[go: up one dir, main page]

WO2003037376A1 - Prophylactiques et/ou remedes pour le traitement de l'arteriosclerose apres transplantation dans le cas de rejet de greffe - Google Patents

Prophylactiques et/ou remedes pour le traitement de l'arteriosclerose apres transplantation dans le cas de rejet de greffe Download PDF

Info

Publication number
WO2003037376A1
WO2003037376A1 PCT/JP2002/011441 JP0211441W WO03037376A1 WO 2003037376 A1 WO2003037376 A1 WO 2003037376A1 JP 0211441 W JP0211441 W JP 0211441W WO 03037376 A1 WO03037376 A1 WO 03037376A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
mcp
transplant
transplantation
rejection
post
Prior art date
Application number
PCT/JP2002/011441
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Kensuke Egashira
Akira Takeshita
Masataka Sata
Original Assignee
Kensuke Egashira
Akira Takeshita
Masataka Sata
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kensuke Egashira, Akira Takeshita, Masataka Sata filed Critical Kensuke Egashira
Priority to EP02779986A priority Critical patent/EP1447095B1/en
Priority to US10/493,070 priority patent/US7304040B2/en
Publication of WO2003037376A1 publication Critical patent/WO2003037376A1/ja

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/521—Chemokines
    • C07K14/523—Beta-chemokines, e.g. RANTES, I-309/TCA-3, MIP-1alpha, MIP-1beta/ACT-2/LD78/SCIF, MCP-1/MCAF, MCP-2, MCP-3, LDCF-1, LDCF-2
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Definitions

  • the present invention relates to a prophylactic and / or therapeutic agent for post-transplant arteriosclerosis or autologous arteriovenous graft transplantation intimal hyperplasia as organ transplant rejection, and post-transplant arteriosclerosis as organ transplant rejection.
  • Autologous Prevention of intimal thickening after allograft arteriovenous graft transplantation
  • Leukocytes have the function of treating foreign matter that has entered from outside the body, and when tissue is damaged, gather at the damaged site and participate in tissue repair.
  • the inflammatory response is when the self-defense function of leukocytes acts excessively, thereby damaging the self-tissue.
  • the occurrence of coronary atherosclerosis after heart transplantation is mainly due to the excessive self-defense response, which causes inflammation. It is thought that it depends. This is due to the infiltration of lipids and macrophagy
  • the mechanism of development is distinctly different from that of normal arteriosclerosis, which is caused by foaming.
  • An object of the present invention is to prevent arteriosclerosis after organ transplantation by preventing leukocyte infiltration and accumulation in transplanted arteries that occur at the time of organ transplantation, and by preventing the production of various site-induced chemokines due to leukocyte activation. And to find ways to prevent intimal hyperplasia.
  • chemokines are a group of proteins having chemotactic activity on leukocytes and lymphocytes. Chemokines are broadly divided into four types according to their structure, and those in which the first and second cysteines are arranged consecutively are called CC chemokines.
  • MCP-1 Monocyte chemoattractant-1
  • mutant 7 ND—MCP-1 which lacks amino acids 2 to 8 from the N-terminus, has the ability to bind to CCR2 but does not induce cell migration Or as a dominant negative, and formed a dimer with wild-type MCP-1 to inhibit the function of MCP-1.
  • the N-terminal deletion of chemokines is not compatible with the corresponding endogenous monomers of chemokines.
  • It can be a potent dominant negative inhibitor of chemokine receptor interaction by forming a dimer, such as rheumatoid arthritis, inflammatory bowel disease, multiple sclerosis, chronic pneumonia such as pulmonary fibrosis, etc. It is known that it is effective for the treatment of inflammation, autoimmune diseases and the like of Japanese cereals (Japanese Unexamined Patent Publication No. 11-050605).
  • the object of the present invention is to prevent and / or treat post-transplant arteriosclerosis or autologous arteriovenous graft post-transplant intimal hyperplasia as rejection after organ transplantation.
  • An object of the present invention is to provide a method for preventing or treating intimal hyperplasia after posterior arterial sclerosis or autologous allo-arterial and vein graft transplantation. Disclosure of the invention
  • the present inventors intramuscularly injected an expression vector (pcDNA3) containing the 7ND-MCP-1 gene into the thigh of a model animal (mouse) and produced it in muscle cells into which the vector plasmid had been introduced. 7 ND—MCP-1 was confirmed to significantly inhibit the progression of arteriosclerosis (intimal hyperplasia) in transplanted hearts, and MCP-1 function inhibitor was The present inventors have found that the present invention is useful as an agent for preventing and / or treating intimal hyperplasia after transplantation, and completed the present invention.
  • the present invention provides a preventive and / or therapeutic agent for post-transplant arteriosclerosis or intimal hyperplasia after autologous arteriovenous graft transplantation as a rejection reaction after organ transplantation, comprising an MCP-1 function inhibitor as an active ingredient. Is what you do.
  • the present invention also relates to the use of an MCP-1 function inhibitor for the manufacture of a prophylactic and / or therapeutic agent for atherosclerosis after transplantation as an organ transplant rejection or for intimal hyperplasia after autologous and allogeneic arteriovenous graft transplantation. To provide.
  • the present invention provides a method for preventing post-transplant arteriosclerosis or autologous arteriovenous graft transplantation-induced intimal hyperplasia as rejection after organ transplantation, which comprises administering an effective amount of an MCP_1 function inhibitor.
  • a method for preventing post-transplant arteriosclerosis or autologous arteriovenous graft transplantation-induced intimal hyperplasia as rejection after organ transplantation which comprises administering an effective amount of an MCP_1 function inhibitor.
  • the MCP-1 function inhibitor according to the present invention is not particularly limited as long as it can inhibit the function of MCP-1 in a living body.
  • anti-MCP-1 antibodies including polyclonal and monoclonal
  • MCP-1 antagonists including protein and non-protein low-molecular compounds
  • MCP-1 dominant negative protein and non-protein low-molecular compounds
  • genes encoding them can also be mentioned.
  • Various types of these antibodies, antagonists, dominant negatives, and genes encoding them are already known, and those obtainable by known methods can be used in the present invention. .
  • an anti-MCP-1 antibody can be obtained by the method described in J. Immunology, 147, 2229-2233, 1991, and an MCP-1 antagonist and a MCP-1 dominant negative are described in JP-A-11-5066005. It is known in gazettes and the like.
  • the introduction of the gene encoding the MCP-1 function inhibitor allows the gene to exist in the living body (blood) longer than the administration of the MCP-1 function inhibitor as a protein to the living body. Is preferred because
  • MCP-1 antagonist or MCP-1 dominant negative is preferred, and 7ND-MCP-1 is more preferred.
  • a gene encoding an MCP-1 antagonist or an MCP-1 dominant negative is preferred, and a gene encoding 7ND-MCP-1 is more preferred.
  • a DNA having the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: 1 is used as the gene encoding 7ND—MCP-1.
  • This DNA can be produced by a genetic engineering technique known per se. That is, it may be prepared from the nucleotide sequence of the DNA encoding wild-type MCP-1 represented by SEQ ID NO: 2 by using the PCR method using a synthetic primer.
  • Expression vectors used to express genes in vivo It is not particularly limited as long as it exerts a function, and examples thereof include plasmid vectors such as pcDNA3, pEF-BOS, and pXT1, and retrovirus vectors such as adenovirus and Sendai virus.
  • a promoter may be used.
  • the promoter is not particularly limited as long as it functions in the host (living body). .
  • Examples of the promoters include SV40 Promoter, CMV Promoter, HSV-II :, SR, RSV, and the like.
  • Ribosomes can also be used to express the gene in a host (living body).
  • the gene may be present inside the ribosome, inside or outside the lipid bilayer constituting the ribosome.
  • Various ribosome compositions capable of expressing a gene in a host (living body) are known.
  • the presence or absence of the protein in serum can be detected by the ELISA method.
  • MCP-1 function inhibitor which is an active ingredient of Z or a therapeutic agent
  • parenteral administration is desirable.
  • the method of parenteral administration includes injection, and the injection site is not particularly limited.
  • the injection site may be an artery, vein, muscle, skin, subcutaneous, or other site other than a transplanted organ or a graft.
  • preparations (dosage forms) for injecting the MCP-1 function inhibitor include injections, which can be produced by known formulation techniques.
  • known pharmaceutical additives can be mixed, and for example, Examples include an impaction agent, a preservative, an excipient, and a soothing agent.
  • the dose to the patient may be appropriately determined according to the patient's symptoms, age, sex, body weight, etc. For example, in the case of protein, 0.1 to: L00 Omg; You can administer 01-10013 ⁇ 4 once every 2-4 weeks.
  • the vector plasmid encoding 7ND-MCP-1 was constructed using the recombinant cDNA method, using the pCDNA3 vector plasmid encoding MCP-1 as a type I plasmid. All mutations were confirmed by DNA sequence analysis from both directions.
  • the obtained PCR product encoding 7ND-MCP-1 was inserted into the multiple cloning site of the pCDNA3 vector plasmid, then transformed into E. coli, and the plasmid DNA was purified using Qiagen Plasmid Giga Kit.
  • the heart of a male DBA2 mouse 6 weeks old, was transferred to the abdomen of a B10.D2 mouse by the method of Furukawa et al. (Circulation. 1996, 93, 333-339). That is, the heart was taken out from the DBA2 mouse and immediately anastomosed with the abdominal artery and vein of the B10.D2 mouse, and the heart was transplanted. Eight weeks later, the transplanted heart was excised and fixed with formalin. paraffin After embedding, 5 sections were prepared from each heart every 500 m. After hematoxylin-eosin staining, cross sections of 10 coronary arteries were randomly selected for morphological measurements.
  • neointima / media ratio was 0.84 / 0.07 in the control group, whereas it was 0.54 / 0.09 in the 7ND treatment group. Neointimal formation was significantly suppressed.
  • an MCP-1 function inhibitor is effective for prevention and / or treatment of post-transplant arteriosclerosis or intimal hyperplasia after autologous or allogeneic arteriovenous graft transplantation. .
  • the mechanism of action is thought to be to suppress the infiltration and adhesion of recipient inflammatory cells to the graft blood vessel.
  • MCP-1 function inhibitor is a prophylactic and / or therapeutic agent for post-transplant arterial sclerosis or autologous arteriovenous graft post-transplant intimal hyperplasia as rejection after organ transplantation. It is useful as a method for preventing and / or treating intimal hyperplasia after transplantation of atherosclerosis or autologous arteriovenous graft.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

明 細 書 臓器移植後拒絶反応としての移植後動脈硬化症の予防及び Z又は治療剤 技術分野
本発明は、 臓器移植後拒絶反応としての移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静 脈グラフト移植後内膜肥厚の予防及び/又は治療剤、 並びに臓器移植後拒絶反応 としての移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚の予防 及び Z又は治療方法に関する。 背景技術
臓器 （心臓、 腎臓、 血管など） 移植後、 移植後拒絶反応として、 移植 （臓器内 の） 血管の炎症が早期に生じ、 後期には動脈硬化病変 （内膜肥厚) が形成される。 この移植後動脈硬化の発生は移植臓器の機能不全ならびに生着率の低下につなが ることから臨床上大きな問題である。 拒絶反応の治療 '防止のために種々の免疫 抑制剤が用いられているが、 その効果は充分ではなく、 副作用も少なくない。 し たがって、 病態の発生機序にそった新しい治療法の開発が求められている （
Transpl ant at ion 72 (6 Suppl) : S16-9, 2001) 。 同様に、 自家 ·同種動静脈ダラ フト移植後内膜肥厚にも同様の炎症性変化が関与すると考えられる。
最近の血管生物学的研究からこれらの難治性疾患の発生機序に共通に炎症が関 与する可能性が示唆されている （N. Engl . J. Med. 340, 1 15-126, 1999) 。 白 血球は生体外から侵入した異物の処理機能を有し、 また組織が損傷を受けた場合 には損傷部位に集まり、 組織の修復に関与する。 炎症反応は、 白血球の自己防衛 能が過剰に働くことにより、 かえって自己組織を損傷する場合であり、 例えば、 心臓移植後の冠動脈硬化の発生は、 主に過剰な自己防衛反応により炎症が惹起さ れることによると考えられる。 これは、 脂質の浸潤とそれを貪食するマクロファ ージの泡沫化により生じる、 通常の動脈硬化とは発生メカニズムを明らかに異に する。
本発明の目的は、 臓器移植時において生じる移植動脈への白血球の浸潤 '集積 と、 白血球の活性ィ匕による種々のサイト力イン、 ケモカインの産生を防止するこ とによって、 臓器移植後の動脈硬化及び内膜肥厚の発症を防ぐ方策を見出すこと にある。
ところで、 ケモカインは、 白血球やリンパ球に対して、 遊走活性を有する一群 の蛋白質である。 ケモカインは、 その構造から大きく 4種類に分けられ、 1番目 と 2番目のシスティンが連続して配置されているものは、 CCケモカインと称さ れている。
CCケモカインのひとつである単球遊走因子— 1 (MCP— 1) は、 それ自身 が蛋白として報告され、 またほぼ同時期に cDNA配列も明らかになった （J. Exp. Med. 169, 1449-1459, 1989； J. Exp. Med. 169, 1485-1490, 1989； FEBS lett, 244, 487-493, 1989) 。
MCP— 1.を認識する受容体はすでに同定され、 また cDNAもクローニング されている （Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 91， 2752-2756, 1994； Bioc em. Biophys. Res. Coramun. 202, 1156-1162, 1994) 。 現在、 CCケモカイン受容体 として 1 1種類の受容体が知られており、 MC P _ 1受容体は C CR2と呼ばれ ている。
ロリンズらは、 MCP— 1蛋白のアミノ酸変異体を各種作成し、 そのうちいく つかは細胞遊走活性が消失することを報告した (J. Bio. Chem. 269, 15918- 15924, 1994) 。 これらの変異体のうち、 N末端から数えて 2から 8番目のアミ ノ酸を欠失させた変異体 7 ND— M CP— 1は、 CCR 2に対する結合能はある が、 細胞遊走を惹起しない、 又はドミナントネガティブ （dominant negative) として野生型 MCP— 1とダイマーを形成し、 MCP— 1の機能を阻害した。 ま た、 ケモカインの N末端欠失が、 ケモカインの対応する内在性単量体とのヘテロ 2量体を形成することによるケモカイン受容体の相互作用の有力なドミナントネ ガティブ阻害剤になり得、 このものが関節リウマチ、 炎症性腸疾患、 多発性硬化 症、 肺繊維症などの慢性肺炎等の炎症、 自己免疫疾患等の治療に有効であること が知られている （特表平 1 1一 5 0 6 0 0 5号公報） 。
本発明の目的は、 臓器移植後拒絶反応としての移植後動脈硬化症又は自家 ·同 種動静脈グラフト移植後内膜肥厚の予防及び/又は治療剤、 更には、 臓器移植後 拒絶反応としての移植後動脈硬ィ匕症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥 厚の予防又は/治療方法を提供することである。 発明の開示
本発明者らは、 7 ND— M C P— 1遺伝子を含む発現ベクター （p c D NA 3 ) をモデル動物 （マウス） の大腿部に筋肉注射し、 ベクタープラスミドが導入さ れた筋肉細胞で産生される 7 ND— M C P— 1が移植心臓の動脈硬化進展 （内膜 肥厚） を有意に抑制することを確認し、 M C P— 1機能阻害剤が、 移植後動脈硬 化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚の予防及び Z又は治療剤とし て有用であることを見出し、 本発明を完成した。
すなわち、 本発明は、 M C P— 1機能阻害剤を有効成分とする臓器移植後拒絶 反応としての移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚の 予防及び Z又は治療剤を提供するものである。
また本発明は M C P— 1機能阻害剤の、 臓器移植後拒絶反応としての移植後動 脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚の予防及び/又は治療剤 製造のための使用を提供するものである。
また本発明は、 M C P _ 1機能阻害剤の有効量を投与することを特徴とする臓 器移植後拒絶反応としての移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植 後内膜肥厚の予防及び Z又は治療方法を提供するものである。 発明を実施するための最良の形態
本発明に係る MC P— 1機能阻害剤は、 生体における MC P - 1の機能を阻害 できるものであれば特に限定されるものではない。 具体的には、 抗 MCP— 1抗 体 （ポリクロ一ナル及びモノクローナルを含む） 、 MCP— 1アンタゴニスト （ 蛋白及び非蛋白低分子化合物を含む） 、 MCP— 1ドミナントネガティブ （蛋白 及び非蛋白低分子化合物を含む） 、 及び MCP—1機能を阻害するものが蛋白の 場合は、 それらをコードする遺伝子も挙げることができる。 これらの抗体、 アン タゴニスト、 ドミナントネガティブ及びこれらをコ一ドする遺伝子はすでに種々 のものが知られており、 また公知の手法により得ることが可能なものを本発明に おいては用いることができる。
例えば、 抗 MCP— 1抗体は、 J. Immunology, 147, 2229-2233, 1991に記載 の方法により得ることができ、 MCP— 1アンタゴニスト及び MCP— 1ドミナ ントネガティブは、 特表平 11一 506005号公報等で知られている。
本発明においては、 蛋白としての MCP— 1機能阻害剤を生体へ投与するより も、 MCP— 1機能阻害剤をコードする遺伝子を導入する方が、 遺伝子を生体 ( 血） 中で長く存在させることができるため好ましい。
本発明においては、 MCP— 1アン夕ゴニスト又は MCP— 1ドミナントネガ ティブが好ましく、 中でも 7ND— MCP— 1が好ましい。 更には、 MCP— 1 アン夕ゴニスト又は MCP— 1ドミナントネガティブをコードする遺伝子が好ま しく、 中でも 7ND— MCP— 1をコードする遺伝子が好ましい。 7ND— MC P— 1をコードする遺伝子としては、 配列番号 1に示される塩基配列を有する D NAが用いられる。 この DNAは、 それ自体公知の遺伝子工学的手法によって作 成することができる。 すなわち、 配列番号 2で示される野生型 MCP— 1をコー ドする DNAの塩基配列より、 合成プライマ一を用いた PC R法を用いて作成す ればよい。
遺伝子を生体内で発現させるために用いる発現ベクターとしては、 その機能を 発揮するものであれば特に限定されるものではなく、 例えば p cDNA3、 pE F— BOS、 pXT 1などのプラスミドベクターやアデノウイルス、 センダイゥ ィルスなどのレトロウイルスベクタ一を挙げることができる。 また、 発現べクタ 一を構築する際にはプロモ一夕一ゃェンハンサ一を用いてもよく、 プロモーター ゃェンハンサ一は、 宿主 （生体） 内で機能するものであれば特に限定されるもの ではない。 プロモー夕一としては、 例えば SV40プロモ一ター、 CMVプロモ 一夕一、 HSV— ΤΚ：、 SRひ、 RSVなどを挙げることができる。
また、 遺伝子を宿主 （生体） 内で発現させるためには、 リボソームも用いるこ とができる。 この場合、 遺伝子はリボソームの内部、 またリボソームを構成する 脂質二重膜の内部もしくは膜の外側に存在していてもよい。 遺伝子を宿主 （生体 ) 内で発現させることが可能なリボソームの組成は、 種々のものが知られている。 導入された 7N.D— MCP— 1遺伝子より 7ND— MCP— 1蛋白が生産され ていることの確認は、 蛋白が血清中に存在するか否かを EL I S Α法により検出 すればよい。
本発明の医薬の適応対象となる疾患としては、 臓器移植後拒絶反応としての移 植後動脈硬化症 （内膜肥厚） 及び自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚が挙 げられる。
本発明の臓器移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚 の予防及び Z又は治療剤の有効成分である MC P― 1機能阻害剤の生体への投与 は、 経口的又は非経口的に行えばよい。 なお、 MCP— 1機能阻害剤が蛋白の場 合は、 非経口的に投与することが望ましい。 非経口的投与の方法としては、 注射 によるものを挙げることができ、 注射部位は特に限定されるものではなく、 動脈、 静脈、 筋肉、 皮膚、 皮下等移植臓器又はグラフト以外の部位に行えばよい。 MC P—1機能阻害剤を注射するための製剤 （剤形） としては、 注射剤を挙げること ができ、 このものは公知の製剤化技術により製することができる。 注射剤を製す るに際しては、 公知の製剤添加物を配合することができ、 例えば、 等張化剤、 緩 衝剤、 保存剤、 賦形剤、 無痛化剤等を挙げることができる。 なお、 患者への投与 量は、 患者の症状、 年齢、 性別、 体重等により適宜検討すればよいが、 例えば、 蛋白の場合は、 0. 1〜： L 00 Omgを、 遺伝子の場合は、 0. 01〜1001¾を、 2〜 4週間に 1回投与すればよレ。 実施例
次に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、 本発明は何らこれに限定 されるものではない。
(1) 7ND— MCP— 1の構築と発現
7ND-MCP- 1をコードするべクタ一プラスミドは、 MCP—1をコード する p CDNA3ベクタ一プラスミドを铸型にして、 組換え PC R法を用いて作 成した。 すべての変異は、 両方向からの DNAシークェンス解析により確認した。 得られた 7ND— MCP— 1をコ一ドする PCR産物を p CDNA3ベクタープ ラスミドのマルチクローニング部位に組込んだ後、 大腸菌にトランスフォームし、 キアゲン社プラスミドギガキットを用いてプラスミド DNAを精製した。
(2) マウス異所性心臓移植モデル
雄性 6週令 BIO. D2マウスの両側大腿筋に 7ND—MCP— 1遺伝子/ p c D N A3 (n- 9 ；以下、 7 ND治療群と略す。 ） もしくはコント口一ルとして、 Green Flourescent Protein遺伝子/ p c DNA 3 (n= 9 ；以下、 コントロール 群と略す。 ） 50 gを筋肉注射した （右 25 g/25 l Tris/EDTA buffer 、 左 25 g/25 xl Tris/EDTA buffer) 。 直後に Aihara & Miyazaki (Nature Biotech voll6. 867-870. 1998)の方法で 100V 6回の通電を行なった。
遺伝子導入 3日後の B10.D2マウスの腹部に、 雄性 6週令の DBA2マウスの心臓を Furukawaらの方法 (Circulation. 1996, 93, 333-339)で移した。 すなわち、 DBA2マウスから心臓を取り出し直ちに B10.D2マウスの腹部動静脈に吻合し心臓移 植を実施した。 8週後に移植心を摘出し、 フオルマリンで固定した。 パラフィン 包埋後、 各心臓より、 500 mおきに 5切片を作製した。 へマトキシリンーェオシ ン染色後、 10冠動脈の断面を無作為に選出し形態学的計測を行なった。
(3) 結果
新生内膜/中膜比が、 コントロール群では 0. 84/0. 07であるのに対し、 7ND治療群では 0. 54/0. 09であり、 7ND治療群は、 コントロール群 と比較して有意に新生内膜形成が抑制されていた。
したがつて、 M C P— 1機能阻害剤を投与することにより、 移植後動脈硬化症 又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚の予防及び Z又は治療に有効であ ることが明らかとなった。 その作用機序は、 レシピエント炎症細胞のグラフト血 管への浸潤、 付着を抑制するためであると考えられる。 産業上の利用可能性
MCP- 1機能阻害剤は、 臓器移植後拒絶反応としての移植後動脈硬ィヒ症又は 自家，同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚の予防及び/又は治療剤、 更には臓器 移植後拒絶反応としての移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後 内膜肥厚の予防及び Z又は治療方法として有用である。

Claims

請求の範囲
1. 単球遊走因子— 1 (MCP— 1) 機能阻害剤を有効成分とする臓器移植後 拒絶反応としての移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥 厚の予防及び Z又は治療剤。
2. MCP— 1機能阻害剤が、 抗 MCP— 1抗体、 MCP— 1アン夕ゴニスト、 MCP- 1ドミナントネガティブ及びそれらをコードする遺伝子から選ばれる 1 種又は 2種以上のものである請求項 1記載の予防及び/又は治療剤。
3. MCP— 1ドミナントネガティブをコードする遺伝子が、 配列番号 1で表 わされるものである請求項 2記載の予防及び/又は治療剤。
4. 単球遊走因子— 1 (MCP—1) 機能阻害剤の、 臓器移植後拒絶反応とし ての移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グラフト移植後内膜肥厚の予防及び /又は治療剤製造のための使用。
5. MCP— 1機能阻害剤が、 抗 MCP— 1抗体、 MCP— 1アン夕ゴニスト、 MCP— 1ドミナントネガティブ及びそれらをコードする遺伝子から選ばれる 1 種又は 2種以上のものである請求項 4記載の使用。
6. MCP— 1ドミナントネガティブをコードする遺伝子が、 配列番号 1で表 わされるものである請求項 5記載の使用。
7. 単球遊走因子一 1 (M C P— 1 ) 機能阻害剤の有効量を投与することを特 徴とする臓器移植後拒絶反応としての移植後動脈硬化症又は自家 ·同種動静脈グ ラフト移植後内膜肥厚の予防及び/又は治療方法。
8. MCP— 1機能阻害剤が、 抗 MCP— 1抗体、 MCP— 1アン夕ゴニスト、 MCP- 1ドミナントネガティブ及びそれらをコードする遺伝子から選ばれる 1 種又は 2種以上のものである請求項 7記載の予防及び/又は治療方法。
9. MCP— 1ドミナントネガティブをコ一ドする遺伝子が、 配列番号 1で表 わされるものである請求項 8記載の予防及び Z又は治療方法。
10. 遺伝子を移植臓器又はグラフト以外の部位に投与するものである請求項 9 記載の予防及び z又は治療方法。
11. 投与部位が筋肉である請求項 1 0記載の予防及び z又は治療方法。
PCT/JP2002/011441 2001-11-02 2002-11-01 Prophylactiques et/ou remedes pour le traitement de l'arteriosclerose apres transplantation dans le cas de rejet de greffe WO2003037376A1 (fr)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP02779986A EP1447095B1 (en) 2001-11-02 2002-11-01 Preventives and/or remedies for post-transplant arteriosclerosis as rejection of organ transplant
US10/493,070 US7304040B2 (en) 2001-11-02 2002-11-01 Suppression of post-transplant arteriosclerosis

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2001337861 2001-11-02
JP2001-337861 2001-11-02

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2003037376A1 true WO2003037376A1 (fr) 2003-05-08

Family

ID=19152438

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2002/011441 WO2003037376A1 (fr) 2001-11-02 2002-11-01 Prophylactiques et/ou remedes pour le traitement de l'arteriosclerose apres transplantation dans le cas de rejet de greffe

Country Status (3)

Country Link
US (1) US7304040B2 (ja)
EP (1) EP1447095B1 (ja)
WO (1) WO2003037376A1 (ja)

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008055945A1 (en) 2006-11-09 2008-05-15 Probiodrug Ag 3-hydr0xy-1,5-dihydr0-pyrr0l-2-one derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase for the treatment of ulcer, cancer and other diseases
WO2008065141A1 (en) 2006-11-30 2008-06-05 Probiodrug Ag Novel inhibitors of glutaminyl cyclase
WO2008104580A1 (en) 2007-03-01 2008-09-04 Probiodrug Ag New use of glutaminyl cyclase inhibitors
US7713521B2 (en) 2005-08-12 2010-05-11 Schering Corporation MCP1 fusions
WO2011029920A1 (en) 2009-09-11 2011-03-17 Probiodrug Ag Heterocylcic derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase
WO2011107530A2 (en) 2010-03-03 2011-09-09 Probiodrug Ag Novel inhibitors
WO2011110613A1 (en) 2010-03-10 2011-09-15 Probiodrug Ag Heterocyclic inhibitors of glutaminyl cyclase (qc, ec 2.3.2.5)
WO2011131748A2 (en) 2010-04-21 2011-10-27 Probiodrug Ag Novel inhibitors
WO2012123563A1 (en) 2011-03-16 2012-09-20 Probiodrug Ag Benz imidazole derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase
RU2479846C2 (ru) * 2007-06-22 2013-04-20 Саппоро Медикал Юниверсити Способ выявления или лечения реакции "трансплантат против хозяина"
US8524217B2 (en) 2010-05-11 2013-09-03 Merck Sharp & Dohme Corp. MCP1-Ig fusion variants
EP2865670A1 (en) 2007-04-18 2015-04-29 Probiodrug AG Thiourea derivatives as glutaminyl cyclase inhibitors
EP3461819A1 (en) 2017-09-29 2019-04-03 Probiodrug AG Inhibitors of glutaminyl cyclase

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2125895B1 (en) * 2007-02-02 2015-04-08 Vegenics Pty Ltd Vegf receptor antagonists for treating organ transplant alloimmunity and arteriosclerosis

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH05276986A (ja) * 1992-04-02 1993-10-26 Sumitomo Electric Ind Ltd 単球遊走性サイトカインに対する抗体
WO1996038559A1 (en) * 1995-05-31 1996-12-05 Dana Farber Cancer Institute Chemokine n-terminal deletion mutations
JP2002284698A (ja) * 2001-03-23 2002-10-03 Kensuke Egashira 血管再狭窄の予防及び／又は治療剤

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5399346A (en) * 1989-06-14 1995-03-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Gene therapy
AU2001292301A1 (en) * 2000-10-11 2002-04-22 Daiichi Pharmaceutical Co., Ltd. Novel drugs for liver diseases

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH05276986A (ja) * 1992-04-02 1993-10-26 Sumitomo Electric Ind Ltd 単球遊走性サイトカインに対する抗体
WO1996038559A1 (en) * 1995-05-31 1996-12-05 Dana Farber Cancer Institute Chemokine n-terminal deletion mutations
JP2002284698A (ja) * 2001-03-23 2002-10-03 Kensuke Egashira 血管再狭窄の予防及び／又は治療剤

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE MEDLINE [online] XP002964344, accession no. STN Database accession no. 2001538553 *
EGASHIRA KENSUKE ET AL.: "Anti-monocyte chemoattractant protein-1 gene therapy inhibits vascular remodeling in rats: blockade of MCP-1 activity after intramuscular transfer of a mutant gene inhibits vascular remodeling induced by chronic blockade of NO synthesis", THE FASEB JOURNAL, vol. 14, no. 13, October 2000 (2000-10-01), pages 1794 - 1978, XP002964345 *
EGASHIRA,KENSUKE ET AL.: "A novel anti-monocyte chemo-attractant protein-1 gene therapy for atherosclerosis", JAPANESE CIRCULATION JOURNAL, vol. 65, no. SUPPLEMENT 1-A, 1 March 2001 (2001-03-01), pages 254 (OJ453), XP002964343 *
FORSYTHE J.L.: "Graft function and other risk factors as predictors of cardiovascular disease outcome", TRANSPLANTATION, vol. 72, no. 6 SUPPL., 27 September 2001 (2001-09-27), pages S16-9, XP008103324 *
KIRCHENGAST MICHAEL ET AL.: "Endothelin-1 and endothelin receptor antagonists in cardiovascular remodeling", PROCEEDINGS OF THE SOCIETY FOR EXPERIMENTAL BIOLOGY AND MEDICINE, vol. 221, no. 4, September 1999 (1999-09-01), pages 312 - 325, XP002964346 *
MITSUAKI ISOBE ET AL.: "Ishoku shinkan domyaku koka no shinten kijo to yobo -in situ RT-PCR-ho ni yoru kaiseki to secchaku sogai ni yoru chiryo koka", ONO MEDICAL RESEARCH FOUNDATION, THE 8TH ANNUAL REPORT 1996 NENDO, 31 August 1997 (1997-08-31), pages 67 - 76, XP002964347 *
ZHANG YU JUN ET AL.: "Structre/activity analysis of human monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) by mutagenesis", THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 269, no. 22, 3 June 1994 (1994-06-03), pages 15918 - 15924, XP002017744 *

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8282914B2 (en) 2005-08-12 2012-10-09 Merck, Sharp & Dohme Corp. Method for treating atherosclerosis by administering human MCP1 fusions
US7713521B2 (en) 2005-08-12 2010-05-11 Schering Corporation MCP1 fusions
WO2008055945A1 (en) 2006-11-09 2008-05-15 Probiodrug Ag 3-hydr0xy-1,5-dihydr0-pyrr0l-2-one derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase for the treatment of ulcer, cancer and other diseases
WO2008065141A1 (en) 2006-11-30 2008-06-05 Probiodrug Ag Novel inhibitors of glutaminyl cyclase
WO2008104580A1 (en) 2007-03-01 2008-09-04 Probiodrug Ag New use of glutaminyl cyclase inhibitors
EP2481408A2 (en) 2007-03-01 2012-08-01 Probiodrug AG New use of glutaminyl cyclase inhibitors
EP2865670A1 (en) 2007-04-18 2015-04-29 Probiodrug AG Thiourea derivatives as glutaminyl cyclase inhibitors
RU2479846C2 (ru) * 2007-06-22 2013-04-20 Саппоро Медикал Юниверсити Способ выявления или лечения реакции "трансплантат против хозяина"
WO2011029920A1 (en) 2009-09-11 2011-03-17 Probiodrug Ag Heterocylcic derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase
WO2011107530A2 (en) 2010-03-03 2011-09-09 Probiodrug Ag Novel inhibitors
WO2011110613A1 (en) 2010-03-10 2011-09-15 Probiodrug Ag Heterocyclic inhibitors of glutaminyl cyclase (qc, ec 2.3.2.5)
WO2011131748A2 (en) 2010-04-21 2011-10-27 Probiodrug Ag Novel inhibitors
US8524217B2 (en) 2010-05-11 2013-09-03 Merck Sharp & Dohme Corp. MCP1-Ig fusion variants
WO2012123563A1 (en) 2011-03-16 2012-09-20 Probiodrug Ag Benz imidazole derivatives as inhibitors of glutaminyl cyclase
EP3461819A1 (en) 2017-09-29 2019-04-03 Probiodrug AG Inhibitors of glutaminyl cyclase

Also Published As

Publication number Publication date
US7304040B2 (en) 2007-12-04
US20050222019A1 (en) 2005-10-06
EP1447095B1 (en) 2012-06-13
EP1447095A1 (en) 2004-08-18
EP1447095A4 (en) 2009-08-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1061944B1 (en) Therapeutic chemokine receptor antagonists
Liekens et al. CXCL12-CXCR4 axis in angiogenesis, metastasis and stem cell mobilization
US7354899B2 (en) Methods of treating autoimmune diseases comprising administering CXCR4 antagonists
JP2009536170A (ja) 治療用の抗体標的指向サイトカイン
MXPA05002219A (es) Composiciones y metodos para tratar una enfermedad cardiovascular.
WO2003037376A1 (fr) Prophylactiques et/ou remedes pour le traitement de l'arteriosclerose apres transplantation dans le cas de rejet de greffe
JP2003517846A (ja) 可溶性インターロイキン−２０レセプター
EA009125B1 (ru) Применение ингибиторов il-18 для лечения и/или предупреждения заболеваний, характерных для синдрома системной воспалительной реакции
JP2003532683A (ja) 造血細胞のｃｘｃｒ４アンタゴニスト治療
JP2003535037A (ja) 炎症を治療する方法
WO2000009152A1 (en) Therapeutic chemokine receptor antagonists
US20070160574A1 (en) Design of CXC chemokine analogs for the treatment of human diseases
JPH08511682A (ja) 組み換えｂｐｉ蛋白およびｌｂｐ蛋白、それをコードする核酸分子、その生産方法並びにそれらの使用
KR100837898B1 (ko) 다발성 경화증의 치료에서 사용되는 케모킨 변이체
BG66483B1 (bg) Използване на инхибитори на интерлевкин -18 за лечение и/или профилактика на сърдечни заболявания
JPWO2002030464A1 (ja) 新規肝疾患用薬
AU2006301494A1 (en) Antagonists against interaction of PF4 and RANTES
JP2003201253A (ja) 臓器移植後拒絶反応としての移植後動脈硬化症の予防及び／又は治療剤
KR20050034584A (ko) Ｓｉｒｓ/패혈증의 치료 및 예방 방법 및 이를 위한조성물
JP2003137812A (ja) 心不全の予防及び／又は治療剤
WO2024011946A1 (en) Polypeptide dimers for the treatment of systemic sclerosis
US6403553B1 (en) Use of polypeptides for treating thrombocytopenia
JP2004307427A (ja) 腎虚血再灌流傷害の治療・改善・予防剤
JP2002284698A (ja) 血管再狭窄の予防及び／又は治療剤
HK1060310A (en) Drugs for liver diseases

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NO NZ OM PH PL PT RO RU SD SE SG SI SK SL TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR IE IT LU MC NL PT SE SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2002779986

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2002779986

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 10493070

Country of ref document: US