JP4958357B2 - 逆ターン模倣物およびそれらに関連する方法 - Google Patents

Description

【０００１】
（技術分野）
本発明は一般に、細胞接着媒介性疾患のインヒビターを含めた逆ターン模倣物に、ならびに逆ターン模倣物の化学ライブラリーに関する。
【０００２】
（発明の背景）
新規な治療についての探索において、リード化合物を作製して最適化するために、製薬産業は、コンビナトリアルケミストリー、並行合成および高処理能力スクリーニングの技術にますます向かっている（Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｉｖｅｒｓｉｔｙ ｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、ＧｏｒｄｏｎおよびＫｅｒｗｉｎ編，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９８；Ｔｈｅ Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ Ｉｎｄｅｘ，Ｂｕｎｉｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９８；Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、ＣｚａｒｎｉｋおよびＤｅＷｉｔｔ編，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，１９９７；Ｈｉｇｈ Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ：Ｔｈｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ Ｂｉｏａｃｔｉｖｅ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ，Ｄｅｖｌｉｎ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９７）。これらの技術は、短期間に数百から数十万以上の化合物のライブラリーを製造し得る。次いで、ライブラリーは、しばしば、高度に自動化された様式で、目的の標的に対してアッセイされて、生物学的に活性な化合物が同定される。化合物の単純な収集物であるライブラリーは、特定のテンプレートの周辺にしっかりと焦点を当てられ得るか、または種々の関連のないテンプレートを含み得る。多くの例では、ライブラリーの多様性は、重要な設計パラメーターである。
【０００３】
基本的レベルで、分子テンプレートまたは骨格についての多様性の点の数、すなわち、構造のバリエーションが導入され得る位置の数は、大きなライブラリーが作製され得る容易さに対して実用的効果を有する。コンビナトリアル技術が用いられる場合、３つの多様性点を含むテンプレートは、各点を誘導体化するために２０の成分が用いられ、そして合計６０の反応が行われるならば、８０００の化合物を生じる（２０³）。しかし、４つの多様性点を有するテンプレートは、合計６０の反応において各点で１５の成分が用いられるならば、５０，０００を超える化合物を生じる（１５⁴）。一般に、大きなライブラリーが、テンプレートについてより効率的に作製され得、誘導体化についてのより多くの可能性を可能にする。
【０００４】
特定の標的についての生物学的に活性な化合物を見出す機会を増やすために、コンホメーション空間および化学的特性（例えば、疎水性および水素結合能力）の両方の範囲にわたるライブラリーを合成することが通常望ましい。同時に、低分子量もしばしば目標である。なぜなら、５００ダルトン未満の化合物は、より高分子量の化合物と比べて好ましい薬物動態特性を有するようであると認められるからである。これらの全ての特徴は、広範な範囲の置換基を支持し、そして合成するのが単純である、小さくコンパクトなテンプレートについての持続した必要性を指摘する。
【０００５】
逆ターンは、３つのクラスのタンパク質二次構造のうちの１つを含み、そして互いに固定された空間的関係において三次（γターン）、四次（βターン）またはより高次（ループ）のアミノ酸側鎖を提示する。ターンは、分子認識事象において重要であることが証明され（Ｒｏｓｅら，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３７：１−１０９，１９８５）、そしてこれらの低分子模倣物における発展しつつある研究分野を生じた（例えば、Ｈａｎｅｓｓｉａｎら，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ５３：１２７８９−１２８５４，１９９７）。多くの模倣物は、生理学的に関係のある側鎖の全ての提示を可能にしない外部ターン模倣物（例えば、Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒら，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２１０：６５６−８，１９８０）またはコンホメーションが融通の利く小さな環式ペプチド誘導体（例えば、Ｖｉｌｅｓら，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２４２：３５２−６２，１９９６）のいずれかであった。しかし、生物学的に活性なタンパク質またはペプチドにおいて見出された逆ターンの二次構造を密接に模倣する非ペプチド性化合物が開発されてきた。例えば、Ｋａｈｎに対する米国特許第５，４７５，０８５号、同第５，６７０，１５５号および同第５，６７２，６８１号、ならびにＫａｈｎに対する公開されたＰＣＴ ＷＯ９４／０３４９４は全て、コンホメーションが制約された、逆ターンの三次元構造を模倣する、非ペプチド性の化合物を開示する。より近年には、Ｋａｈｎに対する米国特許第５，９２９，２３７号、ならびにＫａｈｎに対する公開されたＰＣＴ ＷＯ９７／１５５７７およびＫａｈｎらに対するＰＣＴ ＷＯ９８／４９１６８はさらに、高度に制約された二環式複素環を逆ターン模倣物として開示した。それにもかかわらず、どのテンプレートも、全ての型のターンを模倣し得るわけではないので、さらなる逆ターンテンプレートについての必要性が当該分野に残っている。
【０００６】
細胞接着は、生存生物の生存能力に重要である。接着は、多細胞組織を一緒に保持し、そして胚発生を指向する。接着は、創傷治癒、感染の根絶、および血液凝集において重要な役割を果たす。インテグリンは、これらの機能の全てに密接に関与する細胞表面タンパク質のファミリーである。これらは、赤血球を除くほぼ全ての型のヒト細胞において見出されている。インテグリン機能における異常は、炎症疾患、心臓発作、発作（ｓｔｒｏｋｅ）および癌を含めた種々の障害に寄与する。
【０００７】
インテグリンは、互いに非共有結合的に結合した、αサブユニットおよびβサブユニットのヘテロダイマーからなる。これらの細胞表面レセプターは、細胞膜を通って、細胞質へと広がっている。少なくとも１５の異なるαサブユニットおよび９の異なるβサブユニットが公知である。しかし、大部分のαタンパク質は、１つのβとしか会合しないので、約２１の公知のインテグリンレセプターが存在する。細胞表面では、２つのサブユニットの頭部が互いに接触して細胞外タンパク質リガンドについての結合表面を形成しており、他の細胞または細胞外マトリクスへの接着を可能にする。これらのレセプターの親和性は、細胞外からの、または細胞内のシグナルによって調節され得る。例えば、傷害部位または感染部位への白血球の補充は、一連の接着相互作用を含む。内皮セレクチンおよび白血球セレクチンと、糖質との間の弱い相互作用は、一過性の接着および血管壁に沿った白血球のころがりを媒介する。炎症部位によって放出される種々のケモカインおよび他の誘発因子は、静止状態から高親和性状態へとインテグリンを活性化するためのシグナルとして役立つ。次いで、これらの活性化されたインテグリンは内皮細胞の表面のこれらの同族リガンドに結合し、強固な接着および白血球の平坦化をもたらす。続いて、白血球は、内皮を通って下の組織へと遊走する。
【０００８】
インテグリンα₄β₁は、血管細胞接着分子−１（ＶＣＡＭ−１）またはＩＩＩ型連結セグメント（ＩＩＩＣＳ）を含有するフィブロネクチンの選択スプライシング改変体のいずれかへの結合を通して主に細胞接着を媒介する。リンパ球、単球、好塩基球および好酸球を含めた、炎症に関与する種々の細胞はα₄β₁を発現するが、好中球は発現しない。α₄サブユニットに対するモノクローナル抗体は、慢性関節リウマチの動物モデル（Ｂａｒｂａｄｉｌｌｏら，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｅｍｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌ．１６：４２７−３６，１９９５；Ｉｓｓｅｋｕｔｚら，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ８８：５６９−７６，１９９６）、急性大腸炎の動物モデル（Ｐｏｄｏｌｓｋｙら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９２：３７２−８０，１９９３）、多発性硬化症の動物モデル（Ｙｅｄｎｏｃｋら，Ｎａｔｕｒｅ ３５６：６３−６，１９９２）、喘息の動物モデル（Ａｂｒａｈａｍら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．９３：７７６−８７，１９９４；米国特許第５，８７１，７３４号）および糖尿病の動物モデル（Ｔｓｕｋａｍｏｔｏら，Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６５：１９３−２０１，１９９５）において潜在的治療標的としてα₄含有インテグリンを確認するために用いられている。より最近では、低分子量ペプチジル誘導体は、α₄β₁の競合インヒビターとして産生されており、そしてこれは、ヒツジにおいてアレルギー性気道応答を阻害することが示されている（Ｌｉｎら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４２：９２０−３４，１９９９）。
【０００９】
α₄β₁への結合に関与する、ＩＩＩＣＳにおいて重要な配列が２５残基ペプチドＣＳ１であり、その配列内で、最小に認識されるモチーフがトリペプチドＬＤＶであることが示されている。類似の配列ＩＤＳは、α₄β₁へのＶＣＡＭ−１の結合に関連している。ＶＣＡＭ−１のＮ末端の２つのドメインフラグメントのＸ線結晶構造は、ＩＤＳ配列が、２つのβ鎖を連結する露出したループの一部であることを示す（Ｊｏｎｅｓら，Ｎａｔｕｒｅ ３７３：５３９−４４，１９９５；Ｗａｎｇら，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９２：５７１４−８，１９９５）。逆ターンコンホメーションをとる環式ペプチドおよびそれらの誘導体は、α₄β₁へのＶＣＡＭ−１結合のインヒビターであることが実証されている（ＷＯ ９６／００５８１；ＷＯ ９６／０６１０８；Ｄｏｙｌｅら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓ．４７：４２７−３６，１９９６）。さらに、多数の（α₅β₁に対して）強力かつ選択的な環式ペプチドベースのインヒビターが見出されている（Ｊａｃｋｓｏｎら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４０：３３５９−６８，１９９７）。いくつかの非ペプチジルβターン模倣物もまた、低いマイクロモル濃度範囲のＩＣ₅₀でα₄β₁に結合することが報告されている（Ｓｏｕｅｒｓら，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．８：２２９７−３０２，１９９８）。多数のフェニルアラニン誘導体およびチロシン誘導体もまた、α₄β₁のインヒビターとして開示されている（ＷＯ ９９／０６３９０；ＷＯ ９９／０６４３１；ＷＯ ９９／０６４３３；ＷＯ ９９／０６４３４；ＷＯ ９９／０６４３５；ＷＯ ９９／０６４３６；ＷＯ ９９／０６４３７；ＷＯ ９８／５４２０７；ＷＯ ９９／１０３１２；ＷＯ ９９／１０３１３；ＷＯ ９８／５３８１４；ＷＯ ９８／５３８１７；ＷＯ ９８／５８９０２）。しかし、強力でかつ経口的に利用可能な低分子インヒビターは開示されていない。
【００１０】
関連したインテグリンα₄β₇は、リンパ球の表面に発現され、そしてＶＣＡＭ−１、フィブロネクチンおよび粘膜アドレシン（ａｄｄｒｅｓｓｉｎ）細胞接着分子１（ＭＡｄＣＡＭ−１）に結合する。インテグリンα₄β₇およびＭＡｄＣＡＭは、血液、腸およびリンパ組織の間のリンパ球のサブセットの再循環を媒介する。ＶＣＡＭ−１およびフィブロネクチンＣＳ−１と同様に、ＭＡｄＣＡＭ−１のＣＤループに存在する、α₄β₇による認識に重要であるトリペプチド配列ＬＤＴが存在する。Ｘ線結晶構造は、この配列もまたターン構造の一部であることを示す（Ｔａｎら，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ６：７９３−８０１，１９９８）。近年の研究は、α₄β₇もまた、喘息（Ｌｏｂｂら，Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７９６：１１３−２３，１９９６）、炎症性腸疾患（Ｆｏｎｇら，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｓ．１６：２９９−３１１，１９９７）および糖尿病（Ｙａｎｇら，Ｄｉａｂｅｔｅｓ ４６：１５４２−７，１９９７）のような疾患において役割を果たし得ることを示した。さらに、α₄インテグリンは子宮頸ガンおよび前立腺癌のような癌においてダウンレギュレートされるようであるとはいえ、これらは、転移性メラノーマにおいてアップレギュレートされるようである（Ｓａｎｄｅｒｓら，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｖｅｓｔ．１６：３２９−４４，１９９８）。このことは、α₄β₁およびα₄β₇のインヒビターが抗癌剤として有用であり得ることを示唆する。
【００１１】
コンホメーションが制約された逆ターン模倣物の合成および同定において顕著な進歩がなされたとはいえ、当該分野には依然として、ペプチドの二次構造を模倣する低分子についての必要性が存在する。当該分野には、このようなメンバー、特に置換基の多様性の高さを支持し得る低分子テンプレートを含むライブラリーについての必要性もまた存在する。さらに、当該分野には、これらのライブラリーを合成し、そしてライブラリーメンバーを生物学的標的に対してスクリーニングして生物活性のあるライブラリーメンバーを同定するための技術についての必要性もまた存在する。さらに、当該分野には、炎症疾患および心血管疾患ならびにいくつかの癌を処置する際に使用するための、低分子の経口で利用可能なインテグリンインヒビターについての必要性が存在する。特に、慢性関節リウマチ、喘息、糖尿病および炎症性腸疾患の処置において使用するためのα₄β₁およびα₄β₇のインヒビターについての必要性が存在する。
【００１２】
本発明は、これらの必要性を満たし、そしてさらなる関連の利点を提供する。
【００１３】
（発明の要旨）
手短には、本発明は、生物学的に活性なペプチドおよびタンパク質の逆ターン領域の二次構造を模倣する、コンホメーションが制約された化合物（本明細書中で、「逆ターン模倣物」とも呼ばれる）に関する。本発明の化合物は、薬学的に受容可能なその塩および立体異性体を含めて、以下の一般構造（Ｉ）を有する：
【００１４】
【化１６】

ここで、ＡおよびＲ₁〜Ｒ₄は、以下に定義された通りである。
【００１５】
本発明はまた、構造（Ｉ）の化合物を含むライブラリー、ならびにこのようなライブラリーを合成するための方法およびこのようなライブラリーをスクリーニングして生物学的に活性な化合物を同定するための方法に関する。さらに、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせた本発明の化合物を含む組成物が開示される。細胞接着媒介性疾患を処置するための本発明の化合物およびこれらの化合物を含む組成物を用いる使用方法もまた開示される。
【００１６】
本発明のこれらおよび他の局面は、以下の詳細な説明を参照して明らかである。この目的のために、特定の手順、化合物および／または組成物をより詳細に記載し、そしてその全体が本明細書中に参考として援用される、種々の参考文献が本明細書中に示される。
【００１７】
（発明の詳細な説明）
本発明は、逆ターン模倣物および逆ターン模倣物を含む化学ライブラリーに関する。本発明の逆ターン模倣物は、診断剤、予防剤および／または治療剤（特に抗炎症剤）としての使用を含めて（しかし、これらに限定されない）、生物活性のある薬剤として有用である。本発明の逆ターン模倣物ライブラリーは、このような生物活性のある薬剤の同定において有用である。本発明の実施において、ライブラリーは、数十から数百、数十から数千（以上）の個々の逆ターン模倣物（本明細書中で「メンバー」ともいう）を含み得る。
【００１８】
本発明の１つの局面では、以下の構造（Ｉ）を有する逆ターン模倣物ならびに薬学的に受容可能なその塩および立体異性体が開示される：
【００１９】
【化１７】

ここで、
Ａは、−（ＣＲ₅Ｒ_5a）_n−であり、ここでｎが１、２または３であり；
Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₅は、各出現箇所で、同じであるかまたは異なっており、そして独立して、アミノ酸側鎖部分もしくはアミノ酸側鎖誘導体、ペプチドもしくはペプチド誘導体、リンカーまたは固体支持体であり；
Ｒ_2a、Ｒ_3aおよびＲ_5aは、各出現箇所で、同じであるかまたは異なっており、そして独立して、水素、ヒドロキシ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ₂、−Ｒ₆、−ＯＲ₆、−ＣＯＯＲ₆、−ＣＯＲ₆または−ＣＯＮＨＲ₆であり、ここで、Ｒ₆は、ハロゲンまたはヒドロキシで必要に応じて置換された低級アルキルであり；そして
Ｒ₁およびＲ₄は、分子の残部を表し、ただし、Ｒ₁が−Ｃ（＝Ｏ）ＯＭｅでありかつＲ₄がベンジルである場合、Ｒ₃がメチルであるとき、Ｒ₂はイソプロピルではなく、そしてＲ₃がイソプロピルであるとき、Ｒ₂はメチルではない。
【００２０】
本明細書中で使用される場合、「アミノ酸側鎖部分」は、以下の表１に同定される天然に存在するアミノ酸側鎖部分を含む（がこれらに限定されない）天然に存在するタンパク質に存在する任意のアミノ酸側鎖部分を表す。本発明の他の天然に存在するアミノ酸側鎖部分としては、３，５−ジブロモチロシン、３，５−ジヨードチロシン、ヒドロキシリジン、γ−カルボキシグルタメート、ホスホチロシンおよびホスホセリンの側鎖部分が挙げられる（がこれらに限定されない）。さらに、グリコシル化アミノ酸側鎖（グリコシル化トレオニン、グリコシル化セリンおよびグリコシル化アスパラギンを含む（がこれらに限定されない））もまた、本発明の実施において用いられ得る。
【００２１】
【表１】

さらに、本明細書中で使用される場合、「アミノ酸側鎖誘導体」は、天然に存在するアミノ酸側鎖部分に対する改変および／またはバリエーションを表す。例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシンおよびフェニルアラニンのアミノ酸側鎖部分は一般に、以下に定義されたような１以上の置換基で必要に応じて置換された、アルキル部分、アリール部分またはアリールアルキル部分として分類され得る。従って、代表的なアミノ酸側鎖誘導体としては、置換されたかまたは置換されていない、アルキル部分、アリール部分およびアリールアルキル部分が挙げられる。
【００２２】
この目的のために、「アルキル」は、１個〜１２個の炭素原子を含む、直鎖または分枝鎖の、環式または非環式の、飽和または不飽和のアルキルである（本明細書中で「Ｃ_{1 〜 12}アルキル」ともいう）。同様に、「低級アルキル」は、上記で定義されるとおりであるが、１個〜４個の炭素原子を含む（本明細書中で「Ｃ_{1 〜 4}アルキル」ともいう）。代表的な飽和直鎖アルキルとしては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシルなどが挙げられる；一方、飽和分枝鎖アルキルとしては、イソプロピル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソペンチルなどが挙げられる。代表的な飽和環式アルキルとしては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどが挙げられる。不飽和アルキルは、隣接する炭素原子の間に少なくとも１つの二重結合または三重結合を含む（それぞれ、「アルケニル」または「アルキニル」といわれる）。代表的な直鎖および分枝鎖のアルケニルとしては、エチレニル、プロピレニル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブテニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニルなどが挙げられる；一方、代表的な直鎖および分枝鎖のアルキニルとしては、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニルなどが挙げられる。代表的な不飽和環式アルキルとしては、シクロペンテニルおよびシクロヘキセニルなどが挙げられる。
【００２３】
「アリール」は、６個〜１２個の炭素原子を含む芳香族炭素環式部分（例えば、フェニルおよびナフチル）である（本明細書中で、「Ｃ_{6 〜 12}アリール」ともいう）。
【００２４】
「アリールアルキル」は、少なくとも１つのアルキル水素原子がアリール部分で置換されたアルキル（例えば、ベンジル、−（ＣＨ₂）₂フェニル、−（ＣＨ₂）₃フェニル、−ＣＨ（フェニル）₂など）である。
【００２５】
同様に、ヒスチジン、トリプトファン、プロリンおよびヒドロキシプロリンのアミノ酸側鎖部分は一般に、以下に定義される通りの１以上の置換基で必要に応じて置換された、複素環式部分または複素環式アルキル部分と分類され得る。従って、代表的なアミノ酸側鎖誘導体はまた、置換されたかまたは置換されていない、複素環部分および複素環アルキル部分が挙げられる。
【００２６】
本明細書中で使用される場合、「複素環」とは、５員〜７員の単環式複素環式環、または７員〜１０員の二環式複素環式環であって、飽和、不飽和または芳香族のいずれかであり、窒素、酸素および硫黄から独立して選択される１個〜４個のヘテロ原子を含み、そしてここで、窒素へテロ原子および硫黄へテロ原子が必要に応じて酸化され得、そして窒素へテロ原子が必要に応じて４級化され得る、５員〜７員の単環式複素環式環、または７員〜１０員の二環式複素環式環を意味し、これには、上記の複素環のいずれかがベンゼン環に縮合している二環式環が包含される。複素環は、任意のヘテロ原子または炭素原子を介して連結され得る。複素環としては、以下に定義される通りのヘテロアリールが挙げられる。従って、以下に列挙したヘテロアリールに加えて、複素環としてはまた、モルホリニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、ピペリジニル、ヒダントイニル、バレロラクタミル、オキシラニル、オキセタニル、アジリジニル、アゼチジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル（ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｐｒｉｍｉｄｉｎｙｌ）、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニルなどが挙げられる。
【００２７】
「複素環アルキル（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅａｌｋｙｌ）」とは、少なくとも１つのアルキル水素原子が複素環部分で置換されたアルキル（例えば、−ＣＨ₂（複素環）、−（ＣＨ₂）₂（複素環）など）を意味する。
【００２８】
「ヘテロアリール」とは、５員〜１０員の芳香族複素環式環であって、窒素、酸素および硫黄から選択される少なくとも１つのヘテロ原子を有し、そして少なくとも１つの炭素原子を含む芳香族複素環式環を意味し、これには、単環式環系および二環式環系の両方が含まれる。代表的なヘテロアリールは、ピリジル、フリル、ベンゾフラニル、チオフェニル、ベンゾチオフェニル、キノリニル、ピロリル、インドリル、オキサゾリル、ベンゾキサゾリル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、チアゾリル、ベンゾチアゾリル、イソキサゾリル、ピラゾリル、イソチアゾリル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、シノリニル（ｃｉｎｎｏｌｉｎｙｌ）、フタラジニル、およびキナゾリニルである。
【００２９】
「ヘテロアリールアルキル」は、少なくとも１つのアルキル水素原子がへテロアリール部分で置換されたアルキル（例えば、−ＣＨ₂ピリジニル、−ＣＨ₂ピリミジニルなど）を意味する。
【００３０】
用語「置換された」は、本明細書中で使用される場合、少なくとも１つの水素原子が置換基で置換された、上記のいずれかの基（アルキル、アリール、アリールアルキル、複素環、複素環アルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキルである）を意味する。ケト置換基（「Ｃ（＝Ｏ）」）の場合、２つの水素原子が置換されている。「置換基」は、これに関して、ハロゲン、ケト、ヒドロキシ、ハロアルキル、−Ｒ、−ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲＲ、−ＮＲＲ、−ＮＲＣ（＝Ｏ）Ｒ、−ＮＲＣ（＝Ｏ）ＯＲ、−ＮＲＣ（＝Ｏ）ＮＲＲ、−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲＲ、−ＳＨ、−ＳＲ、−ＳＯＲ、−ＳＯ₂Ｒ、−ＮＲＳＯ₂Ｒ、−ＳｉＲ₃または−ＯＰ（ＯＲ）₃であり、ここで、Ｒの各出現箇所は、同じであるかまたは異なっており、そして独立して、水素、アルキル、アリール、アリールアルキル、複素環もしくは複素環アルキルであるか、または同じ窒素原子に結合している任意の２つのＲ基が、それらが結合している窒素原子と一緒になって、複素環式環または置換された複素環式環を形成している。
【００３１】
「ペプチド」は、ペプチド結合によって連結された、少なくとも２つの天然に存在するかまたは天然に存在しない、α−アミノ酸を意味する。ペプチド結合を介して連結されるアミノ酸の数に依存して、得られるペプチドはまた、「ポリペプチド」または「タンパク質」といわれ得る。同様に、「ペプチド誘導体」は、共有結合的に改変されているか、および／またはα−アミノ酸以外のアミノ酸を含む、ペプチドを意味する。代表的なペプチド誘導体としては、例えば、メチル、ベンジル、アセチル、ベンゾイル、メタンスルホニル、フェニルスルホニル、アリルオキシカルボニル、ｔ−ブチルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルまたはフルオレニルオキシカルボニル部分によってアミノ末端でＮ−アルキル化、Ｎ−アシル化またはＮ−スルホニル化されているペプチド；カルボキシ末端がエステル化されている（メチル、エチル、ベンジル）またはヒドロキシもしくはアルデヒドに還元されているペプチド；ペプチド結合のところで、例えば、メチルまたは２−ヒドロキシ−４−メトキシベンジルでＮ−アルキル化されているペプチド；ならびにβ−アミノ酸またはγ−アミノ酸（例えば、β−アラニンまたはβ−アミノ酪酸）を取り込んでいるペプチドが挙げられる。
【００３２】
「リンカー」は、それぞれのＲ₁部分、Ｒ₂部分、Ｒ₃部分、Ｒ₄部分および／またはＲ₅部分を通しての、別の部分、薬剤、化合物、固体支持体、分子、アミノ酸、ペプチドまたはタンパク質への構造（Ｉ）の化合物の連結を容易にする任意の共有結合性架橋部分である。例えば、本発明の化合物は、１以上の公知の化合物（例えば、ビオチン）に、診断アッセイまたはスクリーニングアッセイにおける使用のために連結され得る。さらに、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄またはＲ₅のうちの１つ（以上）は、構造（Ｉ）の化合物を固体支持体（例えば、固相ペプチド合成において使用される支持体）へと連結するリンカーであり得る。このようなリンカーの例としては、ｐ−アルコキシベンジルアルコール、フェニルアセトアミドメチルおよび２−クロロトリチルクロリドが挙げられる。この状況では、別の部分もしくは化合物、または固体支持体への連結は、Ｒ₁位またはＲ₄位においてであることが好ましい。
【００３３】
「固体支持体」とは、別の化合物が直接付着するかまたはリンカーを介して付着する任意の組成物であって、付着した化合物が可溶性である少なくとも１つの溶媒に不溶性である組成物を意味する。あるいは、「固体支持体」は、付着した化合物と類似の可溶性特性を有するが、溶液から容易に沈澱されて固体として濾別され得る、組成物であり得る。代表的な例としては、ポリスチレン、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールがグラフト化されたポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリアミド−ポリエチレングリコールコポリマー、制御された孔隙のガラス（ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ−ｐｏｒｅ ｇｌａｓｓ）およびシリカが挙げられる。
【００３４】
用語「分子の残部」とは、Ｒ₁位および／またはＲ₄位のいずれかで逆ターン模倣物に共有結合した、任意の部分、薬剤、化合物、固体支持体、分子、リンカー、アミノ酸、ペプチドまたはタンパク質を意味し、これとしては、上記に定義した通りのアミノ酸側鎖部分、アミノ酸側鎖誘導体およびペプチド誘導体が挙げられる。従って、以下の構造（Ｉ’）によって表されるように、構造（Ｉ）の代替的な記載は、環の窒素原子と、対応するＲ₁部分およびＲ₄部分との間の結合が未定義のままであり得る：
【００３５】
【化１８】

ここで、
【００３６】
【化１９】

は、共有結合を通して環の対応する窒素に連結した分子の残部を表し、そしてＡ、Ｒ₂およびＲ₃は、上記に定義した通りである。
【００３７】
構造（Ｉ）の１つの実施形態では、Ｒ_2a、Ｒ_3aならびに各出現箇所のＲ_5aおよびＲ₅は水素であり、そして本発明の化合物は、以下の構造（ＩＩ）を有する：
【００３８】
【化２０】

ここで、ｎ、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄は上記で定義された通りである。
【００３９】
別の実施形態では、Ａは−ＣＨ（Ｒ₅）ＣＨ（Ｒ₅）−であり、Ｒ_2aおよびＲ_3aは両方とも水素であり、そして本発明の化合物は以下の構造（ＩＩＩ）を有する：
【００４０】
【化２１】

ここで、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄および各出現箇所のＲ₅は上記で定義されたとおりである。
【００４１】
なおさらなる実施形態では、ｎは１であり、Ｒ_2a、Ｒ_3aおよびＲ_5aは水素であり、そして本発明の化合物は以下の構造（ＩＶ）を有する：
【００４２】
【化２２】

ここで、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄およびＲ₅は上記で定義された通りである。
【００４３】
構造（ＩＶ）のさらに特定の実施形態では、Ｒ₅は水素であり、そして本発明の化合物は、以下の構造（Ｖ）を有する：
【００４４】
【化２３】

ここで、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄は上記で定義された通りである。
【００４５】
構造（Ｉ）のなお別の実施形態では、Ｒ_3aは水素であり、そして本発明の化合物は以下の構造（ＶＩ）を有する：
【００４６】
【化２４】

ここで、Ａ、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ_2a、Ｒ₃およびＲ₄は上記で定義された通りである。
【００４７】
構造（Ｉ）の好ましい実施形態では、Ｒ_2a、Ｒ_3aおよび各々の出現箇所のＲ_5aは水素であり、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃およびＲ₄は同じであるかまたは異なっており、そして独立して、アミノ酸側鎖部分またはアミノ酸側鎖誘導体である。構造（Ｉ）のさらに好ましい実施形態では、Ｒ₁は、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ₇、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ₇または−ＳＯ₂Ｒ₇であり、ここで、Ｒ₇はアミノ酸側鎖部分またはアミノ酸側鎖誘導体である。なおさらに好ましい実施形態の構造では、Ｒ₇は、ハロゲン、−ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−ＮＨ₂またはＣ_{1 〜 4}アルキルで必要に応じて置換されたアリールまたはアリールアルキルである。
【００４８】
上記の構造（Ｉ）では、縮合した二環式環上の炭素原子への種々のＲ基の結合についての実線の表示は、これらのＲ基が、この紙面の上または下のいずれかに存在し得ることを示す。本発明の逆ターン模倣物が天然に存在するアミノ酸（すなわち、「Ｌ−アミノ酸」）の逆ターンを模倣することが意図される場合、このＲ基は一般に、構造（Ｉ）においてこの紙面の下に存在する（すなわち、「
【００４９】
【化２５】

」）。しかし、本発明の逆ターン模倣物が１以上のＤ−アミノ酸を含む逆ターンを模倣することが意図される場合、対応するＲ基は、構造（Ｉ）においてこの紙面の上に存在する（すなわち、「
【００５０】
【化２６】

」）。
【００５１】
本発明の逆ターン模倣物は一般に、以下の反応スキームにおいて例示される方法によって調製され得る。
【００５２】
【化２７】

上記の反応スキームでは、遊離のヒドロキシル基を保有する樹脂は、酸性条件下で臭素含有アセタールで処理される。誘導体化された樹脂を一級アミンと反応させ、続いてカップリング試薬および塩基の存在下でＮ保護アミノ酸誘導体とアシル化させる。アミノ保護が除去され、そして第２のＮ保護アミノ酸誘導体がカップリングされる。脱保護後、露出された一級アミンは、適切な試薬（例えば、塩化スルホニル、クロロホルメートまたはイソシアネート）を用いてキャップされる。この化合物は、樹脂から同時に除去され、そしてギ酸での処理によって環化されて最終生成物を形成する。あるいは、構造（Ｉ）の逆ターン模倣物は、個々の成分の順次のカップリングまたは収束カップリングによって溶液中で調製され得る。
【００５３】
上記の反応スキームはＲ_2a部分およびＲ_3a部分を水素として示すとはいえ、Ｒ_2a位およびＲ_3a位に水素以外の部分を有する構造（Ｉ）の化合物は、同じ反応スキームによって、しかし、対応するＲ_2a置換反応前駆体および／またはＲ_3a置換反応前駆体を用いて作製され得る。例えば、Ｒ₂およびＲ_2aが両方ともメチルである場合、適切なアミノイソ酪酸誘導体を用いてこれらの基を逆ターン模倣物中に導入し得る。
【００５４】
上記で言及したように、本発明の逆ターン模倣物は、生物活性のある薬剤（例えば、診断剤、予防剤および治療剤）として有用である。代表的な逆ターン模倣物のインテグリン結合活性は、実施例２に提示される。この実施例では、逆ターン模倣物は、ＣＳ１ペプチドをＲａｍｏｓ細胞から効果的に置換することが見い出された。従ってこのデータは、逆ターン模倣物がα₄β₁インテグリンを拮抗し、そして潜在的な抗炎症剤として作用する能力を示す。
【００５５】
本発明の別の局面では、本発明の逆ターン模倣物を含むライブラリーが開示される。一旦組み立てられると、本発明のライブラリーは、生物活性を有する個々のメンバーを同定するためにスクリーニングされ得る。生物活性のあるメンバーについてのライブラリーのこのようなスクリーニングは、例えば、ライブラリーのメンバーの結合活性について評価する工程またはライブラリーメンバーが機能アッセイに対して有する効果を評価する工程を包含し得る。スクリーニングは通常、ライブラリーメンバー（またはライブラリーメンバーのサブセット）を目的の標的（例えば、抗体、酵素、レセプターまたは細胞株など）と接触させることによって達成される。目的の標的と相互作用し得るライブラリーメンバーは、本明細書中で「生物活性のあるライブラリーメンバー」または「生物活性のある模倣物」と呼ばれる。例えば、生物活性のある模倣物は、酵素を阻害し得るか、例えば、細胞株に関連した機能的応答を誘発し得るかもしくは拮抗し得る、抗体またはレセプターに結合し得るライブラリーメンバーであり得る。言い換えると、本発明のライブラリーのスクリーニングは、どのライブラリーメンバーが目的の１以上の生物学的標的と相互作用し得るかを決定する。さらに、相互作用が生じる場合、ライブラリーメンバーから生物活性のある模倣物が同定され得る。ライブラリーからの単一または（制限された数の）生物活性のある模倣物の同定は、それ自体が生物学的に活性である、従って、診断剤、予防剤または治療剤として有用である、逆ターン模倣物をもたらし、そしてこれらの分野におけるリード化合物の同定を顕著に進展させるためにさらに用いられ得る。
【００５６】
本発明のライブラリーのペプチド模倣物の合成は、本発明の成分の断片と組み合わせた公知のペプチド合成技術を用いて達成され得る。より詳細には、任意のアミノ酸配列は、コンホメーションが制約された逆ターン模倣物のＲ₁部分、Ｒ₂部分、Ｒ₃部分、Ｒ₄部分またはＲ₅部分のいずれかとして付加され得る。好ましくは、アミノ酸配列は、Ｒ₁部分またはＲ₄部分として付加され得る。この目的のために、模倣物は、公知の技術によって固体支持体（例えば、４−ヒドロキシメチルフェノキシブチレートをリンカーとして利用するポリスチレン）上で（例えば、Ｊｏｈｎ Ｍ．ＳｔｅｗａｒｔおよびＪａｎｉｓ Ｄ．Ｙｏｕｎｇ，Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９８４，Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐ．，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌｉｎｏｉｓ；Ａｔｈｅｒｔｏｎ，Ｅ．，Ｓｈｅｐａｒｄ，Ｒ．Ｃ．Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ；ＩＲＬ：Ｏｘｆｏｒｄ，１９８９を参照のこと）、またはアルコール結合によってシリル連結樹脂上で（Ｒａｎｄｏｌｐｈら，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１７：５７１２−１４，１９９５を参照のこと）合成され得る。
【００５７】
さらに、液相合成技術および固相合成技術の両方の組合せを利用して、本発明のペプチド模倣物を合成し得る。例えば、固相支持体を利用して、コンホメーションが制約された逆ターンがその配列に付加される点まで直鎖状ペプチド配列を合成し得る。次いで、溶液合成技術によって先に合成された、コンホメーションが制約された適切な逆ターン模倣物は、固相合成に次の「アミノ酸」として付加され得る（すなわち、少なくとも２つの反応性部位を有する、コンホメーションが制約された逆ターン模倣物は、直鎖状ペプチドへと付加されるべき次の残基として利用され得る）。コンホメーションが制約された逆ターン模倣物から配列に取込まれると、次いで、さらなるアミノ酸が、固体支持体に結合したペプチドを完成するために付加され得る。あるいは、直鎖状のＮ末端保護ペプチド配列およびＣ末端保護ペプチド配列は、固体支持体上で合成され得、支持体から取り出され得、次いで公知の溶液カップリング技術を用いて、溶液中のコンホメーションが制約された逆ターン模倣物へとカップリングされ得る。
【００５８】
本発明の別の局面では、ライブラリーを構築するための方法が開示される。伝統的なコンビナトリアルケミストリー（例えば、Ｔｈｅ Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ Ｉｎｄｅｘ Ｂｕｎｉｎ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９８；Ｇａｌｌｏｐら，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３７：１２３３−１２５１，１９９４を参照のこと）および並行合成技術は、莫大な数の化合物が基本的分子骨格への試薬の順次の組合せによって迅速に調製されることを可能にする。例えば、上記で開示される合成は、Ｎｉｃｏｌａｏｕおよび共同実験者の指向性選別技術（Ｎｉｃｏｌａｏｕら，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ’ｌ．Ｅｄ．３４：２２８９−２２９１，１９９５）を用いて実施され得る。現在、この技術のための装置が、ＩＲＯＲＩ（Ｌａ Ｊｏｌｌａ，ＣＡ）から市販されている。あるいは、上記で開示された合成は、４８ウェルプレート形式または９８ウェルプレート形式を用いた並行合成によって実施され得、ここで、各ウェルは、溶媒および試薬を排出するためのフリッティング出口（ｆｒｉｔｔｅｄ ｏｕｔｌｅｔ）を含む（Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｇｕｉｄｅ ｔｏ Ｃｏｍｂｉｎａｔｏｒｉａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、ＣｚａｒｎｉｋおよびＤｅＷｉｔｔ編，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ，１９９７）。Ｒｏｂｂｉｎｓ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）、Ｃｈａｒｙｂｄｉｓ（Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）およびＢｏｈｄａｎ（Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ）は現在、この技術のために適切な装置を提供する。
【００５９】
本発明のさらなる局面では、生物活性についてライブラリーをスクリーニングするため、および生物活性のあるライブラリーメンバーを単離するための方法が開示される。本発明のライブラリーは、種々の技術および方法によって生物活性についてスクリーニングされ得る。一般に、スクリーニングアッセイは、以下によって行われ得る：（１）ライブラリーを目的の生物学的標的（例えば、レセプター）と接触させ、そしてこのライブラリーの模倣物と標的との間で結合を生じさせる工程、ならびに（２）適切なアッセイ（例えば、Ｌａｍら（Ｎａｔｕｒｅ ３５４：８２−８４，１９９１）またはＧｒｉｍｉｎｓｋｉら（Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １２：１００８−１０１１，１９９４）によって開示された比色アッセイ）によって結合事象を検出する工程。好ましい実施形態では、ライブラリーメンバーは溶液中に存在し、そして標的は固相に固定されている。あるいは、このライブラリーは、固相に固定され得、そしてこれを溶液中の標的と接触させることによってプローブされ得る。
【００６０】
別の局面では、本発明は、治療有効量の本発明の化合物を薬学的に受容可能なキャリアまたは希釈剤中に含む、貯蔵または投与のために調製された薬学的組成物を包含する。細胞接着のインヒビターを用いた治療は、種々の炎症状態（特に、慢性関節リウマチ、炎症性腸疾患および喘息）の処置および予防のために示される。この分野の経験者は、抗炎症治療を必要とする状況を容易に認識する。
【００６１】
本発明の化合物の「治療有効量」は、投与経路、処置される温血動物の種類、および考慮される特定の動物の身体的特徴に依存する。これらの要因およびこの量を決定することに対するそれらの関係は、医学分野の当業者に周知である。この量および投与方法は、最適な効力を達成するように調整され得るが、体重、食餌、同時薬物適用および医学分野の当業者が認識すると示される他の要因のような要因に依存する。
【００６２】
本発明の化合物の「治療有効量」は、所望の効果および治療適応症に依存して、広範な範囲にわたり得る。代表的に、投薬量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と約１００ｍｇ／ｋｇ体重との間、好ましくは約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重と約１０ｍｇ／ｋｇ体重との間である。
【００６３】
希釈剤を含めて、治療的用途のための「薬学的に受容可能なキャリア」は、製薬の分野で周知であり、そして例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．（Ｇｅｎｎａｒｏ編、１９８５）に記載される。例えば、生理学的ｐＨでの滅菌生理食塩水およびリン酸緩衝化生理食塩水が用いられ得る。保存剤、安定剤、色素および矯味矯臭剤でさえも、薬学的組成物中に提供され得る。例えば、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸およびｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステルが、保存剤として添加され得る。さらに、抗酸化剤および懸濁剤が用いられ得る。
【００６４】
本発明の化合物は、過剰のインテグリン媒介細胞接着が寄与因子である任意の状態の予防および処置のために有用である。特に、本発明の化合物は、炎症の予防および処置のための薬剤として有用である。本発明の方法の実施において、治療有効量の本発明の化合物を含有する組成物は、その必要がある温血動物に投与される。例えば、本発明の化合物は、慢性関節リウマチ、アテローム性動脈硬化症、アルツハイマー病、ＡＩＤＳ痴呆、ＡＲＤＳ、喘息、アレルギー、炎症性腸疾患、ＣＮＳ炎症、アトピー性皮膚炎、Ｉ型糖尿病、脳炎、心筋虚血、多発性硬化症、髄膜炎、腎炎、再灌流傷害、再狭窄、網膜炎、乾癬、発作および腫瘍転移から選択される状態と診断されたかまたはそのような状態を発症する危険性がある温血動物に投与され得る。
【００６５】
多発性硬化症（ＭＳ）は、中枢神経系の徐々に消耗する自己免疫疾患である。現在、免疫応答を誘発する正確な抗原は未知である。しかし、マクロファージは、脳における神経線維を取り囲む脂肪ミエリン鞘を攻撃してその破壊を開始するようである。ＭＳ（実験的アレルギー脳脊髄炎）の動物モデルでは、α₄β₁に対するマウスのモノクローナル抗体は、内皮に対する白血球の接着をブロックし、そしてその動物の中枢神経系の炎症およびその後の麻痺を妨げた（Ｙｅｄｎｏｃｋ，Ｃａｎｎｏｎら，Ｎａｔｕｒｅ ３５６：６３−６，１９９２）。
【００６６】
本発明の化合物は、単独で、２以上の化合物の組合せとして、または他の公知の炎症インヒビターとの組合せで用いられ得る。例えば、本発明の化合物は、コルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症剤、ＣＯＸ−２インヒビター、マトリックスメタロプロテアーゼインヒビターまたはリポキシゲナーゼインヒビターとともに治療的に用いられ得る。本発明の化合物は、錠剤、カプセル剤（この各々は、持続放出（ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ）処方物および時限放出（ｔｉｍｅｄ ｒｅｌｅａｓｅ ）処方物を包含する）、丸剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、チンキ剤、懸濁剤、シロップ剤および乳剤のような経口形態で投与され得る。同様に、これらは、静脈内（ボーラスまたは注入）形態、腹腔内形態、皮下形態、鼻腔内形態、直腸内形態または筋肉内形態、製薬の分野の当業者に周知の全ての使用形態で投与され得る。化合物は、眼内または局所的に、ならびに経口的または非経口的に投与され得る。
【００６７】
本発明の化合物は、吸入によって投与され得、従って、加圧パックまたはネブライザーからエアゾールスプレイの形態で送達され得る。この化合物はまた、処方され得る粉末として送達され得、そしてこの粉末組成物は、通気粉末吸入デバイスの助けを借りて吸入され得る。吸入のために好ましい送達システムは、計量吸入エアゾールである。これは、適切なプロペラント（例えば、フルオロカーボンまたは炭化水素）中の本発明の化合物の懸濁液または溶液として処方され得る。別の好ましい送達システムは、さらなる賦形剤を有するかまたは有さない、本発明の化合物の乾燥粉末として処方され得る乾燥粉末吸入エアゾールである。
【００６８】
本発明の化合物は、活性成分の持続放出を可能にするような様式で処方され得る、蓄積注射またはインプラント調製物の形態で投与され得る。活性成分は、ペレットまたは小さなシリンダー中に圧縮され得、そして皮下または筋肉内に、蓄積注射またはインプラントとして移植され得る。インプラントは、生分解性ポリマーまたは合成シリコーンのような不活性物質（例えば、Ｓｉｌａｓｔｉｃ、シリコーンゴムまたはＤｏｗ−Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎによって製造された他のポリマー）を用い得る。
【００６９】
本発明の化合物はまた、リポソーム送達システム（例えば、小さな単層小胞、大きな単層小胞および多層小胞）の形態で投与され得る。リポソームは、種々のリン脂質（例えば、コレステロール、ステアリルアミンまたはホスファチジルコリン）から形成され得る。
【００７０】
本発明の化合物はまた、化合物分子がカップリングされる個々のキャリアとしてのモノクローナル抗体の使用によって送達され得る。インテグリンインヒビターはまた、標的化可能な薬物キャリアとしての可溶性ポリマーとカップリングされ得る。このようなポリマーとしては、ポリビニルピロリドン（ｐｏｌｙｖｉｎｌｙｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ）、ピランコポリマー、ポリヒドロキシ−プロピル−メタクリルアミド−フェノール、ポリヒドロキシエチル−アスパルタルニド−フェノールまたはパルミトイル残基で置換されたポリエチレンオキシド−ポリリジンが挙げられ得る。さらに、インテグリンインヒビターは、薬物の制御放出を達成する際に有用なクラスの生分解性ポリマー（例えば、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、ポリ乳酸とポリグリコール酸とのコポリマー、ポリイプシロンカプロラクトン、ポリヒドロキシ酪酸、ポリオルトエステル、ポリアセタール、ポリジヒドロピラン、ポリシアノアクリレートおよびヒドロゲルの架橋されたかまたは両親媒性のブロックコポリマー）にカップリングされ得る。
【００７１】
用量および投与方法は、最適な効力を達成するように調整され得るが、体重、食餌、同時薬物適用および医学分野の当業者が認識する他の要因のような要因に依存する。投与が非経口（例えば、毎日、静脈内）であるべきな場合、注射可能な薬学的組成物は、液体の溶液もしくは懸濁物、注射前の液体への溶解もしくは懸濁に適切な固体形態、または乳濁液としてのいずれかの従来の形態で調製され得る。
【００７２】
本発明の活性な化合物の経口投与に適切な錠剤は以下の通りに調製され得る：
【００７３】
【数１】

活性な化合物、セルロースの全て、およびコーンスターチの一部を１０％コーンスターチペーストに混合し、そして顆粒化する。得られる顆粒を篩にかけ、乾燥し、そして残りのコーンスターチおよびステアリン酸マグネシウムとブレンドする。次いで、得られる顆粒を、それぞれ、錠剤１粒あたり２５．０ｍｇ、５０．０ｍｇおよび１００．０ｍｇの活性成分を含む錠剤へと圧縮する。
【００７４】
上記に示した活性な化合物の静脈内投薬形態は、以下の通りに調製され得る：
【００７５】
【数２】

上記の量を利用して、活性な化合物は、注射用水（ＵＳＰ、Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ／Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ ｆｏｒ １９９５，Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ Ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．発行，Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ．，ｃｏｐｙｒｉｇｈｔ １９９４の１６３６頁を参照のこと）中の塩化ナトリウム、クエン酸およびクエン酸ナトリウムの、予め調製した溶液中に室温で溶解される。
【００７６】
以下の実施例は、例示の目的で提供されるが限定の目的ではない。
【００７７】
（実施例）
（実施例１）
（構造（Ｉ）の代表的化合物の合成）
（２−ブロモ−１−エトキシ−エチル−１−オキシ連結樹脂（ａ）の合成）
【００７８】
【化２８】

一般に、樹脂（ＡｒｇｏｇｅｌＯＨまたはヒドロキシメチルポリスチレン）のバッチを、８当量のブロモアルキルアルデヒドジエチルアセタールおよび２当量のピリジニウムｐ−トルエンスルホネート（ＰＰＴＳ）の存在下で１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）中で４時間還流した。１つの例では、ヒドロキシメチルポリスチレン（１０．０ｇ、０．７ｍｍｏｌ ＯＨ／ｇ、７ｍｍｏｌ）および３．５ｇのＰＰＴＳ（１４ｍｍｏｌ）を２００ｍｌのＤＣＥ中に懸濁した。次いで、８．５ｍｌの２−ブロモジエトキシエタン（約５６ｍｍｏｌ）のＤＣＥ（１００ｍｌ）中の溶液を、攪拌しながら添加し、そして反応混合物を還流しながら加熱した（約８０℃）。４時間後、この樹脂を濾別し、そして１００ｍＬジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、５０ｍＬジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１００ｍＬ ＤＭＦ、２００ｍＬジクロロメタン（ＤＣＭ）、５０ｍＬ １，４−ジオキサンで、そして最終的に１００ｍＬメタノールで洗浄した。乾燥後、１１．７３ｇの樹脂（ａ）を得た。臭素分析は、定量的ローディングを示した。
【００７９】
（代表的化合物の合成）
適切な大きさのプラスチック製の使い捨てシリンジ中で反応を行った。このシリンジの各々には、ポリプロピレンフリットを取り付けて樹脂を保持した。各工程の後、樹脂のバッチを、ＤＭＦ（３回）およびＤＣＭ（３回）で洗浄した。代表的に、ＤＭＦ中で予め膨潤させた０．０３ｍｍｏｌの樹脂（ａ）のサンプル（例えば、０．６ｍｍｏｌ Ｂｒ／ｇをローディングした５０ｍｇのポリスチレン樹脂）を、ＤＭＳＯ中のアミンＲ₄−ＮＨ₂（２ｍｍｏｌ）の１ｍＬの２．０Ｍ溶液で６０℃で１６〜２４時間処理した。
【００８０】
次いで、この樹脂を、クロラニル試験が陰性になるまで（代表的に１〜２時間）、ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＨＡＴＵ（３４ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（０．０３２ｍｌ、０．１８ｍｍｏｌ）の存在下で０．０９ｍｍｏｌのＦｍｏｃアミノ酸（ＦｍｏｃＮＨ−ＣＨＲ₃−ＣＯＯＨ）と反応させた。その後、２０分間かけた２５％（ｖ／ｖ）ピペリジン／ＤＭＦ溶液（２ｍＬ）での処理によってＦｍｏｃ保護を除去した。
【００８１】
次いで、この樹脂を、カイザー試験が陰性になるまで（代表的に１時間）、ＤＭＦ（１ｍＬ）中のＤＩＣ（０．０１４ｍｌ、０．０９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１４ｍｇ、０．０９ｍｍｏｌ）の存在下で０．０９ｍｍｏｌの第２のＦｍｏｃアミノ酸（ＦｍｏｃＮＨ−ＣＨＲ₂−ＣＯＯＨ）と反応させた。この樹脂を再度、２０分間かけて２５％（ｖ／ｖ）ピペリジン／ＤＭＦ溶液（２ｍＬ）で処理した。
【００８２】
最後に、この樹脂に結合した配列を、ＤＣＭ（１ｍＬ）中でのＤＩＥＡ（０．１０６ｍＬ、０．６ｍｍｏｌ）の存在下での塩化スルホニル（Ｒ₁ＳＯ₂Ｃｌ、０．３ｍｍｏｌ）との１時間にわたる（カイザー試験陰性）反応によって終結させた。あるいは、クロロホルメートＲ₁ＯＣＯＣｌまたはイソシアネートＲ₁ＮＣＯ（後者は、ＤＩＥＡの存在を必要としない）を、Ｒ₁部分の導入のために塩化スルホニルの代わりに用いた。
【００８３】
洗浄し、そして乾燥した樹脂を、ＤＣＭ中で再度膨潤させ、排水し、そして１ｍＬのギ酸（９６％）で室温にて一晩処理した。多数の場合、環化を完了するために６０℃までの上昇した温度または延長した反応時間が必要であった（条件については、以下の表２を参照のこと）。上清を収集し、そして洗浄液（０．５ｍＬのギ酸を２回）と合わせた。ギ酸のエバポレーション後に得られた残渣を、アセトニトリル／水の５０：５０混合物中に再度溶解し、凍結し、そして凍結乾燥した。粗物質の収率は、８５％〜１００％であった。Ｒ₁にスルホニル部分を保有する化合物の粗純度は一般に、８０％を超えた。
【００８４】
表２は、上記の手順によって合成された本発明の代表的化合物を表す。
【００８５】
【表２】

（実施例２）
（代表的化合物の生物学的活性）
実施例１の化合物が、α₄β₁インテグリンへのＣＳ１ペプチドの結合を拮抗する能力を測定するアッセイを行った。Ｖａｎｄｅｒｓｌｉｃｅ，Ｐ．ら（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１９９７，１７１０−１７１８）（本明細書中に参考として援用される）の手順の改変版を利用した。
【００８６】
手短には、ビオチン化ＣＳ１ペプチド（１ｍｇ／１００ｍＬのリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ））の１００μＬ／ウェルの溶液を、ＮｅｕｔｒＡｖｉｄｉｎプレート（Ｐｉｅｒｃｅ）中で１時間、室温でインキュベートした。次いで、このプレートを、蒸留水で３回洗浄し、そして２００μＬのブロッキング緩衝液（ＰＢＳ中の３％ ＢＳＡ）で少なくとも４時間処理した。ブロッキングしたプレートを上記の通りに洗浄した。収集したＲａｍｏｓ細胞（１０⁷／ｍＬ）を、１０μＬのカルセインＡＭ／ｍＬを含むＰＢＳ中に再懸濁し、そして暗所で３０分間インキュベートした。この懸濁物を４５ｍＬ ＰＢＳで希釈し、そして細胞を遠心分離および吸引によって収集した。この細胞を結合緩衝液中に再懸濁した（約５×１０⁵／ｍＬ）。細胞溶解をモニタリングすべき場合、５μＭの最終濃度になるようにエチジウムホモダイマーを緩衝液に添加した。試験されるべき化合物またはコントロールのペプチドの溶液（１０μＬ）を適切なウェルに添加し、続いて９０μＬの細胞懸濁物を添加した。このプレートを、３７℃で１時間インキュベートした。エチジウムホモダイマーを添加する場合、リンスする前に５３５／６１７での蛍光を測定した。さもなければ、このプレートを３回洗浄し、５０μＬの溶解緩衝液を各ウェルに添加し、このプレートを暗所で１０分間揺り動かし、そして蛍光を４８５ｎｍの励起および５３５ｎｍの発光でモニタリングした。
【００８７】
好ましくは、本発明の化合物は、このアッセイにおいて１００μＭ未満のＩＣ₅₀値を有する。この目的のために、本発明の好ましい化合物は、化合物４、５、８〜１０、３１、３２、３８〜４９、５４および５５であり、そして１０μＭ未満のＩＣ₅₀値を有する、より好ましい化合物は、化合物１０、４１、４２、４４〜４９、５４および５５である。このように、本発明の化合物は、細胞接着を効果的に阻害し、そして抗炎症剤としての活性を保有する。
【００８８】
本発明の特定の実施形態が例示の目的で本明細書中に記載されているが、本発明の趣旨および範囲から逸脱することなく種々の改変が行われ得ることが認識される。従って、本発明は、添付の特許請求の範囲によって以外には限定されない。

Claims (14)

1. 以下の構造を有する化合物
   

   

   ならびに薬学的に受容可能な塩および立体異性体であって：
   Ｒ_１が−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ_７、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ_７または−ＳＯ_２Ｒ_７であり、ここで、Ｒ_７が、ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アミノ基またはアルキルによって必要に応じて置換されたアリール、アリールアルキルまたはアルキルであり、
   Ｒ_２は、カルボキシアルキルであり、
   Ｒ_３は、アルキル、カルボキシアルキル、またはハロゲンもしくはヒドロキシで必要に応じて置換されたアリールアルキルであり、
   Ｒ_４は、アルキル、カルボキシアルキル、ハロゲンもしくはヒドロキシで必要に応じて置換されたアリールアルキル、またはハロゲンもしくはヒドロキシで必要に応じて置換されたヘテロアリールアルキルであり、および
   Ｒ_２ａは、水素またはアルキルである、
   化合物ならびに薬学的に受容可能な塩および立体異性体。
2. Ｒ_２ａが水素である、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ_２が、−（ＣＨ_２）_２ＣＯＯＨである、請求項１に記載の化合物。
4. Ｒ_３が、ベンジルまたは置換ベンジルである、請求項１に記載の化合物。
5. Ｒ_１が、−ＳＯ_２Ｒ_７である、請求項１に記載の化合物。
6. 前記化合物が、以下の構造：
   

   

   を有する、請求項１に記載の化合物。
7. 前記化合物が、以下の構造：
   

   

   を有する、請求項１に記載の化合物。
8. 前記化合物が、以下の構造：
   

   

   を有する、請求項１に記載の化合物。
9. 前記化合物が、以下の構造：
   

   

   を有する、請求項１に記載の化合物。
10. 前記化合物が、以下の構造：
    

    

    を有する、請求項１に記載の化合物。
11. 前記化合物が、以下の構造：
    

    

    を有する、請求項１に記載の化合物。
12. 前記化合物が、以下の構造：
    

    

    を有する、請求項１に記載の化合物。
13. 前記化合物が、以下の構造：
    

    

    を有する、請求項１に記載の化合物。
14. 前記化合物が、以下の構造：
    

    

    を有する、請求項１に記載の化合物。