KR100390271B1

KR100390271B1 - (s)-옥시부티닌과(s)-데스에틸옥시부티닌을이용한요실금치료

Info

Publication number: KR100390271B1
Application number: KR1019970705184A
Authority: KR
Inventors: 군너 아베르그; 존 알 맥 컬로우; 유에 팡
Original assignee: 세프라코 아이엔시.
Priority date: 1995-01-31
Filing date: 1996-01-25
Publication date: 2003-10-04
Anticipated expiration: 2016-01-25
Also published as: CN1151786C; MX9705820A; US5677346A; PL182768B1; AU4966496A; NO973516L; BR9607001A; NO973516D0; UA45387C2; ES2150663T3; PL321498A1; HUP9800794A2; SK103597A3; RU2181589C2; CN1179714A; CA2211400A1; FI973163A7; NO315927B1; EP0806948B1; AU706741B2

Abstract

라세믹 옥시부티닌과 관계되는 부작용의 부수적인 위협을 피할수 있는 요실금 치료방법이 개시된다. 그 방법은 실질적으로 대응 R 엔안티오머가 없는 (S)-옥시부티닌, (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염의 치료상 효과적인 양을 투여하는 것을 포함한다. (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌 및 허용가능한 담체를 함유하는 정제 및 경피기구 형태의 약제학적 조성물이 데스에틸옥시부티닌의 합성과 같이 또한 개시된다.

Description

(S)-옥시부티닌과 (S)-데스에틸옥시부티닌을 이용한 요실금 치료

라세믹 옥시부티닌(OXY)은 배뇨근 불안정에 기인한 요실금의 치료와 장관 운동항진증의 치료에 치료학적으로 사용된다. 라세믹 옥시부티닌은 평활근에 대해 직접적인 진경효과를 나타내며, 평활근에 대해 아세틸콜린의 작용을 억제한다. 토끼 배뇨근상에서 아트로핀의 항콜린 활성의 5분의 1만을 나타내며, 4에서 10배의 항경련활성을 나타낸다. 그것은 니코틴 수용체의 존재하에서는 무스카린 수용체에 대해 완전히 선택적이고, 결과로서, 어떤 차단효과도 골격 신경근 연접점 또는 자율신경절에서 관찰되지 않는다.

라세믹 옥시부티닌은 방광 평활근을 이완시키며, 비자발적 방광 수축으로 특징되는 상태의 환자들에게 있어서 방광 연구결과 라세믹 옥시부티닌이 소포(vesicle)의 용량을 증가시키고, 배뇨근의 비자발적 수축의 빈도를 감소시키고, 그리고 배뇨하고자 하는 초기 욕구를 늦추는 것으로 증명되었다. 따라서 요실금과 잦은 자발적 배뇨 둘다를 치료하고 예방하는데 유용하다. 방광에서 라세믹 옥시부티닌의 효능은 평활 배뇨근상에 항무스카린 효과, 직접적인 진경 효과 및 국소마취 효과의 조합에 기인에 의한 것으로 생각되어 왔다. 라세미 약물의 항무스카린 활성 때문에, 무스카린 콜린성 수용체와 관련된 구강건조증(xerostomia)과 산동증(mydriasis, 눈동자 확장)은 매우 일반적이 부작용들이다. 사실상, 적어도 한명 이상의 연구자가 라세믹 옥시부티닌 투여에 수반되는 산동증(mydriasis), 구강건조 증(xerostomia), 빈맥증(tachycardia) 등 필연적인 증상을 언급하였다[Lish et al.Arch. Int. Pharmacodyn. 156, 467-488 (1965), 481]. 항콜린성 부작용의 높은 발생율(40에서 80%)로 인해 때로는 투약량을 감소하거나 치료를 중단하게 된다.

각각의 엔안티오머들에 대한 약리학적 연구는 R-엔안티오머가 효능있는 엔안티오머임을 시사해왔다. 노론아-블랍(Noronha-Blob)등은 라세믹 옥시부티닌의 콜린 길항작용(시험관내에서는 M₁, M₂및 M₃수용체 아형(subtype)에 대한 친화력에 의해 측정되고, 생체내에서는 다양한 생리학적 반응에 의해 측정됨)이 주로 R-엔안티오머의 활성에 의한 것으로 생각될 수 있다고 결론지었다[J. Pharmacol. Exp. Ther.256, 562-567 (1991)]. 모든 반응에 대하여 라세믹 옥시부티닌과 그것의 엔안티오머의 효능의 등급 정도가 같다는 것, 즉, (R)-옥시부티닌이 라세믹 옥시부티닌보다 그 효능이 크거나 동등하며, 라세믹 옥시부티닌은 (S)-옥시부티닌보다 효능이 매우 크므로, (S)-옥시부티닌은 (R)-옥시부티닌보다 1 내지 2 등급 정도 효능이 적다는것이 발견되었다.

발명의 요약

옥시부티닌 및 그 데스에틸 대사산물의 실질적으로 광학적으로 순수한 S 엔안티오머가 요실금 치료에 뛰어난 치료법을 제공한다는 것이 뜻밖에 발견되었다.

광학적으로 순수한 (S)-옥시부티닌(S-OXY)와 (S)-데스에틸옥시부티닌(S-DEO)은, 일차 우선적으로 항콜린 활성으로부터 발생되고 라세믹 옥시부티닌의 투여에 관련되는 부작용을 실질적으로 감소시키면서 이 치료법을 제공한다. 이러한 부작용에는, 구강건조증, 산동증, 가면상태(drowsiness), 구토, 변비, 심계항진(palpitations) 및 빈맥이 있지만 이들에 한정되지는 않는다. (S)-옥시부티닌 또는 S-DEO의 투여에 의한, 빈맥 및 심계항진과 같은 라세믹 옥시부티닌의 심혈관 부작용의 경감이 특히 치료적 가치가 있다.

이러한 조성물들과 방법들의 활성 화합물들은 옥시부티닌과 데스에틸옥시부티닌의 광학 이성질체들이다. 라세믹 옥시부티닌의 제조는 영국 특허 명세서 제 940,540호에 서술되어 있다. 화학적으로, 활성 화합물들은 (1) 4-(디에틸아미노)-2-부티닐 페닐시클로헥실글리콜레이트로도 알려진 4-(디에틸아미노)-2-부티닐α -시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트(이후부터는 옥시부티닌으로 기재함)의 S 엔안티오머; 그리고 (2) 4-(에틸아미노)-2-부티닐 α -시클로헥실-α-히드록시벤젠 아세테이트(이후부터는 데스에틸옥시부티닌으로 기재함)의 S 엔안티오머이다. USAN 위원회에 의해 라세믹 옥시부티닌의 염산염에 주어진 일반명은 옥시부티닌 클로라이드이며; 그것은 디트로판^?(Ditropan^?)이라는 상품명으로 판매된다.

S 절대 입체화학(등록번호 119618-22-3)을 갖는 옥시부티닌의 이성질체는 우선성이며, 식 I 에 보여진다.

데스에틸옥시부티닌의 S 엔안티오머는 식 II 에 보여진다.

(S)-옥시부티닌의 합성(Kachur et al.J. Pharmacol. Exp. Ther. 247, 867-872(1988)]은 알려져있으나 (S)-옥시부티닌 자체는 현재 상업적으로 입수할 수 없다. 기니아피그와 렛트에 대해서는 엔안티오머 각각의 약물학이 기술[Kachur etal. J. Pharmacol. Exp. Ther. 247, 867-872 (1988) 및 Noronha-Blob et al. J.

Pharmaco. Exp. Ther. 256, 562-567(1991)]되어있음에도 불구하고, 보고된 모든 임상결과는 라세미 혼합물을 가지고 얻어졌다. (S)-데스에틸옥시부티닌은 상술되어 있지 않으며; 그것의 합성은 아래 기술된 방법에 따라 수행된다.

하나의 태양에서 본 발명은, 대응하는 R 엔안티오머가 실질적으로 없는 (S)-옥시부티닌, (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 치료상 효과적인 양으로 그러한 치료가 필요한 사람에게 투여하는 것을 포함하는, 부수적인 부작용가능성이 없는 요실금 치료방법에 관한 것이다.

여기서 사용되는 문구 "실질적으로 그것의 R 엔안티오머가 없는"은 적어도 90중량% 의 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌과 10중량% 이하의 (R)-옥시부티닌 또는 (R)-데스에틸옥시부티닌을 함유하는 조성물을 의미한다. 더욱 바람직한 구현예에서는, 이 조성물은 적어도 99중량%의 S 엔안티오머 및 1중량% 이하의 R 엔안티오머를 함유한다.

실질적으로 광학적으로 순수한 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌은 1일 약 1 mg 내지 100 mg의 비율로 비경구, 직장, 방광, 경피, 경구 또는 에어로졸로 투여될 수 있다. 경구 및 경피 투여가 바람직하다.

또 다른 태양에서 본 발명은, 대응하는 R 입체이성질체가 실질적으로 없는, 치료상 효과적인 양의 (S)-옥시부티닌, (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 함유하는 정제 또는 캡슐 형태에 있어서 약제학적 제형(Pharmaceutical unit dosage form)에 관한 것이다. 정제 또는 캡슐은 바람직하게는 0.5 내지 25mg의 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌을 포함하고 선행기술에서 잘 알려진, 통상적인 방법으로 제조된다. 본 발명은 또한 경피 투여 기구 형태의 복용형태에 관한 것이다. 경피투여는 예를들어, PCT 출원 WO 92/20377에 기술된 것처럼, 경피 투여기구에 흡수 촉진제(permeation enhancer)가 포함됨으로써 개량되었다.

또 다른 관점에서 본 발명은 데스에틸옥시부티닌, 바람직하게는 DEO의 단일 엔안티오머, 가장 바람직하게는 S-DEO의 제조방법에 관한 것이며; 그 제조방법은 첫 번째로, 무수 염기의 존재하에서 메틸 α -시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트와 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)-메틸아미노]-2-부틴-1-올을 반응시켜 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트를 제조하며; 연속해서 카보노클로리데이트와 메탄올과 반응시켜 4-(에틸아미노)-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트(데스에틸옥시부티닌)을 제조하는 단계로 이루어진다. 그 제조공정은 구리염(I)의 존재하에서 N-에틸-4-메톡시벤젠 메탄아민과 2-프로핀-1-올 그리고 포름알데히드 또는 포름알데히드 상당물을 반응시켜 첫 번째 단계에서 필요한 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올을 제조하는 공정이 추가될 수도 있다.

본 발명은 광학적으로 순수한 (S)-옥시부티닌[(S)-oxybutynin]과 (S)-데스에틸옥시부티닌[(S)-desethyloxybutynin, S-DEO]을 이용한 요실금 치료방법, 광학적으로 순수한 (S)-옥시부티닌 또는 S-DEO를 함유하는 약제학적 조성물 및 DEO의 단일 엔안티오머를 제조하는 방법에 관한 것이다.

옥시부티닌과 DEO의 S 엔안티오머는 에스테르화에 따른 중간체 맨델산의 레졸루션(resolution)에 의해 얻어질 수 있다. 에스테르화는 옥시부티닌에 대해서는 카쿠어(Kachur) 등에 의해 기술(op. cit. )된 것처럼, S-DEO에 대해서는 하기 반응 식 A에 도식된 개량된 방법에 의해 기술된 것처럼 수행될 수 있다.

[도식 A]

여기에 사용된 라세믹, 앰비스컬레믹 및 스컬레믹 또는 엔안티오머적으로 순수한 화합물의 도식적 표현은 메이어 제이. 켐. 에드 [Maehr J. Chem. Ed. 62, 114-120 (1985)]로부터 얻어진다. 그러므로, 굵고 꺽어진 쐐기 모양(식 I에서 보여진 것처럼)이 비대칭 원소의 완전한 배열을 나타내기 위하여 사용되며, 쐐기 윤곽선과 점선 또는 꺽은선(식 III 에 보여진 것처럼)은 엔안티오머적으로 순수한 화합물의 불확정된 완전한 배열을 나타내기 위해 사용된다.

DEO에 대한 전체 공정은 ; (a) 염화 제 1 구리 존재하에서 불활성 용매내에 N-에틸-4-메톡시벤젠메탄아민과 2-프로핀-1-을 및 파라포름알데히드를 반응시켜 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올(V)을 제조하며;

(b) 메틸 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트(IV)의 단일 엔안티오머와 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올(V)을 톨루엔내에서 촉매량의 소디움메톡사이드의 존재하에서 반응시켜 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트(VI)의 단일 엔안티오머를 제조하며;

(c) 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트(VI)을 연속적으로 디클로로에탄내 α-클로로에틸 카르본클로리데이트와 메탄올과 반응시켜 DEO(VII)의 단일 엔안티오머를 제조하는 것이다.

그 공정은 게다가 명백히 라세믹 메틸 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트로부터 라세믹 DEO를 제조하는데 응용할 수 있다. 파라포름알데히드는 포름알데히드의 편리한 제공원으로 사용되나 그것은 선행기술에서 잘알려진 다른 포름알데히드 제공원으로 대치될수 있다. 유사하게 α-클로로에틸 카르보노클로리데이트는 탈알킬화를 위해 사용되나 다른 카르보노클로리데이트(예로, 비닐)가 사용될수 있다.

선택적으로, OXY 및 DEO의 S 엔안티오머는 부분이성질성 염과 키럴 산의 분별 재결정과 같은 통상적 방법을 사용하여 라세믹 옥시부티닌 또는 DEO의 레졸루션을 통해 얻어질수 있다. 한정되지는 않지만, 단순한 결정화와 키럴 기질상의 크로마토그래피를 포함하는, 그 기술 분야의 전문가에게 알려진 레졸루션의 다른 표준 방법이 또한 사용될 수 있다.

질병의 급성 또는 만성적인 치료에 있어서 (S)-옥시부티닌 또는 S-DEO의 예방 또는 치료 목적의 복용량은 치료할 질병상태의 심한 정도와 성질 및 투여 경로에 따라 다양할 것이다. 복용량 및 어쩌면 복용 횟수 또한 각 환자의 나이, 체중 및 반응(약에 대한 감응도)에 따라 다양할 것이다. 일반적으로, 여기에서 기술된 조건에 대한 (S)-옥시부티닌 또는 S-DEO의 하루 총 복용량의 범위는 약 1 mg 내지 약 100 mg이며, 이를 한번에 또는 바람직하게는 나누어서 복용한다. 환자의 질병을 치료하기 위하여 실제로 투여할때에는 작은 투여량에서, 어쩌면 약 0.25 mg 내지 약 25 mg에서 시작하여야 하고, 환자의 전체적인 반응에 따라 예를들어 약 100 mg까지 증가해야 한다.

더욱이 65세 이상인 환자와 신장 기능 또는 간 기능에 장애가 있는 환자들에게는 작은 투여량으로 시작하여 각환자의 반응과 혈중 약물농도에 따라 투여량을 조절할 것이 권고된다. 그러나 해당 기술 분야의 전문가들의 견지에서 명백하기만 하다면, 몇가지 경우에 있어서는 이러한 범위 밖의 복용량을 사용하는 것이 필요할 수 있다. 게다가, 임상학자 또는 치료의사는 각 환자의 반응과 관련하여 치료를 어떻게, 언제 중단, 조절 또는 종결할 지를 알 것이다. 문구 "치료적으로 효과적인 양" 과 "뇨실금 치료에 충분하나 부작용 발생에는 불충분한 양"은 상기 기술된 복용량 및 복용 횟수 예정표에 의하여 달성될 수 있다.

효과적인 복용량의 (S)-옥시부티닌 또는 S-DEO를 환자에게 투여하기에 적당하다면, 어떤 투약경로라도 적용 할 수 있다. 예를 들면, 경구, 직장, 비경구(피하내, 근육내, 정맥내), 경피, 에어로졸 등과 같은 투약 형태가 적용될 수 있다. 또한, 라세믹 옥시부티닌에 대한 마사드(Massad) 등의 서술처럼[J. Urol.148, 595-597(1992)], 요도를 통해 직접 방광에 약물을 투여할 수도 있다. 제형은 정제, 트로키제, 분산제, 현탁제, 용액제, 캡슐제, 경피투여 시스템 등을 포함한다.

본 발명의 약제학적 조성물은 활성 성분으로서 (S)-옥시부티닌 또는 S-DEO, 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하며, 또한 약제학적으로 허용가능한 담체 및 임의로 다른 치료학적 성분이 함유될 수도 있다.

"약제학적으로 허용가능한 염" 또는 "그의 약제학적으로 허용가능한 염"은 약제학적으로 허용가능한 비독성 산으로부터 제조된 염을 가리킨다. 본 발명의 화합물에 대해 적당한 약제학적으로 허용가능한 산 부가 염은 아세틱, 벤젠술포닉(베실레이트), 벤조익, 캠포술포닉, 시트릭, 에탄술포닉, 푸마릭, 글루코닉, 글루타믹, 하이드로브로믹, 하이드로클로릭, 아이세티오닉, 락틱, 말레익, 말릭, 맨델릭, 메탄술포닉, 뮤식, 니트릭, 파모익, 판토데닉, 포스포릭, 숙시닉, 술퍼릭, 타르타릭, p-톨루엔술포닉 등을 포함한다. 염산는 특히 유용하며, 사실상 하기 기술된 연구에 사용된 염이다.

본 발명의 조성물은 현탁제, 용액제, 엘릭실제 또는 고형 제형을 포함한다. 전분, 당 및 미세결정 셀룰로오스와 같은 담체와 부형제, 과립형성제, 윤활제, 결합제, 붕해제 등이 경구용 고형제(산제, 캡슐제 및 정제와 같은)의 제조에 적당하고, 경구용 고형제가 경구용 액제보다 바람직하다. 투약의 용이성 때문에, 정제 및캡슐제는 보다 더 편리한 경구용 투여 단위 형태중 하나로 대표되며, 이 경우 고형의 약제학적 담체가 사용된다. 만약 필요하다면, 정제는 통상의 수성 또는 비수성 코팅법으로 코팅할 수 있다.

상기 기술된 통상 복용형태에 덧붙여서, 본 발명의 화합물은 또한 미합중국 특허 제 3,845,770; 3,916,899; 3,536,809;3,598,123; 및 4,008,719 호 및 PCT 출원 WO 92/20377에 기술된 것과 같이 제어 방출 방법 및 약물 송달 기구에 의해 투약될 수 있으며, 그것의 명세서 내용들을 여기에 참고로 기재한다.

경구 투여에 적당한 본 발명의 약제학적 조성물은 소정량의 활성성분을 각각 함유한 캡슐, 교갑(cachet), 또는 정제와 같은 분리된 단위 투여 형태로써, 산제 또는 과립제로써, 또는 수용액내, 비수용액내, 수중 유 유탁액(O/W emulsion), 또는 유중 수 유탁액(W/O emulsion)내 용액 또는 현탁액으로써 제공될 수 있다. 그러한 조성물은 어떠한 조제법으로도 만들어질 수 있으나 모든 조제법들은 하나 이상의 필요 성분들로 구성된 담체와 활성 성분을 결합시키는 단계를 포함한다. 일반적으로 조성물은, 액체 담체 또는 미세하게 분쇄한 고체 담체 또는 둘다와 활성 성분을 균일하고 밀접하게 잘 혼합하고, 만약 필요하다면, 그 생성물을 라세믹 혼합물에 대해 알려진 것처럼 원하는 모양으로 만듦으로서 제조된다.

예를 들면, 정제는 임의로 하나 이상의 부형 성분을 가하고 압축하거나 성형하여 제조될 수 있다. 압축 정제들은 결합제, 윤활제, 불활성 희석제, 표면활성제 또는 분산제와 임의로 혼합된 분말이나 과립과 같은 유동형태의 활성 성분을 적당한 기계내에서 압축하여 제조될 수 있다. 성형 정제들은 불활성 액체 희석제로 젖신 분말 화합물의 혼합물을 적당한 기계를 사용하여 성형하므로써 제조될 수 있다. 모든 선행기술들은 제약기술분야의 전문가에게 잘 알려져 있다. 각 정제는 약 0.5mg 내지 약 25mg의 활성성분을 포함할 수 있다.

실시예 1

경구용 단위 제제의 처방예

정제

(S)-옥시부티닌 또는 데스에틸옥시부티닌을 균일한 혼합물이 형성될때까지 락토오스및 셀룰로오스와 혼합한다. 레이크를 가하고 더 혼합한다. 최종적으로 칼슘 스테아레이트를 가하여 혼합하고, 이 혼합물을 9/32 인치(7mm) 얇은 오목 펀치로 압축하여 정제로 만든다. 부형제 또는 정제의 최종 무게에 대한 활성 성분의 비를 변경하므로써 다른 강도의 정제를 제조할 수 있다.

OXY 및 DEO 모두의 (S)-엔안티오머의 놀라운 유용성은 다음 연구로 입증되었다.

옥시부티닌의 엔안티오머

인간 무스카린 수용체 아형 M1, M2, M3 및 M4 에 대한 (R)- 및 (S)-옥시부티닌의 결합

실험재료와 방법

실험은 인간 재조합 M₁, M₂, M₃및 M₄무스카린 수용체 아형을 발현시키기 위하여 바쿠로비루스(baculovirus)로 감염된 SF9 세포로부터 제조한 막(membranes)상에서 수행되었다.

결합 분석

[표 1]

배양후 분석물들은, 진공하에서 GF/B 유리섬유 필터(와트만)를 통해 신속히 여과하고 브란델 셀 하베스터(Bramdel cell Harvester)를 사용하여 냉각된 완충액으로 세척하였다. 표지된 방사능은 리퀴드 신틸레이션 칵테일(liquidscintillation coctail, Formula 99, DuPont NEN)을 사용하여 리퀴드 신틸레이션 카운터(LS 6000, Beckman)로 측정하였다.

실험 프로토콜

각 화합물들의 경쟁곡선을 얻기위하여 그 농도를 10가지로 달리하고 각각의 수용체에 대한 반응시험을 이중으로 실시하였다. 실험을 검증(validation)위하여 각 실험에서 조사대상인 수용체에 대한 참조 화합물에 대해서도 8 가지로 농도를 달리하고 역시 이중으로 실험을 실시하여 경쟁 곡선을 얻었다.

결과의 분석과 표시

각 수용체의 특이적 라디오리간드 결합은, 과량의 비표지된 리간드의 존재하에서 측정된 비특이적 결합과 총결합 사이의 차이로 정의되었다. IC₅₀값(특이적 결합의 50%를 억제하기 위해 요구되는 농도)은 경쟁 곡선의 비선형 회귀 분석에 의해 결정되었다. 이러한 파라미터들은 시그마플랏^TM소프트웨어를 사용하여 커브피팅하여 구하였다. R- 및 S-OXY에 대한 IC₅₀는 표 2에 나타내었다.

[표 2]

인간 무스카린 아형 M1-M4에 대한 R-옥시부티닌과 S-옥시부티닌의 결합

이러한 결과들은 S-OXY가 R-OXY보다 무수카린 수용체 아형에 대해 덜 친화적인 것을 나타낸다.

칼슘 채널에 대한 (R)- 및 (S)-옥시부티닌의 결합

실험 재료 및 방법

결합 분석

다음과 같은 방법으로 결합에 대한 분석을 실시하였다.

[표 3]

실험조건은 다음과 같다.:

[표 4]

배양후, 분석물은 진공하에서 GF/B 또는 GF/C 유리섬유 필터(와트만)을 통해 신속히 여과하였고 브란델 셀 하베스터를 사용하여 냉각된 완충액으로 세척하였다. 표지된 방사능은 리퀴드 신틸레이션 칵테일(Formula 989, DuPont NEN)을 사용하여 리퀴드 신틸레이션 카운터(LS 6000, Beckman)로 측정하였다.

실험 프로토콜

화합물들은 10^-5M의 농도에서 각 수용체상에 대한 반응시험을 이중으로 실시하였다. 실험을 검증하기 위하여 각 실험에서 조사 대상인 수용체에 대한 참조 화합물들에 대해서도 8가지로 농도를 달리하고 역시 이중으로 실험을 실시하여 경쟁 곡선을 얻었다.

결과의 분석과 표시

각 수용체의 특이적 라디오리간드 결합은, 과량의 비표지된 리간드의 존재하에서 측정된 비특이적 결합과 총결합 사이의 차이로 정의되었다. 특이적 결합의 억제 퍼센트로써 표시되는 평균값은 표 5에 나타내었다. IC₅₀값(특이적 결합 50%를 억제하기 위해 요구되는 농도)은 경쟁 곡선의 비선형 회귀 분석에 의해 결정되었다. 이러한 파라미터들은 시그마플랏^TM소프트웨어를 사용하여 커브피팅하여 구하였다.

[표 5]

칼슘 채널에 대한 R-옥시부티닌 및 S-옥시부티닌의 결합

[칼슘 채널 수용체에 대한 딜티아젬과 베라파밀의 결합억제(단위 % )

이러한 결과들은 S-OXY가 R-OXY에 유사한 칼슘 유입 저지 활성을 갖는다는 것을 나타낸다.

데스에틸옥시부티닌의 엔안티오머

라세믹 옥시부티닌의 주된 대사산물은 RS-데스에틸옥시부티닌(DEO)이다. DEO의 R 및 S 엔안티오머에 대해서 지금까지 기술되어진 바 없었으며, 각 엔안티오머 즉 R- 및 S-DEO의 항경련 활성 및 칼슘 유입 저지 활성에 대해서도 우리연구에 앞서서는 알려지지 않았다. 우리는 이러한 엔안티오머들을 합성했고, 수용체 결합과 방광 기능의 모델에서 그들의 항무스카린 효과, 진경효과, 칼슘 유입 저지 효과들을 연구해 왔다. 우리는 대사산물의 각 엔안티오머가 그것의 "부모"인 옥시부티닌 엔안티오머와 관련이 있는 약리학적 프로필을 보유한다는 것을 발견했다.

무스카린 수용체 아형에 대한 결합

각 화합물(R-, S-, 및 RS-DEO)의 3가지 농도에 의해 유도된 특이적 라디오리간드 결합의 억제 퍼센트는 상기 옥시부티닌의 엔안티오머에 대해 설명된 것처럼 복제된 인간 무스카린 수용체 아형(M1-M4)에서 시험되었다. 하기 표들(표 6 과 7)은 각 아형에서의 억제 퍼센트를 나타낸다. 또한, IC₅₀값들은 M₁및 M₂인간 수용체 아형에 대해 측정되었고 표 6에 나타내었다.

[표 6]

[표 7]

이러한 결과들은 S-DEO가 R- 또는 라세믹 DEO보다 무스카린 수용체 아형에 대해 덜 친화적이라는 것을 나타낸다.

칼슘 채널에 대한 결합

각 화합물(R-, S-, 그리고 RS-DEO)에 의해 유도된 특이적 라디오리간드 결합의 억제 퍼센트는 L-타입 칼슘 채널의 딜티아젬 및 베라파밀 자리에서 시험되었다. 그 결과들은 표 8에 보여진다.

[표 8]

이러한 결과들은 S-DEO가 R- 및 라세믹 DEO의 것과 유사한 칼슘 유입저지 활성을 갖는다는 것을 나타낸다.

항무스카린/항경련 활성의 기능적 특징

R-, S- 및 RS-옥시부티닌(OXY)와 R-, S-, 및 RS-DEO의 효과는 방광 기능의 시험관 모델에서 연구되었다. 하기 기술된 것처럼, 기니아피그 방광 평활근의 분리된 스트립(strip)는 조직 배스(tissue bath)에 넣고 무스카린 작동제(agonist) 카르바콜에 의해 또는 외부 칼륨 농도의 증가에 의해 수축시켰다.

실험 재료 및 방법

방광 스트립 카쿠어 등, (Kachur et al, 1988)과 노론하-브랍 및 카쿠어 1991(Noronha-Blob and Kachur, 1991)에 의해 기술된 것들과 유사한 방법들을 사용하여 실험들을 수행하였다. 400-600 g 무게의 수컷 하트리 기니아 피그의 방광의 몸체로부터 조직의 스트립(약 10 mm 길이 및 1.5 mm 너비)들을 제거하였다(에름 힐브리딩 실험실, 켈름스포드, MA). 그 조직들은 다음 조성을 갖고 산소가 공급하는 완충액에 현탁시켰다: mM 단위; NaCl, 133; KCl, 4.7; CaCl2, 2.5; MgSO₄, 0.6;NaH₂PO₄, 1.3; NaHCO3, 16.3; 및 글루코스, 7.7. 그것들은 37.5℃에서 유지되었다. 이소메트릭 트랜스듀서(모델 FT-10)와 잉크-라이팅 폴리그라프(모델 7)(Astro-Med, Inc., Grass Instrument Div., West Warwick, RI)로 수축이 기록되었다. 0.5그람의 휴지기 장력이 모든 시간동안 모든 조직상에 유지되었다.

각 실험에서 단일 방광으로부터 7개의 스트립까지 제거하여, 개별적 조직 챔버에 현탁시켰으며 실험이 수행되기 전에 한시간 동안 배싱용액(bathing solution)과 평형에 도달되도록하였다.

카르바콜-유도 수축일련의 실험이 옥시부티닌의 콜린 억제 작용에 집중되었다. 이러한 실험들에서, 각 조직의 생존력을 평가하기 위해서 그리고 관련 프레임으로서 수행하기 위하여, 조직의 각 대의 수축이 조직배양액(배양액의 농도가 137.7 mM KCl이 되도록 NaCl이 KCl로 대치됨)에 노출에 대한 반응으로 최초에 기록되었다. 이것은 바로 표준 배양액(standard medium)으로 수행되었고, 단지 그 피크 반응이 기록될때까지 각 농도에 대한 노출을 분리하면서 점차적으로 증가된 농도의 카르바콜에 대한 노출에 대해 수행하였다. 그 다음엔, 대조군 조직으로 공급하기 위하여 17mM 에탄올에 노출되고/또는 처리되지 않은 하나의 스트립을 남겨 놓고 남은 스트립 각각은 어떤 농도의 길항제에 한시간동안 노출되었다. 에탄올 대조군은 용해도가 좋지 못하기 때문에 시험 물질의 원액이 에탄올에서 제조되어야만 할 때, 조직 용액이 에탄올의 효과적인 농도가 17mM임을 경험으로 알게된 결과로써 사용되었다. 결국, 137.7mM KCl에 노출후 증가된 농도의 카르바콜에 대한 반응은 초단위로 기록되었다.

포타슘-유도 수축. 두번째 일련의 실험들은 연구되는 물질의 진경 작용에 집중되었다. 수축은 배양액내 연속적으로 증가된 농도의 칼륨에 대한 반응으로 기록되었다.

데이터 분석. 길항제가 작동제에 대한 피크 반응을 감소시키는지 여부를 결정하기 위하여, 두 번째 세트의 측정 동안에 각 스트립에 의해 발전된 피크 장력은 첫 번째 농도-효과 측정 동안에 발전된 피크 장력의 퍼센트로써 표시되었다. 그 다음에, 각 길항제에 대한 결과 데이터는 ANOVA(one -way ananlysisi of variance)에 의해 처리-관련 차를 분석하였다. 방광의 각 스트립에 대하여 길항제 농도를 단지 하나로 하여 실험하였기 때문에 아룬라크사나와 스킬드(Arunlakshana and Schild 1959)의 과정을 수정된 형태로 사용하여 스킬드 회귀의 pA2와 기울기를 결정하였다. 첫 번째로, 반-최고 반응(half-maximal response)을 나타내는 작동제의 농도(EC₅₀)는 두 번째 세트의 농도-효과 데이터로부터 각 스트립에 대하여 평가되었다. EC₅₀는 반 최고 준위의 반응을 포괄하는 반응과 약물농도의 대수값에 들어맞는 선형 회귀선들로부터 얻었다. 약물처리된 각각의 스티립에 대하여, "농도 비"(CR)은 처리된 조직의 EC₅₀를 처리되지 않은 조직의 EC₅₀로 나눈 비율 로써 계산되었다. 두 개 이상의 스트립들이 다른 농도의 같은 화합물에 노출된 각 실험에 대하여 이 비율 빼기 1의 대수[즉, log(CR-1)]를 스트립이 노출된 길항제 농도 대수에 대해 플롯하여 "스킬드 도면"을 작성하였다. 길항제 농도의 대수에 대한 log(CR-1)의 회귀 분석은 회귀선의 pA2와 기울기를 평가하기 위하여 사용되었다. 마지막으로, 실험들을 화학물질에 따라 분류하고 pA2와 기울기의 평균값 ± S.E.를 계산하였다. 그 기울기에 대한 95% 신뢰 한계(CL)는 표준 방법을 사용하여 그것의 S.E.으로부터 평가되었다. 단지 하나의 스트립이 주어진 화학물질에 노출된 실험에 대해서, pKD를 (길항제의 농도)/(CR-1)로서 계산하고 이 KD의 음대수를 pA2 값과 합산하여 확장된 세트(expanded set)의 pA2 값을 산출하였다.

결과

카르바콜-유도 수축에 대한 라세믹 옥시부티닌 및 DEO 와 그들 각각의 엔안티오머의 효과를 하기 표 9에 요약하였다. 주어진 값들은 pA2 값[평균값 ± SE]들과 기울기[평균값 ± SE]를 제공하는 스킬드 분석의 요약이다.

[표 9]

이러한 결과들은 S-OXY와 S-DEO모두가 방광무스카린 수용체의 길항제로서의 효능이 R- 및 라세믹 OXY 그리고 R- 및 라세믹 DEO보다 작다는 것을 나타낸다.

칼륨-유도 수축에 대한 라세믹 옥시부티닌과 그것의 엔안티오머의 효과를 하기 표 10에 요약하였다. (주어진 값들은 화합물에 60분 노출된 후 137.7 mM K+에 의해 유도된 수축량을 약물에 노출되기 전에 유도된 수축량으로 나눈 값이다.)

[표 10]

* 처리되지 않은 조직에 대한 대응 값으로부터 유의성있게 차이남(p < 0.01)

이러한 결과들은 옥시부티닌과 그것의 엔안티오머들 그리고 데스에틸옥시부티닌과 그것의 엔안티오머들이 방광 평활근 진경제로서 동등한 효능을 갖는다는 것을 나타낸다.

결론

방광의 정상적 배뇨는 콜린 작용기전을 통하여 조정된다는 것이 잘 알려져 있는 반면에, 요실금으로 고통받는 환자들에게 나타나는 방광 불안정성은 방광의 비콜린적 수축에 관계된 것으로 보인다. 안데르슨 등은[Neuroulol Urodyn5, 579-586(1986)] 동물에게서 아트로핀 저항성 압박근이 칼슘 길항제에 대해 매우 민감하다는 것을 보였다.

상술된 칼슘 채널 차단제인 딜티아젬과 베라파밀에 대한 수용체 자리에 대한 (R)- 및 (S)-옥시부티닌의 수용체 결합 친화성 연구는, S-옥시부티닌과 (S)-데스에틸옥시부티닌이 (R-이성질체와 라세믹체와 달리) 정상적 배뇨 작용기전에는 거의 효과를 갖지 않는 반면에 비자발적 배뇨에 치료적 효과를 갖는다는 결론을 내리게 한다. S-OXY 및 S-DEO 모두는 또한 대응하는 R-이성질체 그리고 라세믹체와 비교하여 유의성 있게 감소된 항콜린성 부작용을 나타낸다. 라세믹 옥시부티닌의 항콜린성 작용으로부터 발생하는 심혈관계 부작용을 피하는 것은 특히 중요하다. 우리는 S-옥시부티닌과 S-데스에틸옥시부티닌이 라세믹체 또는 순수한 R-엔안티오머에 비하여 부작용이 매우 많이 감소된, 인간의 요실금 치료에 효과적인 약제라고 결론 지었다.

메틸 (R)-α-시클로헥실-α-히드록시밴젠아세테이트 (IV)

100mL의 아세톤내의 (R)-α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세트산 (III)(12.2g, 52.1mmol)과 K₂CO₃(10.8g, 78.2mmol)에 메틸 아이오다이드(MeI)(13.0mL, 208mmol)를 0℃(얼음 중탕)에서 적가하였다. MeI의 첨가(ca. 1h)후에 반응 혼합물은 실온에서 하룻밤 동안 교반하였다. 그 혼합물은 셀라이트 패드로 여과하였고 아세톤으로 2번 세척하였다. 여과물을 농축하여 백색 스러리를 제조하고 이를 물로 희석하고 헵탄으로 추출하였다. 모아진 추출물을 물, 염수로 세척하고 건조 및 농축하여 백색 고체인 목적물(R)-IV(11.9g, 92%수율)을 얻었다.

메틸 (S)-α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트 (IV):

상술한 것과 같은 방법으로 (S)-III(10.6g, 45.3 mmol)로부터 (S)-IV(11.2g, 100% 수율)를 백색 고체로 얻었다.

4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]2-부티닐(R)-α-시클로헥실-α-히드록시밴젠아세데이트(VI) :

120mL의 톨루엔내의 (R)-IV(11.9g, 47.7mmol)과 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올(V)(9.30g, 39.9mmol )에 NaOMe(0.222g, 4.11mmol )을 더했다. 반응 혼합물을 5시간 동안 환류 교반하였고 총 6mL의 용매는 딘-스탁 기구로 제거하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각하였고, 에틸아세테이트로 희석하고, 물, 염수로 세척하고, 건조 및 농축하였다. 잔류물은 실리카 겔(CH₂Cl₂내 1%, 2.5% 및 5% MeOH로 용리)상에 크로마토그래피하여 목적물(R)-VI(14.1g, 79% 수율)을 오일로 얻었다.

4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐-(S)-α-시클로헥실-α히드록시벤젠아세테이트(VI) :

상술한 것과 같은 방법으로 수행하여 (S)-VI(4.24g, 58% 수율)를 (S)-IV(4.07g, 16.4mmol) 및 V(4.24g, 18.2mmol)로부터 오일로 얻었다.

라세믹 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐(S)-α-시클로헥실-α-히드록시벤젠-아세테이트 :

상술한 것과 같은 방법으로 수행하여 DEO의 라세믹 전구물질(2.05g, 43%, 수율)을 라세믹 IV(2.98g, 12.0mmol) 및 V(2.48g, 10.6mmol)로부터 오일로 얻었다.

4-(에틸아미노)-2-부티닐(R)-α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트 염산염(VII)-HCl :

(R)-VI(14.0g, 31.2mmol)과 α-클로로에틸 카르보노클로리데이트(4.0mL, 37.4mmol)의 1,2-디클로로에탄용액을 1시간동안 환류 교반하였다. 냉각후, 반응 혼합물을 농축하고 200mL의 MeOH를 잔류물에 첨가하였다. 반응 혼합물을 20분동안 환류 교반하였고 실온까지 냉각시켰다. 혼합물을 농축하였고 잔류물을 실리카 겔(CH₂Cl₂의 1%, 50% MeOH로 용리)상에 크로마토그래피하고 에테르로 분쇄하여 목적물 (R)-VII-HCl(8.93g, 87% 수율)을 황갈색 고체로 얻었다. 이 황갈색 고체를 EtOH/Et₂O로부터 재결정으로 정제하고 연속적으로 10% 수용성 K₂CO₃와 EtOAc, 활성탄 및 에테르의 1N HCl용액으로 처리하여 (R)-DEO-HCl(6.44g)을 회색 고체로 얻었다.

4-(에틸아미노)-2-부티닐 (S)-α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세데이트 염산염(VII)-HCl :

상술한 것과 같은 방법으로 (S)-DEO-HCl(5.27g, 57%, 수율)을 (S)-VI(11.4g, 25.4mmol)로부터 회색 고체로 얻었다.

라세믹 4-(에틸아미노)-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시밴젠아세테이트 염산염 :

상술한 것과 같은 방법으로 (± )-DEO-HCl(0.63g)을 (±) 전구물질(2.28g, 5.08mmol)로부터 회색고체로 얻었다.

S-옥시부티닌은 보호된 중간물 V 대신에 4-(디에틸아미노)-2-부틴-1-올을 대치하여 같은 방법으로 제조할 수 있다.

중간물질로 사용된 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올(V)은 다음과 같이 합성한다.:

N-에틸-4-메톡시밴젠메탄아민 :

아니스알데히드(15.6g, 115mmol)과 에틸아민(2.0M in THF, 87mL, 174mmol)의 1,2-디클로로에탄(450mL) 혼합물에 빙초산(10.0mL, 174mmol)을 질소대기하에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분동안 교반하였고 얼음 중탕으로 0℃까지 냉각하였다. NaBH(OAc)₃(36.9g, 174mmol)을 나누어 첨가하고 반응 혼합물을 실온에서 하룻밤동안 교반하였다. 그 혼합물을 농축하였고 잔류물은 염기성 용액(물 100mL 내 10g NaOH)으로 희석하여 용액을 약간 염기성으로 만들었다. 이 수용액 층을 에테르로 추출하였다. 모아진 추출물들을 물, 염수로 세척하였고 건조 및 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔(CH₂Cl₂내 5% MeOH로 용리하고, 4%, Et₃N를 포함하는 CH₂Cl₂내 50% MeOH로 용리)상에 크로마토그래피하고 목적물(11.2g, 59% 수율)을 오일로 얻었다.

4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올(V) :

350mL의 1,4-디옥산내 N-에틸-4-메톡시벤젠메탄아민(13.3g, 80.6mmol), 파라포름알데히드(3.63g), 프로파길 알콜(6.33g, 113mmol) 및 CuCl(0.311g)의 혼합물을 30분동안 환류 교반하였다. 이 반응 혼합물을 실온으로 냉각하였고 농축하였다. 그 잔류물을 50% NH₄OH 200mL로 희석하였고 EtOAc로 추출하였다. 모아진 추출물들을 물, 염수로 세척하였고, 건조 및 농축하였다. 그 잔류물을 실리카 겔(CH₂Cl₂내 2.5% MeOH로 용리되고, CH₂Cl₂내 5% MeOH로 용리됨)상에 크로마토그패피하여 목적물 V(15.1g, 81%수율)을 오일로 얻었다.

Claims

(S)-옥시부티닌과 (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택된 화합물의 치료상 효과적인 양을 포함하는 요실금 치료용 약제학적 조성물.
제1항에 있어서, (S)-옥시부티닌 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염을 치료상 효과적인 양으로 포함하는 요실금 치료용 약제학적 조성물.
제1항에 있어서, (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염을 치료상 효과적인 양으로 포함하는 요실금 치료용 약제학적 조성물.
제 1항 내지 3항 중 어느 한 항에 있어서, (S)-엔안티오머의 치료상 효과적인 양을 흡입제로 또는 비경구, 경피, 직장 또는 경구 투여로 투약하는 요실금 치료용 약제학적 조성물.
제4항에 있어서, 상기 (S)-엔안티오머를 포함하는 경구투여용 요실금 치료용 약제학적 조성물.
90중량% 이상의 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌 및 10중량% 이하의 (R)-옥시부티닌 또는 (R)-데스에틸옥시부티닌을 포함하는, (S)-옥시부티닌, (S)-데스에틸옥시부티닌 및 그들의 약제학적으로 허용가능한 염으로 구성된 군으로부터 선택된 화합물을 포함하는 요실금 치료용 약제학적 조성물.
제 6 항에 있어서, (S)-옥시부티닌 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물.
제 6항에 있어서, (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물.
제 6 항 내지 8항 중 어느 한 항에 있어서, 흡입제로 투여되거나 비경구, 경피, 직장 또는 경구 투여되는 약제학적 조성물.
제 9 항에 있어서, 경구용 약제학적 조성물.
90중량% 이상의 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌과 10중량% 이하의 (R)-옥시부티닌 또는 (R)-데스에틸옥시부티닌을 포함하는, (S)-옥시부티닌과 (S)-데스에틸옥시부티닌, 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염으로 구성된 군으로부터 선택된 화합물의 치료상 효과적인 양과 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 요실금 치료용 정제 또는 캡슐 형태의 약제학적 제형.
제 11항에 있어서, 0.5 내지 100mg의 (S)-옥시부티닌을 포함하는 약제학적 제형.
제 11 항에 있어서, 0.5 내지 100mg의 (S)-데스에틸옥시부티닌을 포함하는 약제학적 제형.
90중량% 이상의 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌 및 10중량% 이하의 (R)-옥시부티닌 또는 (R)-데스에틸옥시부티닌을 포함하는, (S)-옥시부티닌과 (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염으로 구성된 군으로부터 선택된 화합물의 치료상 효과적인 양과 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 요실금 치료용 경피송달기구 형태의 약제학적 제형.
제 14 항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용가능한 담체가 흡수 촉진제를 포함하는 약제학적 제형.
(a) 메틸 α -시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트와 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올을 무수 염기하에서 반응시켜 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트를 제조하고; 그리고 (b) 상기 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트를 연속적으로 카르보노클로리데이트와 메탄올과 반응시켜 4-(에틸아미노)-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트를 제조하는 단계를 포함하는 데스에틸옥시부티닌의 제조방법.
제 16 항에 있어서, N-에틸-4-메톡시벤젠메탄아민을 2-프로핀-1-올 및 포름알데히드 또는 포름알데히드 상당물과 구리(I) 염의 존재하에서 반응시켜 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올을 제조하는 추가적 단계를 포함하는 제조방법.
제 17 항에 있어서, (a) N-에틸-4-메톡시벤젠메탄아민을 2-프로핀-1-올 및 파라포름알데히드와 염화 제 1 구리 존재하에서 불활성 용매내에서 반응시켜 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올을 제조하고;

(b) 메틸 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트를 상기 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부틴-1-올과 소듐 메톡사이드의 존재하에서 톨루엔내에서 반응시켜 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시아세테이트를 제조하고; 그리고

(c) 상기 4-[N-에틸-(4-메톡시페닐)메틸아미노]-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트를 연속적으로 디클로로에탄내 α-클로로에틸 카르보노클로리데이트와, 이어서 메탄올과 반응시켜 4-(에틸아미노)-2-부티닐 α-시클로헥실-α-히드록시벤젠아세테이트(데스에틸옥시부티닌)을 제조하는 단계를포함하는 제조방법.
제 16 항에 있어서, 상기 데스에틸옥시부티닌이 단일 엔안티오머로 증가된 제조방법.
제 19 항에 있어서, 상기 데스에틸옥시부티닌이 (S)-데스에틸옥시부티닌인 제조방법.
99중량% 이상의 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌과 1중량% 이하의 (R)-옥시부티닌 또는 (R)-데스에틸옥시부티닌을 포함하는, (S)-옥시부티닌, (S)-데스에틸옥시부티닌 및 그들의 약제학적으로 허용가능한 염으로 구성된 군으로부터 선택된 화합물을 포함하는 요실금 치료용 약제학적 조성물.
제 21 항에 있어서, (S)-옥시부티닌 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물.
제 21 항에 있어서, (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함하는 약제학적 조성물.
제 21 항 내지 23항 중 어느 한 항에 있어서, 흡입제로 투여하거나 비경구,경피, 직장 또는 경구 투여되는 약제학적 조성물.
제 24 항에 있어서, 경구투여용 약제학적 조성물.
99중량% 이상의 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌 및 1중량% 이하의 (R)-옥시부티닌 또는 (R)-데스에틸옥시부티닌을 포함하는, (S)-옥시부티닌과 (S)-데스에틸옥시부티닌 또는 그들의 약제학적을 허용가능한 염으로 구성된 군으로부터 선택된 화합물의 치료상 효과적인 양과 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 요실금 치료용 정제 또는 캡슐 형태의 약제학적 제형.
제 26 항에 있어서, 0.5 내지 100mg의 (S)-옥시부티닌을 포함하는 약제학적 제형.
제 26 항에 있어서, 0.5 내지 100mg의 (S)-데스에틸옥시부티닌을 포함하는 약제학적 제형.
99중량% 이상의 (S)-옥시부티닌 또는 (S)-데스에틸옥시부티닌 및 1중량% 이하의 (R)-옥시부티닌 또는 (R)-데스에틸옥시부티닌을 포함하는, (S)-옥시부티닌과 (S)-데스에틸옥시부티닌, 또는 그들의 약제학적으로 허용가능한 염으로 구성된 군으로 부터 선택된 화합물의 치료상 효과적인 양과 약제학적으로 허용가능한 담체를포함하는 요실금 치료용 경피송달기구 형태의 약제학적 제형.
제 29 항에 있어서, 상기 약제학적으로 허용가능한 담체가 흡수 촉진제를 포함하는 약제학적 제형.