JP2020516649A - 標的化併用療法 - Google Patents

Abstract

本開示のいくつかの実施形態は、免疫治療剤およびウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された抗がん分子を含む腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物の組み合わせを使用する、腫瘍の処置のための方法および組成物に関する。一局面では、（ａ）腫瘍を有する被験体に、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含む組成物を投与する工程であって、前記構築物は、前記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む、工程；および（ｂ）腫瘍を有する前記被験体に、免疫チェックポイントインヒビターを含む組成物を投与する工程、を包含する方法が提供される。

Description

関連出願
この出願は、米国特許法§１１９（ｅ）の下、２０１７年４月１２日に出願された米国仮出願第６２／４８４，６９３号（これは、その全体が参考として本明細書に援用される）の利益を主張する。

背景
がんに関して多くの処置が利用可能であるが、がんの多くの形態は、不治、処置不能のままであるか、または標準治療に抵抗性になる。旧来のがん処置法は頻繁に、抗がん薬物によって正常／健康な細胞において引き起こされる細胞傷害に起因して、重篤な副作用が付随する。

要旨
本開示は、腫瘍細胞を選択的に標的化および殺滅すると同時に、腫瘍抗原を免疫系に提示し、抗腫瘍免疫を相乗効果的に生成し、それによって、がんの処置および防止のための併用療法を提供するための方法および組成物を提供する。予測外なことに、実験データから、腫瘍標的化感光性分子（これは、レーザー活性化の際に細胞傷害性になる）は腫瘍抗原特異的免疫応答を誘発することが示された。がん細胞に対するこの免疫応答をブーストするために、免疫チェックポイントインヒビターは、上記腫瘍標的化感光性分子と同時に（または順次に）投与され得る。

従って、いくつかの実施形態において、（ａ）腫瘍を有する被験体に、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含む組成物を投与する工程であって、上記構築物は、上記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む工程；および（ｂ）上記腫瘍を有する被験体に、免疫チェックポイントインヒビターを含む組成物を投与する工程を包含する方法が、本明細書で提供される。

いくつかの実施形態において、免疫チェックポイントインヒビターは、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物での処置を受けている最中である腫瘍を有する被験体に投与され、上記構築物は、上記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む。

免疫チェックポイントインヒビターおよび腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含む組成物がまた、本明細書で提供され、上記構築物は、上記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む。

上記の要旨は、本明細書で開示される技術の実施形態、利点、特徴および使用のうちのいくつかを、非限定的な様式で例証することが意味される。本明細書で開示される技術の他の実施形態、利点、特徴および使用は、詳細な説明、図面、実施例、および特許請求の範囲から明らかである。

図１は、本開示のＶＬＰ結合体の作用機構を示す模式図である。上記ＶＬＰ結合体は、上記ＶＬＰの表面において一級アミンに結合体化された感光性分子（ＩＲＤｙｅ（登録商標）７００ＤＸ）を有する腫瘍標的化ウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む。上記ＶＬＰ結合体は、照射がなければ不活性である。ＶＬＰ結合体は、腫瘍細胞を優先的に標的化する。６８９ｎｍでの赤外線照射は、上記ＶＬＰ結合体を活性化する。ウイルスキャプシドのＬ１タンパク質は、多価様式で腫瘍表面上のヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧ）に特異的に結合する。次いで、その活性化した薬物は、その腫瘍細胞膜を破壊し、免疫原性促進性の腫瘍細胞損傷および壊死をもたらす。

図２は、ＴＣ−１モデルにおいてマウスの生存曲線を示すグラフである。約５０ｍｍ^３の腫瘍が形成された（０日目）後、そのマウスに、上記ＶＬＰ結合体またはリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）を注射し、次いで、１２時間後および２４時間後に、光で処置した。そのプロトコルを、３日目に反復した。

図３は、ＴＣ−１モデルにおいてマウスの生存曲線を示すグラフである。約１００〜３００ｍｍ^３の腫瘍が形成された（０日目）後、そのマウスに、上記ＶＬＰ結合体またはＰＢＳを注射し、次いで、１２時間後に光で処置した。そのプロトコルを、３日目に反復した。０日目および１７日目に採血して、腫瘍特異的Ｔ細胞応答を測定した。

図４は、１７日目に実験用マウスの血液中で検出された腫瘍抗原特異的ＣＤ８^＋ Ｔ細胞を示す。腫瘍容積、ＨＰＶ１６ Ｅ７テトラマー^＋ ＣＤ８^＋ゲーティング、およびＨＰＶ１６ Ｅ７ペプチド再刺激−ＩＦＮ−γ、ＣＤ８^＋ゲーティングを示す。

図５は、光処置単独では、腫瘍抗原特異的ＣＤ８^＋ Ｔ細胞が生じないことを図示する。腫瘍容積、ＨＰＶ１６ Ｅ７ テトラマー^＋ ＣＤ８^＋ゲーティング、およびＨＰＶ１６ Ｅ７ペプチド再刺激−ＩＦＮ−γ、ＣＤ８^＋ゲーティングを示す。

図６は、腫瘍増殖および再発を防止するための、ＮＩＲで活性化した腫瘍標的化薬物結合体、およびチェックポイントインヒビターの組み合わせを図示する模式図である。

図７は、実施例４で行われる実験の模式図である。

詳細な説明
がん／腫瘍処置薬物を腫瘍に特異的に送達するために、ある種のウイルスキャプシドタンパク質は、それらの腫瘍標的化能力または構造安定性を失うことなく、治療用分子を運ぶためにアセンブリされ得るおよび／または化学的に改変され得る。これらの「ウイルスキャプシドタンパク質構築物」は、腫瘍細胞表面に、例えば、腫瘍細胞表面上のヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧ）への結合を介して、選択的に結合し得、その腫瘍細胞に入り、そこでその治療用分子（例えば、感光性分子）は、標的化された細胞傷害性効果および／または抗腫瘍免疫を生成し得、腫瘍細胞死滅および腫瘍再発の防止をもたらし得る。がんの処置におけるこのようなウイルス様粒子および構築物の使用は、例えば、ＰＣＴ出願公開ＷＯ２０１５０４２３２５（２０１４年９月１８日出願（その全体は本明細書に参考として援用される））に記載されている。

本開示のいくつかの局面は、少なくとも一部分は、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を介して腫瘍細胞へと送達される感光性分子が抗腫瘍免疫を生成するということを示す予測外の結果に基づく。免疫原性促進性の細胞死を受ける腫瘍細胞は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）が腫瘍抗原を取り込むように刺激して、それらをプロセシングし、その腫瘍に対する腫瘍抗原特異的Ｔ細胞免疫応答を誘導する免疫原性因子を放出する。このような腫瘍抗原特異的Ｔ細胞応答は、処置の壊死効果と合わさって、正常細胞に影響を及ぼすことなく腫瘍細胞を選択的かつ有効に破壊し、抗腫瘍免疫を生成し、腫瘍再発を防止するための限りない可能性を示す。

腫瘍細胞は頻繁に、自己攻撃を防止するために免疫系が採用する機構を利用する。がん免疫治療剤は、腫瘍細胞が免疫系による攻撃を巧みにかわす能力を低減または排除するために開発されてきた。がんを処置するためのこのような免疫治療剤の使用は、例えば、米国特許出願公開ＵＳ２０１６００２４４６９、同ＵＳ２０１３０２０２６４５、同ＵＳ２０１００１８９６４１、米国特許第５４７８５５６号、同第５２９０５５１号、および同第５１２６１２９号（これらの全体は、本明細書に参考として援用される）に記載されている。いくつかの実施形態において、その免疫治療剤は、免疫チェックポイントインヒビターである。従って、本開示は、腫瘍細胞において細胞傷害性感光性分子を標的化および活性化し、そして免疫チェックポイントインヒビター（または他の免疫治療剤）を同時にまたは順次に投与することによって生成される予測外の相乗効果を利用する、がん／腫瘍の併用療法のための組成物および方法を包含する。このような組成物および方法は、旧来の化学療法および腫瘍免疫療法ストラテジーと比較した場合に、腫瘍増殖を制御する、抗腫瘍免疫を誘導する、および腫瘍再発を防止するにあたって、より有効である。

よって、本開示のいくつかの局面は、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含む組成物であって、その構築物がその構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む組成物を提供する。

「ウイルスキャプシドタンパク質構築物（ｖｉｒａｌ ｃａｐｓｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓｅｍｂｌａｇｅ）」とは、ウイルスキャプシドタンパク質から形成される任意の粒子または集合体である。ウイルスキャプシドタンパク質構築物の例としては、カプソマーおよびウイルス様ナノ粒子、ならびに他のウイルス性偽ウイルス（ｐｓｅｕｄｏｖｉｒｕｓ）およびウイルス性ナノ粒子が挙げられるが、これらに限定されない。ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、「腫瘍標的化（ｔｕｍｏｒ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ）」するとみなされる。なぜならそれは、非腫瘍（例えば、非がん性、そうでなければ、正常な、健康な）細胞を結合することなく、腫瘍（例えば、がん性）細胞を結合するからである。いくつかの実施形態において、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、７２カプソマー構造（例えば、Ｌ１またはＬ１／Ｌ２ウイルスキャプシドタンパク質を含む）を有するウイルス様粒子（ＶＬＰ）である。

いくつかの実施形態において、ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）ウイルスキャプシドタンパク質構築物（例えば、タイプ１６、タイプ３１、またはタイプ１６に由来するアミノ酸およびタイプ３１に由来するアミノ酸を含む改変されたタイプからの）である。いくつかの実施形態において、ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、非ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）ウイルスキャプシドタンパク質構築物である。非ヒトパピローマウイルスのウイルスキャプシドタンパク質構築物の例としては、ウシパピローマウイルス、ワタオウサギ（ｃｏｔｔｏｎ−ｒａｂｂｉｔ）パピローマウイルス、マカクパピローマウイルスおよびマウスパピローマウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。

ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、ウイルスキャプシドタンパク質を含む。「キャプシドタンパク質」とは、タンパク質モノマーである。キャプシドタンパク質は、一緒にアセンブリして、カプソマー（例えば、キャプシドタンパク質のペンタマー）を形成し得る。「カプソマー」とは、ウイルスキャプシドのサブユニットであり、それは、ウイルス（例えば、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）のような）の遺伝物質を保護するタンパク質の外側の覆いである。しかし、本開示の状況におけるカプソマーは、キャプシドとは独立して、送達ビヒクル（腫瘍標的化送達ビヒクル）として使用され得ることは理解されるべきである。本開示のキャプシドタンパク質は、パピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質、パピローマウイルスＬ２キャプシドタンパク質、およびこれらの改変体（例えば、感染阻害抗体を誘導する、低減または改変された能力を有する改変体）を含む。いくつかの実施形態において、ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、Ｌ１キャプシドタンパク質のみを含む一方で、他の実施形態では、ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、Ｌ１およびＬ２キャプシドタンパク質の組み合わせを含む。「外側キャプシドタンパク質（ｅｘｔｅｒｎａｌ ｃａｐｓｉｄ ｐｒｏｔｅｉｎ）」とは、本明細書で使用される場合、ＶＬＰの表面上で露出されるキャプシドタンパク質をいう。

ウイルス様粒子、またはＶＬＰは、本明細書で使用される場合、Ｌ１、またはＬ１およびＬ２の自己アセンブリする秩序だったアレイを含む組織化されたキャプシド様構造（例えば、形状がおよそ球形または円筒状）、カプソマーをいい、ウイルスゲノムを含まない。いくつかの実施形態において、そのウイルス様粒子は、真正ビリオン（ａｕｔｈｅｎｔｉｃ ｖｉｒｉｏｎ）に形態的にかつ抗原的に類似であるが、それらはウイルスの遺伝物質（例えば、ウイルス核酸）を欠き、その粒子を非感染性にする。

腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、いくつかの実施形態において、その粒子自体に対する免疫原性を低減する、すなわち、その構築物に対する中和抗体の誘導を低減するように改変され得る。そのウイルスキャプシドタンパク質構築物は、例えば、改変された免疫原性を有する改変体キャプシドタンパク質を有するカプソマーからアセンブリされ得る。「改変された免疫原性」を有する改変体キャプシドタンパク質は、既存の（例えば、内因性）ウイルス血清型特異的抗体によるキャプシドタンパク質の認識を低減または防止するために、アミノ酸において天然にまたは合成的に改変される（例えば、変異される、置換される、欠失される、ＰＥＧ化されるまたは挿入される）ものである。改変体キャプシドタンパク質は、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）Ｌ１改変体、非ヒトパピローマウイルスＬ１改変体、または異なるＨＰＶ血清型に由来するアミノ酸の組み合わせに基づくパピローマウイルスＬ１改変体であり得る。例えば、改変された免疫原性を有するＬ１改変体は、組換えタンパク質であり得、これは、国際公開番号ＷＯ２０１０１２０２６６（２００９年７月２４日出願（その全体は、本明細書に参考として援用される））に記載される。いくつかの実施形態において、そのウイルスキャプシドタンパク質構築物は、改変された免疫原性を有するＬ１改変体（改変体ＨＰＶ１６／３１ Ｌ１キャプシドタンパク質）を含む。

本開示の腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、がん細胞を特異的に標的化し得、このような特異性は、少なくとも部分的に、その腫瘍細胞表面上のヘパラン硫酸プロテオグリカン（ＨＳＰＧ）への、ウイルスキャプシドタンパク質構築物におけるＬ１タンパク質の結合によって媒介される。このプロセスは、その宿主細胞に付着し、感染するウイルスのプロセスに類似である。その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、無傷の上皮細胞に結合も偽標的化（ｐｓｅｕｄｏ−ｔａｒｇｅｔ）もしないので、健康なまたは正常な細胞に影響を及ぼすことなく、抗がん薬物を腫瘍に特異的に送達するための優れたツールである。

本開示の腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、抗がん活性を有する分子（本明細書で「抗がん分子（ａｎｔｉ−ｃａｎｃｅｒ ｍｏｌｅｃｕｌｅ）」といわれる）に結合体化されたキャプシドタンパク質を含む。このような抗がん分子は、腫瘍細胞に対して標的化された細胞傷害性効果を生じ得るおよび／または場合によっては、その腫瘍細胞に対して免疫応答を誘導し得る。本開示の分子の非限定的な例としては、以下が挙げられる：ボルテゾミブ、イマチニブ、セリシクリブ、アファチニブ（Ｇｉｌｏｔｒｉｆ）、アレクチニブ（Ａｌｅｃｅｎｓａ）、アキシチニブ（Ｉｎｌｙｔａ）、ベリノスタット（Ｂｅｌｅｏｄａｑ）、ボルテゾミブ（Ｖｅｌｃａｄｅ）、ボスチニブ（Ｂｏｓｕｌｉｆ）、カボザンチニブ（Ｃｏｍｅｔｒｉｑ）、カルフィルゾミブ（Ｋｙｐｒｏｌｉｓ）、セリチニブ（Ｚｙｋａｄｉａ）、コビメチニブ（Ｃｏｔｅｌｌｉｃ）、クリゾチニブ（Ｘａｌｋｏｒｉ）、ダブラフェニブ（Ｔａｆｉｎｌａｒ）、ダサチニブ（Ｓｐｒｙｃｅｌ）、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ）、エベロリムス（Ａｆｉｎｉｔｏｒ）、ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ）、イブルチニブ（Ｉｍｂｒｕｖｉｃａ）、イデラリシブ（Ｚｙｄｅｌｉｇ）、イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ）、イキサゾミブ（Ｎｉｎｌａｒｏ）、ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ）、レンバチニブ（Ｌｅｎｖｉｍａ）、ニロチニブ（Ｔａｓｉｇｎａ）、オラパリブ（Ｌｙｎｐａｒｚａ）、オシメルチニブ（Ｔａｇｒｉｓｓｏ）、パルボシクリブ（Ｉｂｒａｎｃｅ）、パノビノスタット（Ｆａｒｙｄａｋ）、パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ）、ポナチニブ（Ｉｃｌｕｓｉｇ）、レゴラフェニブ（Ｓｔｉｖａｒｇａ）、ルキソリチニブ（Ｊａｋａｆｉ）、シプリューセル−Ｔ（Ｐｒｏｖｅｎｇｅ）、ソニデジブ（Ｏｄｏｍｚｏ）、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ）、テムシロリムス（Ｔｏｒｉｓｅｌ）、トファシチニブ（Ｘｅｌｊａｎｚ）、トラメチニブ（Ｍｅｋｉｎｉｓｔ）、バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ）、ベムラフェニブ（Ｚｅｌｂｏｒａｆ）、ビスモデギブ（Ｅｒｉｖｅｄｇｅ）、およびボリノスタット（Ｚｏｌｉｎｚａ）。当該分野で公知の任意の抗がん分子は、本開示に従って使用され得る。

いくつかの実施形態において、その抗がん分子は、感光性分子、または光増感剤である。「感光性分子」または「光増感剤」とは、光を吸収すると励起状態へと促進され得る化合物である。この種は、これが遭遇する任意の有機化合物を迅速に攻撃し、従って、非常に細胞傷害性である。いくつかの実施形態において、活性化された感光性分子は、光励起されると光を再放出する（例えば、フルオロフォア）。いくつかの実施形態において、活性化された感光性分子は、光励起されると、毒性になり得るか、または毒性分子を生じ得る。例えば、感光性分子のあるクラスは、光を吸収すると励起状態へと促進され得、酸素との項間交差を受けて、一重項酸素を生じ得る。

驚くべきことに、ウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物が、ＮＩＲ光でいったん活性化されたら、腫瘍壊死を誘導したのみならず、その腫瘍の免疫原性促進性の細胞死を誘導し、その腫瘍に対して長時間持続性の腫瘍抗原特異的Ｔ細胞応答をも活性化した。よって、免疫系は、その腫瘍を攻撃するように活性化され、局所の（局部的な）および遠隔的な処置有効性を増強する。予測外なことに、この作用機構は、既存の腫瘍のサイズを低減した、すなわち、腫瘍増殖を阻害したのみならず、マウスにおいてチャレンジした際に、あらたな腫瘍が形成するのをも防止した、すなわち、腫瘍再発をも防止した。

本開示に従う使用のための感光性分子の例としては、蛍光色素、赤外吸収色素（ｉｎｆｒａｒｅｄ ｄｙｅ）、近赤外吸収色素、ポルフィリン分子およびクロロフィル分子が挙げられるが、これらに限定されない。

本開示に従う使用のための蛍光色素の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：アクリジンオレンジ、アクリジンイエロー、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ、７−アミノアクチノマイシンＤ、８−アニリノナフタレン−１−スルホン酸、ＡＴＴＯ色素、オーラミン−ローダミン染料、ベンズアントロン、ビマン、９，１０−ビス（フェニルエチニル）アントラセン、５，１２−ビス（フェニルエチニル）ナフタセン、ビスベンズイミド、ブラックライト塗料（ｂｌａｃｋｌｉｇｈｔ ｐａｉｎｔ）、カルセイン、カルボキシフルオレセイン、カルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステル、カルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル、１−クロロ−９，１０−ビス（フェニルエチニル）アントラセン、２−クロロ−９，１０−ビス（フェニルエチニル）アントラセン、２−クロロ−９，１０−ジフェニルアントラセン、クマリン、ＤＡＰＩ、ダーククエンチャー（ｄａｒｋ ｑｕｅｎｃｈｅｒ）、ＤｉＯＣ６、ＤｙＬｉｇｈｔ Ｆｌｕｏｒ、Ｆｌｕｏ−３、Ｆｌｕｏ−４、ＦｌｕｏＰｒｏｂｅｓ、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート、蛍光画像ガイド下手術（ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｍａｇｅ−ｇｕｉｄｅｄ ｓｕｒｇｅｒｙ）、ｆｌｕｏｒｏ−ｊａｄｅ染料、ｆｕｒａ−２、ｆｕｒａ−２−アセトキシメチルエステル、ＧｅｌＧｒｅｅｎ、ＧｅｌＲｅｄ、緑色蛍光タンパク質、ヘプタメチン色素、インディアンイエロー、Ｉｎｄｏ−１、ルシファーイエロー、ルシフェリン、ＭＣｈｅｒｒｙ、メロシアニン、ナイルブルー、ナイルレッド、光学的光沢剤、ペリレン、フロキシン、フィコビリン、フィコエリトリン、フィコエリスロビリン、ヨウ化プロピジウム、ピラニン、ローダミン、ローダミン１２３、ローダミン６Ｇ、ＲｉｂｏＧｒｅｅｎ、ＲｏＧＦＰ、ローズベンガル、ルブレン、（Ｅ）−スチルベン、（Ｚ）−スチルベン、スルホローダミン１０１、スルホローダミンＢ、ＳＹＢＲ Ｇｒｅｅｎ Ｉ、ｓｙｎａｐｔｏ−ｐＨｌｕｏｒｉｎ、テトラフェニルブタジエン、トリス（バソフェナントロリンジスルホネート）ルテニウム（ＩＩ）四ナトリウム、テキサスレッド、Ｔｉｔａｎ ｙｅｌｌｏｗ、ＴＳＱ、ウンベリフェロン、黄色蛍光タンパク質およびＹＯＹＯ−１。

本開示に従う使用のための感光色素の例としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：ＨｐＤ，ポルフィマーナトリウム（Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ（登録商標）、Ｐｈｏｔｏｇｅｍ（登録商標）、Ｐｈｏｔｏｓａｎ Ｈｅｍｐｏｒｆｉｎ（登録商標））、ｍ−ＴＨＰＣ、テモポルフィン（Ｆｏｓｃａｎ（登録商標））、ベルテポルフィン（Ｖｉｓｕｄｙｎｅ（登録商標））、ＨＰＰＨ（Ｐｈｏｔｏｃｈｌｏｒ（登録商標））、パラジウム細菌フェオフォルビド（Ｐａｌｌａｄｉｕｍ−ｂａｃｔｅｒｉａ−ｐｈｅｏｐｈｏｒｂｉｄｅ）（Ｔｏｏｋａｄ（登録商標））、５−ＡＬＡ、５ アミノレブリン酸（Ｌｅｖｕｌａｎ（登録商標））、５−ＡＬＡメチルエステル（Ｍｅｔｖｉｘ（登録商標））、５−ＡＬＡベンジルエステル（Ｂｅｎｚｖｉｘ（登録商標））、５−ＡＬＡヘキシルエステル（Ｈｅｘｖｉｘ（登録商標））、ルテチウム（ＩＩＩ）−テキサフィリンもしくはモテキサフィン−ルテチウム（Ｌｕｔｅｘ（登録商標）、Ｌｕｔｒｉｎ（登録商標）、Ａｎｇｒｉｎ（登録商標）、Ｏｐｔｒｉｎ（登録商標））、ＳｎＥＴ２、エチルエチオプルプリンスズ（ＩＶ）（Ｔｉｎ （ＩＶ） ｅｔｈｙｌ ｅｔｉｏｐｕｒｐｕｒｉｎ）（Ｐｕｒｌｙｔｉｎ（登録商標）、Ｐｈｏｔｒｅｘ（登録商標））、ＮＰｅ６、モノ−Ｌ−アスパルチル塩素ｅ６、タラポルフィンナトリウム（Ｔａｌｐｏｒｆｉｎ（登録商標）、Ｌａｓｅｒｐｈｙｒｉｎ（登録商標））、ＢＯＰＰ、ボロン酸プロトポルフィリン（ｂｏｒｏｎａｔｅｄ ｐｒｏｔｏｐｏｒｐｈｙｒｉｎ）（ＢＯＰＰ（登録商標））、亜鉛フタロシアニン（ＣＧＰ５５８４７（登録商標））、ケイ素フタロシアニン（Ｐｃ４（登録商標））、スルホン化アルミニウムフタロシアニン誘導体の混合物（Ｐｈｏｔｏｓｅｎｓ（登録商標））、ＡＴＭＰｎ、アセトキシ−テトラキス（β−メトキシエチル−）ポルフィセン）、ＴＨ９４０２およびジブロモローダミンメチルエステル。

本開示に従う使用のための感光分子の例としては、以下が挙げられる：蛍光画像化において使用され得るもの（例えば、近赤外線（ＮＩＲ）吸収蛍光色素）、例えば、ポルフィリン、クロロフィル、クロリン、フタロシアニン、バクテリオクロリン、テキサフィリン、Ｐｈｏｔｏｆｒｉｎ（登録商標）（ポルフィマーナトリウム）、Ｖｉｓｕｄｙｎｅ（登録商標）（ベルテポルフィン）、Ｌａｓｅｒｐｈｙｒｉｎ（登録商標）／ＮＰｅ６（テモポルフィン）、Ｆｏｓｃａｎ（タラポルフィン）、メチレンブルー（Ｕｒｏｌｅｎｅ Ｂｌｕｅ（登録商標）、Ｓｗｉｓｓ Ｂｌｕｅ、Ｂａｓｉｃ Ｂｌｕｅ ９、Ｃｈｒｏｍｏｓｍｏｎ、メチルチオニニウムクロリド（Ｍｅｔｈｙｌｔｈｉｏｎｉｕｍ Ｃｈｌｏｒｉｄｅ））、ならびにアミノレブリン酸の種々の誘導体（ＡＬＡ、Ｍｅｔｖｉｘ（登録商標）、Ｈｅｘｖｉｘ^ＴＭ／Ｃｙｓｖｉｅｗ（登録商標））、またはこれらの組み合わせ。いくつかの実施形態において、本開示のウイルスキャプシドタンパク質構築物に結合体化された感光分子は、近赤外吸収色素である。いくつかの実施形態において、その近赤外吸収色素は、ＩＲＤｙｅ（登録商標）７００ＤＸである。

本開示の種々の局面によれば、その抗がん分子（例えば、ＩＲＤｙｅ（登録商標）７００ＤＸ）は、そのウイルスキャプシドタンパク質構築物のキャプシドタンパク質（例えば、パピローマウイルスＬ１および／またはＬ２キャプシドタンパク質）に結合体化され得る。いくつかの実施形態において、その抗がん分子は、そのウイルスキャプシドタンパク質構築物のキャプシドタンパク質に共有結合的に結合体化される。いくつかの実施形態において、その抗がん低分子は、そのウイルスキャプシドタンパク質構築物のキャプシドタンパク質のリジン残基に共有結合的に結合体化される。そのキャプシドタンパク質への抗がん分子の結合体化は、腫瘍細胞の表面へのそのウイルスキャプシドタンパク質構築物の結合を損ねないか、または腫瘍細胞の表面上のＨＳＰＧへのウイルスキャプシドタンパク質構築物の結合を損ねない。その抗がん分子に結合体化されるウイルスキャプシドタンパク質構築物は、「結合体（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）」と本明細書でいわれ得る。

パピローマウイルスのＬ１タンパク質は、化学的結合体化にアクセス可能な多数のリジンを含む。従って、多数の感光性分子（または他の抗がん分子）が、本開示の１つの腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物に結合体化され得る、すなわち、抗がん分子 対 ウイルスキャプシドタンパク質構築物の比は変動し得る。いくつかの実施形態において、ウイルスキャプシドタンパク質構築物：感光性分子の比は、約１：１０〜約１：１０００、または約１：５０〜約１：１０００である。すなわち、いくつかの実施形態において、ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、約１０〜約１０００の感光性分子を含み得る。いくつかの実施形態において、ウイルスキャプシドタンパク質構築物：感光性分子の比は、１：１０、１：１５、１：２０、１：２５、１：５０、１：７５、１：１００、１：１５０、１：２００、１：２５０、１：５００、１：７５０または１：１０００である。いくつかの実施形態において、そのウイルスキャプシドタンパク質構築物は、１０、１５、２０、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０、または１０００の感光性分子を含み得る。例えば、そのウイルスキャプシドタンパク質構築物は、１０〜１０００、１０〜５００、１００〜１０００、２００〜１０００、３００〜１０００、４００〜１０００、５００〜１０００、１００〜５００、２００〜５００、３００〜５００、４００〜５００、１００〜４００、２００〜４００、３００〜４００、１００〜３００、または２００〜３００の感光性分子を含み得る。いくつかの実施形態において、そのウイルスキャプシドタンパク質構築物は、１０００より多くの感光性分子または１０未満の抗がん分子を含み得る。そのウイルスキャプシドタンパク質構築物のＬ１タンパク質への感光性分子の結合体化は、構造的完全性またはその構築物の腫瘍標的化能力、すなわち、その腫瘍細胞の表面上のＨＳＰＧを選択的に結合するその能力を含まない。従って、本開示の腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物の別の利点は、多量の治療剤を、その分子の非常に低濃度においてすら腫瘍に特異的に送達するそれらの能力である。

いくつかの実施形態において、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、そのウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む。いくつかの実施形態において、その感光性分子は、ＩＲＤｙｅ（登録商標）７００ＤＸである。いくつかの実施形態において、そのウイルス粒子結合体は、ウイルス様粒子、例えば、改変体または改変ＨＰＶ １６／３１ Ｌ１キャプシドタンパク質および野生型ＨＰＶ Ｌ２キャプシドタンパク質からアセンブリされ、赤外線活性化分子、例えば、ＩＲＤｙｅ（登録商標）７００ＤＸに結合体化された７２カプソマーを含むウイルス様粒子を含む。この結合体は、がん細胞に選択的に結合することが示され、レーザーで活性化されると、その結合体は、がん細胞の膜を選択的に破壊し、隣り合う正常細胞を損傷することなく、そのがん細胞を殺滅する。

本開示の組成物は、がんの処置のための免疫治療剤をさらに含む。「免疫治療剤」とは、本明細書で使用される場合、がんを処置するために免疫系の使用を促進する薬剤をいう。このような免疫治療剤は、代表的には、がん細胞がしばしば、それらの表面上に、免疫系によって検出され得る分子を有するという事実を利用する。いくつかの実施形態において、その免疫治療剤は、腫瘍細胞に付着するように免疫系に能動的に誘導する。いくつかの実施形態において、その免疫治療剤は、既存の抗腫瘍応答（例えば、モノクローナル抗体、リンパ球、およびサイトカイン）を増強する。いくつかの実施形態において、その免疫治療剤分子は、免疫チェックポイントの活性を調節する。

「免疫チェックポイント」とは、免疫応答シグナルを増強するか（共刺激分子）または免疫応答シグナルを低減するかのいずれかである免疫系のタンパク質である。多くのがんは、阻害性免疫チェックポイントタンパク質を利用して、Ｔ細胞シグナルを阻害することによって、それら自身を免疫系から保護する。このような阻害性チェックポイントタンパク質としては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）、プログラム細胞死１レセプター（ＰＤ−１）、Ｔ細胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン（Ｔ−ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｄｏｍａｉｎ ａｎｄ Ｍｕｃｉｎ ｄｏｍａｉｎ）３（ＴＩＭ３）、リンパ球活性化遺伝子−３（ＬＡＧ３）、Ｖ−ｓｅｔドメイン含有Ｔ細胞活性化インヒビター１（ＶＴＶＮ１またはＢ７−Ｈ４）、表面抗原分類２７６（ＣＤ２７６またはＢ７−Ｈ３）、ＢおよびＴリンパ球減弱因子（Ｂ ａｎｄ Ｔ Ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ Ａｔｔｅｎｕａｔｏｒ）（ＢＴＬＡ）、ガレクチン−９（ＧＡＬ９）、チェックポイントキナーゼ１（Ｃｈｋ１）、アデノシンＡ２Ａレセプター（Ａ２ａＲ）、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、キラー細胞免疫グロブリン様レセプター（ＫＩＲ）、リンパ球活性化遺伝子−３（ＬＡＧ３）およびＴ細胞活性化のＶドメインＩｇサプレッサー（ＶＩＳＴＡ）。

これらの免疫チェックポイントタンパク質のうちのいくつかは、それらの免疫阻害活性のために、それらの同族結合パートナー、またはリガンドを要する。例えば、Ａ２ＡＲは、アデノシンＡ２Ａのレセプターであり、Ａ２ＡＲへのＡ２Ａの結合は、負の免疫フィードバックループを活性化する。別の例として、ＰＤ−１は、その２つのリガンドであるＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２と会合して、Ｔ細胞の活性化を防止することによって免疫系をダウンレギュレートする。ＰＤ−１は、リンパ節における抗原特異的Ｔ細胞のプログラムされた細胞死を促進し、同時に、サプレッサーＴ細胞のプログラムされた細胞死を低減するので、その免疫阻害性機能を達成する。さらに別の例として、ＣＴＬＡ４は、Ｔ細胞の表面上に存在し、抗原提示細胞（ＡＰＣ）の表面上のその結合パートナーであるＣＤ８０またはＣＤ８６に結合される場合に、それは、Ｔ細胞へと阻害性シグナルを伝達し、それによって、その免疫応答を低減する。

がん細胞は、免疫チェックポイントタンパク質を利用して、免疫系によって攻撃されることから逃れることが公知である。従って、がんに対する免疫応答を増強し、従ってがんを処置するために免疫チェックポイントインヒビターを使用することは、記載されてきた。本開示の組成物における免疫治療剤はまた、免疫チェックポイントインヒビターであり得る。いくつかの実施形態において、その免疫チェックポイントは、以下のうちのいずれか１またはこれより多くを阻害する：細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ−４）、プログラム細胞死１レセプター（ＰＤ−１）、Ｔ細胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン３（ＴＩＭ３）、リンパ球活性化遺伝子−３（ＬＡＧ３）、Ｖ−ｓｅｔドメイン含有Ｔ細胞活性化インヒビター１（ＶＴＶＮ１またはＢ７−Ｈ４）、表面抗原分類２７６（ＣＤ２７６またはＢ７−Ｈ３）、ＢおよびＴリンパ球減弱因子（ＢＴＬＡ）、ガレクチン−９（ＧＡＬ９）、チェックポイントキナーゼ１（Ｃｈｋ１）、アデノシンＡ２Ａレセプター（Ａ２ａＲ）、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、キラー細胞免疫グロブリン様レセプター（ＫＩＲ）、リンパ球活性化遺伝子−３（ＬＡＧ３）およびＴ細胞活性化のＶドメインＩｇサプレッサー（ＶＩＳＴＡ）。

いくつかの実施形態において、「阻害する」とは、免疫チェックポイントタンパク質の、その同族結合パートナー（例えば、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、またはＡ２ａＲ）への結合を防止するかまたは弱めることを意味する。いくつかの実施形態において、その免疫チェックポイントインヒビターは抗体である。いくつかの実施形態において、その抗体は、抗ＣＴＬＡ−４、抗ＰＤ−１、抗ＰＤ−Ｌ１、抗ＴＩＭ３、抗ＬＡＧ３、抗Ｂ７−Ｈ３、抗Ｂ７−Ｈ４、抗ＢＴＬＡ、抗ＧＡＬ９、抗Ｃｈｋ、抗Ａ２ａＲ、抗ＩＤＯ、抗ＫＩＲ、抗ＬＡＧ３、抗ＶＩＳＴＡ抗体、または前述の抗体のうちのいずれか２もしくはこれより多くの組み合わせを含む。いくつかの実施形態において、その免疫チェックポイントインヒビターは、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態において、その免疫チェックポイントインヒビターは、抗ＰＤ１、抗ＰＤ−Ｌ１、抗ＣＴＬＡ−４、または前述の抗体のうちのいずれか２もしくはこれより多くの組み合わせを含む。例えば、その抗ＰＤ−１抗体は、ペンブロリズマブ（Ｋｅｙｔｒｕｄａ（登録商標））またはニボルマブ（Ｏｐｄｉｖｏ（登録商標））であり、その抗ＣＴＬＡ−４抗体は、イピリムマブ（Ｙｅｒｖｏｙ（登録商標））である。従って、いくつかの実施形態において、その免疫チェックポイントインヒビターは、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブ、または前述の抗体のうちの２もしくはこれより多くの任意の組み合わせを含む。本明細書で記載される実施例が、限定していることを意味されず、当該分野で公知の任意の免疫チェックポイントインヒビターおよびこれらの任意の組み合わせが本開示に従って使用され得ることは、理解されるべきである。

本明細書で開示される、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物および免疫治療剤を含む組成物は、がんの処置に適している。従って、本開示はまた、腫瘍を有する被験体にこのような組成物を投与して、腫瘍を処置するための方法を包含する。その組成物は、腫瘍増殖を低減するおよび／または腫瘍の再発を防止するために有効な量において上記被験体に投与される。

「投与すること」または「投与」または「投与する」とは、薬理学的に有用である様式で被験体に物質を提供することを意味する。医療分野の当業者に公知の従来法は、処置されるべきがんのタイプまたはがんの部位に依存して、その治療剤または組成物をその被験体に投与するために使用され得る。この組成物はまた、他の従来の経路を介して投与され得る（例えば、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、直腸に、鼻に、口内に、膣に、または埋め込まれたレザバを介して、投与され得る）。用語「非経口的（ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ）」とは、本明細書で使用される場合、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、膀胱内、滑液包内、胸骨内、髄腔内、病変内、および頭蓋内注射または注入の技術を含む。さらに、それは、注射用デポー投与経路を介して（例えば、１ヶ月、３ヶ月、または６ヶ月のデポー注射用または生分解性の物質および方法を使用して）被験体に投与され得る。いくつかの実施形態において、その組成物は、全身に、例えば、静脈内に、投与され得る。いくつかの実施形態において、その組成物は、局所的に投与される。いくつかの実施形態において、その組成物は、埋め込みによって投与される。

いくつかの実施形態において、本開示の組成物は、腫瘍増殖が存在する標的部位に注射され得る。本開示に従って使用され得る注射方法としては、静脈内注射、病変内注射、皮下注射、硝子体内注射、脈絡膜上注射、腹腔内注射、動脈内注射、肝内注射および膀胱内注射が挙げられるが、これらに限定されない。注射が使用される場合には、注射の領域に依存して、中空の針、コーティングされた針、ミニニードルまたはマイクロニードルが使用される。

いくつかの実施形態において、本開示のがん処置方法は、腫瘍を有する被験体に、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含み、ウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む組成物、および免疫治療剤を含む組成物を投与する工程を包含する。

いくつかの実施形態において、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物およびその免疫治療剤は、同時に投与される。「同時に（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔｌｙ）」とは、２またはこれより多くの物質／薬剤（例えば、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物およびその免疫治療剤）を、被験体に同時に投与することを意味する。例えば、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物またはその免疫治療剤を含む組成物は、投与前に、合わされ得る／混合され得る。

いくつかの実施形態において、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物およびその免疫治療剤は、順次に投与される。「順次に（ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌｌｙ）」とは、１つの薬剤を投与することおよび別の薬剤を投与することに、時間的に（２つの別の工程として）隔たりがあることを意味する。いくつかの実施形態において、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、第１に投与され、その免疫治療剤（例えば、チェックポイントインヒビター）は、第２に投与される。いくつかの実施形態において、その免疫治療剤は、第１に投与され、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、第２に投与される。投与する工程のその２工程の間の時間は、少なくとも１分間、少なくとも５分間、少なくとも３０分間、少なくとも１時間、少なくとも５時間、少なくとも１０時間、少なくとも１日間、少なくとも１週間、またはさらに少なくとも１ヶ月間であり得る。その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物およびその免疫治療剤が順次に投与される場合、それらはまた、異なる経路を介してまたは異なる位置に投与され得る。例えば、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、その露出された腫瘍病変へと病変内に、またはその被験体の皮膚へと皮下に投与され得る一方で、その免疫治療剤は、全身に、例えば、静脈内に、投与され得る。

いくつかの実施形態において、本開示のがん処置方法は、ウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された分子（例えば、感光性分子）を含む腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物での処置を受けている最中である腫瘍を有する被験体に、免疫治療剤を投与する工程を包含する。

本開示の感光性分子は、分子のタイプに依存して、赤外線、近赤外線、または紫外線によって活性化され得る。例えば、赤外レーザーまたは近赤外レーザーまたは紫外レーザーは、いくつかの実施形態において、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物の感光性分子を活性化するために使用され得る。そのレーザーによって送達されるエネルギーは、５ジュール（Ｊ）〜約１５０Ｊ、または８Ｊ〜３６Ｊの範囲に及び得る。いくつかの実施形態において、そのレーザーによって送達されるエネルギーは、５Ｊ、６Ｊ、７Ｊ、８Ｊ、９Ｊ、１０Ｊ、１２Ｊ、１４Ｊ、１６Ｊ、１８Ｊ、２０Ｊ、２２Ｊ、２４Ｊ、２６Ｊ、２８Ｊ、３０Ｊ、３２Ｊ、３４Ｊ、３６Ｊ、３８Ｊ、４０Ｊ、５０Ｊ、６０Ｊ、７０Ｊ、８０Ｊ、９０Ｊ、１００Ｊ、１１０Ｊ、１２０Ｊ、１３０Ｊ、１４０Ｊ、または１５０Ｊである。

光またはレーザーは、その感光性分子（またはその腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物）に約５秒間〜約５分間適用され得る。例えば、いくつかの実施形態において、その光またはレーザーは、その感光性分子に、その分子を活性化するために５秒間、１０秒間、１５秒間、２０秒間、２５秒間、３０秒間、３５秒間、４０秒間、４５秒間、５０秒間、または５５秒間適用される。いくつかの実施形態において、そのレーザーは、その感光性分子に、１分間、１．５分間、２分間、２．５分間、３分間、３．５分間、４分間、４．５分間または５分間、適用される。

光またはレーザーは、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を投与してから約３０分間〜約４８時間後に、その感光性分子（またはその腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物）に適用され得る。例えば、いくつかの実施形態において、その光またはレーザーは、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を投与してから３０分間、３５分間、４０分間、４５分間、５０分間または５５分間後に、その感光性分子に適用される。いくつかの実施形態において、その光またはレーザーは、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を投与してから１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、または２４時間後に、その感光性分子に適用される。いくつかの実施形態において、その光またはレーザーは、その腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を投与してから３６時間または４８時間後に、その感光性分子に適用される。

その光またはレーザーは、例えば、その腫瘍の部位に直接適用され得る。

本開示のがん処置方法によれば、感光性分子に結合体化されたウイルスキャプシドタンパク質構築物での処置を受けている最中である腫瘍を有する被験体は、免疫治療剤（例えば、免疫チェックポイントインヒビター）をさらに投与され得る。本明細書で記載される任意の免疫治療剤は、その被験体への投与に適している。処置されるべき腫瘍のタイプに依存して、種々の免疫治療剤が投与され得ることは、理解されるべきである。当業者は、適切な免疫治療剤を同定し得る。いくつかの実施形態において、免疫チェックポイントインヒビター（例えば、抗ＰＤ−１、抗ＰＤ−Ｌ１、および／または抗ＣＴＬＡ−４抗体）が投与される。

本開示の組成物および方法を使用して処置され得る腫瘍のタイプとしては、前悪性新生物（ｐｒｅｍａｌｉｇｎａｎｔ ｎｅｏｐｌａｓｍ）、悪性腫瘍、転移、またはがん性または前がん性とみなされるように制御されない細胞増殖によって特徴づけられる任意の疾患もしくは障害が挙げられるが、これらに限定されない。そのがんは、原発性または転移性のがんであり得る。がんとしては、以下が挙げられるが、これらに限定されない：眼のがん、胆管がん、膀胱がん、胸膜がん、胃がん、卵巣がん、髄膜がん、腎臓がん、脳のがん（膠芽腫および髄芽腫が挙げられる）、乳がん、子宮頚がん、絨毛癌、結腸がん、子宮内膜がん、食道がん、胃がん、血液新生物（急性リンパ性白血病および骨髄性白血病が挙げられる）、多発性骨髄腫、ＡＩＤＳ関連白血病および成人Ｔ細胞白血病リンパ腫、上皮内新生物（ボーエン病およびパジェット病が挙げられる）、肝臓がん、肺がん、リンパ腫（ホジキン病およびリンパ球性リンパ腫が挙げられる）、神経芽腫、口腔がん（扁平上皮癌が挙げられる）、卵巣がん（上皮細胞、間質細胞、生殖細胞および間葉系細胞から生じるものが挙げられる）、膵臓がん、前立腺がん、直腸がん、肉腫（平滑筋肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、および骨肉腫が挙げられる）、皮膚がん（黒色腫、カポジ肉腫、基底細胞がん、および扁平上皮がんが挙げられる）、精巣がん（精上皮腫、非精上皮腫、奇形腫、絨毛癌、間質腫瘍および胚細胞腫瘍（ｇｅｒｍ ｃｅｌｌ ｔｕｍｏｒ）のような胚腫瘍（ｇｅｒｍｉｎａｌ ｔｕｍｏｒ）が挙げられる）、甲状腺がん（甲状腺の腺癌（ｔｈｙｒｏｉｄ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ）および髄様癌が挙げられる）、および腎がん（腺癌およびウィルムス腫瘍が挙げられる）。一般に遭遇するがんとしては、乳がん、前立腺がん、肺がん、卵巣がん、結腸直腸がん、および脳のがんが挙げられる。いくつかの実施形態において、その腫瘍は、黒色腫、癌腫、肉腫、またはリンパ腫である。

いくつかの実施形態において、その腫瘍は転移しており、皮膚または表面に露出した腫瘍病変（例えば、メルケル細胞癌、頭頚部扁平上皮癌、基底細胞癌、乳癌および転移性の乳癌、皮膚Ｔ細胞リンパ腫（セザリー症候群）ならびに肉腫）を有する。いくつかの実施形態において、その腫瘍は、外科的な介入なしにアクセス可能である（例えば、頭部、頸部、子宮頸部、喉頭または皮膚に位置する腫瘍）。いくつかの実施形態において、その腫瘍は、がん性または悪性である。いくつかの実施形態において、その腫瘍は、外科的なまたは内視鏡による介入によってアクセス可能にされる（光／レーザーにアクセス可能にされる）。いくつかの実施形態において、その腫瘍は転移性である。いくつかの実施形態において、その腫瘍は、原発性腫瘍であり、転移している。いくつかの実施形態において、その転移性のがんは、皮膚または表面に露出した腫瘍病変を有する。いくつかの実施形態において、その腫瘍は、赤外レーザーでの処置にアクセス可能な病変を有する。いくつかの実施形態において、その転移性のがんは、眼の中に腫瘍病変または転移を有する。いくつかの実施形態において、その腫瘍は、眼の腫瘍であり、肝臓に転移している。その腫瘍が眼の腫瘍であるか、または眼に転移している場合、その眼の腫瘍は、硝子体、脈絡膜外腔（ｃｈｏｒｏｉｄａｌ ｓｐａｃｅ）、虹彩、毛様体、強膜、中心窩、網膜、視神経乳頭、または視神経に位置する。

腫瘍を有する被験体は、いくつかの実施形態において、哺乳動物（例えば、ヒト）である。

本開示の組成物および／または治療剤は、がん増殖を低減または防止するために有効な量でその被験体に投与される。「有効（な）量」とは、本明細書で使用される場合、単独で、または１もしくはこれより多くの他の薬剤との組み合わせてのいずれかで、その被験体に対して治療効果を付与するために必要とされる各薬剤の量をいう。有効量は、当業者によって認識されるように、処置されている特定の状態、その状態の重篤度、個々の被験体のパラメーター（年齢、健康状態、サイズ、性別および体重が挙げられる）、処置の継続時間、同時治療（あるとすれば）の性質、特定の投与経路ならびに医療関係者（ｈｅａｌｔｈ ｐｒａｃｔｉｔｉｏｎｅｒ）の知識および見解の範囲内の類似の要因に依存して、変動する。これらの要因は、当業者に周知であり、慣用的に過ぎない実験で対処され得る。個々の構成要素またはその組み合わせの最大用量、すなわち、妥当な医学的判断に従うその最高の安全な用量が使用されることは、概して好ましい。しかし、被験体が、医学的理由、心理的理由から、または実質的には任意の他の理由から、より低い用量または耐用量に固執し得ることは、当業者によって理解される。

経験的考慮事項（例えば、半減期）は一般に、その投与量の決定に寄与する。例えば、ヒト免疫系と適合性である薬剤（例えば、ヒト化抗体または完全ヒト抗体に由来する領域を含む薬剤）は、その化合物の半減期を長期化する、およびその化合物がその宿主の免疫系によって攻撃されるのを防止するために、使用され得る。投与頻度は、治療の過程にわたって決定および調節され得、概して、疾患の処置および／または抑制および／または好転および／または遅延に基づくが、必ずしもそうではない。あるいは、化合物の持続性の連続放出製剤が適切であり得る。徐放を達成するための種々の製剤およびデバイスは、当該分野で公知である。

いくつかの実施形態において、投与量は、毎日、２日ごと、３日ごと、４日ごと、５日ごと、または６日ごとである。いくつかの実施形態において、投与頻度は、毎週、２週間ごと、４週間ごと、５週間ごと、６週間ごと、７週間ごと、８週間ごと、９週間ごと、または１０週間ごとに１回；または毎月、２ヶ月ごと、もしくは３ヶ月ごと、またはより長い期間ごとに１回である。この治療の進捗は、従来の技術およびアッセイによって容易にモニターされる。その投与レジメン（使用される化合物を含む）は、時間を経て変動し得る。

いくつかの実施形態において、通常の体重の成体被験体は、約０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇの範囲におよぶ用量が投与され得る。いくつかの実施形態において、その用量は、１〜２００ｍｇの間である。その特定の投与量レジメン、すなわち、用量、タイミングおよび反復は、その特定の被験体およびその被験体の病歴、ならびに薬剤の特性（例えば、その薬剤の半減期および当該分野で周知の他の考慮事項）に依存する。

本開示の目的のために、本明細書で記載されるとおりの治療剤の適切な投与量は、使用されるその特定の薬剤（またはその組成物）、製剤および投与経路、その疾患のタイプおよび重篤度、その化合物が防止目的で投与されるのかまたは治療目的で投与されるのか、以前の治療、その被験体の臨床歴およびアンタゴニストへの応答、ならびに主治医の判断に依存する。代表的には、臨床医は、所望の結果を達成する投与量に達するまで、薬剤を投与する。１またはこれより多くの薬剤の投与は、例えば、そのレシピエントの健康状態、投与目的が治療できであるのかまたは予防的であるのか、および当業者に公知の他の要因に依存して、連続的または間欠的であり得る。薬剤の投与は、事前に選択された期間にわたって本質的に連続的であってもよいし、例えば、疾患を発生させる前、その間、またはその後のいずれかに、一連の間隔を空けた用量にあってもよい。

本明細書で使用される場合、用語「処置すること」とは、薬剤またはその薬剤を含む組成物を、疾患、その疾患の症状、またはその疾患に対する素因を有する被験体に、その疾患、その疾患の症状、またはその疾患に対する素因を治癒する、回復させる、軽減する、緩和する、変化させる、治す、好転させる（ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ）、改善する、または影響を及ぼす目的をもって、適用または投与することをいう。

疾患を軽減することは、その疾患の発生もしくは進行を遅延させること、または疾患の重篤度を低減することを包含する。その疾患を軽減することは、必ずしも治癒的な結果を要しない。そこで使用される場合、疾患の発生を「遅延させる」とは、その疾患の進行を先送りする、妨げる、減速する、遅らせる、安定化する、および／または延期することを意味する。この遅延は、病歴および／または処置されている個体に依存して、種々の時間の長さであり得る。疾患の発生を「遅延させる」もしくは軽減するか、またはその疾患の始まりを遅延させる方法は、その方法を使用しない場合と比較して、所定の時間枠の中でその疾患の１もしくはこれより多くの症状を発生させる確率を低減するおよび／または所定の時間枠の中でその症状の程度を低減する方法である。このような比較は、代表的には、統計的に有意な結果を与えるために十分な被験体数を使用する臨床研究に基づく。

疾患の「発生」または「進行」とは、その疾患の最初の発現および／またはその疾患の後に起こる進行を意味する。その疾患の発生は、当該分野で周知のとおりの標準的な臨床技術を使用して検出可能かつ評価され得る。しかし、発生とは、検出不能であり得る進行にも言及する。この開示の目的のために、発生または進行とは、その症状の生物学的経過に言及する。「発生」は、出現、再発、および始まりを包含する。本明細書で使用される場合、疾患の「始まり（ｏｎｓｅｔ）」または「出現（ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ）」とは、最初の始まりおよび／または再発を包含する。

本開示はまた、以下に挙げられる段落を包含する：
１．以下：
（ａ）腫瘍を有する被験体に、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含む組成物を投与する工程であって、上記構築物は、上記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む、工程；および
（ｂ）腫瘍を有する上記被験体に、免疫チェックポイントインヒビターを含む組成物を投与する工程、
を包含する、方法。

２．上記ウイルスキャプシドタンパク質は、ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質である、段落１に記載の方法。

３．上記ウイルスキャプシドタンパク質は、非ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質である、段落１に記載の方法。

４．上記非ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質は、ウシパピローマウイルスキャプシドタンパク質またはワタオウサギパピローマウイルス（ｃｏｔｔｏｎｔａｉｌ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ）タンパク質である、段落３に記載の方法。

５．上記ウイルスキャプシドタンパク質は、パピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質、またはパピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質およびパピローマウイルスＬ２キャプシドタンパク質の組み合わせを含む、段落１〜４のいずれか１つに記載の方法。

６．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、カプソマーまたはウイルス様粒子である、段落１〜５のいずれか１つに記載の方法。

７．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、１０〜１０００の感光性分子を含み、必要に応じて、上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、２００〜５００の感光性分子を含む、段落１〜６のいずれか１つに記載の方法。

８．上記感光性分子は、蛍光色素、赤外吸収（ＩＲ）色素、近赤外吸収（ＮＩＲ）色素、ポルフィリン、クロロフィル、クロリン、フタロシアニン、バクテリオクロリン、テキサフィリン、ポルフィマーナトリウム、ベルテポルフィン、テモポルフィン、タラポルフィン、メチレンブルー、アミノレブリン酸、またはこれらの組み合わせを含む、段落１〜７のいずれか１つに記載の方法。

９．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、改変体または改変されたＨＰＶ １６／３１ Ｌ１キャプシドタンパク質および野生型ＨＰＶ Ｌ２キャプシドタンパク質からアセンブリされる７２カプソマーを含むウイルス様粒子であり、上記感光性分子は、ＩＲｄｙｅ ７００ＤＸを含む、段落１〜８のいずれか１つに記載の方法。

１０．上記免疫チェックポイントインヒビターは、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＧＡＬ９、Ｃｈｋ１またはＡ２ａＲの、同族結合パートナーへの結合を阻害する、段落１〜９のいずれか１つに記載の方法。

１１．上記免疫チェックポイントインヒビターは抗体である、段落１０に記載の方法。

１２．上記抗体は、モノクローナル抗体である、段落１１に記載の方法。

１３．上記抗体は、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＴＩＭ３抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ４抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＧＡＬ９抗体、抗Ｃｈｋ１抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、および前述の抗体のうちのいずれか２またはこれより多くの組み合わせから選択される、段落１〜１２のいずれか１つに記載の方法。

１４．上記抗体は、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブおよび前述の抗体のうちの２またはこれより多くの任意の組み合わせから選択される、段落１３に記載の方法。

１５．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物および上記免疫チェックポイントインヒビターは、同時に投与される、段落１〜１４のいずれか１つに記載の方法。

１６．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物および上記免疫チェックポイントインヒビターは、順次に投与される、段落１〜１４のいずれか１つに記載の方法。

１７．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、上記免疫チェックポイントインヒビターが上記被験体に投与される前に上記被験体に投与される、段落１６に記載の方法。

１８．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、腫瘍または腫瘍病変へと局所的に投与され、上記免疫チェックポイントインヒビターは、全身に投与される、段落１６および１７に記載の方法。

１９．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物および／または上記免疫チェックポイントインヒビターは、注射によって、局所的に、または埋め込みによって投与される、段落１〜１８のいずれか１つに記載の方法。

２０．上記注射は、病変内注射、皮下注射、硝子体内注射、脈絡膜上注射、腹腔内注射、動脈内注射、肝内注射、膀胱内注射、またはこれらの任意の組み合わせである、段落１９に記載の方法。

２１．上記感光性分子を、赤外レーザー、近赤外レーザー、または紫外レーザーを使用して活性化する工程をさらに包含する、段落１〜２０のいずれか１つに記載の方法。

２２．上記腫瘍は、がん性である、段落１〜２１のいずれか１つに記載の方法。

２３．上記腫瘍は、転移性である、段落２３に記載の方法。

２４．上記腫瘍は、黒色腫、癌腫、肉腫またはリンパ腫である、段落１〜２３のいずれか１つに記載の方法。

２５．上記腫瘍は、赤外レーザーでの処置にアクセス可能な病変を有する、段落１〜２４のいずれか１つに記載の方法。

２６．上記腫瘍は、メルケル細胞癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、転移性乳癌、皮膚Ｔ細胞リンパ腫または肉腫である、段落２５に記載の方法。

２７．上記腫瘍は、原発性腫瘍であり、転移している、段落１〜２５のいずれか１つに記載の方法。

２８．上記腫瘍は、肝臓、膀胱、眼、頭部、頸部、子宮頸部、喉頭、皮膚、肺、胸膜、膵臓、胃、食道、結腸、胸部、卵巣、前立腺、精巣、脳、髄膜、腎臓に位置するおよび／またはそれらに転移している、段落１〜２７のいずれか１つに記載の方法。

２９．上記被験体はヒトである、段落１〜２７のいずれか１つに記載の方法。

３０．腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物での処置を受けている最中である腫瘍を有する被験体に、免疫チェックポイントインヒビターを投与する工程を包含する方法であって、上記構築物は、上記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む、方法。

３１．免疫チェックポイントインヒビターおよび腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含む組成物であって、上記構築物は、上記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む、組成物。

３２．上記ウイルスキャプシドタンパク質は、ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質である、段落３１に記載の組成物。

３３．上記ウイルスキャプシドタンパク質は、非ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質である、段落３１に記載の組成物。

３４．上記非ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質は、ウシパピローマウイルスキャプシドタンパク質またはワタオウサギパピローマウイルスタンパク質である、段落３３に記載の組成物。

３５．上記ウイルスキャプシドタンパク質は、パピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質、またはパピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質およびパピローマウイルスＬ２キャプシドタンパク質の組み合わせを含む、段落３１〜３４のいずれか１つに記載の組成物。

３６．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、カプソマーまたはウイルス様粒子である、段落３１〜３５のいずれか１つに記載の組成物。

３７．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、１０〜１０００の感光性分子を含む、段落３１〜３６のいずれか１つに記載の組成物。

３８．上記感光性分子は、蛍光色素、赤外吸収（ＩＲ）色素、近赤外吸収（ＮＩＲ）色素、ポルフィリン、クロロフィル、クロリン、フタロシアニン、バクテリオクロリン、テキサフィリン、ポルフィマーナトリウム、ベルテポルフィン、テモポルフィン、タラポルフィン、メチレンブルー、アミノレブリン酸、またはこれらの組み合わせを含む、段落３１〜３７のいずれか１つに記載の組成物。

３９．上記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、改変体または改変されたＨＰＶ １６／３１ Ｌ１キャプシドタンパク質および野生型ＨＰＶ Ｌ２キャプシドタンパク質からアセンブリされた７２カプソマーを含むウイルス様粒子であり、上記感光性分子は、ＩＲｄｙｅ ７００ＤＸを含む、段落３１〜３８のいずれか１つに記載の組成物。

４０．上記免疫チェックポイントインヒビターは、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＧＡＬ９、Ｃｈｋ１またはＡ２ａＲの、同族結合パートナーへの結合を阻害する、段落３１〜３９のいずれか１つに記載の組成物。

４１．上記免疫チェックポイントインヒビターは、抗体である、段落４０に記載の組成物。

４２．上記抗体は、モノクローナル抗体である、段落４１に記載の組成物。

４３．上記抗体は、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＴＩＭ３抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ４ 抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＧＡＬ９抗体、抗Ｃｈｋ１抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、および前述の抗体のうちのいずれか２またはこれより多くの組み合わせから選択される、段落３１〜４２のいずれか１つに記載の組成物。

４４．上記抗体は、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブおよび前述の抗体のうちの２またはこれより多くの任意の組み合わせから選択される、段落４３に記載の組成物。

本開示は、以下の実施例によってさらに例証され、その実施例は、さらなる限定として決して解釈されるべきではない。

実施例１：静脈内投与したＶＬＰ結合体を使用する抗腫瘍免疫応答の有効性および誘導
方法． アルビノＣ５７Ｂｌ／６マウスに、肺がんモデルの一部として５×１０^５個のＴＣ−１細胞を皮下注射した。腫瘍が約１００〜３００ｍｍ^３に達したときに（０日目とした）、その動物に、２５μｇ ＶＬＰ結合体（ＩＲＤｙｅ（登録商標）７００ＤＸに結合体化した腫瘍標的化ＶＬＰ）またはＰＢＳを、静脈内注射を介して投与し、続いて、１２時間後に腫瘍標的化近ＩＲ光処置（５０Ｊ／ｃｍ^２；６９０ｎｍ）を行った。このプロトコルを３日目に反復した。腫瘍特異的Ｔ細胞応答を測定するために、０日目および１７日目に採血した。腫瘍のサイズが＞１５００ｍｍ^３に達したときに、動物を安楽死させた。

結果． ＰＢＳ処置動物と比較して、ＶＬＰ結合体／光処置した動物では、生存が全体的に有意に増大した。全てのコントロール動物は、２１日目に安楽死させ、メジアン生存は、１１日であった。ＶＬＰ結合体／光処置した動物は、２４日間のメジアンで生存し、２匹の動物は、完全な腫瘍退縮を示した（図３および表２）。腫瘍特異的ＣＤ８＋ Ｔ細胞（Ｅ７テトラマー陽性およびＥ７ペプチド刺激後のＩＦＮγ分泌）を、これらの同じ２匹の動物において検出した。これは、ＶＬＰ結合体がネオ腫瘍抗原に対する抗腫瘍免疫を誘発し得ることを示した（図４）。より小さな腫瘍を有する動物は、腫瘍増殖を制御し、Ｅ７特異的免疫応答が１７日目に検出された。処置の時に、その腫瘍負荷は、代表的な実験におけるよりも高く、その２匹の応答している動物はまた、処置の開始時に最小の腫瘍を有した。これは、処置閾値が存在し得ることを示した。光処置単独では、無効であることが示された（図５）。従って、攻撃的な肺がんの動物モデル（免疫適格）において、その組み合わされた処置は、良好な有効性（２つの完全奏功）を示した。テトラマー染色およびＥ７ペプチドでの刺激に応じたサイトカイン分泌は、抗腫瘍免疫の開始を示した。

実施例２：新たな製剤緩衝液中でＩＶ投与したＶＬＰ結合体を使用する抗腫瘍免疫応答の有効性および誘導
方法． アルビノＣ５７Ｂｌ／６マウスに、肺がんモデルの一部として５×１０^５個のＴＣ−１細胞を皮下注射した。腫瘍が約５０ｍｍ^３に達したときに（０日目とした）、その動物に、１００μｇ ＶＬＰ結合体またはＰＢＳを、静脈内注射を介して投与し、続いて、１２時間後および２４時間後に腫瘍指向性近ＩＲ光処置（５０Ｊ／ｃｍ^２；６９０ｎｍ）を行った。２つのさらなるアームを含めた（処置なしおよび光なしのＶＬＰ結合体）。このプロトコルを、３日目に反復した。腫瘍特異的Ｔ細胞応答を測定するために、０日目および１７日目に採血した。腫瘍のサイズが＞１５００ｍｍ^３に達したときに、動物を安楽死させた。

ナイーブマウスおよび腫瘍退縮を示すマウスを、それらの対側の側腹部に５×１０^５個のＴＣ−１細胞を皮下でチャレンジし、腫瘍負荷を１ヶ月間測定した。ＴＣ−１細胞で再チャレンジした動物は、再チャレンジ後に腫瘍増殖を示さなかった一方で、再チャレンジした全てのコントロール動物は、腫瘍増殖を有した。

結果． 攻撃的な肺がんの動物モデル（免疫適格）において全ての他のアームと比較して、ＶＬＰ結合体／光群において生存は、全体的に有意に増大した（図２および表２）。非処置群における１匹の動物が、自然発生的な退縮を示した。２匹のＶＬＰ結合体／光マウスは、完全な退縮を示し、１匹のマウスは、その腫瘍のサイズが縮小し、増殖も消えもしないという点で、制御された増殖を示した。従って、その組み合わされた処置は、良好な有効性を示した。その生成される抗腫瘍応答は、チャレンジの際に、新たな腫瘍増殖（ｔｕｍｏｒ ｏｕｔｇｒｏｗｔｈ）を防止できた。

Ｅ７テトラマー染色およびＩＦＮγ分泌を、２匹の動物において検出できた。しかし、そのバックグラウンド染色は高かったので、低い陽性値がマスクされた可能性があった。４匹の残りのマウスにその後、３匹のナイーブマウスと並行して、ＴＣ−１腫瘍をチャレンジした。そのナイーブマウスを腫瘍負荷に起因して安楽死させなければならなかった時までに、チャレンジしたマウスの３／４は、腫瘍なしのままであった。腫瘍チャレンジに生き残らなかった唯一の動物は、腫瘍制御（増殖なし）を示したマウスであった。そのチャレンジ腫瘍が増殖しなかった；しかし、その原発性腫瘍は、もはや制御されず、再び増殖し始めた。これらのデータは、免疫学的応答がなされ、原発性腫瘍を除去できたのみならず、後の腫瘍の発生をも防止できたことを示す。ＶＬＰ結合体緩衝液中での変化は、ＩＶ注射後の低下した安定性をもたらすこともあり、より少ない応答者をもたらし得る。

実施例３：腫瘍特異的Ｔ細胞の生成を増強する、ＶＬＰ結合体と既存のがん治療との組み合わせ
背景． がん治療のいくつかのクラスは、腫瘍細胞を、宿主免疫応答によってしばしば無視される、アポトーシス死に向かって駆り立てる。さらに、多くの腫瘍は、宿主による免疫認識から巧みに逃げるように進化している。これに鑑みて、新世代の免疫モジュレーター／チェックポイントインヒビターが導入されている。すなわち、Ｔ細胞および腫瘍細胞表面抗原に対する抗体は、細胞間を通る阻害性シグナルをブロックする（例えば、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＣＴＬＡ−４）（Ｍｅｌｅｒｏ， ２０１５）。データは、ＶＬＰ結合体が、急性の壊死におそらく起因して、抗腫瘍免疫を誘導し得ることを示す。その結合体と、Ｔ細胞／腫瘍相互作用を増強する処置モダリティーとを合わせると、原発性腫瘍に対するその有効性が有意に増大し、全身性の抗腫瘍免疫がもたらされるので、同定されていない遠隔の転移が潜在的に標的化され、疾患の再発が防止される。

方法． そのＴＣ−１腫瘍モデルを使用して、ＶＬＰ結合体／光処置を、抗ＰＤ−１、抗ＰＤ−Ｌ１および／または抗ＣＴＬＡ−４（または適切である場合には他の分子）と組み合わせる。コントロールアームは、これらの抗体またはＶＬＰ結合体単独を受ける動物を含む。ＶＬＰ結合体／光処置は、処置直後に、腫瘍微小環境に対して高度に破壊的である。これは、腫瘍特異的Ｔ細胞応答を生成するために推定２週間かかるという知識と組み合わせれば、腫瘍応答に対する相乗効果を評価するために、免疫チェックポイントインヒビターがＶＬＰ結合体／光処置の前および／または後に適用されることを意味する。処置後１週間に２回の間隔で生存および循環中の腫瘍特異的Ｔ細胞の測定が読み取られる。ＶＬＰ結合体 ＋ チェックポイントインヒビター処置は、単一の処置として、その同じチェックポイントインヒビターまたはそのＶＬＰ結合体を比較した場合、腫瘍増殖を制御し、抗腫瘍免疫を誘導するにおいてより有効である（図６）。

実施例４： 皮下モデル
マウスに、ＴＣ−１（肺）またはＭＢ４９（膀胱）がん細胞（１〜５×１０^５個）のいずれかを移植する。腫瘍が約５０ｍｍ^３に達したとき（およそ１０日間）、それらに、ｉ．ｐ．の１００μｇ 抗体（αＣＴＬＡ−４、αＰＤ−Ｌ１またはαＰＤ−１およびその対応するアイソタイプコントロール）、ｉ．ｖ．の１００〜２００μｇ ＶＬＰの表面における一級アミンに結合体化された感光性分子（ＩＲＤｙｅ（登録商標）７００ＤＸ）を有する腫瘍標的化ウイルス様粒子（ＶＬＰ）（薬物）、１２時間後に、６９０ｎｍ 光（５０Ｊ／ｃｍ^２）を与える（図７）。

抗体を、２日間の間隔をあけて２回より多く投与する。

薬物および６９０ｎｍ 光曝露を、２４時間後に反復する。

薬物／光および抗体処置の第２回を、１週間後に投与し得る。

抗体 − １００μｇをｉ．ｐ．で送達；ＢｉｏＸＣｅｌｌから入手
αＣＴＬＡ−４ − クローン９Ｄ９
αＰＤ−Ｌ１ − クローン１０Ｆ．９Ｇ２
αＰＤ−１ − クローンＲＭＰ１−１４
アイソタイプコントロール

参考文献
Ｆｅｌｔｋａｍｐ ＭＣ， Ｓｍｉｔｓ ＨＬ， Ｖｉｅｒｂｏｏｍ ＭＰ， Ｍｉｎｎａａｒ ＲＰ， ｄｅ Ｊｏｎｇｈ ＢＭ， Ｄｒｉｊｆｈｏｕｔ ＪＷ， ｔｅｒ Ｓｃｈｅｇｇｅｔ Ｊ， Ｍｅｌｉｅｆ ＣＪ， Ｋａｓｔ ＷＭ． Ｖａｃｃｉｎａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｅｐｉｔｏｐｅ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ａｇａｉｎｓｔ ａ ｔｕｍｏｒ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ １６−ｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄ ｃｅｌｌｓ． Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ． １９９３ Ｓｅｐ；２３（９）：２２４２−９．
Ｌｉｎ ＫＹ， Ｇｕａｒｎｉｅｒｉ ＦＧ， Ｓｔａｖｅｌｅｙ−Ｏ’Ｃａｒｒｏｌｌ ＫＦ， Ｌｅｖｉｔｓｋｙ ＨＩ， Ａｕｇｕｓｔ ＪＴ， Ｐａｒｄｏｌｌ ＤＭ， Ｗｕ ＴＣ． Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｔｕｍｏｒｓ ｗｉｔｈ ａ ｎｏｖｅｌ ｖａｃｃｉｎｅ ｔｈａｔ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｌａｓｓ ＩＩ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｕｍｏｒ ａｎｔｉｇｅｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． １９９６ Ｊａｎ １；５６（１）：２１−６．
Ｍｅｌｅｒｏ Ｉ， Ｂｅｒｍａｎ ＤＭ， Ａｚｎａｒ ＭＡ， Ｋｏｒｍａｎ ＡＪ， Ｐeｒｅｚ Ｇｒａｃｉａ ＪＬ， Ｈａａｎｅｎ Ｊ． Ｅｖｏｌｖｉｎｇ ｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｔｏ ｃｏｍｂａｔ ｃａｎｃｅｒ． Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ． ２０１５ Ａｕｇ；１５（８）：４５７−７２．

本明細書で開示される全ての参考文献、特許および特許出願は、各々が引用され、場合によっては、その文書の全体を包含し得るその主題に関して参考として援用される。

不定冠詞「１つの、ある（ａ）」および「１つの、ある（ａｎ）」とは、本明細書および特許請求の範囲において使用される場合、明らかにそうでないことが示されなければ、「少なくとも１（ａｔ ｌｅａｓｔ ｏｎｅ）」を意味することが理解されるべきである。用語「または（ｏｒ）」は一般に、状況が明らかに別のことを示さなければ、その意味において、「および／または（ａｎｄ／ｏｒ）」を含めて使用される。

明らかにそうでないことが示されなければ、１より多くの工程または行為を含む、本明細書で特許請求される任意の方法において、その方法の工程または行為の順序が、その方法の工程または行為が記載される順序に必ずしも限定されないことは、理解されるべきである。

特許請求の範囲、および上記の明細書において、全ての移行句（例えば、「包含する、含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む、包含する（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「有する（ｃａｒｒｙｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む、含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「包含する、関わる（ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ）」、「保持する（ｈｏｌｄｉｎｇ）」、「から構成される（ｃｏｍｐｏｓｅｄ ｏｆ）」など）は、開放系である（が挙げられるが、これらに限定されない）と理解されるべきである。移行句「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」および「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」のみが、それぞれ、米国特許商標庁の特許審査基準、セクション２１１１．０３に示されるとおり、閉鎖系または半閉鎖系の移行句であるものとする。全ての開放系の移行句が、閉鎖系または半閉鎖系の移行句で置き換えられ得ることはまた、理解されるべきである。従って、用語「含む、包含する」は、「からなる」または「から本質的になる」で置き換えられ得る。

Claims (44)

1. 以下：
   （ａ）腫瘍を有する被験体に、腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含む組成物を投与する工程であって、前記構築物は、前記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む、工程；および
   （ｂ）腫瘍を有する前記被験体に、免疫チェックポイントインヒビターを含む組成物を投与する工程、
   を包含する、方法。
2. 前記ウイルスキャプシドタンパク質は、ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質である、請求項１に記載の方法。
3. 前記ウイルスキャプシドタンパク質は、非ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質である、請求項１に記載の方法。
4. 前記非ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質は、ウシパピローマウイルスキャプシドタンパク質またはワタオウサギパピローマウイルスタンパク質である、請求項３に記載の方法。
5. 前記ウイルスキャプシドタンパク質は、パピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質またはパピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質およびパピローマウイルスＬ２キャプシドタンパク質の組み合わせを含む、請求項１に記載の方法。
6. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、カプソマーまたはウイルス様粒子である、請求項１に記載の方法。
7. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、１０〜１０００の感光性分子を含み、必要に応じて、前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、２００〜５００の感光性分子を含む、請求項１に記載の方法。
8. 前記感光性分子は、蛍光色素、赤外吸収（ＩＲ）色素、近赤外吸収（ＮＩＲ）色素、ポルフィリン、クロロフィル、クロリン、フタロシアニン、バクテリオクロリン、テキサフィリン、ポルフィマーナトリウム、ベルテポルフィン、テモポルフィン、タラポルフィン、メチレンブルー、アミノレブリン酸、またはこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の方法。
9. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、改変体または改変されたＨＰＶ １６／３１ Ｌ１キャプシドタンパク質および野生型ＨＰＶ Ｌ２キャプシドタンパク質からアセンブリされた７２カプソマーを含むウイルス様粒子であり、前記感光性分子は、ＩＲｄｙｅ ７００ＤＸを含む、請求項１に記載の方法。
10. 前記免疫チェックポイントインヒビターは、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＧＡＬ９、Ｃｈｋ１またはＡ２ａＲの、同族結合パートナーへの結合を阻害する、請求項１に記載の方法。
11. 前記免疫チェックポイントインヒビターは抗体である、請求項１０に記載の方法。
12. 前記抗体は、モノクローナル抗体である、請求項１１に記載の方法。
13. 前記抗体は、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＴＩＭ３抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ４抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＧＡＬ９抗体、抗Ｃｈｋ１抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、および前述の抗体のうちのいずれか２またはこれより多くの組み合わせから選択される、請求項１に記載の方法。
14. 前記抗体は、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブおよび前述の抗体のうちの２またはこれより多くの任意の組み合わせから選択される、請求項１３に記載の方法。
15. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物および前記免疫チェックポイントインヒビターは、同時に投与される、請求項１に記載の方法。
16. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物および前記免疫チェックポイントインヒビターは、順次に投与される、請求項１に記載の方法。
17. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、前記免疫チェックポイントインヒビターが前記被験体に投与される前に、前記被験体に投与される、請求項１６に記載の方法。
18. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、腫瘍または腫瘍病変に局所投与され、前記免疫チェックポイントインヒビターは全身投与される、請求項１６に記載の方法。
19. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物および／または前記免疫チェックポイントインヒビターは、注射によって、局所的に、または埋め込みによって、投与される、請求項１に記載の方法。
20. 前記注射は、病変内注射、皮下注射、硝子体内注射、脈絡膜上注射、腹腔内注射、動脈内注射、肝内注射、膀胱内注射、またはこれらの任意の組み合わせである、請求項１９に記載の方法。
21. 前記感光性分子を、赤外レーザー、近赤外レーザー、または紫外レーザーを使用して活性化する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
22. 前記腫瘍はがん性である、請求項１に記載の方法。
23. 前記腫瘍は転移性である、請求項２３に記載の方法。
24. 前記腫瘍は、黒色腫、癌腫、肉腫またはリンパ腫である、請求項１に記載の方法。
25. 前記腫瘍は、赤外レーザーでの処置にアクセス可能な病変を有する、請求項１に記載の方法。
26. 前記腫瘍は、メルケル細胞癌、扁平上皮癌、基底細胞癌、転移性乳癌、皮膚Ｔ細胞リンパ腫または肉腫である、請求項２５に記載の方法。
27. 前記腫瘍は、原発性腫瘍であり、転移している、請求項１に記載の方法。
28. 前記腫瘍は、肝臓、膀胱、眼、頭部、頸部、子宮頸部、喉頭、皮膚、肺、胸膜、膵臓、胃、食道、結腸、胸部、卵巣、前立腺、精巣、脳、髄膜、腎臓に位置するおよび／またはそれらに転移している、請求項１に記載の方法。
29. 前記被験体はヒトである、請求項１に記載の方法。
30. 腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物での処置を受けている最中である腫瘍を有する被験体に、免疫チェックポイントインヒビターを投与する工程を包含する方法であって、前記構築物は、前記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む、方法。
31. 免疫チェックポイントインヒビターおよび腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物を含む組成物であって、前記構築物は、前記構築物のウイルスキャプシドタンパク質に結合体化された感光性分子を含む、組成物。
32. 前記ウイルスキャプシドタンパク質は、ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質である、請求項３１に記載の組成物。
33. 前記ウイルスキャプシドタンパク質は、非ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質である、請求項３１に記載の組成物。
34. 前記非ヒトパピローマウイルスキャプシドタンパク質は、ウシパピローマウイルスキャプシドタンパク質またはワタオウサギパピローマウイルスタンパク質である、請求項３３に記載の組成物。
35. 前記ウイルスキャプシドタンパク質は、パピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質またはパピローマウイルスＬ１キャプシドタンパク質およびパピローマウイルスＬ２キャプシドタンパク質の組み合わせを含む、請求項３１に記載の組成物。
36. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、カプソマーまたはウイルス様粒子である、請求項３１に記載の組成物。
37. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、１０〜１０００の感光性分子を含む、請求項３１に記載の組成物。
38. 前記感光性分子は、蛍光色素、赤外吸収（ＩＲ）色素、近赤外吸収（ＮＩＲ）色素、ポルフィリン、クロロフィル、クロリン、フタロシアニン、バクテリオクロリン、テキサフィリン、ポルフィマーナトリウム、ベルテポルフィン、テモポルフィン、タラポルフィン、メチレンブルー、アミノレブリン酸、またはこれらの組み合わせを含む、請求項３１に記載の組成物。
39. 前記腫瘍標的化ウイルスキャプシドタンパク質構築物は、改変体または改変されたＨＰＶ １６／３１ Ｌ１キャプシドタンパク質および野生型ＨＰＶ Ｌ２キャプシドタンパク質からアセンブリされた７２カプソマーを含むウイルス様粒子であり、前記感光性分子は、ＩＲｄｙｅ ７００ＤＸを含む、請求項３１に記載の組成物。
40. 前記免疫チェックポイントインヒビターは、ＣＴＬＡ−４、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＧＡＬ９、Ｃｈｋ１またはＡ２ａＲの、同族結合パートナーへの結合を阻害する、請求項３１に記載の組成物。
41. 前記免疫チェックポイントインヒビターは、抗体である、請求項４０に記載の組成物。
42. 前記抗体は、モノクローナル抗体である、請求項４１に記載の組成物。
43. 前記抗体は、抗ＣＴＬＡ−４抗体、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、抗ＴＩＭ３抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、抗Ｂ７−Ｈ４ 抗体、抗ＢＴＬＡ抗体、抗ＧＡＬ９抗体、抗Ｃｈｋ１抗体、抗Ａ２ａＲ抗体、および前述の抗体のうちのいずれか２またはこれより多くの組み合わせから選択される、請求項３１に記載の組成物。
44. 前記抗体は、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、イピリムマブおよび前述の抗体のうちの２またはこれより多くの任意の組み合わせから選択される、請求項４３に記載の組成物。