KR900701847A - 복합 폴리펩티드, 그들의 제조 방법 및 사용 방법 - Google Patents
복합 폴리펩티드, 그들의 제조 방법 및 사용 방법Info
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Abstract
내용 없음
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 실험 관련 부분의 실시예1에 사용된 절단성 친화성 라벨을 설명한 것이다. 제2도는 제1도의 친화성 라벨을 합성하기 위한 방법의 개요이다. 제3도는 실시에 1에서 티올 작용기를 MOPC315의 결합 부위내로 도입하는 방법을 설명한 것이다.
Claims (33)
- 결합부위에 결합할 수 있는 리간드와 폴리펩티드를 합하고, 이때 상기 리간드는 상기 결합부위에 절단가능하게 결합된 일차 반응성기를 갖고 있으며; 상기 일차반응성기를상기 폴리펩티드상의 아미노산 측쇄에 공유적으로 결합시키며: 상기 리간드로부터 상기 일차 반응성기를 절단하고; 이렇게 함으로써 상기 반응성기 부분은 상기 아미노산 측쇄를 통해 폴리펩티드에 결합된 상태를 유지하며; 상기 폴리 펩티드로부터 상기 리간드를 제거하는 단계로 구성된 상기 결합부위 근처의 폴리펩티드에 활성 작용기를 삽입하는 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 결합상태를 유지하고 있는 부분은 활성 작용기이며, 촉매성 작용기 및 반응성 작용기로 구성된 군에의 선택된 것을 특징으로 하는 방법.
- 제2항에 있어서, 상기 부분은 티올인 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 반응성기를 절단함으로써 디아조케톤, 방향족 아지드, 디아조늄, 티올, α-브로모케톤, 에폭사이드 및 알데히드로 구성된 군에서 선택된 부분을 제공하는 방법.
- 제4항에 있어서, 반응성기 부분에 이차 작용기를 공유 결합시키는 것을 또한 포함하며, 여기에서 상기 이차 작용기는 촉매성 작용기, 반응성 작용기. 라벨링기 및 화학 치료제로 구성된 군에서 선택된 활성 작용기인 방법.
- 제2항 또는 제5항에 있어서, 상기 활성작용기는 산, 염기, 효소 보조인자, 금속복합체, 광활성분자, 친핵제, 친전자체 및 레독스 활성분자로 구성된 군에서 선택된 촉매성 활성기인 방법.
- 제2항 또는 제5항에 있어서, 상기 활성 작용기는 알킬화제, 산화제, 환원제, 가수분해제 및 광활성제로 구성된 군에서 선택된 반응성 작용기인 방법.
- 제5항에 있어서, 상기 활성 작용기는 플루오로포어, 화학발광제, 생체발광제, 염료. 스핀라벨, 플라빈, 압전물질 및 비오틴으로 구석된 군에서 선택된 검출성 라벨인 방법.
- 제5항에 있어서, 상기 환성 작용기는 독소, 독소단편, 살균제, 래디칼 스카벤저, 래디칼 발생제, 알킬화제, 신경전달물질, 방사선핵종, 항비루스성화합물, 항진균성 화합물, 항종양제, 항미코플라스미드성제제 및 중금속으로 구성된군에서 선택된 화학 치료제인 방법.
- 제1항에 있어서, 상기 폴리펩티드는 항체, 항체단편, 효소, 효소단편, 호르몬, 림포킨, 렉틴, 아비딘 MHC의 단백질. T세포 수용체, G단백질, 신경전달물질 수용체 및 DNA결합단백질로 구성된 군에서 선택된 것인 방법.
- 결합부위 근처의 미리 선택된 위치에 최소한 하나의 아미노산을 첨가 또는 치환시킨것을 제외하고는 상기 결합 부위를 갖고 있는 대표적인 폴리펩티드의 단편과 최소한 거의 동일한 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드를 제조하고: 리포터 분자 및 화학치료제로 구성된 군에서 선택된 활성 작용기를 상기 첨가 또는 치환된 아민노산의 측쇄제 공유 결합시키는 단계로 구성된 결합 부위 근처에 활성 작용기를 갖고 있는 폴리펩티드를 제조하는 방법.
- 제11항에 있어서, 상기 첨가 또는 치환된 아미노산은 아르기닌, 아스파테이트, 시스테인, 메티오닌, 글루타메이트, 히스티딘, 리신, 세린, 트레오닌, 트리프토판 및 티로신으로 구성된 군에서 선택되는 방법.
- 제11항에 있어서, 상기 첨가 또는 치환된 아미노산은 천연 발생 아미노산 이외의 아미노산인 방법.
- 제13항에 있어서, 상기 천연 발생 아미노산 이외의 아미노산은 아릴 아민, 알킬아민, 알데히드, 카르복실레이트 및 α-β불포화 에논으로 구성된 군에서 선택된 측쇄를 갖는 방법.
- 결합부위 근처의 미리 선택된 위치에 최소한 하나의 아미노산을 첨가 또는 치환시킨것을 제외하고는 변형시키지 않은 폴리펩티드의 아미노산 서열과 거의 동일한 아미노산 서열을 암호하는 DNA서열을 표현시키고: 상기 표현 생성물을 회수하며; 상기 첨가 또는 치환된 아미노산의 측쇄에 활성 작용기를 공유 결합 시키는 단계로 구성된 결합부위를 정의하는 공지된 아미노산을 갖고 있는 폴리펩티드를 변형시키는 방법.
- 제15항에 있어서, 상기 첨가 또는 치환된 아미노산은 아르기닌, 아스파테이트, 시스테인, 메티오닌, 글루타메이트, 히스티딘, 리신, 세린, 트레오닌, 트리프트판 및 티로신으로 구성된 군에서 선택된 것인 방법.
- 제12항 또는 제16항에 있어서, 상기 최소한 하나의 아미노산은 티올 측쇄를 갖는 시스테인이며, 상기 활성 작용기는 디설파이드 교환, 알킬화 또는 친전자성 첨가에 의해 결합된 것인 방법.
- 제12항 또는 제16항에 있어서, 상기 아미노산은 아미다졸 측쇄를 갖는 히스티딘이며, 상기 활성 작용기는 α-할로케톤, 디아조케톤 및 알킬할라이드로 구성된 군에서 선택된 친전자성시약과 반응에 의해 결합되는 방법.
- 제12항 또는 제16항에 있어서, 상기 아미노산은 일차 아민 측쇄를 갖는 리신이며, 상기 활성 작용기는 α-할로케콘, 이소티오시아네이트, 아릴설포닐 할라이드로 구성된 군에서 선택된 친전자성 시약과의 반응 또는 알데히드와의 반응에 의해 결합되는 방법.
- 제12항 또는 제16항에 있어서, 상기 아미노산은 페놀성 측쇄를 갖는 티로신이여, 상기 작용기는 아릴디아조늄 화합물 또는 α-할로 케톤을 사용해 알킬화 시키거나 또는 질산처리 또는 환원후 아실화 또는 알킬화시켜 결합시키는 방법.
- 제12항 또는 제16항에 있어서, 상기 아미노산은 카르복실 측쇄를 갖는 달루타에이드 또는 아스파테이트이며, 상기 작용기는 카르모디이미드 같은 활성제를 사용한 아미노 첨가 또는 디아조 알칸을 사용한 알킬화에 의해 결합되는 방법.
- 제12항 또는 제l6항에 있어서, 상기 아미노산은 지방족 히드록실측쇄를 갖는 세린 또는 트레오닌이며, 상기 작용기는 α-할로케톤 또는 아릴 설포닐힐라이드와의 축합반응에 의해 결합되는 방법.
- 제12항 또는 제16항에 있어서, 상기 아미노산은 인돌 측쇄를 갖는 트리프로판이며, 상기 작용기는 드리프로판을 산화시킨후 알킬화 또는 아실화 시켜 결합되는 방법.
- 결합 부위 및 이 결합부위가 미리 선택된 타겟 리간드와 복합체를 형성할 수 있도록 해주는 아미노산 측쇄에 공유 결합된 최소한 하나의 활성 작용기를 갖드며, 상기 환성 작용기는 리포터 분자 또는 화학치료제이고, 상기 활성 작용기 및 타겟리간드는 폴리펩티드와 리간드사이의 결합친화력을 손상시키지 않고 상호 작용할수 있는 폴리펩티드.
- 제24항에 있어서, 상기 폴리 펩티드는 항체 또는 항체 단편인 폴리펩티드.
- 제24항에 있어서, 상기 활성 작용기가 리포터 분자이며 이리포터 분자의 검출성은 타겟리간드에 대한 항체의 결합에 의헤 변형되는 항체 또는 항체 단편.
- 제26항에 있어서, 상기 검출성 라벨은 플루오로포어, 화학발광제, 생체 발광제, 염료, 스핀라벨, 플라빈, 압전분자 및 비오틴으로 구성된 군에서 선택되는 항체 또는 항체 단편.
- 제24항에 있어서, 상기 활성 작용기는 화학치료제이고, 상기 타겟 리간드에 대한 화학 치료제의 활성 및 특이성이 향상되는 항체 또는 항체 단편.
- 제28항에 있어서, 상기 화학치료제는 독소, 항균제, 래디칼 스카벤저, 래디칼 발생체, 알킬화제, 신경 전달 물질, 방사능핵종, 항비루스성 화합물, 항진균성 화합물, 항종양제, 항미코플라스미드성 제제 및 중금속으로 구성된 군에서 선택된 항체 또는 항체 단편.
- P는 결합부위를 갖으며, 항체, 항체단편, 효소, 효소단편, 호르몬, 림포킨, 렉틴, 아비딘, MHC의 단백질, T-세포수용체, G단백질, 신경전달물질 수용체 및 DNA결합단백질로 구성된 군에서 선택된 폴리펩티드이며: X는 아미노산 측쇄이고, 이 측쇄는 결합부위의 약 20A내에 존재하며: Y는 디설파이드, 에스테르, 아민 및 디아조로 구성된 군에서 선택된 공유 결합기이며: Z는 리포터 분자와 화학치료제로 구성된 군에서 선택된 활성 작용기이며, Z는 X와 Y를 통해 P에 결합되어 있고 P상의 다른 위치에는 거의 없는 것을 특징으로 하는 P-X-Y-Z로 표시되는 폴리펩티드.
- 제3O항에 있어서, 상기 활성 작용기 Z는 플루오로 포어, 화학발광제, 생체발광제, 염료, 스핀라벨, 플라빈, 압전분자 및 비오틴으로 구성된 군에서 선택된 리포터 분자인 폴리펩티드.
- 제3O항에 있어서, 상기 활성 작용기 Z는 독소, 항균제, 래디칼 스카벤저, 래디칼 발생제, 알킬화제, 신경전달물질, 방사능핵종, 항비루스성화합물, 항진균성화합물, 항종양제, 항미코플라스미드성 제제 및 중금속으로 구성된 군에서 선택된 화학치료제인 폴리펩티드.
- 제3O항에 있어서, P는 항체, 항체 단편, 효소, 효소 단편, 호르몬, 림포킨, 렉턴, 아비딘, MHC의 단백질, T-세포수용체, G단백질, 신경전달물질 수용체 및 DNA결합 단백질로 구성된 군에서 선택되는 폴리펩티드.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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