 2013-09-24 Torrent Pharmaceuticals Limited Fused thiazolo and oxazolo pyrimidinones
CN105176930B (zh) 2010-03-31 2021-05-04 斯克里普斯研究所 重编程细胞
CN103260649A (zh) 2010-06-15 2013-08-21 迈德詹尼克斯医疗以色列有限公司 长效药物制剂
EP2670750B1 (en) 2011-02-02 2016-09-14 Fibrogen, Inc. Naphthyridine derivatives as inhibitors of hypoxia inducible factor
GB201102659D0 (en) 2011-02-15 2011-03-30 Isis Innovation Assay
EP2717870B1 (en) 2011-06-06 2017-09-27 Akebia Therapeutics Inc. Composition for stabilizing hypoxia inducible factor-2 alpha useful for treating cancer
NO2686520T3 (hu) 2011-06-06 2018-03-17
GB201113101D0 (en) 2011-07-28 2011-09-14 Isis Innovation Assay
US9446031B2 (en) 2012-01-18 2016-09-20 National University Of Singapore Compositions and methods for neovascularization
WO2013134632A2 (en) * 2012-03-09 2013-09-12 Fibrogen, Inc. Treatment for high cholesterol
SG11201405574UA (en) 2012-03-09 2014-10-30 Fibrogen Inc 4 -hydroxy- isoquinoline compounds as hif hydroxylase inhibitors
US8883823B2 (en) 2012-07-16 2014-11-11 Fibrogen, Inc. Crystalline forms of a prolyl hydroxylase inhibitor
EP2872488B1 (en) 2012-07-16 2018-08-22 Fibrogen, Inc. Crystalline forms of a prolyl hydroxylase inhibitor
US9340511B2 (en) 2012-07-16 2016-05-17 Fibrogen, Inc. Process for making isoquinoline compounds
KR102279522B1 (ko) 2012-11-02 2021-07-19 셀진 코포레이션 골 및 다른 장애를 치료하기 위한 액티빈-actrii 길항제 및 용도
SG11201505748UA (en) 2013-01-24 2015-08-28 Fibrogen Inc Crystalline forms of {[1-cyano-5-(4-chlorophenoxy)-4-hydroxy-isoquinoline-3-carbonyl]-amino}-acetic acid
NL2010225C2 (en) * 2013-02-01 2014-08-04 Conradus Ghosal Gho Composition and method for preserving, transporting and storing living biological materials.
SMT202000190T1 (it) 2013-06-06 2020-05-08 Fibrogen Inc Formulazioni farmaceutiche di un inibitore di hif-idrossilasi
PE20160194A1 (es) * 2013-06-13 2016-04-20 Akebia Therapeutics Inc Composiciones y metodos para tratar anemia
MX383715B (es) 2013-11-15 2025-03-14 Akebia Therapeutics Inc Formas sólidas de acido {[5-(3-clorofenil)-3-hidroxipiridin-2-carbonil]amino}acético, composiciones, y usos de las mismas.
WO2015089416A1 (en) * 2013-12-12 2015-06-18 Cornell University Prolylhydroxylase/atf4 inhibitors for treating neural cell injury
EP2915878A1 (en) 2014-03-07 2015-09-09 Institut Pasteur Method and device for conserving viable and functional human polymorphonuclear neutrophils
JP6669673B2 (ja) 2014-06-13 2020-03-18 アクセルロン ファーマ， インコーポレイテッド 潰瘍を処置するための方法および組成物
ES2988818T3 (es) 2014-07-11 2024-11-21 Grifols Worldwide Operations Ltd Transferrina para su uso en trasplante de riñón
WO2016054806A1 (en) * 2014-10-10 2016-04-14 Merck Sharp & Dohme Corp. Substittued pyridine inhibitors of hif prolyl hydroxylase
TW201632504A (zh) 2015-01-23 2016-09-16 阿克比治療有限公司 ２－（５－（３－氟苯基）－３－羥吡啶醯胺基）乙酸之固體形式、其組合物及其用途
CN106146395B (zh) * 2015-03-27 2019-01-01 沈阳三生制药有限责任公司 3-羟基吡啶化合物、其制备方法及其制药用途
CU20170126A7 (es) 2015-04-01 2018-07-05 Akebia Therapeutics Inc Composiciones y métodos para tratar anemia
CN105296631A (zh) * 2015-11-04 2016-02-03 吴艾霖 流式液相芯片急性高原病脯氨酰羟化酶基因rs480902位点检测试剂盒
US11510917B2 (en) 2016-02-19 2022-11-29 Cornell University HIF-stabilization and prevention of hyperoxia-induced neonatal lung disease
CN108245687A (zh) * 2016-12-29 2018-07-06 贾中芝 一种IpostC在抗肠再灌注损伤中所起作用的实验方法
WO2019055490A1 (en) 2017-09-14 2019-03-21 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University PACKAGING OF IRRADIED FABRIC FOR FAT GREETING RETENTION
US11225660B2 (en) 2017-10-12 2022-01-18 Emory University Methods and compositions for managing vascular conditions using miR-483 mimics and HIF1alpha pathway inhibitors
AU2019265629B2 (en) 2018-05-09 2024-09-12 Akebia Therapeutics, Inc. Process for preparing 2-((5-(3-chlorophenyl)-3-hydroxypyridine-2-carbonyl)amino)acetic acid
US10500318B1 (en) * 2018-07-03 2019-12-10 Temple Therapeutics BV Dosing regimens for treating hypoxia-associated tissue damage
CN111349077B (zh) * 2019-02-02 2022-06-28 杭州华东医药集团新药研究院有限公司 一种哒嗪衍生物及其制备方法和医药用途
US11524939B2 (en) 2019-11-13 2022-12-13 Akebia Therapeutics, Inc. Solid forms of {[5-(3-chlorophenyl)-3-hydroxypyridine-2-carbonyl]amino} acetic acid
CN113826614B (zh) * 2021-09-30 2023-03-14 佛山市第一人民医院（中山大学附属佛山医院） 一种器官保存液
JP2025502209A (ja) * 2022-01-13 2025-01-24 フィブロジェン インコーポレイテッド うっ血性心不全の処置
WO2024165507A1 (en) 2023-02-06 2024-08-15 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Use of hif-1α stabilizing agents for the treatment of type i interferonopathies

Family Cites Families (57)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4558006A (en) 1983-02-04 1985-12-10 Kirin-Amgen, Inc. A.T.C.C. HB8209 and its monoclonal antibody to erythropoietin
CA1261335A (en) * 1984-08-29 1989-09-26 Hoffmann-La Roche Limited/Hoffmann-La Roche Limitee Ethylenediamine monoamide derivatives
US4667016A (en) 1985-06-20 1987-05-19 Kirin-Amgen, Inc. Erythropoietin purification
GB8530602D0 (en) * 1985-12-12 1986-01-22 Fujisawa Pharmaceutical Co Heterocyclic compounds
FI884418A7 (fi) * 1987-10-05 1989-04-06 Fujisawa Pharmaceutical Co Sydäntä suojaava aine ja terapeuttinen aine iskeemisiin sairauksiin sisältäen N-sisältäviä, heterosyklisiä yhdisteitä, ja menetelmä näiden yhdisteiden valmistamiseksi.
DE4015255A1 (de) * 1990-05-12 1991-11-14 Hoechst Ag Oxalyl-aminosaeurederivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihrer verwendung als arzneimittel zur inhibierung der prolyl-hydroxylase
US5474796A (en) 1991-09-04 1995-12-12 Protogene Laboratories, Inc. Method and apparatus for conducting an array of chemical reactions on a support surface
US5605662A (en) 1993-11-01 1997-02-25 Nanogen, Inc. Active programmable electronic devices for molecular biological analysis and diagnostics
US5550124A (en) * 1991-12-10 1996-08-27 University Of Southern California Use of peripheral-type benzodiazpine sites for treatment of CNS trauma or disease
TW352384B (en) † 1992-03-24 1999-02-11 Hoechst Ag Sulfonamido- or sulfonamidocarbonylpyridine-2-carboxamides, process for their preparation and their use as pharmaceuticals
EP0650961B1 (de) 1993-11-02 1997-03-05 Hoechst Aktiengesellschaft Substituierte heterocyclische Carbonsäureamide, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
ATE149485T1 (de) 1993-11-02 1997-03-15 Hoechst Ag Substituierte heterocyclische carbonsäureamidester, ihre herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
CA2138929A1 (en) * 1993-12-30 1995-07-01 Klaus Weidmann Substituted heterocyclic carboxamides, their preparation and their use as pharmaceuticals
US6015880A (en) 1994-03-16 2000-01-18 California Institute Of Technology Method and substrate for performing multiple sequential reactions on a matrix
US5508463A (en) 1994-03-17 1996-04-16 Trustees Of The University Of Pennsylvania α-aminophosphonates
DE4410480A1 (de) † 1994-03-25 1995-09-28 Hoechst Ag Sulfonamidocarbonylpyridin-2-carbonsäureesteramide sowie ihre Pyridin-N-oxide, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE4410423A1 (de) * 1994-03-25 1995-09-28 Hoechst Ag Sulfonamidocarbonylpyridin-2-carbonsäureamide sowie ihre Pyridin-N-oxide, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
US5807522A (en) 1994-06-17 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods for fabricating microarrays of biological samples
EP0716077A1 (de) * 1994-12-08 1996-06-12 Ciba-Geigy Ag Aromatisch substituierte Omega-Aminoalkansäureamide und Alkansäurediamide und ihre Verwendung als Renininhibitoren
AU6887996A (en) * 1995-09-01 1997-04-01 Washington University School Of Medicine Method of reducing neurotoxic injury with zinc chelators
IL135495A (en) 1995-09-28 2002-12-01 Hoechst Ag Intermediate compounds for the preparation of quinoline-converted amines - 2 - carboxylic acid
US5846528A (en) * 1996-01-18 1998-12-08 Avigen, Inc. Treating anemia using recombinant adeno-associated virus virions comprising an EPO DNA sequence
EP0900202A1 (de) * 1996-04-30 1999-03-10 Hoechst Aktiengesellschaft 3-alkoxypyridin-2-carbonsäureamidester, ihre herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
DE19650215A1 (de) † 1996-12-04 1998-06-10 Hoechst Ag 3-Hydroxypyridin-2-carbonsäureamidester, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
WO1998029109A1 (en) * 1996-12-30 1998-07-09 Johns Hopkins University Methods and compositions for identification of autoantigens
EP0878480A1 (en) * 1997-05-14 1998-11-18 H.W. Prof. Dr. Müller A method for the improvement of neuronal regeneration
DE19746287A1 (de) * 1997-10-20 1999-04-22 Hoechst Marion Roussel De Gmbh Substituierte Isochinolin-2-Carbonsäureamide, ihre Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
JP2003522093A (ja) * 1997-10-24 2003-07-22 ファイブロゲン インコーポレイテッド フェナントロリン誘導体
US5916898A (en) 1997-10-24 1999-06-29 Zeneca Limited Phenanthroline derivatives
US6200974B1 (en) 1997-10-24 2001-03-13 Zeneca Limited Phenanthroline derivatives
EP1034267A1 (en) * 1997-12-04 2000-09-13 Genzyme Corporation Compositions and methods for inducing gene expression
US6124131A (en) * 1998-08-25 2000-09-26 The Johns Hopkins University School Of Medicine Mutant hypoxia inducible factor-1 HIF-1
CN1324234A (zh) * 1998-09-25 2001-11-28 格利科克斯有限公司 果糖胺氧化酶,拮抗剂和抑制剂
US6506936B1 (en) * 1999-02-25 2003-01-14 Fibrogen, Inc. N-substituted arylsulfonylamino hydroxamic acids useful as inhibitors of c-proteinase and for treating or preventing disorders related to unregulated collagen production
CN1367701A (zh) * 1999-05-11 2002-09-04 奥索－麦克尼尔药物公司 红细胞生成素给药的药代动力学和药效模型
GB9911047D0 (en) * 1999-05-12 1999-07-14 Isis Innovation Assay method and means
CZ299516B6 (cs) * 1999-07-02 2008-08-20 F. Hoffmann-La Roche Ag Konjugát erythropoetinového glykoproteinu, zpusobjeho výroby a použití a farmaceutická kompozice sjeho obsahem
JO2291B1 (en) * 1999-07-02 2005-09-12 اف . هوفمان لاروش ايه جي Erythropoietin derivatives
DE10010430A1 (de) * 2000-03-03 2001-09-06 Bayer Ag Substituierte 5-Ethyl-dihydropyridazinone und ihre Verwendung
DE10010423A1 (de) * 2000-03-03 2001-09-06 Bayer Ag Substituierte 2,5-Dimethyldihydropyridazinone und ihre Verwendung
DE10010425A1 (de) † 2000-03-03 2001-09-06 Bayer Ag Substituierte 5-Methyldihydropyridazinone und ihre Verwendung
DE10010426A1 (de) † 2000-03-03 2001-09-06 Bayer Ag Verwendung von 6-[4-Aminopheny]-dihydropyridazinonen
AU2002250256B2 (en) * 2001-03-08 2008-04-03 Emory University pH-dependent NMDA receptor antagonists
US6849718B2 (en) 2001-03-20 2005-02-01 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Muteins of hypoxia inducible factor alpha and methods of use thereof
US6855510B2 (en) 2001-03-20 2005-02-15 Dana Farber Cancer Institute, Inc. Pharmaceuticals and methods for treating hypoxia and screening methods therefor
AU2002241154A1 (en) † 2001-03-21 2002-10-03 Isis Innovation Ltd. Assays, methods and means relating to hypoxia inducible factor (hif) hydroxylase
GB0108770D0 (en) * 2001-04-06 2001-05-30 Eisai London Res Lab Ltd Inhibitors
US6660737B2 (en) 2001-05-04 2003-12-09 The Procter & Gamble Company Medicinal uses of hydrazones
US6878729B2 (en) 2001-05-04 2005-04-12 The Procter & Gamble Company Medicinal uses of dihydropyrazoles
WO2003001968A2 (en) * 2001-06-26 2003-01-09 Beth Israel Deaconess Medical Center Compositions and methods for inhibiting platelet activation and thrombosis
US6566088B1 (en) * 2001-10-04 2003-05-20 Board Of Regents, The University Of Texas System Prolyl-4-hydroxylases
CA2468083C (en) † 2001-12-06 2016-02-23 Fibrogen, Inc. Use of heterocyclic carboxamides to treat anemia
US6994981B2 (en) * 2002-02-19 2006-02-07 The Buck Institute Modulators of paraptosis and related methods
AU2003222513A1 (en) * 2002-03-08 2003-09-22 Protemix Corporation Limited Preventing and/or treating vascular disease, cardiomyopathy and/or associated heart failure
US8614204B2 (en) 2003-06-06 2013-12-24 Fibrogen, Inc. Enhanced erythropoiesis and iron metabolism
RU2461557C2 (ru) * 2006-04-04 2012-09-20 Файброджен, Инк. Соединения пирроло- и тиазолопиридина (варианты) и фармацевтическая композиция на их основе
DK3357911T3 (da) † 2006-06-26 2022-07-04 Akebia Therapeutics Inc Prolylhydroxylaseinhibitorer og fremgangsmåder til anvendelse

Also Published As

Publication number Publication date
CN1602360A (zh) 2005-03-30
US20110166178A1 (en) 2011-07-07
JP5469572B2 (ja) 2014-04-16
EP1487472A4 (en) 2005-11-16
HK1069845A1 (en) 2005-06-03
EP2298301B2 (en) 2022-11-16
ES2686626T3 (es) 2018-10-18
US20060270699A1 (en) 2006-11-30
CA2916093C (en) 2020-11-03
US20170312268A1 (en) 2017-11-02
EP1463823B1 (en) 2013-03-06
CN102552261A (zh) 2012-07-11
US20130245037A1 (en) 2013-09-19
CN100522946C (zh) 2009-08-05
DK2289531T3 (en) 2018-10-01
US20060178317A1 (en) 2006-08-10
WO2003049686A2 (en) 2003-06-19
WO2003053997A3 (en) 2004-06-17
US8466172B2 (en) 2013-06-18
EP1463823A2 (en) 2004-10-06
DK1463823T3 (da) 2013-06-03
JP2006137763A (ja) 2006-06-01
AU2009200018C1 (en) 2013-02-07
US20060183695A1 (en) 2006-08-17
WO2003053997A2 (en) 2003-07-03
CA2467689C (en) 2013-10-01
WO2003049686A3 (en) 2004-06-24
US20210369702A1 (en) 2021-12-02
US20130203805A1 (en) 2013-08-08
JP2011046733A (ja) 2011-03-10
US20060258702A1 (en) 2006-11-16
US20060178316A1 (en) 2006-08-10
EP2298301A3 (en) 2013-03-13
JP5341293B2 (ja) 2013-11-13
AU2002357096B2 (en) 2008-10-16
CN102526045A (zh) 2012-07-04
CN102552262A (zh) 2012-07-11
EP2295059A3 (en) 2013-04-03
ES2686625T3 (es) 2018-10-18
CA2467689A1 (en) 2003-06-19
US20150080425A1 (en) 2015-03-19
CA2468083C (en) 2016-02-23
CA2916093A1 (en) 2003-07-03
CA3094774A1 (en) 2003-07-03
NO20042804L (no) 2004-09-06
EP2324834A3 (en) 2013-02-13
US20030176317A1 (en) 2003-09-18
ES2414706T3 (es) 2013-07-22
AU2002362065B2 (en) 2007-12-06
JP2011037862A (ja) 2011-02-24
CA2468083A1 (en) 2003-07-03
AU2002362065A1 (en) 2003-06-23
IL162085A0 (en) 2005-11-20
CN102526044A (zh) 2012-07-04
EP1487472A2 (en) 2004-12-22
US20060258660A1 (en) 2006-11-16
EP2295059A2 (en) 2011-03-16
EP3520784A1 (en) 2019-08-07
NO343732B1 (no) 2019-05-27
EP2324834B1 (en) 2019-05-08
HUP0500643A3 (en) 2010-03-29
US20110166145A1 (en) 2011-07-07
CN102552263A (zh) 2012-07-11
DK2298301T3 (en) 2018-10-01
EP1463823A4 (en) 2005-11-16
CN1599618A (zh) 2005-03-23
EP2298301A2 (en) 2011-03-23
EP2289531A3 (en) 2013-03-13
AU2002357096A1 (en) 2003-07-09
HU229475B1 (en) 2014-01-28
JP5498918B2 (ja) 2014-05-21
IL162085A (en) 2016-10-31
JP2005526010A (ja) 2005-09-02
JP4804131B2 (ja) 2011-11-02
EP1487472B1 (en) 2019-06-26
AU2009200018B2 (en) 2012-05-24
EP2289531A2 (en) 2011-03-02
AU2009200018A1 (en) 2009-02-05
EP2298301B1 (en) 2018-07-04
JP2005524612A (ja) 2005-08-18
US20030153503A1 (en) 2003-08-14
EP2324834A2 (en) 2011-05-25
EP2289531B1 (en) 2018-07-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20210369702A1 (en) Methods for treating anemia in subjects having kidney failure using inhibitors of hypoxia-inducible factor (hif) hydroxylase
HK1156251B (en) Methods of increasing endogenous erythropoietin (epo)
HK1154209A (en) Medicaments for the treatment or prevention of anemia
HK1154209B (en) Medicaments for the treatment or prevention of anemia
HK1154214B (en) Medicaments for treating anemia associated with kidney disease
HK1156251A (en) Methods of increasing endogenous erythropoietin (epo)
HK1069845B (en) Methods of increasing endogenous erythropoietin (epo)
HK1154214A (en) Medicaments for treating anemia associated with kidney disease