WO2003013587A1

WO2003013587A1 - Compositions pour l'occlusion vasculaire

Info

Publication number: WO2003013587A1
Application number: PCT/JP2002/007894
Authority: WO
Inventors: Yasuhiko Tabata; Susumu Miyamoto; Keisuke Yamada
Original assignee: Yasuhiko Tabata; Susumu Miyamoto; Keisuke Yamada
Priority date: 2001-08-03
Filing date: 2002-08-02
Publication date: 2003-02-20
Also published as: JP2003048841A

Description

明細書血管閉塞用組成物技術分野

本発明は、繊維性部材、細胞増殖因子を徐放することができる部材 (徐放部材)、及び細胞増殖因子を含む、動脈瘤処置に有用な血管閉塞用組成物に関する。背景技術

最近、動脈瘤などに対する低侵襲性の処置法として、カテーテルを用いて血管閉塞用物質を動脈瘤内に留置し動脈瘤を閉塞する、いわゆる血管内手術法が提案されている。その血管閉塞用物質としては、セルローススポンジ（特開平 2— 3 1 762) 、ゼラチン粒子（特開昭 60-222045) 、らせん状コイル（特表平 9— 5 1 063 7) 、主として金属製の撚り合わせ形状コイル（特許第 30 1 64 1 8号）、親水性樹脂製の口ッド（特開平 1 1—4 7 1 38) などが提案されている。

これらの中でも動脈瘤処置用の血管閉塞用物質として一般的に使用されているものは、「主として白金系合金製のマイクロコイル」であって、いろいろな形状、特性のものが提案されている。これを、カテーテル先端部（distal) に接続し、血管内の所定部位に到達させ（たとえば特表平 8— 50 1 01 5、平 7— 502 6 74) 、機械的、電気的または水圧によって動脈瘤内において切離し、そして留置する。

実際には、これら動脈瘤処置用の血管閉塞用物質としての金属製マイクロコィルをガイドワイヤー先端部に備えた医療用ワイヤーを操作し、この先端が動脈瘤開口部に達するまで挿入し、血管閉塞用物質である金属製マイクロコイルを瘤内において切離し、留置する動脈瘤処置方法が実用化されている。

金属製マイクロコイルは、その形状づけ加工や電気的切離などには好ましいが、医療での広範囲な実用化の妨げとなっている下記のような問題を有することが知られている。 ( 1 ) 金属製マイクロコイルのみを動脈瘤内に留置することによっては、必要とされる瘤内腔の平均的かつ高密度の充填をいかなる手段を用いても達成することができないため、十分な塞栓効果を得ることができない場合がある。

( 2 ) 金属製マイクロコイルによって生じた血栓は、器質化が十分に誘導されず、本来期待される非破裂性の組織にはならないことがある。そのため、金属製マイクロコイルの瘤外への脱落、突出が見られることがある。

( 3 ) また、後日開頭手術による動脈瘤のクリッピング、切除などを行う時には、留置された金属製マイクロコイルの存在が大きな障害となる。瘤内に留置された金属製マイクロコイルの密度が高い場合には、より大きな障害となる。

本発明は上記で述べたような問題点を解決するために行われたものである。本発明の第 1の目的は、血管、好ましくは動脈瘤などの血管部位を、確実かつ好ましく閉塞することができる血管閉塞用組成物を提供することにある。発明の第 2の目的は、金属性マイク口コイルのみを用いる従来技術に比べて優れた器質化を誘導することができる血管閉塞用組成物を提供することであり、第 3の目的は、後日開頭手術により、動脈瘤や脳動静脈奇形などを切除する際に障害とならない血管閉塞用組成物を提供することであり、第 4の目的は金属性コイル、セルローススポンジなどの物質と併用したときにおいても、なお安定して血管を閉塞することができる血管閉塞用組成物を提供することにある。発明の開示すなわち、本発明は、繊維性部材、細胞増殖因子を徐放することができる部材、及び細胞増殖因子を含む血管閉塞用組成物に関する。

【図面の簡単な説明】

図 1は、 6週間後のモデル動脈瘤の組織切片の図である。 A： 1 0 0 /X gの b F G F含浸ゼラチンハイド口ゲルマイクロコイル処理群（9 5 %含水率）、 B ：マイク口コイル処理群、 C ： b F G F不含ゼラチンハイド口ゲルマイクロコイル処理群（ 9 5 %含水率）図 2は、 1 0 0 z g b F G F含浸ゼラチンハイドロゲル（9 5 %含水率）マイク口コイル処理 6週間後の第 8因子免疫染色の図である。器質化線維組織表面が血管内皮細胞で完全におおわれている。発明を実施するための最良の形態

本発明の血管閉塞用組成物は血管の所定部位、とりわけ動脈瘤に適用されるものであって、塞栓後にその部位で確実に器質化を生じるよう設計されたものである。

本発明において、器質化とは、血管内に入れられた材料の周辺生じた血栓ではなく、それが線維性組織に置き換わったものをいう。この組織が動脈瘤内に形成されれば、その部位は非破裂性であり、再び瘤を生じることはなレ、。

本発明は、繊維性部材、細胞増殖因子、及び細胞増殖因子を徐放することができる部材を含む、好ましくは、インビボにおける器質化を誘導することができる、血管閉塞用組成物に関する。

本発明の組成物を、動脈瘤モデルであるラットの内頸動脈瘤に充てんすると、所定濃度範囲の細胞増殖因子の存在下において、 3週間及び 6週間後に線維性組織が生成する。これに対して、繊維性部材のみの場合、細胞増殖因子徐放部材のみの場合、繊維性部材及び細胞増殖因子徐放部材の場合、さらに徐放性のない細胞増殖因子含有物質のみの場合には、いずれも血栓は生成するが器質化は誘導されず、処置的に有効な塞栓組織は生じない。また、本発明の組成物を金属性コィノレ、セルローススポンジなどの物質と併用したときにおいても、なお安定的に血管を閉塞することができる。

通常、本発明の組成物の調製は下記：

1 . 繊維性部材を好ましい形状に加工し、

2 . この繊維性部材上に細胞増殖因子徐放部材を付着または一体化させ、

3 . さらに細胞増殖因子を加える

の順序の工程で行われる。この組成物の繊維性部材としては、ポリエステル、好ましくは、ポリエチレンテレフタレ一ト、ポリブチレンテレフタレート等のような生体適合性の高いポリエステル、ポリアミド、好ましくは、ナイロン等、ポリアクリル、ポリオレフィン、好ましくは、ポリプロピレン等を用いることができる。これらの中でもポリプロピレン、ナイロンが特に好ましい。この繊維性部材としてはマルチフィラメント、モノフィラメントなどいろいろなものが使用可能であり、その単位フイラメント直径は 1 0 / m力ら 300 μπιまで広範囲のものを用いることができる。また、これらの材質、直径は混合されていてもよレ、。たとえば、直径 1 00 xmのポリエステルモノフィラメントを直径約 0. 7瞧のミクロスパイラルに加工し、これを熱固定してからさらに直径 2讓の 2次コイルとした血管閉塞用のコイルを用いることもできる。

細胞増殖因子徐放部材の例としては、部分架橋ゼラチン、コラーゲンが挙げられる。たとえば、ゼラチンの場合には、その水溶液にダルタールアルデヒド等の 2官能性アルデヒド溶液を加えてハイドロゲルとしてもよい。このハイドロゲルに繊維性部材を浸漬して繊維性部材に細胞増殖因子徐放部材を付着'固定させる。これを放置することによってゼラチンの架橋反応を進め、未反応のアルデヒドを洗浄、除去することによって、繊維性部材と細胞増殖因子徐放部材とからなる組成物を調製することができる。

細胞増殖因子の例としては、塩基性線維芽細胞増殖因子（Basic Fibroblast Growth Factor： b FGF) 、酸性繊維芽細胞増殖因子（a FGF) 、血小板由来増殖因子（PDGF) 、トランスフォーミング増殖因子 i3 1 (TGF- β 1 ) 、血管内皮細胞増殖因子（VEGF) 及び結合組織増殖因子（CTGF) が挙げられる。この水溶液に上記の繊維性部材と細胞増殖因子徐放部材と力らなる組成物を浸漬し、しばらく放置して細胞増殖因子を吸収させることによって、繊維性部材、細胞増殖因子徐放部材及び細胞増殖因子を含む血管閉塞用糸且成物を調製することができる。増殖因子の種類は上記以外のものも含めた 1種又は 2種以上の組合わせも可能である。このようにして調製された組成物においては、内部に含有固定されていた細胞増殖因子が架橋ゼラチンなどの分解過程にしたがい、徐々に長時間にわたって放出され、動脈瘤内部における線維芽細胞などによる器質化を誘導することが明らかになつた。架橋されていないゼラチンのような非徐放性の物質に b F G Fなどを吸収含有させ、上記と同様の操作を行っても器質化の誘導は認められない。したがって、長時間にわたってある一定範囲濃度の細胞増殖因子を放出して初めて適切な器質化が誘導され、そして動脈瘤の処置に有効な塞栓を形成することができる。線維性組織の瘤内での形成が生じれば、その部位は非破裂性で瘤は永久に詰められる。これが器質化である。そして、器質化部位の血管内腔側は天然物質と同じ血管内腔細胞でおおわれている。実施例

以下、本発明の実施例について説明するが、本発明は必ずしもこれらに限定されるものではない。

実施例 1

1— 1 . ポリエステル（ポリエチレンテレフタレ一ト）製の円形断面モノフイラメント（0 . 0 7瞧径、東レ株式会社製）を、直径 0 . 5 5 mmのステンレス製直線材に隙間なく巻きつけ、フィラメントの両端を直線材に固定し、 1 5 0 °C のォーブン内で 8時間放置した。室温まで冷却後フィラメントの両端を切って、直線材からはずし、 5 8 °Cで 1 5分間放置し、このフィラメントのコィルを作製した。次に、このコイルを張力をかけることなく、直径 2 . 5匪のステンレス直線材に隙間なく卷きつけた、その後、 1 4 5 °Cのオーブン内で 7時間放置し、再び室温まで冷却し、ポリエステルを熱カ卩ェさせることによりポリエステルマイク口コイルを得た。

1 - 2 . 5 %ゼラチン水溶液 4 0 mlに、 2 5 %ダルタールアルビデヒド溶液 1 2 5 1又は 8 0 i lをすばやく（1分以内に）加えてかきまぜ、それぞれ水分率 9 5 %又は 9 8 %のゼラチンハイドロゲル水溶液を得た。グルタールアルデヒド水溶液添加直後に、 1一 1で得られたポリエステルマイク口コイルをこの溶液に浸漬した。これを、 4 °Cで 12時間放置してゼラチンを架橋した。この架橋ゼラチンハイド口ゲルを付着させたポリエステルマイクロコイルをグリシン溶液で十分に中和し、 37 °Cで 1時間放置後に 2回水洗した。これを凍結乾燥し、ェチレンオキサイドガスで滅菌し、 Ι ΐ μΐの b FGF水溶液（100/zg含有）中に入れて 4°Cで 8時間静置させ、架橋ゼラチンハイドロゲルに b FGFを含浸させ、血管閉塞用組成物を得た。

1— 3. Guglielmiらの方法 (Guglielmi G. et al. J. Neurosurgery, 75， 1 (1991) )にしたがって、家兎の内頸部にぉ、て静脈を 8 mmの長さで切除、採取し、これを内頸動脈上に移植して、約 5讓の深さのポケット状モデル動脈瘤を調製した。

1-4. 1—2の血管閉塞用組成物を、 1 _ 3のモデル動脈瘤内に入れ、瘤の反血管側を縫合糸で閉鎖した。

1-5. 図 1には、 6週間後のモデル動脈瘤の組織切片を示す。図 1Aは、 100 の b FGFを含浸させたゼラチンハイドロゲノレ（95%含水率）一ポリエステルコイル、図 1 B、 1 Cは、それぞれマイクロコイルのみ、ゼラチンハイドロゲル（95%含水率）コイルの結果である。瘤の内腔は器質化された線維性組織によって、内腔断面積の 80%が占有閉鎖されていた。これに対してコントロールとして用いたポリエステル製マイクロコイルのみ（図 1 B) 、及びポリェステル製マイクロコイルと架橋ゼラチンハイド口ゲルのみ（図 1 C) の場合は、モデル瘤内部に血栓が形成されているが、開口部の形状及び径には変化がなく、また、器質化された組織も全く認められなかった。 b FGF 100 / gを含有した 3成分からなる組成物による塞栓ではモデル瘤では、新たに生成した線維性組織での動脈側は周辺の天然動脈内腔表面と同様の様子であり、これは一様に免疫組織化学的に見て第 8因子陽性細胞で覆われていることが判った（図 2) 。

実施例 2

ポリエステル製マルチフィラメント（単位フィラメント径 12. 5/xm、フイラメント数 48、仮撚、長さ 20讓）を、白金合金（白金 91%) のマイクロコィノレ（ 1次コイル径 0 · 3 8讓、 2次コイル径 2 . 7 mm) の 2次コイルの 4ケ所に力ませて繊維製部材とした。この繊維製部材を実施例 1と同様の方法を用いて、含水率 9 5 %のダルタールアルデヒド架橋したゼラチンハイドロゲルに浸漬し、そして b F G Fをゼラチンハイド口ゲルに含浸させ、固定した。この組成物 3本又は 5本を、家兎のモデル動脈瘤にカテーテルを用いて送達した。 6週間後に家兎を犠牲死させて動脈瘤内における線維性組織の形成の有無を調べた。留置組成物が 3本の場合には、瘤開口部が線維性組織によって閉じており、また、留置組成物が 5本の場合には、瘤開口部が線維†生組織によって閉じていた。瘤内部の線維性組織の所見も実施例 1と同じであった。

実施例 3

ポリエステル製マイク口コイルのかわりに少量の綿製ガーゼを用いた以外は実施例 1と同様な方法を用いて塞栓形成組成物を調製した。この塞栓形成組成物を家兎のモデル動脈瘤内に挿入し、動脈瘤の遠位部を縫合し、閉鎖した。細胞増殖因子として結合組織増殖因子 2 5又は 5 0 gを含浸させた部分架橋ゼラチンを付着させたガーゼの場合と、増殖因子を含浸させていない部分架橋ゼラチンとガーゼだけの場合とを比較した。 6週間後に家兎を犠牲死させてモデル動脈瘤内を観察した。結合組織増殖因子 2 5 / gの場合は、瘤内が組織切片の断面積から算出した場合約 8 0 %が器質化しており、 5 0 // gの場合は、約 9 0 %が器質化していた。その免疫組織的所見は、実施例 1と同様であった。これに対して、部分架橋ゼラチンとガーゼだけの場合には瘤内は血栓で満たされているが、塞栓の器質化は認められず、瘤内には血流の再開通している像が認められた。

Claims

請求の範囲

1. 繊維性部材、細胞増殖因子を徐放することができる部材、及び細胞増殖因子を含む血管閉塞用組成物。

2. 器質化を誘導することができる、請求の範囲第 1項の組成物

3. 細胞増殖因子が、塩基性線維芽細胞増殖因子（b FGF) 、酸性線維芽細胞増殖因子（a FGF) 、血小板由来増殖因子（PDGF) 、トランスフォーミング増殖因子 ]3 1 (TGF— ]3 1) 、血管内皮細胞増殖因子（VEGF) 及び結合 ¾a織増殖因子（CTGF)からなる群より選ばれた細胞増殖因子である、請求の範囲第 1項又は第 2項に記載の組成物。

4. 繊維性部材が、ポリエステル、ポリアミド、ポリアクリル、ポリオレフィン、綿、又はシルクから選ばれた 1種以上からなる、請求の範囲第 1項〜第 3 項のいずれか 1項記載の組成物。

5. 繊維性部材が、マルチフィラメント又はモノフィラメントである、請求の範囲第 4項に記載の組成物。

6. 繊維性部材の単位フィラメント直径が 20 /zm以下である、請求の範囲第 5 項に記載の組成物。

7.細胞増殖因子を徐放することができる部材が、親水性ハイドロゲルである、請求の範囲第 1項〜第 6項のいずれか 1項記載の組成物。

8. 親水性ハイド口ゲルが、部分架橋ゼラチンハイド口ゲル、ポリビニルアルコール、又は変性ポリビュルアルコールから選ばれた親水性ハイド口ゲルである、請求の範囲第 7項に記載の組成物。