[go: up one dir, main page]

HUT70431A - New peptide derivatives - Google Patents

New peptide derivatives Download PDF

Info

Publication number
HUT70431A
HUT70431A HU9401474A HU9401474A HUT70431A HU T70431 A HUT70431 A HU T70431A HU 9401474 A HU9401474 A HU 9401474A HU 9401474 A HU9401474 A HU 9401474A HU T70431 A HUT70431 A HU T70431A
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
cha
pro
nag
hooc
pic
Prior art date
Application number
HU9401474A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9401474D0 (en
Inventor
Ann-Catrine Elis Teger-Nilsson
Ruth Elvy Bylund
Original Assignee
Astra Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astra Ab filed Critical Astra Ab
Publication of HU9401474D0 publication Critical patent/HU9401474D0/hu
Publication of HUT70431A publication Critical patent/HUT70431A/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/06—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/12—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/022—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2
    • C07K5/0222—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -X-C(=O)-(C)n-N-C-C(=O)-Y-; X and Y being heteroatoms; n being 1 or 2 with the first amino acid being heterocyclic, e.g. Pro, Trp
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06191—Dipeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

A találmány tárgyát képezik a trombin új kompetitiv inhibitorai, az előállításukra szolgáló eljárások, a vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyászati kompozíciók, továbbá a vegyü- 2 letek antikoagulánsokkénti alkalmazása, tromboembóliás megbetegedések kezelésében és megelőzésében, úgymint vénás trombózis, tüdőembólia, artériás trombózis, különösen miokardiális infarktus és agytrombózis, általános hiperkoagulábilis állapotok és helyi hiperkoagulábilis állapotok, például érplasztikát és koszorúér bypass operációkat követő állapotok esetén.
A találmány további tárgya egy vegyület új alkalmazása szerin proteáz inhibitor szintézisének kiindulási anyagaként. A találmány tárgya továbbá egy szerin proteáz inhibitor új szerkezeti fragmense.
A vér koagulációja az a kulcsfolyamat, amely szerepet játszik mind a vérzéscsillapításban (vagyis egy sérült véredény révén fellépő vérveszteség megakadályozásában), mind pedig a trombózisban (vagyis egy véredénynek egy vérrög általi patologikus elzáródásában). A koaguláció enzimatikus reakciók komplex sorozatának eredménye, ahol az egyik végső lépés a protrombin proenzim átalakulása az aktív trombin enzimmé.
A trombin központi szerepet játszik a koagulációban. Aktiválja a vérlemezkéket, a fibrinogént átalakítja fibrin monomerekké, amelyek spontán módon filamentumokká polimerizálódnak, és aktiválja az F XIII faktort, amely viszont a polimert nem oldódó fibrinné térhálósítja. A trombin aktiválja továbbá az F V és F VIII faktorokat egy pozitív feedback reakcióban. Várható ezért, hogy a trombin inhibitorai hatékony antikoagulánsok a vérlemezkék inhibiciója, a fibrinképzés és a fibrin stabilizáció révén. Várható, hogy a trombin inhibitorok a pozitív feedback mechanizmus gátlása révén gátló hatást fejtenek ki a koagulációhoz és a trombózishoz vezető folyamatok láncolatának korai szakaszában.
Azokat a trombin inhibitorokat, amelyek a fibrinogén Aa lánc hasítási helye körül lévő aminosav szekvencián alapulnak, Blomback és munkatársai ismertették először a J. Clin. Láb. Invest. 24, Suppl. 107, 59 (1969) közleményükben, és a Phe-Val-Arg szekvenciát (P9-P2-P1, a leírásban P3-P2-P1 szekvenciaként szerepel) vélték a legjobb inhibitornak.
A 4,346,078 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban és a Peptides 1983 Walter de Gruyter & Co, Berlin, 643-647. oldalain S. Bajusz és munkatársai ismertetik a H-DPhe-Pro-Agm trombin inhibitort, egy dipeptidil származékot, amely a Pl-helyzetben amino-alkil-guanidint tartalmaz.
S. Bajusz és munkatársai arról is beszámolnak a J. Med.
Chem. 1990, 33, 1729-1735 közleményben és az EP-A-0,185,390 számú európai szabadalmi bejelentésben, hogy ha az agmatint argininaldehiddel helyettesítették, olyan trombin inhibitort nyertek, amelynek sokkal nagyobb hatása volt.
Lehetségesnek vélik, hogy ezen trombin inhibitor megnövekedett aktivitásának oka az aldehidcsoportnak az enzim aktív helyén lévő Ser-OH-val való kölcsönhatása, amely révén hemiacetál keletkezik. Nem képzelhető el, hogy azonos típusú kölcsönhatás lépne fel a H-DPhe-Pro-Agm dipeptid származékban, minthogy nincs olyan aminosavszármazéka, amelynek a Pl-helyzetben karbonilcsoportja van.
A trombin inhibitor szakterületre vonatkozó más művek olyan szerin proteázokat ismertetnek, amelyek elektrofil ketonokon alapulnak a Pl-helyzetben lévő aldehidek helyett, és e művek közé tartoznak a következők:
E.N. Shaw et al., a 4,318,904 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás, amely peptid-klór-metil-ketonokat, pl. H-DPhe-Pro-Arg-CH2Cl-t ismertet;
M. Szelke és D.M. Jones az EP-A1-0118,280 számú európai szabadalmi bejelentésben olyan vegyületeket ismertet, amelyek a fibrinogén Aa lánc P3-P2' pentapeptid szekvenciájának származékai, ahol a könnyen hasítható Ρχ-Ρι' peptidkötést egy -CO-CH2molekularésszel helyettesítették, és így a megfelelő peptidek keto-izosztéráját állították elő;
M. Kolb et al., EP-A2-0,195,212 számú európai szabadalmi bejelentés, amely peptid α-keto észtereket és amidokat ismertet;
B. Imperiali and R.H. Abeles, Biochemistry 1986, 25, 3760 peptidil-fluor-alkil-ketonokat ismertet;
Ueda et al., Biochem. J. 1990, 265, 539 peptidil-fluor-alkil-ketonokat ismertet;
D. Schirlin et al., EP-A1-0,362,002 számú európai szabadalmi bejelentés, amely fluor-alkil-amid-ketonokat ismertet;
P. Bey et al., EP-A2-0,364,344 számú európai szabadalmi bejelentés, amely α,β,δ-triketonvegyületeket ismertet.
A.D. Kettner et al. az EP A2- 0,293,881 számú európai szabadalmi bejelentésben az arginin C-terminális boronsavszármazékain és azok izotiourónium analógjain alapuló trombin inhibitorokat ismertet.
A találmány célja új és hatékony trombin-inhibitorok kidolgozása, amelyek az enzim kompeptitív inhibitorai, vagyis reverzibilis gátlást idéznek elő. A találmány további célja olyan inhibitorok kidolgozása, amelyek orális adagolás esetén is rendelkeznek biológiai aktivitással és szelektíven gátolják a trombint más szerin-proteázokkal szemben. A stabilitás, a hatás tartama, valamint a terápiás dózisok esetén csekély toxicitás a találmány további célja.
A találmány szerinti vegyületek rokonságban vannak a humán fibrinogén Aa lánc peptidszekvenciájával, módosított P9, P2 és P± alegységeket képviselve:
P9
H-Ala-Asp-Ser-Gly-Glu-Gly-Asp-Phe-Leu-AlaP2 Pl ΡΓ P2' p3’
V
-Glu-Gly-Gly-Gly-Val-Arg—Gly-Pro-Arg-ValA találmány szerint azt találtuk, hogy az (I) általános képletű vegyületek akár önmagukban akár fiziológiailag elfogadható sóik formájában, beleértve a sztereoizomereket is, a trombin hatékony inhibitorai.
Az (I) általános képletű vegyületekben
A jelentése metiléncsoport vagy
A jelentése etiléncsoport és a keletkezett öttagú gyűrű viselhet vagy nem viselhet egy vagy két fluoratomot, egy hidroxicsoportot vagy egy oxocsoportot a 4-helyzetben vagy lehet vagy nem lehet telítetlen, vagy
A jelentése -CH2-O-, -CH2-S~, -CH2-SO- képletű csoport, ahol a heteroatom a 4-helyzetben van, vagy
A jelentése n-propilén-csoport és a keletkezett hattagú gyűrű viselhet vagy nem viselhet az 5-helyzetben fluoratomot, hidroxicsoportot vagy oxocsoportot, viselhet vagy nem viselhet a 4- vagy 5-helyzetek egyikében két fluoratomot vagy lehet vagy nem lehet telítetlen a 4- és 5-helyzetben vagy viselhet vagy nem viselhet a 4-helyzetben 1-4 szénatomos alkilcsoportot, vagy
A jelentése -CH2-O-CH2-, -CH2~S-CH2- vagy -CH2-SO-CH2- képletű csoport;
R2 jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport, 2-3 szénatomos hidroxi-alkil-csoport vagy R OOC-alkil általános képletű csoport, melyben az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz és R22 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy 2-3 szénatomos alkiléncsoport intramolekulárisan alfa-helyzetben kapcsolva az R2 csoportban lévő karbonilcsoporthoz, vagy
R2 jelentése R22OOC-1,4-fenil-CH2- általános képletű csoport, ahol R22 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, vagy
R1 jelentése R22-NH-CO-alkil- általános képletű csoport, ahol az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz, és a karbonilcsoporthoz képest alfa-helyzetben szubsztituálva lehet 1-4 szénatomos alkilcsoporttal és ahol R22 jelentése hidrogénΊ n atom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy -CH2COOR-LZ‘ altalános képletű csoport, melyben R22 jelentése a fenti, vagy
R2 jelentése R22OOC-CH2-OOC-alkil- általános képletű csoport, ahol az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz és a karbonilcsoporthoz képest alfa-helyzetben szubsztituálva lehet 1-4 szénatomos alkilcsoporttal, és ahol R22 jelentése a fenti, vagy
R2 jelentése CH3SO2- csoport, vagy
R2 jelentése R22OCOCO- általános képletű csoport, melyben R22 jelentése a fenti, vagy
R4 jelentése -CH2PO (OR44 ) 2 < -CH2SO3H vagy [5-(1H)-tetrazolil] csoport, ahol R44 jelentése egyenként minden esetben hidrogénatom, metilcsoport vagy etilcsoport;
R jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy
R24OOC-alkil- általános képletű csoport, melyben az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz és szubsztituálva lehet a karbonilcsoporthoz viszonyított alfa-helyzetében, és az alfa-szubsztituens jelentese R-(CH2)p- általános képletű csoport, ahol p értéke 0, 1, 2 és R22 jelentése metilcsoport, fenilcsoport, hidroxicsoport, COOR24 általános képletű η
csoport, és R jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport;
m értéke 0, 1 vagy 2, R3 jelentése ciklohexilcsoport és R4 jelentése hidrogénatom, vagy m értéke 1 és R3 jelentése ciklohexilcsoport vagy fenilcsoport és R4 etilénhidat képez az R4 szubsztituenssel együtt, vagy m értéke 1 és mind R3 mind R4 jelentése ciklohexilcsoport vagy fenilcsoport;
R5 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport;
n értéke 2-től 6-ig terjedő egész szám; és
B jelentése -N(R^)-C(NH)-NH2 általános képletű csoport, ahol
R^ jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, vagy
B jelentése -S~C(NH)-NH2 vagy -C(NH)-NH2 képletű csoport.
Az alkilcsoportok egyenes vagy elágazó láncúak lehetnek, hacsak másképpen nem adjuk meg jelentésüket. Az 1-4 szénatomos alkilcsoportok jelentése metilcsoport, etilcsoport, n-propil-csoport, i-propil-csoport n-butil-csoport, i-butil-csoport, szek-butil-csoport és tere-butil-csoport. Ha telítetlen kötést említünk, az szén-szén kettőskötésre vonatkozik. A rövidítések jelentését a leírás végén lévő felsorolásban adjuk meg.
Egy előnyös kivitel szerint a találmány olyan (I) általános képletű vegyületekre vonatkozik, amelyekben R1 jelentése R-^OOC-alkil- általános képletű csoport, ahol az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz és R11 jelentése hidrogénatom. Azon vegyületek közül, amelyekben A jelentése etiléncsoport és jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, különösen előnyösek azok, amelyekben R5 jelentése hidrogénatom.
Az (I) általános képletű vegyületek között azok a vegyületek, amelyekben jelentése ciklohexilcsoport, m értéke 1 vagy 2, különösen 1, és jelentése hidrogénatom, egy másik előnyös alosztályt képeznek.
A vegyületek egy másik előnyös csoportját azon vegyületek alkotják, melyekben A jelentése n-propilén-csoport és a keletkezett hattagú gyűrű a 4-helyzetben viselhet vagy nem viselhet 1-4 szénatomos alkilcsoportot, és R^ jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, és ezek között is különösen előnyösek azok, amelyekben jelentése hidrogénatom.
Egy másik előnyös kivitel szerint n értéke 3.
Előnyösek azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyekben a P2-helyzetben lévő α-aminosav S-konfigurációjű, és ezen vegyületek közül azok, amelyekben a P3-helyzetben lévő a-aminosav R-konfigurációjú is, különösen előnyösek.
« «V · · » · • ·· · • · · ·
A találmány szerinti előnyös vegyületek
Példa száma
Vegyület
H-(R)Cha-Pro-Agm
Me-(R)Cha-Pro-Agm
HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm iprOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/a
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b
HOOC-(RvagyS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/a
HOOC-(RvagyS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/b
HOOC-(RvagyS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b
HOOC(R,S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-(RvagyS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/a
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm
HOOC-(RvagyS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha~Pro-Agm/b
H-(R)Cha-Pro-Nag nBu-(R)Cha-Pro-Nag
HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag 1PrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag tBuOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CH2 -OOC-CH2 Z(R) Cha-Pro-Nag ·· ·· *4 « · « ·· · · 4 ·· · • · · · « · • · · · · ·
H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (HOOC-CH2)2 -(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CH2~(nBu)(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/a
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b
Etooc-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(RvagyS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Nag/a
HOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(R,S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag
EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag
MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-(R,S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag MeOOC-(R, S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (HO)2P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
EtO(HO)P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (EtO)2P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Mag
H-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm
H-(R,S)Pro[3 -(transz)Ch]-Pro-Agm
HOOC-CH2~(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Agm
HOOC-CH2~(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-Agm
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/a
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
H-(R)Cha-Pic-Nag
Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(RvagyS)Pic-Nag/b
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-(RvagyS)Pic-Nag/c
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)-Cha-(RvagyS)Pic-Nag/d
HOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pic-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Agm
HOOC-CH2-(R)Cha-(RvagyS)Mor-Nag
H-(R)Cha-Aze-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag
H-(R)Cha-Pro[5-(S)Me]-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro[5-(S)Me]-Nag
HOOC-CH2-(R)Cha-(RvagyS)Pic(4,5-dehidro)-Nag/b
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic[4-(S)Me]-Nag
83 HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic[4- (R)Me]-Nag
84 HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag
85 H- (R)Hoc-Pro-Nag
86 HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag
87 HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag
88 HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag
89 HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag
90 HOOC-CH2-(R)Cha-Pro [5-(R,S)Me]-Nag
91 H-(R)Cha-Pic[4-(R)MeJ-Nag
92 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic [4-(R)Me]-Nag
93 HOOC-CH2(R)-Cha-Pic[6-(S)Me]-Nag E vegyületek közül különösen előnyösek a 4, 6, 9, 22, 30,
34, 59, 63, 67, 73, 80 és 82 számú példa szerinti vegyületek és a következő vegyületek a legelőnyösebbek:
30 HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag
34 HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b
67 HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag A vegyületeket összefoglaló fenti táblázatban az /a, /b, /c
és /d betűk az R vagy S jelű szénatom szerinti lényegében
tiszta sztereoizomerekre vonatkozik. A sztereoizomert mindegyik vegyület esetén a kísérleti részre vonatkoztatással azonosítjuk.
Az R,S a sztereoizomer elegyekre vonatkozik. A találmány egy további kivitele a (VIII) képletű vegyület
új felhasználására vonatkozik, miszerint e vegyületet szerin
proteáz inhibitor szintézisének és különösen trombin inhibitor szintézisének kiindulási anyagaként alkalmazzuk. Felhasználhatjuk úgy, amint van, vagy úgy, hogy egyszeres guanidinocsoport védelmet alkalmazunk a δ-nitrogénatomon vagy kétszeres védelmet alkal« « « · <· ·
V V · * • · « · • * · · mázunk a δ-nitrogénatomokon vagy a y, δ-nitrogénatomokon, előnyösen egy védőcsoporttal, úgymint benzil-oxi-karbonil-csoporttal. A noragmatin származékok védelmét a guanidinovegyületek esetén ismert eljárásokkal végezzük. Ezt a vegyületet a leírásban noragmatin-nak vagy Nag-nak nevezzük. A vegyületet korábban már ismertették, többek között haj szőkítést gyorsító szerként az 1,599,324 számú nagy-britanniai szabadalmi leírásban. Nem ismertették azonban a (IX) képletű szerkezeti részletet egy gyógyászatilag hatékony vegyület szerkezeti elemeként. Ilyen szerkezeti elemként a noragmatin fragmens értékessé tesz egy szerin proteáz inhibitort, és különösen egy trombin inhibitort.
A találmány egy további megvalósítása az emberi vagy állati szervezetben fellépő olyan állapotok kezelésére vonatkozik, amelyek esetén a trombin gátlása szükséges. A találmány szerinti vegyületek várhatóan hasznosak különösen emberi és állati szervezetben trombózis és a vérben és szövetekben fellépő fokozott véralvadékonyság kezelésére vagy megelőzésére. Várható továbbá, hogy hasznosak olyan esetekben, amikor nemkivánt trombinfelesleg lép fel a fokozott alvadékonyság jele nélkül. Azon megbetegedéses állapotok, amelyekben a vegyületek potenciálisan felhasználhatók a kezelésben és/vagy a profilaxisban, magukban foglalják a következőket: vénás trombózis, tüdőembólia, artériás trombózis, úgymint a miokardiális infarktus, instabil angina, trombózis alapú hűdés (stroke), perifériás artériás trombózis. A vegyületek továbbá várhatóan felhasználhatók atheroszklerotikus megbetegedések, úgymint coronaria artériás megbetegedések, agyi artériás megbetegedések és perifériás artériás megbetegedések megelőzésében. Továbbá a vegyületek trombolitikumokkal együtt várhatóan
V » · V fr · «····« • · · · · · jól felhasználhatók trombózisos megbetegedések, különösen miokardiális infarktus esetén. A vegyületek továbbá várhatóan hasznosak a trombolízis, percutan transzluminális érplasztika (PTCA) és koszorúér bypass operációkat követő újraelzáródás megelőzésében. A vegyületek várhatóan hasznosak továbbá a mikrosebészeti eljárások utáni retrombózis megelőzésében is. A vegyületek továbbá várhatóan hasznosak a mesterséges szervekkel és szívbillenytűkkel összefüggő beavatkozásokkal kapcsolatos antikoaguláns kezelésben. A vegyületek várhatóan hasznosak továbbá a hemodialízis és a disszeminált intravaszkuláris koaguláció esetén végzett antikoaguláns kezelésben.
A találmány szerinti vegyületeket várhatóak felhasználhatjuk továbbá in vivő körülények között a pácienseknél alkalmazott katéterek és mechanikai eszközök öblítésére, továbbá in vitro körülmények között antikoagulánsként vér, plazma és más vérkészítmények tartósítására.
A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületeket szokásos módon orális, rektális, dermális, nazális vagy parenterális úton adagoljuk olyan gyógyszerkészítmények formájában, amelyek a hatóanyagot vagy szabad bázis vagy valamely gyógyszerészetileg elfogadható, nem toxikus savaddíciós só, például hidroklorid, hidrobromid, laktát, acetát, citrát, p-toluol-szulfonát, trifluor-acetát és hasonlók formájában gyógyszerészetileg elfogadható adagolási formában tartalmazzák.
Az adagolási forma lehet szilárd, félszilárd vagy folyékony preparátum, amelyeket önmagukban ismert eljárásokkal készítünk. A hatóanyag - szokás szerint - a készítményt 0,1 és 0,99 tömeg% közötti arányban alkotja, különösen 0,1-50 tömeg%-át parenterális adagolási mód esetén és 0,2-75 tömeg%-át orális adagolásra alkalmas készítmények esetén.
A találmány szerinti vegyületek alkalmas napi dózisai humán terápiás kezelés esetén körülbelül 0,001-100 mg/testtömeg kg perorális adagolás esetén és 0,001-50 mg/testtömeg kg parenterális adagolási mód esetén.
A találmány további tárgya a találmány szerinti vegyületek előállítási eljárása. Az (I) általános képletű vegyűleteket úgy állíthatjuk elő, hogy egy N-terminálisán védett aminosavat vagy dipeptidet vagy előzetesen előállított N-terminálisán alkilezett védett dipeptidet valamely (X) általános képletű vegyülethez kapcsolunk, ahol a (X) általános képletben n értéke az (I) általános képletnél megadott és X jelentése nemvédett vagy védett guanidinocsoport vagy védett aminocsoport vagy egy olyan csoport, amely aminocsoporttá átalakítható, ahol az aminocsoportot majd guanidinocsoporttá átalakítjuk.
A kapcsolást az alábbi módszerek valamelyike szerint végezzük:
I. módszer
Valamely - standard peptidkapcsolással előállított - N-terminálisan védett dipeptidet standard peptidkapcsolással kapcsolunk, az 1. reakcióvázlat szerint egy védett vagy nem védett amino-guanidinnal vagy egyenesláncú alkil-aminnal, amely az alkillánc terminális végén védett vagy maszkírozott aminocsoportot visel, ahol R3 , R4, R5, n, m és A jelentése.az (I) általános képletnél megadott, R^ jelentése hidrogénatom vagy alkilcsoport, W-]_ jelentése aminovédő-csoport, úgymint tere-butoxi-karbonil- és benzil-oxi-karbonil-csoport és X jelentése -NH-C(NH)NH2, * ·
-NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH~W2 vagy -NH~W2 általános képletű csoport, ahol W2 jelentése aminovédő-csöpört, úgymint terc-butoxi-karbonil- vagy benzil-oxi-karbonil-csoport vagy X jelentése maszkírozott aminocsoport, úgymint azidcsoport, így a védett peptidet kapjuk meg. A végtermékeket az alkalmazott X csoport természetétől függően a következőkben megadott utak bármelyike szerint előállíthatjuk: eltávolítjuk a védőcsoporto(ka)t (ha X jelentése -NH-C(NH)NH2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2 vagy -NH-C(NH)NH-W2 csoport), vagy szelektíven eltávolítjuk a W4 csoportot (például ha X jelentése -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2 csoport, a W2“nek ebben az esetben ortogonális helyzetben kell lennie a W]_-hez viszonyítva), ezt követően alkilezzük az N-terminális nitrogént és a terminális alkil-amino funkció védőcsoportját eltávolítjuk vagy szelektíven eltávolítjuk a védőcsoportot/megszüntetjük a maszkírozást (X jelentése NH-W2, W2-nek ebben az esetben ortogonálisnak kell lennie W]_-hez képest vagy X jelentése maszkírozott aminocsoport, úgymint azidcsoport), majd standard eljárások alkalmazásával elvégezzük a szabad amin guanidálását, és eltávolítjuk a -csoportot.
II. módszer.
Valamely - standard eljárással előállított - N-terminálisán védett aminosavat standard peptidkapcsolással kapcsolunk, a 2. reakcióvázlat szerint, egy védett vagy nem védett amino-guanidinnal vagy egyenesláncú alkil-aminnal, amely az alkillánc terminális végén védett vagy maszkírozott aminocsoportot visel, ahol W4, A, R8 és X jelentése a fenti, majd eltávolítjuk a Wj-csoportot, és kapcsolást végzünk az N-terminális aminosavval, védett formában, igy az I. vagy III. módszerben leírt védett peptidet kapjuk attól függően, hogy milyen szubsztitúció van a kapcsolásban felhasznált N-terminális aminosav nitrogénatomján. A szintézist ezt követően az I. vagy III. módszer szerint folytatjuk, így kapjuk meg a végtermék peptidet.
III. módszer
Valamely előzetesen kialakított N-terminálisán alkilezett és védett dipeptidet - melyet standard peptidkapcsolással állítottunk elő - standard peptidkapcsolással kapcsolunk, a 3. reakcióvázlat szerint, egy védett vagy nem védett amino-guanidinnal vagy egyenesláncú alkil-aminnal, amely az alkillánc terminális végén védett vagy maszkírozott aminocsoportot visel, ahol R2, R2 , R4 , R5, n, m, A és X jelentése a fentiekben megadott, feltéve, hogy R2 jelentése hidrogénatomtól eltérő és W3 jelentése acil védőcsoport, úgymint trifluor-acil-csoport.
A végtermékeket az alkalmazott X csoport természetétől függően a következőkben megadott utak bármelyike szerint előállíthatjuk: eltávolítjuk a védőcsoportokat (ha X jelentése -NH-C(NH)NH2, -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)~C(NH)NH~W2, -NH~C(NW2)NH~W2 vagy -NH-W2 csoport), vagy a terminális alkil-amino funkción vagy szelektíven eltávolítjuk a védőcsoportot/megszüntetjük a maszkírozást (X jelentése maszkírozott aminocsoport, úgymint azidcsoport) , majd guanidálunk és eltávolítjuk a W3 védőcsoportot.
A következő leírás a találmány bemutatását szolgálja.
Kísérleti rész
A találmány szerinti vegyületek szintézisét az I-VI szintézisvázlatok mutatják be.
Általános kísérleti eljárások
A NMR és 13C NMR méréseket Bruker AC-P 300 és Bruker AM 500 típusú spektrométerekkel végeztük, az előbbi 500,14 MHz ^H frekvencián és 125,76 MHz 13C frekvencián, az utóbbi 300,13MHz frekvencián és 76,46 MHz 13C-frekvencián működik.
A mintákat úgy készítettük, hogy 10-50 mg anyagot oldottunk 0,6 ml oldószerben, amely oldószer a következők bármelyike lehet: CDCI3 (izotópos tisztaság > 99,8%, Dr Glaser AG, Basel), CD3OD (izotópos tisztaság > 99,95%, Dr. Glaser AG, Basel) vagy D20 (izotópos tisztaság > 99,98%, Dr. Glaser AG, Basel).
A CDCI3 és CD3OD oldószerekkel mért 1H és 13C kémiai eltolódás értékeket tetrametil-szilánhoz mint külső standardhoz viszonyítottuk. A D20-ban mért ^H kémiai eltolódásokat a 3-(trimetil-szilil)-d4-propánsavhoz és a D2O-ban mért 13C kémiai eltolódásokat az 1,4-dioxánhoz mint referenciához (67,3 ppm) viszonyítottuk, mindkettőt külső standardként használtuk. A külső standarddal végzett kalibrálás kisebb eltolódási differenciákat okozhat a belső standarddal végzett kalibráláshoz viszonyítva, a kémiai eltolódásokban jelentkező differencia azonban ÍH eltolódásnál 0,02 ppm-nél, a ^-^C-eltolódásnál pedig 0,1 ppm-nél kisebb.
A prolincsoportot tartalmazó peptidszekvenciák 1H NMR-spektruma gyakran két rezonanciacsoportot mutat. Ez a közreható konformerek létezésének felel meg, az amidkötés körüli rotációra tekintettel, ahol a prolin az amidkötés N-része. A konformereket cisz és transz vegyületeknek nevezzük. A találmány szerinti vegyületekben az (R)Cha-Pro- és az -(R)Cha-Pic- szekvenciák gyakran hoznak létre cisz-transz egyensúlyt egy konformerrel • ·
- 19 túlsúlyban lévő konformerként (>90%). Ezekben az esetekben csak a nagyobb mennyiségű rotamer kémiai eltolódás adatait adjuk meg.
A vékonyréteg-kromatográfiás meghatározásokat kereskedelmi forgalomban kapható Merek Silicagel 6OF254 bevonatú üveg vagy alumínium lemezeken végeztünk. A foltokat úgy tettük láthatóvá, hogy kombináltuk az UV-fény alkalmazását az azt követő permetezéssel, ahol a permetezést olyan oldattal végeztük, amelyet 372 ml 95%-os EtOH, 13,8 ml koncentrált H2SO4, 4,2 ml koncentrált ecetsav és 10,2 ml p-metoxi-benzaldehid vagy foszfomolibdénsav reagens (5-10 tömeg% 95% EtOH-ban) elegyítésével állítottunk elő, valamint a hevítést.
Flash kromatográfiát Merek Silicagel 60-on (40-63 mm, 230400 mesh), N2-nyomás alatt végeztünk.
Fordított fázisú nagyteljesítményű folyadékkromatográfiát (a példákban RPLC-vel jelöljük) Waters M-590 készülékkel végeztünk, amely három fordított fázisú Kromasil 100, C8 oszloppal (EkaNobel) van felszerelve, és az oszlopok különböző méretűek analitikai (4,6 mm x 250 mm), félpreparatív (25,4 mm x 250 mm) és preparatív (50,8 mm x 500 mm) kromatográfiás célokra, és 260 mmnél detektáltunk.
A fagyasztva szárítást Leybold-Heraeus, Lynovac GT2 típusú készülékkel végeztünk.
Védőcsoport beviteli eljárások
Boc-(R)Cha-OH
21,55 g (125,8 mmol) H-(R)Cha-OH-t 130 ml 1M NaOH-ban és 65 ml THF-ben oldunk, és az oldathoz 30 g (137,5 mmol) Boc20-t adunk, majd az elegyet 4,5 órán át keverjük szobahőmérsékleten.
A THF-et lepároljuk és további 150 ml vizet adunk az elegyhez. A lúgos vizes fázist kétszer mossuk EtOAc-tal, majd 2M KHSO4-oldattal megsavanyítjuk és 3 x 150 ml EtOAc-tal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel és sóoldattal mossuk, majd szárítjuk (Na2SO4). Az oldószert lepároljuk és 30,9 g (90,5%) címbeli vegyületet kapunk fehér szilárd anyag formájában.
Z-(R)Cha-OH
A Bodanszky M. and Bodanszky A. The Practice of Peptide Synthesis, Springer Verlag, 1984, 12. oldalán ismertetett eljárást alkalmazzuk, kiindulási anyagként H-(R)Cha-OH-t használunk .
Boc-(Me)Phe-OH
Ugyanúgy állítjuk elő mint a Boc-(R)Cha-OH-t, kiindulási anyagként Me-(R)Phe-OH-t használunk.
Boc-(R,S)Pro [3-(transz)Ph]-OH
H-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-OH x HCl-t a J. Org. Chem., 55, 270-275 (1990) és a J. Org. Chem., 39, 1710-1716 (1974) közleményekben leírtak szerint állítunk elő. A vegyület 2,0 g-jából (8,8 nunol? 1 ekv. ) , továbbá 17,6 ml IN NaOH-ból, 12 ml vízből és 12 ml THF—bői oldatot készítünk, melyet erélyesen keverünk és keverés közben +5°C-on hozzáadunk 2,33 g (10,7 mmol,
1,2 ekv.) (Boc)20-t. Hagyjuk, hogy a reakcióelegy szobahőmérsékletre felmelegedjék, és a keverést további 18 órán át folytatjuk. A szerves oldószert lepároljuk, és a maradékhoz 50 ml vizet adunk. A lúgos vizes fázist 2 x 50 ml EtOAc-tal mossuk, és kb. pH = 1 értékig megsavanyítjuk 2M KHSO4 oldattal. A savas vizes fázist 4 x 75 ml EtOAc-tal extraháljuk és az egyesített szerves fázist 1 x 40 ml vízzel és 1 x 40 ml sóoldattal mossuk, majd
MgSO^-on szárítjuk. Az oldószer bepárlása után 2,0 g (78%) tiszta terméket kapunk fehér szilárd anyagként.
l-H-NMR (CDCI3, 500 MHz, két rotamer elegye): δ 1,4 és 1,5 (2s, 9H), 2,0-2,1 (m, IH), 2,3-2,4 (m, IH), 3,45-3,88 (m, 3H), 4,3 és
4,45 (2d, IH) , 7,2-7,4 (m, 5H) .
Boc-(R,S)Pro(3-Ph)-OH
Az előbbiek szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként a H-(R,S)Pro(3-Ph)-OH cisz/transz izomer elegyét használjuk.
Boc-(R)Dph-OH
A K. Hsich et al., J. Med. Chem., 32, 898 (1989) közleményben ismertetett eljárás szerint állítjuk elő H-(R)Dph-OH-ból.
Boc-(R)Hop-OH
Ugyanúgy állítjuk elő, amint azt a Boc-(R)Cha-OH esetére leírtuk, kiindulási anyagként H-(R)Hop-OH-t használunk. 1H-NMR (300 MHz, CDCI3): δ 1,45 (s, 9H), 2,00 (m, IH), 2,22 (m,
IH), 2,75 (bt, 2H), 4,36 (bs, IH), 5,05 (bs, IH), 7.15-7,33 (m,
5H) .
Védőcsoport eltávolítási eljárások (a) A védett peptidet 95%-os EtOH-ban oldjuk és 5% Pd/aktívszén katalizátor, alkalmazásával hidrogénezzük atmoszférikus nyomáson feleslegben lévő TFA vagy HOAc (>2 ekv.) jelenlétében körülbelül 1-4 órán át. A katalizátort leszűrjük, az oldószert elpároljuk, a maradékot fagyasztva szárítjuk (H2O), és a peptid végterméket (TFA vagy HOAc só formájában) fehér por alakjában elkülönítj ük.
(b) Mindenben az (a) pontban leírtak szerint járunk el azzal az eltéréssel, hogy körülbelül 5:1 arányú EtOH/H2O elegyet használunk oldószerként.
(c) Mindenben az (a) pontban leírtak szerint járunk el, de oldószerként MeOH-t használunk.
(d) Mindenben az (a) pontban leírtak szerint járunk el, de savként 2M HCl-t használunk, és így HCl-sót kapunk.
(e) Az észtereket hidrolizáljuk, erre példa a következő:
0,4 mmol EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag x 2 HOAc-ot 1,5 ml
MeOH-ban oldunk, és 1,2 ml (1,2 mmol) 1M NaOH oldatot adunk hozzá szobahőmérsékleten. Három óra múlva bepároljuk a metanolt, és feleslegben lévő HOAc-ot adunk a maradékhoz, majd az elegyet fagyasztva szárítjuk és RPLC-vel [CHgCN/O.lM NH^OAc (70/30 arány)] tisztítjuk. A kapott anyagot vízből fagyasztva szárítjuk, így nyerjük a tiszta terméket 73%-os hozammal.
(f) Terc-butil-észterek lehasítása, melyre illusztratív példa a következő:
A terc-butil-észtert feleslegben lévő TFA-ban oldjuk. Az elegyet 2 órán át keverjük szobahőmérsékleten, majd a TFA-t bepároljuk. A tisztítást úgy végezzük, hogy az anyagot aktívszénnel kezeljük víz-etanol elegyben, majd vízből fagyasztva szárítjuk, és megkapjuk a kívánt vegyületeket.
A kiindulási anyagok előállítása
H-Pic-QEtxHCl
4,0 g (0,031 mól) L-pipekolinsavat 100 ml absz. etanolban szuszpendálunk és sósavgázt buborékoltatunk át rövid ideig a szuszpenzión addig, amíg tiszta oldatot kapunk. Az oldatot jégfürdőben lehűtjük, és 17 ml tionil-kloridot adunk hozzá cseppenként, 15 perc alatt. A jégfürdőt eltávolítjuk, és az elegyet visszafolyóhűtő alatt forraljuk 2,5 órán át. Az oldószert elpá roljuk, és a terméket hidroklorid sója formájában kvantitatív hozammal nyerjük ki.
1H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,33 (t, 3H), 1,8-2,1 (m, 5H), 2,3-2,5 (m, 1H), 3,1-3,3 (m, 1H), 3,5-3,7 (m, 1H), 4,14 (dd, 1H), 4,44 (q, 2H) .
H-Pic-QMexHCl
Ugyanúgy állítjuk elő, mint a H-Pic-OEtxHCl sót, de EtOH helyett MeOH-t használunk.
H-Aze-OEtxHCl
Ugyanúgy állítjuk elő, mint a H-Pic-OEtxHCl-t, kiindulási anyagként H-Aze-OH-t használunk.
H-Pic[4-(S)Me]-OEtxHCl
Ugyanúgy állítjuk elő, mint a H-Pic-OEtxHCl-t, kiindulási anyagként H-Pic[4-(S)Me]-OH-t használunk, amit a Synthelec (Lund, Svédország) cégtől szerzünk be.
H-(R)Pic[4- (R)Mel-OEt-xHCl
Ugyanúgy állítjuk elő, mint a H-Pic-OEtxHCl-t, kiindulási anyagként H-(R)Pic[4-(R)Me]-OH-t használunk, amit a Synthelec (Lund, Svédország) cégtől szerzünk be.
H-(R)Dph-QH
Az A. Evans et al., JACS, 112, 4011 (1990) közleményben ismertetett általános eljárás szerint állítjuk elő.
H-(R,S)Pic(4,5-dehidro)-OEt
H-(R,S) Pic(4,5-dehidro)-OH-t állítunk elő a Burgstahler et al., J. Org. Chem., 35, 4, pp. 489-492 (1960) közleményben ismertetett eljárással. Az anyag 3,05 g-ját (18,1 mmol) 75 ml telített EtOH/HCl oldatban oldjuk, és az elegyet visszafolyóhűtő alatt forraljuk 5 órán át. Az oldószert lepároljuk, és a mara24 dékot vízben oldjuk, vizes nátrium-hidroxid oldattal meglúgosítjuk, és háromszor extraháljuk etil-acetáttal, szárítjuk (Na2SO4) és óvatosan bepároljuk az oldatot, így 2,05 g (71%) címbeli vegyületet kapunk.
1H-NMR (CDC13) : δ 1,28 (t, 3H) , 1,88 (bs, NH) , 2,2-2,4 (m, 2H) , 3,45 (bs, 2H) , 3,57 (dd, 1H) , 4,21 (q, 2H) , 5,68-5,82 (m, 2H) .
Boc-(R)Cgl-OH
Boc-(R) Pgl-OH-t hidrogénezünk 5% Rh/Al2C>3 katalizátor jelenlétében MeOH-ban 5 Mpa nyomáson. Az oldatot szűrjük, és az oldószert bepároljuk, igy megkapjuk a címbeli vegyületet, melyet további tisztítás nélkül használhatunk fel.
1H-NMR (300 MHz, CDC13): δ 0,9-1,7 (m, 20H), 4,0-4,2 (m, 1H), 5,2 (d, 1H).
Boc-(R)Dch-OH
0,75 (2,2 mmol) Boc-(R)Dph-OH-t 25 ml MeOH-ban oldunk, és katalitikus mennyiségű 5% Rh/Al2O3~at adunk hozzá. Az elegyet 5 Mpa nyomáson, 50°C-on 40 órán át hidrogénezzük, szűrjük és bepároljuk, így 0,72 g (93%) címbeli vegyületet kapunk. 1H-NMR (CDCI3): δ 0,9-2,0 (m, 32H), abból 1,45 (bs, 9H), 4,55 (bd) és 4,9 (bd) ; két rotamer összegezve összesen 1H, 5,7-6,1 (széles, NH) .
H-(R)Pro[5-(S)MeJ-QMe
A B. Gopalan et al. , J. Org. Chem. 51, 2405 (1986) közleményben leirt eljárással állítjuk elő.
H-Mor-OH
A K. Nakajima, et al., Bull. Chem. Soc. Jpn. 51 (5), 1577
-1578 (1978) és Ibid. 60, 2963-2965 (1987) közleményekben leírt módszerrel állítjuk elő.
H-Mor-QEtxHCl
Ugyanúgy állítjuk elő, mint a H-Pic-OEtxHCl-t, kiindulási anyagként H-Mor-OH-t használunk.
Boc-(R)Cha-OSu ekv. Boc-(R)Cha-OH-t, 1,1 ekv. HOSu-t és 1,1 ekv. DCC-t vagy CME-CDI-t feloldunk acetonitrilben, melynek mennyisége körülbelül 2,5 ml/mmol sav, és egy éjjelen át szobahőmérsékleten keverjük. A reakció folyamán keletkezett csapadékot leszűrjük, az oldószert lepároljuk és a terméket vákuumban szárítjuk. (Ha CME-CDl-t használunk a reakcióban, a CH^CN lepárlása utáni maradékot EtOAc-ban oldjuk, és a szerves fázist vízzel mossuk, majd szárítjuk.) Az oldószer lepárlása után a tiszta címbeli vegyületet kapj uk.
1H-NMR (500 MHz, CDCI3, 2 rotamer kb: 1:1 arány) δ 0,85-1,1 (m, 2H) , 1,1-1,48 (m, 4H) , 1,5-1,98 (m, 16H; abból 1,55 (bs, 9H) ,
2,82 (bs, 4H) , 4Z72 (bs, 1H, több rotamer), 4^85 (bs, 1H, kevesebb).
Boc-(Me)(R)Cha-Su (i) Boc-(Me)(R)Cha-OH
11,9 g (42,6 mmol) Boc-(Me)(R)Phe-OH 150 ml MeOH-val készített oldatát 5% Rh/A12C>3 jelenlétében 0,28 Mpa nyomáson 24 órán át hidrogénezzük. A katalizátort leszűrjük és az oldószert lepároljuk, így fehér szilárd anyagként (95%-os hozammal) kapjuk meg a terméket, melyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő lépésben.
2H-NMR (500 MHz, CDCI3, két rotamer elegye kb: 1/1): δ 0,8-1,1 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 20H, abból 1,47 és 1,45 (s, 9H), 2,82 és
2,79 (s, összesen 3H), 4,88 és 4,67 (m, összesen 1H).
(ii) Boc-(ME)(R)Cha-OSu
Ugyanúgy állítjuk elő, amint azt a Boc-(R)Cha-OSu esetére leírtuk, kiindulási anyagként Boc-(Me)(R)Cha-OH-t használunk.
Boc-(R)Cha-Pro-QSu (i) Boc-(R)Cha-Pro-OH
680 mmol H-(S)Pro-OH-t oldunk 750 ml 0,87 molos nátrium-hidroxid oldatban. Ehhez 375 ml DMF-ben oldott 170 mmol Boc-(R)Cha-OSu oldatát adjuk cseppenként 20 perc alatt. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük. Az elegyet 2M KHS04-oldattal megsavanyítjuk, és háromszor extraháljuk etilacetáttal. Egyesítjük a szerves fázisokat, majd háromszor mossuk vízzel és egyszer sóoldattal. Nátrium-szulfáton megszárítjuk, és lepároljuk az oldószert, a szirupszerű olajat dietil-éterben oldjuk, az oldószert lepároljuk, majd végül a terméket vákuumban szárítjuk, így nyerjük a Boc-(R)Cha-Pro-OH-t fehér por alakjában, majdnem kvantitatív hozammal.
1H-NMR (500 MHz, CDCI3, kevesebb rotamer 10%) δ 0,8-1,05 (m, 2H) ,
1,05 -1,55 [m, 15H; abból 1,5 (bs, 9H)], 1,55-1,8 (m, 5H), 1,8-
2,15 (m, 3H) , 2,47 (m, 1H) , 3,48 (m, 1H) , 3,89 (m , 1H), 4,55 (m
2H) , 5,06 (m, 1H) ; a kevesebb rotamer jelei 2,27 (m, 1H), 3,58
(m, 1H) , 4,33 (m, 1H) , 5,0 ’(m, 1H) .
(ii) Boc-(R)Cha-Pro-OSu
A Boc-(R)Cha-OSu esetére leirt eljárással állítjuk elő
Boc-(R)Cha-Pro-OH kiiindulási anyagból.
^H NMR (500 MHz, CDCI3, 2 rotamer, 5:1 arány) δ 0,78-1,05 (m,
2H) , 1,05- 1,83 (m, 20H; abból 1,43 (bs, 9H) , 1,83-2,26 (m, 3H) ,
2,32 (m, 1H), 2,72-2,9 (m, 4H), 3,2 (m, 1H, kevesebb rotamer),
3,52 (m, 1H, több), 3,68 (m, 1H, kevesebb rotamer), 3,89 (m, 1H, több), 4,31 (bq, 1H, kevesebb rotamer), 4,56 (bq, 1H, több), 4,71 (bt, 1H, több rotamer), 4,93 (bt, 1H, kevesebb)/5,22 (bd, 1H, több rotamer), 5,44 (bd, 1H, kevesebb).
Z-(R)Cha-Pro-OSu
Ugyanúgy állítjuk elő mint a Boc-(R) Cha-Pro-OSu-1, kiindulási anyagként Z-(R)Cha-OH-t használunk.
Boc-(R)Cha-Pic-OSu (i) Boc-(R)Cha-Pic-OEt
6,3 g (0,023 mól) Boc-(R) Cha-OH-t 150 ml CH2Cl2-ben oldunk. Az oldatot jégfürdőben lehűtjük, és 6,3 g (0,047 mól) N-hidroxi-benzotriazolt és 11,2 g (0,0265 mól) CME-CDI-t adunk hozzá. A jégfürdőt 15 perc múlva eltávolítjuk, és a reakcióelegyet órán át keverjük szobahőmérsékleten. Az oldószert lepároljuk és a maradékot 150 ml DMF-ben oldjuk, majd jégfürdőben lehűtjük.
4,1 g (0,021 mól) H-Pic-OEtxHCl-t adunk hozzá és a pH-t körülbelül 9-re állítjuk be N-metil-morfolin hozzáadásával. A jégfürfőt 15 perc múlva eltávolítjuk, és a reakcióelegyet három napon át keverjük. Az oldószert lepároljuk és a maradékot etil-acetátban oldjuk, majd hígított vizes KHS04-oldattal, vizes NaHCO^-oldattal és vízzel.mossuk. A szerves fázist Na2S04-on szárítjuk és lepároljuk, így 7,7 g (89%) Boc-(R)Cha-Pic-OEt-et kapunk, melyet további tisztítás nélkül használunk fel.
1H-NMR (500 MHz, CDCl^, 2 rotamer, 3:1 arány) δ 0,7-1,0 (m, 2H) ,
1,1-1,9 (m, 29H; abból 1, ,28 (t, 3H) , 1,45 (bs, 9H), 2,01 (bd,
több rotamer), 2 ,31 (bd, 1H), 2, ,88 (bt, 1H, kevesebb), 3, 30 (
1H, több), 3 , 80 (bd, 1H, több), 4,15-4,3 (m, 2H), 4,5-4,7 (m,
kevesebb), 4,77 (bq, 1H, több), 4,90 (bd, 1H, kevesebb), 5,28
(bd, 1H, több), 5,33 (bd, 1H, több).
(ii) Boc-(R)Cha-Pic-OH
5,6 g (0,014 mól) Boc-(R)Cha-Pic-OEt-et 100 ml THF-fel, 100 ml vízzel és 7 g LiOH-val elegyítünk. Az elegyet szobahőmérsék- leten keverjük egy éjjelen át. A THF-et lepároljuk és a vizes oldatot vizes KHSO^-oldattal megsavanyítjuk, majd háromszor extraháljuk etil-acetáttal. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, Na2S04-on szárítjuk, majd bepároljuk, így 4,9 g (94%) Boc-(R)Cha-Pic-OH-t kapunk, melyet további tiszítás nélkül használunk fel. A vegyületet diizopropil-éter/hexán elegyből kristályosíthatj uk.
1H-NMR (500 MHz, CDC1
2H) , 1,1-2,1 (m, 27H;
9H, kevesebb) , 2 , 33 (
1H, több), 3, 85 (bd,
1H, kevesebb) , 4 ,77 (
1H, (bd, f
1H, több), 5,56 2, 2 rotamer, 3,5:1 arány) δ 0,8-1,1 (m, abból 1,43 (s, 9H, több rotamer), több), 4,57 (bd, 1H, kevesebb) (m,
1,46 (s,
3,33 (bt, , 4,68 (m,
1H, több), 5,03 (bs,
1H, több) .
(iii) Boc-(R)Cha-Pic-OSu g (2,6 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH-t 15 ml
DMF-ben oldunk szobahőmérsékleten, majd az oldatot -18°C-ra hűtjük le és ezen a hőmérsékleten tartjuk a reakciókomponensek adagolása alatt. 0,6 g (5,2 mmol) hidroxi-szukcinimidet adunk hozzá és a reakcióelegyet néhány percig keverjük, amíg feloldódnak a kristályok. 0,56 g (2,7 mmol) diciklohexil-karbodiimidet 10 ml DMF-ben oldunk és előhűtünk, majd cseppenként hozzáadjuk a reakcióelegyhez. A reakcióelegyet néhány percig -18°C~on tartjuk, majd 20°C-os vízfürdőbe helyezzük és 2 órán át keverjük. Az oldószert lepároljuk, 40 ml etil-acetátot adunk a maradékhoz és a kivált karbamidot szűréssel eltávolítjuk. A szerves fázist a következők sze29 rint mossuk: egyszer vízzel, kétszer 0,3M KHSO^-oldattal, kétszer híg NaHCO^-mal, egyszer vízzel, egyszer sóoldattal, majd Na2SO4on szárítjuk. Az oldószert lepároljuk és a terméket vákuumban szárítjuk, így 1,16 g (93%) terméket kapunk. Az 4H-NMR mérések szerint az anyag két diasztereomert tartalmaz (epimerek a Pic molekularészben, S/R), ezek aránya 95/5.
4H-NMR (300 MHz, CDCl^, nagyobb mennyiségű diasztereomer) δ 0,7-2,0 (m, 27H; abból 1,46 (bs, 9H), 2,29 (bd, 1H), 2,85 (bs, 4H),
3,40 (m, 1H), 4,5-4,8 (m, 1H), 5,1-5,4 (m, 1H), 5,70 (bd, 1H, nagyobb mennyiségű) .
Boc-(R)Cha-Mor-QSu
Úgy állítjuk elő mint a Boc-(R)Cha-Pic-OSu-t, kiindulási anyagként H-Mor-OEtxHCl-t használunk, azzal az eltéréssel azonban, hogy oldószerként CH^CN-t használunk DMF helyett az
Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu
Úgy állítjuk elő mint a Boc-(R)Cha-Pro-OSu-t, kiindulási anyagként Boc-(Me)(R)Cha-OH-t használunk.
Boc-(Me)(R)Cha-Pic-OSu
Úgy állítjuk elő mint a Boc-(R)Cha-Pic-OSu-t, kiindulási anyagként Boc-(Me)(R)Cha-OH-t használunk.
Úgy állítjuk elő mint a Boc-(R)Cha-Pro-OSu-t, kiindulási anyagként Boc-(R,S)Pro(3-Ph)-OH-t használunk.
1,0 g (3,43 mmol, 1 ekv.) Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-OH-1,
1,04 g (4,29 mmol, 1,25 ekv.) H-Pro-OBnxHCl-t és 0,04 g (0,24 mmol, 0,07 ekv.) HOBt-t 15 ml DMF-ben szuszpendálunk és szobahőmérsékleten hozzáadunk 1,83 g ( 4,29 mmol, 1,25 ekv.) CME-CDI-t és 0,525 ml (4,73 mmol, 1,38 ekv.) NMM-et. További 4 napig keverjük, majd az oldószert lepároljuk és a maradékot 200 ml EtOAc-ban felvesszük. A szerves fázist 2x40 ml vízzel, 2x25 ml 1M KHSO4-gyel, 2x25 ml 1M NaOH-val és 2x25 ml vízzel mossuk és MgS04-on szárítjuk. Az oldószert lepároljuk, a maradékot flash kromatográfiával tisztítjuk (CH2C12/MeOH : 97/3), így a tiszta terméket 44%-os hozammal kapjuk a diasztereomerek mintegy 1:1 arányú elegyeként.
(ii) Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-OH
Az előző lépésben kapott vegyület benzil-észter-csoportját hidrogénezéssel távolítjuk el, a hidrogénezést 5% Pd/aktívszén katalizátor jelenlétében EtOH oldószerben, atmoszférikus nyomáson, 4 órán át végezzük. Az elegyet szűrjük és bepároljuk, így tiszta terméket kapunk mintegy 1:1 arányú diasztereomer elegyként, kvantitatív hozammal.
^H-NMR (CDCI3, 500 MHz, két diasztereomer, mindkettő két rotamerből áll): δ 1,3-2,4 (m + 4s a Boc csoportokból összesen 14H), 2,5-2,9 (mz összesen 1H), 3,2-3,9 (m, összesen 5H), 4,3-
4,65 (m, összesen 2H), 7,2-7,5 (m, 5H).
(iii) Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-OSu
A Boc-(R)Cha-OSu előállítására leírt eljárást szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-OH-t használunk.
Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ch]-Pro-OSu (i) Boc-(R,S)Pro[3 -(transz)Ch]-Pro-OH
Boc-(R,S)Pro[3 -(transz)Ph]- Pro-OH-1 hidrogénezünk 5% Rh/A12O3 ·· ·· ♦♦ * * «··«··«« · • ·· · · · • * · · · · katalizátor jelenlétében metanolban, kis mennyiségű HOAc-cal együtt, 7 napon át 0,34 Mpa nyomáson. A katalizátort leszűrjük, lepároljuk az oldószert és a maradékot flash kromatografáljuk (CH2C12/MeOH : 94/6), így a terméket szilárd fehér anyagként kapjuk, amely két diasztereomer elegye.
(ii) Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ch]-Pro-OSu
A Boc-(R)Cha-OSu előállítására leírt eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ch]-Pro-OH-t használunk.
Boc-(R)Hoc-Pro-OH (i) Boc-(R)Hoc-OH
3,2 (11,46 mmol) Boc-(R)Hop-OH-t feloldunk 75 ml metanolban.
0,5 g katalizátort - aktivált alumínium-oxid hordozós ródiumot (Rh/A12Ű3) - adunk hozzá és az elegyet hidrogén atmoszférában keverjük 0,41 MPa nyomáson 18 órán át. A katalizátort celiten keresztül leszűrjük, majd az oldószert lepároljuk és a terméket majdnem kvantitatív hozammal kapjuk meg.
1H NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,90 (m, 2H), 1,08-1,33 (m, 6H), 1,43 (s, 9H) , 1,60-1,74 (m, 6H) , 1,88 (bs, 1H) , 4,27 (bs, 1H) .
(ii) Boc-(R)Hoc-OSu
A Boc-(R)Cha-OSu előállítására ismertetett eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként Boc-(R)Hoc-OH-t használunk.
(iii) Boc- (R)Hoc-Pro-OH
Úgy állítjuk elő mint a Boc-(R)Cha-Pro-OH-t, kiindulási anyagként Boc-(R)Hoc-OSu-t használunk.
4H NMR (500 MHz, CDCI3): δ 0,80-0,94 (m, 2H), 1,05-1,36 (m, 7H),
1,36-1,48 (bs, 9H), 1,48-1,78 (m, 7H), 1,98-2,14 (m, 2H), 2,34 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 4,52 (bd, 1H),
5,26 (bd, ΙΗ), kevesebb rotamer jelei jelennek meg: δ 1,92, 2,25,
3,58, 4,20 és 4,93.
Boc-(R)Hoc-Pic-OH (i) Boc-(R)Hoc-Pic-OMe
A Boc-(R)Cha-Pic-OEt előállítására ismertetett eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagokként Boc-(R)HoC-OH-t és H-Pic-OMexHCl-t használunk.
(ii) Boc-(R)Hoc-Pic-OH
Ugyanúgy állítjuk elő mint a Boc-(R)Cha-Pic-OH-t, de kiindulási anyagként Boc-(R)Hoc-Pic-OMe-t használunk.
1H-NMR (500 MHz, CDCI3) δ 0,82-0,97 (m, 2H) , 1,10-1,36 (m, 7H) ,
1,36-1,50 (bs, 9H) , 1,50-1,82 (m, UH) , 2,35 (bd, 1H) , 3,28 (bt, 1H), 3,85 (bd, 1H), 4,63 (m, 1H), 5,33 (bs, 1H), 5,44 (bd, 1H), kevesebb rotamer jelei: δ 1,88, 2,80, 4,25, 4,55 és 4,97.
Boc-(R)Cha-Aze-OH
A Boc-(R)Cha-Pic-OH előállítására ismertetett eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként H-Aze-OEtxHCl-t használunk.
Boc-(R)Cha-Pic[4-(S)Me]-OH
A Boc-(R)Cha-Pic-OH előállítására ismertetett eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként H-Pic[4-(S)Me]-OEtxHCl-t használunk, azzal az eltéréssel, hogy oldószerként CH2Cl2-t alkalmazunk.
Boc-(R)Cha-(R)Pic[4-(R)Me]-QSu (i) Boc-(R)Cha-(R)Pic[4-(R)Me]-OEt
A Boc-(R)Cha-Pic-OEt előállítására ismertetett eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként H-(R)Pic[4-(R)Me]
-OEtxHCl-t használunk.
·· ··«· · 9 · ·· •·· · • · · ···· ·· ···· (ii) Boc-(R)Cha-(R)Pic[4 - (R)Me]-OH
Úgy állítjuk elő, hogy a fenti (i) pont szerinti termék védőcsoportját az (e) eljárás szerint eltávolítjuk.
(iii) Boc-(R)Cha-(R)Pic[4-(R)Me]-OSu
A Boc-(R)Cha-Pic-OSu előállítására ismertetett eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként Boc-(R)Cha-(R)Pic[4-(R)Me]-OH-t használunk.
Boc-(R)Cha~(R,S)Pic(4,5-dehidro)-OH
A Boc-(R)Cha-Pic-OH előállítására ismertetett eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként H-(R,S)Pic(4,5-dehidro)-OEt-et használunk.
Boc-(R)Cgl-Pic-OH (i) Boc-(R)Cgl-Pic-OMe
1000 ml (8,1 mmol) pivaloil-kloridot adagolunk 2,086 g (8,1 mmol) Boc-(R)Cgl-OH-nak és 1,13 ml (8,1 mmol) trietil-aminnak 25 ml toluol és 5 ml DMF eleggyel készült oldatához. Az elegyhez ezt követően jégfürdő hőmérsékletén 1,46 g (8,1 mmol) H-Pic-OMexHCl és 1,13 ml (8,1 mmol) trietil-amin 20 ml DMF-fel készült elegyét adagoljuk. A reakcióelegyet hagyjuk lassan felmelegedni szobahőmérsékletre, majd 24 óra múlva vízzel hígítjuk és toluollal extraháljuk. Az elegyet 0,3M KHSO4-oldattal, 10%-os Na2CO3-oldattal és sóoldattal mossuk, az oldószert vákuumban eltávolítjuk és így 2,52 g (81%) színtelen olajat kapunk, melyet további tisztítás nélkül használunk fel.
4H-NMR (500 MHz, CUClj, 2 rotamer, 5:1 arány) δ 0,8-1,8 (m, 25H),
2,25 (d, 1H), 2,75 (t, 1H, kevesebb rotamer), 3,3 (t, 1H), 3,7 (s, 3H), 3,85 (d, 1H), 4,3 (t, 1H, kevesebb rotamer), 4,5-4,6 (m,
1H) , 5,25 (d, 1H) , 5, 30 (d, 1H) .
(ii) Boc-(R)Cgl-Pic-OH
A Boc-(R)Cha-Pic-OEt hidrolízisére leírt eljárás szerint állítjuk elő az előbbi (i) pont szerinti termékből. A végterméket diizopropil-éterből és hexánból kristályosítjuk.
1H-NMR (500 MHz, CDCI3, 2 rotamer, 5:1 arány) δ 0,8-1,8 (m, 25H),
2,3 (d, 1H), 2,8 (t, 1H), kevesebb rotamer), 3,3 (t, 1H), 3,9 (d, 1H) , 4,4 (t, 1H, kevesebb), 4,5-4,6 (m, 1H) , 5,1 (s, 1H, kevesebb rotamer), 5,3 (d, 1H), 5,40 (d, 1H).
Boc-(R)Dph-Pic-OH
A Boc-(R)Cha-Pic-OH előállítására leírt eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként Boc-(R)Dph-OH-t használunk.
Boc-(R)Dch-Pic-OH
A Boc-(R)Cha-Pic-OH előállítására leírt eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként Boc-(R)Dch-OH-t használunk.
Boc-(R)Cha-Pro[5-(S)Me]-OH
A Boc-(R)Cha-Pic-OH előállítására leírt eljárás szerint állítjuk elő, kiindulási anyagként H-Pro[5-(S)Me]-OMe-t használunk .
Boc-Nag(Z) (i) N-(benzil-oxi-karbonil)-O-metil-izokarbamid
2,8 liter tömény (50 tömeg%) vizes NaOH (19,1M, 53 mól) és liter víz oldatát keverjük 18°C-on és két részletben hozzáadunk 1,7 kg (94%, 13,0 mól) O-metil-izokarbamid-hemiszulfátot és
1,57 kg (99%, 9,0 mól) O-metil-izokarbamid-hidrogén-szulfátot. A reakcióelegyet lehűtjük 3-5°C~ra. 20 perces időtartam alatt hűtés és erőteljes keverés közben hozzáadunk 3,88 kg (92%, 20,9 mól) benzil-klór-formiátot. A reakcióhőmérséklet 3-8°C~ra emelkedik a Z-Cl adagolása közben. Az adagolótölcsért 5 liter vízzel kiöb- lítjük, az öblítővizet a reaktorba adagoljuk. A reakcióelegyet 0-3°C-on 18 órán át keverjük, szűrjük és a kristályokat 10 liter hűtött (3°C-os) vízzel mossuk. Az anyagot 25°C-on 10-20 mbar vákuumban 48 órán át szárítjuk, így 3,87 kg (89%) címbeli vegyületet kapunk fehér kristályos por alakjában.
(ii) Boc-Nag(Z)
Boc-NH-(CH2)3-NH2xHCl-t állítunk elő Mattingly P.G., Synthesis, 367 (1990) eljárása szerint. Ebből 3,9 kg-ot (18,5 mól) kg izopropanolban oldunk, az oldatot keverjük, és 60-70°C-on részletekben, 30 perc alatt hozzáadunk 4,2 kg (42 mól) KHCO^-ot. Lassú CO2-gáz fejlődés következik be. Az elegyet további 30 percen át keverjük, majd részletekben, 30 percen át hozzáadunk
3,74 kg (18,0 mól) N-benzil-oxi-karbonil-O-metil-izokarbamidot. A reakcióelegyet 65-70°C-on keverjük 16 órán át, 20°C-ra lehűtjük, majd szűrjük. A csapadékot 10+5 liter izopropanollal mossuk. Az egyesített szűredékeket csökkentett nyomáson töményítjük úgy, hogy a hűtőköpenyt legfeljebb 65-70°C-on tartjuk. Ha körülbelül 45 litert ledesztilláltunk, 90 liter EtOAc-ot adunk a maradékhoz. A reakcióelegyet 20-25°C-ra hűtjük, 10 és 5 liter vízzel, majd 5 liter sóoldattal mossuk, majd 2 kg Na2S04-on szárítjuk. A reakcióelegyet keverjük, majd szűrjük, és a szűrőlepényt 11 és 7 liter EtOAc-cal mossuk. Az egyesített szűredékeket csökkentett nyomáson betöményítjük úgy, hogy a hűtőköpenyt legfeljebb 40-50°C-on tartjuk. Ha körülbelül 90 liter EtOAc-ot ledesztilláltunk, 25 liter toluolt adunk az elegyhez, és folytatjuk a lepárlást. Miután körülbelül további 18 liter desztillátumot gyűjtöttünk, 20 liter toluolt adunk az elegyhez erőteljes keverés közben, és a kapott elegyet -l-0°C-ra hűtjük és egy éjjelen át (17 órán át) gyengén keverjük. A kristályos iszapot szűrjük, és a terméket 10 és 5 liter hűtött toluollal mossuk. A terméket 10-20 mbar nyomáson és 40°C~on 24 órán át vákuumszáritjuk, így 4,83 kg (13,8 mól, 76%) Boc-Nag(Z)-t kapunk.
1H-NMR (300 MHz, CDCI3): δ 1,41 (s , 9H), 1,6-1,7 (m, 2H), 3,0-3,3
(m, 4H), 4,8-5,0 (bs, 1H) , 5,10 (s , 2H), 7,2-7,4 (m, 5H) .
Boc-Agm(Z)
(i) Boc-Agm
14,95 g (65,5 mmol, 1 ekv.) agmatin-szulfát (Aldrich), 13,7
ml (98,25 mmol, 1,5 ekv.) Et3N, 165 ml víz és 165 ml THF szusz-
penziójához 5 perc alatt, szobahőmérsékleten hozzáadunk 21,5 g (98,25 mmol, 1,5 ekv.) (Boc)20-t. Az elegyet egy éjszakán át erőteljesen keverjük, szárazra pároljuk és a maradékot 2x100 ml Etával mossuk, így kapjuk a Boc-Agm-t fehér por alakjában, melyet további tisztítás nélkül használunk fel a következő lépésben .
(ii) Boc-Agm(Z)
Az előző lépésben nyert körülbelül 65,5 mmol nyers Boc-Agm-ból 180 ml 4n NaOH oldattal és 165 ml THF-fel hideg, +5°C-os szuszpenziót készítünk, melyhez 10 perc alatt hozzáadunk 24 ml (169 mmol, 2,5 ekv.) benzil-klór-formiátot. Az elegyet szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük, majd hozzáadunk 150 ml metanolt és a keverést szobahőmérsékleten további 20 órán át folytatjuk. A szerves oldószert lepároljuk, és 200 ml vizet adunk a maradékhoz. A lúgos vizes fázist 1x300 ml és 2x200 ml EtOAc-cal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat 2x100 ml vízzel, 1x100 ml sóoldattal mossuk, majd MgSO^-on szárítjuk. Az oldószert lepároljuk, és a maradékot flash kromatografáljuk (CH2Cl2/MeOH lépcső zetes gradienst 97/3, 95/5 és 9/1 arányban használunk), így 14,63 g (58%) tiszta Boc-Agm(Z)-t kapunk fehér por alakjában.
1H-NMR (CDC13, 500 MHz): δ 1,35-1,40 (m, 2H), 1,45 (s, 9H), 1,5-
1,6 (m, 2H), 3,0-3,2 (m, 4H), 4,65 (bs, IH), 5,1 (s, 2H), 7,25-
7,40 (m, 5H).
13C-NMR (CDCI3, 75,5 MHz): δ 25,44, 27,36, 28,21, 65,83, 79,15, 127,47, 127,66, 128,14, 137,29, 156,47, 161,48, 163,30.
Boc-NH-(CH2)3-N3
Mattingly P.G., Synthesis 1990, 367 irodalmi helyen ismertetett módszere szerint állítjuk elő.
Z-NH-(CH212rNH2 g (0,1 mól) etilén-diamin és 22 ml trietil-amin 20 ml kloroformmal készült hideg oldatához hozzáadjuk 2,5 g Z-OSu 5 ml kloroformmal készített oldatát. Hagyjuk, hogy.az elegy felmelegedjék szobahőmérsékletre és egy éjjelen át keverjük. Az elegyet szűrjük, lepároljuk az oldószert és flash kromatografáljuk a maradékot [CH2Cl2/MeOH(NH3-mai telített) : 95/5], így 0,9 g (46%) címbeli vegyületet kapunk.
^-NMR (300 MHz, CDCI3): δ 1,27 (s, 2H) , 2,85 (t, 2H) , 3,24 (q,
2H), 5,14 (s, 2H), 7,22-7,40 (m, 5H).
Aqm x HC1
Agm x H2SO4-ből (Aldrich-termék) állítjuk elő úgy, hogy a hidrogén-szulfát-iont kloridionra cseréljük egy ioncserélő oszlopon.
H-Naq(Z) X 2HC1
Úgy állítjuk elő, hogy Boc-Nag(Z)EtOAc-cal készült oldatába HCl-t (e) buborékoltatunk, majd elpárologtatjuk az oldószert.
BnOOC-CH2~NH-CO-CH2-Br mmol p-TsOH x H-Gly-OBn és 5 mmol trietil-amin 10 ml CH2Cl2~vel készült oldatához 10 ml CH2Cl2~ben oldott 5 mmol 2-bróm-ecetsavat és 5 mmol diciklohexil-karbodiimidet adunk. Az elegyet szobahőmérsékleten keverjük egy éjjelen át, majd szűrjük. A szerves fázist kétszer szűrjük 0,2M KHSO^-oldattal, 0,2M NaOH-
-oldattal, sóoldattal, majd szárítjuk. Az oldószert lepároljuk, és a maradékot flash kromatografáljuk (CH2Cl2/MeOH, 95/5), így a kívánt vegyületet kvantitatív hozammal kapjuk.
1H-NMR (300 MHz, CDCI3): δ = 3,89 (s, 2H) , 4,05-4,11 (d, 2H) ,
5,19 (s, 2H), 7,06 (bs, 1H), 7,3-7,4 (m, 5H).
BnOOC-CH2-OCO-CH2-Br
2,8 g (0,020 mmol) bróm-ecetsav, 4,2 g (0,020 mmol) benzil-bróm-acetát és 2,0 g (0,020 mmol) trietil-amin és 25 ml EtOAc elegyét 3 órán át visszafolyóhűtő alkalmazásával forraljuk. Felhígítjuk további EtOAc-cal, és lehűtjük. Az oldatot híg sósavval, majd ezután vizes NaHCO2-oldattal és végül vízzel mossuk. Na2S04-on szárítjuk, az oldószert lepároljuk, majd a maradékot flash kromatografáljuk (heptán/etil-acetát, 72/25), így a címbeli terméket 26%-os hozammal kapjuk meg.
1H-NMR (500 MHz, CDCI3): δ 3,95 (s, 2H) , 4,75 (s, 2H) , 5,23 (s,
2H), 7,35-7,45 (m, 5H).
BnO-(CH2)3-OTf
0,83 g (5 mmol) propándiol-monobenzil-étert 0,6 g (7 mmol) száraz piridinben és 20 ml diklór-metánban oldunk és -15°C-ra hűtünk. Az oldathoz 15°C-ra előhűtött trifluor-metánszulfonsavanhidridet adunk és a reakcióelegyet 45 percen át keverjük és hagyjuk, hogy ezalatt a hőmérséklet 15°C-ra emelkedjék. Az oldó39 szert lepároljuk és a terméket 10 ml térfogatú hexán/etil-acetát
4:1 arányú elegyben oldjuk és szilicium-dioxidon át szűrjük.
Végül az így 0,95 oldószert lepároljuk és a terméket vákuumban szárítjuk,
1-(benzil-oxi)-3-(trifluor-metánszulfonil)-propánt kapunk, melyet közvetlenül használunk fel (lásd a 21.
példát).
1H-NMR (500 MHz,
CDC13): δ 2,12 (m, 2H), 3,6 (t, 2H), 4,51 (s,
BnO- (CH2)2~cho
BnO-(CH2)3-OH Swern-oxidációjával állítjuk elő, D. Swern et al. , J. Org. Chem., 1978, 2480-2482 közleményében ismertetett élj árással.
1H-NMR (300 MHz, CDCI3): δ 2,63 (dt, 2H) , 3,80 (t, 2H) , 4,51 (s,
2H), 7,30 (m, 5H), 9,76 (bt, 1H).
Br-(S)CH(CH20Bn)-COOBn (i) Br-(S)CH(CH2OBn)-COOH ml vízben lévő 3,9 g (19 mmol) O-benzil-szerint hozzáadunk 11 g (107 mmol) nátrium-bromid 20 ml vízzel és 2 g (20 mól) kénsavval készült oldatához. A reakcióelegyet -10°C-ra lehűtjük, és 1,73 g (25 mmol) NaNO2~t adunk hozzá erélyes keverés közben. Az így keletkezett sűrű elegyhez újabb adag vizet adunk, majd ezután néhány perc múlva lg (10 mmol) kénsavat. Az elegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, ezután kétszer extraháljuk 100 ml EtOAc-tal. Az egyesített szerves fázist kétszer mossuk vízzel és egyszer sóoldattal, majd Na2S04-on szárítjuk. Az oldószert lepároljuk, így 3,7 g (75%) címbeli vegyületet kapunk sárga olaj alakjában, mely elég tiszta ahhoz, hogy köz vetlenül felhasználjuk a következő lépésben.
(ii) Br-(S)CH(CH2OBn)-COOBn
Az előbbi (i) pont szerint kapott nyerstermék 2,6 g (10 mmol) mennyiségét 25 ml száraz benzolban oldjuk, és az oldathoz hozzáadunk 2,6 g (20,5 mmol) oxalil-kloridot és 1 g 4Á-os molekulaszűrőt. Az elegyet szobahőmérsékleten argon atmoszférában 18 órán át keverjük. A molekulaszűrőt szűréssel eltávolítjuk, majd az oldószert lepároljuk. A halványsárga maradékot feloldjuk 10 ml CH^CN-ben, és 1 g (9,2 mmol) benzil-alkoholt adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten 5 órán át keverjük. Az oldószert lepároljuk és a maradékot Et2O-ban oldjuk, és egyszer mossuk 1M NaOH-oldattal, vízzel, sóoldattal és Na2S04-on szárítjuk. Az oldószert lepároljuk, ezután a maradékot flash kromatografáljuk (CH2Cl2/MeOH, 95/5), így 1,8 g (67%) kívánt vegyületet kapunk. 1H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 3,82 (dd, 1H), 3,99 (dd, 1H), 4,38 (dd, 1H), 4,56 (s, 2H), 5,23 (s, 2H), 7,23-7,46 (m, 5H).
Példák a találmány szerinti vegyületek előállítására
1. példa
H-(R)Cha-Pro-Aqmx2HOAc (i) Boc-(R)Cha-Pro-AgmxHOAC
1,7 mmol Boc-(R)Cha-Pro-OSu-t és 2,0 mmol (1,18 ekv.) agmatin-dihidrokloridot feloldunk 35 ml 95:5 arányú DMF/H2O elegyben. Az oldathoz trietil-amint adunk, hogy a pH-t kb. 10 értékre beállítsuk, és az oldatot szobahőmérsékleten 2 napig keverjük. Az oldatot szárazra pároljuk (5 Hgmm/60°C), és a nyersterméket RPLC-vel tisztítjuk [CH3CN/NH4OAC (0,lM), 38:62],
A kívánt vegyületet fehér por alakjában fagyasztva szárítással nyerj ük.
1H NMR (500 MHz, CDCl3/DMSO-d6 5:2, két rotamer, 9:1 δ (több
rotamer): 0,75-0,90 (m, 2H), 1,1-2,05 (m, 19H), 1,35 (s , 9H)
2,98-3,14 (m, 4H), 3 , 37 (q, 1H), 3,76 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4, 33
(dd, 1H) , 6,30 (d, 1H) , 7,05-7,80 (széles m, 5H), 8,67 (széles d,
1H) .
A kevesebb rotamer csere kiszélesedett jeleit figyeljük meg egyértelműen a következő helyeken: δ 3,44 (m, 1H), 3,62 (m,
1H) , 4,10 (m, 1H) , 4,64 (m, 1H) , 5,56 (d, 1H) , 9,08 (m, 1H) .
(ii) H-(R)Cha-Pro-Agmx2HOAc
0,2 mmol Boc-(R)Cha-Pro-Agm 2 ml TFA-val készített oldatát szobahőmérsékleten 4,5 órán át keverjük. Az oldószert lepároljuk és a visszamaradó olajat RPLC-vel (0,1 m CH^N/NH^OAc, 25:75) kromatografáljuk. A diacetátsót fehér porként ismételt fagyasztva szárítással kapjuk meg.
4Η NMR (500,13 MHz, D2O): δ 0,80-0,95 (m, 2H), 1,00-1,21 (m, 3H),
1,32 (m, 1H) , 1,40-1,78 (m, 12H) , 1,83-2,00 (m, 2H), 1,90 (s,
acetát), 2,20 (m, 1H) , 3 ,06-3,14 (m, 4H), 3, , 50 (m, 1H) , 3,67 (m,
1H), 4,20-4,30 (m, 2H) .
13C NMR (75,6 MHz, D2O): guanidin : δ 157,4: karbonil szénatomok:
δ 169,9, 174,5.
2. példa
Me-(R)Cha-Pro-Aqmx2H0Ac (i) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Agm
479,6 mg (1 mmol, 1 ekv.) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu és 500 ml NMM 16 ml DMF/H2O (15/1) eleggyel készült oldatához szohahőmérsékleten hozzáadunk 166,5 mg (1,2 mmol, 1,2 ekv.) AgM x HCl-t.
A reakcióelegyet további 70 órán keresztül keverjük és az oldó42 szert elpároljuk, így egy olaj szerű nyersterméket kapunk. Ezt tisztítás nélkül használjuk fel a következő lépésben.
(ii) Me-(R)Cha-Pro-Agmx2H0Ac
Az előző lépésben nyert nyers olajat szobahőmérsékleten feloldjuk 10 ml 1:4 arányú TFA/CH2C12 elegyben. 2 óra 25 percen át keverjük, majd az oldószert lepároljuk és a nyersterméket RPLC-vel [CH3CN/NH4OAc, (O,1M) 35:65] tisztítjuk, így fagyasztva szárítás után megkapjuk a tiszta terméket fehér por alakjában. 1H NMR (500 MHz, D2O): δ 0,93-1,05 (m, 2H), 1,10-1,29 (m, 3H),
1,33-1,43 (m, 1H), 1,50-1,80 (m, 12H), 1,88-2,10 (m, 2H), 1,92 (s, acetát) , 2,27-2,36 (m, 1H) , 2,68 (s, 3H) , 3,15-3,23 (m, 3H) , 3,24-3,31 (m, 1H), 3,57-3,66 (m, 1H), 3,76-3,83 (m, 1H), 4,28 (t, 1H) , 4,39 (dd, 1H) .
13C-NMR (125,76 MHz, D2O): guanidin: δ 157,24; karbonil szénatomok: δ 174,03, 168,24.
3. példa
HO-(CH2)2~(R)Cha-Pro-Aqmx2HCl (i) Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z) ekv. Boc-Agm(z)-t oldunk 1:4 arányú TFA/CH2C12 elegyben (kb. 6 ml/mmol arányban), majd az elegyet szobahőmérsékleten körülbelül 2 órán át keverjük. Az oldószert bepároljuk és a terméket feloldjuk 1 ekv. Boc-(R)Cha-Pro-OSu-val együtt DMF-ben (kb. 1 ml/mmol arányban), a pH-t NMM-mel beállítjuk kb. 9-es értékre és az elegyet szobahőmérsékleten 20 óráig keverjük. Az oldószert vákuumban bepároljuk, a nyersterméket feloldjuk CH2C12' ben és háromszor mossuk vízzel és egyszer sóoldattal. Szárítás után (Na2SO4) az oldószert bepároljuk és a terméket flash kromatografáljuk (CH2Cl2/MeOH) , így megkapjuk a Boc-(R)Che-Pro~ -Agm(Z)-t fehér por alakjában.
(ii) H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t feloldunk 1:4 arányú TFA/CH2C12 elegyben (kb. 6 ml/mmol arányban) és szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük az oldatot. Az oldószert bepároljuk, a terméket feloldjuk 0,2 molos NaOH-ban (20 ml/mmol) és kétszer extraháljuk diklór-metánnal. A szerves fázisokat összegyűjtjük és sóoldattal mossuk, szárítjuk (Na2SO4) és az oldószert bepároljuk, így nyerjük a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t, mint fehér por.
(iii) BnO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm(Z) mmol H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t feloldunk 10 ml metanolban.
mmol trietil-ammónium-hidrokloridot, 0,7 mmol nátrium-cianobórhidridet és azután 1,05 mmol BnO-(CH2)2-CHO-t adunk hozzá és a reakcióelegyet egy éjjelen át keverjük. Az oldószert lepároljuk és a nyersterméket feloldjuk etil-acetátban, kétszer mossuk vízzel, egyszer sóoldattal és nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószert bepároljuk és a nyersterméket flash kromatográfiával tisztítjuk (EtOAc/MeOH).
(iv) HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agmx2HCl
Úgy állítjuk elő, hogy a fenti (iii) pontban kapott termék védőcsoportját a d) védőcsoport eltávolítási eljárással lehasít j uk.
2H-NMR (500 MHz, D20): δ 0,72 (m, kevesebb rotamer), 0,84 (m, kevesebb rotamer), 0,87-1,03 (m, 2H), 1,03-1,26 (m, 3H), 1,28-1,40 (bs, 1H) , 1,44-1,80 (m, UH), 1,80-1,95 (bs, 3H) , 1,95-2,10 (bs, 2H) , 2,28 (m, 1H) , 3,04 (m, 1H) , 3,08-3,27 (m, 5H) , 3,58 (bs, 1H), 3,67 (bs, 2H), 3,78 (m, 1H), 4,12 (bd, kevesebb rota44
mer), 4,30 (m, 1H), 4,37 (m, 1H).
13C-NMR (125 MHz, D2O): guanidin: δ 157,26; karbonil szénatomok: δ 174,06, 168,36.
4. példa
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-AgmxHOAC
Általános eljárás az N-terminális alkilezésére
Ezt az eljárást általánosabban ismertetjük és az alábbi példákban hivatkozunk rá azokkal az alkilező szerekkel együtt, amelyeket az egyes példák szerinti eljárásoknál alkalmazunk.
Az alkilezendő peptidet (1 ekv.) és az alkilező szert (1,1-1,2 ekv.) feloldjuk kb. 10 ml/mmol acetonitrilben. 2,0-2,2 ekv.
kálium-karbonátot adunk hozzá és a reakcióelegyet 50-60°C-on addig keverjük, míg a kiindulási anyag elfogy (TLC, általában 1-5 óra) . Szűrjük, az oldószert bepároljuk és a maradékot flash kromatografáljuk [CH2Cl2/MeOH, CH2Cl2/MeOH(ΝΗβ-telített) vagy
EtOAc/MeOH kb. 9/1], majd az oldószert lepároljuk és megkapjuk az alkilezett terméket.
(i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm(z)
H-(R)Cha-Prp-Agm(Z)-bői (lásd a 3. példát) és Br-CH2COOBn-ből állítjuk elő a fent leírt módszer szerint.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-AgmxHOAC
Készítéséhez a (b) védőcsoport eltávolitási eljárást alkalmazzuk a fenti (i) pont szerinti terméken.
1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,9-1,1 (m, 2H), 1,1-2,3 (m, 19H), 1,95 (s, acetát), 3,1-3,2 (m, 4H), 3,2-3,65 (m, 3H), 3,85 (m, 1H), 4,0 (bt, 1H) , 4, 35 (dd, 1H) .
13C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: δ 157,55; karbonil szénatomok: δ 168,71, 171,37 és 174,3.
5. példa 1Pr-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-AgmxHOAc
Az alkilezést a 4. példa szerint végezzük H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (lásd a 3. példát) és Br-CH2COO 1Pr felhasználásával, majd a (b) védőcsoport eltávolítási eljárás alkalmazása után megkapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,85-1,05 (m, 2H), 1,1-1,35 (m, 9H;
abból 1,23 (d, 3H), 1,25 (d, 3H), 1,35-2,02 (m, 14H) 1,92 (s, acetát) , 2,08 (m, 1H) , 2,2 (m, 1H) , 3,07-3,45 (m, 6H) , 3,55 (m,
1H), 3,7-3,8 (m, 2H), 4,3 (dd, 1H), 5,05 (m, 1H).
13C-NMR (125 MHz, D2O): guanidin: δ 157,39; karbonil szénatomok: δ 171,10, 172,76 és 174,44.
6. példa
HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Aqmx2TFA (i) Me-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu-ból készítjük ugyanúgy, mint a 3. példában leírtuk a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére.
(ii) HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agmx2TFA
Az alkilezést úgy végezzük, mint a 4. példában leírtuk, Me-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t és Br-CH2COBn-t használunk, ezt követően a védőcsoportot a (b) védőcsoport eltávolítási eljárással lehasítjuk és megkapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (300 MHz, D2O): δ 0,9-1,35 (m, 6H), 1,5-2,2 (m, 14H),
2,25-2,45 (m, 1H), 3,12 (s, 3H), 3,15-3,35 (m, 4H), 3,6-3,75 (m,
1Η), 3,8-3,95 (m, 1H) , 4,22 (kétségtelen bs, 2H) , 4,45 (m, 1H),
4,6 (bt, 1H).
13C-NMR (75,47 (MHz, D20): guanidin: δ 157,52; karbonil szénatomok: δ 173,86, 168,79, 167,38.
7. példa
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-AqmxHOAc
Az alkilezést úgy végezzük, mint a 4. példában, kiindulási anyagként H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t (lásd a 3. példát) és Br-CH(Me)COOBn-t használunk, majd a védőcsoportot az (a) eljárás szerint eltávolítjuk, így megkapjuk a címbeli vegyületet, mint két diasztereomer elegyét.
8. példa
HOOC-(RvaqyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Aqm/axHOAc
Úgy kapjuk meg, hogy elválaszjtuk a 7. példa szerint kapott diasztereomereket, RPLC-vel [CH2CN/NH4OAc (0,lm), 1/4], Ez a diasztereomer a kettő közül elsőként jön le az oszlopról. 1H-NMR (500 MHz, D2O; 2 rotamer kb: 5:1 arány): δ 0,74 (m, kevesebb rotamer), 1,01 (m, 2H), 1,10-1,33 (m, 3H), 1,48-1,88 (m, 15H; abból 1,51 (d, 3H) , 1,92-2,12 (m, 3H) , 1,96 (s, acetát) , 2,30 (m, 1H), 3,20 (m, 3H), 3,38 (m, 1H), 3,47 (q, kevesebb rotamer), 3,53--3,68 (m, 2H), 3,73 (m, 1H), 4,20 (d, kevesebb rotamer), 4,33 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,51 (d, kevesebb rotamer). 13C-NMR (125 MHz, D2O): guanidin: δ 157,38; karbonil szénatomok:
δ 174,11, 173,45, 168,64.
9. példa
HOOC-(RvaqyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Aqm/bxHOAc
Az a diasztereomer, mely az első után jön le az oszlopról a
8. példában levő elválasztásnál, adja a fenti címbeli vegyületet. ^H-NMR (500 MHz, D2O, 2 rotamer ca 9:1 arány): δ 0,88 (m, kevesebb rotamer), 1,05 (m, 2H) , 1,12-1,33 (m, 3H) , 1,42 (bs, 1H) , 1,50-1,88 (m, 15H; abból 1,55 (d, 3H) , 1,93-2,13 (m, 3H) , 1,95 (s, acetát), 2,30 (m, 1H), 2,40 (m, kevesebb rotamer), 3,22 (t, 2H) , 3,28 (t, 2H) , 3,64 (m, 1H) , 3,70 (q, 1H) , 3,98 (t, kevesebb rotamer), 4,35 (t, 1H) , 4,41 (dd, 1H) .
10. példa
HOOC-(RvagyS)CH(nPr)-(R)-Cha-Pro-Agm/axHOAc
Az alkilezést a 4. példa szerint végezzük H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (lásd a 3. példát) és Br-CH(nPr)COOEt felhasználásával, a védőcsoportokat az (e), majd a (b) eljárással eltávolítjuk, így HOOC-(R,S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm képződik. A címbeli vegyületet megkapjuk, ha a diasztereomereket RPLC-vel szétválasztjuk [CH^CN/NH^OAc (0,lm) 1/4] és az anyagot fagyasztva szárítjuk (H2O) az oldószer elpárologtatása után. Ez a diasztereomer a kettő közül elsőnek jön le az oszlopról.
1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,8-1,1 (m, 5H; abból 0,92 (t, 3H), 1,1-2,1 (m, 22H), 1,95 (s, acetát), 2,2 (m, 1H), 3,1-3,35 (m, 5H) , 3,48 (m, 1H) , 3,88 (m, 1H) , 4,0 (m, 1H) , 4,4 (dd, 1H) . 13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 157,50; karbonil szénatomok:
δ 168,55 és 174,16.
•· ·« ·«*···«« ♦ • · • · » · · · »♦
11. példa
HOOC-(RvagyS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Aqm/bxHOAc
A másik diasztereomer, mely a 10. példában leírt szétválasztásnál az első után jön le az oszlopról, a fenti címbeli vegyület .
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,85-1,05 (m, 5H; abból 0, 95 ( t, 3H)
1,1-2,08 (m, 22H) , 1,9 (s, acetát), 2, 14 (m, 1H) , 3, 1-3, 4 (m,
5H) , 3,45 (m, 1H) , 3,62 (m, 1H) , 3, 80 (M, 1H), 4,34 (dd, 1H) .
13C-NMR (75 MHz, D2O) : guanidin: δ 157,53 ; karbonil szénatomok
δ 169,01 és 174,27.
12. példa
HOOC-(RvagyS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Aqm/bxHOAc (i) tBuOOC-(RvagyS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm(Z)
0,55 mmol H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (lásd a 3. példát), 0,66 mmol terc-butil-(R,S)fenil-bróm-acetát, 1,4 mmol Κ2ΟΟβ elegyét 10 ml C^CN-ben szobahőmérsékleten keverjük 28 órán át és még 5 óráig 60°C-on. A diasztereomer elegyet (kb. 3:1, NMR mérés szerint) leszűrjük és bepároljuk. A visszamaradó olajat kétszer flash kromatografáljuk (CH^C^/MeOH, 92/8) , amelynek eredményeként a két diasztereomer teljesen szétválik [Rf =0,36 (a kevesebb izomeré) és 0,27 (a nagyobb mennyiségű izomeré)].
1H NMR (nagyobb mennyiségű izomer (500,13 MHz, CDCI3): δ 0,79
(quart, 1H ) , 0,90 (quart, 1H ), 1,06-1,70 (m, Η) , 1,37 (s, 9H) ,
1,85-2,03 (m, 3H) , 2,20 (m, 1H), 3,10-3, 24 (m, 3H), 3,25-3,38 (m
2H), 3,42 (m, 1H) , 3 , 53 (m, 1H), 4,30 (s , 1H), 4,49 (dd, 1H),
5,08 (s, 2H), 7 , 19 -7,40 (m, 10H); széles NH-jelek vannak a 6,7-
-8,6 tartományban.
(ii) HOOC-(RvagyS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/bxHOAc
A nagyobb mennyiségű izomer 50 mmol-ját és 0,5 mmol tioanizolt feloldunk TFA-ban és szobahőmérsékleten tartjuk 8 órán keresztül. 5 óráig tartó bepárlás (0,1 Hgmm) után a visszamaradó olajat RPLC-vel tisztítjuk [CH^CN/NH^OAc (0,lm), 2:3], majd megkapjuk a címbeli vegyületet, az oldószer bepárlása és fagyasztva szárítás után.
1H NMR (500,13 MHz, . MeOD): δ 0,85-1,01 (m, 2H) , 1,13-1,38 (m,
4H) , 1, 53-2,05 (m, 14H), 1,92 (s, acetát) 2 , 18 (m, 1H), 3,08- 3,26
(m, 3H) , 3,32- 3,45 (m, 2H), 3,64 (m, 1H), 3,93 (t, 1H), 4,37 (dd,
1H) , 4, 43 (s, 1H) , 7,28-7,50 (m, 5H).
13C NMR (125,6 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,7: karbonil szénatomok: δ 173,8, 174,7, 177,0.
13. példa
HOOC-(R,S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-AqmxHOAc
Az alkilezést a 4. példa szerint végezzük, H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (lásd a 3. példát) és Br-CH(CH2-CH2-Ph)COOEt alkalmazásával. Az (a) vé.dőcsoport eltávolítási eljárás után az (e) védőcsoport eltávolítási eljárást alkalmazzuk, így kapjuk a HOOC-(R,S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm-t.
14, példa
HOOC-(RvagyS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/ax2TFA
A címbeli vegyületet úgy kapjuk meg, hogy a 13. példa szerint kapott diasztereomereket szétválasztjuk RPLC-vel [CH^CN/NH^OAc, (0,lm), 2/3] és fagyasztva szárítjuk az anyagot (H2O/TFA) az oldószer eltávolítása után. Ez a diasztereomer elsőként jön le az oszlopról a kettő közül és ez a címbeli vegyület.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,93-1,11 (m, 2H), 1,24 (m, 1H), 1,29-
-1,40 (m, 2H) , 1,52-1,85 (m, UH) , 1,89-2,11 (m, 4H), 2,14-2,32
(m, 3H), 2,83 (t, 2H) , 3 , 14 (t, 2H) , 3,24 (t, 2H), 3,50 (q, 1H),
3,70 (m, 1H) , 4,0 0 (t, 1H) , 4,36-4, 42 (m, 2H) , 7,17-7,31 (m, 5H)
13C-NMR (125 MHz , MeOD): guanidin: δ 158,66; karbonil szénatomok
δ 168,08, 171,53, 174, 16 .
15. példa
HOOC-CH2CH2-(R)Cha~Pro-AqmxHOAc (i) BnOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-Agm(Z)
1,1 ekv. benzil-akrilátot és 1 ekv. H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t (lásd a 3. példát) feloldunk 20 ml/mmol etanolban és az elegyet szobahőmérsékleten keverjük 20 órán át. Az oldószert elpároljuk és a nyersterméket flash kromatográfiával tisztítjuk (CH2Cl2/MeOH [NH3-telített), 95/5] . Végül az oldószert bepároljuk és a termé ket vákuumban szárítjuk.
1H-NMR (500 MHz,.CDCl3): δ 0,7-0,95 (m, 2H), 1,0-1,5 (m, 10H),
1,5-1,75 (m, 5H) , 1,75-1,92 (m, 2H) , 2,0 (m, 1H) , 2,17 (bs, 1H) ,
2,45 (m, 2H), 2,63 (m, 1H), 2,79 (m, 1H), 2,97-3,25 (m, 4H), 3,33
(m, 2H), 3,52 (bt, 1H), 4,45 (bd, 1H), 4,95-5,12 (m, 4H), 7,13-
-7,4 (m, 10H) .
(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-AgmxHOAc
Úgy készítjük, hogy az (a) védőcsoport eltávolítás! eljárást alkalmazzuk a fenti (i) pont szerinti terméken.
- 51 4H-NMR (500 MHz, D2O): δ 0,88 (m, 2H), 1,00-1,23 (m, 3H), 1,33
(bs, 1H) , 1,42-1,72 (m, UH) , 1,78-2,00 (m, 3H) , 1,94 (s,
acetát), 2,18 (m, 1H), 2,52 (m, 2H), 3,03-3, , 20 (m, 6H), 3,50 (m
1H) , 3,72 (m, 1H) , 4,23 (m, 1H) , 4,30 (m, 1H) .
13C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: δ 157,25; karbonil szénatomok
δ 178,07 , 173,96, 168,24 .
16. példa
EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-AqmxHOAc (i) EtOOC-CO-(R)-Cha-Pro-Agm(Z)
0,46 g (0,89 mmol) H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) (lásd a 3. példát) és
199 mg (1,97 mmol) NMM 10 ml THF-fel készült, 10°C-ra hűtött oldatához hozzáadunk 134 mg (0,98 mmol) Cl-COCOOEt-et 3 ml THFben oldva. Az elegyet -10°C-on tartjuk 1 óra hosszat, utána szobahőmérsékleten keverjük még 1 óráig. Az oldószert bepároljuk és a maradékot feloldjuk etil-acetátban. A szerves fázist kétszer mossuk vízzel és Na2S04-on szárítjuk. Az oldószert bepároljuk és EtOAc-ból kristályosítjuk, így 0,275 g (50%) címbeli vegyületet nyerünk fehér kristályok alakjában.
(ii) EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-AgmxHOAc
Készítésénél a (b) védőcsoport eltávolítás! eljárást végezzük a fenti (i) pont szerinti terméken.
4H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,9-2,25 [m, 24H; abból 1,17 (t, 3H) ] ,
1,90 (s, acetát), 3,1-3,25 (m, 4H), 3, . 5-3, 65 [m, 3H; abból 3,59
(q, 2H) ] , 3,88 (m, 1H), 4,35 (m, 1H) t 4,69 (dd, 1H) .
43C-NMR (75,5 MHz, MeOD): guanidin: δ 157 , 5 6 és karbonil szén-
atomok: δ 159,21, 160,74, 172,81, 174,56.
17. példa (R,S)Bla~(R)Cha-Pro~Agmx2TFA
Az alkilezést a 4. példa szerint végezzük, H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t (lásd a 3. példát) és α-bróm-butirolaktont alkalmazva, majd az (a) védőcsoport eltávolítási eljárás alkalmazása után kapjuk a címbeli vegyületet két diasztereomer elegyeként.
^H-NMR (500 MHz, D20, diasztereomerek elegye kb. 1/1) δ 0,93-1,06 (m, 2H), 1,09-1,30 (m, 3H), 1,37-1,49 (m, 1H), 1,50-1,87 (m,
UH) , 1,89-2,10 (m, 3H) , 2,24-2,36 (m, 1H) , 2,44-2,56 (m, 1H) ,
2,72-2,85 (m, 1H), 3,10-3,30 (m, 4H), 3,56-3,65 (m, 1H), 3,75-3,84 (m, 1H), 4,2-5,0 (m, 5H), részlegesen eltakarja a H-O-D jel) .
13C-NMR (125,76 MHz, D2O) guanidin: δ 157,34 (átfedő csúcsok); karbonil szénatomok: δ 174,34, 173,90, 173,62, 167,88, 167,58 (két csúcs átfedésben van).
18. példa
HOOC-(RvagyS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Aqm/bx2TFA
A címben szereplő vegyületet úgy kapjuk meg, hogy a 13.
példa szerinti diasztereomert hasonló módon kezeljük, mint azt a
14. példában leírtuk. Ez a diasztereomer az első után jön le az oszlopról.
1H-NMR (500 MHz, MeOD) : δ 0,95-1,06 (m, 2H) , 1,14-1,40 (m, 4H) ,
1,48-1,84 (m, UH) , 1,87 -2,30 (m, 6H) , 2,72-2,90 (m, 2H) , 3, 12-
-3,32 (m, 4H) , 3,52 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 4,04 (dd, 1H) , 4, 27
(t, 1H), 4,37 (dd, 1H) , 7,17-7,32 (m, 5H) .
13C-NMR (125 MHZ , MeOD): guanidin: δ 158,68: karbonil szénatomok
δ 168,14, 171,46, 174,03 .
19. példa
H-(R)Cha-Pro-Naqx2H0Ac (i) Z- (R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH(Boc) mmol Z-(R)Cha-Pro-OSu-t oldunk 1 ml DMF-ben 0°C-on. Ehhez az oldathoz H2N-(CH2)3-NH(Boc)-ot adunk (lásd a kiindulási anyag előállítását), melyet 1 ml DMF-ben oldunk és az oldat pH-ját kb. 9-re állítjuk be NMM-el. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 napig keverjük, ezután vízbe öntjük. A vizes fázist 4-szer extraháljuk EtOAc-val. Az egyesített szerves fázist mossuk 0,3 molos KHSO^-gyel, 0,2 molos NaOH-dal, sóoldattal és szárítjuk. Bepárlás és flash kromatográfálás (EtOAc/petroléter, 4/1) után megkapjuk a címvegyületet 59%-os kitermeléssel.
(ii) Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2
0,6 mmol Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH(Boc)-ot oldunk 8 ml CH2Cl2-ben. 2 ml TFA-t adunk az oldathoz és a reakcióelegyet 1 óra hosszat keverjük. Az oldószert elpároljuk és a maradékot feloldjuk CH2Cl2~ben, kétszer mossuk 0,2 molos NaOH-dal, és Na2SO4-tal szárítjuk. Az oldószer bepárlása után kapjuk meg az
amint 93%-os hozammal.
1H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,79-1,03 (m, 2H) , 1,05-1,75 (m, 15H) ,
1,84-2,08 (m, 4H), 2,36 (m, 1H) , 2,66 (m, 2H) , 3,25 (m, 2H) , 3,43
(q, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,45 (m, 1H), 4,56 (d, 1H), 5,09 (m, 2H) ,
5 , 35 (d, 1H) , 7,30-7,45 (m, 5H) .
(iii) Z-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
0,55 mmol (1 ekv.) Z-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2~t oldunk 2 ml
DMF-ben és az oldat pH-ját 8-9 értékre állítjuk be trietil-aminnal. 1 ml DMF-ben oldott, 0,55 mmol (1 ekv.) 3,5-dimetil-1
-pirazolil-formamidinium-nitrátot adunk az oldathoz és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 3 napig keverjük. Az oldószert bepároljuk, a nyersterméket fagyasztva szárítás, és RPLC-vel [CH3CN/NH4OAC (0,1 m) 4/6] való tisztítás után megkapjuk a címbeli vegyületet 93% kitermeléssel, miután az oldatot bepároltuk és fagyasztva szárítottuk (H2O) az anyagot (iv) H-(R)Cha-Pro-Nagx2H0Ac
Készítésénél az (a) védőcsoport eltávolitási eljárást alkalmazzuk a fenti (iii) pont szerinti terméken.
1H-NMR (500 MHz, D20): δ 0,82-1,03 (m, 2H), 1,03-1,28 (m, 3H),
1,35 (m, 1H) , 1,53-1,82 (m. 9H), 1,82-2,05 (m, 3H), 1,89 (s,
acetát), 2,24 (m, 1H) , 3 , 15 (t, 2H), 3,23 (q, 2H), 3,55 (m, 1H),
3,72 (m, 1H) , 4,27-4,34 (m, 2H) .
13c-nmr (125 MHz, D2O): guanidin: δ 157,37; karbonil szénatomok:
δ 169,81, 174,52.
20, példa nBu-(R)Cha-Pro-Nagx2HOAc (i) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
Boc-(R)Cha-Pro-OSu-ból és Boc-Nag(Z)-bői készítjük ugyanúgy mint leírtuk a 3. példában H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetében. 1H-NMR (500 MHz, CDCI3): δ 0,8-1,03 (m, 2H), 1,10-1,50 (m, 6H),
1,60-1,83 (m, 8H) , 1,87-2,20 (m, 3H) , 3,15 (m, 1H), 3,25 (m, 2H)
3,42 (m, 2H), 3, 63 (dd, 1H) , 3,70 (m, 1H), 4,36 (bs, 1H) , 5 , 07
(s , 2H), 7,22 -7,43 (m, 5H) .
(ii) nBu -(R)Cha-Pro-Nag( Z)
0,5 g (1 mmol) H-(R)Cha- Pro-Nag( Z)-t feloldunk 10 ml méta-
nolban. 0,1 g (1 mmol) trietil-ammónium-hidrokloridot, 44 mg (0,7
mmol) nátrium-ciano-bórhidridet és azután 76 mg (1,05 mmol) vaj sav-aldehidet adunk, hozzá és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük. Az oldószert bepároljuk és a nyersterméket etil-acetátban feloldjuk, kétszer mossuk vízzel, egyszer sóoldattal és nátrium-szulfáton szárítjuk. Az oldószert bepároljuk és a nyersterméket flash kromatográfiával tisztítjuk (EtOAc/EtOH/Et3N 88/10/2). Végül az oldószert bepároljuk és a terméket vákuumban szárítjuk, így kapunk 0,22 g (40%-os hozam) nBu-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t.
1H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,82-1,0 [m, 5H; abból 0,88 (t, 3H)], 1,08-1,49 (m, 10H), 1,58-1,8 (m, 7H), 1,88-2,22 (m, 3H), 2,4 (m, 1H) , 2,5 (m, 1H) , 3,05 (bs, 1H) , 3,3 (m, 1H) , 3,4-3,53 (m, 3H) ,
3,73 (m, 1H), 4,42 (bs, 1H), 5,1 (s, 2H), 7,25-7,43 (m, 5H).
(iii) nBu-(R)Cha-Pro-Nagx2HOAc
Úgy készítjük, hogy az (a) védőcsoport eltávolítás! eljárást alkalmazzuk a fenti (ii) terméken.
1H-NMR 8300 MHz, D2O): δ 0,94 (t, 2H), 1,10-1,31 (m, 3H), 1,38 (m,
3H) , 1,55-1,88 (m, UH), 1,88-2,15 (m, 3H) , 1,95 (s, acetát) ,
2,34 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 3,08 (m, 1H), 3,24 (t, 2H), 3,30 (m
2H) , 3,66 (m, 1H) , 3,82 (m, 1H) , 4,32 (t, 1H), 4,41 (dd, 1H) .
13c_ NMR (125 MHz, D2O) : gua’nidin: δ 157,40 ; karbonil szénatomok
δ 180,39, 174,28, 168,55.
21, példa
HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nagx2TFA (i) BnO-(CH3)3-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,5 g (1 mmol) 1-benzil-oxi-3-trifluor-metán-szulfonil-propánt (készítését lásd a kiindulási anyagoknál) és H-(R)Cha56 furánban. 0,28 g (2 romol) kálium-karbonátot adunk hozzá és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten két óráig keverjük. Az oldószert elpárologtatjuk és a nyersterméket etil-acetát/víz eleggyel extraháljuk. A szerves fázist egyszer vizes nátrium-hidrogénkarbonáttal, egyszer vízzel és egyszer sóoldattal mossuk. Miután nátrium-szulfáton szárítottuk, az oldószert bepároljuk és a nyersterméket flash kromatografáljuk [CH2CH2/MeOH(NH3-telített), 95:5], Végül az oldószert bepároljuk, a terméket vákuumban szárítjuk, így 0,29 g (45%) címbeli vegyületet nyerünk.
1H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,77-1,03 (m, 2H) , 1,03-2,18 (m, 19H) ,
2,52 (m, IH), 2,64 (m, IH), 3,03 (bs, IH), 3,1-3,6 (m, 7H), 3,66 (m, IH), 4,41 (bs, IH), 4,46 (s, 2H), 5,08 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H), 7,55 (m, IH).
(ii) HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nagx2TFA
Előállításánál az (a) védőcsoport eltávolítási eljárást alkalmazzuk a fenti (i) terméken.
1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,00 (bs , , 2H) , 1,10 -1,32 (m, 3H) , 1,40
(bs, IH), 1,55-2,15 (m, 14H), 2,30 (m, IH) , 3,05-3,35 (m, 6H) ,
3,57-3,75 (m, 3H), 3,81 (bs, IH) , 4,35 (bs, IH), 4,42 (bs, IH) .
22, példa
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NaqxHOAc (í) H-(R)Cha-Pro-NH(CH2)3-N3
Ugyanúgy állítjuk elő, mint a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-1 (lásd a
3. példát) Boc-(R)Cha-Pro-OSu és Boc-NH-(CH3)2~NH3~ból· kiindulva [helyettesítve a Boc-Agm(Z)-t].
(ii) EtOOC-CH2~(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2xHOAc
Az alkilezést a 4. példában leírtak szerint végezzük,
H-(R)Cha-Pro-NH(CH2)3-Νβ-at és EtOOC-CH2Br-t használva, majd az (a) védőcsoport eltávolitási eljárással redukáljuk az azidot és így kapjuk a címbeli vegyületet.
(iii) EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Ugyanazt az eljárást alkalmazzuk, melyet a 19. példa (iii) fejezetében leírtunk Z-(R)Cha-Pro-Nag esetére, hogy elvégezzük a fenti (ii) pontban kapott amin guanidezését. A címbeli vegyületet tiszta formában RPLC [ΟΗβΟΝ/ΝΗ^ΟΑο(0,1 m, 3/7)], majd az oldószer bepárlása és fagyasztva szárítása (H2O) után kapjuk meg.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Úgy készítjük, hogy az (e) védőcsoport eltávolítása eljá-
rással eltávolítjuk a fenti (iii) termék védőcsoportját.
1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 0,99 (m, 2H) , 1,09-1,30 (m, 3H) , 1,44
(m, 1H), 1,59-2,09 (m, 12H), 1,92 (s, acetát), 2,29 (m, 1H), 3,20
(t, 2H) , 3,28 (m, 2H) , 3,52-3,63 (m, 3H), 3,76 (m, 1H), 4,38 (dd,
1H) , 4,42 (t, 1H) .
13C-NMR (125 MHz, D2O) : guanidin: δ 157,43; karbonil szénatomok:
δ 168,72, 171,36, 174,35.
23. példa
EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
A 22. példa (iii) pontja szerint állítjuk elő.
^-H-NMR (300 MHz , D2O) : δ 1,07 (m, 2H) , 1,17-1,59 [m, 7H; abból
1,38 (t, 3H ) ] , 1, .60-2,24 (m, 12H), 2, 04 (s, acetát), 2,39 (m,
1H) , 3,31 (t, 2H) , 3,39 (t, 2H) , 3,63-3,90 (m, 4H) , 4,12 (t, 1H) ,
4,36 (g, 2H), 4,46 (dd, 1H).
13C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: δ 157,37; karbonil szénatomok: δ 173, 73, 175,09, 175,70.
24. példa j-PrOOC-CH2~ (R)Cha-Pro-NaqxHOAc
Az alkilezést úgy végezzük, mint a 4. példában, de H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 20. példát) és Br-CH2COOiPr-t használunk, majd a (b) védőcsoport eltávolitási eljárással megkapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,85-1,05 (m, 2H), 1,1-2,15 [m, 22H; abból 1,23 (d, 3H), 1,25 (d, 3H)], 1,92 (s, acetát), 2,2 (m, 1H),
3,10-3,35 (m, 5H), 3,4 (m, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,65-3,8 (m, 2H),
4,28 (dd, 1H) , 5, 03 (m, 1H) .
13C-NMR (125 MHz, D2O): guanidin: δ 157,39; karbonil szénatomok:
δ 170,40, 172,00 és 174,50.
25. példa tBuOOC-CH2~(R)Cha-Pro-Naqx2TFA
Az alkilezést a 4. példa szerint végezzük úgy, hogy
H-(R) Cha-Pro-Nag.(Z)-t (lásd a 20. példát) és Br-CH2COOtBu-t használunk, majd a (b) védőcsoport eltávolitási eljárással kapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,9-1,15 (m, 2H), 1,15-2,15 [m, 25H; abból 1,55 (bs, 9H)], 2,3 (m, 1H), 3,15-3,45 (m, 4H), 3,55 (m,
1H), 3,7-3,95 (m, 3H), 4,3-4,4 (m, 2H).
13C-NMR (75 MHz, D2O) guanidin:
δ 157,55; karbonil szénatomok:
δ 166,55, 168,13 és 174,33.
26. példa
HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc (i) BnOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,20 g (0,40 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 20. példát) elegyítünk 0,115 g (0,40 mmol) benzil-oxi-karbonil-metil-bróm-acetáttal, 55 mg (0,40 mmol) K2CO3-mal és 5 ml CHjCN-nel. Az elegyet szobahőmérsékleten keverjük 6 óra hosszat. Az oldószert bepároljuk és a nyersterméket kromatografáljuk (CH2Cl2/MeOH, 9/1) így 0,20 g (71%) kívánt vegyületet kapunk az oldószer elpárologtatósa után.
(ii) HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy a fenti (i) pontban kapott termék védőcsoportját az (a) eljárással eltávolítjuk.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,6 (m, 8H),
1,6-2,15 (m, 10H), 1,99 (s, acetát), 2,23 (m, 1H), 3,1-3,4 (m,
4H), 3,4 5-3,65 (m, 4H), 3,7-3,9 (m, 3H), 4,34 (m, 1H), 4,48 (dd,
2H) .
13c-nmr (125 MHz, MeOD) , guanidin: δ karbonil szénatomok:
δ 176,1, 175,2, 174,9, 173,1.
27. példa
H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
A 4. példa szerint alkilezünk, H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a
20. példát) és Cl-CH2CONH2-t használva, a reakcióban katalitikus mennyiségű (10 mol%) KI jelenlétében, ezután az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással kapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,02 (m, 2H), 1,12-1,34 (m, 3H), 1,46 (m, 1H), 1,61-2,13 (m, 9H), 1,99 (s, acetát), 2,34 (m, 1H), 3,25 (t, 2H), 3,33 (t,
D2O): guanidin: δ 157,5; karbonil szénatomok:
13C-NMR (75 MHz, δ 168,94, 169,40,
174,43.
28. példa
HOOC-CH2-NH-CO-CH2~(R)Cha-Pro~Naqx2TFA
Az alkilezést a 4. példa szerint végezzük, úgy, hogy
20. példát) és Br-CH2CONHCH2COOBn-t használunk (lásd a kiindulási védőcsoport eltávolítási eljárással kapjuk meg a címbeli vegyületet.
1H-NMR ( 500 MHz, MeOD) : δ 1,01 (m , 2H), 1,15 -1,38 (m, 3H), 1,47
(m, 1H) , 1,64-2, 13 (m, 12H), 2,27 (m, 1H), 3,17-3, 26 (m, 3H),
3,37 (m, 1H), 3, 51 (m, 1H), 3,83 (m, 1H) , 3,88 (s, 2H), 3,93-4,06
(m, 2H) , 4,35-4, 45 (m, 2H) .
: guanidin:
(75 MHz, MeOD) δ 158,71; karbonil szénatomok:
13c-nmr δ 166,94, 168,35, 172,44, 174,17.
29. példa (HOOC-CH212~(R)Cha-Pro-NaqxHOAc (i) (EtOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2xHOAc
A 4. példa szerint alkilezünk, kiindulási anyagként
H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3-at (lásd a 22. példát) és Br-CH2COOEt-et (10 ekv.-t használunk a dialkilezés teljessé tételére) használunk, ezután az (a) védőcsoport eltávolítási eljárást alkalmazzuk, így megkapjuk a címbeli vegyületet.
(ii) (EtOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
A 19. példa (iii) pontjában a Z-(R)Cha-Pro-Nag esetére leírt eljárással végezzük a fenti amin guanidezését. A vegyületet RPLC-vel tisztítjuk [CH3CN/NH4OAC (O,1M), 4:6].
(iii) (HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Az észtercsoportok hidrolízisét az (e) védőcsoport eltávolítás! eljárással végezzük, dupla mennyiségű NaOH-val. Az anyagot RPLC-vel tisztítjuk, [CH3CN/NH4OAC (0,1 m), 2:8], az oldószert elpároljuk, a maradékot fagyasztva szárítjuk (H2O), így tisztán kapjuk meg a végterméket.
1H-NMR (300 MHz, D2O): δ 0,92-1,49 (m, 6H), 1,60-2,54 (m, 10H), 2,05 (s, acetát), 3,25-3,50 (m, 4H), 3,65-4,03 [m, 6H; abból
3,95 (s, 4H)], 4,49 (m, 1H), 4,71 (m, 1H; részben átfedi a H-O-D csúcs).
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 157,64; karbonil szénatomok: δ 168,62, 171,39, 174.30.
30. példa
HOOC-CHo-(Me)(R)Cha-Pro-Nagx2TFA (i) Me-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu-ból és Boc-Nag(Z)-bői készítjük ugyanúgy, mint azt leírtuk a 3. példában H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére.
(ii) HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nagx2TFA
Alkilezést végzünk a 4. példában leírtak szerint, kiindulási anyagként Me-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t és Br-CH2COOBn-t használunk, majd a (b) védőcsoport eltávolitási eljárással megkapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 0,8-1,06 (m, 2H), 1,08-1,27 (m, 4H),
1,55-2,10 (m, 12H), 2,30 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 3,14-3,33 (m, 4H), 3,63 (m, 1H), 3,81 (m, 1H), 4,13 (nyilvánvaló bs, 2H), 4,38 (br.dd, 1H) , 4,56 (bt, 1H).
'--’C-NMR (125,76 MHz, D2O) : guanidin: δ 157,40; karbonil szénatomok: δ 174,05, 168,83, 167,44.
31. példa
HOOC-CH2-(nBu)(R)Cha~Pro-Naqx2TFA
Alkilezést végzünk a 4. példában leírtak szerint, kiindulási anyagként nBu~(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 20. példát) és Br-CH2COOBn-t használunk, majd az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással megkapjuk a címben szereplő vegyületet.
1-H-NMR (500 MHz, D2O) : δ 0,78-0,88 (m, 3H) , 0,88-1,02 (m, 2H),
1,02-1,23 (m , 4H), 1,23 -1,38 (m, 2H), 1,45 -1,84 (m, UH) , 1,84-
2,10 (m, 3H) , 2,24 (m, 1H), 3,05-3,18 (m, 3H), 3,18- 3,38 (m, 3H),
3,57 (m, 1H) , 3,77 (m, 1H), 4,05-4,25 (m, 2H), 4,32 (m, 1H) , 4,50
(m, 1H) .
13C-NMR (125 MHz, D2O): guanidin: δ 159,17 ; karbonil szénatomok:
δ 175,66, 171,13, 169,31.
32. példa
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Alkilezést végzünk a 4. példában leírtak szerint, kiindulási anyagként H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 20. példát) és
Br-CH(Me)COOBn-t használunk, majd az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással megkapjuk a címbeli vegyületet mint két diasztereomer elegyét.
33. példa
HOOC-(RvaqyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/axHOAc
Ezt a vegyületet úgy kapjuk meg, hogy a 32. példa szerinti diasztereomereket RPLC-vel szétválasztjuk [CHgCN/NH^OAc 0,lm), 1/4], majd bepároljuk az oldószert. Ez a diasztereomer a kettő közül elsőként jön le az oszlopról.
4H-NMR (300 MHz, D2O): 2 rotamer kb: 9:1 arány): δ 0,78 (m, kevesebb rotamer), 1,07 (m, 2H), 1,17-1,42 (m, 3H), 1,48-1,64 [m, 4H; abból 1,56 (d, 3H)] , 1,64-1,95 (m, 9H) , 1,95-2,20 (m, 3H) , 2,00 (s, acetát) , 2,37 (m, 1H) , 3,28 (t, 2H) , 3,38 (t, 2H) , 3,53 (m, kevesebb rotamer), 3,63 (m, 2H), 3,77 (m, 1H), 4,24 (d, kevesebb rotamer), 4,35-4,50 (m, 2H), 4,60 (d, kevesebb rotamer).
34, példa
HOOC-(RvaqyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Naq/bxHOAc
Mindenben a 33. példában leírt eljárást alkalmazzuk a 32.
példa szerint kapott vegyület esetére, igy kapjuk meg a címbeli vegyületet. Az a diasztereomer az első után jön le az oszlopról. 4H-NMR (300 MHz, D2O, 2 rotamer kb: 9:1 arány): δ 0,95 (m, kevesebb rotamer), 1,12 (m, 2H), 1,22-1,40 (m, 3H), 1,40-1,67 [m,
4H; abból 1,60 (d, 3H)] , 1, 67-2,00 (m, 9H) , 2,00-2, 25 (m, 3H),
2,03 (s, acetát), 2,40 (m, 1H) , 3,25-3 , 48 (m, 4H), 3,66-3,84 (m
2H), 3,93 (m, 1H), 4,38 (m, 1H) , 4,50 (m, 1H), 4,93 (m kevesebb
rotamer).
13C-NMR (75,5 MHz, D2O): δ 157,42; karbonil szénatomok: δ 168,05, 171,99, 174,04.
35. példa
EtOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Naqx2TFA
Mindenben a 22. példában leírtak szerint járunk el, de az alkilezési lépésben EtOOC-CH(Me)-Br-t használunk Br-CH2-COOEt helyett.
-’-H-NMR (500 MHz, MeOD, 2 diasztereomer kb: 2,5:1 arány és 4 rotamer): δ 0,88-2,43 (m, 25H) , 3,1-4,55 (m, UH) .
13C-NMR (75 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,65; karbonil szénatomok: δ 174,33, 170,66, 168,20.
36. példa
HOOC-(RvaqyS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Naq/axHOAc
Alkilezést végzünk a 4. példában leírtak szerint H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 20. példát) és Br-CH(nPr)COOEt-et használva, és az (e) védőcsoport eltávolítási eljárást alkalmazzuk, majd a (b) védőcsoport eltávolítása után kapjuk a HOOC-(R,S)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm-ot. A címbeli vegyületet megkajuk, ha RPLC-vel szétválasztjuk a két diasztereomert (ez a diasztereomer jön le elsőnek a kettő közül az oszlopról) (0,1 m CHgCN/NH^OAc, 1/4), bepároljuk az oldószert, majd a maradékot fagyasztva szárítjuk (H2O).
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,85-1,05 [m, 5H; abból 0,95 (t, 3H)], 1,1-2,05 (m, 20H), 1,95 (s, acetát), 2,18 (m, 1H), 3,15-3,3 (m, 4H) , 3,35 (m, 1H) , 3,46 (m, 1H) , 3,85 (m, 1H) , 4,04 (m, 1H) , 4,38 (dd, 1H).
13C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,73; karbonil szénatomok: δ 171,63, 174,43 és 176,78.
37. példa
HOOC-(R)CH(CHp-QH)-(R)Cha-Pro-NaqxTFA
A 4. példában leírtak, szerint alkilezünk, H- (R) Cha-Pro-Nag (Z) (lásd a 20. példát) és Br-(S)CH(CH2~OBn)-COOBn használatával, majd az (a) védőcsoport eltávolítás! eljárással kapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (300 MHz, O2O) : δ 0,75-1,56 (m, 7H) , 1,56-2,30 (Μ, UH) ,
2,40 (m, 1H), 3,15-3,55 (m, 4H), 3,55-4,60 (m, 7H).
38. példa
HOOC-(R,S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro~Naqx2TFA
A 4. példában leírtak szerint alkilezünk H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (lásd a 20. példát) és Br-CH(Ph)COO^Bu alkalmazásával, majd az (a), azt követően az (f) védőcsoport eltávolítás! eljárásokkal
kapjuk meg a címbeli vegyületet, 1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,8-1, mint két diasztereomer elegyét.
1 (m, 2H) , , 1,1-2,18 (m, 16H) ,
2,26 (m, 1H); 3,04-3,35 (m, 5H), 3,45 (m, 1H), 3, 7 (m, 1H) , 4,35
(m, 1H), 4,85 (s, 1H, egyik izomer), 5 , 05 (s, 1H, a másik
izomer), 7,4-7,6 (m, 5H), 7,75 (bt, 1H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 158,68; karbonil szénatomok: δ 174,39, 174,15 és 170,5, 170,06 és 168,32, 167,78.
39. példa
HOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-NaqxHOAc
A 21. példában leírtak szerint alkilezünk, H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (lásd a 20. példát) és TFO-(R)CH(CH2CH2Ph)-COOEt alkalmazásával, majd a (e), ezt követően az (a) védőcsoport eltávolítás! eljárásokkal kapjuk a címbeli vegyületeket.
^H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,77-1,05 (m, 2H) , 1,05-1,35 (m, 5H),
1,35-2,16 (m, 14H :), 1,88 (s, acetát ) , 2,71 (t, 2H), 3,07-3,53 (m
7H), 3,73 (m, 1H) , 4,32 (m, 1H), 7, 03-7,25 (m, 5H) .
13C-NMR (75 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,71; karbonil szénatomok:
δ 174,15, 177,31, 182,61.
40. példa
HOOC-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-NaqxHOAc
Alkilezést végzünk a 4. példában leírtak szerint H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (lásd a 20. példát) és Br-CH(CH2CH2Ph)COOEt felhasználásával, ezt követi az (a) és (e) védőcsoport eltávolítási eljárás, melyekkel HOOC-(R,S)CH(CH2-CH2-Ph)-(R)Cha-Pro-Nag-ot kapunk. A címbeli vegyületet úgy kapjuk meg, hogy RPLC-vel szétválasztjuk a két diasztereomert [CH3CN/NH4OAc (0,lm), 2/3], az oldószert bepároljuk, majd a maradékot fagyasztva szárítjuk (H2O).
1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,97 (m, 2H), 1,10-1,41 (m, 3H), 1,43-2,30 (m, 16H) , 1,96 (s, acetát) , 2,70 (m, 2H) , 3,06-3,26 (m,
3H), 3,28-3,66 (m, 3H), 3,84 (m, 1H), 4,14 (bt, 1H), 4,39 (dd,
1H), 7,11-7,28 (m, 5H).
13C-NMR (75 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,66.
41. példa
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NaqxHOAc (i) EtOOC-CH2CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-NH2
A 15. példában leírtak szerint alkilezünk, de H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)g-N3-at használunk H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) helyett, ezt követően az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással megkapjuk a címbeli vegyületet.
(ii) Et-OOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
A fenti amint ugyanúgy guanidinezzük, amint azt a 19. példában a Z-(R)Cha-Pro-Nag esetére leírtuk, így megkapjuk az (ii) címbeli vegyületet.
(iii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy a fenti (ii) termék védőcsoportját az (e) eljárással eltávolítjuk.
2H-NMR (500 MHz, D2O) : δ 1,12 (m, 2H) , 1,22-1,48 (m, 3H) , 1,54
(bs, 1H), 1,70-2,37 (m, 12H) , 2,14 ( s, acetát), 2, 53 (m, 1H)
2,70 (bs, 2H), 3,15 (t, 1H), 3,25-3 , 55 (m, 5H), 3, 75 (m, 1H)
3,93 (m, 1H), 4,43 (t, 1H) , 4,52 (m, 1H) .
42. példa
EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
A 41. példa (ii) pontja szerint állítjuk elő.
2H-NMR (500 MHz, D2O) : δ 0,97 (m, 2H) , 1,11-1,39 [m, 7H; ebből
1 , 30 (t, 3H)J, 1, 50 (t, 2H) , 1, 62-1,76 (m, 5H), 1,76-2,14 (m, 5H) ,
1,93 (s, acetát) , 2,29 (m, 1H) , 2,62 (t, 2H), 2,77-2,94 (m, 2H) ,
3,23 (dd, (t, 1H) 2H), 3, 32 (t, 2H) , 3, 60-3,87 (m, 3H), 4,20 (q, 2H) , 4,36
22C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: δ 157,39; karbonil szénatomok: δ 182,05, 175,13, 175,02.
43. példa
HOOC-(CH213-(R)Cha-Pro-Nagx2HOAc (i) Et-OOC-CH=CH-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z) ekv. H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 20. példát) és 1,1 ekv.
etil-3-bróm-krotonátot feloldunk 15 ml/mmol acetonitrilben.
Kálium-karbonátot adunk hozzá, és a reakcióelegyet 2 órán át keverjük szobahőmérsékleten. Szűrés és az oldószer bepárlása után a nyersterméket flash kromatográfiával tisztítjuk (CH2Cl2/MeOH).
Végül az oldószert bepároljuk és a terméket vákuumban szárítjuk. 1H-NMR (500 MHz, CDC13): δ 0,73-1,0 (m, 2H), 1,0-1,4 [m, 8H;
, 1,43-2,15 (m, 12H), 2,96 , 56 (m, 1H) , 4,15 (q, (bs ,
1H), 5,03 (s, 1H),
6,0
7,05 (bs,
7,17-7,37 (m, 5H),
7,5 (bs, 1H).
(ü)
EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nagx2TFA
Úgy készítjük, hogy az (a) védőcsoport eltávolítási élj árással eltávolítjuk a fenti (i) pont szerinti termék védőcso port j át.
(iii) HOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nagx2HOAc
Úgy állítjuk elő, hogy a fenti (ii) pont szerinti termék védőcsoportját eltávolítjuk az (e) védőcsoport eltávolítási elj árással.
ÍH-NMR (5 00 MHz, D2 0) : δ 1, 02 (bs , 2H) , 1,08-1, 32 (m, 3H), 1,42
(bs, 1H) , 1,55-2, 15 (m, 14H) , 1,92 (s , acetát), 2 , 33 (bs, 3H),
3,00 (bs, 1H), 3, 07 (bs, 1H) , 3 , 18- -3,40 (m, 4H) , 3,62 (bs, 1H),
3 , 82 (bs, 1H), 4, 33 (bs, 1H) , 4,40 (bs , 1H) .
13C-NMR (125 MHz, D20): guanidin: δ 157,42; karbonil szénatomok: δ 181,87, 174,34, 168,64.
44. példa
EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nagx2TFA
A 43. példa (ii) pontja szerint állítjuk elő.
1H-NMR (300 MHz, MeOD/D2O): δ 0,63-1,30 [m, 9H; abból 1,02 (t, 3H) ] , 1,30-1,97 (m, 14H), 2,06 (bs, 1H), 2,28 (m, 2H), 2,72-3,20 (m, 6H) , 3,36 (m, 1H) , 3,60 (m, 1H), 3,94 (m, 2H), 4,06 (m, 1H), 4 , 17 (m, 1H) .
13C-NMR (75 MHz, MeoD/D20): guanidin: δ 158,10; karbonil szénatomok: δ 175,40, 174,23, 168,54.
45. példa
HOOC-CO-(R)Cha-Pro-NaqxHOAc (i) EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,50 g (0,97 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-1 oldunk 0,54 ml trietil-aminban és 8 ml CH2Cl2-ben. 0,146 g (1,07 mmol) etil-oxalil-kloridot - melyet 2 ml CH2Cl2 _ben oldottunk - adunk hozzá, miközben a hőmérséklet 22°C-ról 28°C~ra nő és a reakcióelegyet szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. A szerves fázist kétszer mossuk vízzel, szárítjuk (Na^O^) és flash kromatografáljuk, [EtOAc/EtOH (99%) 9/1], így 92 mg (15%) címbeli vegyületet kapunk.
(ii) HOOC-CO(R)Cha-Pro-NagxHOAc
A címbeli vegyületet úgy kapjuk meg, hogy elvégezzük a (b),
majd az (e) védőcsoport eltávolít ási eljárást.
1H-NMR (300 MHz, MeOD) : δ 0,88-1, 14 (m, 2H) , 1, 15-1,5 (m, 4H),
1,5-2,3 (m, 13H), 1,9 (s, acetát) , 3,1-3,43 (m, 4H), 3,6 (m, 1H)
4,05 (m , 1H) , 4,43 (dd, 1H), 4,5 (m, 1H).
18C~NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 157,57; karbonil szénatomok:
δ 165,94, 173,95, 174,85 és 181,22.
46. példa
MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-NaqxHOAc (i) MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
A metil-észtert úgy állítjuk elő, hogy átészterezzük az EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 45. példát) az oszlopon flash kromatografálás alatt úgy, hogy EtOAc/MeOH (9:1) elegyet használunk eluenskéntj hozam: 55%.
(ii) MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi, (i) pont szerinti termék védőcsoportját a (b) eljárással eltávolítjuk.
^-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,9-1,1 (m, 2H) , 1,1-2,3 (m, 17H) 1,9 s, acetát) , 3,12-3,4 (m, 4H) , 3,52-3,67 (m, 2H) , 3,9 (s, 3H) ,
4,35 (m, 1H), 4,65 (m, 1H).
l^C-NMR (75 MHz, D2O) : guanidin: δ 157,52; karbonil szénatomok: δ 159,11, 161,20, 173,17 és 174,90.
47. példa (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Naqx2TFA
A 4. példában leírtak szerint alkilezünk H-(R)Cha-Pro-Nag(Z) (lásd 20. példa) és α-bróm-butirolakton felhasználásával. Ezután az (a) védőcsoport eltávolítási eljárást végezzük el, és megkapjuk a címbeli vegyületet, mint két diasztereomer elegyét. ^H-NMR (300 MHz, D2O, diasztereomerek elegye): δ 1,0-1,43 (m,
5H) , 1,45-1,60 (br,s, 1H) , 1,64-2,28 (m, 12H) , 2,31-2,50 (m, 1H) ,
2,80-2,98 (m, 1H), 3,23-3,46 (m, 4H), 3,66-3,79 (m, 1H), 3,82-3,96 (m, 1H), 4,33-5,08 (m, 5H, részben átfedi a H-O-D jel).
48. példa
HOOC-(R,S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-NaqxHOAc (i) BnOOC-(R,S)CH(CH2COOBn)-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,21 g (0,42 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 20. példát) és 0,12 g (0,42 mmol) dibenzil-maleátot oldunk 10 ml CH^CN-ben. Az elegyet egy éjjelen át hevítjük visszafolyóhűtő alkalmazásával, bepároljuk és flash kromatografáljuk (CH2Cl2/MeOH, 94/6). Az oldószert lepároljuk, így kapjuk meg a kívánt vegyületet 22%-os hozammal.
(ii) HOOC-(R,S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (i) pontban kapott termék védőcsoportját az (a) eljárással eltávolítjuk.
XH-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,9-2,4 (m, 19H), 2,00 (s, acetát),
2,7-3,0 (m, 2H), 3,1-3,6 (m, 5H), 3,75-3,9 (m, 2H), 4,2-4,5 (m, 2H) .
49. példa
MeOOC-(R,S)CH(CHpCOOMe)-(R)Cha-Pro-NagxHOAc (i) MeOOC-(RS)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag(Z)
0,21 g (0,42 mmol) H(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd a 20. példát) és 0,24 g (1,7 mmol) dimeti'l-maleátot oldunk 15 ml MeOH-ban. Az elegyet egy éjjelen át visszafolyóhűtő alkalmazásával hevítjük, bepároljuk és flash kromatografáljuk (CH2Cl2/MeOH, 9/1). Az oldószert lepároljuk és így megkapjuk a kívánt vegyületet 45%-os hozammal.
(ii) MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (i) pont szerint kapott termék védőcsoportját a (c) eljárással eltávolítjuk.
Ί2 1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,85-1,1 (m, 2H), 1,15-2,3 (m, 17H),
1,91 (s, acetát), 2,6-2,8 (m, 2H), 3,1-3,5 (m, 5H), 3,5-3,8 (m,
10H); abból 4 szingulett 3,66, 3,68, 3,71, 3,73), 4,29 (m, 1H).
HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nagx2TFA (i) tBuOOC-Ph-4CH2- (R) Cha-Pro-NH- (CH2) 3-N3
0,39 g (1,1 mmol) H-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3~ot (lásd a 22. példát) és 0,33 g (1,2 mmol) terc-butil-p-bróm-metil-benzoátot feloldunk 10 ml CH3CN-ben. és 0,19 g (2,4 mmol) K^CC^-at adunk hozzá. Az elegyet visszafolyóhűtő alkalmazásával egy éjszakán át hevítjük és bepároljuk. A nyers terméket flash kromatográfiával tisztítjuk (CH2Cl2/MeOH, 92:8), így 0,50 g címbeli vegyületet kapunk (84%).
(ii) tBuOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3~NH2
0,60 g (1,8 mmol) bisz(fenil-tio)-sztannán, 0,20 g (1,8 mmol) tiofenol és 0,18 g (1,8 mmol) trietil-amin 50 ml CH2Cl2~vel készült oldatához 0°C-on hozzáadunk 0,50 g (0,92 mmol) tBuOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)3-N3-ot. Az elegyet 0°C~on 30 percig, majd szobahőmérsékleten 4 órán át keverjük. Ezután az elegyet felhígítjuk CH2Cl2-vel, majd vizes nátrium-hidrogénkarbonát oldattal és ezután háromszor egymás után 2%-os H2O2-oldattal mossuk. A szerves fázist híg sósavval extraháljuk. Az egyesített savas vizes réteget EtOAc-val mossuk és ezt követően meglúgosítjuk vizes NaOH-dal
A vizes réteget kétszer extraháljuk etil-acetáttal
Az egyesített szerves fázist Na2SC>4-tal szárítjuk telítve), (8:2) 0,12 g (26%) címbeli vegyületet kapunk.
és bepároljuk. Flash kromatográfiával (CH2Cl2/MeOH(NH3)-mai
(iii) HOOC-Ph-4-CH2~(R)Cha-Pro-Nagx2TFA
A fenti amint a 19. példában a Z-(R)Cha-Pro-Nag esetére leírt módon guanidinezzük, majd elvégezzük az (f) védőcsoport eltávolitási eljárást, így kapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,9-1,5 (m, 7H) , 1,4-1,9 (m, 9H) ,
1, 95- 2,1 (m, 2H) , 2 , 16 (m, 1H), 2,32 (m, 1H), 3,2-3,3 (m, 3H) ,
3, 41 (pentet, 1H) , 3,53 (m, 1H), 3,77 (m, 1H), 4,2-4,3 (m, 3H)
4, 42 (dd, 1H) , 7, 15 (d, 2H) , 8,10 (d, 2H)
13c-NMR (125 MHz, MeOD), guanidin: δ 160,8; karbonil szénatomok: δ 174,3, 168,9, 168,2.
51. példa (HO)2P (0)-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc mg (92 mmol) (EtO)2PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd az 53. példát) feloldunk 3 ml CH^CN-ben. 0,15 ml trimetil-szilil-bromidot adunk hozzá és az elegyet szobahőmérsékleten állni hagyjuk 21 órán át. Bepárlás után és NMR analízissel úgy találtuk, hogy valamennyi észter visszamaradt. A nyersanyagot ismét feloldjuk 3 ml CH^CN-ben és 0,15 ml trimetil-szilil-bromidot adunk hozzá. 5 óra múlva az elegyet bepároljuk és RPLC-vel tisztítjuk (0,1 m CH3CN/NH4OAC, 30:70), a kapott oldatot szűrjük, bepároljuk, majd fagyasztva szárítjuk, igy 8%-os hozammal kapjuk meg a végterméket.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,8-1,1 (m, 2H), 1,15-1,4 (m, 4H),
1,5-1,9 (m, 10H), 1,9-2,1 (m, 4H), 1,96 (s, acetát), 2,20 (m, 1H) , 2,95 (m, 1H) , 3,0-3,2 (m, 3H) , 3,4-3,5 (m, 2H) , 4,09 (m, 1H), 4,39 (bd, 1H), 4,59 (m, 1H).
12C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,6; karbonil szénatomok: δ 174,2, 170,6.
52. példa
EtO(HO)P(0)-CH2~(R)Cha-Pro-Nagx2HOAc (i) (EtO)(HO)PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag(Z) ml (77 mmol) (EtO)2PO-CH2~(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t (lásd az
53. példát) feloldunk 2 ml EtOH-ban és 2 ml 2M NaOH-oldatban. Az elegyet egy éjjelen át keverjük, majd bepároljuk. A nyersanyagot RPLC-vel tisztítjuk (0,1 m CH^CN/NH^OAc, 30:70), ezután szűrjük és az oldószert bepároljuk, így kapjuk a címbeli vegyületet.
(ii) (EtO)(HO)PO-CH2-(R)Cha-Pro-Nagx2H0Ac
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (i) pont szerinti termék védőcsoportját a (c) eljárással eltávolítjuk.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,9-1,1 (m, 2H), 1,15-1,35 [m, 6H;
abból 1,28 (t, 3H)], 1,35-1,5 (m, 2H), 1,5-1,6 (m, 1H), 1,65-1,8 (m, 6H), 1,9-2,1 (m, 3H), 1,95 (s, acetát), 2,19 (m, 1H), 2,8-3,0 (m, 2H), 3,1-3,25 (m, 2H), 3,27 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,48 (m, 1H), 3,9-4,05 (m, 4H), 4,36 (bd, 1H).
12C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,6; karbonil szénatomok: δ 175,0, 174,7.
53. példa (EtO)2P(O)-CH2~(R)Cha-Pro-NaqxHOAc (i) (EtO) 2PO-CH2-(R) Cha-Pro-Nag (Z)
0,2 g (0,40 mmol) H-(R)Cha-Pro-Nag(Z)-t oldunk 5 ml THF-ben és 0,11 g (0,80 mmol) kálium-karbonátot és 0,12 g (0,40 mmol) dietil-triflil-metil-foszfonátot adunk hozzá. Az elegyet 2 óra
hosszat keverjük szobahőmérsékleten. A reakcióelegyet vízzel feldolgozzuk és a vizes fázist háromszor extraháljuk EtOAc-val. Az egyesített szerves fázist Na2S04-on szárítjuk, és bepároljuk., így 0,14 g (53%) címbeli vegyületet kapunk.
(ii) (EtO)2PO-CH2-(R)Cha-Pro-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (i) pont szerinti termék védőcsoportját a (c) védőcsoport eltávolítási eljárással eltávolító uk.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,85-1,05 (m, 2H), 1,15-1,3 (m, 5H),
1,34 (t, 6H), 1,5-1,85 (m, 8H), 1,9-2,05 (m, 3H) , 1,91 (s,
acetát), 2,10 (m, 1H) , 2,22 (m, 1H) t. 2,90 (dd, 1H) - 3,05 (dd,
1H), 3,1 -3,3 (m, 3H) , 3,42 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 3, 71 (dd, 1H)
3,82 (m, 1H), 4,1 -4,2 (m, 4H) , 4,28 (dd, 1H) .
13c-nmr (125 MHz, MeOD ): guanidin: δ 158, 7 ; karbonil szénatomok
δ 176,1, 175,1.
54. példa
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-MagxHOAc (i) H- (R)Cha-Pro-NH- (CH2)2-NH(Z)
Boc-(R)Cha-Pro-OSu-ból és H2N-(CH2)2-NH(Z)-bői állítjuk elő ugyanúgy, mint leírtuk a 3.' példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) előállítását .
(ii) EtOOC-CH2-(R)Cha-Pro-NH-(CH2)2-NH2xHOAc
Alkilezést végzünk a 4. példában leírtak szerint, majd az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással megkapjuk a címbeli vegyületet.
(iii) HOOC-CH2(R)Cha-Pro-MagxHOAc
A fenti amint ugyanúgy guanidinezzük, amint azt a 19. pél• a · · dában Z-(R)Cha-Pro-Nag-ra leírtuk, majd az (e) védőcsoport eltávolítási eljárás után megkapjuk a címbeli vegyületet, amelyet
RPLC-vel (0,lm CH3CN/NH4OAc, 1/4) tisztítunk, és fagyasztva szárítunk (H2O).
1H-NMR (300 MHz, D2O): δ
0,90-1,18 (m, 2H)
1,19-1,43 (m, 3H) ,
1, 52 (m, 1H) , (m, 10H)
2,06 (s, acetát),
31-2,47 (m,
1H), 3,44 (m,
2H), 3,50 (m, 2H) ,
3,60-3,75 (m, 1H),
4,46-4,54 (m,
157,82 ;
karbonil szénatomok:
δ 168,80, 171,41, 174,81.
55. példa
H-(R,S)Pro(3 -Ph)-Pro-Aqmx2TFA
Boc-(R, S ) Pro (3-Ph)-Pro-OSu-ból állítjuk elő (lásd a kiindulási anyagok készítését) ugyanúgy, mint azt a 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére leírtuk, majd a (b) védőcsoport eltávolítás! eljárást végezzük el.
1H-NMR (500 MHz, D2O, két diasztereomer elegye ismeretlen relatív sztereomerkémiai arányban): δ 1,0-1,8 (m, 7H), 2,0-2,5 (m, 3H), 2,8-4,3 (m, 10H), 4,56 (d, 1H, több), 4,90 (d, 1H, több) , 7,2-7,5 (m, 5H) .
43C-NMR (125,76 MHz, D2O): guanidin: δ 157,36 (kevesebb és több); karbonil szénatomok: δ 174,1 (több), 174,0 (kevesebb), 167,8 (több), 167,0 (kevesebb).
56. példa
H-(R,S)ProL3-(transz)CH]-Pro-Aqmx2TFA
Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ch]-Pro-OSu-ból állítjuk elő (lásd a
kiindulási anyagok előállítását) ugyan olyan úton, mint azt leírtuk H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) előállítására a 3. példában, majd a (b) védőcsoport eltávolítási eljárást végezzük el.
R-NMR (500 MHz, D20, két diasztereomer elegye, arány 1,8/1): δ
0,95-1,32 (m, 5H) , 1,35-1,46 (m, 1H) , 1,50-1,92 (m, 10H) , 1,93-2,15 (m, 4H), 2,23-2,43 (m, 2H), 3,15-3,30 (m, 4H), 3,35-3,50 (m, 2H), 3,57-3,68 (m, 1H), 3,74-3,82 (m, 1H), 4,34-4,41 (m, 1H),
4,51 (d, 1H, kevesebb), 4,48 (d, 1H, több).
13C-NMR (125,76 MHz, D20): guanidin: δ 157,36 (kevesebb és több), karbonil szénatomok: δ 174,34 (több), 174,07 (kevesebb), 168,94 (kevesebb és több).
57. példa
HOOC-CHo(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro~Agmx2TFA (i) H-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Agm(Z)
Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-OSu-ból állítjuk elő (lásd a kiindulási anyagok készítését) ugyanúgy, amint azt a 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) előállítására leírtuk.
(ii) HOOC-CH2-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Agmx2TFA
Br-CH2COOBn alkalmazásával alkilezünk, amint azt a 4. példában leírtuk, majd elvégezzük a (b) védőcsoport eltávolítási eljárást és így a címbeli vegyületet két diasztereomer elegyeként kapjuk meg.
•R-NMR (500 Mhz, MeOD, két diasztereomer elegye aránya kb:
1,1/D δ 1,40-1,80 (m, 6H), 1,85-2,05 (m,
1H), 2,10-2,30 (m,
1H) , 2,50-2,65 (m, 2H) , 3,10-3,40 (m, 6H) ,
3,50-3,70 m, 2H) ,
7,30-7,60 (m, 5H).
3,9-4,40 (m, 4H), 4,63 (d, 1H, több), 4,67 (d,
1H, kevesebb),
13C-NMR (125,76 MHz, D20): guanidin: δ 157,52 (mindkét izomer);
karbonil szénatomok: δ 173,87, 173,73, 169,12, 168,94, 167,21,
167,00.
58. példa
HOOC-CH2(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Nagx2TFA (i) H-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Nag(Z)
Boc-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-OSu-ból (lásd a kiindulási anyagok előállítását) és Boc-Nag(Z)-bői állítjuk elő a 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére leírt módon.
(ii) HOOC-CH2-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Nagx2TFA
A 4. példában leírtak szerint alkilezünk Br-CH2COOBn alkalmazásával, majd a (b) védőcsoport eltávolítási eljárással meg kapjuk a címbeli vegyületet két diasztereomer elegyeként.
4H-NMR (500 MHz, MeOD, két diasztereomer elegye, arány kb:
1,5/1): δ 1,40-1,85 (m, 4H), 1,9-2,00 (m, 1H), 2,10-2,30 (m, 1H),
2,45-2,70 (m, 2H), 3,08-3,46 (m, 6H), 3,57-3,70 (m, 2H)
3,90-4,0 (m, 1H), 4,32-4,40 (m, 1H), 4,04 és 4,29 (AB-kvartett, 2H, több),
4,16 és 4,37 (AB-kvartett, 2H, kevesebb), 4,60 (d, 1H, több),
4,64 (d, 1H, kevesebb), 7,3-7,6 (m, 5H).
13C-NMR (125,76 MHz, D2O): guanidin: δ 157,48 (mindkét izomer); karbonil szénatomok: δ 173,90, 173,71, 169,01, 168,94, 167,07 (mindkét izomer).
59. példa
HOOC-CH2-(R) Cha-Pic-Aqmx2TFA (i) H-(R)Cha-Pic-Agm(Z)
Boc-(R)Cha-Pic-OSu-ból (lásd a kiindulási anyagok előállí « ·
- 79 tását) állítjuk elő a 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére leírt módon.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agmx2TFA
A 4. példában leírtak szerint alkilezünk Br-CH2COOBn alkalmazásával, majd az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással megkapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 1,02 (m, 2H), 1,13-2,00 (m, 20H), 2,24 (bd, IH), 3,12-3,45 (m, 5H), 3,71 (bd, IH), 3,87 (s, 2H), 4,65 (bt, IH), 5,06 (m, IH).
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 157,47; karbonil szénatomok: δ 169,42, 170,03, 172,71.
60. példa
HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-AqmxHOAc (i) Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Agm(Z)
Boc-(Me)(R)Cha-Pic-OSu-ból készítjük a 3. példában a
H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) előállítására leírt módon.
(ii) H00C-CH2-(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-AgmxHOAc
A 4. példában leírtak szerint alkilezünk Br-CH2COOBn alkalmazásával, majd a (b) védőcsoport eltávolítási eljárással megkapjuk a címbeli terméket.
Megjegyzés: a Pic epimerizációja következett be a szintézis valamely pontján.
Az 1H-NMR-spektrum komplex, két diasztereomert tartalmaz, körülbelül 1:1 arányban és azok rotamerjeit.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,75-2,15 (számos m, 20H) , 1,95 (bs, acetát), 2,2-2,7 [6H, a jelek két különálló csoportját figyeljük meg kb. 1:1 arányban; abból 2,35 és 2,55 (s, 3H)], 3,0-3,5 (m,
- 80 6Η), 3,9-4,17 [m, 2Η; abból 4,14 (dd)], 4,4-4,5 (m, 1H), 4,97-5,15 (két bdd, 1H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 157,50; karbonil szénatomok: δ 169,65, 170,01, 170,54, 172,67, 172,89.
61. példa
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha~Pic-AqmxTFA
Alkilezést végzünk a 4. példában leírtak szerint H-(R)Cha-Pic-Agm(Z) (lásd az 59. példát) és Br-CH(Me)COOBn alkalmazásával. Utána az (a) védőcsoport eltávolítási eljárást végezzük el, úgy megkapjuk a címbeli vegyületet mint két diasztereomer elegyét.
62, példa
HOOC-(RvaqyS)CH(Me)-(R)Cha~Pic~Aqm/ax2TFA
Úgy kapjuk meg, hogy a 61 példa szerint kapott diasztereomereket RPLC-vel elválasztjuk (0,1 m CH3CN/NH4OAc, 1/3). Ezután bepároljuk az oldószert és az anyagot H2O/TFA-ból fagyasztva szárítjuk. Ez a diasztereomer a kettő közül elsőként jön le az oszlopról.
1H-NMR (300 MHz, D2O, 2 rotamer kb : 5:1 arány): δ 0,70 (m,
kevesebb rotamer), 0,75 -1,0 (m, 2H), 1,0-1,28 (m, 3H), 1,28-1,83
[m, 20H; abból 1,57 (d, 3H)], 2 , 14 (bd, 1H), 2,92 (t, kevesebb
rotamer), 3,03-3,32 (m, 5H), 3, 59 (bd, 1H), 3,85 (q, kevesebb
rotamer), 3,98 (q, 1H), 4,30-4, 50 (m, kevesebb rotamer), 4,54 (m
1H), 4,95 (s, 1H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin : δ 157,39; karbonil szénatomok:
δ 172,26, (2 szénatom), 169,92.
«« ·· ·« ♦ « · 9 9 9 · ·· « 99 9 · ♦ * * · ·»«· ·· »999 99
63. példa
HOOC(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pic~Aqm/bx2TFA
A címbeli vegyületet úgy kapjuk meg, hogy a 62. példában leírt eljárást végezzük el a 61. példa szerint kapott vegyülettel. Ez a diasztereomer az első vegyület után jön le az oszlopról.
'-H-NMR (500 MHz, D2O, 2 rotamer kb: 5:1 arány) . δ 0,72 (m,
kevesebb rotamer), 0,82 (m, kevesebb rotamer), 0,97 (m, 2H),
1,0-1,23 (m, 3H), 1,23-1,40 (m, 2H), 1,40-1,83 [m, 18H; abból
1,63 (d, 3H)], 2,1 1 (d, 1H), 2,17 (d, kevesebb rotamer), 2,92 (t,
kevesebb rotamer), 3,05-3,26 (m, 4H), 3,29 (t, 1H) , 3,74 (d, 1H) ,
4,02 (q, 1H), 4,34 (d, kevesebb rotamer), 4,41 (dd, kevesebb
rotamer) , 4,52 (t, 1H), 4,95 (s, 1H) .
13c-nmr (125 MHz, D2O): guanidin : δ 154,68; karbonil szénatomok:
δ 169,81 , 169,60, 167,36.
64, példa
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agmx2TFA
H-(R)Cha-Pic-Agm(Z)-bői (lásd az 59. példát) állítjuk elő ugyanúgy, amint azt a HOOC-CH2~CH2-(R)Cha-Pro-Agm előállítására a 15. példában leírtuk, de 1,2 ekv. benzil-akrilátot használunk 1,1 ekv. helyett.
^H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamer kb. 4:1 arány), δ 0,70-0,90 (m, kevesebb rotamer), 0,90-1,0 (m, 2H), 1,05-1,25 (m, 3H), 1,30-1,45 (m, 2H), 1,45-1,85 (m, 15H), 2,1 (bd, 1H), 2,2 (bd, kevesebb rotamer), 2,75 (t, 2H), 2,95 (t, kevesebb rotamer), 3,1-3,4 (m,
7H), 3,75 (bd, 1H), 4,55 (t, 1H), 4,95 (m, 1H).
···
- 82 <·«« ·· • · ·« · * • ·* · «··« ·*····
Í-^C-NMR (75 MHz, D20) : guanidin: δ 157,48; karbonil szénatomok: δ 170,10, 172,58, 174,75.
65. példa
H-(R)Cha-Pic-Naqx2TFA (i) Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) (ia) Kiindulási anyagként Boc-(R)Cha-Pic-OSu-t használunk és ugyanazt az eljárást alkalmazzuk, amelyet a Boc-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére a 3. példában leírtunk.
(ib) Boc-(R)Cha-Pic-OH kiindulási anyagból:
0,432 ml (2 mmol) difenil-foszforil-azidot adunk 765 mg (2 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH 5 ml DMF-fel készült oldatához -10°C-on, keverés közben. 10 perc múlva hozzáadunk 600 mg (2,1 mmol) H-Nag(Z)x2HCl-t (lásd a kiindulási anyagok készítését) 5 ml DMF-ben oldva és 615 mg (4,4 mmol) trietil-amint. A reakcióelegyet jégfürdőben tartjuk 3 óráig, utána szobahőmérsékleten 12 óráig, ezután vízbe öntjük. A vizes fázist extraháljuk EtOAc-tal, utána a szerves fázist szárítjuk (MgSO4), és az oldószert vákuumban bepároljuk. 1,18 g (96%) terméket kapunk diasztereomerek elegyeként (epimerek Pic-ben) 97:3 arányban (RS/RR).
(ic) Boc-(R)Cha-Pic-OH-ból kiindulva:
4,2 g (21,9 mmol) EDC hidrokloridot adunk -15°C-on 8,9 g (20,9 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH, 10,6 g (88 mmol) DMAP és 6,3 g (19,5 mmol) H-Nag-(Z)x2HCl (lásd a kiindulási anyagok készítését) acetonitrillel készült oldatához keverés közben. A reakcióelegyet hagyjuk 15°C-ig felmelegedni 16 óra alatt. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot feloldjuk etil-ace83 ♦* ·· -.X • ·· ·« · *· · • *· ® · · * 9 · · · · ···· ·· ···· ··· · · tátban. Vízzel, Ο,3 ml KHSO4-oldattal, 0,3m NaHCO^-oldattal, majd vízzel és sóoldattal mossuk, utána Na2S04-on szárítjuk, majd az oldószert bepároljuk. így 11,9 g (92,5%) terméket kapunk diasztereomer elegy alakjában (epimerek Pic-ben) 98/2 arányban (RS/RR).
1H-NMR (500 MHz, CDCI3): δ 0,85-2,0 [m, 29H; abból 1,40 (bs,
9H)J, 2,46 (bd, 1H), 3,1-3,4 (m, 5H), 3,92 (bd, 1H), 4,53 (bq,
1H), 5,10 (s, 2H), 5,22 (bs, 1H), 5,29 (bd, 1H), 6,7-7,2 (b, 3H),
7,25-7,45 (m, 5H).
13C-NMR (125 MHz, CDCI3): guanidin δ 156,9; karbonil szénatomok: δ 173,6, 170,3, 163,7, 161,7.
(ii) H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)
A 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) előállítására leírt eljárással állítjuk elő, kiindulási anyagként Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z)-t használunk.
1H-NMR (500 MHz, CDCI3): δ 0,8-2,0 (m, 22H), 2,24 (bd, 1H), 3,1-3,4 (m, 5H), 3,72 (bd, 1H), 3,84 (bq, 1H), 5,05 (bd, 1H), 5,08 (s, 2H) , 7,3-7,5 (m, 5H) .
(iii) H-(R)Cha-Pic-Nagx2TFA
Úgy állítjuk elő, hogy az (a) védőcsoport eltávolítási eljárást alkalmazzuk, az előbbi (i) pont szerint kapott termék esetére.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,9-1,1 (m, 2H), 1,2-2,0 (m, 18H), 2,32 (bd, 1H), 3,20 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,36 (m, 1H), 3,69 (bd, ÍH), 4,49 (dd, 1H), 5,05 (bd, 1H).
'^C-NMR (125 MHz, MeOD) : guanidin: δ 158,7; karbonil szénatomok: δ 172,7,171,4.
66. példa
Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nagx2TFA (i) Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag(Z)
Ugyanúgy állítjuk elő, mint a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t a 3.
példa szerint, kiindulási anyagokként Boc-(Me)(R)Cha-Pic-OSu-t és Boc-Nag(Z)-t használunk. A Pic epimerizációja megy végbe a szintézis alatt és a terméket mint két diasztereomer elegyét kapjuk meg.
(ii) Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nagx2TFA
Készítéséhez a (b) védőcsoport eltávolítási eljárást alkalmazzuk.
Az 4H-NMR spektrum összetett, körülbelül 4:1 arányban két diasztereomerből és ezek rotermerjeiből áll.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,8-1,08 (m, 2H), 1,15-2,4 (számos m,
19H), 2,6-2,75 és 2,9-2,95 (számos s, 3H), 3,1-3,6 (számos m,
5H), 3,75-4,1 (számos m, 1H), 4,4-4,7 (számos m, 1H), 5,05-5,15 (két dd, 1H).
13C-NMR (125 MHz, D2O) : guanidin: δ 154,84; karbonil szénatomok: δ 167,60 és 169,99.
67, példa
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)
Alkilezést végzünk a 4. példában leírtak szerint, kiindulási vegyületekként H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)-t (lásd 65. példa) és Br-CH2COOBn-t használunk, így megkapjuk a címbeli vegyületet. 1H-NMR (500 MHz, CDCI3): δ 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,7 (m, 19H),
1,79 (bd, 1H), 2,3-2,5 [m, 2H; abból 2,38 (bd, 1H)], 3,00 (bt,
1Η), 3,1-3,4 [m, 5H; abból 3,38 (d, 1H)], 3,58 (d, 1H), 3,6-3,7 (m, 2H), 5,06 (dd, 2H), 5,07 (s, 2H), 5,16 (bs, 1H), 6,7-7,1 (b,
1H), 7,15 (bs, 1H), 7,2-7,4 (m, 10H).
^c-NMR (125 MHz, CDCI3) guanidin és karbonil szénatomok: δ 176,0, 173,6, 170,8, 163,8, 161,7.
(iia) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nagx2HCl
Elvégezzük az (a) védőcsoport eltávolítási eljárást, majd a terméket RPLC-vel tisztítjuk, eluensként CH2CN/0,lm NH^OAc-ot, 1/3 arányú elegyet használunk, az oldószert 40-50°C~on bepároljuk és fagyasztva szárítás után megkapjuk a címbeli vegyületet acetát alakjában. Húszszoros mennyiségű sósav felesleggel kezeljük, bepároljuk és ismételt fagyasztva szárítás után kapjuk a kívánt vegyület bisz-hidrokloridját.
4H-NMR (500 MHz, D2O, két rotamer elegye): δ 0,7-2,0 (m, 20H),
2,17 (bd, 1H), 2,95 (t, kevesebb rotamer), 3,17 (t, 2H), 3,25-3,35 (m, 3H), 3,72 (bd, 1H), 3,86 (dd, kevesebb rotamer), 3,90 (s, 2H) , 4,72 (t, 1H) , 4,99 (bs, 1H) .
4^C-NMR (75 MHz, D2O); guanidin δ 157,4; karbonil szénatomok: δ 169,9, 170,2, 173,0.
(iib) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nagx2HBr
BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)-t, izopropil-alkohol/víz (95/5) arányú elegyében oldjuk és 5% Pd/C katalizátor, valamint 2,2 ekv. HBr jelenlétében atmoszférikus nyomáson hidrogénezzük. A katalizátort kiszűrjük, és az oldószert bepároljuk, így sárga olaj keletkezik. (Alternatív módon a savat adagolhatjuk hidrogénezés és szűrés után is). Izopropil-alkoholból vagy etil-alkohol és etil-acetát 1:1 arányú elegyéből kristályosítva kapjuk meg a címbeli vegyületet fehér, kristályos por alakjában.
XH-NMR (500 MHz, D2O, rotamerek elegye): δ 1,15-2,0 (m, 20H),
2,30 (bd, 1H), 3,30 (m, 2H), 3,40-3,50 (m, 3H), 3,85-3,90 (m,
1H), 3,95 (nyilvánvaló s, 2H), 4,75-4,85 (m, 1H, részben átfedi a H-O-D vonat) 5,10 (bs, 1H).
12C~NMR (125 MHz, D2O): guanidin:ő 157,6; karbonil szénatomok:
δ 169,7, 170,2, 173,0.
68. példa
MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Naqx2TFA
A MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z) metilésztert úgy állítjuk elő, hogy az iprOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag(Z)-t (lásd a 69. példát) átészterezzük az oszlopon, flash kromatografálás alatt, ha CH2Cl2/MeOH-t használunk eluensként. A címbeli vegyületet megkapjuk, ha az (a) védőcsoport eltávolító eljárást alkalmazzuk.
XH-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,95-1,15 (m, 2H), 1,2-1,6 (m, 6H) ,
1,65-2, 0 (itt, 13H), 2,25 (bd, 1H) , 3,21 (t, 2H), 3,30 (t, 2H), 3,37
(m, 1H) , 3, 71 (m, 1H), 3,83 (s , 3H), 3,97 (dd, 2H) , 4,67 (bt,
1H) , 5,05 (bs, 1H) .
22C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,0; karbonil szénatomok: δ 173,0, 171,1, 168,3.
69. példa ^-PrOOC-CH2- (R) Cha-Pic-Naqx2TFA
Alkilezést végzünk a 4. példa szerint, H-(R)Cha-Nag(Z) (lásd 65. példa) és Br-CH2-COO1Pr kiindulási vegyületeket használunk. Ezután az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással megkapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,95-1,1 (m, 2H), 1,15-1,6 (m, 12H;
abból 1,25 (d, 3H), 1,28 (d, 3H), 1,65-1,95 (m, 12H), 2,28 (bd, 1H) , 3,21 (t, 2H) , 3,30 (t, 2H) , 3,36 (m, 1H) , 3,93 (dd, 2H) ,
4,67 (t, 1H), 5,04 (bs, 1H), 5,11 (pentet, 1H).
13C-NMR (125 MHz, MeOD): guanidin: δ 157,9; karbonil szénatomok: δ 173,1, 171,0, 168,3.
70. példa
HOOC-CH2-(Me) (R) Cha- (RvaqyS) Pic-Naq/bx2TFA
Alkilezést végzünk a 4. példa szerint, kiindulási anyagként
Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag(Z)-t (lásd a 66. példát) és Br-CH2-COOBn-t használunk. Ezt követően a (b) védőcsoport eltávolítási eljárással kapjuk a HOOC-CH2~(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-Nag-ot. A két diasztereomert szétválasztjuk RPCL-vel (CH3CN/NH4OAc, 1:3), majd H2O/TFA-ból fagyasztva szárítjuk. Ez a diasztereomer később jön le a kettő közül az oszlopról.
1H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,9-1,1 (m, 2H), 1,15-1,35 (m, 4H),
1,4-1,55 (m, 2H), 1,6-1,85 (m, 12H), 2,3 (m, 1H), 2,85 (s, 3H), 3,15-3,45 (m, 5H), 3,65 (bs, 2H), 4,0 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 5,08 (dd, 1H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 157,65; karbonil szénatomok: δ 169,86 és 172,48.
71. példa
HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Nagx2TFA
Alkilezést végzünk a 4. példa szerint, kiindulási vegyületekként H-(R)Cha-Pic-Nag(Z)-t (lásd a 65. példát) és
Br-CH(Me)COOBn-t használunk. Ezt követi az (a) védőcsoport eltá88 volítási eljárás és megkapjuk a címbeli vegyületet, mint négy diasztereomer elegyét.
72. példa
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-(RvagyS)Pic-Nag/cx2TFA
Úgy kapjuk meg, hogy a 71. példa szerint előállított dia sztereomereket RPLC-vel elválasztjuk [CH3CN/NH4OAc (0,1 m), 1:4], majd az anyagot bepároljuk és H2O/TFA elegyből fagyasztva szárítjuk. Ez a diasztereomer a négy közül harmadikként jön le az oszlopról.
'H-NMR (300 MHz, D2O, 2 rotamer kb: 5:1 arány) : δ 0,88 (m, kevesebb rotamer), 0,98-1,63 (m, 7H),
1,63-2,02 [m, 16H; abból
1,68 (d, 3H)],
2,28 (m, 1H) , 3,10 (t, kevesebb rotamer), 3,25-3,50 [m, 5H; abból
3,33 (t, 2H) és 3,43 (t,
2H) ] , 3,82 (bd, 1H) , 4,02 (q, 1H),
4,55 (d, kevesebb rotamer), 4,65 (d, kevesebb rotamer),
4,72 (m,
1H) ,
5,10 (m, 1H).
73. példa
HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-(RvagyS)Pic-Naq/dx2TFA
Úgy kapjuk meg, hogy a 71. példa szerint előállított diasztereomereket RPLC-vel elválasztjuk [CH^CN/NH^OAc (0,1 m), 1:4], majd az anyagot bepároljuk és H2O/TFA elegyből fagyasztva szárítjuk. Ez a diasztereomer a négy közül utolsóként jön le az oszlopról.
1H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamer kb: 5:1 arány): δ 0,80 (m,
kevesebb rotamer) , 0 , 90 (m, kevesebb rotamer), 1,03 (m, 2H),
1,10-1,33 (m, 3H) , 1,42 (m, 2H) , 1,51-1,92 [m, 16H, abból 1,57
(d, 3H)] , 2,18 (d, 1H) , 2,24 (d, kevesebb rotamer), 2,98 (t,
* « t
1H), 4,42 (d, kevesebb rotamer),
3,21 (t,
2H)], 3,82 (d, 1H) , 4,02 (q,
4,50 (t.
kevesebb rotamer) , 5,03 (s, példa
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic~Naqx2TFA (lásd a 65. példát) állítjuk elő úgy, mint azt a
15. példában a HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm esetére leírtuk, de 1,2 ekv.
benzil-akrilátot használunk 1,1 ekv.
helyett.
1H-NMR (500 MHz,
D2O, 2 rotamer kb:
kevesebb (m, 2H), (d,
1H), 2,30 (d, kevesebb rotamer) kevesebb rotamer),
3,15 (t, 2H),
3,2-3,35 (m, 1H) .
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin:
δ 157,57; karbonil szénatomok:
δ 170,16, 172,82, 174,75.
75. példa
HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Aqmx2TFA
A vegyületet Boc-(R)Cha-Mor-OSu-ból (lásd a kiindulási anyagok előállítását) ugyanúgy állítjuk elő, mint azt a 3.
példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére leírtuk.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Agmx2TFA
A 4. példában leírtak szerint alkilezünk Br-CH2COOBn alkalmazásával, majd elvégezzük a (b) védőcsoport eltávolítási lépést, és megkapjuk a címbeli vegyületet. A szintézis valamelyik szakaszában a Mór epimerizálódott, és a végtermék két diasztereomernek körülbelül 9:1 arányú elegye.
1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,92-1,95 (m, 17H), 3,12-3,39 (m, 4H),
3,44-4,05 (m, 7H) , 4,37 (d, 1H) , 4,63 (m, 1H) , 4,79 (bd, 1H) . 13C-NMR (75,47 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,63; karbonil szénatomok: δ 170,87, 170,82, 169,08 a többi: δ 69,06, 67,01 (C-O-C).
76. példa
HOOC-CH2-(R)Cha-(RvagyS)Mor-Nagx2TFA (i) H-(R)Cha-Mor-Nag(Z)
Boc-(R)Cha-Mor-OSu-ból (lásd a kiindulási anyagok készítése) és Boc-Nag(Z)-bői állítjuk elő a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére a 3. példában leírtak szerint.
(ii) HOOC-CH2-(R) Cha-(RorS)Mor-Nagx2TFA
A 4. példában leírtak szerint alkilezünk Br-CH2COOBn-nel, majd a (b) védőcsoport eltávolitási eljárással megkapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 0,92-1,13 (m, 2H), 1,15-1,42 (m, 3H),
1,50 (br.s, 1H) , . 1,62-1,95 (m, 9H) , 3,14-3,40 (m, 4H) , 3,46-4,13 (m, 7H), 4,41 (d, 1H), 4,63 (m, 1H), 4,80 (br.d, 1H).
l^C-NMR (75,47 MHz, MeOD): guanidin: δ 158,68; karbonil szénatomok: δ 171,19, 170,90, 169,46, a többi: δ 68,81, 67,00 (C-O-C).
77. példa
H-(R)Cha-Aze-Nagx2HOAc (i) Boc-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
Boc-(R)Cha-Aze-OH-ból állítjuk elő úgy, mint azt a Boc-(R)-Cha-Pic-Nag(Z) esetére a 65. példa (ic) pontjában leírtuk.
(ii) H-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
A 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére leírt eljárás szerint állítjuk elő.
(iii) H-(R)Cha-Aze-Nagx2H0Ac
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (ii) pont szerint kapott termék védőcsoportját az (a) eljárással eltávolítjuk.
1H-NMR (300 MHz, D2O) : δ 0,85-1,10 (m, 2H) , 1,10-2,04 (m, 13H) ,
1,95 (m, acetát), 2,20-2,37 (m, 1H), 2,60-2,82 (m, 1H), 3,15-3,40 (m, 4H), 3,96-4,15 (m, 2H), 4,18-4,30 (m, 1H), 4,30-4,42 (m, 1H), kisebb mennyiségű rotamer jelei jelennek meg: δ 0,70, 3,90 és
5,10.
^c-NMR (75 MHz, D20): guanidin: δ 157,39 és karbonil szénatomok: δ 170,22 és 172,38.
78. példa
HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-NaqxHOAc (i) BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag(Z)
H-(R)Cha-Aze-Nag(Z)-bői (lásd a 77. példát) állítjuk elő a
4. példában leírt eljárás szerint.
(ii) HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (í) pont szerinti termék védőcsoportját az (a) eljárással eltávolítjuk.
3'H-NMR (500 MHz, MeOD): δ 0,90-1,10 (m, 2H) , 1,15-2,00 (m, 13H) ,
1,95 (s, acetát), 2,20-2,30 (m, 1H), 2,58-2,70 (m, 1H), 3,17-3,30 (m, 4H), 3,35-3,50 (m, 2H), 3,55-3,68 (m, 1H), 4,10-4,20 (m, 1H), 4,30-4,38 (m, 1H), 4,65-4,77 (m, 1H) , kisebb mennyiségű rotamer jelenik meg: δ 3,75, 3,98, 4,03 és 5,08 • · • 4
- 92 13C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: δ 157,40 és karbonil szénatomok: δ 169,16, 171,92 és 172,13.
79. példa
H- (R)Cha-Pro[5-(S)Me]-NaqxHCl (i) Boc-(R)Cha-Pro[5-(S)Me]-Nag(Z)
Ugyanazt a kapcsolási eljárást alkalmazzuk, melyet a Boc-(R)Cha-OH és a H-Pic-OEtxHCl kapcsolásánál leírtunk (lásd a kiindulási anyagok készítését), kiindulási vegyületekként Boc-(R)Cha-Pro[5-(S)Me]-OH-t és Η-Nag(Z)x2HCl~t használunk.
(ii) H-(R)Cha-Pro[5-(S)Me]-Nag(Z)
Ugyanazt az eljárást alkalmazzuk, mint amelyet a H-(R)Cgl~ -Pic-Nag(Z) szintézisére használunk [lásd a 84. példa (ii) pontj át] .
(iii) H-(R)Cha-Pro[5-(S)Me]-Nagx2HCl
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (ii) pont szerinti termék védőcsoportját a (d) eljárással eltávolítjuk.
1H-NMR (300 MHz, D2O): δ 1,0-2,3 (m, 21H); abból, 1,47 (d, 3H),
2,4-2,55 (m, 1H), 3,3-3,6 (m, 4H), 4,30 (bt, 1H), 4,38 (dd, 1H),
4,47 (bt, 1H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 157,6 karbonil szénatomok: δ 174,6, 169,6.
80. példa
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro[5-(S)Me]NaqxHOAc
A 4. példában leírtak szerint alkilezünk H-(R)Cha-Pro-[5 (S)Me]-Nag(Z)-t (lásd a 79. példát) és Br-CH2-COOBn-t használva, majd az (a) védőcsoport eltávolítási eljárással kapjuk a címbeli vegyületet.
1H-NMR (300 MHz, D2O): δ 0,9-1,9 (m, 19H); abból 1,34 (bd, 3H),
1,93 (s, acetát), 2,0-2,2 (m, 3H), 2,34 (m, 1H), 3,1-3,5 (m, 7H),
3,97 (m, 1H) , 4,20 (m, 1H) , 4,31 (bt. 1H) 43C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: δ 157,4.
81. példa
HOOC-CHq-(R)Cha-(RvaqyS)Pic(4,5-dehidro)-Nag/bxHOAc (i) Boc-(R)Cha-(R,S)Pic (4,5-dehidro)-Nag(Z)
Boc-(R) Cha-(R, S) Pic-(4,5-dehidro)-ΟΗ-ból ugyanúgy állítjuk, elő, mint azt a 65. példa (ic) pontjában Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) esetére leírtuk.
(ii) H-(R)Cha-(R,S)Pic (4,5-dehidro)-Nag(Z)
A 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) előállítására leírt eljárással állítjuk elő.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha- (R,S)Pic(4,5-dehidro)-Nag(Z)
H-(R)Cha-(R,S)Pic(4,5-dehidro)-Nag(Z)-bői készítjük a 4. példában leírt eljárás szerint.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha- (RvagyS)Pic(4,5-dehidro)-Nag/bxHOAc
356 mg (0,539 mmol) BnOOC-CH2~(R)Cha-(R, S)Pic-(4,5-dehidro)-Nag(Z), 10,8 ml trifluor-ecetsav és 3,4 ml tioanizol elegyét szobahőmérsékleten 3,5 órán keresztül keverjük. Vizet adunk hozzá és az elegyet kétszer mossuk CH2CH2-vel, az oldószert elpároljuk, így HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Pic (4,5-dehidro)-Nag-ot kapunk. A címbeli vegyületet úgy kapjuk meg, hogy elválasztjuk a diasztereomereket RPLC-vel [CH^CN/NH^OAc (0,lm) 3/7], lepároljuk az oldószert és az anyagot vízből fagyasztva szárítjuk. A diasztereomer a kettő közül másodikként jön le az oszlopról.
1H-NMR (300 MHz, D20): δ 0,85-1,95 (m, 15H), 2,50-2,80 (m, 2H) ,
3,25 (t, 2H), 3,35 (t, 2H), 3,55 (bs, 2H), 3,85-4,6 (m, 3H), 4,92 (kevesebb rotamer), 5,30 (d, IH), 5,85-6,1 (m, 2H) 13C-NMR (75 MHz, D2O): quanidin: δ 157,59; karbonil szénatomok: δ 171,46, 172,58, 173,03.
82. példa
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic[4-(S)Me)-Nagx2HCl (i) Boc-(R)Cha-Pic[4-(S)Me]-Nag(Z)
Boc-(R)Cha-Pic[4-(S)Me]-OH-ból készítjük úgy, mint azt a Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) előállítására a 65. példa (ic) pontjában leírtuk.
(ii) H-(R)Cha-Pic[4-(S)Me]-Nag(Z)
A 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) előállítására ismertetett eljárással állítjuk elő.
(iii) Bnooc-CH2-(R)Cha-Pic[4- (S)Me]-Nag(Z)
H-(R)Cha-Pic[4-(S)Me]-Nag (Z)-bői állítjuk elő a 4. példában leírt eljárás szerint.
(iv) HOOC-CH2-(R)Cha-Pic [4-(S)Me]-Nagx2HCl
Úgy állítjuk ' elő, hogy az előbbi (iii) pont szerint kapott termék védőcsoportját a (d) eljárással eltávolítjuk. 1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 0,95-2,05 [m, 22H; abból 1,05 (d, 3H)],
2,30-2,38 (bd, IH), 3,28-3,36 (mf 2H), 3,36-3,50 (m, 3H), 3,85-3,95 (m, IH), 3,98 (s, 2H), 4,70-4,90 (m, IH; részben elfedve a jel mögött), 5,22-5,27 (d, IH) , kisebb mennyiségű rotamer jelei jelennek meg: δ 0,93, 3,13 és 4,57 13C-NMR (125 MHz, D2O): guanidin: δ 157,58; karbonil szénatomok: δ 170,12, 170,32 és 172,82.
83. példa
HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic [4-(R)Me]-Nagx2HCl (i) Boc- (R)Cha-(R)Pic[4-(R)Me]-Nag(Z)
Boc-(R)Cha-(R)Pic[4 -(R)Me]-OSu-ból és Boc-Nag(Z)-bői állítjuk elő a 3. példában a Boc(R)Cha-Pro-Agm(Z) előállítására leírt eljárás szerint.
(ii) H-(R)Cha-(R)Pic[4- (R)Me]-Nag(Z)
A 3. példában a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z) esetére leírt eljárás szerint állítjuk elő.
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic[4-(R)Me]-Nag(Z)
H-(R)Cha-(R)Pic[4-(R)Me]-Nag(Z)-bői állítjuk elő a 4. példában leírt eljárás szerint (iv) HOOC-CH2-(R)Cha- (R)Pic[4-(R)Me]-Nagx2HCl
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (iii) pont szerint kapott termék védőcsoportját a (d) eljárással eltávolítjuk. 1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,00-2,05 (m, 22H), 2,18-2,26 (bd, 1H),
3,28-3,36 (m, 2H), 3,36-3,55 (m, 3H), 3,85-4,05 (m, 3H), 4,70-
-4,90 (m, 1H; részben eltakarva a HÓD jel mögött), 5,35-5,30 (d, 1H), kisebb mennyiségű rotamer jelei jelennek meg: δ 2,40, 2,90,
4,10, 4,42, 4,55 és 5,23.
13C-NMR (125 MHz, D2O): guanidin: δ 157,56; karbonil szénatomok: δ 169,69, 169,84 és 173,20.
84. példa
HOOC-CH2-(R)Cql-PÍC-Naqx2HCl (i) Boc-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
Boc-(R)Cgl-Pic-OH-ból állítjuk elő a 3. példa (ic) pontjában a Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) esetére ismertetett eljárás szerint.
1H-NMR (300 MHz, CDCI3): δ 0,9-1,8 (m, 27H) , 2,4 (d, 1H), 3,1-3,3 (m, 5H), 3,9 (d, 1H), 4,2 (t, 1H), 5,1 (s, 2H), 5,2 (bd, 2H),
6,7-7,4 (m, 9H).
(ii) H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
Sósavgázt buborékoltatunk át 1,38 g (2,22 mmol) Boc-(R)Cgl~ -Pic-Nag(Z) 25 ml etil-acetáttal készült oldatán. 10 perc múlva az oldószert elpároljuk és a maradékot feloldjuk etil-acetátban és 10%-os Na2CO3 oldatban. A szerves fázist elválasztjuk, sóoldattal mossuk és MgSO^-on szárítjuk. Az oldószer lepárlása után 1,02 g (92%) címbeli vegyületet kapunk.
1H-NMR (300 MHz, MeOD): δ 1,0-1,9 (m, 18H), 2,2-2,3 (m, 1H)
3,2-3,3 (m, 5H), 3,6 (d, 1H), 3,8-3,9 (bd, 1H), 4,2 (t, 1H)
4,7-4,8 (bs, 5H) , 5,1 (s, 2H), 5,2 (s, . 1H), 7,2-7,3 (m, 5H)
(iii) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)
291 mg (0,98 mmol) benzil-glikolát-triflátésztert 2 ml
CH2Cl2-ben oldunk és az oldatot -25°C-on keverés közben hozzáadjuk 0,52 g (1,04 mmol) H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z) és 494 mg (3,58 mmol) K2CO3, 5 ml acetonitril és 1 ml CH2C12 elegyéhez. Hagyjuk, hogy a hőmérséklet néhány óra alatt elérje a szobahőmérsékletet és 5 nap múlva vízzel felhígítjuk, majd EtOAc-val és toluollal extraháljuk a reakcióelegyet. A szerves fázist MgS04-on szárítjuk
és az oldat bepárlása után 319 mg (47%) színtelen kristályokat
kapunk.
1H-NMR (500 MHz, CDC13 ): δ 1,0 -1,1 (m, 1H), 1,1-1,3 (m, 4H),
1,35-1,6 (m , 5H), 1,6- 1,85 (m, 8H) , 1,8 -2,2 (bs, 1H), 2,23-2,5
(m, 2H), 2, 9 (t, 1H), 3,1-3,5 (m, 6H) , 3,6-3,7 (m, 2H), 5,0 -5,1
(m, 4H), 5, 2 (s, 1H) , 5,5-7,4 (m, 13H) .
(iv) HOOC-CH2-(R)Cgl~Pic-Nagx2HCl
319 mg (0,49 mmol) BnOOC-CH2~(R)Cgl-Pic-Nag(Z)-t melegítés közben feloldunk ml izopropanolban és 5 ml vízben és 24 órán át hidrogénezzük az elegyet 228 mg 10%-os Pd/C katalizátor jelenlétében. Szűrés és az oldószer bepárlása után a maradékot hígított sósavban oldjuk, ezt követően fagyasztva szárítás után 223 mg (91%) peptidet izolálunk, fehér por alakjában. 1H-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,1-2,1 (m, 18H), 2,3 (d, 1H), 3,3 (t,
2H), 3,4 (t, 3H), 3,85-4,05 (m, 3H), 4,6 (d, 1H), 5,15 (s, 1H).
13C-NMR (75 MHz, D2O): guanidin: δ 157,43 karbonil szénatomok: δ 169,2, 172,94 .
85. példa
H-(R)Hoc-Pro~Nagx2TFA (i) Boc-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
Boc-(R)Hoc-Pro-OH-ból állítjuk elő a 65. példa (ic) pontjában a Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) esetére leírt eljárás szerint.
(ii) H-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
A vegyületet ugyanúgy állítjuk elő, mint a HO~(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t, a 3. példában leírt módszer szerint.
(iii) H-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)xTFA
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (ii) pont szerint kapott termék védőcsoportját az (a) eljárással eltávolítjuk. 1H-NMR (300 MHz, D2O): δ 0,90-1,05 (m, 2H), 1,16-1,48 (m, 6H),
1,48-1,84 (m, 6H), 1,84-2,24 (m, 6H), 2,40 (m, 1H), 3,25-3,45 (m, 4H) , 3,74 (m, 1H) , 3,85 (m, 1H) , 4,42 (m, 1H) , 4,51 (m, , 1H) .
86. példa
HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-NaqxHOAc (i) BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)
A vegyületet H-(R)Hoc-Pro-Nag(Z)-ból (lásd a 85. példa) állítjuk elő a 4. példában leírt eljárással.
(ii) HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (i) pont szerint kapott
termék védőcsoportját az (a) eljárással eltávolítjuk.
1H-NMR (300 MHz, D20): δ 0,76-0,97 (m, 2H) , 1,00-1,37 (m, 6H) ,
1,50-2,12 (m, 12H), 1,89 (s, acetát), 2,27 (m, 1H), 3,10-3,33 (m,
4H) , 3,41 (bs, 2H) , 3, 61 (m, 1H) , 3,77 (m, 1H) , 4,12 (m, 1H) ,
4,37 (m, 1H) .
13C-NMR (75 MHz, D20): guanidin: δ 157,4, karbonil szénatomok: δ 170,8, 173,9, 174,5.
87, példa
HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-NaqxHOAc (i) Boc-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
A vegyületet Boc-(R)Hoc-Pic-OH-ból állítjuk elő a 65. példa (ic) pontjában a Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) esetére leírt módszerrel.
(ii) H-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
Ugyanúgy állítjuk elő, mint a H-(R)Cha-Pro-Agm(Z)-t, a 3. példában leírtak szerint.
(iii) BnOOC-(R)Hoc-Pic-Nag(Z)
A 4. példában leírt eljárással állítjuk elő.
(iv) HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (iii) pont szerint kapott termék védőcsoportját az (a) eljárással eltávolítjuk.
1H-NMR (300 MHz, D2O) : δ 0,75-0,95 (m, 2H) , 1,00-1,30 (m, 6H) ,
1,30-1,50 (m, 2H) , 1,50-1,82 (m, 12H), 1,82-1,95 (bs, acetát),
2,23 (bd, 1H) , 3, 08-3,32 (m, 6H), 3,52 (bs, 2H) , 3,77 (bd, 1H)
4,50 (bs , 1H) , 5, 00 (bs, 1H).
88. példa
HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Naqx2HCl (i) Boc-((R)Dph-Pic-Nag(Z)
A vegyületet Boc-(R)Dph-Pic-OH-ból állítjuk elő, a Boc-(R)Cha-Pic-Nag(Z) esetére a 65. példa (ic) pontjában leírt eljárás szerint.
(ii) H-(R)Dph-Pic-Nag(Z)
A 84. példa (ii) pontjában a H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z) előállítására leírt eljárás szerint állítjuk elő.
(iii) BnOOc-CH2-(R)Dph-Pic-Nag(Z)
H-(R)Dph-Pic-Nag(Z)-bői állítjuk elő a 4. példában leírt eljárás szerint.
(iv) HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nagx2HCl
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (iii) pont szerinti termék
védőcsoportj át a (d) eljárással eltávolítjuk.
^•H-NMR (500 MHz, D2O): δ 0,46 (m, 1H), 1,2-1, 3 5 (m, 2H) , 1, 45 (m,
1H), 1,53 (m, 1H) , 1,89 (pentet, 2H), 2,03 (bd, 1H) , 3, 24 (bt,
1H), 3,29 (t, 2H) , 3,38 (t, 2H), 3,72 (d, 1H) , 3,78 (d, 1H) , 3 ,79
(m, 1H), 4,68 (d, 1H), 4,89 (m, 1H), 5,73 (d, 1H) , 7,4- 7,6 (m,
6H) , 7, 65 (t, 2H) , 7,81 (d, 2H) .
• ·
- 100 89. példa
HOOC-CH2~(R)Dch-Pic-NaqxHOAc (i) Boc-(R)Dch-Pic-Nag(Z)
A vegyületet Boc-(R)Dch-Pic-OH-ból állítjuk elő a 65. példa (ic) pontjában a boc-R(Cha)-Pic-Nag(Z) esetére leírt eljárás szerint.
(ii) H-(R)Dch-Pic-Nag(Z)
Úgy állítjuk elő, mint a H-(R)Cgl-Pic-Nag(Z)-t a 84. példa (ii) pontja szerint.
(iii) BnOOC-CH2- (R) Dch-Pic-Nag (Z)
H-(R)Dch-Pic-Nag(Z)-bői állítjuk elő a 4. példában leírt eljárás szerint.
(iv) HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-NagxHOAc
Úgy állítjuk elő, hogy az előbbi (iii) pont szerinti termék védőcsoportját az (a) eljárással eltávolítjuk.
ÍH-NMR (500 MHz, D2O): δ 1,2-2,0 (m, 30H), 2,09 (s, acetát), 2,30 (bd, 1H), 3,32 (t, 2H), 3,4-3,5 (m, 3H), 3,65 (d, 1H), 3,70 (d,
1H), 3,86 (bd, 1H), 4,86 (m, 1H), 5,09 (m, 1H).
Í^C-NMR (125 MHz, D2O): guanidin: δ 159,4, karbonil szénatomok: δ 172,5, 173,3, 174,9.
Pl példa
Oldat parenterális adagolásra
Oldatot készítünk a következő alkotórészekből:
HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nagx2HBr
Nátrium-klorid injekciós célra
Ecetsav
Víz injekciós célra 1000 ml-re.
*· ·· ·· · · *·«·»«·· · • ·· · · ·
101
A hatóanyagot, a nátrium-kloridot és az ecetsavat vízben feloldjuk. Az oldat pH-ját 3-7 értékre állítjuk be 2 molos NaOH oldattal. Az oldatot egy steril 0,2 gm-es szűrőn át megszűrjük és aszeptikusán steril ampullákba töltjük.
P2 példa
Tabletták orális adagolásra
1000 tablettát készítünk a következő alkotórészekből:
Trombin inhibitor 100 g
Laktóz 200 g
Poli(vinil-pirrolidon) 30 g
Mikrokristályos cellulóz 30 g
Magnézium-sztearát 6 g
A hatóanyagot és a laktózt poli(vinil-pirrolidon) vizes oldatával elegyítjük. Az elegyet szárítjuk és őröljük, hogy granulátumot képezzünk. A mikrokristályos cellulózt és utána a magnézium-sztearátot hozzákeverjük. Az elegyet azután tablettázó gépben 1000 tablettává préseljük, mindegyik 100 mg hatóanyagot tartalmaz .
A biológiai hatás vizsgálata
A trombin alvadási idejének és IC^qTT értékének meghatározása:
Humán trombint (T, 6769. Sigma Chem. Co.) puffér oldatban (pH = 7,4, 100 μΐ) és inhibitor oldatot (100 μΐ) egy percig inkubálunk. 100 μΐ összegyűjtött, normál, citráttal kezelt plazmát adunk hozzá és az alvadási időt egy automata készülékben (KC 10, Amelung) mérjük.
·· ·· » · ·«·*·*«· · • ·· · · · • · * · · ·
102
A másodpercekben mért alvadási időt az inhibitor koncentráció függvényében ábrázoljuk, és az IC5QTT értéket interpolációval határozzuk meg.
IC50TT az az inhibitor koncentráció, amely kétszeresére növeli a humán plazma alvadási idejét. A pIC5QTT a mol/l-ben kifejezett IC^qTT tizes alapú negatív logaritmusa (-lóg 10).
A találmány szerinti előnyös vegyületek pIC50TT értéke a
6,6-8,2 tartományban van.
Az aktivált parciális tromboplasztin idő (Activated Partial Thromoplastin Time, APTT) meghatározása:
Az APTT-t összegyűjtött normál, humán, citráttal kezelt plazmában határozzuk meg PTT Automated 5 reagens (Stago gyártmánya) alkalmazásával. Az inhibitorokat hozzáadjuk a plazmához (10 μΐ inhibitor oldatot 90 μΐ plazmához) és meghatározzuk az elegyben az APTT-t KC 10 (Amelung) koaguláció analizátorral a reagens gyártójának instrukciói szerint. A másodpercekben mért alvadási időt a plazma inhibitor-konentrációjának függvényében ábrázoljuk, és az IC^qAPTT értéket interpolációval határozzuk meg.
Az IC^qAPTT értéket úgy definiáljuk mint a plazmában lévő azon inhibitor-koncentrációt, amely megkétszerezi az aktivált parciális tromboplasztin időt. A pIC^^APTT érték tizes alapú negatív logaritmusa. A találmány szerinti előnyös vegyületek közül azok, amelyeket megvizsgáltunk, 5,1-6,4 pIC50APTt értékkel rendelkeztek.
103
A leírásban használt rövidítések
Agm = Agmatin
Agm(Z) = (benzil-oxi-karbonil) -agmatin
AA1 = aminosav 1
aa2 = aminosav 2
Azé = (S)-Azetidin-2-karbonsav
Bla = α-szubsztituált butirolakton
Boc = tercier-butoxi-karbonil
sóoldat = telített víz/NaCl oldat
Bu = butil
Bn = benzil
Cgl = (S)-ciklohexil-glicin
Ch = ciklohexil
Cha = (S)-β-ciklohexil-alanin
CME-CDI = 1-ciklohexil-3 -(2-(morfolino-etil)-karbodiimid- -meto-p-toluolszulfonát
DCC = diciklohexil-karbodiimid
Dch = (S)-Diciklohexil-alanin
DMAP = N,N-(dimetil-amino)-piridin
DMF = dimetil-formamid
DMSO = dimetil-szulfoxid
Dph = (S)-Difenil-alanin
EDC = 1-(3-Dimetil-amino-propil)-3-etil-karbodiimid- -hidroklorid
Et = etil
EtOAc = etil-acetát
HOAc = ecetsav
HOBt = N-hidroxi-benzotriazol
104
Hoc = (S)-Homociklohexil-alanin
Hop = (S)-Homofenil-alanin
HOSu = N-hidroxi-szűkeinimid
Mag = miniagmatin
Me = me til
Mór = (S)-morfolin-2-karbonsav
Mpa = megapascal
Nag = noragmatin
Nag(Z) = δ-Ν-(benzil-oxi-karbonil)-noragmatin
NMM = N-metil-morfolin
Pgi = (S)-fenil-glicin
Ph = fenil
Phe = (S)-fenil-alanin
Pic = (S)-pipekolinsav
Pr = propil
Pro = (S)-prolin
RPLC = fordított fázisú nagyteljesítményű kromatográfia
Tf = trifluor-metil-szulfonil
TFA = trifluor-ecetsav
THF = tetrahidrofurán
p-TsOH = para-toluolszul’f onsav
Val = (S)-valin
Z = benzil-oxi-karbonil
Az n, s, i és t prefiumok jelentése a szokásos: normál, izo, szék és tere.

Claims (31)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Az (I) általános képletű vegyületek vagy fiziológiailag elfogadható sóik, beleértve sztereoizomerjeiket, ahol
    A jelentése metiléncsoport vagy
    A jelentése etiléncsoport és a keletkezett öttagú gyűrű viselhet vagy nem viselhet egy vagy két fluoratomot, egy hidroxicsoportot vagy egy oxocsoportot a 4-helyzetben vagy lehet vagy nem lehet telítetlen, vagy
    A jelentése -CH2-0-, -CH2-S-, -CH2-SO- képletű csoport, ahol a heteroatom a 4-helyzetben van, vagy
    A jelentése n-propilén-csoport és a keletkezett hattagú gyűrű viselhet vagy nem viselhet az 5-helyzetben fluoratomot, hidroxicsoportot vagy oxocsoportot, viselhet vagy nem viselhet a 4- vagy 5-helyzetek egyikében két fluoratomot vagy lehet vagy nem lehet telítetlen a 4- és 5-helyzetben vagy viselhet vagy nem viselhet a 4-helyzetben 1-4 szénatomos alkilcsoportot, vagy
    A jelentése -CH2-O-CH2-, -CH2-S-CH2- vagy -CH2-SO-CH2- képletű csoport;
    R1 jelentése hidrogénatom, 1-4 szénatomos alkilcsoport, 2-3 szénatomos hidroxi-alkil-csoport vagy R3-^OOC-alkil általános képletű csoport, melyben az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz és R1-1- jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy 2-3 szénatomos alkiléncsoport intramolekulárisan alfa-helyzetben kapcsolva az R1 csoportban lévő karbonilcsoporthoz, vagy
    106
    Rx jelentése R22OOC-1,4-fenil-CH2- általános képletű csoport, ahol R12 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, vagy
    Rx jelentése R12-NH-CO-alkil- általános képletű csoport, ahol az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz, és a karbonilcsoporthoz képest alfa-helyzetben szubsztituálva lehet 1-4 szénatomos alkilcsoporttal és ahol RX2 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy -Ct^COOR12 általános képletű csoport, melyben RX2 jelentése a fenti, vagy
    Rx jelentése RX2OOC-CH2-OOC-alkil- általános képletű csoport, ahol az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz és a karbonilcsoporthoz képest alfa-helyzetben szubsztituálva lehet 1-4 szénatomos alkilcsoporttal, és ahol Rx2 jelentése a fenti, vagy
    R1 jelentése CH3SO2- csoport, vagy
    Rx jelentése RX2OCOCO- általános képletű csoport, melyben RX2 jelentése a fenti, vagy
    R1 jelentése -CH2PO(OR14)2, ~CH2SO3H vagy -CH2-[5-(1H)-tetrazolil] csoport, ahol R24 jelentése egyenként minden esetben hidrogénatom, metilcsoport vagy etilcsoport;
    R jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport vagy R22OOC-alkil- általános képletű csoport, melyben az alkilcsoport 1-4 szénatomot tartalmaz és szubsztituálva lehet a karbonilcsoporthoz viszonyított alfa-helyzetében, és az alfa-szubsztituens jelentése R22-(CH2)p- általános képletű
    107 η 9 csoport, ahol p értéke 0, 1, 2 és R jelentese metilcsoport, fenilcsoport, hidroxicsoport, COOR21 általános képletű csoport, és R21 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport;
    m értéke 0, 1 vagy 2, R3 jelentése ciklohexilcsoport és R4 jelentése hidrogénatom, vagy m értéke 1 és R3 jelentése ciklohexilcsoport vagy fenilcsoport és R4 etilénhidat képez az R1 szubsztituenssel együtt, vagy m értéke 1 és mind R3 mind R4 jelentése ciklohexilcsoport vagy fenilcsoport;
    R5 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport;
    n értéke 2-től 6-ig terjedő egész szám; és
    B jelentése -N(R^)-C(NH)-NH2 általános képletű csoport, ahol
    R6 jelentése hidrogénatom vagy metilcsoport, vagy
    B jelentése -S-C(NH)-NH2 vagy -C(NH)-NH2 képletű csoport.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti olyan (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik, beleértve sztereoizomerjeiket, melyekben R- jelentése R44OOC-alkil- általános képletű csoport, ahol az alkilcsoport
    1-4 szénatomot tartalmaz és
    11 *2 R-1-·1 jelentése hidrogénatom, A, R , m,
    R3 ,
    R4, R3, n és B jelentése az 1. igénypontban megadott.
  3. 3. A 2. igénypont szerinti olyan (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik, beleértve szte, c reoizomerjeiket, melyekben A jelentése etilencsoport es RJ
    1 7 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, Rx, R , m, R3, R4, n és B jelentése a 2. igénypontban megadott.
    108
  4. 4. A 2. igénypont szerinti olyan (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik, beleértve sztereoizomerjeiket, melyekben A jelentése n-propilén- csoport és a keletkezett hattagú gyűrű viselhet vagy nem viselhet a 4-helyzetében 1-4 szénatomos alkilcsoportot és R3 jelentése hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, és R1, R2, m, R3 , R4 , n és B jelentése a 2. igénypontban megadott.
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti olyan (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik, beleértve sztereoizomerjeiket, melyekben R3 jelentése ciklohexil csoport, m értéke 1 vagy 2 és R4 jelentése hidrogénatom, A, R1, R2, m, R3 , n és B jelentése az 1-4. igénypontok bármelyikében megadott.
  6. 6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti olyan (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik,
    1 o beleértve sztereoizomerjeiket, melyekben n értéké 3, A, R , R , R3, R4 , m, R3 , n és B jelentése az 1-5. igénypontok bármelyikében megadott.
  7. 7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti olyan (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik, melyekben a P2 helyzetben lévő α-aminosav S-konfigurációjú, A, R1, R2, m, R3, R4, R3 , n és B jelentése az 1-6. igénypontok bármelyikében megadott.
  8. 8. A 7. igénypont szerinti olyan (I) általános képletű vegyületek és fiziológiailag elfogadható sóik, melyekben a P3 helyzetben lévő α-aminosav R-konf íguracio] u, A, R1·, R , m, RJ, R4, R3 , n és B jelentése a 7. igénypontban megadott.
    109
  9. 9. Az 1. igénypont szerinti
    H-(R)Cha-Pro-Agm
    Me-(R)Cha-Pro-Agm
    H0-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Agm xPrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/a
    HOOC-(RvagyS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/a
    HOOC-(RvagyS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Agm/b
    HOOC-(RvagyS)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b
    HOOC-(R,S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro~Agm
    HOOC-(RvagyS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/a
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
    EtOOC-CO-(R)Cha-Pro-Agm (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-(RvagyS)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Agm/b
    H-(R)Cha-Pro-Nag nBu-(R)Cha-Pro-Nag
    HO-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag
    EtOOC-CH2- (R) Cha.-Pro-Nag 1PrOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag t-BuOOC-CH2- (R) Cha-Pro-Nag
    HOOC-CH2-OOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
    H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (HOOC-CH2)2-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-CH2-(nBu)(R)Cha-Pro-Nag
    110
    HOOC-(R, S) CH (Me) - (R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/a
    EtOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-(RvagyS)CH(nPr)-(R)Cha-Pro-Nag/a
    HOOC-(R)CH(CH2-OH)-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-(R,S)CH(Ph)-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-(S)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-(R)CH(CH2CH2Ph)-(R)Cha-Pro-Nag HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
    EtOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag
    EtOOC-(CH2)3-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag
    MeOOC-CO-(R)Cha-Pro-Nag (R,S)Bla-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-(R,S)CH(CH2COOH)-(R)Cha-Pro-Nag
    MeOOC-(R,S)CH(CH2COOMe)-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-Ph-4-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (HO)2P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
    EtO(HO)P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag (EtO)2P(0)-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
    H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Mag
    H-(R,S)Pro(3-Ph)-Pro-Agm
    H-(R,S)Pro[3 -(transz)Ch]-Pro-Agm
    HOOC-CH2-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Agm
    HOOC-CH2-(R,S)Pro[3-(transz)Ph]-Pro-Nag
    HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(R,S)Pic-Agm
    111
    HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm
    HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/a
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
    H-(R)Cha-Pic-Nag
    Me-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag
    MeOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag iPrOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-(RvagyS)Pic-Nag/b
    HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-(R,S)Pic-Nag
    HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-(RvagyS)Pic-Nag/c
    HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-(R,S)Mor-Agm
    HOOC-CH2-(R)Cha-(RvagyS)Mor-Nag
    H-(R)Cha-Aze-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Nag
    H-(R)Cha-Pro[5 -(S)Me]-Nag
    HOOC-CH2~(R)Cha-(RvagyS)Pic(4,5-dehidro)-Nag/b
    HOOC-CH2-(R)Cha-(R)Pic[4-(R)Me)-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cgl-Pic-Nag
    H- (R) Hoc-Pro-Nag·
    HOOC-CH2-(R)Hoc-Pro-Nag
    HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(R)Dph-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(R)Dch-Pic-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro[5-(R,S)Me]-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic[4-(R)Me]-Nag
    H-(R)Cha-Pic [4-(R)Me]-Nag
    HOOC-CH2(R)-Cha-Pic[6-(S)Me]-Nag
    112 vagy fiziológiailag elfogadható sóik, beleértve a sztereoizomereket.
  10. 10. Az 1. igénypont szerinti
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Agm
    HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Agm/b
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Nag
    HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Agm
    HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pic-Agm/b
    HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-(RvagyS)Pic-Nag/d
    HOOC-CH2-(R)cha-Pro[5-(S)Me]-Nag
    H00C-CH2-(R)Cha-Pic[4-(S)Me]-Nag vagy farmakológiailag elfogadható sóik, beleértve a sztereoizomereket.
  11. 11. HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Nag vagy fiziológiailag elfogadható sói, beleértve a sztereoizomereket.
  12. 12. HOOC-(RvagyS)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Nag/b vagy fiziológiailag elfogadható sói, beleértve a sztereoizomereket.
  13. 13. HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Nag vagy fiziológiailag elfogadható sói, beleértve a sztereoizomereket.
  14. 14. Eljárás az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyületek előállítására, ahol A, R , R , R R4, , m, n és B jelentése az 1-13. igénypontok bármelyikében megadott,
    113 azzal jellemezve, hogy egy N-terminálisán védett aminosavat vagy dipeptidet vagy előzetesen előállított N-terminálisán alkilezett védett dipeptidet valamely (X) általános képletű vegyülethez kapcsolunk, ahol a (X) általános képletben n értéke 2-től 6-ig terjedő egész szám és X jelentése nem védett vagy védett guanidinocsoport vagy védett aminocsoport vagy egy olyan csoport, amely aminocsoporttá átalakítható, ahol az aminocsoportot majd guanidinocsoporttá átalakítjuk, és kívánt esetben fiziológiailag elfogadható sót képezünk, és ha a reakciótermék sztereoizomerek elegye, azokat adott esetben standard kromatográfiás vagy átkristályosítási eljárásokkal elválasztjuk, és kívánt esetben az egyes sztereoizomereket elkülönít j ük.
  15. 15. A 14. igénypont szerinti eljárás az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyületek előállítására, ahol A, R1, R2, R3, R4, R5, m, n és B jelentése az 1-13. igénypontok bármelyikében megadott, azzal jellemezve, hogy
    a) (I. módszer) valamely N-terminálisán védett dipeptidet standard peptidkapcsolással kapcsolunk, az 1. reakcióvázlat szerint egy védett vagy nem védett amino-guanidinnal vagy egyenesláncú alkil-aminnal, amely az alkillánc terminális végén védett vagy maszkírozott aminocsoportot visel, ahol R3, R4, R5 , n, m és A jelentése az (I) általános képletnél megadott, R6 jelentése hidrogénatom vagy alkilcsoport, W1 jelentése aminovédő-csöpört, úgymint terc-butoxi-karbonil- és benzil-oxi-karbonil-csoport és X jelentése -NH-C(NH)NH2, -NH-C (NH)NH-W2, -N(W2) -C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2
    114 vagy -NH-W2 általános képletű csoport, ahol W2 jelentése aminovédő-csoport, úgymint terc-butoxi-karbonil- vagy benzil-oxi-karbonil-csoport vagy X jelentése maszkírozott aminocsoport, úgymint azidcsoport, így a védett peptidet kapjuk meg; vagy
    b) (II. módszer) valamely N-terminálisán védett aminosavat standard peptidkapcsolással kapcsolunk, a 2. reakcióvázlat szerint, egy védett vagy nem védett amino-guanidinnal vagy egyenesláncú alkil-aminnal, amely az alkillánc terminális végén védett vagy maszkírozott aminocsoportot visel, ahol W-^, A, R3 és X jelentése az előbbi a) pontban megadott, majd eltávolítjuk a W^-csoportot, és kapcsolást végzünk az N-terminális aminosavval, védett formában; vagy
    c) (III. módszer) valamely előzetesen kialakított N-terminálisán alkilezett és védett dipeptidet - melyet standard peptidkapcsolással állítottunk elő - standard peptidkapcsolással kapcsolunk, a 3. reakcióvázlat szerint, egy védett vagy nem védett amino-guanidinnal vagy egyenesláncú alkil-aminnal, amely az alkillánc terminális végén védett vagy maszkírozott aminocsoportot visel, ahol R2, R3 , R4, R5, n, m, A és X. jelentése a fentiekben megadott, azzal a feltétellel, hogy R2 jelentése hidrogénatomtól eltérő és W2 jelentése acil védőcsoport, úgymint trifluor-acil-csoport;
    majd a végtermékeket az alkalmazott X csoport természetétől függően a következőkben megadott utak bármelyike szerint előállíthatjuk: eltávolítjuk a védőcsoportokat (ha X jelentése -NH-C(NH)NH2, -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH~C(NW2)NH-W2 csoport) vagy szelektíven eltávolítjuk a W| csoportot (például ha X jelentése -NH-C(NH)NH-W2, -N(W2)-C(NH)NH-W2, -NH-C(NW2)NH-W2
    115 csoport, a V^-nek ebben az esetben ortogonális helyzetben kell lennie a W^-hez viszonyítva), ezt követően alkilezzük az N-terminális nitrogént és a terminális alkil-amino funkció védőcsoportját eltávolítjuk vagy szelektíven eltávolítjuk a védőcsoportot/megszüntetjük a maszkírozást (X jelentése NH-W2, W2-nek ebben az esetben ortogonálisnak kell lennie W]_-hez, illetve W3hoz képest vagy X jelentése maszkírozott aminocsoport, úgymint azidcsoport), majd standard eljárások alkalmazásával elvégezzük a szabad amin guanidálását, és eltávolítjuk a W4- vagy W3-csoportot, és kívánt esetben fiziológiailag elfogadható sót képezünk, és ha a reakciótermék sztereoizomerek elegye, azokat adott esetben standard kromatográfiás vagy átkristályosítási eljárásokkal elválasztjuk, és kívánt esetben az egyes sztereoizomereket elkülönítjük .
  16. 16. A (VIII) képletű vegyület alkalmazása - önmagában vagy só formában, és önmagában vagy olyan formában, amelyben a guanidinocsoportja egyszeresen van védve a δ-nitrogénatomon vagy kétszeresen van védve a δ-nitrogénatomokon vagy a ,δ-nitrogénatomokon - szerin proteáz inhibitorok, különösen trombin inhibitorok előállításának kiindulási anyagaként.
  17. 17. A (VIII) képletű vegyület 16., 26. és 27. igénypontok szerinti alkalmazása, ahol a szerin proteáz inhibitor peptidvegyület.
  18. 18. Az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület vagy sója terápiás alkalmazásra.
  19. 19. A 18. igénypont szerinti vegyületek és sóik alkalmazása antikoaguláns és trombózis elleni szerekként.
    · W »'·· · • ·· « 9 V • · · · · ·
    116
  20. 20. Gyógyszerkészítmény, amely az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület vagy sója hatásos mennyiségét tartalmazza egy vagy több gyógyszerészeti vivőanyaggal együtt.
  21. 21. A 20. igénypont szerinti készítmények alkalmazása antikoaguláns és trombózis elleni szerekként.
  22. 22. Az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyületek és sóik hatóanyagként! alkalmazása az emberi vagy állati szervezetben a trombint gátló gyógyszerkészítmény előállítására.
  23. 23. Módszer trombin gátlására emberi vagy állati szervezetben ilyen gátlás szükségessége esetén, azzal jellemezve, hogy a szervezetnek az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület vagy sója inhibitorként hatékony mennyiségét adagoljuk.
  24. 24. Módszer emberi és állati szervezetek vérében és szöveteiben fellépő trombózis és hiperkoagulabilitás kezelésére vagy megelőzésére, azzal jellemezve, hogy ilyen kezelés vagy megelőzés szükségesség esetén a szervezetbe az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti (I) általános képletű vegyület vagy sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
  25. 25. Az 1-24. igénypontok bármelyike szerinti vegyület, eljárás gyógyszerkészítmény, alkalmazás és módszer, amint azt lényegében ezen igénypontok tartalmazzák.
  26. 26. A 16. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a vegyület δ-Ν-(benzil-oxi-karbonil)-noragmatin önmagában vagy só formában vagy a |'-nitrogénatomon védett formában.
    117
  27. 27. A 26. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a vegyület a-N-(terc-hutil-oxi-karbonil)-δ-Ν-(benzil-oxi-karbonil)-noragmatin önmagában vagy só formában vagy a δ- vagy ^-nitrogénatomon védett formában.
  28. 28. δ-Ν-(benzil-oxi-karbonil)-noragmatin vagy sója, továbbá ezeknek a δ-nitrogénatomon védett formája.
  29. 29. A 28. igénypont szerinti δ-Ν-(benzil-oxi-karbonil)-noragmatin .
  30. 30. a-N-(terc-butil-oxi-karbonil)-δ-Ν-(benzil-oxi-karbonil)-noragmatin vagy sója, vagy a δ-nitrogénatomján vagy a ^nitrogénatomján védőcsoportot tartalmazó formája.
  31. 31. A 30. igénypont szerinti a-N-(terc-butil-oxi-karbonil)-δ-Ν-(benzil-oxi-karbonil)-noragmatin.
HU9401474A 1991-12-04 1992-12-01 New peptide derivatives HUT70431A (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE9103612A SE9103612D0 (sv) 1991-12-04 1991-12-04 New peptide derivatives

Publications (2)

Publication Number Publication Date
HU9401474D0 HU9401474D0 (en) 1994-08-29
HUT70431A true HUT70431A (en) 1995-10-30

Family

ID=20384531

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9401474A HUT70431A (en) 1991-12-04 1992-12-01 New peptide derivatives

Country Status (27)

Country Link
US (4) US5614499A (hu)
EP (1) EP0618926B1 (hu)
JP (1) JP3306826B2 (hu)
CN (1) CN1076199A (hu)
AP (1) AP353A (hu)
AT (1) ATE190066T1 (hu)
AU (2) AU670052B2 (hu)
CA (1) CA2125175C (hu)
CZ (2) CZ333895A3 (hu)
DE (1) DE69230727T2 (hu)
EE (1) EE9400455A (hu)
FI (1) FI115770B (hu)
HU (1) HUT70431A (hu)
IL (1) IL103910A0 (hu)
IS (1) IS3954A (hu)
MA (1) MA22729A1 (hu)
MX (1) MX9206938A (hu)
NO (1) NO311361B1 (hu)
NZ (2) NZ246106A (hu)
SE (1) SE9103612D0 (hu)
SI (1) SI9200363A (hu)
SK (1) SK63194A3 (hu)
TN (1) TNSN92109A1 (hu)
TW (1) TW223078B (hu)
WO (1) WO1993011152A1 (hu)
YU (1) YU104592A (hu)
ZA (1) ZA929099B (hu)

Families Citing this family (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6534536B1 (en) 1994-03-16 2003-03-18 Bristol-Myers Squibb Company Alkylsulfonamido heterocyclic thrombin inhibitors
US5583146A (en) * 1992-12-02 1996-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
SE9301916D0 (sv) * 1993-06-03 1993-06-03 Ab Astra New peptides derivatives
US6984627B1 (en) 1993-06-03 2006-01-10 Astrazeneca Ab Peptide derivatives
SE9900043D0 (sv) * 1999-01-11 1999-01-11 Astra Ab New use
EP0648780A1 (en) * 1993-08-26 1995-04-19 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic thrombin inhibitors
GB9318637D0 (en) * 1993-09-08 1993-10-27 Ferring Res Ltd Enzyme inhibitors
US5439888A (en) * 1994-03-04 1995-08-08 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5705487A (en) * 1994-03-04 1998-01-06 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5707966A (en) * 1994-03-04 1998-01-13 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
ZA951617B (en) * 1994-03-04 1997-02-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents.
ZA951618B (en) * 1994-03-04 1996-08-27 Lilly Co Eli Antithrombotic agents
US5602101A (en) * 1994-03-04 1997-02-11 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5726159A (en) * 1994-03-04 1998-03-10 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5885967A (en) * 1994-03-04 1999-03-23 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5484772A (en) * 1994-03-04 1996-01-16 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5488037A (en) * 1994-03-04 1996-01-30 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5691356A (en) * 1994-03-21 1997-11-25 Bristol-Myers Squibb Company Disubstituted heterocyclic thrombin inhibitors
US5681844A (en) * 1994-04-18 1997-10-28 Corvas International, Inc. Methionine sulfone and s-substituted cysteine sulfone derivatives as enzyme inhibitors
US5561146A (en) * 1994-06-10 1996-10-01 Bristol-Myers Squibb Company Modified guanidino and amidino thrombin inhibitors
DE4421052A1 (de) 1994-06-17 1995-12-21 Basf Ag Neue Thrombininhibitoren, ihre Herstellung und Verwendung
DE4436772A1 (de) * 1994-10-14 1996-04-18 Boehringer Mannheim Gmbh Neues Dipeptid-Derivat, Verfahren zu seiner Herstellung sowie diese Verbindung enthaltende Arzneimittel
SE504185C2 (sv) * 1994-11-08 1996-12-02 Astra Ab Lagringsstabil vattenlösning för infusion av trombininhibitorer
SE9404196D0 (sv) * 1994-12-02 1994-12-02 Astra Ab New antithrombotic formulation
DE4443390A1 (de) * 1994-12-06 1996-06-13 Basf Ag Neue dipeptidische p-Amidinobenzylamide mit N-terminalen Sulfonyl- bzw. Aminosulfonylresten
FI973360A7 (fi) * 1995-02-17 1997-08-15 Abbott Gmbh & Co Kg Uusia dipeptidisiä amidiineja trombiininestäjiksi
US5710130A (en) * 1995-02-27 1998-01-20 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
US5914319A (en) * 1995-02-27 1999-06-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
DE19512484A1 (de) 1995-04-04 1996-10-17 Bayer Ag Kohlenhydratmodifizierte Cytostatika
SA96170106A (ar) * 1995-07-06 2005-12-03 أسترا أكتيبولاج مشتقات حامض أميني جديدة
TW541316B (en) * 1995-12-21 2003-07-11 Astrazeneca Ab Prodrugs of thrombin inhibitors
SE9600216D0 (sv) * 1996-01-18 1996-01-18 Hans Arne Hansson Styrning av läkningsprocesser
CA2200163A1 (en) * 1996-03-22 1997-09-22 Michael Robert Wiley Antithrombotic diamides
US5811402A (en) * 1996-03-22 1998-09-22 Eli Lilly And Company Antithrombotic diamides
SE9602263D0 (sv) 1996-06-07 1996-06-07 Astra Ab New amino acid derivatives
US6200967B1 (en) 1996-06-25 2001-03-13 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
WO1997049404A1 (en) 1996-06-25 1997-12-31 Eli Lilly And Company Anticoagulant agents
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
SE9603724D0 (sv) * 1996-10-11 1996-10-11 Astra Ab New pharmaceutical parenteral formulation of a thrombin inhibitor
US5877156A (en) * 1997-04-24 1999-03-02 Akzo Nobel, N.V. Thrombin inhibitors
AR013084A1 (es) 1997-06-19 2000-12-13 Astrazeneca Ab Derivados de amidino utiles como inhibidores de la trombina, composicion farmaceutica, utilizacion de dichos compuestos para la preparacion demedicamentos y proceso para la preparacion de los compuestos mencionados
SE9704543D0 (sv) 1997-12-05 1997-12-05 Astra Ab New compounds
CN1289341A (zh) 1998-01-26 2001-03-28 Basf公司 凝血酶抑制剂
AU750561B2 (en) * 1998-04-24 2002-07-25 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Amino acid amidinohydrazones, alkoxyguanidines and aminoguanidines as protease inhibitors
SE9802938D0 (sv) 1998-09-01 1998-09-01 Astra Ab Improved stability for injection solutions
SE9802973D0 (sv) * 1998-09-03 1998-09-03 Astra Ab Immediate release tablet
SE9804313D0 (sv) 1998-12-14 1998-12-14 Astra Ab New compounds
DE60037183T2 (de) 1999-01-13 2008-10-09 Astrazeneca Ab Neue amidinbenzylamin-derivate und ihre verwendung als thrombin-inhibitoren
KR20000060566A (ko) * 1999-03-17 2000-10-16 이경하 치환된 방향족 아미딘 유도체 및 이를 함유하는 의약조성물
AR023510A1 (es) 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
AR023819A1 (es) * 1999-05-03 2002-09-04 Astrazeneca Ab FORMULACIoN FARMACEUTICA, KIT DE PARTES Y UTILIZACION DE DICHA FORMULACION
US6290662B1 (en) * 1999-05-28 2001-09-18 John K. Morris Portable, self-contained apparatus for deep vein thrombosis (DVT) prophylaxis
SE9902202D0 (sv) 1999-06-10 1999-06-10 Astra Ab Production of aggregates
SE0001803D0 (sv) 2000-05-16 2000-05-16 Astrazeneca Ab New compounds i
US6433186B1 (en) 2000-08-16 2002-08-13 Astrazeneca Ab Amidino derivatives and their use as thormbin inhibitors
JP2002155086A (ja) * 2000-11-16 2002-05-28 Ube Ind Ltd ７ａ−アルコキシ−４Ｈ−ピラノ［３，２−ｄ］−オキサゾール−２（３Ｈ）−オン類、及びその製造法
US7129233B2 (en) 2000-12-01 2006-10-31 Astrazeneca Ab Mandelic acid derivatives and their use as thrombin inhibitors
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
AR034517A1 (es) 2001-06-21 2004-02-25 Astrazeneca Ab Formulacion farmaceutica
SE0201659D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab Modified release pharmaceutical formulation
SE0201661D0 (sv) 2002-05-31 2002-05-31 Astrazeneca Ab New salts
US7332227B2 (en) * 2003-03-14 2008-02-19 Becton, Dickinson And Company Non-volatile lubricant system for medical devices
WO2004091463A2 (en) 2003-04-11 2004-10-28 Hill-Rom Services, Inc. System for compression therapy
US7795205B2 (en) 2004-04-12 2010-09-14 Canyon Pharmaceuticals, Inc. Methods for effecting regression of tumor mass and size in a metastasized pancreatic tumor
GB0507577D0 (en) 2005-04-14 2005-05-18 Novartis Ag Organic compounds
US8070678B2 (en) * 2005-10-05 2011-12-06 Gurbel Paul A Detection of restenosis risk in patients receiving a stent by measuring the characteristics of blood clotting including the measurement of maximum thrombin-induced clot strength
TW200827336A (en) 2006-12-06 2008-07-01 Astrazeneca Ab New crystalline forms
CN102924567B (zh) * 2008-10-28 2014-06-04 上海医药工业研究院 一类肽化合物、其制备方法及用途
CN102464701B (zh) 2010-11-08 2015-10-21 上海医药工业研究院 一类新型化合物、其制备方法及用途
EP2721050A1 (en) * 2011-06-16 2014-04-23 Lonza Ltd A process for extraction of peptides and its application in liquid phase peptide synthesis
US9737454B2 (en) 2012-03-02 2017-08-22 Hill-Rom Services, Inc. Sequential compression therapy compliance monitoring systems and methods
US10507158B2 (en) 2016-02-18 2019-12-17 Hill-Rom Services, Inc. Patient support apparatus having an integrated limb compression device
RU2712194C1 (ru) * 2019-10-02 2020-01-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Государственный научно-исследовательский институт генетики и селекции промышленных микроорганизмов Национального исследовательского центра "Курчатовский институт" (НИЦ "Курчатовский институт" - ГосНИИгенетика) Антикоагулянтное лекарственное средство, представляющее собой синтетический дипептид Ac-Trp-Arg-Pip ⋅HCl, фармацевтическая композиция, включающая это антикоагулянтное лекарственное средство

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HU178398B (en) * 1979-06-12 1982-04-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new agmatine derivatives of activity against haemagglutination
US4568636A (en) * 1981-03-25 1986-02-04 Pentapharm Ag Tripeptide derivatives
US4395401A (en) * 1981-09-09 1983-07-26 Smithkline Beckman Corporation Renally active dipeptides
DE3505555A1 (de) * 1985-02-18 1986-09-11 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Neue oligopeptidylargininolderivate und deren homologe, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel
US4906659A (en) * 1985-06-18 1990-03-06 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibiotic tan-749, its derivatives, production and use thereof
DE3606480A1 (de) * 1986-02-28 1987-09-03 Behringwerke Ag Oligopeptidylnitrilderivate, diese enthaltende mittel, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
US5187157A (en) * 1987-06-05 1993-02-16 Du Pont Merck Pharmaceutical Company Peptide boronic acid inhibitors of trypsin-like proteases
US5037819A (en) * 1990-06-04 1991-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
US5110812A (en) * 1990-06-04 1992-05-05 Bristol-Myers Squibb Co. Azetidin-2-one derivatives as serine protease inhibitors
TW201303B (hu) * 1990-07-05 1993-03-01 Hoffmann La Roche
GB9019558D0 (en) * 1990-09-07 1990-10-24 Szelke Michael Enzyme inhibitors
GB9024129D0 (en) * 1990-11-06 1990-12-19 Thrombosis Research Trust Inhibitors and substrates of thrombin
EP0503203A1 (en) * 1991-03-15 1992-09-16 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel thrombin inhibitors
SE9102462D0 (sv) * 1991-08-28 1991-08-28 Astra Ab New isosteric peptides
ZA928581B (en) * 1991-11-12 1994-05-06 Lilly Co Eli Antithrombotic agents

Also Published As

Publication number Publication date
AU670052B2 (en) 1996-07-04
CN1076199A (zh) 1993-09-15
SI9200363A (en) 1993-06-30
AP9200457A0 (en) 1993-01-31
CZ129694A3 (en) 1994-12-15
MX9206938A (es) 1993-06-01
ZA929099B (en) 1993-06-07
TNSN92109A1 (fr) 1993-06-08
CZ333895A3 (en) 1996-04-17
US5614499A (en) 1997-03-25
EE9400455A (et) 1996-06-17
NO942066D0 (no) 1994-06-03
SE9103612D0 (sv) 1991-12-04
NZ280762A (en) 1998-08-26
CA2125175C (en) 2001-09-11
YU104592A (sh) 1995-12-04
WO1993011152A1 (en) 1993-06-10
FI942645L (fi) 1994-06-03
US5747460A (en) 1998-05-05
NO942066L (no) 1994-06-03
CA2125175A1 (en) 1993-06-10
AU3120993A (en) 1993-06-28
IS3954A (is) 1993-06-05
AU5061696A (en) 1996-08-01
ATE190066T1 (de) 2000-03-15
AP353A (en) 1994-08-14
AU683793B2 (en) 1997-11-20
JPH09500356A (ja) 1997-01-14
DE69230727D1 (de) 2000-04-06
SK63194A3 (en) 1994-12-07
TW223078B (hu) 1994-05-01
IL103910A0 (en) 1993-04-04
JP3306826B2 (ja) 2002-07-24
MA22729A1 (fr) 1993-07-01
DE69230727T2 (de) 2000-08-03
EP0618926B1 (en) 2000-03-01
FI942645A0 (fi) 1994-06-03
US5955433A (en) 1999-09-21
HU9401474D0 (en) 1994-08-29
EP0618926A1 (en) 1994-10-12
NZ246106A (en) 1996-07-26
FI115770B (fi) 2005-07-15
US5736521A (en) 1998-04-07
NO311361B1 (no) 2001-11-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUT70431A (en) New peptide derivatives
FI119812B (fi) Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidijohdannaisten valmistamiseksi
EP0605462B1 (en) New isosteric peptides
FR2609289A1 (fr) Nouveaux composes a activite d&#39;inhibiteurs de collagenase, procede pour les preparer et compositions pharmaceutiques contenant ces composes
US5780631A (en) Starting materials in the synthesis of thrombin and kininogenase inhibitors
CA2110464A1 (en) Guanidinyl-substituted heterocyclic thrombin inhibitors
JPH04330094A (ja) 有機化学における改良
HUT72062A (en) Prolin-amide derivatives and pharmaceutical compositions containing them as active component
CA2155448A1 (en) Inhibitors of farnesyl protein transferase
RU2106356C1 (ru) Псевдопептиды или их соли, способы их получения, фармацевтическая композиция
JP4023554B2 (ja) アミノスルホン酸の誘導体、プソイドペプチドの合成における同誘導体の利用、およびその製造法
EP0838471A1 (en) Peptide derivatives and angiotensin iv receptor agonist
HU208427B (en) Process for producing renine-inhibiting amino-acid derivatives and pharmaceutical compositions containing them
HU187808B (en) Process for the preparation of n-bracket-carboxy-alkyl-bracket-prolina containing tripeptides
EP0832879A1 (en) Process for preparing intermediates for thrombin inhibitors
HU224427B1 (hu) Véralvadásgátló hatású peptidszármazékok, a vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények és alkalmazásuk

Legal Events

Date Code Title Description
DFC4 Cancellation of temporary protection due to refusal