JP2025515474A - 注射可能な懸濁液 - Google Patents

Abstract

本開示は、再懸濁を必要とせずに投与を可能にする治療用生物学的製剤の高濃度の注射可能な粒子懸濁液を提供する。特に、本明細書に開示される組成物は、投与前に手動の予備混合又は再懸濁を必要としない高度に濃縮された低体積の注射可能な粒子懸濁液である。

Description

関連出願
本出願は、２０２２年４月２９日に出願された米国仮出願第６３／３３６，７４３号の利益を主張する。上記出願の教示全体は、参照により本明細書に組み込まれる。

本開示は、療法のためのバイオ医薬品製品の送達（例えば、筋肉内又は皮下送達）に有用である組成物及び方法に関する。特に、本明細書に開示される組成物及び方法は、注射前に再懸濁を必要とせずに患者に投与することができる治療用生物学的製剤の高濃度、低体積、及び低シリンジ力の注射可能な粒子懸濁液である。

生物学的製剤、特に抗体は、過去数十年にわたって薬物の発見及び開発の過程でパラダイムシフトを推進しており、以前にほとんど又は全く治療選択肢が存在しなかった患者を支援している。例えば、現在のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）療法は、多くの場合、高体積及び低濃度での静脈内（ＩＶ）注入によって投与される大きな用量を必要とし、これは、送達に数時間を要する可能性があり、患者の不快感を引き起こし、感染のリスクを増加させる。皮下（ＳＣ）注射は、病院及び臨床施設への負担を軽減し、より少ない時間を必要とし、合併症のリスクを低下させるため、送達のためのより望ましい代替物を提供する。しかしながら、ｍＡｂ粒子のＳＣ注射は、多くの場合、得ることが困難である高濃度を余儀なくさせる低送達体積を必要とする。低送達体積での高い粒子濃度の要件はまた、過度に高い注射力につながり、粒子再懸濁のための手動のかき混ぜを必要とする可能性のある粒子沈降をもたらす可能性がある。したがって、投与前に手動の予備混合又は再懸濁を必要としない高度に濃縮された低体積の注射可能な粒子組成物が必要である。

本明細書では、薬学的に有効な組成物であって、
薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、
凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物が提供される。

一態様では、本開示は、疾患又は状態の治療を必要とする対象において疾患又は状態を治療する方法であって、対象に、薬学的に有効な量の組成物であって、
薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、
凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を投与することを含む、方法を提供する。

本開示はまた、本明細書において、薬学的に有効な組成物であって、
薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、
凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を投与する方法を提供する。

別の態様では、本開示は、薬学的に有効な組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した粒子であって、粒子が、
第１の治療用生物学的製剤又はその塩を含む第１の複数の粒子、
第２の治療用生物学的製剤又はその塩を含む第２の複数の粒子を含む、粒子と、
凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
組成物中の第１及び第２の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を提供する。

本開示はまた、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスと、組成物であって、
薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、
凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物と、を含む、キットを提供する。

本組成物は、いくつかの実施形態では、投与前に手動の予備混合又は再懸濁を必要とせずに、シリンジ注射、携帯型薬物送達注射デバイス、又は経口投与される液体注射器カプセルによって高濃度の治療用生物学的製剤粒子の懸濁液を投与するのに有用である。

１０００倍の倍率での本明細書に開示される組成物において使用される粒子の画像を示す。 複数の濃度での異なる凝集剤（レシチン、ＰＳ８０）の存在下及び不在下での凝集体積の画像を示す。 １２ヶ月にわたる４０℃での保管中のＩｇＧ粒子単独及び懸濁液中の安定性を示すグラフを示す。 凝集剤及びタンパク質濃度についてのパラメータのプロットを示す。 液体担体としてカプリル酸トリグリセリドを使用する懸濁液の注射性のプロットを示す。 様々な温度での一定期間にわたる凝集体積のプロットを示す。 約２．４Ｎの力を平均する、様々な温度での一定期間にわたる懸濁液の注射性のプロットを示す。 種々の針のサイズによる注射力のプロットを示す。 ２７ゲージのＵＴＷ針を使用する注射時間に対する注射力のプロットを示す。 一定期間にわたるカプセル保管中の凝集体積の代表的な画像を示す。 一定期間にわたるカプセル保管中の凝集体積の代表的な画像を示す。 ラット（Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ）のコホートにおける、ｍＡｂ微小粒子懸濁液（ＳＣ注射）及び水性ｍＡｂ ＳＣ注射についての薬物動態プロファイルのグラフを示す。 ３０μｍの倍率での本明細書に開示される組成物において使用されるリツキシマブ粒子の画像を示す。 内部断面を明らかにするために切片化されたリツキシマブ粒子の画像を示す。 注射された際の凝集剤を有する６２０ｍｇ／ｍＬのリツキシマブ懸濁液の滑走力のプロットを示す。 ３０μｍの倍率での本明細書に開示される組成物において使用されるリツキシマブ粒子の画像を示す。 内部断面を明らかにするために切片化されたリツキシマブ粒子の画像を示す。 注射された際の凝集剤を有する５０７ｍｇ／ｍＬのリツキシマブ懸濁液の滑走力のプロットを示す。

治療用生物学的製剤、特にモノクローナル抗体（ｍＡｂ）治療法は、ヒト疾患の治療を劇的に改善している。しかしながら、これらの生物学的製剤の送達は、患者に負担をかけている。投与の標準は、多くの場合、低濃度での静脈内（ＩＶ）注入によるものであり、これは、送達に数時間を要する可能性があり、患者の不快感を引き起こし、患者に対する感染のリスクを増加させる。単純な注射による皮下（ＳＣ）送達が好ましいが、ＳＣ送達体積（１．５～２．０ｍＬ）に対する制約は、１００ｍｇ／ｍＬ超の抗体濃度を余儀なくさせ、これは多くの場合、実行不可能である。１００ｍｇ／ｍＬを超える溶液濃度は非常に粘性があり、これにより非常に高い注射力につながり、多くの場合、治療用抗体組成物の分解を伝播する。粒子懸濁液技術の利用は、治療用生物学的製剤（例えば、ｍＡｂ）の完全な構造及び生物活性を保存しながら、５００ｍｇ／ｍＬ超の治療用生物学的製剤（例えば、抗体）濃度を送達することができ、したがって、治療用生物学的製剤の送達をＩＶからＳＣに変換することにより、患者、医療提供者、支払者、及び薬学的開発者に利点を提供することができる。しかしながら、治療用生物学的製剤粒子は、経時的に懸濁液媒体（例えば、薬学的に許容される液体担体）から最終的に沈殿又は沈降し、高い注射力につながる。したがって、組成物の投与前の粒子再懸濁液には、外部手段（例えば、ボルテックス又は音波のかき混ぜ）による容器閉鎖の手動のかき混ぜ又は予備混合が必要とされる。

本開示は、一般に、薬学的に有効な組成物及び方法であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満である、組成物及び方法に関する。いくつかの実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度は、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である。いくつかの実施形態では、組成物と同時に、逐次的に、又は断続的に投与することができる、薬学的に有効な量の少なくとも１つのヒアルロナン分解剤（例えば、ヒアルロニダーゼ）を投与することを更に含む、本明細書に記載される組成物及び方法。いくつかの実施形態では、複数の粒子及び凝集剤は、少なくとも１ヶ月間、非水性液体担体中に実質的に懸濁したままである。ある特定の実施形態では、組成物は、投与前に手動の予備混合又は再懸濁を必要とせずに、シリンジ注射、携帯型薬物送達注射デバイス、又は経口投与される液体注射器カプセルによって投与される。いくつかの実施形態では、組成物の注射力は、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、実質的に同じままである。薬学的に許容される液体担体中に凝集剤とともに懸濁した複数の粒子を含む、本開示の例の組成物の説明については、本明細書における実施例２～３を参照されたい。

本明細書に一般に記載される態様及び実施形態が例示的であることは容易に理解されるであろう。様々な態様及び実施形態の以下のより詳細な説明は、本開示の範囲を限定することを意図するものではなく、単に様々な態様及び実施形態の代表的なものである。更に、本明細書に開示される組成物及び方法は、本開示の範囲から逸脱することなく、当業者によって変更され得る。別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書において参照される全ての刊行物及び特許は、参照により援用される。

定義
本開示の目的のために、別段の明示的な記載がない限り、以下の定義が使用される。

本開示を説明する文脈において使用される「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」という用語、及び同様の指示対象は、本明細書で別段の指示がない限り、又は文脈によって明らかに矛盾しない限り、単数形及び複数形の両方を包含すると解釈されるべきである。本明細書に記載される全ての組成物は、本明細書で別段の指示がない限り、又は文脈によって明らかに別段の矛盾がない限り、任意の好適な様式で実行することができる。本明細書に提供される任意の及び全ての例、又は例示的な文言（例えば、「～など」）の使用は、単に本開示をより良好に明示することを意図しており、別段に特許請求されている本開示の範囲に対して制限を課すものではない。本明細書におけるいずれの文言も、任意の特許請求されていない要素が本開示の実施に不可欠であることを示すものと解釈されるべきではない。

温度及び期間などの所与の数値に関連する「約」という用語は、指定された値の１０％以内の数値を含むことを意味する。

本明細書で使用される場合、「投与する」又は「投与される」という用語は、対象内への、又は対象上への（適宜）組成物の実際の物理的導入を意味する。組成物を対象内に導入する任意の及び全ての方法が、本開示に従って企図され、組成物は、任意の特定の導入手段に依存せず、そのように解釈されるべきではない。導入手段は、当業者に既知であり、また、本明細書において例示される。

本明細書で使用される場合、「アルキル」基又は「アルカン」は、完全に飽和されている直鎖状又は分岐状の非芳香族炭化水素である。典型的には、直鎖状又は分岐状のアルキル基は、別段の定義がない限り、１～約２０個の炭素原子、好ましくは１～約１０個の炭素原子を有する。直鎖状及び分岐状のアルキル基の例には、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソ－プロピル、ｎ－ブチル、イソ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、ｔｅｒｔ－ペンチル、ネオ－ペンチル、イソ－ペンチル、ｓｅｃ－ペンチル、３－ペンチル、ｓｅｃ－イソ－ペンチル、活性－ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、エチルヘキシルなどが含まれる。Ｃ_１－８直鎖状又は分岐状のアルキル基は、「低級アルキル」基とも称される。２つの開放原子価を有するアルキル基は、メチレン、エチレン、プロピレンなどのアルキレン基と称されることもある。更に、本明細書、実施例、及び特許請求の範囲を通して使用される「アルキル」（又は「低級アルキル」）という用語は、「非置換アルキル」及び「置換アルキル」の両方を含むことが意図され、後者は、炭化水素骨格の１つ以上の炭素上に水素を置き換える置換基を有するアルキル部分を指す。そのような置換基は、別段の指定がない場合、例えば、アルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル（カルボキシル、及びアルコキシカルボニル、ホルミル、若しくはアシルなど）、チオカルボニル（チオエステル、チオアセテート、若しくはチオホルメートなど）、アルコキシル、ホスホリル、ホスフェート、ホスホネート、ホスフィネート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、アルキルチオ、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、又は芳香族若しくは複素芳香族部分を含むことができる。適切であれば、炭化水素鎖上で置換された部分自体が置換され得ることが当業者には理解されるであろう。例えば、置換アルキルの置換基は、アミノ、アジド、イミノ、アミド、ホスホリル（ホスホネート及びホスフィネートを含む）、スルホニル（スルフェート、スルホンアミド、スルファモイル、及びスルホネートを含む）、及びシリル基、並びにエーテル、アルキルチオ、カルボニル（ケトン、アルデヒド、カルボキシレート、及びエステルを含む）、－ＣＦ_３、－ＣＮなどの、置換及び非置換形態を含み得る。例示的な置換アルキルを以下に記載する。シクロアルキルは、アルキル、アルケニル、アルコキシ、アルキルチオ、アミノアルキル、カルボニル置換アルキル、－ＣＦ_３、－ＣＮなどで更に置換され得る。いくつかの実施形態では、「アルキル」という用語は、環を形成するために一緒に結合された炭素原子である３～１０個の炭素環原子を有する非芳香族炭素環の環を指す「シクロアルキル」を意味し得る。環は、飽和であり得るか、又は１つ以上の炭素－炭素二重結合を有し得る。シクロアルキルの例には、限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、及びシクロヘプチル、並びにノルボルニル及びアダマンチルなどの架橋及びケージ化飽和環基が含まれる。本明細書に記載されるように、有機溶媒には、限定されないが、脂肪族炭化水素溶媒、芳香族炭化水素溶媒、アルコール若しくはアルキルアルコール、アルキルエーテル、スルホキシド、アルキルケトン、アルキルアセテート、トリアルキルアミン、アルキルホルメート、トリアルキルアミン、又はそれらの組み合わせが含まれる。脂肪族炭化水素溶媒は、ペンタン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン、シクロヘキサンなど、又はそれらの組み合わせであり得る。芳香族炭化水素溶媒は、ベンゼン、トルエンなど、又はそれらの組み合わせであり得る。アルコール又はアルキルアルコールには、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノール、ヘプタノール、オクタノール、デカノール、アミルアルコール、又はそれらの組み合わせが含まれる。アルキルエーテルには、メチル、エチル、プロピル、ブチルなど、例えば、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、又はそれらの組み合わせが含まれる。スルホキシドには、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、デシルメチルスルホキシド、テトラデシルメチルスルホキシドなど、又はそれらの組み合わせが含まれる。「アルキルケトン」という用語は、アルキル基で置換されたケトン、例えば、アセトン、エチルメチルケトンなど、又はそれらの組み合わせを指す。「アルキルアセテート」という用語は、アルキル基で置換されたアセテート、例えば、エチルアセテート、プロピルアセテート（ｎ－プロピルアセテート、イソ－プロピルアセテート）、ブチルアセテート（ｎ－ブチルアセテート、イソ－ブチルアセテート、ｓｅｃ－ブチルアセテート、ｔｅｒｔ－ブチルアセテート）、アミルアセテート（ｎ－ペンチルアセテート、ｔｅｒｔ－ペンチルアセテート、ネオ－ペンチルアセテート、イソ－ペンチルアセテート、ｓｅｃ－ペンチルアセテート、３－ペンチルアセテート、ｓｅｃ－イソ－ペンチルアセテート、活性－ペンチルアセテート）、２－エチルヘキシルアセテートなど、又はそれらの組み合わせを指す。「アルキルホルメート」という用語は、アルキル基で置換されたホルメート、例えば、メチルホルメート、エチルホルメート、プロピルホルメート、ブチルホルメートなど、又はそれらの組み合わせを指す。「トリアルキルアミン」という用語は、３つのアルキル基で置換されたアミノ基、例えば、トリエチルアミンを指す。

本明細書で使用される場合、「アミノ酸」又は「残基」は、当該技術分野で既知の任意の天然に存在する、又は天然に存在しないアミノ酸、任意のアミノ酸誘導体、又は任意のアミノ酸模倣物を指す。それぞれのアミノ酸のＬ形態及びＤ形態が含まれるが、Ｌ形態が通常好ましい。いくつかの実施形態では、この用語は、２０個の天然に存在するアミノ酸：Ｌ形態のグリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、プロリン（Ｐｒｏ）、システイン（Ｃｙｓ）、メチオニン（Ｍｅｔ）、セリン（Ｓｅｒ）、スレオニン（Ｔｈｒ）、グルタミン（Ｇｉｎ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、リジン（Ｌｙｓ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、及びチロシン（Ｔｙｒ）のうちのいずれか１つに関する。いくつかの実施形態では、アミノ酸側鎖は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、又はＰｒｏの側鎖であり得る。ある特定の実施形態では、アミノ酸誘導体は、アミノ酸塩、例えば、塩酸、リン酸、ＤＬ－乳酸／グリコール酸、コハク酸、クエン酸、硫酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、コハク酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、硫酸ナトリウムなどのアミノ酸塩である。

本明細書で使用される場合、文脈が別段に必要とする場合を除き、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という用語、並びに用語の変形形態、例えば「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｄ）」は、更なる添加剤、構成成分、要素、又はステップを除外することを意図するものではない。「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、互換的に使用され得る。本明細書で使用される場合、「からなる群から選択される」、「から選択される」などの語句は、指定された材料の混合物を含む。数値的な限界又は範囲が本明細書に記載される場合、その端点が含まれる。また、数値的な限界又は範囲内の全ての値及び部分範囲が、本明細書において明示的に書き出されているかのように具体的に含まれる。単数形における要素への言及は、具体的に記載されない限り、「１つ及び１つのみ」を意味することを意図するのではなく、「１つ以上」を意味することを意図する。別段の具体的な記載がない限り、「いくつかの」などの用語は、１つ以上を指し、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」などの単数形の用語は、１つ以上を指す。

「オリゴペプチド」という用語は、ポリペプチド又はタンパク質とは対照的に、アミノ酸のメンバーが少ないペプチドを指すように使用される。本明細書に記載されるオリゴペプチドは、典型的には、約２～約４０個のアミノ酸残基からなる。オリゴペプチドには、ジペプチド（２個のアミノ酸）、トリペプチド（３個のアミノ酸）、テトラペプチド（４個のアミノ酸）、ペンタペプチド（５個のアミノ酸）、ヘキサペプチド（６個のアミノ酸）、ヘプタペプチド（７個のアミノ酸）、オクタペプチド（８個のアミノ酸）、ノナペプチド（９個のアミノ酸）、デカペプチド（１０個のアミノ酸）、ウンデカペプチド（１１個のアミノ酸）、ドデカペプチド（１２個のアミノ酸）、イコサペプチド（２０個のアミノ酸）、トリコンタペプチド（３０個のアミノ酸）、テトラコンタペプチド（４０個のアミノ酸）などが含まれる。オリゴペプチドはまた、分子構造に従って分類され得る：アエルギノシン、シアノペプトリン、ミクロシスチン、ミクロビリジン、ミクロギニン、アナバエノペプチン、及びシクラミドなど。ホモオリゴペプチドは、同じアミノ酸を含むオリゴペプチドである。特定の実施形態では、ホモオリゴペプチドは、１０個のアミノ酸のポリバリン、ポリアラニン、及びポリグリシン六量体を含む。

「ペプチド」という用語の意味は、別のアミノ酸のアミノ基への１個のアミノ酸のカルボキシル基によって連結されている、２個以上のアミノ酸の小さいタンパク質として定義される。したがって、その基本的レベルにおいて、どのようなタイプのペプチド合成も、アミノ酸又はペプチド分子を互いに又は既存のペプチド鎖に追加する、繰り返されるステップを含む。「ペプチド」という用語は、一般に、約２～約１００個のアミノ酸を有する一方、ポリペプチド又はタンパク質は、遺伝子から翻訳され得る全長配列まで、約１００個以上のアミノ酸を有する。加えて、本明細書で使用される場合、ペプチドは、ポリペプチド又はタンパク質の部分配列又は一部分であり得る。ある特定の実施形態では、ペプチドは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、又は１００個のアミノ酸残基からなる。いくつかの実施形態では、ペプチドは、約３０～約１００個のアミノ酸の長さである。

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、又は他の問題若しくは合併症を伴わずに、ヒト及び動物の組織との接触における使用に好適であり、合理的な利益／リスク比に見合う組成物を指す。好ましくは、「薬学的に許容される」という用語は、連邦若しくは州政府の規制機関によって承認されているか、又は動物、より特定的にはヒトにおいて使用するための米国薬局方若しくは他の一般に認められた薬局方にリストされていることを意味する。

「タンパク質」という用語の意味は、約２０個の異なるアミノ酸から構築された線形ポリマーとして定義される。タンパク質中のアミノ酸のタイプ及び配列は、それらを産生するＤＮＡによって指定される。ある特定の実施形態では、配列は、天然及び非天然であり得る。アミノ酸の配列は、タンパク質の全体的な構造及び機能を決定する。いくつかの実施形態では、タンパク質は、５０個以上の残基を含有することができる。特定の実施形態では、タンパク質は、約１０１個を超える残基の長さを含有することができる。タンパク質の正味電荷は、２つの因子によって決定することができる：１）酸性アミノ酸対塩基性アミノ酸の総計数、及び２）正の残基又は負の残基を曝露する特定の溶媒ｐＨ環境。本明細書で使用される場合、「正味正に帯電した又は正味負に帯電したタンパク質」は、非変性ｐＨ環境下で正味正電荷又は正味負電荷を有するタンパク質である。一般に、当業者は、全てのタンパク質が、そのｐＨ及び／又は溶媒環境に応じて、そのアミノ酸組成物にかかわらず、「正味負に帯電したタンパク質」とみなされ得ることを認識するであろう。例えば、異なる溶媒は、溶媒ｐＨに応じて、負又は正の側鎖を露出させることができる。タンパク質は、好ましくは、対応する酵素又は抗体と実質的に同じ活性を示す任意のタイプの酵素又は抗体若しくはその断片から選択される。タンパク質は、構造材料（例えば、ケラチン）として、酵素として、ホルモンとして、輸送体（例えば、ヘモグロビン）として、抗体として、又は遺伝子発現の調節因子として機能し得る。タンパク質は、細胞、組織、及び臓器の構造、機能、及び調節に必要とされる。いくつかの実施形態では、タンパク質は、治療用生物学的製剤である。ある特定の実施形態では、タンパク質は、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）又はヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）である。

本明細書で使用される「実質的に」という用語は、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、９９．５％、９９．９％、９９．９９％、又は少なくとも約９９．９９９％以上におけるような大部分、又はほとんどを指す。

開示されるプロセスにおけるステップの特定の順序又は階層は、例示的なアプローチの例示であることが理解される。設計上の選択に基づいて、プロセスのステップの特定の順序又は階層が並べ替えられ得ることが理解される。いくつかのステップは同時に実行され得る。「実施形態」などの語句は、そのような実施形態が主題技術の全ての構成に適用されることを含意しない。実施形態に関する開示は、全ての実施形態、又は１つ以上の実施形態に適用され得る。実施形態などの語句は、１つ以上の実施形態を指してもよく、その逆も指してもよい。

粒子
別段の定義がない限り、本明細書で使用される技術の全ての用語、表記法、及び他の科学用語は、本開示が属する技術分野の技術者によって一般的に理解される意味を有することが意図される。いくつかの場合では、一般的に理解される意味を有する用語は、明瞭さ及び／又は容易に参照するために本明細書で定義され、そのような定義を本明細書に含めることは、必ずしも当該技術分野で一般に理解されるものとの実質的な差を表すと解釈されるべきではない。本明細書に記載又は参照される技術及び手順は、一般に十分に理解されており、当業者によって従来の方法論を使用して一般的に用いられる。適宜、別段の明記がない限り、市販のキット及び試薬の使用を伴う手順は、一般に、製造元が定義したプロトコル及び／又はパラメータに従って実施される。本明細書で使用される場合、「及び／又は」という語句は、２つ以上の項目のリストにおいて使用される際に、リストされた項目のうちのいずれか１つを単独で用いることができるか、又はリストされた項目のうちの２つ以上の任意の組み合わせを用いることができることを意味する。例えば、組成物が構成成分Ａ、Ｂ、及び／又はＣを含有又は除外するものとして記載されている場合、組成物は、Ａのみ、Ｂのみ、Ｃのみ、Ａ及びＢを組み合わせて、Ａ及びＣを組み合わせて、Ｂ及びＣを組み合わせて、又はＡ、Ｂ、及びＣを組み合わせて含有又は除外することができる。

本明細書で使用される「粒子（ｐａｒｔｉｃｌｅ）」若しくは「粒子（ｐａｒｔｉｃｌｅｓ）」又は「微小粒子（ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ）」若しくは「微小粒子（ｍｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ）」という用語は、最も広い意味で互換的に、別個の本体（ｂｏｄｙ）又は本体（ｂｏｄｉｅｓ）を指す。本明細書に記載される粒子は、例えば、従来の凍結乾燥中に典型的に生成される多孔質モノリシック「ケーキ」とは対照的に、円形であり、サブマイクロメートルから数十マイクロメートルまでの特徴サイズを有する制御された分散性のものである。この形態は、後処理なしで流動性粉末（例えば、低ハウスナー比を特徴とする）を可能にする。いくつかの実施形態では、「粒子」という用語は、液滴と比較して実質的に固体である物質の状態のいずれかにある、タンパク質（ｐｒｏｔｅｉｎ）又はタンパク質（ｐｒｏｔｅｉｎｓ）、例えば、治療用生物学的製剤（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｂｉｏｌｏｇｉｃ）又は治療用生物学的製剤（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ）の量を指す。

本明細書に開示されるように、生物学的製剤医薬製品又はバイオ医薬品としても既知の治療用生物学的製剤は、生物学的供給源において製造された、それから抽出された、又はそれから半合成された任意の薬学的薬物である。治療用生物学的製剤は、ワクチン、血液及び血液構成成分、アレルゲン、体細胞、遺伝子療法、組織、並びに組換え治療用タンパク質などの広範囲の製品を含むことができる。生物学的製剤は、種々の天然供給源、例えば、ヒト、動物、又は微生物から単離することができ、バイオテクノロジー方法又は他の技術によって生成され得る。本開示のいくつかの実施形態では、治療用生物学的製剤は、抗体又はその断片である。いくつかの実施形態では、抗体は、哺乳動物又はヒト抗体、例えば、ウシＩｇＧ、ヒトＩｇＧ、又はモノクローナル抗体（ｍＡｂ）である。ある特定の実施形態では、抗体は、リツキシマブ又はトラスツズマブである。特定の実施形態では、治療用生物学的製剤は、抗体の断片である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組成物は、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した少なくとも２つの複数の粒子（例えば、第１及び第２の複数の粒子）を含み、各複数の粒子は、少なくとも１つの治療用生物学的製剤（例えば、他の複数における粒子と比較して少なくとも１つの異なる治療用生物学的製剤）を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組成物は、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した少なくとも２つの複数の粒子（例えば、第１及び第２の複数の粒子）を含み、各複数の粒子は、少なくとも１つの抗体、例えば、複数のリツキシマブ粒子及び複数のトラスツズマブ粒子を含む。

「抗体」及び「免疫グロブリン」という用語は、最も広い意味で互換的に使用され、それらがどのように、すなわち、免疫化、組換え、合成方法論を使用して生成されるかにかかわらず、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多価抗体、及び多重特異性抗体を含む。抗体は、免疫系において機能して、抗原を結合し、したがって異物を特定及び／又は中和する、脊椎動物の血液又は他の体液中に見られるガンマグロブリンタンパク質であり得る。抗体は、異なるクラス又はアイソタイプに割り当てることができる。免疫グロブリンには、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭの５つのクラスがあり、それぞれ、アルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、及びミューと命名される重鎖を有する。ガンマクラスは、配列及び機能の差に基づいてサブクラスに更に分けられ、例えば、ヒトは、以下のサブクラスを発現する。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２。本開示のいくつかの実施形態では、ＩｇＧ抗体は、ＩｇＧ１抗体である。本開示のある特定の実施形態では、ＩｇＧ抗体は、モノクローナルＩｇＧ抗体である。任意の脊椎動物種からのＬ鎖は、その定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、２つの明確に異なるタイプ、例えば、カッパ及びラムダのうちの１つに割り当てることができる。

認識される免疫グロブリン遺伝子は、カッパ、ラムダ、アルファ、ガンマ、デルタ、イプシロン、及びミュー定常領域遺伝子、並びに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖は、カッパ又はラムダのいずれかとして分類される。いくつかの実施形態では、重鎖は、ガンマ、ミュー、アルファ、デルタ、又はイプシロンとして分類され、これらは、次いで、免疫グロブリンのクラス、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥをそれぞれ定義する。本開示の特定の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ抗体である。

例示的な抗体（免疫グロブリン）構造単位は、四量体を含む。各四量体は、ポリペプチド鎖の２つの同一の対から構成され、各対は、１つの「軽」鎖（約２５ｋＤ）及び１つの「重」鎖（約５０～７０ｋＤ）を有する。各鎖のＮ末端は、抗原認識に主に関与する約１００～１１０個又はそれ以上のアミノ酸の可変領域を定義する。「可変軽」鎖、ドメイン、領域、及び構成成分という用語は、互換的に使用され、「ＶＬ」又は「Ｖ_Ｌ」によって略され、抗体又は抗体断片の軽鎖を指す。同様に、「可変重」鎖、ドメイン、領域、及び構成成分という用語は、互換的に使用され、「ＶＨ」又は「Ｖ_Ｈ」によって略され、抗体又は抗体断片の重鎖を指す。抗体は、一般に、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖から構成されるヘテロ四量体糖タンパク質である。各Ｌ鎖は、１つの共有結合のジスルフィド結合によってＨ鎖に連結される。２つのＨ鎖は、Ｈ鎖アイソタイプに応じて１つ以上のジスルフィド結合によって互いに連結される。各Ｈ鎖及びＬ鎖はまた、規則的に間隔を置いた鎖内ジスルフィド架橋を有する。Ｈ鎖及びＬ鎖は、特定のＩｇドメインを定義する。特に、各Ｈ鎖は、Ｎ末端に、可変ドメイン（ＶＨ）、それに続いて、アルファ及びガンマ鎖の各々に対する３つの定常ドメイン（ＣＨ）、並びにｐ及びｃアイソタイプに対する４つのＣＨドメインを有する。各Ｌ鎖は、Ｎ末端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、それに続いてその他端に定常ドメイン（ＣＬ）を有する。ＶＬはＶＨと整列し、ＣＬは重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨＬ）と整列する。定常ドメインは、Ｆｃ部分を含み、これは、ジスルフィドによって一緒に保持される両方のＨ鎖のカルボキシ末端部分を含む。ＡＤＣＣなどの抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域内の配列によって決定され、これはまた、ある特定のタイプの細胞上に見られるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される部分でもある。

本明細書に開示されるように、ＶＨ及びＶＬの対合は、抗体の重鎖又は軽鎖のアミノ末端ドメインを含む「可変領域」又は「可変ドメイン」を一緒に形成する。重鎖の可変ドメインは、「ＶＨ」と称される場合がある。軽鎖の可変ドメインは、「ＶＬ」と称される場合がある。Ｖドメインは、「抗原結合部位」を含有し、これは、抗原結合に影響を与え、特定の抗体の、その特定の抗原に対する特異性を定義する。Ｖ領域は、約１１０個のアミノ酸残基にまたがり、各々が一般に９～１２個のアミノ酸長である「超可変領域」（一般に約３個）と呼ばれる極端な可変性のより短い領域によって分離される１５～３０個のアミノ酸のフレームワーク領域（ＦＲ）（一般に約４個）と呼ばれる比較的不変のストレッチからなる。ＦＲは、ｐシート立体配置を大部分採用し、超可変領域は、ｐシート構造を接続し、いくつかの場合ではｐシート構造の一部を形成するループを形成する。ある特定の実施形態では、「超可変領域」は、配列において超可変であり、かつ／又は構造的に定義されたループを形成する抗体可変ドメインの領域を指す。一般に、抗体は、６つの超可変領域を含み、３つがＶＨにあり（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、３つがＶＬにある（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。「フレームワーク」又は「ＦＲ」残基は、本明細書で定義される超可変領域残基以外のそれらの可変ドメイン残基である。

「全長抗体」、「インタクトな抗体」、及び「全抗体」という用語は、本明細書において、上記で定義される抗体断片としてではなく、その実質的にインタクトな形態における抗体を指すために互換的に使用される。この用語は、特に、Ｆｃ領域を含有する重鎖を有する抗体を指す。全長抗体は、天然配列抗体又は抗体バリアントであり得る。ある特定の実施形態では、「インタクトな」又は「全」抗体は、抗原結合部位、並びにＣＬ及び少なくとも重鎖定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含むものである。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン、例えば、ヒト天然配列定常ドメイン、又はそのアミノ酸配列バリアントであり得る。

上記に示されるように、本明細書で使用される抗体という用語は、別段の記載がない限り、又は文脈によって明らかに矛盾しない限り、抗原に特異的に相互作用する、例えば、結合する能力を保持する抗体の断片を含む。抗体の抗原結合機能が全長抗体の断片によって実行され得ることが示されている。「抗体」という用語内に包含される結合断片の例には、（ｉ）Ｆａｂ’又はＦａｂ断片、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、軽鎖定常領域（ＣＬ）、及び重鎖定常領域ドメイン１（ＣＨ１）ドメインからなる一価断片、又はＷＯ２００７／０５９７８２に記載される一価抗体、（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）_２断片、ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結している２つのＦａｂ断片を含む二価断片、（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインから本質的になるＦｄ断片、（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬ及びＶＨドメインから本質的になるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインから本質的になり、ドメイン抗体とも呼ばれるＨｏｌｔ ｅｔ ａｌ；Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００３ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ；２１（１１）：４８４－９０、ｄＡｂ断片Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４１，５４４－５４６（１９８９）、（ｖｉ）ラクダ科又はナノボディＲｅｖｅｔｓ ｅｔ ａｌ；Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏｌ Ｔｈｅｒ．２００５ Ｊａｎｕａｒｙ；５（１）：１１１－２４、並びに（ｖｉｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が含まれる。更に、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬ及びＶＨは、別々の遺伝子によってコードされるが、それらは、ＶＬ及びＶＨ領域が対となって一価分子を形成する単一のタンパク質鎖としてこれらが作製されることを可能にする合成リンカーにより、組換え方法を使用して接合され得る（単鎖抗体又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として既知であり、例えば、Ｒｅｖｅｔｓ ｅｔ ａｌ；Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏｌ Ｔｈｅｒ．２００５ Ｊａｎｕａｒｙ；５（１）：１１１－２４、及びＢｉｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２，４２３－４２６（１９８８）を参照されたい。そのような単鎖抗体は、別段の明記がない限り、又は文脈によって明らかに指示されない限り、抗体という用語の範囲内に包含される。そのような断片は、一般に抗体の意味内に含まれるが、それらはまとめてあり、各々が独立して、本発明の特有の特徴であり、異なる生物学的特性及び有用性を示す。本発明の文脈におけるこれら及び他の有用な抗体断片は、本明細書において更に論じられる。

本明細書に開示されるように、「可変ドメインを含む全抗体断片」には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、及びＦｖ断片、ダイアボディ、線形抗体、単鎖抗体分子、並びに抗体断片から形成された多重特異性抗体が含まれる。「Ｆａｂ断片」は、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（ＶＨ）、及び１つの重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨＩ）とともにＬ鎖全体からなる。各Ｆａｂ断片は、抗原結合に関して一価であり、すなわち、単一の抗原結合部位を有する。「Ｆａｂ’断片」は、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む、ＣＨＩドメインのカルボキシ末端での追加の少数の残基を有することにより、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を有するＦａｂ’についての本明細書における命名である。「Ｆ（ａｂ’）_２断片」は、二価抗原結合活性を有する２つのジスルフィド連結Ｆａｂ断片に大まかに対応し、依然として抗原に架橋することができる。「Ｆｖ」は、完全な抗原認識及び結合部位を含有する最小の抗体断片である。この断片は、緊密な非共有結合性会合における、１つの重鎖可変領域ドメイン及び１つの軽鎖可変領域ドメインの二量体からなる。単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）種において、１つの重鎖可変ドメイン及び１つの軽鎖可変ドメインは、軽鎖及び重鎖が二本鎖Ｆｖ種のものと類似した「二量体」構造で会合し得るように、柔軟なペプチドリンカーによって共有結合で連結され得る。これらの２つのドメインの折り畳みから、抗原結合のためのアミノ酸残基に寄与し、抗体に抗原結合特異性を付与する、６つの超可変ループ（Ｈ及びＬ鎖からそれぞれ３つのループ）が生じる。「ｓＦｖ」又は「ｓｃＦｖ」とも略される「単鎖Ｆｖ」は、単一のポリペプチド鎖を形成するために接続されたＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含む抗体断片である。特定の実施形態では、ｓｃＦｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間に、ｓｃＦｖが抗原結合のために所望の構造を形成することを可能にするポリペプチドリンカーを更に含む。いくつかの実施形態では、「単一の可変ドメイン」は、結合部位全体よりも低い親和性であるが、抗原を認識し結合する能力を有するＦｖの半分（抗原に特異的な３つのＣＤＲのみを含む）である。

いくつかの実施形態では、「ダイアボディ」は、２つの抗原結合部位を有する抗体断片を指し、この断片は、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を同じポリペプチド鎖（ＶＨ－ＶＬ）に含む。小さい抗体断片は、Ｖドメインの鎖内対合ではなく鎖間対合が達成されるように、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間の短いリンカー（約５～１０個の残基）とともにｓＦｖ断片を構築することによって調製され、二価断片、すなわち、２つの抗原結合部位を有する断片がもたらされる。いくつかの実施形態では、ダイアボディは、二価であっても二重特異性であってもよい。ある特定の実施形態では、二重特異性ダイアボディは、２つの抗体のＶＨドメイン及びＶＬドメインが異なるポリペプチド鎖上に存在する、２つの「クロスオーバー」ｓＦｖ断片のヘテロ二量体である。トリアボディ及びテトラボディもまた、当該技術分野で一般に既知である。

本明細書に記載の抗体の「抗原結合断片」は、インタクトな抗体の一部分のみを含み、一般に、インタクトな抗体の抗原結合部位を含み、したがって、抗原に結合する能力を保持する。本定義によって包含される抗体断片の例示的な例には、限定されないが、以下が含まれる：（ｉ）ＶＬ、ＣＬ、ＶＨ、及びＣＨ１ドメインを有するＦａｂ断片、（ｉｉ）ＣＨ１ドメインのＣ末端において１個以上のシステイン残基を有するＦａｂ断片であるＦａｂ’断片、（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインを有するＦｄ断片、（ｉｖ）ＶＨ及びＣＨ１ドメイン並びにＣＨ１ドメインのＣ末端において１個以上のシステイン残基を有するＦｄ’断片、（ｖ）抗体の単一のアームのＶＬ及びＶＨドメインを有するＦｖ断片、（ｖｉ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片、（ｖｉｉ）単離されたＣＤＲ領域、（ｖｉｉｉ）Ｆ（ａｂ’）_２断片、ヒンジ領域においてジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ’断片を含む二価断片、（ｉｘ）単鎖抗体分子、例えば、単鎖Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｘ）同じポリペプチド鎖において軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）に接続された重鎖可変ドメイン（ＶＨ）を含む２つの抗原結合部位を有する「ダイアボディ」、（ｘｉ）相補的軽鎖ポリペプチドと一緒に、一対の抗原結合領域を形成する一対のタンデムＦｄ、セグメント（ＶＨ－ＣＨ１－ＶＨ－ＣＨ１）を含む「線形抗体」。いくつかの実施形態では、「抗原結合部位」は、一般に、Ｖドメインに抗原結合機能を付与するために必要とされる少なくとも超可変領域及びフレームワーク領域を含む分子を指す。抗原結合部位は、本明細書に記載される方法において、抗体又は抗体断片（ｄＡｂ、Ｆａｂ、Ｆｄ、Ｆｖ、Ｆ（ａｂ’）_２、又はｓｃＦｖなど）の形態にあり得る。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、抗原結合について、インタクトな抗体、例えば、断片が由来するインタクトな抗体と競合する。

「断片」という用語は、インタクトな又は完全な抗体又は抗体鎖よりも少ないアミノ酸残基を含む抗体又は抗体鎖の一部又は一部分を指す。本明細書で使用される場合、抗体分子の「断片」という用語は、抗体のＦｃ断片及び抗原結合断片、例えば、抗体軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、抗体重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆａｂ断片、Ｆｄ断片、Ｆｖ断片、単一ドメイン抗体断片（ＤＡｂ）、ワンアームド（ｏｎｅ－ａｒｍｅｄ）（一価）抗体、又はそのような抗原結合断片の組み合わせ、組み立て、若しくはコンジュゲーションによって形成される任意の抗原結合分子を含む。

いくつかの実施形態では、「単鎖Ｆｖ」又は「ｓｃＦｖ」又は「単鎖」抗体という用語は、抗体のＶＨ及びＶＬドメインを含む抗体断片を指すことができ、これらのドメインは単一のポリペプチド鎖に存在する。一般に、Ｆｖポリペプチドは、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間に、ｓＦｖが抗原結合のために所望の構造を形成することを可能にするポリペプチドリンカーを更に含む。ｓＦｖのレビューについては、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ，ＴＨＥ ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＹ ＯＦ ＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬ ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照されたい。

本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られる抗体を指し、すなわち、集団を含む個々の抗体は、少量で存在し得る可能性のある天然に存在する変異を除いて同一である。モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、高度に特異的であり、単一の抗原部位又は抗原上の決定基に対して指向される。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、それらが他の抗体によって汚染されずに合成され得る点で有利である。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ方法論によって調製され得る。モノクローナル抗体はまた、分子工学技術を使用してファージ抗体ライブラリから単離され得る。本開示のモノクローナル抗体は、組換えＤＮＡ方法によって生成され得、本明細書に記載されるように、「組換え抗体」又は「組換えモノクローナル抗体」と称されることもある。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、全ての抗体産生細胞が単一のＢリンパ球細胞株に由来するため、全ての抗体分子が同じエピトープを認識する単一の種の抗体である。モノクローナル抗体（ｍＡｂ）を生成するための方法は、一般に、ポリクローナル抗体を調製するための方法と同じラインに沿って開始する。いくつかの実施形態では、マウス及びラットなどのげっ歯類は、モノクローナル抗体の生成に使用される。ある特定の実施形態では、ウサギ、ヒツジ、又はカエル細胞は、モノクローナル抗体の生成に使用される。ラットの使用は周知であり、ある特定の利点を提供し得る。マウス、例えば、ＢＡＬＢ／ｃマウスは、日常的に使用され、一般に、高いパーセンテージの安定な融合を与える。本開示のいくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体である。本開示の特定の実施形態では、ＩｇＧ抗体は、モノクローナルである。

いくつかの実施形態では、組換え抗体断片は、当該技術分野で周知の技術を使用して、ファージ抗体ライブラリから単離され得る。例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，１９９１，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７を参照されたい。組換え抗体断片は、細菌における組換えによって生成される大きなファージ抗体ライブラリに由来し得る（Ｓｂｌａｔｔｅｒｏ ａｎｄ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，２０００，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １８：７５－８０、及び本明細書に記載の通り）。抗体断片のＶＨ及びＶＬ構成成分、すなわち、ｓｃＦｖをコードするポリヌクレオチドは、当該技術分野で既知の方法を使用して組換え全長免疫グロブリンを生成するために使用され得る（例えば、Ｐｅｒｓｉｃ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｇｅｎｅ １８７：９－１８を参照されたい）。

「単離された抗体」は、その既存の環境の構成成分から特定されて、分離及び／又は回収されている抗体である。汚染構成成分は、抗体についての治療用途を妨げる材料であり、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性又は非タンパク質性溶質を含み得る。

本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」は、ヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体を指す。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリを含む、当該技術分野で既知の様々な技術を使用して産生することができる。ヒト抗体は、抗原投与（ａｎｔｉｇｅｎｉｃ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ）に応答してそのような抗体を産生するように修飾されているが、その内因性遺伝子座が無効化されているトランスジェニック動物に、抗原を投与することによって調製することができる。非ヒト、例えば、げっ歯類の抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト抗体に由来する最小の配列を含有するキメラ抗体である。ほとんどの場合、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域からの残基が、所望の抗体特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、ウサギ、又は非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域からの残基によって置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの実施形態では、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられている。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体又はドナー抗体に見られない残基を含み得る。これらの修飾は、抗体性能を更に向上させるために行われる。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含み、超可変ループの全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲの全て又は実質的に全てがヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体はまた、任意選択的に、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分を含むであろう。

「親和性成熟」抗体は、それらの変化を有さない親抗体と比較して、抗原への抗体の親和性における改善をもたらす、その１つ以上の超可変領域において１つ以上の変化を有するものである。いくつかの実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対してマイクロモルの親和性を有することができる。いくつかの実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対してナノモル又は更にピコモルの親和性を有することができる。親和性成熟抗体は、当該技術分野で既知の手順によって産生される。

「遮断」抗体又は「アンタゴニスト」抗体は、それが結合する抗原の生物学的活性を阻害するか、又は低減させるものである。いくつかの実施形態では、遮断抗体又はアンタゴニスト抗体は、抗原の生物学的活性を実質的又は完全に阻害する。本明細書で使用される「アゴニスト抗体」は、目的のポリペプチドの機能的活性のうちの少なくとも１つを模倣する抗体である。本明細書で使用される場合、タンパク質阻害剤、例えば、アンタゴニストの相互作用に関連する「阻害」、「阻害する」、「阻害すること」などの用語は、阻害剤の不在下でのタンパク質の活性又は機能に対して、タンパク質の活性又は機能に悪影響を及ぼす、例えば、それを減少させることを意味する。いくつかの実施形態では、阻害は、疾患又は疾患の症状の低減を指す。いくつかの実施形態では、阻害とは、シグナル伝達経路（ｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｐａｔｈｗａｙ）又はシグナル伝達経路（ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙ）の活性の低減を指す。したがって、阻害には、少なくとも部分的に、刺激を部分的又は完全に遮断すること、活性化を減少、防止、若しくは遅延すること、又はシグナル伝達若しくは酵素活性若しくはタンパク質の量を不活性化、脱感作、若しくは下方調節することが含まれる。

「結合親和性」は、一般に、分子、例えば、抗体の単一の結合部位とその結合パートナー、例えば、抗原との間の非共有結合性相互作用の合計の強さを指す。別段の指示がない限り、本明細書で使用される場合、「結合親和性」は、結合対のメンバー、例えば、抗体と抗原との間の１：１の相互作用を反映する、固有の結合親和性を指す。分子ＸのそのパートナーＹに対する親和性は、一般に、解離定数（Ｋｄ）によって表すことができる。親和性は、本明細書に記載されるものを含む、当該技術分野で既知の一般的な方法によって測定することができる。低親和性抗体は、一般に、抗原にゆっくりと結合し、容易に解離する傾向があり、一方、高親和性抗体は、一般に、抗原により速く結合し、より長く結合したままである傾向がある。結合親和性を測定する種々の方法は、当該技術分野で既知であり、それらのいずれかを本開示の目的のために使用することができる。「エピトープ」は、一般に、抗体の抗原結合部位によって結合される抗原のその一部を指す。いくつかの実施形態では、エピトープは、抗原結合部位を形成する抗体ＣＤＲの超可変ループが、一次タンパク質構造におけるようにアミノ酸の配列に結合するという意味で「線形」であり得る。いくつかの実施形態では、エピトープは、「立体配座エピトープ」、すなわち、ＣＤＲの超可変ループが、それらが三次又は四次タンパク質構造に提示されている残基に結合するものである。

前述の組成物のいくつかの実施形態では、タンパク質、例えば、治療用生物学的製剤は、抗体である。いくつかの実施形態では、抗体には、限定されないが、３Ｆ８、アバゴボマブ、アバタセプト、アブシキシマブ、アビツズマブ、アブレゼキマブ、アブリルマブ、アクリツモマブ、アクトクスマブ、アビツズマブ、アダリムマブ－ａｄｂｍ、アダリムマブ－ａｔｔｏ、アダリムマブ－ｂｗｗｂ、アデカツムマブ、Ａｄｏ－トラスツズマブエムタンシン、アデュカヌマブ、アファセビクマブ、アフェリモマブ、アフリベルセプト、アフツズマブ、アラシズマブペゴール、ＡＬＤ５１８、アレファセプト、アレムツズマブ、アリロクマブ、ペンテト酸アルツモマブ、アマツキシマブ、アナツモマブマフェナトックス、アンデカリキシマブ、アネツマブラブタンシン、アニフロルマブ、アンルキンズマブ、アンスビマブ、アポリズマブ、アプルツマブイキサドチン、アルシツモマブ、アスクリンバクマブ、アセリズマブ、アテゾリズマブ、アチドルトキスマブ、アチヌマブ、アトリズマブ、アトルチビマブ、アトロリムマブ、アベルマブ、アジンツキシズマブベドチン、バピネウズマブ、バシリキシマブ、バビツキシマブ、ＢＣＤ－１００、ベクツモマブ、ベゲロマブ、ベランタマブマホドチン、ベラタセプト、ベリムマブ、ベマリツズマブ、ベンラリズマブ、ベルメキマブ、ベルサンリマブ、ベルチリムマブ、ベシレソマブ、ベバシズマブ、ベバシズマブ－ａｗｗｂ、ベズロトキスマブ、ビシロマブ、ビマグルマブ、ビメキズマブ、ビルタミマブ、ビバツズマブメルタンシン、ブレセルマブ、ブリナツモマブ、ブロンツベトマブ、ブロソズマブ、ボコシズマブ、ブラジクマブ、ブレンツキシマブベドチン、ブリアキヌマブ、ブロダルマブ、ブロルシズマブ、ブロンチクツズマブ、ブロスマブ、カビラリズマブ、カミダンルマブテシリン、カムレリズマブ、カナキヌマブ、カンツズマブメルタンシン、カンツズマブラブタンシン、カプラシズマブ、カプロマブペンデチド、カルルマブ、カロツキシマブ、カツマキソマブ、ｃＢＲ９６－ドキソルビシン免疫複合体、セデリズマブ、セミプリマブ、セルグツズマブアムナロイキン、セルグツズマブアムナロイキン、セルトリズマブペゴール、セトレリマブ、セツキシマブ、シビサタマブ、シルムツズマブ、シタツズマブボガトックス、シクスツムマブ、クラザキズマブ、クレノリキシマブ、クリバツズマブテトラキセタン、コドリツズマブ、コフェツズマブペリドチン、コルツキシマブラブタンシン、コナツムマブ、コンシズマブ、コスフロビキシマブ、クレネズマブ、ＣＲ６２６１、クリザンリズマブ、クロテズマブ、クサツズマブ、ダセツズマブ、ダクリズマブ、ダロツズマブ、ダピロリズマブペゴール、ダラツムマブ、デクトレクマブ、デムシズマブ、デニロイキンディフチトクス、デニンツズマブマホドチン、デノスマブ、デパツキシズマブマホドチン、デルロツキシマブビオチン、デツモマブ、デザミズマブ、ジヌツキシマブ、ジリダブマブ、ドマグロズマブ、ドルリモマブアリトクス、ドスタルリマブ、ドロジツマブ、ＤＳ－８２０１、デュリゴツマブ、デュピルマブ、デュルバルマブ、デュシギツマブ、デュボルツキシズマブ、エクロメキシマブ、エクリズマブ、エドバコマブ、エドレコロマブ、エファリズマブ、エフングマブ、エルデルマブ、エレザヌマブ、エルゲムツマブ、エロツズマブ、エルシリモマブ、エマクツズマブ、エミベツズマブ、エミシズマブ、エナポタマブベドチン、エナバツズマブ、エンホルツマブベドチン、エンリモマブペゴール、エノブリツズマブ、エノキズマブ、エノチクマブ、エンシツキシマブ、エピツモマブシツキセタン、エポエチン－アルファ、エポエチン－アルファ－ｅｐｂｘ、エプラツズマブ、エプチネズマブ、エレヌマブ、エルリズマブ、エルツマキソマブ、、エタネルセプト、エタネルセプト－ｓｚｚｓ、エタラシズマブ、エチギリマブ、エトロリズマブ、エビナクマブ、エボロクマブ、エキスビビルマブ、第ＶＩＩＩ因子Ｆｃ融合タンパク質、第ＩＸ因子Ｆｃ融合タンパク質、ファノレソマブ、ファラリモマブ、ファリシマブ、ファルレツズマブ、ファシヌマブ、フェルビズマブ、フェザキヌマブ、フィバツズマブ、フィクラツズマブ、フィギツムマブ、フィルグラスチム、フィルグラスチム－ｓｎｄｚ、フィリブマブ、フランボツマブ、フレチクマブ、フロテツズマブ、ホントリズマブ、ホラルマブ、ホラビルマブ、フレマネズマブ、フレソリムマブ、フロボシマブ、フルネベトマブ、フルラヌマブ、フツキシマブ、ガルカネズマブ、ガリキシマブ、ガニツマブ、ガンテネルマブ、ガチポツズマブ、ガビリモマブ、ゲジブマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、ゲボキズマブ、ギルベトマブ、ギムシルマブ、ギレンツキシマブ、グレンバツムマブベドチン、ゴリムマブ、ゴミリキシマブ、ゴスラネマブ、グセルクマブ、イバリズマブ、ＩＢＩ３０８、イブリツモマブチウキセタン、イクルクマブ、イダルシズマブ、イファボツズマブ、イゴボマブ、イラダツズマブベドチン、ＩＭＡＢ３６２、イマルマブ、イマプレリマブ、イムシロマブ、イムガツズマブ、インクラクマブ、インダツキシマブラブタンシン、インズサツマブベドチン、イネビリズマブ、インフリキシマブ、インフリキシマブ－ａｂｄａ、インフリキシマブ－ｄｙｙｂ、インフリキシマブ－ｑｂｔｘ、インテツムマブ、イノリモマブ、イノツズマブオゾガミシン、イピリムマブ、イオマブ－Ｂ、イラツムマブ、イサツキシマブ、イスカリマブ、イスチラツマブ、イトリズマブ、イキセキズマブ、ケリキシマブ、ラベツズマブ、ラクノツズマブ、ラジラツズマブベドチン、ランブロリズマブ、ランパリズマブ、ラナデルマブ、ランドグロズマブ、ラプリツキシマブエムタンシン、ラルカビキシマブ、レブリキズマブ、レマレソマブ、レンダリズマブ、レンベルビマブ、レンジルマブ、レルデリムマブ、レロンリマブ、レソファブマブ、レトリズマブ、レクサツムマブ、リビビルマブ、リファスツズマブベドチン、リゲリズマブ、ロンカスツキシマブテシリン、ロサツキシズマブベドチン、リロトマブサテトラキセタン、リンツズマブ、リリルマブ、ロデルシズマブ、ロキベトマブ、ロルボツズマブメルタンシン、ルカツムマブ、ルリズマブペゴール、ルミリキシマブ、ルムレツズマブ、ルパルツマブアマドチン、ルチキズマブ、マフティビマブ、マパツムマブ、マルゲツキシマブ、マルスタシマブ、マスリモマブ、マブリリムマブ、マツズマブ、メポリズマブ、メテリムマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ、ミリキズマブ、ミルベツキシマブソラブタンシン、ミツモマブ、モドツキシマブ、モガムリズマブ、モナリズマブ、モロリムマブ、モスネツズマブ、モタビズマブ、モキセツモマブパスドトクス、ムロモナブ－ＣＤ３、ナコロマブタフェナトックス、ナミルマブ、ナプツモマブエスタフェナトックス、ナラツキシマブエムタンシン、ナルナツマブ、ナタリズマブ、ナビシキシズマブ、ナビブマブ、ナキシタマブ、ネバクマブ、ネシツムマブ、ネモリズマブ、ＮＥＯＤ００１、ネレリモマブ、ネスバクマブ、ネタキマブ、ニモツズマブ、ニルセビマブ、ニボルマブ、ノフェツモマブメルペンタン、オビルトキサキシマブ、オビヌツズマブ、オカラツズマブ、オクレリズマブ、オデシビマブ、オデシビマブ－ｅｂｇｎ、オズリモマブ、オファツムマブ、オララツマブ、オレクルマブ、オレンダリズマブ、オロキズマブ、オマリズマブ、オンブルタマブ、ＯＭＳ７２１、オナルツズマブ、オンツキシズマブ、オンバチリマブ、オピシヌマブ、オポルツズマブモナトックス、オレゴボマブ、オルチクマブ、オテリキシズマブ、オチリマブ、オトレルツズマブ、オキセルマブ、オザネズマブ、オゾラリズマブ、パギバキシマブ、パリビズマブ、パムレブルマブ、パニツムマブ、パンコマブ、パノバクマブ、パルサツズマブ、パスコリズマブ、パソツキシズマブ、パテクリズマブ、パトリツマブ、ＰＤＲ００１、ペグフィルグラスチム－ｊｍｄｂ、ペムブロリズマブ、ペムツモマブ、ペラキズマブ、ペルツズマブ、パキセリズマブ、ピジリズマブ、ピナツズマブベドチン、ピンツモマブ、プラクルマブ、プロザリズマブ、ポガリズマブ、ポラツズマブベドチン、ポネズマブ、ポルガビキシマブ、プラシネズマブ、プレザリズマブ、プリリキシマブ、プリトキサキシマブ、プリツムマブ、ＰＲＯ１４０、キリズマブ、ラコツモマブ、ラドレツマブ、ラフィビルマブ、ラルパンシズマブ、ラムシルマブ、ラネベトマブ、ラニビズマブ、ラキシバクマブ、ラバガリマブ、ラブリズマブ、レファネズマブ、レガビルマブ、レラトリマブ、レムトルマブ、レスリズマブ、リロナセプト、リロツムマブ、リヌクマブ、リサンキズマブ、リツキシマブ、リツキシマブ－ａｂｂｓ、リツキシマブ－ａｒｒｘ、リツキシマブ－ｐｖｖｒ、リババズマブペゴール、リババズマブペゴール、ロバツムマブ、Ｒｍａｂ、ロレズマブ、ロミルキマブ、ロミプロスチム、ロモソズマブ、ロンタリズマブ、ロスマンツズマブ、ロバルピツズマブテシリン、ロバルピツズマブテシリン、ロベリズマブ、ロザノリキシズマブ、ルプリズマブ、サシツズマブゴビテカン、サマリズマブ、サムロタマブベドチン、サペリズマブ、サリルマブ、サトラリズマブ（ＳＡ２３７）、サツモマブペンデチド、セクキヌマブ、セリクレルマブ、セリバンツマブ、セトキサキシマブ、セトルスマブ、セビルマブ、シブロツズマブ、ＳＧＮ－ＣＤ１９Ａ、ＳＧＮ－ＣＤ３３Ａ、ＳＨＰ６４７、シファリムマブ、シルツキシマブ、シムツズマブ、シプリズマブ、シルトラツマブベドチン、シルクマブ、ソフィツズマブベドチン、ソラネズマブ、ソリトマブ、ソネプシズマブ、ソンツズマブ、スパルタリズマブ、スタムルマブ、スレソマブ、スプタブマブ、スチムリマブ、スビズマブ、スブラトキスマブ、タバルマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タファシタマブ、タラコツズマブ、タリズマブ、タムツベトマブ、タネズマブ、タプリツモマブパプトキス、タレキスツマブ、タボリマブ、テフィバズマブ、テリモマブアリトキス、テリソツズマブベドチン、テナツモマブ、テネリキシマブ、テプリズマブ、テポジタマブ、テプロツムマブ、テシドルマブ、テツロマブ、テゼペルマブ、ＴＧＮ１４１２、チブリズマブ、チシリムマブ、チルドラキズマブ、チガツズマブ、チミグツズマブ、チモルマブ、チラゴツマブ、チスレリズマブ、チソツマブベドチン、ＴＮＸ－６５０、トシリズマブ、トムゾツキシマブ、トラリズマブ、トサトキスマブ、トシツモマブ、トベツマブ、トラロキヌマブ、トラスツズマブ、トラスツズマブ－ａｎｎｓ、トラスツズマブ－ｄｋｓｔ、トラスツズマブ－ｄｔｔｂ、トラスツズマブエムタンシン、トラスツズマブ－ｐｋｒｂ、トレガリズマブ、トレメリムマブ、トレボグルマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツビルマブ、ウブリツキシマブ、ウロクプルマブ、ウレルマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ウトミルマブ、バダスツキシマブタリリン、バナリマブ、バンドルツズマブベドチン、バンチクツマブ、バヌシズマブ、バパリキシマブ、バリサクマブ、バルリルマブ、バテリズマブ、ベドリズマブ、ベルツズマブ、ベパリモマブ、ベセンクマブ、ビジリズマブ、ボバリリズマブ、ボロシキシマブ、ボンレロリズマブ、ボプラテリマブ、ボルセツズマブマホドチン、ボツムマブ、キセンツズマブ、ＸＭＡＢ－５５７４、ザルツムマブ、ザノリムマブ、ザツキシマブ、ゼノクツズマブ、ジラリムマブ、ゾルベツキシマブ（ＩＭＡＢ３６２、クラウジキシマブ）、Ｚｉｖ－アフリベルセプト、又はゾリモマブアリトキスが含まれる。

前述の組成物のいくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナルである。ある特定の実施形態では、モノクローナル抗体には、限定されないが、３Ｆ８、８Ｈ９、アバタセプト、アバゴボマブ、アブシキシマブ、アビツズマブ、アダリムマブ－ａｄｂｍ、アダリムマブ－ａｔｔｏ、アダリムマブ－ｂｗｗｂ、アブリルマブ、アクトクスマブ、アビツズマブ、アブレゼキマブ、アブリルマブ、アクトクスマブ、アダリムマブ、アデカツムマブ、Ａｄｏ－トラスツズマブエムタンシン、アデュカヌマブ、アファセビクマブ、アフェリモマブ、アフリベルセプト、アフツズマブ、アラシズマブペゴール、ＡＬＤ５１８、アレファセプト、アレムツズマブ、アリロクマブ、ペンテト酸アルツモマブ、アマツキシマブ、アナツモマブマフェナトックス、アンデカリキシマブ、アネツマブラブタンシン、アニフロルマブ、アンルキンズマブ（ＩＭＡ－６３８）、アンスビマブ、アポリズマブ、アルシツモマブ、アスクリンバクマブ、アセリズマブ、アテゾリズマブ、アチドルトキスマブ、アチヌマブ、アトリズマブ（トシリズマブ）、アトルチビマブ、アトロリムマブ、アベルマブ、バピネウズマブ、バシリキシマブ、ベバシズマブ、ベバシズマブ－ａｗｗｂ、ＢＣＤ－１００、ベクツモマブ、ベゲロマブ、ベラタセプト、ベリムマブ、ベマリツズマブ、ベンラリズマブ、ベルメキマブ、ベルサンリマブ、ベルチリムマブ、ベシレソマブ、ベズロトキスマブ、ビシロマブ、ビマグルマブ、ビメキズマブ、ビルタミマブ、ビバツズマブメルタンシン、ブレセルマブ、ブリナツモマブ、ブロンツベトマブ、ブロソズマブ、ボコシズマブ、ブラジクマブ、ブレンツキシマブベドチン、ブリアキヌマブ、ブロダルマブ、ブロルシズマブ、ブロンチクツズマブ、ブロスマブ、カビラリズマブ、カムレリズマブ、カナキヌマブ、カンツズマブメルタンシン、カンツズマブラブタンシン、カプラシズマブ、カプロマブペンデチド、カルルマブ、カロツキシマブ、カツマキソマブ、セデリズマブ、セミプリマブ、セルトリズマブペゴール、セトレリマブ、セツキシマブ、シビサタマブ、シルムツズマブ、Ｃｈ．１４．１８、シタツズマブボガトックス、シクスツムマブ、クラザキズマブ、クレノリキシマブ、クリバツズマブテトラキセタン、コドリツズマブ、コフェツズマブペリドチン、コルツキシマブラブタンシン、コナツムマブ、コンシズマブ、コスフロビキシマブ、クレネズマブ、ＣＲ６２６１、クリザンリズマブ、クロテズマブ、クサツズマブ、ダセツズマブ、ダクリズマブ、ダロツズマブ、ダピロリズマブペゴール、ダラツムマブ、デクトレクマブ、デムシズマブ、デニロイキンディフチトクス、デニンツズマブマホドチン、デノスマブ、デルロツキシマブビオチン、デツモマブ、デザミズマブ、ジヌツキシマブ、ジリダブマブ、ドマグロズマブ、ドルリモマブアリトクス、ドスタルリマブ、ドロジツマブ、デュリゴツマブ、デュピルマブ、デュルバルマブ、デュシギツマブ、デュボルツキシズマブ、エクロメキシマブ、エクリズマブ、エドバコマブ、エドレコロマブ、エファリズマブ、エフングマブ、エルデルマブ、エレザヌマブ、エルゲムツマブ、エロツズマブ、エルシリモマブ、エマクツズマブ、エミベツズマブ、エミシズマブ、エナバツズマブ、エンホルツマブベドチン、エンリモマブペゴール、エノブリツズマブ、エノキズマブ、エノチクマブ、エンシツキシマブ、エピツモマブシツキセタン、エポエチン－アルファ、エポエチン－アルファ－ｅｐｂｘ、エプラツズマブ、エプチネズマブ、エレヌマブ、エルリズマブ、エルツマキソマブ、エタネルセプト、エタネルセプト－ｓｚｚｓ、エタラシズマブ、エチギリマブ、エトロリズマブ、エビナクマブ、エボロクマブ、エキスビビルマブ、第ＶＩＩＩ因子Ｆｃ融合タンパク質、第ＩＸ因子Ｆｃ融合タンパク質、ファノレソマブ、ファラリモマブ、ファリシマブ、ファルレツズマブ、ファシヌマブ、ＦＢＴＡ０５、フェルビズマブ、フェザキヌマブ、フィバツズマブ、フィクラツズマブ、フィギツムマブ、フィルグラスチム、フィルグラスチム－ｓｎｄｚ、フィリブマブ、フランボツマブ、フレチクマブ、フロテツズマブ、ホントリズマブ、ホラルマブ、ホラビルマブ、フレマネズマブ、フレソリムマブ、フロボシマブ、フルネベトマブ、フルラヌマブ、フツキシマブ、ガルカネズマブ、ガリキシマブ、ガニツマブ、ガンテネルマブ、ガチポツズマブ、ガビリモマブ、ゲジブマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、ゲボキズマブ、ギルベトマブ、ギムシルマブ、ギレンツキシマブ、グレンバツムマブベドチン、ゴリムマブ、ゴミリキシマブ、ゴスラネマブ、グセルクマブ、イバリズマブ、ＩＢＩ３０８、イブリツモマブチウキセタン、イクルクマブ、イダルシズマブ、イファボツズマブ、イゴボマブ、ＩＭＡＢ３６２、イマルマブ、イマプレリマブ、イムシロマブ、イムガツズマブ、インクラクマブ、インダツキシマブラブタンシン、インズサツマブベドチン、イネビリズマブ、インフリキシマブ、インフリキシマブ－ａｂｄａ、インフリキシマブ－ｄｙｙｂ、インフリキシマブ－ｑｂｔｘ、インテツムマブ、イノリモマブ、イノツズマブオゾガミシン、イピリムマブ、イラツムマブ、イサツキシマブ、イスカリマブ、イスチラツマブ、イトリズマブ、イキセキズマブ、ケリキシマブ、ラベツズマブ、ラクノツズマブ、ランブロリズマブ、ランパリズマブ、ラナデルマブ、ランドグロズマブ、ラルカビキシマブ、レブリキズマブ、レマレソマブ、レンダリズマブ、レンベルビマブ、レンジルマブ、レルデリムマブ、レロンリマブ、レソファブマブ、レトリズマブ、レクサツムマブ、リビビルマブ、リファスツズマブベドチン、リゲリズマブ、リロトマブサテトラキセタン、リンツズマブ、リリルマブ、ロデルシズマブ、ロキベトマブ、ロルボツズマブメルタンシン、ルカツムマブ、ルリズマブペゴール、ルミリキシマブ、ルムレツズマブ、ルチキズマブ、マフティビマブ、マパツムマブ、マルゲツキシマブ、マルスタシマブ、マスリモマブ、マブリリムマブ、マツズマブ、メポリズマブ、メテリムマブ、ミラツズマブ、ミンレツモマブ、ミリキズマブ、ミルベツキシマブソラブタンシン、ミツモマブ、モドツキシマブ、モガムリズマブ、モナリズマブ、モロリムマブ、モスネツズマブ、モタビズマブ、モキセツモマブパスドトクス、ムロモナブ－ＣＤ３、ナコロマブタフェナトックス、ナミルマブ、ナプツモマブエスタフェナトックス、ナルナツマブ、ナタリズマブ、ナビシキシズマブ、ナビブマブ、ナキシタマブ、ネバクマブ、ネシツムマブ、ネモリズマブ、ＮＥＯＤ００１、ネレリモマブ、ネスバクマブ、ネタキマブ、ニモツズマブ、ニルセビマブ、ニボルマブ、ノフェツモマブメルペンタン、オビルトキサキシマブ、オビヌツズマブ、オカラツズマブ、オクレリズマブ、オデシビマブ、オデシビマブ－ｅｂｇｎ、オズリモマブ、オファツムマブ、オララツマブ、オレクルマブ、オレンダリズマブ、オロキズマブ、オマリズマブ、オンブルタマブ、ＯＭＳ７２１、オナルツズマブ、オンツキシズマブ、オンバチリマブ、オピシヌマブ、オポルツズマブモナトックス、オレゴボマブ、オルチクマブ、オテリキシズマブ、オチリマブ、オトレルツズマブ、オキセルマブ、オザネズマブ、パギバキシマブ、パリビズマブ、パムレブルマブ、パニツムマブ、パンコマブ、パノバクマブ、パルサツズマブ、パスコリズマブ、パソツキシズマブ、パテクリズマブ、パトリツマブ、ＰＤＲ００１、ペグフィルグラスチム－ｊｍｄｂ、ペムブロリズマブ、ペムツモマブ、ペラキズマブ、ペルツズマブ、パキセリズマブ、ピジリズマブ、ピナツズマブベドチン、ピンツモマブ、プラクルマブ、プロザリズマブ、ポガリズマブ、ポラツズマブベドチン、ポネズマブ、ポルガビキシマブ、プラシネズマブ、プレザリズマブ、プリリキシマブ、プリトキサキシマブ、プリツムマブ、ＰＲＯ１４０、キリズマブ、テツロマブ、ラコツモマブ、ラドレツマブ、ラフィビルマブ、ラルパンシズマブ、ラムシルマブ、ラネベトマブ、ラニビズマブ、ラキシバクマブ、ラバガリマブ、ラブリズマブ、レファネズマブ、レガビルマブ、レラトリマブ、レムトルマブ、レスリズマブ、リロナセプト、リロツムマブ、リヌクマブ、リサンキズマブ－ｒｚａａ、リツキシマブ、リツキシマブ－ａｂｂｓ、リツキシマブ－ａｒｒｘ、リツキシマブ－ｐｖｖｒ、ロバツムマブ、Ｒｍａｂ、ロレズマブ、ロミルキマブ、ロミプロスチム、ロモソズマブ、ロンタリズマブ、ロスマンツズマブ、ロベリズマブ、ロザノリキシズマブ、ルプリズマブ、サシツズマブゴビテカン、サマリズマブ、サリルマブ、サトラリズマブ（ＳＡ２３７）、サツモマブペンデチド、セクキヌマブ、セリクレルマブ、セリバンツマブ、セトキサキシマブ、セトルスマブ、セビルマブ、シブロツズマブ、ＳＧＮ－ＣＤ１９Ａ、ＳＧＮ－ＣＤ３３Ａ、ＳＨＰ６４７、シファリムマブ、シルツキシマブ、シムツズマブ、シプリズマブ、シルクマブ、ソフィツズマブベドチン、ソラネズマブ、ソリトマブ、ソネプシズマブ、ソンツズマブ、スパルタリズマブ、スタムルマブ、スレソマブ、スプタブマブ、スチムリマブ、スビズマブ、スブラトキスマブ、タバルマブ、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ、タファシタマブ、タラコツズマブ、タリズマブ、タムツベトマブ、タネズマブ、タプリツモマブパプトキス、タレキスツマブ、タボリマブ、テフィバズマブ、テリモマブアリトキス、テナツモマブ、テネリキシマブ、テプリズマブ、テポジタマブ、テプロツムマブ、テシドルマブ、テツロマブ（リロトマブ）、テゼペルマブ、ＴＧＮ１４１２、チブリズマブ、チシリムマブ（トレメリムマブ）、チルドラキズマブ、チガツズマブ、チミグツズマブ、チモルマブ、チラゴツマブ、チスレリズマブ、ＴＮＸ－６５０、トシリズマブ（アトリズマブ）、トムゾツキシマブ、トラリズマブ、トサトキスマブ、トシツモマブ、トベツマブ、トラロキヌマブ、トラスツズマブ、トラスツズマブ－ａｎｎｓ、トラスツズマブ－ｄｋｓｔ、トラスツズマブ－ｄｔｔｂ、トラスツズマブエムタンシン、トラスツズマブ－ｐｋｒｂ、ＴＲＢＳ０７、トレガリズマブ、トレメリムマブ、トレボグルマブ、ツコツズマブセルモロイキン、ツビルマブ、ウブリツキシマブ、ウロクプルマブ、ウレルマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ウトミルマブ、バナリマブ、バンドルツズマブベドチン、バンチクツマブ、バヌシズマブ、バパリキシマブ、バリサクマブ、バルリルマブ、バテリズマブ、ベドリズマブ、ベルツズマブ、ベパリモマブ、ベセンクマブ、ビジリズマブ、ボバリリズマブ、ボロシキシマブ、ボンレロリズマブ、ボプラテリマブ、ボルセツズマブマホドチン、ボツムマブ、キセンツズマブ、ＸＭＡＢ－５５７４、ザルツムマブ、ザノリムマブ、ザツキシマブ、ゼノクツズマブ、ジラリムマブ、ゾルベツキシマブ（ＩＭＡＢ３６２、クラウジキシマブ）、Ｚｉｖ－アフリベルセプト、ゾリモマブアリトキス、又はヒト患者からの試料中の対応する抗薬物抗体が含まれる。ある特定の実施形態では、モノクローナル抗体は、リツキシマブ、リツキシマブ－ａｂｂｓ、リツキシマブ－ａｒｒｘ、又はリツキシマブ－ｐｖｖｒである。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、アトルチビマブ、マフティビマブ、オデシビマブ－ｅｂｇｎ、又はそれらの組み合わせである。

いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、バイオシミラーである。いくつかの実施形態では、バイオシミラーには、限定されないが、アダリムマブ－ａｄｂｍ、アダリムマブ－ａｔｔｏ、アダリムマブ－ｂｗｗｂ、ベバシズマブ－ａｗｗｂ、エポエチンアルファ－ｅｐｂｘ、エタネルセプト－ｓｚｚｓ、インフリキシマブ－ａｂｄａ、インフリキシマブ－ｄｙｙｂ、インフリキシマブ－ｑｂｔｘ、フィルグラスチム－ｓｎｄｚ、オデシビマブ－ｅｂｇｎ、ペグフィルグラスチム－ｊｍｄｂ、ペグフィルグラスチム－ｂｍｅｚ、リサンキズマブ－ｒｚａａ、リツキシマブ－ａｂｂｓ、リツキシマブ－ａｒｒｘ、リツキシマブ－ｐｖｖｒ、トラスツズマブ－ａｎｎｓ、トラスツズマブ－ｄｔｔｂ、トラスツズマブ－ｐｋｒｂ、又はトラスツズマブ－ｄｋｓｔが含まれる。ある特定の実施形態では、活性バイオシミラー物質は、アダリムマブ、ベバシズマブ、エノキサパリンナトリウム、エポエチンアルファ、エポエチンゼータ、エタネルセプト、フィルグラスチム、ホリトロピンアルファ、インフリキシマブ、インスリングラルギン、インスリンリスプロ、ペグフィルグラスチム、リサンキズマブ、リツキシマブ、リツキシマブ－ａｂｂｓ、リツキシマブ－ａｒｒｘ、リツキシマブ－ｐｖｖｒ、ソマトロピン、テリパラチド、トラスツズマブ、トラスツズマブ－ａｎｎｓ、トラスツズマブ－ｄｔｔｂ、トラスツズマブ－ｐｋｒｂ、又はトラスツズマブ－ｄｋｓｔである。いくつかの実施形態では、バイオシミラーは、リツキシマブ、リツキシマブ－ａｂｂｓ、リツキシマブ－ａｒｒｘ、又はリツキシマブ－ｐｖｖｒである。ある特定の実施形態では、バイオシミラーは、トラスツズマブ－ａｎｎｓ、トラスツズマブ－ｄｔｔｂ、トラスツズマブ－ｐｋｒｂ、又はトラスツズマブ－ｄｋｓｔである。

いくつかの実施形態では、標的化部分は、インタクトなポリクローナル抗体、インタクトなモノクローナル抗体、抗体断片、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）変異体、多重特異性抗体、二重特異性抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体の抗原決定基部分を含む融合タンパク質、又は抗原認識部位を含む他の修飾された免疫グロブリン分子からの抗体である。

ある特定の実施形態では、治療用生物学的製剤は、レジパスビル／ソホスブビル、インスリングラルギン、レナリドミド、沈降１３価肺炎球菌結合型ワクチン、フルチカゾン／サルメテロール、エルビテグラビル／コビシスタット／エムトリシタビン／テノホビルアラフェンアミド、エムトリシタビン、リルピビリン、及びテノホビルアラフェンアミド、エムトリシタビン／テノホビルアラフェンアミド、グラゾプレビル／エルバスビル、凝固因子ＶＩＩａ組換え、エポエチンアルファ、アフリベルセプト、又はエタネルセプトである。

いくつかの実施形態では、治療用生物学的製剤は、アバタセプト、アボボツリヌス毒素Ａ、アガルシダーゼベータ、アルビグルチド、アルデスロイキン、アルグルコシダーゼアルファ、アルテプラーゼ（ｃａｔｈｆｌｏ ａｃｔｉｖａｓｅ）、アナキンラ、アスホターゼアルファ、アスパラギナーゼ、アスパラギナーゼｅｒｗｉｎｉａ ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ、ベカプレルミン、ベラタセプト、コラゲナーゼ、コラゲナーゼｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃｕｍ、ダルベポエチンアルファ、デニロイキンディフチトクス、ドルナーゼアルファ、デュラグルチド、エカランチド、エフガルチギモドアルファ－ｆｃａｂ、エロスルファーゼアルファ、エタネルセプト－ｓｚｚｓ、フィルグラスチム、フィルグラスチム－ｓｎｄｚ、ガルスルファーゼ、グルカルピダーゼ、イデュルスルファーゼ、インコボツリヌス毒素Ａ、インターフェロンアルファ－２ｂ、インターフェロンアルファ－ｎ３、インターフェロンベータ－１ａ、インターフェロンベータ－１ｂ、インターフェロンガンマ－１ｂ、ラロニダーゼ、メトキシポリエチレングリコール－エポエチンベータ、メトレレプチン、オクリプラスミン、オナボツリヌス毒素Ａ、オプレルベキン、パリフェルミン、副甲状腺ホルモン、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ペグインターフェロンアルファ－２ａ、リバビリンとともにパッケージ化されたペグインターフェロンアルファ－２ａ、ペグインターフェロンアルファ－２ｂ、ペグインターフェロンベータ－１ａ、ペグロチカーゼ、ラスブリカーゼ、レテプラーゼ、リロナセプト、リマボツリヌス毒素Ｂ、ロミプロスチム、サルグラモスチム、セベリパーゼアルファ、Ｔｂｏ－フィルグラスチム、テネクテプラーゼ、又はＺｉｖ－アフリベルセプトである。

タンパク質、例えば、本明細書に開示される粒子における治療用生物学的製剤は、約０．５～約１．０の単位当たりの活性、単位当たり約０．７５～約１．０の活性、又は単位当たり約０．９～約１．０の活性を有する。活性は、粒子形成前の同じタンパク質に対して測定される。いくつかの実施形態では、タンパク質は、約０．５～約１．０の単位当たりの活性を有する。「活性」という用語は、２つの時点でのタンパク質、例えば、抗体、抗体断片、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、又はヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）の機能的又は構造的態様の比を指す。この比の分母は、液滴形成の直前の、水性供給溶液中のタンパク質の機能的又は構造的態様の尺度に対応する。この比の分子は、より遅い時点での、例えば、粒子形成の直後のタンパク質の機能的又は構造的態様の同じ尺度に対応する。

いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、タンパク質、例えば、処理後の治療用生物学的製剤の約１０％未満、例えば、約９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、又は１％未満の凝結を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の約５％未満の凝結を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の約３％未満の凝結を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の約１％未満の凝結を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤のいずれの凝結も実質的に含まない。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の約０．５％未満の凝結を有する。

いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、タンパク質、例えば、処理後の治療用生物学的製剤の約１０％未満の断片化を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の約３％未満の断片化を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の約１％未満の断片化を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤のいずれの断片化も実質的に含まない。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の約５％未満の断片化を有する。治療用生物学的製剤治療用生物学的製剤の凝結及び断片化を測定するための好適な方法は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）を使用することによって達成することができる。

ある特定の実施形態では、組成物は、粒子形成前の治療用生物学的製剤と比較して、タンパク質、例えば、治療用生物学的製剤の集団において電荷バリアントの約５％未満（例えば、約４、３、２、又は１％未満）の変化を提供する。いくつかの実施形態では、粒子は、処理後の治療用生物学的製剤の集団において電荷バリアントの約５％未満の変化を有する。電荷バリアントは、酸性、塩基性、又は中性であり得、変動は、アスパラギン脱アミド化又はリジン糖化などの末端アミノ酸における翻訳後修飾によって引き起こされ得る。例えば、電荷バリアントは、Ｃ末端リジン残基の喪失による正電荷の喪失、還元糖による２個のリジン残基のアミン部分の共有結合、又はＮ末端グルタミンの環化による中性アミドへのＮ末端アミンの変換を含む。タンパク質、例えば、抗体又は断片上の負電荷は、脱アミド化反応を介するアスパラギン酸及び／又はイソアスパラギン酸残基へのアスパラギン残基の変換によって出現し得る。

いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、粒子形成前の少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性（モノマー）形態で含む水性組成物と比較して、タンパク質、例えば、治療用生物学的製剤の電荷バリアントの約５％未満の変化を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の電荷バリアントの約３％未満の変化を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の電荷バリアントの約１％未満の変化を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、治療用生物学的製剤の電荷バリアントのいずれの変化も実質的に含まない。電荷バリアントを測定する例示的な方法には、カチオン交換クロマトグラフィー（ＣＩＥＸ）が含まれ、バリアントは、バリアント、例えば、酸性、塩基性、又は中性集団に対応するピーク下面積を、試料スペクトルにおける全てのピークの下に含まれる累積面積で除算することによって定量化される。２つの試料、例えば、試料Ａと試料Ｂとの間の電荷バリアント集団パーセンテージの変化は、すなわち、試料Ｂの特定のバリアント、例えば、酸性のパーセンテージを試料Ａの特定のバリアント、例えば、酸性のパーセンテージから減算するか、又は逆の場合も同様に行うことにより、それぞれの集団バリアントパーセンテージにおける数値差として計算される。ある特定の実施形態では、分析は、集団内の全てのバリアントについて同様に拡張され得る。

本開示による粒子は、円形である。真円度は、粒子の形状の指標として機能することができる。本明細書に記載される粒子は、特徴的な真円度を有することができ、例えば、実質的に円形である相対的な形状を有する。この特徴は、その真円度に基づいて粒子の形態を記載し、定義する。粒子が完全に円形の構造を有する場合、真円度は１．０である。本開示による粒子は、約０．８０～約１．００、０．９０～約１．００、０．９５～約１．００、０．９６～約１．００、０．９７～約１．００、０．９８～約１．００、又は０．９９～約１．００の真円度を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ての真円度は、約０．８５～約１．００である。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ての真円度は、約０．９０～約１．００である。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ての真円度は、約０．９５～約１．００である。特定の実施形態では、粒子の実質的に全ての真円度は、約０．９８～約１．００である。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ての真円度は、約１．００である。粒子の直径及び真円度は、電子顕微鏡などの下で観察された画像の処理又はフロー式粒子画像分析器によって決定することができる。真円度はまた、粒子を真円度測定に供し、得られた値を平均化することによって決定することができる。例えば、真円度（ｃｉｒｃ）は、以下の式を使用して計算することができる：

本明細書で使用される「周囲長」という用語は、閉じた平面図形の境界線又は二次元像の全てのボーダーの合計を指す。本明細書で使用される場合、「面積」という用語は、粒子の二次元像の断面積を指す。粒子の真円度はまた、粒子の最小寸法の、その最大直径に対する比として記載することができる。完全な円について、この比は、１である。真円度パーセンテージは、真円度に１００を乗算することによって計算することができる。真円度は、例えば、画像、例えば、顕微鏡法、特に、走査型電子顕微鏡法（ＳＥＭ）又は透過型電子顕微鏡法（ＴＥＭ）によって得られた画像を取り扱うように適合された任意のソフトウェアを使用して、アスペクト比を測定することによって計算することができる。いくつかの実施形態では、粒子真円度を測定する方法には、粒子の走査型電子顕微鏡写真の画像分析が含まれ、ここで、平均丸さは、画像の平面上に投影された粒子の断面形状に基づいて計算される。そのような丸さ係数を拡張して、対応する真円度を特定することができる。

本開示の特定の実施形態では、本明細書に記載の粒子は、隆起状又はしわ状ではなく、滑らかである表面形態を有する。本開示の分野の当業者は、日常的かつ標準的な技術を使用して、開示される粒子の表面形態を容易に評価することができる。

ある特定の実施形態では、粒子は、約０．１～約１０００μｍ、例えば、約０．１～約９００、８００、７００、６００、５００、４００、３００、２００、１００、９０、８０、７０、６０、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１、０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、又は約０．２μｍの直径を有する。いくつかの実施形態では、粒子は、約１～約１００μｍ、例えば、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、又は５０～約１００μｍの直径を有する。いくつかの実施形態では、粒子は、約４～約１００μｍの直径を有する。ある特定の実施形態では、粒子は、約１０～約１００μｍの直径を有する。ある特定の実施形態では、粒子は、約２０～約５０μｍの直径を有する。粒子サイズ及び分布を測定する方法には、イメージングフローサイトメトリー、レーザー回折、及び粒子の走査型電子顕微鏡写真の画像分析が含まれ、ここで、平均球面半径又は直径は、画像の平面上に投影された粒子の断面積に基づいて計算することができる。

本明細書で使用される場合、「分散性指数」（ＤＩ）という用語は、粒子のサイズ分布の不均一性の程度を特徴とするパラメータである。多分散性指数（ＰＤＩ）、「集団分散性」又は「スパン」、例えば、Ｄ１０、Ｄ５０、Ｄ９０はまた、粒子サイズ分布の幅を示す値を意味することができる。粒子サイズ分布は、Ｄ１０、Ｄ５０、Ｄ９０、及びμｍにおける平均粒子サイズによって報告され、値は、示されるＤ番号よりも小さい粒子のパーセンテージを表し、例えば、Ｄ１０粒子サイズは、質量の１０％がこの値未満の直径を有する粒子から構成される粒子直径であり、Ｄ５０粒子サイズは、質量の５０％がこの値未満の直径を有する粒子から構成される粒子直径であり、Ｄ９０粒子サイズは、質量の９０％がこの値未満の直径を有する粒子から構成される粒子直径である。Ｄ１０、Ｄ５０、及びＤ９０粒子サイズ分布は、レーザー光散乱粒子分布計を使用して測定することができる。

粒子直径及び分散性はまた、注射性、例えば、シリンジ性に影響を与えることができる。粒子は、多くの場合、針の内径よりも少なくとも３～１０倍小さいことが推奨される。粒子集団の少量画分が針の内径よりも大きい場合でも、それらは針を詰まらせ、投薬量全体を無駄にする可能性がある。本明細書に記載される本開示のある特定の実施形態では、組成物中の高濃度の治療用生物学的製剤は、様々なサイズの粒子を混合することによって達成される。

本明細書で使用される場合、「水分」及び「水」という用語は、互換的に使用され得る。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ての水分含有量は、約７重量％未満、例えば、約６、５、４、３、２、１．９、１．８、１．７、１．６、１．５、１．４、１．３、１．２、１．１、１、０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２、又は０．１重量％未満である。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約７重量％未満の水分を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、約５重量％未満の水分を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、約３重量％未満の水分を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約１重量％未満の水分を有する。水分含有量の測定のための例示的な方法には、化学滴定法、例えば、オーブンを伴うカールフィッシャー滴定が含まれる。水を含む種々の溶媒はまた、熱励起を伴う重量喪失法を使用して測定され得る。例示的な方法には、赤外分光法を伴う熱重量分析（ＴＧＡ－ＩＲ）又はガスクロマトグラフィー水素炎イオン化検出器／質量分析法（ＧＣ－ＦＩＤ／ＭＳ）が含まれる。

細孔又は多孔性とは対照的に、固体（例えば、粒子）の表面と連通せず、多孔性又は表面積に寄与しない、本明細書で使用される「内部空隙空間」又は「内部空隙」という用語。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約１０％未満の内部空隙空間、例えば、約９、８、７、６、５、４、３、２、又は１％未満の内部空隙空間を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、いずれの内部空隙空間も実質的に含まない。内部空隙空間を決定するための好適な方法は、「アクセス可能な」細孔及び「アクセス不可能な」空隙空間を視覚化するために使用することができる、集束イオンビーム走査型電子顕微鏡法（ＦＩＢ－ＳＥＭ）を使用することによって達成することができる。内部空隙空間を決定するための別の方法は、ガス置換法を使用して体積を測定する一般的な分析技術であるガス置換比重瓶法によって達成することができる。ヘリウム又は窒素などの不活性ガスが、置換媒体として使用される。真の体積は、総体積からガスがアクセス可能な体積を差し引いたものである。密度は、試料重量を真の体積で除算することによって計算される。試料を、既知の体積の機器コンパートメントに密封し、適切な不活性ガスを入れ、次いで、別の精密な内部体積に膨張させる。膨張の前及び後の圧力を測定し、試料体積を計算するために使用する。この体積を試料重量に除算し、ガス置換密度を得る。本開示の典型的な粒子の断面は、ＦＩＢ－ＳＥＭによって又は約２２℃における温度でヘリウムを使用するガス比重瓶法によって示されるように、任意の内部空隙空間の不在を示し、典型的に、標準偏差が約０．０００５ｇ／ｃｍ^３の、平均で約１．３ｇ／ｃｍ^３の密度を提供する。例えば、内部空隙空間は、以下の式を使用して計算することができる：内部空隙空間＝Ａ_ｖ／Ａ_ｐ、式中、Ａ_ｖは、空隙空間の総面積であり、Ａ_ｐは、粒子の総面積である。本開示の典型的な粒子の断面は、例えば、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／１５９５７号（公開第ＷＯ２０２０／１６０３２３号）及びＰＣＴ／ＵＳ２０２１／０２７７５５（ＷＯ２０２１／２１２０１９）における、多くの方法において取得及び特徴とすることができ、これらの各々の内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。

いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約１０％未満の内部空隙空間を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、約５％未満の内部空隙空間を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、約３％未満の内部空隙空間を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約１％未満の内部空隙空間を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、いずれの内部空隙空間も実質的に含まない。

いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約５０重量％超のタンパク質、例えば、治療用生物学的製剤、例えば、約５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、又は９９重量％超の治療用生物学的製剤を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約６０重量％超の治療用生物学的製剤を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、約７０重量％超の治療用生物学的製剤を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約８０重量％超の治療用生物学的製剤を有する。特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、約９０重量％超の治療用生物学的製剤を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、約９５重量％超の治療用生物学的製剤を有する。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、約９８重量％超の治療用生物学的製剤を有する。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、約９９重量％超の治療用生物学的製剤を有する。

「賦形剤」という用語は、粒子の特徴又は形態に対する所望の改変を達成するのに有用であり得る粒子製剤への添加剤を指す。そのような改変には、限定されないが、物理的安定性、化学的安定性、及び治療有効性が含まれる。例示的な賦形剤には、限定されないが、炭水化物、ｐＨ調整剤、塩、キレート剤、界面活性剤、タンパク質安定剤、乳化剤、防腐剤、アミノ酸、酸化防止剤、パラベン、殺菌剤、殺真菌剤、保存剤、又はそれらの組み合わせが含まれる。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、１つ以上の賦形剤を更に含む。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、炭水化物、ｐＨ調整剤、塩、キレート剤、界面活性剤、タンパク質安定剤、乳化剤、アミノ酸、酸化防止剤、又はそれらの組み合わせを更に含む。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、少なくとも炭水化物及びアミノ酸を更に含む。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、少なくとも界面活性剤及びアミノ酸を更に含む。ある特定の実施形態では、粒子の実質的に全ては、少なくとも１つのアミノ酸を更に含む。

いくつかの実施形態では、炭水化物は、単糖類、二糖類、オリゴ糖類、又は多糖類のファミリーに由来し得る。いくつかの実施形態では、炭水化物は、デキストラン、トレハロース、スクロース、アガロース、マンニトール、ラクトース、ソルビトール、マルトース、デンプン、アルギネート、キサンタン、ガラクトマニン（ｇａｌａｃｔｏｍａｎｉｎ）、寒天、アガロース、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、炭水化物は、デキストラン、トレハロース、スクロース、アガロース、マンニトール、ラクトース、ソルビトール、マルトース、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、炭水化物は、トレハロース、シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルベータ－シクロデキストリン、スルホブチルエーテルベータ－シクロデキストリン、メチルベータ－シクロデキストリン、又はそれらの組み合わせである。特定の実施形態では、炭水化物は、トレハロース、スクロース、ソルビトール、又はそれらの組み合わせである。シクロデキストリンは、グルコースモノマーの数の数に基づいて、３つの異なる形態α、β、及びγで利用可能である。α、β、及びγシクロデキストリンにおけるグルコースモノマーの数は、それぞれ、６、７、又は８であり得る。

「ｐＨ調整剤」又は「緩衝種」又は「緩衝剤」という用語は、本明細書において、最も広い意味で互換的に使用される。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、ｐＨ調整剤を含む。いくつかの実施形態では、粒子の実質的に全ては、１つ以上のｐＨ調整剤を含む。ある特定の実施形態では、ｐＨ調整剤は、酢酸塩、クエン酸塩、グルタミン酸塩、グリシン酸塩、ヒスチジン、乳酸塩、マレイン酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、重炭酸塩、水酸化アルミニウム、リン酸、塩酸、ＤＬ－乳酸／グリコール酸、ホスホリルエタノールアミン、トロメタミン、イミダゾール、グリクリグリシン、グルタミン酸一ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、ｐＨ調整剤は、酢酸塩、クエン酸塩、ヒスチジン、リン酸塩、コハク酸塩、塩酸、水酸化ナトリウム、又はそれらの組み合わせである。特定の実施形態では、ｐＨ調整剤は、ヒスチジン、塩酸、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、ｐＨ調整剤は、ヒスチジン．ＨＣｌ、コハク酸塩、リン酸塩、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される組成物のｐＨレベルは、約５．０～約８．０である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される組成物のｐＨレベルは、約５．５～約７．０である。ある特定の実施形態では、ｐＨレベルは、約４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、又は７．５である。ある特定の実施形態では、ｐＨレベルは、約５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、又は７．０である。特定の実施形態では、ｐＨレベルは、約５．０、５．５、６．０、６．５、又は７．０である。

いくつかの実施形態では、塩は、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化カリウム、水酸化ナトリウム、塩化第一スズ、硫酸マグネシウム、グルコヘプトン酸ナトリウム、過テクネチウム酸ナトリウム、グアニジン塩酸塩、水酸化カリウム、塩化マグネシウム、硝酸カリウム、又はそれらの組み合わせである。特定の実施形態では、塩は、塩化ナトリウム、水酸化ナトリウム、硝酸カリウム、塩化マグネシウム、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、塩は、塩化ナトリウムである。

いくつかの実施形態では、キレート剤は、エデト酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸、ペンテト酸、又はそれらの組み合わせである。

いくつかの実施形態では、界面活性剤には、限定されないが、（ｉ）塩化セチルトリメチルアンモニウム、塩化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、臭化ジオクタデシルジメチルアンモニウムなどのカチオン性界面活性剤、（ｉｉ）ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、硫酸ドデシルナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、ミレス硫酸ナトリウム、ペルフルオロオクタンスルホネート、アルキルエーテルホスフェート、エアロゾル－ＯＴ（ビス（２－エチルヘキシル）スルホコハク酸ナトリウム）などのアニオン性界面活性剤、（ｉｉｉ）ポリソルベート、ポリエチレングリコールｔｅｒｔ－オクチルフェニルエーテル、レシチン、アルキルフェノールエトキシレート、脂肪アルコールエトキシレート（オクタエチレングリコールモノドデシルエーテル、コカミドジエタノールアミン、ポロキサマー、モノステアリン酸グリセロール、脂肪アミン、ソルビトールの脂肪酸エステル（モノラウリン酸ソルビタン、Ｔｗｅｅｎ ８０、Ｔｗｅｅｎ ２０、ポロキサマー（ポリオキシエチレン（ポリ（エチレンオキシド））の２つの親水性鎖に隣接しているポリオキシプロピレン（ポリ（プロピレンオキシド））の中心疎水性鎖から構成される非イオン性トリブロックコポリマー、例えば、ポロキサマー１８８、ポロキサマー４０７などの非イオン性界面活性剤、並びに（ｉｖ）コカミドプロピルヒドロキシスルタイン及び３－［（３－コラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］－１－プロパンスルホネート（ＣＨＡＰＳ）などの双性イオン性界面活性剤が含まれる。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート、ステアリン酸マグネシウム、硫酸ドデシルナトリウム、アルキルフェノールエトキシレート、グリセリン、ポリオキシエチル化ヒマシ油、ドクサート、ステアリン酸ナトリウム、デシルグルコシド、ノノキシノール－９、臭化セチルトリメチルアンモニウム、ビス（２－エチルヘキシル）スルホコハク酸ナトリウム、レシチン、ソルビタンエステル、ホスファチジルコリン、ポリリシノール酸ポリグリセロール、シロキサン、セチルポリエチレングリコール／ポリプロピレングリコール－１０／１ジメチコントリグリセリド、ビス－ポリエチレングリコール／ポリプロピレングリコール－１４／１４ジメチコン、ビス－（グリセリル／ラウリル）グリセリルラウリルジメチコン（及び）カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、セチルポリエチレングリコール／ポリプロピレングリコール－１０／１ジメチコン、リン脂質、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート、ドクサート、ポロキサマー、又はレシチンである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０、ポリソルベート６０、又はポリソルベート８０である。ある特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート２０又はポリソルベート８０、例えば、Ｔｗｅｅｎ ２０、Ｔｗｅｅｎ ６０、Ｔｗｅｅｎ ８０である。ある特定の実施形態では、ソルビトールの脂肪酸エステルは、ソルビタンエステル、例えば、ｓｐａｎ ２０、ｓｐａｎ ４０、ｓｐａｎ ６０、又はｓｐａｎ ８０である。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、イオン性界面活性剤である。特定の実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、又はポロキサマー１８８である。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ソルビタンエステル、ポリソルベート、ポロキサマー、ポリエチレングリコールｔｅｒｔ－オクチルフェニルエーテル、レシチン、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、界面活性剤は、ポリソルベート、ソルビタンエステル、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである。

いくつかの実施形態では、タンパク質安定剤は、アセチルトリプトファネート、カプリレート、Ｎ－アセチルトリプトファン、トレハロース、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリオキサマー、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸、ポリ（ビニル）ポリマー、ポリエステル、ポリアルデヒド、ｔｅｒｔ－ポリマー、ポリアミノ酸、ヒドロキシエチルデンプン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、ソルビトール、スクロース、マンニトール、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、タンパク質安定剤は、トレハロース、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリオキサマー、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸、ポリ（ビニル）ポリマー、ポリエステル、ポリアルデヒド、ｔｅｒｔ－ポリマー、ポリアミノ酸、ヒドロキシエチルデンプン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、ソルビトール、スクロース、マンニトール、シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルベータ－シクロデキストリン、スルホブチルエーテルベータ－シクロデキストリン、メチルベータ－シクロデキストリン、アセチルトリプトファネート、カプリレート、Ｎ－アセチルトリプトファン、プロピレングリコール、グルコース星型ポリマー、シリコーンポリマー、ポリジメチルシロキサン、カルボキシメチルセルロース、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸－コ－グリコール酸）、ポリ乳酸、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、フィコール、デキストラン、又はそれらの組み合わせである。特定の実施形態では、タンパク質安定剤は、トレハロース、シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルベータ－シクロデキストリン、スルホブチルエーテルベータ－シクロデキストリン、メチルベータ－シクロデキストリン、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、タンパク質安定剤は、ヒドロキシプロピルベータ－シクロデキストリン、メチルベータ－シクロデキストリン、又はそれらの組み合わせである。本明細書に記載の「安定化剤」という用語と同義に使用される安定剤は、塩、炭水化物、糖類、又はアミノ酸、好ましくは、薬学的組成物中の好適な添加剤又は賦形剤として当局によって認められた炭水化物又は糖類であり得る。ある特定の実施形態では、ＰＥＧは、ＰＥＧ ２００、ＰＥＧ ３００、ＰＥＧ ３３５０、ＰＥＧ ８０００、ＰＥＧ １００００、ＰＥＧ ２００００、又はそれらの組み合わせである。「安定剤」という用語は、タンパク質、例えば、抗体又は抗体断片の物理的及び／又は化学的特性を安定化する賦形剤又は賦形剤の混合物を指す。いくつかの実施形態では、安定剤は、例えば、粒子状物質の混合及び／又は保管中のタンパク質の分解を防止する。例示的な安定剤には、限定されないが、糖、塩、疎水性塩、洗剤、還元剤、シクロデキストリン、ポリオール、カルボン酸、及びアミノ酸が含まれる。本明細書に記載の「安定な」製剤又は組成物は、タンパク質が許容される期間にわたってその本質的な物理的、化学的、又は生物学的特性の許容される部分を保持する粒子を含む粒子製剤又は組成物を指す。タンパク質の場合、例えば、安定性を評価する例示的な方法は、（ｉ）Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，２４７－３０１，Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｌｅｅ Ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，１９９１、及び（ｉｉ）Ｊｏｎｅｓ，Ａ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．１０：２９－９０（１９９３）においてレビューされている。いくつかの実施形態では、タンパク質の化学的安定性は、いくつかの段階での試料のサイズ分布を測定することによって評価される。これらには、例えば、粒子形成の前（水性供給溶液の評価）、粒子形成の直後、及び保管期間の後に再び含まれ、保管は、懸濁液担体媒体内又は懸濁液担体媒体の不在下のいずれかで行われる。

粒子における使用に好適な乳化剤の例には、限定されないが、７未満のＨＬＢを有する親油性薬剤、例えば、混合脂肪酸モノグリセリド；混合脂肪酸ジグリセリド；脂肪酸モノ及びジグリセリドの混合物；親油性ポリグリセロールエステル；モノオレイン酸グリセリル、ジオレイン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリル、モノパルミチン酸グリセリル、及びジパルミチン酸グリセリルを含むグリセロールエステル；脂肪酸のグリセリル－ラクトエステル；モノパルミチン酸プロピレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、及びモノオレイン酸プロピレングリコールを含むプロピレングリコールエステル；モノステアリン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタンを含むソルビタンエステル；ステアリン酸、パルミチン酸、及びオレイン酸を含む脂肪酸、並びにそれらの石鹸；並びにそれらの混合物であるモノオレイン酸グリセリル、ジオレイン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、ジステアリン酸グリセリル、モノパルミチン酸グリセリル、及びジパルミチン酸グリセリル；脂肪酸のグリセリル－ラクトエステル；モノパルミチン酸プロピレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、及びモノオレイン酸プロピレングリコールを含むプロピレングリコールエステル；モノステアリン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタンを含むソルビタンエステル；ステアリン酸、パルミチン酸、及びオレイン酸を含む脂肪酸、並びにそれらの石鹸；リン脂質；又はそれらの組み合わせが含まれる。いくつかの実施形態では、乳化剤は、ポリソルベート（ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート２０、例えば、Ｔｗｅｅｎ ８０、Ｔｗｅｅｎ ６０、Ｔｗｅｅｎ ２０）、ソルビタンモノオレエート、エタノールアミン、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポロキシル４０水添ヒマシ油、カルボマー１３４２、トウモロコシ油－モノ－ジ－トリグリセリド、ポリオキシエチル化オレイングリセリド、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、ソルビトールの脂肪酸エステルは、ソルビタンエステル、例えば、ｓｐａｎ ２０、ｓｐａｎ ４０、ｓｐａｎ ６０、又はｓｐａｎ ８０である。ある特定の実施形態では、乳化剤は、ポリソルベート８０、ソルビタンモノオレエート、又はそれらの組み合わせである。

いくつかの実施形態では、防腐剤は、フェノール、ｍ－クレゾール、ベンジルアルコール、２－フェニルオキシエタノール、クロロブタノール、ネオマイシン、塩化ベンゼトニウム、グルテルアルデヒド、ベータ－プロピオラクトン、又はそれらの組み合わせである。

ある特定の実施形態では、アミノ酸は、アラニン、アスパラギン酸、システイン、イソロイシン、グルタミン酸、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、ピロリシン、セリン、セレノシステイン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン、プロリン、若しくはそれらの様々な塩（アルギニン塩酸塩、グルタミン酸アルギニンなど）、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、アミノ酸は、アラニン、アスパラギン酸、システイン、イソロイシン、グルタミン酸、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、ピロリシン、セリン、セレノシステイン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン、プロリン、又はそれらの組み合わせである。なおいくつかの実施形態では、アミノ酸は、アルギニン、ヒスチジン、プロリン、アスパラギン、又はそれらの組み合わせである。特定の実施形態では、アミノ酸は、ヒスチジンである。いくつかの実施形態では、アミノ酸は、アラニン、グルタミン酸、メチオニン、スレオニン、トリプトファン、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン、プロリン、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、アミノ酸は、アルギニン及びヒスチジンである。ある特定の実施形態では、アミノ酸は、ヒスチジンである。

いくつかの実施形態では、酸化防止剤は、グルタチオン、アスコルビン酸、システイン、Ｎ－アセチ（ａｃｅｔｙ）－Ｌ－トリプトファネート、トコフェロール、ヒスチジン、メチオニン、ペンテト酸、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、パラベンは、パラヒドロキシ安息香酸である。ある特定の実施形態では、殺菌剤は、塩化ベンザルコニウム（カチオン性界面活性剤）、次亜塩素酸塩、過酸化物、アルコール、フェノール化合物（例えば、石炭酸）、安息香酸ベンジル、又はそれらの組み合わせである。特定の実施形態では、殺菌剤は、塩化ベンザルコニウム又は安息香酸ベンジルである。ある特定の実施形態では、殺真菌剤は、アシベンゾラル、２－フェニルフェノール、アニラジン、カルボン、ナタマイシン、アジ化カリウム、又はそれらの組み合わせである。

いくつかの実施形態では、保存剤は、硝酸ナトリウム、二酸化硫黄、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸メチル、チメロサール、パラベン、ホルムアルデヒド、ヒマシ油、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、保存剤は、ヒドロキシ安息香酸メチル、チメロサール、パラベン、ホルムアルデヒド、ヒマシ油、又はそれらの組み合わせである。

少なくとも１つのタンパク質、例えば、本明細書に記載される治療用生物学的製剤を含む複数の粒子は、多くの方法において、並びに例えば、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０６３１５０号（公開第ＷＯ２０１８／０９８３７６号）、ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０４３７７４（公開第ＷＯ２０１９／０２３３９２号）、ＰＣＴ／ＵＳ２０１９／０３３８７５（公開第ＷＯ２０１９／２２６９６９号）、ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／１５９５７（公開第ＷＯ２０２０／１６０３２３号）、ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０５０５０８（公開第ＷＯ２０２１／０５０９５３号）、ＰＣＴ／ＵＳ２０２１／１６８７８（ＷＯ２０２１／１５８９５９）、ＰＣＴ／ＵＳ２０２１／０１８８０６（ＷＯ２０２１／１６８２７１）、ＰＣＴ／ＵＳ２０２１／０２７７５５（ＷＯ２０２１／２１２０１９）、及びＰＣＴ／ＵＳ２０２２／０７２７５５（ＷＯ２０２２／２５６８４０）に開示される粒子を形成する任意の方法において調製及び特徴とすることができ、これらの各々の内容は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。

本開示の要素の各々は、複数の実施形態を含むものとして本明細書に記載されているが、別段の指示がない限り、本開示の所与の要素の実施形態の各々は、本開示の他の要素の実施形態の各々とともに使用されることが可能であり、そのような使用の各々は、本開示の別個の実施形態を形成することを意図していることが理解されるべきである。

本明細書に記載される組成物に対する他の好適な修飾及び適合は、当業者に既知の情報に鑑みて本明細書に含まれる本開示の説明から容易に明らかであり、本開示又はその任意の実施形態の範囲から逸脱することなく実施し得ることが関連技術分野の当業者に理解されるであろう。

本開示の薬学的組成物
注射可能な粒子懸濁液は、沈降の変動を示すことができ、これは、薬物組成物の使用又は投与に影響を及ぼし得る。特に、治療用生物学的製剤の高濃度、低体積、及び低シリンジ力の注射可能な粒子懸濁液は、ある期間にわたって懸濁液媒体から沈殿又は沈降し、したがって、注射の前に予備混合又は再懸濁を必要とする。低送達体積での高い粒子濃度の沈降はまた、高い注射力につながり、組成物中の治療用生物学的製剤の分解を伝播させ得る。本明細書で使用される場合、「沈降する」又は「沈降」という用語は、粒子が容器閉鎖、例えば、バイアル、カートリッジ、シリンジ、携帯型薬物送達注射デバイスなどの底部に沈殿するか、又は密に堆積するプロセスである。密に堆積した粒子の沈殿は、一般に、過度に高い注射力又はシリンジ閉塞につながり、組成物の投与前に手動のかき混ぜ又は予備混合を必要とする。

凝集又は「粒子凝集」は、粒子－粒子相互作用を支配する界面化学と環境条件との間の相互関係から生じる現象である。本明細書で使用される凝集体積は、全流体体積のパーセンテージとして表される、粒子分散によって占有される粒子凝塊物の量の尺度である。より具体的には、凝集体積（Ｆ）は、総流体体積（Ｖｏ）に対する粒子凝塊物（Ｖｕ）の体積の比である。凝集体積は、粒子凝塊物の沈降特性に基づいて経時的に減少することができる。凝集した懸濁液では、粒子は、粒子凝塊又は凝塊物につながる衝突を受け、それは、サイズが増加し、例えば、凝集体積が増加する。「凝塊物」という用語は、緩く凝集性である粒子のクラスターを指す。粒子凝塊物の緩いネットワークは、高い注射力につながる可能性のある粒子沈降を防止するために十分な粒子間距離を維持する。凝集体積が１に等しい場合、降伏応力（凝集体積が変形を受ける応力）を測定して、懸濁液の流れを作製すために必要である剪断応力を示すことができる。降伏応力のための測定は、平行プレートレオメータ（ＡＮＴＯＮ ＰＡＡＲ（商標）ＭＣＲ ９２）によって取得することができる。降伏応力の増加は、凝塊物の増加を示す。凝塊物を測定するための他のアプローチには、限定されないが、レーザー回折、緩和ＮＭＲ、顕微鏡法、及び小角度散乱が含まれる。

本明細書に開示される組成物では、凝塊のプロセスは、凝集剤の使用によって制御することができる。凝集剤、又は凝集化剤は、液体中の懸濁した粒子を凝塊させ、それによって凝塊物を形成することによって凝集を促進する化学物質である。非水性粒子懸濁液では、凝塊物の分解及び再分散は、凝集した粒子系に付与される剪断応力によって支配される。剪断応力は、材料の表面上に作用する力によって引き起こされ、変形を引き起こす。これらの系では、剪断は、非水性懸濁媒体中又は任意の界面（例えば、容器閉鎖、他の粒子など）の近くでの速度勾配を介する粒子又は凝塊物の移動に起因することができる。剪断応力は、例えば、機械的に凝集体積に導入することができ、実験的に制御することができる。

本明細書に開示される組成物は、凝集剤を含み、一般に、組成物の注射又は投与前に手動のかき混ぜ又は予備混合を必要とせずに投与を可能にする治療用生物学的製剤の高濃度、低体積、及び低シリンジ力の注射可能な粒子懸濁液である。組成物は、シリンジ、携帯型薬物送達注射デバイス、又は経口投与される液体注射器カプセルの閉塞をもたらし得る粒子沈降を回避する安定な凝集体積を有益に維持する。

ある特定の実施形態では、本開示は、組成物、例えば、薬学的組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、治療用生物学的製剤（例えば、本明細書に開示される治療用生物学的製剤）を含む、複数の粒子と、凝集剤（例えば、本明細書に開示される凝集剤）と、を含む、組成物に関する。

本明細書で使用される「薬学的に許容される液体担体」という語句は、液体、希釈剤、賦形剤、又は溶媒などの薬学的に許容される材料、組成物、又はビヒクルを意味する。各担体は、組成物の他の成分と適合性があり、患者に有害ではないという意味で「許容される」ことでなければならない。当業者は、粒子における不活性物質を用いて治療用生物学的製剤の体積を希釈又は増加させることができる。これらの希釈剤には、炭水化物、特にトレハロース、マンニトール、ａ－ラクトース、無水ラクトース、セルロース、スクロース、修飾されたデキストラン、及びデンプンが含まれ得る。三リン酸カルシウム、炭酸マグネシウム、及び塩化ナトリウムを含むある特定の無機塩もまた、充填剤として使用され得る。いくつかの市販の希釈剤は、Ｆａｓｔ－Ｆｌｏ、Ｅｍｄｅｘ、ＳＴＡ－Ｒｘ １５００、Ｅｍｃｏｍｐｒｅｓｓ、及びＡｖｉｃｅｌｌである。

いくつかの実施形態では、投与用の薬学的組成物には、水溶性形態の活性治療用生物学的製剤の非水性溶液が含まれる。好ましくは、活性治療用生物学的製剤の懸濁液は、適切な油性注射組成物として調製され得る。好適な親油性溶媒又はビヒクルには、脂肪油（例えば、ゴマ油、トウモロコシ油）、又は脂肪酸エステル（例えば、オレイン酸エチル若しくはトリグリセリド）、又はリポソームが含まれる。適切な粘度は、注射の場合には必要とされる粒子サイズの維持によって、及び凝集剤の使用によって維持することができる。微生物作用の予防は、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどの様々な抗菌剤及び抗真菌剤によってもたらすことができる。

本開示は、本開示の組成物中の治療用生物学的製剤の「薬学的に許容される塩」又は「塩」の使用を含む。本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」又は「塩」という用語には、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、ギ酸、酢酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、グリコール酸、サリチル酸、クエン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、マロン酸、トリフルオロ酢酸、トリクロロ酢酸、ナフタレン－２－スルホン酸、又は他の酸を含む、無機酸又は有機酸に由来する塩が含まれる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される塩の形態は、塩を含む分子の比が１：１ではない形態を含むことができる。例えば、塩は、治療用生物学的製剤の１分子当たり２つの塩酸分子などの、塩基の１分子当たり１つ超の無機酸又は有機酸分子を含み得る。別の例として、塩は、酒石酸の１分子当たり２つの分子の治療用生物学的製剤などの、塩基の１分子当たり１つ未満の無機酸又は有機酸分子を含み得る。ある特定の実施形態では、本開示の企図される塩には、限定されないが、アルギニン、ベネンタミン、ベンザチン、ベタイン、水酸化カルシウム、コリン、デアノール、ジエタノールアミン、ジエチルアミン、２－（ジエチルアミノ）エタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ－メチルグルカミン、ヒドラバミン、ｌＨ－イミダゾール、Ｌ－リジン、マグネシウム、４－（２－ヒドロキシエチル）モルホリン、ピペラジン、カリウム、１－（２－ヒドロキシエチル）ピロリジン、ナトリウム、トリエタノールアミン、トロメタミン、又は亜鉛塩が含まれる。いくつかの実施形態では、本開示の企図される塩には、限定されないが、Ｎａ、Ｃａ、Ｋ、Ｍｇ、Ｚｎ、又は他の金属塩が含まれる。更なる実施形態では、本開示の企図される塩には、限定されないが、アルキル、ジアルキル、トリアルキル、又はテトラアルキルアンモニウム塩が含まれる。薬学的に許容される塩は、例えば、水又はエタノールなどとの様々な溶媒和物としても存在することができる。そのような溶媒和物の混合物も調製することができる。いくつかの実施形態では、タンパク質性組成物は、中性又は塩の形態に製剤化され得る。薬学的に許容される塩には、酸付加塩（タンパク質の遊離アミノ基を用いて形成される）が含まれ、これは、無機酸、例えば、塩酸若しくはリン酸など、又は酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸などの有機酸を用いて形成される。遊離カルボキシル基を用いて形成される塩はまた、例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、又は水酸化第二鉄などの無機塩基、及びイソプロピルアミン、トリメチルアミン、ヒスチジン、プロカインなどの有機塩基に由来することができる。

いくつかの実施形態では、粒子は、非水性液体担体中に懸濁し、それによって、非水性の薬学的に許容される組成物を形成することができる。重要なことに、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を有する非水性組成物を生成するプロセスは、本明細書に記載の生物学的製剤の構造又は生物活性を有意に変化させない。いくつかの実施形態では、液体担体は、非水性である。ある特定の実施形態では、非水性液体担体は、有機溶媒である。いくつかの実施形態では、非水性液体担体は、少なくとも２つの有機溶媒を含む。

いくつかの実施形態では、有機溶媒は、安息香酸ベンジル、ココナッツ油、綿実油、魚油、ブドウ種子油、ヘーゼルナッツ油、水添植物油、オリーブ油、ヤシ種子油、ピーナッツ油、ハッカ油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、ヒマワリ油、クルミ油、トウモロコシ油、アセトン、酢酸エチル、乳酸エチル、ジメチルアセトアミド、ジメチルイソソルビド、ジメチルスルホキシド、グリコフロール、ジグリム、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル、Ｎ－メチルピロリドン、ペルフルオロデカリン、ポリエチレングリコール、２－ピロリドン、テトラヒドロフルフリルアルコール、ジグリセリド、トリギルセリド（ｔｒｉｇｙｌｃｅｒｉｄｅ）、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、エチルラウレエート、分画植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のトリグリセリド、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、オレイン酸エチル、カプリン酸エチル、アジピン酸ジブチル、脂肪酸エステル、ヘキサン酸、オクタン酸、トリアセチン、ジエチルグリコールモノエーテル、ガンマ－ブチロラクトン、ユージノール、クローブバッド油、シトラール、リモネン、ポリオキシル４０水添ヒマシ油、ポリオキシル３５ヒマシ油、単純なアルコール、例えば、エタノール、オクタノール、ヘキサノール、デカノール、プロパノール、ブタノール、ガンマ－ブチロラクトン、トコフェロール、オクタ－フルオロプロパン、（ペルフルオロヘキシル）オクタン、ｎ－アセチルトリプトファン、ラウリン酸エチル、カプリル酸メチル、カプリル酸エチル、カプリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、アジピン酸ジメチル、スベリン酸ジブチル、セバシン酸ジエチル、マカデミアナッツ脂肪酸エチル（ｅｔｈｙｌ ｍａｃａｄａｍｉａｔｅ）、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、ラウリン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、コハク酸ジエチル、ポリソルベートエステル、エタノールアミン、プロパン酸、シトラール、アニソール、アネトール、ベンズアルデヒド、リナロール、カプロラクトン、フェノール、チオグリセロール、ジメチルアセトアミド、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ソルケタール、イソソルビドジメチルエーテル、ギ酸エチル、酢酸エチルヘキシル、プロピレングリコールジカプリレート、カプリル酸トリグリセリド、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、又はそれらの組み合わせを含む。中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）は、６～１２個の炭素原子の鎖長を有する脂肪酸を含有する。それらは、カプロン酸（Ｃ６）、カプリル酸（Ｃ８）、カプリン酸（Ｃ１０）、及びラウリン酸（Ｃ１２）を含む。いくつかの実施形態では、有機溶媒は、オレイン酸エチル、ジグリセリド、トリギルセリド、ミグリオール、マカデミアナッツ脂肪酸エチル、カプリン酸エチル、コハク酸ジエチル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールジカプリレート、カプリル酸トリグリセリド、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、ゴマ油、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、トリアセチン、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、有機溶媒は、オレイン酸エチル、カプリル酸エチル、プロピレングリコールジカプリレート、ジグリセリド、トリギルセリド、ゴマ油、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、トリアセチン、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、有機溶媒は、オレイン酸エチル及びゴマ油である。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される組成物中の治療用生物学的製剤の濃度は、約２５０ｍｇ／ｍＬ超、例えば、約２７５、３００、３２５、３５０、３７５、４００、４２５、４５０、４７５、５００、５２５、５５０、５７５、６００、６２５、６５０、６７５、７００、７２５、７５０、７７５、又は８００ｍｇ／ｍＬ超である。特定の実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤の濃度は、約８００ｍｇ／ｍＬ超である。いくつかの実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤の濃度は、約４００ｍｇ／ｍＬ超である。ある特定の実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤の濃度は、約５００ｍｇ／ｍＬ超である。いくつかの実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤の濃度は、約６００ｍｇ／ｍＬ超である。ある特定の実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤の濃度は、約７００ｍｇ／ｍＬ超である。

本明細書に記載の組成物では、凝塊のプロセスは、注射又は投与前に手動のかき混ぜ又は予備混合を必要とせずに粒子組成物の投与を可能にすることができる凝集剤の使用によって制御することができる。凝集剤は、非イオン性又はイオン性であり得る。一般に、イオン性凝集剤は、荷電粒子と相互作用し、例えば、アニオン性凝集剤は、正に帯電した粒子と相互作用し、カチオン性凝集剤は、負に帯電した粒子と相互作用する。いくつかの実施形態では、凝集剤は、イオン性である。いくつかの実施形態では、イオン性凝集剤は、ステアリン酸マグネシウム、硫酸ドデシルナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、レシチン、又はそれらの組み合わせである。特定の実施形態では、凝集剤は、非イオン性である。本明細書に開示されるように、非イオン性凝集剤は、荷電粒子と相互作用する。ある特定の実施形態では、非イオン性凝集剤は、ポリソルベート（ポリソルベート８０、ポリソルベート６０、ポリソルベート２０、例えば、Ｔｗｅｅｎ ８０、Ｔｗｅｅｎ ６０、Ｔｗｅｅｎ ２０）、アルキルフェノールエトキシレート、グリセロール、ポリオキシエチル化ヒマシ油、ドクサート、デシルグルコシド、ノノキシノール－９、ソルビタンエステル、ソルビタンモノオレエート、エタノールアミン、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポロキシル４０水添ヒマシ油、カルボマー１３４２、トウモロコシ油－モノ－ジ－トリグリセリド、ポリオキシエチル化オレイングリセリド、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである。いくつかの実施形態では、非イオン性凝集剤は、ポリソルベート、アルキルフェノールエトキシレート、ソルビタンエステル、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである。ある特定の実施形態では、非イオン性凝集剤は、ポリソルベート又はソルビタンエステルである。いくつかの実施形態では、粒子懸濁液への凝集剤の添加は、組成物の粘度を実質的に増加させない。本明細書に開示されるように、粒子の懸濁液への凝集剤の添加は、粒子の懸濁液の凝集体積を増加させる（例えば、図４及び図６を参照されたい）。ある特定の実施形態では、粒子の懸濁液への凝集剤の添加は、凝集体積の安定性を少なくとも１ヶ月間増加させる（例えば、実施例６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、粒子の懸濁液への凝集剤の添加は、シリンジ力を低減させる（例えば、実施例１６及び１７を参照されたい）。いくつかの実施形態では、粒子の懸濁液への凝集剤の添加は、微小粒子（例えば、Ａｂ微小粒子）懸濁液の投与（例えば、皮下投与）の薬物動態（ＰＫ）を改善し、水性Ａｂ溶液の投与（例えば、皮下投与）よりも高いバイオアベイラビリティを示す（例えば、図１１を参照されたい）。いくつかの実施形態では、粒子の懸濁液への凝集剤の添加は、粒子におけるタンパク質の安定性を増加させる（例えば、図３を参照されたい）。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組成物は、約５０ｍｇ／ｍＬ未満、例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、５、３、１、０．５、０．１、０．０５、又は０．０１ｍｇ／ｍＬ未満の組成物中の凝集剤の濃度を使用する。いくつかの実施形態では、組成物中の凝集剤の濃度は、約１０ｍｇ／ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、組成物中の凝集剤の濃度は、約５ｍｇ／ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、組成物中の凝集剤の濃度は、約３ｍｇ／ｍＬ未満である。特定の実施形態では、組成物中の凝集剤の濃度は、約１ｍｇ／ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、組成物中の凝集剤の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍＬ未満である。ある特定の実施形態では、組成物中の凝集剤の濃度は、約０．０１ｍｇ／ｍＬ未満である。

粘度は、注射可能な製品の取り扱い及び投与において重要な役割を果たすことができる。懸濁液製品について、注射デバイス、例えば、シリンジ、携帯型薬物送達注射デバイス、又は経口投与される液体注射器カプセルを作動させるためにより大きな力を要するため、高粘度の薬物製品は、針（例えば、２７ゲージの針）を介して送達することが困難であり得る。代替的に、より大きなゲージ針を使用するか、又はより長い注射時間を必要とすることは、患者の療法へのコンプライアンスを低減させる可能性がある。

「粘度」という用語は、剪断流に抵抗するように作用する流体の特性を記載するために使用される。本開示の目的のために、粘度は、２５℃において指定された剪断速度でコーン及びプレート（２°／４０ｍｍ）を装着したレオメータ、例えば、ＡＲ－Ｇ２レオメータ（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、ＵＳＡ）を使用して決定することができる。ある特定の実施形態では、粘度は、ニュートン領域における剪断速度で測定される。いくつかの実施形態では、粘度は、１００ｓ^－１又はそれを超える剪断速度、例えば、１０００ｓ^－１、又は１０００ｓ^－１超、又は１０，０００ｓ^－１超で測定される。本明細書で使用される「低粘度」という用語は、約１００ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する組成物、例えば、液体担体を記載する。

いくつかの実施形態では、組成物は、約２００ｍＰａ・ｓ未満、約１５０ｍＰａ・ｓ未満、約１２５ｍＰａ・ｓ未満、約１００ｍＰａ・ｓ未満、約９５ｍＰａ・ｓ未満、約９０ｍＰａ・ｓ未満、約８５ｍＰａ・ｓ未満、約８０ｍＰａ・ｓ未満、約７５ｍＰａ・ｓ未満、約７０ｍＰａ・ｓ未満、約６５ｍＰａ・ｓ未満、約６０ｍＰａ・ｓ未満、約５５ｍＰａ・ｓ未満、約５０ｍＰａ・ｓ未満、約４５ｍＰａ・ｓ未満、約４０ｍＰａ・ｓ未満、約３５ｍＰａ・ｓ未満、約３０ｍＰａ・ｓ未満、約２５ｍＰａ・ｓ未満、約２０ｍＰａ・ｓ未満、約１９ｍＰａ・ｓ未満、約１８ｍＰａ・ｓ未満、約１７ｍＰａ・ｓ未満、約１６ｍＰａ・ｓ未満、約１５ｍＰａ・ｓ未満、約１４ｍＰａ・ｓ未満、約１３ｍＰａ・ｓ未満、約１２ｍＰａ・ｓ未満、約１１ｍＰａ・ｓ未満、約１０ｍＰａ・ｓ未満、約９．５ｍＰａ・ｓ未満、約９ｍＰａ・ｓ未満、約８．５ｍＰａ・ｓ未満、約８ｍＰａ・ｓ未満、約７．５ｍＰａ・ｓ未満、約７ｍＰａ・ｓ未満、約６．５ｍＰａ・ｓ未満、約６ｍＰａ・ｓ未満、約５．５ｍＰａ・ｓ未満、又は約５ｍＰａ・ｓ（１ミリパスカル秒）未満の粘度を有する。また、液体の混合物を使用して、粘度を制御することもできる。単位「ｍＰａ・ｓ」及び「ｃＰ」は、本明細書において、最も広い意味で互換的に使用される。

いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する。いくつかの実施形態では、組成物は、約８０ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、約５０ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する。いくつかの実施形態では、組成物は、約４０ｍＰａ．ｓ未満の粘度を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、約３０ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する。特定の実施形態では、組成物は、約２５ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する。いくつかの実施形態では、組成物は、約２０ｍＰａ．ｓ未満の粘度を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、約１５ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、約５ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する。

本明細書に記載されるように、より高い凝集体積は、増加した凝塊物又はより少ない粒子沈降を示し、したがって、液体担体中の粒子のより均一な分散による改善された注射力性能を示す。いくつかの実施形態では、組成物は、初期混合後に約５０％超、例えば、初期混合後に６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％超、又は約９８％超の凝集体積を有する。いくつかの実施形態では、組成物は、初期混合後に約７０％超の凝集体積を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、初期混合後に約８０％超の凝集体積を有する。特定の実施形態では、組成物は、初期混合後に約８５％超の凝集体積を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、初期混合後に約１００％の凝集体積を有する。初期混合は、凝集体積を作製するバルクの運動による凝集剤との初期の不均一な粒子懸濁液の均一化を指す。

いくつかの実施形態では、凝集体積は、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月後に約１０％未満、例えば、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、又は１％低減する。いくつかの実施形態では、凝集体積は、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月後に約７％未満低減する。ある特定の実施形態では、凝集体積は、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月後に約５％未満低減する。いくつかの実施形態では、凝集体積は、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月後に約３％未満低減する。ある特定の実施形態では、凝集体積は、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月後に約１％未満低減する。いくつかの実施形態では、複数の粒子及び凝集剤は、少なくとも１ヶ月間、液体担体中に実質的に懸濁したままである。いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１ヶ月間、実質的に同じ凝集体積を有する。

ある特定の実施形態では、水性液体中に溶解すると持続する、約１００μｍ以上の特徴サイズを有する不溶性粒子状物質は、可視粒子（ＶＰ）と称される。本明細書に記載される本開示の特定の実施形態では、組成物は、可視粒子（ＶＰ）を実質的に含まない。いくつかの実施形態では、水性液体は、水、水性緩衝液、又は生理学的に関連する水性液体である。本明細書で使用される場合、「生理学的に関連する水性液体」という用語は、細胞外コンパートメントに分布する任意の水分含有体液、例えば、細胞外液、間質液、血管内液（血液、血漿、及びリンパ）、及び脳脊髄液を指す。

いくつかの実施形態では、水性液体中に溶解すると持続する、約１μｍ～約１００μｍの特徴サイズを有する不溶性粒子状物質は、サブ可視粒子（ＳｖＰ）と称される。ＳｖＰは、１ｍＬ当たり約０～約１００，０００，０００、例えば、１ｍＬ当たり約０～約１０，０００，０００、１ｍＬ当たり約０～約１，０００，０００、１ｍＬ当たり約０～約５００，０００、１ｍＬ当たり約０～約１００，０００、１ｍＬ当たり約０～約５０，０００、１ｍＬ当たり約０～約１０，０００、１ｍＬ当たり約０～約６，０００、１ｍＬ当たり約０～約１，０００、１ｍＬ当たり約０～約６００、１ｍＬ当たり約０～約２５０、１ｍＬ当たり約０～約１００、１ｍＬ当たり約０～約６０、又は１ｍＬ当たり約０～約１０の量で存在する。いくつかの実施形態では、１０μｍ以上の特徴サイズを有する粒子の計数は、１ｍＬ当たり約０～約６，０００、例えば、１ｍＬ当たり約０～約１，０００、１ｍＬ当たり約０～約１００、１ｍＬ当たり約０～約１０、１ｍＬ当たり約０～約５、１ｍＬ当たり約０～約３、又は１ｍＬ当たり約０～約１である。ある特定の実施形態では、２５μｍ以上の特徴サイズを有する粒子の計数は、１ｍＬ当たり約０～約６００、例えば、１ｍＬ当たり約０～約１００、１ｍＬ当たり約０～約１０、１ｍＬ当たり約０～約３、１ｍＬ当たり約０～約１、１ｍＬ当たり約０～約０．５、又は１ｍＬ当たり約０～約０．１である。ＳｖＰを測定する例示的な方法には、標準的な濃度、例えば、約１００ｍｇ／ｍＬ又は約１ｍｇ／ｍＬへの治療用生物学的製剤の再構成及び希釈後の、Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｃｏｕｎｔｅｒ、ＨＩＡＣ Ｒｏｙｃｏ、又は微小流動イメージングシステムによる治療用生物学的製剤の分析が含まれる。いくつかの実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、約１０μｍ超の粒子の１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約１００，０００，０００の不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、約１０μｍ超の粒子の１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６０００の不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する。特定の実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、約２５μｍ超の粒子の１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６００の不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）を実質的に含まない。

ある特定の実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約１００，０００，０００の約１０μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する。いくつかの実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６０００の約１０μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する。いくつかの実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６００の約２５μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する。特定の実施形態では、水性液体は、水、水性緩衝液、又は生理学的に関連する水性液体である。

いくつかの実施形態では、水性液体中に溶解すると持続する、約１００ｎｍ～約１μｍの特徴サイズを有する不溶性粒子状物質は、サブミクロン粒子（ＳＭＰ）と称され、しばしば、ナノ粒子として既知である。そのようなＳＭＰの存在は、免疫原性に寄与すると考えられており、したがって、そのような影響を最小限に抑えるために回避されるべきである。定量的に、ＳＭＰは、１ｍＬ当たり約０～５×１０^１２、例えば、１ｍＬ当たり約０～約０．５×１０^１２、１ｍＬ当たり約０～約５０×１０^９、１ｍＬ当たり約０～約１０×１０^９、１ｍＬ当たり約０～約５×１０^９、１ｍＬ当たり約０～約０．５×１０^９、１ｍＬ当たり約０～約５０×１０^６、１ｍＬ当たり約０～約１×１０^６、１ｍＬ当たり約０～約５００，０００、１ｍＬ当たり約０～約２００，０００、１ｍＬ当たり約０～約１００，０００、１ｍＬ当たり約０～約１０，０００、１ｍＬ当たり約０～約５０００、又は１ｍＬ当たり約０～約１０００の量で存在する。ＳＭＰを定量的に測定する例示的な方法には、標準的な濃度、例えば、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ、又は約１μｇ／ｍＬへの治療用生物学的製剤の再構成及び希釈後のＮａｎｏＳｉｇｈｔによる治療用生物学的製剤の分析、微小流動イメージングシステム、複数角度レーザー光散乱にカップリングした非対称フィールドフローフラクショネーション（ＡＦ４ ＭＡＬＳ）、動的光散乱（ＤＬＳ）、又はＦＬＯＷＣＡＭ（商標）イメージングが含まれる。定性的に、ＳＭＰは、開始モノマー治療用生物学的製剤溶液に相当する範囲内である。特定の実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、サブミクロン粒子（ＳＭＰ）を実質的に含まない。

本明細書に記載の本開示は、高度に濃縮された組成物であって、凝集剤と、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を含む、複数の粒子と、を含み、組成物が、水、緩衝液、又は他の生理学的に関連する水性液体、例えば、患者の体内の生物学的流体中に溶解すると、モノマー治療用生物学的製剤を含む類似した水性組成物と比較して、実質的に類似した免疫原性を有する、組成物に関する。本明細書で使用される場合、哺乳動物又はヒトの内部で遭遇し得るものとしての「生理学的に関連する」条件を適用することができる。当業者は、本明細書に記載される組成物の最終的な用途に従って、試験に最も適切な一連の条件を決定することができるであろう。いくつかの実施形態では、組成物は、水性液体中に溶解すると、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態、例えば、モノマー形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した免疫原性を有する。特定の実施形態では、組成物は、実質的に非免疫原性である。ある特定の実施形態では、水性液体は、水、水性緩衝液、又は生理学的に関連する水性液体である。

本明細書に開示されるように、「免疫原性」という用語は、治療用生物学的製剤（抗原）の注射された組成物による免疫応答の誘導を指し、一方、「抗原性」は、既存の抗体との治療用生物学的製剤の組成物の反応を指す。まとめると、抗原性及び免疫原性は、「免疫反応性」と称される。特定の実施形態では、組成物は、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態、例えば、モノマー形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した免疫原性を有する。ある特定の実施形態では、組成物は、例えば、反復用量抗薬物抗体免疫原性分析に基づいて、非免疫応答の存在に供した場合、実質的に非免疫原性である（例えば、実施例８を参照されたい）。

特定の組成物、例えば、ヒトＩｇＧに対する毒性と治療効果との間の比は、その治療指標であり、ＬＤ_５０（集団の５０％における化合物致死量）とＥＤ_５０（集団の５０％において有効な化合物の量）との間の比として表すことができる。高い治療指数を示す組成物が好ましい。細胞培養アッセイ及び／又は動物研究、例えば、ヒトＩｇＧから得られた治療指標データは、ヒトにおける使用のための様々な投薬量の製剤化において使用することができ、当該技術分野で既知である。そのような化合物の投薬量は、好ましくは、毒性がほとんど又は全くないＥＤ_５０を含む血漿濃度の範囲内にある。投薬量は、用いられる剤形及び利用される投与経路、例えば、皮下注射に依存して、この範囲内で変動し得る。例えば、Ｆｉｎｇｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ：ＴＨＥ ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＩＣＡＬ ＢＡＳＩＳ ＯＦ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，Ｃｈ．１，ｐ．１，１９７５を参照されたい。正確な組成物、投与経路、及び投薬量は、患者の状態及び組成物が送達される特定の方法を考慮して、個々の医師によって選択され得る。

いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態、例えば、モノマー形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した毒性を有する。いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態、例えば、モノマー形態で含む水性組成物と比較して、低減された毒性を有する。特定の実施形態では、組成物は、例えば、局所忍容性及び臨床観察分析に基づいて、実質的に無毒性である（例えば、実施例７を参照されたい）。

本明細書に記載の本開示による特定の実施形態では、粒子組成物は、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態、例えば、モノマー形態で含む水性組成物と比較して、治療用生物学的製剤の改善された安定性を有する（例えば、図３を参照されたい）。「安定な」組成物は、その中の全ての治療用生物学的製剤が、例えば、容器閉鎖中、意図される保管温度、例えば、４～４０℃での保管の際に、それらの物理的安定性及び／又は化学的安定性及び／又は生物学的活性を本質的に保持する組成物である。組成物は、保管の際にその物理的及び化学的安定性、並びにその生物学的活性を本質的に保持することが望ましい。保管期間は、一般に、組成物の意図される貯蔵期限に基づいて選択される。更に、組成物は、組成物の凍結（例えば、－７０℃まで）及び解凍後、例えば、１、２又は３サイクルの凍結及び解凍後に安定であるべきである。タンパク質安定性を測定するための様々な分析技術は、当該技術分野で利用可能であり、例えば、Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，２４７－３０１，Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｌｅｅ Ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，Ｐｕｂｓ．（１９９１）及びＪｏｎｅｓ，Ａ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．１０：２９－９０（１９９３）においてレビューされている。安定性は、選択された温度で、選択された期間にわたって測定することができる。安定性は、凝結体形成の評価（例えば、サイズ排除クロマトグラフィーを使用して、及び／又は目視検査による）；カチオン交換クロマトグラフィー又はキャピラリーゾーン電気泳動を使用する電荷不均一性を評価することによる；アミノ末端又はカルボキシ末端配列分析；質量分析；還元型抗体及びインタクトな抗体を比較するＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析；ペプチドマップ（例えば、トリプシン又はＬＹＳ－Ｃ）分析；抗体の生物学的活性又は抗原結合機能を評価することなどを含む、種々の異なる方法で定性的及び／又は定量的に評価することができる。いくつかの実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤は、少なくとも１ヶ月間安定である。いくつかの実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤は、少なくとも２ヶ月間安定である。ある特定の実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤は、少なくとも３ヶ月間安定である。ある特定の実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤は、４０℃で少なくとも３ヶ月間安定である。

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される方法は、組成物と同時に、逐次的に、又は断続的に投与することができる、薬学的に有効な量の少なくとも１つのヒアルロナン分解剤を投与することを更に含む。皮下組織又は細胞外マトリックスは、グリコサミノグリカンの粘弾性ゲル内に埋め込まれた繊維性タンパク質のネットワークからなる。ヒアルロナンは、皮下組織の顕著なグリコサミノグリカンである。ヒアルロナンは、粘性ポリマーとして線維芽細胞によって間質中に分泌され、これは、その後、ヒアルロニダーゼの作用によってリンパ中で局所的に分解される。グリコサミノグリカンは、細胞外マトリックスの複雑な線形多糖類であり、ヒアルロナンの場合のように、Ｎ－置換ヘキソサミン及びウロン酸の反復する二糖構造を特徴とする。

ヒアルロナン分解剤は、例えば、注射によって投与され、それによって治療用生物学的製剤の吸収を改善させる組成物の体積を増進及び／又は増加させることにより、複数の粒子及び凝集剤を含む組成物の皮下投与を増進させることができる。ヒアルロナン分解剤、例えば、ヒアルロニダーゼの使用は、ヒアルロナンの可逆的な加水分解、例えば、ヒアルロナンの可逆的な分解を介して、全身循環への療用生物学的製剤の皮下投与を改善することができる。細胞外マトリックスにおけるヒアルロナンの分解は、皮下組織におけるチャネルを一時的に開放し、それによって、より大きい体積が皮下組織に安全及び快適に投与されることを可能にする（例えば、実施例９を参照されたい）。更に、ヒアルロナンの分解は、皮下組織の粘度を一時的に減少させ、注射された液体の分散を促進し、それらの吸収を容易にする。ヒアルロニダーゼの効果は、２４～４８時間以内に起こるヒアルロナン組織の完全な再構成を伴って局所的及び可逆的である。例えば、Ｆｒｏｓｔ，Ｇ．Ｉ．，“Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｈｕｍａｎ ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ（ｒＨｕＰＨ２０）：ａｎ ｅｎａｂｌｉｎｇ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｄｒｕｇ ａｎｄ ｆｌｕｉｄ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ”，Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｏｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，２００７；４：４２７－４４０］を参照されたい。ヒアルロナンの分解による皮下組織の浸透性の増加は、同時に、逐次的に、又は断続的に投与される複数の粒子を含む組成物の分散及び吸収を増加させるそれらの能力についてのヒアルロニダーゼの有効性と相関する。ある特定の実施形態では、本明細書に記載される方法は、少なくとも１つのヒアルロナン分解剤を投与することを更に含む。

いくつかの実施形態では、本開示の方法は、少なくとも１つのヒアルロナン分解剤、例えば、組成物と同時に、逐次的に、又は断続的に投与される薬学的に有効な量の少なくとも１つのヒアルロナン分解剤を投与することを更に含む。ある特定の実施形態では、ヒアルロナン分解剤は、本明細書においてヒアルロニダーゼとも称されるヒアルロニダーゼ酵素である。いくつかの実施形態では、ヒアルロニダーゼは、可溶性中性活性ヒアルロニダーゼである。ある特定の実施形態では、ヒアルロニダーゼは、哺乳動物ヒアルロニダーゼである。特定の実施形態では、哺乳動物ヒアルロニダーゼは、ヒトヒアルロニダーゼである。特定の実施形態では、ヒトヒアルロニダーゼは、組換えヒトヒアルロニダーゼ、例えば、ｒＨｕＰＨ２０である。本明細書に開示される組成物における使用に好適である、ある特定の組換えヒトヒアルロニダーゼは、市販されており、例えば、Ｈａｌｏｚｙｍｅ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）からのｒＨｕＰＨ２０である。

本開示のある特定の実施形態によれば、ヒアルロナン分解剤は、組成物と同時に、逐次的に、又は断続的に投与することができる。本明細書で使用される場合、「同時」又は「ほぼ同時」投与という用語は、同時に投与される構成成分、例えば、組成物及びヒアルロナン分解剤の両方の同時投与を指す。いくつかの実施形態では、ヒアルロナン分解剤及び組成物は、単一の組成物、例えば、共製剤化されて投与される。いくつかの実施形態では、ヒアルロナン分解剤及び組成物は、別々の製剤として投与される。しかしながら、１つの構成成分は、例えば、同じ診察予約又は医師の往診で、数分又は数時間以内に投与され得る。そのような投与は、「逐次的」投与と称される。ある特定の実施形態では、逐次的投与は、ヒアルロナン分解剤及び本明細書に記載の組成物の逐次的投与を指す。特定の実施形態では、ヒアルロナン分解剤は、最初に投与され、それに続いて組成物の１回以上の用量の投与が行われる。ある特定の実施形態では、構成成分は、共製剤又は別々の製剤として断続的に投与され得る。特定の実施形態では、ヒアルロナン分解剤は、最初に投与される。

本開示の方法
治療用生物学的製剤、例えば、ｍＡｂを含む治療用組成物の臨床適用が行われる場合、一般に、意図される用途に適切である薬学的組成物又は治療用組成物を調製することが有益であろう。ある特定の実施形態では、薬学的組成物は、例えば、少なくとも約０．１％の活性治療用生物学的製剤を含み得る。いくつかの実施形態では、活性治療用生物学的製剤は、単位の重量の約２％～約９９％、又は約５０％～約９９％、及び例えば、その中で導き出せる任意の範囲を含み得る。

本明細書に記載されるように、ＣＤ２０（Ｂｐ３５としても既知である）は、Ｂリンパ球制限分化抗原であり、これは、初期プレＢ細胞発達中に発現し、形質細胞分化まで残る。この抗原は、悪性Ｂ細胞、すなわち、衰えない増殖がＢ細胞リンパ腫につながり得るＢ細胞の表面上に非常に高密度で発現しているため、ＣＤ２０は、Ｂ細胞リンパ腫についての有用な標的であり得る。食品医薬品局（ＦＤＡ）は、再発性及び以前に治療された低悪性度非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）における使用のために抗ＣＤ２０抗体、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））の治療用途を承認している。リツキシマブは、Ｂ細胞上のＣＤ２０抗原への結合によって作用し、それにより補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）及び抗体依存性細胞が媒介する細胞毒性（ＡＤＣＣ）を伴うと考えられる機序によって、Ｂ細胞の溶解をもたらす。ある特定の実施形態では、治療用生物学的製剤は、抗体である。特定の実施形態では、抗体は、抗ＣＤ２０抗体である。

本明細書では、疾患又は状態の治療を必要とする対象において疾患又は状態を治療するための組成物及び方法であって、対象に、薬学的に有効な量の組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満である、組成物を投与することを含む、組成物及び方法が提供される。いくつかの実施形態では、組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度は、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である。ある特定の実施形態では、本明細書では、がん、炎症性疾患、又は免疫疾患の治療を必要とする対象においてそれを行うための方法であって、対象に、薬学的に有効な量の組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を投与することを含む、方法が提供される。また、本明細書では、薬学的に有効な組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を投与するための方法が提供される。

「治療する」又は「治療すること」又は「治療」という用語は、一般に、治療用治療措置、例えば、疾患又は状態を治療する、逆転させる、及び／又は下方調節することを指す。本明細書で使用される場合、「治療する」又は「治療すること」とは、本開示の抗体又はその抗原結合断片のいずれかを含有する組成物などの治療用生物学的製剤を、生物学的製剤が治療活性又は予防活性を有する１つ以上の疾患症状を有する対象、又は疾患を有する疑いがある対象に、内部的又は外部的に投与することを意味する。典型的には、治療用生物学的製剤は、そのような症状（複数可）の退縮を誘導するか、又はその進行を任意の臨床的に測定可能な程度まで阻害することによってかどうかにかかわらず、治療された対象又は集団における１つ以上の疾患症状を緩和するのに有効な量で投与される。任意の特定の疾患症状を緩和するのに有効である治療用生物学的製剤の量は、対象又は患者の病状、年齢、及び体重などの因子、並びに対象又は患者に所望の応答を誘発するための治療用生物学的製剤の能力により変動し得る。疾患症状が緩和されているかどうかは、その症状の重症度又は進行状態を評価するために、医師又は他の熟練した医療提供者によって典型的に使用される任意の臨床測定によって評価され得る。この用語は、障害と関連する症状の発症の延期、及び／又はそのような障害の症状の重症度の低減を更に含む。この用語は、既存の制御不能な症状又は望ましくない症状の改善、追加の症状の予防、及びそのような症状の根底にある原因の改善又は予防を更に含む。したがって、この用語は、障害、疾患、若しくは症状を有するか、又はそのような障害、疾患、若しくは症状を発症する可能性を有するヒト又は動物対象に有益な結果が与えられたことを示す。本明細書で使用される場合、「治療」は、それがヒト又は獣医学的対象に適用される場合、治療用治療及び診断用途を指す。「治療」は、それがヒト又は獣医学的対象に適用される場合、ヒト又は動物の対象への本開示の治療用生物学的製剤、例えば、抗体又は抗原結合断片の接触を包含する。がんのための治療を必要とする対象には、良性、前がん性、又は非転移性腫瘍を既に有するもの、及びがんの出現又は再発を予防するものが含まれる。いくつかの実施形態では、治療すること又は治療の目的又は結果は、がん細胞の数を低減させ、原発性腫瘍のサイズを低減させ、末梢臓器へのがん細胞浸潤を阻害し（すなわち、ある程度まで減速させ、好ましくは停止させ）、腫瘍転移を阻害し（すなわち、ある程度まで減速させ、好ましくは停止させ）、腫瘍成長をある程度まで阻害し、かつ／又は障害と関連する症状のうちの１つ以上をある程度まで軽減することであり得る。いくつかの実施形態では、治療の有効性は、生存の期間、疾患の進行までの時間、応答率（ＲＲ）、応答の期間、及び／又は生活の質を評価することによって測定することができる。本明細書で使用される「予防する」又は「予防すること」又は「予防」という用語は、対象に薬学的に有効な量の本開示による組成物を投与することを含む、疾患又は状態の開始の阻害又は遅延を必要とする対象においてそれを行う任意の作用を指す。本開示のある特定の実施形態では、疾患又は状態に罹患している対象を「治療すること」には、限定されないが、（ｉ）疾患若しくは状態の進行を減速、停止、若しくは逆転させること、（ｉｉ）疾患若しくは状態の症状の進行を減速、停止、若しくは逆転させること、（ｉｉｉ）疾患若しくは状態の再発の可能性を低減させること、及び／又は（ｉｖ）疾患若しくは状態の症状が再発する可能性を低減させることが含まれるものとする。

本明細書に記載される組成物及び方法によって治療することができるがんの非限定的な例には、限定されないが、胃腸管の腫瘍（結腸がん、直腸がん、結腸直腸がん腫、結腸直腸がん、結腸直腸腺腫、遺伝性非ポリポーシス１型、遺伝性非ポリポーシス２型、遺伝性非ポリポーシス３型、遺伝性非ポリポーシス６型；結腸直腸がん、遺伝性非ポリポーシス７型、小腸及び／若しくは大腸がん、食道がん、食道がんを伴う胼胝形成、胃がん腫、膵臓がん、膵内分泌腫瘍）、子宮内膜がん、隆起性皮膚線維肉腫、胆嚢がん、胆管腫瘍、前立腺がん、前立腺腺がん、腎臓がん（例えば、ウイルムス腫瘍２型若しくは１型）、肝臓がん（例えば、肝芽腫、肝細胞がん腫、肝細胞がん）、膀胱がん、胎児性横紋筋肉腫、生殖細胞腫瘍、絨毛性腫瘍、睾丸生殖細胞腫瘍、卵巣、子宮、上皮性卵巣の未熟奇形腫、仙尾部腫瘍、絨毛がん、胎盤部絨毛性腫瘍、上皮性成人腫瘍、卵巣がん、漿液性卵巣がん、卵巣性索腫瘍、子宮頸がん、子宮頸部がん、小細胞及び非小細胞肺がん、鼻咽腔、乳がん（例えば、乳管がん、浸潤性乳管内がん、散発性；乳がん、乳がんに対する罹病性、４型乳がん、乳がん－１、乳がん－３；乳房－卵巣がん）、扁平上皮細胞がん（例えば、頭頸部における）、神経原性腫瘍、星状細胞腫、神経節芽腫、神経芽細胞腫、リンパ腫（例えば、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞、バーキット、皮膚Ｔ細胞、組織球性、リンパ芽球性、Ｔ細胞、胸腺、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫）、神経膠腫、腺がん、副腎腫瘍、遺伝性副腎皮質がん、脳の悪性腫瘍（腫瘍）、様々な他のがん腫（例えば、気管支原性大細胞、腺管、悪性腹水、エールリッヒ・レトレ腹水、類表皮、大細胞、ルイス肺、髄様、粘膜表皮性、燕麦細胞、小細胞、紡錘細胞、棘細胞、移行細胞、未分化、がん肉腫、絨毛がん、嚢胞腺がん）、上衣芽細胞腫、上皮腫、赤白血病（例えば、フレンド、リンパ芽球）、線維肉腫、巨細胞腫、グリア腫瘍、神経膠芽腫（例えば、多形、星状細胞腫）、神経膠腫肝細胞（ｇｌｉｏｍａ ｈｅｐａｔｏｍａ）、ヘテロハイブリドーマ、ヘテロ骨髄腫、組織球腫、ハイブリドーマ（例えば、Ｂ細胞）、副腎腫、インスリノーマ、膵島腫瘍、角化腫、上皮様平滑筋腫、平滑筋肉腫、白血病（例えば、急性リンパ性、急性リンパ芽球性、急性リンパ芽球性プレＢ細胞、急性リンパ芽球性Ｔ細胞白血病、急性巨核芽球性、単球性、急性ミエロイド性、急性骨髄性、好酸球増加を伴う急性骨髄性、Ｂ細胞、好塩基球性、慢性骨髄性、慢性、Ｂ細胞、好酸球性、フレンド、顆粒球性若しくは骨髄球性、毛様細胞、リンパ球性、巨核芽球性、単球性、単球性－マクロファージ、骨髄芽球性、骨髄性、骨髄単球性、形質細胞、プレＢ細胞、前骨髄球性、亜急性、Ｔ細胞、リンパ系新生物、骨髄性悪性腫瘍への素因、急性非リンパ性白血病）、リンパ肉腫、黒色腫、乳房腫瘍、肥満細胞腫、髄芽細胞腫、中皮腫、転移性腫瘍、単球腫瘍、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、骨髄腫、腎芽細胞腫、神経組織グリア腫瘍、神経組織神経細胞腫瘍、神経鞘腫、神経芽細胞腫、乏突起膠腫、骨軟骨腫、骨骨髄腫、骨肉腫（例えば、ユーイング）、骨粗鬆症、骨転移、乳頭腫、移行細胞、褐色細胞腫、下垂体腫瘍（浸潤性）、形質細胞腫、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、肉腫（例えば、ユーイング、組織球性細胞、イエンセン、骨原性、細網細胞）、神経鞘腫、皮下腫瘍、奇形がん（例えば、多能性）、奇形腫、精巣腫瘍、胸腺腫及び毛包上皮腫、胃がん、線維肉腫、多形神経膠芽腫；多発性グロムス腫瘍、リー・フラウメニ症候群、脂肪肉腫、リンチがん家族性症候群ＩＩ型、男性生殖細胞腫瘍、肥満細胞白血病、髄様甲状腺、多発性髄膜腫、内分泌腫瘍症、粘液肉腫、傍神経節腫、家族性非クロム親和性、毛母腫、乳頭状、家族性及び散発性、ラブドイド素因症候群、家族性、ラブドイド腫瘍、軟部組織肉腫、又は神経膠芽腫を伴うターコット症候群が含まれる、限定されないが、任意の固形若しくは非固形がん及び／又はがん転移が含まれる。

いくつかの実施形態では、治療用生物学的製剤は、免疫療法である。いくつかの実施形態では、免疫療法は、抗ＣＤ２０抗体である。ある特定の実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、リツキシマブである。本明細書に記載される組成物及び方法の特定の実施形態では、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）の治療を必要とする対象における非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）の治療であって、対象に、薬学的に有効な量の組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を投与することを含む、治療に有用であり得る。本明細書に記載されるように、ＣＤ２０抗原に結合することができる任意の抗体は、本開示の方法で使用され得る。ＣＤ２０抗原に結合する抗体には、例えば、Ｃ２Ｂ８（リツキシマブ；ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標））（参照により本明細書に明確に組み込まれる米国特許第５，７３６，１３７号）、Ｙ２Ｂ８と命名されるイットリウム－［９０］標識２１３８マウス抗体（参照により本明細書に明確に組み込まれる米国特許第５，７３６，１３７号）、１３１ １－Ｂ１抗体を生成するために１３１ １で任意選択的に標識されたマウスＩｇＧ２ａ １３１（ＢＥＸＸＡＲ（登録商標））（参照により本明細書に明確に組み込まれる米国特許第５，５９５，７２１号）、マウスモノクローナル抗体１Ｆ５（Ｐｒｅｓｓ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ ６９（２）：５８４－５９１（１９８７））、キメラ２Ｈ７抗体（参照により本明細書に明確に組み込まれる米国特許第５，６７７，１８０号）、及びＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ Ｔｙｐｉｎｇ Ｗｏｒｋｓｈｏｐから入手可能なモノクローナル抗体Ｌ２７、Ｇ２８－２、９３－１ １３３、Ｂ－－Ｃｌ、又はＮＵ－－Ｂ２（Ｖａｌｅｎｔｉｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ：Ｌｅｕｋｏｃｙｔｅ ＴｙｐｉｎｇＩＩＩ（ＭｃＭｉｃｈａｅｌ，Ｅｄ．，ｐ．４４０，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ（１９８７））が含まれる。

本開示のある特定の実施形態では、抗ＣＤ２０抗体は、リツキシマブである。リツキシマブは、遺伝子操作されたキメラマウス／ヒトモノクローナル抗体である。リツキシマブは、マウス軽鎖及び重鎖可変領域配列、並びにヒト定常領域配列を含有するＩｇＧ、カッパ免疫グロブリンである。リツキシマブは、およそ８．０ｎＭのＣＤ２０抗原に対する結合親和性を有し、例えば、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ（Ｓｏｕｔｈ Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）から市販されている。

他の実施形態では、抗体は、トラスツズマブ（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ；Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）である。トラスツズマブは、ＨＥＲ２エクトドメインの細胞外部分に結合し、二量体化及び成長因子の発現につながるカスケードを防止するヒト化モノクローナル抗体である。ある特定の実施形態では、トラスツズマブは、乳がん食道がん、胃がん、又は他のＨＥＲ２過剰発現の新しいがん又は転移性がんを治療するために使用される。

また、本明細書では、炎症性疾患の治療を必要とする対象において炎症性疾患を治療するための方法であって、対象に、薬学的に有効な量の組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を投与することを含む、方法が提供される。

本明細書に記載される方法のいくつかの実施形態では、炎症性疾患には、限定されないが、関節疾患、眼科疾患、網膜疾患、クローン病、過敏性腸症候群、シェーグレン病、組織移植片拒絶、喘息、多発性硬化症、強皮症、グッドパスチャー症候群、アテローム性動脈硬化症、慢性特発性血小板減少性紫斑病、アジソン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、糖尿病、敗血症性ショック、重症筋無力症、炎症性骨盤疾患、炎症性腸疾患、尿道炎、ブドウ膜炎、副鼻腔炎、肺臓炎、脳炎、髄膜炎、心筋炎、骨髄炎、筋炎、肝炎、胃炎、腸炎、虫垂炎、膵炎、又は胆嚢炎が含まれる。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組成物及び方法は、免疫疾患、例えば、血液悪性腫瘍に対して二次的な後天性低ガンマグロブリン血症、慢性炎症性脱髄性多発神経障害（ＣＩＤＰ）、ギランバレー症候群、特発性血小板減少性紫斑病、炎症性ミオパチー、ランバート・イートン筋無力症候群、多巣性運動神経障害、重症筋無力症、メルシュ・ヴォルトマン症候群、続発性低ガンマグロブリン血症特異的抗体欠損症、急性播種性脳脊髄炎、自己免疫性溶血性貧血；瘢痕性類天疱瘡、エヴァンス症候群、胎児母体／新生児同種免疫性血小板減少症（ＦＭＡＩＴ／ＮＡＩＴ）、血球貪食症候群、高リスク同種造血性幹細胞移植、ＩｇＭ異常タンパク性神経障害、腎臓移植、多発性硬化症、眼球クローヌス・ミオクローヌス運動失調、輸血後紫斑病、中毒性表皮壊死症／スティーブンスジョンソン症候群（ＴＥＮ／ＳＪＳ）、毒素ショック症候群、アルツハイマー病、多発性骨髄腫、敗血症；Ｂ細胞腫瘍、外傷、又は細菌、ウイルス、真菌感染症を治療するのに有用である。いくつかの実施形態では、免疫疾患は、自己免疫疾患である。ある特定の実施形態では、自己免疫疾患には、限定されないが、多発性硬化症、強皮症、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、甲状腺炎、レイノー症候群、シェーグレン症候群、自己免疫性ブドウ膜炎、自己免疫性心筋炎、炎症性腸疾患、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、全身性狼瘡、視神経脊髄炎、特発性血小板減少性紫斑病、重症筋無力症、潰瘍性大腸炎、クローン病、多発性関節炎、移植片対宿主反応、若年発症糖尿病、橋本甲状腺炎、グレーブス病、悪性貧血、慢性活動性（ルポイド）肝炎、乾癬性関節炎、又は神経皮膚炎が含まれる。「減少する」又は「低減する」とは、数、量、サイズ、又は強度において、より少なく又はより小さくなることを意味する。ある特定の実施形態では、疾患（例えば、巣状分節性糸球体硬化症（ＦＳＧＳ）など）のリスクを減少させることは、疾患を発症する可能性を少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、又は９０％減少させることを含む。いくつかの実施形態では、疾患のリスクを減少させることは、疾患の発症の遅延、例えば、少なくとも約６ヶ月、例えば、約１年、例えば、約２年、約５年、又は約１０年の遅延を含む。

本明細書に記載されるように、凝集剤を有する粒子ベースの組成物は、注射前に再懸濁を必要とせずに低い注射力での注射性を可能にすることによって、治療用生物学的製剤、例えば、ｍＡｂの皮下投与の現在の課題に直接対処することができる。いくつかの実施形態では、粒子及び凝集剤は、非水性液体担体中に懸濁し、少なくとも１ヶ月間、液体担体中に実質的に懸濁したままであり、複雑で時間がかかる再懸濁手順の必要性を排除する。本明細書に記載される組成物は、予め充填されたシリンジ、予め充填された携帯型薬物送達注射デバイス、又は予め充填された経口投与される液体注射器カプセルで使用することができる。本明細書に記載される組成物中の粒子の非常に分散性の性質は、患者に優しい皮下注射を可能にする。皮下空間内では、本明細書に記載されるように、粒子に含まれる治療用生物学的製剤は、注射の際にその元のモノマー状態に容易に戻り、完全なバイオアベイラビリティを可能にする。特定の実施形態では、組成物は、治療用生物学的製剤の品質を損なわず、より高い充填量を達成し、したがって、治療用生物学的製剤、例えば、ｍＡｂを皮下注射によって容易に送達して、疾患又は状態の治療を必要とする対象において疾患又は状態を治療することを可能にし、疾患又は状態は、がん、炎症性疾患、又は免疫疾患である。いくつかの実施形態では、疾患又は状態は、がんである。いくつかの実施形態では、疾患又は状態は、炎症性疾患又は状態である。ある特定の実施形態では、疾患又は状態は、免疫疾患である。

本明細書に開示される薬学的組成物及び方法は、例えば、非経口又は腹腔内を含む任意の好適な投与経路によって対象に投与することができる。いくつかの実施形態では、組成物は、非経口、皮下、経口、表皮、皮内、筋肉内、動脈内、腹腔内、又は静脈内注射によって投与される。特定の実施形態では、組成物は、皮下注射によって投与される。適切な投与経路及びそれに好適な組成物の詳細は、例えば、米国特許第６，１１０，９７３号、同第５，７６３，４９３号、同第５，７３１，０００号、同第５，５４１，２３１号、同第５，４２７，７９８号、同第５，３５８，９７０号、及び同第４，１７２，８９６号、並びにその中に引用されている特許に見出すことができる。本明細書に開示される「薬学的組成物」という用語は、例えば、対象に投与されるとき、組成物中の治療用生物学的製剤を有効にするような形態にあり、組成物が投与される対象に対して許容できないほど毒性である追加の構成成分を含有しない調製物を指す。そのような組成物は、無菌である。「無菌」組成物又は製剤は、無菌性であるか、又は全ての生きている微生物及びそれらの胞子を含まない。

「注射性」又は「シリンジ性」という用語は、本明細書に記載の液体組成物を、注射デバイス、例えば、シリンジ、携帯型薬物送達注射デバイス、又は経口投与される液体注射器カプセルの使用を通じて対象に投与することができる相対的な容易さを指す。特に、注射性は、組成物の粘度、より重要なことに、粒子の沈降、注射又は移送流量、及び針の特徴、例えば、長さ及びゲージによって部分的に影響される。いくつかの実施形態では、注射性は、様々な剪断速度で組成物の粘度を測定することによって決定される。いくつかの実施形態では、注射性は、バレル、プランジャー、及び針からなる注射デバイスを作動させるために必要とされる離脱力及び／又は滑走力を測定することによって決定される。ある特定の実施形態では、シリンジのバレルは、少なくとも６ｍｍの内径を有する。本明細書に記載されるように、凝集剤及び少なくとも１つの治療用生物学的製剤を含む複数の粒子を含む組成物の注射性は、ほぼ同じ濃度の水性モノマー治療用生物学的製剤を有する水性組成物のそれよりも優れている。「注射性」又は「シリンジ性」という用語はまた、１６～３３ゲージの針、任意選択的に、薄壁又は超薄壁（ＵＴＷ）針を備えたシリンジを通る薬学的組成物の注射性能を指すことができる。ある特定の実施形態では、シリンジは、少なくとも８ｍｍの長さである針を備えている。注射性は、注射に必要とされる圧力又は力、流れの均一性、吸引の質、及び目詰まりがないことなどの因子に依存する。本明細書に記載されるように、注射性は、凝集剤を添加しない標準的な粒子組成物に対して、一定期間後の組成物の注射力を比較することによって評価され得る。本明細書に記載の組成物は、一定期間後の注射性を改善させることができ、注射力は、別様の同じ条件下で同じ濃度の治療用生物学的製剤を有する標準的な粒子組成物と比較した場合に、少なくとも１０％、好ましくは少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも５０％、及び最も好ましくは少なくとも７５％低減する。代替的に、組成物の注射性は、シリンジが一定期間にわたって、例えば、一定期間にわたる粒子の沈降で同じ力で押圧される際に、凝集体積、例えば、組成物の約２．０ｍＬ、好ましくは約１．５ｍＬ、より好ましくは約１．０ｍＬ、及び最も好ましくは約０．５ｍＬを注射するのに必要とされる時間又は注射力を比較することによって評価することができる。「流量」という語句は、単位時間当たり所与の断面積を通過し得る液体組成物の体積を指す。一般に、流量式は、Ｑ＝Ａ×ｖであり、式中、Ｑは、流量であり、Ａは、流路内の点における断面積であり、ｖは、その点における液体の平均速度である。ある特定の実施形態では、流量は、一定である。特定の実施形態では、流量は、少なくとも約０．１ｍＬ／秒である。

「注射離脱力」という用語は、シリンジの内容物の排出が安定した速度で起こることができる前の、標準的な注射デバイスのシリンジバレルとプランジャーとの間の摩擦を克服するのに必要とされる力、例えば、プランジャーの静止摩擦を破壊するのに必要とされる最大力を指す。力は、シリンジプランジャーシャフトの外側に面している末端において加えられ、シリンジバレルの軸に沿って指向される。シリンジの内容物は、所定のゲージ及び長さのシリンジ針を通して排出される。ある特定の実施形態では、注射離脱力は、作動中にシリンジプランジャーの外側に面している末端において配置されるロードセルによって測定される。

「シリンジ力」、「注射力」、「注射滑走力」、又は「滑走力」という用語は、本明細書で互換的に使用され、標準的な注射デバイスの内容物の安定した排出を維持するのに必要とされる力、例えば、静止摩擦が克服されると、プランジャーの動きを維持するのに必要とされる力を指す。力は、シリンジプランジャーシャフトの外側に面している末端において加えられ、シリンジバレルの軸に沿って指向される。シリンジの内容物は、所定のゲージ及び長さのシリンジ針を通して排出される。「ニュートン領域」又は「Ｎ」という用語は、全ての点における局所ひずみ速度と直線的に比例するか、又はほぼ直線的に比例する剪断応力の範囲を意味する。いくつかの実施形態では、粒子の懸濁液への凝集剤の添加は、シリンジ力を低減させる（例えば、実施例１６及び１７を参照されたい）。

本明細書に記載される組成物の投与は、１８～３３ゲージの針を使用して投与することを含み得る。１８～３３ゲージの針は、約１９ｍｍ（３／４インチ）以下、又は好ましくは約１３ｍｍ（１／２インチ）以下の長さを有し得る。いくつかの実施形態では、組成物の投与は、２７～３３ゲージの針を使用する。いくつかの実施形態では、２７～３３ゲージの針は、約１３ｍｍ（１／２インチ）以下の長さを有する。ある特定の実施形態では、組成物は、１８ゲージ～３３ゲージの範囲、例えば、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２ゲージ～３３ゲージのゲージを有する針から分配される。いくつかの実施形態では、組成物は、２７ゲージ～３０ゲージの範囲のゲージを有する針から分配される。ある特定の実施形態では、組成物は、２５ゲージ～２７ゲージの範囲のゲージを有する針から分配される。特定の実施形態では、組成物は、２７ゲージのゲージを有する針から分配される。

いくつかの実施形態では、組成物は、約７０Ｎ未満、例えば、約６０、５０、４０、３０、２５、２０、１５、１０、又は５Ｎの注射力を使用して分配される。いくつかの実施形態では、組成物は、約２５Ｎ未満の注射力を使用して分配される。特定の実施形態では、組成物は、約２０Ｎ未満の注射力を使用して分配される。ある特定の実施形態では、組成物は、約１５Ｎ未満の注射力を使用して分配される。いくつかの実施形態では、組成物は、約１０Ｎ未満の注射力を使用して分配される。ある特定の実施形態では、組成物は、約５Ｎ未満の注射力を使用して分配される。いくつかの実施形態では、注射力は、組成物中の治療用生物学的製剤の濃度が増加するにつれて、組成物の粘度よりも低い速度で増加する。ある特定の実施形態では、注射力は、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、実質的に同じままである。

他の場合では、本明細書に記載の複数の粒子及び凝集剤を含む組成物は、任意選択的に、組成物と同時に、逐次的に、又は断続的に投与される少なくとも１つのヒアルロナン分解剤、例えば、ヒアルロニダーゼを投与することを更に含む。いくつかの実施形態では、投与される組成物は、約２０．０ｍＬ未満、例えば、１５．０、１０．０、５．０、２．０、１．５、１．０、０．５ｍＬである。いくつかの実施形態では、投与される組成物は、約２．０ｍＬ未満である。ある特定の実施形態では、投与される組成物は、約１．５ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、投与される組成物は、約１．０ｍＬ未満である。特定の実施形態では、投与される組成物は、約０．５ｍＬ未満である。

いくつかの実施形態では、組成物は、投与後に約１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１分未満で溶解する。ある特定の実施形態では、組成物は、投与後に約６０秒未満、例えば、５９、５８、５７、５６、５５、５４、５３、５２、５１、５０、４９、．．．１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１秒で溶解する。特定の実施形態では、組成物は、投与後に直ちに溶解する。

本明細書に記載される組成物は、非経口投与に使用することができ、例えば、使用前に注射デバイスの手動のかき混ぜ又は予備混合を必要としない、静脈内、筋肉内、皮下、又は更に腹腔内経路を介する注射用に製剤化される。注射可能な使用に好適な薬学的組成物は、無菌粒子を含む無菌非水性液体担体を含む。全ての場合において、組成物は、無菌でなければならず、容易に注射することができる程度に流体でなければならない。薬学的組成物はまた、現在の適正製造手順（ｃＧＭＰ）及び保管の条件下で安定であるべきである。

本開示は、一般に、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスにおける使用のための組成物に関する。特定の実施形態では、組成物は、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイス内にある。例えば、本明細書に開示されるシリンジは、予め充填されたシリンジであり得る。ある特定の実施形態では、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスは、組成物を用いて予め充填されている。携帯型薬物送達注射デバイスの例には、ペン注射器、自動注射器（例えば、自動注射装置、パッチ）、又は経口投与される液体注射器カプセル（例えば、胃腸管などに薬物を送達するロボットピル）が含まれる。本明細書に記載される組成物は、ガラス又はプラスチックなどで作られた使い捨てシリンジ、カートリッジ、又は任意の他の容器閉鎖に封入され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、シリンジ注射によって投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、予め充填されたシリンジから分配される。ある特定の実施形態では、携帯型薬物送達注射デバイスは、無線通信システムを使用して患者に薬物を自動的に、又は半自動的に送達するように構成される。

自動注射器、例えば、自動注射装置、ペン注射器、若しくは医薬品ペン、又は経口投与される液体注射器カプセルは、治療用薬剤の非経口投与を可能にする、予め充填され、予め組み立てられた注射デバイスである。自動注射器の利点は、それらが密封された無菌カートリッジ又は注射デバイスに測定された用量の治療用薬剤を含むことである。自動注射器は、器用さが低い、視力が乏しい、又は時間通りに治療用薬剤を投与するために携帯性を必要とする人々に有用であり、また、治療用薬剤の自己注射に対する恐怖又は苦労を減少させることができ、これは、人が医薬品を服用する可能性を増加させる。自動注入器は、投薬量を測定する必要なしに迅速かつ簡単な治療用薬剤の自己投与を可能にする緊急事態において最も有用である。

本明細書に開示される組成物及び方法における治療用生物学的製剤の粒子懸濁液が完全に送達されることを確実にすることは、多くの場合、注射力が既に比較的高くなり得る粒子懸濁液にとって重要である。高い剪断において、携帯型薬物送達注射デバイスの場合がよくあるように、高い注射力での単位用量の完全注射を確実にするという問題は、組成物中の粒子沈降によって複雑になる可能性があり、ユーザ操作が困難になる。

自動注入器では、組成物中の治療用生物学的製剤の粒子は、その後に注射される粒子懸濁液として保管される可能性が高い。しかしながら、粒子懸濁液の長期保管（例えば、３ヶ月～１２ヶ月）は、高い注射力につながり得る粒子沈降などの欠点を有する。これらの自動注射器は、注射直前に粒子の再懸濁を促進するために、ユーザが注射器本体を手動で振盪することを必要とする。残念ながら、自動注射器を手動で振盪するなどのステップは、ある用量の治療用薬剤を投与するために必要な時間を増加させ、これは、治療用薬剤の迅速な送達が必要とされる多くの緊急医療状況では望ましくない。

いくつかの実施形態では、組成物は、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスによって投与される。特定の実施形態では、組成物は、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイス内にある。特定の実施形態では、組成物は、シリンジによって投与される。ある特定の実施形態では、組成物は、携帯型薬物送達注射デバイスによって投与される。ある特定の実施形態では、携帯型薬物送達注射デバイスは、ペン注射器である。いくつかの実施形態では、携帯型薬物送達注射デバイスは、自動注射器である。ある特定の実施形態では、携帯型薬物送達注射デバイスは、経口投与される液体注射器カプセルである。特定の実施形態では、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスは、組成物を用いて予め充填されている。いくつかの実施形態では、組成物は、１回以上の用量で投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、単回用量で投与される。ある特定の実施形態では、組成物は、複数回用量で投与される。

いくつかの実施形態では、組成物は、シリンジによって投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、ペン注射器によって投与される。ある特定の実施形態では、組成物は、自動注射器によって投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、経口投与される液体注射器カプセルによって投与される。特定の実施形態では、シリンジ、ペン注射器、自動注射器、経口投与される液体注射器カプセルは、予め充填されている。

本開示の組成物は、疾患又は状態の治療を必要とする対象において疾患又は状態を治療するために利用され得る。いくつかの実施形態では、疾患又は状態は、がんである。いくつかの実施形態では、疾患又は状態は、炎症性疾患又は状態である。ある特定の実施形態では、疾患又は状態は、免疫疾患である。ある特定の実施形態では、対象は、哺乳動物、例えば、ヒト又は動物である。本明細書に記載の組成物は、種々の既知の経路及び技術を使用して、インビボで哺乳動物、例えば、ヒト又は動物対象に投与することができる。例えば、組成物は、注射可能な懸濁液として提供され、従来の針及びシリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスを使用して、非経口、皮下、経口、表皮、皮内、筋肉内、動脈内、腹腔内、又は静脈内注射を介して投与され得る。ある特定の実施形態では、組成物は、哺乳動物に投与される。特定の実施形態では、組成物は、ヒトに投与される。

本開示による特定の実施形態では、組成物が投与される際に、完全な溶解は、直ちに又は数秒以内に生じ得、皮下空間に持続している粒子によって課される任意の免疫学的リスクを軽減する。例えば、等しい用量の水性モノマーｍＡｂと比較して、ｍＡｂを含む粒子の投薬は、本明細書に記載されるような類似又は改善された薬物動態（ＰＫ）プロファイル（ＡＵＣ、Ｃｍａｘ及びＴｍａｘ）を生成することが示されている。ある特定の実施形態では、組成物は、投与後に直ちに溶解する。

本明細書に記載される組成物は、生物活性を喪失することなく、高濃度の治療用生物学的製剤（３００～７５０ｍｇ／ｍＬ）組成物の皮下送達を示す。これは、有機溶媒、例えば、ゴマ油、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、脂肪酸エステル（オレイン酸エチル（ＥＯ））を液体担体として使用することによって、種々の治療用生物学的製剤について達成されている。例えば、オレイン酸エチルは、２５℃で約６ｍＰａ・ｓの粘度を有する脂肪酸エステルであり、保管中又はインビボでの溶解中に粒子と化学的に相互作用しない。

制御可能なサイズ分布（多分散性指数＜０．２）を有する密な（１．３２ｇ／ｃｍ^３）の丸い粒子の生成は、本明細書に記載される種々の治療用生物学的製剤を使用して達成することができる。集束イオンビーム走査型電子顕微鏡法（ＦＩＢ－ＳＥＭ）を使用して、組成物中の高いタンパク質充填量に到達するために極めて重要である、粒子が空隙空間を含有しないかどうかを決定することができ、Ｘ線光電子分光法（ＸＰＳ）を使用して、粒子の径方向分布を制御することができる。ある特定の実施形態では、粒子サイズは、約１０～約８０μｍであり得、これは、低粘度組成物に到達するために好ましいが、２７ゲージの針におけるシリンジの目詰まりを防止するのに十分に小さい。例えば、予め充填されたシリンジに、凝集剤、及びオレイン酸エチル（ＥＯ）液体担体中の約４００ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度での粒子を充填することによって、治療用組成物は、約２０ｍＰａ・ｓ（約４Ｎの注射力に相関する）の粘度で形成することができ、これは、凝集体積、粘度、又は注射力を実質的に変化させることなく、少なくとも１ヶ月間保管することができる（例えば、粒子は、少なくとも１ヶ月間、液体担体中に実質的に懸濁したままである）。実施例５及び６を参照されたい。いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１ヶ月間、実質的に同じ凝集体積を有する。実施例６を参照されたい。いくつかの実施形態では、複数の粒子及び凝集剤は、少なくとも３ヶ月間、液体担体中に実質的に懸濁したままである。実施例１０及び１１を参照されたい。ある特定の実施形態では、注射力は、約２５℃での容器閉鎖保管条件下で少なくとも３ヶ月間、実質的に同じままである。実施例１０及び１１を参照されたい。いくつかの実施形態では、降伏応力は、約２５℃での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、実質的に同じままである。実施例１３を参照されたい。特定の実施形態では、組成物への凝集剤の添加は、粒子が沈降するのを防止し、針の目詰まりを防止する。

本明細書に記載されるように、組成物中の粒子の構造的安定性の特徴評価は、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、示差走査蛍光分析法（ＤＳＦ）、円二色性（ＣＤ）、カチオン交換クロマトグラフィー（ＣＩＥＸ）、及びサブ可視粒子（ＳｖＰ）分析を使用して達成された。加えて、薬物動態（ＰＫ）及び免疫原性研究を使用して、生物活性の保存を分析した。実施例７及び８を参照されたい。

また、本明細書に記載されるのは、ＳＥＣデータにより、９６．６％のモノマー（タンパク質含有量５０７ｍｇ／ｍＬ）を含有した再製剤化粒子組成物と比較して、凝結体を含有するラベル製剤（ＦＤＡ承認された製剤としての水性ｍＡｂ）と比較して、処理の際に最小の凝結体形成が観察されたことが確認された。実施例１１を参照されたい。４０℃での保管の３０日後、ＤＳＦは、試料全体にわたり１℃未満の熱シフトを示し、ＣＤは、二次構造（ベータ－シートパーセンテージ）のいずれの差も検出することができなかった。ＣＩＥＸを使用して、規制（ＩＣＨ Ｑ６Ｂ）によって要求されるようなタンパク質の荷電バリアントを分析し、化学修飾が本明細書に記載される調製中に、及び保管の際に起こらなかったことを確実にした。ある特定の実施形態では、組成物は、ＦＤＡラベル製剤よりも、保管の際に化学修飾を受けにくい場合がある。これは、タンパク質が粒子として固体状態でより安定であることによる。

４０℃での３０日間の保管後、フローサイトメトリーアッセイによって生物活性の保存が示されている。ＦＤＡラベル製剤と、本明細書に記載のそれらの組成物との間で識別可能な差は明らかでなかった。本明細書における実施例４及び実施例５に示されるように、ＦＤＡラベル製剤の場合、生物活性は、保管後に有意に減少したが、組成物中の粒子については、活性の減少は観察されなかった。

インビボ研究の開始前に、組成物に使用した粒子は、実質的に無菌性な条件下で得た。細菌内毒素レベルは、受け入れられている注射標準を約３桁下回った（０．０５ＥＵ／ｍｇ～０．２５ＥＵ／ｍｇ）。加えて、微生物成長アッセイは、観察可能な成長を示さなかった。

本明細書に記載される組成物は、ラット薬物動態（ＰＫ）、ＳＣクリアランス（マウス）、及び有効性（マウス異種移植）の観点から、水性ＦＤＡラベル製剤に匹敵する。ＰＫプロファイルを実施例７に示し、ｍＡｂ微小粒子懸濁液（ＳＣ注射）は、水性ｍＡｂ ＳＣ注射よりも高いバイオアベイラビリティを示す。図１１を参照。粒子のインビボでの溶解挙動は、未溶解粒子が潜在的に免疫原性反応を引き起こす可能性があるため、標準的な水性製剤と比較して、組成物が増加した速度で注射部位を消失することができることを確実にしたことが示されている。いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、改善された薬物動態（ＰＫ）を有する。図１１を参照。時間ゼロから無限大までの曲線下面積（ＡＵＣ）は、時間にわたる総薬物曝露を表す。ピーク濃度は、薬物投薬を決定するために使用される薬物動態尺度である。最大濃度（Ｃｍａｘ）は、用量が与えられた後の、血液、脳脊髄液、又は標的臓器中の薬物の最高濃度である。Ｔｍａｘは、吸収される必要がある薬物（例えば、経口薬物）の投与後に薬物が最大濃度（Ｃｍａｘ）に到達するのにかかる時間である。Ｔｍａｘは、薬物吸収の速度及び薬物消失の速度によって支配される。Ｔｍａｘにおいて、これらは等しい。ある特定の実施形態では、組成物は、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、改善されたＡＵＣ、Ｃｍａｘ、及び／又はＴｍａｘを有する。

いくつかの実施形態では、ヒアルロニダーゼの投与は、皮下シリンジ注射によって投与される凝集剤を有する組成物の体積及び流体分散の増加を可能にする。本明細書に開示されるように、再懸濁なしに皮下投与された組成物の注射体積は、ヒアルロニダーゼを用いる事前注射によって大幅に増加させることができる。実施例９に示されるように、これらのヒアルロニダーゼ事前注射部位は、注射時に投与の部位に形成された皮膚小疱の外観によって決定されるように、組成物の注射の改善された速度を示した。

本開示の特定の実施形態は、本明細書に記載されている。当然ながら、これらの特定の実施形態の等価物の変形形態、変更、改変、及び置換は、前述の説明を読むと、当業者に明らかになるであろう。本発明者らは、当業者がそのような等価物の変形形態、変更、改変、及び置換を適宜用いることを期待し、本発明者らは、本開示が本明細書に具体的に記載されるものとは別の方法で実施されることを意図する。当業者は、本質的に類似した結果をもたらすように変更、変化、又は改変され得る、種々の重要でないパラメータを容易に認識するであろう。したがって、本開示は、適用される法律により許容される、本明細書に添付の特許請求の範囲において列挙される主題の全ての改変物及び等価物を含む。更に、その全ての可能な変形形態における上に記載された要素の任意の組み合わせが、本明細書で別段の指示がない限り、又は文脈によって明らかに別段の矛盾がない限り、本開示により包含される。

全般的に記載されている本開示は、以下の実施例を参照することによってより容易に理解され、これは、本開示のある特定の態様及び実施形態の例示の目的でのみ含まれ、限定することは意図されない。

キット
様々な実施形態では、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した凝集剤を有する複数の治療用粒子を含む薬学的に有効な組成物を含むキットが想定される。例えば、キットは、１つ以上の追加の容器を含み得、各々は、本明細書に記載される組成物の使用のための商業的及びユーザの観点から望ましい様々な材料（例えば、任意選択的に濃縮された形態の試薬及び／又はデバイス）のうちの１つ以上を有する。そのような材料の非限定的な例には、限定されないが、希釈剤、フィルタ、針、シリンジ、カートリッジ、デバイス、キャリア、パッケージ、容器、バイアル、並びに／又は内容物及び／若しくは使用説明書をリストするチューブラベル、並びに使用説明書を伴う添付文書が含まれる。いくつかの実施形態では、本実施形態は、実施形態の療法を投与するためのキットを企図する。キットは、本開示の薬学的組成物のいずれかを含有する１つ以上の密封された予め充填されたシリンジ、カートリッジ、又は携帯型薬物送達注射デバイスを含み得る。キットは、例えば、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を含む少なくとも複数の粒子、並びに実施形態の構成成分を調製、製剤化、及び／若しくは投与するか、又は開示される治療方法のうちの１つ以上のステップを実行するための試薬を含み得る。いくつかの実施形態では、キットはまた、キットの構成成分と反応しない容器、例えば、エッペンドルフチューブ、シリンジ、ボトル、チューブ、又は携帯型薬物送達注射デバイスである好適な容器を含み得る。容器は、無菌化可能な材料、例えば、プラスチック又はガラスから作られ得る。特定の実施形態では、組成物は、予め充填されたシリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスから分配される。ある特定の実施形態では、キットは、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスと、組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、粒子（例えば、粒子の実質的に全て）が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、凝集剤と、を含み、組成物中の凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、組成物中の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物と、を含む。

キットは、本明細書において記述される方法の手順ステップを概説する指示シートを更に含み得、本明細書に記載のものと実質的に同じ手順に従うか、又は当業者に既知である。指示情報は、コンピュータを使用して実行した際に、薬学的に有効な量の治療用生物学的製剤を送達するための実際又は仮想の手順の表示をもたらすコンピュータ可読指示を含有するコンピュータ可読媒体中にあり得る。

ラベルは、任意選択的に容器上にあるか、又は容器と関連する。例えば、ラベルを形成する文字、数字、又は他の記号が容器自体に添付、型打ち、又はエッチングされている場合、ラベルは容器上にあり、例えば、添付文書として、容器も保持する受け器又はキャリア内に存在する場合、ラベルは容器と関連する。加えて、ラベルは、内容物が特定の治療用途のために使用されることを示すために使用され得る。加えて、ラベルは、例えば、本明細書に記載される方法における内容物の使用のための指図を示し得る。ある特定の実施形態では、薬学的組成物は、本明細書に提供される治療用生物学的製剤を含有する１つ以上の単位剤形を含有するパック又はディスペンサーデバイス中に存在する。例えば、パックは、金属又はプラスチック箔、例えば、ブリスターパックを含有する。あるいは、パック又はディスペンサーデバイスは、投与のための指示が付随し得る。あるいは、パック又はディスペンサーは、医薬品の製造、使用、又は販売を規制する政府機関によって規定された形態における、容器と関連する通知を付随し得、この通知は、ヒト又は獣医学的投与のための薬物の形態の機関による承認を反映する。そのような通知は、例えば、処方薬について米国食品医薬品局によって承認されたラベリング、又は承認された製品の挿入物である。いくつかの実施形態では、適合性の薬学的液体担体中に製剤化された本明細書に提供される治療用粒子及び凝集剤を含有する組成物が調製され、適切な容器中に入れ、示された状態の治療のためにラベリングされる。

いくつかの場合では、本明細書に提供される液体組成物は、予め充填された注射デバイス、例えば、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスに製剤化される。いくつかの実施形態では、粒子懸濁液、例えば、組成物は、約０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、又は約２．５ｍＬの投与される体積で製剤化される。いくつかの実施形態では、投与される組成物の体積は、約２．５ｍＬ未満である。ある特定の実施形態では、投与される組成物の体積は、約２．０ｍＬ未満、好ましくは約１．５ｍＬ未満、より好ましくは約１．０ｍＬ未満、及び最も好ましくは約０．５ｍＬ未満である。

他の場合では、方法は、少なくとも１つのヒアルロナン分解剤、例えば、組成物と同時に、逐次的に、又は断続的に投与される薬学的に有効な量の少なくとも１つのヒアルロナン分解剤を投与することを更に含む。いくつかの実施形態では、投与されるヒアルロナン分解剤は、約２．０Ｌ未満、例えば、約１．８、１．５、１．２、１．０、０．８、０．５、０．３、０．１Ｌ未満、又は約８００、７００、６００、５００、４００、３００、２００、１００、９０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、９．０、８．０、７．０、６．０、５．０、４．０、３．０、又は約２．５ｍＬの体積である。いくつかの実施形態では、投与される組成物は、約２０．０ｍＬ未満である。ある特定の実施形態では、投与される組成物は、約１０．０ｍＬ未満である。いくつかの実施形態では、投与される組成物は、約５．０ｍＬ未満である。

いくつかの実施形態では、そのようなキットは、ブリスターパック内の本開示の予め充填された注射デバイス、例えば、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスを含む。ブリスターパック自体は、内部で無菌であり得る。いくつかの実施形態では、本開示による予め充填された注射デバイス、例えば、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスは、無菌化、例えば、最終の無菌化を受ける前に、そのようなブリスターパックの内部に入れられ得る。

全般的に記載されている本開示は、以下の実施例を参照することによってより容易に理解され、これは、本開示のある特定の態様及び実施形態の例示の目的でのみ含まれ、限定することは意図されない。

例示

材料
ヒトＩｇＧ（ＩＲＨＵＧＧＦ－ＬＹ、＞９７％）及びウシＩｇＧ（ＩＲＢＶＧＧＦ）は、粉末として又は水性溶液としてＩｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈから入手した。ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及びヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）は、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈから購入した。モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、水性溶液として提供され、受け取った。Ｒｏｃｈｅのリツキシマブのバイオシミラーは、１０ｍｇ／ｍＬのリツキシマブ、９ｍｇ／ｍＬの塩化ナトリウム、７．３５ｍｇ／ｍＬのクエン酸ナトリウム二水和物、及び０．７ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０として水性組成物中の抗体を提供したベンダーから購入した。Ｒｏｃｈｅのトラスツズマブのバイオシミラーは、水性組成物として抗体を提供したＧｅｎｓｃｒｉｐｔ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎから購入した。粒子を処理するために使用される特注の「供給溶液」の組成物は、脱塩、それに続いて所望の賦形剤を濃縮及び添加することによって、又は直接緩衝液交換によって、受け取った製剤を修飾することによって生成した。粒子組成物に使用される全ての賦形剤は、既存の承認された生物学的製剤注射に使用されている。濃縮カラムは、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｉｇｍａ（１０～５０ｋＤａカットオフを有するタンパク質精製及び濃縮のためのＡｍｉｃｏｎ（登録商標）Ｕｌｔｒａ １５ｍＬフィルタ）から調達し、必要に応じて、（ｉ）所望のモノクローナル抗体濃度に到達するために、及び（ｉｉ）粒子形成前に緩衝液／賦形剤を交換するために使用した。ある特定の事例では、溶液から塩を除去するために、Ｚｅｂａ脱塩カラム（ＴＨＥＲＭＯ ＦＩＳＨＥＲ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ（商標）８７７７３）も使用した。典型的には、脱塩された溶液中のタンパク質に対する残留塩の比（重量／重量）は、決定された形態の伝導度測定及び／又は元素分析として、１％未満であった。全ての賦形剤は、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、受け取ったままで使用した。

方法
ＦＬＯＷＣＡＭ（商標）：粒子サイジングは、ＦＬＯＷＣＡＭ（商標）、動的画像分析機器を使用して測定した。試料をイソプロパノール中で約１ｍｇ／ｍＬに希釈し、薄いチャネルを通過させた。粒子の画像を記録し、サイズ及び形状によって分析した（計数加重）。

画像分析：粒子直径及び真円度は、ＳＥＭ画像上のＩｍａｇｅＪ分析を使用して測定した。分析は、例えば、５００×又は１０００×の画像で実行した。ＩｍａｇｅＪ粒子分析ツールを画像上で実行し、＞０．８の真円度及び＞０．５μｍのサイズを有する物体を特定し、各々、物体の輪郭を伴った。これらの輪郭を、良好な適合について視覚的に検査した。任意の誤って特定された粒子を手動で拒絶し、任意の欠損した粒子を手動で含め、ＩｍａｇｅＪ直径ツールを使用して測定した。選択された顕微鏡画像は、（ｉ）最小の粒子の重なり、（ｉｉ）粒子とバックグラウンドとの間の良好なコントラスト、及び（ｉｉｉ）少なくとも１０ピクセルの粒子占有を提供する解像度に基づいて更なる分析のために選択した。これは、粒子が容易に特定されることを可能にし、解像度ベースのエラーを低減させた。二値化閾値を適用して、粒子をバックグラウンドから分離し、ウォーターシェッドセグメンテーションアルゴリズムを適用して、個々の粒子が別々に測定されることを確実にした。次いで、ＩｍａｇｅＪツール「Ａｎａｌｙｚｅ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ」を、以下のパラメータを用いて二値化写真上で適用した：０．５～１．０の真円度；５と無限大平方ミクロンとの間のサイズ；エッジ上の除外；穴の充填。特定された粒子の輪郭を、元の画像上に重ね合わせた。次いで、誤って特定された粒子、例えば、その輪郭が粒子にマッチしない単一の粒子又は粒子として特定されたクラスターを廃棄した。欠損している粒子を、粒子の輪郭を手動で追跡し、ＩｍａｇｅＪの測定ツールを使用することによって測定した。

加速保管プロトコル：全ての試料を、老化のためにガラス底プレート及び２Ｒ Ｓｃｈｏｔｔバイアルに移した（典型的には、試料に応じて２ｍＬ又は４ｍＬの体積）。ガラス底プレート及び２Ｒ Ｓｃｈｏｔｔバイアルをパラフィルムで密封し、４℃、２５℃、４０℃、５０°、又は６０℃でオーブン中に入れ、老化期間にわたり視覚的に検査し、完全性及び安定性を確実にした。

粘度測定：別段の明記がない限り、懸濁液粘度を、２５℃でＡＲ－Ｇ２レオメータ（ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）及び２５ｍｍプレートを使用して測定した。測定は、１０００ｓ－１で行い、これは、２７ゲージの針において経験する剪断速度未満を下回る。各測定を３回繰り返し（繰り返し間で約６０秒の間隔）、懸濁液の短期間の物理的安定性を評価した。各測定前に較正標準を記録し、機器設定を検証した。

注射性測定：別段の明記がない限り、シリンジ力（注射力）を、特注の力センサ装置及び２７ゲージの超薄壁針（ＴＳＫ）を有する１ｍＬのＮｏｒｍ－ｊｅｃｔモデルシリンジを使用して、１ｍＬの懸濁液（４００ｍｇ／ｍＬの粒子）の０．１ｍＬ／秒の排出中に測定した。

カールフィッシャー：水分含有量についての試験を、カールフィッシャー分析を使用して行った。およそ１００ｍｇの粒子をオーブン中で１５０℃に加熱し、放出された水を電量的に決定した。

骨格密度：骨格密度を、ガス比重瓶法によって測定した。ガスは、窒素又は他の適合性ガスであり、粒子質量は、０．０４１３ｇであった。

粒子溶解：リン酸塩－緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を乾燥粒子試料に添加し、５０ｍｇ／ｍＬ（粒子質量／ｍＬの溶液、９６ウェルプレート）の最終濃度を生成した。一定期間後、１０μＬのアリコートを試料バイアルから取り出し、２８０ｎｍでの吸光度を測定し、記録した。全ての試料について、Ａｂ、例えば、ｍＡｂの濃度を時間に対してプロットした。

塩含有量：塩含量を、誘導結合プラズマ発光分光法（ＩＣＰ－ＯＥＳ）を使用してナトリウム含有量を測定することによって記録した。較正曲線を、ナトリウム標準（ＩＣＰＴＲＡＣＥＣＥＲＴ（登録商標）、１０００ｍｇ／Ｌ）を使用して調製した。品質管理を、１００ｐｐｍのナトリウムで希釈した標準溶液を使用して完了した。次いで、２体積％の硝酸（１０ｍＬ）に溶解した粒子の試料（約１５ｍｇ）を分析し、ナトリウムについて約０．５ｐｐｍの機器の検出限界より低い強度がもたらされた。これは、０．０３４重量％未満のナトリウム含有量、及び０．１重量％未満の総塩含有量（クエン酸ナトリウム及び塩化ナトリウムが等しく除去されていると仮定する）を示した。

サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）測定：試料（１ｍｇ／ｍＬ）の２０μＬの注射を、ＡＧＩＬＥＮＴ ＡＤＶＡＮＣＥＢＩＯ（商標）ＳＥＣ（３００ｍｍ×２．７μｍ、３００Åカラム）上でＳＥＣ緩衝液（２５ｍＭのリン酸塩、２５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ６．８）中で１ｍＬ／分の流量で１５分間実行した。ピーク分析を、以下のパラメータを使用して自動統合によって実行した：勾配感度＝０．５、ピーク幅＝０、高さリジェクト＝０、面積リジェクト＝０、ショルダーオフ、面積パーセントリジェクト０、標準接線スキムモード、高度なベースライン補正、フロントピークスキム高さ比について０、テールピークスキム高さ比について０、ピーク対谷比について０、及びスキム谷比について０。代替的に、試料（１ｍｇ／ｍＬ）の２０μＬの注射を、ＡＧＩＬＥＮＴ ＡＤＶＡＮＣＥＢＩＯ（商標）ＳＥＣ（３００ｍｍ×２．７μｍ、３００Åカラム）上でＳＥＣ緩衝液（２５ｍＭのリン酸塩、２５０ｍＭのＮａＣｌ ｐＨ６．８）中で１ｍＬ／分の流量で１５分間実行した。ピーク分析を、以下のパラメータを使用して自動統合によって実行した：勾配感度＝０．５、ピーク幅＝０、高さリジェクト＝０、面積リジェクト＝０、ショルダーオフ、面積パーセントリジェクト０、標準接線スキムモード、高度なベースライン補正、フロントピークスキム高さ比について０、テールピークスキム高さ比について０、ピーク対谷比について０、及びスキム谷比について０。

カチオン交換クロマトグラフィー（ＣＩＥＸ）測定：電荷バリアント分析を、ＡＧＩＬＥＮＴ ＢＩＯＭＡＢ（商標）ＮＰ５、４．６×２５０ｍｍ、ＰＥＥＫイオン交換カラムを使用して、０、７、及び３０日目に加速保管条件下で各試料について実行した。試料は、水中の一晩の透析後に１ｍｇ／ｍＬの濃度で調製した。緩衝液Ａを、３０ｍＭのリン酸塩、ｐＨ：６．３、及びＮａＣｌ：０ｍＭとともに調製した。緩衝液Ｂを、緩衝液Ａ：３０ｍＭのリン酸塩、ｐＨ６．３及びＮａＣｌ：１７５ｍＭとともに調製した。試料を、１００％の緩衝液Ａで開始し、２０分の期間にわたり１００％の緩衝液Ｂまで傾斜をつけ、その後、勾配を１００％の緩衝液Ａ及び０％の緩衝液Ｂに次の１分で戻すように設定した勾配において実行した。系を、１００％の緩衝液Ａ中で１０分間再平衡化した後、次の試料を注射した。手動スキムピークモードとして統合を実行し、ＡＧＩＬＥＮＴ（商標）データを反映した。

フローサイトメトリー：１００万個のＲａｊｉ細胞（ウェル当たり１００μＬ）を、９６ウェル「Ｖボトム」プレートにおけるウェル当たりにプレーティングし、１０μＬのｍＡｂ、標識、粒子、又は懸濁液を２００μＬの開始濃度でウェルに添加した。ｍＡｂ標識、粒子、及び懸濁液についての希釈係数は、３Ｘであった。プレートを４℃で３０分間インキュベートした。プレートを２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、ＰＢＳで３回洗浄した。１００μＬのＰＥコンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧを、１：２００希釈で二次抗体として添加した。プレートを２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、ＰＢＳで３回洗浄した。次いで、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＡＴＴＵＮＥ（商標）ＮＸＴフローサイトメータ上での分析のために、細胞を２００μＬの冷たいＰＢＳ中に再懸濁した。

走査型電子顕微鏡法（ＳＥＭ）：電子顕微鏡写真を、ＨＩＴＡＣＨＩ（商標）ＴＭ３０３０Ｐｌｕｓ又はＴＭ１０００卓上顕微鏡のいずれかで選択された試料について収集した。試料を伝導性テープ上に固定化し、低真空抗帯電環境において検査し、試料調製の必要性を取り除いた。

画像分析：選択された顕微鏡画像は、（ｉ）最小の粒子の重なり、（ｉｉ）粒子とバックグラウンドとの間の良好なコントラスト、及び（ｉｉｉ）少なくとも１０ピクセルの粒子占有を提供する解像度に基づいて更なる分析のために選択した。これは、粒子が容易に特定されることを可能にし、解像度ベースのエラーを低減させた。二値化閾値を適用して、粒子をバックグラウンドから分離し、ウォーターシェッドセグメンテーションアルゴリズムを適用して、個々の粒子が別々に測定されることを確実にした。次いで、ＩｍａｇｅＪツール「Ａｎａｌｙｚｅ Ｐａｒｔｉｃｌｅｓ」を、以下のパラメータを用いて二値化写真上で適用した：０．５～１．０の真円度；５と無限大平方ミクロンとの間のサイズ；エッジ上の除外；穴の充填。特定された粒子の輪郭を、元の画像上に重ね合わせた。次いで、誤って特定された粒子、例えば、その輪郭が粒子にマッチしない単一の粒子又は粒子として特定されたクラスターを廃棄した。欠損している粒子を、粒子の輪郭を手動で追跡し、ＩｍａｇｅＪの測定ツールを使用することによって測定した。

密度分析：選択された試料からの粒子の骨格密度を、ＡＣＣＵＰＹＣ（商標）ＩＩ １３４０ガス置換比重瓶法システムでおよそ０．１ｇの粉末を検査することによって決定した。

水含有量分析：選択された試料からの粒子における水分を、およそ０．１ｇの粉末を、カールフィッシャー滴定装置を有するオーブン中に入れ、試料を加熱することによって決定した。

ＥＬＩＳＡアッセイ：ＥＬＩＳＡアッセイを、選択された試料上で使用し、ヒト抗体を変性感受性の様式で検出した。ヒトＩｇＧを最初にＰＢＳ中で１時間プレーティングし、それ続いて洗浄緩衝液（ＰＢＳ＋０．０５％のＴｗｅｅｎ２０）で３回、４分間洗浄し、それに続いて洗浄緩衝液中の２％のＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ）で４５分間遮断し、それに続いて希釈（２０μｇ／ｍＬ）タンパク質Ａ－ＨＲＰ（ＡＢＣＡＭ（商標））とともに４５分間インキュベーションし、それに続いて緩衝液で３回、３分間洗浄し、それに続いてＴＭＢ（ＡＢＣＡＭ（商標））とともに１０分間インキュベーションし、最終的にそれに続いて、停止溶液（ＡＢＣＡＭ（商標））で反応物をクエンチした。比色の読み取りを、ＴＨＥＲＭＯ ＭＵＬＴＩＳＫＡＮ ＳＰＥＣＴＲＵＭ（商標）上で実施した。

サブ可視粒子（ＳｖＰ）分析：サブ可視粒子（ＳｖＰ）を、Ｆｌｕｉｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＦＬＯＷＣＡＭ（商標）ＰＶ－１００システムで分析した。分析のための試料を、無菌遠心分離管において濾過した水（ＭＩＬＬＩ－Ｑ（商標））で目的の濃度まで再構成した。その後、３セットの試料を調査した。これらには、（ｉ）再構成のために使用した希釈剤の試料、（ｉｉ）粒子形成プロセスのために使用した供給溶液のアリコート、すなわち、第１の水性液体の試料、及び（ｉｉｉ）再構成された材料が含まれていた。

加速保管：別段の明記がない限り、保管を、選択された試料について、これらをインキュベータ又はオーブンにおいて高温（４０℃）で規定された期間で維持することによって加速条件下で実施した。試料を、２ｍＬ又は４ｍＬのＷＨＥＡＴＯＮ（商標）ガラスバイアル中に保持し、パラフィンフィルムで密封した。

逆ガスクロマトグラフィー（ＩＧＣ）：逆ガスクロマトグラフィーを使用して粉末化した試料を分析した。円筒形カラムを２００～３００ｍｇの粉末化した試料で充填して、固定相を作製した。不活性ガスパージ後、一連のガスプローブをカラム上に注入した。各プローブについての保持体積の決定は、各試料についての表面エネルギーの分散性及び極性成分の評価を可能にした。

Ｘ線回折（ＸＲＤ）：試料を０．７ｍｍ直径のガラスキャピラリー中に充填した。粉末パターンは、入射ビーム集束ミラー及びＸ’ＣＥＬＥＲＡＴＯＲ（商標）検出器を備えたＰＡＮＡＬＹＴＩＣＡＬ ＥＭＰＹＲＥＡＮ（商標）回折計上で測定した。パターン（１～５０^ｏ２θ、０．０１６７１１３^ｏステップ、４秒／ステップ、１／４^ｏ発散スリット、０．０２ラジアンソーラースリット）をＭｏ Ｋａ照射を使用して測定した。静電気効果（凍結乾燥対照を評価する場合、乳鉢及び乳棒における粉砕後にこれが起こった）がキャピラリーへの試料の充填を防止した場合、その粉末パターンを、ＬＹＮＸＥＹＥ（商標）位置敏感検出器を備えたＢＲＵＫＥＲ（商標）Ｄ２ Ｐｈａｓｅ回折計上でフラットプレート標本から測定した。パターンを、１．０秒／ステップについて計数して、５～１００^ｏ２θのＣｕ Ｋα照射を使用して０．０２０２１４４^ｏステップで測定した。標準的な機器設定（３０ｋＶ、１０ｍＡ、０．６ｍｍの発散スリット、２．５^ｏソーラースリット、及び３ｍｍの散乱スクリーン高さ）を用いた。

微小流動粒子サイジング（ＭＰＳ）：粒子サイズ分析のための流動イメージング顕微鏡法を、ＦＬＯＷＣＡＭ（商標）ＰＶ－１００を使用して実施した。粒子のサイズ及び分散性を調査するために、５ｍｇの粉末を超音波処理を介して１０ｍＬの乾燥イソプロパノールに分散させた。イソプロパノール連続相は、粒子が溶解することを防止し、すなわち、再構成を防止した。０．３ｍＬをセル中に注入し、０．１５ｍＬ／分の流量を使用して粒子の画像を取得した。０．９超の真円度を有する粒子を分析において報告し、任意の二重画像を分析から除去し、１～１００μｍの範囲の粒子のサイズ分布及び分散性を得た。

動的蒸気吸着（ＤＶＳ）：動的水蒸気収着を使用して粉末を分析した。およそ５０ｍｇの粉末化した試料を、機器の微量天秤のパン中に充填した。試料を２２℃で等温に保持し、試料質量を、測定を通して監視した。表面の水を除去するための０％のＲＨパージの後、試料チャンバにおける相対湿度（ＲＨ）を１時間当たり４％のＲＨの一定の割合で９０％のＲＨまで傾斜をつけた。試料を９０％のＲＨで１時間保持し、次いで、階段状変化としてＲＨを０％に低減させた。試料を０％のＲＨで１時間保持し、その後、測定を終了した。

動的走査熱量測定法（ＤＳＣ）：動的走査熱量測定法を使用して粉末化した試料を分析した。５～１０ｍｇの塊の粉末化した試料をアルミニウムるつぼ中に充填し、気密密封した。るつぼを機器中に充填し、温度を５℃／分の一定の割合で－８０～２００℃、任意選択的に、２０～１８０℃に傾斜をつける間に試料への熱流を監視した。

ＵＳＰ＜７９０＞：ＵＳＰ＜７９０＞標準によると、溶解した粒子の試料を、２０００ルクス超の照明条件下で白及び黒のバックグラウンドに対して視覚的に観察した。つや消し仕上げの高密度ポリエチレンシートをバックグラウンドのために選択し、グレアを低減させた。視検ポイントにおける照度をルクス計（Ｄｒ．Ｍｅｔｅｒ、ＬＸ１３３０Ｂ）で確認した。試料を混ぜた後、バックグラウンドに対して保持し、５秒間視検した。

凝集体積：凝集体積は、好適な濃度で所望の液体担体中に粒子を懸濁させることによって測定することができる。次いで、懸濁液を、典型的には振盪又は機械的手段によってかき混ぜて、測定の開始時に流体中の粒子の均一な分散を確実にする。かき混ぜを停止した直後に、測時を始める。混合物を放置し、固体の沈殿又は沈降の程度を観察し、経時的に記録する。

実施例１
タンパク質粒子の調製のための一般的なプロトコル：１．水性タンパク質溶液を調整して、５０～１６０ｍｇ／ｍＬの最終濃度に到達させた。２．次いで、賦形剤を得られた溶液に添加し、次いで、小さな０．２２μｍのフィルタを通して濾過して、得られた水性「供給」溶液から任意の外因性固体を除去した。３．脱水溶媒（例えば、ｎ－ブチルアセテート）を容器（２ｍＬ～２００Ｌの容器）に添加した。４．次いで、タンパク質供給溶液を、様々な流量（例えば、最大１００ｍＬ／分）で容器に添加した。５．次いで、混合物を一定期間（例えば、最大５分）撹拌して（例えば、剪断場又は最大２５，０００ｒｐｍに供する）、水性液滴を生成し、その後、水性液滴を脱水して（脱水溶媒の体積、混合物のｒｐｍ、及び流量に依存する時間）、混合物中に懸濁したタンパク質粒子を形成した。６．次いで、タンパク質粒子を液体混合物から分離した（例えば、濾過、遠心分離、及びデカントなど）。７．液体混合物（水性液体及び脱水溶媒）を除去した。８．タンパク質粒子における残留溶媒（例えば、水性液体及び脱水溶媒）をタンパク質粒子から除去し（例えば、真空乾燥、ガス乾燥、ガススパージング、抽出溶媒など）、次いで、粒子における水分含有量を調整した（例えば、湿潤ガス、抽出溶媒など）。９．次いで、タンパク質粒子の一部をＤＩ水中に溶解し、特徴評価のために完全な再溶解のためにインキュベートした。１０．次いで、溶液を分析して、タンパク質品質（ＦＬＯＷＣＡＭ（商標）を使用するＳｖＰ分析、及びＨＰＬＣ－ＳＥＣを使用する可溶性凝結体（例えば、ＳＥＣ）、断片化（例えば、ＳＥＣ）、電荷バリアント（例えば、イオン交換クロマトグラフィー（ＳＣＥＸ））分析の変化）、並びにタンパク質濃度を測定した。２００ｍｇ／ｍＬ～８００ｍｇ／ｍＬの範囲のタンパク質濃度は、一般的なプロトコル（少なくとも６０～９３％（ｗ／ｗ）の粒子タンパク質充填量）に従って処理している。最大８５％のタンパク質充填量を有する粒子は、開始水性供給溶液と比較して改善された安定性を示した。

標的サイズ及び分散性範囲におけるＡｂ粒子の調製：リツキシマブ、トラスツズマブ、ヒト又はウシのＩｇＧ粒子を、一般的なプロトコルの下で形成し、分析のために１０ｍｇの粒子を提供した。平均粒子サイズ、Ｄ１０、Ｄ５０、及びＤ９０は、計数加重された粒子サイズ分析（ＦＬＯＷＣＡＭ（商標））に基づいて報告した。粒子の平均粒子サイズ、Ｄ１０、Ｄ５０、及びＤ９０は、５～５０μｍの平均粒子サイズ及びＤ９０＜６０μｍを有することが決定された。粒子は、以下の粒子サイズ統計を有していた：平均直径＝５～５０μｍ。バッチについての粒子のＳＥＭを得た。画像は、図１に示されるように、１０００倍の倍率で取得した。画像処理及び統計は、ＩｍａｇｅＪ分析、計数加重を使用して実行し、懸濁液研究のために使用した望ましい物理的特徴（例えば、真円度、内部空隙空間、重量によるタンパク質、安定性、及び品質など）を有するタンパク質粒子を提供した。

ＳＥＣによる粒子における凝結、断片化、及び電荷バリアントの変化の決定：乾燥粉末試料を超純水中に５％（ｗ／ｖ）まで溶解し、６０ＲＰＭで振盪した。３連のタンパク質濃度を決定した後、試料をＰＢＳで１ｍｇ／ｍＬに希釈し、ＨＰＬＣバイアル中でシリンジ濾過した。担体液体中の試料を再懸濁し、各試料を５００ＲＰＭで直ちに遠心分離し、得られた担体液体上清を、沈降した粒子を妨害することなく吸引（及び廃棄）した。粒子に水を添加して混合した後、試料を６０ＲＰＭで振盪した。（底又は水性層からの）初期のタンパク質濃度の決定後、各試料をＰＢＳで希釈し、タンパク質濃度を３連で測定した（底又は水性層から）。次いで、各試料をＰＢＳで希釈し、ＨＰＬＣバイアル中でシリンジ濾過し、濾過前に針を廃棄した（担体液体の移送を防止するため）。全ての試料を、ＡＧＩＬＥＮＴ（商標）１２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＩＩ生体不活性ＬＣシステム及び２００ｍＭのアルギニン－ＨＣｌ、１００ｍＭのリン酸ナトリウム ｐＨ６．５で平衡化したＴＳＫｇｅｌ ＳｕｐｅｒＳＷ ＨＴＰカラム（４μｍ、４．６ｍｍＩＤ×１５０ｍｍＬ）カラムを使用して分析した。オートサンプラー及びカラムコンパートメントを、それぞれ、４℃及び２０℃で維持し、ＵＶ吸光度を２８０ｎｍで監視した。実行時間は１０分であった。統合された高分子量（凝結体）、モノマー、及び低分子量ピークの面積％を報告した。

ＳＣＥＸによる粒子における凝結、断片化、及び電荷バリアントの変化の決定：乾燥粉末試料を超純水中に５％（ｗ／ｖ）まで溶解し、６０ＲＰＭで振盪した。３連のタンパク質濃度を決定した後、試料を超純水で希釈し、ＨＰＬＣバイアル中でシリンジ濾過した。担体液体中の試料を再懸濁し、各試料を５００ＲＰＭで直ちに遠心分離し、得られた担体液体上清を、沈降した粒子を妨害することなく吸引（及び廃棄）した。粒子に水を添加して混合した後、試料を６０ＲＰＭで振盪した。（底又は水性層からの）初期のタンパク質濃度の決定後、各試料を超純水で希釈し、タンパク質濃度を３連で測定した（底又は水性層から）。次いで、各試料を超純水で希釈し、ＨＰＬＣバイアル中でシリンジ濾過し、濾過前に針を廃棄した（担体液体の移送を防止するため）。全ての試料を、ＡＧＩＬＥＮＴ（商標）１２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ＩＩ生体不活性ＬＣシステム及び１００％の移動相Ａ（ＴＨＥＲＭＯ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ（商標）１Ｘ ＣＸ－１ ｐＨ勾配緩衝液Ａ）で平衡化したＴＨＥＲＭＯ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ ＭＡＢＰＡＣ（商標）ＳＣＸ－１０ ＲＳカラム（５μｍ、２．１ｍｍＩＤ×１５０ｍｍＬ）を使用して分析した。勾配は、０～２０％の移動相Ｂである（ＴＨＥＲＭＯ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ（商標）１Ｘ ＣＸ－１ ｐＨ勾配緩衝液Ｂ）。オートサンプラー及びカラムコンパートメントを、それぞれ、４℃及び３０℃で維持し、ＵＶ吸光度を２８０ｎｍで監視した。統合された酸性、中性（主要）、及び塩基性ピークの面積％を報告した。

実施例２
タンパク質粒子組成物のための一般的なプロトコル：リツキシマブ、トラスツズマブ、又は賦形剤（例えば、ヒスチジン、アルギニン．ＨＣｌ、ＰＳ８０、ＰＳ２０、トレハロース、ＮａＣｌ、スクロース、メチオニン、プロリン、リン酸ナトリウム）を含有するＩｇＧ（ヒト又はウシ）粒子を、有機担体液体又は少なくとも２つの有機担体液体（例えば、オレイン酸エチル、ゴマ油、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、トリアセチン、カプリル酸トリグリセリド）の混合物中で、２００～７００ｍｇ／ｍＬの濃度における懸濁液に作製した。これは、タンパク質粒子を有機担体液体に添加し、ミキサー（例えば、ローターステータなど）を使用して希釈懸濁液を生成することによって達成した。希釈懸濁液を６０μｍのフィルタを通してふるいにかけ、懸濁液を所望のタンパク質濃度に調整した。この懸濁液に、凝集剤を添加して、２００～８００ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度で最大１０ｍｇ／ｍＬの凝集剤の総濃度に到達させた。この懸濁液を初期に、１分間のボルテックス及び／又は機械的混合を使用して混合し、少なくとも１ヶ月間安定したままである所望の凝集体積を作製した。

ＨＩｇＧ粒子組成物：ＨＩｇＧ粒子（７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０（若しくはＰＳ２０）、又は７８％のタンパク質：２％のヒスチジン：１９％のアルギニン：１％のＰＳ８０、又は８９％のタンパク質：３％のヒスチジン：７％のアルギニン：１％のＰＳ８０、又は８９％のタンパク質：３％のヒスチジン：７％のアルギニン：１％のトレハロース（若しくはメチオニン）、又は８８％のタンパク質：３％のヒスチジン：７％のアルギニン：１％のＰＳ８０：１％のメチオニン（若しくはＮａＣｌ、スクロース、プロリン、リン酸ナトリウム））を、オレイン酸エチル中で５００ｍｇ／ｍＬの濃度における懸濁液に作製した。これは、１９～２３ｇの粒子を約４５０ｍＬのオレイン酸エチルに添加し、ローターステータミキサーを使用して希釈懸濁液を生成することによって達成した。希釈懸濁液を６０μｍのフィルタを通してふるいにかけ、遠心分離によって５００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧの濃度に調整した。この懸濁液のアリコートに、凝集剤（ポリソルベート８０）をピペットにより添加して、５００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧ濃度で最大１０ｍｇ／ｍＬの最終総濃度に到達させた。この懸濁液をボルテックスし、次いで、１分間機械的に混合して、凝集剤を有さない粒子懸濁液と比較して少なくとも１ヶ月間一貫性を保つ安定な懸濁液（凝集体積）を作製した。ＨＩｇＧ及びＢＩｇＧを互換的に使用した。タンパク質の特徴評価は、実施例１に従って達成し、開始水性供給溶液と比較して改善された安定性を示した。

リツキシマブ粒子組成物：リツキシマブ粒子（９８％のタンパク質：２％のヒスチジン、又は８０％のタンパク質：２％のヒスチジン：１８％のアルギニン）を、オレイン酸エチル中で５００及び７００ｍｇ／ｍＬの濃度における懸濁液に作製した。これは、粒子を約４５０ｍＬのオレイン酸エチルに添加し、ローターステータミキサーを使用して希釈懸濁液を生成することによって達成した。希釈懸濁液を６０μｍのフィルタを通してふるいにかけ、遠心分離によって５００又は７００ｍｇ／ｍＬのリツキシマブの濃度に調整した。この懸濁液のアリコートに、凝集剤（ポリソルベート８０）をピペットにより添加して、５００又は７００ｍｇ／ｍＬのリツキシマブ濃度で最大１０ｍｇ／ｍＬの最終総濃度に到達させた。この懸濁液をボルテックスし、次いで、１分間機械的に混合して、凝集剤を有さない粒子懸濁液と比較して少なくとも１ヶ月間一貫性を保つ安定な懸濁液（凝集体積）を作製した。タンパク質の特徴評価は、実施例１に従って達成し、開始水性供給溶液と比較して改善された安定性を示した。

トラスツズマブ粒子組成物：トラスツズマブ粒子（７１％のタンパク質：２％のヒスチジン：２６％のアルギニン：１％のＰＳ８０）を、リツキシマブプロトコルに従って、オレイン酸エチル中で５００又は７００ｍｇ／ｍＬの濃度における懸濁液に作製した。リツキシマブプロトコルに従って、少なくとも１ヶ月間一貫性を保つ安定な懸濁液（凝集体積）を生成した。特徴評価は、実施例１に従って達成し、開始水性供給溶液と比較して改善された安定性を示した。

実施例３
高濃度、安定な凝集体積、及び低い注射力を有するタンパク質粒子組成物：
単位「ｍＰａ・ｓ」及び「ｃＰ」は、本明細書において、最も広い意味で互換的に使用される。

レオロジー：リツキシマブ、トラスツズマブ、ウシＩｇＧ、又はヒトＩｇＧ粒子の懸濁液を、以下の特徴を伴って作製した：タンパク質充填量＞２５０ｍｇ／ｍＬ及び見かけの粘度＜２０ｃＰ（ｍＰａ・ｓ）。平行プレートレオメータ又は当該技術分野で既知である他の方法を使用して粘度を測定した。担体液体中で様々な濃度において懸濁液を調製した。濃度＞３００ｍｇ／ｍＬにおいて、約２０ｃＰ（ｍＰａ・ｓ）の粘度を測定した。より低い粘度の担体が考慮される場合、更により高い濃度を達成することができる。

レオロジー（４０℃での０、７、３０日目）：粒子（リツキシマブ、トラスツズマブ、ウシＩｇＧ、又はヒトＩｇＧ）の懸濁液の粘度を経時的に追跡して、７日及び３０日の加速保管にわたって５％超まで変動しないことを確実にした。各時点で、懸濁液は、タンパク質充填量＞２５０ｍｇ／ｍＬを伴って粘度＜２０ｃＰ（ｍＰａ・ｓ）を有した。２８０ｍｇ／ｍＬのタンパク質懸濁液の調製に基づいて、濃度条件を満たした。０日目の試料を直ちに測定した。７日目及び３０日目の試料を、上記で概説した老化手順に従って老化させた。１０００ｓ^－１の剪断速度で測定を行った。０日目に、懸濁液の粘度を１６．８７ｃＰで測定した。７日目に、粘度は１６．３３ｃＰに低減した。３０日目に、粘度は、０日目と比較して２１．８３ｃＰに２９％増加し、２０ｃＰの限界をわずかに上回る。しかしながら、そのような小さいプレート（２５ｍｍ）、小さい機器ギャップ（１５０ミクロン）、及び小さい試料体積を使用して、測定におけるエラーは、３０％ほども高くなる可能性があることが推定されている。

カールフィッシャー滴定：固体粒子（リツキシマブ、トラスツズマブ、ウシＩｇＧ、又はヒトＩｇＧ）の水含有量を決定して、カールフィッシャー滴定を使用して粒子の構成成分の組成を定義した。粒子の水含有量を測定し、記録し、リツキシマブ、トラスツズマブ、ウシＩｇＧ、又はヒトＩｇＧの各々について１～６重量％であることを決定した。

粘度の決定：２５ｍｍの３度のコーン（ＣＰ２５－３、Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ）を、レオメータ（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ Ｍｏｄｕｌａｒ Ｃｏｍｐａｃｔ Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒ（ＭＣＲ）シリーズ９２）上に装填した。プレートを２５℃まで温めた。凝集剤を有する懸濁液を、視覚的に均質になるまでボルテックスした。２５０ｕＬをベースプレート上にピペットし、試料を９５０ １／ｓの剪断速度で測定した。

タンパク質含有量の決定：凝集剤を有する粒子懸濁液をボルテックスによって分散させ、超純水中で２．５％（ｖ／ｖ）に希釈し、６０ＲＰＭで３０分間振盪した。対応する乾燥粉末試料を超純水中で５％（ｗ／ｖ）まで溶解し、６０ＲＰＭで３０分間振盪した。３連のタンパク質濃度（懸濁液について底又は水層から）を決定した後、平均化した再溶解したタンパク質粒子濃度及び再溶解体積の積を微小粒子の質量で除算することにより、粒子におけるタンパク質の質量パーセントを計算した。次いで、懸濁液の平均化した濃度（水性／製剤担体液体希釈係数によって補正された）を、粒子におけるタンパク質のこの質量パーセントで割り、懸濁液中の粒子の理論上の質量を計算した。結果は、実施例１及び２に示されるタンパク質含有量に相当する。

溶解：０、７、及び３０日目に、各懸濁液について溶解速度を記録した。様々な時点で溶解を記録し、懸濁液について約２０分以内及び約６０～８０分の粒子の溶解を確認した。粒子及び懸濁液を、１０ｍｇ／ｍＬの最終濃度までＰＢＳに溶解し、ロッカー上で振動させた。０、７、及び３０日目の粒子の溶解も４０℃で保管した。

ＵＳＰ＜７９０＞：可視粒子の存在を、粒子の溶解した試料中で決定した。ＵＳＰ＜７９０＞を使用して、「可視」範囲（＞１００μｍ）で存在する粒子が存在するかどうかを決定した。溶解した粒子の観察を使用して、可視粒子の存在を評価した。観察は、適切な照明下で白及び黒のバックグラウンドを伴って手短に（５秒）行った。いくつかの潜在的な小さい粒子が観察されたが、目で見ることが困難であり、それらは、サブ可視粒子として分類される可能性がある。これらの粒子がサブ可視とみなされ得ることを考えると、他の方法を使用して下記のように更に調査した。

サブ可視粒子分析：溶解した粒子において存在するサブ可視粒子物質を調査した。粒子の溶解後に、サブ可視粒子分析を実行した。このデータを他の競合的粒子形成技術と比較した。ＳｖＰ分析を粒子分析器によって実行し、ここで、粒子計数を、対照試料におけるバックグラウンド信号について調整した。試料中で測定したサブ可視粒子計数は、標準的な凍結乾燥を含む任意の他の完成技術よりも低かった。

凝集体積：ＢＩｇＧ粒子を３ｍＬのオレイン酸エチルに添加し、それに続いて０．１重量％～０．０１重量％での凝集剤（レシチン又はＰＳ８０）を添加して、５００ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度を形成した。懸濁液を初期に混合し、凝集体積を計算し、凝集剤を有さない懸濁液と比較した。粒子凝塊及び凝集体積に対する凝集剤の効果を図２に示す。０．０１重量％及び０．１重量％でのレシチンは、粒子凝塊及び凝集体積を低減させる。ＰＳ８０ ．０１重量％及び０．１重量％は、凝集剤を有さない懸濁液と比較して、粒子凝塊及び凝集体積を増加させる。両方の場合において、凝集体積の低減は観察されず、２５Ｃで少なくとも３ヶ月間安定したままであった。

注射性：針を通して凝集剤を有する懸濁液を注射する力を測定し、注射力が、注射前に再懸濁なしで２４時間後に同じままであったことを検証した。上記で得られたように、ＥＯ中の５００ｍｇ／ｍＬ濃度のタンパク質でのＢＩｇＧ粒子及び０．１重量％でのＰＳ８０の懸濁液を、１８－Ｇの針（３インチ）を有する５ｍＬのシリンジ中に充填した。注射力は２．０Ｎ未満であり、保管の２４時間後に同じままであった。参照のために、１５ｍＰａ・ｓ標準を使用してシリンジ針を備えた空のシリンジを作動させる力を比較し、結果は、注射力が全て２．０Ｎを下回ったことを示した。これらの研究は、組成物を注射する力が少なくとも１ヶ月間安定したままであったことを示した。

実施例４
粒子及び懸濁液の品質研究：
設計：実施例１～３と同様の手順を用いて、凝集剤を有する粒子の懸濁液を得た。凝集剤を有するタンパク質粒子懸濁液の安定性を、５、２５、及び４０℃で３ヶ月の期間にわたって評価して、タンパク質液体原薬（ＬＤＳ）と比較して、例えば、開始水性供給溶液と比較して、粒子懸濁液組成物の安定性を決定した。

組成物：実施例１～３と同様の手順を用いて、粒子に製剤化した凝集剤を有する粒子の懸濁液（６００ｍｇ／ｍＬのタンパク質及び０．１ｍｇ／ｍＬのＰＳ８０；７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０）を得、次いで、これをオレイン酸エチル中に懸濁した。

接線流濾過（ＴＦＦ）による緩衝液交換：タンパク質供給溶液を、必要とされる緩衝液カクテル中へのダイアフィルトレーションによって調製した。中空繊維フィルタモジュール（ＭｉｎｉＫｒｏｓ Ｓａｍｐｌｅｒ）を備えたＫｒｏｓＦｌｏｗ ＫＲ２ｉ ＴＦＦシステム（Ｒｅｐｌｉｇｅｎ）を使用して、供給調製を実行した。いくつかのダイアフィルトレーション体積交換を、各製剤についての適切な緩衝液で実行した。

ＦＩＢ－ＳＥＭイメージング：走査型電子顕微鏡（ＨＩＴＡＣＨＩ（商標）、ＴＭ－１０００）を使用して粒子をイメージングした。粒子の試料を、分析のために粘着性のステージ上に乗せた。１５ｋＶの加速電圧を使用して、画像を様々な倍率で取り込んだ。

接線流濾過（ＴＦＦ）による緩衝液交換：タンパク質供給溶液を、必要とされる緩衝液カクテル中へのダイアフィルトレーションによって調製した。中空繊維フィルタモジュール（ＭｉｎｉＫｒｏｓ Ｓａｍｐｌｅｒ）を備えたＫｒｏｓＦｌｏｗ ＫＲ２ｉ ＴＦＦシステム（Ｒｅｐｌｉｇｅｎ）を使用して、供給調製を実行した。いくつかのダイアフィルトレーション体積交換を、各製剤についての適切な緩衝液で実行した。

ＳＥＭイメージング：走査型電子顕微鏡（ＨＩＴＡＣＨＩ（商標）、ＴＭ－１０００）を使用して粒子をイメージングした。粒子の試料を、分析のために粘着性のステージ上に乗せた。１５ｋＶの加速電圧を使用して、画像を様々な倍率で取り込んだ。

カールフィッシャー電量測定：水分含有量についての試験を、８６０ＫＦ ＴＨＥＲＭＯＰＲＥＰ（商標）オーブンを備えたＭｅｔｒｏＯｈｍ（８９９電量計）を使用して、カールフィッシャー分析によって実行した。粒子をオーブン中で１６５℃に加熱し、放出された水を電量的に決定した。

粒子溶解：水を乾燥粒子試料に添加して、最終タンパク質濃度を生成した。試料を、６０ＲＰＭで旋回（ｎｕｔａｔｉｎｇ）ミキサーに一定期間入れる。最終の溶解濃度を、試料からアリコートを取り出し、２８０ｎｍでの吸光度（消光係数Ｅ１％＝１．６９Ｌ・ｇ－１・ｃｍ－１を使用して）を測定することによって記録した。

濁度：再構成した粒子溶液のアリコートを１－ｃｍ経路長キュベットに移した。４０５ｎｍでの吸光度を、ＮＡＮＯＤＲＯＰ（商標）Ｏｎｅ ＵＶ－ＶＩＳ分光光度計（ＴＨＥＲＭＯ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＣ（商標））を使用して記録した。結果は、開始水性供給溶液及び粒子と比較して改善された濁度を示した。

サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）測定：試料の注射を、Ｔｏｓｏｈ ＴＳＫｇｅｌ ＳｕｐｅｒＳＷ ｍＡｂ ＨＴＰ（４．６ｍｍ ＩＤ×１５ｃｍ Ｌ）カラム上で、１００ｍＭのリン酸二水素ナトリウム及び２００ｍＭのＬ－アルギニン一塩酸塩、ｐＨ６．５からなる移動相を使用して約０．３５ｍＬ／分の流量で１０分間実行した。ピークを手動で検査して、正確な特定を確実にし、当該技術分野で既知のパラメータを使用して自己統合によって分析を実行した。

強力カチオン交換クロマトグラフィー（ＳＣＥＸ）：ＭＩＬＬＩ－Ｑ（商標）水中に溶解した試料の注射を、ＭＡｂＰａｃ（商標）ＳＣＸ－１０ ＲＳ分析カラム、２．１ｍｍ ＩＤ×１５ｃｍ Ｌ、５μｍカラム上で４０分の総実行時間について、１００％の移動相ｐＨ勾配緩衝液Ｂに、１００％の移動相ｐＨ勾配緩衝液Ａで開始する勾配方法を使用して０．４ｍＬ／分の流量で実行し、それに続いて、洗浄及び再平衡化を行った。ピークを手動で検査して、正確な特定を確実にし、当該技術分野で既知のパラメータを使用して自己統合によって分析を実行した。

疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）：７５０ｍＭの硫酸アンモニウム、５０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム二水和物、ｐＨ６．０（１ｍｇ／ｍＬ）からなる希釈剤に溶解した試料の注射を、ＭＡｂＰａｃ（商標）ＨＩＣ－２０ ＨＰＬＣカラム、５μｍ、４．６ｍｍ ＩＤ×２５ｃｍ Ｌカラム上で６０分の総実行時間について、５０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム二水和物、ｐＨ６．０からなる１００％の移動相Ｂに、２Ｍの硫酸アンモニウム、５０ｍＭのリン酸二水素ナトリウム二水和物、ｐＨ６．０からなる５０％の移動相Ａで開始する勾配方法を使用して１ｍＬ／分の流量で実行し、それに続いて、５０％の移動相Ａを使用して洗浄及び再平衡化を行った。ピークを手動で検査して、正確な特定を確実にし、当該技術分野で既知のパラメータを使用して自己統合によって分析を実行した。

粒子サイジング（レーザー回折）：粒子サイズ分析を、Ｈｏｒｉｂａ ＬＡ－９６０Ｓを使用してレーザー回折を介して実施した。乾燥粒子を、およそ０．１ｍｇ／ｍＬの濃度でイソプロピルアルコール中に懸濁した。粒子懸濁液を粒子測定機器内で超音波処理して、均一性を確実にし、次いで、Ｈｏｒｉｂａ粒子サイズ分析器によって循環させ、かき混ぜた。イソプロピルアルコールの移動相を使用して粒子サイズ分析を実施し、体積平均粒子サイズ分布を計算した。

微小流動イメージング：流動イメージング顕微鏡法（ＦＬＯＷＣＡＭ（商標）、Ｆｌｕｉｄ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を実行して、タンパク質ＬＤＳ及び粒子製剤におけるサブ可視粒子を定量化した。粒子を、上に記載した粒子溶解方法を使用して最初に再溶解し、超純水で１ｍｇ／ｍＬに希釈した。分析のために、水性試料を０．１５ｍＬ／分の流量で導入した。得られた粒子計数を記録し、タンパク質の１ｍｇ当たりで報告する。

結果：乾燥粒子及び凝集剤を有する粒子懸濁液の安定性を、タンパク質液体原薬（ＬＤＳ）と並行して評価した。安定性を、５、２５、及び４０℃で追跡し、データを７、１４日、１、３、６、９、及び１２ヶ月で収集した。粒子安定性、ＬＤＳのタンパク質安定性、及び懸濁液を、各時間及び温度で測定した。粒子及び粒子懸濁液の分析は、モノマープロファイル（ＳＥＣ）、電荷バリアントプロファイル（ＣＥＸ）の維持、アイソフォーム／推定される酸化（ＨＩＣ）、並びにコロイド安定性（濁度及びサブ可視粒子）によって測定したように、タンパク質品質が一定のままであったことを確認した。各場合では、タンパク質供給溶液を、粒子及び凝集剤を有する粒子懸濁液に対して測定した。５、２５、及び４０℃で乾燥粉末及び粒子懸濁液として保管した粒子は、滑らかで球形の形態を示した。これらの温度において、３ヶ月の期間にわたって、粒子形態又は粒子サイズ分布の変化は観察されなかった。粒子の水分含有量は、全ての保管温度及び時間の長さについて一定のままであった。タンパク質凝結体の分析を、５、２５、及び４０℃で最大１２ヶ月までＳＥＣによって測定した。標準について、Δ（Ｍｏｎ＋Ｄｉｍ）％及びΔ（Ｄｉｍ＋Ａｇｇ）％に対するｈＩｇＧ粒子（凝集剤を有さない）の安定性に対する賦形剤選択（ヒスチジン、アルギニン．ＨＣｌ、及びＰＳ８０）の効果を実施し、ＬＤＳ試料と比較した場合、凝結を経時的に評価するために、４０℃で１２ヶ月間保管した。図３に示されるように、４０℃で１２ヶ月間保管したＬＤＳ試料は、ｈＩｇＧ粒子及び同じ温度（４０℃、１２ヶ月間）で保管した凝集剤試料を有する懸濁液と比較して、高いタンパク質凝結を示した。

凝集剤を有する粒子懸濁液についての凝結の低い割合は、タンパク質ＬＤＳと比較して改善された安定性を示した。タンパク質の電荷バリアントプロファイルを、５、２５、及び４０℃で最大９０日までＳＣＥＸによって測定した。タンパク質ＬＤＳと比較して４０℃で改善された安定性を示した粒子及び凝集剤を有する粒子懸濁液について認識可能な変化は観察されなかった。ＨＩＣを使用して、タンパク質の潜在的な酸化を測定した。タンパク質の推定される全体的な酸化の程度を、５、２５、及び４０℃で最大９０日までＨＩＣによって測定した。認識可能な変化は観察されず、これは、粒子及び凝集剤を有する粒子懸濁液が同じ温度及び時間でのタンパク質ＬＤＳと比較して、２５及び４０℃での酸化ストレスに関して改善された安定性を示したことを示す。水性媒体中の再溶解した粒子のタンパク質品質を更に探索するために、可視及びサブ可視粒子を様々な温度での保管後に分析した。溶解の際に、タンパク質溶液は、最大９０日までの４０℃での保管後に可視粒子及びサブ可視粒子を本質的に含まなかった。凝集剤を有する粒子懸濁液について、タンパク質濃度、粘度、及び注射力は、全ての保管時間及び温度において著しく変化しなかった。

実施例５
構造的アッセイによる、凝集剤によるタンパク質の安定性（４０℃での０、７、３０日目）：
サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）：目的は、ＳＥＣデータを収集して、３０日間の４０℃での保管を通して凝集剤の存在下でのタンパク質モノマーの分解を評価することであった。タンパク質液体原薬（ＬＤＳ）、粒子、及び凝集剤を有する懸濁液に基づいて、ＳＥＣを実行した。各試料についてのモノマー、凝結体、及び断片データを得た。ＳＥＣデータを記録し、４０℃での保管後の０、７、及び３０日目に、凝集剤による処理及び保管を通してタンパク質モノマーの良好な安定性が示された。ＬＤＳについての３０日試料は、各々がモノマーの＞９８％保存を有した凝集剤を有する粒子懸濁液と比較して、モノマーのより乏しい保存を有した。

カチオン交換クロマトグラフィー（ＣＩＥＸ）：ＣＩＥＸデータを収集して、電荷バリアント種の分布、及び３０日間の４０℃での凝集剤の存在下での保管を通してそれらの変化を評価した。ＬＤＳ、粒子、及び凝集剤を有する懸濁液に対して、ＣＩＥＸを実行した。各試料についての酸性、主要、及び塩基性種データを得て、分析した。選択したＣＩＥＸデータポイントは、３０日の老化後の懸濁液におけるそのようなシフトの不在と比較して、ラベル製剤が経験した酸性シフトを強調した。懸濁液からのタンパク質は、未処理の材料に似ている一方、ＬＤＳは、高い分解を経験した。ＣＩＥＸデータを提案したように記録し、４０℃での保管凝集剤の後の０、７、及び３０日目に、凝集剤による保管を通して電荷バリアントの良好な安定性を示した。ＬＤＳについての３０日試料は、凝集剤を有する粒子懸濁液と比較して、バリアントにおける酸性シフトに起因して電荷バリアント分布の劇的に低い保存を有した。

タンパク質の凝結、断片化、及び電荷バリアントの変化：別段の明記がない限り、実施例１～３に従って、サイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ－ＳＥＣ）を使用して凝結及び断片化データを収集した。別段の明記がない限り、実施例１～３に従って、強力カチオン交換クロマトグラフィー（ＣＩＥＸ）を使用して電荷バリアント種の分布及びそれらの変化を収集した。結果は、凝集剤を有する懸濁液について、開始ＬＤＳと比較して改善された安定性を示した。

実施例６
凝集剤及びタンパク質濃度の研究：
平均滑走力を、最大７００ｍｇ／ｍＬの粒子懸濁液濃度（７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０）に対してプロットした。２０Ｎ（ニュートン）は、典型的な滑走力限界への参照として受け入れられた。

凝集剤及びタンパク質濃度を増加させることによる凝集体積：ＢＩｇＧを使用するタンパク質粒子懸濁液を、０～１０ｍｇ／ｍＬの凝集剤（ＰＳ８０）濃度を有する液体担体としてオレイン酸エチルを使用して、３００～７００ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で作製し、２４時間保管した。図４は、凝集体積研究のための凝集剤及びタンパク質濃度パラメータのリストを示す。表１は、ＢＩｇＧ及びＰＳ８０の濃度が増加するにつれて、凝集体積が増加することを示す。

凝集剤及びタンパク質濃度を増加させることによる注射性：ＢＩｇＧを使用するタンパク質粒子懸濁液を、１ｍＬのシリンジに取り付けられた２０ゲージ及び２２ゲージの１３ｍｍ（半インチ）針（Ｊａｐａｎ Ｂｉｏ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を使用して、０～１０ｍｇ／ｍＬの凝集剤（ＰＳ８０）濃度を有する液体担体としてオレイン酸エチルを使用して、５００～７００ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度で作製した。表２は、ＢＩｇＧ及びＰＳ８０の濃度が増加するにつれて、注射力の実質的な変化なしに凝集体積が増加することを示す。

カプリル酸トリグリセリドを使用する注射性：ＢＩｇＧを使用するタンパク質粒子懸濁液を、０．１ｍｇ／ｍＬでの凝集剤（ＰＳ８０）濃度を有する担体液体としてカプリル酸トリグリセリドを使用して、６２０ｍｇ／ｍＬの濃度（７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０）で作製した。２４時間後に凝集体積の変化は観察されなかった。１ｍＬのシリンジに取り付けられた２２ゲージの１３ｍｍ（半インチ）針（Ｊａｐａｎ Ｂｉｏ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を使用して、注射力は、図５に示されるように０．１ｍＬ／秒で５．２Ｎであった。

凝集体積及び保管：ＢＩｇＧを使用するタンパク質粒子懸濁液を、０ｍｇ／ｍＬ及び１０ｍｇ／ｍＬでの凝集剤（ＰＳ８０）濃度を有する担体液体としてオレイン酸エチルを使用して、５５６ｍｇ／ｍＬの濃度（７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０）で作製し、４℃～２５℃で１ヶ月間保管した。図６に示されるように、ＰＳ８０を懸濁液に添加した場合、１ヶ月後に４℃又は２５℃で凝集体積の変化は観察されなかった。更に、注射力は、１ｍＬのシリンジに取り付けられた２０ゲージの１３ｍｍ（半インチ）針（Ｊａｐａｎ Ｂｉｏ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を使用して、２．４Ｎで実質的に同じままであった（最大１４秒）。図７を参照されたい。

針ゲージによる注射力：ＢＩｇＧを使用するタンパク質粒子懸濁液を、１ｍＬのシリンジに取り付けられた２０ゲージ、２５ゲージ、及び２７ゲージの１３ｍｍ（半インチ）針（Ｊａｐａｎ Ｂｉｏ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を使用して、１０ｍｇ／ｍＬの凝集剤（ＰＳ８０）濃度を有する液体担体としてオレイン酸エチルを使用して、６４０ｍｇ／ｍＬの濃度（７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０）で作製した。２４時間後、凝集体積は１００％のままであり、３つの全ての針サイズについて、注射力に実質的な変化はなかった（２０ゲージについて３Ｎ、２５ゲージについて６Ｎ、及び２７ゲージについて１６Ｎ）。図８を参照されたい。

２７ゲージのＵＴＷ針を使用する注射力：ＢＩｇＧを使用するタンパク質粒子懸濁液を、１ｍＬのシリンジに取り付けられた２７ゲージのＵＴＷ、１３ｍｍ（半インチ）針（Ｊａｐａｎ Ｂｉｏ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）を使用して、１０ｍｇ／ｍＬの凝集剤（ＰＳ８０）濃度を有する液体担体としてオレイン酸エチルを使用して、６２５ｍｇ／ｍＬの濃度（７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０）で作製した。２４時間後、凝集体積は１００％のままであり、注射力に実質的な変化はなかった（１７．４Ｎ）。図９は、６２５ｍｇ／ｍＬのタンパク質濃度で、２７ゲージのＵＴＷ針を使用して注射時間に関連する注射力を示す。

カプセルの保管：ＢＩｇＧを使用するタンパク質粒子懸濁液を、１０ｍｇ／ｍＬの凝集剤（ＰＳ８０）濃度を有する液体担体としてオレイン酸エチルを使用して、５５６ｍｇ／ｍＬの濃度で作製し、気泡なしで２つのゼラチンカプセル（１８ｍｍの長さ、Ｍｅｄｌａｂ）に添加した。１ヶ月後、凝集体積は１００％のままであり、タンパク質粒子の観察可能な沈降はなかった。図１０Ａ及び１０Ｂを参照されたい。

実施例７
薬物動態（ＰＫ）：Ａｂ微小粒子懸濁液の皮下投与は、水性Ａｂ注射よりも高いバイオアベイラビリティを示す：
組成物：研究の範囲は、以下の組成物、１）ＩＶ Ａｂ水性リツキシマブ：３０ｍｇ／ｍＬ ２）ＳＣ Ａｂ水性：３０ｍｇ／ｍＬのリツキシマブ（抗ＣＤ－２０抗体）、４ｍｇ／ｍＬのヒスチジン、１ｍｇ／ｍＬのトレハロース、０．７ｍｇ／ｍＬの塩化ナトリウム、及び０．６ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、３）粒子組成物中に製剤化し、次いで、１０ｍｇ／ｍＬの濃度で凝集剤（ＰＳ８０）を有するオレイン酸エチル（非水性担体ビヒクル）に懸濁した、ＳＣ Ａｂタンパク質微小粒子懸濁液：３０ｍｇ／ｍＬのリツキシマブ（抗ＣＤ－２０抗体）、４ｍｇ／ｍＬのヒスチジン、１ｍｇ／ｍＬのトレハロース、０．７ｍｇ／ｍＬの塩化ナトリウム、及び０．６ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を有する４つのコホートを伴う。懸濁液の濃度は、３０ｍｇ／ｍＬであり、かつ４）ＳＣ懸濁液ビヒクル：オレイン酸エチル（非水性担体ビヒクル）。

動物：雌の野生型アルビノＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂ）を、Ｔｕｆｔｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（Ｔｕｆｔｓ ＣＭＳ）における動物施設に収容した。記載した動物の全ての使用は、米国学術研究会議の「Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｒｅ ａｎｄ ｕｓｅ ｏｆ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｎｉｍａｌｓ」に準拠して実施し、動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認された詳細な書面によるプロトコルに従って実行した。

投薬、研究設計、及び分析：全ての粒子組成物注射は、２７ゲージの針を有する１００μＬのＨａｍｉｌｔｏｎガラスシリンジを使用して達成した。シリンジ中の粒子を再懸濁させるためのプロトコルは実施されなかった。全ての水性及び非水性ビヒクル注射は、ステークイン（ｓｔａｋｅｄ－ｉｎ）の３０ゲージの針を有する３００μＬのインスリンシリンジを使用して達成した。シリンジ中の粒子を再懸濁させるためのプロトコルは実施されなかった。Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットをこの研究のために使用した。以下の研究設計を使用した：１）ＩＶ Ａｂ水性：用量＝１０ｍｇ／ｋｇ；体積＝１００μＬ；ｎ＝５、２）ＳＣ Ａｂ水性：用量＝１０ｍｇ／ｋｇ；体積＝１００μＬ；ｎ＝５、３）ＳＣ Ａｂ微小粒子懸濁液：用量＝１０ｍｇ／ｋｇ；体積＝１００μＬ；ｎ＝５、４）ＳＣ懸濁液ビヒクル：体積＝１００μＬ；ｎ＝３。血漿試料を、０ｈ、３ｈ、６ｈ、９ｈ、１ｄ、２ｄ、３ｄ、５ｄ、６ｄ、９ｄ、１２ｄ、（１４ｄ、１６ｄ、１９ｄ、２１ｄ、及び２３ｄにおいて収集した。これらの時点は、利用したアッセイの検出の限界を下回った）。各ラットからの血液を、全てのデータポイントで尾静脈出血からＥＤＴＡキャピラリーチューブ（紫色）中に収集した。血液から得られた血漿を、ＥＬＩＳＡを使用する分析のために１０，０００倍に希釈した。血漿試料を、第三者の受託試験機関による抗ヒトＩｇＧ ＥＬＩＳＡアッセイ（Ｒａｙ Ｂｉｏｔｅｃｈ：ＲａｙＢｉｏ（登録商標）ヒトＩｇＧ ＥＬＩＳＡキット）を使用して評価した。試験物品の水性リツキシマブＳ．Ｃ．注射：ＡＵＣ５．８（ｈ＊ｍｇ／ｍＬ）、Ｃｍａｘ３４．０（μｇ／ｍＬ）、Ｔｍａｘ５７．６（時間）。試験物品のオレイン酸エチル（ＥＯ）中のリツキシマブ微小粒子懸濁液Ｓ．Ｃ．注射：ＡＵＣ６．３（ｈ＊ｍｇ／ｍＬ）、Ｃｍａｘ３６．７（μｇ／ｍＬ）、Ｔｍａｘ６７．２（時間）。図１１に示されるように、リツキシマブ微小粒子懸濁液は、水性リツキシマブ注射よりも高いバイオアベイラビリティを示す。

毒性及び局所忍容性の研究及び分析：注射部位を、浮腫（腫脹）及び紅斑（赤色度）について、注射前及び注射後の最大３日間評価した。Ｄｒａｉｚｅスコアリングを利用して、応答の重症度に基づいて部位をスコアリングした（最大０～４）。組成物群（１００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｍＬ）における５匹の動物のいずれにおいても、０日目（注射前）、１日目（注射後）、及び７日目（注射後）に異常な所見は観察されなかった。

紅斑及び痂皮形成：紅斑なし－０；非常に軽度の紅斑（かろうじて知覚可能）－１；十分に規定された紅斑－２；中等度から重度の紅斑－３；重度の紅斑（牛肉の赤色度）から紅斑の等級付けを妨げる痂皮形成－４。

浮腫形成：浮腫なし－０；非常に軽度の浮腫（かろうじて知覚可能）－１；軽度の浮腫（明確な隆起によって十分に規定された領域の縁）－２；中等度の浮腫（およそ１ｍｍの隆起）－３；重度の浮腫（１Ｍｍ超の隆起、及び曝露領域を超える拡大）－４。

Ｄｒａｉｚｅスコアリング：所見の不在又は存在は、個々の動物について、０日目（注射前）、１日目（注射後）、及び７日目（注射後）に記録した。群内の５匹の全ての動物は、注射後３日間にわたってゼロの浮腫及び紅斑スコアを有し、これは、組成物試料が毒性なしで良好に忍容されたことを示す。

詳細な臨床観察：動物をケージから取り出し、観察を行った。これらには、限定されないが、皮膚、毛皮、目、耳、鼻、口腔、胸部、腹部、外陰部、肢及び足部、呼吸器及び循環器の影響、唾液分泌などの自律神経の影響、振戦、けいれん、取り扱いへの反応性、異常な行動を含む神経系の影響の評価が含まれる。組成物群（１００ｍｇ／ｋｇ、５００ｍｇ／ｍＬ）における５匹の動物のいずれにおいても、０日目（注射前）、１日目（注射後）、及び７日目（注射後）に異常な所見は観察されず、これは、組成物試料が観察可能な毒性なしで良好に忍容されたことを示す。

実施例８
免疫原性：Ａｂ微小粒子懸濁液の皮下投与は、免疫応答の存在を示さない：
組成物：研究の範囲は、以下の組成物、１）ＳＣ担体液体対照：オレイン酸エチル；１０μＬ、２）ＳＣ ｍＡｂ水性：２０ｍｇ／ｍＬのリツキシマブバイオシミラー（抗ＣＤ－２０抗体）、４ｍｇ／ｍＬのヒスチジン、１ｍｇ／ｍＬのトレハロース、０．７ｍｇ／ｍＬの塩化ナトリウム、及び０．６ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０；１０μＬ、３）粒子中に製剤化し、次いで、１０ｍｇ／ｍＬの濃度で凝集剤（ＰＳ８０）を有するオレイン酸エチル（非水性担体ビヒクル）に懸濁した、ＳＣ ｍＡｂ微小粒子懸濁液：２０ｍｇ／ｍＬのリツキシマブバイオシミラー（抗ＣＤ－２０抗体）、４ｍｇ／ｍＬのヒスチジン、１ｍｇ／ｍＬのトレハロース、０．７ｍｇ／ｍＬの塩化ナトリウム、及び０．６ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０；１０μＬ、並びに４）加熱及びかき混ぜに供して、陽性対照試料を生成した、ＳＣ分解した水性ｍＡｂ：リツキシマブバイオシミラー（抗ＣＤ－２０抗体）；１０μＬを有する４つのコホートを伴う。

動物：雌の野生型Ｂａｌｂ／ｃマウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｓ）を、Ｔｕｆｔｓ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ（Ｔｕｆｔｓ ＣＭＳ）における動物施設に収容した。全ての動物手順は、Ｔｕｆｔｓ ＣＭＳにおける動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって正式にレビュー及び承認された。

投薬、研究設計、及び分析：全ての粒子組成物注射は、２７ゲージの針を有する１００μＬのＨａｍｉｌｔｏｎガラスシリンジを使用して行った。全ての水性及び非水性ビヒクル注射は、ステークインの３０ゲージの針を有する３００μＬのインスリンシリンジを使用して行った。シリンジ中の粒子を再懸濁させるためのプロトコルは実施されなかった。１０週目におけるＢａｌｂ／ｃ雌マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂ）をこの研究のために使用した。以下の研究設計を使用した：１）ＳＣ担体液体対照：体積＝１０μＬ；ｎ＝１０、２）ＳＣリツキシマブ水性：用量＝１０ｍｇ／ｋｇ；体積＝１０μＬ；ｎ＝１０、３）ＳＣリツキシマブ微小粒子懸濁液：用量＝１０ｍｇ／ｋｇ；体積＝１０μＬ；ｎ＝１０、４）ＳＣ分解したリツキシマブ水性：用量＝１０ｍｇ／ｋｇ、体積＝１０μＬ；ｎ＝１０。血漿試料を、０ｄ及び３５ｄで収集した。各マウスからの血液を、全てのデータポイントで顔面静脈出血からＥＤＴＡキャピラリーチューブ中に収集した。血液から得られた血漿を、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（登録商標）電気化学発光（ＭＳＤ－ＥＣＬ）プラットフォームを使用する分析のために２，５００倍に希釈した。マスターミックスを、アッセイ希釈剤（０．０２％のＴｗｅｅｎ２０を有するＰＢＳ中の１％のＭＳＤブロッカーＡ）に希釈した等しい濃度（０．５μｇ／ｍｌ）のスルホ－ＴＡＧ及びビオチン化リツキシマブとともに作製した。ＡＤＡ標準曲線は、マウス抗リツキシマブ抗体（ＧｅｎＳｃｒｉｐｔ Ａ０１９７０－４０）を１０００ｎｇ／ｍＬ、３３３ｎｇ／ｍＬ、１１１ｎｇ／ｍＬ、３７ｎｇ／ｍＬ、１２ｎｇ／ｍＬ、４ｎｇ／ｍＬ、１ｎｇ／ｍＬ、及び０ｎｇ／ｍＬで連続希釈することによって作製した。最初に、５０μＬのマスターミックスを丸底９６ウェルポリプロピレンプレートの各ウェルに添加した。次いで、２５μＬのＡＤＡ標準又は４％の血漿試料を、各ウェルに添加した。プレートを密封し、中程度の振盪を伴って４℃で一晩インキュベートした。１５０μＬのブロッキング溶液（ＰＢＳＴ中の３％ｗ／ｖのＭＳＤブロッカーＡ）を、９６ウェルストレプトアビジンプレート（ＭＳＤ Ｌ５５ＳＡ）の各ウェルに添加した。プレートを密封し、中程度の振盪を伴って室温で少なくとも３０分間インキュベートした後、２００μＬのＰＢＳＴで洗浄した。５０μＬの溶液を、ポリプロピレンプレートの各ウェルからストレプトアビジンプレートに移した。次いで、プレートを密封し、４００～７００ｒｐｍの振盪を伴って室温で１時間インキュベートし、それに続いて、２００μＬのＰＢＳＴで３回の洗浄を行った。１５０μＬの２×Ｒｅａｄ緩衝液を各ウェルに添加した。ＭＳＤ ＱＵＩＣＫＰＬＥＸ機器を使用してプレートを分析した。この研究の結果は、Ａｂ微小粒子懸濁液の皮下投与が、リツキシマブのための反復用量抗薬物抗体（免疫原性）に基づいて免疫応答の存在を示さないことを示す。

実施例９
ヒアルロニダーゼの投与は、皮下シリンジ注射によって投与される凝集剤を有する組成物の体積及び流体分散の増加を可能にする：
実施例１～４に記載されているものと同様の手順を、粒子及び懸濁液の生成に用いた。粒子製剤：ＨＩｇＧ７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０は、３％の粒子水含有量を有する滑らかで球形の粒子を提供した。ＦＩＢ－ＳＥＭは、粒子が内部空隙空間を有さないことを示す。懸濁液製剤：担体液体オレイン酸エチル、タンパク質含有量１００ｍｇ／ｍＬ、１％のＰＳ８０。凝集体積は、２５℃で少なくとも１ヶ月間安定したままであった。１ｍｇタンパク質当たりに正規化されたＡｕｒａによって測定したＳＶＰ＞２μｍ（１．８Ｅ５）、ＳＥＣ９８．９％のモノマーデータは、粒子が約２５℃で少なくとも１ヶ月間安定したままであったことを示す。

組成物：研究の範囲は、以下の組成物を有する２組の注射部位を有する、８インチ×１８インチの二重袋（Ｓａｖｅｎｏｒ’ｓ、Ｂｏｓｔｏｎ）で、生理学的温度に平衡化された１つの豚バラ肉試料を伴う。ＰＢＳ溶液についての群１注射部位；及びヒアルロニダーゼ事前注射の後に投与されるＳＣ Ａｂ懸濁液についての群２注射部位：ｉ）８．５ｍｇ／ｍｌのＮａＣｌ、１０ｍＭのクエン酸－クエン酸ナトリウム、０．９ｍｇ／ｍｌのＥＤＴＡ－２Ｎａ、０．３ｍｇ／ｍｌのＣａＣｌ２ ｐＨ５．２中の２０００Ｕのヒアルロニダーゼ（Ｃｒｅａｔｉｖｅ Ｂｉｏｍａｒｔ）、それに続いてｉｉ）ＳＣ Ａｂ懸濁液。懸濁液の濃度は、１００ｍｇ／ｍＬのタンパク質であった。シリンジ中の粒子を再懸濁させるためのプロトコルは実施されなかった。

投薬、研究設計、及び分析：皮付きの豚バラ肉の５ポンド部分を生理学的温度に到達させた。皮側は、アルコールを使用して徹底的に清浄し、次いで、無菌ガーゼを使用して乾燥させた。シリンジ中の粒子を再懸濁させるためのプロトコルは実施されなかった。皮を引き締めている間に、ＰＢＳ溶液（群１）を、２４ｍＬのＨｅｎｋｅ－Ｊｅｃｔシリンジ及び２７Ｇ ＵＴＷ針を使用して、４５度の角度で皮の下に皮下注射した。十分な背圧が生じるまで懸濁液を分配し、懸濁液の更なる分配を防止した。分配した体積は１．４ｍＬであり、平均注射速度は０．０２５ｍＬ／秒であった。実験を、ヒアルロニダーゼ事前注射の後に皮下投与したＳＣ Ａｂ懸濁液（群２）で繰り返し、１ｍＬのヒアルロニダーゼ混合物を、１ｍＬのツベルクリンシリンジ及び２５Ｇ ＵＴＷ針を使用して、４５度の角度で皮の下に皮下事前注射した。約５～１０分の期間の後、２４ｍＬのＨｅｎｋｅ－Ｊｅｃｔシリンジ及び２５Ｇ ＵＴＷ針を使用して、ＳＣ Ａｂ懸濁液を４５度の角度で同じ注射部位に皮下注射した。十分な背圧が懸濁液のいずれの更なる分配を防止するまで、懸濁液を分配した。平均体積は５．３ｍＬであり、平均注射速度は０．０４５ｍＬ／秒であった。研究のエンドポイントには、注射体積測定及び注射部位の定性的評価が含まれた。全ての注射は、同じ注射力を使用して実施した。

結果：この研究の目的は、単回用量として皮下に与えた場合に投薬することができる最大実行可能体積を決定することである。実験は、皮下投与したＳＣ Ａｂ懸濁液の注射体積（１．４ｍＬの総体積）が、ヒアルロニダーゼ（５．３ｍＬの総体積）を用いる事前注射によって大幅に増加することが可能であることを示し、これらのヒアルロニダーゼ注射部位は、治療の部位に形成された皮膚小疱の外観、及び注射力の減少（注入速度の増加）、及び注射のより大きな体積によって決定されるように、Ａｂ粒子組成物の注射の改善された速度を示した。

実施例１０
実施例１～４と同様の手順を、粒子及び懸濁液の生成に用いた。粒子製剤：リツキシマブ１６０ｍｇ／ｍＬ（９８％）、ヒスチジン２．６３ｍｇ／ｍＬ（３％）、ｐＨ：６．０。懸濁液製剤：担体液体オレイン酸エチル、タンパク質含有量６２０ｍｇ／ｍＬ、固体充填８４３ｍｇ／ｍＬ。

粒子生成及び液滴生成（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ／２０ｍｍ）研究：拡散相：連続相（ｎＢＡ）比１／２００、少なくとも１６ｍＬ：３．２Ｌ、（１００００ｒｐｍ）／６０秒のミキサー速度の混合を伴う。遠心分離及びその後の乾燥（空気１０～７５ＲＨ）による固液分離プロセスは、粒子サイズ分布（Ｄ１０／Ｄ５０／Ｄ９０）が９．３４／２０．３２／４０．５８μｍであり、粒子水含有量が３．４％である滑らかで球形の粒子を提供した（図１２）。ＦＩＢ－ＳＥＭは、粒子が内部空隙空間を有さないことを示す（図１３）。

担体液体としてオレイン酸エチルを使用して、２．５６ｍＬの体積を充填する。１２０秒間のＲＳＭ５０００ｒｐｍ及びフィルタ（６０ｕｍ）を使用する懸濁液分散プロセス及びパラメータ。オレイン酸エチル中のストック１００ｍｇ／ｍＬのＰＳ８０溶液（１％のＰＳ８０）の１０ｕＬを懸濁液に添加し、ボルテックスして混合する。凝集体積は、２５℃で少なくとも３ヶ月安定したままであった。１ｍＬの懸濁液を１ｍＬのＧｅｒｒｅｓｈｅｉｍｅｒ １３ｍｍシリンジに移し、２５ゲージのＵＴＷ針をシリンジに追加する。０．０５ｍＬ／秒（５１．１ｍｍ／分）又は０．１ｍＬ／秒（１８９．４ｍｍ／分）及び０．０５ｍＬ／秒（９４．６ｍｍ／分）でシリンジ力を測定する。

シリンジ力の結果。図１４は、０．０５ｍＬ／秒で注射した場合の６２０ｍｇ／ｍＬのリツキシマブ懸濁液の滑走力が１６Ｎであることを示す。

自動注射装置の力の結果。シリンジに６２０ｍｇ／ｍＬの懸濁液を充填し、試験装置に入れて、ばね駆動型自動注射装置をシミュレートした。ばねは、１６Ｎでシリンジから懸濁液を排出することができた。

実施例１１
実施例１～４と同様の手順を、粒子及び懸濁液の生成に用いた。粒子製剤：リツキシマブ７０ｍｇ／ｍＬ（８０％）、ヒスチジン２．２ｍｇ／ｍＬ（２％）、アルギニン．ＨＣｌ １５．３ｍｇ／ｍＬ（１８％）、ｐＨ：６．０。懸濁液製剤：担体液体オレイン酸エチル、タンパク質含有量５０７ｍｇ／ｍＬ、固体充填７３５ｍｇ／ｍＬ。

粒子生成及び液滴生成（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ／２０ｍｍ）研究：拡散相：連続相（ｎＢＡ）比１／２００、少なくとも２０ｍＬ：４Ｌ、（８０００ｒｐｍ）／６０秒のミキサー速度の混合を伴う。遠心分離及びその後の乾燥（空気１０～７５ＲＨ）による固液分離プロセスは、粒子サイズ分布（Ｄ１０／Ｄ５０／Ｄ９０）が６．６／１１．４／１９．３μｍであり、粒子水含有量が３％である滑らかで球形の粒子を提供した（図１５）。ＦＩＢ－ＳＥＭは、粒子が内部空隙空間を有さないことを示す（図１６）。１ｍｇタンパク質当たりに正規化されたＡｕｒａによって測定したＳＶＰ＞２μｍ（３．５Ｅ５）、Ｐｒｏ－Ａ、１６．００％の酸化、ＳＣＥＸ（酸性／中性／塩基性％）７．７／８２．７／９．６、ＳＥＣ９６．６％のモノマーデータは、粒子が少なくとも３ヶ月間安定したままであったことを示す。

担体液体としてオレイン酸エチルを使用して、３．２ｍＬの体積を充填する。１５分間のＲＳＭ６０００ｒｐｍ及びフィルタ（６０ｕｍ）を使用する懸濁液分散プロセス及びパラメータ。オレイン酸エチル中のストック１００ｍｇ／ｍＬのＰＳ８０溶液（１％のＰＳ８０）の１０ｕＬを懸濁液に添加し、ボルテックスして混合する。凝集体積は、２５℃で少なくとも３ヶ月安定したままであった。１ｍＬの懸濁液を２．２５ｍＬのＮｅｏｐａｋシリンジに移し、２７ゲージのＳＴＷ×１／２インチの針をシリンジに追加する。０．１ｍＬ／秒（１８９．４ｍｍ／分）でシリンジ力を測定する。

シリンジ力の結果。図１７は、０．１ｍＬ／秒で注射した場合の５０７ｍｇ／ｍＬのリツキシマブ懸濁液の滑走力が３０Ｎであることを示す。

実施例１２
実施例１０及び１１と同様の手順を、トラスツズマブ粒子及び懸濁液の生成に用いた。粒子製剤：トラスツズマブ７１．４ｍｇ／ｍＬ（７１％）、ヒスチジン２．２ｍｇ／ｍＬ（２％）、アルギニン．ＨＣｌ １５．３ｍｇ／ｍＬ（２６％）、ＰＳ８０ ０．９ｍｇ／ｍＬ（１％）、ｐＨ：６．０。懸濁液製剤：担体液体オレイン酸エチル、タンパク質含有量５０７ｍｇ／ｍＬ、固体充填７３５ｍｇ／ｍＬ。

粒子生成及び液滴生成（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ／２０ｍｍ）研究：拡散相：連続相（ｎＢＡ）比１／２００、少なくとも１８ｍＬ：３．６Ｌ、（４０００ｒｐｍ）／６０秒のミキサー速度の混合を伴う。遠心分離及びその後の乾燥（空気１０～７５ＲＨ）による固液分離プロセスは、滑らかで球形の粒子を提供し、ＳＥＣモノマーデータは、粒子が少なくとも３ヶ月間安定したままであったことを示す。

凝集体積及び保管の結果。１ヶ月後、凝集体積は１００％で安定したままであり、タンパク質粒子の観察可能な沈降はなかった。

シリンジ力の結果。１ヶ月後、結果は、５０７ｍｇ／ｍＬのトラスツズマブ懸濁液の滑走力に変化を示さなかった。

実施例１３
実施例１～４と同様の手順を、粒子及び懸濁液の生成に用いた。粒子製剤：ＨＩｇＧ７４％のタンパク質：２％のヒスチジン：２４％のアルギニン：１％のＰＳ８０は、３％の粒子水含有量を有する滑らかで球形の粒子を提供した。ＦＩＢ－ＳＥＭは、粒子が内部空隙空間を有さないことを示す。懸濁液製剤：担体液体オレイン酸エチル、タンパク質含有量５００ｍｇ／ｍＬ、１％のＰＳ８０。凝集体積は、２５℃で少なくとも１ヶ月間安定したままであった。１ｍｇタンパク質当たりに正規化されたＡｕｒａによって測定したＳＶＰ＞２μｍ（１．８Ｅ５）、ＳＥＣ９８．９％のモノマーデータは、粒子が約２５℃で少なくとも１ヶ月間安定したままであったことを示す。

凝集体積及び保管安定性の結果。４℃、２５℃、及び４０℃で１ヶ月後、凝集体積は１００％で安定したままであり、タンパク質粒子の観察可能な沈降はなかった。５００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧ懸濁液の保管安定性を、０ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ、及び１．０ｍｇ／ｍＬでのオレイン酸エチル中のＰＳ８０の濃度で、１、２、及び３ヶ月で収集したデータを用いて、４℃、２５℃、及び４０℃で追跡した。データは、４℃、２５℃、及び４０℃で最大３ヶ月間保管した後、オレイン酸エチル中に製剤化したＰＳ８０の濃度の増加に伴い、ＳＶＰ＞２μｍの計数が減少したことを示した。ＳＶＰ計数は、２５℃及び４０℃で少なくとも３ヶ月間保管した５００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧ懸濁液について、ＥＯ中の１．０ｍｇ／ｍＬのＰＳ８０で少なくとも４倍減少した。

シリンジ力の結果。１ｍＬの懸濁液を１ｍＬのＳｃｈｏｔｔ ＳｙｒｉＱ ＢｉｏＰｕｒｅシリンジに移し、２７ゲージの１／２インチの針をシリンジに追加する。０．１ｍＬ／秒（１８９．４ｍｍ／分）でシリンジ力を測定する。シリンジ力の結果は、０．１ｍＬ／秒で注射した場合の５００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧ懸濁液の滑走力が１６Ｎであることを示す。

降伏応力のための測定を、平行プレートレオメータ（ＡＮＴＯＮ ＰＡＡＲ（商標）ＭＣＲ ９２）によって取得した。結果は、粒子懸濁液が凝集剤の添加時に流れることを可能にする、安定な凝集体積の形成を示す降伏応力が観察されたことを示す。

実施例１４
２つ以上のタンパク質を有する粒子組成物：
実施例１０～１２と同様の手順を、リツキシマブ及びトラスツズマブ懸濁液の生成に用いた。粒子製剤（実施例１１及び１２）：リツキシマブ７０ｍｇ／ｍＬ（８０％）、ヒスチジン２．２ｍｇ／ｍＬ（２％）、アルギニン．ＨＣｌ １５．３ｍｇ／ｍＬ（１８％）、ｐＨ：６．０、及びトラスツズマブ７１．４ｍｇ／ｍＬ（７１％）、ヒスチジン２．２ｍｇ／ｍＬ（２％）、アルギニン．ＨＣｌ １５．３ｍｇ／ｍＬ（２６％）、ＰＳ８０ ０．９ｍｇ／ｍＬ（１％）、ｐＨ：６．０。懸濁液製剤：懸濁液への担体液体オレイン酸エチル（２％のＰＳ８０）、及び混合のためのボルテックス、合計５３１．７ｍｇ（タンパク質含有量４００ｍｇ／ｍＬ）についての２２１．２ｍｇのリツキシマブ及び３１０．５ｍｇのトラスツズマブ、粒子タンパク質パーセンテージ７０％。

凝集体積及び懸濁液安定性の結果。１ヶ月後、凝集体積は１００％で安定したままであり、リツキシマブ及びトラスツズマブ粒子の観察可能な沈降はなかった。１ヶ月後、粒子及び粒子懸濁液の分析は、２５℃で少なくとも１ヶ月間保管した後、ＰＳ８０をオレイン酸エチル中に製剤化した場合に、ＳＥＣによるモノマープロファイルによって測定したように、タンパク質品質がわずかに減少したことを確認した。

実施例１５
少なくとも２つの担体液体を有するタンパク質粒子組成物：
実施例１～４と同様の手順を、粒子及び懸濁液の生成に用いた。粒子製剤：ＨＩｇＧ １３０ｍｇ／ｍＬ（８８％）、ヒスチジン５．０ｍｇ／ｍＬ（３％）、アルギニン．ＨＣｌ ９．８ｍｇ／ｍＬ（７％）、メチオニン２．０（１％）、ＰＳ８０ ０．１（１％）、ｐＨ：５．５。懸濁液製剤：担体液体４０／６０オレイン酸エチル：ゴマ油、タンパク質含有量４００ｍｇ／ｍＬ、固体充填４５２ｍｇ／ｍＬ、凝集剤：０又は２ｍｇ／ｍＬ。

粒子生成及び液滴生成（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ／２０ｍｍ）研究：拡散相：連続相（ｎＢＡ）比１／２００、少なくとも２０ｍＬ：４Ｌ、（８０００ｒｐｍ）／６０秒のミキサー速度の混合を伴う。遠心分離及びその後の乾燥（空気１０～７５ＲＨ）による固液分離プロセスは、粒子サイズ分布（Ｄ１０／Ｄ５０／Ｄ９０）が６．１／１０．１／１５．７μｍであり、粒子水含有量が３％である滑らかで球形の粒子を提供した。ＦＩＢ－ＳＥＭは、粒子が内部空隙空間を有さないことを示す。１ｍｇタンパク質当たりに正規化されたＡｕｒａによって測定したＳＶＰ＞２μｍ（３．５Ｅ５）、Ｐｒｏ－Ａ、１６．００％の酸化、ＳＣＥＸ（酸性／中性／塩基性％）７．７／８２．７／９．６、ＳＥＣ９６．６％のモノマーデータは、粒子が少なくとも３ヶ月間安定したままであったことを示す。

担体液体として４０／６０オレイン酸エチル：ゴマ油を使用して、３．２ｍＬの体積を充填する。１５分間のＲＳＭ６０００ｒｐｍ及びフィルタ（６０ｕｍ）を使用する懸濁液分散プロセス及びパラメータ。オレイン酸エチル中のストック１００ｍｇ／ｍＬのＰＳ８０溶液（１％のＰＳ８０）の１０ｕＬを懸濁液に添加し、ボルテックスして混合する。次いで、凝集剤を有さない懸濁液（１ヶ月後に６２．３％）と比較して、凝集体積は、２５℃で少なくとも１ヶ月間安定したままであった（７４．８％）。１ｍＬの懸濁液を２．２５ｍＬのＧｅｒｒｅｓｈｅｉｍｅｒシリンジに移し、２７ゲージのＴＷ×１／２インチの針をシリンジに追加する。０．１ｍＬ／秒（１８９．４ｍｍ／分）でシリンジ力を測定する。室温で、凝集体積の変化が観察されなくなるまで上向きにして保管（少なくとも１ヶ月の保管）。

凝集体積及び保管安定性の結果。２５℃で１ヶ月後、凝集剤を有さない懸濁液（１ヶ月後に６２．３％）と比較して、凝集体積は７４．８％で安定したままであり、タンパク質粒子の観察可能な沈降はなかった。４００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧ懸濁液の保管安定性を、０ｍｇ／ｍＬ及び０．１ｍｇ／ｍＬでの４０／６０オレイン酸エチル：ゴマ油中のＰＳ８０の濃度で、１ヶ月で収集したデータを用いて、２５℃で追跡した。データは、２５℃で少なくとも最大１ヶ月間保管した後、４０／６０オレイン酸エチル：ゴマ油中に製剤化したＰＳ８０の濃度の増加に伴い、ＳＶＰ＞２μｍの計数が減少したことを示した。

シリンジ力の結果。１ｍＬの懸濁液を１ｍＬのＧｅｒｒｅｓｈｅｉｍｅｒシリンジに移し、２７ゲージのＴＷ×１／２インチの針をシリンジに追加する。０．１ｍＬ／秒（１８９．４ｍｍ／分）でシリンジ力を測定する。シリンジ力の結果は、担体液体として４０／６０オレイン酸エチル：ゴマ油を使用する凝集剤を有する４００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧ懸濁液の滑走力が、０．１ｍＬ／秒で注射した場合に２０．１Ｎであり、凝集剤を有さない懸濁液と比較した場合に２７．４Ｎであることが見出されたことを示す。粘度は、凝集剤を有さない懸濁液（３１．８ｃＰ）と比較して、２３．３ｃＰであることが見出された。

降伏応力のための測定を、平行プレートレオメータ（ＡＮＴＯＮ ＰＡＡＲ（商標）ＭＣＲ ９２）によって取得した。結果は、粒子懸濁液が凝集剤の添加時に流れることを可能にする、安定な凝集体積の形成を示す降伏応力が観察されたことを示す。

実施例１６
担体液体としてＭＣＴを有するタンパク質粒子組成物：
実施例１～４と同様の手順を、粒子及び懸濁液の生成に用いた。粒子製剤：ＨＩｇＧ １３０ｍｇ／ｍＬ（８８％）、ヒスチジン５．０ｍｇ／ｍＬ（３％）、アルギニン．ＨＣｌ ９．８ｍｇ／ｍＬ（７％）、メチオニン２．０（１％）、ＰＳ８０ ０．１（１％）、ｐＨ：５．５。懸濁液製剤：担体液体ＭＣＴ、タンパク質含有量４００ｍｇ／ｍＬ、固体充填４５２ｍｇ／ｍＬ、凝集剤：０又は２ｍｇ／ｍＬ。

粒子生成及び液滴生成（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ／２０ｍｍ）研究：拡散相：連続相（ｎＢＡ）比１／２００、少なくとも２０ｍＬ：４Ｌ、（８０００ｒｐｍ）／６０秒のミキサー速度の混合を伴う。遠心分離及びその後の乾燥（空気１０～７５ＲＨ）による固液分離プロセスは、粒子サイズ分布（Ｄ１０／Ｄ５０／Ｄ９０）が６．１／１０．１／１５．７μｍであり、粒子水含有量が３％である滑らかで球形の粒子を提供した。ＦＩＢ－ＳＥＭは、粒子が内部空隙空間を有さないことを示す。１ｍｇタンパク質当たりに正規化されたＡｕｒａによって測定したＳＶＰ＞２μｍ（３．５Ｅ５）、Ｐｒｏ－Ａ、１６．００％の酸化、ＳＣＥＸ（酸性／中性／塩基性％）７．７／８２．７／９．６、ＳＥＣ９６．６％のモノマーデータは、粒子が少なくとも３ヶ月間安定したままであったことを示す。

担体液体としてＭＣＴを使用して、３．２ｍＬの体積を充填する。１５分間のＲＳＭ６０００ｒｐｍ及びフィルタ（６０ｕｍ）を使用する懸濁液分散プロセス及びパラメータ。ＭＣＴ中のストック１００ｍｇ／ｍＬのＰＳ８０溶液（１％のＰＳ８０）の１０ｕＬを懸濁液に添加し、ボルテックスして混合する。次いで、凝集剤を有さない懸濁液（１ヶ月後に６５．１％）と比較して、凝集体積は、２５℃で少なくとも１ヶ月間安定したままであった（８７．６％）。１ｍＬの懸濁液を２．２５ｍＬのＧｅｒｒｅｓｈｅｉｍｅｒシリンジに移し、２７ゲージのＴＷ×１／２インチの針をシリンジに追加する。０．１ｍＬ／秒（１８９．４ｍｍ／分）でシリンジ力を測定する。室温で、凝集体積の変化が観察されなくなるまで上向きにして保管（少なくとも１ヶ月の保管）。

凝集体積及び保管安定性の結果。２５℃で１ヶ月後、凝集剤を有さない懸濁液（１ヶ月後に６５．１％）と比較して、凝集体積は８７．６％で安定したままであり、タンパク質粒子の観察可能な沈降はなかった。４００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧ懸濁液の保管安定性を、０ｍｇ／ｍＬ及び０．１ｍｇ／ｍＬでのＭＣＴ中のＰＳ８０の濃度で、１ヶ月で収集したデータを用いて、２５℃で追跡した。データは、２５℃で少なくとも最大１ヶ月間保管した後、ＭＣＴ中に製剤化したＰＳ８０の濃度の増加に伴い、ＳＶＰ＞２μｍの計数が減少したことを示した。

シリンジ力の結果。１ｍＬの懸濁液を１ｍＬのＧｅｒｒｅｓｈｅｉｍｅｒシリンジに移し、２７ゲージのＴＷ×１／２インチの針をシリンジに追加する。０．１ｍＬ／秒（１８９．４ｍｍ／分）でシリンジ力を測定する。シリンジ力の結果は、担体液体として４０ＭＣＴを使用する凝集剤を有する４００ｍｇ／ｍＬのＨＩｇＧ懸濁液の滑走力が、０．１ｍＬ／秒で注射した場合に３１．８Ｎであり、凝集剤を有さない懸濁液と比較した場合に３８．９Ｎであることが見出されたことを示す。粘度は、凝集剤を有さない懸濁液（４５．２ｃＰ）と比較して、３６．９ｃＰであることが見出された。

降伏応力のための測定を、平行プレートレオメータ（ＡＮＴＯＮ ＰＡＡＲ（商標）ＭＣＲ ９２）によって取得した。結果は、粒子懸濁液が凝集剤の添加時に流れることを可能にする、安定な凝集体積の形成を示す降伏応力が観察されたことを示す。

参照による組み込み
本明細書で言及される全ての刊行物及び特許は、各個別の刊行物又は特許が、参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されたかのように、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。矛盾する場合、本明細書におけるあらゆる定義を含む本出願が優先する。

等価物
本開示の特定の態様及び実施形態が論じられているが、一方で、上記明細書は例示的なものであり、制限的なものではない。本開示の多くの変形形態は、本明細書及び以下の特許請求の範囲を見直すと当業者には明らかになるであろう。本開示の全範囲は、そのような変形形態とともに、それらの等価物の全範囲及び本明細書とともに、特許請求の範囲を参照することによって決定されるべきである。

Claims (253)

1. 薬学的に有効な組成物であって、
   薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、前記粒子の実質的に全てが、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、
   凝集剤と、を含み、前記組成物中の前記凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
   前記組成物中の前記治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物。
2. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を含む、請求項１に記載の組成物。
3. 前記凝集剤が、イオン性である、請求項１又は２に記載の組成物。
4. 前記イオン性凝集剤が、ステアリン酸マグネシウム、硫酸ドデシルナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、レシチン、又はそれらの組み合わせである、請求項３に記載の組成物。
5. 前記凝集剤が、非イオン性である、請求項１又は２に記載の組成物。
6. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート、アルキルフェノールエトキシレート、グリセロール、ポリオキシエチル化ヒマシ油、ドクサート、デシルグルコシド、ノノキシノール－９、ソルビタンエステル、ソルビタンモノオレエート、エタノールアミン、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポロキシル４０水添ヒマシ油、カルボマー１３４２、トウモロコシ油－モノ－ジ－トリグリセリド、ポリオキシエチル化オレイングリセリド（ｏｌｅｉｃ ｇｌｙｃｅｒｉｄｅ）、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである、請求項５に記載の組成物。
7. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート、アルキルフェノールエトキシレート、ソルビタンエステル、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである、請求項５に記載の組成物。
8. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート又はソルビタンエステルである、請求項５に記載の組成物。
9. 前記組成物中の前記凝集剤の濃度が、約１０ｍｇ／ｍＬ未満である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
10. 前記組成物が、混合後に約６０％超の凝集体積を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
11. 前記凝集体積が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月後に約１０％未満低減する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
12. 前記組成物が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、実質的に同じ凝集体積を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
13. 前記複数の粒子及び凝集剤が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、前記液体担体中に実質的に懸濁したままである、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
14. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の約１０％未満の凝結を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
15. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤のいずれの凝結も実質的に含まない、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
16. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の約１０％未満の断片化を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
17. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤のいずれの断片化も実質的に含まない、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
18. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の電荷バリアントにおいて約５％未満の変化を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
19. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の電荷バリアントにおいていずれの変化も実質的に含まない、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
20. 前記粒子の実質的に全てが、約０．８０～約１．００の真円度を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
21. 前記粒子の実質的に全てが、約１．００の真円度を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
22. 前記粒子の実質的に全てが、約７重量％未満の水分を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
23. 前記粒子の実質的に全てが、約１０％未満の内部空隙空間を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
24. 前記粒子の実質的に全てが、いずれの内部空隙空間も実質的に含まない、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
25. 前記粒子の実質的に全てが、約６０重量％超の治療用生物学的製剤を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
26. 前記粒子の実質的に全てが、炭水化物、ｐＨ調整剤、塩、キレート剤、界面活性剤、タンパク質安定剤、乳化剤、防腐剤、アミノ酸、酸化防止剤、パラベン、殺菌剤、殺真菌剤、保存剤、又はそれらの組み合わせを更に含む、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
27. 前記炭水化物が、デキストラン、トレハロース、スクロース、アガロース、マンニトール、ラクトース、ソルビトール、マルトース、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
28. 前記ｐＨ調整剤が、酢酸塩、クエン酸塩、グルタミン酸塩、グリシン酸塩、ヒスチジン、乳酸塩、マレイン酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、重炭酸塩、水酸化アルミニウム、リン酸、塩酸、ＤＬ－乳酸／グリコール酸、ホスホリルエタノールアミン、トロメタミン、イミダゾール、グリクリグリシン（ｇｌｙｃｌｙｇｌｙｃｉｎｅ）、グルタミン酸一ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
29. 前記塩が、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化カリウム、水酸化ナトリウム、塩化第一スズ、硫酸マグネシウム、グルコヘプトン酸ナトリウム、過テクネチウム酸ナトリウム、グアニジン塩酸塩、水酸化カリウム、塩化マグネシウム、硝酸カリウム、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
30. 前記キレート剤が、エデト酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸ペンテト酸、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
31. 前記界面活性剤が、ソルビタンエステル、ポリソルベート、ポロキサマー、ポリエチレングリコールｔｅｒｔ－オクチルフェニルエーテル、レシチン、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
32. 前記タンパク質安定剤が、トレハロース、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリオキサマー、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸、ポリ（ビニル）ポリマー、ポリエステル、ポリアルデヒド、ｔｅｒｔ－ポリマー、ポリアミノ酸、ヒドロキシエチルデンプン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、ソルビトール、スクロース、マンニトール、シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルベータ－シクロデキストリン、スルホブチルエーテルベータ－シクロデキストリン、メチルベータ－シクロデキストリン、アセチルトリプトファネート、カプリレート、Ｎ－アセチルトリプトファン、プロピレングリコール、グルコース星型ポリマー、シリコーンポリマー、ポリジメチルシロキサン、カルボキシメチルセルロース、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸－コ－グリコール酸）、ポリ乳酸、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、フィコール、デキストラン、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
33. 前記乳化剤が、ポリソルベート、ソルビタンモノオレエート、エタノールアミン、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポロキシル４０水添ヒマシ油、カルボマー１３４２、トウモロコシ油－モノ－ジ－トリグリセリド、ポリオキシエチル化オレイングリセリド、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
34. 前記防腐剤が、フェノール、ｍ－クレゾール、ベンジルアルコール、２－フェニルオキシエタノール、クロロブタノール、ネオマイシン、塩化ベンゼトニウム、グルテルアルデヒド（ｇｌｕｔｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ）、ベータ－プロピオラクトン、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
35. 前記アミノ酸が、アラニン、アスパラギン酸、システイン、イソロイシン、グルタミン酸、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、ピロリシン、セリン、セレノシステイン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン、プロリン、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
36. 前記酸化防止剤が、グルタチオン、アスコルビン酸、システイン、Ｎ－アセチル－Ｌ－トリプトファネート、トコフェロール、ヒスチジン、メチオニン、ペンテト酸、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
37. 前記パラベンが、パラヒドロキシ安息香酸である、請求項２６に記載の組成物。
38. 前記殺菌剤が、塩化ベンザルコニウムである、請求項２６に記載の組成物。
39. 前記殺真菌剤が、アシベンゾラル、２－フェニルフェノール、アニラジン、カルボン、ナタマイシン、アジ化カリウム、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
40. 前記保存剤が、硝酸ナトリウム、二酸化硫黄、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸メチル、チメロサール、パラベン、ホルムアルデヒド、ヒマシ油、又はそれらの組み合わせである、請求項２６に記載の組成物。
41. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも炭水化物及びアミノ酸を更に含む、請求項１～２５のいずれか一項に記載の組成物。
42. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも界面活性剤及びアミノ酸を更に含む、請求項１～２５のいずれか一項に記載の組成物。
43. 前記粒子の実質的に全てが、少なくともアミノ酸を更に含む、請求項１～２５のいずれか一項に記載の組成物。
44. 前記治療用生物学的製剤が、抗体又はその断片である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
45. 前記抗体が、ヒト抗体である、請求項４４に記載の組成物。
46. 前記ヒト抗体が、ＩｇＧ抗体である、請求項４５に記載の組成物。
47. 前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項４４～４６のいずれか一項に記載の組成物。
48. 前記液体担体が、非水性である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
49. 前記非水性液体担体が、有機溶媒である、請求項４８に記載の組成物。
50. 前記有機溶媒が、安息香酸ベンジル、ココナッツ油、綿実油、魚油、ブドウ種子油、ヘーゼルナッツ油、水添植物油、オリーブ油、ヤシ種子油、ピーナッツ油、ハッカ油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、ヒマワリ油、クルミ油、トウモロコシ油、アセトン、酢酸エチル、乳酸エチル、ジメチルアセトアミド、ジメチルイソソルビド、ジメチルスルホキシド、グリコフロール、ジグリム、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル、Ｎ－メチルピロリドン、ペルフルオロデカリン、ポリエチレングリコール、２－ピロリドン、テトラヒドロフルフリルアルコール、ジグリセリド、トリギルセリド（ｔｒｉｇｙｌｃｅｒｉｄｅ）、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、エチルラウレエート、分画植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のトリグリセリド、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、オレイン酸エチル、カプリン酸エチル、アジピン酸ジブチル、脂肪酸エステル、ヘキサン酸、オクタン酸、トリアセチン、ジエチルグリコールモノエーテル、ガンマ－ブチロラクトン、ユージノール、クローブバッド油、シトラール、リモネン、ポリオキシル４０水添ヒマシ油、ポリオキシル３５ヒマシ油、単純なアルコール、例えば、エタノール、オクタノール、ヘキサノール、デカノール、プロパノール、ブタノール、ガンマ－ブチロラクトン、トコフェロール、オクタ－フルオロプロパン、（ペルフルオロヘキシル）オクタン、ｎ－アセチルトリプトファン、ラウリン酸エチル、カプリル酸メチル、カプリル酸エチル、カプリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、アジピン酸ジメチル、スベリン酸ジブチル、セバシン酸ジエチル、マカデミアナッツ脂肪酸エチル（ｅｔｈｙｌ ｍａｃａｄａｍｉａｔｅ）、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、ラウリン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、コハク酸ジエチル、ポリソルベートエステル、エタノールアミン、プロパン酸、シトラール、アニソール、アネトール、ベンズアルデヒド、リナロール、カプロラクトン、フェノール、チオグリセロール、ジメチルアセトアミド、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ソルケタール、イソソルビドジメチルエーテル、ギ酸エチル、酢酸エチルヘキシル、プロピレングリコールジカプリレート、カプリル酸トリグリセリド、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、又はそれらの組み合わせを含む、請求項４９に記載の組成物。
51. 前記有機溶媒が、オレイン酸エチル、ジグリセリド、トリギルセリド、マカデミアナッツ脂肪酸エチル、カプリン酸エチル、コハク酸ジエチル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールジカプリレート、カプリル酸トリグリセリド、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、ゴマ油、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、トリアセチン、又はそれらの組み合わせである、請求項５０に記載の組成物。
52. 前記有機溶媒が、オレイン酸エチル、カプリル酸エチル、プロピレングリコールジカプリレート、ジグリセリド、トリギルセリド、ゴマ油、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、トリアセチン、又はそれらの組み合わせである、請求項５０に記載の組成物。
53. 前記非水性液体担体が、少なくとも２つの有機溶媒を含む、請求項４８に記載の組成物。
54. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤の濃度が、約４００ｍｇ／ｍＬ超である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
55. 前記組成物が、約１００ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
56. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、可視粒子（ＶＰ）を実質的に含まない、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
57. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約１００，０００，０００の約１０μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
58. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６０００の約１０μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
59. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６００の約２５μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
60. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）を実質的に含まない、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
61. 前記水性液体が、水、水性緩衝液、又は生理学的に関連する水性液体である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
62. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した免疫原性を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
63. 前記組成物が、実質的に非免疫原性である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
64. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した毒性を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
65. 前記組成物が、実質的に無毒性である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
66. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、改善された薬物動態（ＰＫ）を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
67. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、前記治療用生物学的製剤の改善された安定性を有する、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
68. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、少なくとも１ヶ月間安定である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
69. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、少なくとも３ヶ月間安定である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
70. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、４０℃で少なくとも３ヶ月間安定である、先行請求項のいずれか一項に記載の組成物。
71. 疾患又は状態の治療を必要とする対象において疾患又は状態を治療する方法であって、前記対象に、薬学的に有効な量の組成物であって、
    薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、前記粒子の実質的に全てが、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、
    凝集剤と、を含み、前記組成物中の前記凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
    前記組成物中の前記治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を投与することを含む、方法。
72. 前記疾患又は状態が、がん、炎症性疾患、又は免疫疾患である、請求項７１に記載の方法。
73. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を含む、請求項７１に記載の方法。
74. 前記凝集剤が、イオン性である、請求項７１に記載の方法。
75. 前記イオン性凝集剤が、ステアリン酸マグネシウム、硫酸ドデシルナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、レシチン、又はそれらの組み合わせである、請求項７４に記載の方法。
76. 前記凝集剤が、非イオン性である、請求項７１に記載の方法。
77. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート、アルキルフェノールエトキシレート、グリセロール、ポリオキシエチル化ヒマシ油、ドクサート、デシルグルコシド、ノノキシノール－９、ソルビタンエステル、ソルビタンモノオレエート、エタノールアミン、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポロキシル４０水添ヒマシ油、カルボマー１３４２、トウモロコシ油－モノ－ジ－トリグリセリド、ポリオキシエチル化オレイングリセリド、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである、請求項７６に記載の方法。
78. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート、アルキルフェノールエトキシレート、ソルビタンエステル、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである、請求項７６に記載の方法。
79. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート又はソルビタンエステルである、請求項７６に記載の方法。
80. 前記組成物中の前記凝集剤の濃度が、約１０ｍｇ／ｍＬ未満である、請求項７１～７９のいずれか一項に記載の方法。
81. 前記組成物が、初期混合後に約６０％超の凝集体積を有する、請求項７１～８０のいずれか一項に記載の方法。
82. 前記凝集体積が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月後に約１０％未満低減する、請求項７１～８１のいずれか一項に記載の方法。
83. 前記組成物が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、実質的に同じ凝集体積を有する、請求項７１～８２のいずれか一項に記載の方法。
84. 前記複数の粒子及び凝集剤が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、前記液体担体中に実質的に懸濁したままである、請求項７１～８３のいずれか一項に記載の方法。
85. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の約１０％未満の凝結を有する、請求項７１～８４のいずれか一項に記載の方法。
86. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤のいずれの凝結も実質的に含まない、請求項７１～８５のいずれか一項に記載の方法。
87. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の約１０％未満の断片化を有する、請求項７１～８６のいずれか一項に記載の方法。
88. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤のいずれの断片化も実質的に含まない、請求項７１～８７のいずれか一項に記載の方法。
89. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の電荷バリアントにおいて約５％未満の変化を有する、請求項７１～８８のいずれか一項に記載の方法。
90. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の電荷バリアントにおいていずれの変化も実質的に含まない、請求項７１～８９のいずれか一項に記載の方法。
91. 前記粒子の実質的に全てが、約０．８０～約１．００の真円度を有する、請求項７１～９０のいずれか一項に記載の方法。
92. 前記粒子の実質的に全てが、約１．００の真円度を有する、請求項７１～９１のいずれか一項に記載の方法。
93. 前記粒子の実質的に全てが、約７重量％未満の水分を有する、請求項７１～９２のいずれか一項に記載の方法。
94. 前記粒子の実質的に全てが、約１０％未満の内部空隙空間を有する、請求項７１～９３のいずれか一項に記載の方法。
95. 前記粒子の実質的に全てが、いずれの内部空隙空間も実質的に含まない、請求項７１～９４のいずれか一項に記載の方法。
96. 前記粒子の実質的に全てが、約６０重量％超の治療用生物学的製剤を有する、請求項７１～９５のいずれか一項に記載の方法。
97. 前記粒子の実質的に全てが、炭水化物、ｐＨ調整剤、塩、キレート剤、界面活性剤、タンパク質安定剤、乳化剤、防腐剤、アミノ酸、酸化防止剤、パラベン、殺菌剤、殺真菌剤、保存剤、又はそれらの組み合わせを更に含む、請求項７１～９６のいずれか一項に記載の方法。
98. 前記炭水化物が、デキストラン、トレハロース、スクロース、アガロース、マンニトール、ラクトース、ソルビトール、マルトース、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
99. 前記ｐＨ調整剤が、酢酸塩、クエン酸塩、グルタミン酸塩、グリシン酸塩、ヒスチジン、乳酸塩、マレイン酸塩、リン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、重炭酸塩、水酸化アルミニウム、リン酸、塩酸、ＤＬ－乳酸／グリコール酸、ホスホリルエタノールアミン、トロメタミン、イミダゾール、グリシルグリシン、グルタミン酸一ナトリウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
100. 前記塩が、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化カリウム、水酸化ナトリウム、塩化第一スズ、硫酸マグネシウム、グルコヘプトン酸ナトリウム、過テクネチウム酸ナトリウム、グアニジン塩酸塩、水酸化カリウム、塩化マグネシウム、硝酸カリウム、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
101. 前記キレート剤が、エデト酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸ペンテト酸、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
102. 前記界面活性剤が、ソルビタンエステル、ポリソルベート、ポロキサマー、ポリエチレングリコールｔｅｒｔ－オクチルフェニルエーテル、レシチン、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸マグネシウム、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
103. 前記タンパク質安定剤が、トレハロース、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリオキサマー、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸、ポリ（ビニル）ポリマー、ポリエステル、ポリアルデヒド、ｔｅｒｔ－ポリマー、ポリアミノ酸、ヒドロキシエチルデンプン、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、ソルビトール、スクロース、マンニトール、シクロデキストリン、ヒドロキシプロピルベータ－シクロデキストリン、スルホブチルエーテルベータ－シクロデキストリン、アセチルトリプトファネート、メチルベータ－シクロデキストリン、カプリレート、Ｎ－アセチルトリプトファン、プロピレングリコール、グルコース星型ポリマー、シリコーンポリマー、ポリジメチルシロキサン、カルボキシメチルセルロース、ポリ（グリコール酸）、ポリ（乳酸－コ－グリコール酸）、ポリ乳酸、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、フィコール、デキストラン、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
104. 前記乳化剤が、ポリソルベート、ソルビタンモノオレエート、エタノールアミン、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポロキシル４０水添ヒマシ油、カルボマー１３４２、トウモロコシ油－モノ－ジ－トリグリセリド、ポリオキシエチル化オレイングリセリド、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
105. 前記防腐剤が、フェノール、ｍ－クレゾール、ベンジルアルコール、２－フェニルオキシエタノール、クロロブタノール、ネオマイシン、塩化ベンゼトニウム、グルテルアルデヒド、ベータ－プロピオラクトン、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
106. 前記アミノ酸が、アラニン、アスパラギン酸、システイン、イソロイシン、グルタミン酸、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、ピロリシン、セリン、セレノシステイン、スレオニン、トリプトファン、チロシン、バリン、アスパラギン、アルギニン、ヒスチジン、グリシン、グルタミン、プロリン、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
107. 前記酸化防止剤が、グルタチオン、アスコルビン酸、システイン、Ｎ－アセチル－Ｌ－トリプトファネート、トコフェロール、ヒスチジン、メチオニン、ペンテト酸、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
108. 前記パラベンが、パラヒドロキシ安息香酸である、請求項９７に記載の方法。
109. 前記殺菌剤が、塩化ベンザルコニウムである、請求項９７に記載の方法。
110. 前記殺真菌剤が、アシベンゾラル、２－フェニルフェノール、アニラジン、カルボン、ナタマイシン、アジ化カリウム、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
111. 前記保存剤が、硝酸ナトリウム、二酸化硫黄、ソルビン酸カリウム、ソルビン酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、安息香酸、ヒドロキシ安息香酸メチル、チメロサール、パラベン、ホルムアルデヒド、ヒマシ油、又はそれらの組み合わせである、請求項９７に記載の方法。
112. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも炭水化物及びアミノ酸を更に含む、請求項９７に記載の方法。
113. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも界面活性剤及びアミノ酸を更に含む、請求項９７に記載の方法。
114. 前記粒子の実質的に全てが、少なくともアミノ酸を更に含む、請求項９７に記載の方法。
115. 前記治療用生物学的製剤が、抗体又はその断片である、請求項７１～１１４のいずれか一項に記載の方法。
116. 前記抗体が、ヒト抗体である、請求項１１５に記載の方法。
117. 前記ヒト抗体が、ＩｇＧ抗体である、請求項１１６に記載の方法。
118. 前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項１１５に記載の方法。
119. 前記液体担体が、非水性である、請求項７１～１１８のいずれか一項に記載の方法。
120. 前記非水性液体担体が、有機溶媒である、請求項１１９に記載の方法。
121. 前記有機溶媒が、安息香酸ベンジル、ココナッツ油、綿実油、魚油、ブドウ種子油、ヘーゼルナッツ油、水添植物油、オリーブ油、ヤシ種子油、ピーナッツ油、ハッカ油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、ヒマワリ油、クルミ油、トウモロコシ油、アセトン、酢酸エチル、乳酸エチル、ジメチルアセトアミド、ジメチルイソソルビド、ジメチルスルホキシド、グリコフロール、ジグリム、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル、Ｎ－メチルピロリドン、ペルフルオロデカリン、ポリエチレングリコール、２－ピロリドン、テトラヒドロフルフリルアルコール、ジグリセリド、トリギルセリド、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、エチルラウレエート、分画植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のトリグリセリド、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、オレイン酸エチル、カプリン酸エチル、アジピン酸ジブチル、脂肪酸エステル、ヘキサン酸、オクタン酸、トリアセチン、ジエチルグリコールモノエーテル、ガンマ－ブチロラクトン、ユージノール、クローブバッド油、シトラール、リモネン、ポリオキシル４０水添ヒマシ油、ポリオキシル３５ヒマシ油、単純なアルコール、例えば、エタノール、オクタノール、ヘキサノール、デカノール、プロパノール、ブタノール、ガンマ－ブチロラクトン、トコフェロール、オクタ－フルオロプロパン、（ペルフルオロヘキシル）オクタン、ｎ－アセチルトリプトファン、ラウリン酸エチル、カプリル酸メチル、カプリル酸エチル、カプリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、アジピン酸ジメチル、スベリン酸ジブチル、セバシン酸ジエチル、マカデミアナッツ脂肪酸エチル、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、ラウリン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、コハク酸ジエチル、ポリソルベートエステル、エタノールアミン、プロパン酸、シトラール、アニソール、アネトール、ベンズアルデヒド、リナロール、カプロラクトン、フェノール、チオグリセロール、ジメチルアセトアミド、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ソルケタール、イソソルビドジメチルエーテル、ギ酸エチル、酢酸エチルヘキシル、プロピレングリコールジカプリレート、カプリル酸トリグリセリド、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、又はそれらの組み合わせを含む、請求項１２０に記載の方法。
122. 前記有機溶媒が、オレイン酸エチル、ジグリセリド、トリギルセリド、マカデミアナッツ脂肪酸エチル、カプリン酸エチル、コハク酸ジエチル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールジカプリレート、カプリル酸トリグリセリド、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、ゴマ油、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、トリアセチン、又はそれらの組み合わせである、請求項１２０に記載の方法。
123. 前記有機溶媒が、オレイン酸エチル、カプリル酸エチル、プロピレングリコールジカプリレート、ジグリセリド、トリギルセリド、ゴマ油、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、トリアセチン、又はそれらの組み合わせである、請求項１２０に記載の方法。
124. 前記非水性液体担体が、少なくとも２つの有機溶媒を含む、請求項１１９に記載の方法。
125. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤の濃度が、約４００ｍｇ／ｍＬ超である、請求項７１～１２４のいずれか一項に記載の方法。
126. 前記組成物が、約１００ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する、請求項７１～１２５のいずれか一項に記載の方法。
127. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、可視粒子（ＶＰ）を実質的に含まない、請求項７１～１２６のいずれか一項に記載の方法。
128. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約１００，０００，０００の約１０μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、請求項７１～１２７のいずれか一項に記載の方法。
129. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６０００の約１０μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、請求項７１～１２８のいずれか一項に記載の方法。
130. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６００の約２５μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、請求項７１～１２９のいずれか一項に記載の方法。
131. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）を実質的に含まない、請求項７１～１３０のいずれか一項に記載の方法。
132. 前記水性液体が、水、水性緩衝液、又は生理学的に関連する水性液体である、請求項７１～１３１のいずれか一項に記載の方法。
133. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した免疫原性を有する、請求項７１～１３２のいずれか一項に記載の方法。
134. 前記組成物が、実質的に非免疫原性である、請求項７１～１３３のいずれか一項に記載の方法。
135. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した毒性を有する、請求項７１～１３４のいずれか一項に記載の方法。
136. 前記組成物が、実質的に無毒性である、請求項７１～１３５のいずれか一項に記載の方法。
137. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、改善された薬物動態（ＰＫ）を有する、請求項７１～１３６のいずれか一項に記載の方法。
138. 前記方法が、少なくとも１つのヒアルロナン分解剤を投与することを更に含む、請求項７１～１３７のいずれか一項に記載の方法。
139. 前記ヒアルロナン分解剤が、ヒアルロニダーゼである、請求項１３８に記載の方法。
140. 前記ヒアルロニダーゼが、可溶性中性活性ヒアルロニダーゼである、請求項１３９に記載の方法。
141. 前記ヒアルロニダーゼが、哺乳動物ヒアルロニダーゼである、請求項１３９に記載の方法。
142. 前記哺乳動物ヒアルロニダーゼが、ヒトヒアルロニダーゼである、請求項１４１に記載の方法。
143. 前記ヒトヒアルロニダーゼが、組換えヒトヒアルロニダーゼ（ｒＨｕＰＨ２０）である、請求項１４２に記載の方法。
144. 前記ヒアルロナン分解剤が、前記組成物と同時に、逐次的に、又は断続的に投与される、請求項１３８に記載の方法。
145. 前記組成物が、非経口、皮下、経口、表皮、皮内、筋肉内、動脈内、腹腔内、又は静脈内注射によって、それを必要とする対象に投与される、請求項７１～１４４のいずれか一項に記載の方法。
146. 前記組成物が、皮下注射によって投与される、請求項７１～１４５のいずれか一項に記載の方法。
147. 前記組成物が、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスによって投与される、請求項７１～１４５のいずれか一項に記載の方法。
148. 前記シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスが、前記組成物を用いて予め充填されている、請求項１４７に記載の方法。
149. 前記組成物が、シリンジによって投与される、請求項１４７に記載の方法。
150. 前記組成物が、携帯型薬物送達注射デバイスによって投与される、請求項１４７に記載の方法。
151. 前記携帯型薬物送達注射デバイスが、ペン注射器である、請求項１４８に記載の方法。
152. 前記携帯型薬物送達注射デバイスが、自動注射器である、請求項１４８に記載の方法。
153. 前記携帯型薬物送達注射デバイスが、経口投与される液体注射器カプセルである、請求項１４８に記載の方法。
154. 前記組成物が、１８ゲージ～３３ゲージの範囲のゲージを有する針から分配される、請求項７１～１５３のいずれか一項に記載の方法。
155. 前記組成物が、約７０Ｎ未満の注射力を使用して分配される、請求項７１～１５４のいずれか一項に記載の方法。
156. 前記注射力が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、実質的に同じままである、請求項７１～１５５のいずれか一項に記載の方法。
157. 投与される前記組成物が、約２０．０ｍＬ未満である、請求項７１～１５６のいずれか一項に記載の方法。
158. 投与される前記組成物が、約２．０ｍＬ未満である、請求項７１～１５７のいずれか一項に記載の方法。
159. 投与される前記組成物が、約０．５ｍＬ未満である、請求項７１～１５８のいずれか一項に記載の方法。
160. 前記組成物が、投与後、約１０分未満で溶解する、請求項７１～１５９のいずれか一項に記載の方法。
161. 前記組成物が、投与後、直ちに溶解する、請求項７１～１６０のいずれか一項に記載の方法。
162. 前記組成物が、１回以上の用量で投与される、請求項７１～１６１のいずれか一項に記載の方法。
163. 前記組成物が、単回用量で投与される、請求項１６２に記載の方法。
164. 前記組成物が、複数回用量で投与される、請求項１６２に記載の方法。
165. 前記対象が、哺乳動物である、請求項７１～１６４のいずれか一項に記載の方法。
166. 前記対象が、ヒトである、請求項７１～１６５のいずれか一項に記載の方法。
167. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、前記治療用生物学的製剤の改善された安定性を有する、請求項７１～１６６のいずれか一項に記載の方法。
168. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、少なくとも１ヶ月間安定である、請求項７１～１６７のいずれか一項に記載の方法。
169. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、少なくとも３ヶ月間安定である、請求項７１～１６８のいずれか一項に記載の方法。
170. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、４０℃で少なくとも３ヶ月間安定である、請求項７１～１６９のいずれか一項に記載の方法。
171. 薬学的に有効な組成物であって、
     薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、前記粒子の実質的に全てが、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、
     凝集剤と、を含み、前記組成物中の前記凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
     前記組成物中の前記治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物を投与する、方法。
172. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を含む、請求項１７１に記載の方法。
173. 前記凝集剤が、イオン性である、請求項１７１に記載の方法。
174. 前記イオン性凝集剤が、ステアリン酸マグネシウム、硫酸ドデシルナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、臭化セチルトリメチルアンモニウム、レシチン、又はそれらの組み合わせである、請求項１７３に記載の方法。
175. 前記凝集剤が、非イオン性である、請求項１７１に記載の方法。
176. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート、アルキルフェノールエトキシレート、グリセロール、ポリオキシエチル化ヒマシ油、ドクサート、デシルグルコシド、ノノキシノール－９、ソルビタンエステル、ソルビタンモノオレエート、エタノールアミン、ポリオキシル３５ヒマシ油、ポロキシル４０水添ヒマシ油、カルボマー１３４２、トウモロコシ油－モノ－ジ－トリグリセリド、ポリオキシエチル化オレイングリセリド、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである、請求項１７５に記載の方法。
177. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート、アルキルフェノールエトキシレート、ソルビタンエステル、ポロキサマー、又はそれらの組み合わせである、請求項１７５に記載の方法。
178. 前記非イオン性凝集剤が、ポリソルベート又はソルビタンエステルである、請求項１７５に記載の方法。
179. 前記組成物中の前記凝集剤の濃度が、約１０ｍｇ／ｍＬ未満である、請求項１７１～１７８のいずれか一項に記載の方法。
180. 前記組成物が、混合後に約６０％超の凝集体積を有する、請求項１７１～１７９のいずれか一項に記載の方法。
181. 前記凝集体積が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月後に約１０％未満低減する、請求項１７１～１８０のいずれか一項に記載の方法。
182. 前記組成物が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、実質的に同じ凝集体積を有する、請求項１７１～１８１のいずれか一項に記載の方法。
183. 前記複数の粒子及び凝集剤が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、前記液体担体中に実質的に懸濁したままである、請求項１７１～１８２のいずれか一項に記載の方法。
184. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の約１０％未満の凝結を有する、請求項１７１～１８３のいずれか一項に記載の方法。
185. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤のいずれの凝結も実質的に含まない、請求項１７１～１８４のいずれか一項に記載の方法。
186. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の約１０％未満の断片化を有する、請求項１７１～１８５のいずれか一項に記載の方法。
187. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤のいずれの断片化も実質的に含まない、請求項１７１～１８６のいずれか一項に記載の方法。
188. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の電荷バリアントにおいて約５％未満の変化を有する、請求項１７１～１８７のいずれか一項に記載の方法。
189. 前記粒子の実質的に全てが、前記治療用生物学的製剤の電荷バリアントにおいていずれの変化も実質的に含まない、請求項１７１～１８８のいずれか一項に記載の方法。
190. 前記粒子の実質的に全てが、約０．８０～約１．００の真円度を有する、請求項１７１～１８９のいずれか一項に記載の方法。
191. 前記粒子の実質的に全てが、約１．００の真円度を有する、請求項１７１～１９０のいずれか一項に記載の方法。
192. 前記粒子の実質的に全てが、約７重量％未満の水分を有する、請求項１７１～１９１のいずれか一項に記載の方法。
193. 前記粒子の実質的に全てが、約１０％未満の内部空隙空間を有する、請求項１７１～１９２のいずれか一項に記載の方法。
194. 前記粒子の実質的に全てが、いずれの内部空隙空間も実質的に含まない、請求項１７１～１９３のいずれか一項に記載の方法。
195. 前記粒子の実質的に全てが、約６０重量％超の治療用生物学的製剤を有する、請求項１７１～１９４のいずれか一項に記載の方法。
196. 前記粒子の実質的に全てが、炭水化物、ｐＨ調整剤、塩、キレート剤、界面活性剤、タンパク質安定剤、乳化剤、防腐剤、アミノ酸、酸化防止剤、パラベン、殺菌剤、殺真菌剤、保存剤、又はそれらの組み合わせを更に含む、請求項１７１～１９５のいずれか一項に記載の方法。
197. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも炭水化物及びアミノ酸を更に含む、請求項１７１～１９５のいずれか一項に記載の方法。
198. 前記粒子の実質的に全てが、少なくとも界面活性剤及びアミノ酸を更に含む、請求項１７１～１９５のいずれか一項に記載の方法。
199. 前記粒子の実質的に全てが、少なくともアミノ酸を更に含む、請求項１７１～１９５のいずれか一項に記載の方法。
200. 前記治療用生物学的製剤が、抗体又はその断片である、請求項１７１～１９９のいずれか一項に記載の方法。
201. 前記抗体が、ヒト抗体である、請求項２００に記載の方法。
202. 前記ヒト抗体が、ＩｇＧ抗体である、請求項２０１に記載の方法。
203. 前記抗体が、モノクローナル抗体である、請求項２００、２０１、又は２０２のいずれか一項に記載の方法。
204. 前記液体担体が、非水性である、請求項１７１～２０３のいずれか一項に記載の方法。
205. 前記非水性液体担体が、有機溶媒である、請求項２０４に記載の方法。
206. 前記有機溶媒が、安息香酸ベンジル、ココナッツ油、綿実油、魚油、ブドウ種子油、ヘーゼルナッツ油、水添植物油、オリーブ油、ヤシ種子油、ピーナッツ油、ハッカ油、サフラワー油、ゴマ油、大豆油、ヒマワリ油、クルミ油、トウモロコシ油、アセトン、酢酸エチル、乳酸エチル、ジメチルアセトアミド、ジメチルイソソルビド、ジメチルスルホキシド、グリコフロール、ジグリム、メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル、Ｎ－メチルピロリドン、ペルフルオロデカリン、ポリエチレングリコール、２－ピロリドン、テトラヒドロフルフリルアルコール、ジグリセリド、トリギルセリド、中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、エチルラウレエート、分画植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のトリグリセリド、飽和植物脂肪酸Ｃ８及びＣ１０のプロピレングリコールジエステル（ＰＧＤ）、オレイン酸エチル、カプリン酸エチル、アジピン酸ジブチル、脂肪酸エステル、ヘキサン酸、オクタン酸、トリアセチン、ジエチルグリコールモノエーテル、ガンマ－ブチロラクトン、ユージノール、クローブバッド油、シトラール、リモネン、ポリオキシル４０水添ヒマシ油、ポリオキシル３５ヒマシ油、単純なアルコール、例えば、エタノール、オクタノール、ヘキサノール、デカノール、プロパノール、ブタノール、ガンマ－ブチロラクトン、トコフェロール、オクタ－フルオロプロパン、（ペルフルオロヘキシル）オクタン、ｎ－アセチルトリプトファン、ラウリン酸エチル、カプリル酸メチル、カプリル酸エチル、カプリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、アジピン酸ジメチル、スベリン酸ジブチル、セバシン酸ジエチル、マカデミアナッツ脂肪酸エチル、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、ラウリン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、コハク酸ジエチル、ポリソルベートエステル、エタノールアミン、プロパン酸、シトラール、アニソール、アネトール、ベンズアルデヒド、リナロール、カプロラクトン、フェノール、チオグリセロール、ジメチルアセトアミド、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ソルケタール、イソソルビドジメチルエーテル、ギ酸エチル、酢酸エチルヘキシル、プロピレングリコールジカプリレート、カプリル酸トリグリセリド、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、又はそれらの組み合わせを含む、請求項２０５に記載の方法。
207. 前記非水性液体担体が、少なくとも２つの有機溶媒を含む、請求項２０４に記載の方法。
208. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤の濃度が、約４００ｍｇ／ｍＬ超である、請求項１７１～２０７のいずれか一項に記載の方法。
209. 前記組成物が、約１００ｍＰａ・ｓ未満の粘度を有する、請求項１７１～２０８のいずれか一項に記載の方法。
210. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、可視粒子（ＶＰ）を実質的に含まない、請求項１７１～２０９のいずれか一項に記載の方法。
211. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約１００，０００，０００の約１０μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、請求項１７１～２１０のいずれか一項に記載の方法。
212. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６０００の約１０μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、請求項１７１～２１１のいずれか一項に記載の方法。
213. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、１ｍＬ当たり約０～１ｍＬ当たり約６００の約２５μｍ超の特徴サイズを有する不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）の濃度を有する、請求項１７１～２１２のいずれか一項に記載の方法。
214. 前記組成物が、水性液体中に溶解すると、不溶性サブ可視粒子（ＳｖＰ）を実質的に含まない、請求項１７１～２１３のいずれか一項に記載の方法。
215. 前記水性液体が、水、水性緩衝液、又は生理学的に関連する水性液体である、請求項１７１～２１４のいずれか一項に記載の方法。
216. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した免疫原性を有する、請求項１７１～２１５のいずれか一項に記載の方法。
217. 前記組成物が、実質的に非免疫原性である、請求項１７１～２１６のいずれか一項に記載の方法。
218. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、実質的に類似した毒性を有する、請求項１７１～２１７のいずれか一項に記載の方法。
219. 前記組成物が、実質的に無毒性である、請求項１７１～２１８のいずれか一項に記載の方法。
220. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、改善された薬物動態（ＰＫ）を有する、請求項１７１～２１９のいずれか一項に記載の方法。
221. 少なくとも１つのヒアルロナン分解剤を投与することを更に含む、請求項１７１～２２０のいずれか一項に記載の方法。
222. 前記ヒアルロナン分解剤が、ヒアルロニダーゼである、請求項２２１に記載の方法。
223. 前記ヒアルロナン分解剤が、前記組成物と同時に、逐次的に、又は断続的に投与される、請求項２２１に記載の方法。
224. 前記組成物が、非経口、皮下、経口、表皮、皮内、筋肉内、動脈内、腹腔内、又は静脈内注射によって、それを必要とする対象に投与される、請求項１７１～２２３のいずれか一項に記載の方法。
225. 前記組成物が、皮下注射によって投与される、請求項１７１～２２４のいずれか一項に記載の方法。
226. 前記組成物が、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスによって投与される、請求項１７１～２２５のいずれか一項に記載の方法。
227. 前記シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスが、前記組成物を用いて予め充填されている、請求項２２６に記載の方法。
228. 前記組成物が、シリンジによって投与される、請求項２２６に記載の方法。
229. 前記組成物が、携帯型薬物送達注射デバイスによって投与される、請求項２２６に記載の方法。
230. 前記携帯型薬物送達注射デバイスが、ペン注射器である、請求項２２９に記載の方法。
231. 前記携帯型薬物送達注射デバイスが、自動注射器である、請求項２２９に記載の方法。
232. 前記携帯型薬物送達注射デバイスが、経口投与される液体注射器カプセルである、請求項２２９に記載の方法。
233. 前記組成物が、１８ゲージ～３３ゲージの範囲のゲージを有する針から分配される、請求項１７１～２３２のいずれか一項に記載の方法。
234. 前記組成物が、約７０Ｎ未満の注射力を使用して分配される、請求項１７１～２３３のいずれか一項に記載の方法。
235. 前記注射力が、約４０℃未満での容器閉鎖保管条件下で少なくとも１ヶ月間、実質的に同じままである、請求項１７１～２３４のいずれか一項に記載の方法。
236. 投与される前記組成物が、約２０．０ｍＬ未満である、請求項１７１～２３５のいずれか一項に記載の方法。
237. 投与される前記組成物が、約２．０ｍＬ未満である、請求項１７１～２３６のいずれか一項に記載の方法。
238. 投与される前記組成物が、約０．５ｍＬ未満である、請求項１７１～２３７のいずれか一項に記載の方法。
239. 前記組成物が、投与後、約１０分未満で溶解する、請求項１７１～２３８のいずれか一項に記載の方法。
240. 前記組成物が、投与後、直ちに溶解する、請求項１７１～２３９のいずれか一項に記載の方法。
241. 前記組成物が、１回以上の用量で投与される、請求項１７１～２４０のいずれか一項に記載の方法。
242. 前記対象が、哺乳動物である、請求項１７１～２４１のいずれか一項に記載の方法。
243. 前記対象が、ヒトである、請求項１７１～２４２のいずれか一項に記載の方法。
244. 前記組成物が、少なくとも１つの治療用生物学的製剤を可溶性形態で含む水性組成物と比較して、前記治療用生物学的製剤の改善された安定性を有する、請求項１７１～２４３のいずれか一項に記載の方法。
245. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、少なくとも１ヶ月間安定である、請求項１７１～２４４のいずれか一項に記載の方法。
246. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、少なくとも３ヶ月間安定である、請求項１７１～２４５のいずれか一項に記載の方法。
247. 前記組成物中の前記治療用生物学的製剤が、４０℃で少なくとも３ヶ月間安定である、請求項１７１～２４６のいずれか一項に記載の方法。
248. 薬学的に有効な組成物であって、薬学的に許容される液体担体中に懸濁した粒子であって、前記粒子が、
     第１の治療用生物学的製剤又はその塩を含む第１の複数の粒子、
     第２の治療用生物学的製剤又はその塩を含む第２の複数の粒子を含む、粒子と、
     凝集剤と、を含み、前記組成物中の前記凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、
     前記組成物中の前記第１及び第２の治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物。
249. 前記第１の複数の粒子が、前記第２の治療用生物学的製剤を含まない、請求項２４８に記載の組成物。
250. 前記第２の複数の粒子が、前記第１の治療用生物学的製剤を含まない、請求項２４８又は２４９に記載の組成物。
251. 前記第１の治療用生物学的製剤が、リツキシマブである、請求項２４８～２５０のいずれか一項に記載の組成物。
252. 前記第２の治療用生物学的製剤が、トラスツズマブである、請求項２４８～２５１のいずれか一項に記載の組成物。
253. キットであって、シリンジ又は携帯型薬物送達注射デバイスと、組成物であって、
     薬学的に許容される液体担体中に懸濁した複数の粒子であって、前記粒子の実質的に全てが、少なくとも１つの治療用生物学的製剤又はその塩を含む、複数の粒子と、
     凝集剤と、を含み、
     前記組成物中の前記凝集剤の濃度が、約５０ｍｇ／ｍＬ未満であり、前記組成物中の前記治療用生物学的製剤又はその塩の濃度が、約２５０ｍｇ／ｍＬ超である、組成物と、を含む、キット。
     

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