JPH07196522A

JPH07196522A - 抗ヘリコバクター・ピロリ活性剤

Info

Publication number: JPH07196522A
Application number: JP5353549A
Authority: JP
Inventors: Kyoichi Kobashi; 恭一小橋; Tsutomu Nakanishi; 勤中西; Akira Inada; 昭稲田; Makoto Kawaguchi; 誠川口
Original assignee: Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Rohto Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1993-12-28
Filing date: 1993-12-28
Publication date: 1995-08-01
Anticipated expiration: 2019-07-28
Also published as: JP3547782B2

Abstract

(57)【要約】【目的】胃炎、胃・十二指腸潰瘍の予防及び治療に有
用な抗ヘリコバクター・ピロリ活性剤を提供する。【構成】オウゴン、アロエ、シャクヤク、クジン、ケ
イヒ、大茴香、ニクズク、リョウキョウ、セキシャク、
エンメイソウ、アカメガシワ、ヨウバイヒ、カッコウ、
センブリ、シソシ、ウイキョウ、カンキョウ、ビャクジ
ュツ、サンショウ、コロンボ、ショウキョウ、モッコウ
及びアセンヤクから選ばれる一種または複数の生薬を含
有することを特徴とする抗ヘリコバクター・ピロリ活性
剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、胃炎、胃・十二指腸潰
瘍の原因物質の一つであるヘリコバクター・ピロリ（He
licobacter pylori）の産生するウレアーゼの活性阻害
剤あるいはヘリコバクター・ピロリの増殖阻害剤として
有用な抗ヘリコバクター・ピロリ活性剤に関し、更に詳
しくは、オウゴン、アロエ、シャクヤク、クジン、ケイ
ヒ、大茴香、ニクズク、リョウキョウ、セキシャク、エ
ンメイソウ、アカメガシワ、ヨウバイヒ、カッコウ、セ
ンブリ、シソシ、ウイキョウ、カンキョウ、ビャクジュ
ツ、サンショウ、コロンボ、ショウキョウ、モッコウ及
びアセンヤクから選ばれる一種または複数の生薬を含有
し、抗ヘリコバクター・ピロリ活性を有する胃炎、胃・
十二指腸潰瘍の予防及び治療剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】１９８３年に胃炎または消化性潰瘍患者
の胃粘膜生検組織からカンピロバクター・ピロリ（Camp
ylobacter pylori）が高率に見い出されることが報告
（WarrenJR. Marshall BJ: Lancet, 1273-1275, 1983）
されて以来、胃炎あるいは胃・十二指腸潰瘍の発症にカ
ンピロバクター・ピロリが関与していることが次第に明
らかになり、多くの研究報告がなされてきている。その
後、カンピロバクター・ピロリはヘリコバクター・ピロ
リと改名され、胃炎あるいは胃・十二指腸潰瘍疾患との
関連性が深いことが、臨床的にも明らかになってきた。
ヘリコバクター・ピロリは胃粘膜に感染するグラム陰性
のらせん状桿菌であり、強いウレアーゼ活性を有し、宿
主由来の胃内の尿素をアンモニアに分解して胃酸を中和
し、当該菌の胃の中での生育を可能とする。また、ヘリ
コバクター・ピロリに分解されたアンモニアが胃粘膜に
対して障害性を持つことが近年報告され、胃炎あるいは
胃・十二指腸潰瘍の原因の一つとして注目されている。
以上のようなことから、胃炎あるいは胃・十二指腸潰瘍
の予防及び治療に抗ヘリコバクター・ピロリ活性を有す
る抗生物質等を利用しようとする試みが行われてきた。
これまでβラクタム剤（ペニシリン、アンピシリン
等）、マクロライド剤（エリスロマイシン、クラリスロ
マイシン等）、アミノグリコシド剤（ストレプトマイシ
ン）、テトラサイクリン剤等の抗生物質及びビスマス製
剤がヘリコバクター・ピロリに対して強い抗菌作用を示
すことが報告され、これらの投与が行われてきた。また
近年、Ｈ₂−受容体拮抗剤、プロトンポンプ・インヒビ
ター等の抗潰瘍剤において、ヘリコバクター・ピロリに
対する抗菌活性を併せ持つ成分の開発が行われ、製品化
されつつある。しかしながら、これら従来の抗生物質等
の投与では、長期投与時の安全性あるいは再発等の問題
も多く、有効かつ安全な薬剤の開発が望まれていた。こ
れら従来の薬剤のうち、臨床的に応用されつつあるもの
もあるが、評価が一定せず、これまで有効かつ安全で長
期投与が可能な薬剤はなかった。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ヘリ
コバクター・ピロリの産生するウレアーゼ活性を阻害
し、またはヘリコバクター・ピロリの増殖を阻害するこ
とにより、胃炎あるいは胃・十二指腸潰瘍の発症を防
ぎ、治療するのに有効かつ安全な抗ヘリコバクター・ピ
ロリ活性剤を提供することにある。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、前記課題
を解決するため、一般的に副作用が少なく、長期連用が
推奨されている生薬に着目し、有用なヘリコバクター・
ピロリの産生するウレアーゼの活性阻害剤あるいはヘリ
コバクター・ピロリの増殖阻害剤を開発すべく鋭意研究
した結果、オウゴン、アロエ、シャクヤク、クジン、ケ
イヒ、大茴香、ニクズク、リョウキョウ、セキシャク、
エンメイソウ、アカメガシワ及びヨウバイヒにウレアー
ゼ活性阻害作用があること、また、カッコウ、センブ
リ、オウゴン、シソシ、ウイキョウ、カンキョウ、ビャ
クジュツ、サンショウ、コロンボ、ショウキョウ、モッ
コウ、クジン、アセンヤク、アロエ及びシャクヤクにヘ
リコバクター・ピロリ増殖阻害作用があることを見い出
し、本発明を完成するに至った。

【０００５】即ち、本発明は、ヘリコバクター・ピロリ
の産生する酵素ウレアーゼの活性を阻害し、または、ヘ
リコバクター・ピロリの増殖を阻害することにより、胃
炎あるいは胃・十二指腸潰瘍の発症を防ぎ、治療するの
に有効かつ安全な抗ヘリコバクター・ピロリ活性剤を提
供するものである。

【０００６】本発明において、上記記載の生薬原料は、
粉末にして、あるいは抽出エキスにして用いることがで
きる。粉末の調製法については、生薬原料の形質及び成
分等の諸条件（生薬成分の熱安定性、油脂成分の多いも
の、繊維質の強いもの、芳香性成分の揮散の恐れのある
もの、含水度の高いもの、希望粒度等）を加味して選定
する。粉砕方法としては、生薬原料を直接あるいは凍結
した後、アトマイザー、ハンマーミル、スタンプミル、
ボールミル等を用いて粉砕する。粉砕工程を経た粉砕物
から希望粒度の粉末を得るため、ジャイロ型シフターあ
るいは振動篩等の篩過機により篩過を行う。抽出エキス
の調製法としては、例えば、上記原料の粗砕物を抽出溶
媒中で冷浸し、濾過して濾液を得る。残留物については
上記冷浸、濾過を２〜３回繰り返す。得られた濾液を合
わせ、抽出溶媒を留去した後、濃縮してエキスを得る。
抽出溶媒としては例えば、水、メタノール及びエタノー
ル等のアルコール類、酢酸エチル、アセトン並びにこれ
らの混合物等が挙げられるが、好ましくはエタノールで
ある。抽出溶媒の使用量は原料の粗砕物１重量部に対し
て２〜１０重量部、好ましくは２〜４重量部である。冷
浸温度及び時間は５〜４０℃で、好ましくは１５〜２５
℃で、１日〜３週間、好ましくは５日〜８日間である。
濃縮操作においては、常圧下でも減圧下でもよいが、濃
縮温度は４０℃以下で行うのが好ましい。

【０００７】生薬抽出エキスは、そのまま、または希釈
あるいは濃縮し、もしくは凍結乾燥した後、粉末または
ペースト状に調製し、所望により適宜製剤化して用いる
ことができる。抽出エキスの製剤中の含量は通常、０．
０１〜１０重量％である。剤型は特に限定されず、例え
ば錠剤、カプセル剤、丸剤、顆粒剤及び液剤等であって
よい。剤型に応じて、賦形剤等の添加剤を随意選択する
ことができる。これらの生薬の投与量は例えば抽出エキ
スの場合、約０．１〜１０ｇ／日（原生薬換算量）であ
り、乾燥粉末の場合は約０．０１〜５ｇ／日である。

【０００８】以下、実施例、試験例を挙げて本発明を具
体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるもので
はない。

【０００９】

【実施例】実施例１生薬抽出エキスの作成方法破砕した各種生薬それぞれ１００ｇに２〜３倍量のエタ
ノールを加え、室温にて１週間抽出した。同様の操作を
さらにもう一度繰り返した後、濾過により得られた抽出
液を濃縮乾固し、生薬抽出エキスを得た。原生薬から得
られた抽出エキス量を表１に示した。尚、原生薬は全て
市販のものを使用した。

【表１】生薬エキス含量* 生薬エキス含量* オウゴン３．７６カッコウ６．４９アロエ３．０１センブリ１７．６７シャクヤク８．５４シソシ４．９４クジン３．５２ウイキョウ４．８２ケイヒ４．５１カンキョウ５．２６大茴香１２．３６ビャクジュツ５．２２ニクズク８．０９サンショウ１４．６２リョウキョウ５．４５コロンボ１．９９セキシャク１０．８０ショウキョウ４．７２エンメイソウ３．４２モッコウ６．５９アカメガシワ２．２４アセンヤク３．００ヨウバイヒ１６．６１＊原生薬100g当たりのエキス含量（ｇ）

【００１０】試験例１ヘリコバクタ−・ピロリの産生
するウレアーゼに対するエキスの阻害効果の検討本発明に係わる生薬抽出エキスのウレアーゼ阻害活性を
次の方法で測定した。１）ウレアーゼ酵素標品調製法１０％ウシ胎児血清を加えたブルセラブロス培地（ＢＢ
Ｌ社製）１００ｍｌでヘリコバクター・ピロリATCC 435
04株を６日間培養した後、遠心分離（2,000×g，20mi
n）を行い、沈澱を１ｍＭＥＤＴＡ（同仁化学研究所
製）及び１ｍＭ β−メルカプトエタノール（和光純薬
工業製）を含む２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）で
洗い、再び遠心分離し、沈澱を同様の緩衝液に懸濁し、
菌懸濁液とした。２）生薬エキスウレアーゼ阻害剤の調製法実施例１で得た生薬エキスを必要に応じて水またはメタ
ノールで希釈して阻害剤を調製した。３）ウレアーゼ阻害活性測定法ウレアーゼ活性は尿素を分解して形成されるアンモニア
をインドフェノール法により定量的に求めた。即ち、ウ
レアーゼ５０μｌと阻害剤５０μｌを３７℃で１５分間
インキュベートした後、４００ｍＭの尿素を含んだ１０
０ｍＭのリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）３００μｌを加
え、３７℃温浴中で３０分間反応させた。反応液に１Ｎ
硫酸１００μｌを添加後、溶液Ｉ（1%フェノール、0.00
5%ニトロプルシッドナトリウム）及び溶液ＩＩ（0.1%次
亜塩素酸ナトリウム、0.5%水酸化ナトリウム、5.5%リン
酸二ナトリウム）を加え、６５℃にて２０分間インキュ
ベートした後、生成するインドフェノールの６３０ｎｍ
における吸光度を測定した。ウレアーゼ活性は３７℃、
１分間に１μmolの尿素を分解する活性を１ＩＵ（inter
national unit）とした。阻害剤を添加しない場合の活
性値を１００（阻害率０％）とする阻害率％で表した。
結果を表２に示す。

【表２】ヘリコバクター・ピロリ産生ウレアーゼのエキスによる阻害活性生薬阻害率（％）生薬阻害率（％）（１％濃度）（１％濃度）オウゴン１１．６ニクズク３３．３アロエ１６．４リョウキョウ５２．２シャクヤク２２．２セキシャク６４．１クジン２６．８エンメイソウ７２．３ケイヒ３０．３アカメガシワ８８．０大茴香３０．４ヨウバイヒ９５．２結果：表２に示すとおり、上記生薬は、ウレアーゼ阻害
活性を有することが示された。

【００１１】試験例２ヘリコバクタ−・ピロリの増
殖に対する阻害効果の検討培地：ブルセラブロス（ＢＢＬ社製）に馬血清を７％、
寒天を２％となるように添加し、２０ｍｌを三角フラス
コにとり、更に実施例１で調製した生薬抽出エキスを加
え、オートクレーブで滅菌した後、シャーレで固めた。植菌：凍結保存したヘリコバクター・ピロリATCC 43504
株の懸濁液０.５ｍｌをブルセラHK寒天培地（極東製薬
工業製）に塗布し、５日間培養した後、２ｍｌの生理食
塩水で洗い菌を集めた。そのうちの０.２ｍｌを培地に
塗布した。培養：嫌気ジャー中にキャンピロパック（三菱瓦斯化学
製）を入れ、３７℃で５日間培養した。判定：培養後、コントロールを+++とし、全く生えてい
ないものを−として阻害効果を５段階（+++，++，＋，
±，−）で評価した。実験はそれぞれ２回繰り返した。
結果を表３に示す。

【表３】エキスによるヘリコバクタ−・ピロリの増殖阻害活性生薬増殖生薬増殖カッコウ＋＋コロンボ＋＋センブリ＋＋ショウキョウ＋オウゴン＋＋モッコウ＋シソシ＋＋クジン＋ウイキョウ＋＋アセンヤク＋カンキョウ＋＋アロエ＋ビャクジュツ＋＋シャクヤク − サンショウ＋＋結果：表３に示すとおり、上記生薬は、ウレアーゼ増殖
阻害活性を有することが示された。特にシャクヤクにつ
いては強い増殖阻害活性が認められた。

【００１２】試験例３ヨウバイヒ及びアカメガシワの
ウレアーゼ阻害活性成分の探索ヨウバイヒ及びアカメガシワについては、実施例１で得
たエタノール抽出エキスを水に懸濁後、エーテルで抽出
した。エーテル層は濃縮乾固した。水層は更にｎ−ブタ
ノールで抽出し、ｎ−ブタノール移行部と水移行部を得
た。これらも同様に濃縮乾固し、サンプルとし、試験例
１に従ってウレアーゼ阻害活性を試験した。また、ヨウ
バイヒについては、さらに水移行部をゲル濾過により分
画した。その結果、アカメガシワについてはエタノール
抽出エキス、水移行部、ｎ−ブタノール移行部に阻害作
用がみられたが、各分画で活性には殆ど差が認められな
かった。ヨウバイヒについては、エタノール抽出エキ
ス、水移行部、ｎ−ブタノール移行部に阻害が認めら
れ、特に水移行部に強い活性が認められた。水移行部の
Sephadex LH-20による分画では、フラクション１に強い
阻害活性が認められた。

【表４】アカメガシワ及びヨウバイヒ抽出エキスのウレアーゼ阻害活性５０％阻害濃度（％）アカメガシワヨウバイヒ Crude＊ 0.31 0.033 H₂0 0.22 0.031 n-BuOH 0.41 0.12 Ether > 1.0 > 1.0 ＊エタノール抽出エキス

【表５】ヨウバイヒのH₂O移行部のSephadex LH-20による分画とウレアーゼ阻害活性５０％阻害濃度（％） Fraction 1 0.0054 Fraction 2 0.36 Fraction 3 0.047

【００１３】アカメガシワ及びシャクヤクは実施例１で調製した生薬
抽出エキスを用い、結晶セルロースと上記の割合で混
合、乾燥した後、打錠する。錠剤の場合はこれを粉砕
し、ステアリン酸マグネシウムを１％の割合となるよう
に混合し、打錠する。カプセル剤の場合は、打錠前の混
合粉末をカプセル充填機にて第１号カプセルに充填す
る。１回服用量は１錠あるいは１カプセルとする。

【００１４】実施例１で調製した生薬抽出エキスを用い、他の成分を
上記の割合で混合した後、適量の水を加え練合、造粒を
行う。造粒物は流動層乾燥機にて乾燥し、整粒の後、着
香剤として微量のトウヒ油を添加し、分包する。１回服
用量は１包とする。

【００１５】実施例１で調製した生薬抽出エキスを用い、他の上記成
分を加えて水に溶かして全量を６０mlとして液剤を製し
た後、遮光したガラス瓶に充填し、製品とする。

【００１６】

【発明の効果】胃炎、胃・十二指腸潰瘍の原因物質の一
つであるヘリコバクター・ピロリの産生するウレアーゼ
の活性阻害作用あるいはヘリコバクター・ピロリの増殖
抑制作用を有する生薬を使用することにより、胃炎ある
いは胃・十二指腸潰瘍を予防及び治療することができ
る。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】オウゴン、アロエ、シャクヤク、クジ
ン、ケイヒ、大茴香、ニクズク、リョウキョウ、セキシ
ャク、エンメイソウ、アカメガシワ、ヨウバイヒ、カッ
コウ、センブリ、シソシ、ウイキョウ、カンキョウ、ビ
ャクジュツ、サンショウ、コロンボ、ショウキョウ、モ
ッコウ及びアセンヤクから選ばれる一種または複数の生
薬を含有することを特徴とする抗ヘリコバクター・ピロ
リ（Helicobacter pylori）活性剤。
【請求項２】オウゴン、アロエ、シャクヤク、クジ
ン、ケイヒ、大茴香、ニクズク、リョウキョウ、セキシ
ャク、エンメイソウ、アカメガシワ及びヨウバイヒから
選ばれる一種または複数の生薬を含有し、ヘリコバクタ
ー・ピロリの産生するウレアーゼに対して阻害活性を有
する請求項１の抗ヘリコバクター・ピロリ活性剤。
【請求項３】カッコウ、センブリ、オウゴン、シソ
シ、ウイキョウ、カンキョウ、ビャクジュツ、サンショ
ウ、コロンボ、ショウキョウ、モッコウ、クジン、アセ
ンヤク、アロエ及びシャクヤクから選ばれる一種または
複数の生薬を含有し、ヘリコバクター・ピロリの増殖阻
害活性を有する請求項１の抗ヘリコバクター・ピロリ活
性剤。