WO1998000391A1

WO1998000391A1 - Derives de cyclopropylglycine et agoniste du recepteur du l-glutamate du type a regulation metabolique

Info

Publication number: WO1998000391A1
Application number: PCT/JP1996/003849
Authority: WO
Inventors: Haruhiko Shinozaki; Takeo Taguchi; Michiko Ishida
Original assignee: Nippon Chemiphar Co., Ltd.
Priority date: 1996-06-28
Filing date: 1996-12-27
Publication date: 1998-01-08
Also published as: EP0913389A4; EP0913389A1

Description

明細書シクロブ口ピルグリシン誘導体及び代謝調節型 Lーグルタミン酸受容体ァゴニス卜

[技術分野]

本発明は、新規なシクロプロピルグリシン誘導体、およびそのシクロプロピルグリシン誘導体を有効成分とする代謝調節型 Lーグルタミン酸受容体ァゴニス卜に関する。

[背景技術]

現在、グルタミン酸受容体は、イオンチャンネル型（ i G l uR) と代謝調節型（mG 1 uR) とに大きく分類されている。そして、 i G 1 uRはさらに NM DA (N—メチルー D—ァスパラギン酸）型と非一 NMDA型とに分類される。 ( 「神経精神薬理」第 18巻 5号、 345〜365頁、 1996年）

NMD A型受容体については、ァゴニストにより活性化されるこの受容体の作用によって Ca²⁺が細胞内に流入して、細胞内 Ca²⁺濃度が上昇すること、そしてその結果、種々の Ca²⁺依存性酵素が活性化され、次いで発生する連鎖的な細胞内変化が一定の閾値を越えると、不可逆的な細胞死へ移行することが推測されている。（「日薬理誌」 104号、 177〜 187頁（ 1994年））

一方、 mG l uRは、その配列の相同性、細胞内情報伝達機構、およびァゴニスト選択性により、現在では三つのグループ（グループ I、 Π、 ΓΠ) に分けられている。 mG 1 uRのグループ Iのァゴニス卜としては、キスカル酸が強い活性を示し、このものは、イノシトール三燐酸（ I P₃ ) の生成と細胞内 C a 動態の変動を促す。

mG l iRのグル一ブΠ、 ΠΙのァゴニストは、 f o r s k o l ί nで誘発した細胞内 c AMPの生成を抑制する。 mG 1 u Rのグループ Πと Π1との問には、ァゴニス卜の選択性に差異がある。

mG 1 u Rのグループ Πのァゴニス卜としては、 DCC — IV ( 2 S, 1 ' R, 2* R, 3' R) — 2— （2， 3—ジカルボキシシクロプロピル）グリシン）及び L— CCG— I ( (2 S, 1 ' S, 2' S) - 2 - (2—カルボキシシクロブ口ピル）グリシン）が知られており、 mG 1 uRのグループ mのァゴニストとしては、 L一 AP4 (L— 2—アミノー 4一ホスホノ酩酸）が知られている。（特開平 6— 256323号公報、特開平 6 - 24970号公報、「神経精神薬理」第 18巻 6号、 419〜425頁、 1996年）

ところで、 mG 1 uRのグループ IIに属するァゴニス卜は、シナプスにおいて伝達物質の放出を抑制して、シナプス伝達の効率を悪くすること力 s確認されている。中枢神経系でシナプス伝達の効率を悪くすると、運動系に対して筋弛緩力 s考えられ、実際に、麻酔剤との併用では、麻酔の著しい増強カ認められることが動物実験で確認されており、また鎮静、ないしはトランキライザー様作用、抗てんかん作用も認められている。更に、 mG 1 uRのグループ Πに属するァゴニス卜は、 i n v i troおよび i n v i v oで興奮性アミノ酸による神経細胞死を防護する作用があり、神経細胞保護剤として強い期待が持たれている。また、このような中枢抑制作用は、今までに類を見ない新しい形のグルタミン酸受容体ァゴニストであり、今後の中枢作用薬の研究に必須であるため、研究用試薬としてもその重要性が高い。（「日薬理誌」 104号、 177~ 187頁（ 1994 年））。

従って、 mG 1 u Rのグループ Πに属するァゴニス卜である DC G— IVは、強力に mG l uRを活性化することから、その神経細胞保護作用に対する期待が持たれている。また DCG— IVは、 mG 1 uRを活性化すること以外にも、興奮性アミノ酸による神経細胞死との関連性を持つと考えられている N M D A型受容体をも活性化すること力 ^s知られていることから、 NMDA成分を持たない新規な m G 1 uRのァゴニス卜の開発が待たれている。

[発明の開示]

本発明は、従来知られていた代謝調節型 L -グル夕ミン酸受容体ァゴニストよりも、より選択的で優れた特性を示す新規なシクロプロピルグリシン誘導体を提供することを目的とする。本発明は、また上記の新規なシクロプロビルグリシン誘導体を製造するための中間体として有用な新規な化合物を提供することも、その目的とする。

本発明は、下記の一般式（ I ) ：

[ただし、 R' と R² とは、それぞれ独立に、水酸基もしくは炭素数 1〜 6のァルコキシ基を表わし、 R³ と FT とは、それぞれ独立に、水素原子もしくは炭素数 1〜6のアルキル基を表わし、 X¹ と X² とは、それぞれ独立に、ハロゲン原子を表わす。 ] で表わされるシクロブ口ピルグリシン誘導体にある。

本発明はまた、上記の一般式（I) で表されるシクロプロピルグリシン誘導体を有効成分として含む代謝調節型 L一グルタミン酸受容体ァゴニストにもある。本発明はまた、上記の一般式（I) で表されるシクロプロピルグリシン誘導体を有効成分として含む医薬組成物にもある。

また、本発明が提供する中間体は、下記の一般式（2) ：

[ただし、 R² は、水酸基もしくは炭素数 1〜6のアルコキシ基を表わし、 R³ は、水素原子もしくは炭素数 1〜6のアルキル基を表わし、 X' と X² とは、それぞれ独立にハロゲン原子を表わす。 ] で表わされるラクタム誘導体である。

[発明を実施するための最良の形態] 本発明のシクロプロビルグリシン誘導体は、下記の一般式（J) ：

[ただし、 R¹ と R² とは、それぞれ独立に、水酸基もしくは炭素数 1〜6のァルコキシ基（例、メ卜キシ基、エトキシ基、 _n—プロボキシ基、イソプロポキシ基、 n—ブトキシ基、イソブトキシ基）を表わし、 R³ と FT とは、それぞれ独立に、水素原子もしくは炭素数 1〜6のアルキル基（例、メチル基、ェチル基、 n—ブロビル基、イソプロピル基、 n—ブチル基、イソブチル基）を表わし、そして X¹ と X² とは、それぞれ独立に、ハロゲン原子（例、弗素、塩素、臭素、沃素）を表わす。 ] で表わされるシクロブ口ピルグリシン誘導体である。

なお、本発明のシクロブ口ピルグリシン誘導体は遊離酸の状態でも、あるいは塩の状態にあってもよい。

本発明のシクロプロピルグリシン誘導体は、一般式（I ) R¹ と R² と力 s共に水酸基を表わし、 R³ と R⁴ とが共に水素原子を表わし、そして X¹ と X² とが共に弗素原子を表わす化合物（即ち、 2 - （2' -カルボキシー 3' , 3' - ジフルォロ）シクロブ口ピルグリシン）であることが好ましい。この化合物には下記の合計 8個の光学異性体がある。

L一 I ： (2 S, 1 ' S, 2 ' S) 一 2— (2* —カルボキシー 3' , 3' — ジフルォロ）シクロプロビルグリシン

L一 Π : (2 S, 1 ' R, 2' R) -2- (2' 一カルボキシー 3' , 3' - ジフルォロ）シクロブ口ピルグリシン

L-ffl： (2 S, 1 ' S, 2' R) 一 2— (2' 一カルボキシ— 3' , 3' — ジフルォロ）シクロプロビルグリシン

L-IV： (2 S, 1 ' R, 2' S) —2— (2' 一カルボキン一 3' , 3' - ジフルォロ）シクロブ口ビルグリシン D— T ： (2 R, 1 ' R, 2、 R) - 2 - (2' -カルボキシ一 3' , 3' — ジフルォロ）シクロプロビルグリシン

D— Π : (2 R, 1' S, 2、 S) - 2 - (2' —カルボキシー 3' , 3' 一

ジフルォロ）シクロプロピルグリシン

D-ffl： (2 R, 1 ' R, 2' S) 一 2— (2' 一カルボキシー 3' , 3' — ジフルォロ）シクロブ口ビルグリシン

D-IV： (2 R, 1 ' S, 2' R) 一 2— (2* 一カルボキシ一 3' ， 3' — ジフルォロ）シクロブ口ピルグリシン

上記の各異性体なかでは、 L一 Iの（2S, Γ S, 2' S) -2- (2' - カルボキシー 3' ， 3' —ジフルォロ）シクロブ口ピルグリシン力最も好ましい。

本発明のシクロプロビルグリシン誘導体は、下記の反応経路図— 1に示すように、公知のォレフィン化合物（E— 1または Z— 1 ： J. O r . Chem. ， 59 ( 1 ) ， 97- 103 (1994) 参照）にクロロジフルォロ酢酸ナトリウムを作用させて 2— (2' 一べンジルォキシメチルー 3' , 3' ージフルォロ）シクロブ口ビルエチレングリコール 1， 2— 0—ァセトニドのそれぞれ二種の光学活性異性体を得て（ E— 1からの反応については、 Te tr ahedron ： As ymmetry, 5 (8) , 1423- 1426 ( 1994) に記載されている）、次にそれらを出発原料として反応経路図- 2に示すような方法（反応経路の例として、 L— 1と D— Πの製造例を挙げてある）を利用して得ることができる。

反応経路図一 1

I

(2S, 1'S, 2'S) -2 (2S， 1'R， 2'R)-2

CIC

digl

(2S, 1'R， 2'S) -2 (2S, 1'S, 2'R)-2

L-IV D -III し - III D-IV

a) HCl/MeOH

b) TBDMS - CI, Imidazole

c) PhCOOH, DIAD, Ph₃P

d) OH"

e) DIAD, Ph₃P, (Ph0)₂P(O)N₃

f) t) Bu₄N⁺F7THF; ii) Hg Pd - C; iii) Boc₂0, NaHC0₃; iv) Jones OX. CH₂ vi) Jones Ox. - CH₂N₂; vii) Ti(0小 Pr )₄, BnOH; viii) H2/Pd(OH)₂; ix) c.HCI

次に本発明のシクロブ口ピルグリシン誘導体の合成例を示す。なお、この合成例に記載のない本発明のシクロブ口ピルグリシン誘導体についても同様な方法を利用して容易に製造することができる。

[実施例 1 ] [Z— 1 ] から [ (2 S, 1 ' R, 2' S) - 2] 及び [ (2 S，

Γ S， 2' R) -2] の製造一一 [前記反応経路図— 1 ] (Z, 4' S) 一 3—ベンジルォキシー 1一（2' ， 2、一ジメチルー 1 ' , 3' —ジォキソラン一 4' 一ィル）一 1一プロペン（Z— 1 ) (7. 5 g) のジエチレングリコールジメチルェ一テル溶液を 180°Cに加熱した。この溶液にクロロジフルォロ酢酸ナトリウム（45. 8 g) のジエチレングリコールジメチルエーテル溶液を 1 0時間で滴下し、さらに 180°Cで 1時間加熱した。冷却後、反応溶液に氷水を加え、へキサンで抽出した。へキサン抽出液を水で洗浄したのち、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムグラフィ一（へキサン：酢酸ェチル =30 ： 1、体積比）にかけて粗精製したのち、中圧クロマトグラフィー（へキサン：酢酸ェチル =4 ：し体積比）で各異性体を分離することによって、 [ (2 S, 1 ' R, 2、 S) -2] を 2. 6 g、そして [ (2 S， 1 ' S, 2* R) -2] を 5. 6 g得た。

[ (2 S, Γ R, 2' S) - 2]

無色油状物、 [a] _D ²⁷' ⁶ : -37. 6 (c 0. 978、 CHC 1₃ ) [ (2 S, 1 ' S, 2' R) - 2]

無色油状物、 [ α ] D²⁸ ° _:— 35. 6 (c 0. 999、 CHC 1₃ ) [実施例 2] [E— l ] から [ (2 S， 1 ' S, 2、 S) — 2] 及び [ (2 S,

Γ R, 2' R) 一 2〗の製造一一 [前記反応経路図- 1 ] (E, 4' S) —3—ベンジルォキシー 1— (2' , 2' ージメチル一， 3' —ジォキソラン一 4' —ィル）一 1—プロペン（E— 1 ) ( 1. :3 g) から、実施例 1に記載の方法と同様な方法を利用して、 [ (2 S, 〖 ' S, 2' S) 一 2] を 0. 76 g、そして [ (2 S, R, 2' R) — 2] を（）· 45 gi「} た。

[ (2 S, 1 ' S, 2 ' S) - 2]

無色油状物、 [ ] " ⁰ : -20. 9 (( 1. 0 ()、 C 11 (：し） [ (2 S, Γ R, R) - 2]

無色油状物、 [ α ] 。"· ⁸ ： +28. 7 (c 1. 06, (； H C 1 α ) [実施例 3] (2 R, Γ S, 2' S) —2— （2' —カルボキシ—3' , 3' ージフルォロ）シクロブ口ビルグリシン [D— II] およびそのェステルの製造（反応経路図 - 3)

経路図一 3

(2R, 1'S, 2'S) -4

(2R, 1'S, 2'S) -5

(2R, 1'S, 2'S) - 8 (2R， 1'S, 2'S) - 9

(2R, 1'S, 2'S) - 10 ） [ (2 S, 1 ' S, 2' S) ー2] から [ (23, 1 ' S. 2' S) - 3] の製造

[ (2 S, 1¹ S, 2' S) 一 2] (300mg) のメタノール（2mL) 溶液に 1 0%塩酸（0. 5mL) を滴下し、室温にて 6時間反応させた。減圧下で濃縮したのち、飽和炭酸水素ナトリウム水を加え、酢酸ェチルで抽出した。この有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾したのち、減圧下で濃縮した。得られた残渣を次の反応に直接用いた。

アルゴン雰囲気下、粗生成物の N， N—ジメチルホルムアミド（2mL) 溶液にイミダゾール（ 138. Omg) を加え、 O^eCで t一プチルジメチルシリルクロリド（TBDMS— C 1 ) ( 1 67. Omg) を加えたのち、室温で 5時間撹拌した。飽和塩化アンモニゥム水溶液を加え、ジェチルェ一テルで抽出した。この有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下で乾燥した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、へキサンノ酢酸ェチル 5 し体積比）溶出部分から [ (2 S， 1 ' S, 2' S) 一 3] を 302. Omg得た。

[ (2 S, S, 2' S) -3]

無色油状物、 [α] D²⁸- ⁴ ： - 10. 6 (c 1. 00, CHC 13 ) (2) [ (2 S, 1 ' S, 2' S) — 3] から [ (2 R, 1 ' S. 2' S) - 4] の製造

アルゴン雰囲気下、 [ (2 S， Γ S, 2' S) -3] U 36mg) と卜リフエニルホスフィン（ 165mg) のテ卜ラヒドロフラン（2mし）溶液に、 0°Cでジフエニルホスホリルアジド（0. 1 2mL) とジェチルァゾジカルボキシレート（87 " L) を加え、室温で 6時問撹拌した。反応液に飽和食塩水を加えてジェチルエーテルで抽出した。

エーテル抽出層を無水硫酸マグネシゥムで乾燥したのち、減下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマ卜グラフィ一で精製し、へキサンノ酢酸ェチル（ 1 5Z1、体積比）溶出部分から [ (2 R, 1 ' S, 2' S) —4] を 92m g得た。

[ (2 R, 1 ' S, 2 ' S) 一 4] 無色油状物、 [ a ] υ²⁶· ⁸ ： - 3. 03 ( c 0. 99, C H C 1 , )

(3) [ (2 R, 1 ' S, 2' S) 一 4] から [ ( 2 R, 1 ' , ' S ) -

5] の製造

[ (2 R, 1 ' S, 2' S) -4] (92mg) のテ卜ラヒドロフラン（3 mL) 溶液に 0°Cでテ卜ラブチルアンモニゥムフルオライドを加え、 3時間撹拌した。飽和食塩水を加え、ジェチルエーテルで抽出した。

有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥したのち、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、へキサン Z酢酸ニチル（ 1 0/ 1、体積比）溶出部分から [ (2 R, 1 ' S, 2 ' S) - 5] を 65 m g 得た。

[ (2 R, 1 ' S, 2 ' S) - 5]

無色油状物、 [a] _D ^2B 。： —42. 4 (c 0. 97、 C H C 1₃ )

(4) [ (2 R, 1 ' S, 2' S) — 5] から [ (2 R, 1 ' S, 2 ' S) -

6] の製造

[ ( 2 R, Γ S, 2' S) - 5] (2. l g) と 5%P dノ活性炭の酢酸ェチル（2 mL) の懸濁液を水素ガス雰囲気下、室温常圧で 3時間撹拌した。反応液を濾過したのち、減圧濃縮し、得られた残渣を次の反応に用いた。

残渣のジォキサン/水（体積比 2 1の混合溶液を 1 8mL) m液に炭酸水素ナトリウム（3. 1 g) と二炭酸—ジ— t—ブチル（B o c₂ 0) ( 3. 5 g ) を加え、室温で 1時間撹拌した。反応液に飽和食塩水を加え、酢酸ェチルで抽出し、得られる有機抽出層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下で濃縮した。

得られた残渣をシリカゲルカラムクロマ卜グラフィ一で精製し、へキサン /酢酸ェチル（3Z2、体積比）溶出部分から [ ( 2 R, , 2' S) - Γ, ] を 3. 3 g得た。

[ (2 R, Γ S,. 2' S) - 6]

無色プリズム品、融点： 1 CM . 5〜 1 03. 5°C

[α] „^2η' ⁶ : - 1 9. Π 9 (( 1 . 0 1 , C 11 ( I , ) (5) [ (2 R, L ' S , 2 ' S ) — 6 ] から [ ( 2 R , 1 ' S, 2' S) -

7] の製造

[ (2 R, 1 ' S， 2' S) -6] (50 Omg) のアセトン（20mL) 溶液に氷冷下で Jo ne s試薬 (5mL) を加えた。 1時間後、ィソプロピルァルコール（3mL) を加え、 30分間撹拌したのち、水を加えて酢酸ェチルで抽出した。抽出液を無水硫酸マグネシウムで乾燥したのち、減圧濃縮し、残渣を得た。

残渣をジェチルエーテル（5mL) に溶解し、氷冷下でジァゾメタンのエーテル溶液を加えた。反応溶液を減圧下で濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、へキサンノ酢酸ェチル（5 し休槓比）溶出部分から [ (2 R, 1 ' S, 2' S) -7] を 442m g得た。

[ (2 R, 1 ' S, 2' S) - 7]

無色プリズム晶、融点： 59. 0〜6 し 0°C

[ α ] D^{29 2} : - 34. 84 (c 0. 528、 CHCし）

(6) [ (2 R, 1 ' S, 2' S) — 7] から [ (2 R， 1 ' S, 2 ' S) 一

8] の製造

[ (2 R， 1 ' S, 2' S) 一 7] ( 1. 0 g) と水酸化パラジウムとの酢酸ェチル（ l mL) 懸濁液を水素ガス雰囲気下で室温常圧で 5時間撹拌した。この反応液を濾過したのち、減圧下で濃縮し、得られた残渣を上記 (5) の変換操作に掛け、未精製の濃縮残渣を得た。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ一で精製し、へキサン Z酢酸ェチル（ 1 1、体積比）を用いて溶出粗精製した。

粗精製の濃縮残渣をべンジルアルコール（5mし）に溶解し、チタンテトライソプロボキシド（0. 87mL) を加えて、 70°Cで 3時間 ¾ftした。反応溶液をシリカゲルカラムグラフィ一（へキサン：酢酸ェチル = 20 ： 1、休積比）にかけて粗精製したのち、中圧クロマトグラフィー（へキサン：酢酸ェチル =4 ： 1、体積比）で精製して、 [ ( 2 R , 1 ' S. 2' S) 一 8 ] を： 3. Om 得た。

3 [ (2 R, Γ S, 2' S) -8]

無色ブリズム晶、融点： 1 14. 5〜 1 16. 5

[ α ] D^{28 0} : + 12. 12 (c 1. 006、 CHC )

(7) [ (2 R, 1 ' S, 2' S) — 8] から [ (2 R， 1 ' S, 2' S) - 9] の製造

[ (2 R, 1¹ S, 2' S) -8] ( 10 Om g) と水酸ィヒパラジウムとをメチルアルコール（0. 5mL) に懸濁し、水素ガス雰囲気下にて 3時間撹拌した。この反応液を漶過した後、減圧下で澳縮し、得られた残渣をテ卜ラヒドロフラン/水（ 1ノ1、体積比）（し 5mL) 混合液に溶解し、 36%塩酸（50 u L) を加え、 5 (TCで 2時間撹拌した。

反応液を濃縮した後、逆相カラムクロマトグラフィー（ODSカラム）を用いた HPLC (H₂ 0) で精製し、 [ (2 R, 1 ' S, 2' S) -9] (本発明の化合物の D— Π ： (2 R, 1 ' S, 2 ' S) - 2 - (2' —カルボキシー 3' ， 3' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン）の塩酸塩）を 18. 7mg得た。

[ (2 R, 1 * S, 2' S) 一 9〕 =D- Πの塩酸塩

無色プリズム晶、融点： 160°C (分解）

[α] ο^ζ5· ⁶ : -38. 54 (c 〇. 890、 H₂ 0)

I R ( B r ) v cm'¹ ： 3447, 3034, 2924, 1717, 1637, 1398, 1239, 1028, 948, 792.

'HNMR (400MHz, D₂ 0) δ ：

2. 73 ( 1 H, ddd, J = 1 1. 4, 10. 9， 7. 3 II z) ,

2. 97 ( 1 H, d d, J = 1 . 1 , 7. 2 H z) ,

3. 82 ( 1 H, d, J = 10. 9 Hz) .

l³CNMR ( 100. 6MH z, D₂ 0) δ ：

30. 56 (dd, J = 10. 2, 9. 3 Hz) ，

33. 84 (dd, J = 1 1. 1 , 1 0. 9 H z ) ,

53. 05,

1 13. 08 (d d, J = 292. 3, 285. 711 ) ,

171. 89,

4 1 73. 29.

,⁹FNMR (376. 5 H z, D₂ 0) δ :

一 7 1. 72 ( I F, d d, J = I 58. 2， 1 1 8 H z ) , 一 70. 05 ( I F, d d, J = 1 59. 8, 1 3 7 II z ) . (8) [ (2 R， 1 ' S， 2' S) — 7] から [ (2 R， 1 S, 2' S) 一

1 0] の製造

[ (2 R, 1¹ S, 2' S) 一 7] (74. 8mg) を、上記の（6) と同様な手順で脱べンジルエーテル、 J o n e s酸化して得られる残 ¾を 1 0%塩酸 /テ卜ラヒドロフラン（ 1 / 1、体積比）混合液の溶解し、 50 で 1時間撹拌した。

反応液を濃縮したのち、逆相カラムクロマトグラフィー（〇DSカラム）を用いた H P LC (H₂ 0) で精製して、 [ (2 R, 1 ' S , 2 ' S ) - 1 0] (本発明の化合物の D— Π ： (2 R, 1 ' S, 2 ' S) - 2 - ( 2 · —カルボキシー 3' , 3' —ジフルォロ）シクロブ口ピルグリシン）のモノメチルエステルの塩酸塩）を 1 4. 5mg得た。

[ (2 R, 1 ' S, 2' S) — 1 0] = D— IIのエステルの塩酸塩

無色プリズム晶、 [ a ] D²⁶- ⁰ : - 3 1 . 99 ( c 1 . 45、 H₂ 〇） 'HNMR (300MH z, D₂ 0) δ ：

2. 73 ( 1 H, ddd, J = 1 8. 4， 1 1. 4， 1 . 7 H z) ,

2. 97 ( 1 H， d d， J = 1 4. 4, 7. 5 II z ) ,

3. 88 (3 H, s) ,

4. 1 4 ( 1 H, d, J = 1 1. 〇 H z) .

1³CNMR ( 1 00. 6MHz, D₂ 0) δ :

29. 78 (dd, J= 1 1. 5, 8. 4 H z) ，

33. 87 (d d, J= 1 0. 9, 1 0. 9 H z) ,

52. 24,

57. 1 5，

1 1 2. 86 (d d, J = 292. 1 , 286. O il /.) , 1 7 1 . 05，

5 171. 79.

I⁹FNMR (376. 5MH z, D₂ 0) δ ：

-71. 70 ( I F, dd, J= 160. 6, 9. 3 II ) , 一 70. 01 ( I F, dd, J = 157. 9, 1 4. 0 H z ) . [実施例 4] (2 S, 1 * S, 2' S) 一 2— (2' —カルボキシー 3' ， 3' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン [Lー门およびそのェステルの製造（反応経路図 - 4)

OTBDMS

(2S,1'S, 2'S) - 3 (2R, 1'S, 2'S) - 11

(2S, 1'S, 2'S) -5 (2S, 1'S, 2'S) - 6 (2S, 1'S, 2'S)

(2S, 1'S, 2'S) - 8 (2S, S， 2'S) - 9

(2S, 1'S, 2'S) (2S， 1'S, 2'S) -10 98/00391

( 1 ) [ (2 S, 1 ' S, 2' S) —3] から [ (2 R, 1 · S, 2· S) -

1 1 ] の製造

[ (2 S, Γ S, 2' S) - 3] (3. O g) とトリフエニルホスフィン (4. 0 g) のテトラヒドロフラン（ 10mL) 溶液に、氷冷下、ジェチルァゾジカルボキシレー卜（2. l mL) と安息香酸（ 1. 6 g) とを加え、室温で 2 時間撹拌した。反応液に飽和食塩水を加え、ジェチルェ一テルで抽出した。エーテル抽出層を無水硫酸ナトリウムで乾燥したのち、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、へキサン酢酸ェチル（30Z1、体積比）溶出部分から [ (2 R, Γ S, 2' S) — 1 1 ] を 3. 5 g得た。

[ (2 R, Γ S, 2' S) - 1 1]

無色油状物、 [ t] _D ^{25 6} : +3. 00 (c 1. 000、 C H C 1 a )

(2) [ (2 R, 1 * S, 2、 S) — 1 1 ] から [ (2 R， I ' S, 2 ' S)

- 3 ] の製造

[ (2 R, 1 ' S, 2、 S) 一 1 1 ] (3. 3 g) のメチルアルコール（ 1 OmL) 溶液に I N— NaOH (5mL) を加え、室温で 6時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残渣に水を加え、ジェチルエーテルで抽出した。エーテル抽出層を無水硫酸マグネシゥムで乾燥したのち、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリ力ゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、へキサンノ酢酸ェチル（ 1 5Z1、体積比）溶出部分から [ (2 R， 1 ' S, 2' S) - 3] を 1 - 7 g得た。

[ (2 R, 1¹ S, 2' S) -3]

無色油状物、 [ α ] 。"· : - 1 6. 89 (c 1. 006, C HC 1 _a )

(3) [ (2 R, 1 ' S, 2' S) — 3〗から [ (2 S, I ' S. 2' S) —

9] の製造

上記の（2) で得られた [ (2 R, 1 ' S, 2' S) 一: に対して ¾施例 3の（2) 〜（7) に記載の処理を順次施し、本発明の化合物の [ (2 S, I ' S, 2' S) 一 9] 、すなわち、（2 S, I ' S, 2' S) - 2 - { 2' 一カルボキシ一 3' ， 3' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン [ 1.一 f ] の酸を得た。

[ (2 S, 1 ' S, 2' S) -9] 二 L一 Iの塩酸塩

無色プリズム晶、融点： 1 55°C (分解）

[a] D" ⁰ : + 50. 64 (c 1. 398、 H₂ 0)

I R (K B r) v cm" : 3414, 3061 , 171 2, 1 6 1 6, 1477, 1 226, 1 040, 737, 620.

lHNMR (400MHz, D₂ 0) δ :

2. 78 ( 1 H, ddd, J= 1 3. 0， 1 0. 8, 7. 5 H z) ,

2. 86 ( 1 H, dd， J = 14. 2, 7. 5 H z) ，

3. 92 ( 1 H, d, J= 1 0. 7 H z) .

I³CNMR ( 100. 6MH z, D₂ 0) δ :

30. 88 (d d, J= 1 2. 0, 8. 9 H z) ,

33. 29 (dd, J= l l . 1， 1 0. 9 H z) ,

53. 20，

1 13. 26 (dd, J = 289. 6, 286. 3Hz) ,

1 71. 77,

172. 89.

,⁹FNMR (376. 5MHz, D₂ 0) <5 ：

— 70. 35 ( I F, dd, J = 1 57. 9, 13. l H z) ， -67. 5 1 ( I F, dd， J = 1 56. 9, 1 2. 8 H z ) . (4) [ (2 R, 1 ' S, 2、 S) — 3] から [ (2 S, 1 ' S, 2 ' S) - — 10] の製造

前記の（2) で得られた [ (2 R, 1 ' S, 2' S) —3] に対して実施例 3の（8) に記載の処理を施し、本発明の化合物の〖（2 S， 1 ' S, 2' S) - 1 0] , 即ち、（2 S, S, 2' S) — 2— (2' —カルボキシ—3' , 3' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン [L一 I ] のモノメチルエステルの塩酸塩を得た。

[ (2 S, に S, 2' S) 一 10] = L— 【のエステルの塩酸塩

無色プリズム晶

I 9 [ ] ο^2λ· ⁸ ： + 52. 88 (c 1 . 49、 H ₂ 〇）

1 M N M R (300MH z, D₂ 0) δ ：

2. 60〜 2. 80 ( 2 H, m)

3. 9 1 (3 H, s)

4. 1 6 ( 1 H, d, J= 1 0. 7 H z) .

l³CNMR (75. 5MH z, D₂ 0) δ ：

29, 94 (dd, J= 1 3. 0, 8. 3 H z) ，

33. 38 (dd, J= 1 1. 1 , 1 0. 8 H z) ,

53. 39,

57. 08.

1 1 2. 73 (d d, J = 290. 〇， 286. 2 Η κ

1 70. 6 1 ,

1 7 1. 43.

,⁹FNMR (376. 5MH z, D₂ 〇） δ :

-70. 65 ( I F, d d, J = 1 60. 7 1 3. 0 Η ζ) 一 67. 8 1 ( I F, d d, J = 1 57. 4 I 3. 4 Η ζ)

[実施例 5] (2 R， 1 ' R, 2" R) - 2 - (2' —カルボキシー 3 ' , 3' —ジフルォロ）シクロブ口ピルグリシン [D— I ] の製造（反応経路図- 5)

^経路図一 5

(2R, 1'R, 2'R) -6 (2R， 1'R, 2'R) -7

(2R, 1'R, 2'R) - 7

(2R, 1'R, 2'R) - 10 ( 1 ) [ (2 S, Γ R， 2' R) — 2] から [ (2 R, 1 ' R, 2 ' R) - 9] の製造

[ (2 S, l ' R， 2' R) — 2] に対して実施例 3の（门〜（7) に記載の処理を順次施し、本発明の化合物の [ (2 R， 1 ' R, 2 ' R) - 9] 、すなわち、（2 R， R， 2' R) - 2 - (2' 一カルボキシー 3' , 3' —ジフルォロ）シクロブ Όピルグリシン [D— I ] の塩酸塩を得た。

[ (2 R, 1 ' R, 2' R) 一 9] =D- Iの塩酸塩

無色プリズム晶、融点： 1 53°C (分解）

[a] _D ^{27 6} : —47. 49 (c 0. 88、ト 0)

I R (KB r) v c -' ： 3424, 3035, 1 72 1 , 1 638, 1 477， 1 2 1 2， 1 045, 738, 622.

'H隨 R (400MH z, D₂ 〇） δ ：

2， 72 ( 1 H, ddd, J = 1 3. 2, 1 0. 8, 7. 6 H z) ,

2. 80 ( 1 H, dd， J = 1 4. 4， 7. 5 H z) ,

3. 8 1 ( 1 H, d, J = 1 0. 7 H z) .

l³CNMR ( 1 00. 6MH z , D₂ 0) δ ：

3 1. 24 (dd, J= 1 1 . 8, 8. 9 H z) ,

33- 78 (b r t) ，

53. 76,

1 1 3. 52 (d d, J = 289. 〇， 286. 011 z ) ,

1 72. 37，

1 73. 58.

1⁹F NMR (376. 5MH z, D₂ 〇） δ ：

- 70. 1 1 ( I F, dd， J = 1 57. 4 , 1 'Λ. 3 II κ ) -67. 44 ( I F, d d， J = 1 57. 4 , 1 5. 911 ζ )

[実施例 6] (2 S, Γ R, 2' R) - 2 - (2' —カカルルボボキキシシーー 33'' ， 3' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン [し— II ] およびそのェステルの製造（反応経路図一 6) 6ss/967fcIDd6i6 O/8AV :

( 1 ) [ (2 R, 1 ' R, 2' R) — 1 1 ] から [ (2 S, 1 ' R, 2 ' R)

-9] の製造

実施例 4に記載の方法に準じて、本発明の化合物の [ (2 S, 〗 ' 2' R) 一 9] 、即ち（2 S， 1 ' R, 2' R) —2— (2' 一カルボキシ— 3' , 3' ージフルォロ）シクロプロビルグリシン [L一 Π] の塩酸塩を得た。

[ (2 S, 1 ' R, 2' R) 一 9] = L- Πの塩酸塩

無色プリズム晶、融点： 1 65°C (分解）

[a] _D".⁰ : +40. 68 (c 0. 870, H , 0 )

I R (KB r) v cm-¹ ： 3209, 3046， 2928, 1 7 1 6, 1 646, 1 387, 1 226, 1 028, 950, 784.

'HNMR (400MH z, D₂ 0) δ :

2. 67 ( 1 H, d d d d, J = 1 1. 6 0. 9, 7. 3，

1. 6 H z) ,

2. 90 ( 1 H, dd, J = 1 4. 3， 7. 3 H z) ,

3. 72 ( 1 H， d, J= 1 0. 9 Hz) .

1³CN R ( 1 00. 6MH z, D₂ 0) δ ：

30. 66 (d d, J= 1 0. 0, 9. 5 H z) ，

34. 1 2 (d d, J= 1 0. 8, 1 0. 6 H z) ,

53. 29,

1 1 3. 2 1 (dd, J = 29 1. 9, 285. 7 II z ) 1 72. 2 1 ,

1 73. 64.

,⁹FNMR (376. 5MH z, D₂ 0) δ :

一 7 1. 73 ( I F, d d, J = 1 60. 8, 1 2 7 H z) ，一 70. 07 ( I F, d d, J = 1 59. 7, 1 3 Γ, [ [ v. ) ·

(2) [ (2 R, 1 ' R， 2' R) — 7] から [ (2 S. I H, 2 ' 10 1 0 ] の製造

実施例 4に記載の方法に準じて、本発 B/Iの化合物の [ (2 S. \\, 2' R) - 1 0] 、すなわち、（2 S, 1 ' R, 2' R) - 2 - ( 2 ' 一カルボキシ一 3' ， 3 ' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン [しー 1门のモノメチルェステルの塩酸塩を得た。

[ (2 S, 1 ' R, 2' R) —9] = L一 Πのモノメチルエステル塩酸塩無色プリズム晶、 [a] D²⁵' ⁶ ： +50. 67 (c 1. 03、 H_a O) 'HNMR (300MHz, D₂ 0) δ :

2. 81 ( 1 H, d d d, J = 18. 4, 1 1. 3， 1 - 7 H z ) ,

3. 07 ( 1 H, d d, J = 1 4. 0， 7. 1 Fl z ) ，

3. 91 (3 H， s) ,

4. 20 ( 1 H, J= 1 1. 3Hz) .

1³C NMR ( 100. 6MH z, D₂ 0) δ ：

29. 78 (d d, J = 1 1. 2， 9. 〇Hz) ,

33. 99 (b r) ，

52. 22，

57. 14,

1 12. 93 (d d, J = 292. 2， 286. 0 i-I z ) ,

171. 04,

171. 77.

l⁹FNMR (376. 5MH z, D₂ 0) δ :

一 71. 70 ( I F, dd， J= 157. 6, 9. 5 H z) , — 70. 01 ( I F, dd， J= 1 60. 1 , 13. 8 Hz) . (3) [ (2 R, 1 ' R, 2、 R) — 9] から [ (2S, 1 ' ， 2 ' R) — 12 ] の製造

上記の（ 1 ) で得た [ (2 R, Γ R, 2' R) -9] ( l ()_{m g}) をジェチルエーテルとメチルアルコールとの混合溶媒（ 1 ：し沐 ½比）に溶解し、ジァゾメタンのエーテル ¾液を加えた。減圧下で濃縮した後、 1 ⁽)% 酸を加えて減圧下で濃縮して、本発明の化合物の [ (2 S, R, 2' \\) - 1 2] , 即ち、（2 S， l ' R, 2' R) —2— (2' —カルボキシ一： Γ , 3' —ジフルォロ）シクロブ口ピルグリシン [し一 Π] のジメチルエステルの ¾酸塩を 1 に 2mg得た。 [ (2 S, 1 ' R, 2、 R) — 12] =L— Πのジメチルエステル塩酸塩無色プリズム晶

¹ H N M R (400MHz, D₂ 0) δ ：

2. 88 ( 1 H， dd, J= 18. 6, 1 1. 3 H z) , 3. 18 ( 1 H, dd, J= 13. 6, 7. 3 H z) ,

3. 83 (3 H, s) ,

3. 90 (3 H, s) ,

4. 21 ( 1 H, J= 1 1. 1 H z) .

l³CNMR (75. 5MH z, D₂ 0) δ :

29. 56 (dd, J = 8. 9， 8. 5 H z) ，

33. 07 (dd, J= 1 2. 5, 10. 2 H z) ,

51. 99,

56. 29,

57. 02，

1 12. 90 (dd, J = 292. 0, 286. 6 H z) , 170. 13，

170. 71.

1⁹FNMR (376. 5MH z, D_z 0) 0 :

-71. 80 ( I F, dd， J = 161. 1 , 12. 9 Hz) , 一 70. 15 ( 1 F, dd, J= 160. 7, 13. 1 H z ) . [実施例 7] (2R, 1 ' R， 2* S) -2- (2' -カルボキシ -:Γ , 3' ージフルォロ）シクロブ口ピルグリシン [D— ill] の製造（反応経路図— 7) 6 s/96¾73d I6S086/ OAV

( 1 ) [ (2 S' , 1 ' R， 2 ' S ) — 2 ] から [ ( 2 R , R , 2 ' S)

- 7 ] の製造

実施例 3に記載の方法に準じて、 [ (2S' ， Γ R, 2' S) -2] を順次処理し、 [ (2 R， 1 * R, 2' S) 一 7] を無色油状物として得た。

(2) [ (2R, 1 ' R, 2' S) — 7] から [ (3 S, 4 R, 5 R) 一 13

] の製造

[ (2 R, Γ R, 2' S) -7] ( 125mg) と 5%パラジウム/活性炭とのメチルアルコール（ I mL) 懸濁液を水素ガス雰囲気下、室温常圧で 2時間撹拌した。反応液を濾過、減圧濃縮し、得られた残渣をアセトン（5mL) に溶解し、 J one s試薬を加え、 30分間撹拌したのち、イソプロピルアルコ一ルを滴下し、さらに 30分間撹拌した。反応液に飽和食塩水を加え、ジェチルェ —テルで抽出した。抽出有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥したのち、減圧濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（へキサン：酢酸ェチル =5 : 1、体積比）で精製を行ない、 [ (3 S， 4 R, 5 R) — 13] を無色油状物として 60m g得た。

(3) [ (3 S, 4 R, 5 R) — 13] から [ (3S, 4 R, 5 R) 一 14] 及び [ (2 R， 1 ' R， 2' S) - 9] の製造

[ (3 S, 4 R, 5 R) - 13] (33mg) に 1 N塩酸 (4mL) を加えて 60°Cで 5時間撹拌した。反応液を減圧下で乾燥したのち、逆相カラムクロマ卜グラフィーを用いた HP LC (H₂ 0) で精製し、 [ (3 S, 4 R, 5 R) - 14】を 7. 9mg、そして本発明の化合物の [ (2 R, 1 ' R, 2' S) —9 ] 、即ち、（2R， 1 ' R, 2' S) 一 2— (2' 一カルボキシ— 3' , 3' - ジフルォロ）シクロプロピルグリシン [D— III] の塩酸塩を 7. 6mg得た。

[ (3 S, 4 R, 5 R) - 14]

無色プリズム晶

'HNMR (400MHz, D₂ 0) δ ：

3. 0〇（ 1 H， d d, J = I 1. 7, 8. 2 ΙΙ κ) , 3. 14 ( 111, d d, J = 1 0. 9, 8. 2 i I /. ) ,

4. 58 ( 1 II , s) , CNMR ( 1 00. 6MH z, D₂ 0) δ

30. 1 8 (dd, J = 1 2 9 1 2. 8 H z

32. 84 (dd, J= 1 3 7 1 3. 4 H z

56. 8 1 ,

1 1 2. 1 1 (dd, J = 292 5, 278. 2 [1 z

1 75. 1 5,

1 76. 05.

,⁹FNMR (376. 5MHz, D₂ 0) δ ：

-84. 26 ( I F, d, J = 1 57. 1 H z) ，

- 64. 32 ( I F, d d d, J= 1 57. 0, 1 2 6,

9. 2 H z) .

( 2 R, 1 ' R, 2' S) 一 9] = D— ΙΠの塩酸塩

無色プリズム晶

[ a] D²⁵- ⁰ : + 1 7. 34 (c 0. 830、 H₂ 0)

I R (KB r) v cm"¹ : 3422, 3038, 1 72 1 1 627,

147 1 , 1 400， 1 225, 1 045, 975, 7 1 0

'HNMR (30 OMHz, D₂ 0) δ :

2. 6 1 ( 1 H, d d d, J = 1 1. 8， 1 1. 7， 1 1. 6 H z)

3. 0 1 ( 1 H, dd, J = 1 2. 6, 1 1 - 4 H z) ,

4. 55 ( 1 H, d, J= 1 1. 3 H z) .

,³CNMR (75. 5MHz, D₂ 0) δ :

29. 1 2 (dd, J= 1 1. 7, 8. 9 H z) ,

3 1. 25 (dd, J= 1 0. 6, 8. O U z ) ,

50. 46,

1 1 2. 5 (dd， J = 292. 9, 282. 911 κ ) .

1 7 1. 60,

1 73. 44.

1^<JFN R (376. 5 M H z , D, 0) δ ：

- 79. 04 ( 1 F, d, J= 1 59. 1 II z ) . - 59. 05 ( I F, d d d, J = 1 57. 0, 1 ,

13. 0 H z) .

[実施例 8] (2 S, 1 ' R, 2* S) -2- (2' 一カルボキシ—3' , 3' —ジフルォロ）シクロブ口ビルグリシン [し— IV] の製造（反応経路図一 8)

一 8

(2R， 1'R, 2'S) -3 (2S, 1'R, 2'S) - 4

(2S, 1'R, 2'S) (3S, 4R, 5S) -13

(3S, 4R, 5S) -14 (2S, 1'R, 2'S) -9 ( I ) [ (2 S, I ¹ R, 2 ' S ) — 2 ] から [ ( 2 S , に R, 2 ' S) - 7] の製造

実施例 4に記載の方法に準じて、 [ (2 S, l ' R， 2' S) - 2] を順次処理し、 [ (2 S, 1 ' R, 2' S) —7] を無色プリズム品として得た。

(2) [ (2 S, 1 ' R, 2' S) 一 7] から [ (3 S, 4 , 5 S) 一 1 3

] の製造

実施例 7に記載の方法に準じて、 [ (2 S. 1 ' R, 2' S) — 7] から [ (3 S, 4 R, 5 S) 一 1 3] を無色プリズム晶として得た。

(3) [ (3 S, 4 R, 5 S) — 1 3] から [ (3 S, 4 . B S) 一 1 4] 及び [ (2 S, 1 ' R, 2' S) - 9] の製造

[ (3 S, 4 R, 5 S) - 1 3] から実施例 7に記載された方法を利用して [ (3 S, 4 R, 5 S) 一 1 4] 、そして本発明の化合物の [ (2 S, 1 ' R, 2 ' S) -9] 、すなわち、（2 S， 1 ' R, 2' S) 一 2— （2，一カルボキシー 3' , 3' —ジフルォロ）シクロプロピルグリシン [L一 IV] の塩酸塩を得た。

[ (3 S, 4 R, 5 S) 一 14]

無色プリズム晶

lHN R (400MH z, D₂ 0) 0 ：

2. 99 ( 1 Η, d d, J = 1 1. 8， 8. 5 H z) ,

3. 1 7 ( 1 H, d dd, J= 1 0. 6, 8. 1 , 7. 9 H z) , 4. 93 ( 1 H, dd， J = 7. 4, 1. 8 H z) .

1³C NMR ( 1 00. 6MH z , D₂ 0) δ ：

28. 59 ( d d , J = I 2. 5 , 1 2. 11 z ) ,

33， 83 (d d, J = 1 3. 42 , I 3. 3511 x ) , 57. 85,

1 1 2. 68 (dd， J = 293. 0, 279. I ( κ ) , 1 74. 46,

1 75. 72.

,^UFNMR (376. 5 M 1 i , D, 0) δ ： -8 1. 75 ( I F, d， J = 16 1. l H z) ，

-63. 03 ( I F, ddd, J= 1 61. 0, 1 2. 〇，

9. 4 H z ) .

[ (2 S, Γ R, 2、 S) -9] =L一 Wの塩酸塩

無色プリズム晶

[α] ₀ ^2β· ⁵ : +70. 78 (c 0. 955、 Η₂ 〇）

I R (KB r) v cm"： 3455, 3032, 1 732, 1 626，

1472, 1219, 1 1 56, 1085, 1046, 975. 'HNMR (300MHz, D₂ 0) δ :

2. 71 (1 H, ddd, J = 10. 5, 1 0. 4， 9. 4Hz) ，

3. 05 ( 1 H, dd, J= 1 2. 0, 1 1. 9 Hz) ,

4. 7 1 ( H, d， J = 1 1. 5 H z) .

1³CNMR (75. 5MH z, D₂ 〇） δ ：

29. 10 (dd, J= 10. 1 , 9. 9 H z) ，

31. 07 (dd, J = 1 1. 6， 9. 0 H z) ,

48. 76,

1 1 2. 5 1 (dd, J = 292. 4, 285. 3 hi z ) , 171. 73,

172. 64.

1⁹FNMR (376. 5MH z, D₂ 0) δ ：

-83. 27 ( I F, d, J = 16 1. 3 H z) ，

-59. 10 (I F, ddd, J = 1 6 1. 2, 1 0. 7，

9. 3Hz) .

[実施例 9] (2 R, 1 ' S, 2' R) 一 2— (2' —カルボキシー 3' , 3' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン [D— 1V] の製造（反応経路図一 9)

実施例 7に記載された方法を利用して [ (3 R, 4 S, 5 R) — 14] 、そして本発明の化合物の [ (2 R, l ' S, 2' R) _9] 、すなわち（ 2 R , S, 2' R) —2— （2' —カルボキシ一 3' , 3' -ジフルォロ）シクロブ口ピルグリシン [D— IV] の塩酸塩を得た。

[ (3 R, 4 S, 5 R) - 14]

無色プリズム晶

'HNMR (400MHz, D₂ 0) δ ：

2. 99 ( 1 H, dd, J= 1 1. 9, 8. 6Hz) , 3. 1 7 ( 1 H, dd, J= 1 8. 7, 8. 1 H z) , 4. 58 ( 1 H, d, J = 7. 3 H z) .

,³CNMR ( 100. 6MH z, D₂ 0) δ :

28. 57 (dd, J = 1 2. 5, 1 2. 4 H z) ,

33. 82 (dd, J= 13. 4, 13. 3 H z) ,

57. 83,

1 1 2. 67 (dd, J = 293. 0, 279. 4 H z) , 1 74. 44，

1 75. 70.

[ (2 R, 1 ' S, 2、 R) 一 9] =D— IVの塩酸塩

臼

無色プリズム曰曰

[a] 。²².⁴ : - 67. 99 (c 1 050、 H₂ 0)

I R (KB r) v cm- ¹ : 3432 3039, 1 73 1 , 1 636, 1471 , 1 2 19, 1 155 1084, 1 047, 974. 'HNMR (400MHz, D₂ 0) δ ：

2. 65 ( 1 H, d d d d, J = 1 1. 8, 1 1. 7， 1 0. 1，

2. 5 H z)

3. 06 ( 1 H, ddd, J= 12. 2, 1 2. 1 , 2. 2 Η κ)

4. 58 ( 1 H, d, J= 1 1. 4 H z) ,

3CNMR ( 100. GMHz, D_z 0) δ ：

29. 27 ( d <i , J= 1 0. 3 , 9. 611 ) , 31. 50 (b r t) ，

49. 54,

1 12. 66 (dd, J = 291. 8, 283. 9 l-i z ) , 171. 78,

173. 25.

l⁹FNMR (376. 5MH z, D₂ 0) δ :

-83. 24 ( I F, d, J = 161. 4 H z) ,

-59. 14 ( I F, d d d, J = 161. 4， 1 1 - 7,

9. 9 H z) .

[実施例 10] (2S, 1 ' S, 2' R) - 2 - (2 ' —カルボキシ -3' ,

3' ージフルォロ）シクロブ口ビルグリシン [L-ffi] の製造 (反応経路図 - 10)

実施例 8に記載された方法を利用して [ (3R, 4S, 5S) — 14] 、そして本発明の化合物の [ (2S， l ' S, 2' R) — 9] 、すなわち（2 S, に S, 2· R) 一 2— (2' 一カルボキシー 3' , 3' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン [L— III] の塩酸塩を得た。

[ (3 R, 4 S, 5S) - 14]

無色プリズム晶

'HNMR (400MHz, D₂ 〇） δ ：

3. 00 ( 1 Η, dd， J = 1 1. 7, 8. 2 H z) ， 3, 14 ( 1 H, dd, J= 10. 9, 8. 3 Hz) ,

4. 57 ( 1 H, s) .

¹³CNMR ( 100. 6MHz, D₂ 0) δ ：

30. 19 (dd, J = 12. 9, 12 6 H z

32. 84 (t, J= 13. 4H z) ，

56. 81,

1 12. 05 (t， J = 291. 8 H z) ,

175. 16,

176. 06.

[ (2 S, 1 ' S, 2" R) -9] =L fflの塩酸塩

無色プリズム晶

[a] D²⁵- ⁴ : - 13. 90 (c 0 820、 H ₂ 〇）

I R (KBr) v cm"： 3438, 3033 1720, 1637,

1471 , 1399， 1224, 1043 974, 708.

'HNMR (300MHz, D₂ 0) δ :

2. 58 ( 1 H , d d d, J= 1 1. 7, 1 1. 5, 1 に II z

2. 99 ( 1 H, d d, J = 12. 2, 10. 7ト 1 κ ) , 4. 51 ( l H, d, J= 1 1. 5Hz) ,

^,3CNMR (75. 5 M H z , D₂ 0) δ :

29. 37 ( d d , J = 1 0. 9. 9. 5 II z ) ,

3 L . 55 (d d, .J = I 0. 8, 1 0. 2 ΙΙ ) , 50. 65,

1 12. 77 (dd, J = 292. 7， 282. 9 Hz) , 171. 81,

173. 63.

,⁹FNMR (376. 5MHz, D₂ 0) δ :

-79. 02 ( 1 F, d， J= 158. 9 H z) ,

-59. 03 ( I F, d d d, J= 157. 0， 1 3. 1 ,

12. 5 H z) .

[実施例 1 1] (2R, l' R， 2' S) — 2— （2' —カルボキシー 3' ,

3' -ジフルォロ）シクロプロピルグリシン [D— ΠΙ] の製造（別法：反応経路図一 1 1 )

反絰路図一 1 1

9a, b

R = Bn(a), R = i-Pr(b)

5a, b

(2R， 1'R, 2'R)-4

11 ( 1 ) (4 S) 一 3— [ (E) 一 4' ーブロモー 4' ， 4' ージフルォ Π— 2' 一ブテノィル] 一 4一べンジル - 2—ォキサゾリジノン（化合物 5 a) アルゴン雰囲気下、 (4 S) 一 N—ブロモアセチルー 4-ベンジル— 2—ォキサゾリジノン（3. 7 g) とトリフエニルホスフィン（3. 6 g) とのァセトニトリル（ 15mL) 溶液を 50°C2日間撹拌した。この反応混合物に 2 N— N a OH水溶液（6. 5mL) を加えて、ェチルエーテルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮して、ホスホラン 9 aの粗体を残渣として得た。

ェチルブロモジフルォロアセテート（ 1. 7mL) と D I BAL— H (ジイソブチルアルミニウム 'ハイドライド、 0. 93Mへキサン溶液、 1 4. 7mL) とをェチルエーテル（10mL) に入れ、一 78°Cで 20分間撹拌した。この反応混合物にメチルアルコール（5mL) 、次いで 5%HC 1 (10mL) を順に加え、全体を室温で 10分間撹拌した。この混合物をェチルエーテルで抽出し、そしてその有機層を、飽和炭酸水素ナ卜リゥム水溶液と飽和食塩水とで順次洗浄した。次に、この有機層を無水硫酸マグネシウムを用いて乾燥し、減圧下で濃縮した。

上記の残渣の溶液と前記のホスホラン 9 aの粗体とをテ卜ラヒドロフラン（T HF) (38mL) 中で室温下、 5時間撹拌した。減圧下で溶媒を留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、 2. 88gの（4S) — 3— [ (E) 一 4' 一プロモー 4' ， 4' ージフルオロー 2' —ブテノィル] 一 4一ベンジルー 2—才キサゾリジノン（化合物 5 a) を無色油状物として得た。

(2) (2 R, Γ R, 2' R, 4" S) 一ェチル N—ジフエニルメチリデン一 2— [2' - { (4" —ベンジルー 2" —ォキサゾリジノン— 3" — ィル）カルボ二ル} 一 3· , 3' —ジフルォロ] シクロブ口ピルグリシネー卜（7 a) の製造

アルゴン雰囲気下、ェチル · Ν— （ジフエニルメチリデン）グリシネー卜（6 ) (756mg) と LDA (リチウム ·ジイソプロビルアミド、 0. 47ml,の N, N—ジイソプロピルァミンと n—ブチルリチウムのへキサン溶液 U . 6「） M溶液、 1 , 87mL) とから得たもの）とを、ジメチルホルムアミド（DMF 、 15mL) 中、一 20°Cにて 15分間撹神した。これに、上 ilの（4S) —3— [ (E) 一 4' ーブロモー 4' , 4' ージフルオロー 2' —ブテニル] 一 4—ベンジルー 2—ォキサゾリジノン（化合物 5 a) 溶液（ 1 Om Lの DMF中に 92 6mg) を加えた。同じ温度で 2時間撹拌したのち、飽和塩化アンモニゥム水溶液を加えて反応を停止させ、反応混合物をェチルエーテルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（へキサン酢酸ェチル = 7/ 1 ) で精製したところ、 758mg (54%) の標記化合物（7 a) (無色油状物）と 245mg ( 16%) の（8a) (無色油状物）が得られた。

(3) (2 R, 1 ' R, 2、 R) — 2— （2' —カルボキシ— 3' , 3' -ジフルォ口）シクロプロビルグリシン [D— I] の製造

ベンジルアルコール（lmL) と T i (0— i一 Pr ( 1 54m g) との混合物を減圧（40mmH_g) 下、室温で 30分間撹拌した。得られた残渣に、上記の残渣（7 a) ( 1 OOmg) を加え、この混合物を 70 °Cで 7時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（へキサン/酢酸ェチル = 10/1 ) で精製すると、無色油状物のジベンジルエステル体（ 1 1 ) が得られた（87mg、 89%) 。

水素雰囲気下、ジベンジルエステル体（ 1 1 ) (87mg) と 5%パラジウム Z活性炭とを l mLのメチルアルコール中で室温下、 5時間搅拌した。触媒を濾別し、濾液をへキサンと水とで分配させた。水槽を減圧下で濃縮し、固体残渣を得て、これをェチルエーテルで洗浄して、目的の（2 R, 1 ' R, 2' R) 一 2 - (2' —カルボキシ一 3' ， 3' ージフルォロ）シクロプロピルグリシン [D 一 I ] を得た（31 mg) 。

無色プリズム晶、融点： 200°C (分解）

[ ] ο²³· ² : +39. 4 (c 1. 00、 H₂ 0)

I R (KB r) v cm"¹ : 3106, 1621 , 1530, 1476.

1393.

¹ H N M R (400MHz, D₂ 0) δ ： 2. 72 ( 1 H, m)

2. 80 ( 1 H, d d, J = 15. 0, 7. 8 H z ) ,

3. 81 ( 1 H, d, J= 10. 7 H z) .

1³CNMR ( 100. 6MH z, D₂ 0) δ :

31. 3 (dd, J= 1 1. 6, 8. 6Hz) ,

34. 1 (b r) ,

54. 2 (b r) ，

1 13. 7 (dd, J = 288. 2, 286. 1 H z) ， 172. 7，

173. 7.

l⁹FNMR (376. 5MH z, D₂ 0) δ ：

— 71. 4 (I F, dd， J= 157. 6 13. 6 H z ) ，

- 69. 0 ( I F, dd, J = 157. 2 14. 8 H z) .

[薬理実験]

( 1 ) 代謝調節型 L一グルタミン酸受容体（mG i uR) のグループ Iに対する作用

脱分極活性の測定

被検薬物によって惹起される新生ラット脊髄摘出標本の脱分極は、篠崎らの方法（B r. J. Pharmaco l . 98巻、 1213〜 1224頁、 198 9年）に従った。即ち、新生ラッ卜脊髄摘出標本を用いテトロドトキシン 0. 5 ίΐ Mを含む人工脳脊髄液漼流下に、その運動神経細胞前根からの脱分極の細胞外記録を、公知の mG 1 uRのァゴニストである CCG (2 - (カルボキシシクロプロビル）グリシン）及び本発明化合物について、濃度 10—³Μ〜 10·⁷Μで測定し、最小有効濃度（MEC) を求めた。

活性の強さは、本発明の好ましい化合物（8種： L一：!〜【V、 ])- 1〜IV) の光学配置にそれぞれに対応する各々の CCGの最小有効濃度（MF!C) の比で評価した（L— I〜IV及び D— I〜IVは全て塩酸塩を用いた）。その結果を表 Iに示す。表 1 ：対応する光学配置の CCGの活性の強さの比

I Π ra IV

L 3 0. 3 2 1 1=；

D体 1. 5 0. 1 〈0. 1 〈〇. 0 1

表 2 ：光学配置が対応する CCGの最小有効濃度 (αΜ)

I ϋ ΠΙ IV

L体 2 200 100 〇. 3

D体 3 0. 1 300 5 次に、 3 X 1 Cr⁵Mの NMDA型のアンタゴニストである C Ρ Ρ (3— [ (R S) — 2—カルボキシビペラジン一 4一ィル] プロピル— 1—ホスホン酸）または D— AP5 (D (一）一 2—ァミノ— 5—ホスホノ吉草酸）を加えた人工脳脊髄液港流下に同様の実験を行なったところ、本発明の化合物の L— I及び L一 Π の脱分極活性は殆ど影響を受けないことが確認された。

本発明の化合物 L一 Iによる NMD A様脱分極は、公知物質である DCG— IV

( (2 S, 1 ' R, 2' R, 3' R) -2- (2, 3—ジカルボキシシクロプロビル）グリシン）に比べると約 1 33に相当し、弱いことが確認された。これは、脱分極力 ^s事実上において無視できる程度のものであることを意味する。次に、 NMD A型受容体アン夕ゴニス卜である D— AP 5および非 NMD A型受容体アンタゴニス卜である CNQX (6—シァノー 7—二卜口キノキサリン一 2, 3—ジオン）の各 100 の存在下で同様の試験を行なった。その結果、 L一 ΙΠ、 L - IV及び D体では抑制が観察されたが、 L一 I及び 1,— ίΐでは殆ど抑制されていなかった。一方、 mG 1 u Rのグループ Iのアンタゴニス卜である MC PG ( ( S) 一 α—メチルー 4一カルボキシフエニルグリシン）（ l mM) の存在下に同様の試験を行なったところ、 L一 Iおよび L一 Πの脱分極が抑制されることが確認された。

( 2 ) mG 1 uRのグループ Πに対する作用

単シナプス反射抑制活性の沏 I定

新生ラット脊髄摘出標本における単シナプス反射測定は、大塚（大塚正徳、生体の科学、 36巻 4号 325〜327頁）に報告されている方法により行なつた。すなわち、新生ウィスター系ラッ卜の脊髄をエーテル麻酔下に脊柱に囲まれたまま摘出し、酸素 95%、炭酸ガス 5%を飽和した人工脳脊髄液に浸漬したまま実体顕微鏡下に L 3から L 5までの前根および後根を付けたままの半切脊髄摘出標本を漼流漕に移し、酸素 95%炭酸ガス 5%で飽和した人工脳脊髄液で港流する。

後根に吸引電極を介して単一刺激を加え、同一前根から前根反射電位を記録すると、早い時間経過のスパイクに続いて、ゆっくりとした脱分極とこれにのつた非同期性の電位変化が観察される。この早い時間経過のスパイクは、単シナプス性反射に相当する。

港流液に種々の濃度の被検薬物を加えて単シナプス性反射を測定し、その最小有効濃度（MEC) を求めた。

公知の mG 1 uRのァゴニス卜である L一 CCG— Iの最小有効濃度は 0. 2 uMであり、本発明のシクロブ口ピルグリシン誘導体 L一 Iは、脊髄単シナプス性反射を 3倍強く抑制することが確認された。

次いで、 mG 1 u Rのグループ Πのアンタゴニストの MC CG— I ( (2 S, 3 S, 4 S) 一 α—メチルー 2— （2—カルボキシシクロプロピル）グリシン） 0. 3mMの存在下で、同様の試験を行なったところ、本発明の化合物し一 I及び L一 IIの脊髄単シナプス性反射の抑制作用は消失すること力認された。

(3) 本発明のシクロプロビルグリシン誘導体の薬理効梁のまとめ

1 ) L- 1の脱分極活性は、 N M D A型受容体ァンタゴニス卜であるじ一 Λ P 5 ( 1 00 u ) で僅かに（ 5 %) 抑制され、非 N M D Λ 休ァンタゴ二

4 B O 98/00391 ス卜である CNQXに感受性であり、また mG 1 u Rのグループ Tのアンタゴニス卜である MCPG (ImM) でほぼ完全に抑制された。

また L一 Iは、脊髄単シナブシス性反射を減弱させ、この作用は mG 1 uRのグループ Πのアン夕ゴニストである M C C Gで抑制された。

従って、この L一 Iは mG 1 uRのグループ I及びグループ Πのァゴニス卜の機能を有し、最小有効濃度で比較するとグループ Πのァゴニス卜作用が強いといえる。

2) L一 Πは、非 NMDA型受容体アン夕ゴニストである CNQXに非感受性であり、 mG 1 u Rのグループ Iのァゴニストであると考えられる。

3) L一 IIIおよび L一 IV、そして D体の全ては、 NMDA型ァゴニストと考えられる。

4) L一 fflでは、 L— CCG— Π1力 s有するトランスポーターへのグルタミン酸取り込み阻害作用が失われていることがわかる〔日薬理誌、 104、 177-1 87 (1994) 、 Br. J. Pharmaco l . 98巻、 1213〜： 122 4頁、 1989年] 。

[産業上の利用可能性〗

前記の薬理実験結果からわかるように、本発明のシクロプロピルグリシン誘導体、特に（2S, Γ S, 2' S) 一 2— （2， —カルボキシー 3' ， 3' —ジフルォロ）シクロブ口ビルグリシンは、代謝調節型 L一グルタミン酸受容体ァゴニス卜として優れた特性を示すため、たとえば、ハンチントン氏病、てんかん、パ一キンソン氏病などの各種神経変性疾患あるいは虚血性神経細胞死に由来する各種の脳中枢の機能障害の治療に、また鎮静剤、鎮痛剤、麻酔増強剤あるいは抗痙攣剤として用途力期待される。

さらに、本発明のシクロブ口ビルグリシン誘導体はグルタミン酸受容体のアンタゴニスト等への開発の糸口を提供し、また各種の試薬および医薬品としての利用力期待される。

Claims

1. 下記の一般式：

ミ青

の

[ただし、 R¹ と R² とは、それぞれ独立に、水囲酸基もしくは炭素数 1〜6のァルコキシ基を表わし、 R³ と FT とは、それぞれ独立に、水素原子もしくは炭素数丄〜 6のアルキル基を表わし、 X' と） ² とは、それぞれ独立に、ハロゲン原子を表わす。〗で表わされるシクロプロピルグリシン誘導体。

2. R³ ととが共に水素原子を表わし、 X¹ と X² とが共にフッ素原子を表わす請求の範囲第 1項に記載のシクロプロビルグリシン誘導体。

3. (2 S, 1 ' S, 2' S) -2 - (2' 一カルボキシー 3' , 3' —ジフルォ口）シクロプロビルグリシン。

4. 下記の一般式：

[ただし、 R² は、水酸基もしくは炭素数 1〜6のアルコキシ ¾を ^わし、 I ' は、水素原子もしくは炭素数 i〜6のアルキル基を表わし、 X' と X² とは、それぞれ独立に、ハロゲン原子を表わす。〗で表わされるラクタム ^ 。

5. 下記の一般式：

[ただし、 R¹ と R² とは、それぞれ独立に、水酸基もしくは炭素数 1〜6のァルコキシ基を表わし、 R³ ととは、それぞれ独立に、水素原子もしくは炭素数 1〜6のアルキル基を表わし、 X¹ と X² とは、それぞれ独立に、ハロゲン原子を表わす。 ] で表わされるシクロブ口ビルグリシン誘導体を有効成分とする代謝調節型 L一グルタミン酸受容体ァゴニス卜。

6. シクロプロビルグリシン誘導体の式の R ³ と FT とが共に水素原子を表わし、 X' と X² とが共にフッ素原子を表わす請求の範囲第 5項に記載の代謝調節型 Lーグルタミン酸受容体ァゴニスト。

7. (2 S, Γ S, 2' S) -2- (2' 一カルボキシー 3' , 3' —ジフルォ口）シクロプロピルグリシンを有効成分とする代謝調節型 L―グルタミン酸受容体ァゴニス卜。