JP2022525535A

JP2022525535A - 単純ヘルペスウイルス感染の予防及び処置のためのモノクローナル抗体

Info

Publication number: JP2022525535A
Application number: JP2021556422A
Authority: JP
Inventors: シーヘロルド，ベッツィ; ケルソー，ガーネット; 雅征倉岡; バーン，クレア; アール，ジュニアジェイコブズ，ウィリアム
Original assignee: Albert Einstein College of Medicine
Current assignee: Albert Einstein College of Medicine
Priority date: 2019-03-19
Filing date: 2020-03-19
Publication date: 2022-05-17
Also published as: CN119899260A; AU2020242042A1; EP3941524A1; WO2020191181A1; KR20210141948A; CN113661176A; IL286415A; CN113661176B; WO2020191181A9; CA3133862A1; US20220162291A1

Abstract

単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）に結合する抗体及び抗原結合断片、抗体及び／又は抗原結合断片を用いる使用方法並びに抗体及び／又は抗原結合断片を含む医薬組成物が提供される。

Description

関連出願の相互参照
本出願は、その内容が参照により全体として本明細書に組み込まれる、２０１９年３月１９日に出願された米国仮特許出願第６２／８２０，４９５号明細書に対する優先権を主張する。

政府支援の記述
本発明は、ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈにより授与された助成金番号ＡＩ１１７３２１の下で政府支援によりなされた。政府は、本発明における一定の権利を有する。

ヘルペスウイルス感染は、ヒト集団における大きい健康上の問題である。現在、活動性感染に対するいくらかの活性を有する小分子抗ウイルス処置が存在するが、ＨＳＶ－１又はＨＳＶ－２感染に対する市販のワクチンは、存在しない。さらに、ＨＳＶ処置に有効なモノクローナル抗体は、存在しない。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＳＦＴＴＹＤ（配列番号１）、
ＩＹＰＲＥＧＳＴ（配列番号２）、及び
ＡＴＹＧＳＳＲＹＹＴＭＤＹ（配列番号３）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＥＳＶＤＮＦＧＩＳＦ（配列番号４）、
ＡＡＳ（配列番号５）、及び
ＱＱＳＫＥＶＰＬＴ（配列番号６）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＳＩＴＮＧＮＨ（配列番号７）、
ＩＲＳＳＧＳＳ（配列番号８）、及び
ＡＲＧＧＧＬＲＨＹＦＤＹ（配列番号９）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＧＮＩＨＮＹ（配列番号１０）、
ＨＡＥ（配列番号１１）、及び
ＱＨＦＷＳＴＰＹＴ（配列番号１２）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＦＴＦＴＤＹＹ（配列番号１３）、
ＩＲＮＫＡＮＧＹＴＴ（配列番号１４）、及び
ＡＣＧＮＹＶＧＹＡＭＤＹ（配列番号１５）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹ（配列番号１６）、
ＷＡＳ（配列番号１７）、及び
ＫＱＳＹＮＬＹＴ（配列番号１８）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＦＳＬＳＲＨＤ（配列番号７９）、
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＱＤＩＳＳＹ（配列番号８２）、
ＲＡＮ（配列番号８３）、及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＴＦＴＮＹＤ（配列番号８７）、
ＩＹＰＲＤＧＳＴ（配列番号８８）、及び
ＡＲＧＩＦＹＶＮＹＤＶＹ（配列番号８９）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）、
ＧＡＡ（配列番号９１）、及び
ＱＱＹＷＳＳＰＬＴ（配列番号９２）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＥＹＥＦＰＳＨＤ（配列番号９３）、
ＩＮＳＤＧＧＳＴ（配列番号９４）、及び
ＡＲＨＳＳＧＹＶＬＤＹ（配列番号９５）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＨＷ（配列番号９６）、
ＧＡＴ（配列番号９７）、及び
ＱＱＹＷＳＴＰＹＴ（配列番号９８）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＥＹＥＦＰＳＨＤ（配列番号８５）、
ＩＮＳＤＧＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＲＨＳＳＧＹＶＬＤＹ（配列番号８１）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＨＷ（配列番号８６）、
ＧＡＴ（配列番号８３）、及び
ＱＱＹＷＳＴＰＹＴ（配列番号８４）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

本明細書に記載の抗体又は抗原結合断片及び薬学的に許容可能な担体又は賦形剤を含む医薬組成物。

抗体の重鎖可変領域をコードする核酸であって、重鎖可変領域は、
ＧＹＳＦＴＴＹＤ（配列番号１）、
ＩＹＰＲＥＧＳＴ（配列番号２）、及び
ＡＴＹＧＳＳＲＹＹＴＭＤＹ（配列番号３）；又は
ＧＹＳＩＴＮＧＮＨ（配列番号７）；
ＩＲＳＳＧＳＳ（配列番号８）、及び
ＡＲＧＧＧＬＲＨＹＦＤＹ（配列番号９）；又は
ＧＦＴＦＴＤＹＹ（配列番号１３）、
ＩＲＮＫＡＮＧＹＴＴ（配列番号１４）、及び
ＡＣＧＮＹＶＧＹＡＭＤＹ（配列番号１５）；又は
ＧＦＳＬＳＲＨＤ（配列番号７９）、
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）；又は
ＧＦＳＬＮＮＹＤ（配列番号８５）、
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）；又は
ＧＹＴＦＴＮＹＤ（配列番号８７）、
ＩＹＰＲＤＧＳＴ（配列番号８８）、及び
ＡＲＧＩＦＹＶＮＹＤＶＹ（配列番号８９）；又は
ＥＹＥＦＰＳＨＤ（配列番号９３）、
ＩＮＳＤＧＧＳＴ（配列番号９４）、及び
ＡＲＨＳＳＧＹＶＬＤＹ（配列番号９５）
を含むアミノ酸配列を有する、核酸。

抗体の軽鎖可変領域をコードする核酸であって、軽鎖可変領域は、
ＥＳＶＤＮＦＧＩＳＦ（配列番号４）；
ＡＡＳ（配列番号５）；及び
ＱＱＳＫＥＶＰＬＴ（配列番号６）、又は
ＧＮＩＨＮＹ（配列番号１０）；
ＨＡＥ（配列番号１１）；及び
ＱＨＦＷＳＴＰＹＴ（配列番号１２）、又は
ＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹ（配列番号１６）；
ＷＡＳ（配列番号１７）；及び
ＫＱＳＹＮＬＹＴ（配列番号１８）；又は
ＱＤＩＳＳＹ（配列番号８２）、
ＲＡＮ（配列番号８３）、及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）；又は
ＱＤＩＮＳＹ（配列番号８６）、
ＲＡＮ（配列番号８３）、及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）；又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）、
ＧＡＡ（配列番号９１）、及び
ＱＱＹＷＳＳＰＬＴ（配列番号９２）；又は
ＤＨＩＮＨＷ（配列番号９６）、
ＧＡＴ（配列番号９７）、及び
ＱＱＹＷＳＴＰＹＴ（配列番号９８）
を含むアミノ酸配列を有する、核酸。

本明細書に記載の抗体の軽鎖の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３をコードする核酸。

本明細書に記載の抗体の重鎖の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３をコードする核酸。

本明細書に記載の核酸の１つ以上を含む宿主細胞。

治療剤に結合又はコンジュゲートされている、本明細書に記載の抗体又は抗原結合断片。

対象における単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）活性を阻害する方法であって、対象におけるＨＳＶ－２活性を阻害するために有効な量において、本明細書に記載の抗体又は抗原結合断片を投与することを含む方法。

単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）によって感染された細胞の抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）を活性化させる方法であって、細胞を、細胞のＡＤＣＣを生じさせる量における、本明細書に記載の単離抗体又は抗原結合断片と接触させることを含む方法。

対象における単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）感染に伴う疾患又は病態を処置又は予防するための、有効量の、本明細書に記載の抗体若しくは抗原結合断片又は本明細書に記載の医薬組成物の使用。

当業者は、下記の図面が説明の目的にすぎないことを理解する。図面は、本教示の範囲を決して限定するものではない。

特許又は出願書類は、着色された少なくとも１つの図面を含む。有色図面を有する本特許又は特許出願公開の複写物は、請求及び必要費用の支払い時に官庁により提供される。

ＨＳＶ－２Ｇ感染細胞溶解物及び非感染Ｖｅｒｏ細胞溶解物への培養物上清の結合を示すＥＬＩＳＡ結果。ΔｇＤ－２をワクチン接種したマウスの鼠径リンパ節からの胚中心（ＧＣ）Ｂ細胞を９６ウェルプレート中に直接ソートした（１個の細胞／ウェル）。次いで、これらのＧＣＢ細胞をＮＢ－２１．２Ｄ９フィーダー細胞の存在下で培養した。培養後、最初にＩｇＧの存在をＥＬＩＳＡにより決定し、次いでＨＳＶ－２Ｇ感染細胞溶解物（ＨＳＶ－２Ｇ）及び非感染Ｖｅｒｏ溶解物（対照）に対する培養物上清ＩｇＧの反応性をＥＬＩＳＡにより試験した。１６日目～１７日目のＧＣＢ細胞から得られたＶＨ遺伝子セグメントの分布。組換え抗体（２２Ｄ１０、３２Ｈ６、３３Ｂ８及び３５Ｈ７）によるＨＳＶ－２Ｇ溶解物結合の保持。ＨＳＶ－２Ｇ溶解物への組換え抗体の結合をＥＬＩＳＡにより試験した。重鎖及び軽鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物の両方を選択単一Ｂ細胞培養ウェル（２２Ｄ１０、３２Ｈ６、３３Ｂ８及び３５Ｈ７）から標準的ＲＴ－ＰＣＲにより増幅させた。これらのクローニングされたＶ（Ｄ）Ｊ再編成物を発現ベクター中に導入した。組換え抗体をＥｘｐｉ２９３Ｆ細胞中へのそれらの発現ベクターの同時形質移入により得た。≧４ｍｇの精製ＩｇＧを得た（示さず）。これらの抗体は、対照の非感染Ｖｅｒｏ溶解物に結合しなかった。個々のｍＡｂのＩｇＧ１及びＩｇＧ２アイソタイプによるＦｃγＲＩＶ活性化。ＦｃγＲＩＶ活性化は、ＰｒｏｍｅｇａＦｃγＲＩＶＡＤＣＣＲｅｐｏｒｔｅｒＢｉｏａｓｓａｙを使用して１ｍｇ／ｍＬの濃度においてアッセイした。統計的分析は、ＡＮＯＶＡによるものである、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。単一骨髄形質細胞及びＧＣＢ細胞からそれぞれクローニングされた組換え抗体（ＢＭＰＣ－２３及び１９Ｇ７）によるＨＳＶ－２Ｇ溶解物結合を示す。ＨＳＶ－２－Ｇ感染細胞溶解物及び非感染細胞溶解物への組換え抗体の結合をＥＬＩＳＡにより試験した。クローニングされたＨＳＶ反応性ＩｇＧ２ｃ抗体（ＢＭＰＣ－２３、３３Ｂ８及び２２Ｄ１０）によるマウスの受身伝達は、全生存率（図６Ａ）並びに上皮（図６Ｂ）及び神経学的アッセイ（図６Ｃ）において致死ＨＳＶ－２チャレンジに対する保護を提供する。クローニングされたＨＳＶ反応性ＩｇＧ２ｃ抗体（ＢＭＰＣ－２３、３３Ｂ８及び２２Ｄ１０）によるマウスの受身伝達は、全生存率（図６Ａ）並びに上皮（図６Ｂ）及び神経学的アッセイ（図６Ｃ）において致死ＨＳＶ－２チャレンジに対する保護を提供する。免疫沈降－質量分析（ＩＰ－ＭＳ）を実施して、２２Ｄ１０、３３Ｂ８及びＢＭＰＣ－２３抗体の結合標的を同定した。結果は、ヒトヘルペスウイルス糖タンパク質Ｂ（ｇＢ）を標的として同定する。Ｌｕｍｉｎｅｘマルチプレックスアッセイにより測定されたＨＳＶ－１の糖タンパク質Ｂ（ｇＢ－１）への組換え抗体の結合を示す。Ｌｕｍｉｎｅｘマルチプレックスアッセイにより測定されたｇＢ－１への種々の組換え抗体の結合を示す、ＩｇＧ濃度（ｎｇ／ｍｌ）に対する蛍光強度中央値（ＭＦＩ）のグラフである。Ｌｕｍｉｎｅｘマルチプレックスアッセイにより測定されたｇＢ－１への種々の組換え抗体の結合を示す、ＩｇＧ濃度（ｎｇ／ｍｌ）に対する蛍光強度中央値（ＭＦＩ）のグラフである。ｇＢ－１へのＢＭＰＣ－２３ヒトＩｇＧ抗体の結合を阻害するｇＢ－１特異的マウスモノクローナルＩｇＧ抗体の能力を示す。ｇＢ－１へのＢＭＰＣ－２３ヒトＩｇＧ抗体の結合を阻害するｇＢ－１特異的マウスモノクローナルＩｇＧ抗体の能力を示す。

抗呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）Ｆ中和モノクローナル抗体（ｍＡｂ）パリビズマブによる予防的処置は、高リスク乳児及び幼児におけるＲＳＶ感染の重度合併症の予防において有効であることが証明されており、現在、この目的のために認可されており、規則に従って使用される。市販の抗ＨＳＶ－２又は抗ＨＳＶ－１抗体処置は、極めて有用であるが、これまで存在していない。このような製品は、免疫不全患者又は未発達免疫応答を有する未成熟患者において特に有用である。

抗体、抗原結合断片並びに抗体及び抗原結合断片をコードする核酸が本明細書に開示される。抗体又は抗原結合断片は、単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）抗原に結合する。抗体又は抗原結合断片は、３つの重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）を含むアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、３つの軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）を含むアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域又はそれらの組み合わせを含む。抗体又は抗原結合断片は、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含むアミノ酸配列を有する重鎖可変領域；軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含むアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域；又はそれらの組み合わせを含む。

抗体又はその抗原結合断片であって、
ＧＦＴＦＴＤＹＹ（配列番号１３）、
ＩＲＮＫＡＮＧＹＴＴ（配列番号１４）、及び
ＡＣＧＮＹＶＧＹＡＭＤＹ（配列番号１５）
を含む重鎖可変領域、並びに／又は
ＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹ（配列番号１６）、
ＷＡＳ（配列番号１７）、及び
ＫＱＳＹＮＬＹＴ（配列番号１８）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＦＳＬＮＮＹＤ（配列番号８５）、
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＱＤＩＮＳＹ（配列番号８６）、
ＲＡＮ（配列番号８３）、及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＴＦＴＮＹＷ（配列番号９９）、
ＩＨＰＮＩＧＩＴ（配列番号１００）、及び
ＡＲＧＳＤＳＧＳＡＷＦＡＹ（配列番号１０１）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）、
ＧＡＴ（配列番号９７）、及び
ＱＱＹＷＳＴＰＬＴ（配列番号１０２）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＴＦＴＳＹＷ（配列番号１０３）、
ＩＨＰＮＳＧＩＴ（配列番号１０４）、及び
ＡＲＧＳＮＳＧＳＡＷＦＡＹ（配列番号１０５）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）、
ＧＡＴ（配列番号９７）、及び
ＱＱＹＷＳＴＰＬＴ（配列番号１０２）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＴＦＴＳＹＷ（配列番号１０３）、
ＩＨＰＮＳＧＩＴ（配列番号１０４）、及び
ＡＲＧＳＮＳＧＳＡＷＦＡＹ（配列番号１０５）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）、
ＧＡＡ（配列番号９１）、及び
ＱＱＹＷＳＳＰＬＴ（配列番号９２）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＴＦＴＴＹＧ（配列番号１０７）、
ＩＮＴＹＳＧＶＳ（配列番号１０８）、及び
ＡＱＬＮＹＧＭＤＹ．（配列番号１０９）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＱＤＶＳＴＳ（配列番号１１０）、
ＳＡＳ（配列番号１１１）、及び
ＨＱＨＹＳＩＰＲＴ（配列番号１１２）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＴＦＴＴＹＧ（配列番号１０７）、
ＩＮＴＹＳＧＶＳ（配列番号１０８）、及び
ＡＱＶＮＹＡＭＤＹ（配列番号１１３）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＱＤＶＳＴＡ（配列番号１１４）、
ＳＡＳ（配列番号１１１）、及び
ＱＱＨＹＳＴＰＲＴ（配列番号１１５）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＳＩＴＳＧＹＤ（配列番号１１６）、
ＩＳＹＳＧＬＴ（配列番号１１７）、及び
ＡＲＧＰＰＷＹＦＤＶ（配列番号１１８）
を含む重鎖可変領域；
ＱＩＶＲＡＴ（配列番号１１９）、
ＬＡＳ（配列番号１２０）、及び
ＬＱＹＷＮＹＰＹＴ（配列番号１２１）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片が提供される。

実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＩｇＧ抗体である。実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ＩｇＧ２ｃアイソタイプを有するＩｇＧ抗体である。

実施形態において、抗体又はその断片は、ヒト化抗体である。

実施形態において、抗体が提供される。実施形態において、抗原結合断片が提供される。実施形態において、抗原は、単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）抗原である。例えば、ＨＳＶ－２抗原は、糖タンパク質Ｂ（ｇＢ）である。

実施形態において、抗体又はその断片は、Ｆｃガンマ受容体ＲＩＩＩ（ＦｃγＲＩＩＩ）に結合するＦｃ領域を含む。実施形態において、抗体又はその断片は、ヒトＦｃγＲＩＩＩを、それに結合した場合に活性化させるＦｃ領域を含む。実施形態において、ヒトＦｃγＲＩＩＩ受容体は、ＦｃγＲＩＩＩａである。

実施形態において、抗体又はその断片は、Ｆｃガンマ受容体ＲＩＶ（ＦｃγＲＩＶ）に結合する。

実施形態において、抗体又はその断片は、ＨＳＶ－２抗原に結合する。

実施形態において、軽鎖及び／又は重鎖のフレームワーク領域は、ヒトフレームワーク領域であるか、又はそれと８５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖及び／又は重鎖のフレームワーク領域は、ヒトフレームワーク領域である。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ１－８５の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ１－１のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ１－８５の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ１－１のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ３－２の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ５のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ３－２の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ５のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ３－４の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ３－４の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１２－４１の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ２のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１２－４１の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ２のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ７－３の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２－１のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ７－３の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２－１のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ８－２１の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ２のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ８－２１の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ２のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ２－３の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２－１のＤ及びＩＧＨＪ３のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ２－３の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２－１のＤ及びＩＧＨＪ３のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１４－１１１の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ５のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１４－１１１のＶＬの生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ５のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ１－８５の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２－１のＤ及びＩＧＨＪ３のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ１－８５の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２－１のＤ及びＩＧＨＪ３のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１３－８５の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ５のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１３－８５のＶＬの生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ５のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ５－２の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ３－２のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ５－２の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ３－２のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１３－８５の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ２のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１３－８５のＶＬの生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ２のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ１－６４の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ３－２のＤ及びＩＧＨＪ３のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ１－６４の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ３－２のＤ及びＩＧＨＪ３のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１３－８５の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ５のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ１３－８５のＶＬの生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ５のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ９－３の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２－１２のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ９－３の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ２－１２のＤ及びＩＧＨＪ４のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ６－１７の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ１のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ６－１７のＶＬの生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ１のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ３－１の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ６－３のＤ及びＩＧＨＪ１のＪＨに由来する。実施形態において、重鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物は、ＩＧＨＶ３－１の生殖細胞系列ＶＨ、ＩＧＨＤ６－３のＤ及びＩＧＨＪ１のＪＨと９５％以上の同一性を有する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ６－１４の生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ２のＪＬに由来する。実施形態において、軽鎖は、ＩＧＫＶ６－１４のＶＬの生殖細胞系列ＶＬ及びＩＧＫＪ２のＪＬと９５％以上の同一性を有する。

有効量の、本明細書に記載の抗体又は抗原結合断片及び薬学的に許容可能な担体又は賦形剤を含む医薬組成物も提供される。実施形態において、医薬組成物は、抗ウイルス小分子薬をさらに含む。抗ウイルス小分子は、ファムシクロビル、ペンシクロビル、バラシクロビル又はそれらの組み合わせを含む。実施形態において、小分子抗ウイルス薬は、アシクロビルである。

以下は、抗ＨＳＶ抗体の例示的なヌクレオチド配列及びアミノ酸配列である。対応する重鎖又は軽鎖ＣＤＲ（例えば、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）に順序どおりに下線を付す。ヌクレオチド配列及びアミノ酸配列のまとめを、例示的抗ＨＳＶ抗体の対応するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含め、表４に提供する。

ＢＭＰＣ－２３＿ＩｇＨ
ヌクレオチド：

アミノ酸：

ＢＭＰＣ－２３＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸：

２２Ｄ１０＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸：

２２Ｄ１０＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸：

３３Ｂ８＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸：

３３Ｂ８＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸：

ＨＳＶ０１０－４＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－４＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－７＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－７＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－３４＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－３４＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－６＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－６＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－９＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－９＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－１３＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－１３＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－１４＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－１４＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－２８＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－２８＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－２０＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－２０＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－８＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－８＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－１５＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－１５＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－１６＿ＩｇＨ
ヌクレオチド

アミノ酸

ＨＳＶ０１０－１６＿ＩｇＬ
ヌクレオチド

アミノ酸

実施形態において、上記に列挙される重鎖アミノ酸配列の１つの重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに上記に列挙される軽鎖アミノ酸配列のいずれか１つの軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を有する抗体が提供される。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＢＭＰＣ－２３の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、３３Ｂ８の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、２２Ｄ１０の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－４の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－８の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－７の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－３４の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－６の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＣ０１０－９の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－１３の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－１４の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－１５の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－１６の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－２８の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。実施形態において、重鎖ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３並びに軽鎖ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３の両方は、ＨＳＶ０１０－２０の重鎖ＨＣＤＲ及び軽鎖ＬＣＤＲと同じである。

抗体又はその抗原結合断片をコードする核酸が提供される。抗体又は抗原結合断片をコードする単離核酸分子も提供される。

実施形態において、抗体の軽鎖をコードする核酸が提供される。特に、核酸は、抗体の軽鎖可変領域をコードする。軽鎖は、ラムダ鎖又はカッパ鎖である。実施形態において、核酸は、ヒトフレームワーク領域もコードする。核酸は、単離核酸分子であり得る。

実施形態において、核酸は、配列番号２１、配列番号２５、配列番号２９、配列番号３３、配列番号６９、配列番号３７、配列番号４１、配列番号４５、配列番号４９、配列番号５３、配列番号５７、配列番号７３、配列番号７７、配列番号６１又は配列番号６６を含む核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、軽鎖が、配列番号２１、配列番号２５、配列番号２９、配列番号３３、配列番号６９、配列番号３７、配列番号４１、配列番号４５、配列番号４９、配列番号５３、配列番号５７、配列番号７３、配列番号７７、配列番号６１又は配列番号６６と９５％以上の同一性を有する核酸配列を有する、抗体の軽鎖可変領域をコードする。

実施形態において、核酸は、
ＥＳＶＤＮＦＧＩＳＦ（配列番号４）；
ＡＡＳ（配列番号５）；及び
ＱＱＳＫＥＶＰＬＴ（配列番号６）、又は
ＧＮＩＨＮＹ（配列番号１０）；
ＨＡＥ（配列番号１１）；及び
ＱＨＦＷＳＴＰＹＴ（配列番号１２）、又は
ＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹ（配列番号１６）；
ＷＡＳ（配列番号１７）；及び
ＫＱＳＹＮＬＹＴ（配列番号１８）、又は
ＱＤＩＳＳＹ（配列番号８２）；
ＲＡＮ（配列番号８３）；及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）、又は
ＱＤＩＮＳＹ（配列番号８６）；
ＲＡＮ（配列番号８３）；及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）、又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）；
ＧＡＡ（配列番号９１）；及び
ＱＱＹＷＳＳＰＬＴ（配列番号９２）、又は
ＤＨＩＮＨＷ（配列番号９６）
ＧＡＴ（配列番号９７）
ＱＱＹＷＳＴＰＹＴ（配列番号９８）、又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）；
ＧＡＴ（配列番号９７）；及び
ＱＱＹＷＳＴＰＬＴ（配列番号１０２）、又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）；
ＧＡＴ（配列番号９７）；及び
ＱＱＹＷＳＳＰＬＴ（配列番号９２）、又は
ＱＤＶＳＴＳ（配列番号１１０）；
ＳＡＳ（配列番号１１１）；及び
ＨＱＨＹＳＩＰＲＴ（配列番号１１２）、又は
ＱＤＶＳＴＡ（配列番号１１４）；
ＳＡＳ（配列番号１１１）；及び
ＱＱＨＹＳＴＰＲＴ（配列番号１１５）、又は
ＱＩＶＲＡＴ（配列番号１１９）；
ＬＡＳ（配列番号１２０）；及び
ＬＱＹＷＮＹＰＹＴ（配列番号１２２）
（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３をそれぞれの順で列挙する）
を含むアミノ酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。

実施形態において、核酸は、ヒトフレームワーク領域もコードする。実施形態において、軽鎖は、ラムダ鎖又はカッパ鎖である。

抗体の重鎖をコードする核酸が提供される。特に、核酸は、抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、ヒトフレームワーク領域もコードする。核酸は、単離核酸分子であり得る。

実施形態において、核酸は、重鎖が、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号６７、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号７１、配列番号７５、配列番号５９又は配列番号６３を含む核酸配列を有する、抗体の重鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、重鎖が、配列番号１９、配列番号２３、配列番号２７、配列番号３１、配列番号６７、配列番号３５、配列番号３９、配列番号４３、配列番号４７、配列番号５１、配列番号５５、配列番号７１、配列番号７５、配列番号５９又は配列番号６３と９５％以上の同一性を有する核酸配列を有する、抗体の重鎖可変領域をコードする。

実施形態において、核酸は、
ＧＹＳＦＴＴＹＤ（配列番号１）；
ＩＹＰＲＥＧＳＴ（配列番号２）；及び
ＡＴＹＧＳＳＲＹＹＴＭＤＹ（配列番号３）、又は
ＧＹＳＩＴＮＧＮＨ（配列番号７）、
ＩＲＳＳＧＳＳ（配列番号８）；及び
ＡＲＧＧＧＬＲＨＹＦＤＹ（配列番号９）、又は
ＧＦＴＦＴＤＹＹ（配列番号１３）；
ＩＲＮＫＡＮＧＹＴＴ（配列番号１４）；及び
ＡＣＧＮＹＶＧＹＡＭＤＹ（配列番号１５）、又は
ＧＦＳＬＳＲＨＤ（配列番号７９）；
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）；及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）、又は
ＧＦＳＬＮＮＹＤ（配列番号８５）；
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）；及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）、又は
ＧＹＴＦＴＮＹＤ（配列番号８７）；
ＩＹＰＲＤＧＳＴ（配列番号８８）；及び
ＡＲＧＩＦＹＶＮＹＤＶＹ（配列番号８９）、又は
ＥＹＥＦＰＳＨＤ（配列番号９３）；
ＩＮＳＤＧＧＳＴ（配列番号９４）；及び
ＡＲＨＳＳＧＹＶＬＤＹ（配列番号９５）、又は
ＧＹＴＦＴＮＹＷ（配列番号９９）；
ＩＨＰＮＩＧＩＴ（配列番号１００）；及び
ＡＲＧＳＤＳＧＳＡＷＦＡＹ（配列番号１０１）、又は
ＧＹＴＦＴＳＹＷ（配列番号１０３）；
ＩＨＰＮＳＧＩＴ（配列番号１０４）；及び
ＡＲＧＳＮＳＧＳＡＷＦＡＹ（配列番号１０５）、又は
ＧＹＴＦＴＴＹＧ（配列番号１０７）；
ＩＮＴＹＳＧＶＳ（配列番号１０８）；及び
ＡＱＬＮＹＧＭＤＹ（配列番号１０９）、又は
ＧＹＴＦＴＴＹＧ（配列番号１０７）；
ＩＮＴＹＳＧＶＳ（配列番号１０８）；及び
ＡＱＶＮＹＡＭＤＹ（配列番号１１３）、又は
ＧＹＳＩＴＳＧＹＤ（配列番号１１６）；
ＩＳＹＳＧＬＴ（配列番号１１７）；及び
ＡＲＧＰＰＷＹＦＤＶ（配列番号１１８）
（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３をそれぞれの順で列挙する）
を含むアミノ酸配列を有する抗体の重鎖可変領域をコードする。

実施形態において、核酸は、配列番号１９の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号２１の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号２３の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号２５の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号２７の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号２９の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号３１の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号３３の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号６７の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号６９の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号３５の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号３７の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号３９の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号４１の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号４３の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号４５の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号４７の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号４９の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号５１の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号５３の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号５５の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号５７の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号７１の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号７３の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号７５の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号７７の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号５９の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号６１の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。実施形態において、核酸は、配列番号６３の核酸配列を有する抗体の重鎖可変領域及び配列番号６５の核酸配列を有する抗体の軽鎖可変領域をコードする。

実施形態において、核酸は、ヒトＦｃ領域もコードする。実施形態において、核酸は、ＦｃγＲＩＩＩに結合するヒトＦｃ領域もコードする。実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、ヒトＦｃγＲＩＩＩを、それに結合した場合に活性化させるＦｃ領域を含む。実施形態において、ヒトＦｃγＲＩＩＩ受容体は、ＦｃγＲＩＩＩａである。実施形態において、重鎖は、ガンマ鎖である。

実施形態において、本開示の核酸は、５００アミノ酸長未満、２５０アミノ酸長未満又は１２０アミノ酸長未満であるポリペプチドをコードする。実施形態において、本開示のアミノ酸は、７０～１００アミノ酸長であるポリペプチドをコードする。

核酸の実施形態において、核酸は、ＤＮＡである。実施形態において、核酸は、ｃＤＮＡである。実施形態において、核酸は、ＲＮＡである。

本明細書に開示される核酸は、本明細書に開示される抗体又は抗原結合断片の組換え産生に好適である。したがって、本発明は、抗体又は抗原結合断片をコードする核酸配列を含有するベクター及び宿主細胞にも関する。

本明細書に記載の核酸分子をコードするベクターが提供される。本明細書に記載の核酸の１つ以上又は本明細書に記載のベクターを含む宿主細胞も提供される。

抗体又は抗原結合断片は、異種分子に結合又はコンジュゲートされ得る。異種分子は、治療剤、例えば細胞毒性薬、放射性同位体、免疫調節剤、二次抗体、抗ウイルス小分子又はそれらの組み合わせであり得る。実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、治療剤に結合又はコンジュゲートされ得る。

対象におけるＨＳＶ－２を阻害する方法は、対象におけるＨＳＶ－２活性を阻害するために有効な量において抗体又は抗原結合断片を投与することを含む。抗体又は抗原結合断片は、対象からウイルスを除去し、対象におけるＨＳＶ－２の播種を予防し、対象における潜伏の確立を予防し、且つ／又はＨＳＶ－２による対象の感染を予防することにより、対象におけるＨＳＶ－２活性を阻害し得る。

実施形態において、対象は、ＨＳＶ－２によって感染されている。実施形態において、対象は、未だにＨＳＶ－２によって感染されていない。実施形態において、対象は、免疫不全である。実施形態において、免疫不全患者は、癌を有するか、移植を受けたことがあるか、又は免疫抑制医薬の投薬中である。実施形態において、対象は、妊娠している。実施形態において、対象は、新生児である。

実施形態において、対象は、抗ウイルス療法を受けているか又は受けたことがある。抗ウイルス療法は、対象への抗ウイルス小分子の投与を含む。抗ウイルス小分子は、ファムシクロビル、ペンシクロビル、バラシクロビル又はそれらの組み合わせを含む。実施形態において、抗ウイルス療法は、対象へのアシクロビルの投与を含む。

ＨＳＶ－２によって感染された細胞の抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）を活性化させる方法は、細胞を、細胞のＡＤＣＣを生じさせる量における単離抗体又は抗原結合断片と接触させることを含む。

実施形態において、細胞は、ＨＳＶ－２によって感染されている対象中に存在する。

対象における単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）感染に伴う疾患又は病態の処置又は予防における使用のための、本明細書に記載の抗体若しくは抗原結合断片又は抗体若しくは抗原結合断片を含む医薬組成物が提供される。

対象におけるＨＳＶ－２感染に伴う疾患又は病態を処置又は予防するための医薬品の製造のための、有効量の、本明細書に記載の抗体又は抗原結合断片の使用。

本明細書に記載の１つ又は複数の抗体は、１つ又は複数の単離抗体であり得る。同様に、本明細書に記載の抗原結合断片は、単離抗原結合断片であり得る。

実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、キメラ又はヒト化である。実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、ヒト配列Ｆｃ領域を有する。

実施形態において、抗体又は抗原結合断片は、モノクローナル抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片又はそれらの組み合わせを含む。

実施形態において、単離抗体、単離抗原結合断片、抗体又は抗原結合断片は、モノクローナル抗体、ｓｃＦｖ、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片又はそれらの組み合わせを含む。ｓｃＦｖは、厳密には抗体の断片ではなく、融合タンパク質である一方、本明細書において使用される抗体の抗原結合断片は、特に記載のない限り、ｓｃＦｖを含むことに留意されたい。

実施形態において、方法は、対象における神経ＨＳＶ－２感染症状の処置及び予防のためのものである。

実施形態において、方法は、上皮ＨＳＶ－２感染症状の処置及び予防のためのものである。

実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、表２若しくは表４において命名されるヒト生殖細胞系列のフレームワーク配列を含むＶＨフレームワーク、及び／又は（ｉｉ）表２若しくは表４において命名されるヒト生殖細胞系列のフレームワーク配列を含むＶＬフレームワークを含む。実施形態において、抗体又はその抗原結合断片は、表２若しくは表４において命名されるヒト生殖細胞系列のフレームワーク配列と９５％以上の同一性を含むＶＨフレームワーク、及び／又は（ｉｉ）表２若しくは表４において命名されるヒト生殖細胞系列のフレームワーク配列と９５％以上の同一性を含むＶＬフレームワークを含む。

実施形態において、抗体又はその断片は、約１×１０－９モル濃度（Ｍ）～約１×１０－１２Ｍの結合親和性（ＫＤ）でＨＳＶ－２表面抗原に結合する。

本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片を産生する方法であって、宿主細胞を、抗体又はその抗原結合断片が宿主細胞によって産生される条件下で培養することを含む方法が提供される。用語「宿主細胞」は、抗体又は抗原結合断片をコードする外因性核酸が導入された細胞を指し、そのような細胞の子孫を含む。宿主細胞としては、「形質転換体」、「形質転換細胞」、「形質移入体」、「形質移入細胞」及び「形質導入細胞」が挙げられ、それらは、初代形質転換／形質移入／形質導入細胞及び継代数にかかわらず、それらに由来する子孫を含む。子孫は、親細胞と核酸含有量が完全に同一でなくてよく、突然変異を含有し得る。最初に形質転換された細胞においてスクリーニング又は選択されたものと同じ機能又は生物学的活性を有する突然変異体子孫も含まれる。

宿主細胞は、哺乳類宿主細胞であり得る。本明細書に提供される抗体又はその抗原結合断片を発現させるための哺乳類宿主細胞の例としては、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）、例えばＣＨＯ－Ｋ１、ＣＨＯ－Ｓ、ＣＨＯ－Ｋ１ＳＶ、ＮＳＯ骨髄腫細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＨＫＢ１１細胞、ＢＨＫ２１細胞、ＣＡＰ細胞、ＥＢ６６細胞、ＳＰ２細胞及びＥｘｐｉ２９３Ｆ細胞が挙げられる。実施形態において、宿主細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である。実施形態において、宿主細胞は、Ｅｘｐｉ２９３Ｆ細胞である。

本明細書において使用される用語「抗体」は、インタクト（完全）抗体、すなわち完全Ｆｃ及びＦｖ領域を有する抗体を指す。インタクト抗体は、ジスルフィド結合により相互接続された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖及び２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパク質である。それぞれの重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域を含む。重鎖定常領域は、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２及びＣＨ３を含む。それぞれの軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域を含む。軽鎖定常領域は、１つのドメイン、ＣＬを含む。ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称されるより保存された領域が散在する相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される超可変の領域にさらに下位分類される。それぞれのＶＨ及びＶＬは、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲから構成され、アミノ末端からカルボキシ末端まで以下の順で配置される：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重鎖及び軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメイン又は結合部分を含有する。

本明細書において使用される用語「抗原結合断片」又は「抗原結合部分」は、完全抗体未満であるが、抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の任意の部分又は一緒に結合している抗体の部分を指す。抗原結合断片は、それが特異的結合のための断片であるインタクト抗体と競合する。この場合、抗原は、ＨＳＶ－２抗原である。抗原は、ＨＳＶ－１抗原であり得る。「抗体」又はその「断片」は、任意のクラスの免疫グロブリン、例えばＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇＥを含み得る。例示的なクラスは、ＩｇＧであり、例示的なアイソタイプは、ＩｇＧ２ｃである。

抗体の用語「抗原結合断片」又は「抗原結合部分」内に包含される例としては、Ｆａｂ断片（ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価断片）、Ｆ（ａｂ’）２断片（ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋により結合している２つのＦａｂ断片を含む二価断片）、Ｆａｂ’断片（フリースルフヒドリル基を有する、Ｆ（ａｂ’）２断片の還元により産生される一価断片）、抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなる断片、Ｆｖ断片（抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなる断片）、単鎖断片（ｓｃＦｖ、ペプチドリンカーを介して結合している可変ドメイン軽鎖（ＶＬ）及び可変ドメイン重鎖（ＶＨ））、ｄＡｂ断片（ＶＨドメインからなる）；単離相補性決定領域（ＣＤＲ）、ナノボディ（単一可変ドメイン及び２つの定常ドメインを含有する重鎖可変領域）、それらの突然変異体、天然発生バリアント、要求される特異性の抗原認識部位を有する抗体部分を含む融合タンパク質、ヒト化抗体、キメラ抗体並びに要求される特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の任意の他の改変立体配置が挙げられる。

抗原結合断片は、例えば、インタクト抗体を開裂させることにより又は組換え手段により調製することができる。一般に、ＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｃｈ．７（参照により全体として本明細書に組み込まれるＰａｕｌ，Ｗ．，ｅｄ．，２ｎｄｅｄ．ＲａｖｅｎＰｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８９））を参照されたい。抗原結合断片は、組換えＤＮＡ技術により、又はインタクト抗体の酵素的若しくは化学的開裂により、又は分子生物学技術により産生することができる。一部の実施形態において、断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、相補性決定領域（ＣＤＲ）断片又は単鎖抗体（ｓｃＦｖ）である。ｓｃＦｖ断片の場合、ＶＬ及びＶＨは、別個の遺伝子によりコードされ、組換え手段を介して、ＶＬ及びＶＨ領域が対合して一価分子を形成する単一タンパク質鎖としてのそれらの作製を可能とする合成リンカーにより一緒に結合される。実施形態において、ｓｃＦｖは、ヒト可変ドメインＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３又はＦＲ４と同一の配列を有する可変ドメインフレームワーク配列を含む。実施形態において、ｓｃＦｖは、５～３０アミノ酸残基長のペプチドである合成リンカーを含む。例えば、ｓｃＦｖは、グリシン、セリン及びトレオニン残基の１つ以上を含むリンカーペプチドを含む。実施形態において、ｓｃＦｖのリンカーは、１０～２５アミノ酸長である。実施形態において、ペプチドリンカーは、グリシン、セリン及び／又はトレオニン残基を含む（例えば、それぞれ参照により全体として本明細書に組み込まれるＢｉｒｄｅｔａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４２：４２３－４２６（１９８８）及びＨｕｓｔｏｎｅｔａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８５：５８７９－５８８３（１９８８）を参照されたい）。

抗原結合断片は、ポリペプチド上のＨＳＶ－２抗原特異的結合を付与するために十分である抗体の少なくとも一部を含有するポリペプチド、例としてダイアボディであり得る。Ｎ末端からＣ末端まで、成熟軽鎖及び重鎖可変ドメインの両方は、領域ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３及びＦＲ４を含む。それぞれのドメインに対するアミノ酸の割り当ては、それぞれ参照により全体として本明細書に組み込まれるＫａｂａｔ，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ（ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｓｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９８７ａｎｄ１９９１））、Ｃｈｏｔｈｉａ＆Ｌｅｓｋ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）又はＣｈｏｔｈｉａｅｔａｌ．（Ｎａｔｕｒｅ３４２：８７８－８８３（１９８９））の定義に従う。本明細書において使用される用語「ポリペプチド」は、天然又は人工タンパク質、タンパク質断片及び／又はタンパク質配列のポリペプチドアナログを包含する。ポリペプチドは、モノマー又はポリマーであり得る。本明細書において使用されるＦｄ断片は、ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなる抗体断片を意味し；Ｆｖ断片は、抗体の単一アームのＶ１及びＶＨドメインからなり；ｄＡｂ断片（参照により全体として本明細書に組み込まれるＷａｒｄｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３４１：５４４－５４６（１９８９））は、ＶＨドメインからなる。一部の実施形態において、断片は、少なくとも５、６、８又は１０アミノ酸長である。他の実施形態において、抗原結合断片は、少なくとも１４、少なくとも２０、少なくとも５０又は少なくとも７０、８０、９０、１００、１５０又は２００アミノ酸長である。

本明細書において使用される用語「モノクローナル抗体」又は「ｍＡｂ」は、実質的に均一の抗体の集団の抗体メンバーを指し、すなわち、集団をなす個々の抗体は、微量で存在し得る可能な突然変異、例えば天然発生突然変異を除いて同一である。したがって、修飾語「モノクローナル」は、区別される抗体の混合物でないという抗体の性質を示す。典型的には、異なる抗原決定基（エピトープ）に対して指向される異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、モノクローナル抗体調製物のそれぞれのモノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して指向される。モノクローナル抗体調製物は、それらの特異性に加えて、それらが典型的には他の免疫グロブリンにより汚染されていないという点で有利である。したがって、同定されたモノクローナル抗体は、その配列が同定されたら、非ハイブリドーマ技術により、例えば適切な組換え手段により産生することができる。

本明細書に記載の本発明の実施形態において、抗体は、単離されている。本明細書において使用される用語「単離抗体」は、その起源又は由来の資源の点で以下の少なくとも１つ（例えば、１、２、３又は４つ）を有する抗体を指す：（１）その天然状態でそれに伴う天然に付随する構成成分を伴わないか、（２）同じ種からの他のタンパク質を有さないか、（３）異なる種からの細胞により発現されるか、又は（４）人工でない限り天然に生じない。

実施形態において、抗体は、ヒト化である。本明細書において使用される「ヒト化抗体」は、ヒト及び非ヒト（例えば、ネズミ、ラット）抗体の両方からの配列を含有する抗体の形態を指す。非ヒト（例えば、ネズミ）抗体のヒト化形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含有するキメラ抗体である。一実施形態において、ヒト化抗体は、ネズミ超可変領域（ＨＶＲ）（又はＣＤＲ）からの残基以外にヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）の配列を有する抗体である。実施形態において、ネズミｍＡｂのフレームワーク（ＦＲ）残基は、対応するヒト免疫グロブリン可変ドメインフレームワーク（ＦＲ）残基により置き換えられている。これらのヒト化抗体は、抗体性能をリファインするためにさらに改変することができる。ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にもドナー抗体中にも見出されない残基を含み得る。代わりに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にもドナー抗体中にも見出されない残基を含まない。一般に、ヒト化抗体は、超可変ループの全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲの全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のものである少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含む。ヒト化抗体は、任意選択で、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのものの少なくとも一部も含む。例えば、それぞれの内容が参照により全体として本明細書に組み込まれるＪｏｎｅｓｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３－３２９（１９８８）；Ｐｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）；ＶａｓｗａｎｉａｎｄＨａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ＆Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５－１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ２３：１０３５－１０３８（１９９５）；ＨｕｒｌｅａｎｄＧｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）；並びに米国特許第６，９８２，３２１号明細書及び同第７，０８７，４０９号明細書を参照されたい。一実施形態において、ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にもドナー抗体中にも見出されない残基を含み、ヒト化抗体のＦｃ領域は、内容が参照により全体として本明細書に組み込まれる国際公開第９９／５８５７２号パンフレットに記載のとおり改変される。

モノクローナル抗体をヒト化するための技術は、周知であり、例えばそれぞれの内容が参照により全体として本明細書に組み込まれる米国特許第４，８１６，５６７号明細書；同第５，８０７，７１５号明細書；同第５，８６６，６９２号明細書；同第６，３３１，４１５号明細書；同第５，５３０，１０１号明細書；同第５，６９３，７６１号明細書；同第５，６９３，７６２号明細書；同第５，５８５，０８９号明細書；及び同第６，１８０，３７０号明細書に記載されている。非ヒト免疫グロブリンに由来する抗原結合部位を含む多数の「ヒト化」抗体分子、例としてヒト定常ドメインに融合している齧歯類又は改変齧歯類Ｖ領域及びそれらに付随する相補性決定領域（ＣＤＲ）を有する抗体が記載されている。例えば、それぞれの内容が参照により全体として本明細書に組み込まれるＷｉｎｔｅｒｅｔａｌ．Ｎａｔｕｒｅ３４９：２９３－２９９（１９９１）、Ｌｏｂｕｇｌｉｏｅｔａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：４２２０－４２２４（１９８９）、Ｓｈａｗｅｔａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３８：４５３４－４５３８（１９８７）及びＢｒｏｗｎｅｔａｌ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４７：３５７７－３５８３（１９８７）を参照されたい。他の参照文献は、適切なヒト抗体定常ドメインとの融合前にヒト支持フレームワーク領域（ＦＲ）中にグラフトされた齧歯類超可変領域又はＣＤＲを記載している。例えば、それぞれの内容が参照により全体として本明細書に組み込まれるＲｉｅｃｈｍａｎｎｅｔａｌ．Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３－３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎｅｔａｌ．Ｓｃｉｅｎｃｅ２３９：１５３４－１５３６（１９８８）及びＪｏｎｅｓｅｔａｌ．Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２－５２５（１９８６）を参照されたい。別の参照文献は、組換えにより合わせた齧歯類フレームワーク領域により支持される齧歯類ＣＤＲを記載している－欧州特許出願公開第０５１９５９６号明細書（参照により全体として組み込まれる）。これらの「ヒト化」分子は、ヒトレシピエントにおけるそれらの部分の治療適用の継続期間及び有効性を限定する齧歯類抗ヒト抗体分子に対する不所望な免疫学的応答を最小化するように設計される。抗体定常領域は、それが免疫学的に不活性になる（例えば、補体溶解をトリガーしない）ようにエンジニアリングすることができる。例えば、国際公開第９９／５８５７２号パンフレット；英国特許出願第９８０９９５１．８号明細書を参照されたい。同様に利用することができる抗体をヒト化する他の方法は、Ｄａｕｇｈｅｒｔｙｅｔａｌ．，Ｎｕｃｌ．ＡｃｉｄｓＲｅｓ．１９：２４７１－２４７６（１９９１）により、及び米国特許第６，１８０，３７７号明細書；同第６，０５４，２９７号明細書；同第５，９９７，８６７号明細書；同第５，８６６，６９２号明細書；同第６，２１０，６７１号明細書；及び同第６，３５０，８６１号明細書；並びに国際公開第０１／２７１６０号パンフレット（それぞれ参照により全体として組み込まれる）に開示されている。

実施形態において、本明細書における抗体又は断片は、組換えにより産生することができ、例えば、抗体は、宿主細胞中に形質移入される組換え発現ベクターを使用して発現させることができ、抗体は、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離することができ、抗体は、ヒト免疫グロブリン遺伝子についてトランスジェニックである動物（例えば、マウス）から単離することができる。

抗体の「可変領域」又は「可変ドメイン」は、抗体の重鎖又は軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖の可変ドメインは、「ＶＨ」と称することができる。軽鎖の可変ドメインは、「ＶＬ」と称することができる。これらのドメインは、一般に、抗体の最も可変の部分であり、抗原結合部位を含有する。用語「可変」は、可変ドメインのある部分が抗体間の配列において大幅に異なり、それぞれの特定の抗体の、その特定の抗原に対する結合及び特異性において使用されるという事実を指す。しかしながら、可変性は、抗体の可変ドメイン全体にわたり均等に分配されているわけではない。可変性は、軽鎖及び重鎖可変ドメインの両方において、超可変領域（ＨＶＲ）（又はＣＤＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存的な部分は、フレームワーク（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、それぞれ４つのＦＲ領域を含み、ＦＲ領域は、大部分が３つのＣＤＲにより接続されているベータシート立体配置をとり、ＣＤＲは、ベータシート構造に接続し、場合によりベータシート構造の一部を形成するループを形成する。それぞれの鎖中のＣＤＲは、ＦＲ領域により近接して一緒に保持され、他の鎖からのＣＤＲとともに抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔｅｔａｌ．，ＳｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎｓｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌＩｎｔｅｒｅｓｔ，ＦｉｆｔｈＥｄｉｔｉｏｎ，ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＨｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１）を参照されたい）。定常ドメインは、抗原への抗体の結合に直接関与せず、種々のエフェクター機能、例えば抗体依存性細胞毒性における抗体の関与を呈示する。

任意の脊椎動物種からの抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（κ）及びラムダ（λ）と呼ばれる２つの明確に区別されるタイプの一方に割り当てることができる。

「フレームワーク」又は「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるＨＶＲ残基以外のそれらの可変ドメイン残基である。

実施形態において、本明細書における抗体は、ヒトＦｃ領域を有する。本明細書における用語「Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域及びバリアントＦｃ領域を含め、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は、変動し得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、通常、Ｃｙｓ２２６位におけるアミノ酸残基又はＰｒｏ２３０からそのカルボキシル末端まで及ぶと定義される。Ｆｃ領域のＣ末端リジンは、例えば、抗体の産生若しくは精製中又は抗体の重鎖をコードする核酸を組換えエンジニアリングすることにより除去することができる。したがって、本明細書において使用されるインタクト抗体は、他のＣ末端リジンを有する又は有さない抗体であり得る。

本明細書に開示される抗体、ｓｃＦｖ又は抗体の断片を含む組成物又は医薬組成物は、好ましくは、使用前の貯蔵及び輸送中の一定期間にわたる変性、酸化又は凝集の効果に起因するタンパク質の活性又は構造的統合性の損失を防止するために安定剤を含む。組成物又は医薬組成物は、塩、界面活性剤、ｐＨ及び等張化剤、例えば糖の任意の組み合わせの１つ以上を含み得、それらは、凝集問題の克服に寄与し得る。本発明の組成物又は医薬組成物が注射として使用される場合、およそ中性のｐＨ範囲のｐＨ値を有することが望まれ、界面活性剤レベルを最小化して、対象中への注射に有害な配合物中の気泡を回避することも有利である。実施形態において、組成物又は医薬組成物は、液体形態であり、溶液中で高濃度の生物活性抗体を安定的に支持し、吸入又は非経口投与に好適である。実施形態において、組成物又は医薬組成物は、哺乳類対象、特にヒト対象への投与のために配合される。実施形態において、組成物又は医薬組成物は、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮内及び／又は皮下注射のために配合される。実施形態において、組成物又は医薬組成物は、液体形態であり得、気泡形成及びアナフィラキシー様副作用の最小化されたリスクを有する。実施形態において、組成物又は医薬組成物は、等張性である。一実施形態において、組成物又は医薬組成物は、ｐＨ又は６．８～７．４を有する。

実施形態において、本明細書に開示されるｓｃＦｖ又は抗体の断片は、凍結乾燥及び／又はフリーズドライされ、使用前に再構成される。

薬学的に許容可能な担体の例としては、限定されるものではないが、リン酸緩衝生理食塩溶液、滅菌水（例として、注射用水ＵＳＰ）、エマルジョン、例えば油／水エマルジョン及び種々のタイプの湿潤剤が挙げられる。エアロゾル又は非経口投与のための例示的な希釈剤は、リン酸緩衝生理食塩水又は正常（０．９％）生理食塩水、例えば０．９％の塩化ナトリウム溶液、ＵＳＰである。このような担体を含む組成物は、周知の慣用の方法により配合される（例えば、それぞれの内容が全体として本明細書に組み込まれるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈｅｄｉｔｉｏｎ，Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ，ｅｄ．，ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１９９０；及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ，ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ２０ｔｈＥｄ．ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，２０００を参照されたい）。非限定的な例において、これは、二塩基性リン酸ナトリウム、塩化カリウム、一塩基性リン酸カリウム、ポリソルベート８０（例えば、２－［２－［３，５－ビス（２－ヒドロキシエトキシ）オキソラン－２－イル］－２－（２－ヒドロキシエトキシ）エトキシ］エチル（Ｅ）－オクタデク－９－エノエート）、エデト酸二ナトリウム脱水物、スクロース、一塩基性リン酸ナトリウム一水和物及び二塩基性リン酸ナトリウム二水和物の１つ以上を含み得る。

本明細書に記載の抗体若しくは抗体の断片、又は組成物、又は医薬組成物は、凍結乾燥させるか、又は任意の好適な形態、例として、限定されるものではないが、注射液剤若しくは吸入液剤、ゲル形態及び錠剤形態でも提供することができる。

抗体の置換バリアントは、本発明により包含される。置換バリアントは、抗体分子中の少なくとも１つのアミノ酸残基が除去されており、その場所に挿入された異なる残基を有する。置換突然変異誘発のために最も興味深い部位としては、超可変領域が挙げられるが、フレームワーク変更も企図される。保存的置換は、表１に「保存的置換」の見出しのもと示される。このような置換が生物学的活性の変化をもたらす場合、表１に「例示的置換」と指定されるか、又はアミノ酸クラスを参照して以下にさらに記載されるより実質的な変化を導入し、産物をスクリーニングすることができる。

抗体の生物学的特性の実質的な改変は、（ａ）置換の区域中のポリペプチド骨格の構造、例えばβ－シート若しくはヘリカル立体構造、（ｂ）標的部位における分子の荷電若しくは疎水性、又は（ｃ）側鎖の嵩高さの維持に対するその効果において有意に異なる置換を選択することにより達成される。天然発生残基は、共通の側鎖特性に基づいて群に分類される：
（１）非極性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
（２）荷電を有さない極性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
（３）酸性（負荷電）：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
（４）塩基性（正荷電）：Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
（５）鎖方向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；及び
（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ。

非保存的置換は、これらのクラスの１つのメンバーを別のクラスのものに交換することにより作製される。

例えば、作製することができる置換の１つのタイプは、化学反応性であり得る抗体中の１つ以上のシステインを別の残基、例えば、限定されるものではないが、アラニン又はセリンに変化させることである。例えば、非カノニカルシステインの置換が存在し得る。置換は、抗体の可変ドメインのＣＤＲ若しくはフレームワーク領域中又は定常領域中で作製することができる。一部の実施形態において、システインは、カノニカルである。抗体の適切な立体構造の維持に関与しない任意のシステイン残基も、一般に、セリンにより置換して分子の酸化安定性を改善し、異常な架橋を防止することができる。逆に、特に抗体が抗体断片、例えばＦｖ断片である場合、システイン結合を抗体に付加してその安定性を改善することができる。

抗体は、例えば、抗体の結合特性を変更するために、例えば重鎖及び／又は軽鎖の可変ドメイン中でも改変することができる。可変領域の変化は、結合親和性及び／又は特異性を変更し得る。一部の実施形態において、１つ～５つ以下の保存的アミノ酸置換がＣＤＲドメイン内で作製される。他の実施形態において、１つ～３つ以下の保存的アミノ酸置換がＣＤＲドメイン内で作製される。

本明細書に記載の抗体は、組換え産生することができる。真核発現系中で産生される抗体は、Ａｓｎ２９７に対応するＦｃ部分上の残基におけるグリコシル化を含む。

実施形態において、本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片を含む組成物又は医薬組成物は、抗体又はその抗原結合断片に関して実質的に純粋である。本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片を含む組成物又は医薬組成物は、組成物又は医薬組成物のサンプルの少なくとも６０％～７５％が抗体又はその抗原結合断片の単一種を呈する場合、抗体又は断片に関して「実質的に純粋」である。本明細書に記載の抗体又はその抗原結合断片を含む実質的に純粋な組成物又は医薬組成物は、抗体又は抗原結合断片であるその部分において、単一種の抗体又は抗原結合断片の６０％、７０％、８０％又は９０％、より通常には約９５％、好ましくは９９％超を含み得る。純度又は均一性は、当技術分野において周知の多数の手段、例えばポリアクリルアミドゲル電気泳動又はＨＰＬＣにより試験することができる。

方法の実施形態において、対象は、哺乳類である。

実施形態において、哺乳類は、ヒトである。

本明細書に記載の種々の要素の全ての組み合わせは、特に本明細書に記載のない限り又は特に文脈により明らかに矛盾しない限り、本発明の範囲内である。

本明細書において使用される用語は、特定の実施形態を記載する目的のためのものにすぎず、限定的なものではない。本明細書において使用される単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」及び「その」は、内容が特に明記しない限り、複数形、例として「少なくとも１つ」を含むものとする。「少なくとも１つ」は、「１つの（ａ）」又は「１つの（ａｎ）」を限定するものと解釈すべきでない。「又は」は、「及び／又は」を意味する。本明細書において使用される用語「及び／又は」は、関連する列挙項目の１つ以上の任意の及び全ての組み合わせを含む。用語「含む」、「包含する」及び「有する」は、包括的であるものとし、列挙要素以外の追加の要素が存在し得ることを意味する。

薬学的に許容可能：本明細書において使用される用語「薬学的に許容可能」は、動物、より特定するとヒト及び／又は非ヒト哺乳類における使用に安全である他の配合物に加えて、連邦若しくは州政府の規制機関により承認されているか、又は米国薬局方、他の一般に認識されている薬局方に列挙されていることを意味する。薬学的に許容可能な担体：本明細書において使用される用語「薬学的に許容可能な担体」は、本抗体又は断片とともに投与される賦形剤、希釈剤、保存剤、可溶化剤、乳化剤、補助剤及び／又はビヒクルを指す。このような担体は、無菌液体、例えば水及び油、例として石油、動物、植物又は合成起源のもの、例えばピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油など、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の合成溶媒であり得る。抗菌剤、例えばベンジルアルコール又はメチルパラベン；酸化防止剤、例えばアスコルビン酸又は重硫酸ナトリウム；キレート剤、例えばエチレンジアミン四酢酸；及び張度の調整のための薬剤、例えば塩化ナトリウム又はデキストロースも担体であり得る。担体との組み合わせで組成物を産生する方法は、当業者に公知である。一部の実施形態において、言語「薬学的に許容可能な担体」は、医薬投与と適合性である任意の及び全ての溶媒、分散媒、コーティング、等張及び吸収遅延剤などを含むものとする。薬学的に活性な物質のこのような媒体及び薬剤の使用は、当技術分野において周知である。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，ＴｈｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅｏｆＰｈａｒｍａｃｙ．２０”’ｅｄ．，（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ２００３）を参照されたい。任意の慣用の媒体又は薬剤が活性化合物と不適合でない限り、組成物におけるそのような使用が企図される。

本明細書に記載の本発明の態様及び実施形態は、態様及び実施形態「からなること」及び／又は「から本質的になること」を含むことが理解される。

本開示全体にわたり、本発明の種々の態様を範囲形式で提示することができる。範囲形式の記載は、単に便宜性及び簡潔性のためであることを理解すべきであり、本発明の範囲に対する変更できない限定として解釈すべきでない。したがって、範囲の記載は、全ての可能な部分的範囲及びその範囲内の個々の数値を具体的に開示しているとみなすべきである。例えば、範囲の記載、例えば１～６は、部分的範囲、例えば１～３、１～４、１～５、２～４、２～６、３～６など、並びにその範囲内の個々の数、例えば１、２、３、４、５及び６を具体的に開示しているとみなすべきである。これは、範囲の幅に関係なく適用される。

本発明の他の目的、利点及び特徴は、添付の図面とともに解釈される以下の本明細書から明らかになる。

本開示を種々の実施形態を参照して記載してきた一方、本開示の範囲を逸脱せずに種々の変化形態がなされ得、均等物がその要素について置換され得ることが当業者により理解される。さらに、特定の状況又は材料を、本開示の教示に、その本質的な範囲から逸脱せずに適合させるために多くの改変形態がなされ得る。したがって、本開示は、本開示の実施のために企図される最良の方式として開示される特定の実施形態に限定されず、本開示は、添付の特許請求の範囲内に収まる全ての実施形態を含むことが意図される。

全ての引用される特許、特許出願及び他の参照文献は、参照により全体として本明細書に組み込まれる。しかしながら、本出願の用語が、組み込まれる参照文献の用語と矛盾又は相反する場合、本出願からの用語が、組み込まれる参照文献からの相反用語よりも優先される。

本発明は、以下の実験詳細からよりよく理解することができる。

実験詳細
免疫優勢エンベロープ糖タンパク質Ｄが欠失した候補ＨＳＶ－２シングルサイクルウイルスワクチン（ΔｇＤ－２と命名）は、ネズミモデルにおけるＨＳＶ疾患からマウスを能動的又は受動的に保護し得る高力価抗体を誘導する。これらの抗体は、弱い中和性であるが、ネズミＦｃガンマ受容体ＩＶ（ＦｃγＲＩＶ）を潜在的に活性化させて抗体依存性細胞媒介細胞毒性（ＡＤＣＣ）を活性化させる。本開示は、免疫マウスの胚中心Ｂ細胞から単離されたモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を分析し、クローニングし、シーケンシングし、試験し、ウイルス疾患からマウスを受動的に保護するいくつかを同定した。あるｍＡｂは、ＨＳＶを有する患者（例えば、ヒト化形態におけるもの）又は播種性疾患についてリスクがある患者（例えば、新生児、免疫不全宿主）の予防及び処置に使用されるために十分に活性であった。

マウスをΔｇＤ－２によりプライムブースト免疫し、脾臓、流入領域リンパ節又は骨髄を単離した。次いで、胚中心（ＧＣ）Ｂ細胞をＮＢ－２１．２Ｄ９細胞（Ｎｏｊｉｍａ培養物）上で培養した。培養後、上清をＨＳＶ溶解物結合ＩｇＧの存在についてＥＬＩＳＡによりスクリーニングした。個々のマウス間のＧＣＢ細胞クローンにおけるＢ細胞抗原受容体（ＢＣＲ）レパトア分析のための選択ＧＣＢ細胞培養物から増幅されたＶ（Ｄ）Ｊ再編成物をシーケンシングした。次いで、選択単一ＧＣＢ細胞培養物から及び単一骨髄形質細胞から再編成された抗体を、インビトロでｍＦｃγＲＩＶを活性化させ、受身伝達モデルにおいてマウスを保護する能力について評価した。

簡潔に述べると、マウスにΔｇＤ－２をワクチン接種し、次いでワクチン接種の１６日後、流入領域鼠径リンパ節をハーベストした。ＧＣＢ細胞をそれらの組織から単離し、Ｎｏｊｉｍａ培養物中で培養した。これらの（輸送）組織からのＧＣＢ細胞の全クローニング効率は、フレッシュに単離された組織のものよりも低かったが（２０％に対して６％）、ＨＳＶ－２Ｇ株（ＨＳＶ－２Ｇ又はＨＳＶ２－Ｇ）溶解物に特異的な５０個のＧＣクローンが得られた。ＥＬＩＳＡをＨＳＶ－２Ｇ溶解物及び非感染Ｖｅｒｏ溶解物（対照）に対して実施し、結果を図１に示す。ΔｇＤ－２によりワクチン接種されたマウスの鼠径リンパ節からのＧＣＢ細胞を９６ウェルプレート中に直接ソートした（１個の細胞／ウェル）。次いで、これらのＧＣＢ細胞をＮＢ－２１．２Ｄ９フィーダー細胞の存在下で培養した。培養後、ＩｇＧの存在を最初にＥＬＩＳＡにより決定し、次いでＨＳＶ－２Ｇ溶解物（ＨＳＶ－２Ｇ）及び非感染Ｖｅｒｏ溶解物に対する培養物上清ＩｇＧの反応性をＥＬＩＳＡにより試験した。

ＧＣＢ細胞の分子遺伝的特徴を分析した（図２）。Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物をＨＳＶ－２Ｇ溶解物反応性ＩｇＧ＋培養物のｃＤＮＡから増幅させ、次いでクローニングし、シーケンシングした。再編成されたＶ、Ｄ及びＪ遺伝子セグメントは、ＩＭＧＴＶ－ＱＵＥＳＴ（ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／におけるワールドワイドウェブを参照されたい）を使用して決定した。ＶＨ遺伝子セグメントの多様なセットは、ＨＳＶ２特異的ＧＣＢ細胞により使用された。ＶＨ１－６４及びＶＨ１－２６は、他の遺伝子セグメントよりも高頻度（約１０％）で出現した。

それぞれのＢ細胞培養物から得られたＶ（Ｄ）Ｊ配列に基づき、対合重鎖及び軽鎖をＥｘｐｉ２９３Ｆ細胞中で（組換えマウスＩｇＧ１及びＩｇＧ２ｃ抗体として）再発現させた（Ｋｕｒａｏｋａｅｔａｌ．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ２０１６；ＤｉＬｉｌｌｏｅｔａｌ．ＮａｔｕｒｅＭｅｄｉｃｉｎｅ２０１３）。次いで、４つの独立したＨＳＶ－２Ｇ溶解物反応性ＩｇＧ＋単一Ｂ細胞培養物を１６日目ＧＣＢ細胞から選択した。予測されるとおり、全ての組換え抗体は、ＨＳＶ－２Ｇ溶解物と特異的に反応した（図３）。クローン３２Ｈ６が最も強く溶解物に結合し、次いで３５Ｈ７、２２Ｄ１０及び３３Ｂ８であった。図３は、組換え抗体によるＨＳＶ－２Ｇ溶解物結合の保持を示す。ＨＳＶ－２Ｇ溶解物への組換え抗体の結合は、ＥＬＩＳＡにより試験した。重鎖及び軽鎖Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物の両方を選択単一Ｂ細胞培養物ウェル（２２Ｄ１０、３２Ｈ６、３３Ｂ８及び３５Ｈ７）から標準的ＲＴ－ＰＣＲにより増幅させた。これらのクローニングされたＶ（Ｄ）Ｊ再編成物を発現ベクター中に導入した。組換え抗体をＥｘｐｉ２９３Ｆ細胞中へのそれらの発現ベクターの同時形質移入により得た。≧４ｍｇの精製ＩｇＧを得た（示さず）。これらの抗体は、対照の非感染Ｖｅｒｏ溶解物に結合しなかった。これらの組換え抗体（それぞれ≧４ｍｇ）をインビトロＦｃγＲＩＶ活性化アッセイ（ＰｒｏｍｅｇａＦｃγＲＩＶＡＤＣＣＲｅｐｏｒｔｅｒＢｉｏａｓｓａｙ）（図４）及びインビボ保護アッセイにおいて反応抗原の同定のために試験した。

ΔｇＤ－２プライムブーストワクチン接種は、ブーストの８ヵ月後にマウスが依然としてＨＳＶチャレンジから保護されたことを示す結果により証明されるとおり、マウスにおいて長期のＨＳＶ反応性（及び保護性）血清ＩｇＧ応答を確立する。これらの結果は、ワクチン接種が長期生存形質細胞を良好に確立することを示唆する。プライムブーストワクチン接種を受けたマウスの骨髄から保護ＩｇＧを産生するＨＳＶ反応性形質細胞を単離できることが仮定された。ナイーブマウスと比較して、ΔｇＤ－２ワクチン接種マウスは、ΔｇＤ－２ワクチン接種マウスから骨髄形質細胞を単離した実験において、骨髄中で４倍高い頻度の表面ＩｇＭ－ＣＤ１３８ｈｉＢ２２０ｌｏ／－ＦＳＣｈｉ形質細胞を含有した。

骨髄形質細胞の分子遺伝的特徴を分析するため、Ｖ（Ｄ）Ｊ再編成物を単一ｓＩｇＭ－ＣＤ１３８ｈｉＢ２２０ｌｏ／－ＦＳＣｈｉ形質細胞のｃＤＮＡから増幅させ、次いで増幅産物をクローニングし、シーケンシングした。再編成されたＶ、Ｄ及びＪ遺伝子セグメントは、ＩＭＧＴＶ－ＱＵＥＳＴ（ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／におけるワールドワイドウェブ上で利用可能）を使用して決定した。９６個の個々の細胞から、本発明者らは、重鎖及び軽鎖の２１個のペア並びに４つの重鎖のみのクローンを回収した（表１）。２５個の重鎖配列は、４つのＩｇＧ３（１６％）、９つのＩｇＧ１（３６％）、７つのＩｇＧ２ｂ（２８％）、４つのＩｇＧ２ｃ（１６％）及び１つのＩｇＡ（４％）アイソタイプからなるものであった。２０個の個々のクローン（８０％）は、ＶＨ遺伝子セグメント中の少なくとも１つのヌクレオチド置換（平均４．４個のＶＨ突然変異）を担持した。ΔｇＤ：ＨＳＶワクチン接種マウスの骨髄形質細胞から回収されたＶ（Ｄ）Ｊ再編成物のまとめを以下の表２に提供する。表２に示されるとおり、ＣＤＲ３は、保存残基を示す（ＨＤＣＲについてＣ、Ｗ及びＬＣＤＲについてＣ、Ｆ）。ＢＭＰＣ－７を除き、ＩｇＧ２ｂ又はＩｇＧ２ｃクローン（表２の灰色行）は、ＶＨ及びＶＬ突然変異を担持し、それらの形質細胞クローンがＧＣ応答を介して生成されることを示唆する。

ΔｇＤ－２ワクチン接種により誘発された血清抗体による保護は、ＦｃγＲＩＶの活性化に依存する。活性化ＦｃγＲに優先的に結合するＩｇＧ２ｃ抗体に注目した。それぞれの形質細胞から得られたＶ（Ｄ）Ｊ配列に基づき、対合重鎖及び軽鎖を上記のとおりＥｘｐｉ２９３Ｆ細胞中で（組換えマウスＩｇＧ１及びＩｇＧ２ｃ抗体として）再発現させた。ＩｇＧ２ｂ及びＩｇＧ２ｃ定常領域を担持する９つのクローンを選択した（ＢＭＰＣ－１、ＢＭＰＣ－１２、ＢＭＰＣ－７、ＢＭＰＣ－８、ＢＭＰＣ－９、ＢＭＰＣ－２３、ＢＭＰＣ－２６、ＢＭＰＣ－５７及びＢＭＰＣ－６１）。これら９つの抗体のうち、ＢＭＰＣ－２３は、ＨＳＶ－２Ｇ溶解物と反応したが、他は反応しなかった（図５Ａ及び５Ｂ並びにデータを示さず）。ＢＭＰＣ－２３の結合は、１９Ｇ７、ΔｇＤ－２ワクチン接種マウスのＧＣＢ細胞からクローニングされた別のＨＳＶ－２Ｇ溶解物反応性ＩｇＧのものと同等である。ＢＭＰＣ－２３のＩｇＧ１及びＩｇＧ２ｃアイソタイプをインビトロＦｃγＲＩＶ活性化アッセイ（図４）及びインビボ保護アッセイ（以下の説明を参照されたい、図６Ａ～６Ｃ）において分析した。図４に示されるとおり、ＢＭＰＣ－２３ＩｇＧ２ｃは、最大レベルのＦｃγＲ活性化を示した。

２２Ｄ１０、３３Ｂ８及びＢＭＰＣ－２３抗体（それぞれ≧４ｍｇ）のＩｇＧ１及びＩｇＧ２ｃ形態の両方をインビボ保護アッセイの再現性及び保護についてのＩｇアイソタイプへの任意の依存性について評価した。代表的な実験を図６Ａ～６Ｃに示す。簡潔に述べると、２つの独立実験からの全結果は、ＢＭＰＣ－２３のＩｇＧ２ｃバージョンが８／１０匹のマウスを保護し、２２Ｄ１０が５／１０匹のマウスを保護し、３３Ｂ８が４／１０匹のマウスを致死チャレンジから保護したことを実証する。３つのモノクローナル抗体ＢＭＰＣ－２３、２２Ｄ１０及び３３Ｂ８（ＩｇＧ２ｃとして）は、ＨＳＶ－２に対して有意な保護を提供した。保護を提供する能力に対するＩｇアイソタイプの役割を試験するため、これら３つの抗体のＩｇＧ１及びＩｇＧ２ｃアイソタイプを生成し、ｍＦｃγＲＩＶシグナリングを活性化させる能力について（ＡＤＣＣについての測定値として）及びインビボ保護アッセイについて評価した。結果を図４に示す。

ＩＰ－ＭＳを実施して２２Ｄ１０、３３Ｂ８及びＢＭＰＣ－２３抗体の標的を同定した。結果を図７Ａ及び７Ｂに示し、ヒトヘルペスウイルス糖タンパク質Ｂ（ｇＢ）を標的として同定する。

ＢＭＰＣ－２３は、ＨＳＶ－１ｇＢ（ｇＢ－１）に結合する。抗体のｇＢ－１結合をＬｕｍｉｎｅｘマルチプレックスアッセイにより決定した。抗原（ｇＢ－１）コンジュゲートマイクロスフェア（それぞれ１，０００カウント）の混合物を９６ウェルフィルタープレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）のそれぞれのウェルに添加した。１％のＢＳＡ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０及び０．０５％のＮａＮ３を含有するＰＢＳにより洗浄した後、段階希釈された組換え抗体（５Ｅ７、１９Ｇ７、１８Ｇ４、２２Ｅ１０、３Ａ２、１７Ｇ３、２２Ｄ１０、３２Ｈ６、３３Ｂ８、２５Ｈ７、ＢＭＰＣ－２３及びＳ５Ｖ２－２９）をプレートに添加し、プレートを穏やかに撹拌しながら室温において２時間インキュベートした。サンプルを、１％の牛乳、１％のＢＳＡ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０及び０．０５％のＮａＮ３を含有するＰＢＳ中で希釈した。洗浄後、ＰＥヤギ抗マウスＩｇＧをプレートに添加し、穏やかに撹拌しながら室温において１時間インキュベートした。洗浄後、マイクロスフェアを、１％のＢＳＡ、０．０５％のＴｗｅｅｎ２０及び０．０５％のＮａＮ３を含有するＰＢＳ中で再懸濁させ、それぞれのマイクロスフェアからの蛍光シグナルをＢｉｏ－Ｐｌｅｘ（登録商標）３Ｄ機器中で測定した。図８に示されるとおり、ｇＢ－１への実質的な結合を実証する唯一の抗体は、ＢＭＰＣ－２３であった。

ｇＢ－１特異的ＨＳＶ抗体の発見。Ｎｏｊｉｍａ培養（単一Ｂ細胞培養）後、ＨＳＶ特異的抗体を胚中心Ｂ細胞からクローニングし、上記のとおりＬｕｍｉｎｅｘマルチプレックスアッセイによりＨＳＶ－１ｇＢ－１への結合について試験した。図９Ａ及び９Ｂは、ＢＭＰＣ－２３と比較した１０個の抗体についてのｇＢ－１結合結果を示す。試験された抗体についての細胞起源及び単離方法を表３に示す。ＢＭＰＣ－２３を除き、表３の抗体は、ΔｇＤ－２による初回ワクチン接種の１５～１７日後に採取された胚中心Ｂ細胞（リンパ節）に由来した。ＢＭＰＣ－２３は、ΔｇＤ－２によるブーストの２週間後に採取された骨髄形質細胞に由来した。重鎖及び軽鎖についてのヌクレオチド配列及びアミノ酸配列を表４に示し、それらは、軽鎖及び重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３についてのアミノ酸配列である。

ＢＭＰＣ様抗体の発見。図３の１０個のｇＢ－１特異的マウスモノクローナルＩｇＧ抗体のうちの９つを、ｇＢ－１へのＢＭＰＣ－２３ヒトＩｇＧ抗体の結合を阻害するそれらの能力について試験した。段階希釈されたｇＢ－１特異的マウスモノクローナル抗体又は無関連対照マウス抗体（Ｈ３３Ｌγ１）をｇＢ－１コンジュゲートＬｕｍｉｎｅｘビーズとインキュベートした。インキュベーション後、固定濃度（２ｎｇ／ｍｌ）のＢＭＰＣ－２３ヒトＩｇＧ抗体をそれぞれのウェルに添加した。洗浄後、マウス抗ヒトＩｇＧ－ＰＥを添加してヒトＢＭＰＣ－２３抗体の結合を検出した。ｙ軸は、ｇＢ－１に結合しない対照ＩｇＧ、Ｈ３３Ｌγ１の存在下で平均ＭＦＩとして決定された最大結合のＭＦＩ割合を示す。図１０Ａは、ＢＭＰＣ－２３マウスＩｇＧ（２２２ｎｇ／ｍｌにおける）がヒトＢＭＰＣを＞９９％阻害したことを示す。それぞれ図１０Ｂ、１０Ｆ及び１０Ｇに示されるＨＳＶ０１０－４（２２２ｎｇ／ｍｌにおいて＞９５％）、ＨＳＶ０１０－７（２２２ｎｇ／ｍｌにおいて＞９０％）及びＨＳＶ０１０－３４（２２２ｎｇ／ｍｌにおいて＞８０％）による強力な阻害は、それらの抗体がｇＢ－１上のエピトープに、ＢＭＰＣ－２３により認識されるものと密接に重複して結合することを示す。したがって、ＢＭＰＣ－２３と同様の保護効力がそれらの抗体から予測される（実験進行中）。ＨＳＶ０１０－２８（図１０Ｄにおける２２２ｎｇ／ｍｌにおいて３０％の阻害）及びＨＳＶ０１０－６、９、１３、１４（図１０Ｅにおける２２２ｎｇ／ｍｌにおいて３２％～４８％）による軽度の阻害は、それらの抗体により認識されるｇＢ－１上のエピトープが、ＢＭＰＣ－２３により認識されるものと部分的に重複することを示す。図１０Ｃに示されるＨＳＶ０１０－２０による無阻害は、この抗体により認識されるエピトープが、ＢＭＰＣ－２３により認識されるものと重複しないことを示す。これらの抗体の保護効力は、試験する必要がある（実験進行中）。上記データも以下の表３にまとめる。

追加の実験。抗体２２Ｄ１０及び３３Ｂ８についての標的抗原の決定を、ＢＭＰＣ－２３抗体の抗原決定に使用されたものと同様の方法を使用して実施した。例えば、２２Ｄ１０若しくは３３Ｂ８抗体により結合されるタンパク質の質量分析及び／又はＨＳＶ－１からの他の非ｇＢ精製抗原に対する２２Ｄ１０若しくは３３Ｂ８のスクリーニングなどの方法を使用することができる。

ＨＳＶ－１による眼感染症から保護する表３の１２個の非試験抗体の能力は、上記の方法を使用して評価される。

表３のＨＳＶ－１結合抗体についてのエピトープの構造決定を実施した。このような方法としては、ＨＳＶ－１タンパク質（例えば、ｇＢ－１）との抗体のＦａｂ断片の共結晶化、Ｘ線回折及びＸＤＳによる分析が挙げられる（例えば、Ｗａｔａｎａｂｅｅｔａｌ，２０１９，Ｃｅｌｌ，１７７，１１２４－１１３５を参照されたい）。

Claims

抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＳＦＴＴＹＤ（配列番号１）、
ＩＹＰＲＥＧＳＴ（配列番号２）、及び
ＡＴＹＧＳＳＲＹＹＴＭＤＹ（配列番号３）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＥＳＶＤＮＦＧＩＳＦ（配列番号４）、
ＡＡＳ（配列番号５）、及び
ＱＱＳＫＥＶＰＬＴ（配列番号６）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片。
抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＳＩＴＮＧＮＨ（配列番号７）、
ＩＲＳＳＧＳＳ（配列番号８）、及び
ＡＲＧＧＧＬＲＨＹＦＤＹ（配列番号９）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＧＮＩＨＮＹ（配列番号１０）、
ＨＡＥ（配列番号１１）、及び
ＱＨＦＷＳＴＰＹＴ（配列番号１２）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片。
抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＦＴＦＴＤＹＹ（配列番号１３）、
ＩＲＮＫＡＮＧＹＴＴ（配列番号１４）、及び
ＡＣＧＮＹＶＧＹＡＭＤＹ（配列番号１５）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹ（配列番号１６）、
ＷＡＳ（配列番号１７）、及び
ＫＱＳＹＮＬＹＴ（配列番号１８）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片。
抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＦＳＬＳＲＨＤ（配列番号７９）、
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＱＤＩＳＳＹ（配列番号８２）、
ＲＡＮ（配列番号８３）、及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片。
抗体又は抗原結合断片であって、
ＧＹＴＦＴＮＹＤ（配列番号８７）、
ＩＹＰＲＤＧＳＴ（配列番号８８）、及び
ＡＲＧＩＦＹＶＮＹＤＶＹ（配列番号８９）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）、
ＧＡＡ（配列番号９１）、及び
ＱＱＹＷＳＳＰＬＴ（配列番号９２）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片。
抗体又は抗原結合断片であって、
ＥＹＥＦＰＳＨＤ（配列番号９３）、
ＩＮＳＤＧＧＳＴ（配列番号９４）、及び
ＡＲＨＳＳＧＹＶＬＤＹ（配列番号９５）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＨＷ（配列番号９６）、
ＧＡＴ（配列番号９７）、及び
ＱＱＹＷＳＴＰＹＴ（配列番号９８）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片。
抗体又は抗原結合断片であって、
ＥＹＥＦＰＳＨＤ（配列番号８５）、
ＩＮＳＤＧＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＲＨＳＳＧＹＶＬＤＹ（配列番号８１）
を含む重鎖可変領域；並びに／又は
ＤＨＩＮＨＷ（配列番号８６）、
ＧＡＴ（配列番号８３）、及び
ＱＱＹＷＳＴＰＹＴ（配列番号８４）
を含む軽鎖可変領域
を含む抗体又は抗原結合断片。
ＩｇＧ２ｃアイソタイプを有する、請求項１～７のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片。
ヒト化抗体である、請求項１～８のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片。
ヒトＦｃガンマ受容体ＲＩＩＩ（ＦｃγＲＩＩＩ）に結合するＦｃ領域を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片。
単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）抗原に結合する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片。
ＨＳＶ－２糖タンパク質Ｂに結合する、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片。
軽鎖のフレームワーク領域、重鎖のフレームワーク領域又はそれらの組み合わせは、ヒトフレームワーク領域であるか、又は前記ヒトフレームワーク領域と８５％以上の同一性を有する、請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片。
前記軽鎖の前記フレームワーク領域、前記重鎖の前記フレームワーク領域又は前記それらの組み合わせは、前記ヒトフレームワーク領域である、請求項１３に記載の抗体又は抗原結合断片。
抗体の重鎖可変領域をコードする核酸であって、前記重鎖可変領域は、
ＧＹＳＦＴＴＹＤ（配列番号１）、
ＩＹＰＲＥＧＳＴ（配列番号２）、及び
ＡＴＹＧＳＳＲＹＹＴＭＤＹ（配列番号３）；又は
ＧＹＳＩＴＮＧＮＨ（配列番号７）、
ＩＲＳＳＧＳＳ（配列番号８）、及び
ＡＲＧＧＧＬＲＨＹＦＤＹ（配列番号９）；又は
ＧＦＴＦＴＤＹＹ（配列番号１３）、
ＩＲＮＫＡＮＧＹＴＴ（配列番号１４）、及び
ＡＣＧＮＹＶＧＹＡＭＤＹ（配列番号１５）；又は
ＧＦＳＬＳＲＨＤ（配列番号７９）、
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）；又は
ＧＦＳＬＮＮＹＤ（配列番号８５）、
ＩＷＧＤＧＳＴ（配列番号８０）、及び
ＡＫＥＤＹＧＩＦＰＹ（配列番号８１）；又は
ＧＹＴＦＴＮＹＤ（配列番号８７）、
ＩＹＰＲＤＧＳＴ（配列番号８８）、及び
ＡＲＧＩＦＹＶＮＹＤＶＹ（配列番号８９）；又は
ＥＹＥＦＰＳＨＤ（配列番号９３）、
ＩＮＳＤＧＧＳＴ（配列番号９４）、及び
ＡＲＨＳＳＧＹＶＬＤＹ（配列番号９５）
を含むアミノ酸配列を有する、核酸。
ヒト重鎖フレームワーク領域をコードする核酸配列をさらに含む、請求項１５に記載の核酸。
ヒトＦｃ領域をコードする核酸配列をさらに含む、請求項１５又は１６に記載の核酸。
抗体の軽鎖可変領域をコードする核酸であって、前記軽鎖可変領域は、
ＥＳＶＤＮＦＧＩＳＦ（配列番号４）、
ＡＡＳ（配列番号５）、及び
ＱＱＳＫＥＶＰＬＴ（配列番号６）；又は
ＧＮＩＨＮＹ（配列番号１０）、
ＨＡＥ（配列番号１１）、及び
ＱＨＦＷＳＴＰＹＴ（配列番号１２）；又は
ＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＹ（配列番号１６）、
ＷＡＳ（配列番号１７）、及び
ＫＱＳＹＮＬＹＴ（配列番号１８）；又は
ＱＤＩＳＳＹ（配列番号８２）、
ＲＡＮ（配列番号８３）、及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）；又は
ＱＤＩＮＳＹ（配列番号８６）、
ＲＡＮ（配列番号８３）、及び
ＬＱＹＤＥＦＰＬＴ（配列番号８４）；又は
ＤＨＩＮＮＷ（配列番号９０）、
ＧＡＡ（配列番号９１）、及び
ＱＱＹＷＳＳＰＬＴ（配列番号９２）；又は
ＤＨＩＮＨＷ（配列番号９６）、
ＧＡＴ（配列番号９７）、及び
ＱＱＹＷＳＴＰＹＴ（配列番号９８）
を含むアミノ酸配列を有する、核酸。
ヒト軽鎖フレームワーク領域をコードする核酸配列をさらに含む、請求項１８に記載の核酸。
請求項１５～１９のいずれか一項に記載の核酸の１つ以上を含む宿主細胞。
対象における単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）活性を阻害する方法であって、
前記対象におけるＨＳＶ－２活性を阻害するために有効な量において、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片を投与すること
を含む方法。
前記対象は、ＨＳＶ－２によって感染されている、請求項２１に記載の方法。
前記対象は、未だにＨＳＶ－２によって感染されていない、請求項２１に記載の方法。
前記対象は、免疫不全である、請求項２１～２３のいずれか一項に記載の方法。
前記対象は、妊娠しているか又は新生児である、請求項２１～２４のいずれか一項に記載の方法。
前記対象は、抗ウイルス薬を受けているか又は受けたことがある、請求項２１～２５のいずれか一項に記載の方法。
前記抗ウイルス薬は、アシクロビルを含む、請求項２６に記載の方法。
医薬組成物であって、
請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片；及び
薬学的に許容可能な担体又は賦形剤
を含む医薬組成物。
小分子抗ウイルス薬をさらに含む、請求項２８に記載の医薬組成物。
前記小分子抗ウイルス薬は、アシクロビルである、請求項２９に記載の医薬組成物。
前記抗体又は抗原結合断片は、対象における単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）感染に伴う疾患又は病態を処置又は予防するために有効な量で存在する、請求項２８～３０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）によって感染された細胞の抗体依存性細胞毒性（ＡＤＣＣ）を活性化させる方法であって、
前記細胞を、前記細胞のＡＤＣＣを生じさせる量における、請求項１～１４のいずれか一項に記載の単離抗体又は抗原結合断片と接触させること
を含む方法。
前記細胞は、ＨＳＶ－２に曝露されたことがあるか又はＨＳＶ－２によって感染されている対象中に存在する、請求項３２に記載の方法。
前記対象は、哺乳類である、請求項２１～２７又は３２若しくは３３のいずれか一項に記載の方法。
前記対象は、ヒトである、請求項２１～２７又は３２～３４のいずれか一項に記載の方法。
対象における単純ヘルペスウイルス２型（ＨＳＶ－２）感染に伴う疾患又は病態を処置又は予防するための医薬品の製造のための、有効量の、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗体又は抗原結合断片の使用。