WO1993012117A1

WO1993012117A1 - Immunosuppressive agent

Info

Publication number: WO1993012117A1
Application number: PCT/JP1992/001619
Authority: WO
Inventors: Takeki Okumoto; Kenji Chiba; Yukio Hoshino; Hirotsugu Komatu; Mariko Nagasawa; Hidekazu Aratani; Michio Terasawa; Minoru Moriwaki
Original assignee: Yoshitomi Pharmaceutical Industries Ltd
Current assignee: Mitsubishi Tanabe Pharma Corp
Priority date: 1991-12-11
Filing date: 1992-12-10
Publication date: 1993-06-24
Anticipated expiration: 1994-06-11
Also published as: DE69230891D1; ES2143993T3; EP0656361A1; DE69230891T2; GR3033434T3; EP0656361B1; EP0656361A4; DK0656361T3; US5686479A; ATE191345T1

Description

明細書

免疫抑制剤

「技術分野 J

本発明は、特定のチエノトリァゾロジァゼピン化合物からなる免疫抑制剤、免疫抑制方法および用途に関する。

「背景技術」

近年、臓器移植が盛んに行われるようになり、その際に生じる拒絶反応を抑制するために、シクロスポリン、ァザチォプリン、ステロイド剤などの免疫抑制作用剤が使用されている。しかしながら、これら免疫抑制剤を多用すると、腎毒性やその他重篤な副作用が出現し、医療分野では問題となっていた。

ところで、炎症性疾患ゃァレルギー性疾患などの治療薬として期待されている血小板活性化因子拮抗剤（P A F拮抗剤）がシクロスポリンの免疫抑制作用を増強することが、たとえば Transplantat ion Proceedings 第 2 0巻第 2号追補 1 ( 2月） 1 9 8 8年第 3 1 3〜3 1 5頁に、また特表平 3— 5 0 0 8 9 8号公報にはチエノトリァゾロジァゼピン化合物と併用することによりシクロスポリンの副作用が減少する旨記載されている。

また、細胞接着分子が臓器移植の際の拒絶反応に重要な役割をしていることが明らかにされた。細胞接着分子として知られている L F A— 1 (leukocyte funct ion-associated ant igen - 1といい、 CDUa( a鎖) と CD18 ( yS鎖) から成る分子）および I C AM— 1 (intercel l ular adhesi on molecule-1という）に特異的に結合する抗体を、同種心移植を行ったマウスに投与したところ、臓器移植に伴う拒絶反応は抑制され、移植心は長期に生着することが報告された（Science, 225卷、 1 1 2 5〜1 1 2 7頁、 1 9 9 2年 2月 2 8日）。したがって、細胞接着分子である L F A— 1 と I C AM— 1を介する細胞接着を特異抗体で阻害することにより、臓器移植に伴う拒絶反応を抑制することが可能である。

さらに、近年、自己免疫疾患の一つとして重要視されている慢性関節リウマチは、それ自体慢性疾患であって、しかも進行性であり、やがては関節の機能障害をもたらすことから、その治療方法の確立が焦眉の課題となっている。関節リウマチに対する薬物療法としては、非ステロイド性抗炎症剤、ステロイド剤、免疫調節剤等があげられるが、非ステロイド性炎症剤では十分な効果が得られないこと、ステロイド剤や免疫調節剤では副作用の頻度が高く、しばしば重篤な事例に至ることから、さらに有効な治療薬の開発が望まれている。ところで、細胞接着分子 I CAM- 1に特異的に結合する抗体をラットアジュバント関節炎モデルに投与した場合、関節炎の発症が抑制されることが報告されている（Jouranl of Im munology 1 4 7巻、 4 1 6 7〜4 1 7 1頁、 1 9 9 1年 1 2月 1 5曰）。

しかしながら、抗体を投与した場合には、アレルギーやアナフィラキシーショックなどを引き起こす可能性があり、使用方法が限定される。

したがって、細胞接着分子 L F A— 1、 I C AM— 1等を介する細胞接着を阻害する薬物、あるいはこれら細胞接着分子の細胞表面への発現を抑制する薬物は、臓器移植に伴う拒絶反応を抑制すること、および自己免疫疾患の治療に有用であることが期待され、副作用の少ない免疫抑制剤となる可能性が指摘されている。

「発明の開示 J

本発明者らは、上記課題を解决するために鋭意検討を行ったところ、ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリアゾロジァゼピン化合物がシクロスポリンなどの免疫抑制剤の作用を増強すること、それ自体免疫抑制作用を有すること、血管内皮細胞への白血球接着を阻害する作用を有していること、さらに、関節炎抑制作甩を有していることを見出し、本発明を完成させるに至った。

すなわち、本発明はジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリァゾロジァゼピン化合物（以下、本化合物ともいう）を有効成分とする免疫抑制剤、自己免疫疾患治療剤、免疫抑制作用増強剤または細胞接着阻害剤、本化合物をヒトを含む哺乳動物に投与することを特徴とする免疫抑制方法、自己免疫疾患治療方法、免疫抑制作用増強方法または細胞接着阻害方法、および免疫抑制剤、自己免疫疾患治療剤、免疫抑制作用増強剤または細胞接着阻害剤を製造するための本化合物の用途を提供する。

本化合物中、アルキルとは炭素数 1〜 6個の直鎖または分技鎖伏の了ルキルであり、メチルが好ましい。

本化合物とは、 4一（2—クロ口フエニル）一 2— （2— （4一イソプチルフェニル）ェチル）一 6， 9 一ジメチルー 6 H—チエノ〔3 , 2— f 〕〔1， 2， 4〕トリァゾロ〔4, 3— a〕〔し 4〕ジァゼピン（以下、化合物 Aともいう）、 3— 〔4一（2—クロ口フエニル）一 6, 9—ジメチル一 6 H—チエノ

〔3， 2— f 〕〔 1 , 2, 4〕トリァゾロ〔4， 3— a〕〔 1 , 4〕ジァゼピン一 2—ィル〕プロピオン酸モルホリド（以下、化合物 Bともいう）またはそれらの光学異性体（たとえば、 6 S— （一）体）、または（+ ) — 6— （2—クロ口フエニル）一 3—シクロプロパンカルボ二ルー 8, 1 1 —ジメチルー 2, 3, 4， 5—テトラヒドロ一 8 H—ピリド〔4' , 3' : 4， 5〕チエノ〔3, 2 - f )

〔1， 2, 4〕トリァゾロ〔4, 3— a〕〔 1 , 4〕ジァゼピン（以下、化合物 Cともいう）など、またはそれらの医薬上許容されうる塩（塩酸塩、臭化水素酸塩、マレイン酸塩など）もしくは水和物（ 1水和物、 1ノ2水和物、 3/2水和物、 2水和物、 3水和物など）が好ましく、これらの化合物は特開平 1 一 1 5 6 9 8 2号、同 2— 2 5 6 6 8 1号、同 2— 2 5 6 6 8 2号の各公報に記載された方法により製造され、これら公報を本明細書に参考として引用する。

本発明の医薬を製造するにあたって、本化合物は治療上有効な量が含有されているのが好ましく、通常 0. 1〜5 Omg程度でよい。当該医薬はこれら有効成分の他に、医薬上許容されうる担体、賦形剤、希釈剤、溶解補助剤、崩壊剤、結合剤などと混合して錠剤、散剤、カブセル剤、注射剤、坐剤、点滴剤などとすることにより経口的または非経口的に安全に患者に投与することができる。投与量は、通常 1 日当たり成人に対し、経口投与で 5〜 1 0 0mg、静脈投与で 1〜5 Omg程度である。

免疫抑制作用増強剤として免疫抑制剤と併用する場合は、本化合物を含有する医薬と免疫抑制剤とを別個に投与することが好ましく、このような投与形態も本発明の範囲内であることはいうまでもない。この場合、免疫抑制剤の処方は公知のものでもよいし、また当業者のなしうる範囲内で改良された処方も使用でき、本化合物含有医薬に対し、 0. 0 1〜5 0倍量の範囲内で併用可能である。なお、臓器移植に際しては、ドナー側にも臓器移植前に本発明において用いられる本化合物含有医薬を投与するか、または摘出臓器に本化合物含有医薬を注入しておいてもよい。

免疫抑制剤としてはシクロスポリン、ァザチォプリン、ステロイド剤、 FK— 506 (EP-A 18416公報など）、 I S P— Iおよびその関連化合物 (WO 90Z02727公報、特開平 3— 128347号公報）などがあげられる

また、関節リウマチ治療薬（抗リウマチ剤）として用いる場合には、非ステロイド性抗炎症剤、ステロイド性抗炎症剤、免疫調節剤等と併用することもできる。本発明の医薬は臟器ゃ骨髄移植の際に生ずる拒絶反応を抑制するために、または関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、シヱーグレン病、多発性硬化症、重症筋無力症、 I型糖尿病、内分泌性眼障害、原発性胆汁性肝硬変、クローン病、糸球体腎炎、サルコィドーシス、乾癬、天痘瘡、再生不良性貧血、特発性血小板減少性紫斑病などの自己免疫疾患を予防または治療するために使用される。

「図面の簡単な説明 j

被検体無処置ラット、シクロスポリン（CsA) 3mgZkg投与ラットおよび化合物 A (Y— 24180と表示） 1 OmgZkgおよびシクロスポリン 3m g/k g投与ラットの 7日目における皮 It移植実験における皮膚の移植状況を示す図面を写真により第 1〜3図に示す。すなわち、第 1図は 4週齢の雄性 WKA Hラットの全層皮膚移植片を 4週齢の雄性 F 344ラッ卜の背部移植床に縫合により移植を行レ、、被検体による処置を行わなかった事例を、第 2図は同実験モデルに対し、シクロスポリン（CsAと表示） 3mgZkgを 1曰 1回腹腔内投与した事例を、第 3図はシクロスポリン 3mg kgを 1曰 1回腹腔内投与し、同時に化合物 A (Y— 24180と表示）を 1日 1回 1 OmgZkg経口投与した事例を示す。第 4図はマウスにおけるコラーゲン誘発関節炎に対する作用効果を示した説明図である。図中一〇ー〇一は対照群を、一鲁ー鲁一は化合物 A 3mg Zkg経口投与群を、一△—△一は化合物 Al OmgZkg経口投与群を、一□ 一□一はハイドロコルチゾン 1 OmgZkg経口投与群を示す。

「発明を実施するための最良の形態」

以下、製剤処方例および実験例により本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されないことはいうまでもない。

製剤処方例 1

(1) シクロスポリン内服薬（商品名：サンディミユン内服薬） (2) 化合物 A 0. 5mg含有錠剤：

化合物 Aを 0. 5部、乳糖 2 5部、結晶セルロース 3 5部およびコーンスターチ 3部とをよく混和したのち、コーンスターチ 2部で製した結合剤とよく練合した。この練合物を 1 6メッシュで篩過し、オーブン中 5 0でで乾燥後、 24メッシュで篩過した。ここに得た練合粉体とコーンスターチ 8部、結晶セルロース 1 1部およびタルク 9部とをよく混合したのち、圧搾打錠し、 1锭あたり有効成分 0. 5 mg含有の錠剤を得る。

臓器または骨髄移植手術前および Zまたは後において、それぞれを連続的に、または間欠的に患者に投与する。

製剤処方例 2

( 1 ) シクロスポリン注射剤（商品名：サンディミュン注）

(2) 化合物 B l mg含有注射剤：

化合物 B l . Omgと塩化ナトリウム 9. Omgを注射用水にて溶解し、濾過して発熱物質を除去し、濾液を無菌下にアンプルに移し、殺菌して、溶融により密封することにより製造される。

製剤処方例 3

化合物 A O. 5部、乳糖 25部、結晶セル□ース 3 5部およびコーンスターチ 3部とをよく混和したのち、コーンスターチ 2部で製した結合剤とよく練合したこの練合物を 1 6メッシュで篩過し、オーブン中 5 0てで乾燥後、 24メッシュで篩過した。ここに得た練合粉体とコーンスターチ 8部、結晶セルロース 1 1部およびタルク 9部とをよく混合したのち、圧搾打錠して 1錠あたり有効成分 0. 5 mg含有の錠剤を得る。

製剤処方例 4

化合物 A l . Omgと塩化ナトリウム 9. Omgを注射用水にて溶解し、濾過して発熱物質を除去し、濾液を無菌下にアンプルに移し、殺菌後、溶融密封することにより有効成分 1. Omg含有注射剤を得る。

実験例 1 ：ラット同種皮膚移植でのシクロスポリンとの併用による生着延長効果の増強作用

ラット同種皮膚移植は、以下の方法で行った。 4週齢の雄性 WKAHラット

(1群 5匹）の全層皮膚移植片（2 X 2 cm) を 4週齢の雄性 F 344ラッ卜の背部移植床に縫合により移植を行い、無菌のガーゼでおおい包帯した。包帯は移植後 6日目に除去し、移植片が拒絶されるまで毎日観察を行った。皮膚移植片の拒絶は、移植片の上皮が 9 0%以上褐色になり、壊死を起こした時点で半！ [定した c 移植後から壊死を起こした時点までの日数を移植片の生着日数とした。

試験化合物は 0. 5%メチルセルロースに懸濁して、移植当日より 1日 1回、移植片が拒絶されるまで経口投与を行った。

シクロスボリンは注射用製剤を生理食塩水で希釈して、 1日 1回、 9日目まで 1 0回腹腔内投与を行った。

結果は各ラットでの移植片の生着日数に基づき、平均生着日数を求め、第 1〜 3表にまとめた。

第 1 表ドナーレシピ被検体用量移植片の平均生着ェント Crag/kg) 日数土標準偏差

WAH F344 6.4±0.5

WKAH F344 化合物 A 10 6.8±0.4

WKAH F344 シクロスポリン 3 8.2±0.4

WKAH F344 化合物 A 10 10.2±0.8

+シクロスポリン 3

WKAH F344 化合物 B 10 9.2±0.4

+シクロスポリン 3

WKAH F344 化合物 C 10 9.6±0.5

+シクロスポリン 3

(* , ·-マン 'ウィットニイ U試験によりそれぞれ ρく 0. 05、 p < 0 0 1で対照群に対し、有意であることを意味する。）

第 1表から明らかなように、シクロスポリンに化合物 A、 Bまたは Cを併用投与すると、有意に移植片の生着日数を延長することが判つた。

第 2 表ドナーレシピ被検体用量移植片の平均生着ェント (rag/kg) 日数土標準偏差

WKAH F344 6.2±0.4

WKAH F344 シクロスポリン 3 8.2±0.4

WKAH F344 化合物 A 0.3 9.6±0.9

+シクロスポリン 3

WKAH F344 化合物 A 1 10.0±0.7

+シクロスポリン 3

WKAH F344 化合物 A 3 10.2±0.8

+シクロスボリン 3

WKAH F344 化合物 A 10 10.2±0.8

+シクロスポリン 3

( ：マン ·ゥイツトニイ U試験により p < 0. 0 1で対照群に対し、有意であることを意味する。）

第 2表から明らかなように、化合物 Aはシクロスボリン投与群に対し、有意に- しかも用量依存的に移植片の生着日数を延長することが判明した。ドナーレシピ被検体用量移植片の平均生着ェント Cmg/kg) 日数土標準偏差醒 F344 6.4±0·5 醒 F344 シクロスボリン 10 10.8±0.8 醒 F344 シクロスボリン 30 14.4±0.5

WKAH F344 化合物 A 10 13.4±0.5

+シクロスボリン 10

WKAH F344 化合物 A 10 18.8±1.6

十シクロスポリン 30 * :マン、ウイットニイ U試験により ρく 0. 0 1で対照群に対し、有意であることを意味する。）

第 3表から明らかなように、化合物 Αはシクロスボリン高濃度処置群に対しても有意に移植片の生着日数を延長させる。

実験例 2 ：培養ヒト血管内皮細胞（HUVEC) への U 937細胞（ヒト組織球性白血病細胞）接着阻害作用

HUVE Cを牛胎児血清 (20%) 、牛脳由来血管内皮細胞増殖因子（20 g/ml) およびへパリン（1 0 OyWgZml) を含む 1 99培地に浮遊させ、コラーゲンでコートされた 96ゥエル組織培養用ブレートに添加後、 37°C、 5 %C0₂ 存在下で塔養した。細胞がコンフルェントに達した時点でインターロイキン 1 (1 OUZml) を添加し、さらに 24時間培養した。洗净後、ロイコトリエン B4 (1 ^M) および試験化合物としての化合物 Aと共に U 937細胞 (3 X 1 05細胞/ゥエル）を添加し、 30分間ィンキュベートした。プレートを倒置することにより非接着細胞を除去した後、ローズベンガル溶液（リン酸緩衝生理食塩水中 0. 25%) を加え、 5分間放置した。 1 99培地を用いて非接着細胞を 2回洗浄■除去した後、リン酸緩衝生理食塩水で希釈した 50 %ェタノ ―ルを添加し、 20分間放置することにより細胞内に取り込まれたローズべンガル色素を漏出させた。 9 6ゥヱルプレート用吸光度計を用いて 5 7 0 nmの吸光度を測定し、 HUVECのみのゥエルの吸光度を差し引いた値を U 9 3 7細胞接着の指標とした。

実験結果は以下の第 4表にまとめた通りである。

第 4 表ロイコトリェン B4 化合物 A U937細胞接着抑制率

( M) (570nmの吸光度）（）

0 0 0.143 100 1 0 0.449 0 1 0.1 0.451 -0.7 1 1 0.404 14.7 1 10 0.199 81.6 上記の表のように、化合物 Aは濃度依存的に血管内皮細胞への U 9 3 7細胞接着を抑制し、その I C₅₀値は約 3 zMであった。

実験例 3 ：ヒト末梢血好中球の CD 1 8発現に対する作用

ほとんどの白血球系細胞の表面に発現する接着分子のひとつである L F A— 1 の) S鎖を構成する CD 1 8抗原の発現に対する作用を検討した。

デキストランを用いて調製したヒト末梢血好中球を牛胎児血清（2 0%) を含む RPM I 1 64 0培地に浮遊させ、ロイコトリェン B 4 ( 1 Wおよび試験化合物としての化合物 Aと共に 9 6ゥエル濾過用プレートに添加した（2 X 1 0 5細胞 Zゥエル）。 3 7て、 5 0 %C0₂ 存在下で 9 0分間培養した後、 RPM 1 1 64 0培地にて 1回洗浄し、マウス抗ヒト CD 1 8モノクロ一ナル抗体（ 4 U g/m 1 ) を添加した、氷冷下で 1時間放置した後、 1回洗浄し、パーォキシダ一ゼ標識抗マウスィムノグロブリン抗体（2. 5 fi g/m 1 ) を添加した。氷冷下で 1時間放置した後、 2回洗浄し、パーォキシダーゼ用基質〔2 ,2 ' -azino -bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sufonic acid )〕を添加した。室温で 30分間放置した後、 9 6ゥエルプレート用吸光度計を用いて 40 5 nmの吸光度を測定し、 CD 1 &抗原発現の指標とした。

結果を以下の第 5表に示す。

第 5 表 — ロイコ卜リエン Β4 化合物 A CD18 発現抑制率

( M) OM) (405nmの吸光度）（％)

0 0 0.100 100 1 0 0.156 0 1 0.1 0.143 23.8

1 1 0.134 39.9

1 10 0.108 85.1 上記の第 5表のように、化合物 Aは濃度依存的にヒト末梢血好中球上の CD 1 8堯現を抑制し、その I C₅₀値は約 2 ίίΜであった。

実験例 4 ：ォキサゾロン誘発マウス耳浮腫に対する作用

体毛を除去したマウス腹部にォキサブロン溶液（アセトン中 5 Omg/m 1 ) 50 ^ 1を塗布することによって感作した後、 6日目にマウス右耳の表裏に 5 a 1ずつォキサゾロン溶液を塗布した。 24時間後に左右の耳を直径 6 mmのパンチヤ一を用いてくり抜き、その重量を直示天秤にて測定した。処置耳（右耳）の重量から未処置耳（左耳）の重量を差し引いた値を浮腫の指標とした。試験化合物としての化合物 Aは 0. 5%メチルセルロース溶液に懸濁し、感作後 3〜6 日目に経口により投与した（0. 11111 体重1 0 ^) 。

結果を第 6表に示す。第 6 処置化合物 A 耳浮腫（右耳 -左耳）

(mg/kg/日） Ong,平均重量土標準偏差）未感作 0 1.5±1.3

感作 0 12.9±2.4

感作 3 10.3±4.3

感作 10 10.0±1.6

感作 30 8.2±1.0

感作 100 7.7±2.3 , ：マン ·ゥイットニイ U試験によりそれぞれ pく 0. 05、 p < 0.

0 1で対照群に対し、有意であることを意味する。）

上記の第 6表のように、化合物 Aは用量依存的にマウス耳浮腫を抑制し、 in V ivo においても細胞接着を阻害することによって炎症部位への白血球浸潤を抑制し、関節リウマチに効果を有することが示唆された。

実験例 5 ：ラットコラーゲン関節炎に対する効果

体重 200 g前後の雄性スプラグドーリーラット（日本チヤ一ルスリバ一）を用いた。 I型コラーゲンの調製は Trenthamらの方法（J.Exp. Med., 第 1 4 6巻、第 857〜868頁、 1 977年）に準じた。ラットは一群 7匹とし、エーテル麻酔下、除毛した背部皮内に 1 mgのコラーゲンを含む 1 m 1のコラーゲン乳濁液（2mlZkgで 0. 1N酢酸に溶解し、フロイントの不完全アジュバントと 1 ： 1ェマルジヨンを作製）を 5ケ所に分割して投与し、 7日後に尾根皮内に前述の乳濁液を 0. 2m l投与した。試験化合物としての化合物 Aはコラーゲン感作日から 2 1日間、 1日 1回、体重 1 k g当たり 5m lを経口投与した。足容積はデジタルボリュームメーター（室町機械）を用い、経日的に測定した。併せて眼静脈より採血し、抗 II型コラーゲン抗体価を酵素免疫測定法（405 nm) により測定し、抗体産生抑制率（％) を求めた。その結果を第 7表にまとめた。試験化合物抗！ [型コラーゲン抗体価

Ong/kg, p. o. )

平均値 ±標準偏差抑制率（％) 対照 0 0.824± 0.044

化合物 A 3 0.856±0.055 - 3.9 化合物 A 10 0.658±0.129 20.4 インドメタシン 0.3 0.889±0.051 - 8.0 インドメタシン 1 0.674±0.112 18.5 化合物 A + 3 0.564±0.085 32.0 ィンドメタシン 0.3

化合物 A + 3 0.443 ±0.120 46.5 インドメタシン 1

(* ，：マン ·ゥイットニイ U試験によりそれぞれ p < 0. 0 5、 ρ < 0.

0 1で対照群に対し、有意であることを意味する。）

関節炎の発症はコラーゲン感作から約 1 0日目で認められた。化合物 Aは 3および 1 OmgZkgの 2 1日間連続投与で用量に依存した有意な関節炎抑制作用を示し、投与中断後もその作用は持続した。インドメタシンは 0. 3および lm gZk gの経口投与で用量に依存した有意な関節炎抑制作用を示したが、投与中断後関節炎の再燃が認められた。化合物 Aとインドメタシンの併用により、それぞれ単独で投与したときよりも効果の増強作用が認められた。抗！ [型コラーゲン抗体産生においても、化合物 A 1 OmgZkgおよびィンドメ夕シン lmg/k gの経口投与群で抗体産生の抑制傾向が認められたが、併用で有意な抗体産生抑制作用が認められた。

実験例 6 ：マウスコラーゲン関節炎に対する効果

8週齢の雄性 DBAZ1 Jマウス（成和実験動物研究所）を用いた。マウス一群 1 0匹とし、エーテル麻酔下、実験例 5の方法で作製したコラーゲン乳濁液を 0. 1 m l尾根部皮内に投与し、 2 1 日後に同じ操作を行い追加免疫した。試験化合物はコラーゲン感作日から 1 0週間、 1 日 1回、体重 1 kg当たり 1 0m 1 を経口投与した。関節炎は四肢について以下の基準により評点化した。

0 ；関節炎の発症なし、 1点； 2本以下の指に腫脹、 2点； 3本以上の指に腫脹、 3点；軽度の浮腫、 4点；中等度の浮腫、 5点；高度の浮腫。

結果は第 4図に示した通りである。

関節炎の発症はコラーゲン感作から約 4週間目から認められた。化合物 Aは 3 および 1 OmgZk gの経口投与で用量に依存した有意な閟節炎抑制作用を示した。ハイド口コルチゾン 1 OmgZk g経口投与群では関節炎の発症が認められなかった。

「産業上の利用可能性」

上記実験例などから明らかなように、本化合物はシクロスポリンなどの免疫抑制剤の作用を増強し、また、それ自体免疫抑制作用を示し、かつ、細胞接着阻害作用を示すことから、免疫抑制剤、免疫抑制作用増強剤、自己免疫疾患治療剤または細胞接着阻害剤として有用である。

本発明を製剤処方例および各種実験例を含む明細書により具体的に説明したが、本発明の精神と範囲に反しない限り、種々に変更、修飾することができる。

Claims

請求の範囲

1. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリァゾロジァゼピン化合物を有効成分とする免疫抑制剤。

2. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリアゾロジァゼピン化合物を有効成分とする自己免疫疾患治療剤。

3. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリァゾロジァゼピン化合物を有効成分とする免疫抑制作用増強剤。

4. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリ了ゾロジァゼピン化合物を有効成分とする細胞接着阻害剤。

5. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリァゾロジァゼピン化合物が 4一（2—クロ口フエニル）一 2— ( 2 - (4一イソプチルフエ二儿 J ェチノ L ) 一 6, 9—ジメチルー 6 H—チエノ〔3, 2—： Π 〔1， 2, 4〕トリアブ口

〔4, 3 - a) 〔1, 4〕ジァゼピン、 3— 〔4— (2—クロ口フエニ儿ク - 6 , 9一ジメチルー 6H—チエノ〔3, 2 - f ) 〔1 , 2, 4 ) トリ了ゾロ〔4, 3— a〕〔1， 4〕ジァゼピン— 2—ィル〕プロピオン酸モルホリドまたはそれらの光学異性体、または（+ ) — 6— （2—クロ口フエニル）一 3—シクロプロパンカルボ二ルー 8, 1 1—ジメチル一 2, 3, 4, 5—テトラヒドロ— 8 H— ピリド〔4' ， 3' : 4， 5〕チェ〔3, 2 - f ) 〔 1 , 2, 4〕トリァゾロ

〔4, 3— a〕〔1, 4〕ジァゼピン、またはそれらの医薬上許容されうる酸付加塩もしくは水和物である請求の範囲第 1、 2、 3または 4項記載の医薬。

6. 自己免疫疾患が関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、シヱ一グレン病、多発性硬化症、重症筋無力症、 I型糖尿病、内分泌性眼障害、原発性胆汁性肝硬変、クローン病、糸球体腎炎、サルコィドーシス、乾癬、天痘瘡、再生不良性貧血または突発性血小板減少性紫斑症である請求の範囲第 2項記載の自己免疫疾患洽療剤。

7. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリアブ口ジァゼピン化合物を投与することを特徵とする免疫抑制方法。

8. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノ卜リアゾロジァゼピン化合物を投与することを特徵とする自己免疫疾患治療方法。

1 4 新たな用紙

9. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリアブ口ジァゼピン化合物を投与することを特徵とする免疫抑制作用増強方法。

1 0. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリァゾロジァゼピン化合物を投与することを特徵とする細胞接着阻害方法。

1 1. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチェノトリアゾロジァゼピン化合物が 4一（2—クロ口フエニル）一 2— （ 2— （ 4—イソブチルフエニ儿）ェチル）ー 6, 9—ジメチル一 6 H—チエノ〔3, 2 - f ) 〔 1 , 2, 4 ) 卜リアゾ口〔4， 3— a〕〔 1， 4〕ジァゼピン、 3— 〔4一（2—クロ口フエニル一 6, 9—ジメチルー 6 H—チエノ〔3， 2 - f ) 〔 1 , 2， 4〕トリアブ口〔4

， 3— a〕〔 1 , 4〕ジァゼピン一 2—ィル〕プロピオン酸モルホリドまたはそれらの光学異性体、または（十） — 6— （ 2—クロ口フエニル） — 3—シクロブ口パンカルボニル一 8， 1 1 一ジメチルー 2， 3, 4， 5—テトラヒドロー 8 H 一ピリド〔4 ' ， 3' : 4， 5〕チエノ〔3, 2 - f ) 〔 1 , 2, 4〕トリァゾ口〔4， 3 - a) 〔 1， 4〕ジァゼピン、またはそれらの医薬上許容されうる酸付加塩もしくは水和物である請求の範囲第 7、 8、 9または 1 0項記載の方法。

1 2. 自己免疫疾患が関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、シニーグレン病、多発性硬化症、重症筋無力症、 I型糖尿病、内分泌性眼障害、原発性胆汁性肝硬変、クローン病、糸球体腎炎、サルコィドーシス、乾癬、天痘瘡、再生不良性貧血または特発性血小板減少性紫斑症である請求の範囲第 8項記載の自己免疫疾患治療方法。

1 3. 免疫抑制剤を製造するためのジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチェノトリァゾロジァゼピン化合物の使用。

1 4. 自己免疫疾患治療剤を製造するためのジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリァゾロジァゼピン化合物の使用。

1 5. 免疫抑制作用増強剤を製造するためのジァゼピン環の 2位が了ルキル化されたチエノトリァゾロジァゼピン化合物の使用。

1 6. 細胞接着阻害剤を製造するためのジァゼピン環の 2位がアルキル化されチエノトリァゾロジァゼピン化合物の使用。

1 7. ジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリァゾロジァゼビン化合

1 5 新たな ^紙物が 4一（ 2一クロ口フエニル）一 2— （2— （4ーィソブチルフェニ儿）ェチル）一 6, 9—ジメチルー 6 H—チエノ〔3, 2— f 〕〔1 , 2, 4 ) トリァゾ口〔4, 3— a〕〔1， 4〕ジァゼピン、 3— 〔4— (2—クロ口フエニル一 6, 9一ジメチルー 6H—チエノ〔3, 2 - f ) 〔1， 2, 4〕トリアブ口 .〔4 , 3— a〕〔1， 4〕ジァゼピン一 2—ィル〕プロピオン酸モルホリドまたはそれらの光学異性体、または（+ ) - 6 - (2—クロ口フエニル）一 3—シクロプ口パンカルボ二ルー 8, 1 1—ジメチルー 2， 3, 4， 5—テトラヒドロー 8 H 一ピリド〔4' , 3' : 4， 5〕チエノ〔3， 2— f 〕〔1, 2, 4〕トリアブ口〔4， 3— a〕〔1, 4〕ジァゼピン、またはそれらの医薬上許容されうる酸付加塩もしくは水和物である請求の範囲第 1 3、 1 4、 1 5または 1 6項記載の使用。

1 8. 自己免疫疾患が関節ウマチ、全身性エリテマトーデス、シヱーグレン病、多発性硬化症、重症筋無力症、 I型糖尿病、内分泌性眼障害、原発性胆汁性肝硬変、クローン病、糸球体腎炎、サルコィドーシス、乾癣、天痘瘡、再生不良性貧血または特発性血小板減少性紫斑症である請求の範囲第 1 4項記載の自己免疫疾患治療剤を製造するためのジァゼピン環の 2位がアルキル化されたチエノトリァゾロジァゼピン化合物の使用。

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