JP2015506933A - Ｄｈｅａまたは硫酸ｄｈｅａを有し、かつ有効成分の放出調節薬を任意に有し、女性における卵巣予備能を増やし、かつ閉経期に関連する症状を緩和する膣リング - Google Patents

Abstract

デヒドロエピアンドロステロン、硫酸デヒドロエピアンドロステロン、またはその薬剤的に許容される塩を有効成分として有し、さらに、ポリビニルピロリドンＫ−３０を、有効成分の放出調節因子として任意に有し、有効成分の量は処方の総重量に対する１重量％〜３２重量％の範囲にあり、調節因子は、ポリビニルピロリドンＫ−３０、ラクトース、微晶質セルロース、およびラウリル硫酸ナトリウムから選択される膣リング。本発明の膣リングは、女性において卵巣予備能を増加させること、補助生殖医療における薬剤として用いること、および、閉経後女性における外陰部萎縮症および膣委縮症ならびに性機能障害の症状などの閉経に関連する症状を緩和することに用いることができる。

Description

発明の詳細な説明

（出願の分野）
本発明は、女性における減少した卵巣予備能を増加させることと、女性における外陰部萎縮症および膣萎縮症ならびに性機能障害などの閉経期に関する症状を緩和することとに有用であり、活性薬としてデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）または硫酸デヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ−Ｓ）を含み、さらに、活性薬の放出を調節する薬剤的に許容可能な賦形剤を任意に含む、膣リングに関する。

技術水準
欧州諸国における統計によれば、有効な避妊が利用可能になった頃から、女性は、１９８０年初期の平均２３〜２５歳に比べて、最初の子供を平均２９〜３０歳で持つほどに、出産を遅らせてきた（Alviggi et al,, 2009）。さらには女性の生殖能力は平均３０歳で減少し始め、年々減少する（Broekmans et al., 2009）。

最初の妊娠を自発的に遅らせることと、年齢と共に自然な繁殖力が低下することとが組み合わさることによって、補助生殖医療（ＡＲＴ）を求める３５歳を超える女性の数が定常的に増加する結果を生んでいる。これらの処置は高度に複雑であり、また非常に効果ではあるが必ずしも肯定的な結果をもたらすとは限らない。これらの処置に不利に影響する最も重要な要素の一つは、患者の年齢が高いことであり、そのような訳で、これらの処置における改善はこのグループの女性における既存の条件を調節することを狙いにしている。

不妊症の女性のための通常の治療は、卵巣を刺激しかつ卵胞発達および卵母細胞放出を誘導することを狙っている。この治療は、ゴナドトロピン、およびゴナドトロピン放出ホルモン（ＧｎＲＨ）、ヒト閉経期ゴナドトロピン（ＨＭＧ）、ヒト絨毛性ゴナドトロピンおよび卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）を用いた薬理学的処置を含む。さらに、ゴナドトロピンの活性を増加させるために、エストロゲンおよび成長ホルモン（ＧＨ）の双方を用いた事前処置を行うことができる。しかし卵巣刺激の臨床的効果は限られており、効果は完全には満足できるものではない。これらの処置によって、２０％〜６０％の女性が妊娠に成功し、そのうちの７０％〜８５％は複雑でない妊娠であり、健康な赤子を産む結果が得られる。良好な結果が得られない患者は、ゴナドトロピンを用いた処置を繰り返すことができるが、最大で７周期の期間までに限られる。

体外受精（ＩＶＦ）は補助生殖医療において最も広く用いられる治療の１つである。この治療は女性の卵子を男性の精子に接触させることを含む。第１の工程は卵巣刺激であり、それから穿刺を通じて卵母細胞を取得して、実験室においてインビトロ受精を行い、最終的に、結果として得た１つ以上の胚を患者の子宮に戻す。

ゴナドトロピンを用いた卵巣の刺激処置は、ＩＶＦ法の初期のかつ主要な部分としても用いられる。この処置は、卵胞液の吸引によって、麻酔下で、卵巣卵胞性成長を刺激し、取得用の卵母細胞の放出を達成するように努める。

年齢が高くなると卵巣がＦＳＨに対してより非感受的になるので、３５歳以上の女性においてゴナドトロピン刺激に対する卵巣応答が貧弱なることはより一般的である（Alviggi et al., 2009）。一転して、胚移植および体外受精後の誕生成功の可能性もまた減少する。これに対し、ドナー卵子を用いる患者における成果は年齢が高くても依然として一定であることが観察されており、このことは、高年齢の女性における成果が貧弱であることは子宮の要因よりも卵母細胞に関連することを実証している。

ＦＳＨに対する卵巣応答を計画するための最も重要なパラメータが暦年であると考えられているにも関わらず、生殖老齢化率は各人によって顕著に異なる。環境的要因および遺伝的要因の双方が卵子の生物学的老化に寄与し、そのため暦年と生物学的年齢とは必ずしも等価ではない。高年齢の女性および早発性卵巣老化を有する女性の双方は、少数の卵母細胞を生産し、それらのうちの少数が生存可能でありかつ正常である（te Velde et al., 2002, Broekmans et al., 2009）ＩＶＦ処置では卵巣がゴナドトロピンに最大限刺激されるにも関わらず、低品質の卵母細胞が少数生産されることは、ＩＶＦを成功させる際の最大の問題の１つである。

女性における生殖性老化は閉経期への移行を通じて生まれる前から始まり、非成長性卵胞の予備の卵巣における減少であり（ＮＧＦ）この過程において起こる主要な機構。卵胞形成は妊娠期間の１２週目から始まり、２１週目辺りで終わる。４〜５か月目の胎生期において、顆粒膜細胞に取り囲まれた約６百万〜７百万個の卵母細胞が存在し、原始卵胞の予備を形成する。胎生期の残り半分においてアポトーシスによって原始卵胞の大多数が消失し、誕生時点では女性はたった百万〜２百万個の卵胞を有するのみである（Markstrom et al., 2002）。誕生後もゆっくりとしたペースで卵胞の消失は続き、初潮時には約４０万個が残る（te Velde et al., 2002）。

初期モデルは、通常は３８歳で起こる、卵胞の数が臨界レベルの２５０００個の卵母細胞を下回る時に、ＮＧＦ減衰率が減衰の加速時に指数関数的かつ二相性のパターンをなぞり、最終的には閉経時にちょうど１０００個の卵母細胞に至ることを示した（Faddy et al., 1992, Faddy et al., 1996）。その後、新たな実験およびお解析技術を用いることによって、ＮＧＦの低減は、急激に減衰することはないが、老化に関連する卵胞消失率が一定に上昇する形で、生涯を通じて緩やかであることが示された（Hansen et al., 2008）。この加速によって、卵胞消失を老化に関連してより速める結果となる。

より最近、ヒト卵巣における受胎から閉経までのＮＧＦ数に関連するモデルが提示されている（Wallace et al., 2010）。この解析から、３０歳の女性の９５％は生まれる前に有していたＮＧＦ最大数の１２％のみを有しており、４０歳ではＮＧＦの３％のみを有すると推定される。彼らは、成熟段階へのＮＧＦの補充は、誕生から１４歳までは増加し、それから閉経期まで減少することも発見した。

ＮＧＦ母数の減少は、残りの卵母細胞の卵巣品質が低下することに伴う継続的かつ生理的な過程である（te Velde et al., 2002）。ＮＧＦのストックは卵巣予備能を表すと考えられる（Hansen et al., 2008）。高年齢の女性の初期胚における異数性率を増加させる姉妹染色体分裂の異常に対応する減収分裂の不可能性が増加することによって、卵巣品質がより低下する（Battaglia et al., 1996 Kuliev et al., 2005, Pellestor et al., 2005, Hunt et al., 2008）。その結果、３５歳以降に自然流産および妊娠時の染色体突然変異の増加が観察される（Munne et al., 1995, Munne et al., 2005）。自然な不妊症は若い女性においても早まって起こり得る。低卵巣応答への変化は、「低減卵巣予備能」（ＤＯＲ）または「低減卵巣機能」（ＤＯＦ）として知られる。

生まれる前から原始卵胞は常に動員されており、初期の成長卵胞群に加わる。初期動員のこの段階において、卵胞は、初期減数分裂前期において停止される。思春期の後、限られた数の成長卵胞が、それぞれの新たな周期に動員され（周期動員）、そして最終選別の後、単一卵胞の優性および排卵が起こる（Gougeon 1996, McGee et al., 2000）。人生のある時点において、大半の原始卵胞は休止状態を維持し、排卵前期状態に達しないものは、卵胞発達の初期段階において、成熟に達せずかつ排卵に用いられること無く閉鎖の運命にある。０．１％の卵母細胞のみが、排卵誘発性の黄体形成ホルモン（ＬＨ）の増加刺激によって、受精に利用可能な一倍体配偶子を形成する減数分裂を再開する。

女性不妊症と称される状態は、１２か月に亘る期間、妊娠を試みそして失敗する女性を含む（Evers, 2002）。これらの女性の多くは３５歳を超えており、自然不妊症を患っている。各患者の卵巣生物学的年齢を推定し、これらの患者の個人的な注意、情報、および適切な管理を改善する手助けに有用な内分泌性マーカーおよび超音波マーカーが存在する。マーカーには、ＦＳＨレベル、胞状卵胞数（ＡＦＣ）、インヒビン−Ｂ、および抗ミュラー管ホルモン（ＡＭＨ）が含まれる。

増加したベースラインＦＳＨレベルは、補助生殖医療が利用された時に低い妊娠率を招く卵母細胞の減少によって生じ得る、卵巣刺激に対する貧弱な応答に関連することが示されている（Abdalla et al., 2004, Alviggi et al., 2009）。卵母細胞刺激に対する貧弱な応答は、卵胞サイズが２〜５ｍｍの範囲にある５個以下の胞状卵胞数（ＡＦＣ）として規定される（Klinkert et al., 2005）
ＡＭＨは前胞状卵胞および小胞状卵胞の顆粒膜細胞によって産生される二量体糖蛋白質である。産生は卵胞が始原的段階から第一期に分化する時に起こり、卵胞が、２〜６ｍｍの直径を有する中期胞状段階に到達するまで続く。ＡＭＨ産生は、ＦＳＨ依存卵胞成長段階である優性段階に卵胞がいったん達すると停止する（Ueno et al., 1989, Fanchin et al., 2003, Broekmans et al., 2009）。加えて、卵胞が閉鎖段階に達した時にＡＭＨは消失する（Visser et al., 2006）。

ＡＭＨは原始卵胞のストックからの初期卵胞動員段階における１つのまたは主要な調節因子である（Durlinger et al., 2002）。卵胞はＦＳＨに対して最も感受性があり、ＡＭＨがない場合に卵胞成長の初期段階に進むことが示されている（Durlinger et al., 1999, Durlinger et al., 2001）。小さく成長した卵胞からいったんＡＭＨが生成されると、初期卵胞動員を抑制するためまたは前胞状卵胞の成長および選別ならびにＦＨＳ依存性小胞状卵胞選別を抑制するために、それは卵胞形成における少なくとも２つの作用部位を有する（van Houten, 2010）。

当初、血清ＡＭＨレベルが検知された時、このホルモンは男性および女性生殖腺における腫瘍状態を検知する良好な指標として仮定された（Hudson et al., 1990, Lee et al., 1996）。その後、ＡＭＨは、卵母細胞老化を評価する有望な候補として想定された（Visser et al., 2006にレビューされる）。この過程の定量的な側面は、原始卵胞のストックの減少に反映され、このストックを直接測定することは不可能であるため、成長中の卵胞の数は原始卵胞の備蓄のサイズに比例する（Scheffer et al., 2003）ことから、成長中の卵胞の数として間接的に推定することができる（Scheffer et al., 1999）。この理由のため、成長中の卵胞から主に分泌されるＡＭＨなどの因子は、原始卵胞のストックサイズを反映する。

ＡＭＨ血清レベルは年齢が増加するにつれて徐々に減少するが、個々の成長中の卵胞におけるＡＭＨ発現はマウスでは変化しないことが観察されている。血清ＡＭＨ減少は、成長中の卵胞の数の減少に関連し、かつ主には原子卵胞減衰に関する（Kevenaar ME et al., 2006）。同様に、大人の女性では、ＡＭＨ血清レベルは年齢が増加すると閉経期には検知不可なレベルにまで減少する（Vet A et al.,, 2002, van Rooij et al.,, 2005）。ＡＭＨレベルは生理周期中に変化せず、かつ、周期間において顕著には変動しないことが示されており（Fanchin et al., 2005, Hehenkamp et al., 2006）、このことは、ＡＭＨがゴナドトロピンによって制御されていないことを示す（van Houten ELAF et al., 2010）。

ＡＭＨレベルは胞状卵胞数に密接に関連し、ＦＳＨおよび周期の３日目におけるインヒビンＢなどの卵巣老化の他のマーカーにもまた関連する（Vet A et al., 2002）。しかし、ＡＭＨレベルは他のマーカーのレベルが減少する前に減少することが観察されており、その結果、閉経期移行の開始を予測する最適な指標である（van Rooij et al., 2004）。ＡＭＨは経年年齢よりも生殖年齢を予測するためのよりよいマーカーであることもまた観察された（van et al., Disseldorp 2008）。

卵巣予備能を評価することに利用可能なマーカーのうち、ＡＭＨレベルは、卵巣の状態を決定するための信頼できる指標を構成し、ＡＲＴ処置に対する有用なパラメータである。ＡＭＨレベルは排卵誘発処置の前では胞状卵胞数（ＡＦＣ）に密接に関連し、処置後には回収された卵母細胞の数に密接に関連することが、実証されている（van Houten ELAF et al., 2010）。ＡＭＨレベルは、刺激に対して貧弱に応答する患者において、正常に応答する患者よりも顕著に低い（Seifer et al., 2002, van Rooij et al., 2002）。ＡＭＨが卵巣予備能を予測する良好な指標であるとはいえ、このホルモンによる妊娠の予測結果はＡＦＣと同様に低い（Broer et al., 2009）。これらの結果は、ＡＭＨが定量的卵巣予備能の良好な指標であるが、卵巣品質を評価するものではないことを示している。それでもなお、ＡＭＨレベルと、回収される卵母細胞の数との間には、密接な関係がある。他の著者は、高レベルＡＭＨと、ＩＶＦおよび卵細胞質内精子注入法（ＩＣＳＩ）を含むＡＲＴ処置による化学的妊娠および臨床的妊娠の良好な結果との間に直接の関係があることを見出している（Dehghani-Firouzabadi et al., 2008）。これらの研究では、応答が良好な者は、応答が貧しい者よりも顕著に高いＡＭＨレベルを示した。自然不妊症の女性では、ＩＶＦ処置において回収される少ない数の卵母細胞が、当該処置の成功に対する主要な限界の一つであり、それゆえ、この数を＜４（応答が貧しい者）から≧４（応答が良好な者）に増加させることは、ＩＶＦにおける妊娠の確率を実質的に増加させる優れた結果である。

この背景に基づき、補助生殖医療を受ける女性におけるＡＭＨレベルを増加させることは不可避である。

デヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）および硫酸ＤＨＥＡ（ＤＨＥＡ−Ｓ）は、副腎によってその大部分が分泌されるステロイドであり、アンドロステネジオンまたはアンドロステネジオールに変換され、それから強力なアンドロゲンおよびエストロゲンに末梢組織において変換される（Adams 1985, Labrie 1991）。血清ＤＨＥＡおよびＤＨＥＡ−Ｓレベルは女性における主要なアンドロゲン源である。いくつかの報告によって、高年齢の女性では３０歳からＤＨＥＡおよびＤＨＥＡ−Ｓの血清レベルが徐々に減少することが示されている（Orentreich et al., 1984, Labrie et al., 1997）。５０〜６０歳の女性では、血清ＤＨＥＡは２０〜３０歳で記録される最大値よりも７０％減少する（Labrie et al., 1997）。循環時、ＤＨＥＡ−Ｓは末梢組織および副腎組織においてスルホヒドラーゼによってＤＨＥＡに代謝され得る。女性において、ＤＨＥＡ−Ｓの１日産生量の６４％がＤＨＥＡに変換されるが、しかしＤＨＥＡの１３％のみがスルファターゼヒドロキシステロイドによってＤＨＥＡ−Ｓに代謝され戻されることが報告されている（Kroboth et al., 1999にレビュー）。ＤＨＥＡおよびＤＨＥＡ−Ｓは、閉経前の女性において７５％の活性エストロゲンの前駆物質として用いられ、閉経期の女性では１００％に用いられる（Labrie et al., 1997）。

膣座薬としてＤＨＥＡをラットに投与した後、エストロゲンおよび／またはアンドロゲン活性を有する活性性ストロイドへの局所的変換を示す膣レベルにおける形態的変化が起こることが、観察されている（Labrie, 1991）。

ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓの投与によって、卵母細胞の生産数、質、胚の数および質が改善され、自然妊娠率、ＩＶＦ妊娠率、累積妊娠率、受胎時間が改善され、かつ、自然流産が低減することを示すいくつかの科学的報告（Casson et al., 2000, Barad et al 2005, Barad et al., 2006, Barad et al., 2007, Sonmezer et al., 2009, Gleicher et al., 2009, Mamas et al., 2009, Gleicher et al., 2010a, Gleicher et al., 2010b, Gleicher et al., 2010c, Wiser et al., 2010）および特許書類（ＵＳ２００６００８９３３９、ＵＳ２００６０８９３０８、ＵＳ２００８２６９１８０、ＵＳ２０１００４８５２５、ＵＳ２０１０／１１３４０７、２０１１／０２０７７０８、およびＵＳ７６１５５４４）がある。

卵巣予備能を増加させるために記述された処置は、１〜４か月またはそれ以上の期間における毎日５０〜１００ｍｇ用量のＤＨＥＡの経口投与を含む。特許出願ＵＳ２０１００４８５２５およびＵＳ２０１０１１３４０７では、これらの用量のＤＨＥＡが、ＡＭＨ血清レベルを測定することによって決定される卵巣予備能を改善するために少なくとも１か月、経口的に用いられる。これらの文書には、少なくとも１か月、より好ましくは少なくとも４か月のＤＨＥＡ投与による卵子および胚の産生量によって測定される排卵誘発に対する女性の応答の評価が記述されている。卵母細胞および胚の質および量の改善を含む累積胚数の改善、および正倍数体胚の改善率もまた評価された。処置の２か月後では効果は肯定的であるが、１６週以上の期間続けると、より一層改善される。加えて、指定された処置の用量および期間を用いた場合の受精卵母細胞の数の増加、３日目における胚の数の増加、正倍数体卵母細胞の数の増加、および移植された胚の増加が、卵巣予備能が低下した女性において観察された。卵巣予備能が低下した女性において特に、ＤＨＥＡレベルの増加、自然妊娠の増加、妊娠率および累積妊娠の増加もまたあった。

ＤＨＥＡ投与の結果、３０〜１２０日間毎日ＤＨＥＡを摂取する女性における基礎ＡＭＨレベルが増加することが観察されており（ＵＳ２０１０００４８５２５、ＵＳ２０１００１１３４０７、ＵＳ２０１１０２０７７０８）、かつ、ＡＭＨは卵巣予備能に対するより特異的なマーカーとして考えられているため、卵巣機能におけるＤＨＥＡの影響を評価するために用いられている。ＡＭＨ測定はＤＨＥＡの投与前後に行われ、血清ＡＭＨレベルは、ＡＭＨの変動に応じた妊娠成功と同様に顕著に改善したことが見出された（Gleicher et al., 2010a）。

１９０人の女性に対して行われた研究（ＵＳ２０１１０２０７７０８、ＵＳ２０１００４８５２５、ＵＳ２０１００１１３４０７に記述）では、そのうちの平均年齢が４１．６歳の８９人に対して、１日に１回の７５ｍｇ用量のＤＨＥＡまたは１日に３回の各２５ｍｇ用量のＤＨＥＡを、ＩＶＦ処置開始前の最大４か月間において用いた。対照群に属する他の１０１名の女性は平均年齢４０歳であり、ＤＨＥＡを用いない不妊治療を受けた。第１の成果は臨床的妊娠であった。ＨＭＧおよびＦＳＨを用いて彼女らに対して卵巣刺激を行った。妊娠に対する陽性試験を得るまでまたは患者が治療を完了するまで、研究群に属する女性にＤＨＥＡが投与された。結果は、２８％の臨床的妊娠であった研究群において、１１％であった対照群に比べて顕著に高かった。ＤＨＥＡで処置すると臨床的妊娠を少なくとも１５０％増加させ、妊娠の累積時間もまた減少させた。さらにＤＨＥＡで処置した群では自然流産が少なく、対照群の３６％に比べてたった２０％であった。

１つがＵＳにもう１つがカナダにある２つの独立した受胎能センターにおける卵巣予備能が低減した不妊女性における自然流産率に対するＤＨＥＡ投与の効果を示す臨床研究の結果もまた、ＵＳ特許出願ＵＳ２０１０００４８５２５、ＵＳ２０１００１１３４０７、およびＵＳ２０１１０２０７７０８に記述されている。結果は、ＩＶＦ妊娠に対して米国において報告された２００４年における自然流産率と比較された。自然流産の減少は両センターにおいて類似しており、それぞれ１５．０％および１５．２％であった。相違は全ての年齢群において観察されたが、３５歳を超える女性において最も顕著であった。これらの結果はGleicher et al., 2009に記述されている。

今日まで、低減した卵巣予備能を増加させるために記述される全ての処置は、長期間（１〜４か月またはそれ以上）に亘る１日に１〜３回の摂取を可能とする日々の投与を意味する経口ＤＨＥＡを用いている。さらに、ＤＨＥＡは肝臓において顕著に分解されるので、経口ＤＨＥＡ投与におけるさらに別の不便さが知られており、しかし、皮膚および粘膜への投与後に全身に良く吸収されることが知られており、治療的に有効な用量のＤＨＥＡは経粘膜的に投与されることができることが見出されている（ＥＳ２２２７５２）。この種の投与では、肝臓の初回通過効果および注射による投与の不快感が避けられる。

膣経路には副作用が少なくかつ標的部位における活性化合物の濃度を改善できるという利点が有り得ることが知られている。この断定の理論的根拠は、膣を通じて投与した薬剤は骨盤器官を好んで狙うという「初回子宮通過」という概念にある。この流動方向性を説明する機構は、単純な浸透による受動的な吸収、子宮蠕動、および、膣の三分の二周辺にある、子宮峡部内に排出する静脈性血管のネットワーク、および、子宮および付加物の周囲における微小循環の特別な分布を、基本的に構成する。後者の機構は「血管性向流の」と呼ばれ、密接な接触における大表面および反対流のために、静脈から動脈への溶質の直接通過を構成する。

当業界において、外陰部萎縮症および膣萎縮症、閉経後の女性における性機能障害の治療のための、また閉経器の他の症状を緩和するための、ＤＨＥＡを有する膣胚珠または膣座薬の使用が開示されている。発行された国際特許出願ＷＯ２００９０２１３２３ならびにLabrie et al., 2008およびLabrie et al., 2009による報告は、本明細書に参照として組み込まれる。これらの文書には、上述した障害の治療のために１〜１２週の範囲の期間に日々投与される、膣胚珠における３．２５ｇ（０．２５％）、６．５ｍｇ（０．５％）、１３ｍｇ（１．０％）、および２３．４ｍｇ（１．８％）用量のＤＨＥＡの使用が記述されている。

さらに、エストロゲンを有する膣調製物によって、局所的のみならず全身性濃度が増加し、エストロゲンに特異的な副作用の危険性を増加させることが見出されている（Beral V 2003, Heiss et al., 2008）。ＤＨＥＡ座薬を日々用いた場合、細胞質エストロゲンレベルに変化は無かった（Labrie et al., 2008）が、血清レベルは正常な閉経後女性において見出される値内に維持され、それゆえ、膣内投与または全身性投与されるいくつかのエストロゲン製剤の使用によって見出される乳がんの危険性が増加することを回避できる。

ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓを投与するための異なる薬剤形態と、様々な病気の治療または予防におけるこれらの使用との記述を、当業界に見出すことができる。特許文書ＥＳ２２２７５２３、ＥＰ１３５０５４１、ＵＳ５９４８４３４、ＵＳ５９５５４５５、ＵＳ２００９０５４３８３、およびＥＳ２０９８１９３は、本明細書に参照によって組み込まれる。これらの特許には、経口投与のための柔らかいカプセル；経皮性投与するためのクリーム、ジェル、軟膏、ローション、およびパッチ；膣内投与のための膣胚珠または膣座薬が記述されている。ＤＨＥＡを有する膣リングの記述は無く、特許文書ＵＳ２００９０５４３８３にのみ様々な投与可能性間におけるリングが示唆されているが、特定の膣リングについての記述はない。

製薬業界は、異なる種類の有効成分を供給するための膣リングの製造に取り組んでいるが、それらのうちのホルモンを有するいくつかのみが、ヒトに使用される治療的武器の一部となっている。これは、有効性および安全性が、リング形態の少数の製品において実証されるのみだからであり、これによって、異なる国の保健当局によってリングが認可に値するものであるとされている。これらのリングは、避妊単独療法（Ｐｒｏｇｅｒｉｎｇ（登録商標）、プロゲステロン）、混合治療（ＮｕｖａＲｉｎｇ（登録商標）、エトノゲストレルおよびエチニルエストラジオール）、閉経期症状治療のためのエストラジオールを用いたホルモン置換療法（Ｅｓｔｒｉｎｇ（登録商標）、Ｆｅｍｒｉｎｇ（登録商標））として、さらに、不妊の場合に卵子提供受領者のために外部からのプロゲステロン供給を必要とする女性における黄体サプリメント、体外受精、胚移植、および他の補助生殖医療技術（Ｆｅｒｔｉｒｉｎｇ（登録商標））として、用いられる。

ＵＳ６９５１６５４では、活性薬がエラストマーシステムに均一に分散され、指数関数的放出低減、一次を示し、薬剤の初期高放出およびそれに続く薬剤の遅放出を特徴とする、均一またはマトリックスデザインによって形成されるリングから薬剤が放出されることが言及され、また、薬剤が実質的に均一または制御（ゼロ次）された放出率で放出されることはできないことが言及されている。ＵＳ６９５１６５４には、最初の２４時間は実質的に一次放出であり、その後の少なくとも３日ではゼロ次放出である膣内ドラッグデリバリーシステムが記述されている。抗菌薬と、活性薬の放出を増強する、とりわけポリビニルピロリドン、セルロースエーテル、ポリアクリル酸、カルボメル、アルギニン酸、ラクトースなどの糖、シクロデキストリンなどの薬とを有するリングが言及されている。２５日目までの累積薬剤放出を示す結果の中で、同じ用量では、５０ｍｇのメトロニダゾール（ＭＥＴ）、５％および１０％ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）を有するリングが、ＰＶＰを有しないリングよりも２５日期間に亘ってより多くの量の薬剤を放出したことが観察されている（ＵＳ６９５１６５４、図３）。最初の３日間、ＰＶＰおよび５０ｍｇのメトロニダゾール（ＭＥＴ）を有する膣リングからの放出は、より高い用量の活性薬（１００ｍｇのＭＥＴ）を有するがＰＶＰを有しないリングからの放出に比べてわずかに高い。６日目からＰＶＰリングからの放出が減少し始め、薬剤（１００ｍｇのＭＥＴ）を有しないシステムの放出よりも減少し始める。１３日目から、ＰＶＰを有するリングからの累積放出は、２倍の用量を有するがＰＶＰを有しないリングからの放出よりもわずかに低い。ＵＳ６９５１６５４には、ＰＶＰまたはラクトースをリングに加えると消毒薬の放出がより増加するが、この増加は一定期間に亘って持続されることが無いこと、また、ＰＶＰを有しない、有効成分の最大用量の放出を一定時間に亘って超えることが無いことも、観察されている。

（発明の詳細な説明）
ＤＨＥＡ治療効果に特徴的な長期間の治療を可能にするために、初回通過肝代謝の影響を低減または無効化することを可能にする投与経路を通じて、一月に一度、二か月また三ヶ月に一度にのみ投与され、ＤＨＥＡの使用によって緩和される病気または障害の予防または治療に用いられるＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓを届ける持続放出処方の必要性が存在する。

ＤＨＥＡ−Ｓは体内で非硫酸化形態に変換されるため、処方はＤＨＥＡまたはその硫酸物形態であるＤＨＥＡ−Ｓを有し得る。

本出願に記述される処方は、ＤＨＥＡまたはその硫酸化形態であるＤＨＥＡ−Ｓを有する持続放出膣リングに関する。

より好ましくは、本出願は、ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓおよび有効成分放出調節因子を有する持続放出膣リングに関する。

より一層好ましい実施形態では、本発明は、ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓ、および、ＰＶＰ Ｋ−３０、ラクトース、微晶質セルロース、またはラウリル硫酸ナトリウムなどの有効成分放出調節因子を有する持続放出膣リングに関する。

本発明の持続放出膣リングを用いることによって、調節因子の存在に基づき最小化または最大化することができる高組織濃度（局所）および細胞質レベル、ならびに膣リング処方において用いられる濃度が得られ、これによって、治療条件、治療時間、および到達される標的器官に基づく所望のＤＨＥＡ細胞質レベルを管理することができる。

加えて、ＤＨＥＡの使用によって改善される病気または障害の治療または予防のための、ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓを活性薬として有し、かつ有効成分放出調節因子を任意に有する持続放出膣リング、の使用が記述される。

より具体的には、本発明は、卵巣予備能が低減した女性において卵巣予備能を増加させるための、ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓを活性薬として有しかつ有効成分放出調節因子を任意に有する持続放出膣リング、の使用に関する。

加えて、本発明は、閉経に関連する症状を治療するための、ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓを活性薬として有しかつ有効成分放出調節因子を任意に有する持続放出膣リング、の使用に関する。

加えて、本発明は、閉経後女性における外陰部委縮症および膣委縮症ならびに性機能障害を治療するための、ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓを活性薬として有しかつ有効成分放出調節因子を任意に有する持続放出膣リング、の使用に関する。

より好ましくは、ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓ、および薬剤放出増強因子、特にＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングが提示される。驚くべきことに、ＤＨＥＡおよびＰＶＰ−Ｋ３０を有する膣リングを投与すると、同じ濃度のＤＨＥＡを有するがＰＶＰ−Ｋ３０は有しない膣リングを投与する場合に比べて、薬剤の細胞質濃度を同程度に増加させること無く子宮内膜ＤＨＥＡ濃度を増加させることが見出されている。これによって、細胞質濃度を低くしつつ標的組織における治療上の濃度が保証され、これによって、局所治療的効果および望まない全身性副作用の低減が保証される。この効果は当業界において既知の他の放出増強薬剤を用いた時には観察されなかった。ＰＶＰ Ｋ−３０は、１％溶液において２６〜３５センチストークスの粘着性（またはＫ値）を有する１−ビニル−ピロリドンまたはポリビニルピロリドンに対応する。

図面の説明
図１−２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかもしくは１０％または１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図２−１．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかもしくは１０％または１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図３−０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかまたは１５％および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図４−２．５ｇ、２．０ｇ、１．０ｇ、および０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかまたは５％、１０％、１５％、および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからの、１〜４日目からのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図５−２．５ｇ、２．０ｇ、１．０ｇ、および０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかまたは５％、１０％、１５％、および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからの、５〜３０日目からのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図６−２２．５ｇ、２．０ｇ、１．０ｇ、および０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかまたは５％、１０％、１５％、および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからの、３１〜９０日目からのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図７−１．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない膣リング、１．０ｇのＤＨＥＡを有しかつ５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リング、および、２．５ｇのＤＨＥＡを有しかつ５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図８−２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない膣リング、および、０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつ２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図９−２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつラクトース無しまたは１０％のラクトース有りあるいは１５％のラクトースを有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図１０−２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を有しないかまたは０．５％のＳＬＳを有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。

図１１−１．０ｇのＤＨＥＡを有しかつ薬剤放出調節因子を有しない膣リングを投与した後における女性の細胞質液および子宮内膜液におけるデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のレベル。

図１２−１．０ｇおよび２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない膣リングならびに１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングを投与した後における女性の子宮内膜液におけるデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のレベル。

図１３−１．０ｇおよび２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない膣リングならびに１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングを投与した後における女性の細胞質におけるデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のレベル。

発明を適用した実施例
実施例１−ＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓを有する膣リング
異なる量のＤＨＥＡまたはＤＨＥＡ−Ｓを有する膣リングを作製した。有効成分の放出調節薬を加え、調節薬は、
・ＰＶＰ Ｋ−３０：１％溶液中において２６〜３５センチストークス（２６〜３５のＫ値）の粘着性を有するポリビニルピロリドンＫ−３０または１−ビニル−ピロリドンのポリマー
・ラウリル硫酸ナトリウム
・クレモホールＲＨ４０：エトキシレート水素付加ひまし油（ＣＡＳ６１７８８−８５０−０）
・ＡＡ−１ポリカルボフィル：ジビニルグリコール架橋アクリル酸ポリマー（ＣＡＳ９００３−９７−８）
・ラクトース
・微晶質セルロース
から選択した。

１．１−試験した処方
表１、表１ａ、表２、および表２ａに、試験した一般処方（ＧＦ）を詳細に示す。様々な放出調節因子と共に用いたポリマーが含まれる。

ＤＨＥＡの代わりにＤＨＥＡの硫酸形態（ＤＨＥＡ−Ｓ）を有する膣リングもまた、表１ａおよび表２ａに示すように調製した。

放出調節薬の存在下において必要な量の有効成分を適切に重合または硬化するリングを得るために、様々な処方アッセイを行った。クレモホールＲＨ４０（一般処方７、ＧＦ−７および一般処方１８、ＧＦ８）またはポリカルボフィル（一般処方８、ＧＦ−８および一般処方１９、ＧＦ９）を含むリングは硬化しなかったので、これらの薬剤は廃棄した。表１、１ａ、２、および２ａに示す他のリングはアッセイ条件下で重合した。

製造したリングは、リングの厚さに応じて異なる６．０〜１５．０グラムの重量を有した。５４〜５８ｍｍの他の直径および３〜９ｍｍの断面部を有するリングも製造した。

１．２−膣リングの製造手順
リング型に注入される全ての成分の均質な混合物を用意した。まず、各材料の必要な量を測定した：ポリマーＡ、必要なら放出調節薬、およびメロキシカムである。均質化するまでこれらの成分を混合し、ポリマーＢを一定の混合の下で加えた。混合物を室温でリング型に注入し、それからオーブン内に１０５℃で１時間放置した。それから型を冷やして、形成されたリングをそれぞれの型から取り外して最終産物を得た。

上述したように各成分を測定し、しかし表２（ＧＦ−１１）および表２ａ（ＧＦ−２２）に示すようにポリマーＡをポリマーＢに替えかつポリマーＣをポリマーＤに替えることによって、リングを他のポリマーを用いても作成した。加えて、ジ（２−エチルヘキサン）すずをポリマーＣとポリマーＤとの重合用の触媒として加えた。均質化するまで成分を混合し、リング型に注入した。室温（２３〜２５℃）で１時間放置した。それから形成されたリングをそれぞれの型から取り外し、最終産物を得た。

１．３−本発明の好ましい処方
表１および２の一般処方によると、異なる量のＤＨＥＡおよび薬剤放出増強因子を有する膣リングの処方が用意された。本発明の好ましい処方は表３、４、５、および６に含まれる。全ての成分量をグラム単位で示す。

表３〜６に示す特定処方（ＳＦ）もまた、ＤＨＥＡの代わりに活性因子ＤＨＥ−Ｓを用いることによって調製した。これらの表に示す比率に応じて調製した全てのリングは適切に重合した。

実施例２−インビトロ放出試験
表１〜６に記述される膣リングを用いたインビトロ放出試験を、以下に示す解析手順に応じて行った。処方の結果の説明時に表３〜６のアッセイ命名法を「ＳＦ−ｎ」のように示す。ここで、ｎは、これらの表に示す処方の番号である。

ａ）拡散媒体調製：１８９ｍｌのＺｅｐｈｉｒａｎ（登録商標）（１７％塩化ベンザルコニウム）を正しく測定し、２４リットルの蒸留水が入った鍵付きのポリエチレン容器に移した。撹拌して均質化させた。コンテナに調整バッチ番号および製造日に示すラベルを張り付けた。

拡散媒体をいったん調製した後、２６２．４ｎｍの吸光度を測定することによって溶液をチェックし、結果の読み取り値は１．３〜１．６の範囲にあるべきである；さもなければ溶液は廃棄すべきである。

ｂ）サンプル調製：無作為に選択した各処方の４つのリングを個別に測定し、それぞれの重量を記録した。適切な長さのポリエチレン糸を各リングに取り付け、リングを完全に浸すようにした。リングを、ねじ口（拡散媒体の消失を防ぐ）付きかつ広口の５００ｍＬポリエチレンボトルに懸濁させた：各ボトル底面からリングが２．０±０．２ｃｍ離れるように、リングをボトルの外表面テープで固定した。対応するリングを示すラベルをボトルに張り付けた。

サンプル入りのボトルを、温度を３７℃に設定して定温水浴槽（ＢＴ−４７モデル、Ｙａｍａｔｏ、日本）に置き、１００ｒｐｍで懸濁システムを稼働させた。浴槽温度および懸濁速度を毎日チェックした。温度は３７±０．５℃であるべきであり、懸濁速度は１００±５ｒｐｍ以内であるべきである。

媒体溶液を、日曜日を除き毎日交換した（２４時間後）。第２週目の月曜日から、サンプルを廃棄した。なお、拡散媒体は同じ時間に毎日入れ替えた。

ｃ）解析手順：調製サンプルおよび取得サンプルを、２１０ｎｍでのＵＶ分光光度法によって決定した。

ビール−ランベルトの法則に合致する範囲の濃度を決定するために、異なる媒体における異なる濃度のミクロン化したＤＨＥＡに対する補正カーブを作成した。調製されるべき標準濃度を規定し、かつ、必要な場合、サンプルを希釈した。

ｄ）ＤＨＥＡ標準溶液の調製：約２５ｍｇのミクロン化標準ＤＨＥＡを正確に測定し、５０ｍＬメスフラスコに移し、約２５ｍＬのエタノールを加え、エタノールで規定の容量になるように溶解しかつ作成した。得られたストック溶液の濃度は約０．５ｍｇ／ｍｌであった。ストック溶液の２．０ｍｌ分を容積測定ピペットで取り２５ｍＬメスフラスコに入れた：サンプル測定に用いた拡散媒体によって容積を完了した。得られた濃度は約０．０４ｍｇ／ｍｌであった。

取得したサンプルおよび調製した標準の２１０ｎｍにおける吸光度の測定を続けた。

日々放出されるデヒドロエピアンドロステロンの量を、次の数式を用いて計算した。

ＤＨＥＡおよび放出調節因子を有する膣リングのインビトロ放出アッセイの結果を以下に記述する。

２．１ ＰＶＰ Ｋ−３０の濃度が異なる場合における等しいＤＨＥＡ容量（２．０ｇ）
図１は、２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリング（ＳＦ−１１）が１９．８ｍｇのＤＨＥＡ平均初期放出（１日目）を有したことを示す（表７も参照）。１０％（ＳＦ−１３）および１５％（ＳＦ−１４）のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングからの初期放出は、この薬剤がない場合よりも高く、それぞれ平均値にして２９．４および３２．９ｍｇを達成した。同様に、５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリング（ＳＦ−１２）もまた、この薬剤がない場合に比べて高い放出を有し、ＤＨＥＡが同量の場合（２．０ｇ）に１日目に２３．６ｇの値を達成した（表７）。全ての場合に顕著な初期低減が起こるとはいえ、最初の４日間、ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングではより顕著な放出が維持される（図１を参照）。

表７に、一覧にした濃度のＰＶＰ Ｋ−３０を含むリングからの最初の４日間に放出された平均ＤＥＨＡ量を一覧にする。各条件に対して、４つのリングの放出媒体の４通りのサンプルを採取した。

１５日目から、放出カーブの勾配はより低く、リングはＤＨＥＡを期間中に絶えずかつ永続的に放出し続け、これは９０日目まで維持される。ＤＨＥＡの量が同じ（２．０ｇ）で、ＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリング、１０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリング、および１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングを比較すると、図１から明白に明らかなように、ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングにおける長期間に亘るＤＨＥＡの放出が常に高いこと、より多い量のこの薬剤を有するリングではより多いことが示された。１５％のＰＶＰ Ｋ−３０では、５〜３０日目の平均ＤＨＥＡ放出は２１．５ｍｇであった：一方、１０％では平均１８．７ｍｇであり、５％では平均１４．５ｍｇであり、ＰＶＰ Ｋ−３０が無ければ平均１２．２ｍｇであった（図５の白い棒）。短期間において観察される傾向を維持するＤＨＥＡの放出が９０日目までさえも起こることが観察されることは注目すべきことである；それゆえ１５％のＰＶＰ Ｋ−３０の存在下における３１〜９０日目の平均ＤＨＥＡ放出は１７．５ｍｇであったことが分かり得る；一方、１０％では平均は１４．７ｍｇであり、５％では９．３ｍｇであり、ＰＶＰ Ｋ−３０が無ければ６．７ｍｇであった（図６、白い棒）。

２．２−ＰＶＰ Ｋ−３０が存在しない場合および様々な濃度のＰＶＰ Ｋ−３０が存在する場合における低ＤＨＥＡ用量
ＤＨＥＡ用量が低い（１．０ｇ、０．５ｇ）場合、ＰＶＰ Ｋ−３０の同じ効果が観察された、すなわち、ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングにおける有効成分の放出はより多く、薬剤濃度が増えるほど放出量が増えた（図２および図３）。加えて、図３に示すように、最も低い濃度のＤＨＥＡ（０．５ｇ）を有するリングでは、ＰＶＰ Ｋ−３０効果の飽和が観察された。１５％のＰＶＰ Ｋ−３０（ＳＦ−４）（丸形）および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０（ＳＦ−５）（菱形）では、ＤＨＥＡの放出に明白な違いは無かった。

２．３−ＰＶＰ Ｋ−３０が存在しない場合および様々な濃度のＰＶＰ Ｋ−３０が存在する場合における高ＤＥＨＡ用量
加えて、高用量のＤＨＥＡ（２．５ｇ）を有し、かつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない（ＳＦ−１１）かまたはＰＶＰ Ｋ−３０を有する（ＳＦ−１７およびＳＦ−１８）リングを試験した。全ての場合、試験期間中、ＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングは低量のＤＨＥＡを放出した。１〜４日目の間、ＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングは２２．３ｍｇのＤＨＥＡを放出し、５％のＰＶＰ Ｋ−３０（ＳＦ−１７）を有するリングは２６．１ｍｇのＤＨＥＡを放出し、１０％のＰＶＰ Ｋ−３０（ＳＦ−２８）を有するリングは３２．１ｍｇのＤＨＥＡを放出した（図４、灰色の棒）。それに続く日（５〜３０日目）では、ＰＶＰ Ｋ−３０が濃度が増加するとＤＨＥＡ放出もまた増加し、０％、５％、および１０％のＰＶＰ Ｋ−３０に対してそれぞれ１４．７ｍｇ、１８．５ｇ、および２４．２ｍｇであった（図５、灰色の棒）。同様に、より長い時間（３１〜９０日目）では、これらのリングから顕著な放出が依然として観察され、ＰＶＰ Ｋ−３０濃度が０％、５％、および１０％の場合にそれぞれ１０．８ｍｇ、４．０ｍｇ、および１９．１ｍｇであった（図６、灰色の棒）
２．５ｇのＤＨＥＡ用量は、試験した最も高い用量であり、それゆえ、ＰＶＰ Ｋ−３０の有無に関わらず最も高いＤＨＥＡ放出が得られた用量であった。図４〜６に示すように、全ての放出時間において、２．５ｇのＤＨＥＡを有しＰＶＰ Ｋ−３０を有しない場合に得られる放出は、達成され、かつ、１０％および１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有しかつ低濃度のＤＨＥＡ（１．０ｇまたは０．５ｇ）のＤＨＥＡを有するリングによって超えられた。加えて、図７に示すように、２．５ｇのＤＨＥＡおよび５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングから得られる放出は、１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングを用いて達成された。１．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリング（ＳＦ−６）（三角形）からの放出または１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリング（ＳＦ−９）（四角形）からの放出は、２．５ｇのＤＨＥＡおよび５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリング（菱形）と比較された。

同様に、図８に示しかつ図４、５、および６において白い棒（０％のＰＶＰ Ｋ−３０）対ハッチング付棒（１５％および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０）として比較されるように、２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングからの放出レベルは、低用量のＤＨＥＡ（０．５ｇ）および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０（ＳＦー５）を有するリングからの放出よりも低かった。

２．４−有効成分の他の放出調節因子
１．０ｇ２．０ｇの用量のＤＨＥＡを有しかつ１０％のラクトース（ＳＦ−２２およびＳＦ−２４）、１５％のラクトース（ＳＦ−２３およびＳＦ−２５）、５％の微晶質セルロース（ＳＦ−２６およびＳＦ−２８）または１５％の微晶質セルロース（ＳＦ−２７およびＳＦ−２９）を有するリング、ＤＨＥＡを有するがラクトースまたは微晶質セルロースを有しないリングに比べて短期間でより高い量のＤＨＥＡを放出し；長時間では後者と同様の放出レベルが得られた。図９では、１〜２２日目の間においてリングからのＤＨＥＡ放出を増加させる１０％および１５％のラクトースの効果が観察された；しかし、２３〜９０日目の間では、放出レベルは、ラクトースを有するリングと有しないリングとで区別できなかった。

２．０ｇのＤＨＥＡ、０．１％（ＳＦ−２０）または０．５％（ＳＦ−２１）のラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を有するリングもまた、ＳＬＳを有しないリングに比べて、より高い量の薬剤を放出したが、それは短期間（１〜１５日目）のみであった。１６〜９０日目では、図１０における０．５％のＳＬＳを有するリングとＳＬＳを有しないリングとに示すように、薬剤を有するリングと有しないリングと間で違いは観察されなかった。

より高濃度のＳＬＳもまた試験したが、リングが適切に硬化しなかったため、廃棄した。

これらの結果から、我々は、ＰＶＰ Ｋ−３０を有する場合のみが薬剤を有しないリングに比べて短期間および長期間（少なくとも９０日目まで）の両方において有効成分の高放出を達成できると結論する。試験した薬剤がない場合にも同様の効果が得られたが、どのリングも、製造の重合化工程において適切に硬化しないか、または、長期間において放出に違いが見られなかった。

ＰＶＰ Ｋ−３０を放出調節薬として有するリングから最も高い放出は、９０日目までも維持され、この薬剤を有しないリングに比べて放出は常に高かった。

試験した他の薬剤とは異なり、ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングが、観察された通りの放出特性を示すことを予測するものが何も無かったので、これらの結果は完全に驚くべきものであった。

２．５−他のポリマー
ポリマーＣおよびＤ（図２、ＧＦ−１１を参照）によって形成され、異なる用量のＤＨＥＡを有し、かつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングを試験した。示された物性のために、これらのリングはヒト用に推奨される製品として処分された。それにも関わらず、ＤＨＥＡを有するリングの放出特性を評価し、そして、これらのリングは記録時間を通じてポリマーＡからなるリングに比べて高い量の有効成分を放出することが観察された。

これらの結果は、薬剤製品に対しては膣リングの形態はリングが高くかつ安定した放出率のインビトロ放出特性を示すことに十分では無く、しかし、適切な物性、他の要素の中でもとりわけ、最終製品の受容性質の必要性を満たすことをも有するべきであることを実証している。

実施例３−リングの物性
ＤＨＥＡを有する膣リングは、組織レベルに達して治療効果を達成できる有効成分の必要な放出特性を有することに加えて、使用者に対する受容性必要性の他に、膣内投与を可能にする他の特性をも有しなければならない。これらのうち、膣内に挿入するための形態にするために使用者がリングを押すことができるように、リングは柔軟でなければならない。加えて、リングは、均一な滑面を有し、触りやすく、粘着性および規則的な堅さが無く、すなわち、投与が容易になるような一定の柔らかさを有しなければならない。

異なる用量のＤＨＥＡおよび異なる濃度の異なる有効成分放出調節薬を有するリングを試験した。これらのリングにおいて、堅さ（硬度）、柔軟性、多孔性、粘着性、および明るさ特性を評価した。

ＤＨＥＡを有しかつ放出調節因子としてＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングは、リング中の薬剤濃度およびＤＨＥＡ量に応じて異なる物性を有した。ＰＶＰ Ｋ−３０を加えると、徐々に硬度（堅さ）が増加し、柔軟性が低下し、かつ、多孔性が増加した。さらに、高用量のＰＶＰ Ｋ−３０およびＤＨＥＡの場合、リング粘着性が顕著に増加した。

これらの観察を、有効成分の放出調節薬と共に用いたＤＨＥＡの濃度を一覧にした表８に明確に示す。

膣内投与リングが有しなければならない特性に対応して、より高い堅さを有するものは廃棄され、それらは明るさを有さず、ほとんどまたはまったく柔軟性が無く、明らかに多孔性でありかつ粘着性であった。その結果、高濃度のＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有するかまたは有しないリング、すなわち、２．５ｇのＤＨＥＡおよび１０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリング、２．０ｇおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリング、および０．５ｇのＤＨＥＡおよび２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリング（表８）は、膣内投与には適さない。

試験した他の放出調節因子もまた、ＤＨＥＡを有するリングの物性を改変した。表８および表９からのデータを比較することによって観察されるように、ＤＨＥＡの用量が同じである場合、ラクトースを有するリングは、ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングにおいて観察されたものと同様の堅さを示した。２．０ｇのＤＨＥＡおよびラクトースを有するリングの柔軟性は、１．０ｇのＤＨＥＡおよび同じ薬剤（１０％または１５％）を有するリングに比べてより低かった。ラクトースを有するリングは、高多孔性および低レベルの輝度および粘着性を有した。物性のみを考慮すれば、高用量のＤＨＥＡ（２．０ｇ）およびラクトース（１５％）を有するリングは、最終製品としては推奨されない（表９）。

ＤＨＥＡおよび０．５％の微晶質セルロースを有するリングは、一定の程度の多孔性があったとはいえ、経膣的に投与されるに適した堅さ、柔軟性、粘着性、および明るさの物性を有した。高用量の微晶質セルロース（１５％）を有するリングは、高い堅さ（硬度）、および高多孔性（粗面）のために最終製品としては推奨されなかった（表９）。

２．０ｇのＤＨＥＡおよび０．１％または０．５％のラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を有するリングもまた試験された。両条件の下で、リングは良好な物性を有した（表９）ので、これらのパラメータのみを考慮すれば、これらのリングは最終製品として推奨される。

加えて、リング製造に用いた代替ポリマー（表２に規定されるように、ポリマーＣおよびＤ）もまた、物性に影響を与えた。型注入時の製造工程において、これらのポリマーを有する混合物が、他のポリマー（ポリマーＡおよびＢ）を有する混合物に比べて顕著により堅くかつ粘稠であり、加える圧力のために型への注入および充填が困難であった。重合（硬化）したリングはしかし非常に硬く、堅牢で、かつ柔軟性に乏しく、膣内投与をシミュレートするように曲げた状態を維持することは困難であった。したがって、高い堅さ（堅牢さ）、貧しい柔軟性、一定の多孔性および粘着性（表８）のために、これらのリングは最終製品としては適さない。

実施例４−ＤＨＥＡインビボ放出研究
インビボでのＤＨＥＡの膣内放出および吸収を表すために、異なる処方の３つの膣リングを、３８歳を超える９名の健康な女性ボランティアに投与した。ＤＨＥＡを有しかつ調節薬を有するかまたは有しないリングを投与した後の活性薬の子宮内膜および細胞質レベルを測定した。

この研究に用いたリングは、１）１．０ｇのＤＨＥＡを有しかつ調節薬を有しないか、２）２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつ調節薬を有しないか、または、３）１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有した。これらのリングのそれぞれ１つを、３名のボランティアに投与した。これらの用量の活性薬剤および調節薬は、インビトロ放出研究が、記録期間（１〜９０日目）を通じてこれらのリング間のＤＨＥＡ放出量に顕著な違いを示したために、かつ、またこれらのリングの物性が優れていることによって、インビボ研究のために選択された。これらの全ての特性によって、これらのリングが最終製品候補として推奨された。

女性は、生理周期の３〜５日目または激しい生理出血終了後に、膣リングを装着した。次の時間（リング装着後の時間）：１、２、６、２４、７２、１２０、１６８、２１６、３６０、３７２、５２８、および７２０時間目に、各ボランティアから血液サンプルを採取した。子宮内膜液サンプルもまた、リング投与後の３、７、１５、および２２日目に採取した。ボランティアには、リングは次の生理周期まで取り付けたままでいられるが、激しい流血のための不快感がリングによって生じる場合には外し得ると説明された。

膣リングを外さなければならなかったボランティアの、７２０時間（３０日）における細胞質レベルのデータは廃棄した。１名はグループ１からの、もう１名はグループ３からの、２名のボランティアは、リングを外した。他の女性は、リングを少なくとも６０日は取り付けたままにした。評価を標準化するために、３０日目までに得られた結果を解析した。

図１１は、１．０ｇのＤＨＥＡを有しかつ調節薬を有しないリングを投与した後に得られた細胞質および子宮内膜ＤＨＥＡレベルを示す。細胞質ＤＨＥＡ量は、子宮内膜ＤＨＥＡレベルよりも、最大で約２０ｎｍｏｌ／Ｌ低かった。子宮内膜ＤＨＥＡレベル（四角形）は顕著に高く、５６．２ｎｍｏｌ／Ｌの値が達成された。細胞質ＤＨＥＡレベルは、リング投与後の２１６時間（９日）後に一定を維持する傾向になり、１３ｎｍｏｌ／Ｌに近い値を達成した。

１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングの子宮内膜ＤＨＥＡレベルは、同用量のＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングに比べて高かった。この効果は図１２に明白に示される。調節薬を有するリングを投与した時、サンプルに見られたＤＨＥＡ量は、調節薬を有しないリング（四角形）に比べて平均して１．９倍高かった（三角形）。さらには、１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０（三角形）を有するリングでは、２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつ調節薬を有しないリング（十字形）よりも平均して１．５倍高くなった。これらの結果において、膣リング投与後の７日目における子宮内膜ＤＨＥＡレベルにおけるピックを区別することができた。ピークはこの時間に正確に起こらず、期間内に採取した女性の子宮内膜液のサンプル数が低いために、観察され得ないようである。それでも、この結果は、ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングを用いて子宮内膜において達成されるＤＨＥＡの量は、１．０ｇおよび２．０ｇのＤＨＥＡを有するリングにおいて、この薬剤を有しないリングに比べて顕著に高かったと主張することを許容するほど決定的である。これらの結果は、インビトロ放出での試験で得られた結果に類似する。１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングの５〜３０日目におけるＤＨＥＡのインビトロ放出の増加（表５を参照）は、この薬剤を有しないリングに比べて、平均して１．８倍（対して子宮内膜では１．９倍）であり、２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングに比べて、１．６倍（対して子宮内膜では１．５倍、図１２）であった。言い換えると、膣リングから得られる子宮内膜におけるレベルは、インビトロ放出から得られるＤＨＥＡ量から見積もることができる。

細胞質ＤＨＥＡレベルを測定した時、子宮内膜液において見られる異なる振る舞いが観察された。一方では、１．０ｇ用量のＤＨＥＡにおいて見出される細胞質レベルは、調節因子ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングが、ＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングよりも高く、約１．４倍の増加であった（図１３を参照、十字形対丸形）；これは、これら２つのタイプのリング間の１．８倍の違いをもたらしたインビトロ放出試験から得られた結果に合致する（図５を参照、破線棒）。他方では、インビトロ放出の挙動（図５、ドット付き棒１５％のＰＶＰ Ｋ−３０対白棒０％のＰＶＰ Ｋ−３０）に基づけば、１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングでは、より高用量（２．０ｇ）のＤＨＥＡを有するが調節因子を有しないリングに比べて、細胞質レベルが１．６倍高いことが予測される；しかし、細胞質レベルに対する効果は逆になり、２．０のＤＨＥＡを有するリングは、１．０ｇのＤＨＥＡおよび３０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングよりも高かった（図１３、三角形対十字形）。

インビトロ放出からは、１５％のＰＶＰ Ｋ−３０の存在下において、薬剤を有しない全ての用量のＤＨＥＡに比べてＤＨＥＡの高放出が観察されたので、これらの結果は完全に期待できずかつ予期できないものである。これによって、ＰＶＰ Ｋ−３０をするリングを用いた場合にインビボにおいてより高いＤＨＥＡ組織濃度が得られるが、薬剤を有しないが高用量のＤＨＥＡを有するリングに比べてより低い細胞質濃度が得られると予測することはできない。

インビトロ放出の結果から、ＤＨＥＡ濃度が同じ場合、ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングでは、細胞質レベルおよび子宮内膜レベルの双方において、ＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングに比べてＤＨＥＡ濃度がより高くなることが期待されたが、しかし、ＰＶＰ Ｋ−３０を有するリングでは、細胞質濃度を同じ程度に増加させること無く組織の原位置においてより高い薬剤レベルが達成されたが、ＰＶＰ Ｋ−３０を有しないリングではそうでは無かったという驚くべき結果が得られた。

子宮内膜における濃度をより高くするために、（ＰＶＰ Ｋ−３０を加えること無く）リング内のＤＨＥＡ量を増加させると、細胞質薬剤濃度もまた上昇する（図１３）。したがって、細胞質濃度に影響を与えること無く同様の方法で組織濃度をより高めるためには、リングにおけるＤＨＥＡ用量を増加すること無くリング内のＤＨＥＡおよびＰＶＰを共投与すれば十分である（図１３）。

あるいは、インビトロ試験によると、活性薬剤が少なくとも３０〜９０日持続して放出されることが示されているので、発見された結果は、ラクトース、ＳＬＳ、および微晶質セルロースなどの他の放出調節薬を有する膣リングもまた子宮内膜に対するＤＨＥＡの放出に有用であることを示している。さらに、これらの薬剤もまた、少なくとも最初の１５〜２２日目の間に、これらを含むリングからのより高いＤＨＥＡ放出を誘発した。

（文献）
Abdalla H and Thum MY, 2004, An elevated basal FSH reflects a quantitative rather than qualitative decline of the ovarian reserve. Human Reprod 19: 893-898
Adams, 1985. Mol Cell Endocrinol 41:1-17
Alviggi C, Humaidan P, Howles CM, Tredway D, Hillier SG. 2009. Biological versus chronological ovarian age: implications for assisted reproductive technology. Reprod Biol Endocrinol 7:101
Battaglia DE et al.,., 1996, Influence of maternal age on meiotic spindle assembly in oocytes from naturally cycling women. Hum Reprod 11:2217-2222
Barad DH, Gleicher N. 2005. Increased oocyte production after treatment with dehydroepiandrosterone. Fertil Steril 84:756
Barad D, Gleicher N. 2006. Effect of dehydroepiandrosterone on oocyte and embryo yields, embryo grade and cell number in IVF. Human Reprod 21: 2845-2849
Barad D, Brill H, Gleicher N. 2007. Update on the use of dehydroepiandrosterone supplementation among women with diminished ovarian function. J Assist Reprod Genet 24: 629-634
Beral V. 2003. Breast cancer and hormone-replacement therapy in the Million Women Study. Lancet 362: 419-427
Broekmans FJ, Soules MR, Fauser BC. 2009. Ovarian aging: mechanisms and clinical consequences. Endocr Rev 30:465-493
Broer SL, Mol BW, Hendriks D, Broekmans FJ. 2009. The role of antimullerian hormone in prediction of outcome after IVF: comparison with the antral follicle count. Fertil Steril 91:705-714
Casson PR, Lindsay MS, Pisarka MD, Carson SA, Buster JE. 2000. Dehydroepiandrosterone supplementation augments ovarian stimulation in poor responders: a case series. Human Reprod 15: 2129-2132
de Vet A, Laven JS, de Jong FH, Temen APN, Fauser BC. 2002. Antimullerian hormona serum levels: a putative marker for ovarian aging. Fertil Steril 77:357-62
Dehghani-Firouzabadi R, Tayebi N, Asgharnia M. 2008. Serum level of Anti-Mullerian Hormone in early follicular phase as a predictor of ovarian reserve and pregnancy outcome in assisted reproductive technology cycles. Arch Iranian Med 11:371-376
Durlinger AL et al.,. 2002. Regulation of ovarian function: the role of anti-Mullerian hormone. Reproduction 124: 601-609
Durlinger AL et al.,. 1999. Control of primordial follicle recruitment by anti-Mullerian hormone in the mouse ovary. Endocrinology 140:5789-5796
Durlinger AL et al.,. 2001. Anti-Mullerian hormone attenuates the effets of FSH on follicle development in the mouse ovary. Endocrinology 142:4891-4899
Evers JL, 2002, Female subfertility, Lancet 360:151-159
Fanchin R, Taieb J, Lozano DH, Ducot B, Frydman R, Bouyer J. 2005. High reproducibility of serum anti-Mullerian hormone measurements suggests a multi-staged follicular secretion and strengthens its role in the assessment of ovarian follicular status. Hum Reprod 20:923-927
Faddy MJ, Gosden RG, Gougeon A, Richardson SJ, Nelson JF. 1992. Accelerated disappearance of ovarian follicles in mid-life: implications for forecasting menopause. Hum Reprod 7:1342-1346
Faddy MJ, Gosden RG, 1996. A model conforming the decline in follicle numbers to the age of menopause in women. Hum Reprod 11:1484-1486
Fanchin R, Schonauer LM, Righini C, Guibourdenche J, Frydman R, Taieb J. 2003. Serum anti-Mullerian hormone is more strongly related to ovarian follicular status than serum inhibin B, estradiol, FSH and LH on day 3. Hum Reprod 18:323-327
Gleicher N, Ryan E, Weghofer A, Blanco-Mejia S, Barad DH. 2009. Miscarriage rates after dehydroepiandrosterone (DHEA) supplementation in women with diminished ovarian reserve: a case control study. Reprod Biol Endocrinol 7:108
Gleicher N, Weghofer A, Barad DH. 2010a. Improvement in diminished ovarian reserve after dehydroepiandrosterone supplementation. Reprod Biomed 21: 360-365
Gleicher N, Weghofer A, Barad DH. 2010b. Dehydroepiandrosterone (DHEA) reduces embryo aneuploidy: direct evidence from preimplantation genetic screening (PGS)supplementation. Reprod Biol Endocrinol 8:140
Gleicher N, Weghofer A, Barad DH. 2010c. Anti-Mullerian hormone (AMH) defines, independent of age, low versus good live-birth chances in women with severely diminished ovarian reserve. Fertil Steril 94: 2824-2827
Gougeon A. 1996. Regulation of ovarian follicular development in primates: facts and hypotheses. Endocrine Reviews 17:121-155
Hansen KR, Knowlton NS, Thyer AC, Charleston JS, Soules MR, Klein NA. 2008. A new model of reproductive aging: the decline in ovarian non-growing follicle number from birth to menopause, Hum Reprod 23:699-708
Hehenkamp WJ, Looman CW, Themmen AP, de Jong FH, Te Velde ER, Broekmans FJ. 2006. Anti-Mullerian hormone levels in the spontaneous menstrual cycle do not show substantial fluctuation. J Clin Endocrinol Metab 91:4057-4063
Heiss G, Wallace R, Anderson GL, Aragaki A, Beresford SA, Brzyski R, Chlebowski RT, Gass M, LaCroix A, Manson JE, Prentice RL, Rossouw J, Stefanick ML. 2008. Health risks and benefits 3 years after stopping randomized treatment with estrogen and progestin. JAMA 299:1036-1045
Hudson PL, Dougas I, Donahoe PK, Cate RL, Epstein J, Pepinsky RB, MacLaughlin DT, 1990. An immunoassay to detect human mullerian inhibiting substance in males and females during normal development. J Clin Endocrinol Metab 70:16-22
Hunt PA and Hassold TJ, 2008, Human females meiosis: what makes a good egg go bad? Trends Genet 24:86-93
Kevenaar ME, Meerasahib MF, Kramer P, van de Lang-Born, de Jong FH, Groome NP, Themmen APN, Viseer JA, 2006.Serum anti-Mullerian hormone levels reflect the size of the primordial follicle pool in mice. Endocrinology 147: 3228-3234
Klinkert ER et al.,., 2005, Expected poor responders on the basis of an astral follicle count do not Benedit from a higher starting dose of gonadotrophins in IVF treatment: a randomized controlled trial. Hum Reprod 20:611-615
Kroboth PD, Salek FS, Pittenger AL, Fabian TJ, Frye RF. 1999. DHEA and DHEA-S: a review. J Clin Pharmacol 39: 327-348
Kuliev A et al.,., 2005, Frequency and distribution of chromosome abnormalities in human oocytes. Cytogenet Genome Res 111:193-198
Labrie F. 1991. Intracrinology. Mol Cell Endocrinol 78: C113-C118
Labrie F, Belanger A, Cusan L, Gomez JL, Candas B.1997. Marked decline in serum concentrations of adrenal C19 sex steroid precursors and conjugated androgen metabolites during aging. J Clin Endocrinol Metab 82:2396-2402.
Labrie F, Belanger A, Belanger P, Berub R, Martel C, Cusan L, Gomez J, Candas B, Castiel I, Chaussade V, Deloche C, Leclaire J. 2006. Androgen glucuronides, instead of testosterone, as the new markers of androgenic activity in women. J Steroid Biochem Mol Biol 99:182-188.
Labrie F, Cusan L, Gomez JL, Cote I, Berube R, Belanger P, Martel C, Labrie C. 2008. Effect of intravaginal DHEA on serum DHEA and eleven of its metabolites in postmenopausal women. J Steroid Biochem Mol Biol 111: 178-194.
Labrie F, Archer D, Bouchard C, Fortier M, Cusan L, Gomez JL, Girard G, Baron M, Ayotte N, Moreau M, Dube R, Cote I, Labrie C, Lavoie L, Berger L, Gilbert L, Martel C, Balser J. 2009. Effect of intravaginal dehydroepiandrosterone (Prasterone) on libido and sexual dysfunction in postmenopausal women. Menopause 16:923-931.
Lee MM, Donahoe PK, Hasegawa T, Silverman B, Crist GB, Best S, Hasegawa Y, Noto RA, Schoenfeld D, MacLaughlin DT, 1996. Mullerian inhibiting substance in humans: normal levels from infancy to adulthood. J Clin Endocrinol Metab 81:571-576
Mamas L, Mamas E. 2009. Dehydroepiandrosterone supplementation in assisted reproduction: rationale and results. Curr Opin Obstet Gynecol 21: 306-308
Markstrom E, Svensson ECh, Shao R, Svanberg B, Billig H. 2002. Survival factors regulating ovarian apoptosis-dependence on follicle differentiation. Reproduction 123:23-30
McGee EA and Hhsueh AJ. 2000. Inicial and cyclic recruitment of ovarian follicles. Endocr Rev 21:200-214
Munne S et al.,., 1995, Embryo morphology, developmental rates, and maternal age are correlated with chromosome abnormalities. Fertil Steril 64:382-391
Munne S et al.,., 2005, Preimplantation genetic diagnosis reduces pregnancy loss in women aged 35 years and older with a history of recurrent miscarriages. Fertil Steril 84: 331-335
Orentreich N, Brind JL, Rizer RL, Vogelman JH. 1984. Age changes and sex differences in serum dehydroepiandrosterone sulfate concentrations throughout adulthood. J Clin Endocrinol Metab 59:551-555.
Pellestor F et al.,., 2005, Effect of maternal age on the frequency of cytogenetic abnormalities in human oocytes. Cytogenet Genome Res 111:206-212
Scheffer GJ, Broekmans FJ, Dorland M, Habbema JD, Looman CW, te Velde ER, 1999. Antral follicle counts by transvaginal ultrasonography are related to age in women with proven natural fertility. Fertil Steril 72:845-851
Scheffer GJ, Broekmans FJ, Looman CW, Blankenstein M, Fauser BC, teJong FH, 2003. The number of antral follicles in normal women with proven fertility is the best reflection of reproductive age. Hum Reprod 18:700-706
Seifer DB, MacLaughlin DT, Christian BP, Feng B, Shelden RM. 2002. Early follicular serum mullerian-inhibiting substance levels are associated with ovarian response during assisted reproductive technology cycles. Fertil Steril 77:468-471
Sonmezer M, Ozmen B, Cil AP, Ozkavukcu S, Tasci T, Olmus H, Atabekoglu CS. 2009. Dehydroepiandrosterone supplementation improves ovarian response and cycle outcome in poor responders. Reprod Biomed 19:508-513
te Velde ER and Pearson PL. 2002. The variability of female reproductive ageing. Human Reprod Update 8:141-154
Ueno S et al.,., 1989. Mullerian inhibiting substance in the adult rat ovary during various stages of the estrous cycle. Endocrinology 125:1060-1066
Van Disseldorp J, Faddy MJ, Themmen AP, de Jong FH, Peeters PH, van der Schouw YT, Broekmans FJ. 2008. Relationship of serum antimullerian hormone concentration to age at menopause. J Clin Endocrinol Metab 93:2129-2134
van Houten ELAF, Themmen APN, Visser JA, 2010. Anti-Mullerian hormone (AMH): Regulator and marker of ovarian function. Annals d’Endocrinologie 71:191-197
van Rooij IA, Broekmans FJ, Scheffer GJ, Looman CW, Habbema JD, de Jong FH, Fauser BJ, Themmen AP, te Velde ER. 2005. Serum antimullerian hormone levels best reflect the reproductive decline with age in normal women with proven fertility: a longitudinal study. Fertil Steril 83:979-987
van Rooij IA, Broekmans FJ, te Velde ER, Fauser BC, Bancsi LF, de Jong FH, Themmen AP. 2002. Serum anti-Mullerian hormone levels: a novel measure of ovarian reserve. Hum Reprod 17:3065-3071
van Rooij IA, Tonkelaar I, Broekmans FJ, Looman CW, Scheffer GJ, de Jong FH, Themmen AP, te Velde ER. 2004. Anti-mullerian hormone is a promising predictor for the occurrence of the menopausal transition. Menopause 11:601-606
Visser JA et al.,., 2006. Anti-Mullerian hormone: a new marker for ovarian function. Reproduction 131:1-9
Wallace WH, Kelsey TW. 2010. Human ovarian rserve from conception to the menopause, PloS ONE 5(1): e87772
Wiser A, Gonen O, Ghetler Y, Shavit T, Berkovitz A, Shulman A. 2010. Addition of dehydroepiandrosterone (DHEA) for poor-responder patients before and during IVF treatment improves the pregnancy rate: A randomized prospective study. Human Reprod 25: 2496-2500.

２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかもしくは１０％または１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 １．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかもしくは１０％または１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 ０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかまたは１５％および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 ２．５ｇ、２．０ｇ、１．０ｇ、および０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかまたは５％、１０％、１５％、および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからの、１〜４日目からのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 ２．５ｇ、２．０ｇ、１．０ｇ、および０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかまたは５％、１０％、１５％、および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからの、５〜３０日目からのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 ２２．５ｇ、２．０ｇ、１．０ｇ、および０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しないかまたは５％、１０％、１５％、および２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからの、３１〜９０日目からのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 １．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない膣リング、１．０ｇのＤＨＥＡを有しかつ５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リング、および、２．５ｇのＤＨＥＡを有しかつ５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 ２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない膣リング、および、０．５ｇのＤＨＥＡを有しかつ２０％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 ２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつラクトース無しまたは１０％のラクトース有りあるいは１５％のラクトースを有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 ２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）を有しないかまたは０．５％のＳＬＳを有する膣リングからのデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のインビトロ放出特性。 １．０ｇのＤＨＥＡを有しかつ薬剤放出調節因子を有しない膣リングを投与した後における女性の細胞質液および子宮内膜液におけるデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のレベル。 １．０ｇおよび２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない膣リングならびに１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングを投与した後における女性の子宮内膜液におけるデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のレベル。 １．０ｇおよび２．０ｇのＤＨＥＡを有しかつＰＶＰ Ｋ−３０を有しない膣リングならびに１．０ｇのＤＨＥＡおよび１５％のＰＶＰ Ｋ−３０を有する膣リングを投与した後における女性の細胞質におけるデヒドロエピアンドロステロン（ＤＨＥＡ）のレベル。

Claims (13)

1. デヒドロエピアンドロステロン、硫酸デヒドロエピアンドロステロン、またはその薬剤的に許容される塩を活性薬として有し、ポリビニルピロリドンＫ−３０を、有効成分放出のための調節因子としてさらに有することを特徴とする持続放出膣リング。
2. 上記活性薬はデヒドロエピアンドロステロンであることを特徴とする請求項１に記載の膣リング。
3. 上記活性薬は硫酸デヒドロエピアンドロステロンであることを特徴とする請求項１に記載の膣リング。
4. 上記有効成分が少なくとも９０日持続的に放出されることを特徴とする請求項１に記載の膣リング。
5. 上記有効成分を少なくとも６０日持続的に放出することを特徴とする請求項４に記載の膣リング。
6. 上記有効成分を少なくとも３０日持続的に放出することを特徴とする請求項４に記載の膣リング。
7. 上記処方の上記総重量の１〜３２重量％のデヒドロエピアンドロステロンを有することを特徴とする請求項１に記載する膣リング。
8. 上記処方の上記総重量の０〜２５重量％のポリビニルピロリドンＫ−３０を有することを特徴とする請求項１に記載の膣リング。
9. 女性における卵巣予備能を増加させることに有用な薬剤を調製するために用いられる請求項１に記載の膣リングの、使用。
10. 補助生殖医療に有用な薬剤を調製するために用いられる請求項１に記載の膣リングの、使用。
11. 閉経期に関連する症状の治療に有用な薬剤を調製するために用いられる請求項１に記載の膣リングの、使用。
12. 閉経後女性における外陰部萎縮症および膣萎縮症の症状の治療に有用な薬剤を調製するために用いられる請求項１に記載の膣リングの、使用。
13. 閉経後女性における性機能障害の治療に有用な薬剤を調製するために用いられる請求項１に記載の膣リングの、使用。

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