HUP9901344A2

HUP9901344A2 - Radicicol származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények

Info

Publication number: HUP9901344A2
Application number: HU9901344A
Authority: HU
Inventors: Tsutomu Agatsuma; Kazuhito Akasaka; Shiro Akinaga; Katsushige Gomi; Tamio Mizukami; Yutaka Saitoh; Isami Takahashi; Yoshinori Yamashita
Original assignee: Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.
Priority date: 1995-04-26
Filing date: 1996-04-26
Publication date: 2001-04-28
Also published as: ATE194610T1; CA2218981A1; DE69609325T2; WO1996033989A1; EP0823429A4; ES2149468T3; JP3938936B2; EP0823429B1; NZ311790A; NO974890D0; US5977165A; NO974890L; AU700840B2; AU6292796A; CA2218981C; HUP9901344A3; EP0823429A1; KR19990008051A; DE69609325D1

Abstract

(I) általános képletű radicicolszármazékok - ahol R1 és R2 jelentéseazonosan vagy eltérően hidrogénatom, alkanoil-, alkenoil- vagy terc-butil-dimetil-szilil-csoport; (1) ha X jelentése halogénatom, Y jelentése oxigénatom vagy R4-O-N általános képletű csoport, ahol R4jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxil-, alkoxi-,alkanoil-oxi-, azido-, amino-, mono- vagy dialkil-amino-, alkanoil-amino-, alkoxi-karbonil-amino-, alkenil-oxi-karbonil-amino-,karboxil-, alkoxi-karbonil-, alkil-karbamoil- vagy ciklusosimidocsoporttal szubsztituált alkilcsoport; és R3 jelentése hidrogénatom, alkanoil-, alkenoil- vagy -SO-Z- általánosképletű csoport, ahol Z jelentése (A) általános képletű csoport, aholXA, R1A és R2A jelentése az X, R1 és R2 csoportoknál megadott; és YA jelentése oxigénatom vagy R4A-O-N általános képletű csoport, aholR4A jelentése az R4 csoportnál megadott; és (2) ha X és R3 jelentése együtt vegyértékkötés; Y jelentése R4B-O-N általános képletű csoport, ahol R4B jelentése azR4 jelentésénél megadott - és gyógyászatilag alkalmazható sóik. Atalálmány szerinti vegyületek antitumor-, antibakteriális ésimmunszuppresszív hatású gyógyszerkészítményekként alkalmazhatók. Ó

Description

' 'fii® nJi!/

64.862/SM

S.B.G. & K.

Nemzetközi Szabadalmi Iroda H-1062 Budapest. Andrássy úí 113. Telefon: 34-24-950, Fax: 34-24-323

Radicicol-származékok

-...... .

A találmány tárgya új radicicol-származékok és gyógyászatilag alkalmazható sóik. A találmány szerinti vegyületek tirozin kináz inhibitor aktivitásuk alapján antitumor, antimikrobiális és immunszuppresszív hatással rendelkeznek.

Ismeretes, hogy a (B) képleü radicicol mikróbás metabolit gombaeelenes és daganatellenes hatással [Nature, 171, 344 (1953); Neoplasma, 24, 21 (1977)] vagy immunszuppresszív hatással (298764/94 sz. japán nyilvánosságrahozatali irat) bír.

Ismeretes továbbá, hogy az olyan radiciol-származékok, ahol a fenolos hidroxilcsoport különböző acilcsoportokkal van helyettesítve, antitumor hatással rendelkezik (220991/92 sz. japán nyilvánosságrahozatali irat). A fenolos hidroxilcsoportjukon acil- vagy alkilcsoporttal szubsztituált radicicol-származékok angiogenesis inhibitor hatású vegyületekként szintén ismertek az irodalomban (279279/94 sz. japán nyilvánosságrahozatali irat).

A tirozin kináz egy olyan enzim, amelyet az ATP foszfát donorként használ és katalizálja γ-foszfát csoportjának átszállítását egy szubsztrát protein specifikus tirozin maradékának hidroxilcsoportjára, ezáltal fontos szerepet játszva az intracelluláris jel-transzdukció szabályozó mechanizmusában. Különféle tirozin kináz csoportok ismertek, és ismeretes a tirozin kináz aktivitás megemelkedése is

A ···· .

-2 (például, Src vastagbélrákban, ErbB-2 emlőrákban és emésztőszervi rákban, Abb leukémiában, stb.). A tirozin kináz aktivitás rendellenes megemelkedése a sejtek abnormális differenciálódását és burjánzását eredményezi. Ebből következően a tirozin kináz specifikus inhibitorai különféle betegségek megelőzésében és kezelésében alkalmazhatók, ide értve az antitumor szerként való alkalmazást is.

Az Lek olyan tirozin kináz, amelyet T limfocitáknak antigén stimuláció által való aktiválása aktivál, és ennek az enzimnek egyik inhibitora immunszuppreszszánsként használatos. Ismeretes, hogy az Src felelős az osteoclast-sejtben a csont felszívódásért és ennek a tirozin kináznak inhibitora használatos az oszteoporózis kezelésében csont felszívódás inhibitorként. Emellett, az EGF-F (epidermális növekedési faktor receptor), az FGF-R (fibroblast növekedési faktor receptor), a PDGF-R (vérlemezke eredetű növekedési faktor receptor), stb. inhibitorai szilárd daganat növekedési inhibitorként, angiogenezis inhibitorként, vaszkuláris sima izom növekedési inhibitorként, stb. használatosak.

A tirozin kináz aktivitás inhibitor hatása Western folt analízissel (Western blotting analysis) mérhető valamilyen anti-foszfotorizin antitesttel, egy onkogén vSrc-vel transzformált (RIKEN Génbank) patkány fibroblaszt SR-3Y1 sejt törzs felhasználásával. A méréskor kiszámoljuk azt az intracelluláris protein mennyiséget, amelyben a tirozin foszforilezödik. Mivel a módszerben használt SR-3Y1 sejtekben az intracelluláris protein tirozin foszforilezési szintje v-Src tirozin kináz hatására emelkedik, a radicicol-származékok v-Src tirozin kináz gátló hatása annak a proteinmennyiségnek a csökkenésével mérhető, amelyben a tirozin foszforileződött. Robinson, S.P. és társai [International Journal of Oncology, 2, 253 (1993)] ismertettek egy módszert a tirozin foszforileződés gátlásának vizsgálatára, Estem

64.862/SM

-3 folt analízissel; Kwon, H.J. és társai [Cancer Research, 52, 6926 (1992)] SR-3Y1 sejtek felhasználásával végzett kísérleti példákat ismertettek.

A találmány tárgya tirozin kináz inhibitor aktivitással bíró új radicicolszármazékok és gyógyászatilag alkalmazható sóik, amelyek antitumor, antimikrobiális és immunszuppresszív hatásúak.

A találmány tárgya közelebbről (I) általános képletü radicicol-származékok ahol R¹ és R³ jelentése azonosan vagy eltérően hidrogénatom, alkanoil-, alkenoilvagy terc-butil-dimetil-szililcsoport;

(1) ha X jelentése halogénatom,

Y jelentése oxigénatom vagy R⁴-O-N általános képletü csoport, ahol R⁴ jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxilcsoporttal, rövidszénláncú alkoxi-, rövidszénláncú alkanoil-oxi-, azido-, amino-, mono- vagy di-rövidszénláncú alkil-amino-, rövidszénláncú alkanoil-amino-, rövidszénláncú alkoxikarbonil-amino-, rövidszénláncú alkeniloxi-karbonil-amino-, karboxil-, rövidszénláncú alkoxikarbonil-, rövidszénláncú alkil-karbamoil- vagy ciklusos imidocsoporttal szubsztituált rövidszénláncú alkilcsoport; és

R³ jelentése hidrogénatom, alkanoil-, alkenoilcsoport, vagy -SO-Z általános képletü csoport, ahol Z jelentése (A) általános képletü csoport, ahol X^A, R^1Aés R^2a jelentése az előzőekben az

X, R¹ és R² csoportoknál megadott, megfelelőleg, és

Y^A jelentése oxigénatom vagy R^4A-O-N általános képletü csoport, ahol R^4Ajelentése az R⁴ csoportnál megadott;

(2) ha X és R³ jelentése együtt vegyértékkötés;

64.862/SM ···· ..· .

-4 Y jelentése R^4B-O-N általános képletű csoport, ahol R^4B jelentése az R⁴csoportnál megadott és gyógyászatilag alkalmazható sóik.

Az (I) általános képletben az alkanoil kifejezés 1-20 szénatomos egyenesvagy elágazó láncú csoportot, így formil-, acetil-, propanoil-, butanoil-, kaproil-, lauroil-, mirisztoil-, palmitoil-, sztearoil-, stb. csoportot jelent. Az alkenoil kifejezés 3-20 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú csoportot, így palmitoleoil-, linoleoil-, linolenoil-, stb. csoportot jelent. A halogén kifejezés fluor-, klór-, brómvagy jódatomot jelent. A rövidszénláncú alkil kifejezés 1-8 szénatomos egyenes vagy elágazó láncú csoportot, így metil-, etil-, propil-, izopropil-, butil-, izobutil-, szek-butil-, terc-butil-, pentil-, izopentil-, hexil-, heptil-, oktil-, stb. csoportot jelent.

A szubsztituált rövidszénláncú alkilcsoport szubsztituensei 1-3 azonos vagy eltérő csoportot, így hidroxil-, rövidszénláncú alkoxi-, rövidszénláncú alkanoil-oxi-, azido-, amino-, mono- vagy di-rövidszénláncú alkil-amino-, rövidszénláncú alkanoil-amino-, rövidszénláncú alkoxikarbonil-amino-, rövidszénláncú alkeniloxikarbonil-amino-, karboxil-, rövidszénláncú alkoxikarbonil-, rövidszénláncú alkilkarbamoil-, ciklikus imido-, stb. csoportokat jelenthetnek.

A rövidszénláncú alkoxi-, alkanoil-oxi-, mono- vagy di-rövidszénláncú alkilamino-, rövidszénláncú alkanoil-amino-, alkoxikarbonil-amino-, -alkoxikarbonil- és -alkil-karbamoilcsoportokban a rövidszénláncú alkil kifejezés azonos az előzőekben a rövidszénláncú alkilcsoportnál megadottakkal, és szénatomjaik egyike szilícium atommal lehet helyettesítve.

Az (I) általános képletű vegyületek gyógyászatilag alkalmazható sói savaddíciós sók, fémsók, ammonium sók, szerves amin addíciós sók, aminosav

64.862/SM

-5 addíciós sók, stb. lehetnek. Savaddíciós sók lehetnek például a szervetlen savak sói, ilyenek a hidroklorid, hidrobromid, szulfát, foszfát, stb; a szerves savak sói, így a formiát, acetát, oxalát, benzoát, metánszulfonát, p-toluol-szulfonát, maleát, fumarát, tartarát, citrát, szukcinát, laktát, stb. Fémsók lehetnek az alkálifémek sói, így a lítium, nátrium, kálium, stb. sók; az alkáliföldfémek sói, így a magnézium, kalcium, stb. sók; alumínium, cink, stb. sók. Az ammonium sók közé tartoznak az ammonium, tetrametil-ammónium, stb. sók. Szerves amin addíciós sók lehetnek a morfolinnal, piperidinnel, stb. képzett sók. Aminosav addíciós sók például a glicin, fenilalanin, aszpartámsav, glutaminsav, lizin, stb. sói.

A találmány szerinti vegyületeket általában az optikailag aktív radicicolból kiindulva állítjuk elő és az összes lehetséges sztereoizomer, valamint ezek keverékei a találmány oltalmi körébe tartozik.

A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek előállítása három lépésben 1) oximképzés, 2) halo-hidrin képzés és 3) acilezés, történik. Ezek a reakciólépések kombinálhatok a célvegyülettől függően.

Az 1. eljárásban, amikor a kívánt szubsztituens cseréje történik az eljárás során, vagy az adott szubsztituens nem felel meg az eljárás végrehajtásához, a célvegyületet úgy kapjuk meg, hogy ismert módon (például lásd T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons Inc. (1981)] védöcsoportokat viszünk fel és távolítjuk el azokat. Szükség esetén a reakciólépések sorrendje, így a szubsztituensek bevitele felcserélhető. Az 1. eljárás képleteiben R^1aés R^2a olyan csoportok, amelyekben az előzőekben ismertetett jelentésű R¹ és R²csoportokról eltávolítottuk a terc-butil-dimetil-szilil csoportot; R⁴ jelentése pedig a fentiekben megadott.

64.862/SM

-6 Az 1, eljárás 1. lépésében radidicolt, vagy a radicicolból ismert módon (226991/92 számú japán nyilvánosságrahozatali irat) előállított (C) általános képletü vegyületet használjuk kiindulási anyagként.

Az (la) általános képletü vegyületet úgy kapjuk meg, hogy a (C) általános képletü vegyületet a (II) általános képletü vegyülettel vagy ennek valamilyen savaddíciós sójával reagáltatjuk. Oldószerként piridint, kloroformot, diklór-metánt, étert, tetrahidrofuránt, dimetil-formamidot, acetonitrilt, stb. vagy ezek keverékeit használhatjuk. Ha a (II) általános képletü vegyület valamilyen savaddíciós sóját alkalmazzuk, akkor a reakciót valamilyen bázis, például egy amin, így piridin, trietil-amin, diizopropil-etil-amin, stb. vagy valamilyen alkálifém karbonát vagy bikarbónát, így nátrium-karbonát, kálium-karbonát, stb. jelenlétében hajtjuk végre, melynek mennyisége 1 ekvivalensnyi, vagy ennél több, a (II) általános képletü savaddíciós só mennyiségére számítva. Célszerű a piridin alkalmazása, amely egyidejűleg oldószerként is szolgál. A (II) általános képletü vegyületet vagy savaddíciós sóját a radicicolra számítva általában 1 ekvivalensnyi, vagy ennél több, előnyösen 2-10 ekvivalensnyi mennyiségben alkalmazzuk. A reakciót általában 20-100°C hőmérsékleten hajtjuk végre, a reakcióidő 1-80 óra.

A 2. eljárás képletében R^1a, R^2a, X és Y jelentése a fentiekben megadott; R³ jelentése hidrogénatom, formil- vagy -SO-Z általános képletü csoport, ahol Z jelentése a fentiekben megadott.

A 2. eljárás 2-1 lépésében az olyan (Ib) általános képletü vegyületet, ahol R^3a jelentése hidrogénatom, úgy állíthatjuk elő, hogy valamely (la) vagy (C) általános képletü vegyületet egy savval, így például sósavval, hidrogén-bromiddal, stb., vagy Lewis savval, így titán-tetrakloriddal, stb. reagáltatunk. Oldószerként

64.862/SM

-Ί dioxánt, tetrahidrofuránt, étert, kloroformot, diklór-metánt, dimetil-formamidot, acetonitrílt, stb. vagy ezek keverékeit alkalmazhatjuk. A savat vagy Lewis savat az (la) vagy (C) általános képletű vegyületre számítva 1 ekvivalensnyi, vagy ennél több, előnyösen 1-10 ekvivalensnyi mennyiségben alkalmazzuk, a reakciót általában -20°C és 40°C közötti hőmérsékleten hajtjuk végre, a reakcióidő 10 perc és 48 óra közötti.

A 2. eljárás 2-2 lépésében az olyan (Ib) általános képletű vegyületet, ahol R^3a jelentése formilcsoport, úgy állíthatjuk elő, hogy valamely (la) vagy (C) általános képletű vegyületet oxalil-kloriddal, foszfor-oxi-kloriddal vagy foszfor-oxibromiddal reagáltatunk, amelyek mennyisége 1 ekvivalensnyi, vagy több, az (la) vagy (C) általános képletű vegyületre számítva. A reakciót általában -10°C és 40C közötti hőmérsékleten hajtjuk végre, a rakcióidő 1-48 óra.

A 2. eljárás 2-3 lépésében az (Ib) általános képletű vegyületet, ahol R^3ajelentése -SO-Z általános képletű csoport, ahol Z jelentése a fentiekben megadott, úgy állíthatjuk elő, hogy valamilyen (la) vagy (C) általános képletű vegyűletet tionil-kloriddal vagy tionil-bromiddal reagáltatunk. Oldószerként dimetilformamidot, kloroformot, diklór-metánt, dimetil-szulfoxidot, acetonitrílt, stb. alkalmazhatunk, de használhatjuk ezek keverékeit is. A tionil-kloridot vagy tionilbromidot az (la) vagy (C) általános képletű vegyületre számítva 1 ekvivalensnyi, vagy ennél nagyobb mennyiségben, célszerűen 2-10 ekvivalensnyi mennyiségben alkalmazzuk. A reakciót általában -10°C és 40°C közötti hőmérsékleten hajthatjuk végre, a reakcióidő 1-48 óra.

64.862/SM

-8 A 3. eljárás vegyületeinek képletében R^1a, R^2a, X és Y jelentése a fentiekben megadott; R^1b és R^2b jelentése azonos R^1a és R^2ajelentésével; és Kijelentése alkanoil- vagy alkenoilcsoport.

A 3. eljárásban az olyan (le) általános képletű vegyületeket, ahol a hidroxilcsoport alkanoil- vagy alkenoilcsoporttal van szubsztituálva, úgy állíthatjuk elő, hogy valamely (lb') általános képletű vegyületet 1 ekvivalensnyi, vagy ennél több, előnyösen 1-100 ekvivalens valamilyen, a kívánt alkanoil- vagy alkenoilcsoportot tartalmazó savhalogeniddel, savanhidriddel vagy vegyes savanhidriddel reagáltatjuk valamilyen bázis jelenlétében. Egy adott hidroxilcsoport helyettesítése is lehetséges a védöcsoport célzott bevitelével és eltávolításával, de lehet egyidejűleg több hidroxilcsoportot is helyettesíteni védöcsoportokkal hasonló módon eljárva. Bázisként piridint, N,N-dimetil-anilint, Ν,Ν-dietil-anilint, stb. alkalmazhatunk, az (Ibj általános képletű vegyületre számítva 1 ekvivalensnyi vagy több, célszerűen 1-200 ekvivalensnyi mennyiségben. A rakciót valamilyen oldószerben, így dimetilformamidban, dimetil-szulfoxidban, kloroformban, diklór-metánban, toluolban, stb. hajthatjuk végre. Oldószerként lehetséges a bázist, így például piridint is alkalmazni. A reakciót 0,1-4 ekvivalens Ν,Ν-dimetil-amino-piridin, stb. hozzáadásával gyorsíthatjuk. A reakciót általában -20°C és 50°C közötti hőmérsékleten, 5 perc és 24 óra közötti reakcióidővel hajtjuk végre.

A 4. eljárás képleteiben X, Y és R³ jelentése a fentiekben megadott; R^1c és R^2c jelentése hidrogénatom, vagy az egyik jelentése hidrogénatom, a másik jelentése alkanoil- vagy alkenoilcsoport; R^1d és R^2d pedig olyan csoportok, amelyekben az előbb leírt R^1c és R^2c csoportok hidrogénatomjainak legalább egyike t-BuMe₂Si (terc-butil-dimetil-szilil) csoporttal szubsztituált.

64.862/SM

-9 A 4. eljárás 4. lépésében az (le) általános képletű vegyületet úgy állítjuk elő, hogy valamely (Id) általános képletű vegyületet reagáltatunk terc-butil-dimetilszilil-kloriddal, valamilyen bázis jelenlétében. Oldószerként kloroform, diklórmetán, éter, tetrahidrofurán, aceton, dimetil-formamid, acetonitril, stb., vagy ezek keveréke használható. Bázisként aminokat, így piridint, imidazolt, trietil-amint, diizopropil-etil-amint, stb. alkalmazhatunk. A terc-butil-dimetil-szilil-kloridot az (Id) vegyületre számítva általában 1 ekvivalensnyi vagy több, célszerűen 1-10 ekvivalensnyi mennyiségben alkalmazzuk. A bázis mennyisége általában 1 ekvivalensnyi, vagy több, előnyösen 1-5 ekvivalens, a terc-butil-dimetil-szilil-kloridra számítva. A reakciót általában 0-50°C közötti hőmérsékletren hajtjuk végre, a reakcióidő 10 perc és 24 óra közötti.

Az (I) általános képletű vegyületek előállítása esetén az R¹, R², R³, X és Y funkciós csoportokat nemcsak az előzőekben ismertetett lépések szerint, hanem más ismert módszerekkel [például Comprehensive Organic Transformations, R.C. Larock, (1989)] is átalakíthatjuk.

Az előzőleg ismertetett módszerek szerint előállított termékek izolálása és tisztítása ismert kémiai műveletek, például szűrés, extrahálás, mosás, szárítás, bepárlás, kristályosítás, kromatográfia, stb. optimális kombinálásával történhet. A kapott intermedierek tisztítás nélkül használhatók fel a következő reakciókban.

Ha az (I) általános képletű vegyület só formáját kívánjuk előállítani, a kapott só kinyerés után tisztítható; vagy, ha a kapott vegyület szabad bázis formában van, annak sóját úgy állíthatjuk elő, hogy a bázist valamilyen megfelelő oldószerben feloldjuk v. szuszpendáljuk és savat vagy bázist adunk az oldathoz.

64.862/SM

-10 Az (I) általános képletű vegyületek vagy gyógyászatilag alkalmazható sóik addíciós vegyületek formájában is létezhetnek, melyek vízzel vagy különféle oldószerekkel keletkezhetnek. Ezek az addíciós termékek szintén a találmány oltalmi körébe tartoznak.

Az (I) általános képletek példáit az 1. táblázatban foglaljuk össze.

1(1) Táblázat

Példák az (I) általános képletű vegyület oltalmi körébe eső (1A) általános képletű vegyületekre

Vegyület	R¹,R²	R³	X	Y
1	H	HCO	Cl	0
2	H	H	Cl	0
3	H	H	Br	0
4	H	Z^a	Cl	0
5	CH₃CO	CH₃CO	Cl	0
6	ch₃co	HCO	Cl	0
7	ch₃co	z^a	Cl	0
8	H	—	NOH
9	H	—	noch₃
10	(CH₃)₃C(CH₃)₂Si	' ·~	0
11	(CH₃)C(CH₃)₂Sí	—	NOH
12	(CH₃)₃C(CH₃)₂Sí	—	NOCH₂OCH₃
13	H	—	coch₂och₃
14	H	—	NO(CH₂)₃N₃
15	CH₃(CH₂)₁₄CO	HCO	Cl	0
16	CH₃(CH₂)₁₄CO	Z^a	Cl	0

Z^a = (D) á talános képletű vegyület, ahol R^1A és R^2A jelentése az R¹ és R² csoportoknál megadott, megfelelőleg. R³ és X jelentésében — jelentése egy vegyértékkötés R³és X között.

64.862/SM . -11

1(2) Táblázat

Vegyület	R¹,R²	R³	X	Y
17	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	Cl	0
18	CH₃(CH₂)₁₄CO	CH₃CO	Cl	0
19	CH₃(CH₂)₁₄CO	H	Br	0
20	CH₃(CH₂)₁₄CO	CH₃CO	Br	0
21	CH₃(CH₂)₁₄CO	CH₃(CH₂)₁₄CO	Br	0
22	(CH₃)₃C(CH₃)₂Sí	—	NO(CH₂)₆Pht
23	H	—	NO(CH₂)₆Pht
24	H	—	NO(CH₂)₆N₃
25	H	—	NO(CH₂)₅CO₂C(CH₃)₃
26	H	—	NO(CH₂)₅CO₂(CH₂)₂Sí(CH₃)₃
27	H	—	NO(CH₂)₆NHCO₂CH₂CH=CH₂
28	H	—	NO(CH₂)₅CO₂H
29	H	—	coch₂co₂h

R³ és X jelentésében — jelentése egy vegyértékkötés R³ és X között.

Y jelentésében Pht jelentése ftálimido-csoport.

64.862/SM

1(3) Táblázat

Példák az (I) általános képletü vegyület oltalmi körébe eső (IB) általános képletü vegyületekre

Vegyület	-R¹,-R²	-R³ -X	=Y
30	-H	—	=NOCH₂CON(CH₃)₂
31	-H	—	=NO(CH₂)₃OH
32	-CO(CH₂)₁₄CH₃	—	=noch₃
33	-H	-H -Cl	=noch₃
34	-H	-H -Br	=noch₃
35	-H	-CHO -Cl	=noch₃
36	-H	-H -Cl	=NOCH₂CON(CH₃)₂

A találmány szerinti (I) általános képletü vegyületek farmakológiai hatását az alábbi vizsgálatokkal igazoltuk.

1. farmakológiai példa

Intracelluláris tirozin kináz gátlás vizsgálat

SR-3Y1 sejteket 37°C-on, 15 órán át tenyésztettünk 5% széndioxid atmoszférában, Dulbecco féle módosított Eagle közegben (DMEM), amely 10% magzati borjú szérumot (FCS) tartalmazott: ehhez a közeghez adtuk a vizsgálni kívánt radicicol-származékokat különféle koncentrációban. Az így tenyésztett sejteket 4°C hőmérsékleten, 20 percen át roncsoltuk hűtött puffer oldatban (50 mM Tris HCI, pH 7,5, 150 mM NaCI, 1% Triton X-100, 0,1% SDS, 1% nátrium-dezoxikolát, 2mM EDTA, 1mM PMSF, 20 μΜ leupeptin, 0,15 egység/ml aprotinin, 1 mM Na₃VO₄), majd 20,00 g-vel centrifugáljuk 30 percen át. A kapott felülúszó folyadék

64.862/SM protein koncentrációjának megmérése után a mintákat ugyanarra az egységenkénti proteintartalomra állítottuk be, hogy ADS-PAGE segítségével a protein szeparálás elvégezhető legyen. Az így szeparált protein mintákat az egy nitrocellulóz membránba helyeztük, amelyhez egymást követően első antitestként egér poliklonális foszfotirozin antitest MX-pTYR-et (Kyowa Medex Co., Ltd), második antitestként pedig torma peroxidáz-konjugált egér IgG antitestet (BIO-RAD Co.) adtunk, ezáltal létrehozva reakcióikat a membránon lévő protein mintákkal. A detektálást ECL reagenssel (Amersham Co.) hajtottuk végre és a tirozin-foszforilezett protein mennyiséget úgy határoztuk meg, hogy letapogattuk az egy röntgenfilmen kapott sávok sűrűségét. A radicicol-származékok tirozin-foszforilezés gátló aktivitását a származékok IC₅₀ értéke (a vegyület azon koncentrációja, amelynek hatására a tirozin-foszforilezett protein arány felére csökken a hatóanyag nélküli kontroll értékkel összehasonlítva) mutatja.

Az eredmények a 2. táblázatban láthatók.

2. táblázat

Intracelluláris tirozin kináz gátló hatás

Vegyület	IC so (μΠΊ)
Radicicol	0,18
8	0,02
9	<0,05
10	0,15
11	0,02
14	<0,05

64.862/SM

-14 A 2. táblázat adatai szerint az (I) általános képletű vegyületek erőteljes intracelluláris tirozin kináz aktivitás gátló hatást mutatnak a radicicollal összehasonlítva, így tirozin kináz inhibitorként alkalmazhatók.

2. farmakolóqiai példa

Sejt szaporodás gátlás HeLa S3 sejteken

10% magzati borjú szérumot és 2 mM glutaminsavat tartalmazó MÉM közeggel (Nissui Pharmaceutical) 3,0 x 10⁴ sejt/ml koncentrációjúra beállított HeLa S₃ sejteket 0,1 ml/lyuk részletekben egy 96 lyukas mikrotiter lemezre helyeztünk. A sejteket 37°C-on 20 órán át tenyésztettük széndioxid gáz inkubátorban, ezt követően a kultúra felülúszót eltávolítottuk, majd a lemezt egyszer átmostuk fiziológiás sóoldattal. Végül, minden lyukba 0,1 ml, a vizsgálandó vegyületet tartalmazó közeget helyeztünk és a sejteket 37°C-on 72 órán át tenyésztettük a széndioxid gáz inkubátorban. A kultúra felülúszó eltávolítása után minden lyukba 0,1 ml, 0,02% Neutral Red-et tartalmazó közeget adagoltunk és a sejteket 37°C-on 1 órán át festettük a széndioxid gáz inkubátorban. A kultúra felülúszó eltávolítása után a lemezt egyszer mostuk fiziológiás sóoldattal, a pigmentet 0,001 N sósav/30% etanol elegyével extraháltuk, majd 550 nm-nél mértük az abszorpciót mikrolemez leolvasóval. Az IC₅o értékeket minden vizsgált vegyület esetében úgy számítottuk ki, hogy ismert mintakoncentrációknál összehasonlítottuk a kezeletlen sejtek abszorpcióját a kezelt sejtek abszorpciójával.

Az eredmények a 3. táblázatban láthatók.

64.862/SM

3. táblázat

Sejt szaporodás gátló hatás HeLa S3 sejteken

Vegyület	IC50 (μΠΊ)
Radicicol	6,7
4	6,0
6	5,0
7	1,5
8	0,09
9	0,05
10	3,2
11	0,12
13	0,02
14	0,05

A 3. táblázat adatai szerint az (I) általános képletü vegyületek HeLa S₃sejteken az ismert radicicolénál erősebb sejt szaporodás gátló hatást mutatnak, így antitumor szerként használhatók.

3. farmakolóqiai példa

Antitumor vizsgálat P388 leukémia esetén

P388 ascites-indukált egér (DBA/2) hasüregéből ascitetes folyadékot gyűjtöttünk a transzplantáció után 7 nappal. Az ascitetes folyadékban a P388 sejtek számát megszámoltuk és sterilizált fiziológiás sóoldattal 5 x 10⁶ sejt/ml koncentrációjú tumorsejt szuszpenziót készítettünk. Ennek 0,2 ml-es részét, amely 1 x 10⁶ sejtet tartalmazott, 20-25 g testtömegü CDFi egér hasüregébe ültettük. A vizsgálandó vegyületeket polioxietilén-szorbit-monolaurát tartalmú fiziológiás sóoldatban feloldottuk és 0,2 ml-es részüket 24 órával a tumor beültetése után 5

64.862/SM

-16 egeret tartalmazó CDFi egér csoport hasüregébe juttattuk, majd 30 napon keresztül regisztráltuk a túlélési időt. A vizsgálandó vegyületek hatását a kontroll csoport (kezeletlen állatok) napokban számolt átlagos túlélési időinek és a kezelt állatok átlagos túlélési időinek aránya (ILS%) jelzi.

Az eredmények a 4. táblázatban láthatók.

4. táblázat

Antitumor hatás P388 leukémia esetén

Vegyület	ILS (%)
Radicicol	27
1	38
2	46
3	42

A 4. táblázat aataiból láthatóan az (I) általános képletü vegyületek kiváló túlélési idő növekedést eredményeznek összehasonlítva a radidicol hatásával, így antitumor szerként nasználhatók.

4. farmakolóqiai példa

Antitumor vizsgálat Sarcoma 180 szilárd tumoron ddY egér hasüregébe 5 x 10⁶ szarkoma 180 sejtet ültettünk. 7 nappal később a sejteket elkülönítettük az ascitetes folyadékból, sterilizált fiziológiás sóoldattal egyszer átmostuk, majd 5 x 10⁷ sejt/ml koncentrációjú sejtszuszpenziót készítettünk, sterilizált fiziológiás sóoldat felhasználásával. A sejtszuszpenzió 0,1 ml-es részét 20 ± testtömegü ddY egerek jobb hónalji bőre alá transzplantáltuk, majd a tumor beültetés után 24 órával a vizsgálandó vegyületek fiziológiás sóoldatban vagy polioxietilén-szorbit-monolaurát tartalmú fiziológiás sóoldatban felol

64.862/SM

-17 dott 0,1-0,2 ml-es részét intravénás injekcióban beadtuk 5 állatot tartalmazó ddY egér csoportoknak. A tumor térfogatot egy a x b²/Z képlettel számoltuk, ahol a = a tumor hosszabb tengelye, b = a tumor rövidebb tengelye. Az a és b értékeket 7 nappal a tumor beültetés után mértük. A vizsgálandó vegyületek antitumor hatását a T=C arány jellemzi, aho T = a vizsgált vegyülettel kezelt egerek tumor térfogata, C = a vizsgált vegyülettel nem kezelt kontroll csoport tumor térfogata.

Az eredmények az 5. táblázatban láthatók.

5. táblázat

Antitumor hatás Sarcoma 180 szilárd tumoron

Vegyület	T/C (%)
Radicicol	88
1	51
2	50
4	39

Az 5. táblázat adataiból látható, hogy az (I) általános képletű vegyületek radidicollal összehasonlítva kiváló antitumor hatást mutatnak, így antitumor szerként alkalmazhatók.

5. farmakolóqiai példa

Antibakteriális hatás

A vegyületek antibakteriális hatását agar higításos módszerrel mértük. A használt pH = 7 értékű közeget úgy állítottuk elő, hogy 3 g Bacto-Tryptont (Ditfco gyártmány), 3 g hús extraktumot, 1 g élesztő extraktumot, 1 g glükózt és 16 g agart 1 I vízben feloldottunk. Az antibakteriális aktivitást a MIC (minimális gátlókoncentráció) értékek mutatják.

64.862/SM

-18 Az eredmények a 6. táblázatban láthatók.

6. táblázat

Antibakteriális hatás

Vegyület	Minimális gátlókoncentráció (MIC) (pg/ml)
	CA	BS	EH
Radicicol	20	83	-
1	-	83	-
3	-	83	-
4	2,6	1,3	2,6
9	6,5	52	-

CA: Candida albicans ATCC 10231

BS: Bacillus subtilis No. 10707

EH: Enterococcus hirae ATCC 10541

A 6. táblázat adataiból látható az (I) általános képletü vegyületek antibakteriális hatása, így a vegyületek antibakteriális szerként alkalmazhatók.

7. farmakolóqiai példa

T sejt szaporodás gátlás vizsgálata kevert egér limfocita kultúrában

AKR egér (Japán SLC Co., Ltd.) lépet fertözésmentesen kimetszettünk és egy sejtszuszpenziót készítettünk. A szuszpenziót mitomycin C-vel (MMC) (Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd.) (végső koncentráció 50 pg/ml) kevertük és 37°Con 30 percig tenyésztettük. Tenyésztés után a sejteket háromszor átmostuk HBSS oldattal, amelyet úgy készítettünk, hogy 2,5% magzati borjú szérumot adtunk (FCS, Gibco Co.) Hanks féle kiegyenlített sóoldathoz (Gibco Co.). Az átmosás után 1 x 10⁷ sejt/ml sűrűségűre állítottuk be.

64.862/SM

-19 B10.BR egér (Japán SLC Co., Ltd.) nyirokcsomó sejt szuszpenzió (1,5 x 10⁵ sejt tartalom) 50 μΙ-es részét, 50 μΙ AKR egér lép szuszpenziót (5 x 10⁵ sejt tartalom) és 10 μΙ meghatározott koncentrációjú radicicol oldatot és a vizsgálandó vegyületeket egy-egy 96 lyukú mikrotiter lemez lyukaiba helyeztük és a lemezeket 37°C-on, 72 órán át inkubáltuk egy CO2 inkubátorban. A tenyésztés befejezése előtt 18 órával [³H]-timidin 1,0 μθΐ részét adtuk a lemezhez. A tenyésztés befejeztével a sejteket egy szűrőpapíron rögzítettük, megszárítottuk, majd egy toluolos szcintillátort adtunk hozzá a sejtekbe beépült [³H]-timidin radioaktivitásának mérése céljábül. A mérést egy szcintillációs számlálóval végeztük. A kontroll csoport esetén ugyanilyen tenyésztést hajtottunk végre, de nem adtuk a tenyészethez az (I) általános képletű vegyületeket, majd mértük a sejtekbe beépült [³H]-timidin radioaktivitás értéket. A T sejt szaporodás gátló hatást az alábbi képlettel számítottuk ki, amelyből az IC50 értékeket kaptuk meg.

T sejt szaporodás gátló hatás % a kontroll csoport a vizsgált vegyületet tartalmazó radioaktivitása — csoport radioaktivitása a kontroll csoport MMC-kezelt BIO.BRegér radioaktivitása — AKR egér + radioaktivitása radioaktivitása stimulálás előtt

A fenti képletben az MMC-kezelt AKR egér radioaktivitása az MMC-kezelt AKR egér lép sejtekbe beépült [³H]-timidin sugárzási dózisát jelenti, a B10.BR egér radioaktivitása pedig a B10.BR egér nyirokmirigy sejtekbe beépült [³H]timidin sugárzási dózisát jelenti. Az eredmények a 7. táblázatban láthatók.

64.862/SM

7. táblázat

T-sejt szaporodás gátlás aránya (É%) kevert egér limfocita kultúrában

Vegyület	IC₅o (gm)
Radicicol	0,15
3	0,3
8	0,01
9	0,02
19	0,15

A 7. táblázatból látható a vegyületek immunszuppresszív hatása, amely jobb, mint az ismert radicicolé.

A találmány szerinti (I) általános képletü vegyületek vagy gyógyászatilag elfogadható sóik orális vagy parenterális beadási módban alkalmazhatók mint hatóanyagok vagy gyógyszerkészítmények. A gyógyszerkészítmények tabletták, pirulák, porok, granulátumok, kapszulák, kúpok, injekciók, infúziók stb. lehetnek.

Ezek a dózisformák ismert módon állíthatók elő és különböző töltőanyagokat, lubrikánsokat, kötőanyagok, szétesést elősegítő anyagokat, szuszpendálószereket, tonizálószereket, emulgeálószereket, abszorpciós könnyítőket, stb. tartalmazhatnak.

A gyógyszerkészítményekben használható hordozóanyagok a következők lehetnek: víz, injekciós felhasználásra szolgáló desztillált víz, fiziológiás sóoldat, glükóz, fruktóz, szaccharóz, mannit, laktóz, keményítő, kukoricakeményítő, cellulóz, metil-cellulóz, karboximetil-cellulóz, hidroxipropil-cellulóz, alginsav, talkum, nátrium-citrát, kálcium-karbonát, kálcium-hidrogénfoszfát, magnézium-sztearát,

64.862/SM

-21 karbamid, szilikongyanta, szorbit zsírsav észter, gricerin zsírsav észter, stb., ezeket a megkívánt gyógyszerkészítmény céljának megfelelően választjuk ki.

A dózis és a beadási szám a terápiás céltól, a beadás módjától, a kezelési periódustól, a beteg életkorától, testtömegétől, stb. függ, általában a találmány szerinti vegyületeket 0,01-6 mg/testtömeg kg/nap dózisban adhatjuk be.

A találmányt az alább következő példákkal illusztráljuk anélkül, hogy igényünket ezekre a példákra korlátoznánk. Minden vegyület szerkezeti képlete az 1. táblázatban található.

1. példa

1. vegyület ml foszfor-oxikloridot cseppenként 5 ml dimetil-formamidhoz adunk jeges fürdőn lehűtve. Szobahőmérsékleten 30 percen át tartó keverés után az így készített oldatot lassan hozzáadjuk 2 g radicicol 20 ml dimetil-formamidban készült oldatához jeges fürdőn való keverés közben és az elegyet ezt követően szobahőmérsékleten 24 órán át keverjük. A kapott reakcióelegyet 200 ml etil-acetáttal hígítjuk, háromszor mossuk vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítva eluens (2%-os metanol/kloroform elegy) 1,4 g 1. vegyületet kapunk.

¹HMR (CD₃OH) δ (ppm): 8,00 (1H, s), 7,14 (1H, ddd, 1,0, 11,2, 16,1 Hz), 6,44 (1H, s), 6,16 (1H, t, 10,8 Hz), 5,95 (1H, d, 16,1 Hz), 5,68 (1H, t, 10,0 Hz), 5,32 (1H, m), 5,25 (1H, m), 5,20 (1H, dd, 5,6, 10,0 Hz), 4,10 (1H, d, 16,1 Hz), 3,65 (1H, d, 16,1 Hz), 1,97 (1H, m), 1,42 (3H, d, 6,3 Hz).

FAB-MS m/z: 429 [M+H]⁺.

64.862/SM

2. példa

2. vegyület

1,3 ml 36%-os koncentrált sósavat cseppenként 2 g radicicol 70 ml dioxán ban készült oldatához adjuk jeges fürdőn való hűtés közben és az elegyet szobahőmérsékleten 6 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet 100 ml vízzel keverjük, jeges fürdőn tartva telített nátrium-dikarbonát vizes oldattal gondosan semlegesítjük, ezt követően pedig háromszor extraháljuk 150 ml etil-acetáttal. Az extraktumot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 2%-os metanol/kloroform eleggyel eluálva. így 1 g 2. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,25 (1H, ddd, 1.0, 11.3, 16.4 Hz9, 6,50 (1H, s), 6,21 (1H, dt, 1,0, 11,7 Hz), 5,99 (1H, d, 16,4 Hz), 5,79 (1H, dt, 1,0, 11,7 Hz), 5,42 (1H, m), 5,17 (1H, ddd, 1,0, 5,9, 11,7 Hz), 4,25 (1H, d, 16,4 Hz), 4,03 (1H, dd, 5,9, 8,1 Hz), 3,70 (1H, d, 16,4 Hz), 2,07 (1H, ddd, 1,2, 6,8, 15,1 Hz), 1,93 (1H, ddd, 3,7, 8,1, 15,1 Hz), 1,46 (3H, d, 6,3 Hz).

FAB-MS m/z: 401 [M+H]⁺.

3. példa

3, vegyület

1,0 ml 47%-os koncentrált sósavat cseppenként 2,5 g radidicol 50 ml dioxánban készült oldatához adjuk jeges fürdőn való hűtés közben és az elegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet 100 ml vízzel keverjük, jeges fürdőn tartva telített nátrium-dikarbonát vizes oldattal gondosan semlegesítjük, majd háromszor extraháljuk 150 ml etil-acetáttal. Az extrak

64.862/SM

-23 tumot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk, és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluens 2%-os metanol/kloroform elegy. Ilyen módon 1,7 g 3. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,28 (1H, dd, 10,8, 16,0 Hz), 6,51 (1H, s), 6,13 (1H, t, 10,8 Hz), 6,00 (1H, d, 16,0 Hz), 5,96 (1H, t), 10,8 Hz), 5,40 (1H, m), 5,33 (1H, dd, 5,2, 10,8 Hz), 4,24 (1H, d, 16,1 Hz), 4,18 (1H, m), 3,71 (1H, d, 16,1 Hz), 2,08 (1H, m), 1,92 (1H, m), 1,45 (3H, d, 6,4 Hz).

FAB-MS m/z: 445, 447 [M+H]⁺.

4. példa

4. vegyület

0,5 ml tionil-kloridot cseppenként 1,4 g radidicol 7,5 ml dimetil-formamidban készült oldatához adunk jeges fürdőn való hűtés közben és az elegyet szobahőmérsékleten 12 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet 100 ml etilacetáttal hígítjuk és háromszor mossuk vízzel. Ezután vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk eluensként 4%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva. Ilyen módon 1,0 g 4. vegyületet kapunk. ¹H-NMR (CD3OD) δ (ppm): 7,15 (2H, dd, 10,8, 16,1 Hz), 6,52 (2H, s), 6,27 (2H, t, 10,8 Hz), 6,05 (2H, d, 16,1 Hz), 5,73 (2H, t, 10,8 Hz), 5,39 (2H, m), 5,35 (2H, m), 4,88 (2H, m), 4,28 (2H, d, 16,4 Hz), 3,74 (2H, d, 16,4 Hz), 2,27 (2H, m), 2,10 (2H, m), 1,50 (6H, d, 6,3 Hz).

FAB-MS m/z: 847 [M+H]⁺

64.862/SM

5. példa

5. vegyület

0,75 ml ecetsav-anhidridet 170 mg 2. vegyület 1 ml vízmentes piridinben készült oldatához adunk és az elegyet szobahőmérsékleten 10 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet 20 ml etil-acetáttal hígítjuk, majd vízzel, híg vizes sósav oldattal és telített vizes nátrium-bikarbonát oldattal mossuk ebben a sorrendben. Ezt követően vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk eluensként 2:1 arányú normál hexán/etil-acetát elegyet alkalmazva. Ilyen módon 125 mg 5. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCh) Ö (ppm): 7,06 (1H, s), 6,93 (1H, dd, 11,2, 16,3 Hz), 6,12 (1H, t, 11,2 Hz), 6,04 (1H, d, 16,1 Hz), 5,73 (1H, t, 11,2 Hz), 5,40 (1H, m), 5,14 (1H, t, 8,0 Hz), 5,00 (1H, ddd, 1,1, 8,0, 11,2 Hz), 4,41 (1H, d, 16,3 Hz), 3,96 (1H, d, 16,3 Hz), 2,35 (3H, s), 2,34 (3H, s), 2,21 (1H, dd, 8,7, 15,4 Hz), 2,04 (1H, ddd, 3,3, 8,7, 15,4 Hz), 1,96 (3H, s), 1,54 (3H, d, 6,3 Hz).

FAB-MS m/z: 527 [M+H]⁺.

6. példa

6. vegyület ml ecetsav-anhidridet adunk 166 mg 1. vegyület 1 ml piridinben készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 13 órán át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet vízzel hígítjuk, majd 3 x 50 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot híg vizes sósav oldattal, telített vizes nátrium-bikarbonát oldattal és telített vizes nátrium-klorid vizes oldattal mossuk ebben a sorrendben. Ezt követően vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson be

64.862/SM

-25 pároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk. Eluensként 2:1 arányú normál hexán/etil-acetát elegyet alkalmazva 174 mg 6. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,99 (1H, s), 7,07 (1H, s), 6,93 (1H, dd, 11,1, 16,3 Hz), 6,14 (1H, t, 11,1 Hz), 6,04 (1H, d, 16,3 Hz), 5,75 (1H, t, 11,1 Hz), 5,43 (1H, m), 5,34 (1H, t, 7,5 Hz), 5,05 (1H, dd, 7,5, 11,1 Hz), 4,31 (1H, d, 16,2 Hz), 3,96 (1H, d, 16,2 Hz), 2,35 (3H, s), 2,34 (3H, s), 2,14 (1H, m), 2,06 (1H, m), 1,57 (3H, d, 6,4 Hz).

FAB-MS m/z: 513[M+H]⁺.

7. példa

7, vegyület

0,5 ml ecetsav-anhidridet adunk 30 mg 4. vegyület 0,5 ml piridinben készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 13 órán át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk eluensként 1:1 arányú normál hexán/etil-acetát elegyet alkalmazva. Ilyen módon 30 mg 7. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 7,06 (2H, s), 6,88 (2H, dd, 11,0, 15,9 Hz), 6,17 (2H, t, 10,8 Hz), 6,05 (2H, d, 16,3 Hz), 5,67 (2H, t, 10,4 Hz), 5,45 (2H, m), 5,05 (2H, dd, 7,8, 9,7 Hz), 4,82 (2H, dd, 8,5, 8,4 Hz), 4,30 (2H, d, 15,8 Hz), 3,95 (2H, d, 15,8 Hz), 2,338 (6H, s), 2,337 (6H, s), 2,25 (2H, m), 2,06 (2H, m), 1,54 (6H, d, 6,4 Hz). FAB-MS m/z: 1015 [M+H]⁺.

64.862/SM

8. példa

8. vegyület mg hidroxil-amin-hidrokloridot 42 ml radicicol 2 ml piridinben készült oldatához adunk és az elegyet 50°C hőmérsékleten 8 órán át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk eluensként 25:1 arányú kloroform/metanol elegyet alkalmazva. Ilyen módon 10 mg 8. vegyületet kapunk. Az így kapott 8. vegyületet proton ¹H-NMR-rel azonosítva azt találjuk, hogy kb. 3:1 arányú izomer keverék az oxim-hidroxilcsoportnak köszönhetően.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,22 (1H, dd, 11,3, 16,2 Hz), 7,12 (0,5H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 6,83 (1,5H, d, 16,2 Hz), 6,43 (1H, s), 6,42 (0,5H, s), 6,16 (1H, t, 11,3 Hz), 6,11 (0,5H, t, 11,2 Hz), 5,58 (1H, dd, 3,6, 11,3 Hz), 5,46 (0,5H, dd, 3,4, 11,2 Hz), 5,30 (1,5H, m), 4,79 (0,5H, d, 16,3 Hz), 4,72 (0,5H, d, 16,3 Hz), 3,91 (1H, d, 16,1 Hz), 3,81 (1H, d, 16,1 Hz), 3,35 (1,5H, m), 2,97 (0,5H, m), 2,42 (1,5H, m), 1,60 (1,5H, m), 1,53 (3H, d, 6,6 Hz), 1,52 (1,5H, d, 7,7 Hz).

FAB-MS m/z: 380 [M+H]⁺.

9. példa

9. vegyület

100 mg O-metil-hidroxil-amin-hidrokloridot adunk 200 mg radicicol 1 ml piridinben készült oldatához és az elegyet 80°C hőmérsékleten 90 percen át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk, eluensként 25:1 arányú kloroform/metanol elegyet alkalmazva. Ilyen módon 34 mg 9. vegyületet kapunk.

64.862/SM

-27 ¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,23 (1H, dd, 11,3, 16,2 Hz), 6,70 (1H, d, 16,2 Hz), 6,42 (1H, s), 6,14 (1H, t, 11,3 Hz), 5,58 (1H, dd, 3,6, 11,3 Hz), 5,30 (1H, m), 3,904 (1H, d, 16,1 Hz), 3,901 (3H, s), 3,80 (1H, d, 16,1 Hz), 3,33 (1H, m), 3,01 (1H, m), 2,42 (1H, ddd, 3,5, 3,5, 14,5 Hz), 1,59 (1H, ddd, 4,1, 9,0, 14,5 Hz), 1,52 (3H, d, 6,5 Hz).

FAB-MS m/z: 394 [M+H]⁺.

10. példa

10, példa

500 mg radidicol 7,5 ml dimetil-formamidban készült oldatát jeges fürdőn lehűtjük és 700 mg imidazol és 1,1 g terc-butil-dimetil-szilán klorid 2,5 ml dimetilformamidban készült oldataival keverjük ebben a sorrendben és az elegyet szobahőmérsékleten 12 órán át keverjük. A reakcióelegyet 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, majd kétszer mossuk vízzel. Ezután vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 3:1 arányú normál hexán/etil-acetát elegyet használva eluensként. Ilyen módon 902 g 10. vegyületet kapunk. ¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,58 (1H, dd, 10,8, 16,2 Hz), 6,39 (1H, s), 6,13 (1H, ddd, 1,1, 10,8, 10,8 Hz), 6,04 (1H, d, 16,2 Hz), 5,78 (1H, dd, 3,5, 10,8 Hz), 5,32 (1H, m), 3,89 (1H, d, 16,3 Hz), 3,70 (1H, d, 16,3 Hz), 3,40 (1H, ddd, 1,9, 3,4 Hz), 3,02 (1H, ddd, 1,9, 2,3, 9,4 Hz), 2,44 (1H, ddd, 3,2, 3,2, 14,4 Hz), 1,54 (3H, d, 6,6 Hz), 1,50 (1H, m), 1,00 (9H, s), 0,94 (9H, s), 0,24 (3H, s), 0,22 (3H, s), 0,21 (3H, m), 0,20 (3H, s). FAB-MS m/z: 593 [M+H]⁺.

64.862/SM

11. példa

11. vegyület

0,1 ml piridint és 240 mg hidroxil-amin-hidrokloridot adunk 319 mg 10. vegyület 5 ml diklór-metánban készült oldatához és az elegyet 70°C hőmérsékleten 30 órán át keverjük. Ezután lehűtjük szobahőmérsékletre, kloroformmal hígítjuk, majd híg vizes sósavval, telített vizes nátrium-bikarbonát oldattal és telített vizes nátrium-klorid oldattal mossuk ebben a sorrendben. Ezután vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 1:1 arányú normál hexán/etil-acetát elegyet alkalmazva eluensként. Ilyen módon 18 mg 11. vegyületet kapunk. Az így kapott 11. vegyületet ¹H-NMR-rel azonosítva azt találjuk, hogy kb. 1:1 arányú izomer keverék az oxim-hidroxilcsoportnak köszönhetően.

¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,24 (1H, dd, 11,3, 16,1 Hz), 7,13 (1H, dd, 11,2 , 16,0 Hz), 6,87 (1H, d, 16,1 Hz), 6,37 (1H, s), 6,36 (1H, s), 6,20 (1H, d, 16,0 Hz), 6,14 (1H, t, 11,3 Hz), 6,08 (1H, t, 11,2 Hz), 5,65 (1H, dd, 3,0, 11,3 Hz), 5,53 (1H, dd, 3,1, 11,3 Hz), 5,26 (2H, m), 4,85 (1H, d, 16,3 Hz), 3,91 (1H, d, 16,2 Hz), 3,60 (1H, d, 16,2 Hz), 3,39 (2H, m), 3,01 (1H, d, 16,3 Hz), 2,98 (2H, m), 2,42 (2H, m), 1,56 (3H, d, 6,5 Hz), 1,54 (3H, d, 6,5 Hz), 1,49 (2H, m), 1,00 (18H, s), 0,943 (9H, s), 0,942 (9H, s), 0,23 (6H, s), 0,212 (6H, s), 0,209 (6H, s), 0,20 (6H, s).

FAB-MS m/z: 608 [M+H]⁺.

12. példa

12. vegyület

160 μΙ diizopropil-etil-amint és 75 μΙ klór-metil-metil-étert adunk ebben a sorrendben 0°C hőmérsékleten 100 ml 11. vegyület 1 ml diklór-metánban készült

64.862/SM

-29 oldatához és az elegyet 0°C hőmérsékleten 7 órán át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 5:1 arányú normál hexán/etil-acetát elegyet használva eluensként. Ilyen módon 58 mg 12. vegyületet kapunk. Az így kapott 12. vegyületet ¹H-NMR-rel azonosítva azt találjuk, hogy körülbelül 1:1 arányú izomer-keverék az oxim-hidroxilcsoportnak köszönhetően.

¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,24 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 7,12 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 6,81 (1H, d, 16,1 Hz), 6,36 (2H, s), 6,12 (1H, ddd, 2,0, 11,2, 11,2 Hz), 6,07 (1H, ddd, 1,5, 11,2, 11,2 Hz), 5,66 (1H, dd, 2,9, 11,2 Hz), 5,52 (1H, dd, 3,2, 11,2 Hz), 5,28 (2H, m), 5,22 (2H, ABq, 7,3 Hz), 5,18 (2H, s), 4,81 (1H, d, 16,4 Hz), 3,97 (1H, d, 16,4 Hz), 3,59 (1H, d, 16,4 Hz), 3,50 (3H, s), 3,48 (3H, s), 3,37 (2H, m), 3,05 (1H, d, 16,4 Hz), 3,02-2,94 (2H, m), 2,45-2,39 (2H, m), 1,56 (3H, d, 7,8 Hz), 1,54 (3H, d, 6,6 Hz), 1,00 (18H, s), 0,943 (9H, s), 0,940 (9H, s), 0,23 (6H, s), 0,21 (6H, s), 0,204 (6H, s), 0,200 (6H, s).

FAB-MS m/z: 652 [M+H]⁺.

13. példa

13, vegyület μΙ tetra-n-butil-ammónium-fluorid 1 molos tetrahidrofurános oldatot 22 mg 12. vegyület 0,5 ml tetrahidrofuránban készített oldatához adjuk és az elegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. A kapott reakcióelegyet etil-acetáttal hígítjuk, majd kétszer mossuk vízzel. Ezután vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiéval tisztítjuk 2%-os metanol/kloroform elegyet használva eluensként. Ilyen módon 11 mg 13. vegyületet kapunk. Az így kapott

64.862/SM

13. vegyületet ¹H-NMR-rel azonosítva azt találjuk, hogy körülbelül 1:1 arányú izomer keverék az oxim-hidroxilcsoportnak köszönhetően.

^-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,29 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 7,18 (1H, dd, 11,0, 16,1 Hz), 6,77 (1H, d, 16,1 Hz), 6,43 (2H, s), 6,17 (1H, t, 11,2 Hz), 6,16 (1H, d, 16,1 Hz), 6,13 (1H, t, 11,0 Hz), 5,61 (1H, dd, 3,4, 11,2 Hz), 5,50 (1H, dd, 3,4, 11,0 Hz), 5,30 (2H, m), 5,19 (2H, ABq, 7,3 Hz), 5,13 (2H, ABq, 7,1 Hz), 4,65 (1H, d, 16,6 Hz), 3,95 (1H, d, 16,4 Hz), 3,84 (1H, d, 16,4 Hz), 3,46 (1H, d, 16.6 Hz), 3,47 (3H, s), 3,43 (3H, s), 3,33 (1H, m), 3,30 (1H, m), 3,02 (1H, m), 2,97 (1H, m), 2,42 (2H, m), 1,68-1,58 (2H, m), 1,53 (3H, d, 7,8 Hz), 1,51 (3H, d, 6,6 Hz).

FAB-MS m/z: 424 [M+Hf.

14. példa

14. vegyület

36,4 mg radidicol 0.5 ml piridinben készült oldatát és 20 mg O-(3-azidopropil)-hidroxil-amin-hidrokloridot szobahőmérsékleten 14 órán át keverünk. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk eluensként 1%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva, így 29,3 mg 14. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD3OD) δ (ppm): 7,24 (1H, ddd, 1,0, 11,2, 16,1 Hz), 6,72 (1H, d, 16,1 Hz), 6,43 (1H, s), 6,15 (1H, ddd, 1,7, 11,2, 11,2 Hz), 5,59 (1H, dd, 3,7, 11,2 Hz), 5,30 (1H, m), 4,20 (2H, m), 3,92 (1H, d, 16,1 Hz), 3,81 (1H, d, 16,1 Hz), 3,42 (2H, t, 6,6 Hz), 3,34 (1H, m), 3,01 (1H, m), 2,42 (1H, ddd, 3,4, 3,4, 14,4 Hz), 1,96 (2H, m), 1,59 (1H, ddd, 3,9, 8,8, 14,4 Hz), 1,52 (3H, d, 6,4 Hz).

FAB-MS m/z: 463 [M+H]⁺.

64.862/SM

15. példa

15. vegyület mg 1. vegyület 2 ml, metilén-kloridban készült oldatát és 40 mg 4dimetil-amino-piridint 0°C hőmérsékletre hütünk és 0,1 ml palmitoil-kloridot adunk hozzá lassan, cseppenként, majd a kapott elegyet 0°C hőmérsékleten 30 percen át keverjük. Ezt követően az oldószert vákuumban csökkentett nyomáson elpárologtatjuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 4:1 arányú normál-hexán/etil-acetát elegyet alkalmazva eluensként. Ilyen módon 92 mg 15. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,98 (1H, s), 7,03 (1H, s), 6,94 (1H, dd, 11,2, 16,3 Hz), 6,14 (1H, t, 11,2 Hz), 6,04 (1H, d, 16,3 Hz), 5,74 (1H, t, 11,2 Hz), 5,40 (1H, m), 5,32 (1H, brt, 7,6 Hz), 5,05 (1H, dd, 7,6, 11,2 Hz), 4,29 (1H, d, 16,3 Hz), 3,95 (1H, d, 16,3 Hz), 2,63-2.52 (4H, m), 2,14 (1H, dd, 7,6, 15,4 Hz), 2,05 (1H, m), 1,80-1,72 (4H, m), 1,55 (3H, d, 6,3 Hz), 1,43-1,26 (48H, m), 0,88 (6H, t, 6,7 Hz). FAB-MS m/z: 905 [M+H]⁺.

16. példa

16. vegyület mg 4. vegyület 6 ml, metilén-kloridban készült oldatát és 126 mg 4-dimetil-amino-piridint 0°C hőmérsékletre hütünk lassan, cseppenként palmitoilkloridot adunk hozzá és a kapott elegyet 0°C hőmérsékleten 2 órán át keverjük. Az oldószert ezután csökkentett nyomáson elpárologtatjuk, a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 4:1 arányú normál-hexá/etil-acetát elegyet alkalmazva eluensként. Ilyen módon 130 mg 16. vegyületet kapunk.

64.862/SM

-32 ¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,02 (2H, s), 6,88 (2H, m), 6,16 (1H, t, 10,8 Hz), 6,15 (1H, t, 10,8 Hz), 6,04 (1H, d, 16,2 Hz), 6,03 (1H, d, 16,2 Hz), 5,66 (1H, t, 10,8 Hz), 5,64 (1H, t, 10,8 Hz), 5,43 (2H, m), 5,06 (1H, dd, 6,0, 10,8 Hz), 5,02 (1H, dd, 6,8, 9,0 Hz), 4,80 (1H, brt, 8,8 Hz), 4,68 (1H, brt, 8,6 Hz), 4,29 (1H, d, 16,3 Hz), 4,27 (1H, d, 16,2 Hz), 3,95 (2H, d, 16,3 Hz), 2,60-2,52 (8H, m), 2,29-2,18 (2H, m), 2,06 (2H, m), 1,81-1,71 (8H, m), 1,522 (3H, d, 6,3 Hz), 1,517 (3H, d, 6,3 Hz), 1,43-1,21 (96H, m), 0,88 (12H, t, 6,8 Hz).

FAB-MS m/z: 1801,9 [M+H]⁺.

17. példa

17. vegyület

0,5 ml 36%-os koncentrált sósavat adunk cseppenként 343 mg 1. referencia példában kapott vegyület 5 ml, dioxánban készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 30 percen át keverjük. Ezt követően az elegyet vízzel mossuk és vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 4.Ί arányú normál hexán/etil-acetát elegyet használva eluensként. így 96 mg 17. vegyületet kapunk.

^-NMR (CDCh) δ (ppm): 7,01 (1H, s), 6,95 (1H, dd, 11,1, 16,3 Hz), 6,21 (1H, t, 11,1 Hz), 6,03 (1H, d, 16,3 Hz), 5,77 (1H, t, 11,1 Hz), 5,51 (1H, m), 4,97 (1H, ddd, 1,0, 6,6, 11,1 Hz), 4,32 (1H, d, 16,2 Hz), 3,97 (1H, t, 6,6 Hz), 3,93 (1H, d, 16,2 Hz), 2,62-2,45 (4H, m), 2,12 (1H, m), 2,01 (1H, m), 1,79-1,69 (4H, m), 1,50 (3H, d, 6,3 Hz), 1,44-1,21 (48H, m), 0,88 (6H, t, 6,6 Hz).

FAB-MS m/z: 877 [M+H]⁺.

64.862/SM

18. példa

18. vegyület mg 17. vegyület 4 ml, metilén-kloridban készült oldatát 0°C hőmérsékletre hütjük, 5 csepp piridint és 5 csepp acetil-kloridot adunk hozzá cseppenként és a kapott elegyet 0°C hőmérsékleten 30 percen át keverjük. Az oldószert ezt követően csökkentett nyomáson elpárologtatjuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 5:1 arányú normál-hexán/etil-acetát elegyet alkalmazva eluensként. így 15 mg 18. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,02 (1H, s), 6,93 (1H, dd, 11,2, 16,4 Hz), 6,12 (1H, t, 11,2 Hz), 6,03 (1H, d, 16,4 Hz), 5,73 (1H, t, 11,2 Hz), 5,38 (1H, m), 5,13 (1H, t, 8,0 Hz), 5,01 (1H, dd, 8,0, 11,2 Hz), 4,34 (1H, d, 16,4 Hz), 3,96 (1H, d, 16,4 Hz), 2,61-2,55 (4H, m), 2,20 (1H, m), 2,03 (1H, m), 1,95 (3H, s), 1,80-1,71 (4H, m), 1,53 (3H, d, 6,4 Hz), 1,43-1,26 (48H, m), 0,88 (6H, t, 6,6 Hz).

FAB-MS m/z: 919 [M+H]⁺.

19. példa

19. vegyület csepp 47%-os koncentrált hidrogén-bromidot adunk lassan, cseppenként 106 mg az 1. referencia példa szerint előállított a) vegyület 5 ml, dioxánban készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 30 percen át keverjük. A reakcióelegyet kloroformmal hígítjuk és vízzel mossuk. Ezután vízmentes nátriumszulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 3:1 arányú normálhexán/etil-acetát elegyet alkalmazva eluensként. így 41 mg 19. vegyületet kapunk.

64.862/SM ¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,03 (1H, s), 6,99 (1H, dd, 10,8, 16,1 Hz), 6,14 (1H, t, 10,8 Hz), 6,05 (1H, d, 16,1 Hz), 5,94 (1H, t, 10,8 Hz), 5,50 (1H, m), 5,10 (1H, dd, 5,9, 10,8 Hz), 4,29 (1H, d, 16,1 Hz), 4,13 (1H, brt, 5,9 Hz), 3,94 (1H, d, 16,1 Hz), 2,60-2.54 (4H, m), 2,13 (1H, dd, 6,9, 15,2 Hz), 2,00 (1H, m), 1,80-1,69 (4H, m), 1,50 (3H, d, 6,3 Hz), 1,44-1,26 (48H, m), 0,88 (6H, t, 6,6 Hz).

FAB-MS m/z: 921, 923 [M+H]⁺.

20. példa

20. vegyület csepp piridint és 3 csepp ecetsav-anhidridet adunk cseppenként ebben a sorrendben a 19. vegyület 1 ml, metilén-kloridban készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 16 órán át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles preparatív vékonyrétegkromatográfiá-val tisztítjuk (0,25 mm x 10 cm x 20 cm, eluens 5:1 arányú normál-hexán/etil-acetát). Ilyen módön 4,3 mg 20. vegyületet kapunk. ¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,04 (1H, s), 6,97 (1H, dd, 10,7, 16,1 Hz), 6,05 (1H, t, 10,7 Hz), 6,04 (1H, d, 16,1 Hz), 5,89 (1H, t, 10,7 Hz), 5,38 (1H, m), 5,27 (1H, brt, 7,8 Hz), 5,09 (1H, dd, 7,8, 10,7 Hz), 4,32 (1H, d, 16,4 Hz), 3,96 (1H, d, 16,4 Hz), 2,63-2,56 (4H, m), 2,21 (1H, dd, 7,8, 14,4 Hz), 2,02 (1H, m), 1,976 (3H, s), 1,811,71 (4H, m), 1,53 (3H, d, 6,4 Hz), 1,47-1,23 (48H, m), 0,88 (6H, t, 6,8 Hz). FAB-MS m/z: 963, 965 [M+H]⁺.

21. példa

21. vegyület

300 mg 4-dimetil-amino-piridint és 1,0 ml palmitoil-kloridot adunk ebben a sorrendben 250 mg 3. vegyület 10 ml, metilén-kloridban készült oldatához és az

64.862/SM

-35 elegyet szobahőméréskleten 30 percen át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk, majd a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 3:1 arányú normál-hexán/etil-acetát elegyet használva eluensként. így 130 mg 21. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,04 (1H, s), 6,97 (1H, dd, 11,0, 16,8 Hz), 6,04 (1H, t, 11,0 Hz), 6,00 (1H, d, 16,8 Hz), 5,89 (1H, t, 11,0 Hz), 5,38 (1H, m), 5,28 (1H, t, 7,6 Hz), 5,10 (1H, dd, 7,6, 11,0 Hz), 4,31 (1H, d, 16,1 Hz), 3,95 (1H, d, 16,1 Hz), 2,61-2,53 (6H, m), 2,22 (1H, dd, 7,8, 14,4 Hz), 2,01 (1H, m), 1,81-1,71 (6H, m), 1,53 (3H, d, 6,4 Hz), 1,43-1,26 (72H, m), 0,88 (6H, t, 6,8 Hz).

FAB-MS m/z: 1160, 1162 [M+H]⁺

22. példa

22. vegyület

0,1 ml dietil-azo-dikarboxilátot adunk cseppenként 250 mg 11. vegyület, 244 mg N-(6-hidroxi-hexil)-ftálimid és 135 mg trifenil-foszfin 1,5 ml, tetrahidrofuránban készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 21 órán át keverjük. Ezt követően az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk, a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 7,5:1 arányú normálhexán/etil-acetát elegyet alkalmazva eluensként. így 49 mg 22. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCI3) δ (ppm): 7,83 (2H, m), 7,71 (2H, m), 7,08 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 6,30 (1H, s), 6,27 (1H, d, 16,1 Hz), 6,18 (1H, dd, 10,5, 11,2 Hz), 5,48 (1H, dd, 3,2, 10,5 Hz), 5,24 (1H, m), 3,98 (1H, d, 16,1 Hz), 3,91 (2H, m), 3,69 (2H, m), 3,56 (1H, d, 16,1 Hz), 3,41 (1H, m), 2,96 (1H, m), 2,42 (1H, m), 1-83-1,37 (9H,

64.862/SM

-36 m), 1,55 (3H, d, 6,5 Hz), 0,975 (9H, s), 0,973 (9H, s), 0,24 (3H, s), 0,22 (3H, s), 0,204 (3H, s), 0,197 (3H, s).

FAB-MS m/z: 837 [M+H]⁺.

23. példa

23. vegyület

Tetra-n-butil-ammónium-fluoridot (1 molos tetrahidrofurános oldat, 0,05 ml) adunk cseppenként 21,6 mg 22. vegyület 1 ml, tetrahidrofuránban készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 10 percen át keverjük. Ezt követően az oldatot telített vizes ammónium-klorid oldatba öntjük és etil-acetáttal extraháljuk háromszor. Az extraktumot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk, a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 1%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva eluensként. így 16 mg 23. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,79-7,71 (4H, m), 7,03 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 6,77 (1H, d, 16,1 Hz), 6,42 (1H, s), 6,04 (1H, dd, 10,5, 11,2 Hz), 5,39 (1H, dd, 3,2, 10,5 Hz), 5,26 (1H, m), 3,93 (2H, m), 3,84 (1H, d, 16,1 Hz), 3,73 (1H, d, 16,1 Hz), 3,62 (2H, m), 3,23 (1H, m), 2,91 (1H, m), 2,39 (1H, m), 1,80-1,33 (9H, m), 1,47 (3H, d, 6,8 Hz).

FAB-MS m/z: 609 [M+H]⁺.

24. példa

24, vegyület

575 mg O-(6-azido-hexil)-hidroxil-amin-hidrokloridot adunk 900 mg radicicol 5 ml, piridinben készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 78 órán át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot

64.862/SM

-37 szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk eluensként 1%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva. így 319 mg 24. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,23 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 6,72 (1H, d, 16,1 Hz), 6,42 (1H, s), 6,15 (1H, dd, 10,5, 11,2 Hz), 5,58 (1H, 3,4, 10,5 Hz), 5,30 (1H, m), 4,19-4,08 (2H, m), 3,91 (1H, d, 16,1 Hz), 3,81 (1H, d, 16,1 Hz), 3,34 (1H, m), 3,01 (1H, m), 2,42 (1H, m), 1,77-1,65 (2H, m), 1,62-1,56 (9H, m), 1,52 (3H, d, 6,6 Hz). FAB-MS m/z: 505 [M+H]⁺.

25. példa

25. vegyület

400 mg O-[5-(terc-butoxi-karbonil)-pentil]-hidroxil-amin-hidrokloridot adunk 364 mg radidicol 3 ml, piridinben készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 19 órán át keverjük, majd a keverést 60°C hőmérsékleten 2 órán át folytatjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 1%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva eluensként. így 316 mg 25. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD3OD) δ (ppm): 7,23 (1H, dd, 11,3, 16,2 Hz), 6,71 (1H, dd, 16,2 Hz), 6,42 (1H, s), 6,15 (1H, dd, 10,3, 11,3 Hz), 5,58 (1H, dd, 3,4, 10,3 Hz), 5,30 (1H, m), 4,15-4,08 (2H, m), 3,91 (1H, d, 16,0 Hz), 3,81 (1H, d, 16,0 Hz), 3,33 (1H, m), 3,02 (1H, m), 2,42 (1H, m), 2,25-2,20 (2H, m), 1,75-1,34 (7H, m), 1,52 (3H, d, 6,5 Hz), 1,43 (9H, s).

FAB-MS m/z: 550 [M+Hf.

26. példa

26. vegyület

915 mg 0-{5-[[2-(trimetil-szilil)-etil]-oxi-karbonil]-pentil}-hidroxil-amin-hidro

64.862/SM

438 klorid adunk 800 mg radidicol 2 ml, piridinben készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 22 órán át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 1%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva eluensként. így 295 mg 26. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,23 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 6,71 (1H, d, 16,1 Hz), 6,42 (1H, s), 6,15 (1H, dd, 10,7, 11,2 Hz), 5,58 (1H, dd, 3,7, 10,7 Hz), 5,30 (1H, m), 4,19-4,13 (4H, m), 3,91 (1H, d, 16,1 Hz), 3,81 (1H, d, 16,1 Hz), 3,34 (1H, m), 3,01 (1H, m), 2,41 (1H, m), 2,33-2,29 (2H, m), 1,77-1,30 (7H, m), 1,52 (3H, d, 6,8 Hz), 1,00-0,95 (2H, m), 0,03 (9H, s).

FAB-MS m/z: 594 [M+H]⁺.

27. példa

27, vegyület

116 mg O-[6-(allil-oxi-karbonil-amino)-hexil]-hidroxil-amin-hidroklorid adunk 140 mg radicicol 3 ml, piridinben készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 79 órán át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk, a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 1%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva eluensként. így 156 mg 27. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD3OD) δ (ppm): 7,23 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 6,71 (1H, d, 16,1 Hz), 6,42 (1H, s), 6,15 (1H, t, 11,2 Hz), 5,91 (1H, m), 5,58 (1H, dd, 3,7, 11,2 Hz), 5,30 (1H, m), 5,27 (1H, dd, 1,7, 17,3 Hz), 5,16 (1H, brd, 10,5 Hz), 4,50 (2H, m), 4,184,06 (2H, m), 3,91 (1H, d, 16,1 Hz), 3,80 (1H, d, 16,1 Hz), 3,35 (1H, m), 3,12-3,07 (2H, m), 3,01 (1H, m), 2,41 (1H, m), 1,76-1,30 (9H, m), 1,52 (3H, d, 6,6 Hz). FAB-MS m/z: 563 [M+H]⁺.

64.862/SM <39 -

28. példa

28. vegyület

270 mg 6-amino-oxi-hexánsav-hidrokloridot adunk 430 mg radicicol 2 ml, piridinben készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 12 órán át keverjük, majd 60°C hőmérsékleten 1 órán át folytatjuk a keverést. Ezt követően az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk, a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 2%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva eluensként. így 213 mg 28. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,23 (1H, dd, 11,3, 16,2 Hz), 6,71 (1H, d, 16,2 Hz), 6,42 (1H, s), 6,15 (1H, dd, 10,8, 11,3 Hz), 5,58 (1H, dd, 3,6, 10,8 Hz), 5,30 (1H, m), 4,16-4,08 (2H, m), 3,91 (1H, d, 16,1 Hz), 3,80 (1H, d, 16,1 Hz), 3,33 (1H, m), 3,02 (1H, m), 2,42 (1H, m), 2,30 (2H, m), 1,77-1,45 (7H, m), 1,52 (3H, d, 6,5 Hz). FAB-MS m/z: 494 [M+H]⁺.

29. példa

29. vegyület

1,0 g amino-oxi-ecetsav-hemihidrokloridot adunk 1,5 g radidicol 5 ml, piridinben készült oldatához és az elegyet szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük, majd a keverést 60°C hőmérsékleten 1,5 órán át folytatjuk. Az oldószert csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 2%-os metanol/kloroform elegyet alkalmazva eluensként. így 692 mg 29. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD3OD) δ (ppm): 7,27 (1H, dd, 11,2, 16,1 Hz), 6,82 (1H, d, 16,1 Hz), 6,42 (1H, s), 6,17 (1H, dd, 10,5, 11,2 Hz), 5,61 (1H, dd, 3,4, 10,5 Hz), 5,31 (1H,

64.862/SM

-40 m), 4,64 (2H, m), 3,91 (1H, d, 16,4 Hz), 3,82 (1H, d, 16,4 Hz), 3,34 (1H, m), 3,02 (1H, m), 2,42 (1H, m), 1,60 (1H, ddd, 4,2, 9,0, 14,4 Hz), 1,53 (3H, d, 6,6 Hz). FAB-MS m/z: 438 [M+H]⁺.

30. példa

30. vegyület

2,5 g N-hidroxi-szukcinimidet és 310 mg 4-dimetil-amino-piridint adunk ebben a sorrendben 5,2 g 29. vegyület 100 ml, tetrahidrofuránban készült oldatához és az elegyet néhány percig keverjük, majd 4,5 g diciklohexil-karbodiimid 30 ml tetrahidrofuránban készült oldatát adjuk hozzá cseppenként, szobahőmérsékleten 2 órán át tartó keverés után a kicsapódott karbamid-származékot szűréssel eltávolítjuk és a kapott szürletet csökkentett nyomáson bepárolva megkapjuk a szukcinimid-észter nyers kristályait. Az így kapott szukcinimid-észtert 100 ml diklór-metánban feloldjuk és 4,5 ml trietil-aminnal és 2,0 g dimetil-aminhidrokloriddal keverjük ebben a sorrendben, majd az elegyet szobahőmérsékleten keverjük. 12 órán át tartó keverés után a reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot 500 ml etil-acetátban feloldjuk. Ezután 1 n vizes sósav oldattal és telített vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, majd vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Ezután szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk (100 g, 2%-os metanol/kloroform elegy). így 2 g 30. vegyületet kapunk. ¹H-NMR(CD₃OD)5(ppm): 7,27 (1H, dd, 11,3, 16,1 Hz), 6,81 (1H, d, 16,1 Hz), 6,42 (1H, s), 6,17 (1H, dd, 10,5, 11,3 Hz), 5,61 (1H, dd, 3,5, 10,5 Hz), 5,30 (1H, m), 3,91 (1H, d, 16,1 Hz), 3,82 (1H, d, 16,1 Hz), 3,34 (1H, m), 3,08 (3H, s), 3,02 (1H, dd, 2,2, 3,7, 8,9 Hz), 2,95 (3H, s), 2,42 (1H, ddd, 3,6, 3,7, 14,5 Hz), 1,60 (1H, ddd, 4,1, 8,9, 14,5 Hz), 1,52 (3H, d, 6,6 Hz).

64.862/SM

FAB-MS m/z: 465 [M+H]⁺.

31. példa

31. vegyület

364 mg radidicolt és 137 mg O-(3-hidroxi-propil)-hidroxil-amin-hidrokloridot feloldunk 3 ml piridinben és szobahőmérsékleten 64 órán át keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk és a kapott maradékot szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk (15 g, 1,5%-os metanol/kloroform elegy), ilyen módon 186 mg 31. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 7,23 (1H, dd, 11,3, 16,1 Hz), 6,72 (1H, d, 16,1 Hz), 6,42 (1H, s), 6,15 (1H, dd, 10,6, 11,3 Hz), 5,59 (1H, dd, 3,5, 10,6 Hz), 5,30 (1H, m), 4,22 (2H, m), 3,91 (1H, d, 16,1 Hz), 3,80 (1H, d, 16,1 Hz), 3,67 (2H, m), 3,33 (1H, m), 3,01 (1H, m), 2,41 (1H, m), 1,92 (2H, m), 1,58 (1H, m), 1,52 (3H, d, 6,5 Hz).

FAB-MS m/z: 438 [M+H]⁺.

32. példa

32. vegyület

0,2 ml trietil-amint és 78 mg 4-dimetil-amino-piridint adunk 100 mg 9. vegyület 6 ml, diklór-metánban készült oldatához és 0,2 ml palmitoil-klorid 2 ml tetrahidrofuránban készült oldatát adjuk hozzá cseppenként jeges fürdőn való hűtés közben. Ezt követően az elegyet 0°C hőmérsékleten 1 órán át keverjük, majd a keverést szobahöméréskleten 2 órán át folytatjuk, végül az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk. A kapott maradékot dietil-éterben feloldjuk telített vizes ammónium-klorid oldattal, telített vizes nátrium-bikarbonát oldattal és telített vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, majd szilikagéles oszlopkromatográfi

64.862/SM aval tisztítjuk (15 g 20%-os etil-acetát/hexán elegy). Ilyen módon 156 mg 32. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,09 (1H, dd, 11,3, 16,2 Hz), 6,98 (1H, s), 6,73 (1H, d, 16,2 Hz), 6,09 (1H, dd, 10,7, 11,3 Hz), 5,64 (1H, dd, 3,1, 10,7 Hz), 5,34 (1H, m), 4,02 (1H, d, 16,3 Hz), 3,96 (3H, s), 3,73 (1H, d, 16,3 Hz), 3,43 (1H, m), 2,97 (1H, m), 2,57 (2H, m), 2,46 (2H, m), 2,41 (1H, m), 1,77-1,59 (4H, m), 1,56 (3H, d, 6,5 Hz), 1,46-1,26 (48H, m), 0,88 (6H, t, 6,8 Hz).

FAB-MS m/z: 870 [M+H]⁺.

33. példa

33. vegyület

Két csepp 36%-os koncentrált sósavat adunk 33 mg 9. vegyület 1,5 ml, dioxánban készült oldatához és az elegyet állni hagyjuk szobahőmérsékleten 30 percen át. A reakcióelegyet ezután 5 ml etil-acetáttal hígítjuk, kétszer mossuk vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Ezután szilikagéles preparatív vékonyrétegkromatográfiával tisztítjuk (0,5 ml x 10 cm x 20 cm, kloroformmetanol-ecetsav, 195:5:1). Ilyen módon 12 mg 22. vegyületet kapunk. ¹H-NMR (CD3OD) δ (ppm): 6,66 (2H, m), 6,42 (1H, s), 6,10 (1H, m), 5,80 (1H, t, 10,3 Hz), 5,32 (1H, m), 4,97 (1H, dd, 3,4, 10,3 Hz), 4,59 (1H, d, 15,4 Hz), 3,89 (3H, s), 3,84 (1H, m), 3,67 (1H, d, 15,4 Hz), 2,09 (1H, m), 1,94 (1H, m), 1,45 (3H, d, 6,1 Hz).

FAB-MS m/z: 430 [M+Hf.

64.862/SM

34. példa

34. vegyület mg 9. vegyűletet használva a 3. példában leírtak szerint eljárva 8 mg 34. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 6,63 (2H, m), 6,42 (1H, s), 5,99 (1H, m), 5,93 (1H, t, 10,3 Hz), 5,31 (1H, m), 5,10 (1H, dd, 3,6, 10,3 Hz), 4,65 (1H, d, 15,7 Hz), 3,68 (1H, m), 3,67 (1H, d, 15,7 Hz), 2,03 (1H, m), 1,97 (1H, ddd, 3,6, 9,8, 14,4 Hz), 1,44 (3H, d, 6,0 Hz).

FAB-MS m/z: 474, 476 [M+Hf.

35. példa

35. vegyület

Jeges vizes hűtés közben 0,16 ml oxalil-kloridot adunk cseppenként 362 mg 9. vegyület 7 ml, dimetil-formamidban készült oldatához. Ezután jeges vizes fürdőn 30 percen át keverjük, majd a keverést szobahőmérsékleten 15 órán át folytatjuk. A reakcióelegyet 50 ml etil-acetáttal hígítjuk, kétszer mossuk vízzel, majd vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk. Szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítunk (10 g 2%-os metanol/kloroform elegy), ilyen módon 94 mg 35. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 8,10 (1H, s), 6,87 (1H, d, 16,0 Hz), 6,75 (1H, dd, 11,1, 16,0 Hz), 6,49 (1H, s), 6,19 (1H, t, 11,1 Hz), 5,58 (1H, t, 11,1 Hz), 5,45 (1H, m), 5,32 (1H, m), 5,27 (1H, dd, 4,5, 11,1 Hz), 3,91 (3H, s), 3,85 (1H, d, 15,9 Hz), 3,75 (1H, d, 15,9 Hz), 2,03 (1H, m), 1,95 (1H, dd, 4,8, 14,4 Hz), 1,51 (3H, d, 6,4 Hz). FAB-MS m/z: 458 [M+H]⁺.

64.862/SM < i » . . * ,* • · · · ·

36. példa

36. vegyület

410 mg 30. vegyületet használva a 33. példában ismertetettek szerint eljárva 188 mg 36. vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CD₃OD) δ (ppm): 6,78 (1H, d, 16,0 Hz), 6,70 (1H, dd, 10,8, 16,0 Hz), 6,42 (1H, s), 6,10 (1H, dd, 10,8, 11,4 Hz), 5,82 (1H, t, 11,4 Hz), 5,33 (1H, m), 4,98 (1H, dd, 3,1, 11,4 Hz), 4,87-4,79 (2H, m), 4,61 (1H, d, 15,1 Hz), 3,84 (1H, m), 3,67 (1H, d, 15,1 Hz), 3,07 (3H, s), 2,95 (3H, s), 2,09 (1H, m), 1,93 (1H, m), 1,45 (3H, d, 6,0 Hz).

FAB-MS m/z: 501 [M+H]⁺.

37, példa

Tabletták:

g 4. vegyületet, 40 g laktózt, 68 g kukoricakeményítőt és 10 g karboximetil-cellulóz-nátriumot összekeverünk és a keveréket 10%-os hidroxi-propilcellulóz oldat hozzáadásával összedagasztjuk. Az összedagasztott oldatot egy extrúderes granuláló gépbe helyezve granulátumokat képzünk, amelyből ezután magnézium-sztearáttal keverve tabletta készítéshez alkalmas granulátumokat kapunk. A kapott granulátumokat egy tabletta készítő gépbe helyezzük és ismert módon tablettákat készítünk, amelyek 170 mg-os tablettánként 50 mg 4. vegyületet tartalmaznak.

38. példa

Kapszulák:

g 4. vegyületet, 80 g laktózt és 58 g burgonyakeményítöt tartalmazó keveréket 10%-os hidroxipropil-cellulóz-oldat hozzáadásával összedagasztunk. Az

64.862/SM

Zi gl · -·**·»*· összedagasztott keverékeket extrudáló granulálógépbe helyezzük és granulátumokat készítünk, amelyeket magnézium-sztearáttal keverünk és kemény kapszulákba töltjük egy kapszulázó géppel. Ilyen módon kapszulákat kapunk, amely kapszulák 30 mg 4. vegyületet tartalmaznak. A kapszulák 170 mg-osak.

39. példa

Lágy kapszulák:

g 4. vegyületet 100 g szójaolajban feloldunk és az oldatot ismert módon kapszulákká injektáljuk, így 110 mg-os lágy kapszulákat kapunk, amelyek kapszulánként 10 mg 4. vegyületet tartalmaznak.

1. referencia példa

14,16-dipalmitoil-radicicol (a vegyület):

g radidicol 150 ml toluolban készült oldatát 3,3 ml piridint és 1,2 g 4dimetil-amino-piridint 0°C hőmérsékletre hütünk, 12,5 ml palmitoil-kloridot adunk hozzá cseppenként és a kapott terméket 0°C hőmérsékleten 30 percen át keverjük. A reakcióelegyet 400 ml kloroformmal hígítjuk és híg vizes sósav oldattal, telített vizes nátrium-bikarbonát oldattal és telített nátrium-klorid oldattal. Ezután vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és szilikagéles oszlopkromatográfiával tisztítjuk 4:1 arányú normál-hexán/etil-acetát elegyet alkalmazva eluensként. Ilyen módon 12 g a) vegyületet kapunk.

¹H-NMR (CDCI₃) δ (ppm): 7,52 (1H, dd, 10,3, 16,1 Hz), 7,02 (1H, s), 6,15 (1H, t, 10,3 Hz), 6,06 (1H, d, 16,1 Hz), 5,79 (1H, dd, 3,9, 10,3 Hz), 5,40 (1H, m), 4,03 (1H, d, 16,4 Hz), 3,92 (1H, d, 16,4 Hz), 3,52 (1H, m), 3,02 (1H, ddd, 2,2, 2,2, 7,8 Hz), 2,58 (2H, t, 7,6 Hz), 2,49 (2H, ddd, 1,7, 7,3, 7,3 Hz), 2,40 (1H, 3,4, 3,4, 14,7 Hz), 1,781,60 (5H, m), 1,54 (3H, d, 6,6 Hz), 1,49-1,23 (48H, m), 0,88 (6H, t, 6,8 Hz).

64.862/SM

Claims

- ...........

SZABADALMI IGÉNYPONTOK

1. (I) általános képletű radicicol-származékok - ahol R¹ és R² jelentése azonosan vagy eltérően hidrogénatom, alkanoil-, alkenoil- vagy terc-butil-dimetilszililcsoport;

(1) ha X jelentése halogénatom,

Y jelentése oxigénatom vagy R⁴-O-N általános képletű csoport, ahol R⁴ jelentése hidrogénatom vagy adott esetben hidroxil-, alkoxi-, rövidszénláncú alkanoil-oxi-, azido-, amino-, mono- vagy di-rövidszénláncú alkil-amino-, rövidszénláncú alkanoil-amino-, rövidszénláncú alkoxikarbonil-amino-, rövidszénláncú alkeniloxi-karbonil-amino-, karboxil-, rövidszénláncú alkoxikarbonil-, rövidszénláncú alkil-karbamoil- vagy ciklusos imidocsoporttal szubsztituált rövidszénláncú alkilcsoport; és

R³ jelentése hidrogénatom, alkanoil-, alkenoil- vagy -SO-Z- általános képletű csoport, ahol Z jelentése (A) általános képletű csoport, ahol X^A, R^1A és R^2A jelentése az X, R¹ és R² csoportoknál megadott; és

Y^A jelentése oxigénatom vagy R^4A-O-N általános képletű csoport, ahol R^4Ajelentése az R⁴ csoportnál megadott; és (2) ha X és R³ jelentése együtt vegyértékkötés;

Y jelentése R^4B-O-N általános képletű csoport, ahol R^4B jelentése az R⁴jelentésénél megadott és gyógyászatilag alkalmazható sóik.
2. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, ahol X jelentése halogénatom.

64.862/SM • « · · ·' . 47. ··· ·. .. .
3. Az 1. igénypont szerinti vegyületek, ahol Y jelentése R⁴-O-N általános képletü csoport, ahol R⁴ jelentése a fentiekben megadott.
4. Tirozin kináz okozta betegségek gyógyítására szolgáló terápiás szer, amely legalább egy, valamely 1-3 igénypontok szerinti vegyületet tartalmaz.

A meghatalmazott

azS.B.O.* K- Nemzetközi

Szabadalmi Iroda tagja H-1062 Budapest, Andrássy út 113. Telefon: 34-24-950, Fax: 34-24-323 '1

64.862/SM