RO110124B1 - Concentrat bioactiv, procedeu de obtinere a acestuia si compozitii medicamentoase - Google Patents

Description

Prezenta invenție se referă la un concentrat bioactiv, procedeu de obținere al acestuia și compoziții farmaceutice, care sunt destinate tratamentului bolilor degenerative, reumatism, artropatii și altele similare.

Se cunoaște un complex de substanțe cu activitate antihialuronidazică obținut din produse naturale, cum ar fi peștele marin, ce conține aminoacizi, glucide totale, glicogen, condroitinsulfat, fenol, substanțe hipotensive și are o activitate antihialuronidazică de minim 50. U.l./ml.

Procedeul de obținere al complexului constă în aceea că peștele marin se tratează cu soluție de fenol 0,5 %, în două faze, pe o perioadă de 24 h, extractele reunite se concentrează în vid la maxim 40°C, se tratează apoi cu un volum egal 96°, se îndepărtează precipitatul, iar supernatantul obținut se tratează cu celită, se filtrează, se concentrează în vid la maximum 40°C, se tratează cu benzină, după care se îndepărtează aceasta și apoi se tratează cu fenol până la o valoare de 4,5 ... 5,5 %.

Sunt cunoscute, de asemenea, și compoziții medicamentoase ce conțin un extract bioactiv cu activitate antihialuronidazică, fenol și metabisulfit de sodiu.

Medicamentele respective au la bază un complex de substanțe, principii active naturale, asociate în proporții apropiate de cele normale, funcționale, obținute prin extracție din țesuturi animale sau biosintetizate în culturi celulare și de microorganisme, complex care are rol să înlocuiască, să substituie funcțiunea sau chiar să inducă acțiunea de revenire a complexului existent maturai în țesuturile conjunctive, care a fost dezechilibrat din diverse motive și a produs boala.

Procedeele de extracție și condiționare au fost stabilite astfel, ca pierderile și degradarea substanțelor active să fie cât mai reduse și atunci când în materia primă raportul între componente este diferit de cel necesar tratării bolii la om, să fie compensat prin compunerea corespunzătoare a extractelor sau prin schema de tratament.

în prezent sunt cunoscute mecanismele prin care apare boala ca având la bază un dezechilibru în sistemul de biosinteză și descompunere a componenților normali, care condiționează buna funcționare a articulațiilor.

Celulele oricăror țesuturi din organismul viu sunt scufundate și evoluează în spațiul substanței fundamentale. Această substanță fundamentală - un compus universal al structurilor vii - ocupă toate spațiile intercelulare și izolează orice celulă staționară de vecinele sale. Variațiile în compoziția acestui mediu extracelular, exercită o influență profundă asupra comportamentului celulelor și- reciproc - celulele vii posedă mijloace puternice pentru a-și modifica mediul lor înconjurător.

Substanța intercelulară este un gel complex care conține: apa, electroliți, metaboliți, gaze dizolvate, enzime, oligoelemente, grăsimi, proteine, hidrați de carbon. Această substanță capătă un grad de înaltă vâscozitate proporțional cu abundența unor polimeri cu lanț lung formați din acizi mucopolizaharidici, în particular glicozaminoglicanii și proteoglicanii asociați, structurați la nivel microscopic printr-o rețea tridimensională de fibrile colagenice.

în particular se știe că lichidul sinoval, prezent în toate articulațiile, are în afară de rolul de lubrefiant al structurilor în mișcare, în același timp și rol de disipare a energiei.

Această funcțiune se realizează prin compoziția lichidului sinovial, în care glicozaminoglicanii (GAC] și proteoglicanii (PG) ca acidul hialuronic și chondroitinsulfat, care prin structura lor spiralată conferă o viscozitate ridicată, în cazul frecvențelor de mișcare reduse, se comportă viscos, iar la frecvențe ridicate se comportă elastic.

Elasticitatea este atribuită prezenței acidului hialuronic în concnetrație ridicată, la pH = 2,5, care într-o soluție salină formează o pastă vâscoelastică.

RO 110124 Bl

Lichidul sinoval, la diferite vârste, are un comportament similar în ceea ce privește comportarea vâscoasă, dar preluarea energiei la frecvențe mari de mișcare este diferită, lichidul sinoval al tinerilor preluând 77 % din energie, în timp ce la vârstinici preia numai 52%, prin stocare elastică.

Lichidul sinoval, din articulațiile bolnave (osteoartroză) prezintă proprietăți vâscoase, dar nu elastice. Rigiditatea acestui lichid sinoval este de 7 ori mai mică decât cea a vârstiniclor. Concentrația de acid hialuronic în aceste lichide este redusă, de unde rezultă indici de vâscozitate reduși, iar concentrația de proteine este crescută. Influența negativă a schimbării concentrațiilor poate atinge, în unele cazuri, reducerea indicelui de vâscozitate până la de 30 ori.

De asemenea, în articulații, în tendoane, în corpul vitros al ochiului compartimentul lichid (lichid sinoval, lichid vitros) este adiacent matricei solide (cartilagiul articular, tendon, fascia, corp vitros).

Compusul macromolecular vâscoelastic - acidul haluronic - din matricea lichidă, pătrunde suprafața matricei solide. Din punct de vedere rheologic, diferența majoră între cele două matrici este prezența fibrilelor colagenice în matricea solidă și absența lor în lichid.

Stratul superficial de 1 ... 2 μ, conține un complex de acoperire format din acid hialuronic și proteine. Acest strat poate fi îndepărtat sau distrus prin tratare cu hialuronidaza, aflată în exces în matricea intercelulară.

Substratul de 1 □ ... 15 μ în grosime, conține fibrile tipice de colagen, iar spațiul interfibrilar este umplut cu cantități aproximativ egale de acid hialuronic și chondroitinsulfat.

Pe baza celor cunoscute din domeniul de specialitate, în invenția de față s-a căutat să se realizeze un complex de principii la care să participe polimerii mucopolizaharidici și proteoglicanii sub formă de acid hialuronic și chondroitinsulfat, precum și fragmente ale acestora, heparina și acidul ascorbic, toate substanțele, dovedite prin cercetări recente, ce participă la procesele de restituire a funcțiunilor normale ale țesuturilor conjunctive, în cazul bolilor degenerative. Aceste boli care alterează substanța fundamentală în care sunt cufundate celulele, deteriorează relația ce există între ea și aceste celule. Condiția acestui echilibru “normal” este ca fiecare parte - substanță fundamentală și celula -să-și păstreze funcțiunile, deoarece orice schimbare, ca de exemplu, modificarea vâscozității substanței fundamentale, prin depolimerizarea acidului hialuronic de către hialuronidaza secretată în exces de către celule, este urmată de apariția stării de boală.

altă variantă de restabilire a echilibrului o constituie asocierea unei antienzime pe care am numit-o antihialuronidaza (hialuronidaza este, în fond, un grup de enzime cu funcțiuni similare față de structurile conjunctive), care oprește sau reduce depolimerizarea acidului hialuronic, alături de chondroitinsulfat, heparina și acidul ascorbic.

Sunt cunoscute unele încercări de a prepara medicamente pe bază de antihialuronidază, care se extrage din surse care o conțin, ca de exemplu : trahee de bovine, testicule de ovine și bovine, cordon ombilical, pește marin mărunt, etc.

Acestea deși importante la vremea când au fost realizate, au constituit o variantă primară care a soluționat doar parțial problema, atât a procedeului de obținere, cât și a compoziției medicamentelor realizate.

Concentratul bioactiv, conform invenției, este o soluție apoasă cu 10 % substanță activă, din care 7 ... 9 % polimeri mucopolizaharidici cu acțiune antihialuronidazică și antiinflamatoare și un adaos de până la 1 ... 3 % chondroitinsulfat cu acțiune restitutivă și antihialuronidazică , care ar eun pH = 4 ... 6 și o activitate antihialuronidazică de 450 ... 750 U.l/ml, este de culoare gălbui până la brun slab; iar în stare liofilizată conține minimum 93 % substanță activă, din care 65 ... 84 % reprezintă polimerii mucopolizaharidici și 9...28% chon

RO 110124 Bl droitinsulfat, este de culoare gălbuie până la brun slab și conține conservanți uzuali. Procedeul de obținere al concentratului bioactiv constă în aceea că țesăturile cartilaginoase conjunctive de origine animală cum ar fi trahee de bovine și ovine, cordon ombilical, tendoane de animal tânăr, intestine, testicule sau organisme marine, se tratează, în două faze, cu soluție apoasă acidă ce conține □,5 % fenol pH = 2 ... 4, în prima fază în raport de 1: 3,5 ... 4, iar în a doua fază în raport 1 : 1,5, în ambele faze, faza extracție este pe o perioadă de 24 h cu agitare de 30 min la fiecare 3 h și la temperatura de □ ...4°C, după care extractul obținut în prima fază se reunește cu cel obținut în a doua fază, se aduce la pH = 4,5 ... 5 cu coluție Ca(0H)₂, se lasă la sedimentare la □ ... 4°C, timp de 8 h, se filtrează și soluția rezultată se concentrează prin evaporare sub vid la o temperatură maxim de 45°C, până la obținerea unui raport de concentrare de 7 : 1, se trece printr-o coloană de schimbători de ioni - anioniți slabi după care se depolipoidează cu benzină în raport de 1:4 în 6 ... 10 cicluri până când lipidele remanente nu depășesc 1 ... 5 %. Ultimul ciclu de delipoidare se face, cu /7-hexan în același raport, apoi soluția apoasă obținută se concentrează în vid până la obținerea unui volum de 70 % din soluția inițială; după filtrare supematantul obținut se tratează, pentru deproteinizare, cu etanol 96° până ce se realizează o concentrație etanolică de 50 %, se lasă la rece la □ ... 5°C, timp de 12 h, după care se filtrează și soluția etanolică se concentrează pentru îndepărtarea alcoolului până la obținerea unui volum de 70 % față de soluția apoasă supusă la deproteinizare, precipitatul proteic se tratează în gradient cu sulfat de amoniu și fracțiunea proteică cu greutatea moleculară mică, se reunește cu soluția apoasă din care s-a eliminat alcoolul, se îndepărtează impuritățile cu acțiune hidtaminică prin tratarea succesivă a soluției finale cu soluții de fosfat trisodic, clorură de calciu și hidroxid de sodiu până la obținerea unui pH = 8,5, se filtrează și soluția obținută se trece pe coloană schimbători de ioni - cationiți slabi - pH-ul revine la 4 ... 6, după care se adaugă chondroitinsulfat până la o concentrație de 1 ... 3 %. Materia primă poate fi în stare proaspătă, congelată sau conservată. Trecerea soluției pe cationiții slabi se realizează la un debit care să nu depășească, pe oră, 1/5 din volumul soluției inițiale. Compozițiile medicamentoase conțin concentratul bioctiv, soluție sau în stare liofilizată, asociat cu substanțe cu acțiune sinergică cum ar fi: heparina, acetilsalicilat de sodiu sau de lizină, acid ascorbic, vitamina E, apă structurată de tip T, alcool benzilic, propilenglicol, extracte de plante (Achillea, Calendula, Matricaria, Plantago, Hypericum] și excipienți uzuali, fiind condiționate sub formă de injecții intramusculare, injecții intraarticulare, unguent, gel și supozitoare.

în scopul administrării intramusculare, compoziția conține, la 1 ml soluție apoasă, 0,1 ml concentrat bioactiv soluție 1 0% sau 11 mg concentrat bioactiv liofilizat, maxim 5 mg fenol și 2 mg metabisulfit de sodiu, are un pH=

... 6 și o activitate antihialuronidazică de minimum 45 U.l/ml. în scopul administrării intraarticulare, compoziția conține 1 ml soluție apoasă, 15 mg/ml substanță activă uscată din concentrat bioactiv soluție 10 % sau 16,5 mg concentrat bioactiv liofilizat, 1 □ mg acetilsalicilat de sodiu sau de lizină, 2 mg acid ascorbic, 0,2 mg heparină, 20 mg alcool benzilic, 40 mg propilenglicol, are un pH= 4 ... 6, o activitate antihialuronidazică de minimum 65 U.l/ml, iar unitatea de administrare este de 2 ml; se pot utiliza și alte tipuri de conservanți, cum ar fi 2 mg metabisulfit de sodiu, mg fenol, cu condiția că nu se modifice proprietățile substanțelor active sau calitatea produsului final. în scopul condiționării sub formă de unguent, gel sau supozitoare, compoziția conține, la 100 g, 3 ... 10 g substanță uscată din concentratul bioactiv soluție 10 % sau 4 ... 12 g concentrat bioactiv liofilizat,

RO 110124 Bl

0,3 ... 0,5 g acetil salicilat de sodiu sau de lizină, 0,2 ... 0,4 g vitamina E, 0,4 ... 0,8 g acid ascorbic, de preferință, 0,5 g, 0,2 g heparină, 2 ... 5 g extract total din plante, emulsionate într-o bază de cremă sau gel ce conține 40 ... 75 g apă structurată tip Ί”, de preferință, 65 g conservanți și arome uzuale. Plantele utilizate pot fi: Achillea millefolium, Calendula officinalis, Matricaria chamomilla, Plantago sp., Hypericum perforatum. Apa structurată de tip “I” este apa care are un potențial energetic mărit, și realizează o capacitate de penetrație transmembranară și o acțiune accentuat antiinflamatoare și antiinfecțioasă.

Soluția propusă în această invenție, rezolvă o serie din neajunsurile legate de lucrările citate, deoarece procedeul de față are un caracter de principiu, realizând extracția antihialuronidazei cu randament crescut, împreună cu chondroitinsulfatul, într-o proporție asemănătoare cu cea existentă, în substanța fundamentală, deci și în articulații, în cazul în care materia primă din care se face extracția este lipsită de chondroitinsulfatîn proporția cerută, produsul final se aditivează cu acest complex obținut din altă materie primă, printr-un procedeu de valorificare intensivă. Se realizează astfel medicamentele: soluția injectabilă ca atare sau din liofilizat destinată administrării intramusculare, soluție injectabilă ca atare, sau din liofilizat, destinată administrării intraarticulare, un unguent și gel destinate administrării externe, locale și supozitoare, destinate administrării per anal.

Aceste medicamente se utilizează după o schemă de tratament care permite realizarea unor sinergidme, de natură a amplifica rezultatele obținute de fiecare component în parte.

Concentratul bioactiv, prin acțiunea sa împiedică dezorganizarea structurii macromoleculare constituită normal și stimulează procesele de restructurare tisulară și periartriculară în bolile de natură inflamtorie la nivel interstițial și periarticular, precum și la nivelul carti8 lajului articular, influențează pozitiv dinamica ionilor de calciu în efectele inflamatorii, regenerative, biostimulative, dermo și tisular restitutive, stimulează metabolismul pacienților aflați în convalescență.

Toate cele cinci compoziții medicamentoase se adresează cauzei maladiei prin refacerea mecanismelor celulare și intercelulare, odată cu blocarea excesului de hialuronidază și de pornire a procesului de refacere a țesuturilor. Administrarea se face ușor și fără a conduce la apariția de efecte secundare.

Procedeul de obținere se poate aplica la scară industrială, cu consumuri energetice reduse și cu recuperarea de substanțe utilizate.

Procedeul de extracție propus, pe lângă faptul că relaizează un randament superior de extracție, în primă fază, la un pH= 2,4, elimină o serie de inconveniente constatate, deoarece se introduc faze de purificae selectivă, cum ar fi dehidtaminizarea, operație necesară întrucât unele șarje din produsele anterioare au dat rezultate necorespunzătoare la testul hidtaminic, ceea ce conduce la rebutarea lor, având efecte hipotensive. De asemenea, s-a introdus operația de deionizare cu schimbători de ioni, pentru a reduce încărcarea ionică devenită mare în urma operațiilor de concentrare repetate.

în fine, cea mai importantă operație tehnologică introdusă în fluxul de extracție, este realizarea buclei de valorificare a unui deșeu printr-un flux parallel de extracție, prin aceasta asigurându-se un conținut de aminoacizi și chondroitinsulfat mai mare, ceea ce nu se realizează în lucfrările citate anterior.

Aditivarea, în final, cu heparina și acid ascorbic dă posibilitatea obținerii și a unei soluții injectabile, destinată utilizării intraarticulare, cât și a unguentului, gelului și suporzitoarelor corespunzătoare.

Se dau, în continuare, patru exemple de realizare a invenției.

Exemplul 1. Pentru obținerea concentratului bioactiv, materia primă

RO 110124 Bl supusă procedeului de extracție o constituie, în spiritul prezentei invenții, atât țesuturile cartilaginoase, conjunctive de origine animală, trahee de bovine și ovine, cordon ombilical, tendoane de animal tânăr, cât și intestine, sau specii mărunte de pește marin. Se pornește de la materia primă, pește marin mărunt (hamsie), în cantitate de 20 kg, în stare proaspătă, congelată sau conservată și desărată, care după decongelare sau desărare este mărunțită la dimensiuni de

2...6 mm și se realizează extracția la o temperatură de 3 ... 5°C, cu 75 I soluție apoasă ce conține fenol 0,5 % și are un pH = 2-4. Corectarea pH-ului se face cu HCI soluție N, la soluția fenolică, înainte de a adăuga materie primă mărunțită.

Prima extracție se realizează în vase adecvate, din sticlă sau fontă emailată, cu agitare intermediară la 90 ... 120 rot/min, 30 min agitare la fiecare 3 h, timp de 24 h. Soluția obținută se separă prin centrifugare utilizând ca material filtrant o pânză cu peste 100 ochiuri/cm², iar într-o a doua extracție, cu 30 I soluție fenolică(O,5 %), cu pH= 2-4 ajustat ca mai sus, iar operația durează alte 24 h, cu același mod de agitare intermitentă.

Extractele I și II, se reunesc și se filtrează prin hârtie creponată (filtru industrial), iar pasta de pește constituie deșeu.

Soluția astfel extrasă și filtrată se corectează la pH =5, cu soluție de Ca(0H)₂, lăsându-se apoi la sedimentare 8 h, la o temperatură de O ... 4°C.

Se repetă filtrarea, cu filtru industrial, pentru a elimina precipitatul și, implicit, excedentul de ioni de clor.

Filtratul în volum de circa 95 I, se concentrează prin evpaorare sub vid, la o temperatură internă de maximum 45°C. Raportul de concentrare este 7 : 1, obținând astfel 13,5 I concentrat de culoare galben-brun, cu suspensii.

După concentrare, se controlează pH-ul care trebuie să fie cuprins între 4

... 6 și se elimină o parte din ioni prin trecere printr-o coloană cu schimbători de ioni - anioniți slabi.

Soluția se trece prin coloana de schimbători de ioni cu viteza de circa 2 l/h, astfel ca la ieșirea din coloană să aibă un pH = 4-6.

Soluția astfel obținută se delipoidează cu benzină, în cicluri repetate, câte 3 I de benzină la fiecare trecere, durata procesului de agitare și repaus fiind de 2 h. Acest procedeu se repetă de 6 ..10 ori și se controlează eficiența operației astfel, încât în final, lipidele remanente să nu depășească 1 ... 5 %.

Extractul lipidic în benzină se separă prin decantare, în vase adecvate și apoi se distilează, pentru recuperarea benzinei în proporție de 70 ... 75 %. Delipoidarea se poate realiza, de asemenea, cu dicloretan, tricloretilena sau n-hexan. Este de preferat ca ultimul ciclu de delipoidare să se facă cu n-hexan, utilizând circa 3 kg din acest solvent.

Soluția apoasă delipoidată se concentrează sub vid, la circa 9 I pentru a îndepărta urmele de solvent.

Supernatantul se filtrează prin filtru industrial de hârtie, pentru a îndepărta precipitatul format în cursul concentrării și apoi se tratează cu alcool etilic, pentru deproteinizare.

în soluția de supematant, filtrată, se adaugă alcool etilic 96° în fir subțire sub agitare, până ce se realizează o concentrație alcoolică de 50 %. Apoi se lasă la rece la O ... 5°C timp de 12 h. Precipitatul format se contrifughează cu filtru prin pânză cu minim 100 ochiuri/cm², la 3000 rot/min.

Reziduul rămas pe filtru centrifugii se spală cu circa 3 I soluție alcoolică 50%. Soluțiile alcoolice, astfel obținute, se reunesc și se concentrează , sub vid, pentru recuperarea alcoolului. Rezultă în final cca. 7 I soluție apoasă ce conțin principii active antihialuronidazice.

Precipitatul proteic, obținut la faza de deproteinizare, se fracționează cu sulfat de amoniu, iar fracțiunile proteice cu molecula mică, rezultate la o concentrație specifică de sulfat de amoniu, se reunesc cu soluția concentrată, ce rezultă din prima fază a deproteinizării. Această soluție se purifică, pentru a fi

RO 110124 Bl liberă de impurități cu acțiune histaminică, se tratează cu 350 g fosfat trisodic, 200 g clorură de calciu și circa 300 ml hidroxid de sodiu soluție 20%. Fosfatul trisodic și clorură de calciu se adaugă sub formă de soluție apoasă 30 %. Soluția de hidroxid de sodiu se adaugă pentru reglarea pH-ului la 8,5 și se lasă 24 h la □ ... 5°C apoi se centrifughează cu filtrare pe pânză de minim 100 ochiuri/cm² și se reține soluția. Cei circa 9 I din soluția astfel obținută se trec peste un schimbător de ioni, cationit slab, care se regenerează cu soluție de hidroxid de sodiu 0,5 %. Coloana cu schimbători de ioni se tratează cu apa fenolată 0,5 % înainte de trecerea soluției. Operația se repetă până se atinge gradul de test histaminic, admisibil.

Soluția rezultată se filtrează. Chondroitinsulfatul se completează, la nevoie pentru a fi în concentrație 1 ...3 %. Rezultă circa 9 I soluție concentrată, de aproximativ 10 % substanță activă, cu pH = 4-6.

Soluția concentrată se analizează, se determină substanța uscată și activitatea hialuronidazică.

Din această soluție concentrată sau din liofilizat se pot obține, prin diluare cu apă distilată, apirogen, următoarele cinci medicamente : soluție injectabilă pentru administrare intramusculară, soluție injectabilă pentru administrare intraarticulară, unguent sau gel pentru aplicare locală sau supozitoare.

Exemplul 2. Compoziția medicamentoasă destintă administrării intramusculare se obține prin diluarea soluției concentrate sau a liofilizatului cu apă apirogenă, care conține fenol maximum 5 mg/ml și metabisulfit de sodiu maxim 2 mg/ml. Raportul de diluare se stabilește astfel ca soluția injectabilă care se realizează să conțină, la 1 ml soluție apoasă, 0,1 ml concentrat bioactiv soluție 10 % sau 11 mg concentrat bioactiv liofilizat și să aibă o activitate antihialuronidazică de minim 45 U.I./ml.

Soluția se filtrează, mai întâi prin filtre cu porozitate 0,45 μ pentru lim12 pezire și apoi prin filtre de 0,22 μ pentru sterilizare.

Se înfiolează aseptic, în fiole de 1 ml, de culoare brună. Aceste fiole standard, de 1 ml conțin : 10 mg/ml substanță activă, din care 7...9 polimeri mucopolizaharidici, cu acțiune antihialuronidazică și antiinflamatoare și chondroitinsulfat, adăugat până la 1 ..3 mg, cu acțiune predominant reconstitutivă, conservanți uzuali și are un pH = 4 - 6.

în cazul în care se utilizează concentratul bioactiv liofilizat, în flacoane de 10 ml, conțin 110 mg concentrat bioactiv liofilizat și un conservant adecvat până la 25 mg, acest flacon este echivalent cu 10 fiole standard, după dizolvarea în apă distilată.

Exemplul 3. Compoziția medicamentoasă destinată administrării intraarticulare se obține prin diluarea soluției concentrate sau liofilizatului cu apă apitogenă, care conține alcool benzilic 20 mg/ml și 40 mg/ml propilenglicol. Se adaugă, ca substanțe active, cu rol sinergie, 10 mg/ml acetilsalicilat de sodiu sau de lizină, 2 mg/ml acid ascorbic și 0,2 mg/ml heparină.

Raportul de diluare a soluției concentrate sau liofilizatului este stabilit astfel, ca soluția injectabilă să aibe o concentrație de 1,5% substanță activă și o activitate antihialuronidazică de minim 65 U.I./ml.

Soluția destinată înfiolării se filtrează mai întâi pe filtre cu porozitate 0,45 μ pentru sterilizare, după care se înfiolează aseptic în fiole de 2 ml brune.

Aceste fiole conțin 15 mg/ml substanță activă, din care 10 ... 13 mg/ml polimeri mucopolizaharidici, cu acțiune antihialuronidazică și antiinflamatoare, chondroitinsulfat adăugat până la 2 ... 5 mg/ml cu acțiune reconstitutivă, 2 mg/ml acid ascorbic și 0,2 mg/ml heparină și au un pH= 4-6.

Altă condiționare se poate realiza cu aoluție apoasă de fenol 0,5 % și metabisulfit de sodiu 0,2 %.

Exemplul 4. Compoziția medicamentoasă destinată administrării externe, locale - unguent, gel sau supoziRO 110124 Bl toare - se obține prin emulsionarea într-o bază de unguente, de gel sau de supozitoare, la 100 g a 3 ... 10 g substanță activă uscată din concentrat bioactiv soluție 10 % sau 4 ... 12 g concentrat bioactiv liofilizat, care conține 7 ... 9 g polimeri mucopolizaharidici până la 1 ... 3 g, 0,4 g vitamina E, 0,5 g acid ascorbic, 0,5 g acetilsalicilat de sodiu sau de lizină, 0,2 g heparină, 2 ... 5 g extracte totale din plante [Achillea Millefolium, Calendulla officinalis, matricaria chamomilla, Plantago sp., Hypericum perforatum]. O mențiune specială, baza de unguent, de gel sau de supozitoare se prepară cu 60 ... 75 % apă structurată tip T. Baza de unguent mai conține conservanți și aromatizanți uzuali. Apa structurată de tip Ί” face obiectul brevetului de invenție RO nr. 109835 NI și este apa care are un potențial energetic mărit, o capacitate de penetrație transmembranară și o acțiune accentuat antiinflamatoare și antiinfecțioasă. Această apă se obține prin trecerea apei potabile filtrate prin câmpuri electromagnetice activatoare.

Aceste cinci medicamente sunt utilizate, într-o schemă de tratament, care cuprinde programul de administrare a celor cinci, sau în unele cazuri numai două pe care medicul le stabilește de la caz la caz.

Claims (10)

1. Revendicări

   1. Concentrat bioactiv, caracterizat prin aceea că, este o soluție apoasă cu 10 % substanță activă, din care 7 ... 9 % polimeri mucopolizaharidici cu acțiune antihialuronidazică și antiinflamatoare și un adaos de până la 1 ... 3 % de chondroitinsulfat cu acțiune restitutivă și antihialuronidazică, are un pH cuprins între 4 și 6, o activitate antihialuronidazică cuprinsă între 450 și 750 U.l./ml și este de culoare gălbuie până la brun slab, iar în stare liofilizată conține minim 93 % substanță activă din care 65 ... 84 % reprezintă polimerii mucopolizaharidici și 9 ... 28 % chondroitinsulfat, este de culoare gălbuie până la brun slab, și conține conservanți convenționali.
2. 2. Procedeu de obținere a concentratului bioactiv, prin tratarea în două faze, pe o perioadă de 24 h, a unei materii prime organice cu soluție fenol 0,5 % concentrarea în vid a extractelor reunite, deproteinizarea cu etanol 96°, delipoidarea cu un solvent organic cum ar fi benzina, caracterizat prin aceea că țesuturile cartilaginoase, conjunctive de origine animală, trahee de bovine și ovine, cordon ombilical, tendoane de animal tânăr, cât și intestine, testicule sau organisme marine, se tratează în două etape cu soluție apoasă acidă, ce conține fenol 0,5 % și are un pH = 2-4, în prima fază în raport de 1:3,5 ... 4, iar în a doua fază în raport de 1 : 1,5, în ambele faze extracția este pe o perioadă de 24 h cu agitare de 30 min la fiecare 3 h, la o temperatură de O ... 4°C, după care extractul obținut în prima fază se reunește cu cel obținut din a doua fază, se aduc la pH = 4,5 - 5, cu soluție de Ca(OH)_a, lăsându-se apoi la sedimentare 8 h, la o temperatură de O ... 4°C, se filtrează și soluția rezultată se concentrează prin evaporare sub vid, la o temperatură internă de maxim 45°C, până la obținerea unui raport de concentrare de 7 : 1; se trece soluția printr-o coloană cu schimbători de ioni - anioniți slabi - după care se delipoidează cu benzină în raport de 1 : 4, în 6 ... 10 cicluri, până când lipidele remanente nu depășesc 1 ... 5 %, ultimul ciclu de delipoidare se face cu m-hexan în același raport, apoi soluția apoasă obținută se concentrează în vid, până la obținerea unui volum de 70 % din soluția inițială; după filtrare supernatantul obținut se tratează, pentru deproteinizare cu alcool etilic 96°, până ce se realizează o concentrație alcoolică de 50 %, apoi se lasă la O ... 5°C, timp de 12 h, după care se filtrează și soluția alcoolică se concentrează pentru îndepărtarea alcoolului, până la obținerea unui volum de 70 % față de soluția supusă la deproteinizare, precipitatul proteic se tratează în gradient cu sulfat de amoniu și fracțiunea

   RO 110124 Bl proteică cu greutate moleculară mică se reunește cu soluția apoasă din care s-a eliminat alcoolul: se procedează la îndepărtarea impurităților cu acțiune histaminică, prin tratarea succesivă a soluției 5 finale cu soluții de fosfat trisodic, clorură de calciu și hidroxid de sodiu până la obținerea unui pH = 8,5, se filtrează și soluția obținută se trece pe coloana de schimbători de ioni, cationiți slabi, pH-ul 10 revenind la 4 - 6, după care se adaugă chondroitinsulfat până la o concentrație de 1 ... 3 %.
3. 3. Procedeu, conform revendicării

   2, caracterizat prin aceea că, materia 15 primă utilizată poate fi în stare proaspătă, congelată sau coservată, care înainte de folosire se mărunțește.
4. 4. Procedeu, conform revendicării

   2, caracterizat prin aceea că, trecerea 20 soluției pe coloana schimbătoare de ioni, cationiți slabi, se realizează la un debit care nu trebuie să depășească pe oră 1/5 din volumul soluției inițiale, astfel, încât pH-ul revine în limitele 4 ... 6. 25
5. 5. Compoziții medicamentoase, caracterizate prin aceea că, conțin concentratul bioactiv descris la revendicarea 1, asociat cu substanțe cu acțiune sinergică, cum ar fi heparina, acidul 30 ascorbic, acetilsalicilat de lizină sau sodiu, vitamina E, alcool benzilic, propilenglicol, apa structurată tip “I” și extracte de plante și substanțe uzuale pentru condiționarea sub formă de injecții intra- 35 musculare, injecții intraarticulare, unguent, gel și supozitoare.
6. 6. Compoziție medicamentoasă, ce conține un complex bioactiv cu activitate antihialuronidazică, fenol și meta- 40 bisulfit de sodiu caracterizat prin aceea că, în scopul administrării intramusculare, 1 ml soluție apoasă conține Q, 1 ml concentrat bioactiv soluție 10 % sau 11 mg concentrat bioactiv liofilizat, des- 45 cris în revendicarea 1, maxim 5 mg fenol și 2 mg metabisulfit de sodiu, are un pH = 4 - 6 și o activitate antihialuronidazică de minim 45 U.l./ml.
7. 7. Compoziție medicamentoasă, caracterizată prin aceea că, în scopul administrării intraarticulare, conține la 1 ml soluție apoasă, 15 mg/ml substanță uscată din concentrat bioactiv soluție 10 % sau 16,5 mg concentrat bioactiv liofilizat, descris în revendicarea 1, 10 mg acetilsalicilat de sodiu sau de lizină, 2 mg acid ascorbic, 0,2 mg heparină, 20 mg alcool benzilic, 40 mg propilenglicol, are un pH = 4 - 6, o activitate antihialuronidazică de minim 65 U.l./ml, și care poate fi asociată și cu alte tipuri de conservanți, cum ar fi maxim 2 mg metabisulfit de sodiu, și maxim 5 mg fenol.
8. 8. Compoziție medicamentoasă, caracterizată prin aceea că, în scopul condiționării sub formă de unguent, gel sau supozitoare, conține la 100 g, 3 ... 10 g substanță activă uscată din concentrat bioactiv soluție 10 % sau 4 ... 12 g concentrat bioactiv liofilizat, descris în revendicarea 1 ; 0,3 ... 0,5 g acetilsalicilat de sodiu sau de lizină, 0,4 ... 0,8 g acid ascorbic de preferință 0,5 g, 0,2 ... 0,4 g vitamina E, 0,2 g heparină, 2 ... 5 g extract total din plante, emulsionate într-o bază de cremă sau de gel ce conține 40 ... 75 % apă structurată tip Ί”, de preferință 65 %, conservanți și arome uzuale.
9. 9. Compoziție, conform revendicării 8, caracterizat prin aceea că, plantele utilizate pot fi: Achillea millefolium, Calendula officinalis, Matricaria chamomilla, Plantago sp., Hypericum perforatum.
10. 10. Compoziție, conform revendicării 8, caracterizată prin aceea că, apa structurată de tip “I” este apa care are un potențial energetic mărit și realizează o capacitate de penetrație transmembranară și o acțiune accentuat antiinflamatoare și antiinfecțioasă.