KR102628570B1 - Fc 영역 변형 항체의 측정을 위한 면역 분석 - Google Patents
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Abstract
본원에서는 비-인간 실험 동물로부터 수득된 혈청 또는 혈장 샘플에서 2가 항체의 양을 측정하는 방법이 보고되어 있고, 이 항체는 상응하는 SEQ ID NO:01, 02 또는 03의 서열을 갖는 야생형 Fc 영역에 비해 Fc 영역에서 하나 이상의 돌연변이를 포함하며, 이 방법은 하기 단계 a) 항체의 항원의 두 개 이상의 복제물이 공유 결합으로 접합된 비-항체 폴리펩티드를 고정하는 단계, b) 고정된 항원과 샘플을 인큐베이션하여 고정된 항원-항체 복합체를 형성하는 단계, c) 고정된 항원-항체 복합체를 검출 가능한 표지에 접합된 항원과 인큐베이션하여 고정된 삼원 복합체를 형성하는 단계, 및 d) 고정된 삼원 복합체에서 검출 가능한 표지의 양을 측정하여 항체의 양을 측정하는 단계를 포함한다.
Description
본 발명은 면역 분석 분야에 속한다. 본원에서는 연속 ELISA를 사용하여 혈청 샘플에서 Fc 영역 변형 항체를 측정하기 위한 일반적인 방법이 보고되어 있다.
치료용 항체의 작용기 기능뿐만 아니라 약동학적 파라미터의 개선 및 최적화를 위해, 분자 구조의 변형이 모체 치료용 항체에 도입되어 변이 항체를 생성한다. 변형은 항원 인식 도메인뿐만 아니라 Fc 영역에도 제한되지 않는다.
Fc 영역 변형 항체 변이체의 검출 및 평가를 위해, 비생물학적 활성 항체에 기반한 모델 시스템이 발견되었다. 비생물학적 활성 항체는 항체의 Fc 영역 변형의 평가가 수행되는 실험 동물에 존재하지 않는 항원에 결합한다. 사용된 비생물학적 활성 항체가 실험 동물의 내인성 단백질 및 분석 시스템의 다른 성분과 교차 반응하지 않는 것이 검출을 위한 전제 조건이다. 이는 예를 들어, 인공 항원에 결합하는 항체, 예컨대 항-합텐 항체, 예를 들어 항-디곡시게닌 항체를 사용함으로써 달성될 수 있다.
약동학적 성질의 평가와 변형 개념의 증명을 위해, 특이도뿐만 아니라 적절한 민감도를 갖는 검출 방법이 요구된다. 또한, 검출 방법은 상이한 종-특이적 Fc 영역, 예컨대 사람, 시노몰거스, 양, 미니피그 Fc 영역을 갖지만 실험 동물의 내인성 면역 글로불린과 상호 작용하지 않는 항체의 검출을 가능하게 할 것이다.
JP H01-223351에는 고정화되고 표지화된 항원을 포함하는 분석될 항체의 생산에 사용된 동물의 유형 등의 차이에 관계없이 높은 특이성을 갖는 항체에 대한 분석이 보고되어 있다.
WO 96/22533에는 시험 물품 상에 합텐을 고정하는 방법이 보고되어 있다.
본원에 보고된 방법은 일반적인 검출 방법에서 일반적으로 사용되는 항-Fc 영역 항체의/에 대한 결합에 영향을 미치는 Fc 영역에서 하나 이상의 돌연변이를 포함하는 항체들에 특히 적합하다.
ELISA가 현재의 기술적 문제를 해결하기 위한 기본적인 요건은 분석물 항체가 Fc 영역 변형과는 독립적인 일반적인 분석 포맷에서 검출되어야 한다는 것이다. 이것은 또한 샘플 매트릭스에도 적용되어야 한다. 이 분석은 저농도 항체 샘플을 측정할 수 있도록 가능한 민감해야 한다.
Fc 영역 변이와 관련된 생체 내 약동학적 특성을 평가하기 위한 대용물로서 비치료용 항체를 사용하는 것은 비-간섭 분석 장치를 허용한다는 것이 밝혀지고 있다. 대용 항체는 비-내인성 표적에 대한 결합 특이성을 갖는다. 비-내인성 결합 특이성은 포획 시약 및 검출 시약과의 상호 작용에 대한 검출 분석에서 사용된다.
따라서, 본원에서는 비-인간 실험 동물로부터 수득한 혈청 샘플에서 Fc 영역 변형 항체의 양의 시험관 내 측정을 위한 연속 가교 ELISA가 보고되었다.
본원에 보고된 바와 같은, 분석 장치를 기반으로 한 본원에 보고된 방법으로 하기가 가능하다:
- (실험 동물의) 다른 혈청/혈장 성분에 대한 교차 반응도 없이 Fc 영역 변형 항체의 양을 측정하고, 즉 분석은 높은 특이성을 가지며,
- 일반적으로 측정된 Fc 영역 변형 항체의 양, 즉, 이 방법은 Fc 영역 및 실험 동물의 종과 독립적으로 적용 가능하다; 이것은 샘플 매트릭스뿐만 아니라 분석물에도 유효하다; 이것은 임의의 실험 동물 매트릭스에서 상이한 종 특이적 Fc 영역을 포함하는 항체 Fc 영역 변이체의 검출을 가능하게 하며,
- Fc 영역 변형 항체의 구조적 완전성뿐만 아니라 Fc 영역 변형 항체의 이원성을 측정하고 확인하며,
- 고감도 및 최대 100 ng/mL의 낮은 검출 한계에서 Fc 영역 변형 항체의 양을 측정하고,
- 표준화된 재료를 사용하여 방법을 수행한다.
본원에 보고된 방법에서 사용된 항체는 비-내인성 표적에 특이적으로 결합하는 대용 항체이다. 이것은 생체 내에서 항체에 의해 생물학적 효과가 발휘되지 않으며 순전히 Fc 영역 돌연변이/변이와 연관된 약동학적 특성이 전적으로 평가된다는 것을 보장한다.
본원에 보고된 방법에서 사용되는 대용 항체는 하나의 구현예에서 합텐에 결합한다. 합텐 및 항-합텐 항체는 일반적으로 생분석학적 분석, 예컨대 ELISA에 사용된다.
본원에 보고된 한 측면은 비-인간 실험 동물로부터 수득된 혈청 또는 혈장 샘플에서 2가 항체의 양을 측정하는 방법으로서, 이 항체는 SEQ ID NO:01, 02 또는 03의 서열을 갖는 상응하는 야생형 Fc 영역에 비해 Fc 영역에서 하나 이상의 돌연변이를 포함하며, 이 방법은 하기 순서로 하기 단계를 포함한다:
a) 항체의 항원의 1 개 초과의 복제물이 공유 결합으로 접합된 비-항체 폴리펩티드를 고체 표면 상에 고정하는 단계,
b) 고정된 항원을 샘플과 함께 인큐베이션하여 고정된 항원-항체 복합체를 형성하는 단계,
c) 고정된 항원-항체 복합체를 검출 가능한 표지에 접합된 항원과 인큐베이션하여 고정된 삼원 복합체를 형성하는 단계,
d) 고정된 삼원 복합체에서 검출 가능한 표지의 양을 측정하여 항체의 양을 측정하는 단계.
하나의 구현예에서, 2가 항체는 2가 항-합텐 항체이다.
하나의 구현예에서, 2가 항-합텐 항체는 2가 항-디곡시게닌 항체이다.
본원에 보고된 한 측면은 비-인간 실험 동물로부터 수득한 혈청 또는 혈장 샘플에서 2가 항-디곡시게닌 항체의 양을 측정하는 방법으로서, 이 항체는 SEQ ID NO:01, 02 또는 03의 서열을 갖는 상응하는 야생형 Fc 영역에 비해 Fc 영역에서 하나 이상의 돌연변이를 포함하며, 이 방법은 하기 순서로 하기 단계를 포함한다:
a) 1 개 초과의 디곡시게닌 분자가 공유 결합으로 접합된 비-항체 폴리펩티드를 고체 표면 상에 고정하는 단계,
b) 1 개 초과의 디곡시게닌 분자가 공유 결합으로 접합된 고정된 비-항체 폴리펩티드를 샘플과 인큐베이션하여 고정된 항원-항체 복합체를 형성하는 단계,
c) 고정된 항원-항체 복합체를 검출 가능한 표지에 접합된 디곡시게닌으로 인큐베이션하여 고정된 삼원 복합체를 형성하는 단계,
d) 고정된 삼원 복합체에서 검출 가능한 표지의 양을 측정하여 항체의 양을 측정하는 단계.
하나의 구현예에서 비-항체 단백질은 혈청 단백질이다. 하나의 구현예에서 비-항체 폴리펩티드는 소 혈장 알부민이다.
하나의 구현예에서, 항체의 항원의 하나 이상의 복제물은 비-항체 폴리펩티드에 화학적으로 접합된다.
고정화 단계에서의 하나의 구현예에서, 비-항체 폴리펩티드의 농도는 약 50 ng/mL이다.
하나의 구현예에서, 항원은 특이적 결합쌍을 통해 검출 가능한 표지에 접합된다. 하나의 구현예에서, 특이적 결합쌍 (제 1 성분/제 2 성분)은 스트렙타비딘 또는 아비딘/비오틴, 또는 항체/항원 (예를 들어, Hermanson, GT., 외, Bioconjugate Techniques, Academic Press, 1996 참조), 또는 렉틴/폴리사카라이드, 또는 스테로이드/스테로이드 결합 단백질, 또는 호르몬/호르몬 수용체, 또는 효소/기질, 또는 IgG/단백질 A 및/또는 G로부터 선택된다.
하나의 구현예에서, 검출 가능한 표지는 효소이다. 하나의 구현예에서, 검출 가능한 표지는 퍼옥시다아제이다. 하나의 구현예에서, 검출 가능한 표지는 서양고추냉이 퍼옥시다아제이다. 하나의 구현예에서, 검출 가능한 표지의 농도는 약 300 mU/mL이다.
하나의 구현예에서, 고정된 삼원 복합체를 3,3', 5,5'-테트라메틸 벤지딘과 함께 인큐베이션하여 측정한다.
본원에 보고된 한 측면은 SEQ ID NO:01, 02 또는 03의 야생형 Fc 영역에 비해 Fc 수용체(Fcγ 수용체, FcRn)에 대한 결합을 감소시키는 돌연변이를 갖는 Fc 영역을 갖는 항체의 약동학적 특성 (생체 내 반감기)을 측정하기 위한 본원에서 보고된 바와 같은 방법(의 사용)으로, 여기에서, 본원에 보고된 방법은 비-인간 실험 동물 (시노몰거스, 마우스, 래트, 토끼, 미니피그, 기니아피그)에 상기 항체를 투여한 후 적어도 두 개의 상이한 시점에서 수행하고, 이 결과 (투여 후 적어도 두 시점에서의 상기 항체의 혈청/혈장 샘플 농도)에 따라 상기 Fc 영역/항체의 생체 내 반감기가 측정된다.
하나의 구현예에서, 적어도 두 개의 상이한 시점은 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 시점이다. 하나의 바람직한 구현예에서 적어도 두 개의 상이한 시점은 5 내지 10 시점이다. 하나의 구현예에서, 시점은 0.5 내지 300 시간 떨어져 있다. 하나의 구현예에서, 시점은 0.5 시간, 6 시간, 12 시간, 24 시간, 48 시간, 72 시간, 168 시간, 336 시간, 504 시간 및 672 시간으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
가교 분석을 위한 두 가지 주요 원리는 당업자에게 공지되어 있으며, 이들은 비-내인성 표적 및 비-내인성 표적 결합 항체의 예시로서 합텐 디곡시게닌 및 항-디곡시게닌 항체를 사용하여 하기에서 예시된다.
1) 검출 시약으로서 항-이디오타입 항체 및 디곡시게닌화 항체를 사용하여 포획
이 포맷에서 디곡시게닌화 항체가 1 차 검출 시약으로 사용된다. 그러나 이것은 간섭을 일으킬 수 있다: 분석물 자체로서의 항-디곡시게닌화 항체는 분석물의 최종 검출을 방해하는 검출 시약의 디곡시게닌과도 상호 작용할 수 있다.
2) 항-Fc 영역 항체를 사용하여 포획
이 포맷에서 분석물은 고체 상에 접합된 항-Fc 영역 항체에 의해 포획된다. 또한 이 포맷에서 분석물은 검출 항체의 디곡시게닌-표지와 경쟁하여 신호 켄칭(quenching)을 일으킨다. 또한 이 포맷에서는 분석물의 기능적 완전성에 대한 증거를 얻을 수 없다. 또한 추가로 포맷은 한편으로는 포획 항체가 종 특이적이고 다른 한편으로는 포획 항체가 실험 동물의 내인성 항체와 교차 반응하기때문에 종에 독립적이지 않다. 또한, Fc 영역 변형이 포획 항체의 결합의 손실을 일으킬 수 있기 때문에, 본 분석은 Fc 영역 변형 항체 변이체의 검출에 일반적으로 적용할 수 없다.
Ⅰ. 정의
용어 "약(about)"은 그 다음에 이어지는 값이 정확한 값이 아니고 값의 +/- 10 % 또는 값의 +/- 5 % 또는 +/- 2 % 또는 값의 +/- 1 % 인 범위의 중심점임을 나타낸다. 값이 백분율로 주어진 상대값이면 용어 "약"은 그 다음에 이어지는 값이 정확한 값이 아니지만 값의 +/- 10 % 또는 값의 +/- 5 % 또는 값의 +/- 2 % 또는 값의 +/- 1 % 인 범위의 중심점이므로, 범위의 상한값이 100 %를 초과할 수 없다.
용어 "항체"는 면역 글로불린 유전자에 의해 실질적으로 코딩되는 하나 이상의 폴리펩티드로 구성된 단백질을 지칭한다. 인식된 면역 글로불린 유전자는 무수한 면역 글로불린 가변 영역 유전자뿐만 아니라 다른 불변 영역 유전자를 포함한다. 항체는 예를 들어, Fv, Fab 및 F(ab)2 뿐만 아니라 단일 사슬 (scFv) 또는 이중체들 (예를 들어, Huston, J.S. 외, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85 (1988) 5879-5883; Bird, R.E. 외, Science 242 (1988) 423-426; 일반적으로, Hood 외, Immunology, Benjamin N.Y., 2판 (1984); 및 Hunkapiller, T. and Hood, L., Nature 323 (1986) 15-16 참조) 을 포함하는 다양한 포맷에서 존재할 수 있다.
일반적으로 항체는 2 개의 소위 경사슬 폴리펩티드 (경사슬) 및 2 개의 소위 중사슬 폴리펩티드 (중사슬)를 포함한다. 중사슬 및 경사슬 폴리펩티드 각각은 항원과 상호 작용할 수 있는 결합 영역을 포함하는 가변 도메인 (가변 영역) (일반적으로 폴리펩티드 사슬의 아미노 말단 부분)을 함유한다. 중사슬 및 경사슬 폴리펩티드 각각은 불변 영역 (일반적으로 카르복실 말단 부분)을 포함한다. 중사슬의 불변 영역은 i) Fc 감마 수용체 (FcγR)를 갖는 세포, 예컨대 식세포 또는 ii) Brambell 수용체로도 알려진 신생아 Fc 수용체 (FcRn)를 갖는 세포에 대한 항체 i)의 결합을 매개한다. 이것은 또한 고전적인 보체 시스템의 인자, 예컨대 성분 (C1q)를 포함하는 몇몇 인자에 대한 결합을 매개한다.
항체의 경사슬 또는 중사슬의 가변 도메인은 상이한 분절, 즉 4 개의 골격 영역 (FR) 및 3 개의 과가변 영역 (CDR)을 포함한다.
본 발명에 따른 용어 "약물 항체"는 질환의 치료를 위해 개체에게 투여될 수 있는 항체를 의미한다. 본 발명에 따라 수행된 하나의 분석 내에서, 약물 항체 및 포획 항체, 또는 약물 항체 및 추적 항체는 각각 "동일한" 항체 분자, 예를 들어 동일한 발현 벡터로 재조합적으로 생산되고 동일한 아미노산 서열을 포함하는 항체를 포함한다. 약물 항체 (치료용 단일 클론 항체)는 다양한 질환, 예컨대 종양 질환 (예를 들어, 비-호 지킨성 림프종, 유방암 및 결장직장암을 포함한 혈액 및 고형 악성 종양), 면역 질환, 중추 신경계 질환, 혈관 질환, 또는 전염병의 치료에 광범위하게 이용되고 있다. 이러한 항체들은 예를 들어, Levene, A.P., 외, Journal of the Royal Society of Medicine 98 (2005) 145-152에 기술되어 있다. 이러한 항체들은, 예를 들어, CD20, CD22, HLA-DR, CD33, CD52, EGFR, G250, GD3, HER2, PSMA, CD56, VEGF, VEGF2, CEA, Levis Y 항원, IL-6 수용체 또는 IGF-1 수용체에 대한 항체이다. 치료적 항체는 또한 Groner, B., 외, Curr. Mol. Meth. 4(2004)539-547;Harris, M., Lancet Oncol. 5 (2004) 292-302에 기술되어 있다.
본원에서 사용된 용어 "단일 클론 면역 글로불린"은 실질적으로 균질한 면역 글로불린의 집단으로부터 수득된 면역 글로불린을 지칭하며, 즉, 집단을 포함하는 개별 면역 글로불린은 소량으로 존재할 수 있는 가능한 자연 발생 돌연변이를 제외하고 동일하다. 단일 클론 면역 글로불린은 매우 특이적이며, 단일 항원성 부위에 대해 지시된다. 또한, 상이한 항원성 부위 (결정소 또는 에피토프)에 대해 지시된 상이한 면역 글로불린을 포함하는 다클론 면역 글로불린 제제와는 반대로, 각각의 단일 클론 면역 글로불린은 항원 상의 단일 항원 부위에 대해 지시된다. 그들의 특이성 이외에, 단일 클론 면역 글로불린은 다른 면역 글로불린에 의해 오염되지 않고 합성될 수 있다는 점에서 유리하다. 수식어 "단일 클론"은 실질적으로 균질한 면역 글로불린 집단으로부터 얻어지는 것으로서 면역 글로불린의 특성을 나타내며 임의의 특정 방법에 의해 면역 글로불린의 생산을 요구하는 것으로서 해석되어서는 안된다.
용어 "치료용 항체"는 인간에서 사용하기 위한 임의의 항체 제제에 관한 것이다. 바람직하게는, 이러한 치료용 항체는 단일 클론 항체일 것이다. 더욱 바람직한 이러한 단일 클론 항체는 유인원으로부터 수득되거나 인간 단일 클론 항체 또는 인간화 항체일 것이다. 바람직하게는, 인간 단일 클론 항체일 것이다. 또한 바람직한 이러한 치료용 단일 클론 항체는 인간화 단일 클론 항체일 것이다.
용어 "표적 항원"은 상응하는 치료용 항체에 결합된 생체 분자에 관한 것이다. 예시로서, Herceptin® 또는 Perjeta®와 같은 HER2 (= ErbB2 또는 p 185 neu)에 대한 치료용 항체의 표적 항원은 HER2이고, Campath®와 같은 CD52에 대한 치료용 항체의 표적항원은 CD52이며, Erbitux®와 같은 EGFR에 대한 치료용 항체의 표적 항원은 EGFR이고, Mylotarg®와 같은 CD33에 대한 치료용 항체의 표적 항원은 CD33이며, OncoScint®와 같은 Tag-72에 대한 치료용 항체의 표적 항원은 Tag-72이고, Panorex®와 같은 17-1A에 대한 치료용 항체의 표적 항원은 17-1A이며, Rituxan® 또는 Zevalin®과 같은 CD20에 대한 치료용 항체의 표적 항원은 CD20이고, Zenapax®와 같은 CD25에 대한 치료용 항체의 표적 항원은 CD25이다. 표적 항원은 가용성, 즉 분비되거나 방출된 표적 항원 또는 세포막 결합 표적 항원일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 "완충된"은 완충 물질에 의해 산성 또는 염기성 물질의 첨가 또는 방출로 인한 pH의 변화가 평준화된 용액을 의미한다. 이러한 효과를 가져 오는 임의의 완충 물질이 사용될 수 있다.
바람직하게는 약학적으로 허용 가능한 완충 물질, 예컨대, 예를 들어 인산 또는 그의 염, 아세트산 또는 그의 염, 시트르산 또는 그의 염, 모르폴린, 2-(N-모르폴리노) 에탄설폰산 또는 그의 염, 히스티딘 또는 그의 염, 글라이신 또는 그의 염, 또는 트리스 (히드록시메틸) 아미노메탄 (TRIS) 또는 그의 염이 사용된다. 인산 또는 그의 염, 또는 아세트산 또는 그의 염, 또는 시트르산 또는 그의 염, 또는 히스티딘 또는 그의 염이 특히 바람직하다. 선택적으로, 완충된 용액은 추가의 염, 예컨대, 예를 들어 염화 나트륨, 황산 나트륨, 염화 칼륨, 황산 칼륨, 시트르산 나트륨 또는 시트르산 칼륨을 포함한다.
추적 및/또는 포획 항체의 그의 접합 파트너에 대한 접합은 다른 방법, 예컨대 수동 흡착, 화학적 결합, 또는 특정 결합쌍을 통한 결합으로 수행될 수 있다. 본원에 사용된 용어 "접합 파트너"는 예를 들어, 고체 지지체, 폴리펩티드, 검출 가능한 표지, 특이적 결합쌍의 구성원을 의미한다. 하나의 구현예에서, 포획 및/또는 추적 항체의 그의 접합 파트너에 대한 접합은 N-말단 및/또는 ε-아미노 그룹 (라이신), 상이한 라이신의 ε-아미노 그룹, 카복시-, 설프하이드릴-, 하이드록실-, 및/또는 항체의 아미노산 백본의 페놀 작용 그룹 및/또는 항체의 탄수화물 구조의 당 알코올 그룹을 통한 화학적 결합에 의해 수행된다. 하나의 구현예에서, 포획 및/또는 추적 항체는 특이적 결합쌍을 통해 그것의 접합 파트너에 접합된다. 바람직하게는 포획 항체를 비오틴에 접합시키고 고체 지지체에 고정화시키는 것은 고체 지지체에 고정된 아비딘 또는 스트렙타비딘을 통해 수행한다. 바람직하게는, 추적 항체는 디곡시게닌에 접합되고, 검출 가능한 표지와의 연결은 디곡시게닌에 대한 항체를 통해 수행된다. 포획 항체는 또 다른 구현예에서 수동 흡착에 의해 고체 지지체에 접합된다. 수동 흡착에 의해 고체 지지체에 접합된 항체는 상이한 항체 부위를 통해 고체 지지체에 접합된 항체의 혼합물을 포함한다. 따라서, 고체 지지체에 접합된 포획 항체는 2 개 이상의 상이한 접합체의 혼합물이며, 여기서 접합체는 고체 지지체에 대한 접합이 수행되는 항체 부위, 즉 항체 잔기가 상이하다. 수동 흡착은 예를 들어, Butler, J.E., "Solid Phase in Immunoassay", 205-225 페이지; Diamandis, E.P. 및 Christopoulos, T.K. (편집자): Immunoassays (1996) Academic Press San Diego에 기술되어 있다.
크로모겐 (형광 또는 발광 그룹 및 염료), 효소, NMR 활성 그룹 또는 금속 입자, 합텐, 예를 들어 디곡시게닌은 "검출 가능한 표지"의 예시이다. 검출 가능한 표지는 또한 광활성화 가능한 가교 결합 그룹, 예를 들어 아지도 또는 아지린 그룹이다. 전기화학발광에 의해 검출될 수 있는 금속 킬레이트 또한 바람직한 신호 방출 그룹이며, 특히 루테늄 킬레이트, 예를 들어, 루테늄 (비스피리딜)32+ 킬레이트가 바람직하다. 적합한 루테늄 표지 그룹은 예를 들어, EP 0 580 979, WO 90/05301, WO 90/11511 및 WO 92/14138에 기술되어 있다. 직접 검출을 위해, 표지 그룹은 임의의 공지된 검출 가능한 마커 그룹, 예컨대 염료, 발광 표지 그룹, 예컨대 화학발광 그룹, 예를 들어 아크리디늄 에스테르 또는 디옥세탄, 또는 형광 염료, 예를 들어, 플루오레신, 쿠마린, 로다민, 옥사진, 레조루핀, 시아닌 및 이들의 유도체로부터 선택될 수 있다. 표지 그룹의 다른 예시는 발광성 금속 복합체, 예컨대 루테늄 또는 유로퓸 복합체, 효소, 예를 들어 ELISA 또는 CEDIA (Cloned Enzyme Donor Immunoassay, 예를 들어 EP-A-0 061 888)에 사용되는 것, 및 방사성 동위 원소가 있다.
간접 검출 시스템은 예를 들어, 검출 시약, 예를 들어 검출 항체가 바이오아핀 결합쌍의 제 1 파트너로 표지되는 것을 포함한다. 적합한 결합쌍의 예시로는 합텐 또는 항원/항체, 비오틴, 비오틴 유사체 예컨대 아미노비오틴, 이미노비오틴 또는 데시오비오틴/아비딘 또는 스트렙타비딘, 당/렉틴, 핵산 또는 핵산 유사체/상보적인 핵산, 및 수용체/리간드, 예를 들어 스테로이드 호르몬 수용체/스테로이드 호르몬이 있다. 바람직한 제 1 결합쌍 구성원은 합텐, 항원 및 호르몬을 포함한다. 특히 바람직하게는 디곡신 및 비오틴과 같은 합텐 및 이들의 유사체가 있다. 이러한 결합쌍의 제 2 파트너, 예를 들어, 항체, 스트렙타비딘 등은 통상적으로, 예를 들어 상기 언급된 바와 같은 표지에 의해 직접 검출을 허용하도록 표지된다.
항체의 "Fc 영역"은 항체의 항원과의 결합에는 직접 관여하지 않지만, 다양한 효과기 기능을 나타낸다. 중사슬의 불변 영역의 아미노산 서열에 따라, 항체 (면역 글로불린)는 IgA, IgD, IgE, IgG 및 IgM 분류로 나뉜다. 이들 분류 중 일부는 하위 분류 (아이소타입), 즉 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4 의 EFLG 또는 IgG 또는 IgA1 및 IgA2의 IgA 로 더 나누어진다. 항체가 속한 면역 글로불린 분류에 따라 면역 글로불린의 중사슬 불변 영역을 각각 α(IgA), δ(IgD), ε(IgE), γ(IgG) 및 μ(IgM)라고 부른다. 본원에 보고된 방법에서 사용된 항체는 바람직하게는 IgG 분류에 속한다. "항체의 Fc-영역"은 당업자에게 잘 알려져 있고 항체의 파파인 절단에 기반하여 정의된 용어이다. 본원에 보고된 방법에서의 항체는 Fc 영역으로서 인간 Fc 영역 또는 인간 기원 유래 Fc 영역을 함유한다. 추가의 구현예에서, Fc 영역은 하위 분류 IgG4의 인간 항체의 Fc 영역 또는 하위 분류 IgG1, IgG2 또는 IgG3의 인간 항체의 Fc 영역이다. Pro238, Asp265, Asp270, Asn297 (Fc 영역 탄수화물의 소실), Pro329, Leu234, Leu235, Gly236, Gly237, Ile253, Ser254, Lys288, Thr307, Gln311, Asn434 또는/및 His435는, 바뀌는 경우, 감소된 Fcγ 수용체 결합을 제공하는 잔기이다 (Shields, RL, 외, J.Biol.Chem.276 (2001) 6591-6604, Lund, J. 외, FASEB J. 9 (1995) 115-119, Morgan, A 외, Immunology 86 (1995) 319-324, EP 0 307 434). 본원에 보고된 방법에서 사용될 수 있는 예시적인 항체는 L234, L235 및/또는 D265에서의 돌연변이 및/또는 PVA236 돌연변이, 돌연변이 S228P, L234A, L235A, L235E 및/또는 PVA236 (PVA236은 IgG4의 EFLG 또는 IgG1의 아미노산 위치 233 내지 236로부터의 (한 문자 아미노산 코드로 주어진) 아미노산 서열 ELLG이 PVA로 대체됨을 의미한다), IgG4의 돌연변이 S228P, 및 IgG1의 L234A 및 L235A 와 함께, IgG4 하위 분류 또는 IgG1 또는 IgG2 하위 분류의 Fcγ 수용체 결합과 관련된다. 항체의 Fc 영역은 ADCC (항체 의존성 세포 매개 세포 독성) 및 CDC (보체 의존성 세포 독성)에 직접적으로 관여한다. Fcγ 수용체 및/또는 보체 인자 C1q와 결합하지 않는 항체는 항체 의존성 세포 독성 (ADCC) 및/또는 보체 의존성 세포 독성 (CDC)을 유발하지 않는다.
본원에 사용된 용어 "인간 기원 유래 Fc 영역"은 하위 분류 IgG4의 인간 항체의 Fc 영역 또는 하위 분류 IgG1, IgG2, 또는 IgG3 (이들의 변이형을 포함함)의 인간 항체의 Fc 영역 중 하나인 Fc 영역을 의미한다. "항체의 Fc 영역"은 당업자에게 공지되어 있고 항체의 파파인 절단에 기반하여 정의된 용어이다.
본원에서 사용된 용어 "링커"또는 "펩티드 링커"는 천연 및/또는 합성 기원의 펩티드 링커를 의미한다. 이들은 20 개의 자연 발생 아미노산이 단량체 빌딩 블록인 선형 아미노산 사슬로 구성된다. 사슬은 1 내지 50 개의 아미노산, 바람직하게는 1 내지 28 개의 아미노산, 특히 바람직하게는 3 내지 25 개의 아미노산의 길이를 갖는다. 링커는 반복적인 아미노산 서열 또는 자연 발생 폴리펩티드, 예컨대 힌지(hinge) 기능을 갖는 폴리펩티드의 서열을 포함할 수 있다. 링커는 항-CD4 항체에 접합된 펩티드가 올바르게 폴딩되고 적절히 제시되도록함으로써 이의 생물학적 활성을 수행할 수 있음을 보장하는 기능을 갖는다. 바람직하게는, 링커는 글라이신, 글루타민 및/또는 세린 잔기가 풍부하게 지정되는 "합성 펩티드 링커"이다. 이들 잔기는 예를 들어, 5 개 이하 아미노산의 작은 반복 단위, 예컨대 GGGS (SEQ ID NO: 04), GGGGS (SEQ ID NO: 05), QQQQG (SEQ ID NO: 06) 또는 SSSSG (SEQ ID NO: 07)로 나타낸다. 이 작은 반복 단위는 2 내지 5 회 반복하여 다량체 단위를 형성할 수 있다. 다량체 단위의 아미노 말단 및/또는 카복시 말단에는 최대 6 개의 추가 임의의 자연 발생 아미노산이 첨가될 수 있다. 다른 합성 펩티트 링커는 10 내지 20 회 반복되는 단일 아미노산으로 구성되며 아미노- 및/또는 카르복시- 말단에서 6 개 이하의 임의의 자연 발생 아미노산, 예컨대, 예를 들어 링커 GSSSSSSSSSSSSSSSG (SEQ ID NO: 08)의 세린을 포함할 수 있다. 모든 펩티드 링커는 핵산 분자에 의해 암호화될 수 있으므로 재조합적으로 발현될 수 있다. 링커 자체가 펩티드이기 때문에, 항융해성 펩티드는 2 개의 아미노산 사이에 형성된 펩티드 결합을 통해 링커에 연결된다.
본 발명을 수행하는데 유용한, 당업자에게 공지된 방법 및 기술은 예를 들어, Ausubel, F.M., ed., Current Protocols in Molecular Biology, I 내지 III 판 (1997), Wiley and Sons; Sambrook 외, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2 판, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989)에 기술되어 있다.
"폴리펩티드"는 자연적으로 또는 합성적으로 생산된 펩티드 결합으로 연결된 아미노산으로 구성된 폴리머이다. 약 20 개 미만의 아미노산 잔기의 폴리펩티드는 "펩티드"로 지칭될 수 있는 반면, 2 개 이상의 폴리펩티드로 이루어지거나 100 개 초과의 아미노산 잔기로 이루어진 하나의 폴리펩티드를 포함하는 분자는 "단백질"로 지칭될 수 있다. 폴리펩티드는 또한 비-아미노산 성분, 예컨대 탄수화물 그룹, 금속 이온 또는 카복실산 에스테르를 포함할 수 있다. 비-아미노산 성분은 폴리펩티드가 발현되는 세포에 의해 첨가될 수 있으며, 세포 유형에 따라 변할 수 있다. 폴리펩티드는 본 명세서에서 그의 아미노산 백본 구조 또는 이를 코딩하는 핵산의 관점에서 정의된다. 첨가물, 예컨대 탄수화물 그룹은 일반적으로 명시되지는 않지만 그럼에도 불구하고 존재할 수 있다.
용어 "샘플"은 살아있는 것 또는 이전에 살아있었던 것으로부터의 물질의 임의의 양을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다. 이러한 살아있는 것에는 사람, 마우스, 원숭이, 래트, 토끼 및 다른 동물이 포함되나 이에 한정되지는 않는다. 하나의 구현예에서, 샘플은 원숭이, 특히 시노몰거스 원숭이, 또는 토끼, 또는 마우스 또는 래트로부터 얻어진다. 이러한 물질은 임상적으로 가장 널리 사용되는 샘플 공급원인 개체의 전혈, 혈청 또는 혈장을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
"고체상"은 비-유동성 물질을 나타내며, 물질, 예컨대 중합체, 금속 (상자성, 강자성 입자), 유리 및 세라믹으로부터 제조된 입자 (미립자 및 비드 포함); 겔 물질, 예컨대 실리카, 알루미나 및 중합체 겔; 중합체, 금속, 유리 및/또는 세라믹으로 제조될 수 있는 모세관; 제올라이트 및 기타 다공성 물질; 전극; 미세 역가 플레이트; 단단한 스트립; 및 큐벳, 튜브 또는 기타 분광계 샘플 용기를 포함한다. 분석의 고체상 성분은 "고체 지지체"가 분자와 화학적으로 상호 작용하도록 의도된 표면의 적어도 하나의 부분을 함유한다는 점에서 분석이 접촉할 수 있는 불활성 고체 표면과 구별될 수 있다. 고체상은 고정된 성분, 예컨대 칩, 튜브, 스트립, 큐벳 또는 미세 역가 플레이트일 수 있거나 또는 비-고정 성분, 예컨대 비드 및 미세 입자일 수 있다. 미립자는 또한 균질 분석 포맷에 대한 견고한 지지체로 사용될 수 있다. 단백질과 다른 물질의 비공유 결합 또는 공유 결합을 허용하는 다양한 미립자가 사용될 수 있다. 이러한 입자는 중합체 입자, 예컨대 폴리스티렌 및 폴리(메틸메타크릴레이트); 금 입자, 예컨대 금 나노 입자 및 금 콜로이드; 및 세라믹 입자, 예컨대 실리카, 유리 및 금속 산화물 입자를 포함한다. 예를 들어, 본원에서 참조로 포함된 Martin, C.R., et al., Analytical Chemistry-News & Features, May 1 (1998) 322A-327A를 참고하면 된다. 고체상은 임의적으로 전체 또는 특정 영역에 코팅될 수 있다. 재료의 표면에는 모든 지점 또는 영역 배열이 표시되거나 좌표로 나타난다. 각각의 지점 또는 영역 상에, 물질의 표면에 링커 또는 스페이서가 있거나 없는 폴리펩티드가 고정될 수 있다. 바람직하게는, 고정된 폴리펩티드는 IgG의 Fc 영역에 결합할 수 있는 본 발명에 따른 수용체이다. 본 발명에 따른 면역 분석을 위한 고체상은 당업계의 기술 수준에서 널리 기술되어 있다 (예를 들어, Butler, J.E., Methods 22 (2000) 4-23 참조).
본 출원에서 상호 교환적으로 사용할 수 있는 용어 "표준"또는 "표준 물질"은 분석 방법에 대한 참조 지점을 나타내며 동일한 분석 방법의 다른 결과가 비교되는 값을 설정하는 데 사용된다. 본원에서 사용된 용어 "양성 대조군"은 분석 방법에 사용되는 경우, 정의된 컷-오프 또는 문턱 값 이상의 반응이 달성되는 표준 물질을 의미한다. 컷-오프 값은 일반적으로 항-약물 항체를 함유하지 않은 샘플의 분석에서 얻은 평균값에 2 배, 바람직하게는 3 배의 값의 표준 편차를 더한 값이다.
II. 본원에서 보고된 바와 같은 방법
본원에 보고된 방법으로, 비-인간 실험 동물로부터 수득된 혈청 또는 혈장 샘플에서 Fc 영역 변형 항체의 양을 측정하기 위한 종래 기술의 방법의 결점이 회피될뿐만 아니라 검출 방법에 필요한 모든 특이성이 충족될 수 있는 것이 밝혀졌다.
비-항체에 기반한 포획 및 검출 시약을 사용하는 것이 유리하다는 것이 밝혀졌다.
바이오티닐화된 RPLA-디곡시게닌 접합체를 사용함으로써 개선된 신호 대 잡음비, 예를 들어 직접 바이오티닐화된 디곡시게닌에 대한 9.5에 비해 32.8를 얻을 수 있음이 밝혀졌다. RPLA 기반의 포획 시약은 신호 증가를 초래하는 디곡시게닌 분자뿐만 아니라 각각 하나 초과의 비오틴을 포함한다. 이중 유도된 RPLA (예를 들어, 바이오티닐화 및 디곡시게닌화)로 RPLA의 직접 고정화가 가능하다.
시약의 사전 인큐베이션과는 대조적으로 일련의 단계는 증가된 감도 (약 2 인자의 개선)를 일으킨다는 것이 밝혀졌다. 본원에 보고된 방법은 효소 기질로서 ABTS를 사용할 때, 1.56 ng/mL (검출 하한치) 내지 200 ng/mL의 유용한 측정 범위를 갖는다. 또한, 분석물 및 검출 시약의 사전 인큐베이션이 후크 효과를 일으킨다는 것이 밝혀졌다. 또한 특히 높은 검출 시약 (디곡시게닌화 퍼옥시다아제)의 농도에서 사전 인큐베이션은 몇몇 경우에서 분석 신호의 감소, 심지어 신호의 총 억제가 나타난다.
연속 분석 장치에 대해 50 ng/mL 코팅 밀도 또는 덜 이중 유도체화된 RPLA가 결합력 효과를 피하기 위해 유리하다는 것이 밝혀졌다.
요약하면, 연속 분석 장치는 사전 인큐베이션 장치과 비교하여 간섭횟수가 적고 민감도가 높다는 장점이 있다.
또한, 발색 기질로서의 ABTS의 사용과 비교하여 발색 기질로서 TMB를 사용함으로써, 분석의 민감도가 (0.94 ng/mL까지) 더욱 향상될 수 있다는 것을 발견하였다. 이 결과는 35 ng/mL 내지 0.55ng/mL 의 범위에서 사용 가능하다.
다른 매트릭스에서 얻은 표준 곡선은 최대 5 %의 변동 계수와 비교할 수 있다.
100 ㎍/mL 까지의 혈장 농도를 갖는 여러 가지 상이한 항체를 분석함으로써, 본원에서 보고된 분석법은 교차 반응성을 나타내지 않고 분석물 (항-디곡시게닌 항체)을 선택적으로 검출하는 것이 발견되었다. 또한, 상이한 동물의 혈장은 아무런 간섭도 나타내지 않았다.
본원에 보고된 방법에서 사용된 포획 시약은 항체가 아니거나 또는 항체로부터 유래된 것이 아니며, 따라서 직접적인 결합 특이성을 갖지 않는다. 그것은 스캐폴드를 나타내는 이중 도메인의 기능을 갖는다: 하나의 도메인이 고체상에 고정되고 하나의 도메인이 측정될 항체의 항원이다.
본원에 보고된 방법에서 사용된 포획 시약은 검출하고자 하는 항체의 항체와 검출 가능한 표지의 접합체이다. 접합은 항원상의 작용기 및 검출 가능한 표지를 통해 직접적으로 또는 링커를 통해 수행될 수 있다.
상기 약술한 바와 같이 시약을 사용함으로써 본원에서 보고된 방법은 보다 적은 시약을 필요로 한다.
본원에 보고된 방법에서, 분석물은 2 차 검출 시약의 필요없이 포획 및 검출 시약과 함께 면역 복합체를 형성한다. 또한 이 분석 포맷을 사용하여 분석물의 구조적 완전성을 측정할 뿐만 아니라 일반적인 탐지도 가능하다.
하나의 구현예에서, 항체는 IgG 분류의 항체이다.
하나의 구현예에서, 항체는 항-합텐 항체이다. 하나의 구현예에서, 항체는 항-비오틴 항체, 항-디곡시게닌 항체, 항-테오필린 항체, 항-헬리카 항체 및 항-브로모데옥시우리딘 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택된다.
하나의 구현예에서 항체는 항-디곡시게닌 항체이다.
면역 분석법은 분석물의 CDR의 결합 특이성을 프레임워크 영역으로부터 독립적으로 사용하기 때문에, Fc 영역 및 항체가 유도되는 종을 얻을 수 있다. 따라서, 본원에 보고된 분석은 오직 항체의 결합 특이성에 의존한다. 따라서, 본원에 보고된 분석은 항체의 Fc 영역이 유도된 종 및 상기 샘플이 수득된 실험 동물에 대한 일반적인 분석이다.
본원에 보고된 검출 방법에서, 항체의 항원 인식은 항원의 접합 상태와 무관하지만, 항원에 대한 항체의 결합 강도에 의존한다.
하나의 구현예에서, 포획 시약, 즉 항원은 고체상에 접합된다. 하나의 구현예에서, 고체상에 대한 접합은 바이오티닐화된 소 혈장 알부민 (RPLA)을 매개로 한다.
소 혈장 알부민 (RPLA)은 소의 혈장에서 얻은 66 kDa의 단백질 구형 단백질이다.
새로운 치료제의 약리학적 및 독성학적 평가를 위해 종종 영장류, 개 또는 미니피그가 비-설치류 종으로 사용된다.
혈액 샘플 분석의 잠재적 오류 원인은 샘플 매트릭스에 있다. 예를 들어, 매트릭스에 존재하는 단백질은 포획 및 추적 시약과 비특이적으로 상호 작용할 수 있다.
본원에 보고된 한 측면은 비-인간 실험 동물로부터 수득된 혈청 또는 혈장 샘플에서 2가 항체의 양을 측정하는 방법으로서, 이 항체는 상응하는 SEQ ID NO:01, 02 또는 03의 서열을 갖는 야생형 Fc 영역에 비해 Fc 영역에서 하나 이상의 돌연변이를 포함하며, 이 방법은 하기 순서로 하기 단계를 포함한다:
a) 바람직하게는 50 ng/ml의 농도로 고체 아비딘 또는 스트렙타비딘으로 코팅된 표면 상에 항체의 항원의 1 개 초과의 복제물이 공유 결합으로 접합된 바이오 티닐화 소 혈장 알부민을 고정하는 단계,
a1) 임의의 세척 단계,
b) 바람직하게는 항체가 0.55 내지 35 ng/ml의 농도를 가지며, 더욱 바람직하게는 샘플이 10 % 혈청을 포함하는, 고정된 항원을 샘플과 함께 인큐베이션하여 고정된 항원-항체 복합체를 형성하는 단계,
b1) 임의의 세척 단계,
c) 바람직하게는 검출 가능한 표지가 퍼옥시다아제이고, 더욱 바람직하게는 300 mU/ml의 농도로 퍼옥시다아제를 사용하고, 고정된 항원-항체 복합체를 검출 가능한 표지에 접합된 항원과 인큐베이션하여 고정된 삼원 복합체를 형성하는 단계,
c1) 임의의 세척 단계,
d) 고정된 삼원 복합체에서 검출 가능한 표지의 양을 측정하여 항체의 양을 측정하는 단계.
폴리펩티드 (즉, 항원) 및 항체는 수많은 반응성 단량체, 예컨대, 예를 들어, 아미노 그룹 (라이신, 알파-아미노 그룹), 티올 그룹 (시스틴, 시스테인 및 메티오닌), 카복실산 그룹 (아스파르트산, 글루탐산) 및 당 알코올 그룹을 함유한다. 이들은 표면, 단백질, 중합체 (예컨대, 예를 들어, PEG, 셀룰로오스 또는 폴리스티롤), 효소 또는 결합쌍의 구성원과 같은 결합 파트너에 대한 커플링에 사용된다 (예를 들어, Aslam M. 및 Dent, A., Bioconjuation MacMillan Ref. Ltd. (1999) 50-100 참조).
단백질의 가장 일반적인 반응성 그룹 중 하나는 아미노산 라이신의 지방족 ε-아민이다. 일반적으로, 거의 모든 항체는 풍부한 라이신 잔기를 포함한다. 라이신 아민/아미노 그룹은 pH 8.0 (pKa = 9.18) 초과의 비교적 양호한 친핵체이고 따라서 다양한 시약과 쉽고 깨끗하게 반응하여 안정한 결합을 형성한다.
항체의 또 다른 공통 반응성 그룹은 황-함유 아미노산 시스틴과 그 환원 생성물 시스테인 (또는 반 시스틴)으로부터의 티올 잔기이다. 시스테인은 아민보다 친핵성이 높고 일반적으로 단백질에서 가장 반응성이 큰 작용기인 유리 티올 그룹을 함유한다. 티올은 일반적으로 중성 pH에서 반응성이 있으므로 아민 존재 하에 선택적으로 다른 분자와 결합할 수 있다. 유리 설프하이드릴 그룹은 비교적 반응성이기 때문에, 이들 그룹을 갖는 단백질은 종종 이들과 함께 산화 형태로 디설피드 그룹 또는 디설피드 결합으로서 존재한다.
시스틴과 시스테인 이외에도, 일부 단백질은 티오에테르 결합에 황을 포함하는 아미노산 메티오닌을 가지고 있다. 문헌은 몇 가지 티오레이트화 가교결합제의 사용, 예컨대 Traut 's reagent (2-이미노티오레인), 숙시니미딜(아세틸티오)아세테이트 (SATA), 또는 설포숙시니미딜 6-[3-(2-피리딜디티오) 프로피오나미도] 헥사노에이트 (설포-LC-SPDP)이 반응성 아미노 그룹을 통해서 다수의 설프히드릴 그룹을 도입하는 효율적인 방법을 제공한다고 보고하고 있다.
반응성 에스테르, 특히 N-히드록시숙신이미드 (NHS) 에스테르는 아민 그룹의 변형에 가장 일반적으로 사용되는 시약 중 하나이다. 수성 환경에서 반응을 위한 최적의 pH는 pH 8.0 내지 9.0이다.
이소티오시아네이트는 아민 변형 시약이며 단백질과 티오우레아 결합을 형성한다. 이들은 수용액 (최적으로 pH 9.0 내지 9.5)에서 단백질 아민과 반응한다.
알데히드는 온화한 수성 조건 하에서 지방족 및 방향족 아민, 히드라진 및 히드라지드와 반응하여 이민 중간체 (Schiff 염기)를 형성한다. Schiff 염기는 안정한 알킬 아민 결합을 유도하기 위해 약하거나 강한 환원제 (예컨대, 수소화 붕소 나트륨 또는 수소화 시아노 붕소 나트륨)로 선택적으로 환원될 수 있다.
아민을 변형하는데 사용되는 다른 시약은 산 무수물이다. 예를 들어, 디에틸렌트리아민펜타아세트산 무수물 (DTPA)은 2 개의 아민 반응성 무수물 그룹을 함유하는 2 작용성 킬레이트제이다. 단백질의 N-말단 및 ε-아민 그룹과 반응하여 아미드 결합을 형성할 수 있다. 무수물 고리는 개방되어 금속에 단단하게 결합할 수 있는 다가의 금속 킬레이트 암(arm)을 생성한다.
상이한 면역 분석법의 원리는, 예를 들어 Hage, D.S. (Anal. Chem. 71 (1999) 294R-304R). Lu, B., 외 (Analyst 121 (1996) 29R-32R) 는 면역 측정법에서 사용하기 위한 항체의 방향성 고정화를 보고한다. 아비딘-비오틴-매개 면역 분석은 예를 들어 Wilchek, M. 및 Bayer, E.A.,에 의해 Methods Enzymol. 184 (1990) 467-469 에서 보고된다.
[도면의 간단한설명]
도 1 표준 면역 분석의 계획.
도 2 본원에서 보고된 면역 분석의 계획.
도 3 분석 표준 곡선.
도 4 야생형 항체 (다이아몬드) 및 LALA-PG-AAA 돌연변이 (사각형) 의 약동학적 분석.
도 5 표준 곡선.
하기 실시예, 도 및 서열은 본 발명의 이해를 돕기 위해 제공되며, 그 진정한 범위는 첨부된 청구 범위에 기술되어 있다. 본 발명의 취지를 벗어남 없이 개시된 과정에서 변형이 이루어질 수 있음이 이해된다.
재료
실시예 1
면역 분석
본원에 보고된 방법은 샌드위치 포맷의 비-경쟁 효소 결합 면역 흡착 분석이다. 이 분석 장치는 10 % 매트릭스 (혈청)에서 비-생물학적 활성 항체의 검출을 허용한다.
스트렙타비딘 코팅 96-웰 플레이트 (SA-MTP)를 활성화된 비오틴 (비오틴-(XOSu)-RPLA-디곡시게닌(XOSu)(BI-RPLA-DIG))으로 코팅하였다. 코팅은 100㎕의 용액 (50 ng/mL BI-RPLA-DIG)를 실온에서 1 시간 동안 진탕하면서 (500 rpm) 각 웰에 첨가하였다. 이후 웰을 각각 300 ㎕의 세척 완충액으로 3 회 세척하였다.
분석 표준 샘플의 경우, 품질 관리 샘플과 샘플을 중복하여 분석했다. 표준 샘플 및 품질 관리 샘플을 100 % 매트릭스로 준비하고 이후 1:10 (v/v)의 분석 완충액으로 희석했다. 표준 샘플은 하기와 같이 100 % 매트릭스에서 1:1 희석 시리즈로 실험 동물에 동일하게 적용된 동일한 재료를 사용하여 제조하였다: 첫번째 표준 샘플(STD A)을 단일 클론 쥐 항-디곡시게닌 항체 (mAb <Dig>M-19.11-IgG)를 100 % 매트릭스에서 350 ng/mL의 농도로 사용하여 제조하였다. 100 % 매트릭스로 STD A를 희석하여 STD B와, STD G (350 ng/mL-5.5 ng/mL)까지 수득했다. 8 번째 표준은 스파이크되지 않은 100 % 매트릭스이다. 표준 샘플 및 블랭크를 분석 완충액으로 1:10(v/v)으로 희석하였다. 각 샘플과 표준은 웰에 100㎕의 부피로 추가되었다. 플레이트를 실온에서 1 시간 동안 진탕 (500 rpm)하여 인큐베이션하였다. 그 후, 상등액을 제거하고, 각 웰을 300 ㎕/웰 세척 완충액으로 3 회 세척하였다. 각 웰에 100 ㎕ 의 검출 용액 (디곡시게닌(XOSu)-퍼옥시다아제(DIG_POD); 300 mU/mL)을 첨가하였다. 이 후, 플레이트를 실온에서 1 시간 동안 진탕 (500 rpm)하여 인큐베이션하였다. 이 후, 상등액을 제거하고 각 웰을 완충액 300 ㎕로 각각 3 회 세척하였다. 100 ㎕의 3,3', 5,5'-테트라메틸 벤지딘 (TMB) 용액을 첨가하여 착색 반응을 개시하였다. 18 분 후에, 0.5 mol/L의 인산을 첨가하여 반응을 정지시키고, 450 nm에서 흡광도를 측정하고, 690 nm에서 취한 기준치를 사용하였다.
실시예 2
포획 시약
1) 비-특이적 흡착
이 실시예에서 포획 시약 디곡시게닌-접합 소 혈청 알부민 (RPLA-DIG)을 사용하였다.
100 mM 탄산수소 나트륨 완충액 (pH 9.6)에 1.5 ㎍/mL RPLA-DIG를 포함하는 용액을 제조하였다. 폴리스티롤 다중-웰 플레이트의 각 웰을 200 ㎕의 상기 용액으로 채우고 1 시간 동안 진탕하여 인큐베이션하였다. 이 후에, 상등액을 제거하고, 웰을 소 혈청 알부민을 포함하는 300 ㎕/웰 차단 완충액으로 각각 3 회 세척하였다. 상등액을 제거한 후 웰을 각각 세 번 세척한다.
표준 샘플은 하기와 같이 100 % 분석 완충액에서 1:1 연속 희석을 사용하여 준비하였다: 첫 번째 표준 샘플 (STD A)은 단일 클론 쥐 항-디곡시게닌 항체 (mAb <Dig> M-19.11-IgG)를 사용하여 분석 완충액 중 100 ng/mL의 농도에서 제조하였다. STD A를 분석 완충액과 1:1 (100 % 희석)로 STD B를 수득하고 STD G까지 동일하게 하였다. 8 번째 표준은 비-스파이크 분석 완충액이다.
6개의 연속 표준을 중복으로 측정하였다 (1 시간의 웰에서의 인큐베이션 시간).
검출을 위해, 서양고추냉이 퍼옥시다아제 접합 토끼 다클론 항-Fc-항체 (pAk<M-Fc>Rb-IgG-HRP)를 포함하는 용액을 제조하였다 (50 mU/mL). 이 검출 용액을 25mU/mL, 12.5mU/mL, 6.25mU/㎖, 3.13mU/mL 및 1.56mU/mL로 희석하여 검출 시약 농도가 다른 6 개의 검출 용액을 수득하였다.
웰에서 상등액을 제거하고 3 번 세척한 후 검출 시약을 웰에 추가한다. 따라서 6 개의 연속 표준 각각에 대해 검출 시약의 각 희석액 100 ㎕을 추가한다. 인큐베이션 후 상등액을 제거하고 ABTS 용액을 첨가한다. 생성된 착색 반응 생성물을 490 nm의 기준 파장으로 405 nm에서 측정한다.
2) 특이적 흡착
특이적 및 지시적 흡착을 위한 두 가지 다른 포획 시약을 제조했다: i) 정의 된 BI-DIG 화학량론으로: DIG-3-CME-UEEK-Bi (DIG = 디곡시게닌; 3-CME = 3-카복시메틸에테르; UEEK=β-알라닌-글루탐산-글루탐산-라이신; BI=비오틴; MW 약 1.1 kDa; 하기에서 BI-DIG로 표시됨) ii) 정의되지 않은 BI-DIG 화학량론으로: BI-RPLA-DIG (RPLA = 소 혈장 알부민, MW 약 70 kDa).
표준 샘플로서, 이 실시예에서는 항-ANG2 항체가 사용되었다.
포획 시약은 인큐베이션된 표준 및 제 1 검출 시약 (이전 실시예 참조)과 함께 밤새 인큐베이션하였다. 인큐베이션은 표면에 비특이적 흡착이 일어나지 않는 폴리프로필렌 플레이트에서 수행한다.
검출을 위해 디곡시게닌화 항-이디오타입 항체를 밤새 사전 인큐베이션된 샘플 (mAb<ID-mAb<ANG2>>M.2.6.81-IgG(SPA)-Dig(XOSu) (DIG-IGG))에 첨가한다. 신호는 퍼옥시다제 접합체 다클론 항-디곡시게닌 항체 (pAk<DIG>S-Fab-POD)를 사용하여 발생시켰다.
포획 시약 BI-DIG는 219.99 ng/mL의 농도로 사용되었고 포획 시약 BI-RPLA-DIG는 14 ㎍/mL의 농도로 사용되었다. 이 농도에서 포획 시약은 사전 인큐베이션 중에 다른 시약에 비해 100 배의 몰 과량 (BI-100)이 존재했다. 1:10 및 1:1의 몰비를 갖는 1:10 (BI-10) 및 1:100 희석 (BI-1) 용액을 수득하였다. 유사하게, 제 1 검출 시약은 농도 30㎍/㎖ (DIG-100)로 사용되어 포획 시약 대 검출 시약의 몰비가 1:100 이 되게하였다. 1:10 및 1:1 몰비의 1:10 (DIG-10) 및 1:100 희석액 (DIG-1)을 수득하였다. 분석물은 3 ㎍/mL의 농도로 사용되었다 (STD-10). 1:10으로 희석하여 STD-1을 제공하였다.
미리 생성된 면역 복합체 함유 용액을 스트렙타비딘 코팅 다중-웰 플레이트의 웰에 가하고 분석물의 Fc 영역에 대한 2 차 검출 시약 (pAb<M-Fc>Rb-IGG-HRP; HRP=서양고추냉이 퍼옥시다아제)을 160 ng/mL의 농도로 첨가하였다. 1 시간의 인큐베이션 시간 후, 기질 용액을 첨가하고 생성된 착색 반응 생성물을 광도계로 측정하였다.
18.5 분에 측정된 BI-DIG 접합체에 대한 결과를 하기 표에 나타내었다.
18.5 분에 측정된 BI-RPLA-DIG 접합체에 대한 결과를 하기 표에 나타내었다.
디곡시게닌화 항체가 고농도에서만 플레이트에 비특이적으로 결합한다는 것을 알 수 있다. 또한, 두 포획 시약에 대한 최대 흡광도는 동일한 몰비임을 알 수있다. BI-DIG의 경우, 포획 시약의 몰비가 BI-RPLA-DIG에 비해 10 배만큼 이동한다. 소멸 최대값의 신호 대 잡음비 (S/N)를 직접 비교하면 Bi-RPLA-Dig의 경우 S/N이 32.8 (S/N=1.754/0.054)인 반면 BI-DIG는 9.5 (S/N=0.399/0.042)이다.
실시예 3
분석 장치
이 실시예에서 i) 연속 장치 (포획 시약, 분석물 및 검출 시약의 적용, 각 단계는 하나의 세척 단계로 분리됨), ii) 분석물 및 검출 시약의 사전 인큐베이션, 및 iii) 포획 시약, 분석물 및 검출 시약의 사전 인큐베이션.
1) 연속 장치
18.6 분 후 연속 장치으로 얻은 결과를 하기 표에 나타내었다. 50 ng/mL의 분석물 농도에서 최대 36.3이 얻어졌다.
BI-RPLA-DIG 농도가 감소하고 DIG-POD 농도가 증가하면 S/N이 증가하는 것을 볼 수 있다. 300 mU/mL의 검출 시약 및 50 ng/mL의 포획 시약의 농도에서 최대 36.3 이 관찰될 수 있다.
하기 표 (검출 시약 농도가 300 mU/mL로 측정됨)에서 포획 농도가 50 ng/mL까지 증가하고 이후 감소한다는 것을 알 수 있다. 이 농도보다 높은 경우 결합 효과가 발생하여 2가 결합으로 인해 신호가 감소한다.
하기 표 (18.5 분 인큐베이션 시간 후 검출)의 데이터로부터 DIG-POD 성분에 의한 다이내믹 범위에 차이가 없다, 즉 제한이 없다는 것을 알 수 있다. 블랭크 신호의 두 배 이상의 신호가 양호한 정량화가 가능하다고 가정할 때 민감도는 DIG-POD 농도와 무관하다는 것을 알 수 있다. 따라서 ABTS를 착색 시약으로 사용하는 연속 포맷은 BI-RPLA-DIG 농도가 300 mU/mL 이고 50 ng/mL 포획 시약이 1.56 내지 200 ng/mL의 검출 범위를 갖는다.
반응은 착색 기질로서 TMB를 사용하여 반복되었다. ABTS 대신에 TMB를 사용하는 경우, 분석은 더 짧은 시간 내에 수행될 수 있다는 것이 밝혀졌는데, 즉, 더 빠르며, 더 높은 흡광도 값이 얻어질 수 있다. TMB를 이용한 검출 범위는 0.78 내지 50 ng/mL이다. 값은 하기 표에 나타내었다.
2) 사전 인큐베이션 분석물 및 검출 시약
하기 표에서 단일 클론 항-디곡시게닌 항체 50 ng/mL의 농도에서 코팅 농도가 증가하고 검출 시약이 감소함에 따라 S/N이 증가함을 알 수 있다. 400 ng/mL BI-RPLA-DIG 및 31.3 mU/mL DIG-POD에서 최대값에 도달한다. 착색 시약은 ABTS였다.
하기 연속으로 시행된 모든 세 가지 DIG-POD 농도에서 400 ng/mL의 항-디곡시게닌 항체 농도에서 시작하는 후크 효과가 나타난다. DIG-POD 농도가 증가함에 따라 포화 정체기는 더욱 넓어지고 후크 효과는 나중에 도달한다는 것을 알 수 있다. POD 농도에 의한 명확한 제한이 나타난다. BI-RPLA-DIG 농도가 400 ng/mL이고 DIG-POD 농도가 30 mU/mL 인 이 분석법의 경우, 검출 범위는 3.13 내지 150 ng/mL 이다. 다른 두 농도는 제한된 POD 효과와 더 긴 소요 시간으로 인해 적합하지 않다.
3) 포획 시약, 분석물 및 검출 시약의 사전 인큐베이션
하기 표의 데이터를 보면 50 ng/mL 의 단일 클론 항-디곡시게닌 항체 농도에서 포획 시약 농도가 감소하고 검출 시약 농도가 감소함에 따라 S/N이 증가함을 알 수 있다. BI-RPLA-DIG의 농도가 13.7 ng/mL이고 DIG-POD의 농도가 18.8 mU/mL 인 경우 최대값에 도달한다. 착색 시약은 ABTS였다.
하기 데이터 세트에서 BI-RPLA-DIG 농도가 10 ng/mL에서 DIG-POD 농도가 16.6 mU/mL 일 때 제한이 발생하고 표준 곡선이 OD 값 2 에 도달하지 않음을 알 수 있다. 이 조합의 경우 200 ng/mL의 분석물 농도에서 후크 효과를 볼 수 있다. 데이터가 비교 가능하기 때문에 기준은 이 카테고리에서 이들 중 하나를 선택하기 위한 시약 사용이다. 6400 ng/mL의 분석물 농도까지 후크 효과가 검출가능하지 않다. BI-RPLA-DIG 농도가 1000 ng/mL이고 DIG-POD 농도가 600 mU/mL 인 검출 범위는 3.13 내지 200 ng/mL 이다. 동일한 검출 범위는 100 ng/mL BI-RPLA-DIG와 100 mU/mL DIG-POD를 사용하는 분석법을 갖는다.
실시예 4
상이한 착색 시약
ABTS와 TMB의 다른 착색 시약 및 HPPA의 방출값에 대한 하기 표에서 음영 처리된 소멸값은 검출 한계 이하이며 정량화할 수 없다. 연속 장치 (본원에서 보고된 분석)에서의 분석은 0.94 ng/mL의 TMB를 사용하는 검출 한계가 ABTS에 비해 2 배 더 민감하다는 것을 알 수 있다. HPPA를 사용한 검출 한계는 0.47 ng/mL 이다 (5 U/mL DIG-POD 표준 시리즈 사용). 이 분석 변이가 TMB를 사용하는 분석보다 더 민감하지만 놀랍게도 분석 신호는 견고한 분석의 장치를 가능하게 하는 충분히 재현 가능한 방식으로는 얻을 수 없다.
ABTS:
TMB:
HPPA:
실시예 5
매트릭스 범위
다른 매트릭스에서 완충액으로 생성된 표준 샘플에 비해 스파이크된 표준 샘플은 수득된 신호만 감소한 것을 하기 표로부터 볼 수 있다. 완충액 샘플을 참조하면 스파이크된 표준이 다른 샘플 매트릭스에서 94 내지 72 %로 복구된다. 변동은 3 내지 5 % 이다. 따라서 모든 매트릭스 간에는 큰 차이가 없다.
실시예 6
분석 특성
도 3 에서, 본원에 보고된 분석에 대한 표준 곡선은 STD A 내지 STD G 및 블랭크 값을 포함하여 제시된다. 검출 범위는 사용된 항-디곡시게닌 항체의 중량을 기준으로 5.5 내지 35 ng/mL 이다. 하기 표는 각 데이터를 제공한다.
본원에 보고된 분석은 2 내지 6 %의 표준 편차/변이 계수를 갖는 분석-내 정밀도를 갖는다. 분석-내 복구율은 100 내지 104 % 사이이다.
본원에 보고된 분석은 5 내지 12 %의 표준 편차/변이 계수를 갖는 분석-간 정밀도를 갖는다. 분석-간 복구율은 78 내지 117 % 사이이다. ㎕- 및 LLQC 샘플의 계산된 복구율은 87 % 와 121 % 사이이며, 따라서 허용 가능한 범위인 25 % 이내이다.
실시예 7
선택성
하기 표로부터 분석에 매우 우수한 선택성이 있음을 알 수 있다. 상이한 항체에 대해 측정된 소멸값은 블랭크 샘플 수준에서 가장 낮은 표준 샘플보다 훨씬 낮다. 따라서 포획 및 추적 시약은 10 ㎍/mL의 농도까지 서로 연결되어 있지 않다. 따라서, 이 분석법은 항-디곡시게닌 항체 특이적이다.
본원에 보고된 분석은 100 % 혼합 혈장 (분석 농도 10 ㎍/mL)에서 100 ㎍/mL 항체 농도까지 후크 효과를 나타내지 않는다. 하기 표는 각각의 측정된 값을 제공한다. (희석 후 적용 가능한 경우) 샘플은 80 내지 120 % 복구율 (AQL = 정량 한계 초과, BQL = 정량 한계 미만)의 수용 간격 내에서 검출된다.
본원에 보고된 분석의 희석 선형성은 8 마리의 미니피그 개체 혈장에서 100㎍/mL 이하의 항-디곡시게닌 항체의 혈장 농도에서 시험하였다. 45 개의 희석된 샘플 (81 내지 138 %의 간격으로 모두 45 개의 희석액) 중 41 개가 80 내지 120 %의 수용 간격 내에서 검출되었다. 상이한 혈장 매트릭스는 분석물의 복구에 중요한 영향을 미치지 않는다.
실시예 8
샘플 정량화
하기 표에서 항체의 Fc 영역에서 개별 아미노산 잔기를 교환함으로써 약동학적 반감기가 변경되었음을 알 수 있다 (도 4 참조). 데이터는 16 가지의 상이한 미니피크 혈청들을 측정하여 생성되었다. 음영값은 정량 한계 미만이며, ivt는 유리체 내 적용(intravitreal application)을 나타내고, iv는 정맥 내 적용(intravenous application)을 나타낸다.
본원에 보고된 분석을 사용하여 3 개의 Fc 영역 변형 항체가 검출되었다. 표준 곡선은 도 5와 하기 표의 각각의 날짜에 나타내었다.
문헌
Carl Roth GmbH und Co. KG: Albumine fur die Biochemie und Molekularbiologie. IKK 01/2009
Diamandis E.P., Christopoulos T.K. (1991) The biotin-(strept)avidin system: principles and applications in biotechnology. Clinical Chemistry, 37, 625-636
European Medicines Agency (2011. 7.), Guideline on bioanalytical method validation
Goebel-Stengel M, Stengel A, Tache Y, Reeve JR (2011) The importance of using the optimal plastic ware and glassware in studies involving peptides. Analytical Biochemistry, 414, 38-46
Hoffmann-La Roche AG: Roche Lexikon - Medizin. 5 판 Munich: Urban & Fischer, 2003
Hollander, Georg: Immunologie - Grundlage fur Klinik und Praxis. 1판 Munich: Urban & Fischer, 2006
Issaq HJ, Xiao Z, Veenstra TD (2007) Serum and Plasma Proteomics. Chemical Reviews, 107(8), 3601-3620
Luttmann 외: Der Experimentator - Immunologie. 3 판 Heidelberg: Spektrum Akademischer Verlag, 2009
Mould D.R., Green B. (2010) Pharmacokinetics and pharmacodynamics of monoclonal antibodies: concepts and lessons for drug development. BioDrugs, 24(1), 23-39
Raem, A.; Rauch, P.: Immunoassays. 1. Ed. Munich: Spektrum Akademischer Verlag, 2007
Simpson J.R., Greening D.W: Serum/Plasma Proteomics. 1 판 Totowa: Humana Press Inc., 2011
Stubhan, Miriam: Das Gottinger Minipig als Telemetriemodell fur pharmakologische Zwecke, Diss. Univ. Munich, 2008
U.S. Department of Health and Human Services, Food and Drug Administration, Center for Drug Evaluation and Research, Center for Veterinary Medicine (2001. 5.), Guidance for Industry - Bioanalytical Method Validation
약어
ABTS 2,2'-아지노-디-(3-에틸벤즈티아졸린-6-설폰산
Ak 항체
ALQ 정량 한계 초과
AP 분석 완충액 (=범용 완충액)
AS 아미노산
Bi 비오틴
BLQ 정량 한계 미만
BSA 소 혈청 알부민
CDR 상보성 측정 부위
CV 변이 계수
Dig 디곡시게닌
ELISA 효소 결합 면역 흡착 분석
F(ab')2 항원 결합 단편 (2가)
Fab 항원 결합 단편 (1가)
FC 결정화 가능 단편
H 인간
HPPA 3-(4-히드록시페닐)-프로피오닌산
HRP 서양고추냉이 퍼옥시다아제
Ig 면역글로불린
IgA 면역글로불린 하위분류 A
IgD 면역글로불린 하위분류 D
IgE 면역글로불린 하위분류 E
IgG 면역글로불린 하위분류 G
IgM 면역글로불린 하위분류 M
M 마우스
mAk 단일 클론 항체
MTP 마이크로 역가 플레이트
OD 광학 밀도
pAk 다클론 항체
POD 퍼옥시다아제
PP 폴리프로필렌
PS 폴리스티롤
Rb 토끼
RFU 관련 형광 유닛
RPLA 소 혈장 알부민
SA 스트렙타비딘
S:N 신호 대 잡음 비
SD 표준편차
STD 표준
TMB 3,3',5,5'-테트라메틸벤지딘
XOSu X(ε-아미노카프로산-O-숙신이미드)
<110> F. Hoffmann-La Roche AG
<120> Immunoassay for the determination of Fc-region modified
antibodies
<130> P33227-WO
<150> EP 15197058.9
<151> 2015-11-30
<160> 8
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 330
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 1
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100 105 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225 230 235 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 2
<211> 330
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 2
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
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Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115 120 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130 135 140
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145 150 155 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165 170 175
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180 185 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195 200 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210 215 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225 230 235 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245 250 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260 265 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275 280 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290 295 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305 310 315 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
325 330
<210> 3
<211> 327
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<400> 3
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
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65 70 75 80
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Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro
100 105 110
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115 120 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130 135 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145 150 155 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165 170 175
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Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
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225 230 235 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
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Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275 280 285
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290 295 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
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1 5 10 15
Gly
Claims (24)
- 항체가 SEQ ID NO:01, 02 또는 03의 서열을 갖는 상응하는 야생형 Fc 영역에 비해 Fc 영역에서 하나 이상의 돌연변이를 포함하고, 하기 순서로 하기 단계를 포함하는, 비-인간 실험 동물로부터 수득된 혈청 또는 혈장 샘플에서의 2가 항체의 양의 측정 방법:
a) 상기 항체의 항원의 1 개 초과의 복제물이 공유 결합으로 접합된 비-항체 폴리펩티드를 고체 표면 상에 고정하는 단계,
b) 상기 항체의 항원의 1 개 초과의 복제물이 공유 결합으로 접합된 고정된 비-항체 폴리펩티드를 샘플과 인큐베이션하여 고정된 항원-항체 복합체를 형성하는 단계,
c) 고정된 항원-항체 복합체를 검출 가능한 표지에 접합된 상기 항체의 항원과 인큐베이션하여 고정된 삼원 복합체를 형성하는 단계,
d) 고정된 삼원 복합체에서 검출 가능한 표지의 양을 측정하여 항체의 양을 측정하는 단계. - 제 1 항에 있어서, 비-항체 단백질이 혈청 단백질인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 2 항에 있어서, 비-항체 폴리펩티드가 소 혈장 알부민인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 1 항에 있어서, 항체의 항원의 하나 이상의 복제물이 비-항체 폴리펩티드에 화학적으로 접합되는 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 3 항에 있어서, 항체의 항원의 하나 이상의 복제물이 비-항체 폴리펩티드에 화학적으로 접합되는 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 1 항에 있어서, 고정화 단계에서 비-항체 폴리펩티드의 농도가 50 ng/mL +/- 10 % 인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 3 항에 있어서, 고정화 단계에서 비-항체 폴리펩티드의 농도가 50 ng/mL +/- 10 % 인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 4 항에 있어서, 고정화 단계에서 비-항체 폴리펩티드의 농도가 50 ng/mL +/- 10 % 인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 1 항에 있어서, 검출 가능한 표지가 효소인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 4 항에 있어서, 검출 가능한 표지가 효소인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 9 항에 있어서, 검출 가능한 표지가 퍼옥시다아제인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 11 항에 있어서, 검출 가능한 표지가 서양고추냉이 퍼옥시다아제인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 9 항에 있어서, 검출 가능한 표지의 농도가 300 mU/mL +/- 10 % 인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 12 항에 있어서, 검출 가능한 표지의 농도가 300 mU/mL +/- 10 % 인 것을 특징으로 하는 측정 방법.
- 제 11 항에 있어서, 고정된 삼원 복합체를 3,3', 5,5'-테트라메틸벤지딘과 함께 인큐베이션하여 측정하는 측정 방법.
- 제 12 항에 있어서, 고정된 삼원 복합체를 3,3', 5,5'-테트라메틸벤지딘과 함께 인큐베이션하여 측정하는 측정 방법.
- 제 13 항에 있어서, 고정된 삼원 복합체를 3,3', 5,5'-테트라메틸벤지딘과 함께 인큐베이션하여 측정하는 측정 방법.
- 제 1 항에 있어서, 항체는 항-비오틴 항체, 항-디곡시게닌 항체, 항-테오필린 항체, 항-헬리카 항체 및 항-브로모데옥시우리딘 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 측정 방법.
- 제 3 항에 있어서, 항체는 항-비오틴 항체, 항-디곡시게닌 항체, 항-테오필린 항체, 항-헬리카 항체 및 항-브로모데옥시우리딘 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 측정 방법.
- 제 4 항에 있어서, 항체는 항-비오틴 항체, 항-디곡시게닌 항체, 항-테오필린 항체, 항-헬리카 항체 및 항-브로모데옥시우리딘 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 측정 방법.
- 제 6 항에 있어서, 항체는 항-비오틴 항체, 항-디곡시게닌 항체, 항-테오필린 항체, 항-헬리카 항체 및 항-브로모데옥시우리딘 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 측정 방법.
- 제 12 항에 있어서, 항체는 항-비오틴 항체, 항-디곡시게닌 항체, 항-테오필린 항체, 항-헬리카 항체 및 항-브로모데옥시우리딘 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 측정 방법.
- 제 13 항에 있어서, 항체는 항-비오틴 항체, 항-디곡시게닌 항체, 항-테오필린 항체, 항-헬리카 항체 및 항-브로모데옥시우리딘 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 측정 방법.
- 제 15 항에 있어서, 항체는 항-비오틴 항체, 항-디곡시게닌 항체, 항-테오필린 항체, 항-헬리카 항체 및 항-브로모데옥시우리딘 항체로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 측정 방법.
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Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996022533A1 (en) | 1995-01-18 | 1996-07-25 | First Medical, Inc. | Method for immobilizing haptens on a test article |
| US20040242848A1 (en) | 2003-04-21 | 2004-12-02 | Owens S. Michael | Mouse/human chimeric anti-phencyclidine antibody and uses thereof |
| RU2296332C1 (ru) | 2005-10-28 | 2007-03-27 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕДИКА" | Способ ранней диагностики факта потребления наркотических веществ в отсутствие клинических признаков состояния зависимости от наркотиков |
| JP2008529015A (ja) | 2005-02-02 | 2008-07-31 | 鵬 崔 | Ｈｃｖ抗体を検出するためのキットおよびその調製方法 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB2095818B (en) | 1981-03-27 | 1985-10-02 | Exxon Research Engineering Co | Staged adsorption/resorption heat pump |
| US5238808A (en) | 1984-10-31 | 1993-08-24 | Igen, Inc. | Luminescent metal chelate labels and means for detection |
| EP0307434B2 (en) | 1987-03-18 | 1998-07-29 | Scotgen Biopharmaceuticals, Inc. | Altered antibodies |
| JPH01223351A (ja) * | 1988-03-03 | 1989-09-06 | Dainippon Pharmaceut Co Ltd | 抗体の定量方法および定量用試薬 |
| US5068088A (en) | 1988-11-03 | 1991-11-26 | Igen, Inc. | Method and apparatus for conducting electrochemiluminescent measurements |
| AU637775B2 (en) | 1988-11-03 | 1993-06-10 | Igen, Inc. | Electrochemiluminescent assays |
| IL100866A (en) | 1991-02-06 | 1995-10-31 | Igen Inc | Method and apparatus for magnetic microparticulate based luminescence assay including plurality of magnets |
| TWI426920B (zh) * | 2010-03-26 | 2014-02-21 | Hoffmann La Roche | 雙專一性、雙價抗－ｖｅｇｆ／抗－ａｎｇ－２抗體 |
| KR102090849B1 (ko) * | 2012-07-04 | 2020-03-19 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 공유 결합된 항원-항체 접합체 |
| KR20150038046A (ko) | 2012-07-13 | 2015-04-08 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 다중특이적 결합체의 탐지 방법 |
| KR102278979B1 (ko) * | 2014-01-03 | 2021-07-19 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 공유적으로 연결된 헬리카-항-헬리카 항체 접합체 및 그의 용도 |
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1996022533A1 (en) | 1995-01-18 | 1996-07-25 | First Medical, Inc. | Method for immobilizing haptens on a test article |
| US20040242848A1 (en) | 2003-04-21 | 2004-12-02 | Owens S. Michael | Mouse/human chimeric anti-phencyclidine antibody and uses thereof |
| JP2008529015A (ja) | 2005-02-02 | 2008-07-31 | 鵬 崔 | Ｈｃｖ抗体を検出するためのキットおよびその調製方法 |
| RU2296332C1 (ru) | 2005-10-28 | 2007-03-27 | Общество с ограниченной ответственностью "ДИАМЕДИКА" | Способ ранней диагностики факта потребления наркотических веществ в отсутствие клинических признаков состояния зависимости от наркотиков |
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