WO1993018795A1

WO1993018795A1 - Mri contrast medium and diagnostic method

Info

Publication number: WO1993018795A1
Application number: PCT/JP1993/000322
Authority: WO
Inventors: Kohki Yoshikawa; Takahiro Shiono; Hiroyuki Iwai; Tsuneo Yamashita; Kazuhiro Shimokawa
Original assignee: Daikin Industries, Ltd.
Priority date: 1992-03-19
Filing date: 1993-03-18
Publication date: 1993-09-30
Also published as: EP0673655A4; EP0673655A1

Description

MR I造影剤及び診断方法産業上の利用分野

本発明は、目標とする部位に選択的に投与し、長期間滞留させ、従来 X 線で行っていた診断を MR 1で行うことにより、診断精度を向上させ、 X 線被爆の回数を激減させて患者の負担を軽くすることを目的とした MR I 造影剤、及びこれを用いた診断方法に関するものである。

従来の技術

MR I (核磁気共鳴撮像）は、生体内のプロトン（特に水、脂肪）から得られる核磁気共鳴信号を観測するものであり、組織毎のプロトン密度や、スピン一 ¾ί緩和時間（Τ !)およびスピン一スピン緩和時間（Τ₂)の差を利用して、画像のコントラストを形成する。

常磁性化合物は、プロトンの緩和時間を短縮して画像のコントラストを向上させる MR I造影剤となる。これらの化合物のひとつとして、 G d—

DTP A 2メグルミン塩（登録商標マグネピスト：シエーリング社）は、世界初の MR I造影剤として市販されている。

"^に MR I造影剤は、水溶液として静脈内投与され、細胞外に分布し、数十分で造影効果がなくなり、その後、経腎的に排泄される。その薬物動態から、脳、 ■領域において、梗塞、腫瘍の診断に供されている。また、近年、経口投与可能でかつ、高濃度の消化管造影剤も開発され、臨床試験が進行している。

しかし、重金属を含む MR I造影剤は毒性の面から体外排泄性を高めるため、水溶性金属錯体とした水溶液製剤であった。

そのため、造影剤の排泄されやすい部位、例えばリンパ管等の領域の M R Iの造影は困難であり、専ら短時閭で造影可能な油性 X線造影剤（リピオドール）を用いる] C影法に依っていた。

近油性 X線造影剤（リビオドール）のみ、もしくは抗腫瘍剤を懸濁させて動脈に注入し、ゼラチンスポンジで塞拴して腫瘍の治療を行う化学塞^法が紹介されている（竜崇正、 Innervision、 4(1)、 50(1989)) 。この方法は、動脈塞拴によると抗腫瘍剤の滞留効果が相まって、良好な治療成績をあげると同時に、診断においても X線診断により X線造影剤の存在が SiiM^ならびに新たな腫瘍の発見に有用となっている。

しかし、面像診断のための X線造影法、特に X線 CTの利用が拡大するにつれ、被爆の問題を無視出来ず、 X纖影法は長期かつ高頻度の使用が制限される欠点を有する。

；の MR I造影剤の試みとして、リピオドールと水溶液である登録商標マグネビストとのェマルジョンを動脈内に注入することが行われている (石王道人、曰医大誌、 58(3)、 285(1191))。しかし、約 5分後に分離したと記載され、長期監視するための MR I造影剤として使用するに耐え得るほど安定な製剤を得るにはいたっていない。

発明の目的

これらの理由により、低毒性を維持しつつ、現在、動脈、リンパ管、子宮卵管等の部位の造影可能な MR I造影剤への要望が高まつている。本発明の MR I造影剤は、 MR Iで充分なコントラストを得られる量の常磁性化合物の微粒子を油状液体に分散させ、懸濁化することにより得られ、長期閭安定な製剤を与える。

また、上 E¾剤は、油状液体が X線遮蔽効果を有する場合、 X線透視下に目標とする部位（例えば動脈、リンパ管、子宮卵管）へ選択的に注入することが可能となる。また、局部的に投与されるので常磁性重金属化合物の投与量を減じることができる。

さらに、投与後、組織に滞留することで 1回の投与により長期間何回でも経過観察が可能となり、その際、診断に MR Iを施行することになるため、 «X線 C Tで問題になっていた X線被爆が回避できる。

また、閉塞部位に投与することにより、化学塞栓療法の治療監視をすることができる。

発明の構成

本発明は、微粒子状常磁性化合物を含む油状物（特に脂肪酸、脂肪酸ェステル又はパーフルォロ化合物）からなる MR I造影剤に係るものである。上記常磁性化合物は、原子番号 21〜29、 42、 44の金属、及び原子番号 58

〜70のランタン系金属から選ばれた少なくとも 1種の金属の錯体又は錯塩化合物であるのがよい。この場合、配位子がエチレンジァミン—N, N, N' , N' —テトラ酢酸（以下、 EDTAと略す。 ) 、ジエチレントリアミン一 N, N， N，， N" , N" 一ペンタ酢酸（以下、 DTPAと略す。） 1, 4, 7， 10—テトラァザシクロドデカン一 N, Ν' , N" , Ν'" ― テトラ酢酸（以下、 DOT Αと略す。）、 1, , 7, 10—テトラァザシクロドデカン一 N, Ν' , N" 一トリ酢酸（以下、 DO 3 Aと略す。）で

0 Ό 乙よレ、ο

上記の微粒子状常磁性化合物はクェン酸鉄（III)アンモニゥム、硫酸鉄又は酸化鉄とすることができる。

本発明の微粒子状常磁性化合物は粒径以下、 1 πι以上、好ましくは 75 m以下、 10 m以上に湿式微細化粉砕するか、或いは乾式微細化粉砕で得られる。

上記の脂肪酸、 fl旨肪酸の低級アルキルエステル、パ一フルォロ化合物において、肪酸又は脂肪酸の低級アルキルエステルの脂肪酸の炭素数は 4 -30, 低級アルキルの炭素数は 1〜4、パーフルォロ化合物の炭素数は 1〜12が好ましい。

X^it蔽効果のある油状液体とする場合、 1個以上の I、 Brにより置換された炭素数 4〜30の脂肪酸もしくは脂肪酸の低級アルキルエステル、あるいは 1〜l(H の I、 Brにより置換された炭素数 1〜： 12の直鎖アルキルパ —フルォロ化合物が好ましい。

X纖蔽効果のある油状液体は入手容易である。例えばョ一ド化ケシ油 (登録商標リビオドール等）やョード化ケシ油脂肪酸ェチルエステル（登録商標リピオドールウルトラフルイド等）のように、 1922年に開発されて以来、リンパ管造影、子宮卵管造影剤として一般的に使用され、安全性が確認されているもの、また、臭素やヨウ素で置換された直鎖鉋和パーフルォロ化合物の中で、生体に対して安全が確認された化合物、例えばパ一フルォロォクチルブロマイド（P F O B) が挙げられる。

本発明の懸濁液は、である（例えば特開昭 58 -29718号公報明細書に記載）原子番号 21〜29、 42、 44又は 58〜70のランタン系金属から選ばれた少なくとも 1種の金属と配位子 EDTA、 DTPA、 D OTA、 D O 3 Aとからなる金属錯体もしくはその塩であるか、同様に公知である（例えぱ特開平 2— 191229号公報明細書に記載）クェン酸鉄（IIDアンモニゥム、硫酸鉄、含糖酸化鉄を公知の方法で調製することによって得られる常磁性化合物のうちの 1種を含む。

本発明の懸濁液には油状液体 l mlあたり 10 umol〜： lOmmol、好ましくは 50 mol〜500 ^mol の常磁性化合物が配合される。

この懸濁液には、通常知られている各種添加剤、例えば懸濁化剤、分散剤、粘稠剤等をに応じて適宜添加配合することもできる。

例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルポ^^シビニルポリマ一、グリセリン 3旨肪酸エステル、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、マクロゴール、モノォレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノ脂肪酸グリセリン、ラウリル硫酸ナトリウム、流動パラフィン等は懸濁剤、分散剤、粘稠剤のいずれかの用途として、またォリーブ油、セ夕ノール、トラガント等は懸濁剤、粘稠剤として、更にゲイ酸アルミニゥム 'マグネシウム、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンポリオキシプ αピレングリコール、ポリオキシェチレン硬化ヒマシ油、脂肪酸ポリオキシル等は懸濁剤、分散剤として例示でき、製剤の性状、製造法等を考慮して適当量を用い得る。

本発明の懸濁液の製造法は、基本的には、通常の懸濁剤等の製剤の製造法と同様のものとすることができる。即ち、原料となる固体を粉砕機を用いて！^微細化粉枠したのちに分級するか、基剤となる油状化合物とともに湿式微細化粉碎し、各成分とともに秤量、混合してアンプル ·バイアル等に充填して製造できる。

かくして得られる本発明の MR I造影剤は X線造影剤の性質をも保持させることが出来るため、油性 X線造影剤の適応部位、例えば動脈内、リンノ、。管、子宮卵管等に同様に投与が可能となり、投与法は例えば注射による。その投与量は造影される部位ないし組織に応じて適宜選択されるために、使用量を少なくでき、重金属による問題を低減できる。例えば、子宮卵管造影の場合、本発明の造影剤は 5〜 8 ml注入すればよい。

本発明の造影剤は安定であることから、保存性に優れ、排泄され易い箇所にも使用可能である。また、滞溜して使用される本発明の造影剤は徐々に分離、放出され、次いで排泄されるので、生体に对する安全性も高い。そして、本発明の造影剤は投与時には X線遮蔽効果をもつ油状液体の効果により、 X線透視下で目的とする部位、その他の臓器に選択的注入が可能となる。投 ¾は、 MR I機器で長期間監視する診断方法を実施できること、換言すれば、 X線を使用しないですむことは極めて有利な点である。産 S :の利用可能性

本発明による MR I造影剤は、油状の脂肪酸、脂肪酸エステル又はパーフルォロ化合物に微粒子状常磁性化合物を懸濁させたものであるから、長期間安定に使用可能であり、また目的部位へ投与できるためにその投与量も減らすことができる。診断に際しては、目的部位にて長期閭安定に保持されるために、 MR Iで監視を行うことができ、 X線 CTは不要となり、被爆の問題がなくなる。

図面の簡単な説明

図 1は本発明の ^剤投与前の MR I写真である。

図 2は同造影剤投与直後の MR I写真である。

図 3は同造影剤投与直後の X線 CT写真及びそのスケッチである。

図 4は同造影剤投与後 2日目の MR I写真である。

図 5は同造影剤投与後 7日目の MR I写真である。

図 6は G d -DTP A溶出速度の測果を示すグラフである。

難例

以下、本発明を ¾ 例について更に詳しく説明する。

例 1

ジエチレントリアミンー N, N, N* , N" , N" 一ペンタ ft酸のガドリニゥム（以下、 G d— DTP Aと称す。 ) 2メグルミン塩を使用する M R I鶴剤：

G d— DTP A—登録商標リビオドールウルトラフルイド懸濁液

(MR I mmの調製：の方法で調製した G d— D τ p A 2メグルミン塩 10gを乳鉢で粉碎したのち、ステンレス製フルイで 200メッシュ (75/ΖΙΪΙ) 以下の粒径に揃えた。

この G d— D T P A 2メグルミン塩 1195rag ( 1水和物として 1.25mmol) にョード化ケシ油脂肪酸ェチルエステル（登録商標リピオドールウルトラフルイド） 10.0mlを加え、乳鉢でよく混合して懸濁液とした。懸濁液は不透明淡黄色油状物質であつた。

実施例 2

G d - DT P A - P F O B懸濁液の調製：

油状化合物として P F 0 Bを用レ、た以外は、実施例 1に応じて懸濁液を調製した。得られた懸濁液は不透明白色液体であった。

実施例 3

造影試験：

この試験に用いた機器は、 X線 C T一横河メディカル社製 IMAGE腹 2 (スライス厚は 10議）、 MR Iーシ一メンス旭社 » GNET0N H15Q.5T) を使用した。 MR Iの撮像条件は、繰り返し時間（TR) 500msec, ェコ一時閭（T E) 15msecのスピンエコー法（S E 500/15) ©T ! 強調画像、スライス厚 5画、画素数 192X256であった。

曰本白色種兎 (2.5〜2.6kg)の大腿部に V X 11腫瘪紬胞を植し、 10日間増殖させた。 10日目に体動を抑えるため、耳介静脈に 30%ウレタンを投与することによる全身麻酔を行い、麻酔下で動注前に MR Iを施行した。麻酔下で大腿部を切開し、大腿動脈の末梢側に向けて留置針を確保した 0 留置針より、調製したサスペンジョン（上記した懸濁液） 1.0mlを動注した後、生理食塩水 5.0mlを使ってフラッシュし、動脈を結紮した。大腿部を縫合した直後、 2日目、 1週間目に上記の条件で MR I及び X線 C T (但し、これは投与直後のみ）を行った。これらの各写真又はスケッチを図 1〜図 5に示した。これによれば、造影作用が安定に保持されることが分る。また、 X線 C Tは投与直後に行えばよく、その後は MR Iのみを行うことができる。図 1〜図 5を詳述すると、まず図 1は上記の懸濁液投与前の上記大腿部の M R I写真を示すが、これに比較して同懸濁液投与直後の図 2の MR I写真に示すように腫瘍の部分（図 3参照）に白っぽく造影剤（MR I造影剤）が見える。この MR I造影剤は、図 3に示す X線 CT (スケッチ）で観察された X 影剤とほぼ同じ位置に存在することから、 X線造影剤からは分離せずに目的部位に保持されていること力分る。

次に、上記懸濁液投与後 2日目では図 4の MR I写真（これは図 1及び図 2とは少し切断の角度が異なっている。 )のように、 MR I造影剤の浸潤によって同造影剤のある白っぽい部分が拡大されていることが確認できる。更に、 7日目では図 5の MR I写真（図 4と同等の切断角度でのもの）のように、 MR I鶴剤は依然として保持されていると共に、腫瘍の内部に壊死部分が黒つぼく見えるが、こうした壊死部分のにも上記懸濁液が使用可能である。

難例 4 マウス MCH · I CR (35g〜40g) の内に、上記に調製した懸濁液の 12^ 1〜 1を投与し、 7曰閭観察して、 50%致死濃度（LD₅₀) を求めたところ、下記のデータが得られた。これによれば、本発明に基く懸凝液は非常に安全であることが分かる。

懸濁剤 L D e o

G d— DTP A—登録商標リピオドール

ゥノレトラフルイド 2.5mmol kg以上実施例 5

懸濁液の安定性：

実施例 1で調製した懸濁液は安定性を確認するため、室温下で放置し、完全に 2層分離するまでの所要時間を測定した。比較として、 0.5mmol/iBl の G d— D T P A氷溶液 1 mlと登録商標リピオドールウルトラフルイド 1 ml とを均一に混合したものを用いた。結果は下記に示した。これによれば、本発明に基く懸濁液は非常に安定であることが分かる。分脔までの所要時間実施例 Gd- -DTPA (固体） +リピオドール 2日以上

1のものウルトラフルイド比較例 Gd- -DTPA (水溶液） +リピオドール 1 0分

のものウルトラフルイド実施例 6

G d— D T P A溶出速度の測定：

実施例 1で調製した懸濁液について水中での G d— DT P A 2メグルン塩の溶出挙動を鶴するため、日本薬局方第十二改正、溶出試験法に準じて溶出試験を行った。

懸濁液 20mlを 37°Cの純水 500ml中にゆつくり加え、その温度を保ったまま lOOr.p.mの速度でパドルにより攪拌した。 30分、 1時間〜 7時間まで 1 時間毎に^液を採取し、 274nmの吸光度を測定した。 5nMGd— DTP A水溶液の吸光度を 1として、試験液の実測値を百分率により示した。比較として、実施例 5で述べた比較例の混合液を用いた。結果を図 6に示す。

これによれば、本発明に基づく懸濁液は、非常にゆつくりと Gd-D TPA2メグルミン塩を放出する性能（徐放性）をもっていることがわかる。

Claims

請求の範囲

1 . 微粒子状常磁性化合物を含む油状物からなる MR I造影剤。

2. 微粒子状常磁性化合物が、原子番号 21〜29、 42、 44の金属、及び原子番号 58〜70のランタン系金属から選ばれた少なくとも 1種の金属の錯体又は錯塩化合物である、請求の範囲の第 1項に記載した MR I造影剤。

3. 金属錯体又は錯塩化合物の配位子がエチレンジァミン— N, N, Ν，， Ν' ーテトラ酢酸、ジエチレントリアミンー Ν, Ν, Ν' , Ν"， Ν" —ペン夕酢酸、 1 , 4 , 7 , 10-テトラァザシクロドデカン一 Ν, Ν' , Ν" , Ν' " ーテトラ酢酸、 1 , 4 , 7, 10—テトラァザシクロドデカン一 Ν, Ν' , Ν" 一トリ酢酸である、請求の範囲の第 2項に記載した MR I造影剤。

4. 微粒子状常磁性化合物がクェン酸鉄（ΙΠ)アンモニゥ厶、硫酸鉄又は酸化鉄である、請求の範囲の第 1項〜第 3項のいずれかに記載した MR I造影剤。

5. 油状物が脂肪酸、脂肪酸の低級アルキルエステル又はパーフルォロ化合物である、請求の範囲の第 1項〜第 4項のいずれかに記載した M R I造影剤。

e. 脂肪酸、脂肪酸の低級アルキルエステルの脂肪酸の炭素数が 4 〜30であり、パーフルォロ化合物の炭素数が 1〜12である、請求の範囲の第 5項に記載した MR I造影剤。

7. 脂肪酸、 fl旨肪酸の低級アルキルエステル又はパーフルォロ化合物がョゥ素又は臭素で置換されたものであって、脂肪酸又は脂肪酸の低級アルキルエステルの脂肪酸の炭素数が 4〜30であり、該低級アルキルの炭素数が 1〜4であり、パーフルォロ化合物の炭素数が 1〜12である、請求の範囲の第 5項に記載した MR I造影剤。

8. 請求の範囲の第 1項〜第 7項のいずれかに記載した MR I造影剤を使用し、 MR I機器で投与部位を監視する診断方法。