JP2548728B2 - Ｄｎａ切断法 - Google Patents
Ｄｎａ切断法Info
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- dna
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- dna cleavage
- cleaving
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Links
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Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明はDNA（デオキシリボ核酸）の新規な切断法に
関するものであり、本発明は遺伝子操作等に用い得る特
定のＡ−Ｔ（アデニン−チミン）/G−Ｃ（グアニン−シ
トシン）分率を有するDNAの製造法として有利に適用し
得る同方法に関する。
関するものであり、本発明は遺伝子操作等に用い得る特
定のＡ−Ｔ（アデニン−チミン）/G−Ｃ（グアニン−シ
トシン）分率を有するDNAの製造法として有利に適用し
得る同方法に関する。
従来DNAの切断法として制限酵素を用いる方法以外に
は超音波照射法のみが行われている。これは溶液中のDN
Aに対して数十MHzの超音波を照射して、DNAを切断する
方法である。
は超音波照射法のみが行われている。これは溶液中のDN
Aに対して数十MHzの超音波を照射して、DNAを切断する
方法である。
従来の超音波によるDNAの切断法によれば、DNAの切断
箇所はほぼ等間隔になつており、Ａ−T,G−Ｃの塩基対
の含有量は全く制御できない。したがつて、遺伝子操作
に用いるDNAとしては、やはり特殊な制限酵素を用いて
所定の塩基対含有量を有するように切断されたものを得
るしかない。
箇所はほぼ等間隔になつており、Ａ−T,G−Ｃの塩基対
の含有量は全く制御できない。したがつて、遺伝子操作
に用いるDNAとしては、やはり特殊な制限酵素を用いて
所定の塩基対含有量を有するように切断されたものを得
るしかない。
本発明はこのような現状に鑑み、任意のＡ−T,G−Ｃ
の塩基対分率（Ａ−Ｔ対含有量/G−Ｃ対含有量）を有す
るDNAを得ることのできる新規なDNA切断法を提供するこ
とを目的とするものである。
の塩基対分率（Ａ−Ｔ対含有量/G−Ｃ対含有量）を有す
るDNAを得ることのできる新規なDNA切断法を提供するこ
とを目的とするものである。
本発明は、DNA（デオキシリボ核酸）の構成要素であ
る塩基対Ａ−Ｔ（アデニン−チミン）またはＧ−Ｃ（グ
アニン−シトシン）に特有の光吸収波長に等しい波長の
レーザー光をDNAに照射することにより該DNAを切断する
ことを特徴とするDNA切断法である。
る塩基対Ａ−Ｔ（アデニン−チミン）またはＧ−Ｃ（グ
アニン−シトシン）に特有の光吸収波長に等しい波長の
レーザー光をDNAに照射することにより該DNAを切断する
ことを特徴とするDNA切断法である。
本発明はDNAの塩基対Ａ−ＴまたはＧ−Ｃの光吸収極
大に注目し、Ａ−ＴまたはＧ−Ｃのどちらか一方を含む
光吸収端の波長に合わせた、すなわち切断したい結合に
吸収され易い波長のレーザー光をDNAに照射する。これ
によりＡ−ＴまたはＧ−Ｃの一方が選択的に切断されて
任意長のＡ−T,G−C,塩基対を含むDNA、すなわち任意の
塩基対分率を有するDNAを製造するものである。
大に注目し、Ａ−ＴまたはＧ−Ｃのどちらか一方を含む
光吸収端の波長に合わせた、すなわち切断したい結合に
吸収され易い波長のレーザー光をDNAに照射する。これ
によりＡ−ＴまたはＧ−Ｃの一方が選択的に切断されて
任意長のＡ−T,G−C,塩基対を含むDNA、すなわち任意の
塩基対分率を有するDNAを製造するものである。
本発明のレーザー光を得るシステムとしては、例えば
エキシマレーザー、色素レーザー、KDPのような高周波
変換素子を組合せたシステムを用いることが有効であ
る。
エキシマレーザー、色素レーザー、KDPのような高周波
変換素子を組合せたシステムを用いることが有効であ
る。
DNA中のＡ−Ｔ対及びＧ−Ｃ対の光吸収スペクトルは
第２図に実線（Ａ−Ｔ）及び破線（Ｇ−Ｃ）で示すよう
になつている。第３図の左部分に模式的に示すようにDN
Aは側鎖上の糖の部分に塩基A,G,C,Tが結合し、これらは
Ａ−T,G−Ｃの対（塩基対）をなすように二重らせん構
造をとつている。このようにＧ−Ｃ対の存在するDNA主
鎖に、Ｇ−Ｃ対の紫外線吸収波長290nmに同調したレー
ザー光を照射すると、該DNAにおいてＧ−Ｃ対が集団化
していてＡ−Ｔ対の影響を受けにくい中央部分が確率的
に最も切断され易いので、第３図の右部分のようにＧ−
Ｃ対を選択的に切断した形で、DNA主鎖が切断される。
Ａ−Ｔ対の選択的切断も全く同様であつて、Ａ−Ｔ対の
吸収波長に同調するレーザー光を照射することにより可
能である。
第２図に実線（Ａ−Ｔ）及び破線（Ｇ−Ｃ）で示すよう
になつている。第３図の左部分に模式的に示すようにDN
Aは側鎖上の糖の部分に塩基A,G,C,Tが結合し、これらは
Ａ−T,G−Ｃの対（塩基対）をなすように二重らせん構
造をとつている。このようにＧ−Ｃ対の存在するDNA主
鎖に、Ｇ−Ｃ対の紫外線吸収波長290nmに同調したレー
ザー光を照射すると、該DNAにおいてＧ−Ｃ対が集団化
していてＡ−Ｔ対の影響を受けにくい中央部分が確率的
に最も切断され易いので、第３図の右部分のようにＧ−
Ｃ対を選択的に切断した形で、DNA主鎖が切断される。
Ａ−Ｔ対の選択的切断も全く同様であつて、Ａ−Ｔ対の
吸収波長に同調するレーザー光を照射することにより可
能である。
実施例１ 第１図に示すように合成石英製のセル１中のDNA水溶
液４をスターラー２及び３で撹拌しながら、該DNA水溶
液４に、レーザーシステム５としてエキシマレーザを用
いて波長290nmのレーザー光６を照射することにより、
塩基対Ｇ−Ｃを選択的に切断し、所望のＡ−T/G−Ｃ分
率を有するDNAを得た。
液４をスターラー２及び３で撹拌しながら、該DNA水溶
液４に、レーザーシステム５としてエキシマレーザを用
いて波長290nmのレーザー光６を照射することにより、
塩基対Ｇ−Ｃを選択的に切断し、所望のＡ−T/G−Ｃ分
率を有するDNAを得た。
本発明はレーザー光照射によりDNAの塩基対Ａ−Ｔま
たはＧ−Ｃを選択的に切断できるので所望のＡ−T/G−
Ｃ分率を有するDNAに切断することができる。
たはＧ−Ｃを選択的に切断できるので所望のＡ−T/G−
Ｃ分率を有するDNAに切断することができる。
第１図は本発明のDNA切断法を実施するための装置を示
す説明図である。 第２図はDNAのＡ−Ｔ対及びＧ−Ｃ対の光吸収スペクト
ル図であり、第３図は本発明によるDNAのＧ−Ｃ対の選
択的切断を模式的に示した図である。
す説明図である。 第２図はDNAのＡ−Ｔ対及びＧ−Ｃ対の光吸収スペクト
ル図であり、第３図は本発明によるDNAのＧ−Ｃ対の選
択的切断を模式的に示した図である。
Claims (1)
- 【請求項１】DNA（デオキシリボ核酸）の構成要素であ
る塩基対Ａ−Ｔ（アデニン−チミン）またはＧ−Ｃ（グ
アニン−シトシン）に特有の光吸収波長に等しい波長の
レーザー光をDNAに照射することにより該DNAを切断する
ことを特徴とするDNA切断法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62131300A JP2548728B2 (ja) | 1987-05-29 | 1987-05-29 | Ｄｎａ切断法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62131300A JP2548728B2 (ja) | 1987-05-29 | 1987-05-29 | Ｄｎａ切断法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63296691A JPS63296691A (ja) | 1988-12-02 |
| JP2548728B2 true JP2548728B2 (ja) | 1996-10-30 |
Family
ID=15054742
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62131300A Expired - Lifetime JP2548728B2 (ja) | 1987-05-29 | 1987-05-29 | Ｄｎａ切断法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2548728B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10162176B4 (de) * | 2000-12-13 | 2006-03-23 | Institut für Physikalische Hochtechnologie e.V. | Verfahren zum simultanen positionsspezifischen Schneiden von DNA |
-
1987
- 1987-05-29 JP JP62131300A patent/JP2548728B2/ja not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 欧州特許公開１８２３２０ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS63296691A (ja) | 1988-12-02 |
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