HUT73239A

HUT73239A - 4-amino-17beta(cyclopropyloxy)androst-4-en-3-one, 4-amino-17beta(cyclopropylamino)androst-4-en-3-one and their derivatives and pharmaceutical compositions containing them as c17-20 lyase and 5alfa-reductase inhibitors

Info

Publication number: HUT73239A
Application number: HU9503369A
Authority: HU
Inventors: Michael R Angelastro; Timothy T Curran; Cynthia A Gates; J O'neal Johnston; Philip M Weintraub
Original assignee: Merrell Dow Pharma
Priority date: 1993-05-25
Filing date: 1994-05-06
Publication date: 1996-07-29
Also published as: WO1994028010A1; NO954767L; JPH08510733A; FI955642A0; NO954767D0; CA2161649A1; CN1124490A; AU674971B2; US5486511A; EP0700400A1; AU6945594A; HU9503369D0; NZ267231A; FI955642A7

Description

A találmány tárgya az (I) általános képletü vegyületvagy gyógyszerészetileg elfogadható sói, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport és mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport; X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport; a pontozott vonalak jelentése kettőskötés esetleges jelenlétét jelzi.

κ

A találmány szerinti vegyületet C₁₇₂₀ Ház enzim, 5a-reduktáz enzim inhibiá lására, valamint androgén-függő, ösztrogén-indukált és ösztrogén-stimulált betegsé gek, mint például DHT-mediált betegség, prosztata jóindulatú hyperplasia, mellrák, prosztata rák kezelésére gyógy szemészetben alkalmazzák.

JÖÁ'· .

61.384/SM

S.B.G. & K.

Nemzetközi Szabadalmi Iroda H-1062 Budapest, Andrássy út 113. Telefon: 34-24-950, Fax: 34-24-353

4-amino-17β-(οίΚΙορΓορίΙ-οχί)-3η0Γθ5ζί-4-έη-3-οη, 4-amino-17ft-(ciklopropil-amino)O'A ÁV H ',L· t VÍ.Ü -: vIa

-androszt-4-én-3-on és hasontó vegyületek^ amelyek C₁₇,₂₀ liáz és 5a-reduktáz inhibitorok j ^{ς λ} , \ / \

Merrell Dow Pharmaceuticals Inc., CINCINNATI, Ohio,

AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

Feltalálók: WEINTRAUB Philip M„

CINCINNATI,

GATES Cynthia,

FAIRFIELD,

ANGELASTRO Michael R.,

CINCINNATI,

JOHNSTON J. O'Neil,

MILFORD,

CURRAN TimothyT.,

CINCINNATI,

Ohio, AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

A bejelentés napja: 1994. 05. 06.

Elsőbbségei: 1993. 05. 25. (08/066,744),

1994. 03. 16. (08/209,501),

1994. 05. 02. (08/231,434)

AMERIKAI EGYESÜLT ÁLLAMOK

A nemzetközi bejelentés száma: PCT/US94/05075

A nemzetközi közzététel száma: WO 94/28010 * *»

A C_{17 2}o liáz szteroid enzim hasítja a szteoridokban a 17-20 szén-szén kötést olyan esetben, amikor a 17ft-szénatomon két szénatomos oldallánc található a molekulában, és így fontos szerepet játszik, mivel jelentős prekurzor molekulákat állít elő a tesztoszteron az 5a-dihidro-tesztoszteron és az ösztrogének, különösen az ösztron és az ösztradiol képzéséhez. Az olyan vegyületek, amelyek ezt az enzimet inhibálják, ennélfogva alkalmasak a fenti prekurzor vegyület előállításának inhibiálására és alkalmasak különféle androgén, továbbá ösztrogén függő betegségek kezelésére. Az ilyen enzim inhibitorokat alkalmazó kezelés nem limitált a prekurzor molekula származására, mint például a különféle szerv kimetsző eljárásokra, amelyeket a jelen gyakorlatban gyakran alkalmaznak. Például a here eltávolítás hatásosan csökkenti az ivarmirigy androgén mennyiséget, de ez nem gyakorol jelentős befolyást a mellékvese androgén képződésre. Ezen túlmenően az ilyen enzimatikus kezelés sokkal inkább arra irányul, hogy a különféle betegségekért felelős közvetlen hormonális egyensúly hiányt kezelje olyan esetekben, melyeket széles spektrumú orvossággal lehet kezelni, de azok nem hatnak egyetlen megadott szimptómára, hanem általános endokrin hiányt vagy rendellenességet okoznak, amely valamely helyettesítési terápiában esetleg egy élethosszon át tartó függőséget eredményezhet.

Ezen túlmenően ismert, hogy bizonyos típusú mellrák esetek ösztrogén függőek. Mellékvese műtéti eltávolítást, petefészek műtéti eltávolítást és az agyalapi mirigy műtéti eltávolítását, továbbá nem sebészeti eljárásokat is alkalmaznak a tumor visszafejlődés előidézésére. Kimutatták, hogy előrehaladott mellrákban szenvedő humán betegek, akiknek ösztrogén bioszintézis enzim inhibitort adagoltak, igen nagymértékű plazma ösztradiol koncentráció csökkenést mutattak és javított terápiás hatást lehetett elérni vagy legalábbis olyan hatást, mint amelyet a mellékvese eltávolítással elértek. (Jean Van Wauve and Paul A.J. Janssen, Journal of Medicina! Chemistry, 32, 10:2231-2239.)

61.384/SM

A prosztatarák vagy daganatos betegség, amely a prosztata epithelium működő sejtszövetből ered, az egyik leggyakoribb rosszindulatú betegség férfiakban és valamennyi rosszindulatú karcinóma között az egyik legnagyobb számú rákkal kapcsolatos elhalálozást okozza. A szakirodalomban ismert, hogy az olyan betegek, amelyek metasztázisos prosztatarákban szenvednek, pozitív választ adnak a hormonális terápiára. Cookson és Sarosdy leírták, hogy az androgén eltávolítás pozitív választ eredményezett és a kezelt betegek esetében akár 60-80%-ban pozitív javulást okozott. (Cookson C.S. and Sarosdy M.F., South Med. J 87:1-6.)

Részletesebben, a C₁₇₂o ϋθζ inhibitor vegyületek alkalmasak lehetnek hormon függő prosztata karcinóma, prosztata tültengés, virilismus, veleszületett mellékvese hyperplasia kezelésére, amely utóbbi 21-hidroxiláz hiányból ered, továbbá kóros szőrösödés, hormonfüggő mellrák, policisztás petefészek szindróma kezelésére, amely a C_{17 2}o üáz magas aktivitásával kapcsolatos, továbbá alkalmas lehet egyéb burjánzó szövet betegségek, mint például méhbelhártya, májsejt és mellékvese karcinómák kezelésére.

Az emlős szövetekben, mint például bőrben, hím ivarszervekben és prosztatában jelenlevő szteroid 5a-reduktáz enzim katalizálja a tesztoszteron (17B-hidroxi-androsztán-4-én-3-on) konverzióját a dihidro-tesztoszteronná vagy DHT vegyületté (17β-όί0Γθχί-5α-3η0Γθ5ζί-3-οη), amelyet más néven stanolone névvel jeleznek. A DHT sokkal hatásosabb androgén, mint a tesztoszteron és ez a végső szerveken fejt ki hatást bizonyos szöveteken, különösen a növekedés szabályozásában. A DHT képződés az 5a-reduktáz hatására bizonyos szövetekben magukban is előfordulhat. Amennyiben androgén függő betegségeket kezelünk, amely lehet jóindulatú prosztata tültengés és prosztata rákos megbetegedés, beleértve a hormonálisán szabályozott karcinómát, a DHT inhibiálása igen kívánatos.

61.384/SM »

- 4 A tesztoszteron DHT vegyületté történő konverziója összefügghet különféle androgén betegségekkel, különösen olyanokkal, amelyekben a DHT koncentráció túlzott mértékű. Például a bőrben a DHT túlzott koncentrációja a pattanás vagy szörtüsző gyulladás patogenezisével függhet össze, beleértve az acne vulgáris esetét.

Az olyan hatóanyagok, amelyek képesek inhibiálni a C₁₇.₂₀ liáz és az 5a-reduktáz enzimeket, nemcsak a DHT képződést inhibiálják, hanem a tesztoszteron képződést is akadályozzák. Mivel a lényegi androgén szteroid hormonok képződését inhibiálják, ezek a vegyületek javított hatásúak lehetnek az androgén típusú betegségek kezelésében.

Az EP-A-509,259 számú szabadalmi bejelentésben leírak C₁₇.₂o üáz inhibitorokat, amelyek véletlenszerű aktivitást mutatnak a C₁₇.₂o üázzal szemben és ezek 4-pregnén-származékok, amelyek 3-oxo és 4-amino-szubsztituenseket tartalmaznak. Az EP-A-469,547 számú és az EP-A-469,548 számú szabadalmi bejelentésekben leírtak 5a-reduktáz inhibitorokat, amelyek 3-oxo- és 4-amino-, valamint 4-szubsztituált-amino-szubsztituenseket tartalmaztak. A korábbi szabadalmi bejelentésben 4,6-pregn-dién-származékokat írtak le, míg az utóbbiban a megfelelő 4-pregnént írták le. Az EP-A-291,717 számú szabadalmi bejelentésben leírtak C₁₇.₂₀ liáz inhibitorokat, amelyek 17-ciklopropiloxi-szubsztituenseket tartalmaznak, és amelyek továbbá 5,3-enol, valamint 3-oxo-, 4-én-androsztán-származékok. Az EP-A-288,053 számú szabadalmi bejelentésben hasonló vegyületeket írtak le, amelyek 17-ciklopropil-amino-szubsztituenst tartalmaztak.

A találmány tárgya a 4-amino-17-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on, 4amino-17-(ciklopropil-amino)-androszt-4-én-3-on vegyületek, valamint hasonló származékok, továbbá ezek alkalmazása olyan betegségek kezelésére, amelyeket a C₁₇.₂₀ és/vagy 5a-reduktáz inhibiálásával kezelhetünk, beleértve az androgén és

61.384/SM

- 5 ösztrogén médiáit betegségeket, mint például a jóindulatú prosztata túltengést, az ösztrogén függő mellrákot és az androgén függő prosztata rákot. Részletesebben, a találmány tárgya az (I) általános képletű vegyületek és ezek gyógyszerészetileg elfogadható sói, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport és valamennyi R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-4 kis szénatomszámú alkilcsoport, valamennyi X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom és metilcsoport; és a pontozott vonalak a kívánt esetben jelenlevő kettőskötések jelenlétét jelzik. Előnyös találmány szerinti vegyületek, ahol R és X jelentése az általános képletben hidrogénatom.

A találmány szerinti leírásban az „1-4 szénatomszámú alkilcsoport” elnevezés alatt egyenes vagy elágazó szénláncú 1-4 szénatomot tartalmazó alkilcsoportokat értünk, amelyek lehetnek például metilcsoport, etilcsoport, propilcsoport, izopropil-csoport, n-butil-csoport, szek-butil-csoport, terc-butil-csoport és hasonló csoportok.

A „gyógyszerészetileg elfogadható só elnevezés alatt a szakember által könnyen meghatározható elnevezést értünk, és ez olyan savaddíciós só, amely nem fejt ki jelentős toxikus hatást a betegre az adagolt dózisban és amely megfelelő gyógyszerészeti kezelhetőséget és formulálási jellemzőket biztosít. Ilyen sók lehetnek szerves vagy szervetlen sók és ezek lehetnek hidratált formájúak vagy lényegében vízmentes alakok. Alkalmazható szervetlen savak, amelyek megfelelő sókat képeznek például a sósav, a hidrogén-bromid, a kénsav, a foszforsav és továbbá képezhetünk fém sókat, mint például nátrium-monohidrogén-ortofoszfáttal és kálium-hidrogén-szulfáttal képzett sókat. Az alkalmazható szerves savak, amelyek alkalmas sókat képeznek, lehetnek például mono-, di- és tri-karbonsavak, ilyen savak lehetnek például az ecetsav, a glikolsav, a tejsav, a piruvinsav, a malonsav, a borostyánkősav, a glutársav, a fumársav, az almasav, a borkősav, a citromsav, az aszkorbinsav, a maleinsav, a hidroxi-maleinsav, a benzoesav, a hidroxi-benzoesav, a fenil-ecetsav,

61.384/SM

- 6 a fahéjsav, a szalicilsav, a 2-fenoxi-benzoesav, és a szulfonsavak, mint például a metán-szulfonsav és a 2-hidroxi-etán-szulfonsav.

A találmány szerinti vegyületeket a (II) általános képletü megfelelő 4,5-epoxi-vegyületből nyerhetjük, ahol az általános képletben R, X és a pontozott vonalak jelentése a fent megadott. Az olyan találmány szerinti vegyületek előállítása esetében, amelyekben a vegyület a 6-helyzetben nem rendelkezik kettőskötéssel, a fent megadott 4,5-epoxi-vegyületet nátrium-aziddal, inért oldószerben, mint például dimetil-szulfoxidban katalitikus mennyiségű kénsav jelenlétében reagáltatjuk. A reakcióelegyet kb. 60°C hőmérsékletre melegítjük, és így a megfelelő 4-azido-4-én-származékot nyerjük. Ezt az azido-vegyületet ezt követően trifenil-foszfin jelenlétében vizes inért oldószerben melegítjük, és így a kívánt amino-vegyületet nyerjük. Az alkalmazható oldószer a reakcióban például a vizes tetrahidrofurán.

A találmány szerinti 4-amino-4,6-dién-vegyületek előállítása céljából a fent leírt epoxi-vegyületet nátrium-aziddal reagáltatjuk inért oldószerben, amely lehet például dimetil-szulfoxid. A reakciót általában katalitikus mennyiségű erős sav, mint például kénsav jelenlétében, kb. 100°C hőmérsékletre történő melegítéssel hajtjuk végre. A közbenső termékek izolálását nem végeztük, azonban feltehető, hogy az epoxid először felnyílik és így a 4-azido-4-én-vegyület keletkezik. Az alkalmazott reakciókörülmények között az azido-vegyület nitrogénatomot veszít, és így valószínű azirin-vegyület keletkezik, majd ez felnyílik, és így a 4-amino-4,6-dién vegyületet nyerjük.

A találmány szerinti eljárásban fent alkalmazott 4,5-epoxi-vegyüietekét bázis katalizált epoxidálási reakcióban nyerhetjük a megfelelő 4-én vegyületből kiindulva 30%-os vizes hidrogén-peroxid alkalmazásával. Az 1-helyzetben kettőskötést tartalmazó vegyületek esetében előnyösen a telítetlen kötés bevezetése az epoxid kialakítása után történik. Ennélfogva például a 4,5-epoxi-3-keton-vegyület reagáltatása

61.384/SM

- 7 diklór-diciano-kinon reagenssel a megfelelő A¹-epoxid vegyületet szolgáltatja. A fent előállított epoxid-termékek általában a- és β-epoxidok keverékei, ahol a β-epoxid a fő termék. Bármely esetben az epoxidok további reakciója nátrium-aziddal a találmány szerint fent leírt eljárásnak megfelelően a kívánt 4-amino-terméket szolgáltatja.

Más eljárás szerint a találmány szerinti vegyületeket úgy állíthatjuk elő, hogy a megfelelő 4-nitro-4-én-szteroid vegyületet redukáljuk, és így a kívánt 4-amino-szteroidot állítjuk elő. A 4-nitro-4-én-vegyületet úgy állíthatjuk elő, hogy a szteroidot megfelelő reakciókörülmények alkalmazásával erős bázissal reagáltatjuk, amely reakciókörülmények alkalmasak arra, hogy a termodinamikailag kedvező dienolát-vegyület keletkezzen. Ezt követően ezt a vegyületet bármely alkalmas nitráló reagenssel nitráljuk, amely lehet például izopropil-nitrát. A kapott 4-nitro-vegyületet ezt követően bármely ismert módon redukálhatjuk, például kémiai vagy katalitikus redukció révén, és így a kívánt 4-amino-4-én-szteroid vegyületet állíthatjuk elő.

A találmány szerinti vegyületek a C₁₇.₂₀ Ház szteroid enzim és 5a-reduktáz inhibitorai, és így inhibiálják az androgén szteroidok, például a tesztoszteron képződését. Ebből eredően a találmány szerinti vegyületek alkalmasak különféle androgén függő betegségek kezelésére. Mint C₁₇.₂₀ liáz inhibitor anyagok, ugyancsak alkalmazhatók különféle ösztrogén-függő betegségek kezelésében. A jelen találmány tárgya ebből eredően eljárás androgén és/vagy ösztrogén függő betegségek kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen betegségben szenvedő betegnek a találmány szerinti vegyület enzim inhibiálásban hatásos mennyiségét adagoljuk. A beteg elnevezés alatt a leírásban melegvérű emlősöket értünk, beleértve az embert, a főemlősöket, kutyát, szarvasmarhát, macskát, lovat, birkát, egeret, patkányt és sertést.

Részletesebben, a találmány szerinti androgén inhibitor vegyületek alkalmasak prosztata rákos megbetegedés, beleértve az androgén függő prosztata karcinómát, a virilismus, az androgén hajhullás, a faggyú túltermelés és a női túlzott szőrö61.384/SM

- 8 södés kezelésére. Mivel a találmány szerinti vegyületek egyben 5a-reduktáz inhibitor hatással is rendelkeznek, ezek különösen alkalmazhatók dihidro-tesztoszteron (DHT) médiáit betegségek kezelésére, amelyek lehetnek például jóindulatú prosztata túltengés, androgén alopecia, seborrhea, nő esetében előálló túlzott szőrösödés, policisztás méh vagy petefészek szindróma és acne betegségek, beleértve az acne vulgáris esetét.

Mivel a találmány szerinti vegyületek inhibiálják a szteroid C_{17 20} Ház enzimet, amely az ösztrogén bioszintetikus útjában játszik szerepet, a találmány szerinti vegyietek egyben inhibiálják az ösztrogén bioszintézisét. Ebből eredően a találmány szerinti vegyületek alkalmasak fogamzásgátló szerként történő alkalmazásra, alkalmasak az ovuláció vagy a nőkben történő megtermékenyülés megakadályozására, ezen túlmenően alkalmasak férfiakban a populációs viselkedés csökkentésére, amely utóbbi esetben az aromatizálás szükséges folyamat ahhoz, hogy ilyen viselkedés létrejöjjön. Ezen túlmenően, mivel a jelen találmány szerinti vegyületek csökkentik a keringésben található ösztrogén koncentrációt, hatásosan megakadályozzák a biológiailag aktív ösztrogének hatását, illetve azt, hogy ezek az endokrin tumorokat elérjék. Továbbá, mivel a jelen találmány szerinti vegyületek csökkentik az ösztrogén bioszintézist tumorokban, amely tumorok képesek endogén ösztrogén szintézisre, a vegyületek alkalmasak a mellrák enyhülésének kiváltására, beleértve a metasztázis állapotban levő tumorokat is. Ezen túlmenően a találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók petefészek, méh és hasnyálmirigy rákok kezelésében, valamint galactorrhea, McCume-Albright szindróma, jóindulatú mellbetegség és endometriosis kezelésében is. Mivel a találmány szerinti vegyületek C₁₇₂₀ Ház inhibitorok, továbbá alkalmasak egyéb daganatos szövet megbetegedések, mint például méhbelhártya, májsejt és adrenális karcinóma kezelésére is.

61.384/SM

A jelen találmány szerinti vegyületek szteroid C₁₇₂₀ Ház inhibiáló hatását mikroszóma preparátumokon mutattuk ki, amelyeket humán vagy laboratóriumi állat tesztvizsgálatokban szteroid C₁₇₂₀ liáz enzim preparátumon végeztünk. A humán tesztvizsgálati anyagot a tesztvizsgálathoz terápiás here eltávolítás révén nyertük. Részletesebben, a mikroszómákat humán, cynomolgus majom, kutya, patkány vagy érzéstelenített csupasz egér here szövetből nyertük. A tesztvizsgálatnak alávetett találmány szerinti vegyületet dimetil-szulfoxidban oldottuk, és 0,05m kálium-foszfát pufferrel hígítottuk, és így kívánt koncentrációjú tesztvizsgálati vegyület oldatokat állítottunk elő. A kálium-foszfát puffer pH értéke humán majom és kutya liáz tesztvizsgálat esetében 7,4 volt és a patkány, valamint az eszméletlen szőrtelen egér esetében a pH érték 7,2 volt a liáz tesztvizsgálatban. A tesztvizsgálati elegy továbbá 1 mmol NADPH, 5 mmol glükóz-6-foszfát, 1 lU/ml glükóz-6-foszfát dehidrogenáz (egy NADPH regeneráló rendszer), valamint mikroszómális fehérje tartalmú volt, amelynek összes térfogata 0,2 ml. A kontroll tesztvizsgálatok valamennyi komponenst tartalmazták a dimetil-szulfoxidot is beleértve, de nem tartalmaztak tesztvizsgálatnak alávetett találmány szerinti vegyületet. Valamennyi kísérletet párhuzamos méréssel végeztük. Az időfüggő C₁₇₂₀ liáz inaktiválás meghatározás céljára a tesztvizsgálati vegyületet 20-60 pg/ml mikroszómális protein puffer és az NADPH regeneráló rendszer jelenlétében inkubáltuk (amelyet fent leírtunk) 34°C hőmérsékleten. Az inkubálást 0 vagy 40 percen át végeztük. A teszvizsgálati elegyből 180 μΙ mintákat vettünk és ezek enzim aktivitását meghatároztuk. A meghatározást úgy végeztük, hogy triciummal jelzett szteroid szubsztrátot, valamint nem jelzett szteroid szubsztrátot adagoltunk a kivett mintához úgy, hogy összesen 200 μΙ összes térfogatot érjünk el. Ezt követően a mintákat 34°C hőmérsékleten 6 percen át inkubáltuk. A tesztvizsgálati vegyület által kifejtett reverzibilis inhibiálást úgy határoztuk meg, hogy a reakciót szubsztrát adagolással iniciáltuk. A humán, a majom és a kutya liáz esetében alkal61.384/SM

- 10 mázott radioaktív szubsztrát a [7-³H]-17a-hidroxi-pregnenolon volt 11,2 Ci/mmol értékben, amely 0,2 pCi összes aktivitást jelentett tesztvizsgálatonként. A mintákhoz nem jelzett 17a-hidroxi-pregnenolont adagoltunk, hogy teljes koncentrációja a humán és majom enzimek esetében 1,0 pmol vagy 0,3 pmol legyen, a kutya enzim esetében 0,08 pmol legyen. A 17a-hidroxi-pregnenolon K_m értékek sorrendben a humán, a majom és a kutya liáz esetében 0,30 pmol, 0,11 pmol és 0,06 pmol érték. A rágcsáló enzimek esetében alkalmazott radioaktívan jelzett szubsztrát [1,2- HJ-17a-hidroxi-progeszteron (40-57 Ci/mmol; 0,2 pCi per tesztvizsgálat) volt. A nem jelzett 17a-hidroxi-progeszteront adagoltuk a tesztvizsgálati elegyhez úgy, hogy a teljes koncentráció a patkány enzim esetében 0,1 pmol (K_m = 0,1 pmol) és az eszméletlen szőrtelen enzim esetében 0,03 pmol (K_m - 0,03 pmol) érték volt. A teljes tesztvizsgálati térfogat 200 pl volt. A teljes teszvizsgálati elegyet 6 percen át 34°C hőmérsékleten inkubáltuk. Valamennyi reakciót 5 ml kloroform:metanol 2:1 elegy adagolásával leállítottuk. Ebben az időpontban a szubsztrátokat megjelenítő hordozó szteroidokat és termékeket, valamint 0,8 ml vizet adagoltunk a mintákhoz. A humán, a majom és a kutya liáz tesztvizsgálat esetében a hordozó szteroidok a 17a-hidroxi-pregnenolon, a dehidro-epiandoszteron és az andosztendiol voltak. A rágcsáló liáz tesztvizsgálat esetében a hordozó szteroidok a 17a-hidroxi-progeszteron, az andosztén-dion és a tesztoszteron voltak. A szteroidokat Moore és Wilson eljárása szerint extraháltuk (Methods in Enzymol., eds. O’Malley, B.W. and Hardman, J.G.

36, 1975, 466-474). A szteroidokat tartalmazó szerves fázist nitrogéngáz alkalmazásával bepároltuk, majd a maradékot 18% (térfogat/térfogat) tetrahidrofurán-hexános elegyben oldottuk. Ezután a szteroidokat nagynyomású folyadékkromatográfia segítségével (HPLC) Si60 (5 pm) oszlopon (250 x 4 mm) gradiens 18-22 térfogat% tetra61.384/SM

- 11 hidrofu rá π/hexán eluens alkalmazásával elválasztottuk. A szteroid csúcsok radioaktivitását Raciomatic Model HS Flo-One detektorral mértük.

Valamennyi inkubált minta esetében az enzim aktivitást úgy számítottuk, hogy meghatároztuk a szubsztrát termékké történő átalakítás százalékát és az eredményeket a kontrollal összehasonlított százalék inhibiálásban adtuk meg. Az IC₅₀ értékeket úgy határoztuk meg, hogy ezeket az adatokat egy két paraméteres egyenlettel megfelelő számítógépes programmal illesztettük. Az időfüggő inhibitorok K, és k_inactértékeit Kitz-Wilson szerinti grafikus analízissel határoztuk meg. Amennyiben a találmány szerinti vegyületeket a fenti eljárás szerint vizsgáltuk humán liáz alkalmazásával, az alábbi eredményeket nyertük:

1. táblázat

Humán kutya, patkány és szőrtelen egér liáz enzimes inhibiálása

Vegyület	Enzim	Koncentráció (μΠΊθΙ)	Előinkubálás ideje (perc)	% inhigiálás
1	humán	10	40	98
		10	0	95
		1	40	84
		1	0	69
2	humán	10	40	99
		10	0	96
		1	40	86
		1	0	79
	kutya	1	40	57
	patkány	0,1	40	70
	szőrtelen egér	0,01	40	84

1) 4-amino-17β-(οΐ^ορΓορϊΙ-οχί)-3ηύΓοεζί3-4,6-ύΐόη-3-οπ

2) 4-amino-17β-(οίΜορΓορίΙ-οχί)-3ηύΓθ5ζί-4-έη-3-οη

61.384/SM

- 12 Cynomolgus majom C_{17 2}o Ι'θζ alkalmazása esetében a 4-amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on K, értéke 286 nmol és k_inact értéke 0,0007 másodperc’¹. Hasonlóan a 4-amino-17ft-(ciklopropil-oxi)-androszta-4,6-dién-3-on K, értéke 339 nmol és k_inact értéke 0,0009 másodperc'¹.

A találmány szerinti vegyületek szteroid 5a-reduktáz inhibiáló hatását mikroszómális 5a-reduktáz enzim preparátumokon mutattuk ki, amelyeket laboratóriumi prosztata szövetből nyertünk. Részletesebben, a mikroszómát a cynomolgus majom prosztata szövetből nyertük. A mikroszómális preparátum protein koncentrációját a minták felhasználása előtt meghatároztuk. Az egyes cynomolgus majom prosztata 5a-reduktáz aktivitás tesztvizsgálatok 0,1m kálium-foszfát-nátrium-citrát puffért (K-Na puffer, 1:1) tartalmaztak. A pH érték 5,6, ezen túlmenően az egyes tesztvizsgálati minták 0,1% marhaszérum albumint (tömeg/térfogat), 1,0 mmol nátrium-EDTA vegyületet, 7-96 gg mikroszomális fehérjét, 1,0 mmol NADPH vegyületet, 5,0 mmol glükóz-6-foszfátot, 1 lU/ml glükóz-6-foszfát dehidrogenázt [1,2-³H]-tesztoszteront (0,15 piCi), illetve nem jelzett tesztoszteront tartalmaztak, amely a kívánt szubsztrát koncentrációt biztosította. Ezen a túlmenően a minták inhibitort tartalmaztak, amelyet dimetil-szulfoxidban oldottunk, majd K-Na pufferrel hígítottunk abból a célból, hogy a teszvizsgálati koncentráció végső értéke dimetil-szulfoxidban 0,1 térfogat% legyen. A kontroll tesztvizsgálati mintákban ugyanezt a puffért és dimetil-szulfoxidot alkalmaztunk, azonban nem alkalmaztunk tesztvizsgálati inhibitor vegyületet. Az enzimet kivéve valamennyi komponenst tartalmazó minták mérésével meghatároztuk a háttér radioaktivitást. Valamennyi tesztvizsgálati vizsgálatot párhuzamos vizsgálatban végeztünk. A reakciót tesztoszteron adagolásával iniciáltuk, majd az elegyet 20 percen át 25°C hőmérsékleten Dubnoff® rázógép inkubátorban inkubáltuk. Az inhibiálásban

61.384/SM

- 13 tesztvizsgálatnak alávetett vegyületeket a tesztoszteron adagolásával párhuzamosan adagoltuk. A tesztvizsgálati minta összes térfogata 100 μΙ volt.

Az 5a-reduktáz reakciót 5 ml kloroform-metanol (2:1) elegy és 0,9 ml víz adagolásával leállítottuk. A hordozó szteroidokat 2,5 pg mennyiségben adagoltuk és ezek tesztoszteron, dihidro-tesztoszteron és 3,17-androsztán-diol voltak. A szteroid metabolitokat ezután Moore és Wilson (Methods in Enzymology, O’Malley, B.W. and Hardman, J.G., 36, 1975, 466-474) elárása szerint extraháltuk. A szteroidokat tartalmazó szerves fázist nitrogéngáz segítségével bepároltuk, majd a maradékot 3 térfogat% izopropanol hexános oldatban oldottuk. A szteroidokat ezután normál fázisú nagynyomású folyadékkromatográfia segítségével (HPLC) LiCrosorb® DIOL származék szilikagél oszlopon elválasztottuk (10 pm; 4 x 250 mm). Eluensként 3-7,5% izopropanol tartalmú hexán gradiens eluenst, majd izokratikus körülmények között 75 térfogat% izopropanol tartalmú hexán eluenst alkalmaztunk. A szteroid csúcsok radioaktivitását Packard® Radiomatic HS Flo-One® detektor segítségével mértük. Az IC₅₀ értékeket 6 inhibitor koncentráció alapján nyertük. A K, értékeket 4 inhibitor koncentrációból határoztuk meg. A kísérletek adatait megfelelő két paraméteres számítógépes modellhez illesztettük és meghatároztuk az adott IC₅₀ és K, értékeket.

A tesztvizsgálat eredménye lineáris az idő függvényében 30 percig ezen körülmények között. Az IC₅₀ meghatározások céljából egyetlen tesztoszteron koncentrációt alkalmaztunk a K_m értéknél. A tesztoszteron koncentráció 0,5 K_m - 8 K_m érték között változott az inhibiálási mechanizmus meghatározásában, illetve a K, meghatározásban. A tesztoszteron K_m értékeket több kísérletben határoztuk meg és ez 0,025 pmol - 0,091 pmol között változott a cynomolgus majom 5a-reduktáz esetében.

61.384/SM

- 14 A fenti cynomolgus majom 5a-reduktáz alkalmazásával végzett eljárás során 4-3Γηίηο-17β-(οϊΗορΓθρίΙ-οχί)-3η0Γθ5ζί-4-έη-3-οη IC₅₀ értéke 7,4 nmol és K, értéke

7,8 ± 0,7 nm. Hasonlóan a 4-amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszta-4,6-dién-3-on IC₅₀ értéke 2,8 nm.

A találmány szerinti vegyületek prosztata rákban alkalmazható terápiás hatását in vivő tumor modellben határoztuk meg, amelyet leírtak a szakirodalomban [Hoehn W. és munkatársai, Prostrate 1:95-104 (1980); Van Steenbrugge, J.J. és munkatársai, Uroloqy 131:812-817 (1984)]. A modellben humán prosztata tumor xenográfokat (PC-82) növesztettek athymiás egérben. A tumorok sorozatban transzplantálható androgén válaszfüggvényt adó, lassan növekedő tumorok (azaz a tumor térfogata 20-30 napon belül duplázódik meg), továbbá kissé eltérő humán prosztata adrenokarcinóma típusúak. Ezek a tumorok csökkent növekedést, illetve visszafejlődést mutatnak, amennyiben az androgént eltávolítottuk és fél élettartamuk 18 nap volt [van Weerden, W.M. és munkatársai, Prostate 23:149-164 (1993)].

A fent leírt androgén függő humán prosztata rákos tumor modellt alkalmaztuk 4-amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on inhibiáló hatásának értékelésére, amely inhibiáló hatás a prosztata tumor növekedést inhibiálja napi orális 30-100 mg/kg/nap kezelés esetében (lásd a 2 táblázatot). A kontroll csoportokat is vizsgáltuk egy olyan csoportot is beleértve, amely csak a hordozóanyaggal kezelt, valamint egy olyan csoportot, amely kétoldalúan kasztrált csoport. A tumor térfogatot hetente három alkalommal mértük egy digitális mérőkörző segítségével: V (mm³) = 0^ (d2)² /2 képlet alapján végeztük a számítást, ahol d1 jelentése a tumor hossza és d₂ jelentése a tumor vastagsága. A tumor térfogat relatív százalékos változását az átlag tumor térfogatra számítottuk, amely tumor térfogat a 0. héten a kontroll csoport esetében található, amely kontroll csoport csak hordozóanyaggal kezelt és ez az érték a 100% érték.

61.384/SM ·*♦· * • «

2. Táblázat

Humán prosztata tumor növekedés inhibiálása

-Tumor térfogat (mm³)

- A tumor térfogat viszonylatos % térfogata a hordozóanyaggal kezelt kontroll csoportra vonatkoztatva a kezelés kezdeti időpontjában

Idő (hét)

Kezelés	0 hét	+2 hét	+4 hét
Csak hordozóanyag	515 ±122 100%	828 ±166 161%	1919 ± 616 373%
30 mg/kg/nap	541 ± 71 105%	771 ± 108 150%	1305 ± 309 253%o
100 mg/kg/nap	426 ± 49 83%	601 ± 66 117%	840 ± 86 163%
Kasztrált	456 ± 44 89%	310 ± 48 60%	227 ± 65 44%

A 2. táblázat adataiból kitűnik, hogy a kasztrált kontroll egércsoportban androgén függőség jött létre PC-82 prosztata tumorok szempontjából. Ugyanakkor az adatok azt mutatják, hogy amennyiben napi orális kezelést végeztünk 4-amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on hatóanyaggal, hosszabb humán prosztata tumor növekedés inhibiálás jött létre. Az eredményekből kitűnik,hogy a 4-3ΠΊίηο-17β-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on androgén függő humán prosztata tumor növekedés csökkenést indukál.

A különféle androgén és ösztrogén függő betegségek kezelésében, amelyeket a korábbiakban írtunk le, a találmány szerinti vegyületek a betegnek a kezelés során orálisan adagolhatok, és így érhető el a kívánt hatás. A találmány szerinti vegyületek továbbá adagolhatok gyógyszerkészítmény formában és ezen túlmenően fenntartott hatóanyagkibocsátású formában is adagolhatok.

61.384/SM

- 16 A „hatásos inhibiáló mennyiség” elnevezés alatt a találmány szerinti vegyületek olyan mennyiségét értjük, amellyel az enzim inhibiáló hatást a betegben elérhetjük és így a beteg számára a megfelelő terápiás hatást fejtjük ki. Az adagolandó pontos mennyiség a találmány szerinti vegyületből széles határértéken belül változhat, attól függően elsősorban, hogy milyen típusú és milyen méretű beteget kezelünk. Például a dózis függ a beteg típusától, a betegség típusától és súlyosságától és az általában hatásos inhibiáló mennyiség kb. 0,625-200 mg/kg testtömeg/nap, előnyösebben kb. 0,5-100 mg/kg testtömeg/nap lehet. Az orális adagolásra alkalmazott egységdózisok tartalmazhatnak például 10-500 mg találmány szerinti vegyületet. Más eljárás szerint a találmány szerinti vegyületeket a betegnek parenterálisan adagolhatjuk, amely lehet például intravénás, intraperitoneális, intramuszkuláris, szubkután, beültetett készítmény, továbbá injektálás forma. Az aktív vegyületeket közvetlenül injektálhatjuk a szövetbe vagy a tumor helyére, illetve a készítményt is eljuttathatjuk ezekre a helyekre.

A találmány szerinti kezelési eljárás megvalósítása során az aktív hatóanyagot előnyösen készítmény formában adagoljuk, amely készítmény gyógyszerészeti hordozóanyagot tartalmaz és kb. 5-90 tömeg% találmány szerinti ciklopropil-szteroidot tartalmaz. A „gyógyszerészeti hordozóanyag elnevezés alatt ismert és a gyakorlatban használt gyógyszerészeti hordozóanyagokat értünk, amelyek alkalmasak a gyógyszerészetileg aktív találmány szerinti hatóanyagok formulálására és ezután lehetővé teszik, hogy a készítményt állatoknak adagoljuk, az ilyen hordozóanyagok lényegében nem toxikusak és az alkalmazás során nem okoznak érzékenységet. A találmány szerinti készítményeket a szokásos eljárásokkal állíthatjuk elő és így olyan készítményt nyerhetünk, amelyek alkalmas kiszerelőanyagokat tartalmaznak, amely anyagok általában a kívánt készítmény típusának megfelelő gyógyszerészeti gyakor61.384/SM

- 17 latban alkalmazott anyagok. Például a forma lehet tabletta, labdacs, kapszula, por, aeroszol, spré, vizes vagy olajos szuszpenzió, szirup, elixir, injektálási oldat és természetesen az alkalmazott kiszerelő anyagok az ezen formáknak megfelelő anyagok lehetnek. Alkalmazható gyógyszerészeti hordozóanyagokat és formálási eljárásokat a szokásos közleményekben, mint például a Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pennsylvania közleményben írtak le, amelyet referenciaként adunk meg.

Orális adagolás céljára a találmány szerinti vegyületek szilárd vagy folyékony készítménnyé alakíthatók, amely lehet kapszula, pilula, tabletta, labdacs, por, oldat, szuszpenzió vagy emulzió forma. A szilárd egységdózis forma lehet kapszula, amely előnyösen szokásos zselatint tartalmazó kapszula, amely az aktív hatóanyagot vagy valamely hordozóanyagot, például kenőanyagot és inért töltőanyagot, mint például laktózt, szukrózt vagy kukoricakeményítőt tartalmazhat. Más eljárás szerint az aktív hatóanyagot, amely a találmány szerinti vegyület, tabletta formává alakítjuk, szokásos tabletta alapanyagokkal, amelyek lehetnek például laktóz, szukróz és kukoricakeményítő és segédanyagokkal, amelyek lehetnek kötőanyagok, mint például gumi akácia, kukoricakeményítő, alginsavak és kenőanyagokkal, amelyek lehetnek például sztearinsav vagy magnézium-sztearát.

Parenterális adagolás céljára a találmány szerinti hatóanyagokat injektálható dózis, oldat vagy szuszpenzió formában készítjük, az oldat vagy szuszpenzió formát fiziológiailag elfogadható higítóanyaggal állítjuk elő, amely hordozóanyag lehet steril folyadék, mint például olajban-viz elegy és amely tartalmazhat továbbá kívánt esetben felületaktív anyagokat és egyéb más gyógyszerészeti hordozóanyagokat. Alkalmazható olajok az ilyen készítményekben például a petróleum, az állati, a növényi és a szintetikus eredetű olaj. Például alkalmazhatunk mogyoróolajat, szójaolajat és ásványi olajat erre a célra. Általában az oldat előállítása céljából alkalmazhatunk víz,

61.384/SM

- 18 fiziológiás sóoldat, vizes dextróz és hasonló cukor oldatokat, etanolokat és glikolokat, mint például propilén-glikolt vagy polietilén-glikolt. Ezek a hordozóanyagok előnyösen injektálható oldatok előállítását szolgálják.

A találmány szerinti vegyületek továbbá alkalmazhatók bőrtapasz, beültetett injekció vagy beültetett készítmény formában is és ebben az esetben olyan módon hozzuk létre a formát, amely biztosítja az aktív hatóanyag fenntartott kibocsátását. Az aktív hatóanyagot labdacsokká vagy kis hengerekké préselhetjük és szubkután vagy intramuszkuláris úton beültethetjük mint beültetett injekciót vagy beültetett készítményt a beteg szervezetébe. A beültetett készítmények tartalmazhatnak olyan inért anyagokat, amelyek biológiailag lebomló polimerek, illetve szintetikus szilikonok lehetnek, mint például Silastic® szilikon gumi, amely a Dow Corning Corp. terméke. Az ilyen gyógyszerészeti hordozóanyagok további ismertetését, illetve a formálási technológiák leírását találhatjuk meg szokásos közleményekben, mint például a Remington’s Pharmaceutical Sciences közlemény.

A találmány szerinti eljárást és vegyületeket az alábbi példákon részletesen bemutatjuk, azonban a példák nem jelentik a találmány tárgykörének semmilyen korlátozását.

1. példa

4-Azído-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on

10,9 g (33,44 mmol) 17β-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on 80 ml metanol és 60 ml diklórmetán elegyében készült oldatát vízfürdővel 15°C hőmérsékletre hütjük, majd 8,2 ml 30%-os hidrogén-peroxidot adagolunk hozzá. Ezután az elegyhez hozzáadagoljuk 0,58 g nátrium-hidroxid 3,8 ml vízben készült oldatát. A reakcióelegyet 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd az oldószer legnagyobb részét eltávolítjuk és a maradékot 300 ml vízzel hígítjuk. Ezután a keveréket 1 liter diklórmetán61.384/SM nal extraháljuk. A szerves fázist elválasztjuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, leszűrjük és bepároljuk. A nyert folyékony maradékot gyorskromatográfia segítségével SiO₂-n toluol-5% etilacetát eluens alkalmazásával tisztítjuk. így a- és β-epoxidok keverékét nyerjük (5,6 g, 48,7% termelés).

IR spektrum 1724 cm'¹;

MS spektrum (Cl) m/z 345 (100%, M⁺ +1);

¹H NMR spektrum (CDCI₃) 0,38 - 0,60 (4H, m, 2 x ciklopropil CH₂), 0,77 (fő csúcs) + 0,78 (3H, pr s, C₁₈-Me’s), 1,15 (s, C₁₉-Me), 2,97 (fő csúcs), + 3,04 (1H, pr s, C₄-H’s), 3,25 -2,22 (1H, m, OCH), 3,45 (1H, dd, C_17(i-H).

3,6 g (10,4 mmol) fenti epoxid 80 ml dimetil-szulfoxidban készült oldatához erős keverés közben 11 g (169 mmol) nátrium-azidot, majd 0,74 ml tömény kénsavat adagolunk. Ezután az elegyet 60°C hőmérsékleten 90 percen át keverjük. Ezt követően a reakcióelegyet szobahőmérsékletre hűtjük, majd hideg vízbe öntjük. A kivált szilárd anyagot leszűrjük, majd vízzel mossuk és megszárítjuk. így sárga szilárd terméket nyerünk. A nyersterméket gyorskromatográfia segítségével szilikagélen toluol-20% hexán eluens alkalmazásával tisztítjuk. így 1,56 g (42,7% termelés) 4-azido-17ft-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on terméket nyerünk.

O.p.: 103,5 - 105,5°C (vizes Me₂CO). IR spektrum 2116, 1674, 1592 cm’¹;

MS spektrum (Cl) m/z 370 (3%, M⁺ + 1), 342 (50%, M⁺ + 1 -N2), 284 (100%, M⁺ + 1N2-C₃H₆O);

¹H-NMR spektrum (CDCI₃) 0,38 - 0,60 (4H, m - 2 x ciklopropil (CH₂’s), 0,79 (3H, s, C₁₈-Me), 1,18 (s, C₁₉-Me), 3,02 (1H, dq, C₆-H), 3,25 - 3,33 (1H, m, OCH), 3,43 (1H, t, C_17a-H);

¹³C NMR spektrum (CDCI₃) 88,83, 128,46, 155,09, 193,22.

61.384/SM

2. példa

4-Amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on

1,32 g (3,57 mmol) 4-azido-'^-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on, 1,14 g (4,97 mmol) trifenil-foszfin, 25 ml tetrahidrofurán és 8 ml víz elegyében készült oldatát 15 órán át keverjük és visszafolyatás melletti forrás hőmérsékleten forraljuk. Ezt követően a reakcióelegyet lehűtjük, majd az oldószert elpárologtatjuk. A maradékot diklórmetánban oldjuk, majd oszlopkromatográfia segítségével szilikagélen gyorskromatográfia alkalmazásával toluol-10% etilacetát eluens felhasználásával tisztítjuk, így 0,53 g (43,1% termelés) 4-amino-17ft-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-ont nyerünk.

O.p.: 85-88°C.

IR spektrum 3446, 3363, 1672, 1584 cm'¹; MS spektrum (Cl) m/z 344 (100%, M⁺ +1);

¹H NMR spektrum (CDCI₃), 0,38 - 0,61 (4H, m, 2 x ciklopropil) (CH₂’s), 0,74 (s, C₁₈Me), 1,15 (s, C₁₉-Me), 3,25 - 3,33 (m, OCH), 3,44 (t + sz s, C₁₇₍₍-H+NH₂);

¹³C NMR spektrum (CDCI₃), 88,95, 132,87, 138,90, 194,33.

A termék a (III) képletü anyag.

3. példa

4-Amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4,6-dién-3-on

Az 1. példában előállított 2,4 g (5,92 mmol) vegyület, amely epoxid, 50 ml dimetil-szulfoxidban készült oldatát erős keverés közben 60°C hőmérsékletre melegítjük, majd keverés közben 6,2 g (95,5 mmol) nátrium-azidot és ezt követően 0,42 ml tömény kénsavat adagolunk hozzá. A hőmérséklet 100°C értékre emelkedik. Ezt követően az elegyet ezen a hőmérsékleten keverjük, majd szobahőmérsékletre hűtjük és 500 ml hideg vízbe öntjük. A kivált csapadékot leszűrjük, vízzel mossuk és

61.384/SM ···♦.

- 21 megszárítjuk. Ezt követően gyorskromatográfia segítségével szilikagélen toluol-5-20% etilacetát gradiens eluens alkalmazásával tisztítjuk, igy 1,7 g (84% termelés) 4-amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4,6-dién-3-on-t nyerünk.

IR spektrum 3454, 3358, 1670, 1640, 1592 cm’²;

MS spektrum (Cl) m/z 342 (70%, M⁺ +1), 284 (100%, M⁺ + 1 -C₃H₆O);

¹H NMR spektrum (CDCI₃) 0,38 - 0,64 (4H, m, 2 x ciklopropil CH₂’s), 0,84 (3H, s, C₁₈Me), 1,06 (3H, s, C₁₉-Me), 3,0 - 3,9 (sz s, NH₂), 3,25 - 3,35 (m, OCH), 3,48 (t, C_17nH), 5,95 (1H, dd) 6,30 (1H, dd);

¹³C NMR spektrum 88,66, 121,90, 132,15, 132,75, 135,69, 194,37.

A termék a (IV) képletű anyag.

4. példa

4-Amino-17fc-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on

9,70 g (29,5 mmol) 17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on, 7,0 g (62,4 mmol) kálium-terc-butoxid és 2,99 ml izopropil-nitrát reakcióját végezzük el az 1. példa szerinti eljárásnak megfelelően. így 17ft-(ciklopropil-oxi)-4-nitro-androszt-4-én-3-on terméket nyerünk.

O.p.: 137-138°C (metanol).

IR spektrum (CHCI₃), 1695, 1622 (m), 1535, 1373 cm'¹.

MS spektrum (Cl) 374 (100%, M+10), 316 (20%, M+1-c-C₃H₅-O);

¹H-NMR spektrum (CDCI₃) 0,38-0,61 (4H, m), 0,80 (3H, s, C₁₈-Me), 1,29 (s, C₁₉-Me), 3,25-3,33 (1H, m, ciklopropil-CHO), 3,44 (1H, t, C₁₇-H).

A vegyület az (V) képletű anyag.

A fenti nitrálás kiindulási anyagát az alábbi eljárással állítjuk elő:

19,36 g (58,9 mmol) 17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-5-én^-ol 1,9 liter acetonban készült oldatát -3°C hőmérsékletre hűtjük, majd 20 ml Jones reagenssel reagál61.384/SM %

• ·

- 22 tatjuk. Ezt követően a felesleg reagenst metanollal megbontjuk. A szilárd anyagot leszűrjük, majd a szürletet bepároljuk, és így zöld olajos anyagot nyerünk, amelyet gyorskromatográfia segítségével szilikagélen tisztítunk. Ezzel az eljárással 11,0 g (57% termelés) 17ft-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on terméket nyerünk.

A fenti oxidációs eljárásban kiindulási anyagként használt 17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-5-én-3B-ol anyagot az Angelastro és Blohm által benyújtott 4,966,897 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi bejelentésben leírt eljárással állíthatjuk elő.

A 4-nitro vegyület redukcióját kémiai eljárással az alábbi módon végezzük:

1,0 g (2,71 mmol) 17β-(άΜορΓορίΙ-οχί)-4-ηίΐΓθ-3ηύΓθ5ζί-4-έη-3-οη 10 ml ecetsavban készült oldatát 1,0 g cinkporral elegyítjük. A fenti nitro vegyületet az előzőekben leírtak szerint vagy más ismert eljárással állíthatjuk elő. A kapott reakcióelegyet

1,5 órán át szobahőmérsékleten erősen keverjük, majd a cinksót leszűrjük és etilacetáttal mossuk. Az egyesített szürletet és mosófolyadékot bepároljuk, és így sárga szilárd anyagot nyerünk. A szilárd anyagot etilacetátban újra oldjuk, majd az oldatot 3 x 150 ml 1m sósavval mossuk. Az egyesített savas extraktumot nátrium-hidroxiddal semlegesítjük (pH = 14), majd éterrel extraháljuk. Az egyesített szerves fázist ezt követően nátrium-szulfáton megszárítjuk, majd bepároljuk. így 0,59 g 4-amino-17-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on terméket nyerünk.

O.p.: 100-102°C (vizes metanol).

IR spektrum 3354, 1662, 1620, 1581 cm’¹;

MS spektrum (Cl) 344 (100%, M+1);

¹H NMR spektrum (0,37-0,61 (4H, m), 0,79 (3H, s, C₁₈-Me), 1,16 (s, C₁₉-Me), 3,25-

3,33 (m, cikloporpil-CHO), 3,44 (t, C₁₇-H).

A vegyület a (VI) képletű anyag.

61.384/SM

- 23 Más eljárás szerint a 4-nitro-vegyület redukcióját katalitikusán az alábbi módon végezzük:

4,36 g (11,6 mmol) 176-(ciklopropil-oxi)-4-nitro-androszt-4-én-3-on 125 ml száraz etanolban készült oldatát lindlar katalizátorral reagáltatjuk, majd 80 μΙ kinolint adunk hozzá. Ezt követően az elegyet 1 atm. hidrogén atmoszférában kb. 117 órán át keverjük. A reakcióelegyet ezután aktív szénre rétegezett celite szűrési segédanyagon leszűrjük, majd a szilárd anyagot száraz etanollal mossuk. Az egyesített szürletet és mosófolyadékot bepároljuk, és így 3,7 g barna folyadékot nyerünk. A kapott folyadékot diklórmetánban oldjuk, majd szilikagél oszlopon gyorskromatográfia segítségével hexán/etilacetát 20/80 eluens alkalmazásával tisztítjuk az elúció során 200 ml térfogatú frakciókat szedünk.

A terméket tartalmazó frakciókat egyesítjük, majd bepároljuk, és így világos sárga üvegszerű terméket nyerünk, amely állás közben kristályosodik (2,3 g). A kristályos anyagot metanolban oldjuk, majd gyapoton leszűrjük. Ezt követően az oldathoz vizet csepegtetünk, amíg a kristályosítás megkezdődik, majd ezt követően a kristályos elegyet éjszakán át (12-18 órán át) hűtőszekrényben tároljuk. Ezután a kristályos anyagot leszűrjük, majd hideg vizes metanollal mossuk és ezt követően ismét vízzel mossuk. Ezután a kristályos anyagot vákuumban megszárítjuk, és így halványsárga szilárd 1,97 g 4-amino-178-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on-t nyerünk.

IR (KB) spektrum Ί 3458, 3372, 1674, 1622 (m), 1585 cm'¹;

Elemanalízis a C22H33NO2 képlet alapján: számított: C, 76,92; H, 9,68; N, 4,08;

mért: C, 76,86; H, 10,04; N, 4,08.

¹H-NMR spektrum (CDCI₃) δ 0,38-0,61 (4H, m, 2 x CH₂), 0,79 (3H, s, C₁₈-Me), 1,15 (s, C₁₉-Me), 3,27 + 3,44 + ca. 3,4 (4H, ciklopropoxi-H, C₁₇-H, NH₂, M+t, sz);

61.384/SM • · · · · • · · • ·

- 24 ¹³C-NMR spektrum (CDCI₃) δ 88,96, 132,92, 138,74, 194,30;

UV (EtOH) spektrum λ 294 (ε 7570, Ig.s 3,879)

MS/CI spektrum 344 (100%, M+1), 286 (30%, M+1-C₃H₅OH).

5. példa

4-Amino-17β-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on-hidroklorid

4-amino-17ft-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on-t oldunk 20 ml etilacetátban, majd az oldathoz kb. 2 ml dioxános 4m sósavat adagolunk. Ezt követően az oldószert rotációs bepárlón elpárologtatjuk. A kapott szilárd anyagot etilacetáttal eldolgozzuk és így zselatinszerű anyagot nyerünk. Ezt követően az anyagot vízfürdőn melegítjük, amíg a szilárd anyag kiválik. Ezután az elegyet szobahőmérsékletre hűtjük, majd kb. egyenlő mennyiségű hexánnal hígítjuk. A szilárd anyagot leszűrjük és etilacetát:hexán 1:1 eleggyel mossuk. Ezt követően a szilárd anyagot megszárítjuk, így a címbeli vegyületet nyerjük.

IR (KBr) spektrum v 2675, 1662, 1641 cm’¹:

MS (Cl) spektrum 344 (100%, M+1), 286 (30%, M+1, ciklopropil-OH);

¹H-NMR spektrum (CDCI₃) 0,38-0,61 (4H, m, 2 x CH₂), 0,79 (3H, s, C₁₈-Me), 1,25 (s, C₁₉-Me), 3,24 (1H, m, ciklopropil-H), 3,42 (1H, t, C₁₇), 9,74 (2H, sz, NH.HCI); Elemanalízis a C₂₂H₃₄CINO₂ képlet alapján: számított: C, 69,54; H, 9,02; N, 3,69;

mért: C, 69,06; H, 8,89; N, 3,94.

6. példa

17B-(ciklopropil-amino)-4-(amino-pregn)-4-én-3-on

4,61 g (14,07 mmol) 17ft-(ciklopropil-amino)-4-én-3-on és 4,74 g (42,22 mmol, molekvivalens) kálium-terc-butoxid 60 ml terc-butanolban készült oldatát 1 órán át

61.384/SM

visszafolyatás melletti forrás hőmérsékletre melegítjük. Amikora forráshőmérsékletet elérjük, 1,43 ml (14,07 mmol, 1 molekvivalens) izopropil-nitrátot adunk az oldathoz.

óra elteltével az elegyet lassan szobahőmérsékletre hűtjük, majd a keverékhez 20 ml jégecetet és 20 ml diklórmetánt adagolunk. A reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, ezt követően az elegyet leszűrjük, majd a szűrőlepényt diklrómetánnal fehér színig mossuk. A szűrletet további 200 ml diklórmetánnal hígítjuk, majd a kapott oldatot 200 ml félig telített nátrium-klorid vizes oldattal mossuk. Ezután az elegyet egyenlő mennyiségű félig telített nátrium-klorid vizes oldattal és vizes telített nátrium-hidrogénkarbonáttal mossuk (200 ml). A szerves fázist magnézium-szulfáton megszárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. Ezt követően a maradékot szilikagélen kromatográfia segítségévei 19:1 diklórmetámmetanol eluens alkalmazásával tisztítjuk. Szilárd sárga habszerű 17ft-(ciklopropil-amino)-4-(nitro-androszt)-4-én-3-on terméket nyerünk.

¹H-NMR spektrum (300, MHz, CDCI₃) δ 0,75 (s, 3H, C₁₈-Me), 1,30 (s, 3H, C₁₈-Me) ppm.

¹³C-NMR spektrum (75 MHz, CDCI₃) ö 6,46, 7,20, 11,70, 17,64, 20,79, 23,54, 27,07, 29,62, 29,68, 30,84, 33,03, 33,06, 35,11, 37,54, 39,16, 42,40, 52,37, 53,75, 68,84, 146,66, 160,73, 187,47 ppm.

IR (KBr) spektrum 3435, 2944, 2870, 1695, 1533, 1371, 1013, 7566 cm'¹;

MS (El) spektrum 372 (M⁺).

A vegyület a (VII) képletű anyag.

670 mg (1,80 mmol) fenti eljárással előállított 17ft-(ciklopropil-amino)-4-(nitro-androszt)-4-én-3-on vegyületet 11 ml száraz etanolban oldunk, majd az oldathoz 5,95 Pd + 5,4% Pb Lindlar katalizátort (268 mg), majd 3 μΙ kinolint adagolunk. Ezt követően az oldatot erősen keverjük atmoszférikus nyomású hidrogéngáz atmoszférában. A keverést 18 órán át végezzük. Ezután a reakcióelegyet leszűrjük, majd a

61.384/SM

-26 szilárd anyagot 100 ml etanollal és 100 ml diklórmetánnal mossuk. Az oldószereket vákuumban elpárologtatjuk, majd a terméket kromatográfia segítségével szilikagélen 47:3 diklrómetámmetanol eluens alkalmazásával tisztítjuk. Sárga olajos anyagot nyerünk, amely sárgás szilárd anyaggá kristályosodik.

O.p.: 149-150°C (Et₂O);

IR (KBr) spektrum 3474, 3366, 2945, 1616, 1577, 1441, 1369, 1170, 1011 cm'¹;

MS (CI/CH₄) spektrum [M⁺ + H] 343;

¹H-NMR spektrum (33 MHz, CDCI₃) δ 0,73 (s, 3H, C₁₈-Me), 1,15 (s, 3H, C₁₉-Me),

2,66 (t, J=9,3Hz, 1H, C₁₇-H).

¹³C-NMR spektrum (75 Mhz, CDCI₃) δ 6,464, 7,185, 11,289, 20,803, 23,682, 24,757,

29,683, 29,753, 30,914, 32,860, 34,899, 35,307, 37,904, 42,453, 52,910, 54,549, 69,014, 132,938, 138,860, 194,343.

A vegyület a (Vili) képletű anyag.

Claims

1. Az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sói, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport és mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkil-csoport; X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport; a pontozott vonalak jelentése adott esetben jelenlévő kettőskötés.

2. Az 1. igénypont szerinti 4-3Γηίηο-17β-(οίΜορΓορΐΙ-οχί)-3Π0Γθ3Ζί-4-έη-3-οη.

3. Az 1. igénypont szerinti 4-amino-17ft-(ciklopropil-oxi)-androszta-4,6-dién-3-on.

4. Az 1. igénypont szerinti 4-3ΐτιίηο-17β-(οίΜορΓορίΙ-3Γηίηο)-3η0Γθ5ζί-4-όη-3-on.

5. Eljárás az (I) általános képletű vegyület előállítására, ahol az általános képletben mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport; X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport; és a pontozott vonalak jelentése adott esetben jelenlévő kettős kötés, azzal jellemezve, hogy a (II) általános képletű epoxid vegyületet, ahol az általános képletben R, X és a pontozott vonalak jelentése a fent megadott, nátrium-aziddal reagáltatjuk inért oldószerben katalitikus mennyiségű erős sav jelenlétében, és (a) amennyiben a 6,7-helyzet telített, az elegyet kb. 60°C hőmérsékletre melegítjük, és így a megfelelő 4-azido-4-ént állítjuk elő, majd a vegyületet trifenil-foszfinnal melegítjük vizes inért oldószerben, és így a 4-amino-vegyületet nyerjük; vagy (b) amennyiben a 6-helyzetben kettöskötés található, az elegyet 100°C hőmérsékletre melegítjük, és így 4,6-diént állítunk elő.

61.384/SM ί ί. \

6. Αζ 5. igénypont szerinti eljárás 4-amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on előállítására, azzal jellemezve, hogy a 4,5-epoxi-17B-(ciklopropil-oxi)-androszt-3-ont nátrium-aziddal 60°C hőmérsékleten reagáltatunk, majd a terméket trifenil-foszfinnal és vízzel reagáltatjuk.

7. Az 5. igénypont szerinti eljárás 4-amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszta-4,6-dién-3-on előállítására, azzal jellemezve, hogy a 4,5-epoxi-17ft-(ciklopropil-oxi)-androszt-3-on vegyületet nátrium-aziddal 100°C hőmérsékleten reagáltatjuk.

8. Dózisegység formában C₁₇.₂₀ ϋθζ és 5a-reduktáz inhibiáló aktivitást tartalmazó gyógyszerkészítmény, azzal jellemezve, hogy gyógyszerészetileg elfogadható hordozóanyagot, továbbá az (I) általános képletű anyagot vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóját tartalmazza, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport, mindenegyes X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kívánt esetben kettőskötés jelenlétét jelzik.

9. A 8. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amelyben az aktív vegyület 4-amino-17ft-(ciklopropil-oxi)-androszt-4-én-3-on.

10. A 8. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amelyben az aktív vegyület 4-amino-17B-(ciklopropil-oxi)-androszta-4,6-dién-3-on.

11. A 8. igénypont szerinti gyógyszerkészítmény, amelyben az aktív vegyület 4-amino-17ft-(ciklopropil-amino)-androszt-4-én-3-on.

12. Eljárás C_172o Ház enzim inhibiálására, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatásos inhibiáló mennyiségét adagoljuk, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport, mindenegyes X

61.384/SM

4 ' A ·· · · «

- 29 jelentése egymástól függetlenül, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kettőskötés kívánt esetbeni jelenlétét jelzik.

13. A 12. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-3ΐΤ)ίηο-17β-(οίΜορΓοροχί)-3η0Γθ3Ζί-4-έη-3-οηΡ

14. A 12. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οίΗορΓοροχί)-3ηόΓθ5ζί3-4,6-€ΐίέη-3-οηΙ adagolunk.

15. A 12. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οί^ορΓορίΙ-3Γηίηο)-3η0Γθ5ζί-4-έη-3-οηί adagolunk.

16. Eljárás 5a-reduktáz enzim inhibiálására, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatásos inhibiáló mennyiségét adagoljuk, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport, mindenegyes X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kívánt esetben kettöskötés jelenlétét jelzik.

17. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(άΗορΓοροχΐ)-3η0Γθ5ζί-4-όη-3-οηί adagolunk.

18. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(ciklopropoxi)-androszta-4,6-dién-3-ont adagolunk.

19. A 16. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(ciklopropil-amino)-androszt-4-én-3-ont adagolunk.

20. Eljárás androgén-függő betegségek kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatásos inhibiáló mennyiségét adagoljuk, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport, minden61.384/SM * *· * ·

-30egyes X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kívánt esetben kettőskötés jelenlétét jelzik.

21. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οίΗορΓοροχί)-3η0Γθ5ζί-4-έη-3-οηί adagolunk.

22. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οίΗορΓοροχί)-3ηόΓθ5ζί3-4,6-όίέη-3-οηί adagolunk.

23. A 20. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οΐΜορΓορΐΙ-3Γηΐηο)-3ηόΓθ5ζί-4-έη-3-οηί adagolunk.

24. Eljárás ösztrogén-indukált vagy ösztrogén által stimulált betegségek kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatásos inhibiáló menynyiségét adagoljuk, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport, mindenegyes X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kívánt esetben kettőskötés jelenlétét jelzik.

25. A 24. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οίΜορΓοροχί)-3η0Γθ3ζί-4-έη-3-οηΐ adagolunk.

26. A 24. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οίΠορΓοροχί)-3η6Γθ3ζί3-4,6-6ίέη-3-οηΙ adagolunk.

27. A 24. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-178-(ciklopropil-amino)-androszt-4-én-3-ont adagolunk.

28. Eljárás DHT-mediált betegség kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatásos inhibiáló mennyiségét adagoljuk, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól

61.384/SM függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szématomszámú alkilcsoport, mindenegyes X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kívánt esetben kettöskötés jelenlétét jelzik.

29. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οΐΗορΓοροχί)-3ηόΓθ5ζί-4-όη-3-οηί adagolunk.

30. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(ciklopropoxi)-androszta-4,6-dién-3-ont adagolunk.

31. A 28. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(οίΗορΓορίΙ-3Γηίηο)-3η0Γθ5ζί-4-έη-3-οηΙ adagolunk.

32. Eljárás jóindulatú prosztata hyperplasia kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatásos inhibiáló mennyiségét adagoljuk, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport, mindenegyes X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kívánt esetben kettőskötés jelenlétét jelzik.

33. A 32. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-mino-17β-(οίΗορΓοροχί)-3η0Γθ5ζί-4-έη-3-οηΙ adagolunk.

34. A 32. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-mino-17β-(ciklopΓopoxi)-androszta-4,6-dién-3-ont adagolunk.

35. A 32. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-amino-17β-(ciklopropil-amino)-androszt-4-én-3-ont adagolunk.

36. Eljárás mellrák kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatásos inhibiáló mennyiségét adagoljuk, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól függet61.384/SM • 4

-32 lenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport, mindenegyes X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kívánt esetben kettöskötés jelenlétét jelzik.

37. A 36. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-mino-17β-(ciklopropoxi)-androszt-4-én-3-ont adagolunk.

38. A 36. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-mino-17β-(ciklopropil-amino)-androszt-4-én-3-ont adagolunk.

39. Eljárás prosztatarák kezelésére, azzal jellemezve, hogy az ilyen kezelést igénylő betegnek az (I) általános képletű vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatásos inhibiáló mennyiségét adagoljuk, ahol az általános képletben A jelentése oxigénatom vagy NH-csoport, mindenegyes R jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy 1-4 szénatomszámú alkilcsoport, mindenegyes X jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom vagy metilcsoport és a pontozott vonalak kívánt esetben kettőskötés jelenlétét jelzik.

40. A 39. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-mino-17B-(ciklopropoxi)-androszt-4-én-3-ont adagolunk.

41. A 39. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a betegnek 4-mino-17β-(οίΠορΓορίΙ-3Γηίηο)-3η0Γθ5ζί-4-έη-3-οηί adagolunk.