JP3533392B1

JP3533392B1 - 皮膚外用剤

Info

Publication number: JP3533392B1
Application number: JP2003087733A
Authority: JP
Inventors: 欣也高垣; 雄史三井
Original assignee: Toyo Shinyaku Co Ltd
Current assignee: Toyo Shinyaku Co Ltd
Priority date: 2003-03-27
Filing date: 2003-03-27
Publication date: 2004-05-31
Anticipated expiration: 2023-03-27
Also published as: JP2004292378A

Abstract

【要約】【課題】プロアントシアニジンによる生体への効果が
損なわれず、さらにプロアントシアニジンが有するタン
パク質の収斂性に関する問題を解決した皮膚外用剤を提
供すること。【解決手段】本発明の皮膚外用剤は、プロアントシア
ニジンおよび平均分子量７，０００以下のタンパク質分
解ペプチドを含有する。このプロアントシアニジンは、
５量体以上のプロアントシアニジン１重量部に対し、２
〜４量体のプロアントシアニジンを１重量部以上の割合
で含有することが好ましい。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、プロアントシアニ
ジンを含有する皮膚外用剤に関し、さらに詳細には、優
れた肌質の改善効果を有する皮膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】プロアントシアニジンは、フラバン−３
−オールおよび／またはフラバン−３，４ジオールを構
成単位とする重合度が２以上の縮重合体からなる縮合型
タンニンであり、古くから肌の収斂性を高め、整肌効果
を目的として使用されていた。近年、プロアントシアニ
ジンは、抗酸化作用や美白効果などの種々の活性を有す
ることから、食品や化粧品への応用が図られている（特
許文献１および２）。例えば、タンパク質を配合した化
粧料にも応用されている（特許文献３〜６）。また、特
に溶液中におけるタンニンとタンパク質の安定性を高め
る種々の改良もなされている（特許文献７）。

【０００３】一方、プロアントシアニジンは、タンパク
質との結合能力が高い性質を持つため、ゼラチン高融点
ゲルの製造やコラーゲンの架橋剤としても用いられてき
ている（特許文献８および９）。

【０００４】しかし、プロアントシアニジンはタンパク
質との結合能力が極めて高いため、プロアントシアニジ
ンの抽出方法や植物種などによっては、タンパク質と結
合して凝集沈殿や懸濁を生じる。そのため、製剤化が困
難なだけでなく、コラーゲンやプロアントシアニジンが
沈殿し、それぞれの有する生体への効果が非常に低下す
るという問題から、製剤や化粧品への応用範囲が限られ
ていた。

【０００５】

【特許文献１】特開昭６１−１６９８２号公報

【特許文献２】特開平２−１３４３０９号公報

【特許文献３】特開平１１−７５７０８号公報

【特許文献４】特開２０００−６０４８２号公報

【特許文献５】特開平６−３３６４２３号公報

【特許文献６】特開２００２−２３８４９７号公報

【特許文献７】特開２００２−５１７３４号公報

【特許文献８】特開平２−１６３０４６号公報

【特許文献９】特開２００１−８６３４号公報

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、プロアント
シアニジンによる生体への効果が損なわれず、さらにプ
ロアントシアニジンが有するタンパク質の収斂性に関す
る問題を解決した皮膚外用剤を提供することを目的とす
る。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者等は、驚くべき
ことに、２〜４量体のプロアントシアニジンと一定の分
子量のペプチドとを組み合わせることによって、タンパ
ク質の凝集沈殿が起こらず、その結果、それぞれの効果
が相殺されずに得られることを見出して、本発明を完成
した。

【０００８】すなわち、本発明は、プロアントシアニジ
ンおよび平均分子量７，０００以下のタンパク質分解ペ
プチドを含有する、皮膚外用剤を提供し、該プロアント
シアニジンは、２〜４量体のプロアントシアニジンを含
有する。

【０００９】好ましい実施態様において、上記プロアン
トシアニジンは、５量体以上のプロアントシアニジン１
重量部に対し、２〜４量体のプロアントシアニジンを１
重量部以上の割合で含有する。

【００１０】さらに好ましい実施態様では、上記ペプチ
ドは、コラーゲン由来のペプチドである。

【００１１】

【発明の実施の形態】以下、本発明の皮膚外用剤につい
て説明する。なお、以下に説明する構成は、本発明を限
定するものでなく、本発明の趣旨の範囲内で種々改変す
ることができることは当業者に明らかである。

【００１２】本発明の皮膚外用剤に用いられるプロアン
トシアニジンとは、フラバン−３−オールおよび／また
はフラバン−３，４−ジオールを構成単位とする重合度
が２以上の縮重合体からなる化合物群をいう。

【００１３】このプロアントシアニジンとしては、重合
度の低い縮重合体が多く含まれるものが好ましく用いら
れる。重合度の低い縮重合体としては、重合度が２〜３
０の縮重合体（２〜３０量体）が好ましく、重合度が２
〜１０の縮重合体（２〜１０量体）がより好ましく、重
合度が２〜４の縮重合体（２〜４量体）が特に好まし
い。この重合度が２〜４の縮重合体を、本明細書ではＯ
ＰＣ（オリゴメリック・プロアントシアニジン；oligom
eric proanthocyanidin）という。プロアントシアニジ
ンは、ポリフェノール類の一種で、植物が作り出す強力
な抗酸化物質であり、植物の葉、樹皮、果物の皮もしく
は種の部分に集中的に含まれている。プロアントシアニ
ジン、特にＯＰＣは、具体的には、松、樫、山桃などの
樹皮、ブドウ、ブルーベリー、イチゴ、アボガド、ニセ
アカシア、コケモモの果実もしくは種子、大麦、小麦、
大豆、黒大豆、カカオ、小豆、トチの実の殻、ピーナッ
ツの薄皮、イチョウ葉などに含まれている。また、西ア
フリカのコーラナッツ、ペルーのラタニアの根、日本の
緑茶にも、ＯＰＣが含まれることが知られている。ＯＰ
Ｃは、ヒトの体内では、生成することのできない物質で
ある。

【００１４】本発明の皮膚外用剤に含有されるプロアン
トシアニジンとしては、上記の樹皮、果実もしくは種子
の抽出物のような医薬品、医薬部外品、または化粧料の
原料を使用することができる。特に、松樹皮の抽出物を
用いることが好ましい。松樹皮は、プロアントシアニジ
ンの中でもＯＰＣに富むため、プロアントシアニジンの
原料として好ましく用いられる。

【００１５】以下、ＯＰＣを豊富に含む松樹皮の抽出物
を例に挙げて、プロアントシアニジンの調製方法を説明
する。

【００１６】松樹皮抽出物としては、フランス海岸松
（Pinus Martima）、カラマツ、クロマツ、アカマツ、
ヒメコマツ、ゴヨウマツ、チョウセンマツ、ハイマツ、
リュウキュウマツ、ウツクシマツ、ダイオウマツ、シロ
マツ、カナダのケベック地方のアネダなどのマツ目に属
する植物の樹皮抽出物が好ましく用いられる。中でも、
フランス海岸松（Pinus Martima）の樹皮抽出物が好ま
しい。

【００１７】フランス海岸松は、南仏の大西洋沿岸の一
部に生育している海洋性松をいう。このフランス海岸松
の樹皮は、プロアントシアニジン、有機酸、ならびにそ
の他の生理活性成分などを含有し、その主要成分である
プロアントシアニジンに、活性酸素を除去する強い抗酸
化作用があることが知られている。

【００１８】松樹皮抽出物は、上記の松樹皮を水または
有機溶媒で抽出して得られる。水を用いる場合には、温
水または熱水が用いられる。抽出に用いる有機溶媒とし
ては、食品あるいは薬剤の製造に許容される有機溶媒が
用いられ、例えば、メタノール、エタノール、１−プロ
パノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブ
タノール、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロ
ピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレング
リコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチ
ル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、
食用油脂、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、お
よび１，１，２−トリクロロエテンが挙げられる。これ
らの水および有機溶媒は単独で用いてもよいし、組合わ
せて用いてもよい。特に、熱水、含水エタノール、およ
び含水プロピレングリコールが好ましく用いられる。

【００１９】松樹皮からプロアントシアニジンを抽出す
る方法は、特に限定されないが、例えば、加温抽出法、
超臨界流体抽出法などが用いられる。

【００２０】超臨界流体抽出法は、物質の気液の臨界点
（臨界温度、臨界圧力）を超えた状態の流体である超臨
界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体とし
ては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素
（笑気ガス）などが用いられ、二酸化炭素が好ましく用
いられる。

【００２１】超臨界流体抽出法では、目的成分を超臨界
流体によって抽出する抽出工程と、目的成分と超臨界流
体とを分離する分離工程からなる。分離工程では、圧力
変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、または
吸着剤・吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよ
い。

【００２２】また、エントレーナー添加法による超臨界
流体抽出を行ってもよい。この方法は、超臨界流体に、
例えば、エタノール、プロパノール、ｎ−ヘキサン、ア
セトン、トルエン、その他の脂肪族低級アルコール類、
脂肪族炭化水素類、芳香族炭化水素類、またはケトン類
を２〜２０Ｗ／Ｖ％程度添加し、得られた抽出流体で超
臨界流体抽出を行うことによって、ＯＰＣ、カテキン類
（後述）などの目的とする抽出物の抽出溶媒に対する溶
解度を飛躍的に上昇させる、あるいは分離の選択性を増
強させる方法であり、効率的に松樹皮抽出物を得る方法
である。

【００２３】超臨界流体抽出法は、比較的低い温度で操
作できるため、高温で変質・分解する物質にも適用でき
るという利点；抽出流体が残留しないという利点；およ
び溶媒の循環利用が可能であり、脱溶媒工程などが省略
でき、工程がシンプルになるという利点がある。

【００２４】また、松樹皮からの抽出は、上記の方法以
外に、液体二酸化炭素回分法、液体二酸化炭素還流法、
超臨界二酸化炭素還流法などにより行ってもよい。

【００２５】松樹皮からの抽出は、複数の抽出方法を組
み合わせてもよい。複数の抽出方法を組み合わせること
により、種々の組成の松樹皮抽出物を得ることが可能と
なる。

【００２６】本発明の皮膚外用剤に用いられる松樹皮抽
出物は、具体的には、以下のような方法により調製され
るが、これは例示であり、この方法に限定されない。

【００２７】フランス海岸松の樹皮１ｋｇを、塩化ナト
リウムの飽和水溶液３Ｌに入れ、１００℃にて３０分間
抽出し、抽出液を得る（抽出工程）。その後、抽出液を
濾過し、得られる不溶物を塩化ナトリウムの飽和溶液５
００ｍｌで洗浄し、洗浄液を得る（洗浄工程）。この抽
出液と洗浄液を合わせて、松樹皮の粗抽出液を得る。

【００２８】次いで、この粗抽出液に酢酸エチル２５０
ｍｌを添加して分液し、酢酸エチル層を回収する工程を
５回行う。回収した酢酸エチル溶液を合わせて、無水硫
酸ナトリウム２００ｇに直接添加して脱水する。その
後、この酢酸エチル溶液を濾過し、濾液を元の５分の１
量になるまで減圧濃縮する。濃縮された酢酸エチル溶液
を２Ｌのクロロホルムに注ぎ、攪拌して得られる沈殿物
を濾過により回収する。その後、この沈殿物を酢酸エチ
ル１００ｍｌに溶解した後、再度１Ｌのクロロホルムに
添加して沈殿させる操作を２回繰り返す洗浄工程を行
う。この方法により、例えば、２〜４量体のＯＰＣを２
０重量％以上含み、かつカテキン類を５重量％以上含有
する、約５ｇの松樹皮抽出物が得られる。

【００２９】上記松樹皮のような原料植物に由来する抽
出物は、ＯＰＣを乾燥重量換算で好ましくは２０重量％
以上、より好ましくは３０重量％以上含有する。このよ
うにＯＰＣを高い割合で含有する原料として、松樹皮抽
出物が好ましく用いられる。

【００３０】なお、上記のように水やエタノールを用い
て植物体から抽出した抽出物中には、５量体以上のプロ
アントシアニジンも含有するが、プロアントシアニジン
の極性溶媒への溶解度から、そのほとんどは１０〜２０
量体以下である。

【００３１】上記松樹皮抽出物のようにＯＰＣを含有す
るプロアントシアニジンは、コラーゲンペプチドと凝集
沈殿や懸濁を生じにくい。ＯＰＣを多く含有するほど沈
殿は生じにくく、通常は２０重量％以上、好ましくは３
０重量％以上、より好ましくは５０重量％以上含有する
プロアントシアニジンが用いられる。特に、５量体以上
のプロアントシアニジン１重量部に対し、ＯＰＣを１重
量部以上の割合で含有するプロアントシアニジンが好ま
しい。５量体以上のプロアントシアニジンが含有されて
いるにもかかわらず、凝集沈殿が起こらない理由は明ら
かではないが、上記所定の比率以上でＯＰＣを含有する
場合は、プロアントシアニジンとタンパク質との凝集沈
殿や懸濁を防止することができる。

【００３２】上記植物抽出物には、プロアントシアニジ
ン、特にＯＰＣとともにカテキン（catechin）類が上記
原料植物抽出物中に５重量％以上含まれていることが好
ましい。カテキン類とは、ポリヒドロキシフラバン−３
−オールの総称である。カテキン類としては、（＋）−
カテキン、（−）−エピカテキン、（＋）−ガロカテキ
ン、（−）−エピガロカテキン、エピガロカテキンガレ
ート、エピカテキンガレートなどが知られている。上記
松樹皮のような原料植物由来の抽出物からは、狭義のカ
テキンといわれている（＋）−カテキンの他、ガロカテ
キン、アフゼレキン、ならびに（＋）−カテキンまたは
ガロカテキンの３−ガロイル誘導体が単離されている。
カテキン類には、発癌抑制作用、動脈硬化予防作用、脂
肪代謝異常の抑制作用、血圧上昇抑制作用、血小板凝集
抑制作用、抗アレルギー作用、抗ウイルス作用、抗菌作
用、虫歯予防作用、口臭防止作用、腸内細菌叢正常化作
用、活性酸素やフリーラジカルの消去作用、抗酸化作用
などがあることが知られている。カテキン類には、血糖
の上昇を抑制する抗糖尿病効果があることが知られてい
る。カテキン類は、ＯＰＣの存在下で水溶性が増すと同
時に、ＯＰＣを活性化する性質があり、ＯＰＣとともに
摂取することによって、ＯＰＣの作用を増強する。

【００３３】カテキン類は、上記原料植物抽出物に含ま
れていても、タンパク質と反応せず、そしてＯＰＣの溶
解性や機能を向上させるため、プロアントシアニジン１
重量部に対し、０．１重量部以上含有されていることが
好ましい。より好ましくは、ＯＰＣを２０重量％以上含
有する原料植物抽出物に、カテキン類が５重量％以上含
有されるように調製される。例えば、松樹皮抽出物のカ
テキン類含量が５重量％未満の場合、５重量％以上とな
るようにカテキン類を添加してもよい。カテキン類を５
重量％以上含有し、かつＯＰＣを２０重量％以上含有す
る松樹皮抽出物を用いることが最も好ましい。

【００３４】プロアントシアニジン、特にＯＰＣは、上
述のように抗酸化物質であるため、美白効果、しわの防
止効果、およびアトピー性皮膚炎などに対する抗炎症効
果が特に高く、さらに縮合型タンニンとしての効果、す
なわち肌の引き締め効果によるたるみの防止などの効果
も得られる。

【００３５】さらにＯＰＣは、抗酸化作用のほか、ビタ
ミンＣの保護効果もあるため、肌におけるコラーゲン産
生能を増強し、優れた肌質改善効果をも有する。

【００３６】本発明の皮膚外用剤は、プロアントシアニ
ジンを、好ましくは組成物中に乾燥重量換算で０．００
００１重量％〜５重量％、より好ましくは０．００１重
量％〜２重量％、さらに好ましくは０．０１重量％〜１
重量％含有する。

【００３７】本発明の皮膚外用剤のもう一つの必須成分
は、タンパク質を分解して得られる平均分子量が７，０
００以下のペプチド（本明細書において、タンパク質分
解ペプチドという）である。タンパク質分解ペプチド
は、有機合成によって得られたペプチドであってもよ
い。タンパク質分解ペプチドとしては、各種の動植物性
タンパク質を酸、アルカリ、または酵素を用いて分解し
たものであれば特に限定されるものではない。原料とな
るタンパク質としては、例えば、牛、豚、鶏などの畜肉
類、魚類、獣乳、卵などに由来する動物性タンパク質；
例えば、大豆、小麦、トウモロコシ、えんどう豆などに
由来する植物性タンパク質が挙げられる。特に、原料タ
ンパク質としてはコラーゲンが好ましく、そしてタンパ
ク質分解ペプチドとしては、その分解物であるコラーゲ
ンペプチドが最も好ましい。ペプチドに分解されたコラ
ーゲンは、べたつきのない使用感が得られるだけでな
く、優れた保湿効果も有する。

【００３８】コラーゲンは、動物の結合組織を構成する
主要タンパク質であり、骨、腱、皮膚、血管壁などに多
く含まれる。分子内に１または複数の３重らせん構造を
有し、構成するポリペプチド鎖のアミノ酸配列が異なる
種々のタイプが存在する。コラーゲンの変性物であるゼ
ラチンは、コラーゲンを含む原料を温（熱）水抽出する
ことにより得られる分子量３０万から数万程度の水溶性
タンパク質であり、アルカリ処理ゼラチン（等電点４．
８〜５．３）と酸処理ゼラチン（等電点７〜９）とがあ
る。

【００３９】コラーゲンまたはゼラチンからのコラーゲ
ンペプチドの具体的な調製方法を、以下に説明する。ま
ず、牛、豚などの皮または骨を、アルカリ溶液に２〜３
ヶ月浸漬するアルカリ処理または希塩酸などに短期間浸
漬する酸処理を施して、原料に含まれる不純物を除去
し、かつ抽出を容易にするための前処理を行う。例え
ば、原料が牛骨である場合は、骨の中にリン酸カルシウ
ムなどの無機質が含まれているため、予め希塩酸に漬け
て無機質を除去し、これを温（熱）水抽出することによ
りゼラチンを得る。温（熱）水抽出は、一般には、最初
の抽出温度は５０〜６０℃で、２回目以降は抽出温度を
徐々に上げ、最終的には煮沸させる。次いで、得られた
ゼラチンを、通常用いられる酸あるいは酵素で加水分解
することにより、コラーゲンペプチドを得ることができ
る。

【００４０】こうして得られたコラーゲンペプチドは、
平均分子量が約７,０００以下、好ましくは約６，００
０以下である。このような分子量を有するコラーゲンペ
プチドのうち、ＯＰＣとともに溶液中で安定に溶解し、
そして本発明において皮膚外用剤としての効果を得るた
めには、分子量が約２００以上、好ましくは約３，００
０以上、より好ましくは約５，０００以上のペプチドを
用いる。平均分子量が７，０００より大きくなると、高
分子のプロアントシアニジン（１０〜３０量体）が結合
し、沈殿や懸濁を生じやすくなる。

【００４１】このような分子量のコラーゲンペプチド
は、市販のものを容易に入手することができる。例え
ば、動物性コラーゲン由来のコラーゲンペプチドとして
は、ニッピペプタイドＰＢＦ、ニッピペプタイドＰＲＡ
（いずれも（株）ニッピ製）、ＳＣＰ−５０００、ＳＣ
Ｐ−３１００（いずれも新田ゼラチン（株）製）、コラ
ーゲンペプチドＤＳ（協和ハイフーズ株式会社製）、フ
ァルコニックスＣＴＰ（一丸ファルコス株式会社製）な
どが挙げられる。このような動物由来のコラーゲンペプ
チド以外では、動物性コラーゲンとアミノ酸組成が類似
しているものが好ましく、例えば、コラーゲン類似ペプ
チドとして、ニンジン（Daucus carota L.）由来ペプチ
ドが挙げられる。

【００４２】本発明の皮膚外用剤は、タンパク質分解ペ
プチド、好ましくはコラーゲンペプチドを、組成物中に
乾燥重量換算で好ましくは０．００００１重量％〜１０
重量％、より好ましくは０．０００１重量％〜５重量％
含有する。

【００４３】本発明の皮膚外用剤には、上記プロアント
シアニジンおよびタンパク質分解ペプチド以外に、医薬
部外品、化粧料などに通常使用される他の成分を、該皮
膚外用剤の効果を損なわない範囲で含有してもよい。こ
のような成分としては、例えば水、他の薬効成分、他の
油剤、保湿剤、界面活性剤、紫外線吸収剤、吸収促進
剤、香料、色素、保存剤、増粘剤、キレート剤、防腐防
黴剤などを挙げることができる。ここで他の薬効成分
としては、活性酸素除去剤、抗酸化剤、消炎鎮痛剤、抗
ヒスタミン剤、止痒剤、殺菌剤、ビタミン剤、ホルモン
剤などが挙げられる。

【００４４】また、プロアントシアニジンの安定性を高
める目的で、酸化防止剤を添加しても良い。これによ
り、肌のタンパク質や油脂類の酸化を防止し、肌質を改
善および保護する効果を得ることができる。

【００４５】酸化防止剤としては、ビタミンＡなどのカ
ロテノイド類、ビタミンＢ類、アスコルビン酸、ビタミ
ンＥ、およびこれらの誘導体またはこれらの塩、Ｌ−シ
ステイン及びこれらの誘導体やその塩、リボフラビン、
ＳＯＤ、マンニトール、ハイドロキノン、トリプトファ
ン、ヒスチジン、ケルセチン、没食子酸およびその誘導
体、ＢＨＴ、ＢＨＡ、ならびにボタンピ抽出物、トマト
抽出物、パセリ抽出物、メリッサ抽出物、オウゴン抽出
物などの植物抽出物が挙げられる。

【００４６】この中でも、アスコルビン酸は、プロアン
トシアニジンの安定性を高めるだけでなく、肌へ相乗的
に効果を発揮し、肌質の改善効果（例えば、ハリやツヤ
が良くなる効果）および血管保護効果も高める。アスコ
ルビン酸を添加する場合は、プロアントシアニジンに対
して、重量比で、好ましくは１：０．１〜５０、より好
ましくは１：０．２〜２０となるように、本発明の皮膚
外用剤に含有され得る。なお、アスコルビン酸の量は、
上記比より多くてもかまわない。

【００４７】本発明の皮膚外用剤は、通常用いられる方
法により、プロアントシアニジンおよびタンパク質分解
ペプチドと他の成分とを混合して調製することができ、
医薬品、医薬部外品、化粧品、トイレタリー用品として
使用できる。例えば、化粧水、化粧クリーム、乳液、ク
リーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリーム、シャン
プー、ヘアリンス、トリートメント、ボディシャンプ
ー、洗顔剤、石鹸、ファンデーション、白粉、口紅、リ
ップグロス、頬紅、アイシャドー、整髪料、育毛剤、水
性軟膏、油性軟膏、目薬、アイウォッシュ、歯磨剤、マ
ウスウォッシュ、シップ、ゲルなどが挙げられる。ま
た、シップやゲルのような担体や架橋剤に保持・吸収さ
せ、局部へ貼付するなどの方法により、局所的な長時間
投与を行うこともできる。

【００４８】本発明の皮膚外用剤の一日の適用量は、特
に限定されず、好ましくは、プロアントシアニジンとし
て０．００００１ｇ〜１ｇの範囲内である。この範囲内
のプロアントシアニジンに対して適切なタンパク質分解
ペプチドの量は、好ましくは０．０００１ｇ〜０．１ｇ
である。

【００４９】本発明の皮膚外用剤は、適切な量を適用し
た場合、肌質の改善効果および血流改善効果を有する。
特に、ＯＰＣが乾燥重量換算で２０重量％以上含有され
る抽出物をプロアントシアニジンとして用いた場合、特
に優れた効果が得られる。

【００５０】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、
本発明がこの実施例により制限されないことはいうまで
もない。

【００５１】（プロアントシアニジンの調製）松樹皮抽
出物（２〜４量体：４０重量％、５量体以上：８．７重
量％、カテキン：５.１重量％、商標名：フラバンジェ
ノール、株式会社東洋新薬）２０ｇを、Ｓｅｐｈａｄｅ
ｘＬＨ−２０（ファルマシアバイオテク株式会社製）
に供して分離し、乾燥粉末重量で７．６ｇの２〜４量体
および１．６ｇの５量体以上のプロアントシアニジンを
回収した。得られた５量体以上のプロアントシアニジン
１ｇを、上記の松樹皮抽出物の粉末２ｇと混合し、５量
体以上のプロアントシアニジンを多く含む松樹皮抽出物
（２〜４量体：２７重量％、５量体以上：３９重量％、
カテキン１．７重量％）を調製した。これらの松樹皮抽
出物を、最終濃度が０．２重量％となるように水溶液へ
溶解した。

【００５２】なお、ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ−２０によ
る分離は、以下の条件で２回行った。まず、水で膨潤さ
せたＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ−２０をカラム体積で５０
０ｍＬとなるように５０×５００ｍｍのカラムに充填
し、５００ｍＬのエタノールで洗浄した。上記松樹皮抽
出物１０ｇを２００ｍＬのエタノールに溶解し、これを
カラムに通液して吸着させた後、１００〜８０％（ｖ／
ｖ）エタノール−水混合溶媒でグラジエント溶出し、１
００ｍＬずつ分取した。各画分について、シリカゲルク
ロマトグラフィー（ＴＬＣ）により、２〜４量体のＯＰ
Ｃの各標品（２量体：プロアントシアニジンＢ−２（Ｒ
ｆ値：０．６）、３量体：プロアントシアニジンＣ−１
（Ｒｆ値：０．４）、４量体：シンナムタンニンＡ
_２（Ｒｆ値：０．２））を指標として、ＯＰＣの溶出を
検出した。ＴＬＣの条件は、以下のとおりである：ＴＬＣ：シリカゲルプレート（Merck & Co., Inc.製）展開溶媒：ベンゼン／ギ酸エチル／ギ酸（２／７／１）検出試薬：硫酸およびアニスアルデヒド硫酸サンプル量：各１０μＬ

【００５３】ＯＰＣが検出された画分を集め、凍結乾燥
して粉末を得た。次いで、ＯＰＣが検出されなくなった
カラムに、５０％（ｖ／ｖ）水−アセトン混合溶媒１０
００ｍＬを通液し、５量体以上のプロアントシアニジン
を溶出させ、回収した画分を凍結乾燥させて粉末を得
た。

【００５４】（コラーゲンおよびコラーゲンペプチドの
調製）コラーゲン（平均分子量３０万：株式会社高研
製）、ニッピペプタイドＰＡ−１００（平均分子量１
０，０００：株式会社ニッピ製）、コラーゲンペプチド
ＤＳ(平均分子量７，０００：協和ハイフーズ社製)、Ｓ
ＣＰ−５０００（平均分子量５，０００：新田ゼラチン
株式会社製）、ファルコニックスＣＴＰ（平均分子量
３，０００：一丸ファルコス株式会社製）、ニッピペプ
タイドＰＡ−１０（平均分子量１，０００：株式会社ニ
ッピ製）、およびグリシン（分子量７５：和光純薬工業
株式会社製）を用いて、これらのコラーゲン、コラーゲ
ンペプチド、またはアミノ酸が１０．０重量％となるよ
うに水溶液を各１０ｍＬずつ調製した。

【００５５】（実施例１：凝集沈殿評価）上記のように
調製したコラーゲン、コラーゲンペプチド、またはアミ
ノ酸溶液各１ｍＬに、上記プロアントシアニジン溶液１
ｍＬを混合し、１週間室温で放置し、１週間後に沈殿お
よび懸濁の有無を目視により観察した。結果を表１に示
す。

【００５６】

【表１】

【００５７】表１からわかるように、５量体以上のプロ
アントシアニジンと分子量のコラーゲンペプチドまたは
コラーゲンとの混合液では、いずれも懸濁または沈殿が
観察された。これに対して、２〜４量体のプロアントシ
アニジンと分子量７，０００以下のコラーゲンペプチド
またはアミノ酸との混合液では、ほとんど懸濁が見られ
なかった。２〜４量体のプロアントシアニジンを５量体
以上のプロアントシアニジンよりも多く含む松樹皮抽出
物では沈殿が見られなかった。また、平均分子量３０
０，０００のコラーゲンを用いた場合は、ゲル化した固
形分が析出した。このように、２〜４量体のプロアント
シアニジン（ＯＰＣ）またはプロアントシアニジンとし
てＯＰＣを多く含む松樹脂抽出物は、分子量７，０００
以下のコラーゲンペプチドと懸濁または沈殿を生じず、
混合物溶液として安定であることがわかった。

【００５８】（実施例２：血流改善効果および保湿効果
の評価）上記松樹皮抽出物の最終濃度が０．０１重量％
およびコラーゲンペプチドの最終濃度が０．０１重量％
となるように、表２に記載の組み合わせで化粧水１〜８
を調製した。

【００５９】

【表２】

【００６０】２０〜５０歳の健常人１０人を被験者とし
た。まず、各被験者の左右前腕部各４箇所ずつ計８箇所
に２．０ｃｍ平方のマーキングをし、血流計（レーザー
血流画像化装置ＰＩＭ II；ＳｗｅｄｅｎＰｅｒｍｉ
ｅｄ社）を用いて皮下の血流量を測定し、その平均値を
ａとした。測定後、調製した化粧水１〜８を０．１ｍｌ
ずつ各マーキング部位に塗布し、塗布後０．５時間、１
時間、１．５時間、および２時間後に皮下の血流量を測
定し、その平均値をｂとした。得られた各時間における
血流量の平均値から、下記の式を用いて血流改善率を算
出した：血流改善率（％）＝１００×（ｂ−ａ）／ａ結果を図１に示す。

【００６１】また、塗布２時間後に、化粧水塗布部位の
電気伝導率（単位：μｍｈｏ（マイクロモー））を、高
周波伝導度測定装置（ＳＫＩＣＯＮ−２００、ＩＢＳ
社）を用いて測定し、その平均値を算出して保湿性を評
価した。結果を表３に示す。なお、電気伝導率は、水分
量を反映する。

【００６２】

【表３】

【００６３】図１からわかるように、平均分子量が１，
０００、３，０００、５，０００、または１０，０００
のコラーゲンペプチドと２〜４量体の割合が多いプロア
ントシアニジンを含有する松樹皮抽出物とを含有する化
粧水を用いた場合に、高い血流改善効果が得られた。

【００６４】表３より、平均分子量が１，０００、３，
０００、５，０００、または１０，０００のコラーゲン
ペプチドと２〜４量体の割合が多いプロアントシアニジ
ンを含有する松樹皮抽出物とを含有する化粧水は、他の
化粧水に比べて、電気伝導率が高く、比較的高い保湿性
があった。また、平均分子量が１，０００のコラーゲン
ペプチドを用いた場合は、５量体以上の割合が多いプロ
アントシアニジンを含む松樹皮抽出物との混合物であっ
ても、比較的高い保湿効果が得られた。

【００６５】

【発明の効果】本発明の皮膚外用剤は、従来のプロアン
トシアニジンとタンパク質分解ペプチドとの組み合わせ
によって得られるよりも、さらに優れた血流改善効果お
よび保湿効果を有する。本発明の皮膚外用剤は、プロア
ントシアニジンとタンパク質分解ペプチドとの凝集沈殿
が生じにくいため、それぞれの有するその他の作用・効
果も損なわれることなく発揮され得る。

【図面の簡単な説明】

【図１】種々の化粧水塗布後の皮膚における血流改善率
の推移を示すグラフである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 38/00 Ａ６１Ｋ 37/18 (56)参考文献特開昭52−111600（ＪＰ，Ａ) 特開平11−171721（ＪＰ，Ａ) 特開2000−26228（ＪＰ，Ａ) 特開2000−229834（ＪＰ，Ａ) 特開平６−336423（ＪＰ，Ａ) 特開平９−175945（ＪＰ，Ａ) 特開昭61−16982（ＪＰ，Ａ) 特表2003−504402（ＪＰ，Ａ) 国際公開01／032131（ＷＯ，Ａ１) 国際公開96／00561（ＷＯ，Ａ１) ＦＲＡＧＲＡＮＣＥＪＯＵＲＮＡＬ，1984年，Ｎｏ．69，ｐｐ．111− 115. ＦＲＡＧＲＡＮＣＥＪＯＵＲＮＡＬ，2000年，Ｖｏｌ．28，Ｎｏ．２, ｐｐ．27−32. (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 7/00 - 7/50,31/353 A61K 31/7048,38/01

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】プロアントシアニジンおよび平均分子量が
３，０００以上７，０００以下のタンパク質分解ペプチ
ドを含有する皮膚外用剤であって、該プロアントシアニ
ジンが５量体以上のプロアントシアニジン１重量部に対
し、２〜４量体のプロアントシアニジンを１重量部以上
の割合で含有する、皮膚外用剤。
【請求項２】前記ペプチドがコラーゲン由来のペプチド
である、請求項１または２に記載の皮膚外用剤。