JPH11503459A - 癌増殖を阻止するベンゾイミダゾール含有医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 哺乳動物の白血病を治療するための医薬組成物が開示されている。使用する特殊の殺真菌薬は、式（Ｉ）であらわされるベンゾイミダゾールの誘導体であり、式（Ｉ）中Ｘは水素、ハロゲン、７個より少ない炭素原子をもつアルキル、または７個より少ない炭素原子をもつアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数であり；Ｙは水素、塩素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；そしてＲは水素または炭素原子１ないし８個をもつアルキル基であり、Ｒ₂は４−チアゾリルまたはＮＨＣＯＯＲ₁であり、ここでＲ₁は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素あり、またはその医薬に許容可能な無機または有機酸付加塩である。殺真菌薬を化学療法剤と組み合わせて含有する、哺乳動物の腫瘍および癌の増殖を阻止しウィルス感染症の治療に用いることができる医薬組成物が開示されている。使用する特殊の殺真菌薬はベンゾイミダゾール誘導体である。その組成物は増強剤も含むことができる。

Description

【発明の詳細な説明】 癌増殖を阻止するベンゾイミダゾール含有医薬組成物 技術的分野 本発明は哺乳動物、特にヒトおよび温血動物における白血病を含める癌および 腫瘍の増殖を阻止する医薬組成物である。これはウィルスにも効果があり、ウィ ルス感染症の治療に用いることができる。この組成物はベンゾイミダゾール誘導 体を含む。 発明の背景 癌は動物およびヒトの主な死亡原因である。癌の正確な原因は不明であるが、 喫煙または発癌性物質への暴露などの或る種の行動に関係しており、或る種の癌 および腫瘍の発生は多くの研究者によって明らかにされている。 多くの種類の化学療法剤が癌および腫瘍細胞に対して有効であることが示され たが、すべての種類の癌および腫瘍がこれらの薬剤に反応するわけではない。残 念ながら、これら薬剤の多くは正常細胞も破壊する。これら化学療法剤の正確な 作用メカニズムは必ずしもわかっていない。 癌治療分野における進歩にもかかわらず今日までの主な治療法は手術、放射線 照射、化学療法および骨髄移植である。化学療法剤治療は転移性の癌または特に 攻撃的な癌を攻撃すると言われている。このような殺細胞性または細胞増殖抑制 性薬剤は大きい増殖因子をもつ癌、すなわち癌細胞が急速に分裂しつつある癌に 最もよく効く。今日のところ、ホルモン類、特にエストロゲン、プロゲステロン およびテストステロン、および種々の微生物によって産生される若干の抗生物質 、アルキル化剤、および代謝拮抗物質が腫瘍学者の使用できる治療群を構成する 。癌および腫瘍細胞に特異性をもち、正常細胞には影響を与えない理想的細胞増 殖抑制性薬剤が切望される。残念ながら、このようなものは発見されず、その 代わりに特に速やかに分裂する細胞（腫瘍および正常細胞両方）を標的にした薬 剤が用いられている。 腫瘍細胞に対する或る特殊の特異性によってそれら腫瘍細胞を標的にする物質 の開発が打開策であるのは明らかである。或いは腫瘍細胞に対して細胞傷害性で あり、他方正常細胞には緩和な作用をあらわす物質が所望である。そこで、哺乳 動物の腫瘍および癌の増殖を有効に抑制し、正常細胞には影響を与えないかまた は緩和な影響のみを与える医薬組成物を提供することが本発明の目的である。 より詳細に述べるならば、医薬担体と本明細書に定義されるベンゾイミダゾー ル誘導体とを含む抗癌組成物並びにこのような癌の治療法を提供することが本発 明の目的である。 白血病細胞に対する特殊の特異性をもつためにそれら白血病細胞を標的にする 物質の開発も突破口になる。或いは、白血病細胞に対して細胞傷害性であり、他 方正常細胞には緩和な影響をあらわす物質が所望される。そのため、本発明の目 的は白血病の治療に有効であり、正常血球には影響を与えないかまたは緩和な影 響のみを与える医薬組成物を提供することである。 より詳細に述べるならば、医薬担体とここに定義されるベンゾイミダゾール誘 導体とを含む組成物を、白血病治療法と共に提供することが本発明の目的である 。 これらベンゾイミダゾール組成物は化学療法剤と組み合わせて用いるとき、白 血病を含める癌および腫瘍の増殖を抑制し得ると考えられる。ベンゾイミダゾー ルは癌、腫瘍、ウィルスまたは細菌の増殖抑制に特に有効である。これらベンゾ イミダゾールと、腫瘍を効果的に破壊する他の化学療法剤との併用は、新規の治 療法である。 より詳細に述べるならば、本明細書に明らかにした医薬担体とベンゾイミダゾ ール誘導体と化学療法剤とを含む抗癌組成物を、このような癌の治療法と共に提 供することが本発明の目的である。これらの組成物には増強剤を用いることがで きる。 ベンゾイミダゾール組成物はウィルスに対しても効果があり、ウィルス感染症 の治療に用いることができる。そのため、本発明のもう一つの目的は、ベンゾイ ミダゾールを増強剤と組み合わせて投与する、ＨＩＶ、インフルエンザおよびリ ノウィルスなどのウィルス感染症の治療法を提供することである。 これらのおよびその他の目的は下記の本発明の詳細な説明から明らかになる。 発明の概要 哺乳動物、特に温血動物およびヒトの白血病を含む癌、腫瘍を治療するための 医薬組成物であって、医薬担体と、下記の式であらわされる群から選択される抗 癌化合物を有効量含有する医学組成物が請求される。 ［式中、Ｘは水素、ハロゲン、７個より少ない炭素原子をもつアルキル、または ７個より少ない炭素原子をもつアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数で あり；Ｙは水素、塩素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；Ｒは水素または炭 素原子１から８までのアルキル基であり、Ｒ₂は４−チアゾリル、ＮＨＣＯＯＲ₁ であり、ここでＲ₁は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素、より好適 には７個より少ない炭素原子をもつアルキル基である。］ これらの組成物を用い、その有効量を経口、直腸内、局所または非経口、静脈 内投与し、または腫瘍に注入することによって、ヒトまたは動物の癌およびその 他の腫瘍の増殖を抑制することができる。これらの組成物は、健康な細胞に有害 な影響をもたらすアドリアマイシンに比べて、非常に健康な細胞に影響しない。 哺乳動物、特に温血動物およびヒトの治療用医薬組成物であって、医薬担体と 有効量の化学療法剤および上記のベンゾイミダゾールを含む医薬組成物。 増強剤(poteniators)をこの組成物と共に用いることもできる。 好適には、組成物は下記の式であらわされる。 ［式中、Ｒは１−８個の炭素原子をもつアルキルであり、Ｒ₂は４−チアゾリル 、ＮＨＣＯＯＲ₁からなる群から選択され、ここでＲ₁はメチル、エチルまたはイ ソプロピルである化合物、および有機および無機酸との無毒性の医薬に許容可能 な酸付加塩である。］ 最も好ましい化合物は２−（４−チアゾリル）ベンゾイミダゾール、メチル−（ ブチルカルバモイル）−２−ベンゾイミダゾールカルバメートおよび２−メトキ シカルボニルアミノ−ベンゾイミダゾールおよびＹがクロロである化合物である 。 本発明の詳細な説明 Ａ．定義： 本明細書に用いる用語「含む(comprising)」は、種々の成分が本発明の医薬組 成物に一緒に用いられることを意味する。よって、「実質上〜からなる(consist ing essentially of)」および「〜からなる(consisting of)」は用語comprising に包含される。 本明細書に用いる用語「医薬に許容可能な」成分とは、不当な不都合な副作用 （例えば毒性、刺激、およびアレルギー反応）がなく、合理的な利益／リスク比 をもった、ヒトおよび／または動物に使用するのに適した成分である。 本明細書に用いる用語「安全で有効な量」とは、本発明の方法で用いた場合に 不当な不都合な副作用（毒性、刺激またはアレルギー反応など）がなく、すなわ ち合理的な利益／リスク比をもって所望の治療効果を与えるのに十分な成分量を 言う。特異的「安全で有効な量」は治療すべき特殊の条件、患者の肉体的状態、 治療する哺乳動物の種類、治療期間、併用治療（もしあれば）の性質、および用 いられる特殊の処方および化合物またはその誘導体の構造などの要因によって変 化するのは明らかである。 本明細書に用いる「医薬付加塩」とは、抗癌化合物の有機または無機酸との塩 である。これらの好適酸付加塩は塩化物、臭化物、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩、ス ルホン酸塩、蟻酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、クエン酸塩、安息 香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩などである。 本明細書に用いる「医薬担体」とは、抗癌剤を動物またはヒトにデリバリーす るための医薬に許容可能な溶剤、沈殿防止剤(suspending agent)またはビヒクル 、例えばリポソームなどである。担体は液体でも固体でもよく、計画した投与法 を念頭に置いて選択される。 本明細書に用いる「癌」とは哺乳動物に見られる腫瘍および白血病を含めるあ らゆる種類の癌または新生物または悪性腫瘍を指す。癌には正常健康細胞を攻撃 する悪性疾患も含まれる。白血病は正常健康血球、並びに哺乳動物に見られる骨 細胞産生性骨髄を攻撃する疾患を含む。 本明細書に用いる「抗癌化合物」とはベンゾイミダゾールおよびそれらの塩類 である。正確なベンゾイミダゾール類は以下に詳細に記載する。好適材料は、Ｂ ＡＳＦおよびヘキスト、デュポンおよびＭＳＤ−ＡｇＶｅｔから「チアベンダゾ ール（登録商標）」、「ベノミル（登録商標）」および「カルベンダジン（登録 商標）」の名称で販売されている製品である。 本明細書に用いる「ウィルス」は動物またはヒトを含む哺乳動物に感染するウ ィルスを含む。ウィルスにはＨＩＶ、インフルエンザ、ポリオ ウィルス、ヘル ペス、リノウィルスなどが含まれる。 本明細書に用いられる「化学療法剤」はＤＮＡ相互作用性薬剤、代謝拮抗物質 、チュブリン相互作用性薬剤、ホルモン剤およびその他、例えばアスパラギナー ゼまたはヒドロキシウレアなどを含める。 本明細書に用いられる「増強剤」とは、化学療法剤およびベンゾイミダゾール と組み合わせて用いるトリプロリジンおよびそのシス型異性体、およびプロコダ ゾールなどの物質である。 Ｂ．抗癌化合物 本発明の抗癌化合物は、殺真菌作用が公知のベンゾイミダゾール誘導体である 。それらは真菌を抑制、根絶するために用いられる浸透性(systemic)殺真菌薬で ある。この化合物は下記の構造をもつ： ［構造中、Ｘは水素、ハロゲン、７個より少ない炭素原子をもつアルキル、また は７個より少ない炭素原子をもつアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数 であり；Ｙは水素、塩素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；Ｒは水素または 炭素原子１から８までのアルキル基であり、Ｒ₂は４−チアゾリル、ＮＨＣＯＯ Ｒ₁で、ここでＲ₁は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素、より好適に は７個より少ない炭素原子をもつアルキル基である。］。 好適には本組成物は下記の式であらわされる： ［式中、Ｒは１から８までの炭素原子をもつアルキル、Ｒ₂は４−チアゾリル、 ＮＨＣＯＯＲ₁からなる群から選択され、ここでＲ₁はメチル、エチルまたはイソ プロピル、ならびに有機および無機酸との無毒性で医薬に許容可能な酸付加塩で ある。］ 最も好適な化合物は２−（４−チアゾリル）ベンゾイミダゾール、メチル−（ メチルカルバモイル）−２−ベンゾイミダゾールカルバメートおよび２−メトキ シカルボニルアミノ−ベンゾイミダゾール、およびＹがクロロで、Ｘが水素であ る化合物である。 これらの化合物は１９７３年６月１２日にアダムス(Adams)らに与えられた米 国特許第３，７３８，９９５号に記載された方法によって製造される。チアゾリ ル誘導体は、ブラウン(Brown)らの「J．Am．Chem．Soc．」、８３巻、１７６４ ページ（１９６１）およびグレンダ(Grenda)らの「J．Org．Chem．」、３０巻、 ２５９ページ（１９６５）に記載されている方法によって製造される。 殺真菌薬、特に浸透性殺真菌薬は腫瘍を抑制しまたはそれらの増殖を著しく減 少させることができる。浸透性殺真菌薬は植物または動物体全体を移動する能力 をもつ。これはプラスの特性であるとはいえ、ウィルス感染症、癌または腫瘍を 治療する有効な化合物の重要な必要事項ではない。 Ｃ．化学療法剤 化学療法剤は一般にＤＮＡ相互作用性薬剤、代謝拮抗物質、チュブリン相互作 用性薬剤、ホルモン剤およびその他、例えばアスパラギナーゼまたはヒドロキシ ウレアなどに分類される。化学療法剤の各群はさらに活性または化合物の種類に よって分けることができる。本発明の抗癌剤またはベンゾイミダゾールと組み合 わせて用いる化学療法剤はこれらすべての群のメンバーを含める。化学療法剤お よびそれらの投与法を詳細に検討するためには、ドール(Dorr)らの「癌化学療法 ハンドブック(Cancer Chemotherapy Handbook)」２版、１５〜３４ページ、Appl eton & Lange（コネチカット、１９９４）を参照し、参照することによって、そ の内容が本明細書の一部を構成するものとする。 ＤＮＡ相互作用性薬剤には、シスプラチン、シクロホスファミド、アルトレタ ミンなどのアルキル化剤；ブレオマイシンなどのＤＮＡ鎖切断剤；ダクチノマイ シンおよびドキソルビシンなどの挿入性トポイソメラーゼ II インヒビター；エ トポシドおよびテニポシドなどの非挿入性トポイソメラーゼ II インヒビター； およびプルカミジンなどのＤＮＡ小溝(minor groove)結合剤が含まれる。 アルキル化剤は細胞性ＤＮＡ、ＲＮＡ、および蛋白質分子と、および比較的小 さいアミノ酸、グルタチオンおよび同様な化学物質と共有結合化学的付加物を形 成する。一般にこれらアルキル化剤は、核酸、蛋白質、アミノ酸、またはグルタ チオン中の例えばアミノ、カルボキシル、燐酸、スルフヒドリル基などの細胞構 成成分中の求核原子と反応する。癌治療におけるこれらアルキル化剤のメカニズ ムおよび役割は十分には理解されていない。典型的アルキル化剤は下記のものを 含む： ナイトロジェンマスタード、例えばクロラムブシル、シクロホスファミド、イ ソファミド、メクロルエタミン、メルファラン、ウラシルマスタード； アジリジン、例えばチオテパ； メタンスルフォン酸エステル、例えばブスルファン； ニトロソウレア、例えばカルムスチン、ロムスチン、ストレプトゾシン； 白金錯化合物、例えばシスプラチン、カルボプラチン； 生体内還元性アルキレーター、例えばマイトマイシン、プロカルバジン、ダカ ルバジンおよびアルトレタミン。 ＤＮＡ鎖切断剤はブレオマイシンを含める。 ＤＮＡトポイソメラーゼ II インヒビターは下記のものを含む； 挿入剤、例えばアムサクリン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソ ルビシン、イダルビシン、およびミトキサントロン； 非挿入剤、例えばエトポシドおよびテニポシド。 ＤＮＡ小溝結合剤はプリカマイシンである。 代謝拮抗物質は二主要メカニズムのうちのどちらかによって核酸の産生を阻害 する。これら薬剤の幾つかは、ＤＮＡ合成の直接的前駆物質であるデオキシリボ ヌクレオシド三燐酸の産生を阻止し、これによってＤＮＡ複製を阻止する。若干 の化合物はプリン類またはピリミジン類に十分似ており、同化ヌクレオチド経路 においてそれらに置換し得る。これらの類似化合物はその後ＤＮＡおよびＲＮＡ の通常の相対物に代わってそれらＤＮＡおよびＲＮＡ中に置換される。ここで有 用な代謝拮抗物質は下記のものを含める： 葉酸拮抗物質、例えばメトトレキセートおよびトリメトレキセート； ピリミジン拮抗物質、例えばフルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、 ＣＢ３７１７、アザシチジン、シタラビン、およびフロキシウリジン； プリン拮抗物質はメルカプトプリン、６−チオグアニン、フルダラビン、ペン トスタチンを含める； 糖改質類似化合物はシクトラビン、フルダラビンを含める； リボヌクレオチド還元酵素インヒビターはヒドロキシウレアを含める。 チュブリン相互作用性薬剤は、重合して細胞の微小管を形成する蛋白質である チュブリンの特異的部位に結合することによって作用する。微小管は重要な細胞 構造単位である。相互作用性薬剤がその蛋白質に結合するとき、細胞は微小管を 形成することができない。チュブリン相互作用性薬剤にはビンクリスチンおよび ビンブラスチン（両方ともアルカロイドである）およびパクリタクセルがある。 ホルモン剤も癌および腫瘍治療に有用である。それらはホルモン感受性腫瘍に 用いられ、普通は天然資源から誘導される。これらには次のものが含まれる： エストロゲン、共役(conjugated)エストロゲンおよびエチニル エストラジオ ールおよびジエチルスチルベステロール、クロルトリアニセンおよびイデネスト ロール； プロゲスチン、例えばヒドロキシプロゲステロン カプロエート、メドロキシ プロゲステロン、およびメゲストロール； アンドロゲン、例えばテストステロン、テストステロン プロピオネート；フ ルオキシメステロン、メチルテストステロン。 副腎コルチコステロイド類は天然の副腎コルチゾルまたはヒドロコーチゾンか ら誘導される。これらが用いられるのは、それらのもつ抗炎症効果並びにそれら の若干がもつ有糸分裂阻止効果およびＤＮＡ合成抑制効果のためである。これら の化合物にはプレドニゾン、デキサメタゾン、メチルプレドニゾロン、およびプ レドニゾロンがある。 黄体化ホルモン放出ホルモン剤、またはゴナドトロピン放出ホルモン拮抗剤は 主として前立腺癌の治療に用いられる。これらにはロイプロリド アセテートお よびゴセレリン アセテートがある。これらは精巣におけるステロイド類の生合 成を阻害する。 抗ホルモン薬には次のものが含まれる： 抗エストロゲン薬、例えばタモキシフェン； 抗アンドロゲン薬、例えばフルタミド；そして 抗副腎薬、例えばミトタンおよびアミノグルテチミド。 ヒドロキシウレアは主として酵素リボヌクレオチド還元酵素の阻害によって作 用するようにみえる。 アスパラギナーゼはアスパラギンを非機能性アスパラギン酸に変換し、それに よって腫瘍中の蛋白質合成を遮断する酵素である。 Ｄ．増強剤 「増強剤」は医薬組成物および／または免疫抑制剤の効果を改善および／また は増加するいかなる物質でもよい。このような増強剤の１つは、トリプロリジン およびそのシス型異性体である；これらは化学療法剤およびベンゾイミダゾール と組み合わせて用いられる。トリプロリジンは米国特許第５，１１４，９５１号 （１９９２）に記載されている。その他の増強剤はプロコダゾール、１Ｈ−ベン ゾイミダゾール−２−プロパン酸；［β−（２−ベンゾイミダゾール）プロピオ ン酸；２−（２−カルボキシエチル）ベンゾイミダゾール；プロパゾール］であ る。プロコダゾールはウィルスおよび細菌感染症に対する非特異的活性免疫防御 剤であり、ここに請求される組成物と併用することができる。それはベンゾイミ ダゾールのみと共に癌、腫瘍、白血病およびウィルス感染症を有効に治療するこ ともできるし、ベンゾイミダゾールと化学療法剤との組み合わせと併用すること もできる。プロピオン酸およびその塩類およびエステル類もここに請求される医 薬組成物と組み合わせて用いることができる。 増強剤は、ベンゾイミダゾール化合物のウィルス性および他の感染症の治療効 果も改善する。増強剤は安全で有効な量でこれらの抗癌剤と組み合わせて用いる ことができる。これらの組み合わせを患者または動物に、経口、直腸内、局所ま たは非経口的に投与することができる。 アスコルビン酸、ベーターカロチン、ビタミンＡおよびビタミンＥなどの抗酸 化性ビタミンは本発明の組成物と共に投与できる。 Ｅ．用量 本発明の方法においては適切ないかなる用量を投与してもよい。化合物および 担体の種類および量は温血動物またはヒトの種、体重および治療すべき癌または 腫瘍によって広く変動する。使用する化学療法剤および抗癌化合物の範囲および 比率は化学療法剤および治療する癌の種類に依存する。一般に体重１キログラム （ｋｇ）あたり約２ミリグラム（ｍｇ）ないし約４００ｍｇの用量が適切である 。ベンゾイミダゾールでは１５ｍｇないし約１５０ｍｇ／（体重１ｋｇ）を使用 するのが好ましい。化学療法剤ではより少量、すなわち約０．５ｍｇ／（体重１ ｋｇ）ないし約４００ｍｇ／（体重１ｋｇ）が適切である。一般にヒトにおける 用量はマウスなどの温血小動物の場合より少ない。用量単位は単独化合物か、ま たはそれらと他の化合物または他の癌抑制化合物との混合物を含んでもよい。用 量単位は希釈剤、増量剤、担体なども含むことができる。その単位は固体または ゲル状、例えばピル、錠剤、カプセル、リポソームなどでも、経口、直腸内、局 所、非経口投与または静脈内投与、または腫瘍部位または腫瘍部位周辺にまたは 骨髄または骨髄周辺への注入に適する液状であってもよい。 Ｆ．投与量デリバリー系 抗癌化合物および化学療法剤は一般的には医薬に許容可能な担体と混合される 。この担体は固体または液体、またはリポソームでもよく、その種類は使用する 投与型に基づいて選択されるのが普通である。活性薬剤を、錠剤またはカプセル 、リポソームの形状で、または集塊性粉末として、または液状で、混合して投与 することができる。適切な固形担体の例はラクトース、スクロース、ゼラチンお よび寒天を含める。カプセルまたは錠剤は処方が容易で、呑み込んだり噛んだり し易い；その他の固体形には顆粒、および嵩高の粉末(bulk powder)が含まれる 。錠剤は適切な結合剤、滑剤、希釈剤、崩壊剤、着色料、香料、流動化剤、およ び溶解剤を含んでもよい。適切な液体投与型の例は水溶液または水懸濁液、医薬 に許容可能な脂肪および油、アルコール類、またはエステル、乳濁液、シロップ 、またはエリキシル、懸濁液を含めるその他の有機溶媒、非発泡性顆粒から再構 成した溶液および／または懸濁液、発泡性顆粒から再構成した発泡性製剤などを 含める。このような液体投与型は例えば適した溶剤、保存料、乳化剤、沈殿防止 剤、希釈剤、甘味料、増粘剤および溶解剤を含んでもよい。経口投与型は任意的 に香料および着色料を含む。非経口および静脈内投与型はミネラルおよび、選択 された注入またはデリバリーシステムのタイプにそれらを適合させるその他の物 質も含む。 本発明の経口投与型を処方するために用いられる医薬に許容可能な担体および 賦形薬の特殊の例は１９７５年９月２日にロバート（Robert）による米国特許第 ３，９０３，２９７号に記載されている。本発明に有用な投与型を作る技術およ び組成物は次の参照文献に記載されている：「７種類の近代的薬物(7 Modern Ph armaceutics )」の９および１０章（バンカー＆ローズ(Banker & Rhodes)編、１ ９７９）；リーベルマン(Lieberman)ら、「薬剤投与型：錠剤(Pharmaceutica l Dosage Forms ：Tablets )」（１９８１）；およびアンセル(Ansel)、「薬剤投与 型の紹介第２版(Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 2nd Edition) 」（１９７６）。 Ｇ．治療法 治療法は治療しようとする特定の癌または腫瘍タイプの治療に有効な適切な方 法であればいかなる方法でもよい。治療は経口、直腸内、局所、非経口、または 静脈内投与もしくは腫瘍内への注入などによって行われる。有効量を適用する方 法も治療する腫瘍によって変わる。適切な担体、付加的癌抑制化合物または化合 物類、または使用を容易にする希釈剤と共に処方したベンゾイミダゾール化合物 を静脈内、皮下または筋肉内投与により非経口投与するのが、温血動物にこれら 化合物を投与する好ましい方法であると考えられる。 ウィルス感染症の治療法も経口、直腸内、局所、非経口または静脈内投与によ り行われてもよい。実際の時間および用量は治療するウィルスおよび所望血中濃 度に依存する。 これら同一の浸透性殺真菌剤を単独で、またはその他の殺真菌剤と組み合わせ て、化学療法剤と併用することができる。 これらの材料と共に用いることができるその他の殺真菌剤には、 １Ｈ−１，２，４−トリアゾール誘導体、例えばフルコナゾール、およびプロピ コナゾール、およびＮ−クロロフェニルチオカルバメートが含まれる。Ｎ−ホス フォノグリシン誘導体のような除草剤、例えばグリフォセートなど、もベンゾイ ミダゾールと組み合わせて用いることができる。 下記の実施例は例証的であり、本発明を制限するものではない。 実施例Ｉ 結腸、乳および肺癌細胞テスト 次のような細胞培養試験を行い、ベンゾイミダゾール化合物のヒト結腸、乳お よび肺癌細胞に対する毒性を試験した。細胞の生存度はＭＴＴ（３−［４，５− ジメイルチアゾール−２−イル］−２，５−ジフェニルテトラゾリウム ブロミ ド）還元を見ることによって評価した。ＭＴＴ分析試験は細胞生存度の公知の尺 度である。 結腸癌細胞（アメリカ型培養コレクション（ＡＴＣＣ）からのＨＴ２９）およ び乳細胞（ＡＴＣＣの細胞系からのＭＸ１）を１０％ウシ胎児血清を含むイーグ ル最小必須培地に培養した。肺癌細胞（ＡＴＣＣ細胞系からのＡ５４９）は１０ ％ウシ胎児血清を含むハムのＦ１２培地に培養した。 この腫瘍細胞を継代培養し、培養フラスコに所望の細胞密度で植え付けた。培 養培地を傾瀉し、細胞シートを燐酸緩衝食塩液（ＰＢＳ）で２回洗った。細胞を トリプシン化(trypsinized)し、つき砕き(triturated)、それからフラスコに植 え付けた。特に記載しない限り、培養物を３７±１℃で、空気中５±１％二酸化 炭素の加湿空気中でインキュベートした。培養物を、それらが５０〜８０％融合 するまでインキュベートした。 フラスコがほぼ融合状態になったときに細胞を継代培養した。培地をフラスコ から吸引し、細胞シートをＰＢＳで２回すすいだ。次に、トリプシン溶液を各フ ラスコに加えて細胞シートを覆った。３０〜６０秒後にそのトリプシン溶液を除 去し、フラスコを室温で２〜６分間インキュベートした。細胞の９０％が追い出 されたときに増殖培地を加えた。細胞をつき砕いて(trituration)取り出し、滅 菌した遠心分離管に移した。懸濁液中の細胞濃度を測定し、適当に希釈して５０ ００細胞／ｍｌの密度にした。細胞を９６ウェル バイオアッセイ プレートの 指定されたウェルで継代培養した（１ウェルあたり細胞懸濁液２００マイクロリ ットル）。ＰＢＳを残りのすべてのウェルに入れて湿度を保持した。それからプ レートを１晩インキュベートし、その後試験物処理をした。 試験物の各用量を試験するために、各希釈物１００マイクロリットルで培養物 の４重の（４回づつの）ウェルを処理した。溶剤対照標準として指定されたウェ ルには付加的に１００マイクロリットルのメタノール対照標準を入れた；陰性対 照標準のウェルには処理培地１００マイクロリットルを付加的に入れた。試験物 または培地で処理しなかった残るウェルにはＰＢＳを加えた。プレートをその後 約５日間インキュベートした。 ５日間のインキュベーションの終わりに、各用量群を顕微鏡で検査し、毒性を 評価した。処理培地中ＭＴＴの０．５ｍｇ／ｍｌ希釈物を作り、その希釈物を０ ．４５マイクロリットル フィルターを通して濾過し、溶解しなかった結晶を除 去した。培地をバイオアッセイ プレートのウェルから傾瀉した。その直後に、 濾過したＭＴＴ溶液２０００マイクロリットルを、２個の未処理プランク試験ウ ェルを除く全ての試験ウェルに加えた。２個のブランクウェルには処理培地２０ ０マイクロリットルを加えた。プレートを約３時間インキュベーターに戻した。 インキュベーション後、培地を含むＭＴＴを傾瀉した。過剰の培地を各ウェルに 加え、プレートを室温で約２時間振動した。 各ウェルの５５０ｎｍの吸光度（ＯＤ₅₅₀）をモレキュラー・デバイス(Molecu lar Device)（Menlo Park，CA）ＶＭａｘプレートリーダーで測定した。 溶剤対照標準ウェルの平均ＯＤ₅₅₀、および各試験物希釈物および各ブランク ウェルおよび陽性対照標準の平均ＯＤ₅₅₀を計算した。ブランク ウェルの平 均ＯＤ₅₅₀を溶剤対照標準ウェルの平均値および試験物ウェルの平均値から差し 引くと、それぞれの平均ＯＤ₅₅₀が得られる。 用量反応曲線を、縦軸に対照標準の％（直線）および横軸に試験物の濃度（対 数）を取り、半対数プロットして作成した。ＥＣ₅₀は各試験物のプロットから補 外法で求めた。 メタノール中で投与した試験物では、別個の反応を作成し、メタノールデータ を補正した。 陽性対照標準としてアドリアマイシンを用いた。すべての場合に、それは試験 材料のどれよりも１または２log だけ毒性が大きかった。アドリアマイシンは現 在使用される比較的強力な作用物質の１つであり、顕著な副作用をもっている物 質である。その他の極めて有効な化学療法剤類の最大血中濃度はアドリアマイシ ンの最大血中濃度より１０ないし５０倍も高いらしい。 ＥＣ₅₀は細胞の半数が死滅する濃度である。 正常健康細胞では、下記の結果が得られた。明らかにベノミルおよびカルベン ダジンは正常健康細胞に対してアドリアマイシンより遥かに毒性が小さい。 肺癌細胞（Ａ−５４９）、乳癌細胞（ＭＣＦ−７）および結腸癌細胞（ＨＴ− ２９）を用いた関連研究において、浸透性殺真菌剤であるチアベンダゾールはこ れらの細胞を効果的に殺した。表３はその結果をまとめたものである。 これらの実験はこれら組成物が有効に腫瘍細胞を殺すことを示す。 実施例II マウスを無作為に選択し、群に分けて処理した。５群に白血病を感染させた。 疾患動物に５日間投与し、２日間は投与せず、その後さらに５日間投与し、３日 間休薬し、それから５日間投与して２日間休薬した。この不規則なパターンでの 間歇投与は理想的治療法ではなかったが、結果はカルベンダジン（登録商標）が プラスの効果をもつことを示した。マウスの１群はシトキサン（登録商標）、２ −［ビス（２−クロロエチル）−アミノ−１−オキソ−２−アザ−５−オキソホ スフォリジン］で治療し、対照標準をカノーラ油で投与した。３群は種々の濃度 のカルベンダジン（登録商標）、メチル−（ブチルカルバモイル）−２−ベンゾ イミダゾール−カルバメートで治療した。何も投与しない対照標準も用いた。 カルベンダジン（登録商標）を４０００ｍｇ／ｋｇ、２５００ｍｇ／ｋｇおよび １０００ｍｇ／ｋｇの３種類の濃度で投与した。シトキサン（登録商標）を１２ ５ｍｇ／ｋｇで投与した。８日後、非投与群では１匹のマウスが死に、１０日目 までに８匹が死に、１１日目には１０匹のマウスすべてが死んだ。シトキサン（ 登録商標）群のマウスは２１日以上生存した。多量カルベンダジン（登録商標） を投与した群では１４日目に１匹のマウスが死に、１５、１６および１７日目に ２匹づつが死に、２０、２１および２２日目に１匹づつが死んだ。この群の平均 日数は１７．３である。中間量投与群は１４日目に２匹のマウスが死に、１５日 目に４匹、１６日目に１匹、１９日目に２匹、そして２１日目に１匹死んだ。こ の群の平均日数は１６．５０であった。最小量投与群では１２、１３、１４およ び１５日目に２匹づつのマウスが死んだ；そして１６日と１７日に１匹づつが死 んだ。この群の平均日数は１４．１である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/70 Ａ６１Ｋ 31/70 31/71 31/71 33/24 33/24 45/00 45/00 // Ｃ０７Ｄ 235/30 Ｃ０７Ｄ 235/30 Ａ Ｂ (31)優先権主張番号 ６０／００１，８３７ (32)優先日 1995年８月３日 (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，Ｓ Ｚ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，Ｉ Ｓ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ， ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，Ｓ Ｄ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．下記の式で表される化合物を安全で有効な量含有することを特徴とする癌、 腫瘍、またはウィルス感染症を治療するための医薬組成物。 ［式中Ｘは水素、ハロゲン、７より少ない炭素数をもつアルキルまたは７より少 ない炭素数をもつアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数；Ｙは水素、塩 素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；Ｒは水素、または炭素数１ないし８を もつアルキル基で、Ｒ₂は４−チアゾリルまたはＮＨＣＯＯＲ₁であり、ここでＲ₁ は７個より少ない炭素原子をもつ脂肪族炭化水素であり、またはそれらの医薬 に許容可能な無機または有機酸付加塩類である。］ ２．さらに安全かつ有効な量の化学療法剤を含有することを特徴とする請求項１ に記載の医薬組成物。 ３．さらに安全で有効な量の増強剤を含有することを特徴とする請求項１に記載 の医薬組成物。 ４．Ｒが水素、または炭素数１ないし８のアルキルであり、Ｒ₂が４−チアゾリ ル、ＮＨＣＯＯＲ₁からなる群から選択され、ここでＲ₁はメチル、エチルまたは イソプロピルであり、およびそれらの医薬に許容可能な有機または無機酸付加塩 類であることを特徴とする請求項１に記載の医薬組成物。 ５．前記ベンゾイミダゾールが２−（４−チアゾリル）ベンゾイミダゾール、メ チル−（ブチルカルバモイル）−２−ベンゾイミダゾールカルバメートおよび２ −メトキシカルボニルアミノベンゾイミダゾールからなる群から選択されるこ とを特徴とする請求項１、２、３または４に記載の医薬組成物。 ６．前記化学療法剤がＤＮＡ相互作用性薬剤、代謝拮抗物質、チュブリン相互作 用性薬剤、ホルモン剤、アスパラギナーゼ、ヒドロキシウレア、、シスプラチン 、シクロホスファミド、アルトレタミン、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、 ドキソルビシン、エトポシド、テニポシド、およびプルカミジン、メトトレキセ ート、フルオロウラシル、フルオロデオキシウリジン、ＣＢ３７１７、アザシチ ジン、シタラビン、およびフロキシウリジン、メルカプトプリン、６−チオグア ニン、フルダラビン、ペントスタチン、およびシクトラビンからなる群から選択 されることを特徴とする腫瘍増殖を抑制するための請求項５に記載の医薬組成物 。 ７．前記医薬に許容可能な無機または有機酸付加塩が塩化物、臭化物、硫酸塩、 硝酸塩、燐酸塩、スルフォン酸塩、蟻酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸 塩、クエン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、アスコルビン酸塩およびそれらの 混合物からなる群から選択され、Ｙがクロロであることを特徴とする請求項６に 記載の医薬組成物。 ８．請求項１、２、３、４、５、６または７に記載の医薬組成物を約２ｍｇ／（ 体重）ｋｇから約４００ｍｇ／（体重）ｋｇまでを投与することを含むことを特 徴とする温血動物の癌の治療法。 ９．前記ベンゾイミダゾールを経口的または経腸的、静脈内、非経口的に、また は腫瘍内への注入によって投与することを特徴とする請求項８に記載の方法。 １０．下記の式であらわされるベンゾイミダゾールを含有することを特徴とする 動物またはヒトにおける癌またはウィルス感染症を治療するための単位用量組成 物。 ［式中Ｘは水素、ハロゲン、７より少ない炭素数のアルキルまたは７より少ない 炭素数をもつアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数であり；Ｙは水素、 塩素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；Ｒは水素または１ないし８の炭素数 のアルキル基であり、Ｒ₂は４−チアゾリルまたはＮＨＣＯＯＲ₁であり、ここで Ｒ₁は７より少ない炭素数の脂肪族炭化水素であり、および医薬に許容可能なそ れら化合物の塩である。］ １１．さらに化学療法剤を含むことを特徴とする請求項１０に記載の単位用量組 成物。 １２．さらに増強剤を含むことを特徴とする請求項１０または１１に記載の単位 用量組成物。 １３．前記ベンゾイミダゾールが２−（４−チアゾリル）ベンゾイミダゾール、 メチル−（ブチルカルバモイル）−２−ベンゾイミダゾールカルバメートおよび ２−メトキシカルボニルアミノベンゾイミダゾールおよびそれらの医薬に許容可 能な塩類からなる群から選択されることを特徴とする請求項１０、１１または１ ２に記載の単位用量組成物。 １４．前記担体が、ラクトース、スクロース、ゼラチンおよび寒天、水溶液、乳 濁液、懸濁溶液、および非発泡性および発泡性製剤から再構成される懸濁液から なる群から選択されることを特徴とする請求項１０、１１、または１２に記載の 単位用量組成物。 １５．前記投与組成物が沈殿防止剤、希釈剤、甘味料、香料、色素、保存料、乳 化剤、および着色料、およびそれらの混合物からなる群から選択されるメンバー を含むことを特徴とする請求項１３に記載の単位用量組成物。 １６．下記の式の化合物を安全かつ有効量投与することを含むことを特徴とする ウィルス感染症の治療法。 ［式中、Ｘは水素、ハロゲン、７より少ない炭素数のアルキルまたは７より少な い炭素原子のアルコキシであり；ｎは４より小さい正の整数であり；Ｙは水素、 塩素、ニトロ、メチルまたはエチルであり；そしてＲは水素または炭素数１ない し８のアルキル基であり、Ｒ₂は４−チアゾリルまたはＮＨＣＯＯＲ₁であり、こ こでＲ₁は７より少ない炭素数をもつ脂肪族炭化水素であり、およびそれらの医 薬に許容可能な有機または無機付加塩である。］ １６．安全で有効な量の殺真菌薬を投与することを含むことを特徴とする悪性腫 瘍治療法。 １７．安全で有効な量の殺真菌薬を投与することを含むことを特徴とする腫瘍増 殖抑制法。