TW202523359A

TW202523359A - 抗體-藥物結合物與抗pd-1/tim-3雙特異性結合蛋白質之組合

Info

Publication number: TW202523359A
Application number: TW113140332A
Authority: TW
Inventors: 馬修賽門宋; 比拉歐馬; 艾琳諾克蘭西湯普森; 傑洛米湯瑪斯麥提爾二世
Original assignee: 英商阿斯特捷利康英國股份有限公司; 日商第一三共股份有限公司
Priority date: 2023-10-24
Filing date: 2024-10-23
Publication date: 2025-06-16
Also published as: WO2025088496A1

Abstract

提供一種將抗體-藥物結合物與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質組合投予用之醫藥產品。該抗體-藥物結合物為一種抗體-藥物結合物，其中下式所表示的藥物-連接子(其中A表示與抗體的連結位置)經由硫醚鍵與抗體結合，該抗體特別是抗TROP2或抗HER2抗體。亦提供一種治療用途及方法，其中將該抗體-藥物結合物與該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質組合投予至受試者：

Description

抗體-藥物結合物與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質之組合

本申請案請求2023年10月24日提交的美國臨時申請案號63/545,492的優先權，基於所有目的，其內容藉由引用而整體併入本文中。

本揭示係關於一種醫藥產品，其用於將特定抗體-藥物結合物與雙特異性結合蛋白質組合投予，其中該抗體-藥物結合物具有經由連接子結構結合至抗體的抗腫瘤藥，該抗體特別是抗TROP2或抗HER2抗體，該雙特異性結合蛋白質特別是抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質；以及係關於一種治療用途及方法，其中將抗體-藥物結合物與雙特異性結合蛋白質組合投予至受試者。

癌症一直為全球主要的健康負擔。儘管在免疫腫瘤學上有進展，但有效治療的醫療需求一直未獲得滿足，尤其是對於彼等具有免疫腫瘤學(IO)獲得的抗性(immuno-oncology (IO) acquired resistance)的患者。

許多分子標靶已被確定作為抗癌IO療法的潛在效用。在免疫腫瘤學治療領域中，正在研究其治療潛力的一些分子標靶包括細胞毒性T淋巴細胞抗原-4 (CTLA-4或CD152)、程式化死亡配體1(Programmed Death Ligand 1)(PD-L1或B7-H1或CD274)、程式化死亡1 (PD-1)、OX40 (CD134或TNFRSF4)及T細胞抑制性受體T細胞免疫球蛋白及含黏蛋白域-3 (mucin-domain containing-3)(TIM-3)。然而，並非所有患者皆對免疫治療有反應，有些患者隨著時間的推移會停止反應。研究人員並不清楚此種IO獲得的抗性的原因。

如此，仍需繼續識別出免疫治療的候選標靶，特別是能克服IO獲得的抗性，並提高患者反應，使該反應高於目前臨床評估的免疫治療策略。

於此方面，正在開發特異性結合兩個免疫檢查點標靶的雙特異性結合蛋白質。示例包括抗PD-1/CTLA-4雙特異性抗體AK104 (卡度尼利單抗(cadonilimab))及MEDI5752 (US專利號10,457,732)，其包含特異性結合PD-1的第一域及特異性結合CTLA-4的第二域；以及抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體AZD7789，其包含特異性結合PD-1的第一域及特異性結合TIM-3的第二域。AZD7789正處於實性瘤的臨床開發階段，包括鱗狀細胞癌和非鱗狀非小細胞肺癌。例如，抗PD-1/CTLA-4及抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體揭示於WO2017/193032中。AZD7789另揭示於WO2022/221245中。

由與抗體結合的細胞毒性藥物所構成之抗體-藥物結合物(ADC)可選擇性地將藥物遞送至癌細胞處及癌細胞內，導致癌細胞死亡(Ducry, L., et al., Bioconjugate Chem. (2010) 21, 5-13；Alley, S. C., et al., Current Opinion in Chemical Biology (2010) 14, 529-537；Damle N. K. Expert Opin. Biol. Ther. (2004) 4, 1445-1452；Senter P. D., et al., Nature Biotechnology (2012) 30, 631-637；Burris HA., et al., J. Clin. Oncol. (2011) 29(4)：398-405)。

一種此類抗體-藥物結合物為達托泊他單抗德魯特坎(datopotamab deruxtecan)(Dato-DXd，DS-1062)，其係由靶向TROP2的抗體及依喜替康(exatecan)的衍生物所構成。尤其，WO2015/098099及WO2020/240467提供示例性TROP2-靶向抗體-藥物結合物之詳細描述，包括達托泊他單抗德魯特坎。達托泊他單抗德魯特坎已在多種腫瘤類型中顯示臨床效力，包括肺癌及乳癌。

另一種此類抗體-藥物結合物為曲妥珠單抗德魯特坎(trastuzumab deruxtecan)，其由靶向HER2的抗體及依喜替康的衍生物所構成(Ogitani Y. et al., Clinical Cancer Research (2016) 22(20), 5097-5108；Ogitani Y. et al., Cancer Science (2016) 107, 1039-1046)。

曲妥珠單抗德魯特坎(Enhertu ^®，DS-8201)已在表現HER2的實性瘤中顯示顯著的臨床效力，該瘤包括乳癌、胃癌、結腸直腸癌及非小細胞肺癌。值得注目地，DS-8201在上述適應症中已證實在HER2低腫瘤中有前景的活性。

揭示抗體-藥物結合物與免疫檢查點抑制劑之組合投予的參考文獻包括Müller P. et al., Science Translational Medicine (2015) 7(315), 315ra188 (曲妥珠單抗依坦辛(trastuzumab emtansine)(T-DM1)與抗CTLA-4及抗PD-1抗體兩者之組合)；及WO2018/110515 (曲妥珠單抗德魯特坎(DS-8201)與抗PD-1、抗PD-L1、抗CD4及抗CD8抗體的組合)。

然而，有需要鑑別出抗體-藥物結合物的進一步組合夥伴，包括對於抗TROP2抗體-藥物結合物諸如DS-1062及對於抗HER2抗體-藥物結合物諸如DS-8201，以增強其治療潛力。

儘管諸如DS-8201和DS-1062的抗體-藥物結合物作為單藥治療(monotherapy)或與檢查點抑制劑組合具有治療潛力，並且雙特異性檢查點抑制劑具有治療潛力，但仍有改進治療組成物和方法之需要，使其可增進現有癌症治療劑的療效、增加治療反應的持久性、提高對患者的耐受性、降低劑量依賴性毒性、及/或為對先前的癌症治療表現出抗性或難治性的癌症提供替代治療。更具體而言，仍然需要識別出與抗體-藥物結合物，特別是與抗TROP2抗體-藥物結合物諸如DS-1062以及與抗HER2抗體-藥物結合物諸如DS-8201的進一步夥伴組合，以增強其治療潛力。因此，需要提供一種藥物和治療方法，其能夠在癌症的治療中獲得優異的抗腫瘤效果，例如增強的功效、增加的治療反應的持久性和/或降低的劑量依賴性毒性。因此，期望提供一種藥劑及治療，其能夠在癌症治療中獲得優異的抗腫瘤效果，諸如增強的功效、增加的治療反應的持久性及/或降低的劑量依賴性毒性。

[揭示之概要] 本揭示提供一種醫藥產品，其透過將抗體-藥物結合物(尤其是抗TROP2抗體-藥物結合物或抗HER2抗體-藥物結合物)與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質組合投予，而在癌症的治療中展現優異的抗腫瘤效果。本揭示亦提供一種治療用途及方法，其中將抗體-藥物結合物及雙特異性結合蛋白質組合投予至受試者。

具體而言，本揭示係關於下列[1]至[70]： [1]一種醫藥產品，其包含組合投予用之抗體-藥物結合物及抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，其中該抗體-藥物結合物為下式所表示的藥物-連接子：經由硫醚鍵與抗TROP2或抗HER2抗體結合之抗體-藥物結合物，其中A表示與抗體的連結位置； [2]如[1]之醫藥產品，其中將該藥物-連接子與抗TROP2抗體結合； [3]如[2]之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：3所表示的胺基酸序列所組成的CDRH1、由SEQ ID NO：4所表示的胺基酸序列所組成的CDRH2及由SEQ ID NO：5所表示的胺基酸序列所組成的CDRH3，且該輕鏈包含由SEQ ID NO：6所表示的胺基酸序列所組成的CDRL1、由SEQ ID NO：7所表示的胺基酸序列所組成的CDRL2及由SEQ ID NO：8所表示的胺基酸序列所組成的CDRL3； [4]如[3]之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：9所表示的胺基酸序列所組成的重鏈可變區且該輕鏈包含由SEQ ID NO：10所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈可變區； [5]如[3]或[4]之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體為包含由SEQ ID NO：12所表示的胺基酸序列所組成的重鏈及由SEQ ID NO：13所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈的抗體； [6]如[5]之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體在重鏈羧基端缺少一離胺酸殘基； [7]如[2]至[6]中任一項之醫藥產品，其中該抗體-藥物結合物中每個抗體分子結合的藥物-連接子的平均單元數在3.5至4.5的範圍內； [8]如[7]之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體-藥物結合物為達托泊他單抗德魯特坎(DS-1062)； [9]如[1]之醫藥產品，其中該藥物-連接子與抗HER2抗體結合； [10]如[9]之醫藥產品，其中該抗HER2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：16所表示的胺基酸序列所組成的CDRH1、由SEQ ID NO：17所表示的胺基酸序列所組成的CDRH2及由SEQ ID NO：18所表示的胺基酸序列所組成的CDRH3，且該輕鏈包含由SEQ ID NO：19所表示的胺基酸序列所組成的CDRL1、由由SEQ ID NO：20之胺基酸殘基1至3所組成的胺基酸序列所組成的CDRL2及由SEQ ID NO：21所表示的胺基酸序列所組成的CDRL3； [11]如[10]之醫藥產品，其中該抗HER2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：22所表示的胺基酸序列所組成的重鏈可變區且該輕鏈包含由SEQ ID NO：23所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈可變區； [12]如[11]之醫藥產品，其中該抗HER2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈係由SEQ ID NO：14所表示的胺基酸序列所組成且該輕鏈係由SEQ ID NO：15所表示的胺基酸序列所組成； [13]如[11]之醫藥產品，其中該抗HER2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈係由SEQ ID NO：24所表示的胺基酸序列所組成且該輕鏈係由SEQ ID NO：15所表示的胺基酸序列所組成； [14]如[9]至[13]中任一項之醫藥產品，其中該抗體-藥物結合物中每個抗HER2抗體分子結合的藥物-連接子的平均單元數在7至8的範圍內； [15]如[14]之醫藥產品，其中該抗HER2抗體-藥物結合物為曲妥珠單抗德魯特坎(DS-8201)； [16]如[1]至[15]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域特異性結合至TIM-3之免疫球蛋白可變(IgV)域(SEQ ID NO：45)的C’C’’及DE環； [17]如[1]至[16]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域特異性結合至TIM-3之IgV域(SEQ ID NO：45)上的表位且該表位包含N12、L47、R52、D53、V54、N55、Y56、W57、W62、L63、N64、G65、D66、F67、R68、K69、D71、T75、及E77； [18]如[1]至[17]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域及PD-1結合域，該TIM-3結合域包含第一組之CDR：CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2、及CDRL3，該等CDR分別包含SEQ ID NO：35、36、37、38、39及40，或SEQ ID NO：35、36、37、38、39及45之胺基酸序列；且該PD-1結合域包含第二組之CDR：CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2、及CDRL3，該等CDR分別包含SEQ ID NO：25、26、27、28、29、及30之胺基酸序列； [19]如[1]至[18]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域包含：包含SEQ ID NO：41之胺基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO：43之胺基酸序列的輕鏈可變域；且具有PD-1結合域，該PD-1結合域包含：包含SEQ ID NO：31之胺基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO：33之胺基酸序列的輕鏈可變域； [20]如[1]至[18]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域包含：包含SEQ ID NO：42之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO：43之胺基酸序列的輕鏈；且具有PD-1結合域，該PD-1結合域包含：包含SEQ ID NO：32之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO：34之胺基酸序列的輕鏈； [21]如[1]至[20]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為抗體； [22]如[21]之醫藥產品，其中該抗體為IgG抗體； [23]如[21]之醫藥產品，其中該抗體為IgG1抗體； [24]如[22]或[23]之醫藥產品，其中該抗體為人類或經人類化； [25]如[21]至[24]中任一項之醫藥產品，其中該雙特異性抗體為單價； [26]如[1]至[25]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為DuetMab； [27]如[1]至[26]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質包含無醣基化(aglycosylated)的Fc區域； [28]如[1]至[26]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質包含去醣基化(deglycosylated)的Fc區域； [29]如[1]至[26]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質包含具有減少的岩藻糖基化或無岩藻糖基化(afucosylated)的Fc區域； [30]如[1]至[29]中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為「AZD7789」或「sabestomig」； [31]如[1]至[30]中任一項之醫藥產品，其中該產品為組成物，其包含抗體-藥物結合物及抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，用於同時投予； [32]如[1]至[30]中任一項之醫藥產品，其中該產品為組合製劑，其包含抗體-藥物結合物及抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，用於依序投予或分開的同時投予； [33]如[1]至[32]中任一項之醫藥產品，其中該產品係用於治療癌症； [34]如[33]之醫藥產品，其中該癌症為選自由下列組成的群組之至少一者﹕乳癌、肺癌、結腸直腸癌、胃癌、食道癌、頭頸癌、食道胃接合部腺癌(esophagogastric junction adenocarcinoma)、膽道癌、佩吉特氏病(Paget’s disease)、胰臟癌、卵巢癌、子宮癌肉瘤(uterine carcinosarcoma)、泌尿上皮癌(urothelial cancer)、前列腺癌、膀胱癌、子宮內膜癌、胃腸道間質瘤、消化道間質瘤、子宮頸癌(uterine cervix cancer)、鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝癌、肝細胞癌、子宮體癌(corpus uteri carcinoma)、腎臟癌、外陰癌、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤、骨髓瘤、多形性神經膠質母細胞瘤、骨肉瘤、肉瘤、及黑色素瘤、子宮頸癌(cervical cancer)、子宮癌、睾丸癌、及腎細胞癌； [35]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為肺癌； [36]如[35]之醫藥產品，其中該肺癌為非小細胞肺癌； [37]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為結腸直腸癌； [38]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為乳癌； [39]如[38]之醫藥產品，其中該乳癌為HER2陽性乳癌； [40]如[38]之醫藥產品，其中該乳癌為低HER2乳癌； [41]醫藥產品如[38]之，其中該乳癌為三陰性乳癌； [42]醫藥產品如[38]之，其中該乳癌為激素受體(HR)-陽性、HER2-陰性乳癌； [43]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為胃癌； [44]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為胰臟癌； [45]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為卵巢癌； [46]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為前列腺癌； [47]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為腎臟癌； [48]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為膀胱癌； [49]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為子宮內膜癌； [50]如[34]之醫藥產品，其中該癌症為膽道癌； [51]一種與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質組合在受試者中癌症的治療使用的抗體-藥物結合物，其中該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質係如[1]至[30]中任一項所定義； [52]如[51]之使用的抗體-藥物結合物，其中該癌症為如[34]至[50]中任一項所定義； [53]如[51]或[52]之使用的抗體-藥物結合物，其中該使用包含依序投予該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質； [54]如[51]或[52]之使用的抗體-藥物結合物，其中該使用包含分開且同時地投予該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質； [55]如[51]至[54]中任一項之使用的抗體-藥物結合物，其中以約750 mg或約1500 mg之劑量投予該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質； [56]如[55]之使用的抗體-藥物結合物，其中每治療週期投予一次該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，其中該治療週期為約三週； [57]如[51]至[56]中任一項之使用的抗體-藥物結合物，其中該癌症為非小細胞肺癌，且其中該受試者為未接受過治療的(treatment-naïve)，或其中該受試者具有CPI獲得的抗性； [58]如[57]之使用的抗體-藥物結合物，其中該受試者具有任何PD-L1狀態； [59]如[58]之使用的抗體-藥物結合物，其中該受試者具有1%至49%之PD-L1狀態，或其中該受試者具有少於1%之PD-L1狀態； [60]如[51]至[59]中任一項之使用的抗體-藥物結合物，其中該受試者無可行的基因體改變； [61]一種治療癌症之方法，其包含組合投予如[1]至[30]中任一項所定義的抗體-藥物結合物及抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質至需要其之受試者； [62]如[61]之方法，其中該癌症係如[34]至[50]中任一項中所定義； [63]如[61]或[62]之方法，其中依序地投予該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質； [64]如[61]或[62]之方法，其中分開且同時地投予該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質； [65]如[61]至[64]中任一項之方法，其中以約750 mg或約1500 mg之劑量投予該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質； [66]如[65]之方法，其中每治療週期投予一次該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，其中該治療週期為約三週； [67]如[61]至[66]中任一項之方法，其中該癌症為非小細胞肺癌，且其中該受試者為未接受過治療的，或其中該受試者具有CPI 獲得的抗性； [68]如[67]之方法，其中該受試者具有任何PD-L1狀態； [69]如[68]之方法，其中該受試者具有1%至49%之PD-L1狀態，或其中該受試者具有少於1%之PD-L1狀態；及 [70]如[61]至[69]中任一項之方法，其中該受試者無可行的基因體改變。 [揭示之有利效果]

本揭示提供：一種醫藥產品，其包含組合投予用之特定的抗體-藥物結合物與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，其中該抗體-藥物結合物具有經由連接子結構結合至抗體(特別是抗TROP2或抗HER2抗體)之抗腫瘤藥；及一種治療用途及方法，其中組合投予該抗體-藥物結合物及該雙特異性結合蛋白質至受試者。如此，本揭示提供一種藥劑及治療，其在癌症之治療中可獲得優異的抗腫瘤效果。

[詳細說明] 為了更容易理解本揭示，首先定義某些術語。在整個詳細說明中陳述附加定義。

除非另有定義，否則本文使用的所有技術及科學用語具有如本揭示相關技術領域中具通常知識者通常理解的相同意義。例如，the Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press；The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press；及the Oxford Dictionary Of Biochemistry And Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Press，提供所屬技術領域中具通常知識者本揭示中使用的許多術語的通用詞典。

除非上下文另有要求，單數術語應包括複數且複數術語應包括單數。

單位、前綴詞、及符號係以其國際單位制(SI)接受的形式表示。數字範圍包括定義該範圍的數字。

應理解，本文無論在何處描述語言「包含」的態樣，亦提供關於「由…組成」及/或「基本上由…組成」所描述的其他類似態樣。

術語「抑制(inhibit及inhibition)」可指生物活性約10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%或100%的降低。細胞增殖可使用本領域公認的技術進行分析，其測量細胞分裂的速率、及/或經歷細胞分裂的細胞群中的細胞分率(fraction of cells)、及/或由於最後分化或細胞死亡(例如，胸苷摻入(thymidine incorporation)而從細胞群中損失細胞的比率)。

術語「受試者」係指任何動物(例如，哺乳類動物)，包括但不限於人類、非人類靈長類動物、囓齒類動物等，其將成為特定治療的接受者。通常，術語「受試者」及「患者」在本文中指稱人類受試者時可互換使用。

術語「醫藥產品」係指一種製劑，其形式允許活性成分之生物活性，或作為含有所有活性成分的組成物(用於同時投予)，或者作為各自含有至少一種但非全部活性成分之分開的組成物的組合(組合製劑)(用於依序或同時投予)，且其不含有對將要投予該產品的受試者有不可接受的毒性的額外成分。此種產品可為無菌。「同時投予」意指活性成分於同一時間投予。「依序投予」意指活性成分係以任一順序並以各別投予之間的時間間隔而一個接一個地投予。時間間隔可為例如少於24小時；於另一例中為少於6小時；於另一例中為少於2小時。

諸如「治療」或「處理」或「處置」或「減輕」或「緩和」的術語係指下述(1)及(2)兩者：(1)治癒、減緩、減輕所診斷的病理狀況或病症的症狀及/或停止所診斷的病理狀況或病症的進展之治療措施；及(2)防止及/或減緩靶向的病理狀況或病症的發展之預防性或防止性措施。如此，需要治療者包括：已罹患該病症者；易罹患該病症者；以及需要防止該失調者。於某些態樣，若患者顯示出例如某種類型癌症的完全、部分或暫時的緩解，則受試者的癌症係依據本揭示的方法而成功地「治療」。

術語「癌症」、「腫瘤」、「癌性」、及「惡性」係指或描述哺乳類動物的生理狀況，通常以不受調控的細胞生長為特徵。癌症之例包括但不限於乳癌、肺癌、結腸直腸癌、胃癌、食道癌、頭頸癌、食道胃接合部腺癌、膽道癌、佩吉特氏病、胰臟癌、卵巢癌、子宮癌肉瘤、泌尿上皮癌、前列腺癌、膀胱癌、子宮內膜癌、胃腸道間質瘤、消化道間質瘤、子宮頸癌(uterine cervix cancer)、鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝癌、肝細胞癌、子宮體癌、腎臟癌、外陰癌、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤、骨髓瘤、多形性神經膠質母細胞瘤、骨肉瘤、肉瘤、黑色素瘤、子宮頸癌(cervical cancer)、子宮癌、睾丸癌、及腎細胞癌。癌症包括血液科惡性疾病及實性瘤，血液科惡性疾病諸如急性骨髓性白血病、多發性骨髓瘤、慢性淋巴球性白血病、彌漫型大B細胞淋巴瘤、伯奇氏淋巴瘤(Burkitt’s lymphoma)、濾泡性淋巴瘤；實性瘤諸如乳癌、肺癌、神經母細胞瘤及大腸癌。

如本文使用的術語「細胞毒性藥物」定義廣泛，係指抑制或防止細胞功能及/或引起細胞破壞(細胞死亡)及/或發揮抗腫瘤/抗增殖作用的物質。例如，細胞毒性藥物直接或間接地防止新生的腫瘤細胞的發育、成熟或擴散。該術語包括僅引起細胞生長抑制作用的試劑。該術語包括如下所特定的化學治療劑。

術語「化學治療劑」為術語「細胞毒性藥物」之子集，包含天然或合成的化學化合物。

根據本揭示的方法或用途，可投予本揭示的化合物至患者，以促進對於癌症的正向治療反應。關於癌症治療的術語「正向治療反應」係指與疾病有關的症狀的改善。例如，疾病的改善可以以完全反應(complete response)為特徵。術語「完全反應」係指不存在臨床上可檢測的疾病且任何先前的測試結果均正常化。或者，疾病的改善可被歸類為部分反應(partial response)。「正向治療反應」涵括從投予本揭示之化合物所得到之癌症的進展及/或持續時間的減少或抑制、癌症的嚴重度的減輕或改善、及/或其一種或多種症狀的改善。於具體態樣，此類術語係指投予本揭示的化合物後之一種、兩種或三種以上的結果： (1)癌細胞群之穩定、減少或消除； (2)癌症生長的穩定或減少； (3)妨害癌症形成； (4)原發性、區域性及/或轉移性癌症之根除、移除或控制； (5)死亡率降低； (6)無疾病、無復發、無進展、及/或整體存活、持續時間或比率的增加； (7)反應率、反應持久性、或者有反應的或緩解中的患者數量的增加； (8)住院率降低； (9)住院時間減少； (10)癌症的大小被維持且不增加或增加少於10%，或少於5%，或少於4%，或少於2%；及 (11)緩解中的患者數量增加； (12)其他治療癌症所需的輔助療法(例如化學療法或激素療法)的數量減少。

可使用篩檢技術評估臨床反應，諸如PET、磁振造影(MRI)掃描、X射線造影、電腦斷層(CT)掃描、流動式細胞測量術或螢光激發細胞分選儀(FACS)分析、組織學、大體病理學、及血液化學，包括但不限於可藉由ELISA、RIA、層析法等檢測到的變化。除了此等正向治療反應之外，歷經治療的受試者可經歷到與疾病有關的症狀改善的有益效果。

如本文所使用的術語「抗體」係指能夠辨識抗原並特異性結合至抗原的蛋白質。普通或常規哺乳動物抗體包含四聚體(tetramer)，其典型地由兩對相同的多肽鏈組成，每對由一條「輕」鏈(典型地具有約25kDa的分子量)和一條「重」鏈(典型地具有約50-70kDa的分子量)組成。如本文所使用的術語「重鏈」及「輕鏈」係指具有足夠的可變域序列以賦予針對標的抗原的特異性之任何免疫球蛋白多肽。每條輕鏈和重鏈的胺基末端部分典型地包括約100至110或更多個胺基酸之可變域，其典型地負責抗原辨識。如本文所使用，術語「可變區」或「可變域」可互換使用並且在本領域中為常見的。每條鏈的羧基端部分典型地限定負責效應子功能的恆定域。如此，在天然存在的抗體中，全長重鏈免疫球蛋白多肽包括可變域(V _H)和三個恆定域(C _H1、C _H2和C _H3)以及C _H1和C _H2之間的鉸鏈區，其中VH域位於多肽的胺基端且C _H3域位於羧基端，且全長輕鏈免疫球蛋白多肽包括可變域(V _L)及恆定域(C _L)，其中V _L域在多肽之胺基端且C _L域在羧基端。然而，本領域技術人員應當理解，在某些抗體樣結合蛋白形式中天然存在的抗體中的結構域的位置可被修飾而不損失抗原結合能力。人類輕鏈的類別被稱為kappa及lambda輕鏈。

在全長輕鏈和重鏈內，可變域及恆定域典型地由約12個或更多個胺基酸的「J」區域連接，重鏈亦包括約10個以上胺基酸的「D」區域。每個輕鏈/重鏈對的可變區典型地形成抗原結合位。天然存在的抗體的可變域典型地表現出與由三個高度可變區(亦稱為互補決定區或CDR)連接的相對保守的框架區(FR)相同的一般結構。每對之兩條鏈的CDR典型地藉由框架區對齊，其可實現與特定表位的結合。從胺基端至羧基端，輕鏈和重鏈可變域典型地均包含域FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3及FR4。

術語「抗體片段」係指完整或全長鏈或抗體的一部分，通常是標的結合區或可變區。抗體片段之例包括但不限於F _ab、F _ab'、F _(ab')2及F _v片段。如本文所使用，術語「功能片段」通常與「抗體片段」同義，並且就抗體而言，可指諸如F _v、F _ab、F _(ab')2的抗體片段。

本文所述的胺基酸殘基的編號係根據EU編號系統進行(亦描述於Kabat et al, Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD.(1991))。

「單株」抗體或其抗原結合片段係指涉及單個抗原決定位或表位的高度特異性結合之同質抗體(homogeneous antibody)或抗原結合片段群體。此與多株抗體相反，多株抗體典型地包括針對不同抗原決定位的不同抗體。術語「單株」抗體或其抗原結合片段涵蓋完整和全長單株抗體以及抗體片段(諸如Fab、Fab'、F(ab')2、Fv)、單鏈(scFv)突變體、包含抗體部分的融合蛋白，以及包含抗原辨識位點的任何其他修飾的免疫球蛋白分子。此外，「單株」抗體或其抗原結合片段係指以包含但不限於融合瘤、噬菌體選擇、重組表現及轉基因動物之方式製作的此種抗體及其抗原結合片段。

如本文使用的術語「人類抗體」包括具有基本上對應於人類種系免疫球蛋白序列的可變區及恆定區的抗體。於一些態樣中，人類抗體在非人類哺乳動物中生產，包括但不限於囓齒動物，諸如小鼠及大鼠，以及兔類動物，諸如兔子。於其他態樣中，在融合瘤細胞中生產人類抗體。於再其他態樣中，重組地生產人類抗體。於一些態樣中，雙特異性結合蛋白質為人類或人類化抗體。

如本文使用的術語「抗原」或「標的抗原」係指能夠被本揭示內容的結合蛋白質辨識及結合的分子或分子的一部分。標的抗原能夠用於動物以產生能夠結合至該抗原的表位的抗體。標的抗原可具有一個或多個表位。

如本文使用的術語「表位」係指被本揭示內容之結合蛋白質(諸如抗體或其抗原結合片段)辨識及結合之抗原所局限的區域或結構元件。更精確地，表位係由結合蛋白質的CDR結合的特定結構。表位可包含蛋白質結構元件、碳水化合物或甚至在膜中發現的脂質結構的部分。當結合蛋白質優先辨識蛋白質及/或大分子的複雜混合物中的抗原標的時，據悉該結合蛋白質特異性結合抗原。術語「特異性結合」係指特異性結合至分子或其片段(例如抗原)的結合蛋白質。特異性結合分子或其片段的結合蛋白質可以較低親和力與其他分子結合，如通過例如免疫測定、BIAcore或本領域已知的其他測定所確定。尤其，特異性結合至少一個分子或其片段的抗體或片段可與非特異性結合的分子競爭。本揭示具體地包含具有多種特異性的抗體(例如，對兩個或多個各自抗原具有特異性的抗體)。例如，雙特異性結合蛋白質可與在一單一標的抗原上的兩個相鄰表位結合，或與兩個不同抗原結合。

如本文使用的術語「抗原結合位」係指在本揭示內容之結合蛋白質的表面上所產生的位點，於此結合抗原或抗原上的表位。結合蛋白質之抗原結合位係典型地通過參考由結合蛋白質的互補決定區(CDR)產生的環結構來描述。

術語「嵌合」抗體或其抗原結合片段係指其中胺基酸序列源自兩個或兩個以上物種的抗體或其抗原結合片段。通常，輕鏈和重鏈兩者之可變區對應於源自一種哺乳動物(例如小鼠、大鼠、兔等)的抗體或其抗原結合片段的可變區，具有所需的特異性、親和力、及能力，而恆定區與源自另一種哺乳動物(通常是人類)的抗體或其抗原結合片段的序列同源，以避免在該物種中誘發免疫反應。

術語「人類化」抗體或其抗原結合片段係指非人類(例如鼠類)抗體或其抗原結合片段的形式，它們是特異性免疫球蛋白鏈、嵌合免疫球蛋白或其片段，且含有最少的非人類(例如鼠類)序列。通常，人類化抗體或其抗原結合片段為人類免疫球蛋白，其中來自互補決定區(CDR)的殘基被來自非人類物種(例如小鼠、大鼠、兔子、倉鼠)的CDR的殘基所取代，此等殘基具有所需的特異性、親和力及能力(「CDR接枝」)(「CDR grafted」)(Jones et al., Nature 321：522-525 (1986)；Riechmann et al., Nature 332：323-327 (1988)；Verhoeyen et al., Science 239：1534-1536 (1988))。在某些情況下，人類免疫球蛋白的某些Fv框架區(FR)殘基被來自非人物種之具有所需特異性、親和力和能力的抗體或片段中的對應殘基取代。人類化抗體或其抗原結合片段可藉由Fv框架區域中及/或非人類CDR殘基內的額外殘基的取代而進一步修飾，以精煉及優化抗體或其抗原結合片段的特異性、親和力、及/或能力。一般而言，人類化抗體或其抗原結合片段將包含含有對應於非人類免疫球蛋白的全部或基本上全部CDR區的可變域，而全部或基本上全部FR區皆為人類免疫球蛋白共有序列(consensus sequence)的彼等區。人類化抗體或其抗原結合片段亦可包含免疫球蛋白恆定區或域(Fc)的至少一部分，通常是人類免疫球蛋白的恆定區或域。用於產生人類化抗體的方法之例描述於U.S. Pat. 5,225,539；Roguska et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 91(3)：969-973 (1994)；及Roguska et al., Protein Eng. 9(10)：895-904 (1996)。於本揭示之一些態樣，「人類化抗體」為一種表面再處理抗體。

術語「人類」抗體或其抗原結合片段意指具有衍生自人類免疫球蛋白基因座的胺基酸序列的抗體或其抗原結合片段，其中此類抗體或抗原結合片段使用本領域已知的任何技術來製備。人類抗體或其抗原結合片段的此定義包括完整或全長抗體及其片段。

「結合親和力」一般係指在分子(例如，抗體或其抗原結合片段)的單一結合位與其結合夥伴(binding partner)(例如，抗原)之間的非共價相互作用的總和的強度。除非另有指明，如本文所使用，「結合親和力」係指反映結合對成員(例如，抗體或其抗原結合片段和抗原)之間1:1相互作用的內在結合親和力。分子X對其夥伴Y的親和力通常可藉由解離常數(KD)表示。可使用本領域已知的技術測量及/或表現親和力，包括但不限於平衡解離常數(KD)及平衡締合常數(equilibrium association constant)(KA)。KD係根據koff/kon的商數計算，而KA係由k _off/k _on的商數計算。k _on指例如抗體或其抗原結合片段與抗原的締合速率常數，且k _off指例如抗體或其抗原結合片段與抗原的解離。k _on和k _off可藉由熟習本項技術領域者已知的技術而確定，諸如BIAcore®或KinExA。

表位可為例如多肽的連續胺基酸(線性或連續表位)，或者表位可例如一起來自一個或多個多肽的兩個或多個非連續區域(構形的、非線性的、不連續的或非連續的表位)。於本揭示之一些態樣中，抗體或其抗原結合片段特異性結合的表位可藉由下列確定，例如：NMR共振光譜學、X射線繞射晶體學研究、ELISA測定、氫/氘交換耦合質譜法(例如，液相層析電噴灑質譜)、陣列式寡肽掃描測定(array-based oligo-peptide scanning assay)、及/或誘變作圖(mutagenesis mapping)(例如，定點誘變作圖)。對於X射線晶體學，可使用本領域已知的任何方法完成結晶(例如，Giegé R et al., (1994) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 50(Pt 4)：339-350；McPherson A (1990) Eur J Biochem 189：1-23；Chayen NE (1997) Structure 5：1269-1274；McPherson A (1976) J Biol Chem 251：6300-6303)。抗體/其抗原結合片段：抗原晶體可使用眾所周知的X射線繞射技術進行研究，並且可使用電腦軟體諸如X-PLOR進行精製(Yale University, 1992，由Molecular Simulations, Inc.發行；參見，例如，Meth Enzymol (1985) volumes 114 & 115, eds Wyckoff HW et al.,；U.S. 2004/0014194)；及BUSTER (Bricogne G (1993) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 49(Pt 1)：37-60；Bricogne G (1997) Meth Enzymol 276A：361-423, ed Carter CW；Roversi P et al., (2000) Acta Crystallogr D Biol Crystallogr 56(Pt 10)：1316-1323)。誘變作圖研究可使用本領域技術人員已知的任何方法來完成。參見，例如，Champe M et al., (1995) J Biol Chem 270：1388-1394 and Cunningham BC & Wells JA (1989) Science 244：1081-1085對誘變技術(包括丙胺酸掃描誘變技術)的描述。

與參考抗體「結合相同表位」的抗體係指與參考抗體結合相同胺基酸殘基的抗體。抗體與參考抗體結合至相同表位的能力可藉由氫/氘交換測定而確定(參見Coales et al. Rapid Commun. Mass Spectrom. 2009；23：639–647)或x射線晶體學。

若一抗體優先與一表位或重疊表位結合，以至於在某種程度上阻斷了參考抗體與表位的結合，則該抗體被稱為「競爭性抑制」或「交叉競爭」與參考抗體對特定表位的結合。競爭性抑制可以用本領域已知的任何方法確定，例如競爭性ELISA測定。一種抗體可說是至少90%、至少80%、至少70%、至少60%或至少50%競爭性抑制參考抗體與特定表位結合。

被「分離」的多肽、抗體、多核苷酸、載體、細胞或組成物係指以自然界中未發現的形式存在的多肽、抗體、多核苷酸、載體、細胞或組成物。分離的多肽、抗體、多核苷酸、載體、細胞或組成物包括彼等已純化到不再是自然界中存在的形式的多肽、抗體、多核苷酸、載體、細胞或組成物。在本揭示的某些態樣，被分離的抗體、多核苷酸、載體、細胞或組成物基本上純的。如本文所使用，「基本上純的」係指至少50%(即，不含污染物)、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%純度的材料。

術語「多肽」、「胜肽」及「蛋白質」在本文中可互換使用，指任何長度的胺基酸的聚合物。該聚合物可為線性或分支，其可包含修飾的胺基酸，並且可被非胺基酸中斷。該術語亦涵蓋已自然修飾或藉由干預修飾的胺基酸聚合物；例如，雙硫鍵形成、糖基化、脂化、乙醯化、磷酸化或任何其他操作或修飾，諸如與標識組分結合(conjugation)。此定義亦包括例如含有一種或多種胺基酸類似物(包括例如非天然胺基酸等)的多肽，以及本領域已知的其他修飾。應理解，因為本揭示的多肽係基於抗體，所以在本揭示的一些態樣，多肽可呈單鏈或相關鏈出現。 [具體實施例之描述]

以下，描述用於實施本揭示的特定模式。以下描述的具體實施例僅用於說明本揭示的典型具體實施例之一例，並未意圖限制本揭示之範圍。

1. 抗體 - 藥物結合物本揭示中使用的抗體-藥物結合物為一抗體-藥物結合物，其中將下式所表示的藥物-連接子： (其中A表示與抗體的連結位置) 經由硫醚鍵與抗體結合，該抗體特別是抗TROP2或抗HER2抗體。

在本揭示中，將抗體-藥物結合物中由連接子與藥物所組成的部分結構稱為「藥物-連接子」。藥物-連接子連接至在抗體中的鏈間雙硫鍵部位(重鏈之間的兩個部位，及重鏈與輕鏈之間的兩個部位)形成的硫醇基(換言之，半胱胺酸殘基之硫原子)。

本揭示之藥物-連接子包括作為一組分之依喜替康(IUPAC名：(1S,9S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-1,2,3,9,12,15-六氫-9-羥基-4-甲基-10H,13H-苯并[de]吡喃并[3',4'：6,7]吲并[1,2-b]喹啉-10,13-二酮(亦表示為化學名：(1S,9S)-1-胺基-9-乙基-5-氟-2,3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4'：6,7]吲并[1,2-b]喹啉-10,13(9H,15H)-二酮))，其為一種拓樸異構酶I抑制劑。依喜替康為具有抗腫瘤效果之喜樹鹼衍生物，由下式表示：。

本揭示中使用的抗體-藥物結合物亦可以下式表示：。

此處，藥物-連接子與抗體(「抗體-」)經由硫醚鍵結合，該抗體特別是抗TROP2或抗HER2抗體。n的意義與所謂結合的藥物分子之平均數(DAR；藥物對抗體比率(Drug-to-Antibody Ratio))相同，指每一抗體分子結合的藥物-連接子之平均單元數。

遷移至癌細胞中後，本揭示中使用的抗體-藥物結合物在連接子部分處被切割而釋放出下式表示的化合物：。

2. 抗體 - 藥物結合物中的抗體本揭示中使用的抗體-藥物結合物中的抗體為抗TROP2或抗HER2抗體，可衍生自任一物種，例如來自人類、大鼠、小鼠、或兔子。當抗體衍生自非人類物種的情形，其例如為使用習知技術嵌合或人類化。抗體可為多株抗體或單株抗體，且例如為單株抗體。

本揭示中使用的抗體-藥物結合物中的抗體為例如具有能夠靶向癌細胞的特性之抗體，且例如為具有下列性質之抗體，例如：辨識癌細胞的性質、與癌細胞結合的性質、內化於癌細胞中的性質、及/或針對癌細胞的殺細胞活性。

抗體對癌細胞的之結合活性可使用流動式細胞測量術確認。使用下列的測定可確認抗體內化至癌細胞：(1)使用與治療性抗體結合的二級抗體(經螢光標識)於螢光顯微鏡下使併入細胞中的抗體可視化的測定(Cell Death and Differentiation(2008) 15, 751-761)；(2)使用與治療性抗體結合的二級抗體(經螢光標識)測量併入細胞中的螢光強度的測定(Molecular Biology of the Cell, Vol. 15, 5268-5282, December 2004)；或(3)使用與治療性抗體結合的免疫毒素的Mab-ZAP測定，其中該毒素在併入至細胞後被釋放以抑制細胞生長(Bio Techniques 28：162-165, January 2000)。作為免疫毒素，可使用白喉毒素催化域與蛋白質G之重組複合蛋白。

抗體之抗腫瘤活性可藉由測定對細胞生長的抑制活性而在活體外確認。例如，培養過度表現作為抗體的標的蛋白質的癌細胞株，並將抗體以不同濃度添加到培養系統中，以測定對病灶(focus)形成、群落形成及球狀生長的抑制活性。可證實活體內抗腫瘤活性，例如，藉由將抗體投予至移植高表現標的蛋白質的癌細胞株的裸鼠，並測定癌細胞中的變化。

由於在抗體-藥物結合物中結合的化合物發揮抗腫瘤效果，於一具體實施例中，抗體本身應具有抗腫瘤效果。為了特異性及選擇性地發揮抗腫瘤化合物對癌細胞的細胞毒性活性，於一具體實施例中，抗體應具有內化以遷移至癌細胞中的性質。

本揭示中使用的抗體-藥物結合物中的抗TROP2或抗HER2抗體可藉由本技術領域已知程序而獲得。例如，本揭示之抗體可使用本技術領域常規進行的方法而獲得，其涉及以抗原性多肽對動物進行免疫並收集及純化活體內產生的抗體。抗原的來源不限於人類，可以以衍生自如小鼠、大鼠等非人類動物的抗原對動物進行免疫。於此種情形，可測試結合獲得的異源抗原的抗體與人類抗原的交叉反應性，以篩選適用於人類疾病的抗體。

或者，根據本領域已知方法(例如，Kohler and Milstein, Nature(1975) 256, p. 495-497；及Kennet, R. ed., Monoclonal Antibodies, p. 365-367, Plenum Press, N.Y.(1980))，將產生針對抗原的抗體的產生抗體的細胞與骨髓瘤細胞融合以建立融合瘤，而可從中獲得單株抗體。

藉由基因工程化宿主細胞以產生編碼抗原性蛋白質的基因而可獲得抗原。具體而言，製備允許表現抗原基因的載體並將其轉移至宿主細胞因而表現該基因。可純化如此表現的抗原。亦可藉由以上述基因工程化的抗原表現細胞或表現抗原的細胞株對動物進行免疫的方法而獲得抗體。

本揭示中使用的抗體-藥物結合物中的抗TROP2或抗HER2抗體係例如為以降低對人類的異源抗原性為目的而藉由人工修飾獲得的重組抗體，諸如嵌合抗體或人類化抗體；或例如為僅具有源自人類的抗體的基因序列的抗體，即人類抗體。此等抗體可使用已知方法生產。

作為嵌合抗體，可例示其中抗體可變區及恆定區源自不同物種的抗體，例如，其中源自小鼠或大鼠的抗體可變區連結至源自人類的抗體恆定區的嵌合抗體(Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81, 6851-6855, (1984))。

作為人類化抗體，可例示藉由僅將異源抗體之互補性決定區(CDR)整合至源自人類的抗體而獲得的抗體(Nature(1986) 321, pp. 522-525)、及藉由CDR移植法將異源抗體框架(framework)的部分胺基酸殘基以及異源抗體的CDR序列移植到人類抗體而獲得的抗體(WO90/07861)、以及使用基因轉換誘變策略而人類化的抗體(美國專利號5821337)。

作為人類抗體，可例示藉由使用具有人類染色體片段(該片段包括人類抗體之重鏈及輕鏈基因)之產生人類抗體的小鼠所產生的抗體(參見Tomizuka, K. et al., Nature Genetics (1997) 16, p.133-143；Kuroiwa, Y. et. al., Nucl. Acids Res. (1998) 26, p.3447-3448；Yoshida, H. et. al., Animal Cell Technology：Basic and Applied Aspects vol.10, p.69-73 (Kitagawa, Y., Matsuda, T. and Iijima, S. eds.), Kluwer Academic Publishers, 1999；Tomizuka, K. et. al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (2000) 97, p.722-727等)。作為替代，可例示藉由噬菌體展示(phage display)獲得的抗體，該抗體選自人類抗體庫(參見Wormstone, I. M. et. al, Investigative Ophthalmology & Visual Science. (2002)43 (7), p.2301-2308；Carmen, S. et. al., Briefings in Functional Genomics and Proteomics (2002), 1(2), p.189-203；Siriwardena, D. et. al., Ophthalmology (2002) 109(3), p.427-431等)。

在本揭示中使用的抗體-藥物結合物中的抗體中，亦包括抗體的經修飾變異體。經修飾變異體係指藉由使依據本揭示之抗體經歷化學或生物學修飾而獲得的變異體。經化學修飾的變異體之例包括下列變異體：包括化學部分(moiety)鍵結至胺基酸骨架的變異體、包括化學部分鍵結至N-鍵結或O-鍵結的碳水化合物鏈的變異體等。經生物學修飾的變異體之例包括：藉由轉譯後修飾(諸如N-鍵結或O-鍵結的醣基化、N-或C-端加工、脫醯胺、天冬胺酸的異構化、或甲硫胺酸的氧化)獲得的變異體、及藉由在原核宿主細胞中表現而已將甲硫胺酸殘基添加到N端的變異體。又，經標識而能夠檢測或分離依據本揭示之抗體或抗原的抗體，例如，酶標識抗體、螢光標識抗體、及親和力標識抗體，亦包括於經修飾的變異體的意義中。依據本揭示之抗體的此種經修飾的變異體對於改善抗體的穩定性及血液滯留性、減少其抗原性、檢測或分離抗體或抗原等為有用的。

又，藉由調節與根據本揭示的抗體鍵結的聚醣的修飾(醣基化、去岩藻糖基化等)，有可能增強抗體依賴性細胞毒性活性。作為調節抗體的聚醣修飾的技術，已知彼等被揭示於WO99/54342、WO00/61739、WO02/31140、WO2007/133855、WO2013/120066等。然而，該技術並未限於此等。於依據本揭示之抗TROP2或抗HER2抗體，亦包括其中聚醣之修飾受到調節之抗體。

已知在培養的哺乳類動物細胞中產生的抗體重鏈羧基端的離胺酸殘基缺失(Journal of Chromatography A, 705：129-134(1995))，亦已知在培養的哺乳類動物細胞中產生的抗體重鏈羧基端的兩個胺基酸殘基(甘胺酸及離胺酸)缺失且新位於羧基端的脯胺酸殘基被醯胺化(Analytical Biochemistry, 360：75-83(2007))。然而，此種重鏈序列的缺失及修飾不影響抗體的抗原結合親和力及效應子功能(補體的活化、抗體依賴性細胞毒性等)。因此，於依據本揭示之抗TROP2或抗HER2抗體中，亦包括經過此種修飾的抗體及抗體的功能片段，且亦包括在重鏈的羧基端缺失一個或兩個胺基酸的缺失變異體，藉由將缺失變異體醯胺化所獲得的變異體(例如，其中羧基端脯胺酸殘基已被醯胺化之重鏈)等。於依據本揭示之抗體重鏈羧基端具有缺失的缺失變異體的類型並未限於上述變異體，只要抗原結合親和力及效應子功能被保留即可。構成依據本揭示的抗體的兩條重鏈可為選自由全長重鏈及上述缺失變異體所組成的群組之一種類型，或可為從中選擇的兩種類型的組合。每個缺失變異體的量的比例可受到產生依據本揭示之抗體的培養的哺乳類動物細胞的類型及培養條件的影響；然而，可示例在依據本揭示之抗體的兩條重鏈兩者中羧基端的一個胺基酸殘基缺失的抗體。

作為依據本揭示之抗TROP2或抗HER2抗體，可例示例如IgG(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)，且可例示IgG1。

於本揭示，術語「抗TROP2抗體」係指與TROP2(TACSTD2：腫瘤相關的鈣訊息傳導子2(Tumor-associated calcium signal transducer 2)；EGP-1)特異性結合之抗體，例如具有藉由與TROP2結合而內化於表現TROP2的細胞中的活性。

抗TROP2抗體之例包括hTINA1-H1L1(WO2015/098099)，且可例示達托泊他單抗。

於本揭示，術語「抗HER2抗體」係指與HER2(人類上皮生長因子受體第2型(Human Epidermal Growth Factor Receptor Type 2)；ErbB-2)特異性結合之抗體，例如具有藉由與HER2結合而內化於表現HER2的細胞中的活性。

抗HER2抗體之例包括曲妥珠單抗(trastuzumab)(U.S.專利號5821337)及帕妥珠單抗(pertuzumab)(WO01/00245)，且可例示曲妥珠單抗。

3. 抗體 - 藥物結合物之生產用於生產根據本揭示之抗體-藥物結合物的藥物-連接子中間體係由下式表示：。

藥物-連接子中間體可表示為化學名N-[6-(2,5-二側氧-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]甘胺醯基甘胺醯基-L-苯基丙胺醯基-N-[(2-{[(1S,9S)-9-乙基-5-氟-9-羥基-4-甲基-10,13-二側氧-2,3,9,10,13,15-六氫-1H,12H-苯并[de]吡喃并[3',4'：6,7]吲并[1,2-b]喹啉-1-基]胺基}-2-側氧乙氧基)甲基]甘胺醯胺，且可參考WO2014/057687、WO2015/098099、WO2019/044947等中的描述而生產。

本揭示中使用的抗體-藥物結合物可藉由使上述藥物-連接子中間體與具有硫醇基(亦稱為硫氫基)的抗TROP2或抗HER2抗體反應而生產。

具有硫氫基之抗TROP2或抗HER2抗體可藉由本領域中熟知的方法而獲得(Hermanson, G. T, Bioconjugate Techniques, pp. 56-136, pp. 456-493, Academic Press(1996))。例如，藉由對抗體中的每鏈間二硫化物使用0.3至3莫耳當量之還原劑，諸如參(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)，並於含有諸如乙二胺四乙酸(EDTA)的螯合劑之緩衝溶液中與抗體反應，可獲得具有在抗體內部分或完全地還原的鏈間二硫化物之具有硫氫基的抗TROP2或抗HER2抗體。

再者，藉由對每一具有硫氫基之抗TROP2或抗HER2抗體使用2至20莫耳當量之藥物-連接子中間體，可生產每抗體分子結合2至8個藥物分子的抗體-藥物結合物。

生產的抗體-藥物結合物之每一抗TROP2或抗HER2抗體分子的結合的藥物分子之平均數可例如藉由下列方法測定：基於抗體-藥物結合物及其結合前驅物在280nm及370nm兩個波長的UV吸光度的測量的計算方法(UV方法)；或基於藉由以還原劑處理抗體-藥物結合物而獲得的片段之通過HPLC測量的定量的計算方法(HPLC方法)。

抗TROP2或抗HER2抗體及藥物-連接子中間體之間的結合和抗體-藥物結合物之每一抗體分子之結合的藥物分子的平均數之計算可參考WO2014/057687、WO2015/098099、WO2017/002776、WO2022/014698等中之描述而進行。

在本揭示中，術語「抗TROP2抗體-藥物結合物」係指一種抗體-藥物結合物，如此於依據本揭示之抗體-藥物結合物中該抗體為抗TROP2抗體。

抗TROP2抗體例如為包含重鏈及輕鏈之抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：3所表示之胺基酸序列所組成的CDRH1[=由SEQ ID NO：1之胺基酸殘基50至54所組成之胺基酸序列]、由SEQ ID NO：4所表示之胺基酸序列所組成的CDRH2[=由SEQ ID NO：1之胺基酸殘基69至85所組成之胺基酸序列]、及由SEQ ID NO：5所表示之胺基酸序列所組成的CDRH3[=由SEQ ID NO：1之胺基酸殘基118至129所組成之胺基酸序列]，該輕鏈包含由SEQ ID NO：6所表示之胺基酸序列所組成的CDRL1[=由SEQ ID NO：2之胺基酸殘基44至54所組成之胺基酸序列]、由SEQ ID NO：7所表示之胺基酸序列所組成的CDRL2[=由SEQ ID NO：2之胺基酸殘基70至76所組成之胺基酸序列]、及由SEQ ID NO：8所表示之胺基酸序列所組成的CDRL3[=由SEQ ID NO：2之胺基酸殘基109至117所組成之胺基酸序列]。

於一具體實施例中，抗TROP2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：9所表示的胺基酸序列所組成的重鏈可變區[=由SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至140所組成之胺基酸序列]，且該輕鏈包含由SEQ ID NO：10所表示之胺基酸序列所組成的輕鏈可變區[=由SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至129所組成之胺基酸序列]。於另一具體實施例中，抗體包含由SEQ ID NO：12所表示的胺基酸序列所組成的重鏈[=由SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至470所組成之胺基酸序列]及由SEQ ID NO：13所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈[=SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至234]，或抗體包含由SEQ ID NO：11所表示的胺基酸序列所組成的重鏈[=由SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至469所組成之胺基酸序列]及由SEQ ID NO：13所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈[=SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至234]。

於抗TROP2抗體-藥物結合物中每一抗體分子結合的藥物-連接子之平均單元數為2至8，或3至5，或3.5至4.5，或約4。

抗TROP2抗體-藥物結合物可參考WO2015/098099、WO2017/002776及WO2022/014698中的描述而生產。

於某些具體實施例中，抗TROP2抗體-藥物結合物為達托泊他單抗德魯特坎(DS-1062)。

在本揭示中，術語「抗HER2抗體-藥物結合物」係指一種抗體-藥物結合物，如此於依據本揭示之抗體-藥物結合物中該抗體為抗HER2抗體。

抗HER2抗體係例如為一種包含重鏈及輕鏈之抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：14之胺基酸殘基26至33所組成之胺基酸序列所組成的CDRH1、由SEQ ID NO：14之胺基酸殘基51至58所組成之胺基酸序列所組成的CDRH2及由SEQ ID NO：14之胺基酸殘基97至109所組成之胺基酸序列所組成的CDRH3，該輕鏈包含由SEQ ID NO：15之胺基酸殘基27至32所組成之胺基酸序列所組成的CDRL1、由SEQ ID NO：15之胺基酸殘基50至52所組成之胺基酸序列所組成的CDRL2及由SEQ ID NO：15之胺基酸殘基89至97所組成之胺基酸序列所組成的CDRL3；且於另一例中，為一種包含重鏈及輕鏈之抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：14之胺基酸殘基1至120所組成之胺基酸序列所組成的重鏈可變區且該輕鏈包含由SEQ ID NO：15之胺基酸殘基1至107所組成之胺基酸序列所組成的輕鏈可變區；且於另一例中，為一種包含重鏈及輕鏈之抗體，該重鏈由SEQ ID NO：14所表示之胺基酸序列所組成且該輕鏈由SEQ ID NO：15所表示之胺基酸序列所組成；或一種包含重鏈及輕鏈之抗體，該重鏈由SEQ ID NO：14之胺基酸殘基1至449所組成且該輕鏈由SEQ ID NO：15之所有胺基酸殘基1至214所組成之胺基酸序列所組成。

在抗HER2抗體-藥物結合物中每一抗體分子結合的藥物-連接子之平均單元數為2至8，或3至8，或7至8，或7.5至8，或約8。

本揭示中使用的抗HER2抗體-藥物結合物可參考WO2015/115091等中的描述而生產。

於某些具體實施例中，抗HER2抗體-藥物結合物為曲妥珠單抗德魯特坎(DS-8201)。

4. 抗 PD-1/TIM-3 雙特異性結合蛋白質如本文中使用，雙特異性結合蛋白質對至少兩個獨立抗原(或標的)或相同抗原內的不同表位具有結合特異性。示例性雙特異性結合蛋白質可結合一標的的兩個不同表位，或者可結合兩個不同標的。其他此種結合蛋白質可將第一標的結合位與另一標的的第二結合位組合。在一些態樣中，結合蛋白質為雙特異性抗體，術語「雙特異性抗體」係指結合兩種不同表位的抗體。表位可在相同的標的抗原上，也可以在不同的標的抗原上。

在一些態樣中，雙特異性抗體以投予單一製造的分子同時靶向兩種抗原，從中提供協同治療效果。

在一些態樣中，本文提供的抗體為單價雙特異性抗體(MBab)。本文描述的單價雙特異性抗體框架為產生雙特異性抗體提供了優越的平台，其實現與雙特異性抗體相關的所有益處，同時降低由於其單價性質而導致的上述潛在治療風險。此外，本文提供的MBab易於表現、穩定且很可能具有低免疫原性。如本文中使用，術語「單價雙特異性」，其可縮寫為「MBab」，係指雙特異性抗體，其每一臂可特異性結合不同的標的抗原，且對於指定的一對之不同標的抗原(A及B)，MBab可與其每一個之一者結合。在某些態樣中，單價雙特異性抗體可特異性與兩個獨立的抗原(或標的)結合或與在相同抗原上的兩個獨立表位結合。典型地，單價雙特異性抗體包含兩個不同可變區。在一些態樣中，對兩種獨立抗原的結合親和力大約相同。在一些態樣中，對兩種獨立抗原的結合親和力為不同的。

雙特異性結合蛋白質包含特異性結合PD-1之第一結合域、及特異性結合TIM-3之第二結合域。

如本文中使用，術語「PD-1」、「程式化死亡1」及「程式化細胞死亡1」被交替使用。完整的PD-1序列可在NCBI參考序列下發現：NG_012110.1。程式化死亡1 (「PD-1」)為T細胞調節因子的延伸CD28/CTLA-4家族之約31 kD的I型膜蛋白成員(參見Ishida, Y. et al. (1992) Induced Expression Of PD-1, A Novel Member Of The Immunoglobulin Gene Superfamily, Upon Programmed Cell Death,” EMBO J. 11：3887-3895)。PD-1在活化的T細胞、B細胞和單核球上表現(Agata, Y. et al. (1996) “Expression of the PD-1 Antigen on the Surface of Stimulated Mouse T and B Lymphocytes,” Int. Immunol. 8(5)：765-772；Martin-Orozco, N. et al. (2007) “Inhibitory Costimulation and Anti-Tumor Immunity,” Semin. Cancer Biol. 17(4)：288-298)。PD-1為一種受體，負責在藉由結合PDL-1或PDL-2活化後，下調(down-regulation)免疫系統(Martin-Orozco, N. et al. (2007) “Inhibitory Costimulation and Anti-Tumor Immunity,” Semin. Cancer Biol. 17(4)：288-298)並有作為細胞死亡誘導因子的功能(Ishida, Y. et al. (1992) “Induced Expression of PD-1, A Novel Member of The Immunoglobulin Gene Superfamily, Upon Programmed Cell Death,” EMBO J. 11：3887-3895；Subudhi, S. K. et al. (2005) “The Balance of Immune Responses：Costimulation Verse Coinhibition,” J. Molec. Med. 83：193-202)。此過程在許多腫瘤中經由PD-L1的過度表現而被利用，導致免疫反應受到抑制。

PD-1係腫瘤學中免疫媒介療法的有效標靶，在治療黑色素瘤和非小細胞肺癌(NSCLC)等疾病的臨床試驗中獲得正向結果。PD-1/PD-L1相互作用的拮抗性抑制會增加T細胞活化，提高宿主免疫系統對腫瘤細胞的辨識和清除。已提出使用抗PD-1抗體治療感染及腫瘤，並增強適應性免疫反應(adaptive immune response)(參見，U.S.專利號7,521,051；7,563,869；7,595,048)。

如本文中使用，術語「含有T細胞免疫球蛋白及黏蛋白域的蛋白質-3」與「TIM-3」可互換使用，並且包括人類TIM-3的變異體、同功型(isoform)、物種同源物(species homologs)。TIM-3為一種I型細胞表面醣蛋白，包含N端免疫球蛋白(Ig)樣域、靠近於膜的具有O-連接醣基化和N-連接醣基化的黏蛋白域、單一跨膜域、及具有一個或多個酪胺酸磷酸化模體的細胞質區域。TIM-3為T細胞/跨膜、免疫球蛋白、及黏蛋白(TIM)基因家族的成員。人類TIM-3的IgV域的胺基酸序列為：SEVEYRAEVGQNAYLPCFYTPAAPGNLVPVCW GKGACPVFECGNVVLRTDERDVNYWTSRYWLNGDFRKGDVSLTIENVTLADSGIYCCRIQIPGIMNDEKFNLKLVIK (SEQ ID NO：45)。T細胞抑制性受體TIM-3在調節抗腫瘤免疫中發揮作用，因為它在產生IFN-γ的CD4+輔助細胞1(Th1)和CD8+T細胞毒性1 (Tc1) T細胞上表現。它最初被鑑定為一種T細胞抑制性受體，作為一種免疫檢查點受體，其功能為特異性限制Th1和Tc1 T細胞反應的持續時間和強度。進一步的研究已識別出TIM-3路徑可能與PD-1路徑協同作用，以促進癌症中CD8+T細胞嚴重功能失調表型的發展。它亦在某些癌症的調節性T細胞(T _reg)中表現。TIM-3亦在先天免疫系統的細胞上表現，包括小鼠肥大細胞、巨噬細胞和樹突狀細胞(DC)的亞群、NK和NKT細胞、以及人類單核球，以及在小鼠原代支氣管上皮細胞株上表現。TIM-3可產生導致Th1和Tc1細胞凋亡的抑制訊號，並可介導凋亡細胞的吞噬作用和抗原的交叉呈現。

TIM-3之IgV域的晶體結構顯示存在兩個反向平行的β折疊，它們藉由二硫鍵束縛。由四個非典型半胱胺酸形成的兩個額外的二硫鍵會穩定IgV域並將CC'環重新定向為FG環，從而形成被認為參與配體結合的「裂縫(cleft)」結構，並且在其他IgSF成員中未發現。而此「裂縫」組裝是在所有TIM家族蛋白(包括TIM-1和TIM-4)中被識別的特徵結構。已發現IgV域與適當配體的接合(engagement)對於TIM-3的免疫調節角色非常重要，並有助於誘導周圍耐受性和抑制抗腫瘤免疫。TIM-3的C’C”環涉及β股C'之後和β股C”之前的胺基酸，例如，胺基酸50至54。DE環由64至73位胺基酸組成，而CC’環和FG環分別由35至43個胺基酸和92至99個胺基酸組成。

TIM-3有幾種已知的配體，諸如半乳糖凝集素-9(galectin-9)、磷脂醯絲胺酸、CEACAM1和HMGB1。半乳糖凝集素-9是一種S型凝集素，具有兩個不同的碳水化合物識別域，並由一個長的柔性連結子連接，且對於較大的含聚-N-乙醯乳糖胺結構具有較強的親和力。半乳糖凝集素-9沒有訊息序列，且局限於細胞質中。然而，其可經由碳水化合物鏈與標的細胞表面上的醣蛋白結合而被分泌並發揮其功能(Freeman G J et al., Immunol Rev. 2010 Can；235(1)：172-89)。基於結合研究、誘變和共晶結構，人類和小鼠TIM-3兩者皆已顯示為磷脂醯基絲胺酸的受體，且已顯示表現TIM-3的細胞結合及/或吞噬表現磷脂醯絲胺酸的凋亡細胞。TIM-3與磷脂醯絲胺酸的相互作用並不排除與半乳糖凝集素-9的相互作用，由於已發現結合位位於IgV域的相對側。鑑於TIM-3路徑參與某些癌症中免疫抑制的關鍵免疫細胞群，它代表了免疫腫瘤學治療的一有吸引力的候選者。參見Anderson, A. C., Cancer Immunol Res., (2014) 2：393-398；及Ferris, R. L., et al., J Immunol. (2014) 193：1525-1530。

如本文中使用，術語「AZD7789」係指一抗TIM-3/PD-1雙特異性抗體，其包含：包含SEQ ID NO：42之胺基酸序列的第一重鏈、包含SEQ ID NO：44之胺基酸序列的第一輕鏈及包含SEQ ID NO：32之胺基酸序列的第二重鏈、以及包含SEQ ID NO：34之胺基酸序列的第二輕鏈。AZD7789被揭示於US專利號11,279,759，其全部內容藉由引用而併入本文。AZD7789為一單價雙特異性人類化免疫球蛋白G1 (IgG1)單株抗體(mAb)，其特異性結合TIM-3及PD-1，且靶向一獨特的TIM-3表位。AZD7789建構在DuetMab分子的骨架上。DuetMab設計描述於Mazor et al., MAbs. 7(2)：377–389, (2015 Mar-Apr 2015)，其全部內容藉由引用而併入本文。「DuetMab,」設計包括用於2個不同重鏈之異二聚化的旋鈕入孔(knobs-into-holes，KIH)技術並藉由以工程化的二硫鍵取代其中一個CH1-CL介面中的天然二硫鍵，而增加同族(cognate)重鏈和輕鏈配對的效率。

AZD7789包括重鏈中的旋鈕突變(knob mutation)(包含與TIM-3結合的可變區)，以及重鏈中的孔突變(hole mutation)(包含與PD-1結合的可變區)。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有特異性結合TIM-3之免疫球蛋白可變(IgV)域的C’C’’及DE環之TIM-3結合域。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有特異性結合在TIM-3之IgV域上的TIM-3結合域(SEQ ID NO：45)，且表位包含TIM-3之N12、L47、R52、D53、V54、N55、Y56、W57、W62、L63、N64、G65、D66、F67、R68、K69、D71、T75、及E77。

在本揭示之一些態樣中，雙特異性結合蛋白質為特異性結合至人類TIM-3及人類PD-1之抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體或其抗原結合片段，且包含AZD7789抗體之CDR。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域包含第一組之CDR：CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2、及CDRL3，其分別包含SEQ ID NO：35、36、37、38、39及40，或SEQ ID NO：35、36、37、38、39及45之胺基酸序列；且PD-1結合域包含第二組之CDR：CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2、及CDRL3，其分別包含SEQ ID NOs：25、26、27、28、29、及30之胺基酸序列。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有： TIM-3結合域，該TIM-3結合域包含：包含SEQ ID NO：41之胺基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO：43之胺基酸序列的輕鏈可變域；及 PD-1結合域，該PD-1結合域包含：包含SEQ ID NO：31之胺基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO：33之胺基酸序列的輕鏈可變域。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有： TIM-3結合域，該TIM-3結合域包含：包含SEQ ID NO：42之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO：44之胺基酸序列的輕鏈；及 PD-1結合域，該PD-1結合域包含：包含SEQ ID NO：32之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO：34之胺基酸序列的輕鏈。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為抗體。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為IgG抗體。在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為IgG1抗體。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為人類化抗體。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為單價。

在本揭示之一些態樣中，抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為DuetMab。

在一些態樣中，雙特異性結合蛋白質之TIM-3結合蛋白質包含無醣基化的Fc區域。在一些態樣中，TIM-3結合蛋白質包含去醣基化的Fc區域。在一些態樣中，TIM-3結合蛋白質包含具有減少的岩藻糖基化或為無岩藻糖基化的Fc區域。

於某些具體實施例中，抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體為AZD7789或sabestomig。

包括AZD7789之抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體可藉由WO2017/193032及WO2022/221245中揭示的方法生產。

5. 抗體 - 藥物結合物與 抗 PD-1/TIM-3 雙特異性結合蛋白質之組合在此揭示之第一組合具體實施例中，與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質組合的抗體-藥物結合物為其中抗體為抗TROP2抗體的抗體-藥物結合物。

在上述第一組合具體實施例之具體實施例中，抗TROP2抗體包含重鏈及輕鏈，該重鏈包含由SEQ ID NO：3所表示的胺基酸序列所組成的CDRH1 [= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基50至54]、由SEQ ID NO：4所表示的胺基酸序列所組成的CDRH2 [= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基69至85]及由SEQ ID NO：5所表示的胺基酸序列所組成的CDRH3 [= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基118至129]，且該輕鏈包含由SEQ ID NO：6所表示的胺基酸序列所組成的CDRL1 [= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基44至54]、由SEQ ID NO：7所表示的胺基酸序列所組成的CDRL2 [= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基70至76]及由SEQ ID NO：8所表示的胺基酸序列所組成的CDRL3 [= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基109至117]。在上述第一組合具體實施例之另一具體實施例中，抗TROP2抗體包含重鏈及輕鏈，該重鏈包含由SEQ ID NO：9所表示的胺基酸序列所組成的重鏈可變區[= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至140]且該輕鏈包含由SEQ ID NO：10所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈可變區 [= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至129]。在上述第一組合具體實施例之另一具體實施例中，抗TROP2抗體包含由SEQ ID NO：12所表示的胺基酸序列所組成的重鏈[= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至470]及由SEQ ID NO：13所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈[= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至234]。在上述第一組合具體實施例之另一具體實施例中，抗TROP2抗體包含由SEQ ID NO：11所表示的胺基酸序列所組成的重鏈[= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至469]及由SEQ ID NO：13所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈[= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至234]。在上述第一組合具體實施例之另一具體實施例中，抗TROP2抗體為達托泊他單抗德魯特坎(DS-1062)。

在此揭示之第二組合具體實施例中，與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質組合的抗體-藥物結合物為其中抗體為抗HER2抗體之抗體-藥物結合物。

在上述第二組合具體實施例之具體實施例中，抗HER2抗體包含重鏈及輕鏈，該重鏈包含由SEQ ID NO：16所表示的胺基酸序列所組成的CDRH1、由SEQ ID NO：17所表示的胺基酸序列所組成的CDRH2及由SEQ ID NO：18所表示的胺基酸序列所組成的CDRH3，且該輕鏈包含由SEQ ID NO：19所表示的胺基酸序列所組成的CDRL1、由由SEQ ID NO：20之胺基酸殘基1至3所組成的胺基酸序列所組成的CDRL2及由SEQ ID NO：21所表示的胺基酸序列所組成的CDRL3。在上述第二組合具體實施例之另一具體實施例中，抗HER2抗體包含重鏈及輕鏈，該重鏈包含由SEQ ID NO：22所表示的胺基酸序列所組成的重鏈可變區且該輕鏈包含由SEQ ID NO：23所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈可變區。在上述第二組合具體實施例之另一具體實施例中，抗HER2抗體包含重鏈及輕鏈，該重鏈係由SEQ ID NO：14所表示之胺基酸序列所組成且該輕鏈係由SEQ ID NO：15所表示的胺基酸序列所組成。在上述第二組合具體實施例之另一具體實施例中，抗HER2抗體包含重鏈及輕鏈，該重鏈係由SEQ ID NO：24所表示之胺基酸序列所組成，該輕鏈係由SEQ ID NO：15所表示之胺基酸序列所組成。在上述第二組合具體實施例之另一具體實施例中，抗HER2抗體為曲妥珠單抗德魯特坎(DS-8201)。

在上述第一組合具體實施例之特別的具體實施例中，抗TROP2抗體-藥物結合物為達托泊他單抗德魯特坎(DS-1062)且抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為AZD7789。

在上述第二組合具體實施例之特別的具體實施例中，抗HER2抗體-藥物結合物為曲妥珠單抗德魯特坎(DS-8201)且抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為AZD7789，亦已知為Sabestomig。

在上列組合具體實施例之一些態樣中，進一步與一或多種化學治療劑組合抗體-藥物結合物及/或抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質而投予。

6. 治療的組合 用途及方法下列描詳者為醫藥產品及治療用途及方法，其中依據本揭示之該抗TROP2或抗HER2抗體-藥物結合物與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質被組合投予。

本揭示之醫藥產品及治療用途及方法可特徵在於抗體-藥物結合物及抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質作為活性成分被分別包含在不同的調配物中，且被同時投予或於不同時間投予；或特徵在於抗體-藥物結合物及抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質作為活性成分被包含在單一調配物中而投予。

在本揭示之醫藥產品及治療方法中，可將本揭示使用的單一抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質與抗體-藥物結合物組合投予，或可將兩種或多種不同抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質與抗體-藥物結合物組合投予。

腫瘤標記物(諸如TROP2或HER2腫瘤標記物)之存在或不存在可藉由以下測定：例如，藉由自癌症患者收集腫瘤組織以製備經福馬林固定、石蠟包埋的(FFPE)試樣並使該試樣進行基因產物(蛋白質)測試，例如，以免疫組織化學(IHC)法、流式細胞儀、或西方印漬術；或基因轉錄測試，例如，以原位雜交(ISH)法、定量PCR法(q-PCR)、或微陣列分析；或藉由自癌症患者收集無細胞循環性腫瘤DNA (ctDNA)並使ctDNA進行以諸如次世代定序(NGS)之方法的測試。

本揭示之醫藥產品及治療方法，當包含抗HER2抗體-藥物結合物時，可使用於表現HER2的癌症，其可為過度表現HER2的癌症(高度或中度)或可為低表現HER2的癌症。

在本揭示中，術語「過度表現HER2的癌症」並未特別限定，只要被本技術領域中具有通常知識者公認為過度表現HER2的癌症即可。過度表現HER2的癌症之某些例可包括於IHC方法中HER2表現的評分為3+的癌症、及於IHC方法中HER2表現的評分為2+且於原位雜交法(ISH)中HER2表現被測定為陽性的癌症。本揭示的原位雜交方法包括螢光原位雜交法(FISH)及雙色素原位雜交法(DISH)。

在本揭示中，術語「低表現HER2的癌症」並未特別限定，只要其被本技術領域中具有通常知識者公認為低表現HER2的癌症即可。低表現HER2的癌症之某些例可包括於IHC方法中HER2表現的評分為2+且於原位雜交法中HER2表現被測定為陰性的癌症、及於IHC方法中HER2表現的評分為1+的癌症。

藉由IHC法對HER2表現程度進行評分的方法、或藉由原位雜交法測定HER2表現為陽性或陰性的方法並未特別限定，只要其為本技術領域中具有通常知識者所公認者即可。該方法之例可包括描述於HER2檢測指南第四版，乳癌(由日本病理學會(Japanese Pathology Board)開發用於乳癌之HER2最適化使用)中之方法。

癌症，特別是關於乳癌的治療，可為過度表現(高度或中度)HER2或低表現HER2的乳癌、或三陰性乳癌、及/或可具有IHC 3+、IHC 2+、IHC 1+或IHC ＞0且＜1+之HER2狀態分數。

本揭示之醫藥產品及治療方法可用於哺乳類動物，例如用於人類。

本揭示之醫藥產品及治療方法之抗腫瘤效果可藉由下列而確認：將癌細胞移植至試驗對象動物以製備一模型並測量藉由施用本揭示之醫藥產品及治療方法而腫瘤體積的減少或延長生命的效果。然後，可藉由與本揭示中使用的抗體-藥物結合物的單一投予、及雙特異性結合蛋白質的單一投予進行抗腫瘤效果的比較，而確認本揭示中使用的抗體-藥物結合物及雙特異性結合蛋白質之組合使用的效果。

本揭示之醫藥產品及治療方法之抗腫瘤效果可在臨床試驗中使用下列評估方法之任一者來確認﹕實性瘤反應評價基準(RECIST)、WHO評價方法、Macdonald評價方法、體重測量、及其他手法，並可基於下列指標而確定﹕完全反應(CR)、部分反應(PR)；疾病進展(progressive disease)(PD)、客觀反應率(objective response rate)(ORR)、反應持續時間(duration of response)(DoR)、無進展存活期(progression-free survival)(PFS)、整體存活期(overall survival)(OS)等。

藉由使用上述方法，可確認本揭示之醫藥產品及治療方法對於現有用於癌症治療的醫藥產品及治療方法在抗腫瘤效果的優越性。

本揭示之醫藥產品及治療方法可延緩癌細胞的發育、抑制其生長、及進而殺死癌細胞。此等效果可使癌症患者免除癌症所引起的症狀、或者實現癌症患者生活品質(QOL)的改善，並藉由維持癌症患者的生命而達成治療效果。即使本揭示之醫藥產品及治療方法不能實現殺死癌細胞，彼等亦可藉由抑制或控制癌細胞的生長而於實現更長期存活的同時實現癌症患者更高的QOL。

可預期本揭示之醫藥產品藉由作為全身治療應用於患者，以及另外藉由局部施用於癌症組織，而發揮治療效果。

在另一態樣中，本揭示之醫藥產品及治療方法提供在使用電離輻射或其他化學治療劑的癌症治療中作為輔助劑的用途。例如，在癌症治療中，此治療可包含與電離輻射或其他化學治療劑同時或依序地投予至需要治療的受試者治療上有效量之醫藥產品。

本揭示之醫藥產品及治療方法可用於作為結合外科手術之輔助化學療法。本揭示之醫藥產品可為了於外科手術前減小腫瘤體積的目的而投予(稱為術前輔助化學療法或新輔助療法(neoadjuvant therapy))，或者可為了防止外科手術後腫瘤復發的目的而投予(稱為術後輔助化學療法或輔助療法)。

在一些具體實施例中，癌細胞可具有BRCA1及/或BRCA2缺陷表型(phenotype)，即癌細胞中的BRCA1及/或BRCA2活性降低或消失。具有這種表型的癌細胞可能是BRCA1及/或BRCA2缺陷的，即癌細胞中BRCA1及/或BRCA2的表現及/或活性可能會降低或消失，例如藉由編碼核酸中的突變或多形性，或藉由編碼調節因子的基因(例如編碼BRCA2調節因子的EMSY基因)的增幅、突變或多形性(Hughes-Davies, et al., Cell,115, 523-535)。BRCA1及BRCA2為已知的腫瘤抑制因子，其野生型等位基因經常在異基因型攜帶者(heterozygous carriers)的腫瘤中喪失(Jasin M., Oncogene,21(58), 8981-93 (2002)；Tutt, et al., Trends Mol Med.,8 (12), 571-6, (2002))。BRCA1及/或BRCA2突變與乳癌的關聯於本領域中被充分表徵(Radice, P.J., Exp Clin Cancer Res.,21(3 Suppl), 9-12 (2002))。編碼BRCA2結合因子的EMSY基因的增幅亦與乳癌和卵巢癌有關。BRCA1及/或BRCA2突變的攜帶者罹患某些癌症的風險亦提高，該癌症包括乳癌、卵巢癌、胰臟癌、前列腺癌、血液癌、胃腸道癌及肺癌。在一些具體實施例中，個體對於BRCA1及/或BRCA2或其調節因子中的一個或多個變異(諸如突變和多形性)為異基因型的。BRCA1和BRCA2變異的檢測為本領域眾所周知，且描述於例如EP 699 754、EP 705 903；Neuhausen, S.L. and Ostrander, E.A., Genet. Test,1, 75-83 (1992)；Chappnis, P.O. and Foulkes, W.O., Cancer Treat Res,107, 29-59 (2002)；Janatova M., et al., Neoplasma,50(4), 246-505 (2003)；Jancarkova, N., Ceska Gynekol.,68{1), 11-6 (2003))。BRCA2結合因子EMSY之增幅的測定描述於Hughes-Davies, et al., Cell,115, 523-535)。

與癌症相關的突變和多形性可藉由檢測變異體核酸序列的存在而在核酸水平上檢測，或藉由檢測變異體(即突變體或等位基因變異體)多肽的存在而在蛋白質水平上檢測。

可投予本揭示之醫藥產品，其含有至少一種醫藥上適合的成分。根據本揭示中使用的抗體-藥物結合物及雙特異性結合蛋白質之劑量、投予濃度等，可從本領域通常使用的調配物添加劑等中適當地選擇及應用醫藥上適合的成分。本揭示中使用的抗體-藥物結合物可例如作為一種含有緩衝劑(諸如組胺酸緩衝劑)、媒劑(vehicle)(諸如蔗糖和海藻糖)、以及界面活性劑(諸如聚山梨醇酯80和20)之醫藥產品而進行投予。本揭示之醫藥產品中使用的抗體-藥物結合物例如可使用作為注射劑，例如使用作為水性注射劑或凍乾注射劑，例如可使用作為凍乾注射劑。在含有本揭示中使用的抗體-藥物結合物的醫藥產品為水性注射劑之情形，水性注射劑可藉由以適合的稀釋劑稀釋，然後作為靜脈輸注給予。稀釋液之例可包括葡萄糖溶液(dextrose solution)及生理食鹽水，於一具體實施例中，可例示葡萄糖溶液，於另一具體實施例中可例示5%葡萄糖溶液。在本揭示之醫藥產品為凍乾注射劑之情形，將所需量的凍乾注射劑預先溶解於注射用水中，可用適合的稀釋劑稀釋後靜脈輸注給予。稀釋液之例可包括葡萄糖溶液及生理食鹽水，於一具體實施例中可例示葡萄糖溶液，於另一具體實施例中，可例示5%葡萄糖溶液。

可應用於投予本揭示之醫藥產品的投予途徑之例可包括靜脈內、皮內、皮下、肌肉內、及腹膜內途徑。於一具體實施例中，投予途徑為靜脈內。

特定疾病狀態的治療性處理所需的劑量大小必然會根據所治療的受試者、投予途徑及所要治療疾病的嚴重程度而變化。有關投予途徑及劑量方案的更多資訊，可參考Comprehensive Medicinal Chemistry第5卷第25.3章(Corwin Hansch；Chairman of Editorial Board), Pergamon Press 1990。

本揭示中使用的抗TROP2抗體-藥物結合物可以以1至180天的間隔投予至人類一次，且可例如，一週一次、每二週一次、每三週一次、或每四週一次投予，且於一特定例中，可每三週一次投予。又，本揭示中使用的抗體-藥物結合物可以約0.001至100 mg/kg之劑量投予，且可以0.8至12.4 mg/kg之劑量投予。例如，抗TROP2抗體-藥物結合物可每三週一次以0.27 mg/kg、0.5 mg/kg、1.0 mg/kg、2.0 mg/kg、4.0 mg/kg、6.0 mg/kg、或8.0 mg/kg之劑量投予，且於特定例中可每三週一次以4.0或6.0 mg/kg之劑量投予。

本揭示中使用的抗HER2抗體-藥物結合物可以以1至180天的間隔投予至人類，以一週、二週、三週或四週之間隔投予，於一特定例中，可以三週之間隔投予。本揭示中使用的抗HER2抗體-藥物結合物可以每次投予約0.001至100 mg/kg之劑量進行投予，並可以每次投予0.8至12.4 mg/kg之劑量進行投予。例如，抗HER2抗體-藥物結合物可以0.8 mg/kg、1.6 mg/kg、3.2 mg/kg、5.4 mg/kg、6.4 mg/kg、7.4 mg/kg、或8 mg/kg之劑量每三週投予一次，於一特定例中，可以5.4 mg/kg或6.4 mg/kg之劑量每三週投予一次。

雙特異性結合蛋白質可以藉由任何適合的投予途徑以適合的劑量投予。

在一些態樣中，以約750 mg或約1500 mg之劑量將AZD7789或其抗原結合片段投予至受試者。在一些態樣中，投予劑量為約1500 mg。在一些態樣中，投予劑量為約750 mg。

在一些態樣中，每次治療週期投予一劑AZD7789或其抗原結合片段至受試者一次。在一些態樣中，治療週期為三週。在一些態樣中，每三週投予一劑AZD7789或其抗原結合片段約12個月、約24個月、約36個月、或約48個月。

在一些態樣中，將sabestomig及達托泊他單抗德魯特坎投予至罹患非小細胞肺癌的受試者，其中以750 mg或1500 mg之劑量投予sabestomig。在一些態樣中，將sabestomig及達托泊他單抗德魯特坎投予至罹患非小細胞肺癌的受試者，其中該受試者先前已接受檢查點抑制劑(CPI)治療，或其中該受試者為未接受過治療的(treatment-naïve)，其中以750 mg或1500 mg之劑量投予sabestomig。在一些態樣中，將sabestomig及達托泊他單抗德魯特坎投予至罹患非小細胞肺癌的受試者，其中該受試者先前已接受檢查點抑制劑(CPI)治療，且其中以750 mg或1500 mg之劑量投予sabestomig，且其中該罹患非小細胞肺癌的受試者具有CPI獲得的抗性。在一些態樣中，CPI獲得的抗性定義為暴露於抗PD-1/PD-L1單藥治療時間大於或等於4個月(且大於或等於2個週期)，或暴露於抗PD-1/PD-L1加上化療的時間大於或等於6個月。在一些態樣中，罹患非小細胞肺癌的受試者具有任何PD-L1狀態。在一些態樣中，罹患非小細胞肺癌的受試者具有小於1%的PD-L1狀態。在一些態樣中，罹患非小細胞肺癌的受試者具有大於1%的PD-L1狀態。在一些態樣中，罹患非小細胞肺癌的受試者具有大於或等於50%的PD-L1狀態。在一些態樣中，罹患非小細胞肺癌的受試者具有1%至49%的PD-L1狀態。在一些態樣中，PD-L1狀態係藉由本領域已知的方法而確定，例如Ventana PD-L1(SP263)測定法。在一些態樣中，非小細胞肺癌受試者無可行的基因體改變(即，以批准的療法的基因改變，諸如表皮生長因子受體[EGFR]、未分化淋巴瘤激酶[ALK]、ROS原致癌基因1[ROS1]、神經營養性酪胺酸受體激酶[NTRK]、原致癌基因B raf [BRAF]、轉染期間重組[RET]、間葉細胞-上皮細胞轉變因子[MET]或其他可操作的驅動激酶)。在一些態樣中，將雙特異性結合蛋白質、抗體或其抗原結合片段與一種或多種化學治療劑組合投予。在一些態樣中，化學治療劑為卡鉑(carboplatin)。在一些態樣中，投予卡鉑多至四個週期。

在一些態樣中，本文揭示的雙特異性結合蛋白質可與醫藥上可接受的載劑、賦形劑或穩定劑一起調配為醫藥組成物。在某些態樣中，此種醫藥組成物適合用於使用本領域已知的方法藉由任何一種或多種投予途徑而投予至人類或非人類動物。術語「醫藥上可接受的載劑」係意指不干擾活性成分的生物活性的有效性之一種或多種非毒性材料。此類製劑通常可含有鹽、緩衝劑、防腐劑、相容性載劑及可選擇的其他治療劑。此類醫藥上可接受的製劑亦可含有適合投予至人類中之相容的固體或液體填充劑、稀釋劑或囊裝物質。可利用於本文描述的調配物中的其他設想的載劑、賦形劑及/或添加劑包括例如調味劑、抗微生物劑、甜味劑、抗氧化劑、抗靜電劑、脂質、蛋白質賦形劑(諸如血清白蛋白、明膠、酪蛋白)、成鹽抗衡離子(諸如鈉)等。適用於本文所述調配物之此等及另外的已知醫藥載劑、賦形劑及/或添加劑為本領域已知，例如，如下所列者﹕“Remington：The Science & Practice of Pharmacy”, 2lst ed., Lippincott Williams & Wilkins, (2005), and in the “Physician’s Desk Reference”, 60th ed., Medical Economics, Montvale, N.J. (2005)。可選擇適合於期望或需要之投予模式、溶解度及/或穩定性的醫藥上可接受的載劑。

在一些態樣中，可將治療組成物調配用於特定的投予途徑，諸如經口、鼻、肺臟、局部(包括口腔(buccal)和舌下)、直腸、陰道及/或腸胃外投予。如本文使用之術語「腸胃外投予」及「被腸胃外投予」係指腸內和局部投予以外之投予模式，通常藉由注射，包括但不限於靜脈內、肌肉內、動脈內、鞘內、囊內、眼眶內、心內、皮內、腹膜內、經氣管、皮下、表皮下、關節內、囊下、蛛網膜下、脊椎內、硬膜外和胸骨內注射和輸注。適合於局部或經皮投予之本揭示的調配物包括粉末、噴霧劑、軟膏、糊劑、乳膏、洗劑、凝膠、溶液、貼劑、及吸入劑。抗體及其他活性成分可在無菌條件下與醫藥上可接受的載劑混合，且可具有任何可能需要的防腐劑、緩衝劑、或推進劑(參見，例如，U.S.專利號7,378,110；7,258,873；及7,135,180；U.S.專利申請公開案號2004/0042972及2004/0042971)。

調配物能以單位劑型存在且可藉由藥學領域已知的任何方法製備。本揭示之醫藥組成物中的活性成分的實際劑量水平可變化，以獲得對於有效實現對於特定患者、組成物和投予模式所需治療反應且對該患者為無毒的活性成分的量(例如，「治療有效量」)。選擇的劑量水平將取決於多種藥物代謝動力學因素，包括所採用特定組成物的活性、投予途徑、投予時間、所採用特定化合物的排泄速率、治療持續時間、與所採用的特定組成物組合使用的其他藥物、化合物及/或材料、所要治療的患者之年齡、性別、體重、病況、總體健康狀況及既往病史、以及醫學領域眾所周知的類似因素。此等劑量可每天、每週、每兩週、每月或較低頻率投予，例如每半年投予，取決於劑量、投予方法、所要治療的病症或症狀、以及個別受試者特徵。劑量亦可經由連續輸注(諸如通過泵)投予。投予的劑量亦可取決於投予途徑。例如，皮下投予可能需要比靜脈內投予更高的劑量。如上所述，可適應任何常用的投劑方案(例如，藉由每天或每週兩次注射或輸注投予1-10mg/kg)並適合於與治療人類癌症患者有關的方法。 [實施例]

參考下面所示的實施例以具體描述本揭示。然而，本揭示並未限於此等例。此外，決不能以限制的方式進行解釋。

實施例 1A ：抗 TROP2 抗體 - 藥物結合物 (DS-1062) 之生產依據WO2015/098099、WO2017/002776及WO2022/014698中描述之生產方法，並使用抗TROP2抗體(包含由SEQ ID NO：12所表示的胺基酸序列所組成的重鏈[= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至470]及由SEQ ID NO：13所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈[= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至234]之抗體)，生產抗TROP2抗體-藥物結合物(DS-1062：達托泊他單抗德魯特坎)，其中下式所表示的藥物-連接子經由硫醚鍵與抗TROP2抗體結合，其中A表示與抗體的連結位置。該抗體-藥物結合物之DAR為4.0。

實施例 1B ：抗 HER2 抗體 - 藥物結合物 (DS-8201) 之生產依據WO2015/115091中描述之生產方法並使用抗HER2抗體(包含由SEQ ID NO：24所表示之胺基酸序列(SEQ ID NO：14之胺基酸殘基1至449)所組成之重鏈及由SEQ ID NO：15之所有胺基酸殘基1至214所組成之胺基酸序列所組成之輕鏈的抗體)，生產抗HER2抗體-藥物結合物(DS-8201：曲妥珠單抗德魯特坎)，其中下式所表示的藥物-連接子經由硫醚鍵與抗HER2抗體結合，其中A表示與抗體的連結位置。該抗體-藥物結合物之DAR為7.7或7.8。

實施例 2 ：抗 PD-1/TIM-3 雙特異性抗體 (AZD7789) 之生產可依據WO2017/193032、WO2022/221245及Mazor et al., MAbs. 7(2)：377–389, (2015 Mar-Apr 2015)中揭示的方法生產AZD7789，一種抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體。

實施例 3 ：抗腫瘤試驗：腫瘤 - 免疫細胞共培養模型的活體外研究抗體-藥物結合物DS-1062與AZD7789的組合。開發一種共培養測定系統，該系統利用黑色素瘤抗原Melan A (MART-1)反應性T細胞和經工程化以表現MART-1抗原和綠色螢光蛋白(GFP)的PC9肺腺癌細胞。簡而言之，使用胰蛋白酶從細胞培養瓶中採集PC9-MART1-GFP細胞，以完全RPMI培養基洗滌一次，重新懸浮並添加至96孔透明底且不透明壁的光學平盤的每個孔中，依照製造商的說明在37°C下5% CO ₂中培養24小時。以10 µg/mL濃度使用抗PD-1/TIM3雙特異性抗體(AZD7789)。以10 µg/ml濃度使用DS-1062。在休止前，立即將處理劑單獨或組合添加到孔中，並以效應子對標的(E:T)比例為1:1 (效應子T細胞對標的腫瘤細胞)加入抗原特異性CD8+T細胞。利用Sartorius Incucyte活細胞分析系統評估腫瘤細胞裂解，其中GFP訊號強度的損失被使用作為細胞死亡的替代標記。在添加T細胞5天後，藉由每孔GFP強度的影像分析而測量腫瘤細胞死亡及細胞溶解百分比。DS-1062、AZD7789及其組合在腫瘤-免疫細胞共培養模型中的活性如圖44和45所示。圖45中所指比較的統計顯著性表示為** p ＜ 0.01。

結果：如圖44和45所示，AZD7789和DS-1062作為單藥治療增強了T細胞介導的PC9-MART1腫瘤細胞的細胞溶解作用。AZD7789和DS-1062的組合達到最高程度的腫瘤細胞溶解作用。

因此，在腫瘤-免疫細胞共培養模型中，與AZD7789組合的DS-1062增強活體外T細胞介導的腫瘤細胞殺傷能力。

實施例 4 ：以達托泊他單抗德魯特坎 (Dato-DXd) 與卡鉑或不含卡鉑的免疫治療組合中罹患晚期或轉移性非小細胞肺癌 (Tropion-Lung04) 參與者的 1b 期、多中心、兩部分、開放標籤研究。

研究群體：罹患晚期或轉移性非小細胞肺癌(NSCLC)且無可行基因體改變的參與者(即，以批准的療法的基因改變，諸如表皮生長因子受體[EGFR]、未分化淋巴瘤激酶[ALK]、ROS原致癌基因1[ ROS1]、神經營養性酪胺酸受體激酶[NTRK]、原致癌基因B raf [BRAF]、轉染期間重組[RET]、間葉細胞-上皮細胞轉變因子[MET]或其他可操作的驅動激酶)。於此研究應考慮具有不可操作的驅動激酶改變且無可用標靶治療的參與者。

小組小組12和小組13(第1部分和第2部分)將招募任何PD-L1狀態的參與者，此等參與者在接受過先前1或2線的晚期或轉移性NSCLC之全身性治療後，具有檢查點抑制劑(CPI)獲得的抗性，其中至少一種之先前線治療應含有批准的抗PD-1/PD-L1。

小組14將招募任何PD-L1狀態的參與者，此等參與者之前未接受過針對晚期或轉移性NSCLC的全身性抗癌治療(treatment-naïve)。

研究設計：這是一項在有或沒有進行最多4個週期的卡鉑治療之罹患晚期或轉移性NSCLC的參與者且無可行的治療方案基因組改變(即，以批准的療法的基因改變，諸如EGFR、ALK、ROS1、NTRK、BRAF、RET、MET、或其他可操作的驅動激酶)之Dato-DXd與免疫治療(AZD7789 [sabestomig])組合的多中心、開放標籤、多劑量及療程1b期研究。具有不可操作的驅動激酶改變且無可用標靶治療或帶有KRAS突變的腫瘤的參與者應考慮參加研究。主要目標係評估Dato-DXd與免疫治療組合使用或不使用最多4個週期的卡鉑治療晚期或轉移性NSCLC參與者的安全性和耐受性。研究族群如上所述。Dato-DXd的兩個劑量水平(4 mg/kg和6 mg/kg)將與AZD7789 [750或1500 mg]）組合進行研究，且在研究小組中使用或不使用卡鉑最多4個週期：

小組 12：在患有CPI獲得的抗性NSCLC的參與者中，6 mg/kg Dato-DXd與1500 mg AZD7789 Q3W的組合；

小組 13：在患有CPI獲得的抗性NSCLC(僅在需要降階(de-escalation)時才會觸發)的參與者中，4 mg/kg Dato-DXd與1500 mg AZD7789 Q3W的組合或6 mg/kg Dato-DXd與750 mg AZD7789 Q3W的組合；

小組 14：在未接受過治療的NSCLC參與者中，4或6 mg/kg Dato-DXd與750或1500 mg AZD7789 Q3W的組合。Dato-DXd和AZD7789的劑量將被認為是由小組12或13的CPI獲得的耐性參與者中可耐受的劑量。

小組12及13將招募在晚期或轉移性NSCLC的先前1或2線全身性治療後獲得對CPI抗性的參與者。小組12及13將招募任何PD-L1狀態的參與者，包括12至20名PD-L1＜1%的參與者。小組14將招募任何PD-L1狀態的參與者，包括約20名PD-L1 1%至49%的參與者。

目標、結果衡量和終點：將評估Dato-DXd和Sabestomig組合治療的安全性和耐受性，以及療效(例如，客觀反應率、反應持續時間、疾病控制率、無病程進展生存期、反應時間、可測量腫瘤的SoD中的最佳百分比變化、總生存期、藥物動力學特性、及免疫原性)，無論是否使用最多4個週期的卡鉑。

實施例 5 ：抗腫瘤試驗：在人類化小鼠的活體內研究抗體-藥物結合物DS-8201與AZD7789的組合。雌性免疫功能低下的NOD.Cg- Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJ (NSG)小鼠在傑克遜實驗室(Jackson Laboratories)被植入CD34 ⁺臍帶血幹細胞。移植後12週，獲得人類化小鼠並給予7天的馴化期。植入後14週，將1e6 Caki-1細胞皮下注射到右側腹部。每週使用電子卡尺測量並使用公式(寬度 ²×長度)/2計算腫瘤體積兩次。對於療效評估，當腫瘤平均體積達到125 mm ³時開始治療。以流動式細胞測量術評估腫瘤藥效學(PD)變化，當腫瘤平均體積達到250 mm ³時即開始治療。基於腫瘤大小和臍帶血捐獻者，小鼠被隨機分配到表1所示的治療組。

表 1

治療	劑量 (mg/kg)	投予途徑	投劑時間表
媒劑	-	IV	第1天
DS-8201	10	IV	第1天
AZD7789	10	IP	第1、4、8、11天
DS-8201 AZD7789	10 10	IV IP	第1天第1、4、8、11天

於 10 mg/kg 之 DS-8201 調配物DS-8201(HA306批次)的投劑溶液係在以5 mL/kg之投劑體積經由靜脈內(IV)注射進行投予之前，藉由將DS-8201儲液(20.1 mg/mL)在媒劑(25mM組胺酸緩衝液，9%蔗糖，pH 5.5)中稀釋至2 mg/mL而製備。

於 10 mg/kg 之 AZD7789 調配物AZD7789(SP22-031批次)的投劑溶液係在以5 mL/kg之投劑體積經由腹膜內(IP)注射進行投予之前，藉由將儲液(50.3 mg/mL)在PBS中稀釋至2 mg/mL而製備。

流動式細胞測量術染色將腫瘤切除並使用Miltenyi人類腫瘤解離套組解離成單細胞懸浮液。在Cellaca MX高通量自動細胞計數器上對單細胞懸浮液進行計數，並以每個樣本1e6-2e6個細胞平鋪在96孔V形底平盤中。細胞在室溫下用Live/Dead Blue染色30分鐘，然後在室溫下用小鼠和人類Fc封阻10分鐘。將全部染色細胞外主混合液在冰上施加30分鐘，然後將細胞在固定緩衝液中於4°C儲存隔夜。每個染色步驟後用染色緩衝液(PBS + 2% BSA)洗滌平盤。第二天早上，加入通透化(permeabilization)緩衝液，在冰上30分鐘。重複人類和小鼠Fc封阻步驟，並在冰上施加細胞內主混合液30分鐘。以染色緩衝液進行最終洗滌後，將樣品再懸浮於120 μL FACS緩衝液中。將平盤過濾並在Cytek Aurora系統上運作。

基於將每個腫瘤的生長曲線擬合到指數模型log10(腫瘤體積)=a+b·時間+誤差，計算每隻動物的腫瘤生長速率，其中a和b分別對應於對數初始體積和生長速率的參數。使用Mann Whitney U 檢定評估組間腫瘤生長率差異的統計顯著性。

對於藉由流動式細胞測量術的藥效學差異，進行Ordinary One-Way ANOVA。P值報告如下；p ≥ 0.05(ns，不顯著)；*，p＜0.05；**，p ＜ 0.01；***，p ＜0.001；****，p ＜ 0.0001。

結果：以DS-8201和AZD7789作為單一藥劑以及兩者的組合治療人類化Caki-1荷瘤小鼠，略述於表1。如圖46(腫瘤體積隨著時間的推移(±SEM))、圖47(腫瘤生長速率(±SEM))和表2所示的結果所見，與單一藥劑DS-8201 (5.5%)或AZD7789 (18.7%)相比，觀察到DS-8201 + AZD7789組合(107.7%)相對於媒劑之增強的腫瘤生長速率抑制。

表 2

治療	生長速率中位數	生長速率抑制 vs. 媒劑 (%)	p- 值 (Mann-Whitney U 檢定 vs. 媒劑 )
媒劑	0.0185	0.0	N/A
DS-8201	0.0131	5.5	1.000
AZD7789	0.0034	18.7	0.6905
DS-8201 AZD7789	-0.0026	107.7	0.0556

藥效學變化將Caki-1細胞皮下植入CD34 ⁺臍帶血移植的NSG小鼠的右腹側，並根據表1中列出的劑量時間表單獨用DS-8201 10mg/kg或與10mg/kg AZD7789組合治療。開始治療後8天，收集腫瘤並經由流動式細胞測量術評估藥效學變化。

如圖48所示的結果所見，治療開始後8天採集的整個腫瘤顯示，與單藥治療AZD7789相比，使用DS-8201+AZD7789組合的腫瘤浸潤CD8 ⁺T細胞顯著增加。與其他組別相比，DS-8201和AZD7789的組合亦觀察到活化的(CD69 ⁺)、增殖(ki67 ⁺)和效應(顆粒酶 B ⁺) CD8 ⁺T細胞比例增加的趨勢。此外，該組合還發現NK (CD56 ⁺)細胞的豐度增加。在骨髓樣室(CD33 ⁺細胞)中，與單藥治療DS-8201相比，顆粒酶B表現顯著增加。

前述書面的說明書被認為足以使得所屬技術領域中具通常知識者實施此等具體實施例。前述說明及實施例詳述某些具體實施例並描述發明人等深思熟慮的最佳模式。然而，應當理解，無論前述內容在文本中顯得如何詳細，此等具體實施例皆可能以多種方式來實施，且申請專利範圍包括其任何的等效物。

序列表之非關鍵詞文字 SEQ ID NO：1 - 抗TROP2抗體的重鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO：2 - 抗TROP2抗體的輕鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO：3 - 重鏈CDRH1之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基50至54] SEQ ID NO：4 - 重鏈CDRH2之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基69至85] SEQ ID NO：5 - 重鏈CDRH3之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基118至129] SEQ ID NO：6 - 輕鏈CDRL1之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基44至54] SEQ ID NO：7 - 輕鏈CDRL2之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基70至76] SEQ ID NO：8 - 輕鏈CDRL3之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基109至117] SEQ ID NO：9 - 重鏈可變區之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至140] SEQ ID NO：10 - 輕鏈可變區之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至129] SEQ ID NO：11 - 重鏈之胺基酸序列[= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至469] SEQ ID NO：12 - 重鏈之胺基酸序列[= SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至470] SEQ ID NO：13 - 輕鏈之胺基酸序列[= SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至234] SEQ ID NO：14 - 抗HER2抗體的重鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO：15 - 抗HER2抗體的輕鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO：16 - 重鏈CDRH1之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：14之胺基酸殘基26至33] SEQ ID NO：17 - 重鏈CDRH2之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：14之胺基酸殘基51至58] SEQ ID NO：18 - 重鏈CDRH3之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：14之胺基酸殘基97至109] SEQ ID NO：19 - 輕鏈CDRL1之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：15之胺基酸殘基27至32] SEQ ID NO：20 - 包含輕鏈CDRL2(SAS)之胺基酸序列之胺基酸序列 [=SEQ ID NO：15之胺基酸殘基50至56] SEQ ID NO：21 - 輕鏈CDRL3之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：15之胺基酸殘基89至97] SEQ ID NO：22 - 重鏈可變區之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：14之胺基酸殘基1至120] SEQ ID NO：23 – 輕鏈可變區之胺基酸序列 [= SEQ ID NO：15之胺基酸殘基1至107] SEQ ID NO：24 - 重鏈之胺基酸序列[= SEQ ID NO：14之胺基酸殘基1至449] SEQ ID NO：25 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1重鏈CDRH1之胺基酸序列 SEQ ID NO：26 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1重鏈CDRH2之胺基酸序列 SEQ ID NO：27 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1重鏈CDRH3之胺基酸序列 SEQ ID NO：28 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1輕鏈CDRL1之胺基酸序列 SEQ ID NO：29 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1輕鏈CDRL2之胺基酸序列 SEQ ID NO：30 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1輕鏈CDRL3之胺基酸序列 SEQ ID NO：31 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1重鏈可變區之胺基酸序列 SEQ ID NO：32 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1重鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO：33 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1輕鏈可變區之胺基酸序列 SEQ ID NO：34 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗PD1輕鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO：35 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3重鏈CDRH1之胺基酸序列 SEQ ID NO：36 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3重鏈CDRH2之胺基酸序列 SEQ ID NO：37 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3重鏈CDRH3之胺基酸序列 SEQ ID NO：38 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3輕鏈CDRL1之胺基酸序列 SEQ ID NO：39 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3輕鏈CDRL2之胺基酸序列 SEQ ID NO：40 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3輕鏈CDRL3之胺基酸序列 SEQ ID NO：41 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3重鏈可變區之胺基酸序列 SEQ ID NO：42 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3重鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO：43 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3輕鏈可變區之胺基酸序列 SEQ ID NO：44 - 抗PD-1/TIM-3雙特異性抗體的抗TIM-3輕鏈之胺基酸序列 SEQ ID NO：45 -人類TIM-3 IgV之胺基酸序列

[抗TROP2抗體]：圖1為顯示抗TROP2抗體的重鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：1)的圖。圖2為顯示抗TROP2抗體的輕鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：2)的圖。圖3為顯示重鏈CDRH1之胺基酸序列(SEQ ID NO：3 [=SEQ ID NO：1之胺基酸殘基50至54])的圖。圖4為顯示重鏈CDRH2之胺基酸序列(SEQ ID NO：4 [=SEQ ID NO：1之胺基酸殘基69至85])的圖。圖5為顯示重鏈CDRH3之胺基酸序列(SEQ ID NO：5 [=SEQ ID NO：1之胺基酸殘基118至129])的圖。圖6為顯示輕鏈CDRL1之胺基酸序列(SEQ ID NO：6 [=SEQ ID NO：2之胺基酸殘基44至54])的圖。圖7為顯示輕鏈CDRL2之胺基酸序列(SEQ ID NO：7 [=SEQ ID NO：2之胺基酸殘基70至76])的圖。圖8為顯示輕鏈CDRL3之胺基酸序列(SEQ ID NO：8 [=SEQ ID NO：2之胺基酸殘基109至117])的圖。圖9為顯示重鏈可變區之胺基酸序列(SEQ ID NO：9 [=SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至140])的圖。圖10為顯示輕鏈可變區之胺基酸序列(SEQ ID NO：10 [=SEQ ID NO：2之胺基酸殘基21至129])的圖。圖11為顯示重鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：11[=SEQ ID NO：1之胺基酸殘基20至469])的圖。 [抗HER2抗體]：圖12為顯示抗HER2抗體的重鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：14)的圖。圖13為顯示抗HER2抗體的輕鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：15)的圖。圖14為顯示重鏈CDRH1之胺基酸序列(SEQ ID NO：16 [=SEQ ID NO：14之胺基酸殘基26至33])的圖。圖15為顯示重鏈CDRH2之胺基酸序列(SEQ ID NO：17 [=SEQ ID NO：14之胺基酸殘基51至58])的圖。圖16為顯示重鏈CDRH3之胺基酸序列(SEQ ID NO：18 [=SEQ ID NO：14之胺基酸殘基97至109])的圖。圖17為顯示輕鏈CDRL1之胺基酸序列(SEQ ID NO：19 [=SEQ ID NO：15之胺基酸殘基27至32])的圖。圖18為顯示包含輕鏈CDRL2(SAS)的胺基酸序列之胺基酸序列(SEQ ID NO：20 [=SEQ ID NO：15之胺基酸殘基50至56])的圖。圖19為顯示輕鏈CDRL3之胺基酸序列(SEQ ID NO：21 [=SEQ ID NO：15之胺基酸殘基89至97])的圖。圖20為顯示重鏈可變區之胺基酸序列(SEQ ID NO：22 [=SEQ ID NO：14之胺基酸殘基1至120])的圖。圖21為顯示輕鏈可變區之胺基酸序列(SEQ ID NO：23 [=SEQ ID NO：15之胺基酸殘基1至107])的圖。圖22為顯示重鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：24 [=SEQ ID NO：14之胺基酸殘基1至449])的圖。 [抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質]：圖23為顯示AZD7789抗PD1重鏈CDRH1之胺基酸序列(SEQ ID NO：24)的圖。圖24為顯示AZD7789抗PD1重鏈CDRH2之胺基酸序列(SEQ ID NO：26)的圖。圖25為顯示AZD7789抗PD1重鏈CDRH3之胺基酸序列(SEQ ID NO：27)的圖。圖26為顯示AZD7789抗PD1輕鏈CDRL1之胺基酸序列(SEQ ID NO：28)的圖。圖27為顯示AZD7789抗PD1輕鏈CDRL2之胺基酸序列(SEQ ID NO：29)的圖。圖28為顯示AZD7789抗PD1輕鏈CDRL3之胺基酸序列(SEQ ID NO：30)的圖。圖29為顯示AZD7789抗PD1重鏈可變區之胺基酸序列(SEQ ID NO：31)的圖。圖30為顯示AZD7789抗PD1重鏈之胺基酸序列 (SEQ ID NO：32)的圖。圖31為顯示AZD7789抗PD1輕鏈可變區之胺基酸序列(SEQ ID NO：33)的圖。圖32為顯示AZD7789抗PD1輕鏈之胺基酸序列 (SEQ ID NO：34)的圖。圖33為顯示AZD7789抗TIM-3重鏈CDRH1之胺基酸序列(SEQ ID NO：35)的圖。圖34為顯示AZD7789抗TIM-3重鏈CDRH2之胺基酸序列(SEQ ID NO：36)的圖。圖35為顯示AZD7789抗TIM-3重鏈CDRH3之胺基酸序列(SEQ ID NO：37)的圖。圖36為顯示AZD7789抗TIM-3重鏈CDRL1之胺基酸序列(SEQ ID NO：38)的圖。圖37為顯示AZD7789抗TIM-3重鏈CDRL2之胺基酸序列(SEQ ID NO：39)的圖。圖38為顯示AZD7789抗TIM-3重鏈CDRL3之胺基酸序列(SEQ ID NO：40)的圖。圖39為顯示AZD7789抗TIM-3重鏈可變區之胺基酸序列(SEQ ID NO：41)的圖。圖40為顯示AZD7789抗TIM-3重鏈之胺基酸序列 (SEQ ID NO：42)的圖。圖41為顯示AZD7789抗TIM-3輕鏈可變區之胺基酸序列(SEQ ID NO：43)的圖。圖42為顯示AZD7789抗TIM-3輕鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：44)的圖。圖43為顯示人類TIM-3 IgV域之胺基酸序列(SEQ ID NO：45)的圖。 [實驗]：圖44及45表示顯示在腫瘤-免疫細胞共培養模型中DS-1062、AZD7789及其組合的腫瘤細胞細胞溶解活性的圖。圖46及47表示顯示在人類化小鼠中DS-8201、AZD7789及其組合之抗腫瘤活性。圖48表示顯示在人類化小鼠中與DS-8201單獨或與AZD7789組合相關的藥效學變化的圖。

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無。

Claims

一種醫藥產品，其包含組合投予用之抗體-藥物結合物及抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，其中該抗體-藥物結合物為下式所表示的藥物-連接子：經由硫醚鍵與抗TROP2或抗HER2抗體結合之抗體-藥物結合物，其中A表示與抗體的連結位置。
如請求項1之醫藥產品，其中將該藥物-連接子與抗TROP2抗體結合。
如請求項2之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：3所表示的胺基酸序列所組成的CDRH1、由SEQ ID NO：4所表示的胺基酸序列所組成的CDRH2及由SEQ ID NO：5所表示的胺基酸序列所組成的CDRH3，且該輕鏈包含由SEQ ID NO：6所表示的胺基酸序列所組成的CDRL1、由SEQ ID NO：7所表示的胺基酸序列所組成的CDRL2及由SEQ ID NO：8所表示的胺基酸序列所組成的CDRL3。
如請求項3之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：9所表示的胺基酸序列所組成的重鏈可變區且該輕鏈包含由SEQ ID NO：10所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈可變區。
如請求項3或4之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體為包含由SEQ ID NO：12所表示的胺基酸序列所組成的重鏈及由SEQ ID NO：13所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈的抗體。
如請求項5之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體在重鏈羧基端缺少離胺酸殘基。
如請求項1至6中任一項之醫藥產品，其中該抗體-藥物結合物中每個抗體分子結合的該藥物-連接子的平均單元數係在3.5至4.5的範圍內。
如請求項7之醫藥產品，其中該抗TROP2抗體-藥物結合物為達托泊他單抗德魯特坎(datopotamab deruxtecan) (DS-1062)。
如請求項1之醫藥產品，其中該藥物-連接子與抗HER2抗體結合。
如請求項9之醫藥產品，其中該抗HER2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：16所表示的胺基酸序列所組成的CDRH1、由SEQ ID NO：17所表示的胺基酸序列所組成的CDRH2及由SEQ ID NO：18所表示的胺基酸序列所組成的CDRH3，且該輕鏈包含由SEQ ID NO：19所表示的胺基酸序列所組成的CDRL1、由由SEQ ID NO：20之胺基酸殘基1至3所組成的胺基酸序列所組成的CDRL2及由SEQ ID NO：21所表示的胺基酸序列所組成的CDRL3。
如請求項10之醫藥產品，其中該抗HER2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈包含由SEQ ID NO：22所表示的胺基酸序列所組成的重鏈可變區且該輕鏈包含由SEQ ID NO：23所表示的胺基酸序列所組成的輕鏈可變區。
如請求項11之醫藥產品，其中該抗HER2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈係由SEQ ID NO：14所表示的胺基酸序列所組成且該輕鏈係由SEQ ID NO：15所表示的胺基酸序列所組成。
如請求項11之醫藥產品，其中該抗HER2抗體為包含重鏈及輕鏈的抗體，該重鏈係由SEQ ID NO：24所表示的胺基酸序列所組成且該輕鏈係由SEQ ID NO：15所表示的胺基酸序列所組成。
如請求項9至13中任一項之醫藥產品，其中該抗體-藥物結合物中每個抗HER2抗體分子結合的藥物-連接子的平均單元數係在7至8的範圍內。
如請求項14之醫藥產品，其中該抗HER2抗體-藥物結合物為曲妥珠單抗德魯特坎(trastuzumab deruxtecan) (DS-8201)。
如請求項1至15中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域特異性結合至TIM-3之免疫球蛋白可變(IgV)域(SEQ ID NO：45)的C’C’’及DE環。
如請求項1至16中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域特異性結合至TIM-3之IgV域(SEQ ID NO：45)上的表位且該表位包含N12、L47、R52、D53、V54、N55、Y56、W57、W62、L63、N64、G65、D66、F67、R68、K69、D71、T75、及E77。
如請求項1至17中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域及PD-1結合域，該TIM-3結合域包含第一組之CDR：CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2、及CDRL3，該等CDR分別包含SEQ ID NO：35、36、37、38、39及40，或SEQ ID NO：35、36、37、38、39及45之胺基酸序列；且該PD-1結合域包含第二組之CDR：CDRH1、CDRH2、CDRH3、CDRL1、CDRL2、及CDRL3，該等CDR分別包含SEQ ID NO：25、26、27、28、29、及30之胺基酸序列。
如請求項1至18中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域包含：包含SEQ ID NO：41之胺基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO：43之胺基酸序列的輕鏈可變域；且具有PD-1結合域，該PD-1結合域包含：包含SEQ ID NO：31之胺基酸序列的重鏈可變域及包含SEQ ID NO：33之胺基酸序列的輕鏈可變域。
如請求項1至18中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質具有TIM-3結合域，該TIM-3結合域包含：包含SEQ ID NO：42之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO：44之胺基酸序列的輕鏈；且具有PD-1結合域，該PD-1結合域包含：包含SEQ ID NO：32之胺基酸序列的重鏈及包含SEQ ID NO：34之胺基酸序列的輕鏈。
如請求項1至20中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為抗體。
如請求項21之醫藥產品，其中該抗體為IgG抗體。
如請求項21之醫藥產品，其中該抗體為IgG1抗體。
如請求項22或23之醫藥產品，其中該抗體為人類或經人類化。
如請求項21至24中任一項之醫藥產品，其中該雙特異性抗體為單價。
如請求項1至25中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為DuetMab。
如請求項1至26中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質包含無醣基化的Fc區域。
如請求項1至26中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質包含去醣基化的Fc區域。
如請求項1至26中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質包含具有減少的岩藻糖基化或無岩藻糖基化的Fc區域。
如請求項1至29中任一項之醫藥產品，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質為「AZD7789」。
如請求項1至30中任一項之醫藥產品，其中該產品為組成物，其包含該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，用於同時投予。
如請求項1至30中任一項之醫藥產品，其中該產品為組合製劑，其包含該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質，用於依序投予或分開的同時投予。
如請求項1至32中任一項之醫藥產品，其中該產品係用於治療癌症。
如請求項33之醫藥產品，其中該癌症為選自由下列組成的群組之至少一者﹕乳癌、肺癌、結腸直腸癌、胃癌、食道癌、頭頸癌、食道胃接合部腺癌(esophagogastric junction adenocarcinoma)、膽道癌、佩吉特氏病(Paget’s disease)、胰臟癌、卵巢癌、子宮癌肉瘤(uterine carcinosarcoma)、泌尿上皮癌(urothelial cancer)、前列腺癌、膀胱癌、子宮內膜癌、胃腸道間質瘤、消化道間質瘤、子宮頸癌(uterine cervix cancer)、鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝癌、肝細胞癌、子宮體癌(corpus uteri carcinoma)、腎臟癌、外陰癌(vulval cancer)、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤、骨髓瘤、多形性神經膠質母細胞瘤、骨肉瘤、肉瘤、及黑色素瘤、子宮頸癌(cervical cancer)、子宮癌、睾丸癌、及腎細胞癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為肺癌。
如請求項35之醫藥產品，其中該肺癌為非小細胞肺癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為結腸直腸癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為乳癌。
如請求項38之醫藥產品，其中該乳癌為HER2陽性乳癌。
如請求項38之醫藥產品，其中該乳癌為低HER2乳癌。
如請求項38之醫藥產品，其中該乳癌為三陰性乳癌。
如請求項38之醫藥產品，其中該乳癌為激素受體(HR)-陽性、HER2-陰性乳癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為胃癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為胰臟癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為卵巢癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為前列腺癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為腎臟癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為膀胱癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為子宮內膜癌。
如請求項34之醫藥產品，其中該癌症為膽道癌。
一種與抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質組合在受試者中癌症的治療使用的抗體-藥物結合物，其中該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質係如請求項1至30中任一項所定義。
如請求項51之使用的抗體-藥物結合物，其中該癌症為如請求項34至50中任一項所定義。
如請求項51或52之使用的抗體-藥物結合物，其中該使用包含依序投予該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質。
如請求項51或52之使用的抗體-藥物結合物，其中該使用包含分開且同時地投予該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質。
如請求項51至54中任一項之使用的抗體-藥物結合物，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質以約750 mg或約1500 mg之劑量投予。
如請求項55之使用的抗體-藥物結合物，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質每治療週期投予一次，其中該治療週期為約三週。
如請求項51至56中任一項之使用的抗體-藥物結合物，其中該癌症為非小細胞肺癌，且其中該受試者為未接受過治療的(treatment-naïve)，或其中該受試者具有CPI獲得的抗性。
如請求項57之使用的抗體-藥物結合物，其中該受試者具有任何PD-L1狀態。
如請求項58之使用的抗體-藥物結合物，其中該受試者具有1%至49%之PD-L1狀態，或其中該受試者具有少於1%之PD-L1狀態。
如請求項51至59中任一項之使用的抗體-藥物結合物，其中該受試者無可行的基因體改變。
一種治療癌症之方法，其包含組合投予如請求項1至30中任一項所定義的抗體-藥物結合物及抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質至需要其之受試者。
如請求項61之方法，其中該癌症為如請求項34至50中任一項中所定義。
如請求項61或62之方法，其中該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質被依序地投予。
如請求項61或62之方法，其中該抗體-藥物結合物及該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質被分開且同時地投予。
如請求項61至64中任一項之方法，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質以約750 mg或約1500 mg之劑量投予。
如請求項65之方法，其中該抗PD-1/TIM-3雙特異性結合蛋白質每治療週期投予一次，其中該治療週期為約三週。
如請求項61至66中任一項之方法，其中該癌症為非小細胞肺癌，且其中該受試者為未接受過治療的，或其中該受試者具有CPI獲得的抗性。
如請求項67之方法，其中該受試者具有任何PD-L1狀態。
如請求項68之方法，其中該受試者具有1%至49%之PD-L1狀態，或其中該受試者具有少於1%之PD-L1狀態。
如請求項61至69中任一項之方法，其中該受試者無可行的基因體改變。