HUP0101250A2 - Abszorbeálható mikrorészecskék - Google Patents
Abszorbeálható mikrorészecskék Download PDFInfo
- Publication number
- HUP0101250A2 HUP0101250A2 HU0101250A HUP0101250A HUP0101250A2 HU P0101250 A2 HUP0101250 A2 HU P0101250A2 HU 0101250 A HU0101250 A HU 0101250A HU P0101250 A HUP0101250 A HU P0101250A HU P0101250 A2 HUP0101250 A2 HU P0101250A2
- Authority
- HU
- Hungary
- Prior art keywords
- lactide
- based units
- peptide
- microparticle
- absorbable
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
- A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/58—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. poly[meth]acrylate, polyacrylamide, polystyrene, polyvinylpyrrolidone, polyvinylalcohol or polystyrene sulfonic acid resin
- A61K47/585—Ion exchange resins, e.g. polystyrene sulfonic acid resin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
A találmány adott esetben abszorbeálható polimer bevonattal ellátottabszorbeálható polimer mikroszemcséken immobilizált egy vagy többpeptid, egy vagy több protein vagy ezek kombinációja nyújtotthatóanyag-leadású komplexére vonatkozik. A találmány szerintimikroszemcsés komplex molekulánként legalább egy aminocsoporttalés/vagy legalább egy karboxilcsoporttal rendelkező peptid(ek)etés/vagy protein(eke)t, és a peptid(ek) és/vagy protein(ek)megkötéséhez elegendő mennyiségben felületi és felület alattikarboxilcsoportokkal vagy aminocsoportokkal rendelkező szilárd,mikroszemcsés abszorbeálható poliésztert tartalmaz, ahol azimmobilizált peptid(ek) vagy protein(ek) a mikroszemcsés komplexössztömegének 0,1-30%-át teszik ki. Az immobilizált peptide(eke)tés/vagy protein(eke)t tartalmazó mikroszemcsés komplexet adott esetbenegyedileg, vagy csoportosan egy abszorbeálható polimerbe zárják, hogyaz immobilizált peptid(ek) és/vagy protein(ek)hatóanyagfelszabadulását még inkább szabályozzák. Az immobilizáltpeptid(ek) és/vagy protein(ek) felszabadulásának még nagyobb mértékűszabályozására ezenkívül a bevonatos mikroszemcséket egyabszorbeálható gélképző folyadékkal készült kompozícióba isbeépíthetik, amely a biológiai környezetben lévő vízzel valóérintkezés hatására flexibilis géllé vagy félszilárd anyaggá alakulát. Ó
Description
Toi &ΐΰ ............ py
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
ABSZORBEÁLHATÓ MIKRORÉSZECSKÉK
A találmány adott esetben abszorbeálható polimer bevonattal ellátott abszorbeálható polimer mikroszemcséken immobilizált egy vagy több pepiid, egy vagy több protein, vagy ezek kombinációja nyújtott hatóanyagleadású komplexére vonatkozik. A találmány szerinti mikroszemcsés komplex molekulánként legalább egy aminocsoporttal és/vagy legalább egy karboxilcsoporttal rendelkező peptid(ek)et és/vagy protein(eke)t, és a peptid(ek) és/vagy protein(ek) megkötéséhez elegendő mennyiségben felületi és felület alatti karboxilcsoportokkal vagy aminocsoportokkal rendelkező szilárd, mikroszemcsés abszorbeálható poliésztert tartalmaz, ahol az immobilizált peptid(ek) vagy protein(ek) a mikroszemcsés komplex össztömegének 0,1 - 30%-át teszik ki. Az immobilizált peptide(eke)t és/vagy protein(eke)t tartalmazó mikroszemcsés komplexet adott esetben egyedileg, vagy csoportosan egy abszorbeálható polimerbe zárhatjuk, hogy az immobilizált peptid(ek) és/vagy protein(ek) hatóanyagfelszabadulását még inkább szabályozzuk. Az immobilizált peptid(ek) és/vagy protein(ek) felszabadulásának még nagyobb mértékű szabályozására ezenkívül a bevonatos mikroszemcséket egy abszorbeálható gélképző folyadékkal készült kompozícióba is beépíthetjük, amely a biológiai környe92701-2444 Sí
- 2 zetben lévő vízzel való érintkezés hatására flexibilis géllé vagy félszilárd anyaggá alakul át.
Számos gyógyszerszállító rendszert kifejlesztettek, vizsgáltak és alkalmaztak már gyógyászati készítmények szabályozott in vivo felszabadulásának biztosítására. Például poliésztereket, így például poli(DL-tejsav)-at, poli(glikolsav)-at, ρο1ι(εkaprolakton)-t és különféle egyéb kopolimereket alkalmaztak biológiailag aktív molekulák, például progeszterin felszabadulásának biztosítására; ezeket mikroszemcsék, filmek vagy rudak formájában állították elő [M. Chasm és R. Lange: Biodegradable Polymers as Drug Delivery Systems, Dekker, NY, 1990). A polimer/terápiás szer kompozíció, például szubkután vagy intramuszkuláris beültetése után a terápiás szer meghatározott időtartam alatt szabadul fel. Az ilyen biokompatibilis biológiailag lebontható polimer rendszereket úgy tervezik, hogy a bezárt terápiás szer diffúziója a polimer mátrixból lehetővé váljon. A terápiás szer felszabadulása után a „poller” in vivo degradálódik, ezáltal az implantátum sebészeti eltávolítására nincs szükség. Noha a poller lebontásában szerepet játszó faktorokat még nem teljesen ismerjük, valószínű, hogy a poliészterek ilyen lebontását az észterkötések hozzáférhetősége szabályozza a polimer komponensek nem enzimatikus, autokatalitikus hidrolízise számára.
Számos EPO publikációban és US szabadalmi leírásban foglalkoznak polimer mátrix tervezésével, és annak szerepével a terápiás szerek in vivo felszabadulása sebességének és mértékének szabályozásában.
Például az EP 0467389 A2 számú publikációban Deluca
- 3 - ...... ......
• · · · · ·· · fizikai kölcsönhatást ismertet egy hidrofób, biológiailag lebontható polimer és egy protein vagy polipeptid között. A kialakított kompozíció egy terápiás szer és egy hidrofób polimer elegye, amely a betegbe történő bevezetés után késlelteti annak diffúziós felszabadulását a mátrixból.
Az US 4767628 számú szabadalmi leírásban Hutchinson egy polimer eszközben való egységes diszperzióval szabályozza a terápiás szer felszabadulását. Leírja, hogy ez a készítmény szabályozott, folyamatos felszabadulást biztosít két fázis átfedésével: az első a szer diffúziótól függő kimosódása a készítmény felületéből; és a második a polimer lebomlása következtében kialakult vizes csatornákon keresztüli felszabadulás.
Egyéb in situ kialakított, biológiailag lebontható implantátumokat és ezek kialakítására szolgáló eljárásokat ismertetnek az US 5278201 és US5077049 számú szabadalmi leírásokban Dunn és munkatársai. A fenti szabadalmi leírásokban eljárásokat ismertetnek a fog körüli szövet gyógyulásának elősegítésére fog körüli táskában, és a felhámsejtek migrációjának gátlására a fog gyökérfelszíne mentén. Az 5077049 számú szabadalmi leírásban ismertetett eljárás szerint egy in situ képződő, biológiailag lebontható záróréteget helyeznek el a fog felületével szomszédosán. A záróréteg mikropórusos, és meghatározott méretű pórusokat tartalmaz, és tartalmazhat biológiailag hatékony szereket is. A záróréteg kialakulását úgy érik el, hogy a biológiailag lebontható polimer folyékony oldatát, például vízzel koagulálható, termoplasztikus poli(dl-tejsav-koglikolid), vízzel nem elegyedő, nem-toxikus szerves oldószerrel, például N-metil-pirrolidonnal készült oldatát (amellyel tipikusan körülbelül
- 4 50% polimer-koncentrációt érnek el) helyezik a fog körüli táskába. A szerves oldószer szétoszlik a fog körüli folyadékokban, és a biológiailag lebontható, vízzel koagulálható polimer in situ egy szilárd, biológiailag lebontható implantátumot képez. Az oldószer kiszivárgása pórusokat alakít ki a szilárd, biológiailag lebontható implantátumban, ezzel elősegíti a sejtbenövést. A ’859 számú szabadalmi leírás hasonlóképpen eljárást ismertet ugyanilyen indikációkra, amelyben biológiailag lebontható védőréteget képeznek egy biológiailag lebontható, keményíthető, hőre keményedő előpolimer, egy keményítőszer és egy vízoldható anyag, például só, cukor és egy vízoldható polimer folyékony elegyéből. Keményíthető, hőre keményedő előpolimerként ismertetnek egy akrilsav-észter végcsoportot tartalmazó abszorbeálható polimert.
A szakirodalomban ezeken kívül még számos rendszert ismertetnek, amelyek biológiailag aktív anyagok különféle meghatározott helyekre történő szabályozott szállítására alkalmasak. Például az US 501 1692 számú szabadalmi leírásban Fujioka és munkatársai nyújtott, pulzáló hatóanyagfelszabadulást biztosító gyógyászati készítményt ismertetnek, amely gyógyszertartalmú polimer anyag rétegeket tartalmaz. A polimer anyag rétegek a gyógyszert nagyon kis mennyiségben tartalmazzák, vagy gyógyszermentesek. A teljes felület a réteg síkjára merőlegesen helyezkedik el, és polimer anyaggal van bevonva, amely vízben oldhatatlan. Az ilyen típusú pulzáló hatóanyagfelszabadulást biztosító gyógyászati dózisok bőr alá történő beültetésre alkalmasak.
Az US 5366756 számú szabadalmi leírásban Chesterfield és
- 5 munkatársai eljárást ismertetnek porózus, biológiailag abszorbeálható sebészeti implantátum anyagok előállítására. Az eljárás értelmében vesznek egy bizonyos mennyiségű, szemcsés, biológiailag abszorbeálható implantátum anyagot, és a biológiailag abszorbeálható implantátum anyag szemcséit bevonják legalább egy növekedési faktorral. Az implantátum mikróbaellenes szereket is tartalmazhat.
Az US 5385738 számú szabadalmi leírásban Yamhira és munkatársai nyújtott hatóanyagleadású injektálható rendszert ismertetnek, amely egy hatóanyagból és egy gyógyászatilag elfogadható, biológiailag lebontható hordozóból (például proteinekből, poliszacharidokból és szintetikus, nagy móltömegű vegyületekből, előnyösen kollagénből, atelo kollagénből, zselatinból és ezek elegyeiből) álló por injektálásra alkalmas viszkózus oldószerrel (például növényi olajokkal, polietilénglikollal, propiléngliko 11 al, szilikonolajjal, és közepes lánchosszúságú zsírsavak trigliceridjeivel) alkotott szuszpenzióját tartalmazza. A gyógyászati készítményben lévő hatóanyag a biológiailag lebontható hordozóba az alábbi módokon van beépítve: (i) a hatóanyag kémiailag van kötve a hordozó mátrixhoz;
(ii) a hatóanyag intermolekuláris hatással van kötve a hordozó mátrixhoz; vagy (iii) a hatóanyag fizikailag van bezárva a hordozó mátrixba.
Ezenkívül, a fent ismertetett rendszerekben, például az US 4938763 számú szabadalmi leírásban Dunn és munkatársai által ismertetett rendszerekben, a biológiailag lebontható, mikropórusos, szilárd implantátum élő testben történő in situ kialakítása a polimer szerves oldószerrel, például N-metil-2-pirrolidinnel ké
- 6 szült oldatának koagulálásával történik. Azonban az oldószerek, például a kis móltömegű szerves oldószerek alkalmazása, megkönnyíti az oldat elvándorlását az alkalmazási helyről, ezáltal károsítja az élő szövetet, például sejt-dehidratálódást és nekrózist okoz. Az oldószertömeg-veszteség a koagulátum zsugorodásához, és a környező szövetektől való elkülönüléséhez vezethet.
Az US 5612052 számú szabadalmi leírásban kationcserélő mikroszemcséket ismertetnek, amelyeket tipikusan karboxilcsoportot hordozó poliészterláncokból állítanak elő, amelyeken bázikus biológiailag hatékony szereket immobilizálnak, ezáltal a szabályozott hatóanyagleadású rendszert egy abszorbeálható, gélképző, folyékony poliészterben alakítják ki. Az US 5612052 számú szabadalmi leírás tartalmát leírásunkba referenciaként beépítettük. Karboxiltartalmú vegyületek ionos konjugálása bázikus polipeptidekkel a szakirodalomból ismert, például az US 5672659 és US 5665702 számú szabadalmi leírásból. Azonban ezek a komplexek oldható kémiai egységek, amelyeket úgy állítanak elő, hogy az egyes bázikus és karboxilos komponenseket megfelelő oldataikban molekulárisán reagáltatják és ezáltal jól definiált ion-konjugátumot, mint új kémiai egységet állítanak elő, megfelelő fizikokémiai tulajdonságokkal. Ezzel szemben a találmány értelmében a komplexképzést heterogén rendszerben hajtjuk végre, amely elsődlegesen felületi komplexképződéssel jár.
A találmányt összefoglalóan az alábbiakban ismertetjük.
A találmány egy kötött mikroszemcsére vonatkozik, amely egy abszorbeálható heteroláncú polimer magot és a fenti abszor
- 7 beálható heteroláncú polimer magon immobilizálva egy vagy több pepiidet, egy vagy több proteint vagy ezek kombinációját tartalmazza, ahol az egyes peptideket egymástól függetlenül az alábbi csoportból választjuk: növekedésihormon-felszabadító pepiid (GHRP), luteinizálóhormon-felszabadító hormon (LHRH), szomatosztatin, bombezin, gasztrin-felszabadító pepiid (GRP), kalcitonin, bradikinin, galanin, melanocita-stimuláló hormon (MSH), növekedésihormon-felszabadító faktor (GRF), amilin, tachikininek, szekretin, paratiroid hormon (PTH), enkafalin, endotelin, kalcitonin gén-felszabadító pepiid (CGRP), neuromedinek, paratiroid hormonnal rokon protein (PTHrP), glukagon, neurotenzin, adrenokortikotróp hormon (ACTH), pepiid YY (PYY), glukagon-felszabadító pepiid (GLP), vazoaktív intesztinális pepiid (VIP), hipofízis adenilát-cikláz aktiváló pepiid (PACAP), motilin, P-anyag, neuropeptid Y (NPY), TSH és annak analógjai és fragmensei, vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sói; és az egyes proteineket egymástól függetlenül az alábbi csoportból választjuk: növekedési hormon, eritropoietin, granulocita-kolónia stimuláló faktor, granulocita-makrofág-kolónia stimuláló faktor és interferonok.
Az előzőekben ismertetett kötött mikroszemcsék közül előnyösek azok (B csoport), amelyekben a pepiid, protein vagy ezek kombinációja vagy gyógyászatilag elfogadható sója a kötött mikroszemcse össztömegének 0,1 - 30%-át teszi ki.
Az előző bekezdésben ismertetett kötött mikroszemcsék közül előnyösek azok (C csoport), amelyekben az abszorbeál- 8 ható heteroláncú polimer mag glikolát-egységeket tartalmaz.
Az előző bekezdésben ismertetett kötött mikroszemcsék közül előnyösek azok (D csoport), amelyekben az abszorbeálható he-teroláncú polimer mag citrát-maradékokat, tartarát-maradékokat vagy malát-maradékokat is tartalmaz.
Az előző bekezdésben említett kötött mikroszemcsék közül előnyösek azok (E csoport), amelyekben a glikolát-egységek citrát-maradékokhoz, tartarát-maradékokhoz vagy malát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20 : 1.
A C csoportba tartozó kötött mikroszemcsék közül előnyösek továbbá azok, amelyekben a glikolát-egységek karboxil-maradékkal végződnek.
A C csoportba tartozó kötött mikroszemcsék további előnyös csoportját azok alkotják, amelyekben a glikolát-egységek amin-maradékkal végződnek.
A találmány tárgyát képezik továbbá bevonatos mikroszemcsék, amelyek egy vagy több kötött mikroszemcsét tartalmaznak egy abszorbeálható bevonó polimerben, ahol a kötött mikroszemcse egy abszorbeálható heteroláncú polimer magot és egy vagy több pepiidet, egy vagy több proteint vagy ezek kombinációját tartalmazza az abszorbeálható heteroláncú polimer magon immobilizálva, ahol az egyes peptideket egymástól függetlenül az alábbicsoportból választjuk: növekedésihormon-felszabadító peptid (GHRP), luteinizálóhormon-felszabadító hormon (LHRH), szomatosztatin, bombezin, gasztrin-felszabadító peptid (GRP), kalcitonin, bradikinin, galanin, melanocita-stimuláló hormon (MSH), növekedésihormon-felszabadító faktor (GRF), amilin,
- 9 tachikininek, szekretin, paratiroid hormon (PTH), enkafalin, endotelin, kalcitonin gén-felszabadító pepiid (CGRP), neuromedinek, paratiroid hormonnal rokon protein (PTHrP), glukagon, neurotenzin, adrenokortikotróp hormon (ACTH), pepiid YY (PYY), glukagon-felszabadító pepiid (GLP), vazoaktív intesztinális pepiid (VIP), hipofízis adenilát cikláz aktiváló peptid (PACAP), motilin, P-anyag, neuropeptid Y (NPY), TSH és annak analógjai és fragmensei, vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sói;
az egyes proteineket egymástól függetlenül az alábbi csoportból választjuk: növekedési hormon, eritropoietin, granulocita-kolónia stimuláló faktor, granulocita-makrofág-kolónia stimuláló faktor és interferonok; és ahol az abszorbeálható heteroláncú polimer mag glikolát-egységeket tartalmaz.
Az előző bekezdésben ismertetett bevont mikroszemcsék előnyös képviselői azok, ahol a peptid, protein vagy ezek kombinációja vagy gyógyászatilag elfogadható sója a kötött mikroszemcse össztömegének 0,1 - 30%-át teszi ki, és ahol a fenti abszorbeálható heteroláncú polimer mag citrát-maradékokat, tartarát-maradékokat vagy malát-maradékokat is tartalmaz.
Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék előnyös képviselői azok (F csoport), ahol a glikolát-egységek citrát-maradékokhoz, tartarát-maradékokhoz vagy malát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, és a fenti glikolát-egységek karboxil-maradékkal vagy amin-maradékkal végződnek.
Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék elő
- 10 nyös képviselői azok, ahol az abszorbeálható bevonó polimer tartalmaz
a) 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket,
b) d,1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, c) d,1-laktid-alapú egységeket, vagy
d) 1-laktid-alapú egységeket és d,1-laktid-alapú egységeket.
Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék előnyös képviselői azok, ahol az 1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, az 1-laktid-alapú egységek d,1-laktid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 80:20, és a d,l-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10.
Az F csoportba tartozó bevont mikrorészecskék közül előnyösek azok, amelyekben az abszorbeálható bevonó polimer 5-70%-át teszi ki a bevonatos mikroszemcsék össztömegének.
Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék közül előnyösek azok, ahol az abszorbeálható bevonó polimer a bevont mikroszemcsék össztömegének 20-60%-át teszi ki.
Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék közül előnyösek azok, ahol az abszorbeálható bevonó polimer a bevont mikroszemcsék össztömegének 30-50%-át teszi ki.
A találmány tárgyát képezi továbbá egy gyógyászati készítmény, amely a fentiekben ismertetett kötött mikroszemcséket és gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
A találmány további tárgyát képezi egy gyógyászati készítmény, amely a fentiekben ismertetett kötött mikroszemcséket, egy nem-vizes, abszorbeálható, gélképző, cseppfolyós poliész
- 11 tert és kívánt esetben gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
A találmány további tárgyát képezi egy gyógyászati készítmény, amely a fentiekben ismertetett bevont mikroszemcséket és gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
A találmány további tárgyát képezi egy gyógyászati készítmény, amely a fentiekben ismertetett bevont mikroszemcséket, egy nem-vizes, abszorbeálható, gélképzö, cseppfolyós poliésztert és kívánt esetben gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
A D csoportba tartozó kötött mikroszemcsék közül előnyösek továbbá azok (G csoport), ahol az abszorbeálható heteroláncú polimer mag citrát-maradékokat tartalmaz, és a peptid egy LHRH analóg.
Az előző bekezdésben említett kötött mikroszemcsék közül előnyösek azok, ahol a glikolát-egységek abszorbeálható heteroláncú polimer magban lévő citrát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, és ahol az LHRH analóg a p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2.
A D csoportba tartozó kötött mikrorészecskék további előnyös képviselői azok (H csoport), ahol az abszorbeálható heteroláncú polimer mag tartarát-maradékokat tartalmaz, és a peptid egy LHRH analóg.
Az előző bekezdésben ismertetett kötött mikroszemcsék közül előnyösek azok, amelyekben a glikolát-egységek aránya a tartarát-maradékokhoz viszonyítva körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, és az LHRH analóg a p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2.
- 12 A D csoportba tartozó kötött mikroszemcsék további előnyös csoportját képezik azok (I csoport), ahol az abszorbeálható heteroláncú polimer mag citrát-maradékokat tartalmaz, és a peptid egy szomatosztatin analóg.
Az előző bekezdésben említett kötött mikroszemcsék közül előnyösek azok, ahol a glikolát-egységek citrát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, és a szomasztotatin analóg a Η-β-D-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz; az N-hidroxietilpiperazinil-acetil-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, vagy az N-hidroxietilpiperazinil-etilszulfonil-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz.
A D csoportba tartozó kötött mikroszemcsék további előnyös csoportját képezik azok (J csoport), ahol az abszorbeálható heteroláncú polimer mag tartarát-maradékokat tartalmaz, és a peptid egy szomatosztatin analóg.
Az előző bekezdésben említett kötött mikroszemcsék közül előnyösek azok, ahol a glikolát-egységek tartarát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, és a szomasztotatin analóg a Η-β-D-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, az N-hidroxietilpiperazmil-acetil-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, vagy az N-hidroxietilpiperazinil-etilszulfonil-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz.
- 13 A találmány szerinti bevont mikroszemcsék előnyös képviselői az olyan bevont mikroszemcsék, amelyek a G csoportba tartozó egy vagy több kötött mikroszemcsét tartalmaznak egy abszorbeálható bevonó polimerben, amely (a) 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (b) d,1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (c) d,1-laktid-alapú egységeket vagy (d) 1-laktid-alapú egységeket és d,1-laktid-alapú egységeket tartalmaz.
Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék előnyös képviselői azok, ahol az abszorbeálható polimer magban lévő glikolát-egységek citrát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20.1, az LHRH analóg a p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2, és ahol az (a) 1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, (b) a d,1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, és (c) az 1-laktid-alapú egységek d,1-laktid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 80:20.
További előnyös bevont mikroszemcsék azok, amelyek egy vagy több H csoportba tartozó kötött mikroszemcsét tartalmaznak egy abszorbeálható bevonó polimerben, amely (a) 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (b) d,1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (c) d,1-laktid-alapú egységeket vagy (d) 1-laktid-alapú egységeket és d,1-laktid-alapú egységeket tartalmaz.
- 14 Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék előnyös képviselői azok, ahol az abszorbeálható polimer magban lévő glikolát-egységek tartarát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, az LHRH analóg a p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2, és ahol az (a) 1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, (b) a d,1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, és (c) az 1-laktid-alapú egységek d,1-laktid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 80:20.
További előnyös bevont mikroszemcsék azok, amelyek egy vagy több I csoportba tartozó kötött mikroszemcsét tartalmaznak egy abszorbeálható bevonó polimerben, amely (a) 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (b) d,1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (c) d,1-laktid-alapú egységeket vagy (d) 1-laktid-alapú egységeket és d,1-laktid-alapú egységeket tartalmaz.
Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék előnyös képviselői azok, ahol az abszorbeálható polimer magban lévő glikolát-egységek citrát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, a szomasztotatin analóg a Η-β-D-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, az N-hidroxietilpiperazinil-acetil-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NHj, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, vagy az N-hidroxietilpiperazinil-etilszulfonil-Phe-Cys-Tyr-D- 15 -Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, és ahol az (a) 1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, (b) a d,1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, és (c) az 1-laktid-alapú egységek d,1-laktid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 80:20.
További előnyös bevont mikroszemcsék azok, amelyek egy vagy több J csoportba tartozó kötött mikroszemcsét tartalmaznak egy abszorbeálható bevonó polimerben, amely (a) 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (b) d,1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (c) d,1-laktid-alapú egységeket vagy (d) 1-laktid-alapú egységeket és d,1-laktid-alapú egységeket tartalmaz.
Az előző bekezdésben említett bevont mikroszemcsék előnyös képviselői azok, ahol az abszorbeálható polimer magban lévő glikolát-egységek tartarát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, a szomasztotatin analóg a H-B-D-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, az N-hidroxietilpiperazinil-acetil-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, vagy az N-hidroxietilpiperazinil-etilszulfonil-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, és ahol az (a) 1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszo
- 16 nyitott aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, (b) a d,l-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, és (c) az 1-laktid-alapú egységek d,l-laktid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 80:20.
A találmány további tárgya eljárás a fentiek szerinti bevont mikroszemcsék előállítására, amelynek során egy kötött mikroszemcsét egy abszorbeálható bevonó polimerrel vonunk be.
Az előző bekezdésben ismertetett eljárás előnyös kiviteli módja az, ahol a kötött mikroszemcsék abszorbeálható bevonó polimert tartalmazó oldattal alkotott diszperzióját és egy oldószert egy előhűtött közegbe csepegtetünk, amely közeg nem oldószere az abszorbeálható bevonó polimernek.
Az előző bekezdésben említett eljárás előnyös kiviteli módja az, ahol az abszorbeálható bevonó polimer oldata körülbelül 5 - 30% abszorbeálható bevonó polimert tartalmaz, az előhűtött közeg valamely kettő vagy több szénatomot tartalmazó alkohol, és a közeg hőmérséklete szobahőmérséklet és körülbelül -80 °C közötti.
Az előző bekezdésben említett eljárás előnyös kiviteli módja az, ahol az előhűtött közeg hőmérséklete körülbelül -60 - -80 °C, és a közeg az izopropil-alkohol.
A.találmány tárgyát továbbá képezi eljárás a fentiekben ismertetett bevont mikroszemcsék előállítására, amelynek során egy kötött mikroszemcsét egy abszorbeálható bevonó polimerrel emulziós módszer alkalmazásával vonunk be.
A találmányt részletesen az alábbiakban ismertetjük.
A leírásban az „abszorbeálható” kifejezés egy vízben oldha 17 - -2::2 :**:
·· · · · · « · ·« tatlan anyagot, például egy polimert jelent, amely biológiai környezetben a láncok disszociációja révén vízoldható melléktermékekké alakul.
„Mikroszemcse” alatt a leírásban abszorbeálható poliészter részecskéket értünk, amelyek előnyösen lényegében gömb formában vannak.
„Kötött mikroszemcse” alatt a leírásban egy vagy több pepiidet és/vagy egy vagy több proteint tartalmazó mikroszemcsét értünk, ahol a pepiid vagy protein ionosán van immobilizálva a mikroszemcsén.
„Bevont mikroszemcse” alatt a leírásban olyan polimer bevonattal rendelkező kötött mikroszemcsét értünk, ahol a polimer bevonat nem szükségszerűen teljesen záródó.
A „polimer mag” kifejezés a leírásban a mikroszemcsék másik elnevezését jelenti.
„Bevonó polimer” alatt a leírásban a kötött mikroszemcsék bevonására alkalmazott polimert értjük.
„Gélképző cseppfolyós poliészter” alatt a leírásban olyan anyagokat értünk, amelyek oldószereket, például vizet abszorbeálnak, fázisátalakuláson mennek keresztül, és fenntartják a reverzibilis deformációra képes három-dimenziós hálózatot.
A leírásban az aminosavakat a standard hárombetűs rövidítéssel jelöljük, például Alá jelentése alanin.
A találmány szerinti mikroszemcse kristályos, és egy abszorbeálható poliészterből, például poliglikolidból áll, amely egy vagy több karboxilcsoportot tartalmaz az egyes láncokon, amelyek a mikroszemcse felületén és a mikroszemcse közvetlenül a felszín alatt lévő részén a karboxilcsoport elegendő kon
- 18 centrációját biztosítják az egy vagy több bázikus csoportot tartalmazó peptid(ek) és/vagy protein(ek) ionos immobilizálásához vagy komplexálásához. Alternatív módon a poliglikolid karboxilcsoportjai, például egy diaminnal, előnyösen egy primer vagy szekunder aminnal vagy ezek elegyével amidálhatók, amikor az amin egy komplexet képez, amely ionosán immobilizálja az egy vagy több savas csoportot tartalmazó peptide(ke)t és/vagy protein(eke)t. Mivel a mikroszemcsék felülete nem szükségszerűen homogén, a „felszín alatti rész” a mikroszemcsék felületén található résekre és hasonlókra utal. A kötött mikroszemcsék eszközként szolgálnak a peptid(ek) és/vagy protein(ek) szabályozott felszabadulásának biztosítására egy betegben. Az immobilizált peptid(ek) és/vagy protein(ek) felszabadulásának további szabályozására a kötött mikroszemcséket egyedileg, vagy csoportosan abszorbeálható polimer bevonattal vonhatjuk be. A kötött mikroszemcsékből a peptid(ek) és/vagy protein(ek) körülbelül 2 nap - 3 hónap, előnyösen körülbelül 1 hét - körülbelül 3 hónap alatt szabadulnak fel a betegben. A bevont mikroszemcsékből a peptid(ek) és/vagy protein(ek) körülbelül 3 nap - körülbelül 6 hónap, előnyösen körülbelül 2 hét - 5 hónap alatt szabadulnak fel a betegben.
A mikroszemcséken immobilizálható peptidekre példaként említhetjük a korlátozás szándéka nélkül az alábbiakat: növekedésihormon-felszabadító peptid (GHRP), luteinizálóhormon-felszabadító hormon (LHRH), szomatosztatin, bombezin, gasztrinfelszabadító peptid (GRP), kalcitonm, bradikinin, galanin, melanocita-stimuláló hormon (MSH), növekedésihormon-felszabadító faktor (GRF), amilin, tachikininek, szekretin, paratiroid
- 19 hormon (PTH), enkafalm, endotelin, kalcitonin gén-felszabadító peptid (CGRP), neuromedinek, paratíroid hormonnal rokon protein (PTHrP), glukagon, neurotenzin, adrenokortikotróp hormon (ACTH), peptid YY (PYY), glukagon-felszabadító peptid (GLP), vazoaktív intesztinális peptid (VIP), hipofízis adenilát-cikláz aktiváló peptid (PACAP), motilin, P-anyag, neuropeptid Y (NPY), TSH és annak analógjai és fragmensei. A mikroszemcséken immobilizálható proteinek közé tartoznak a növekedési hormon, eritropoietin, granulocita-kolónia stimuláló faktor, granulocita-makrofág-kolónia stimuláló faktor és interferonok.
A mikroszemcsék laktid-alapú polimerből vagy szilárd, félig kristályos polilaktonból, például poliglikolidból állíthatók elő, amely savcsoportot tartalmazó hidroxiles iniciátorok, például glikolsav, tejsav, almasav, borkősav és citromsav gyűrűfelnyitásos polimerizációjával állíthatók elő. A találmány szerinti mikroszemcsék az alábbi eljárással szintetizálhatok. Egy reakcióedényben egy laktid-alapú monomert és/vagy laktont, például glikolidot és egy sav iniciátort, például borkősavat, almasavat vagy citromsavat elegyítünk. A reakcióedényt körülbelül 35-45 °C-ra, előnyösen 40 °C-ra melegítjük, és körülbelül 20-60 percen, előnyösen 30 percen keresztül vákuum alá helyezzük. A reakcióedény hőmérsékletét körülbelül 105-115 °C-ra, előnyösen 110 °C-ra emeljük. Amikor a reakcióedényben a hőmérséklet eléri a fenti értéket, oxigénmentes nitrogénatmoszférába helyezzük, és az elegyet keverjük. Az elegy megolvadása után gyürűfelnyitási polimerizációra alkalmas szervesfém-katalizátor, például ón-2-etil-hexanoát katalitikus mennyiségét adagoljuk be nem protikus oldószerrel, például toluollal készült oldat
- 20 formájában. A reakcióelegyet újra vákuum alá helyezzük körülbelül 30-90 másodpercren keresztül, ezzel a toluolt eltávolítjuk anélkül, hogy a monomer jelentős mennyiségét eltávolítanánk. Az elegy hőmérsékletét körülbelül 115-125 °C-ra, előnyösen 120 C-ra emeljük körülbelül 5-10 percen keresztül, majd tovább emeljük körülbelül 145-150 °C-ra. A reakcióelegyet ezen a hőmérsékleten tartjuk körülbelül 3-5 órán, előnyösen 4 órán keresztül, állandó mechanikus keverés közben.
A kapott polimert mikronizáljuk, először késes aprítóval aprítjuk. A polimert ezután Aljet Micronizer alkalmazásával mikronizáljuk, nyomás alattt száraz nitrogénáram alkalmazásával. Az átlagos részecskeátmérőt Malvern Mastersizer/E-ben analizáljuk, térfogati megoszlási modell és 200/5 cS szilikonolaj, mint diszpergálószer alkalmazásával.
A polimert tisztítjuk, és nátriumsóvá alakítjuk oly módon, hogy a mikronizált polimert acetonban diszpergáljuk, és szonikátorban kezeljük körülbelül 30 percen keresztül. Ezalatt az idő alatt a diszperziót körülbelül 8000-24000 fordulat/perc, előnyösen 9500 fordulat/perc sebességgel működtetett homogenizátorral is homogenizáljuk. A fenti szonikálás/homogenizálás lépés után a diszperziót körülbelül 3000-7000 fordulat/perc, előnyösen 5000 fordulat/perccel centrifugáljuk, előnyösen 30 percen keresztül. A felülúszót elöntjük, a centrifugális üledéket friss acetonban újraszuszpendáljuk, és a szonikálás/homogenizálás lépést megismételjük. A második centrifugálás befejezése után a felülúszót elöntjük, és az üledéket ionmentes vízben újraszuszpendáljuk. Ezután egy utolsó szonikálás/homogenizálás lépést hajtunk végre a maradék aceton eltávolítása érdekében, és a
- 21 - ΚΓ Γ: Of.: Γ:
diszperziót ismét centrifugáljuk, körülbelül 5000 fordulat/perccel 30 percen keresztül.
A centrifugális üledéket friss ionmentes vízben újraszuszpendáljuk, és a diszperzió pH-ját mérjük. Keverés közben megfelelő térfogatú gyenge bázist, például 0,2 mol/1 koncentrációjú nátnum-karbonát-oldatot adunk hozzá, amellyel a pH-t körülbelül 8 és körülbelül 9 közötti értékre emeljük. A diszperziót körülbelül 30 percen keresztül keverjük, majd szűrőpapíron keresztül vákuumszűrjük. A szűrőn maradt csapadékot ionmentes vízzel mossuk, lefagyasztjuk, és liofilizáljuk.
A tisztítást differenciális pásztázó kalorimetriával (DSC) ellenőrizzük, körülbelül 5 °C/perc - 15 °C/perc, előnyösen 10 °C/perc fűtési sebességet alkalmazva.
Anioncserélő mikroszemcsét úgy állítunk elő, hogy egy kationcserélő mikroszemcsét veszünk, és egy diamin előnyösen vagy egy primer amin, vagy egy szekunder amin, vagy egy primer és egy szekunder amin keveréke dioxánnal vagy tet-rahidrofuránnal készült ismert koncentrációjú forró, híg oldatában (körülbelül 80 C-on) inkubáljuk inert gázban, például argonatmoszférában. A diamin koncentrációját a dioxánban vagy tetrahidrofuránban acidimetnásan határozzuk meg. Amikor a reakció gyakorlatilag befejeződik, az amidált mikroszemcséket szűréssel, elválasztjuk, dioxánnal vagy tetrahidrofuránnal mossuk, és vákuumban szárítjuk.
A peptid(ek)et és/vagy protein(eke)t az alábbi eljárással immobilizálhatjuk egy mikroszemcsén. A mikroszemcse nátriumsóját a peptid(ek) és/vagy protein(ek) szabad bázis formáját tartalmazó vizes oldatokban diszpergáljuk. A diszperziókat szó- 22 bahömérsékleten, keverés közben körülbelül 2 órán keresztül inkubáljuk, majd kiszűrjük a kötött mikroszemcséket. A szűrőn maradt anyagot ionmentes vízzel tovább mossuk, lefagyasztjuk és liofilizáljuk. A mintákat ezután nitrogéntartalomra analizáljuk elemanalízissel, az immobilizált peptid(ek) és/vagy protein(ek) mennyiségének meghatározása céljából.
A mikroszemcsék mérete szerepet játszik a mikroszemcsén immobilizálható peptid és/vagy protein mennyiségében. Minél kisebb a mikroszemcse mérete, annál nagyobb egy adott tömegű mikroszemcse fajlagos felülete, tehát annál több peptid és/vagy protein immobilizálható a mikroszemcse tömegegységére vonatkoztatva. A mikroszemcsék méretcsökkentése mikron vagy szubmikron dimenziókra a fentiekben ismertetett módon történhet. A mikroszemcsék átmérője körülbelül 0,5 μm - 100 pm, előnyösen 1 pm - 15 pm, még előnyösebben 3 pm - 10 pm lehet.
Az abszorbeálható bevonó polimer lehet kristályos vagy nem kristályos laktid/glikolid kopolimer, amorf l-laktid/d,l-laktid kopolimer, kaprolakton/glikolid kopolimer vagy trimetilén-karbonát/glikolid kopolimer, amely szokásos szerves oldószerekben, például kloroformban, metilén-kloridban, acetonban, acetonitrilben, etil-acetátban és etil-formiátban oldódik. A fenti abszorbeálható bevonó polimernek nem oldószere a víz, az alacsony forráspontú alkoholok és a szénhidrogének. Az abszorbeálható bevonó polimerek laktonok katalitikus gyűrűnyitó polimerizálásával, vagy ciklikus monomerek, például ε-kaprolakton, p-dioxanon, trimetilén-karbonát, 1,5-dioxepán-2-on vagy 1,4-dioxepán-2-on polimerizálásával állíthatók elő lánciniciátor, például hidroxi-polikarbonsav jelenlétében. További előállítási • * **’· 4** - » · ·· ♦ « i « · ·* ·α ♦-** *- ' * *·«* módszer például az, hogy egy szerves polikarbonsavat az US 5612052 számú szabadalmi leírásban ismertetett módon előre kialakított poliészterrel reagáltatunk, a fenti szabadalmi leírás teljes tartalmát leírásunkba referenciaként beépítettük.
A kötött mikroszemcsék bevonását egy emulzióból történő fáziselválasztással érhetjük el. A bevonó eljárás alternatív módja szerint ultrahangos atomizálót alkalmazunk, ahol a kötött mikroszemcsék abszorbeálható bevonó polimer oldattal készült diszperzióját mikrocseppek formájában egy lehűtött, nem-oldószer közegbe vezetjük be. A kötött mikroszemcséket abszorbeálható bevonó laktid és glikolid kopolimerrel szilárd részecskék bevonására ismert szokásos mikrokapszulázási vagy bevonási módszerekkel vonhatjuk be, például emulzió bepárlási módszerrel, amelyet bárium-szulfát mikroszemcsék bevonására H. Demian és S. W. Shalaby ismertet az US 08/467361 számú szabadalmi leírásban, amelynek tartalmát leírásunkba referenciaként beépítettük; vagy oly módon, hogy polimer oldatba zárt szilárd mikrorészecskéket ultrahangos atomizálón (aeroszolkészüléken) keresztül egy folyékony közegbe juttatva koagulálunk, amely a közeg bevonó polimernek nem oldószere, de a folyékony, nem-oldószer közeg képes a bezárt szilárd mikroszemcsék körüli bevonó polimer oldatból az oldószert kivonni. A mikrorészecskék bevonására alkalmazott polimer oldat koncentrációjától függően az eredeti kötött mikroszemcsék száma a bevont mikroszemcsékben 1 és néhány 100 között változhat, a bevont mikroszemcsék átlagos átmérője 0,5 μm - 100 pm.
Az alábbi eljárás bevont peptiddel és/vagy proteinnel kötött
- 24 (továbbiakban pepiiddel kötött) kationcserélők porlasztással történő előállítására vonatkozik. A kérdéses bevonó kopolimert oldószerben, például vagy acetonitrilben, etil-acetátban vagy etil-formiátban oldjuk 10-30 tömeg% koncentrációban. A fenti oldat megfelelő mennyiségét alkalmazzuk a pepiiddel töltött CE diszpergálására úgy, hogy a pepiidet hordozó CE tömegaránya a bevonó kopolimerhez viszonyítva körülbelül 30:70 - 80:20. A diszpergálást nagy sebességű homogenizálással érjük el. A diszperziót 1 ml/perc - 10 ml/perc áramlási sebességei, változó frekvenciával (ez a frekvencia 12 kHZ - 35 kHz lehet) tápláljuk be egy ultrahangos atomizáló szórófejbe, minél nagyobb a frekvencia, annál nagyobb áramlási sebességek alkalmazhatók, a szemcsejellemzők megtartása mellett. A diszperziót ily módon egy gyűjtőmedencébe porlasztjuk, amely legalább 1 - 10-szeres feleslegben izopropanolt vagy etanolt tartalmaz (az alkalmazott bevonó kopolimer oldószer térfogatához viszonyítva), amely a porlasztás során a szuszpenzió hőmérsékletének -70 °C és -80 C között tartásához elegendő szárazjég szemcsét (rendszerint 0,5 - 1 kg az IPA 1 literére vonatkoztatva) tartalmaz. Ezt a szuszpenziót 300 - 700 fordulat/perc sebességgel keverjük, térfogatától függően. Oldószerként acetonitril alkalmazása esetén a porlasztott cseppecskék azonnal megfagynak, amint a szuszpenzióval érintkeznek. A porlasztás befejezése után a teljes diszperziót felolvadni hagyjuk 10 °C és szobahőmérséklet közötti hőmérsékletre, majd vákuumban szűrjük. A szűrőn maradt anyagot ionmentes vízzel mosva eltávolítjuk a nem-oldószert felesleget. A kapott szemcsék megjelenése síma mikrogömb egy túlnyomóan d,l-laktid bevonó polimer esetében, és enyhén rán- 25 -
cosak abban az esetben, ha a bevonó kopolimer főleg 1-laktid-alapú.
A mikroszemcsés ioncserélő kötőkapacitását az alábbiak szerint határozhatjuk meg. Egy kationcserélő mikroszemcse esetén például a hozzáférhető karboxilcsoportokat a mikroszemcsék előre meghatározott mennyiségében ismert normalitású, hideg, hígított, vizes nátrium-karbonát-oldat alkalmazásával semlegesítjük. A semlegesített mikroszemcséket szűréssel elválasztjuk, és hideg, ionmentes vízzel alaposan átmossuk, majd levegőn szárítjuk. A szilárd mikroszemcséket ezután ismert koncentrációjú, híg pilokarpin-hidroklond-oldatban inkubáljuk úgy, hogy a bázikus szert enyhe feleslegben alkalmazzuk a kötőkapacitási adatokból várható mennyiséghez viszonyítva. A vizes oldatban maradt pilokarpin-HCl koncentrációját addig ellenőrizzük, amíg nem találunk szignifikáns változást a mikroszemcsék bázisfelvételében. A mikroszemcséken immobilizált bázis százalékos mennyiségét a fogyási adatokból határozzuk meg, majd nitrogénre történő elemanalízissel igazoljuk.
Az anioncserélő (amidált szemcsék) kötőkapacitását úgy határozzuk meg, hogy
1) elemanalízist végzünk nitrogéntartalomra, és
2) meghatározzuk a naproxenhez való kötődés mértékét oly módon, hogy híg oldatból kivont naproxen mennyiségét HPLC-vel meghatározzuk. Ez utóbbit az immobilizált naproxen ismert koncentrációjú híg nátrium-hidroxid-oldattal való felszabadításával igazoljuk.
A találmány szerinti kötött mikroszemcséket vagy bevont mikroszemcséket a betegnek szakember számára jól ismert ada- 26 golási módokon adagolhatjuk, például parenterális adagolással, orális adagolással vagy topikális adagolással. Előnyösen az adagolást por vagy szuszpenzió formával végezzük intranazális módon, vagy inhalálószer formájában a légzőrendszeren keresztül. Parenterális adagolás esetén előnyös, ha az adagolást izotóniás vizes közeggel, vagy nem-vizes, abszorbeálható, gélképző, cseppfolyós poliészterrel alkotott diszperzió formával végezzük (amely az US 5612052 számú szabadalmi leírásból ismert, ennek tartalmát leírásunkba referenciaként beépítettük). A kötött mikroszemcséket és/vagy bevont mikroszemcséket tartalmazó találmány szerinti készítmények kívánt esetben különféle komponenseket is tartalmazhatnak. Ilyen komponensek például - a korlátozás szándéka nélkül - a felületaktív szerek, viszkozitásszabályozó szerek, gyógyászati szerek, sejtnövekedés-módosítók, festékek, komplexáló szerek, antioxidánsok, egyéb polimerek, például karboximetil-cellulóz, gyanták, például guárgyanta, viaszok vagy olajok, például ricinusolaj, glicerin, dibutil-ftalát és di(2-etilhexil)ftalát, valamint számos egyéb anyag. Alkalmazásuk esetén az ilyen kívánt esetben jelenlévő komponensek körülbelül 0,1 - körülbelül 20%-át, előnyösen körülbelül 0,5 - körülbelül 5%-át teszik ki a teljes készítménynek.
A kötött mikroszemcsék vagy bevont mikroszemcsék betegnek beadandó hatékony dózisait a kezelést végző orvos vagy állatorvos meghatározhatja, és ez az adott peptid és/vagy protein minőségétől, és a mikroszemcsén immobilizált peptid és/vagy protein mennyiségétől függ. A fenti dózisok vagy ismertek, vagy szakember által könnyen meghatározhatók.
A gélképzők előállítását az US 5612052 számú szabadalmi
- 27 leírás ismerteti, amelynek tartalmát leírásunkba referenciaként beépítettük. A gélképzők specifikus példáit az alábbiakban ismertetjük.
Trimetilén-karbonát/glikolid /60/40) és polietiénglikol 400 ^/20---tömegarányú___blokk-kopolimerjeinek előállítása. (GF-1)
Mechanikus keverővei és nitrogénbevezetővel felszerelt, lánggal kiszárított gyantaüstbe 0,299 mól (119,5 g) polietilénglikol 400-at, 4700 ml (0,946 mmol) 0,2 mol/1 koncentrációjú toluolos ón(II)-oktoát-oldatot, 1,78 mól (206,5 g) glikolidot és 2,65 mól (270 g) trimetilén-karbonátot mérünk. A reaktort argonnal néhányszor átöblítjük, majd a tartalmát felolvasztjuk, es ezután körülbelül 150 °C-on keverés közben 12 órán keresztül melegítjük. A reakció befejeződése után a hőmérsékletet csökkentjük, miközben az elegy folyékonyságát fenntartjuk, és a monomer feleslegét vákuumban eltávolítjuk. A kapott polimert infravörös és NMR analízisnek vetjük alá az összetétel meghatározása céljából, és a móltömeget gél-permeációs kromatográfiával határozzuk meg.
Trimetilén-karbonát/glikolid (60/40) és polietiénglikol 400
- ---tömegaránvú---blokk-kopolimerjeinek előállítása (GF-2)
A cím szerinti kopolimert a GF-1 előállítására ismertetett eljárássá! állítjuk elő, de 1,063 mól (425 g) polietilénglikol 400-at, 1760 ml (0,35 mmol) 0,2 mol/1 koncentrációjú toluolos ón(II)-oktoát-oldatot, 0,279 mól (32,4 g) glikolidot és 0,418 mól (42,6 g) trimetilén-karbonátot alkalmazunk, és az elegyet körülbelül 9 órán keresztül keverjük.
- 28 Trimetílén-karbonát/glíkolid (90/10) és polietiénglikol 1500 8Q/20---tömegarányú blokk-kopolimerjeinek előállítása (GF-3)
A cím szerinti kopolimert a GF-1 előállítására ismertetett eljárással állítjuk elő, de 0,267 mól (400 g) polietilénglikol 1500-at, 1200 ml (0,247 mmol) 0,2 mol/1 koncentrációjú toluolos ón(II)-oktoát-oldatot, 0,097 mól (11,2 g) glikolidot és 0,87 mól (88,7 g) trimetilén-karbonátot alkalmazunk, és az elegyet körülbelül 13 órán keresztül keverjük.
I. példa
Citromsavval iniciált poliglikolsav polimerek (PGCA) előállítása, mikronizálása és tisztítása, kationcserélőként (CE) történő alkalmazásra
Ka) példa
7/1 PGCA
500 ml-es üvegreaktorba 242,63 g glikolidot (Purac Biochem, Arkelsedijk, Hollandia) és 57,37 g citromsavat (Aldrich, Gillingham, Dorset, U.K.) töltünk. A citromsavat előzetesen tovább szárítottuk szilikagélen (Fischer Scientific, Loughborough, Leics., U.K.) Abderhalden-készülékben (Aldrich, St. Louis, Missouri, USA). A reaktort körülbelül 40 °C-os olajfürdőbe merítjük, és 4 Pa (0,04 mbar) vákuum alá helyezzük körülbelül 30 percen keresztül. A fürdőt ezután leeresztjük, és hőmérsékletét körülbelül 110 °C-ra emeljük. A fenti hőmérséklet elérése után a reaktort oxigénmentes nitrogénatmoszféra alá helyezzük, és újra a fürdőbe merítjük. A reaktor tartalmát körülbelül 100 fordulat/perccel keverjük Heidolph-keverővel (Heidolph Elektro GmbH, Kelheim, Németország). A reaktor
- 29 tartalmának felolvadása után hozzáadunk 1,09 ml 0,1 mol/1 koncentrációjú ón(II)-2-etil-hexaonát (Sigma, St. Louis, Missouri USA) toluolban (Riedel de-Haen, Seelze, Németország) (sztöchiometrikus arány 50 ppm). A vákuumot egy folyadék nitrogéncsapdán keresztül újra rákapcsoljuk körülbelül 30 másodpercen át, a toluol eltávolítása céljából, a monomer szignifikáns eltávolítása nélkül. Az olajfürdő hőmérsékletét ezután körülbelül 120 °C-ra emeljük körülbelül 5 percen keresztül, majd tovább emeljük 150 C-ra. A reaktort ezen a hőmérsékleten tartjuk körülbelül 4 órán keresztül állandó, mechanikus keverés közben (körülbelül 100 fordulat/perc). Cím szerinti polimert kapunk.
1(b) példa
10/1 PGCA
A cím szerinti polimer az 1(a) példában leírtak szerint állítjuk elő, de 257,40 g glikolidot, 42,60 g citromsavat és 1,10 ml 0,1 mol/1 koncentrációjú toluolos ón-2-etil-hexanoát-oldatot alkalmazunk (sztöchiometrikus arány 50 ppm).
1(c) példa
15/1 PGCA
Mechanikus keverővei és argonbevezetővel felszerelt, lánggal szárított gyantaüstbe 2,586 mól (300 g) glikolidot, 0,172 mól (33 g) vízmentes citromsavat és 862 ml (0,172 mmol) 0,2 mol/1 koncentrációjú, toluollal készült ón(II)-oktoát-oldatot helyezünk. A polimerizációs reaktort és annak tartalmát száraz argonnal néhányszor átöblítjük. A reakcióelegyet megolvasztjuk, majd körülbelül 160 °C-on, keverés közben addig melegítjük, amíg a polimer az olvadékból elkezd kicsapódni. Röviddel
- 30 a részleges kicsapódás után a keverést befejezzük, és a reakciót körülbelül 160 °C-on körülbelül 2 órán keresztül hagyjuk lejátszódni. A polimerizáció végén a hőmérsékletet 120 °C alá csökkentjük, és a monomer feleslegét vákuumban eltávolítjuk. Az izolált polimer összetételét infravörös és NMR-spektroszkópiával igazoljuk.
Mikronizálás
Az 1(a), 1(b) és 1(c) példa szerint előállított polimerek mindegyikét először késes aprítóval (IKA, Staufen, Németország) aprítjuk. A polimereket ezután Aljet Micronizer-rel (Fluid Energy Aljet, Plumsteadsville, Pennsylvania, USA) mikronizáljuk, nyomás alatti száraz nitrogénáram alkalmazásával. Az I. példa szerinti polimer átlagos részecskemérete 24,84 μm Malvern Mastersizer/E-vel (Malvern, Worcs., U.K.) végzett analízis szerint, térfogati megoszlási modell és diszpergálószerként 200/5 cS szilikonolaj (Dow Corning, Seneffe, Belgium) alkalmazásával. Az 1(b) és 1(c) példa szerinti polimerek átlagos részecskemérete 4,69 μm, illetve 6,31 μm mikronizálás után.
Tisztítás/nátriumsó-képzés
Az 1(a), 1(b) és 1(c) példa szerinti polimerekből 50 g-okat 2 liter acetonban (Riedel de-Haen, Seelze, Németország) diszpergálunk, és szonikátorban (Branson Ultrasonics BV, Soest, Hollandia) kezeljük körülbelül 30 percen keresztül. Ez alatt az idő alatt a diszperziót egy Ultra-turrax T25 homogenizátorral (IKA, Staufen, Németország) is homogenizáljuk körülbelül 9500 fordulat/perccel. A fenti szonikálás/homogenizálás lépés után a diszperziót körülbelül 5000 fordulat/perccel körülbelül 30 percen keresztül centrifugáljuk Sorvall centrifugában (Sorvall,
- 31 Wilmington, Delaware, USA). A felülúszót elöntjük, és a centrifugaüledéket friss acetonban újraszuszpendáljuk, majd a szonikálás/homogenizálás lépést megismételjük. A második centrifugálás befejezése után a felülúszót elöntjük, és az üledéket ionmentes vízben újraszuszpendáljuk. Egy végső szonikálás/homogenizálás lépést hajtunk ezután végre a maradék aceton eltávolítására, és a diszperziót ismét centrifugáljuk körülbelül 5000 fordulat/perccel, körülbelül 30 percen keresztül.
A centrifugaüledéket friss ionmentes vízben újraszuszpendáljuk, és a diszperzió pH-ját mérjük. Az egyes mintákhoz keverés közben megfelelő térfogatú 0,2 mol/1 koncentrációjú nátnum-karbonát-oldatot adunk, amellyel a pH-t körülbelül 8 és körülbelül 9 közötti értékre növeljük. A diszperziókat ezután körülbelül 30 percen keresztül keverjük, majd vákuumban szűrjük 24 cm átmérőjű Whatman no. 1 szűrőpapíron (Whatman Inti. Ltd., Maidstone, Kent, U.K.) keresztül. A szűrőn maradt anyagot tovább mossuk ionmentes vízzel, fagyasztjuk és liofilizáljuk Edwards SuperModulyo liofilizátorral (Edwards, Crawley, West Sussex, U.K.).
A tisztítást differenciális pásztázó kalonmetriával (DSC) ellenőrizzük, TA DSC912S készülék (TA Instruments, New Castle, Delaware, USA) alkalmazásával, 10 °C/perc fűtési sebesség mellett. Az egyes esetekben kapott DSC termogramok nem mutatnak endoterm csúcsot a monomer glikolidra, viszont 176 °C-on, 178 °C-on és 180 °C-on endotermákat mutatnak az 1(a), 1(b), illetve 1(c) példa szerint polimerekre.
II. példa
Glikolid/almasav kopolimer (PGMA) mikroszemcsés kationcserélő előállítása
A cím szerinti mikroszemcséket az 1(c) példában leírt eljárással szintetizáljuk, azzal az eltéréssel, hogy 2,586 mól (300 g) glikolidot, 0,172 mól (23 g) vízmentes almasavat és 862 ml (0,172 mmol) 0,2 mol/1 koncentrációjú, toluollal készült ón(II)-oktoát-oldatot alkalmazunk. A polimer olvadáspontjának meghatározását differenciális pásztázó kaloriemtriával végezzük (Tm = 206 °C).
A szilárd polimert aprítással körülbelül 125 pm átlagos részecskeátmérő eléréséig aprítjuk, Wiley-malomban. A részecskeméret további csökkentését körülbelül 5-10 pm átmérőre nyomás alatti száraz nitrogén alkalmazásával, sugármalomban végezzük. A kapott mikrorészecskéket acetonnal öblítve eltávolítjuk a monomer nyomait és az alacsony móltömegű oligomereket. A terméket vákuumban, 40 °C-on szárítjuk a felhasználásig. A száraz mikroszemcsék átlagos átmérőjét részecskeméret analizátorral határozzuk meg.
III. példa
Borkősav iniciált poliglikolsav polimerek (PGTA) előállítása, mikronizálása és tisztítása, kationcserélőként (CE) történő alkalmazásra
111(a) példa
10/1 PGTA
500 ml-es üvegreaktorba 264,65 g glikolidot (Purac Biochem, Arkelsedijk, Hollandia) és 34,22 g L-borkősavat (Riedel de-Haen, Seelze, Németország) töltünk. A borkősavat előzete
- 33 sen tovább szárítottuk szilikagélen (Fischer Scientific, Loughborough, Leics., U.K.) Abderhalden-készülékben (Aldrich, St. Louis, Missouri, USA). A reaktort körülbelül 40 °C-os olajfürdőbe merítjük, és 4 Pa (0,04 mbar) vákuum alá helyezzük körülbelül 30 percen keresztül. A fürdőt ezután leeresztjük, és hőmérsékletét körülbelül 110 °C-ra emeljük. A fenti hőmérséklet elérése után a reaktort oxigénmentes nitrogénatmoszféra alá helyezzük, és újra a fürdőbe merítjük. A reaktor tartalmát körülbelül 100 fordulat/perccel keverjük Heidolph-keverővel (Heidolph Elektro GmbH, Kelheim, Németország). A reaktor tartalmának felolvadása után hozzáadunk 1,14 ml 0,1 mol/1 koncentrációjú ón-2-etil-hexaonát-oldatot (Sigma, St. Louis, Missouri, USA) toluolban (Riedel de-Haen, Seelze, Németország) (sztöchiometrikus arány 50 ppm). A vákuumot egy folyadék nitrogéncsapdán keresztül újra rákapcsoljuk körülbelül 30 másodpercre a toluol eltávolítása céljából, a monomer szignifikáns eltávolítása nélkül. Az olajfürdő hőmérsékletét ezután körülbelül 120 °C-ra emeljük körülbelül 5 percen keresztül, majd tovább emeljük 150 °C-ra. A reaktort ezen a hőmérsékleten tartjuk körülbelül 4 órán keresztül állandó mechanikus keverés közben (körülbelül 100 fordulat/perc). Cím szerinti polimert kapunk.
Mikronizálás
A 111(a) példa szerint előállított polimert először késes aprítóval (IKA, Staufen, Németország) aprítjuk. A polimert ezután Aljet Micronizer-rel (Fluid Energy Aljet, Plumsteadsville, Pennsylvania, USA) mikronizáljuk, nyomás alatti száraz nitrogénáram alkalmazásával. A polimer így kapott átlagos részecskemérete 14,42 gm Malvern Mastersizer/E-vel (Malvern,
- 34 Worcs., U.K.) végzett analízis szerint, térfogati megoszlási modell és diszpergálószerként 200/5 cS szilikonolaj (Dow Corning, Seneffe, Belgium) alkalmazásával.
Tisztítás/nátriumsó-képzés g 111(a) példa szerinti polimert 2 liter acetonban (Riedel de-Hane, Seelze, Németország) diszpergálunk, és szonikátorban (Branson Ultrasonics BV, Soest, Hollandia) kezeljük körülbelül 30 percen keresztül. Ezalatt az idő alatt a diszperziót egy Ultraturrax T25 homogenizátorral (IKA, Staufen, Németország) is homogenizáljuk körülbelül 9500 fordulat/perccel. A fenti szonikálás/homogenizálás lépés után a diszperziót körülbelül 5000 fordulat/perccel körülbelül 30 percen keresztül centrifugáljuk Sorvall-centrifugában (Sorvall, Wilmington, Delaware, USA). A felülúszót elöntjük, és a centrifugaüledéket friss acetonban újraszuszpendáljuk, majd a szonikálás/homogenizálás lépést megismételjük. A második centrifugálás befejezése után a felülúszót elöntjük, és az üledéket ionmentes vízben újraszuszpendáljuk. Egy végső szonikálás/homogenizálás lépést hajtunk ezután végre a maradék aceton eltávolítására, és a diszperziót ismét centrifugáljuk körülbelül 5000 fordulat/perccel, körülbelül 30 percen keresztül.
A centrifugaüledéket friss ionmentes vízben újraszuszpendáljuk, és a diszperzió pH-ját mérjük. Megfelelő térfogatú 0,2 mol/1 koncentrációjú nátrium-karbonát-oldat hozzáadásával a pH-t körülbelül 8 és körülbelül 9 közötti értékre növeljük. A diszperziót ezután körülbelül 30 percen keresztül keverjük, majd vákuumban szűrjük 24 cm átmérő Whatman no. 1 szűrőpapíron (Whatman Inti. Ltd., Maidstone, Kent, U.K.) keresztül. A
- 35 szűrőn maradt anyagot tovább mossuk ionmentes vízzel, fagyasztjuk és liofilizáljuk Edwards SuperModulyo liofilizátorral (Edwards, Crawley, West Sussex, U.K.).
A tisztítást differenciálkalorimetriával (DSC) ellenőrizzük, TA DSC912S készülék (ΤΑ Instruments, New Castle, Delaware, USA) alkalmazásával, 10 °C/perc fűtési sebesség mellett. A kapott DSC termogram nem mutat endoterm csúcsot a monomer glikolidra, viszont 181 °C-on endotermát mutat.
Ill(b) példa
15/1 PGTA
A cím szerinti polimert az 1(c) példában ismertetett eljárás szerint szintetizáljuk, azzal az eltéréssel, hogy 2,586 mól (300 g) glikolidot, 0,172 mól (26,8 g) vízmentes borkősavat és 862 ml (0,0172 mmol) 0,2 mol/1 koncentrációjú, toluollal készült ón(II)-oktoát-oldatot alkalmazunk. A polimer olvadási hőmérsékletét differenciálkaloriméterrel határozzuk meg (Tm = 204 °C).
A szilárd polimert aprítással körülbelül 125 pm átlagos részecskeátmérő eléréséig aprítjuk Wiley-malomban. A részecskeméret további csökkentését körülbelül 5-10 pm átmérőre nyomás alatti száraz nitrogén alkalmazásával sugármalomban végezzük. A kapott mikrorészecskéket acetonnal öblítve eltávolítjuk a monomer nyomait, és az alacsony móltömegü oligomereket. A terméket vákuumban körülbelül 40 °C-on szárítjuk a felhasználásig. A száraz mikroszemcsék átlagos átmérőjét részecskeméret analizátorral határozzuk meg.
IV. példa
Poliglikolid-alapú mikroszemcsés anioncserélő (AE-1) előállítása
Az anioncserélő előállítását két lépésben végezzük. Első lépésben kis móltömegű poliglikolidot állítunk elő az 1(c) példában ismertetett eljáráshoz hasonló módon, azonban az alábbi polimerizációs töltet alkalmazásával: 1 mól (116 g) glikolid, 30 mmol (2,22 g) propándiol mint iniciátor, és 0,03 mmol ón(II)-oktoát. Ezután a polimer aprítását és tisztítását az 1(c) példában leírtak szerint végeztük. Második lépésben a gyakorlatilag nem-ionos mikroszemcséket forró (körülbelül 80 °C-os), híg diamin-oldatban, például hexán-diamin dioxánnal készült, ismert koncentrációjú oldatában inkubáljuk argon alatt. A diamin koncentrációját dioxánban acidimetriásan határozzuk meg. Amikor a reakció gyakorlatilag lejátszódott, az amidált mikroszemcséket szűréssel elválasztjuk, dioxánnal mossuk, és vákuumban szárítjuk. Az ioncserélő (amidált szemcsék) kötőkapacitását (1) nitrogénre történő elemanalízissel és (2) a naproxenhez való kötődés mértékével határozzuk meg oly módon, hogy mérjük a híg oldatból elfogyott gyógyszer mennyiségét HPLC alkalmazásával. Az utóbbi adatot az immobilizált naproxen ismert koncentrációjú, híg nátrium-hidroxid-oldattal történő felszabadításával erősítjük meg.
V. példa
Propándiollal iniciált poli(laktid ko-glikolid) kopolimerek előállítása bevonóanyagként történő alkalmazásra
Via) példa
75/25 P(1)LGPD
500 ml-es üvegreaktorba helyezünk 235,01 g 1-laktidot (Purac Biochem, Arkelsedijk, Hollandia), 63,09 g glikolidot (Purac Biochem, Arkelsedijk, Hollandia) és 1,90 g propándiolt (Riedel de-Haen, Seelze, Németország), majd 3,96 ml 0,1 mol/1 koncentrációjú, toluollal (Riedel de-Haen, Seelze, Németország) készült ón-2-etil-hexanoát-oldatot (Sigma, St. Louis, Missouri, USA) adunk hozzá (a sztöchiometrikus arány 200 ppm). A toluolt vákuumban körülbelül 1 órán keresztül történő szárítással eltávolítjuk, majd a reaktort oxigénmentes nitrogénatmoszférába helyezzük, és körülbelül 160 °C-ra előmelegített olajfürdőbe merítjük. A reaktor tartalmát körülbelül 100 fordulat/perccel keverjük Heidolph-keverővel (Heidolph Elektro GmbH, Kelheim, Németország). A reaktor tartalmának megolvadása után a hőmérsékletet körülbelül 180 °C-ra emeljük, és ezen az értéken tartjuk körülbelül 3 órán keresztül. Amorf kopolimert kapunk. A kopolimer móltömege (MW) körülbelül 12500 g/mol gélpermeációs kromatográfiás meghatározás (GPC) szerint, Waters 510 szivattyú és Waters 410 differenciális refraktométer (Waters, Milford, Massachusetts, USA) alkalmazásával, a fényszóródás Wyatt Minidawn fényszóródás-detektorral (Wyatt Technology Corporation, Santa Barbara, California, USA) történő detektálásával.
- 38 V(b) példa
90/10 P(1)LGPD
A cím szerinti terméket az V(a) példában leírtak szerint eljárva szintetizáljuk, azzal az eltéréssel, hogy 274,31 g 1-laktidot, 24,55 g glikolidot, 1,14 g propándiolt és 3,89 ml 0,1 mol/1 koncentrációjú toluolos ón-2-etil-hexanoát-oldatot alkalmazunk (sztöchiometrikus arány 200 ppm). Kristályos kopolimert kapunk. A kopolimer móltömege GPC meghatározás szerint körülbelül 20700 g/mol.
V(c) példa
90/10 P(d,I)LGPD
A cím szerinti terméket az V(a) példában leírtak szerint eljárva szintetizáljuk, azzal az eltéréssel, hogy 274,31 g d,l-laktidot, 24,55 g glikolidot, 1,14 g propándiolt és 3,86 ml 0,1 mol/1 koncentrációjú toluolos ón-2-etil-hexanoát-oldatot alkalmazunk (sztöchiometrikus arány 200 ppm). Amorf kopolimert kapunk. A kopolimer móltömege GPC meghatározás szerint körülbelül 20650 g/mol.
V(d) példa
Propándiollal iniciált poli(l-laktid ko-d,l-laktid) kopolimer (PLGPD) előállítása bevonóanyagként történő alkalmazásra
80/20 P(l)L(d,l)LPD
A cím szerinti terméket az V(a) példában leírtak szerint eljárva állítjuk elő, azzal az eltéréssel, hogy 239,09 g 1-laktidot, 59,77 g d,1-laktidot (Purac Biochem, Arkelsedijk, Hollandia), 1,14 g propándiolt és 3,96 ml 0,1 mol/1 koncentrációjú, toluollal készült ón-2-etil-hexanoát-oldatot alkalmazunk. Amorf ko
- 39 polimert kapunk. A kopolimer móltömege GPC meghatározás szerint 22320 g/mol. A polimer üvegesedési hőmérséklete 48 °C DSC szerint.
Tisztítás
Az V(a), V(b) és V(c) példa szerint előállított polimereket úgy mossuk, hogy az 30 tömeg%-os, acetonitrillel (Labscan, Dublin, Írország) készült oldatot porlasztóval 8 ml/perc áramlási sebességgel egy keringtetőfürdővel összekötött 6 literes köpenyes reaktorban lévő, körülbelül 2 °C-ra lehűtött ionmentesített vízbe porlasztjuk, és körülbelül 350 fordulat/perccel keverjük Heidolph-keverövel (Heidolph Elektro GmbH, Kelheim, Németország). Az oldatokat Vibra-Cell VC 50 atomizáló porlasztófejbe (Bioblock, Illkirch, Franciaország) tápláljuk be, Masterflex szivattyú (Cole Parmer Instrument Co., Niles, Illinois, USA) alkalmazásával és a porlasztást 12 kHz szonikálási frekvencia alkalmazásával biztosítjuk. Az így kapott diszperziókat 24 cm átmérőjű Whatman no. 1 szűrőpapíron (Whatman Inti. Ltd., Maidstone, Kent, U.K.) szűrjük, és a szűrőn maradt anyagot ionmentes vízzel mossuk, fagyasztjuk, és liofilizáljuk Edwards SuperModulyo liofilizátor (Edwards, Crawley, West Sussex, U.K.) alkalmazásával.
A tisztaságot DSC-vel igazoljuk TA DSC912s (TA Instruments, New Castle, Delaware, USA) alkalmazásával, 10 °C/perc fűtési sebesség mellett, az V(a), V(b), V(c) illetve V(d) példa szerinti polimerek üvegesedési hőmérséklete (Tg) 44 °C, 49 °C, 45 °C illetve 48 °C.
- 40 4 W
VI példa
Pepiiddel töltött kationcserélők előállítása
VI(a) példa
Feltöltés pepiid A-val (p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 képletű LHRH analóg)
Az 1(a), 1(b), 1(c) és 11(a) példa szerinti polimerek nátriumsóiból 4-4 g-ot 1,33 g szabad bázis formában lévő pepiid A-t (Kinerton Ltd., Dublin, Írország) tartalmazó, 70 ml ionmentes vízzel készült oldatokban diszpergálunk. A diszperziókat szobahőmérsékleten, keverés közben körülbelül 2 órán keresztül inkubáljuk, majd 9 cm átmérőjű Whatman no. 1 szűrőpapíron (Whatman Inti. Ltd., Maidstone, Kent, U.K.) szűrjük keresztül. A szűrőn maradt anyagot további ionmentes vízzel mossuk, fagyasztjuk, és Edwards SuperModulyo készülékben (Edwards, Crawley, West Sussex, U.K.) liofilizáljuk. Ezután a kötött pepiid A mennyiségének meghatározására elemanalízissel meghatározzuk a minták nitrogéntartalmát. Az alábbi eredményeket kapjuk:
| Példa száma | CE Példa száma | CE Polimer | Kötött peptid A (tömeg%) |
| VI(a) (i) | 1(a) | 7/1 PGCA | 24,52 |
| VI(a) (u) | 1(b) | 10/1 PGCA | 12,60 |
| VI(a) (in) | 1(c) | 15/1 PGCA | 19,29 |
| VI(a)(iv) | 111(a) | 10/1 PGTA | 17,60 |
- 41 VI(b) példa
Feltöltés peptid B-vel (Η-β-D-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys diszulfid kötéssel van összekötve, szomatosztatin analóg)
A VI(b) példában leírtak szerint járunk el, az 1(a), 1(b), 1(c) és 11(a) példa szerinti vegyületek nátriumsóiból 4-4 g-ot, és 1,33 g szabad bázis formában lévő peptid B-t (Kinerton Ltd., Dublin, Írország) alkalmazunk. Immobilizált peptid B-t tartalmazó 1(a), 1(b) és 1(c) példa szerinti kötött mikroszemcséket kapunk. A minták nitrogéntartalmát elemanalízissel meghatározva mérjük a kötött peptid B mennyiségét. A kapott eredmények az alábbiak:
| Példa száma | CE Példa száma | CE Polimer | Kötött peptid B (tömeg%) |
| VI(b) (i) | 1(a) | 7/1 PGCA | 25,20 |
| VI(b) (ii) | 1(b) | 10/1 PGCA | 13,10 |
| VI(b) (111) | 1(c) | 15/1 PGCA | 19,64 |
| VI(b) (iv) | 111(a) | 10/1 PGTA | 14,23 |
VII. példa
Bevonatos, polipeptiddel töltött kationcserélők előállítása porlasztással
A polipeptiddel töltött kationcserélőket az alább megadott bevonó kopolimerek acetonitrillel (Labscan, Dublin, Írország) készült oldataiban diszpergáljuk. A diszpergálást úgy végezzük, hogy Ultra-turrax T25 készülékkel (IKA, Staufen, Németország) körülbelül 9500 fordulat/perccel körülbelül 5 percen keresztül
- 42 homogenizálunk. A bevonó kopolimer/acetonitril oldatok koncentrációja 12,5 - 25 tömeg%, és a bevonó kopolimer polipeptiddel töltött kationcserélőhöz viszonyított tömegaránya 1:1 - 1,3:1
A diszpergálás után a diszperziót Vibra-Cell VC50 atomizáló porlasztóba (Bioblock, Illkirch, Franciaország) tápláljuk be 16 kHz szonikálási frekvenciával, kerámiadugattyús szivattyú (FMI, Oyster Bay, N.Y., USA) alkalmazásával, amelyet 2 ml/perc átfolyási sebességre állítunk. A szórófej elérése után a diszperziót izopropil-alkoholba (IPA) (Labscan, Dublin, Írország) porlasztjuk, amelyet szárazjég szemcsék (A.LG., Dublin, Írország) hozzáadásával körülbelül -80 °C hőmérsékletre hütöttünk. Az IPA gyűjtő nem-oldószerként szolgál, és az elegyet körülbelül 300 fordulat/perccel keverjük Heidolph-keverővel (Heidolph Elektro GmbH, Kelheim, Németország). A porlasztás befejezése után a teljes diszperziót körülbelül 10 °C és körülbelül szobahőmérséklet közötti hőmérsékletre hagyjuk felolvadni. A bevont mikroszemcséket ezután Whatman no. 1 szűrőpapíron (Whatman Inti. Ltd., Maidstone, Kent, U.K.) végzett vákuumszűréssel összegyűjtjük. A szűrőn maradt anyagot ionmentes vízzel mossuk, fagyasztjuk, és Edwards SuperModulyo liofilizálóval (Edwars, Crawley, West Sussex, U.K.) liofilizáljuk. A kapott bevonatos mikroszemcsék méretét Malvern Mastersizer/E készülékkel (Malvern, Worcs., U.K.) határozzuk meg, diszpergálószerként 1% Tween 20-at tartalmazó vizet alkalmazunk. A bevont mikroszemcséket nitrogéntartalmát is meghatározzuk elemanalízissel, a peptidtartalom meghatározása céljából. A különféle bevonási kísérleteket az alábbi táblázatban foglaljuk össze.
| Példa száma | Pepiiddel töltött CE: példa száma | Bevonó kopolimer példa száma | Bevonó kopolimer koncentrációja acetonitrilben (tömeg%) | Bevonó kopolimer/peptiddel töltött CE arány | Átlagos részecskeátmérő (pm) | Peptid töltet (tömeg%) |
| VII(a) | VI(a) (ii) | V(a) | 24,31 | 1:1 | 122,14 | 5,38 peptid A |
| VII(b) | VI(a) (ii) | V(b) | 22,41 | 1.1 | 120,15 | 6,38 peptid A |
| VII(c) | VI(a) (iii) | V(b) | 12,5 | 1:1 | 79,30 | 7,76 peptid A |
| VII(d) | VI(a) (iii) | V(c) | 12,5 | 1:1 | 77,85 | 8,93 peptid A |
| VII(e) | VI(a) (iv) | V(c) | 14,95 | 1:1 | 136,74 | 8,75 peptid A |
| VII(f) | VI(a) (i) | V(C) | 14,92 | 1,27:1 | 80,59 | 10,31 peptid A |
| vil(g) | VI(b) (ii) | V(a) | 25,37 | 1:1 | 140,58 | 2,63 peptid B |
| VII(h) | VI(b) (ii) | V(b) | 20 | 1,15:1 | 96,77 | 5,98 peptid B |
| VII(i) | VI(b) (iii) | V(b) | 12,5 | 1:1 | 102,56 | 7,69 peptid B |
| vii(j) | VI(b) (iii) | V(c) | 12,5 | 1:1 | 83,72 | 7,90 peptid B |
| VII(k) | W) Óv) | V(c) | 14,95 | 1:1 | ' 135,14 | 6,69 peptid B |
| VII(l) | VI(b) (i) | V(c) | 14,92 | 1,26:1 | 123,18 | 10,11 peptid B |
- 44 Az összes mintát 180 pm-es szitán (Bioblock, Illkirch, Franciaország) szitáljuk keresztül az in vivo és/vagy in vitro vizsgálat előtt.
Egy kötött mikroszemcse vagy bevont mikroszemcse in vitro az alábbi módszerrel vizsgálható a kötött peptid vagy kötött protein felszabadulási sebességének meghatározására. Körülbelül 50 mg tömegű kötött mikroszemcse vagy bevont mikroszemcse egy alikvotját folyamatos átfolyású cella-rendszerbe helyezzük, ahol egy pufferolt foszfátoldat (körülbelül pH 7,2, 37 °C-os) folyik keresztül a kötött mikroszemcsék vagy bevont mikroszemcsék teljes tömegén körülbelül 45 ml/óra áramlási sebességgel. A felszabadult hatóanyagot tartalmazó puffer mintákat körülbelül 4 °C-on gyűjtjük, és 1-2 napos intervallumokban meghatározzuk a peptid vagy protein koncentrációját. Az egyes mikroszemcsék felszabadulási profilját két hetes időtartam alatt határozzuk meg.
Egy kötött mikroszemcséből vagy bevont mikroszemcséből a kötött peptid vagy kötött protein felszabadulásának sebességét in vivo az alábbi módszerrel határozhatjuk meg. A mintákat hím Wistar patkányoknak (Bioresources, Trinity College, Dublin, Írország) adagoljuk, a combba történő intramuszkuláris injektálással. Szuszpendáló közegként 3% karboximetil-cellulózt és 1% Tween 20-at tartalmazó sóoldatot alkalmazunk. A peptid A-val töltött minták esetén a tényleges ekvivalens dózis 40 pg/kg/nap. A peptid B-vel töltött minták esetén a dózis 1 mg/· kg/nap. A mintákat szívpunkcióval vesszük, és a plazma peptidkoncentrációját peptid A-ra és peptid-B-re specifikus radioimmun vizsgálattal (RIA) ellenőrizzük. A peptid A-val töltött min
- 45 ták esetében (a pepiid A egy LHRH analóg) egy tesztoszterin RIA-t is alkalmazunk a tesztoszterin szuppresszió meghatározására. Alternatív szuszpendáló közegként gélképzöket is alkalmazhatunk bizonyos esetekben. Az eredményeket az A és B táblázatban ismertetjük.
A táblázat
| Peptid A példák | Peptid A (>150 pg/ml) napok száma | Tesztoszterin (<1 ng/ml) napok száma |
| VII(a) | 20 | 21 |
| VII(b) | 10 | 10 |
| VII(c) | 2 | 11 |
| VII(d) | 2 | 11 |
| VII(e) | 2 | 13 |
| VII(f) | 2 | 16 |
| VII(a) gélképzőben | 25 | 44 |
B táblázat
| Peptid B példák | Peptid B (>1000 pg/ml) napok száma |
| VII(g) | nem vizsgált |
| VII(h) | nem vizsgált |
| VII(i) | nem vizsgált |
| VH(j) | 15 |
| VII(k) | 10 |
| VII(l) | 10 |
VIII. példa
VlII(a) példa
Porlasztás, oldószerként acetonitril és szobahőmérsékletű IPA mint nem-oldószer alkalmazásával
Körülbelül 1,06 g 1(c) példa szerinti (polipeptidhez nem kötött) kationcserélőt diszpergálunk az V(a) példa szerinti bevonó kopolimer acetonitrillel (Labscan, Dublin, Írország) készült, 25,24 tömeg%-os oldatában úgy, hogy a kationcserélő bevonó kopolimerhez viszonyított tömegaránya körülbelül 1,03:1. A diszpergálást Ultra-turrax T25 készülékkel (IKA, Staufen, Németország) történő homogenizálással végezzük 9500 fordulat/perc mellett, körülbelül 5 percen keresztül.
A diszpergálás után a diszperziót Vibra-Cell VC50 atomizáló szórófejbe (Bioblock, Illkirch, Franciaország) vezetjük be, 16 kHz szonikáló frekvenciával, kerámiadugattyús szivattyú (FMI, Oyster Bay, N.Y., USA) alkalmazásával, amelyet 2 ml/perc átfolyási sebességre állítottunk. A szórófej elérése után a diszperziót IPA-ba (Labscan, Dublin, Írország) porlasztjuk szobahőmérsékleten (17-22 °C). Ez az IPA gyűjtő nem-oldószerként működik, az elegyet körülbelül 300 fordulat/perc mellett keverjük Heidolph-keverővel (Heidolph Elektro GmbH, Kelheim, Németország). A porlasztás befejezése után a diszperziót körülbelül további 60 percen keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd a bevont szemcséket Whatman no. 1 szűrőpapíron (Whatman Inti. Ltd., Maidstone, Kent, U.K.) keresztül vákuumszűréssel összegyűjtjük. A szűrőn maradt anyagot ionmentes vízzel mossuk, fagyasztjuk, és Edwards SuperModulyo liofilizálóval (Edwards, Crawley, West Sussex, U.K.) liofilizáljuk.
- 47 A kapott szemcsék részecskeméretét Malvern Mastersizer/E készülékkel (Malvern, Worcs., U.K.) és diszpergálószerként 1% Tween 20-at tartalmazó víz alkalmazásával határozzuk meg. A kapott szemcsék átlagos részecskemérete [d(0,5)] 84,75 μm.
VlII(b) példa
Porlasztás, oldószerként etil-acetát és szobahőmérsékletű IPA mint nem-oldószer alkalmazásával
A porlasztást lényegében a VIII(a) példában ismertetett eljárás szerint hajtjuk végre, azzal az eltéréssel, hogy körülbelül 0,99 g 1(c) példa szerinti kationcserélöt (kötött polipeptid nélkül) diszpergálunk az V(a) példa szerinti bevonó kopolimer etil-acetáttal (Riedel de-Haen, Seelze, Németország) készült, 24,88 tömeg%-os oldatában úgy, hogy a kationcserélő bevonó kopolimerhez viszonyított tömegaránya körülbelül 0,96:1. A kapott részecskék átlagos részecskemérete [d(0,5)] 100,56 μm.
VIII(c) példa
Porlasztás, etil-acetát mint oldószer és magasabb frekvenciás szonda alkalmazásával
Körülbelül 1,02 g 1(c) példa szerinti (polipeptidhez nem kötött) kationcserélöt diszpergálunk az V(a) példa szerinti bevonó kopolimer etil-acetáttal (Riedel, de-Haen) készült, 15,14 tömeg%-os oldatában úgy, hogy a kationcserélő bevonó kopolimerhez viszonyított tömegaránya körülbelül 1,05:1. A diszpergálást Ultra-turrax T25 készülékkel (IKA, Staufen, Németország) történő homogenizálással végezzük 9500 fordulat/perc mellett, körülbelül 5 percen keresztül.
A diszpergálás után a diszperziót Martin Walter 400 GSIP porlasztóba (Sódévá, Le Bouget du Lac, Franciaország) táplál
- 48 juk be, 34,6 kHz szonikálási frekvenciával, kerámiadugattyús szivattyú (FMI, Oyster Bay, N.Y., USA) alkalmazásával, amelyet 5 ml/perc átfolyási sebességre állítunk. A szórófej elérése után a diszperziót izopropil-alkoholba (IPA) (Labscan, Dublin, Írország) porlasztjuk, amelyet szárazjég szemcsék (A.LG., Dublin, Írország) hozzáadásával körülbelül -77 °C hőmérsékletre hütöttünk. Az IPA gyűjtő nem-oldószerként szolgál, és az elegyet körülbelül 300 fordulat/perccel keverjük Heidolph-keverővel (Heidolph Elektro GmbH, Kelheim, Németország). A porlasztás befejezése után a bevont mikroszemcséket Whatman no. 1 papíron (Whatman Inti. Ltd., Maidstone, Kent, U.K.) vákuumszűréssel összegyűjtjük. A szűrőn maradt anyagot ionmentes vízzel mossuk, fagyasztjuk, és Edwards SuperModulyo liofilizálóval (Edwars, Crawley, West Sussex, U.K.) liofilizáljuk. A kapott bevonatos mikroszemcsék méretét Malvern Mastersizer/E készülékkel (Malvern, Worcs., U.K.) határozzuk meg, diszpergálószerként 1% Tween 20-at tartalmazó vizet alkalmazunk. A kapott részecskék átlagos részecskemérete [d(0,5)] 95,69 pm.
IX. példa
Szomatosztatin analóg peptid C és D kötése kationcserélőhöz, majd bevonása
IXÍaj példa
Feltöltés peptid C-vel
Az 1(c) példa szerinti vegyület nátriumsójából körülbelül 1,01 g-ot 0,25 g szabad formában lévő peptid C (szerkezete: N-hidroxietilpiperaziml-acetil-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys-maradék egymáshoz diszulfid
- 49 kötéssel kapcsolódik) (Kinerton Ltd., Dublin, Írország) 40 ml ionmentes vízzel készült oldatában diszpergálunk. A diszperziót keverés közben körülbelül 2 órán keresztül inkubáljuk, majd 9 cm átmérőjű Whatman no. 1 szűrőpapíron (Whatman Inti. Ltd., Maidstone, Kent, U.K.) átszűrjük. A szűrőn maradt anyagot további ionmentes vízzel mossuk, fagyasztjuk, és Edwards SuperModulyo készülékben (Edwards, Crawley, West Sussex. U.K.) liofilizáljuk. Ezután a minta nitrogéntartalmát meghatározva meghatározzuk a kötött pepiid mennyiségét, amely 20,21%.
IX(b) példa
Feltöltés pepiid D-vel
A IX(a) példában leírtak szerint járunk el, azzal az eltéréssel, hogy az 1(c) példa szerinti vegyület nátriumsójából 2,04 g-ot diszpergálunk 0,51 g szabad bázis formában lévő pepiid D (amelynek szerkezete N-hidroxietilpiperaziniletilszulfonil-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys-maradék egymással diszulfid kötéssel kapcsolódik) (Kinerton Ltd., Dublin, Írország) 80 ml ionmentes vízzel készült oldatában. A minta nitrogéntartalmát meghatározva a kötött peptid mennyiségét 19,53%-nak találtuk.
X. példa
A IX(a) és IX(b) példa szerinti kötött mikroszemcséket a VII. példában ismertetett eljárással vonunk be, az alábbi eredményeket kapjuk.
| Példa száma | Peptiddel töltött CE | Bevonó kopolimer | Bevonó kopolimer koncentrációja acetonitrilben (tömeg%) | Bevonó kopolimer/peptiddel töltött CE arány | Átlagos részecskeméret (pm) | Peptid töltet (tömeg%) |
| X(a) | IX(a) | V(c) | 12,51 | 1:1 | 83,33 | 9,48 |
| X(b) | IX(b) | V(c) | 12,48 | 0,98:1 | 72,15 | 8,87 |
| X(c) | IX(b) | V(d) | 12,35 | 0,98:1 | 86,03 | 6,74 |
XI, példa
Gélképző készítmény előállítása
0,3 g VII(a) példa szerinti bevont mikroszemcsét 2,0 ml cseppfolyós gélképzővel (I. példa szerinti A komponens és III. példa szerinti C komponens 50:50 arányú elegye, amelyek mindegyikét az US 5612052 számú szabadalmi leírás ismerteti) elegyítünk 5 ml-es fecskendőben, egy mechanikus mikrokeverő alkalmazásával, amelyet 20 fordulat/perccel működtetünk körülbelül 10 percen keresztül. A gélképzőt száraz hővel elősterilizáljuk, és a keverést lamináris áramlású steril fülke alatt, steril keverő alkalmazásával hajtjuk végre. A készítményt az 5 ml-es fecskendőből (a dugattyú behelyezése után) egy kisebb méretű fecskendőbe nyomjuk át, amely a készítmény adagolására alkalmas. A készítmény állandóságát optikai mikroszkóppal ellenőrizzük. A kisebb fecskendőt tárolás céljára száraz csomagolással látjuk el, és körülbelül 4 °C-on tartjuk felhasználásig.
Claims (30)
- Szabadalmi igénypontok1. Kötött mikroszemcse, amely egy abszorbeálható heteroláncú polimer magot és a fenti abszorbeálható heteroláncú polimer magon immobilizálva egy vagy több pepiidet, egy vagy több proteint vagy ezek kombinációját tartalmazza, ahol az egyes peptideket egymástól függetlenül az alábbi csoportból választjuk: növekedésihormon-felszabadító peptid (GHRP), luteinizálóhormon-felszabadító hormon (LHRH), szomatosztatin, bombezin, gasztrin-felszabadító peptid (GRP), kalcitonin, bradikinin, galanin, melanocita-stimuláló hormon (MSH), növekedésihormon-felszabadító faktor (GRF), amilm, tachikininek, szekretin, paratiroid hormon (PTH), enkafalin, endotelin, kalcitonin gén-felszabadító peptid (CGRP), neuromedinek, paratiroid hormonnal rokon protein (PTHrP), glukagon, neurotenzin, adrenokortikotróp hormon (ACTH), peptid YY (PYY), glukagon-felszabadító peptid (GLP), vazoaktív intesztinális peptid (VIP), hipofízis adenilát-cikláz aktiváló peptid (PACAP), motilin, P-anyag, neuropeptid Y (NPY), TSH és annak analógjai és fragmensei, vagy ezek gyógyászatiig elfogadható sói; és az egyes proteineket egymástól függetlenül az alábbi csoportból választjuk: növekedési hormon, eritropoietin, granulocita-kolónia stimuláló faktor, granulocita-makrofág-kolónia stimuláló faktor és interferonok.
- 2. Az 1. igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben a peptid, protein vagy ezek kombinációja vagy gyógyászatilag elfogadható sója a kötött mikroszemcse össztömegének 0,1 - 30%-át teszi ki.
- 3. A 2. igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben az abszorbeálható heteroláncú polimer mag glikolát-egységeket tartalmaz.
- 4. A 3. igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben az abszorbeálható heteroláncú polimer mag citrát-maradékokat, tartarát-maradékokat vagy malát-maradékokat is tartalmaz.
- 5. A 4. igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben a glikolát-egységek citrát-maradékokhoz, tartarát-maradékokhoz vagy malát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1.
- 6. A3, igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben a glikolát-egységek karboxil-maradékkal vagy amin-maradékkal végződnek.
- 7. Bevonatos mikroszemcse, amely egy vagy több kötött mikroszemcsét tartalmaz egy abszorbeálható bevonó polimerben, ahol a kötött mikroszemcse egy abszorbeálható heteroláncú polimer magot és egy vagy több pepiidet, egy vagy több proteint vagy ezek kombinációját tartalmazza az abszorbeálható heteroláncú polimer magon immobilizálva, ahol az egyes peptideket egymástól függetlenül az alábbi csoportból választjuk: növekedésihormon-felszabadító peptid (GHRP), luteinizálóhormon-felszabadító hormon (LHRH), szomatosztatm, bombezin, gasztrin-felszabadító peptid (GRP), kai- 53 citonin, bradikinin, galanin, melanocita-stimuláló hormon (MSH), növekedésihormon-felszabadító faktor (GRF), amilin, tachikinmek, szekretin, paratiroid hormon (PTH), enkafalin, endotelin, kalcitonin gén-felszabadító peptid (CGRP), neuromedinek, paratiroid hormonnal rokon protein (PTHrP), glukagon, neurotenzin, adrenokortikotróp hormon (ACTH), peptid YY (PYY), glukagon-felszabadító peptid (GLP), vazoaktiv mtesztinális peptid (VIP), hipofízis adenilát cikláz aktiváló peptid (PACAP), motilin, P-anyag, neuropeptid Y (NPY), TSH és annak analógjai és fragmensei, vagy ezek gyógyászatilag elfogadható sói;az egyes proteineket egymástól függetlenül az alábbi csoportból választjuk: növekedési hormon, eritropoietin, granulocita-kolónia stimuláló faktor, granulocita-makrofág-kolónia stimuláló faktor és interferonok; és ahol az abszorbeálható heteroláncú polimer mag glikolát-egységeket tartalmaz.
- 8. A 7. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben a peptid, protein vagy ezek kombinációja vagy gyógyászatilag elfogadható sója a kötött mikroszemcse össztömegének 0,1 - 30%-át teszi ki, és ahol a fenti abszorbeálható heteroláncú polimer mag citrát-maradékokat, tartarát-maradékokat vagy malát-mara-dékokat is tartalmaz.
- 9. A 8. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben a glikolát-egységek citrát-maradékokhoz, tartarát-maradékokhoz vagy malát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, és a fenti glikolát-egységek karboxil-maradékkal vagy amin-maradékkal végződnek.
- 10. A 9. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben az abszorbeálható bevonó polimer a) 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, b) d, 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, c) d,1-laktid-alapú egységeket, vagyd) 1-laktid-alapú egységeket és d,1-laktid-alapú egységeket tartalmaz.
- 11. A 10. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben az 1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, vagy az 1-laktid-alapú egységek d,l-laktid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 80:20.
- 12. A 10. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben a d,1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10,
- 13. A 9. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben az abszorbeálható bevonó polimer 5 - 70%-át teszi ki a bevonatos mikroszemcsék össztömegének.
- 14. A 13. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben az abszorbeálható bevonó polimer 20 - 60%-át teszi ki a bevonatos mikroszemcsék össztömegének.
- 15. A 14. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben az abszorbeálható bevonó polimer 30 - 50%-át teszi ki a bevonatos mikroszemcsék össztömegének.
- 16. Gyógyászati készítmény, amely 1. igénypont szerinti kötött mikroszemcséket vagy 7. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcséket és gyógyászatilag elfogadható hordozót tartal maz.
- 17. Gyógyászati készítmény, amely 1. igénypont szerinti kötött mikroszemcséket vagy 7. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcséket, nem-vizes, abszorbeálható, gélképző, cseppfolyós poliésztert és kívánt esetben gyógyászatilag elfogadható hordozót tartalmaz.
- 18. A 4. igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben a pepiid egy LHRH analóg.
- 19. A 18. igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben a glikolát-egységek abszorbeálható heteroláncú polimer magban lévő citrát-maradékokhoz vagy tartarát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, és ahol az LHRH analóg a p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2.
- 20. A 4. igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben a peptid egy szomatosztatin analóg.
- 21. A 20. igénypont szerinti kötött mikroszemcse, amelyben a glikolát-egységek citrát-maradékokhoz vagy tartarát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, és a szomasztotatin analóg a Η-β-D-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz; az N-hidroxietilpiperazinil-acetil-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, vagy az N-hidroxietilpiperaziniletilszulfonil-Phe-Cys-Tyr--D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz.
- 22. Bevonatos mikroszemcse, amely 18. igénypont szerinti egy vagy több kötött mikroszemcsét tartalmaz egy abszorbeálható bevonó polimerben, amely (a) 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (b) d,1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (c) d,1-laktid-alapú egységeket vagy (d) 1-laktid-alapú egységeket és d,l-laktid-alapú egységeket tartalmaz.
- 23. A 22. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben az abszorbeálható polimer magban lévő glikolát-egységek citrát-maradékokhoz vagy tartarát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, az LHRH analóg a p-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NHj, és ahol az (a) 1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, (b) a d,1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, és (c) az 1-laktid-alapú egységek d,1-laktid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 80:20.
- 24. Bevonatos mikroszemcse, amely 20. igénypont szerinti egy vagy több kötött mikroszemcsét tartalmaz egy abszorbeálható bevonó polimerben, amely (a) 1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (b) d,1-laktid-alapú egységeket és glikolid-alapú egységeket, (c) d,1-laktid-alapú egységeket vagy (d) 1-laktid-alapú egységeket és d,1-laktid-alapú egységeket tartalmaz.
- 25. A 24. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse, amelyben az abszorbeálható polimer magban lévő glikolát-egységek citrát-maradékokhoz vagy tartarát-maradékokhoz viszonyított aránya körülbelül 7:1 - körülbelül 20:1, a szomasztotatin- 57 - -J4 « v * ι» '‘.λ «4 analóg a H-B-D-Nal-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys-Thr-NH2, ahol a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, az N-hidroxietilpiperazinil-acetil-D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, vagy az N-hidroxietilpiperazinil-etilszulfonil-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys-Thr-NH2, amelyben a két Cys diszulfid-híddal kapcsolódik egymáshoz, és ahol az (a) 1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, (b) a d,1-laktid-alapú egységek glikolid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 75:25 - körülbelül 90:10, és (c) az 1-laktid-alapú egységek d,1-laktid-alapú egységekhez viszonyított aránya körülbelül 80:20.
- 26. Eljárás a 7. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse előállítására, azzal jellemezve, hogy egy kötött mikroszemcse abszorbeálható bevonó polimerrel történő bevonásának lépését foglalja magában.
- 27. A 26. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kötött mikroszemcsék abszorbeálható bevonó polimert tartalmazó oldattal alkotott diszperzióját és egy oldószert egy előhűtött közegbe csepegtetünk, amely közeg nem oldószere az abszorbeálható bevonó polimernek.
- 28. A 27. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az abszorbeálható bevonó polimer oldata körülbelül 5 - 30% abszorbeálható bevonó polimert tartalmaz, az előhűtött közeg valamely kettő vagy több szénatomot tartalmazó alkohol, és a közeg hőmérséklete szobahőmérséklet és körülbelül -80 °C közötti.
- 29. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy az előhűtött közeg hőmérséklete körülbelül -60 - -80 °C, és a közeg az izopropil-alkohol.
- 30. Eljárás a 7. igénypont szerinti bevonatos mikroszemcse előállítására, azzal jellemezve, hogy tartalmazza egy kötött mikroszemcse abszorbeálható bevonó polimerrel történő bevonásának lépését emulziós módszer alkalmazásával.A meghatalmazott: DANUBIA Szabadalmi és Védjegy Iroda Kft.dr. Kiss Ildikó szabadalmi ügyvivőAktaszámunk: 92701-2444 Sí
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US1539498A | 1998-01-29 | 1998-01-29 | |
| PCT/US1999/001180 WO1999038536A1 (en) | 1998-01-29 | 1999-01-20 | Absorbable microparticles |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| HUP0101250A2 true HUP0101250A2 (hu) | 2001-08-28 |
| HUP0101250A3 HUP0101250A3 (en) | 2006-06-28 |
Family
ID=21771154
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| HU0101250A HUP0101250A3 (en) | 1998-01-29 | 1999-01-20 | Absorbable microparticles |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20060210641A1 (hu) |
| EP (1) | EP1053020B1 (hu) |
| JP (2) | JP3842042B2 (hu) |
| CN (1) | CN1289256A (hu) |
| AR (1) | AR014510A1 (hu) |
| AT (1) | ATE262926T1 (hu) |
| AU (1) | AU2329199A (hu) |
| CA (1) | CA2318152A1 (hu) |
| DE (1) | DE69916031T2 (hu) |
| DK (1) | DK1053020T3 (hu) |
| ES (1) | ES2217738T3 (hu) |
| HU (1) | HUP0101250A3 (hu) |
| IL (2) | IL137388A (hu) |
| NO (1) | NO20003810L (hu) |
| PL (1) | PL193111B1 (hu) |
| PT (1) | PT1053020E (hu) |
| RU (1) | RU2237471C2 (hu) |
| TW (1) | TWI255721B (hu) |
| WO (1) | WO1999038536A1 (hu) |
Families Citing this family (37)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6413539B1 (en) * | 1996-10-31 | 2002-07-02 | Poly-Med, Inc. | Hydrogel-forming, self-solvating absorbable polyester copolymers, and methods for use thereof |
| US6756480B2 (en) | 2000-04-27 | 2004-06-29 | Amgen Inc. | Modulators of receptors for parathyroid hormone and parathyroid hormone-related protein |
| WO2002040537A2 (en) * | 2000-11-16 | 2002-05-23 | Novo Nordisk A/S | Analogues and derivatives of gastrin releasing peptide (grp) |
| FR2825273B1 (fr) * | 2001-05-29 | 2006-11-24 | Oreal | Composition pour le traitement des signes cutanes du vieillissement |
| EP2210900A3 (en) | 2003-12-16 | 2010-08-11 | Ipsen Pharma | Analogues of GLP-1 |
| WO2005067890A2 (en) * | 2004-01-13 | 2005-07-28 | Vasogenix Pharmaceuticals, Inc. | Controlled release cgrp delivery composition for cardiovascular and renal indications |
| TW200538148A (en) * | 2004-01-13 | 2005-12-01 | Vasogenix Pharmaceuticals Inc | Methods for treating acute myocardial infarction by administering calcitonin gene related peptide and compositions containing the same |
| US8889632B2 (en) | 2007-01-31 | 2014-11-18 | Dana-Farber Cancer Institute, Inc. | Stabilized p53 peptides and uses thereof |
| US8592377B2 (en) | 2007-03-28 | 2013-11-26 | President And Fellows Of Harvard College | Stitched polypeptides |
| EP2650006A1 (en) | 2007-09-07 | 2013-10-16 | Ipsen Pharma S.A.S. | Analogues of exendin-4 and exendin-3 |
| US20110250179A1 (en) | 2008-07-04 | 2011-10-13 | Juan Carlos Lacal Sanjuan | Methods for treatment and diagnosis of cancer |
| CN104031140B (zh) | 2008-08-07 | 2017-04-12 | 益普生制药股份有限公司 | 糖依赖性胰岛素释放肽的截短类似物 |
| EP2769986A3 (en) | 2008-08-07 | 2014-11-26 | Ipsen Pharma S.A.S. | Analogues of glucose-dependent insulinotropic polypeptide (GIP) modified at N-terminal |
| JP2011530508A (ja) | 2008-08-07 | 2011-12-22 | イプセン ファルマ ソシエテ パール アクシオン サンプリフィエ | グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチドのアナログ |
| US20110293562A1 (en) | 2009-02-12 | 2011-12-01 | Proyecto De Biomedicina Cima, S.L. | Use of cardiotrophin-1 for the treatment of metabolic diseases |
| MX2012000757A (es) | 2009-07-22 | 2012-08-03 | Ipsen Pharma Sas | Analogos de factor de crecimiento insulinoide tipo 1 (igf-1) que tienen sustitucion de aminoacidos en la posicion 59. |
| AU2011289579B2 (en) * | 2010-08-10 | 2016-11-17 | Ecole Polytechnique Federale De Lausanne | Erythrocyte-binding therapeutics |
| US9850296B2 (en) | 2010-08-10 | 2017-12-26 | Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) | Erythrocyte-binding therapeutics |
| US9517257B2 (en) | 2010-08-10 | 2016-12-13 | Ecole Polytechnique Federale De Lausanne (Epfl) | Erythrocyte-binding therapeutics |
| WO2012021876A2 (en) | 2010-08-13 | 2012-02-16 | Aileron Therapeutics, Inc. | Peptidomimetic macrocycles |
| EA018472B1 (ru) * | 2010-09-15 | 2013-08-30 | Открытое Акционерное Общество "Протек" | Частицы, содержащие эритропоэтин, для лечения и профилактики неврологических и гематологических заболеваний и нарушений |
| ES2718655T3 (es) * | 2011-06-14 | 2019-07-03 | Ipsen Pharma Sas | Composición de liberación sostenida que contiene péptidos como ingrediente activo |
| CN108929375A (zh) | 2011-10-18 | 2018-12-04 | 爱勒让治疗公司 | 拟肽大环化合物 |
| EP3384903B1 (en) * | 2011-11-18 | 2020-05-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Micro-particle containing therapeutic protein coated with biodegradable polymer for medical use |
| WO2013123267A1 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Aileron Therapeutics, Inc. | Triazole-crosslinked and thioether-crosslinked peptidomimetic macrocycles |
| RU2642299C2 (ru) | 2012-02-15 | 2018-01-24 | Эйлерон Терапьютикс, Инк. | P53 пептидомиметические макроциклы |
| US9604919B2 (en) | 2012-11-01 | 2017-03-28 | Aileron Therapeutics, Inc. | Disubstituted amino acids and methods of preparation and use thereof |
| US10953101B2 (en) | 2014-02-21 | 2021-03-23 | École Polytechnique Fédérale De Lausanne (Epfl) | Glycotargeting therapeutics |
| US10946079B2 (en) | 2014-02-21 | 2021-03-16 | Ecole Polytechnique Federale De Lausanne | Glycotargeting therapeutics |
| US10821157B2 (en) | 2014-02-21 | 2020-11-03 | Anokion Sa | Glycotargeting therapeutics |
| US10046056B2 (en) | 2014-02-21 | 2018-08-14 | École Polytechnique Fédérale De Lausanne (Epfl) | Glycotargeting therapeutics |
| KR20170058424A (ko) | 2014-09-24 | 2017-05-26 | 에일러론 테라퓨틱스 인코포레이티드 | 펩티드모방 거대고리 및 이의 용도 |
| MX2017011834A (es) | 2015-03-20 | 2018-04-11 | Aileron Therapeutics Inc | Macrociclos peptidomimeticos y usos de los mismos. |
| CA3004363A1 (en) | 2015-11-06 | 2017-05-11 | Fraunhofer-Gesellschaft Zur Foerderung Der Angewandten Forschung E.V. | Composition comprising a biocompatible and biodegradable polymer, nanocarries and a drug and methods of making and using the same |
| WO2018232176A1 (en) | 2017-06-16 | 2018-12-20 | The University Of Chicago | Compositions and methods for inducing immune tolerance |
| KR20210010879A (ko) | 2018-05-09 | 2021-01-28 | 더 유니버서티 오브 시카고 | 면역 관용 관여 조성물 및 방법 |
| CN113281317B (zh) * | 2021-05-14 | 2022-04-29 | 北京指真生物科技有限公司 | 一种含有花菁类化合物的编码微球及其制备方法和应用 |
Family Cites Families (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IE52535B1 (en) * | 1981-02-16 | 1987-12-09 | Ici Plc | Continuous release pharmaceutical compositions |
| US5385738A (en) * | 1983-10-14 | 1995-01-31 | Sumitomo Pharmaceuticals Company, Ltd. | Sustained-release injection |
| EP0230654B1 (en) * | 1985-12-28 | 1992-03-18 | Sumitomo Pharmaceuticals Company, Limited | Sustained pulsewise release pharmaceutical preparation |
| US4938763B1 (en) * | 1988-10-03 | 1995-07-04 | Atrix Lab Inc | Biodegradable in-situ forming implants and method of producing the same |
| US5077049A (en) * | 1989-07-24 | 1991-12-31 | Vipont Pharmaceutical, Inc. | Biodegradable system for regenerating the periodontium |
| AU653771B2 (en) * | 1991-01-03 | 1994-10-13 | Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. | Stabilization of proteins by cationic biopolymers |
| SG42865A1 (en) * | 1991-07-24 | 1997-10-17 | Enzacor Pty Ltd | Therapeutic compositions and methods |
| US5366756A (en) * | 1992-06-15 | 1994-11-22 | United States Surgical Corporation | Method for treating bioabsorbable implant material |
| US5672659A (en) * | 1993-01-06 | 1997-09-30 | Kinerton Limited | Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters and bioactive polypeptides |
| CA2123144A1 (en) * | 1993-05-10 | 1994-11-11 | David Bodmer | Stabilisation of pharmacologically active compounds in sustained release compositions |
| JPH09504308A (ja) * | 1993-07-23 | 1997-04-28 | マサチューセッツ インスティチュート オブ テクノロジー | 非直鎖状の親水性−疎水性マルチブロックコポリマーのナノ粒子およびマイクロ粒子 |
| US5612052A (en) * | 1995-04-13 | 1997-03-18 | Poly-Med, Inc. | Hydrogel-forming, self-solvating absorbable polyester copolymers, and methods for use thereof |
| US5665702A (en) * | 1995-06-06 | 1997-09-09 | Biomeasure Incorporated | Ionic molecular conjugates of N-acylated derivatives of poly(2-amino-2-deoxy-D-glucose) and polypeptides |
| US5795922A (en) * | 1995-06-06 | 1998-08-18 | Clemson University | Bone cement composistion containing microencapsulated radiopacifier and method of making same |
| KR100210509B1 (ko) * | 1996-01-10 | 1999-07-15 | 성재갑 | 지속성 동물 성장 호르몬 제형 및 이의 제조 방법 |
-
1999
- 1999-01-20 JP JP2000529268A patent/JP3842042B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-01-20 HU HU0101250A patent/HUP0101250A3/hu unknown
- 1999-01-20 EP EP99903216A patent/EP1053020B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-01-20 AT AT99903216T patent/ATE262926T1/de not_active IP Right Cessation
- 1999-01-20 PL PL342662A patent/PL193111B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1999-01-20 WO PCT/US1999/001180 patent/WO1999038536A1/en active IP Right Grant
- 1999-01-20 CA CA002318152A patent/CA2318152A1/en not_active Abandoned
- 1999-01-20 ES ES99903216T patent/ES2217738T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1999-01-20 PT PT99903216T patent/PT1053020E/pt unknown
- 1999-01-20 AU AU23291/99A patent/AU2329199A/en not_active Abandoned
- 1999-01-20 IL IL13738899A patent/IL137388A/xx unknown
- 1999-01-20 DE DE69916031T patent/DE69916031T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1999-01-20 DK DK99903216T patent/DK1053020T3/da active
- 1999-01-20 RU RU2000122622A patent/RU2237471C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-01-20 CN CN99802517A patent/CN1289256A/zh active Pending
- 1999-01-28 AR ARP990100340A patent/AR014510A1/es not_active Application Discontinuation
- 1999-01-28 TW TW088101329A patent/TWI255721B/zh not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-01-20 IL IL13738800A patent/IL137388A0/xx unknown
- 2000-07-25 NO NO20003810A patent/NO20003810L/no unknown
-
2004
- 2004-09-13 JP JP2004265825A patent/JP2005047928A/ja active Pending
-
2006
- 2006-03-20 US US11/385,030 patent/US20060210641A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2318152A1 (en) | 1999-08-05 |
| DK1053020T3 (da) | 2004-07-26 |
| US20060210641A1 (en) | 2006-09-21 |
| JP3842042B2 (ja) | 2006-11-08 |
| DE69916031T2 (de) | 2005-02-17 |
| AR014510A1 (es) | 2001-02-28 |
| PT1053020E (pt) | 2004-06-30 |
| RU2237471C2 (ru) | 2004-10-10 |
| NO20003810L (no) | 2000-09-13 |
| ATE262926T1 (de) | 2004-04-15 |
| NO20003810D0 (no) | 2000-07-25 |
| PL193111B1 (pl) | 2007-01-31 |
| PL342662A1 (en) | 2001-07-02 |
| CN1289256A (zh) | 2001-03-28 |
| TWI255721B (en) | 2006-06-01 |
| JP2005047928A (ja) | 2005-02-24 |
| EP1053020A1 (en) | 2000-11-22 |
| IL137388A (en) | 2005-05-17 |
| HUP0101250A3 (en) | 2006-06-28 |
| IL137388A0 (en) | 2001-07-24 |
| JP2002501908A (ja) | 2002-01-22 |
| DE69916031D1 (de) | 2004-05-06 |
| AU2329199A (en) | 1999-08-16 |
| EP1053020B1 (en) | 2004-03-31 |
| ES2217738T3 (es) | 2004-11-01 |
| WO1999038536A1 (en) | 1999-08-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| HUP0101250A2 (hu) | Abszorbeálható mikrorészecskék | |
| US6555156B1 (en) | Process for making absorbable microparticles | |
| JP3990614B2 (ja) | 生物分解性ポリエステルおよび生物活性ポリペプチドのイオン分子結合体 | |
| JP4303438B2 (ja) | ペプチドの持続放出製剤 | |
| HU224036B1 (hu) | Nyújtott felszabadulású ionos konjugátumok | |
| SK74495A3 (en) | Ionic molecular conjugates of biodegradable polyesters with bioactive polypeptides and a method of preparation thereof | |
| JP2006501138A (ja) | ドラッグデリバリーのための治療用ポリ無水物化合物 | |
| RU2202563C2 (ru) | Фосфорилированные полимеры и их конъюгаты | |
| EP1212095B1 (en) | Process to make a sustained release formulation | |
| CZ20002654A3 (cs) | Absorbovatelné mikročástice | |
| CZ20002640A3 (cs) | Způsob výroby absorbovatelných mikročástic | |
| HK1044285B (en) | Process to make a sustained release formulation | |
| CZ2001424A3 (cs) | Fosforylované polymery a jejich konjugáty |