WO1999037795B1 - PROMOTOR Y SECUENCIAS REGULADORAS DE Ha ds10 G1: UN GEN LEA DE GIRASOL EXPRESADO EXCLUSIVAMENTE EN SEMILLAS DESDE LA FASE DE MADURACION - Google Patents
PROMOTOR Y SECUENCIAS REGULADORAS DE Ha ds10 G1: UN GEN LEA DE GIRASOL EXPRESADO EXCLUSIVAMENTE EN SEMILLAS DESDE LA FASE DE MADURACIONInfo
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Abstract
Con la presente invención aislamos y caracterizamos en plantas transgénicas de tabaco, el promotor y las secuencias reguladoras de un gen LEA-I de girasol, Ha ds10 G1. Estas secuencias presentan unas características muy apropiadas para su uso en la modificación de semillas (por ej. de sustancias de reservas). Las ventajas de su posible uso en plantas transgénicas se muestran mediante ejemplos como estudios de la acumulación y localización del ARNm Ha ds10 en el sistema homólogo. Estos estudios muestran tanto los elevados niveles de expresión alcanzados durante la embriogénesis desde fases tempranas de la maduración, como sus absoluta especificidad de semilla, acompañada de una localización homogénea en embriones que acaba restringiéndose fundamentalmente al parénquima en empalizada de los cotiledones, un tejido especializado en la acumulación de sustancias de reservas en el girasol.
Claims
REIVINDICACIONES MODIFICADAS
[recibidas por la oficina Internacional el 22 de julio de 1999 (22.07.99); reivindicaciones 1-13 reemplazadas por las nuevas reivindicaciones 1-25 (2 páginas)]
1- Secuencia de nucleótidos constituida por el gen de girasol Ha ds10 G1, su promotor, secuencias 5'- y 3'-flanqueantes de Ha ds10 G1 y su uso en la expresión génica específica de semilla.
2.- Secuencia de nucleótidos según reivindicación 1 , caracterizada porque está constituida por la secuencia SEQ ID N°1.
3.- Secuencia de nucleótidos según reivindicación 1 , caracterizada porque está constituida por fragmentos de la SEQ ID N°1.
4.- Secuencia de nucleótidos, caracterizada porque comprende una secuencia de nucleótidos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 3.
5.- Secuencia de nucleótidos homologa a la secuencia de nucleótidos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 4.
6.- Secuencia de nucleótidos homologa según reivindicación 5, caracterizada porque la homología es del 70% al 95%.
7._ Secuencia de nucleótidos caracterizada porque contiene secuencias según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 6 y un gen quimérico.
8.- Secuencia de nucleótidos según reivindicación 7, caracterizada porque permite la expresión de un gen quimérico.
9.- Secuencia de nucleótidos según reivindicación 8, caracterizada porque permite la expresión del gen quimérico especifico de semillas desde etapas tempranas de maduración.
10.- Secuencia de nucleótidos según reivindicación 9, caracterizada porque está constituida por las construcciones ds10F1 , ds10F2, ds10F2 E, ds10F3 y ds10EC1 o parte de dichas secuencias.
11. -Secuencia de nucleótidos según reivindicación 9, caracterizada porque contiene secuencias codificantes y 3'-flanqueantes del gen Ha ds10 G1.
12.- Secuencia de nucleótidos según reivindicación 11 , caracterizada porque está contenida en las construcciones ds10F2 y ds10F2/E.
13.- Secuencia de nucleótidos según reivindicación 9, caracterizada porque contiene secuencias codificantes y del intrón del gen Ha ds10 G1.
31
14.- Secuencia de nucleótidos según reivindicación 13, caracterizada porque está contenida en la construcción ds10F3.
15.- Cassette de expresión caracterizado porque contiene una secuencia de nucleótidos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 14 y un gen quimérico.
16.- Vector caracterizado porque contiene una cassette de expresión según reivindicación 15.
17.- Células hospedadoras caracterizadas porque contienen una secuencia de nucleótidos según una cualquiera de las reivindicaciones 14 a la 16.
18.- Uso de las secuencias de nucleótidos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 16 en la expresión específica de genes quiméricos en semillas, parte de semillas, en extracto de semillas, embriones de semillas y en tejidos de germínulas.
19.- Uso de las secuencias de nucleótidos según una cualquiera de las reivindicaciones 10 a la 12 para incrementar la expresión de genes quiméricos específicamente en semillas de plantas transgénicas.
20.- Uso de las secuencias de nucleótidos según una cualquiera de las reivindicaciones 12 a la 14 para incrementar la expresión de genes quiméricos en semillas y/o para reducirla en otros tejidos.
21. -Plantas transgénicas caracterizadas porque son plantas transformadas por una secuencia de nucleótidos según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a la 16.
22.- Planta transgénica según reivindicación 21 , caracterizada porque se selecciona de las siguientes de girasol, tabaco, soja, colza, la cañóla, el maíz, el trigo, la cebada, el arroz, la judia, la casava y el cacahuete.
23.- Uso de las plantas transgénicas según una cualquiera de las reivindicaciones 21 a la 22 para la producción de sustancias fruto de la expresión de genes quiméricos.
24.- Uso de las plantas transgénicas según reivindicación 23 caracterizado porque las sustancias son proteínas, substancias bioactivas y aceites.
25.- Las sustancias obtenidas según una cualquiera de las reivindicaciones 23 y
24.
HOJA MODIFICADA (ARTÍCULO 19)
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