[go: up one dir, main page]

EA019476B1 - АНТИТЕЛА ПРОТИВ IL-23p19 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ - Google Patents

АНТИТЕЛА ПРОТИВ IL-23p19 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ Download PDF

Info

Publication number
EA019476B1
EA019476B1 EA200870129A EA200870129A EA019476B1 EA 019476 B1 EA019476 B1 EA 019476B1 EA 200870129 A EA200870129 A EA 200870129A EA 200870129 A EA200870129 A EA 200870129A EA 019476 B1 EA019476 B1 EA 019476B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
antibody
drug
hydrochloride
amino acid
human
Prior art date
Application number
EA200870129A
Other languages
English (en)
Other versions
EA200870129A1 (ru
EA019476B9 (ru
Inventor
Жаклин Бенсон
Джилл Картон
Марк Каннингхэм
Евгения И. Орловски
Роберт Раухенбергер
Рэймонд Свит
Original Assignee
Сентокор, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=38218878&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA019476(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Сентокор, Инк. filed Critical Сентокор, Инк.
Publication of EA200870129A1 publication Critical patent/EA200870129A1/ru
Publication of EA019476B1 publication Critical patent/EA019476B1/ru
Publication of EA019476B9 publication Critical patent/EA019476B9/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61J—CONTAINERS SPECIALLY ADAPTED FOR MEDICAL OR PHARMACEUTICAL PURPOSES; DEVICES OR METHODS SPECIALLY ADAPTED FOR BRINGING PHARMACEUTICAL PRODUCTS INTO PARTICULAR PHYSICAL OR ADMINISTERING FORMS; DEVICES FOR ADMINISTERING FOOD OR MEDICINES ORALLY; BABY COMFORTERS; DEVICES FOR RECEIVING SPITTLE
    • A61J1/00—Containers specially adapted for medical or pharmaceutical purposes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/08—Antiseborrheics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/10—Cells modified by introduction of foreign genetic material
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/566—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using specific carrier or receptor proteins as ligand binding reagents where possible specific carrier or receptor proteins are classified with their target compounds
    • G01N33/567—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using specific carrier or receptor proteins as ligand binding reagents where possible specific carrier or receptor proteins are classified with their target compounds utilising isolate of tissue or organ as binding agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)

Abstract

Человеческое антитело против IL-23p19, включая выделенные нуклеиновые кислоты, которые кодируют по меньшей мере одно антитело против IL-23p19, векторы, клетки-хозяева и способы их получения и применения можно применять в диагностических и/или терапевтических композициях, способах и устройствах.

Description

Настоящее изобретение относится к антителам, в том числе к определенным участкам или вариантам, специфичным по меньшей мере к одному белку 1Б-23 или его фрагменту, а также к антиидиотипическим антителам и нуклеиновым кислотам, кодирующим антитела против 1Ь-23р19, комплементарным им нуклеиновым кислотам, векторам, клеткам-хозяевам и к способам их получения и применения, включающим терапевтические составы, введение и устройства.
Предпосылки изобретения
Интерлейкин (1Ь)-12 представляет собой секретируемый гетеродимерный цитокин, состоящий из 2 связанных дисульфидной связью гликозилированных белковых субъединиц, обозначаемых как р35 и р40 из-за их приблизительной молекулярной массы. 1Б-12 продуцируется, главным образом, антигенпредставляющими клетками и запускает клеточно-опосредуемый иммунитет посредством связывания двухцепочечного рецепторного комплекса, который экспрессируется на поверхности Т-клеток или естественных киллерных (ΝΚ) клеток. Цепь рецептора для 1Б-12 бета-1 (ΙΕ-12Κβ1) связывается с субъединицей р40 1Ь-12, обеспечивая первичное взаимодействие между ГЬ-12 и его рецептором. Однако внутриклеточную передачу сигнала (например, фосфорилирование 8ТЛТ4) и активацию несущих рецептор клеток обеспечивает связывание посредством 1Ь-12р35 второй цепи рецептора ΙΕ-12Κβ2 (Ргекку е! а1., 1996). Полагают, что передача сигнала 1Ь-12 одновременно с представлением антигена активирует дифференцировку Т-клеток в направлении фенотипа Т-хелперов 1 (Т111), характеризующегося продукцией интерферона гамма (ΙΕΝγ) (ТтшсЫеп, 2003). Полагают, что Тк1-клетки обеспечивают иммунитет против некоторых внутриклеточных патогенов, образуют фиксирующие комплемент изотипы антител и осуществляют опухолевый иммунологический надзор. Таким образом, полагают, что 1Ь-12 является важным компонентом для механизмов иммунной защиты хозяина.
Было открыто, что белковая субъединица р40 1Б-12 также может связываться с отдельной белковой субъединицей, обозначаемой как р19, с образованием нового цитокина 1Б-23 (Орртап е! а1., 2000). Также 1Б-23 передает сигнал через двухцепочечный рецепторный комплекс. Поскольку субъединица р40 является общей для 1Б-12 и 1Б-23, то цепь ΙΕ-12Κβ1 также является общей для 1Б-12 и 1Б-23. Однако специфичную для 1Б-23 внутриклеточную передачу сигнала (например, фосфорилирование 8ТЛТ3) и последующую продукцию 1Б-17 Т-клетками обеспечивает связывание 1Ь-23р19 со вторым компонентом рецепторного комплекса для 1Б-23, 1Б-23К (Рагкат е! а1., 2002; Лддатга1 е! а1., 2003). Последние исследования показали, что биологические функции 1Б-23 отличаются от функций 1Б-2, несмотря на структурное сходство между двумя цитокинами (Ьаидпкк е! а1., 2005).
Нарушенная регуляция 1Б-12 и популяций Тк1-клеток ассоциирована со многими опосредуемыми иммунной системой заболеваниями, поскольку нейтрализация 1Б-12 антителами является эффективной для лечения псориаза, рассеянного склероза (РС), ревматоидного артрита, воспалительного заболевания кишечника, инсулинзависимого сахарного диабета (1-го типа) и увеита в моделях на животных (Ьеоиатб е! а1., 1995, Нопд е! а1., 1999, Макай е! а1., 1998, Иауйкоп е! а1., 1998). Однако поскольку эти исследования были нацелены на общую субъединицу р40, ш νίνο происходила нейтрализация как 1Б-12, так и 1Ь23. Таким образом, было неясно, 1Б-12 или 1Б-23 опосредовал заболевание, или необходимо ли ингибировать оба цитокина для достижения подавления заболевания. Последние исследования подтвердили с помощью дефицитных по 1Ь-23р19 мышей или специфичной нейтрализации 1Б-23 антителами, что ингибирование 1Б-23 может обеспечить положительный результат, эквивалентный стратегиям против 1Ь12р40 (Сиа е! а1., 2003, Мигрку е! а1., 2003, Вепкоп е! а1., 2004). Таким образом, накапливаются доказательства специфичной роли 1Б-23 в опосредуемом иммунной системой заболевании. Нейтрализация 1Ь23 без ингибирования каскадов 1Б-12 затем может обеспечить эффективное лечение опосредуемого иммунной системой заболевания с ограниченным влиянием на важный механизм иммунной защиты хозяина. Это может представлять собой значительное усовершенствование по сравнению с современными способами лечения.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к выделенным антителам млекопитающих, включая человека, которые связывают субъединицу р19 1Б-23, антителам против 1Ь-23р19 (также обозначаемым как антитела к 1Ь-23р19), иммуноглобулинам, фрагментам, продуктам расщепления и другим определенным их участкам и вариантам, а также к композициям антител против 1Ь-23р19, антиидиотипическим антителам, кодирующим или комплементарным нуклеиновым кислотам, векторам, клеткам-хозяевам, композициям, сочетаниям, составам, устройствам, трансгенным животным, трансгенным растениям и к способам их получения и применения.
В одном аспекте настоящее изобретение относится к выделенным молекулам нуклеиновых кислот, содержащим полинуклеотид, кодирующий специфичные антитела против 1Ь-23р19 или антиидиотипические антитела, содержащие по меньшей мере одну их определенную последовательность, домен, участок или вариант, комплементарным этому полинуклеотиду или гибридизующимся с ним. Кроме того, настоящее изобретение относится к рекомбинантным векторам, содержащим указанные молекулы нуклеиновых кислот антител против 1Ь-23р19, клеткам-хозяевам, содержащим такие нуклеиновые кислоты
- 1 019476 и/или рекомбинантные векторы, а также к способам получения и/или применения таких нуклеиновых кислот антител, векторов и/или клеток-хозяев.
Также настоящее изобретение относится по меньшей мере к одному способу экспрессии по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 или антиидиотипического антитела против 1Ь-23р19 в клеткехозяине, включающему культивирование клетки-хозяина, как описано в настоящем документе, в условиях, при которых по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 экспрессируется в поддающихся выявлению и/или выделению количествах.
Также настоящее изобретение относится по меньшей мере к одной композиции, содержащей (а) выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело против 1Ь-23р19, и/или антитело, как описано в настоящем документе; и (Ь) пригодный и/или фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
Кроме того, настоящее изобретение относится по меньшей мере к одному способу или композиции антитела против 1Ь-23р19 для введения терапевтически эффективного количества в целях модулирования или лечения по меньшей мере одного связанного с 1Ь-23р19 состояния в клетке, ткани, органе, у животного или у пациента и/или до, после или в процессе связанного с ним состояния, как известно в данной области и/или как описано в настоящем документе.
Также настоящее изобретение относится по меньшей мере к одной композиции, устройству и/или способу доставки терапевтически или профилактически эффективного количества по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 в соответствии с настоящим изобретением.
Кроме того, настоящее изобретение относится по меньшей мере к одному способу или композиции антитела против 1Ь-23р19 для диагностики по меньшей мере одного связанного с 1Ь-23р19 состояния в клетке, ткани, органе, у животного или у пациента и/или до, после или в процессе связанного с ним состояния, как известно в данной области и/или как описано в настоящем документе.
Также настоящее изобретение относится по меньшей мере к одной композиции, устройству и/или способу доставки для диагностики по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 в соответствии с настоящим изобретением.
Также предусмотрено медицинское устройство, содержащее по меньшей мере одно выделенное антитело против 1Ь-23р19 по этому изобретению, где устройство является пригодным для контактирования или введения по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19, антиидиотипического антитела против 1Ь-23р19, молекулы нуклеиновой кислоты, соединения, белка и/или композиции.
Также предусмотрено изделие для фармацевтического или диагностического применения у человека, содержащее упаковочный материал и контейнер, содержащий раствор или лиофилизированную форму по меньшей мере одного выделенного антитела млекопитающего против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению. Изделие необязательно может содержать контейнер в качестве компонента устройства или системы для доставки.
Кроме того, настоящее изобретение относится к любому описанному в настоящем документе изобретению.
Описание чертежей
На фиг. 1А показано, что человеческие антитела против 1Ь-23р19 специфично связываются с ЬгГЬ23 и не связываются с йг1Ь-12 или мономером 11гр40. Показано, что антитело против 1Ь-12/1Ь-23 р40 связывает 1Б-23, 1Б-12 и мономер р40.
На фиг. 1В показано, что человеческие антитела против 1Ь-23р19 связываются с 1Б-23, но не с 1Б-23 мыши или его субъединицами.
На фиг. 2 показано связывание 1Б-23 с двумя иммобилизованными на планшете антителами против 1Ь-23р19 по этому изобретению.
На фиг. 3А показано, что антитела ΜΘΚΌ4083 и ΜΘΚ04190 блокируют нормальное связывание 1Ь23/1Б-23К
На фиг. 3В показано, что антитела ΜΘΒ04083 и ΜΘΚΌ4190 не блокируют нормальное связывание 1Ь-23/1Ь-12Вв1.
На фиг. 3С показано, что антитела ΜΘΒ04083, ΜΘΒ04190 и ΜΘΒ04217 не ингибируют связывание Ш-12 с 1Ь-12Вв1-Рс.
На фиг. 4 показано, что антитела против 1Ь-23р19 ΜΘΚΌ4083 и ΜΘΚΌ4190 по этому изобретению ингибируют опосредуемое Ьг1Ь-23 фосфорилирование 8ТАТ 3.
На фиг. 5А показано, что антитела против 1Ь-23р19 ΜΘΚΌ4083 и ΜΘΒ04190 по этому изобретению ингибируют опосредуемую рекомбинантным Ьг1Ь-23 продукцию 1Б-17.
На фиг. 5В показано, что антитела против 1Ь-23р19 ΜΘΚΌ4083 и ΜΘΒ04190 по этому изобретению ингибируют опосредуемую нативным Ьг1Ь-23 продукцию 1Б-17.
На фиг. 5С показано, что антитела против 1Ь-23р19 ΜΘΚΌ4083 и ΜΘΒ04190 по этому изобретению ингибируют опосредуемую нативным 1Б-23 яванской макаки продукцию 1Б-17.
На фиг. 6 показано, что антитела против 1Ь-23р19 ΜΘΒ04083 и ΜΘΚΌ4190 по этому изобретению не ингибируют опосредуемую Ьг1Ь-12 продукцию ΙΡΝγ.
На фиг. 7А-С показано, что антитела против 1Ь-23р19 ΜΘΒ04083, ΜΘΚΌ4190 и ΜΘΒ04217 по это
- 2 019476 му изобретению перекрестно конкурируют друг с другом за связывания с 111116-23.
На фиг. 8 показано, что антитела против 1Ь-23р19 ΜΘΚ05028, 05038, 05040, 05042, 05045, 05049 и 05053 по этому изобретению ингибируют опосредуемую рекомбинантным Ьт1Ь-23 продукцию 1Ь-17.
На фиг. 9 показано, что антитела против 1Ь-23р19 ΜΘΚ05028, 05038, 05040, 05042, 05045, 05049 и 05053 по этому изобретению блокируют нормальное связывание 1Ь-23/1Ь-23К.
На фиг. 10 показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению специфично связываются с Ьт1Ь-23 и не связываются с Ьт1Ь-12 или мономером 1гр40, аналогично мышиному моноклональному антителу против 1Ь-23р19, шЛЬ23Л. Показано, что антитело против 1Ь-12/1Ь-23р40 шЛЫ2Л связывает 1Ь-23, 1Ь-12 и мономер р40.
На фиг. 11А показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению блокируют нормальное связывание 1Ь-23/1Ь-23К
На фиг. 11В показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению не блокируют нормальное связывание 1Ь-23/1Ь-12К.в 1.
На фиг. 11С показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению не ингибируют связывание 1Ь-12 с ΙΤ-12Κ.β 1-Ре.
На фиг. 12 показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению не ингибируют индуцируемую 1Ь-12 продукцию ΙΝΡγ из клеток ΝΚ92ΜΙ.
На фиг. 13 показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению ингибируют опосредуемую рекомбинантным Ьт1Ь-23 продукцию 1Ь-17.
На фиг. 14 показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению ингибируют опосредуемую нативным Ьт1Ь-23 продукцию 1Ь-17.
На фиг. 15 показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению ингибируют опосредуемую нативным 1Ь-23 яванской макаки продукцию 1Ь-17.
На фиг. 16А показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению и тАЬ23А конкурируют за связывание 1Ь-23 с иммобилизованным тАЬ23А.
На фиг. 16В показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759 ЕЛЕ’Е по этому изобретению и, в меньшей степени, тАЬ23А конкурируют за связывание 1Ь-23 с иммобилизованным тЛЬ504(0'ЕЕ
На фиг. 16С показано, что антитела против 1Ь-23р195040о/ЕУ и 3759Ее: е:'е по этому изобретению и тАЬ23А конкурируют за связывание 1Ь-23 с иммобилизованным тАЬ3759ЕЕ Е:,Е.
Описание изобретения
Настоящее изобретение относится к выделенным, рекомбинантным и/или синтетическим антителам против 1Ь-23р19, включая, но не ограничиваясь ими, антиидиотипические антитела млекопитающих (например, человека) против 1Ь-23р19 к ним, а также к композициям и кодирующим молекулам нуклеиновых кислот, содержащим по меньшей мере один полинуклеотид, кодирующий по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 или антиидиотипическое антитело. Кроме того, настоящее изобретение относится, но не ограничивается ими, к способам получения и применения таких нуклеиновых кислот и антител, и антиидиотипических антител, в том числе к диагностическим и терапевтическим композициям, способам и устройствам.
Как используют в настоящем документе, антитело против 1Ь-23р19, антитело к 1Ь-23р19, участок антитела против 1Ь-23р19 или фрагмент антитела против 1Ь-23р19 и/или вариант антитела против 1Ь-23р19 и т.п. включает любой белок или пептид, содержащий молекулу, которая содержит по меньшей мере часть молекулы иммуноглобулина, такую как, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере один определяющий комплементарность участок (СЭЯ) тяжелой или легкой цепи или его связывающий лиганд участок, вариабельный участок тяжелой цепи или легкой цепи, константный участок тяжелой цепи или легкой цепи, каркасная область, или их любой участок, или по меньшей мере один участок рецептора для 1Ь-23 или связывающего белка, который может быть встроен в антитело по настоящему изобретению. Такое антитело необязательно дополнительно воздействует на специфичный лиганд, например, но не ограничиваясь этим, таким образом, что такое антитело модулирует, снижает, повышает, осуществляет антагонизм, осуществляет агонизм, смягчает, ослабляет, блокирует, ингибирует, устраняет и/или предотвращает по меньшей мере один вид активности 1Ь-23 или его связывание или один вид активности рецептора для 1Ь-23 или его связывание ίη νίίτο, ίη δίΐιι и/или ίη νίνο. В качестве неограничивающего примера пригодное антитело против 1Ь-23р19, определенный участок или вариант по настоящему изобретению могут связывать по меньшей мере одну молекулу 1Ь-13 или ее определенные участки, варианты или домены. Пригодное антитело против 1Ь-23р19, определенный участок или вариант также необязательно могут воздействовать по меньшей мере на один вид активности или функцию 1Ь-23р19, такие как, но не ограничиваясь ими, синтез РНК, ДНК или белка, высвобождение 1Ь-23, передача сигнала рецептора для 1Ь-23, расщепление мембранного 1Ь-23, активность 1Ь-23, продукция и/или синтез 1Ь23.
Кроме того, подразумевают, что термин антитело включает антитела, их фрагменты расщепления, определенные участки и варианты, включающие, но не ограничивающиеся ими, миметики антител или содержащие участки антител, которые имитируют структуру и/или функцию антитела или определенно- 3 019476 го его фрагмента или участка, включая, но не ограничиваясь ими, одноцепочечные антитела, антитела из одного домена и их фрагменты. Функциональные фрагменты включают антигенсвязывающие фрагменты, которые связываются с 1Р-23р19 человека. Например, к этому изобретению относятся фрагменты антител, способные связываться с 1Ь-23р19 или его участками, включая, но не ограничиваясь ими, фрагменты РаЬ (например, посредством расщепления папаином), РаЬ' (например, посредством расщепления пепсином или частичного восстановления) и Р(аЬ')2 (например, посредством расщепления пепсином), £аеЬ (например, посредством расщепления плазмином), рРс' (например, посредством расщепления пепсином или плазмином), Ρ4 (например, посредством расщепления пепсином, частичного восстановления и повторной агрегации), Ρν или §сРу (например, посредством способов молекулярной биологии) (см., например, СоШдаи, 1ттипо1оду, выше).
Такие фрагменты можно получать ферментативным расщеплением, синтетическими или рекомбинантными способами, которые известны в данной области и/или как описано в настоящем документе. Также антитела можно получать в виде многообразных укороченных форм с использованием генов антител, в которые встроены один или несколько стоп-кодонов выше природного стоп-кодона. Например, можно сконструировать комбинированный ген, кодирующий участок тяжелой цепи Р(аЬ')2, включающий последовательности ДНК, кодирующие домен СН1 и/или шарнирную область тяжелой цепи. Различные участки антител можно соединять вместе химически посредством общепринятых способов их или можно получать в виде непрерывного белка с использованием способов генетической инженерии.
Как используют в настоящем документе, подразумевают, что термин антитело человека включает антитела, имеющие вариабельные и константные участки, образованные из близко сходных последовательностей иммуноглобулинов эмбрионального типа человека. Антитела человека по этому изобретению могут включать аминокислотные остатки, не кодируемые последовательностями иммуноглобулинов эмбрионального типа (например, мутации, внесенные случайным или сайт-направленным мутагенезом ΐη νΐΐίο или посредством соматической мутации ΐη νίνο). Таким образом, как используют в настоящем документе, термин антитело человека относится к антителу, в котором, по существу, каждая часть белка (например, СИК, каркасная область, домены Сь СН (например, СН1, СН2, СН3), шарнирная область (Уь; УН)) является, по существу, сходной с антителом человека эмбрионального типа. Антитела человека классифицируют на группы на основе сходства их аминокислотных последовательностей, см., например, Ьйр://реор1е.сгу§1.ЬЬк.ас.ик/~иЬс§07§/. Таким образом, с использованием поиска сходства последовательностей можно выбрать антитело со сходной линейной последовательностью в качестве матрицы для создания гуманизированных антител.
Гуманизация (также называемая перестройкой или пересадкой СОК) в настоящее время является общепринятым способом снижения иммуногенности моноклональных антител (тАЬ) из ксеногенетических источников (обычно грызунов) и улучшения эффекторных функций (АОСС, активация комплемента, связывание С1ф. Сконструированное тАЬ получают с использованием способов молекулярной биологии, однако простая пересадка СОК определяющих комплементарность участков (СОК) грызунов в человеческие каркасные области часто приводит к потере аффинности связывания и/или специфичности исходного тАЬ. В целях гуманизации антитела конструкция гуманизированного антитела включает изменения, такие как консервативные аминокислотные замены в остатках СОК и обратная замена остатков с тАЬ грызуна на каркасные области человека (обратные мутации). Положения можно определить и идентифицировать сравнением последовательностей для структурного анализа или анализом модели гомологии ЗИ-структуры вариабельных участков. В процессе созревания аффинности совсем недавно использовали фаговые библиотеки для варьирования аминокислот в выбранных положениях. Аналогично использовали множество подходов для выбора наиболее пригодных каркасных областей человека для пересадки в них СОК грызунов. По мере возрастания совокупности данных об известных параметрах для структур антител повышается детализация и уточнение этих способов. Можно использовать консенсусные или эмбриональные последовательности из отдельного антитела или фрагменты каркасных последовательностей в каждом вариабельном участке легкой или тяжелой цепи из нескольких различных тАЬ. Другим подходом к гуманизации является модификация только поверхностных остатков последовательностей грызунов остатками, наиболее часто встречающимися в тАЬ человека, и он называется изменением поверхности или гиперхимеризацией. Известные последовательности 1д описаны, например, удуу7.псЬ1 .ηΐιη.ηίΐι. дсуу/епСгег/диегу. £сд1 ;
ντντν/. псЫ . ηίϊι. дсгу/хдЫазк; упт. аксс . огд/рЬаде/МЬ. ИСт1 ;
кт/. каЬакйакаЬазе . сот/Сор. Икт1 ;
угум. апЫЬойугезоигсе . сот/опИпесотр. Ькт1 ;
νζνπν. аррЫеДЫозузСетз . сот; «тл/ν. Ыойезбдп. сот;
апктЬоДу .ЬаСИ. ас .ик; тт. ипГгкхк; угугуг . сгузк .ЬЬк. ас .ик/~иЬсд07з ;
КаЬак е£ а1, Зедиепсез о£ Ргокегпз о£ 1ттипо1одз.са1 1п£егезк,
и.5. Берк. Неа1кЬ (1983), все из которых включены в настоящий документ в качестве ссылок в полном объеме. Часто антитело человека или гуманизированное антитело является, по существу, неиммуногенным у человека.
- 4 019476
Аналогично антителами, обозначаемыми как антитела приматов (обезьяны, бабуина, шимпанзе и т.д.), грызунов (мыши, крысы, кролика, морской свинки, хомяка и т.п.) и других млекопитающих, обозначают такие антитела, специфичные для вида, подрода, рода, подсемейства и семейства. Кроме того, химерные антитела могут включать любое сочетание из указанных выше антител. Такие изменения или отклонения необязательно и предпочтительно сохраняют или снижают иммуногенность у человека или других видов по сравнению с немодифицированными антителами. Таким образом, антитело человека отличается от химерного или гуманизированного антитела.
Следует отметить, что антитело человека можно получать с помощью не относящегося к человеку животного или прокариотической или эукариотической клетки, которые способны экспрессировать функционально перестроенные гены иммуноглобулина человека (например, тяжелую цепь и/или легкую цепь). Кроме того, когда антитело человека представляет собой одноцепочечное антитело или антитело с одним доменом, оно может содержать линкерный пептид, который отсутствует в природных антителах человека. Например, Εν может содержать линкерный пептид, такой как от двух до приблизительно восьми остатков глицина или других аминокислотных остатков, которые соединяют вариабельный участок тяжелой цепи и вариабельный участок легкой цепи. Такие линкерные пептиды рассматривают как пептиды человеческого происхождения.
Также можно использовать биспецифичные, гетероспецифичные, гетероконъюгированные или сходные антитела, которые представляют собой моноклональные антитела, предпочтительно антитела человека или гуманизированные антитела, которые обладают специфичностью связывания в отношении по меньшей мере двух различных антигенов. В данном случае, один из видов специфичности связывания представляет собой специфичность связывания в отношении по меньшей мере одной белковой субъединицы 1Ь-23р19, а другой представляет собой специфичность связывания в отношении любого другого антигена. Способы получения биспецифичных антител известны в данной области. Обычно рекомбинантная продукция биспецифичных антител основана на коэкспрессии двух пар тяжелая цепь-легкая цепь иммуноглобулина, где две тяжелые цепи обладают различными видами специфичности (ΜίΕίοίη апб Сие11о, №11игс 305:537 (1983)). Вследствие случайной сборки тяжелых и легких цепей иммуноглобулина эти гибридомы (квадромы) продуцируют потенциальную смесь из 10 различных молекул антител, где только одна из них обладает правильной биспецифичной структурой. Очистку требуемой молекулы обычно проводят посредством стадий аффинной хроматографии. Сходные способы описаны, например, в АО 93/08829, патентах США №№ 6210668, 6193967, 6132992, 6106833, 6060285, 6037453, 6010902, 5989530, 5959084, 5959083, 5932448, 5833985, 5821333, 5807706, 5643759, 5601819, 5582996, 5496549, 4676980, АО 91/00360, АО 92/00373, ЕР 03089, Тгаипескег е! а1., ЕМВО 1. 10:3655 (1991), ЗигезЬ е! а1., Ме1Ьобз ίη Епхуто1оду 121:210 (1986), все из которых включены в настоящий документ в полном объеме.
Антитела против Ш-23р19, пригодные в способах и композициях по настоящему изобретению, необязательно могут характеризоваться высокой аффинностью связывания с Ш-23р19 и необязательно и предпочтительно обладают низкой токсичностью. В частности, для настоящего изобретения являются пригодными антитело, определенный фрагмент или вариант по этому изобретению, где отдельные компоненты, такие как вариабельный участок, константный участок и каркасная область, отдельно и/или совместно, необязательно и предпочтительно обладают низкой иммуногенностью. Антитела, которые можно использовать в соответствии с этим изобретением, необязательно характеризуются способностью в отношении лечения ими пациентов в течение длительных периодов времени с поддающимся определению уменьшением симптомов и низкой и/или приемлемой токсичностью. Низкая или приемлемая иммуногенность и/или высокая аффинность, а также другие пригодные свойства могут приводить к достижению терапевтических результатов. В настоящем документе низкую иммуногенность определяют как возникновение поддающихся титрованию уровней антител к антителу против Ш-23р19 у пациентов, которых лечили антителом против Ш-23р19, встречающееся менее чем у 25% пациентов, которых лечили, предпочтительно менее чем у 10% пациентов, которых лечили рекомендованной дозой в течение рекомендованного курса лечения в процессе периода лечения.
Выделенные нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению можно использовать для продукции по меньшей мере одного антитела против Ш-23р19 или его определенного варианта, которые можно использовать для определения эффекта в клетке, ткани, органе или у животного (в том числе млекопитающих и человека), для диагностики, мониторинга, модулирования, лечения, смягчения, способствования предотвращению заболеваемости или уменьшения симптомов по меньшей мере одного связанного с Ш-23 состояния, выбранного, но не ограничивающегося ими, по меньшей мере из одного из иммунного нарушения или заболевания, сердечно-сосудистого нарушения или заболевания, инфекционного, злокачественного и/или неврологического нарушения или заболевания либо другого известного или описанного связанного с Ш-23 состояния.
Такой способ может включать введение эффективного количества композиции или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно антитело против Ш-23р19, в клетку, ткань, орган, животному или пациенту, нуждающемуся в таком модулировании, лечении, смягчении, профилактике или снижении симптомов, эффектов или механизмов. Эффективное количество может включать количе
- 5 019476 ство, составляющее приблизительно от 0,001 до 500 мг/кг при однократном (например, болюсном), многократном или постоянном введении, или количество для достижения концентрации в сыворотке 0,015000 мкг/мл сыворотки при однократном, многократном или постоянном введении, или любой эффективный диапазон или значение в этом диапазоне, как осуществляют и определяют с использованием известных способов, как описано в настоящем документе или известно в данной области.
Антитела по настоящему изобретению - продукция и получение.
По меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению необязательно можно продуцировать с помощью клеточной линии, смешанной клеточной линии, иммортализованной клетки или клональной популяции иммортализованных клеток, которые хорошо известны в данной области; см., например, Ли8иЬе1 е! а1., еб., Сиггеп! Рго!осо1з т Мо1еси1аг Вю1о§у, 1оНп \\'Пеу & 8опз, 1пс., ΝΥ, (1987-2001); 8атЬгоок е! а1., Мо1еси1аг С1оптд: А ЬаЬога!огу Мапиа1, 2пб Ебйюп, Со1б 8ргтд ИагЬог, ΝΥ (1989); Наг1о\\' апб Ьапе, апйЬоШез, а ЬаЬога!огу Мапиа1, Со1б 8рппд ИагЬог, ΝΥ (1989); СоШдап е! а1., ебз., Сиггеп! Рго!осо1з т 1ттипо1оду, 1оНп \\'Пеу & 8опз, 1пс., ΝΥ (1994-2001); СоШдап е! а1., Сиггеп! Рго!осо1з т Рго!ет 8с1епсе, 1оИп Ш11еу & 8опз, ΝΥ, (1997-2001).
Антитела, специфичные к белкам 1Ь-23р19 человека или их фрагментам, можно получать из рекомбинантных библиотек антител человека с использованием пригодного антигена, такого как выделенный белок 1Ь-23р19 и/или его часть (включая синтетические молекулы, такие как синтетические пептиды). Другие специфичные или общие антитела, включая, но не ограничиваясь ими, антитела млекопитающих, можно индуцировать аналогичным образом. Получение антигенов и выделение антител из библиотек человека можно проводить с использованием любого пригодного способа.
В одном подходе рекомбинантное антитело получают посредством фагового дисплея с использованием библиотек антител (НоодепЬоот Н.К. (Аетем о£ ап!1Ьобу рйа§е-б18р1ау !есйпо1оду апб йз аррйса!юпз. МеШобз 1п Мо1еси1аг Вю1оду. 178:1-37, 2002). В предпочтительном подходе рекомбинантный РаЬ человека выделяют из библиотеки НиСа1 Ио1б™, разработанной Могрйо8у8, АП (Кге^зсйшаг, 2002), а затем повышают его активность посредством кассетного разнообразия СИК (Кпарр1к е! а1., 2000, КгеЬз е! а1., 2001).
Рекомбинантные антитела человека, выделенные из библиотек фагового дисплея, можно конструировать, заменяя определенные остатки конкретными аминокислотами, соответствующими консенсусным или специфичным последовательностям антител человека. Эти последовательности идентифицируют сравнением с базами данных известных антител человека эмбрионального типа или подвергшихся реаранжировке антител.
Известные последовательности 1д человека описаны, например, ντνπν. псЫ . п1т. ηίϊι. доч/епкгег/срегу. £сдх ;
νζνζνζ. псЫ . ηϊΗ.. доч/тдЫазк; νζνζνζ. аксс . огд/рЬаде/МЬ. Игт1 ;
νζνζνζ. гг££с-сре . сат. ас . ик/АЫСЫМЕЫТЗ . ркр;
νζνπν. каЬакйакаЬазе . сот/кор. Икт1 ;
£кр . псЫ . ηϋι. дον/героззЛогу/каЬак ; ν/νζνζ. ттдк.. стпез. £г. 8104/;
νζνζνζ. Ыоскет. ипхгИ. ск/апкгЬоау/ίηάεχ. Ькт1; νηννζ. зсхдиезк . сот;
ντνζνζ. аЬсат. сот; тт. апктЬойугезоигсе . сот/опИпесотр. Г1£т1 ;
юшу.риЬИс. дазкаке . ес!и/~рес1го/гезеагск_коо1з . Икт1 ;
νζνζνζ. уД1£геетап. сот/1ттипо1оду/СН05/киЬу05 . ккт;
ντντν. Ы1т1. огд/дгапкз/1ескигез/1996/у1аЬ;
тгы.ракк.сат.ас.ик/~тгс7/т1ке1тадез.Икт1;
тсЬ. кагуагд. е0.и/В1оЫпкз/1ттипо1оду. Икт1 ;
ντνζν. 1ттипо1одуИпк. сот; раккЬох. миз£1. е0и/~Исеп£ег/1п0ех.Ыхт1 ;
ν/νπΛΖ. аррИейЫозузкетз . сот; νντνι. па1. изс!а . доу/аУ7з_с/риЬз/апк£Ьос1у ;
ννπν.ιη. еЫте-и. ас . ]р/~уазиЫ£о/Е11за . Икт1; νπννζ. Ыобезтдп. сот;
тт. сапсеггезеагскик. огд; тте. Ыо£есЬ. и£1. ес!и; тто.тзаспек.огд; Ьазегу. ис1. кип. п1/~д гаа£з/Ипкз1. Икт1; νζνν. гесаЬ. ипа.Ηά. Зе/ гттипо. Ьте . птт. ес1и; ντντνί. тгс - сре . сат. ас . ик ;
νζνζνζ. 1Ь£ . ипат. тх/у1г/У_т1се . ккт1; кккр : / / ντνην. Βίοίη£ . огд. ик/аЬз ;
антитело.Ьакк.ас.ик; νζνζνζ. иптгк. ск;
νζνζνζ. сгузк . ЬЬк . ас . ик/ ~иЬсд07з ;
ντντνζ. ηίτηΓ. тгс . ас . ик/СС/ссаемд/ссаемд. Ькт1 ;
чмлм. ракк. сат. ас . ик/~гпгс7/11итап1за£.1оп/ТАННР. Икт1 ;
νζνζνζ. 1Ьк . ипат.тх/у1г/зкгис£иге/зкак_аът. Ькт1 ;
ъгугы. Ыозс1 .т155оип . еаи/зтхкЬдр/ίηάβχ. Икт1; ντντνζ. ]ег1п1.0е;
КаЬак ек а1. , Зедиепсез о£ Ргокетпз о£ 1ттипо1од1са1 1п£егезк,
и.5. Όβρ£. Неа1£И (1983), все из которых включены в настоящий документ в качестве ссылок в полном объеме.
Такие замененные аминокислоты можно использовать для снижения иммуногенности или снижения, усиления или модификации связывания, аффинности, скорости ассоциации, скорости диссоциации, авидности, специфичности, времени полужизни или любого другого пригодного свойства, как известно в
- 6 019476 данной области. Как правило, остатки СЭР прямо и наиболее существенно вовлечены во влияние на связывание антигена. Необязательно, антитела можно конструировать с сохранением высокой аффинности к антигену и других полезных биологических свойств. Для достижения этой цели антитела человека необязательно можно получать посредством процесса анализа исходных последовательностей и различных концептуальных сконструированных продуктов с использованием трехмерных моделей исходных, сконструированных и человеческих последовательностей. Трехмерные модели иммуноглобулинов широко доступны и известны специалистам в данной области. Доступными являются компьютерные программы, которые иллюстрируют и воспроизводят возможные трехмерные конформационные структуры выбранных последовательностей иммуноглобулинов-кандидатов. Исследование этих воспроизведенных данных дает возможность анализа вероятной роли остатков в функционировании последовательности иммуноглобулина-кандидата, т.е. анализа остатков, которые влияют на способность иммуноглобулина-кандидата связывать свой антиген. Таким образом, остатки можно выбирать и комбинировать из исходных и эталонных последовательностей, чтобы достигать требуемого свойства антитела, такого как аффинность к антигену(ам)-мишени. Альтернативно или дополнительно указанным выше способам, конструирование можно проводить эмпирически с помощью кассетного разнообразия СИЯ и выбора по требуемой активности, таких как описано для системы Могрйо8у§ НиСАЬ (Кпарр1к с1 а1., 2000, КгеЬк с1 а1., 2001).
Кроме того, антитело против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению может содержать каркасную область легкой цепи человека эмбрионального типа. В конкретных вариантах осуществления последовательность эмбрионального типа легкой цепи выбрана из человеческих последовательностей УК, включая, но не ограничиваясь ими, А1, А10, А11, А14, А17, А18, А19, А2, А20, А23, А26, А27, А3, А30, А5, А7, В2, В3, Ь1, Ь10, Ь11, Ь12, Ь14, Ь15, Ь16, Ь18, Ь19, Ь2, Ь20, Ь22, Ь23, Ь24, Ь25, Ь4/18а, Ь5, Ь6, Ь8, Ь9, О1, 011, 012, 014, 018, 02, 04 и 08. В определенных вариантах осуществления эта каркасная область легкой цепи человека эмбрионального типа выбрана из У1-11, У1-13, У1-16, У1-17, У1-18, У1-19, У1-2, У1-20, У1-22, У1-3, У1-4, У1-5, У1-7, У1-9, У2-1, У2-11, У2-13, У2-14, У2-15, У2-17, У2-19, У2-6, У2-7, У2-8, У3-2, У3-3, У3-45, У4-1, У4-2, У4-3, У4-4, У4-6, У5-1, У5-2, У5-4 и У5-6; см. РСТ \\'0 2005/005604 для описания различных последовательностей эмбрионального типа.
В других вариантах осуществления антитело против 1Ь-23 по настоящему изобретению может содержать каркасную область тяжелой цепи человека эмбрионального типа. В конкретных вариантах осуществления эта каркасная область тяжелой цепи человека эмбрионального типа выбрана из УН1-18, УН1-2, УН1-24, УН1-3, УН1-45, УН1-46, УН1-58, УН1-69, УН1-8, УН2-26, УН2-5, УН2-70, УН3-11, УН3-13, УН3-15, УН3-16, УН3-20, УН3-21, УН3-23, УН3-30, УН3-33, УН3-35, УН3-38, УН3-43, УН3-48, УН3-49, УН3-53, УН3-64, УН3-66, УН3-7, УН3-72, УН3-73, УН3-74, УН3-9, УН4-28, УН4-31, УН4-34, УН4-39, УН4-4, УН4-59, УН4-61, УН5-51, УН6-1 и УН7-81; см. РСТ \\'0 2005/005 604 для описания различных последовательностей эмбрионального типа.
В конкретных вариантах осуществления вариабельный участок легкой цепи и/или вариабельный участок тяжелой цепи содержит каркасную область или по меньшей мере часть каркасной области (например, содержащую 2 или 3 субфрагмента, таких как РЯ2 и РЯ3). В определенных вариантах осуществления, по меньшей мере, РКЕ1, РКЕ2, РКЕ3 или РКЕ4 являются полностью человеческими. В других вариантах осуществления, по меньшей мере, РЯН1, РЯН2, РЯН3 или РЯН4 являются полностью человеческими. В некоторых вариантах осуществления, по меньшей мере, РКЕ1, РКЕ2, РЯБ-Л или РКЕ4 представляют собой последовательности эмбрионального типа (например, эмбрионального типа человека) или содержат консенсусные последовательности человека для определенной каркасной области (широко доступные из источников известных последовательностей 1д человека, описанных выше). В других вариантах осуществления, по меньшей мере, РЯН1, РЯН2, РЯН3 или РЯН4 представляют собой последовательности эмбрионального типа (например, эмбрионального типа человека) или содержат консенсусные последовательности человека для определенной каркасной области. В предпочтительных вариантах осуществления каркасная область представляет собой полностью человеческую каркасную область.
Конструирование антител по настоящему изобретению можно проводить с использованием любого известного способа, такого как, но не ограничиваясь ими, способы, описанные в ^У1п(ег (1опе5 е1 а1., Иа!иге 321:522 (1986), Шесйгаапи е! а1., Иа!иге 332:323 (1988), Уегйоеуеп е! а1., 8с1епее 239:1534 (1988), 811115 е! а1., 1. 1ттипо1. 151: 2296 (1993), Сйо!Ыа апб Ьекк, 1. Мо1. Вю1. 196:901 (1987), Сайег е! а1., Ргос. №111. Асаб. 8с1. И.8.А. 89:4285 (1992), Ргейа е! а1., 1. 1ттипо1. 151:2623 (1993), патентах США №№ 5723323, 5976862, 5824514, 5817483, 5814476, 5763192, 5723323, 5766886, 5714352, 6204023, 6180370, 5693762, 5530101, 5585089, 5225539, 4816567, РСТ: И8 98/16280, И8 96/18978, И8 91/09630, И8 91/05939, И8 94/01234, ОВ 89/01334, ОВ 91/01134, ОВ 92/01755, \\'0 90/14443, \\'0 90/14424, \\'0 90/14430, ЕР 229246, все из которых включены в настоящий документ в качестве ссылок в полном объеме, включая приведенные в них ссылки.
В определенных вариантах осуществления антитело содержит измененный (например, мутантный) Рс-участок. Например, в некоторых вариантах осуществления Рс-участок изменен для снижения или повышения эффекторных функций антитела. В некоторых вариантах осуществления Рс-участок представляет собой изотип, выбранный из 1дМ, 1дА, 1дО, 1дЕ или другого изотипа.
Альтернативно или дополнительно, может быть полезным комбинирование модификаций амино
- 7 019476 кислот с одной или несколькими дополнительными модификациями аминокислот, которые изменяют связывание С1с| и/или функцию комплементзависимой цитотоксичности Ес-участка связывающей 1Ь23р19 молекулы. Представляющий особый интерес исходный полипептид может представлять собой полипептид, который связывается с С1с.| и проявляет комплементзависимую цитотоксичность (СЭС).
Полипептиды с предварительно существующей активностью в отношении связывания с С1с.|. кроме того, необязательно обладающие способностью принимать участие в СЭС. можно модифицировать, чтобы один или оба из этих видов активности усиливались. Модификации аминокислот, которые приводят к изменению С1с| и/или модифицируют его функцию комплементзависимой цитотоксичности, описаны, например, в АО 0042072, которая включена в настоящий документ в качестве ссылки.
Как описано выше, можно сконструировать Ес-участок антитела против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению с измененной эффекторной функцией, например, посредством модификации связывания С1с| и/или связывания ЕсуК и, таким образом, изменения активности в отношении комплементзависимой цитотоксичности (СЭС) и/или активности в отношении антителозависимой клеточно-опосредуемой цитотоксичности (ЛИСС). Эффекторные функции отвечают за активацию или снижение биологической активности (например, у субъекта). Примеры эффекторных функций включают, но не ограничиваются ими, связывание С1с.|; комплементзависимую цитотоксичность (СЭС); связывание Ес-рецептора; антителозависимую цитотоксичность (ЛИСС); фагоцитоз; снижение активности рецепторов клеточной поверхности (например, В-клеточного рецептора; ВСК) и т.д. Для таких эффекторных функций может быть необходимым, чтобы Ес-участок был объединен со связывающим доменом (например, вариабельным доменом антитела) и их можно оценивать с использованием различных способов анализа (например, способов анализа связывания Ес, способов анализа АЭСС, способов анализа СЭС и т.д.).
Например, можно получить вариант Ес-участка антитела против 1Ь-23р19 с повышенным связыванием С1с| и с повышенным связыванием ЕсВуШ (например, обладающий повышенной активностью в отношении ЛЭСС и повышенной активностью в отношении СЭС). Альтернативно, если необходимо снизить или устранить эту эффекторную функцию, можно сконструировать вариант Ес-участка со сниженной активностью в отношении СЭС и/или со сниженной активностью в отношении ЛЭСС. В других вариантах осуществления можно повысить только один из этих видов активности и, необязательно, также снизить другой вид активности (например, получить вариант Ес-участка с повышенной активностью в отношении АЭСС, но со сниженной активностью в отношении СЭС, и наоборот).
Также в конструируемые молекулы можно вносить мутации для изменения их взаимодействия с неонатальным Ес-рецептором (ЕсКп) и улучшения их фармакокинетических свойств. Описана коллекция Ес-вариантов человека с повышенным связыванием с ЕсКп (8Ые1бк е! а1., (2001) Нщ11 гекоНЮоп тарртд оГ 1йе Ьтбшд кйе оп Нитап 1дО1 Гог ЕсуШ, ЕсуКП, ЕсуКШ, апб ЕсКп аиб бекфп оГ 1дО1 уапапГк \νί11ι 1тргоуеб Ыпбтд Го !Не ЕсуК, 1. Вю1. СНет. 276:6591-6604).
Другой тип аминокислотных замен способствует изменению паттерна гликозилирования Ес-участка антитела человека против 1Ь-23р19. Гликозилирование Ес-участка, как правило, является либо Νсвязанным, либо О-связанным. Ν-связанное гликозилирование относится к присоединению углеводной группы к боковой цепи остатка аспарагина. О-связанное гликозилирование относится к присоединению одного из сахаров Ν-ацетилгалактозамина, галактозы или ксилозы к гидроксиаминокислоте, наиболее часто к серину или треонину, хотя также можно использовать 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин. Распознаваемые последовательности для ферментативного присоединения углеводной группы к пептидным последовательностям с боковой цепью аспарагина представляют собой аспарагин-Х-серин и аспарагин-Х-треонин, где X представляет собой любую аминокислоту, за исключением пролина. Таким образом, наличие любой из этих пептидных последовательностей в полипептиде формирует потенциальный участок гликозилирования.
Паттерн гликозилирования можно изменять, например, удалением одного или нескольких участков гликозилирования, находящихся в полипептиде, и/или добавлением одного или нескольких участков гликозилирования, которые отсутствуют в полипептиде. Добавление участков гликозилирования к Есучастку антитела человека против 1Ь-23р19 удобно проводить посредством изменения аминокислотной последовательности, чтобы она содержала одну или несколько из описанных выше трипептидных последовательностей (для участка Ν-гликозилирования).
Иллюстративный вариант по гликозилированию обладает аминокислотной заменой остатка Акп 297 тяжелой цепи. Изменение также можно проводить добавлением одного или нескольких остатков серина или треонина к последовательности исходного полипептида (для участков О-гликозилирования) или его заменой. Кроме того, замена Акп 297 на А1а может привести к удалению одного из участков гликозилирования.
В определенных вариантах осуществления антитело человека против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению экспрессируют в клетках, которые экспрессируют бета-(1,4)-Ыацетилглюкозаминилтрансферазу III (ОпТ III), чтобы ОпТ III присоединяла С1сХАс к антителу человека против Ш^р^. Способы продукции антител таким образом представлены в АО/9954342, АО/03011878, патентной заявке 20030003097А1 и в Итапа е! а1., №11иге Вю1есйио1оду, 17:176-180, ЕеЬ.
- 8 019476
1999.
Скрининг антител в отношении специфичного связывания со сходными белками или фрагментами удобно проводить с использованием библиотек пептидного дисплея. Этот способ включает скрининг крупных коллекций пептидов в отношении отдельных членов, обладающих требуемой функцией или структурой. Скрининг антител в библиотеках пептидного дисплея хорошо известен в данной области. Длина воспроизводимых пептидных последовательностей может составлять от 3 до 5000 или более аминокислот, часто длина составляет 5-100 аминокислот и часто длина составляет приблизительно от 8 до 25 аминокислот. В дополнение к способам получения пептидных библиотек прямым химическим синтезом описано несколько способов рекомбинантных ДНК. Один тип включает воспроизведение пептидной последовательности на поверхности бактериофага или клетки. Каждый бактериофаг или клетка содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую конкретную подлежащую воспроизведению пептидную последовательность. Такие способы описаны в патентных заявках РСТ №№ 91/17271, 91/18980, 91/19818 и 93/08278.
Другие системы для получения библиотек пептидов обладают признаками как химического синтеза, так и рекомбинантных способов ίη νίΐτο; см. публикации патентных заявок РСТ №№ 92/05258, 92/14843 и 96/19256; см. также патенты США №№ 5658754 и 5643768. Библиотеки пептидного дисплея, векторы и наборы для скрининга коммерчески доступны у таких поставщиков, как ΙηνίΐΓο^βη (СагкЬаб, СА) и СатЬпбдс айгЬобу Тсс1то1ощс5 (СатЬпбдсзЫгс, иК); см., например, патенты США №№ 4704692, 4939666, 4946778, 5260203, 5455030, 5518889, 5534621, 5656730, 5763733, 5767260, 5856456, выданные Εηζοη; 5223409, 5403484, 5571698, 5837500, выданные Эуах, 5427908, 5580717, выданные АГГутах; 5885793, выданный СатЬпбдс айгЬобу Тсс11по1ощс8; 5750373, выданный 6спсп!ссй, 5618920, 5595898, 5576195, 5698435, 5693493, 5698417, выданные Хота, СоШдащ выше; Аи8иЬс1, выше или БатЬгоок, вы ше.
Также антитела по настоящему изобретению можно получать с использованием по меньшей мере одной нуклеиновой кислоты, кодирующей антитело против 1Ь-23р19, для создания трансгенных животных или млекопитающих, таких как козы, коровы, лошади, овцы, кролики и т.п., которые продуцируют такие антитела в их молоке. Таких животных можно создавать с использованием известных способов; см., например, но не ограничиваясь ими, патенты США №№ 5827690; 5849992; 4873316; 5849992; 5994616; 5565362; 5304489 и т.п., все из которых включены в настоящий документ в качестве ссылок в полном объеме.
Антитела по настоящему изобретению, кроме того, можно получать с использованием по меньшей мере одной нуклеиновой кислоты, кодирующей антитело против 1Ь-23р19, для получения трансгенных растений и культивируемых клеток растений (например, но не ограничиваясь ими, табака и маиса), которые продуцируют такие антитела, определенные участки или варианты в отделах растений или в клетках, культивируемых из них. В качестве неограничивающего примера трансгенные листья табака, экспрессирующие рекомбинантные белки, успешно использовали для получения крупных количеств рекомбинантных белков, например, с использованием индуцибельного промотора; см., например, Сгатсг с! а1., Сигг. Тор. М1сгоЬо1. Iттиηο1. 240:95-118 (1999) и ссылки, приведенные в ней. Также трансгенный маис использовали для экспрессии на коммерческих уровнях продукции белков млекопитающих с биологической активностью, эквивалентных белкам, которые получают в других рекомбинантных системах или очищают из природных источников; см., например, Нооб с! а1., Абу. Ехр. Меб. Бю1. 464:127-147 (1999) и ссылки, приведенные в ней. Антитела, в том числе фрагменты антител, такие как одноцепочечные антитела (^Εν), также продуцировали в больших количествах из семян трансгенных растений, в том числе из семян растений и из клубней картофеля; см., например, Сошаб с! а1., Р1ай Мо1. Бю1. 38:101-109 (1998) и ссылки, приведенные в ней. Таким образом, антитела по настоящему изобретению также можно получать с использованием трансгенных растений в соответствии с известными способами; см. также, например, Рщсйсг с! а1., Вю!ссйпо1. Арр1. Бюсйст. 30:99-108 (Ос!., 1999), Ма с! а1., Тгсп6з Вю!ссйпо1. 13:522-7 (1995), Ма с! а1., Р1ип! РЬу8ю1. 109:341-6 (1995), ^Ы!с1ат с! а1., Бюсйст. Бос. Тшпз. 22:940-944 (1994) и ссылки, приведенные в них.
Антитела по этому изобретению могут связывать 1Ь-23р19 человека с аффинностью (Кс), находящейся в широком диапазоне. В предпочтительном варианте осуществления по меньшей мере одно тАЬ человека по настоящему изобретению необязательно может связывать 1Ь-23р19 человека с высокой аффинностью. Например, тАЬ человека или другое тАЬ может связывать 1Ь-23р19 человека с Ко, равной или меньшей чем приблизительно 10-7 М, такой как, но не ограничиваясь ими, 0,1-9,9 (или любой диапазон или значение внутри этого диапазона) X 10-7, 10-8, 10-9, 10-10, 10-11, 10-12, 10-13, 10-14 10-15 или любой диапазон или значение внутри этого диапазона, как определяют посредством поверхностного плазмонного резонанса или способа Кшеха, как применяют специалисты в данной области. В одном варианте осуществления антитела по этому изобретению связывают 1Ь-23р19 человека с Кс между приблизительно 4 и приблизительно 4400 пМ.
Аффинность или авидность антитела по отношению к антигену можно определять экспериментально с использованием любого пригодного способа (см., например, БсгеоГзку, с! а1., АпЦЬо6у-Ап1щсп Ιηкгас^о^, в Ри^ат^Ы Iттиηο1οду, Раи1, ^.Е., Еб., Рагси Ргезз: Ысте Уогк, ΝΥ (1984), КиЬу, Τιηίδ 1т
- 9 019476 типо1оду. ν.Η. Ргеетап апб Сотрапу: Νο\ν Уогк, ΝΥ (1992) и способы, описанные в них). Измеренная аффинность конкретного взаимодействия антитело-антиген может варьировать при измерении в различных условиях (например, концентрация соли, рН). Таким образом, измерения аффинности и других параметров связывания антигена (например, Ко, Коп, Кой) предпочтительно проводят в стандартных растворах антитела и антигена и стандартном буфере, таком как буфер, описанный в настоящем документе.
Конкурентные анализы можно проводить с антителом по настоящему изобретению в целях определения белков, антител и других антагонистов, которые конкурируют за связывание 1Ь-23р19 с антителом по настоящему изобретению и/или обладают общим участком эпитопа. Эти анализы, как хорошо известно специалистам в данной области, оценивают конкуренцию между антагонистами или лигандами за ограниченное количество участков связывания на белке, например, р19. Белок и/или антитело иммобилизуют или переводят в нерастворимую форму до или после конкуренции и образец, связанный с субъединицей р19, отделяют от несвязанного образца, например, отстаиванием (где белок/антитело были предварительно переведены в нерастворимую форму) или центрифугированием (где белок/антитело осаждали после конкурентной реакции). Также конкурентное связывание можно определять по наличию изменения функции посредством связывания или отсутствия связывания антитела с белком, например, по наличию ингибирования или усиления ферментативной активности, например, метки. Можно использовать ЕЬ1§Л и другие функциональные способы анализа, как хорошо известно в данной области.
Определенные варианты осуществления антител против 1Ь-23р19 по этому изобретению имеют последовательности, представленные в таблицах последовательностей ниже. Например, антитело против 1Ь-23р19 по этому изобретению обладает последовательностями одного из СИК1 легкой цепи 8ЕО ΙΌ N0: 46-51; последовательностями одного из СИК2 легкой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 52-57; последовательностями одного из СИК3 легкой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 58-79; последовательностями одного из СИК1 тяжелой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 1-6; последовательностями одного из СИК2 тяжелой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 7-39 и 146 и/или последовательностями одного из СИК3 тяжелой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 40-45.
Молекулы нуклеиновых кислот.
С использованием представленной в настоящем документе информации, например, последовательностей нуклеотидов, кодирующих по меньшей мере 70-100% смежных аминокислот по меньшей мере одного из вариабельных участков легкой цепи антител по этому изобретению (например, 8Е0 ΙΌ N0: 136-138 и 142-144) и по меньшей мере одного из вариабельных участков тяжелой цепи антител по этому изобретению (например, 8Е0 ΙΌ N0: 133-135 и 139-141), их определенных фрагментов, вариантов или консенсусных последовательностей, или депонированного вектора, содержащего по меньшей мере одну из этих последовательностей, можно получать молекулу нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению, кодирующую по меньшей мере одно антитело против ΙΕ-23ρ19 с использованием способов, описанных в настоящем документе или известных в данной области.
Молекулы нуклеиновых кислот по настоящему изобретению могут находиться в форме РНК, такой как мРНК, гяРНК, тРНК или любая другая форма, или в форме ДНК, включая, но не ограничиваясь ими, кДНК и геномную ДНК, получаемых клонированием или синтетическим способом продукции либо любым их сочетанием. ДНК может представлять собой трехцепочечную, двухцепочечную или одноцепочечную ДНК или любое их сочетание. Любой участок по меньшей мере одной цепи ДНК или РНК может представлять собой кодирующую цепь, также известную как смысловая цепь, или он может представлять собой некодирующую цепь, также называемую антисмысловой цепью.
Выделенные молекулы нуклеиновых кислот по настоящему изобретению могут включать молекулы нуклеиновых кислот, содержащие открытую рамку считывания (0КБ), необязательно с одним или нескольким интронами, например, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере для одного определенного участка по меньшей мере одного СИК, такого как СИК1, СИК2 и/или СИК3 по меньшей мере одной легкой цепи (например, 8Е0 ΙΌ N0: 46-51, 52-57 или 58-79) или по меньшей мере одной тяжелой цепи (например, 8Е0 ΙΌ N0: 1-6, 7-39 или 40-45); молекулы нуклеиновых кислот, содержащие кодирующую последовательность для антитела против ΙΕ-23ρ19 или вариабельного участка (например, вариабельных участков легкой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 82-85, 93-98, 100, 102, 113-116 и 128-132 и вариабельных участков тяжелой цепи 8Е0 ΙΌ N0: 80, 81, 86-92, 99, 101, 103-112, 117-127 и 147); и молекулы нуклеиновых кислот, которые содержат нуклеотидную последовательность, по существу, отличающуюся от нуклеотидных последовательностей, описанных выше, но которая, тем не менее, вследствие вырожденности генетического кода кодирует по меньшей мере одно антитело против ΙΕ-23ρ19, как описано в настоящем документе и/или известно в данной области. Безусловно, генетический код хорошо известен в данной области. Таким образом, получение вырожденных вариантов нуклеиновых кислот, которые кодируют специфичные антитела против ΙΕ-23ρ19 по настоящему изобретению, является обычной задачей для специалиста в данной области; см., например, Ли8иЬе1, е1 а1., выше, и такие варианты нуклеиновых кислот относятся к настоящему изобретению.
Как указано в настоящем документе, молекулы нуклеиновых кислот по настоящему изобретению, которые содержат нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело против ΙΕ-23ρ19, могут включать, но не ограничиваться ими, молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие аминокислотную последовательность фрагмента антитела отдельно; кодирующую последовательность для целого антитела или его участка;
- 10 019476 кодирующую последовательность для антитела, фрагмента или участка, а также дополнительные последовательности, такие как кодирующая последовательность по меньшей мере для одного сигнального лидерного или слитого пептида с наличием или отсутствием вышеупомянутых дополнительных кодирующих последовательностей, таких как по меньшей мере один интрон, совместно с дополнительными некодирующими последовательностями, включая, но не ограничиваясь ими, некодирующие 5'- и 3'последовательности, такие как транскрибируемые нетранслируемые последовательности, которые участвуют в транскрипции, процессинге мРНК, включая сигналы сплайсинга и полиаденилирования (например, связывание рибосом и стабилизация мРНК); дополнительную кодирующую последовательность, которая кодирует дополнительные аминокислоты, такие как аминокислоты, которые обеспечивают дополнительную функциональность. Таким образом, кодирующая антитело последовательность может быть слитой с маркерной последовательностью, кодирующей пептид, который облегчает очистку слитого антитела, содержащего фрагмент или участок антитела.
Полинуклеотиды, селективно гибридизующиеся с полинуклеотидом, описанным в настоящем документе.
Настоящее изобретение относится к выделенным нуклеиновым кислотам, которые гибридизуются в селективных условиях гибридизации с полинуклеотидом, описанным в настоящем документе. Таким образом, полинуклеотиды этого варианта осуществления можно использовать для выделения, выявления и/или количественного определения нуклеиновых кислот, содержащих такие полинуклеотиды. Например, полинуклеотиды по настоящему изобретению можно использовать для выявления, выделения или амплификации неполных или полноразмерных клонов в депонированной библиотеке. В некоторых вариантах осуществления полинуклеотиды представляют собой геномные последовательности или последовательности кДНК, выделенные из библиотеки нуклеиновых кислот человека или млекопитающих или в ином случае комплементарные им.
Предпочтительно библиотека кДНК содержит по меньшей мере 80% полноразмерных последовательностей, предпочтительно по меньшей мере 85 или 90% полноразмерных последовательностей и более предпочтительно по меньшей мере 95% полноразмерных последовательностей. Библиотеки кДНК могут быть унифицированными для повышения репрезентации редких последовательностей. Для последовательностей, обладающих сниженной идентичностью последовательностей относительно комплементарных последовательностей, как правило, но не исключительно, используют условия гибридизации низкой или умеренной строгости. Условия умеренной или высокой строгости необязательно можно использовать для последовательностей с более высокой идентичностью. Условия низкой строгости делают возможной селективную гибридизацию последовательностей, обладающих приблизительно 70% идентичностью последовательностей, и их можно использовать для выявления ортологических или паралогических последовательностей.
Необязательно полинуклеотиды по этому изобретению кодируют по меньшей мере часть антитела, кодируемого полинуклеотидами, описанными в настоящем документе.
Полинуклеотиды по этому изобретению включают последовательности нуклеиновых кислот, которые можно использовать для селективной гибридизации с полинуклеотидом, кодирующим антитело по настоящему изобретению; см., например, Ли8иЬе1, выше; СоШдаи, выше, все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Конструирование нуклеиновых кислот.
Выделенные нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению можно получать с использованием (а) рекомбинантных способов, (Ь) способов синтеза, (с) способов очистки и/или (6) их сочетаний, как хорошо известно в данной области.
Нуклеиновые кислоты для удобства могут содержать последовательности в дополнение к полинуклеотиду по настоящему изобретению. Например, для упрощения выделения полинуклеотида в нуклеиновую кислоту можно встраивать полилинкер, содержащий один или несколько участков для рестрикции эндонуклеазами. Также для упрощения выделения транслированного полинуклеотида по настоящему изобретению можно встраивать транслируемые последовательности. Например, гексагистидиновая маркерная последовательность обеспечивает удобный способ очистки белков по настоящему изобретению. Нуклеиновая кислота по настоящему изобретению, за исключением кодирующей последовательности, необязательно представляет собой вектор, адаптер или линкер для клонирования и/или экспрессии полинуклеотида по настоящему изобретению.
К таким клонирующим и/или экспрессирующим последовательностям можно добавлять дополнительные последовательности для оптимизации их функционирования в отношении клонирования и/или экспрессии, для упрощения выделения полинуклеотида или для повышения встраивания полинуклеотида в клетку. Применение векторов для клонирования, экспрессирующих векторов, адаптеров и линкеров хорошо известно в данной области (см., например, Ли8иЬе1, выше, или 8ашЬгоок, выше).
Рекомбинантные способы конструирования нуклеиновых кислот.
Композиции выделенных нуклеиновых кислот по этому изобретению, таких как РНК, кДНК, геномная ДНК или любое их сочетание, можно получать из биологических источников с использованием любого количества способов клонирования, известных специалистам в данной области. В некоторых
- 11 019476 вариантах осуществления для выявления требуемой последовательности в библиотеке кДНК или геномной ДНК используют олигонуклеотидные зонды, которые в строгих условиях селективно гибридизуются с полинуклеотидами по настоящему изобретению. Выделение РНК и конструирование библиотек кДНК и геномных библиотек хорошо известно средним специалистам в данной области (см., например, Аи8иЬе1, выше, или 8ашЬгоок, выше).
Способы скрининга и выделения нуклеиновых кислот.
Скрининг библиотеки кДНК или геномной библиотеки можно проводить с использованием зонда на основе последовательности полинуклеотида по настоящему изобретению, такой как последовательности, описанные в настоящем документе. Зонды можно использовать для гибридизации с последовательностями геномной ДНК или кДНК в целях выделения гомологичных генов в одном и том же или в различных организмах. Специалисты в данной области поймут, что для анализа можно использовать различные степени строгости гибридизации; и строгими могут быть либо гибридизация, либо среда. По мере того как условия гибридизации становятся более строгими для того, чтобы произошло формирование дуплекса, степень комплементарности между зондом и мишенью должна повышаться. Степень строгости можно контролировать с помощью одного или нескольких из температуры, ионной силы, рН и наличия частично денатурирующего растворителя, такого как формамид. Например, строгость гибридизации удобно изменять посредством изменения полярности раствора реагирующего вещества, например, посредством изменения концентрации формамида в диапазоне от 0 до 50%. Степень комплементарности (идентичности последовательностей), требуемая для поддающегося детекции связывания, варьирует в соответствии со строгостью среды для гибридизации и/или среды для промывания. Оптимально, степень комплементарности составляет 100%, или 70-100%, или любой диапазон или значение внутри этого диапазона. Однако следует понимать, что небольшие отклонения в последовательностях зондов и праймеров можно компенсировать снижением строгости среды для гибридизации и/или промывания.
Способы амплификации РНК или ДНК хорошо известны в данной области и их можно использовать в соответствии с настоящим изобретением без излишнего экспериментирования исходя из указаний и рекомендаций, представленных в настоящем документе.
Известные способы амплификации ДНК или РНК включают, но не ограничиваются ими, полимеразную цепную реакцию (ПЦР) и связанные с ней процессы амплификации (см., например, патенты США №№ 4683195, 4683202, 4800159, 4965188, выданные Ми1Ш е! а1., 4795699 и 4921794, выданные ТаЬог е! а1., 5142033, выданный Ιηηίδ, 5122464, выданный ^ίίδοη. е! а1., 5091310, выданный Ιηηίκ; 5066584, выданный Су11еп51еп е! а1., 4889818, выданный Се1Гапб е! а1., 4994370, выданный 8йуег е! а1., 4766067, выданный Вщ^ак, 4656134, выданный Кшдо1б) и опосредованную РНК амплификацию, в которой используют антисмысловую РНК к последовательности-мишени в качестве матрицы для синтеза двухцепочечной ДНК (патент США №№ 5130238, выданный Ма1ек е! а1., с торговым названием ΝΑ8ΒΑ), полное содержание всех из этих ссылок включено в настоящее описание в качестве ссылок (см., например, Аи8иЬе1, выше, или 8ашЬгоок, выше).
Например, технологию полимеразной цепной реакции (ПЦР) можно использовать для амплификации последовательностей полинуклеотидов по настоящему изобретению и связанных с ними генов непосредственно из библиотек геномной ДНК или кДНК. ПЦР и другие способы амплификации ίη уйго также могут быть пригодны, например, для клонирования последовательностей нуклеиновых кислот, которые кодируют подлежащие экспрессии белки, для получения нуклеиновых кислот для применения в качестве зондов в целях детекции наличия требуемой мРНК в образцах, для секвенирования нуклеиновых кислот или для других целей. Примеры способов, достаточные для указания специалистам в данной области способов амплификации ίη уйго, можно найти в Вегдег, выше, 8ашЬгоок, выше, и Аи8иЬе1, выше, а также Ми1Й8, е! а1., в патенте США № 4683202 (1987) и Ιηηίδ е! а1., РСК Рго!осок А Ошбе !о Ме!йоб§ амб Аррйсабого, Еб§., Асабеш1е Рге§8 1пс., 8аη Э1едо, СА (1990). Коммерчески доступные наборы для амплификации геномной ДНК посредством ПЦР известны в данной области; см., например, Абуайаде-ОС Семопнс РСК Κι! (С1ойесй). Кроме того, для повышения выхода длинных продуктов ПЦР можно использовать, например, белок гена 32 Т4 (Воейгтдег Матйет).
Синтетические способы конструирования нуклеиновых кислот.
Выделенные нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению также можно получать прямым химическим синтезом с помощью известных способов (см., например, Аи8иЬе1, е! а1., выше). Химический синтез, как правило, приводит к получению одноцепочечного олигонуклеотида, который может быть превращен в двухцепочечную ДНК посредством гибридизации с комплементарной последовательностью или посредством полимеризации с помощью ДНК-полимеразы с использованием одной цепи в качестве матрицы. Специалист в данной области поймет, что, несмотря на то, что химический синтез ДНК может ограничиваться последовательностями приблизительно из 100 или более оснований, более длинные последовательности можно получать посредством лигирования более коротких последовательностей.
Рекомбинантные экспрессирующие кассеты.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к рекомбинантным экспрессирующим кассетам, содержащим нуклеиновую кислоту по настоящему изобретению. Последовательность нуклеиновой кислоты по настоящему изобретению, например последовательность кДНК или геномную последовательность,
- 12 019476 кодирующую антитело по настоящему изобретению, можно использовать для конструирования рекомбинантной экспрессирующей кассеты, которую можно вводить по меньшей мере в одну требуемую клетку-хозяина. Рекомбинантная экспрессирующая кассета, как правило, содержит полинуклеотид по настоящему изобретению, функционально связанный с регуляторными последовательностями инициации транскрипции, которые регулируют трансляцию полинуклеотида в предназначенной для этого клеткехозяине. Для регуляции экспрессии нуклеиновых кислот по настоящему изобретению можно использовать как гетерологичные, так и негетерологичные (т.е. эндогенные) промоторы.
В некоторых вариантах осуществления выделенные нуклеиновые кислоты, которые служат в качестве промотора, энхансера или других элементов, можно встраивать в соответствующее положение (выше, ниже или в интроне) негетерологичной формы полинуклеотида по настоящему изобретению таким образом, чтобы активировать или подавлять экспрессию полинуклеотида по настоящему изобретению. Например, эндогенные промоторы можно изменять ίη νίνο или ίη νίίτο посредством внесения мутаций, делеций и/или замен.
Векторы и клетки-хозяева.
Также настоящее изобретение относится к векторам, которые включают выделенные молекулы нуклеиновых кислот по настоящему изобретению, к клеткам-хозяевам с рекомбинантными векторами, которые получены способами генетической инженерии, и к продукции по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 с помощью рекомбинантных способов, которые хорошо известны в данной области; см., например, 8атЬтоок, с1 а1., выше; Лн5нЬс1. с1 а1., выше, все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Полинуклеотиды необязательно можно связывать с вектором, содержащим селективный маркер, для размножения в хозяине. Как правило, плазмидный вектор вводят в преципитате, таком как преципитат с фосфатом кальция, или в комплексе с заряженным липидом. Если вектор представляет собой вирус, он может быть упакован ίη νίίτο с использованием соответствующей упаковывающей клеточной линии, а затем трансдуцирован в клетки-хозяева.
Вставка ДНК должна быть функционально связана с пригодным промотором. Экспрессирующие конструкции, кроме того, содержат участки инициации, терминации транскрипции и в транскрибируемой области участок связывания рибосомы для трансляции. Кодирующая часть зрелых транскриптов, экспрессируемых конструкциями, предпочтительно включает кодон инициации трансляции вначале и терминирующий кодон (например, ИЛЛ, ИОЛ или ИЛО), расположенный соответствующим образом на конце мРНК, подлежащей трансляции, при этом ИЛЛ и ИЛО являются предпочтительными для экспрессии в клетках млекопитающих или в эукариотических клетках.
Экспрессирующие векторы предпочтительно, но необязательно, включают по меньшей мере один селективный маркер. Такие маркеры включают, но не ограничиваются ими, например, гены устойчивости к метотрексату (МТХ), дигидрофолатредуктазе (ΌΗΕΚ, патенты США №№ 4399216; 4634665; 4656134; 4956288; 5149636; 5179017), ампициллину, неомицину (О418), микофеноловой кислоте или глутаминсинтетазе (О8, патенты США №№ 5122464; 5770359; 5827739) для культуры эукариотических клеток и гены устойчивости к тетрациклину или ампициллину для культивирования в Е. сой и других бактериях или прокариотических организмах (приведенные выше патенты включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме). Пригодные культуральные среды и условия культивирования для описанных выше клеток-хозяев известны в данной области. Пригодные векторы будут полностью очевидны специалисту в данной области. Введение векторной конструкции в клетку-хозяина можно проводить с помощью трансфекции посредством фосфата кальция, опосредуемой ΌΕΑΕ-декстраном трансфекции, опосредуемой катионными липидами трансфекции, электропорации, трансдукции, инфицирования или других известных способов. Такие способы описаны в данной области, как, например, 8атЬтоок, выше, главы 1-4 и 16-18; Аи8иЬе1, выше, главы 1, 9, 13, 15, 16.
По меньшей мере одно антитело по настоящему изобретению можно экспрессировать в модифицированной форме, такой как слитый белок, и оно может включать не только секреторные сигналы, но также и дополнительные гетерологичные функциональные участки. Например, для повышения стабильности и устойчивости в клетке-хозяине в процессе очистки или в процессе последующей обработки и хранения к Ν-концу антитела можно добавлять участок из дополнительных аминокислот, в частности из заряженных аминокислот. Также для упрощения очистки в антитело по настоящему изобретения можно встраивать пептидные группы. Такие участки можно удалять перед окончательным получением антитела или по меньшей мере одного его фрагмента. Такие способы описаны в многих стандартных лабораторных руководствах, таких как 8атЬтоок, выше, главы 17.29-17.42 и 18.1-18.74; Аи8иЬе1, выше, главы 16, 17 и 18.
Специалисты в данной области знают множество экспрессирующих систем, доступных для экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей белок по настоящему изобретению. Альтернативно, нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению можно экспрессировать в клетке-хозяине посредством запуска экспрессии (посредством манипулирования) в клетке-хозяине, которая содержит эндогенную ДНК, кодирующую антитело по настоящему изобретению. Такие способы хорошо известны в данной области, например, как описано в патентах США №№ 5580734, 5641670, 5733746 и 5733761, включенных в на
- 13 019476 стоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Иллюстративными примерами культур клеток, пригодных для продукции антител, их определенных участков или вариантов, являются клетки млекопитающих. Системы клеток млекопитающих часто находятся в виде монослоев клеток, хотя также используют суспензии клеток млекопитающих или биореакторы с клетками млекопитающих. В данной области разработан ряд пригодных линий клеток-хозяев, способных экспрессировать неизмененные гликозилированные белки, и они включают клеточные линии СО8-1 (например, АТСС СРЬ 1650), СО8-7 (например, АТСС СКЬ-1651), НЕК293, ВНК21 (например, АТСС СЯЬ-10), СНО (например, АТСС СЯЬ 1610) и В8С-1 (например, АТСС СВЬ-26), клетки Сок-7, клетки СНО, клетки 1ер С2, Р3Х63Ад8.653, 8Р2/0-Л§14. клетки 293, клетки НеЬа и сходные с ними, которые свободно доступны, например, в Лшепсап Туре СиНите СоНеейои, Мапаккак, Уа (\\л\лт.а1сс.огд). Предпочтительные клетки-хозяева включают клетки лимфоидного происхождения, такие как клетки миеломы и лимфомы. Особенно предпочтительные клетки-хозяева представляют собой клетки Р3Х63Ад8.653 (регистрационный номер АТСС СЯЬ-1580) и клетки 8Р2/0-Ад14 (регистрационный номер АТСС СКЕ-1851). В особенно предпочтительном варианте осуществления рекомбинантная клетка представляет собой клетку Р3Х63Л68.653 или клетку 8Р2/0-Ад14.
Экспрессирующие векторы для этих клеток могут включать одну или несколько из следующих последовательностей для контроля экспрессии, таких как, но не ограничиваясь ими, ориджин репликации; промотор (например, поздний или ранний промоторы 8У40, промотор СМУ (патенты США №№ 5168062; 5385839), промотор 1к Н8У, промотор рдк (фосфоглицераткиназы), промотор ЕЕ-1-альфа (патент США № 5266491), по меньшей мере один промотор иммуноглобулина человека); энхансер и/или информационные участки для процессинга, такие как участки связывания рибосом, участки сплайсинга РНК, участки полиаденилирования (например, участок присоединения поли-А большого Т-Ад 8У40) и последовательности терминаторов транскрипции; см., например, АикиЬе1 е! а1., выше, 8ашЬтоок, е! а1., выше. Другие клетки, пригодные для продукции нуклеиновых кислот или белков по настоящему изобретению, известны и/или являются доступными, например, в Атепсап Туре Си11ите Сойесйои Са!а1одие о! Се11 Ыиек апб НуЬпботак (\\л\лт.а1сс.огд) или в других известных или коммерческих источниках.
Если используют эукариотические клетки-хозяева, то, как правило, в вектор встраивают последовательности полиаденилирования или терминации транскрипции. Примером последовательности терминатора является последовательность полиаденилирования из гена бычьего гормона роста. Также в вектор могут быть включены последовательности для правильного сплайсинга транскрипта. Примером последовательности для сплайсинга является интрон УР1 из 8У40 (8ртадие, е! а1., 1. Упок, 45:773-781 (1983)). Кроме того, в вектор могут быть включены последовательности генов для контроля репликации в клеткехозяине, как известно в данной области.
Очистка антитела.
Антитело против 1Ь-23р19 можно выделять из рекомбинантных клеточных культур и очищать хорошо известными способами, включая, но не ограничиваясь ими, очистку с помощью белка А, осаждение сульфатом аммония или этанолом, экстракцию кислотой, анионную или катионообменную хроматографию, хроматографию с фосфоцеллюлозой, хроматографию гидрофобного взаимодействия, аффинную хроматографию, хроматографию с гидроксилапатитом и хроматографию с лектином. Также для очистки можно использовать высокоэффективную жидкостную хроматографию (ВЭЖХ); см., например, СоШдап, Ситгеи! Рго!осо1к ίη 1ттипо1оду, ог Сиггеп! Рго!осо1к ίη Рто!еш 8с1еисе, 1о1т \Убеу & 8оик, ΝΥ, ΝΥ, (1997-2001), например, главы 1, 4, 6, 8, 9, 10, все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Антитела по настоящему изобретению включают природные очищенные продукты, продукты процессов химического синтеза и продукты, получаемые рекомбинантными способами из эукариотического хозяина, включая, например, дрожжи, высшее растение, клетки насекомых или млекопитающих. В зависимости от хозяина, используемого в способе рекомбинантной продукции, антитело по настоящему изобретению может быть гликозилированным или может быть негликозилированным, при этом гликозилированное антитело является предпочтительным. Такие способы описаны во множестве стандартных лабораторных руководствах, таких как 8атЬтоок, выше, разделы 17.37-17.42, АикиЬе1, выше, главы 10, 12, 13, 16, 18 и 20, СоШдап, Рто!ет 8с1еисе, выше, главы 12-14, все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Антитела против 1Ь-23р19.
Антитело против 1Ь-23р19 в соответствии с настоящим изобретением включает любой белок или пептид, содержащий молекулу, которая содержит по меньшей мере часть молекулы иммуноглобулина, такую как, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере один связывающий лиганд участок (ЬВР), такой как, но не ограничиваясь ими, определяющий комплементарность участок (СЭЯ) тяжелой или легкой цепи или его связывающий лиганд участок, вариабельный участок тяжелой или легкой цепи, каркасную область (например, ЕК.1, ЕЯ2, ЕК.3, ΕΚ.4 или их фрагмент, кроме того, необязательно содержащие по меньшей мере одну замену, вставку или делецию), константный участок тяжелой или легкой цепи (например, содержащий по меньшей мере один СН1, шарнирная область 1, шарнирная область 2, шарнирная область 3, шарнирная область 4, СН2, или СН3 либо их фрагмент, кроме того, необязательно содер
- 14 019476 жащие по меньшей мере одну замену, вставку или делецию), или любая их часть, которая может быть встроена в антитело по настоящему изобретению. Антитело по этому изобретению может включать антитело любого млекопитающего или может быть получено из любого млекопитающего, такого как, но не ограничиваясь ими, человек, мышь, кролик, крыса, грызун, примат или любое их сочетание и т.п.
Выделенные антитела по настоящему изобретению содержат аминокислотные последовательности антител, описанных в настоящем документе, кодируемые любым пригодным полинуклеотидом, или любое выделенное или полученное антитело. Предпочтительно антитело человека или антигенсвязывающий фрагмент связывает 1Ь-23р19 человека и, таким образом, частично или значительно нейтрализует по меньшей мере один вид биологической активности белка. Антитело или его определенный участок или вариант, который частично или значительно нейтрализует по меньшей мере один вид биологической активности по меньшей мере одного белка или фрагмента 1Ь-23, может связывать белок или фрагмент и, таким образом, ингибировать активность, опосредуемую связыванием 1Ь-23 с рецептором для 1Ь-23 или другими зависимыми от 1Ь-23 или опосредуемыми 1Ь-23 механизмами. Как используют в настоящем документе, термин нейтрализующее антитело относится к антителу, которое может ингибировать зависимую от 1Ь-23 активность приблизительно на 20-120%, предпочтительно по меньшей мере приблизительно на 10, 20, 30, 40, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100% или более, в зависимости от способа анализа. Способность антитела против 1Ь-23р19 ингибировать зависимую от 1Ь23 активность предпочтительно оценивают посредством по меньшей мере одного пригодного способа анализа белка 1Ь-23 или рецептора для 1Ь-23, как описано в настоящем изобретении и/или как известно в данной области. Антитело человека по этому изобретению может представлять собой антитело любого класса (1дС, 1дА, 1дМ. 1дЕ, Ι§ϋ и т.д.) или изотипа и может содержать легкую цепь каппа или лямбда. В одном варианте осуществления антитело человека содержит тяжелую цепь или определенный фрагмент 1дС, например, по меньшей мере одного из изотипов 1дС1, 1дС2, 1дС3 или 1дС4 (например, γ1, γ2, γ3, γ4). Антитела этого типа можно получать с использованием трансгенной мыши или другого трансгенного не относящегося к человеку млекопитающего, содержащего трансгены по меньшей мере одной легкой цепи человека (например, 1дС, 1дА и 1дМ), как описано в настоящем документе и/или как известно в данной области. В другом варианте осуществления антитело человека против 1Ь-23р19 человека содержит тяжелую цепь 1дС1 и легкую цепь 1дС1.
По меньшей мере одно антитело по этому изобретению связывает по меньшей мере один определенный эпитоп, специфичный по меньшей мере для одного белка 1Ь-23р19, его субъединицы, фрагмента, участка или любого их сочетания. По меньшей мере один эпитоп может содержать по меньшей мере один участок для связывания антитела, который содержит по меньшей один мере один участок белка, при этом эпитоп предпочтительно состоит по меньшей мере из одного внеклеточного, растворимого, гидрофильного, внешнего или цитоплазматического участка белка. По меньшей мере один определенный эпитоп может содержать любое сочетание по меньшей мере из одной аминокислотной последовательности по меньшей мере из от 1-3 аминокислот до целого определенного участка соседних аминокислот из аминокислот 93-105 8Еф ΙΌ N0: 145 (которые содержат начальную сигнальную последовательность из 19 аминокислотных остатков для субъединицы белка р19), например аминокислотные остатки 93, 93-94, 93-95, 93-96, 97-99, 100-102 8Еф ΙΌ N0: 145 и т.д., которые включают любые участки и сочетания этих последовательностей.
Как правило, антитело человека или антигенсвязывающий фрагмент по настоящему изобретению содержит антигенсвязывающий участок, который содержит по меньшей мере один определяющий комплементарность участок (СЭЯ1, СЭВ2 и СЭЯ3) или вариант по меньшей мере одного вариабельного участка тяжелой цепи и по меньшей мере одного определяющего комплементарность участка человека (СЭЯ1, СЭВ2 и СЭЯ3) или вариант по меньшей мере одного вариабельного участка легкой цепи. Необязательно последовательности СЭЯ могут быть получены из последовательностей эмбрионального типа человека или они могут обладать близким сходством с последовательностями эмбрионального типа. Например, можно использовать СЭЯ из синтетической библиотеки, полученной из естественных мышиных СЭЯ. В качестве неограничивающего примера антитело или антигенсвязывающий участок или вариант могут содержать по меньшей мере один из СЭЯ3 тяжелых цепей, например, выбранных из 8Еф ΙΌ N0: 46-51, 52-57 или 58-79. В конкретном варианте осуществления антитело или антигенсвязывающий фрагмент может обладать антигенсвязывающим участком, который содержит по меньшей мере часть по меньшей мере одного СЭЯ тяжелой цепи (т.е. СЭЯ1, СЭЯ2 и/или СЭЯ3), обладающего аминокислотной последовательностью соответствующих СОЯ (т.е. СЭЯ1, СЭЯ2 и/или СЭЯ3) (например, СЭЯ, описанных в настоящем документе). В другом конкретном варианте осуществления антитело или антигенсвязывающий участок или вариант может обладать антигенсвязывающим участком, который содержит по меньшей мере часть по меньшей мере одного СЭЯ легкой цепи (т.е. СЭЯ1, СЭЯ2 и/или СЭЯ3) (например, СЭЯ, описанных в настоящем документе).
В предпочтительном варианте осуществления три СЭЯ тяжелой цепи и три СЭЯ легкой цепи антитела или его антигенсвязывающего фрагмента можно получать химическим связыванием совместно различных участков (например, СЭЯ, каркасной области) антитела с использованием общепринятых способов, получением и экспрессией (одной или нескольких) молекул нуклеиновой кислоты, которые кодиру
- 15 019476 ют антитело с использованием общепринятых способов технологии рекомбинантных ДНК или с использованием любого другого пригодного способа.
Антитело против 1Ь-23р19 может содержать по меньшей мере один вариабельный участок тяжелой или легкой цепи, имеющий определенную аминокислотную последовательность. Например, в предпочтигельном варианте осуществления антитело против 1Ь-23р19 содержит по меньшей мере один по меньшей мере из одного вариабельного участка тяжелой цепи, необязательно выбранного из 8Е0 ΙΌ ЫО: 80, 81, 86-92, 99, 101, 103-112, 117-127 и 147 и/или по меньшей мере одного вариабельного участка легкой цепи, необязательно выбранного из 8ЕО ΙΌ ЫО: 82-85, 93-98, 100, 102, 113-116 и 128-132. Антитела, которые связываются с 1Ь-23р19 человека и которые содержат определенный вариабельный участок тяжелой или легкой цепи, можно получать с использованием пригодных способов. Антитело, определенный участок или вариант можно экспрессировать с использованием кодирующей нуклеиновой кислоты или ее участка в пригодной клетке-хозяине.
Коды аминокислот.
Аминокислоты, которые входят в состав антител против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению, часто приводят в сокращенном виде. Обозначения аминокислот могут быть представлены посредством обозначения аминокислоты с помощью ее однобуквенного кода, ее трехбуквенного кода, названия или кодона(ов) из трех нуклеотидов, как хорошо понятно в данной области (см. Л1Ьей5. В. е! а1., Мо1еси1аг Вю1оду о£ ТЬе Се11, ТЫгб Еб., Саг1апб РиЬНзЫпд, 1пс., Ые\т Уогк, 1994). Антитело против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению может включать одну или несколько аминокислотных замен, делеций или вставок либо вследствие природных мутаций, либо вследствие воздействия человека, как описано в настоящем описании. Аминокислоты в антителе против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению, которые необходимы для функционирования, можно выявлять известными в данной области способами, такими как сайт-направленный мутагенез или сканирующий аланином мутагенез (например, Ли8иЬе1, выше, главы 8, 15, СипшпдЬат апб Ае11з, 8с1епсе 244:1081-1085 (1989)). В последнем способе в каждый остаток молекулы вносят единичные мутации с заменой на аланин. Затем полученные молекулы тестируют на биологическую активность, такую как, но не ограничиваясь этим, по меньшей мере один вид нейтрализующей 1Ь-23 активности. Участки, которые важны для связывания антитела, также можно выявлять посредством структурного анализа, такого как кристаллизация, ядерный магнитный резонанс или фотоаффинное мечение (8тйЬ, е! а1., I. Мо1. Вю1. 224:899-904 (1992) и бе V оз е! а1., Зсгёпсе 255:306-312 (1992)).
Антитела против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению могут включать, но не ограничиваться ими, по меньшей мере один участок, последовательность или сочетание, выбранные из от 5 до всех соседних аминокислот вариабельного участка последовательностей 8ЕО ΙΌ ЫО: 82-85, 93-98, 100, 102, 113-116 и 128-132 и 8ЕС) ΙΌ ЫО: 80, 81, 86-92, 99, 101, 103-112, 117-127 и 147.
Неограничивающие варианты, которые могут усиливать или поддерживать по меньшей мере один из перечисленных видов активности, включают, но не ограничиваются ими, любой из указанных выше полипептидов, далее содержащих по меньшей мере одну мутацию, соответствующую по меньшей мере одной замене в остатках, варьирующих среди описанных аминокислотных последовательностей вариантов.
Антитело против 1Ь-23р19 далее может необязательно содержать полипептид с аминокислотной последовательностью, которая отличается от последовательностей, описанных в настоящем описании (например, с одной или несколькими консервативными заменами в последовательностях, представленных в настоящем описании). Также, более конкретно, настоящее изобретение включает варианты аминокислотной последовательности вариабельного участка легкой цепи 8ЕО ΙΌ ЫО: 82-85, 93-98, 100, 102, 113-116 и 128-132 или аминокислотной последовательности вариабельного участка 8ЕО ΙΌ ЫО: 80, 81, 86-92, 99, 101, 103-112, 117-127 и 147.
Как поймут специалисты, настоящее изобретение относится по меньшей мере к одному биологически активному антителу по настоящему изобретению. Биологически активные антитела обладают специфичной активностью по меньшей мере 20, 30 или 40%, предпочтительно по меньшей мере 50, 60 или 70% и наиболее предпочтительно по меньшей мере 80, 90 или 95-1000% или более относительно активности нативного (несинтетического), эндогенного или сходного и известного антитела. Способы анализа и количественного определения показателей ферментативной активности и субстратной специфичности хорошо известны специалистам в данной области.
В другом аспекте это изобретение относится к антителам человека и антигенсвязывающим фрагментам, как описано в настоящем документе, которые модифицированы посредством ковалентного присоединения органической группы. Такая модификация может приводить к получению антитела или антигенсвязывающего фрагмента с улучшенными фармакокинетическими свойствами (например, повышенным периодом полураспада в сыворотке ш νί\Ό). Органическая группа может представлять собой линейную или разветвленную гидрофильную полимерную группу, группу жирной кислоты или группу сложного эфира жирной кислоты. В конкретных вариантах осуществления гидрофильная полимерная группа может обладать молекулярной массой, составляющей от приблизительно 800 до приблизительно 120000 Да, и может представлять собой полиалкангликоль (например, полиэтиленгликоль (РЕС), полипропиленгликоль (РРС)), углеводный полимер, полимер из аминокислот или поливинилпирролидон, и
- 16 019476 группа жирной кислоты или сложного эфира жирной кислоты может содержать от приблизительно восьми до приблизительно сорока атомов углерода.
Модифицированные антитела и антигенсвязывающие фрагменты по этому изобретению могут содержать одну или несколько органических групп, которые ковалентно связаны, прямо или непрямо, с антителом. Каждая органическая группа, которая связана с антителом или антигенсвязывающим фрагментом по этому изобретению, может независимо представлять собой гидрофильную полимерную группу, группу жирной кислоты или группу сложного эфира жирной кислоты. Как используют в настоящем документе, термин жирная кислота включает монокарбоновые кислоты и дикарбоновые кислоты. Гидрофильная полимерная группа в качестве используемого в настоящем документе термина относится к органическому полимеру, который является более растворимым в воде, чем в октане. Например, полилизин более растворим в воде, чем в октане. Таким образом, антитело, модифицированное посредством ковалентного присоединения полилизина, относится к этому изобретению. Гидрофильные полимеры, пригодные для модификации антител по этому изобретению, могут быть линейными или разветвленными и включают, например, полиалкангликоли (например, РЕС, монометоксиполиэтиленгликоль (тРЕС), РРС и т.п.), углеводы (например, декстран, целлюлозу, олигосахариды, полисахариды и т.п.), полимеры гидрофильных аминокислот (например, полилизин, полиаргинин, полиаспартат и т.п.), оксиды полиалканов (например, оксид полиэтилена, оксид полипропилена и т.п.) и поливинилпирролидон. Предпочтительно гидрофильный полимер, который модифицирует антитело по этому изобретению, обладает молекулярной массой от приблизительно 800 до приблизительно 150000 Да в качестве отдельного молекулярного элемента. Например, можно использовать РЕС5000 и РЕС20000, где подстрочный знак представляет собой среднюю молекулярную массу полимера в дальтонах. Гидрофильная полимерная группа может быть замещена от одной до шести алкильными группами, группами жирных кислот или группами сложных эфиров жирных кислот. Гидрофильные полимеры, которые замещены жирной кислотой или группой сложного эфира жирной кислоты, можно получать, используя пригодные способы. Например, полимер, содержащий аминогруппу, можно присоединять к карбоксилату жирной кислоты или сложного эфира жирной кислоты, и активированный карбоксилат (например, активированный посредством Ν,Νкарбонилдиимидазола) на жирной кислоте или сложном эфире жирной кислоты можно присоединять к гидроксильной группе на полимере.
Жирные кислоты и сложные эфиры жирных кислот, пригодные для модификации антител по этому изобретению, могут быть насыщенными или могут содержать один или несколько ненасыщенных элементов. Жирные кислоты, которые пригодны для модификации антител по этому изобретению, включают, например, н-додеканоат (С12, лаурат), н-тетрадеканоат (С14, миристат), н-октадеканоат (С18, стеарат), н-эйкозаноат (С20, арахидат), н-докозаноат (С22, бегенат), н-триаконтаноат (С30), н-тетраконтаноат (С40), цис-Д9-октадеканоат (С18, олеат), полностью цис-Д5,8,11,14-эйкозатетраеноат (С20, арахидонат), октандиовую кислоту, тетрадекандиовую кислоту, октадекандиовую кислоту, докозандиовую кислоту и т.п. Пригодные сложные эфиры жирных кислот включают моноэфиры дикарбоновых кислот, которые содержат линейную или разветвленную группу низшего алкила. Группа низшего алкила может содержать от одного до приблизительно двенадцати, предпочтительно от одного до приблизительно шести атомов углерода.
Модифицированные антитела человека и антигенсвязывающие фрагменты можно получать с использованием пригодных способов, таких как реакция с одним или несколькими модифицирующими веществами. Модифицирующее вещество в качестве используемого в настоящем документе термина относится к пригодной органической группе (например, к группе гидрофильного полимера, жирной кислоты, сложного эфира жирной кислоты), которая содержит активирующую группу. Активирующая группа представляет собой химическую группу или функциональную группу, которая в соответствующих условиях может реагировать со второй химической группой, образуя, таким образом, ковалентную связь между модифицирующим веществом и второй химической группой. Например, реагирующие с аминами группы включают электрофильные группы, такие как тозилат, мезилат, гало (хлор, бром, фтор, йод), сложные эфиры Ν-гидроксисукцинимидила (ΝΗ8) и т.п. Активирующие группы, которые могут реагировать с тиолами, включают, например, малеинимид, йодацетил, акрилолил, пиридилдисульфиды, тиол 5-тиол-2-нитробензойной кислоты (ΤΝΒ-тиол) и т.п. Альдегидную функциональную группу можно присоединять к содержащим амин или гидразид молекулам, и азидная группа может реагировать с тривалентной фосфорной группой с образованием связей фосфорамидата или фосфоримида. Пригодные способы встраивания активирующих групп в молекулы известны в данной области (см., например, Негтаивои, С.Т., Вюсои)ида1е Тес11пк|иеч Асайепис Ргевв: 8аи Б1едо, СА (1996)). Активирующая группа может быть прямо связана с органической группой (например, с группой гидрофильного полимера, жирной кислоты, сложного эфира жирной кислоты) или через линкерную группу, например двухвалентную группу С1-С12, где один или несколько атомов углерода могут быть замещены гетероатомом, таким как кислород, азот или сера. Пригодные линкерные группы включают, например, тетраэтиленгликоль, -(СН2)3-, -ΝΗ^Ό^^ΝΗ-, -(СН^-ΝΗ- и -С1Р-О-С1Р-С1Р-О-С1Р-С1Р-О-С1ΡΝΙР. Модифицирующие вещества, которые содержат линкерную группу, можно получать, например, посредством проведения реакции моно-Вос-алкилдиамина (например, моно-Вос-этилендиамин, моно-Вос-диаминогексан) с жир
- 17 019476 ной кислотой в присутствии 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (БИС) с образованием амидной связи между свободным амином и карбоксилатом жирной кислоты. Защитную группу Вос можно удалять из продукта посредством обработки трифторуксусной кислотой (ТБЛ), что делает доступным первичный амин, который можно присоединять к другому карбоксилату, как описано, или который можно подвергать реакции с малеиновым ангидридом, и полученный продукт подвергать циклизации с получением активированного малеимидо-производного жирной кислоты (см., например, Ткотркоп, е! а1., \УО 92/16221, полное описание которой включено в настоящее описании в качестве ссылки).
Модифицированные антитела по этому изобретению можно получать посредством проведения реакции антитела человека или антигенсвязывающего фрагмента с модифицирующим веществом. Например, органические группы можно присоединять к антителу не специфичным в отношении участка способом с использованием реагирующего с амином модифицирующего вещества, например сложного эфира ΝΗ8 и РЕС. Модифицированные антитела человека или антигенсвязывающие фрагменты также можно получать восстановлением дисульфидных связей (например, дисульфидных связей между цепями) антитела или антигенсвязывающего фрагмента. Восстановленное антитело или антигенсвязывающий фрагмент затем можно подвергать реакции с реагирующим с тиолом модифицирующим веществом с получением модифицированного антитела по этому изобретению. Модифицированные антитела человека и антигенсвязывающие фрагменты, содержащие органическую группу, которая связана с определенными участками антитела по настоящему изобретению, можно получать с использованием пригодных способов, таких как обратный протеолиз (ПксН е! а1., Вюсоищда!е Скет., 3:147-153 (1992), \Уег1еп е! а1., Вюсоп)ида!е Скет., 5:411-417 (1994), Китагап е! а1., Рго!ет 8е! 6 (10): 2233-2241 (1997), 1!ок е! а1., Вюогд. Скет., 24(1): 59-68 (1996), Саре11ак е! а1., Вю!ескпо1 Вюепд., 56 (4):456-463 (1997)), и способов, описанных в Негтапкоп, С.Т., Вюсоп)ида!е Тес11тс|иек, Лсакетк Ргекк: 8ап П1едо, СА (1996).
Композиции антиидиотипических антител к антителам против 1Ь-23р19.
В дополнение к моноклональным антителам против 1Ь-23р19 настоящее изобретение также относится к антиидиотипическому (анти-И) антителу, специфичному к таким антителам по этому изобретению. Анти-И-антитело представляет собой антитело, которое распознает определенные детерминанты, как правило, ассоциированные с антигенсвязывающим участком другого антитела. Анти-И можно получать посредством иммунизации животного того же вида и генетического типа (например, линии мыши) в качестве источника И-антитела, антителом или его содержащим СИЯ участком. В иммунизированном животном происходит распознавание и ответ на идиотипические детерминанты иммунизирующего антитела и продукция анти-И антитела. Анти-И антитело также можно использовать в качестве иммуногена для индуцирования иммунного ответа у другого животного, продуцирующего так называемое антианти-И антитело.
Также настоящее изобретение относится по меньшей мере к одной композиции антител против 1Ь23р19, содержащей в ней по меньшей мере одно, по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре, по меньшей мере пять, по меньшей мере шесть или более антител против 1Ь-23р19, как описано в настоящем документе и/или как известно в данной области, которые предоставлены в не встречающейся в природе композиции, смеси или форме. Такие композиции включают не встречающиеся в природе композиции, содержащие по меньшей мере один или два полноразмерных варианта, варианта с С- и/или Ν-концевой делецией, домена или фрагмента, или определенных варианта аминокислотной последовательности антитела против 1Ь-23р19, выбранной из группы, состоящей из 70-100% соседних аминокислот 8ЕО ΙΌ N0: 1-132, 146 и 147 или их определенных фрагментов, доменов или вариантов. Предпочтительные композиции антител против ГЕ-23р19 включают по меньшей мере один или два полноразмерных участка, фрагмента, домена или варианта участков, содержащих по меньшей мере одну СИЯ или ЬВР, последовательности антитела против ГЕ-23р19, описанного в настоящем документе, например, 70-100% 8ЕО ΙΌ N0: 1-132, 146 и 147, или их определенных фрагментов, доменов или вариантов. Следующие предпочтительные композиции содержат, например, 40-99% по меньшей мере одного из 70-100% из 8Е0 ΙΌ N0: 1-132, 146 и 147 и т.д., или их определенные фрагменты, домены или варианты. Такие процентные содержания композиции представляют собой процентные содержания по массе, объему, концентрации, молярности или моляльности, в качестве жидких или сухих растворов, смесей, суспензии, эмульсий, частиц, порошка или коллоидных веществ, как известно в данной области или как описано в настоящем документе.
Композиции антител, содержащие дополнительные терапевтически активные ингредиенты.
Композиции антитела по этому изобретению, кроме того, необязательно могут содержать эффективное количество по меньшей мере одного соединения или белка, выбранного по меньшей мере из одного противоинфекционного лекарственного средства, лекарственного средства для сердечно-сосудистой (СУ) системы, лекарственного средства для центральной нервной системы (ЦНС), лекарственного средства для автономной нервной системы (ΑΝ8), лекарственного средства для дыхательных путей, лекарственного средства для желудочно-кишечного (&Ι) тракта, гормонального лекарственного средства, лекарственного средства для жидкостного или электролитного баланса, гематологического лекарственного средства, противоопухолевого средства, иммуномодулирующего лекарственного средства, лекарственного средства для глаз, ушей и носа, лекарственного средства для местного применения, диетологическо
- 18 019476 го лекарственного средства или сходных с ними. Такие лекарственные средства хорошо известны в данной области, включая составы, показания, дозирование и введение для каждого представленного в настоящем описании лекарственного средства (см., например, Ыитатд 2001 НапбЬоок оГ Огидк, 2Г’1 ебШоп, Зргтдйоике Согр., Зргтдйоике, РА, 2001, Неа1(Н РгоГе551опа1'5 Эгид Сшбе 2001, еб., 811аппоп, ХУЩоп, 81апд, Ргепбсе-На11, 1пс, Иррег 8абб1е К1уег, N1, РНагтсоШегару НапбЬоок, ^е11§ е1 а1., еб., Арр1е1оп & Ьапде, 81атГогб, СТ, все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме).
Противоинфекционное лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из амебицидов или по меньшей мере одного из противопротозойных средств, противогельминтных средств, противогрибковых средств, противомалярийных, противотуберкулезных средств или по меньшей мере одного из противолепрозных средств, аминогликозидов, пенициллинов, цефалоспоринов, тетрациклинов, сульфонамидов, фторхинолонов, противовирусных средств, макролидных противоинфекционных средств и прочих противоинфекционных средств. СУ лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из инотропных средств, антиаритмических средств, антиангинальных средств, антигипертензивных средств, антилипидемических средств и прочих сердечно-сосудистых лекарственных средств.
Лекарственное средство для ЦНС может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из ненаркотических анальгетиков, или по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из жаропонижающих средств, нестероидных противовоспалительных лекарственных средств, наркотического или по меньшей мере одного из опиоидных анальгетиков, седативных гипнотических средств, противосудорожных препаратов, антидепрессантов, седативных лекарственных средств, антипсихотических лекарственных средств, стимуляторов центральной нервной системы, противопаркинсонических средств и прочих лекарственных средств для центральной нервной системы. Лекарственное средство для ΑΝ8 может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из холинергических средств (парасимпатомиметиков), антихолинергических средств, адренергических средств (симпатомиметиков), адренергических блокаторов (симпатолитиков), релаксантов скелетной мускулатуры и нервно-мышечных блокаторов. Лекарственное средство для дыхательных путей может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из антигистаминов, бронходилятаторов, отхаркивающих средств или по меньшей мере одного из средств от кашля и прочих лекарственных средств для дыхательной системы. Лекарственное средство для С1 тракта может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из антацидов или по меньшей мере одного из адсорбентов либо по меньшей мере одного из устраняющих метеоризм средств, пищеварительных ферментов, или по меньшей мере одного из растворяющих желчные камни средств, средств против диареи, слабительных средств, противорвотных средств и лекарственных средств против язвы. Гормональное лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из кортикостероидов, андрогенов, или по меньшей мере одного анаболического стероида, эстрогена или по меньшей мере одного прогестина, гонадотропина, противодиабетического лекарственного средства или по меньшей мере одного из глюкагона, гормона щитовидной железы, антагониста гормона щитовидной железы, гормона гипофиза, и лекарственного средства, подобного гормону паращитовидной железы. Лекарственное средство для жидкостного и электролитного баланса может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из диуретиков, электролитов или по меньшей мере одного замещающего раствора, подкисляющего или по меньшей мере одного подщелачивающего средства. Гематологическое лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из повышающих количество гемоглобина в крови средств, антикоагулянтов, производных крови и тромболитических ферментов. Средства против злокачественной опухоли могут представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из алкилирующих лекарственных средств, антиметаболитов, антибиотиков против злокачественной опухоли, средств против злокачественной опухоли, которые изменяют гормональный баланс, и прочих средств против злокачественной опухоли.
Иммуномодулирующее лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из иммунодепрессантов, вакцин или по меньшей мере одного токсоида, антитоксина или по меньшей мере одного антивенина, иммунной сыворотки и модификаторов биологического ответа. Лекарственные средство для глаз, ушей и носа может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из офтальмических противоинфекционных средств, офтальмических противовоспалительных средств, миотиков, мидриатиков, офтальмических сосудосуживающих средств, прочих лекарственных средств для глаз, ушей и носа. Местное лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из противоинфекционных средств, скабицидов или по меньшей мере одного педикулицида или местного кортикостероида. Диетологическое лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из витаминов, минералов или калорийных средств; см., например, содержание Мпмпд 2001 Эгид НапбЬоок, выше.
По меньшей мере одно амебицидное или противопротозойное средство может представлять собой
- 19 019476 по меньшей мере одно лекарственное средство, выбранное из атоваквона, хлороквина гидрохлорида, хлороквина фосфата, метронидазола, метронидазола гидрохлорида и пентамидина изетионата. По меньшей мере одно противогельминтное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из мебендазола, пирантела памоата и тиабендазола. По меньшей мере одно противогрибковое средство может представлять собой по меньшей мере средство, выбранное из амфотерицина В, холестерил-сульфатного комплекса амфотерицина В, липидного комплекса амфотерицина В, липосомального амфотерицина В, флуконазола, флуцитозина, микроразмерного гризеофульвина, ультрамикроразмерного гризеофульвина, итраконазола, кетоконазола, нистатина и тербинафина гидрохлорида. По меньшей мере одно противомалярийное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из хлороквина гидрохлорида, хлороквина фосфата, доксицилина, гидроксихлороквина сульфата, мефлоквина гидрохлорида, примаквина фосфата, пириметамина и пириметамина с сульфадоксином. По меньшей мере одно противотуберкулезное или противолепрозное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из клофазимина, циклосерина, дапзона, этамбутола гидрохлорида, изониазида, пиразинамида, рифабутина, рифампина, рифапентина и стрептомицина сульфата. По меньшей мере один аминогликозид может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из амикацина сульфата, гентамицина сульфата, неомицина сульфата, стрептомицина сульфата и тобрамицина сульфата. По меньшей мере один пенициллин может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из амоксициллин/клавуланата калия, амоксициллина тригидрата, ампициллина, ампициллина натрия, ампициллина тригидрата, ампициллин натрия/сульбактама натрия, клоксациллина натрия, диклоксациллина натрия, мезлоциллина натрия, нафциллина натрия, оксициллина натрия, пенициллина О бензатина, пенициллина О калия, пенициллина О прокаина, пенициллина О натрия, пенициллина V калия, пиперациллина натрия, пиперациллин натрия/тазобактама натрия, тикарциллина динатрия и тикарциллин динатрия/клавуланата калия. По меньшей мере один цефалоспорин может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из цефаклора, цефадроксила, цефазолина натрия, цефдинира, цефепима гидрохлорида, цефиксима, цефметазола натрия, цефоницида натрия, цефоперазона натрия, цефотаксима натрия, цефотетана динатрия, цефокситина натрия, цефподоксима проксетила, цефпрозила, цефтазидима, цефтибутена, цефтизоксима натрия, цефтриаксона натрия, цефуроксима аксетила, цефуроксима натрия, цефалексина гидрохлорида, цефалексина моногидрата, цефрадина и лоракабефа. По меньшей мере один тетрациклин может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из демеклоциклина гидрохлорида, доксицилина кальция, доксицилина гиклата, доксицилина гидрохлорида, доксицилина моногидрата, миноциклина гидрохлорида и тетрациклина гидрохлорида. По меньшей мере один сульфонамид может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ко-тримоксазола, сульфадиазина, сульфаметоксазола, сульфизоксазола и ацетилсульфизоксазола. По меньшей мере один фторхинолон может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из алатрофлоксацина мезилата, ципрофлоксацина, эноксацина, левофлоксацина, ломефлоксацина гидрохлорида, налидиксовой кислоты, норфлоксацина, офлоксацина, спарфлоксацина и тровафлоксацина мезилата. По меньшей мере один фторхинолон может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из алатрофлоксацина мезилата, ципрофлоксацина, эноксацина, левофлоксацина, ломефлоксацина гидрохлорида, налидиксовой кислоты, норфлоксацина, офлоксацина, спарфлоксацина и тровафлоксацина мезилата. По меньшей мере одно противовирусное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из абакавира сульфата, ацикловира натрия, амантадина гидрохлорида, ампренавира, цидофовира, делавирдина мезилата, диданозина, эфавиренца, фамицикловира, фомивирсена натрия, фоскарнета натрия, ганцикловира, индинавира сульфата, ламивудина, ламивудин/зидовудина, нельфинавира мезилата, невирапина, озельтамивира фосфата, рибавирина, римантидина гидрохлорида, ритонавира, саквинавира, саквинавира мезилата, ставудина, валацикловира гидрохлорида, зальцитабина, занамивира и зидовудина. По меньшей мере одно макролидное противоинфекционное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из азитромицина, кларитромицина, диритромицина, основания эритромицина, эритромицина эстолата, эритромицина этилсукцината, эритромицина лактобионата и эритромицина стеарата. По меньшей мере одно прочее противовоспалительное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из азтреонама, бацитрацина, хлорамфеникола натрия сукцината, клиндамицина гидрохлорида, клиндамицина пальмитата гидрохлорида, клиндамицина фосфата, имипенема и циластатина натрия, меропенема, макрокристаллов нитрофурантоина, микрокристаллов нитрофурантоина, квинупристин/дальфопристина, спектиномицина гидрохлорида, триметоприма и ванкомицина гидрохлорида (см., например, р. 24-214, ΝιίΓδίηβ 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере одно инотропное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из амринона лактата, дигоксина и милринона лактата. По меньшей мере одно противоаритмическое средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из аденозина, амиодарона гидрохлорида, атропина сульфата, бретилиума тозилата, дилтиазема гидрохлорида, дизопирамида, дизопирамида фосфата, эсмолола гидрохлорида, флецианида ацетата, ибутилида фумарата, лидокаина гидрохлорида, мексилетина гидрохлорида, морицизина гидрохлорида, фенитоина, фенитоина натрия, прокаинамида гидрохлорида, пропафенона гидрохлорида, пропранолола гидрохлори
- 20 019476 да, квинидина бисульфата, квинидина глюконата, квинидина полигалактоуроната, квинидина сульфата, соталола, токаинида гидрохлорида и верапамила гидрохлорида. По меньшей мере одно антиангинальное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из амлодипидина безилата, амила нитрита, бепридила гидрохлорида, дилтиазема гидрохлорида, изосорбита динитрата, изосорбита мононитрата, надолола, никардипина гидрохлорида, нифедипина, нитроглицерина, пропранолола гидрохлорида, верапамила и верапамила гидрохлорида. По меньшей мере одно антигипертензивное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ацебутолола гидрохлорида, амлодипина безилата, атенолола, беназеприла гидрохлорида, бетоксалола гидрохлорида, бизопролола фумарата, кандесартана цилексетила, каптоприла, картеолола гидрохлорида, карведилола, клонидина, клонидина гидрохлорида, диазоксида, дилтиазема гидрохлорида, доксазозина мезилата, эналаприлата, эналаприла малеата, эпросартана мезилата, фелодипина, фенолдопама мезилата, фосиноприла натрия, гуанабенца ацетата, гуанадрела сульфата, гуанфацина гидрохлорида, гидралазина гидрохлорида, ирбесартана, израдипина, лабеталола гидрохлорида, лизиноприла, лозартана калия, метилдопы, метилдопатгидрохлорида, метопролола сукцината, метопролола тартрата, миноксидила, моэксиприла гидрохлорида, надолола, никардипина гидрохлорида, нифедипина, низолдипина, нитропруссида натрия, пентбутолола сульфата, периндоприла эрбумина, фентоламина мезилата, пиндолола, празосина гидрохлорида, пропранолола гидрохлорида, квинаприла гидрохлорида, рамиприла, телмисартана, теразозина гидрохлорида, тимолола малеата, трандолаприла, валсартана и верапамила гидрохлорида. По меньшей мере одно антилипидемическое средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из аторвастатина кальция, церивастатина натрия, холестирамина, колестипола гидрохлорида, фенофибрата (микронизированного), флувастатина натрия, гемфиброзила, ловастатина, ниацина, правастатина натрия и симвастатина. По меньшей мере одно прочее СУ лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из абциксимаба, алпростадила, арбутамина гидрохлорида, цилостазола, клопидогрела бисульфата, дипиридамола, эптифибатида, мидодрина гидрохлорида, пентоксифиллина, тиклопидина гидрохлорида и тирофибана гидрохлорида (см., например, р. 215336, ΝιίΓκίπβ 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере один ненаркотический анальгетик или жаропонижающее средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ацетаминофена, аспирина, холина магния трисалицилата, дифлунизала и магния салицилата. По меньшей мере одно нестероидное противовоспалительное лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из целекоксиба, диклофенака калия, диклофенака натрия, этодолака, фенопрофена кальция, флубипрофена, ибупрофена, индометацина, индометацина натрия тригидрата, кетопрофена, каторолака трометамина, набуметона, напроксена, напроксена натрия, оксапрозина, пироксикама, рофекоксиба и сулиндака. По меньшей мере один наркотический или опиодный анальгетик может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из альфентанила гидрохлорида, бупренорфина гидрохлорида, буторфанола тартрата, кодеина фосфата, кодеина сульфата, фентанила цитрата, трансдермальной системы фентанила, фентанила для введения через слизистую оболочку, гидроморфона гидрохлорида, меперидина гидрохлорида, метадона гидрохлорида, морфина гидрохлорида, морфина сульфата, морфина тартрата, нальбуфина гидрохлорида, оксикодона гидрохлорида, оксикодона пектината, оксиморфона гидрохлорида, пентазоцина гидрохлорида, пентазоцина гидрохлорида и налоксона гидрохлорида, пентазоцина лактата, пропоксифена гидрохлорида, пропоксифена напсилата, ремифентанила гидрохлорида, суфентанила цитрата и трамадола гидрохлорида. По меньшей мере одно седативное гипнотическое средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из хлоралгидрата, эстазолама, флуразепама гидрохлорида, пентобарбитала, пентобарбитала натрия, фенобарбитала натрия, секобарбитала натрия, темазепама, триазолама, залеплона и золпидема тартрата. По меньшей мере одно противосудорожное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ацетазоламида натрия, карбамазепина, клонезепама, клоразепата дикалия, диазепама, дивалпрекса натрия, этосуксимида, фосфенитоина натрия, габапентина, ламотригина, сульфата магния, фенобарбитала, фенобарбитала натрия, фенитоина, фенитоина натрия, фенитоина натрия (длительного действия), примидона, тиагабина гидрохлорида, топирамата, вальпроата натрия и вальпроевой кислоты. По меньшей мере один антидепрессант может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из амитриптилина гидрохлорида, амитриптилина памоата, амоксапина, бупропиона гидрохлорида, циталопрама гидробромида, клопирамина гидрохлорида, дезипрамина гидрохлорида, доксепина гидрохлорида, флуоксетина гидрохлорида, имипрамина гидрохлорида, имипрамина памоата, миртазапина, нефадозона гидрохлорида, нортриптилина гидрохлорида, пароксетина гидрохлорида, фенелзина сульфата, сертралина гидрохлорида, транилципромина сульфата, тримипрамина малеата и венлафаксина гидрохлорида. По меньшей мере одно седативное лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из альпразолама, буспирона гидрохлорида, хлордиазепоксида, хлордиазепоксида гидрохлорида, клоразепата дикалия, диазепама, доксепина гидрохлорида, гидроксизина эмбоната, гидроксизина гидрохлорида, гидроксизина памоата, лоразепама, мефробамата, мидазолама гидрохлорида и оксазепама. По меньшей мере одно антипсихотическое лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из хлорпромазина гидрохлорида, клозапина, флуфеназина деканоата,
- 21 019476 флуфеназина энантата, флуфеназина гидрохлорида, галоперидола, галоперидола деканоата, галоперидола лактата, локсапина гидрохлорида, локсапина сукцината, мезоридазина безилата, молидона гидрохлорида, оланзапина, перфеназина, пимозида, прохлорперазина, кветиапина фумарата, рисперидона, тиоридазина гидрохлорида, тиотиксена, тиотиксена гидрохлорида и трифлуоперазина гидрохлорида. По меньшей мере один стимулятор центральной нервной системы может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из амфетамина сульфата, кофеина, декстроамфетамина сульфата, доксапрама гидрохлорида, метамфетамина гидрохлорида, метилфенидата гидрохлорида, модафинила, пемолина и фентермина гидрохлорида. По меньшей мере одно противопаркинсоническое средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из амантадина гидрохлорида, бензтропина мезилата, биперидена гидрохлорида, биперидена лактата, бромкриптина мезилата, карбидопа-леводопы, энтакапона, леводопы, перголида мезилата, прамипексола дигидрохлорида, ропинирола гидрохлорида, селегилина гидрохлорида, толкапона и тригексилфенидила гидрохлорида. По меньшей мере одно прочее средство для центральной нервной системы может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из бупропиона гидрохлорида, донепезила гидрохлорида, дроперидола, флувоксамина малеата, карбоната лития, цитрата лития, наратриптана гидрохлорида, никотина полакрилекса, трансдермальной системы никотина, пропофола, ризатриптана бензоата, сибутамина гидрохлорида моногидрата, суматриптана сукцината, такрина гидрохлорида и золмитриптана (см., например, ρ. 337-530 о£ ШШпд 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере одно холинергическое средство (например, парасимпатомиметик) может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из бетанехола хлорида, эдрофония хлорида, неостигмина бромида, неостигмина метилсульфата, физостигмина салицилата и пиридостигмина бромида. По меньшей мере одно антихолинергическое средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из атропина сульфата, дициломина гидрохлорида, гликопирролата, хиосциамина, хиосциамина сульфата, пропентелина бромида, скополамина, скополамина бутилбромида и скополамина гидробромида. По меньшей мере одно адренергическое средство (симпатомиметик) может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из добутамина гидрохлорида, дофамина гидрохлорида, метараминола битартрата, норадреналина битартрата, фенилэфрина гидрохлорида, псевдоэфедрина гидрохлорида и псевдоэфедрина сульфата. По меньшей мере один адренергический блокатор (симпатолитик) может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из дигидроэрготамина мезилата, эрготамина тартрата, метисергида малеата и пропранолола гидрохлорида. По меньшей мере один релаксант скелетной мускулатуры может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из баклофена, карисопродола, хлорзоксазона, циклобензаприна гидрохлорида, дантролена натрия, метокарбамола и тизанидина гидрохлорида. По меньшей мере один нервно-мышечный блокатор может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из атракурия безилата, цисатракурия безилата, доксакурия хлорида, мивакурия хлорида, панкурония бромида, пипекурония бромида, рапакурония бромида, рокурония бромида, сукцинила хлорида, турбокурарина хлорида и венокурония бромида (см., например, ρ. 531-84 ШШпд 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере одно антигистаминное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из бромфенирамина малеата, цетиразина гидрохлорида, хлорфенирамина малеата, клемастина фумарата, ципрогептадина гидрохлорида, дифенгидрамина гидрохлорида, фексофенадина гидрохлорида, лоратидина, прометазина гидрохлорида, прометазина теоклата и трипролидина гидрохлорида. По меньшей мере один бронходилятатор может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из альбутерола, альбутерола сульфата, аминофиллина, атропина сульфата, эфедрина сульфата, адреналина, адреналина битартрата, адреналина гидрохлорида, ипратропиума бромида, изопротеренола, изопротеренола гидрохлорида, изопротеренола сульфата, левальбутерола гидрохлорида, метапротеренола сульфата, окситрифиллина, пиребутерола ацетата, сальметерола ксинафоата, тербуталина сульфата и теофиллина. По меньшей мере одно отхаркивающее средство или средство против кашля может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из бензонатата, кодеина фосфата, кодеина сульфата, дектраметорафана гидробромида, дифенгидрамина гидрохлорида, гуайфенезина и гидроморфона гидрохлорида. По меньшей мере одно прочее лекарственное средство для дыхательных путей может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ацетилцистеина, беклометазона дипропионата, берактанта, будезонида, кальфактанта, кромолина натрия, дорназы альфа, эпопростенола натрия, флунизолида, флуказона пропионата, монтелукаста натрия, недокромила натрия, паливизумаба, триамцинолона ацетонида, зафирлукаста и зилеутона (см., например, ρ. 585-642, №г8шд 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере один антацид, адсорбент или средство, устраняющее метеоризм, может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из карбоната алюминия, гидроксида алюминия, карбоната кальция, магалдрата, гидроксида магния, оксида магния, симетикона и бикарбоната натрия. По меньшей мере один пищеварительный фермент или средство, растворяющее желчные камни, может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из панкреатина панкрелипазы и урсодиола. По меньшей одно средство против диареи может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из аттапульгита, субсалицилата висмута, кальция поликарбофила, дифеноксилата гидрохлорида и атропина сульфата, лоперамида, октреотида ацетата, настойки опиума и настойки опиума - 22 019476 хлорида и атропина сульфата, лоперамида, октреотида ацетата, настойки опиума и настойки опиума (камфорной). По меньшей мере одно слабительное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из бисакодила, кальция поликарбофила, каскара саграда, ароматического жидкого экстракта каскара саграда, жидкого экстракта каскара саграда, касторового масла, докузата кальция, докузата натрия, глицерина, лактулозы, цитрата магния, гидроксида магния, сульфата магния, метилцеллюлозы, минерального масла, полиэтиленгликоля или раствора электролита, псилиума, сенны и фосфата натрия. По меньшей мере одно противорвотное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из хлорпромазина гидрохлорида, дименгидрината, долазетрона мезилата, дронабинола, гранизетрона гидрохлорида, меклизина гидрохлорида, метоклопрамида гидрохлорида, ондансетрона гидрохлорида, перфеназина, прохлорперазина, прохлорперазина эдизилата, прохлорперазина малеата, прометазина гидрохлорида, скополамина, триэтилперазина малеата и триметобензамида гидрохлорида. По меньшей мере одно лекарственное средство против язвы может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из циметидина, циметидина гидрохлорида, фамотидина, ланзопразола, мизопростола, низатидина, омепразола, рабепрозола натрия, рантидина висмута цитрата, ранитидина гидрохлорида и сукралфата (см., например, р. 643-95, ΝιίΓδίηβ 2001 Эгид НаЫЬоок).
По меньшей мере один кортикостероид может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из бетаметазона, бетаметазона ацетата или бетаметазона натрия фосфата, бетаметазона натрия фосфата, ацетата кортизона, дексаметазона, дексаметазона ацетата, дексаметазона натрия фосфата, флудроацетата кортизона, гидрокортизона, гидроацетата кортизона, гидрокортизона ципионата, гидрокортизона натрия фосфата, гидрокортизона натрия сукцината, метилпреднизолона, метилпреднизолона ацетата, метилпреднизолона натрия сукцината, преднизолона, преднизолона ацетата, преднизолона натрия фосфата, преднизолона тебутата, преднизона, триамцинолона, триамцинолона ацетонида и триамцинолона диацетата. По меньшей мере один андроген или анаболический стероид может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из даназола, флуоксиместерона, метилтестостерона, нандролона деканоата, нандролона фенпропионата, тестостерона, тестостерона ципионата, тестостерона энантата, тестостерона пропионата и трансдермальной системы тестостерона. По меньшей мере один эстроген или прогестин может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из этерифицированных эстрогенов, эстрадиола, эстрадиола ципионата, трансдермальной системы эстрадиол/норэтиндрона ацетата, эстрадиола валерата, эстрогенов (конъюгированных), эстропипата, этинилэстрадиола, этинилэстрадиола и дезогестрела, этинилэстрадиола и этиндиола диацетата, этинилэстрадиола и дезогестрела, этинилэстрадиола и этиндиола диацетата, этинилэстрадиола и левоноргестерела, этинилэстрадиола и норэтиндрона, этинилэстрадиола и норэтиндрона ацетата, этинилэстрадиола и норгестимата, этинилэстрадиола и норгестрела, этинилэстрадиола и норэтиндрона и ацетата и фумарата железа, левоноргестерела, медроксипрогестерона ацетата, местранола и норэтиндрона, норэтиндрона, норэтиндрона ацетата, норгестрела и прогестерона. По меньшей мере один гонадотропин может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ганиреликса ацетата, гонадорелина ацетата, гистрелина ацетата и менотропинов. По меньшей мере одно противодиабетическое средство или глюкагон может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из акарбозы, хлорпропамида, глимепирида, глипизида, глюкагона, глибурида, инсулина, метформина гидрохлорида, миглитола, пиоглитазона гидрохлорида, репаглинида, розиглитазона малеата и троглитазона. По меньшей мере один гормон щитовидной железы может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из левотироксина натрия, лиотиронина натрия, лиотрикса и тироида. По меньшей мере один антагонист гормона щитовидной железы может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из метимазола, йодида калия, йодида калия (насыщенный раствор), пропилтиоурацила, радиоактивного йода (йодид натрия 131Ι) и концентрированного раствора йода. По меньшей мере один гормон гипофиза может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из кортикотропина, козинотропина, десмопрессина ацетата, леупролида ацетата, кортикотропина продленного действия, соматрема, соматропина и вазопрессина. По меньшей мере одно лекарственное средство, подобное гормону паращитовидной железы, может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из кальцифедиола, кальцитонина (человека), кальцитонина (лосося), кальцитриола, дигидротахистерола и этидроната динатрия (см., например, р. 696-796, ΝιίΓδίηβ 2001 Эгид НаЫЬоок).
По меньшей мере один диуретик может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ацетазоламида, ацетазоламида натрия, амилорида гидрохлорида, буметанида, хлорталидона, этакрината натрия, этакриновой кислоты, фуросемида, гидрохлортиазида, индапамида, маннита, метолазона, спиронолактона, торсемида, триамтерена и мочевины. По меньшей мере один раствор электролита или замещающий раствор может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ацетата кальция, карбоната кальция, хлорида кальция, цитрата кальция, глубионата кальция, глуцептата кальция, глюконата кальция, лактата кальция, фосфата кальция (двухосновного), фосфата кальция (трехосновного), декстрана (высокомолекулярного), декстрана (низкомолекулярного), гетакрахмала, хлорида магния, сульфата магния, ацетата калия, бикарбоната калия, хлорида калия, глюконата калия, раствора Рингера для инъекций, раствора Рингера для инъекций (лактатного) и хлорида натрия. По меньшей мере одно подкисляющее или подщелачивающее средство может представлять собой по меньшей мере одно
- 23 019476 средство, выбранное из бикарбоната натрия, лактата натрия и трометамина (см., например, р. 797-833, ΝιίΓδίηβ 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере одно средство для повышения уровня гемоглобина в крови может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из фумарата железа, глюконата железа, сульфата железа, сульфата железа (высушенного), декстрана железа, сорбита железа, комплекса полисахарид-железо и комплекса глюконата железа с натрием. По меньшей мере один антикоагулянт может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ардепарина натрия, дальтепарина натрия, данапароида натрия, эноксапарина натрия, гепарина кальция, гепарина натрия и варфарина натрия. По меньшей мере одно производное крови может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из альбумина 5%, альбумина 25%, антигемофильного фактора, антиингибиторного коагулянтного комплекса, антитромбина III (человека), фактора IX (человека), комплекса фактора IX и фракций белков плазмы. По меньшей мере один тромболитический фермент может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из альтеплазы, анистреплазы, ретеплазы (рекомбинантной), стрептокиназы и урокиназы (см., например, р. 834-66, Жимпд 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере одно алкилирующее лекарственное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из бисульфана, карбоплатина, кармустина, хлорамбуцила, цисплатина, циклофосфамида, ифосфамида, ломустина, мехлорэтамина гидрохлорида, мелфалана, мелфалана гидрохлорида, стрептозоцина, темозололмида и тиотепы. По меньшей мере один антиметаболит может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из капецитабина, кладрибина, цитарабина, флоксуридина, флударабина фосфата, фторурацила, гидроксимочевины, меркаптопурина, метотрексата, метотрексата натрия и тиогуанина. По меньшей мере одно антибиотическое противоопухолевое средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из блеомицина сульфата, дактиномицина, даунорубицина липосомального цитрата, даунорубицина гидрохлорида, доксорубицина гидрохлорида, липосомального доксорубицина гидрохлорида, эпирубицина гидрохлорида, идарубицина гидрохлорида, митомицина, пентостатина, пликамицина и валрубицина. По меньшей мере одно противоопухолевое средство, которое изменяет гормональный баланс, может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из анастрозола, бикалутамида, эстрамустина фосфата натрия, экземестана, флутамида, гозерелина ацетата, лектрозола, леупролида ацетата, магестрола ацетата, нилутамида, тамоксифена цитрата, тестолактона и торемифена цитрата. По меньшей мере одно прочее противоопухолевое средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из аспарагиназы, бацилл Кальметта-Герена (ВС6) (живых интравезикулярных), декарбазина, доцетаксела, этопзида, этопзида фосфата, гемцитабина гидрохлорида, иринотекана гидрохлорида, митотана, митоксантрона гидрохлорида, паклитаксела, пегаспаргазы, порфимера натрия, прокарбазина гидрохлорида, ритуксимаба, тенипозида, топотекана гидрохлорида, трастузумаба, третиноина, винбластина сульфата, винкристина сульфата и винорелбина тартрата (см., например, р. 867-963, Мнмпд 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере один иммунодепрессант может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из азатиоприна, базиликсимаба, циклоспорина, даклизумаба, лимфоцитарного иммуноглобулина, муромонаб-СЭ3, микофенолята мофетила, микофенолята мофетила гидрохлорида, сиролимуса и такролимуса. По меньшей мере одна вакцина или токсоид может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из вакцины ВСС. противохолерной вакцины, токсоидов дифтерии и столбняка (адсорбированных), адсорбированных токсоидов дифтерии и столбняка и бесклеточной вакцины против коклюша, токсоидов дифтерии и столбняка и вакцины против коклюша с цельными клетками, вакцины против НаеторЫ1ш8 Ь на основе конъюгата, вакцины против гепатита А (инактивированной), вакцины против гепатита В (рекомбинантной), трехвалентной вакцины против вируса гриппа типов А и В 19992000 (очищенный поверхностный антиген), трехвалентной вакцины против вируса гриппа типов А и В 1999-2000 (субвирион или очищенный субвирион), трехвалентной вакцины против вируса гриппа типов А и В 1999-2000 (целый вирион), вакцины против вируса японского энцефалита (инактивированной), вакцины против болезни Лайма (рекомбинантной ОкрА), вакцины против вируса кори и свинки и краснухи (живой), вакцины против вируса кори и свинки и краснухи (живой аттенуированной), вакцины против вируса кори (живой аттенуированной), вакцины на основе менингококкового полисахарида, вакцины против вируса кори (живой), вакцины против чумы, пневмококковой вакцины (поливалентный), вакцины против вируса полиомиелита (инактивированной), вакцины против вируса полиомиелита (живой, пероральной, трехвалентной), вакцины против бешенства (адсорбированной), вакцины против бешенства (диплоидные клетки человека), вакцины против вируса краснухи и свинки (живой), вакцины против вируса краснухи (живой аттенуированной), токсоида столбняка (адсорбированного), токсоида столбняка (жидкого), вакцины против тифа (пероральной), вакцины против тифа (парентеральной), вакцины на основе полисахарида против V тифа, вакцины против вируса ветряной оспы и вакцины против желтой лихорадки. По меньшей мере один антитоксин или антивенин может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из антивенина паука черной вдовы, антитоксина против змеиного яда Сго(а11бае (поливалентного), антитоксина дифтерии (эквина) и антивенина Мкгигик Γι.ι1νίι.ΐ5. По меньшей мере одна иммунная сыворотка может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из иммуноглобулина против цитомегаловируса (внутривенного), иммуноглобулина против гепатита В (чело
- 24 019476 века), внутримышечного иммуноглобулина, внутривенного иммуноглобулина, иммуноглобулина против бешенства (человека), внутривенного иммуноглобулина против респираторно-синцитиального вируса (человека), иммуноглобулина Ε1ι0 (Ό) (человека), внутривенного иммуноглобулина Вй0 (Ό) (человека), иммуноглобулина против столбняка (человека) и иммуноглобулина против уапсе11а-/ок1ег. По меньшей мере одно модифицирующее биологический ответ средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из альдеслейкина, эпоэтина-альфа, филграстима, глатирамера ацетата для инъекций, интерферона альфакон-1, интерферон альфа-2а (рекомбинантного), интерферона альфа-2Ь (рекомбинантного), интерферона бета-1а, интерферона бета-1Ь (рекомбинантного), интерферона гамма-1Ь, левамизола гидрохлорида, опрелвекима и сарграмостима (см., например, р. 964-1040, Шгктд 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере одно противоинфекционное средство для глаз может быть выбрано из бацитрацина, хлорамфеникола, ципрофлоксацина гидрохлорида, эритромицина, гентамицина сульфата, офлоксацина 0,3%, полимиксина В сульфата, сульфацетамида натрия 10%, сульфацетамида натрия 15%, сульфацетамида натрия 30%, тобрамицина и видарабина. По меньшей мере одно противовоспалительное средство для глаз может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из дексаметазона, дексаметазона натрия фосфата, диклофенака натрия 0,1%, фторметолона, флубипрофена натрия, каторолака трометамина, преднизолона ацетата (суспензии) и преднизолона натрия фосфата (раствора). По меньшей мере один миотик может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ацетилхолина хлорида, карбахола (внутриглазного), карбахола (местного), экотиофата иодида, пилокарпина, пилокарпина гидрохлорида и пилокарпина нитрата. По меньшей мере один мидриатик может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из атропина сульфата, циклопентолята гидрохлорида, адреналина гидрохлорида, эпинефрила бората, гоматропина гидробромида, фенилэфрина гидрохлорида, скополамина гидробромида и тропикамида. По меньшей мере одно сосудосуживающее средство для глаз может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из нафазолина гидрохлорида, оксиметазолина гидрохлорида и тетрагидрозолина гидрохлорида. По меньшей мере одно прочее средство для глаз может представлять по меньшей мере одно собой средство, выбранное из апраклонидина гидрохлорида, бетоксалола гидрохлорида, бримонидина тартрата, картеолола гидрохлорида, дипивефрина гидрохлорида, дорзоламида гидрохлорида, эмедастина дифумарата, флуоресцеина натрия, кетотифена фумарата, латанопроста, левобунолола гидрохлорида, метипранолола гидрохлорида, хлорида натрия (гипертонического) и тимолола малеата. По меньшей мере одно средство для ушей может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из борной кислоты, пероксида карбамида, хлорамфеникола и конденсата олеата триэтаноламина полипептида. По меньшей мере одно лекарственное средство для носа может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из беклометазона дипропионата, будезонида, эфедрина сульфата, адреналина гидрохлорида, флунизолида, флуказона пропионата, нафазолина гидрохлорида, оксиметазолина гидрохлорида, фенилэфрина гидрохлорида, тетрагидрозолина гидрохлорида, триамцинолона ацетонида и ксилометазолина гидрохлорида (см., например, р. 1041-97, Νιπκίηβ 2001 Эгид НапбЬоок).
По меньшей мере одно противоинфекционное средство для местного применения может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из ацикловира, амфотерицина В, крема с азелаиновой кислотой, бацитрацина, бутоконазола нитрата, клиндамицина фосфата, клотримазола, эконазола нитрата, эритромицина, гентамицина сульфата, кетоконазола, мафенида ацетата, метронидазола (для местного применения), миконазола нитрата, мупироцина, нафтифина гидрохлорида, неомицина сульфата, нитрофуразона, нистатина, сульфадиазина серебра, тербинафина гидрохлорида, терконазола, тетрациклина гидрохлорида, тиоконазола и толнафтата. По меньшей мере один скабицид или педикулицид может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из кротамитона, линдана, перметрина и пиретринов. По меньшей мере один кортикостероид для местного применения может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из бетаметазона дипропионата, бетаметазона валерата, клобетазола пропионата, дезонида, дезоксиметазона, дексаметазона, дексаметазона натрия фосфата, дифлоразона диацетата, флуоцинолона ацетонида, флуоционида, флурандренолида, флуказона пропионата, галционида, гидрокортизона, гидроацетата кортизона, гидрокортизона бутирата, гидрокортизона валерата, мометазона фуроата и триамцинолона ацетонида (см., например, р. 1098-1136, Шгктд 2001 Эгид НаЫЬоок).
По меньшей мере один витамин или минерал может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из витамина А, комплекса витаминов В, цианкобаламина, фолиевой кислоты, гидроксикобаламина, лейковорина кальция, ниацина, ниацинамида, пиридоксина гидрохлорида, рибофлавина, тиамина гидрохлорида, витамина С, витамина Ό, хлоркальциферола, эргокальциферола, аналога витамина Ό, доксеркальциферола, парикальцитола, витамина Е, аналога витамина К, фитонадиона, фторида натрия, фторида натрия (местного), микроэлементов, хрома, меди, йода, марганца, селена и цинка. По меньшей мере одно калорийное средство может представлять собой по меньшей мере одно средство, выбранное из аминокислот для инфузий (кристаллических), аминокислот для инфузий в декстрозе, аминокислот для инфузий с электролитами, аминокислот для инфузий с электролитами в декстрозе, аминокислот для инфузий при печеночной недостаточности, аминокислот для инфузий при высоком метаболи
- 25 019476 ческом стрессе, аминокислот для инфузий при почечной недостаточности, декстрозы, жировых эмульсий и триглицеридов средней цепи (см., например, р. 1137-63, Шгкюд 2001 Эгид НамбЬоок).
Композиции антител против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению, кроме того, могут содержать по меньшей мере одно из любых пригодных и эффективных количеств композиции или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19, которое приводят в контакт с клеткой, тканью, органом, животным или пациентом, или вводят в клетку, ткань, орган, животному или пациенту, нуждающемуся в таком модулировании, воздействии или терапии, кроме того, необязательно содержащей по меньшей мере одно средство, выбранное из антагониста ΤΝΡ (например, но не ограничиваясь ими, химического или белкового антагониста ΤΝΡ, моноклонального или поликлонального антитела против ΤΝΡ или фрагмента, растворимого рецептора для ΤΝΡ (например, р55, р70 или р85) или фрагмента, их слитых полипептидов или низкомолекулярного антагониста ΤΝΡ, например связывающего ΤΝΡ белка I или II (ΤΒ6-Ι или ΤΒР-II), нерелимомаба, инфликсимаба, энтерацепта, СЭР-571, СЭР-870, афелимомаба, ленерцепта и т.п.), противоревматического средства (например, метотрексата, ауранфина, ауротиоглюкозы, азатиоприна, этанерцепта, золота натрия тиомалата, гидроксихлороквина сульфата, лефлуномида, сульфасалзина), мышечного релаксанта, наркотического средства, нестероидного противовоспалительного лекарственного средства (Ы8А1Э), обезболивающего средства, анестетика, седативного средства, местного анестетика, нервно-мышечного блокатора, противомикробного средства (например, аминогликозида, противогрибкового средства, противопаразитарного средства, противовирусного средства, карбапенема, цефалоспорина, фторхинолона, макролида, пенициллина, сульфонамида, тетрациклина, другого противомикробного средства), противопсориазного средства, кортикостероида, анаболического стероида, средства против диабета, минерала, питательного вещества, средства для щитовидной железы, витамина, связанного с кальцием гормона, средства против диареи, средства против кашля, противорвотного средства, средства против язвы, слабительного средства, антикоагулянта, эритропоэтина (например, эпоэтина альфа), филграстима (например, О-С8Р, ^иродем), сарграмостима (ОМ-С8Р, йеикте), средства для иммунизации, иммуноглобулина, иммунодепрессанта (например, базиликсимаба, циклоспорина, даклизумаба), гормона роста, заместительного гормонального лекарственного средства, модулятора эстрогеновых рецепторов, мидриатика, средства против циклоплегии, алкилирующего средства, антиметаболита, ингибитора митоза, радиофармацевтического средства, антидепрессанта, средства против мании, антипсихотического средства, анксиолитика, гипнотического средства, симпатомиметика, стимулирующего средства, донепезила, такрина, лекарственного средства от астмы, бета-агониста, стероида для ингаляции, ингибитора лейкотриена, метилксантина, кромолина, адреналина или аналога, дорназы альфа (пульмозим), цитокина или антагониста цитокина. Неограничивающие примеры таких цитокинов включают, но не ограничиваются ими, любой из от 1Й-1 до 1Й-23 (например, 1Й-1, 1Ь-2 и т.д.). Пригодные дозы хорошо известны в данной области; см., например, \Уе11к е! а1., ебк., Рйагтасо!йегару Наг1бЬоок, 2п6 Е6Пюп, Арр1еЮг1 аг1б йа^е, 8!атГогб, СТ (2000); РЭК Рйагтасорое1а, Τа^аксοη Роске! Рйагтасорое1а 2000, Эе1ихе Е6Пюп, Τа^аκсοη РиЬШйтд, йота йтба, СА (2000), все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Такие противоопухолевые или противоинфекционные средства также могут включать молекулы токсинов, которые ассоциированы, связаны, которые совместно составляют или совместно вводят по меньшей мере с одним антителом по настоящему изобретению. Действие токсина необязательно может быть направлено на селективное уничтожение патологической клетки или ткани. Патологическая клетка может представлять собой злокачественную или другую клетку. Такие токсины могут представлять собой, но не ограничиваться ими, очищенный или рекомбинантный токсин или фрагмент токсина, содержащий по меньшей мере один функциональный цитотоксический домен токсина, например, выбранного по меньшей мере из одного из рицина, дифтерийного токсина, токсина змеиного яда или бактериального токсина. Термин токсин также включает как эндотоксины, так и экзотоксины, продуцируемые природными, мутантными или рекомбинантными бактериями или вирусами, которые могут вызывать любое патологическое состояние у человека и других млекопитающих, в том числе токсиновый шок, который может привести к смерти. Такие токсины могут включать, но не ограничиваться ими, термолабильный (Й-Τ) энтеротоксин энтеротоксигенных Е. со11, термостабильный энтеротоксин (8Τ), цитотоксин 8Ыде11а, энтеротоксины Аегопют-ж, токсин-1 синдрома токсического шока (Τ88Τ-1), стафилококковый энтеротоксин А (8ЕА), В (8ЕВ) или С (8ЕС), стрептококковые энтеротоксины и т.п. Такие бактерии включают, но не ограничиваются ими, штаммы или виды энтеротоксигенных Е. со11 (ЕΤЕС), энтерогеморрагических Е. со11 (например, штаммы серотипа 0157:Н7), штаммы 8!арйу1ососсик (например, 8!арйу1ососсик аигеик, 8!арйу1ососсик руодегек), штаммы 8Ыде11а (например, 8Ыде11а букегИепае, 81пде11а йех^й, 8Ыде11а Ьоуби и 8Ыде11а когте!), штаммы За^огеИа (например, За^огеНа 1ур1и, За^огеИа сйо1ега-кшк, За^огеИа ег1!егй1б1к), штаммы С1ок!пбшт (например, С1ок!йбшт регГппдещ, С1ок!йбшт бгйсйе, С1ок!пбшт Ьо!и1тит), штаммы СатрЫоЬас!ег (например, СатрЫоЬас!ег ,ίοίυηί, Сатрй1оЬас!ег Ге!ик), штаммы Не1юЬас!ег (например, Не1юЬас!ег ру1оп), штаммы Аегототак (например, Аегототак коЬпа, Аеготог1ак йубгорЫ1а, Аеготог1ак сау1ае), Р1е1котог1ак кЫде11о1бек, Уегкта еη!е^οсο1^!^са, штаммы У1Ьгюк (например, VIЬпок сйо1егае, ^Ьйок рагайето1у!юик), штаммы К1еЬк1е11а, Ркеибοтοηак аегидтока и 8!гер!ососа; см., например, 81ет, еб., ЮТЕКЫАй МЕЭ1Сй№Е, 3гб еб., р. 1-13, йй!1е, Вго\\п зп6 Со., Вок!оп (1990), Еузпк е!
- 26 019476 а1., ебк., Вас!епа1 1п!ес!юпк о! Нитапк: Ер1бетю1оду апб Соп!го1, 2б. Еб., р. 239-254, Р1епит Меб1са1 Воок Со., №\ν Уогк (1991), Мапбе11 е! а1., Ргтар1ек апб Ргасбсе о! 1п!ес!юик О1кеакек, 3б. Еб., С1шгс1п11 ЬМпдк!опе, №\ν Уогк (1990), Вегко\у е! а1., ебк., Т11е Мегск Мапиа1, 1611 ебШоп, Мегск и Со., Яактау, N1, 1992, \Уооб е! а1., РЕМ8 МюгоЬю1оду 1ттипо1оду, 76:121-134 (1991), Маггаск е! а1., 8с1епсе, 248:705-711 (1990), содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Соединения, композиции или сочетания антител против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению, кроме того, могут содержать по меньшей мере одно из любых пригодных дополнительных веществ, таких как, но не ограничиваясь ими, разбавитель, связующее вещество, стабилизатор, буферы, соли, липофильные растворители, консервант, адъювант или сходные с ними. Фармацевтически приемлемые дополнительные вещества являются предпочтительными. Неограничивающие примеры и способы получения таких стерильных растворов хорошо известны в данной области, такие как, но не ограничиваясь этим, Сеппаго, Еб., Яет1пд!оп'к РЬагтасеийса1 8с1епсек, 18411 ЕбШоп, Маск РиЬНкЫпд Со. (Еак!оп, РА) 1990. Обычно можно выбирать фармацевтически приемлемые носители, которые являются приемлемыми для способа введения, растворимости и/или стабильности композиции антитела против 1Ь-23р19, фрагмента или варианта, как хорошо известно в данной области или как описано в настоящем описании.
Фармацевтические эксципиенты и добавки, пригодные для композиции по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются ими, белки, пептиды, аминокислоты, липиды и углеводы (например, сахара, в том числе моносахариды, ди-, три-, тетра- и олигосахариды; производные сахаров, такие как альдиты, альдоновые кислоты, этерифицированные сахара и т.п.; и полисахариды или полимеры сахаров), которые могут быть представлены отдельно или в сочетании, составляя отдельно или в сочетании 1-99,99% по массе или по объему. Иллюстративные белковые эксципиенты включают сывороточный альбумин, такой как сывороточный альбумин человека (Н8А), рекомбинантный альбумин человека (гНА), желатин, казеин и т.п. Репрезентативные компоненты аминокислот/антител, которые также могут функционировать с буферной емкостью, включают аланин, глицин, аргинин, бетаин, гистидин, глутаминовую кислоту, аспарагиновую кислоту, цистеин, лизин, лейцин, изолейцин, валин, метионин, фенилаланин, аспартам и т.п. Одной предпочтительной аминокислотой является глицин.
Углеводные эксципиенты, пригодные для применения в соответствии с этим изобретением, включают, например, моносахариды, такие как фруктоза, мальтоза, галактоза, глюкоза, Ό-манноза, сорбоза и т.п.; дисахариды, такие как лактоза, сахароза, трегалоза, целлобиоза и т.п.; полисахариды, такие как рафиноза, мелизитоза, мальтодекстрины, декстраны, крахмалы и т.п.; и альдиты, такие как маннит, ксилит, мальтит, лактит, ксилит сорбит (глюцит), миоинозитол и т.п. Предпочтительные углеводные эксципиенты для применения в соответствии с настоящим изобретением представляют собой маннит, трегалозу и рафинозу.
Композиции антител против 1Ь-23р19 также могут включать буфер или изменяющее рН вещество; как правило, буфер представляет собой соль, полученную из органической кислоты или основания. Репрезентативные буферы включают соли органических кислот, такие как соли лимонной кислоты, аскорбиновой кислоты, глюконовой кислоты, угольной кислоты, винно-каменной кислоты, янтарной кислоты, уксусной кислоты или фталевой кислоты; Тпк, гидрохлорид трометамина или фосфатные буферы. Предпочтительными буферами для применения в композициях по настоящему изобретению являются соли органических кислот, такие как цитрат.
Кроме того, композиции антител против 1Ь-23р19 по этому изобретению могут включать полимерные эксципиенты/добавки, такие как поливинилпирролидоны, фиколлы (полимерный сахар), декстраты (например, циклодекстрины, такие как 2-гидроксипропил-в-циклодекстрин), полиэтиленгликоли, вкусовые добавки, противомикробные средства, подсластители, антиоксиданты, антистатические средства, поверхностно-активные вещества (например, полисорбаты, такие как Т\VЕЕN 20 и Т\VЕЕN 80), липиды (например, фосфолипиды, жирные кислоты), стероиды (например, холестерин) и хелатирующие агенты (например, ЭДТА).
Эти и дополнительные известные фармацевтические эксципиенты и/или добавки, пригодные для применения в композициях антител против 1Ь-23р19, участков или вариантов в соответствии с этим изобретением, известны в данной области, например, как приведено в Яеттд1оп: Т1е 8с1епсе & Ргасбсе о! РЬагтасу, 19411 еб., ^1Шатк & ^1Шатк, (1995) и в РЬукШап'к Эекк ЯеГегепсе, 52пб еб., Мебюа1 Есопот1ск, Моп!уа1е, N1 (1998), описания которых полностью включены в настоящее описание в качестве ссылок. Предпочтительные вещества носителей или эксципиентов представляют собой углеводы (например, сахариды и альдиты) и буферы (например, цитрат) или полимерные вещества. Иллюстративная молекула носителя представляет собой мукополисахарид, гиалуроновую кислоту, которые могут быть пригодны для внутрисуставной доставки.
Составы.
Как указано выше, это изобретение относится к стабильным составам, которые предпочтительно содержат фосфатный буфер с физиологическим раствором или выбранной солью, а также к поддающимся хранению растворам и составам, содержащим консервант, а также к поддающимся хранению составам для многократного применения, пригодным для фармацевтического или ветеринарного применения, содержащим по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 в фармацевтически приемлемом составе.
- 27 019476
Поддающиеся хранению составы содержат по меньшей мере один известный консервант или необязательно выбранный из группы, состоящей по меньшей мере из одного из фенола, м-крезола, п-крезола, окрезола, хлоркрезола, бензилового спирта, нитрита фенилртути, феноксиэтанола, формальдегида, хлорбутанола, хлорида магния (например, гексагидрата), алкилпарабена (метил, этил, пропил, бутил и т.п.), хлорида бензалкония, хлорида бензетония, дегидроацетата натрия и тимеросала или их смесей в водном разбавителе. Можно использовать любую пригодную концентрацию или смесь, которые известны в данной области, такие как 0,0015%, или любой диапазон, значение или часть в этой области. Неограничивающие примеры включают отсутствие консерванта, приблизительно 0,1-2% м-крезол (например, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,9, 1,0%), приблизительно 0,1-3 бензиловый спирт (например, 0,5, 0,9, 1,1, 1,5, 1,9, 2,0, 2,5%), приблизительно 0,001-0,5% тимеросал (например, 0,005-1,0%), приблизительно 0,001-2,0% фенол (например, 0,05, 0,25, 0,28, 0,5, 0,9, 1,0%), 0,0005-1,0% алкилпарабен(ы) (например, 0,00075, 0,0009, 0,001, 0,002, 0,005, 0,0075, 0,009, 0,01, 0,02, 0,05, 0,075, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,5, 0,75, 0,9, 1,0%) и т.п.
Как указано выше, это изобретение относится к изделию, содержащему упаковочный материал и по меньшей мере один флакон, содержащий раствор по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 с предусмотренными буферами и/или консервантами, необязательно в водном разбавителе, где указанный упаковочный материал содержит этикетку, на которой указано, что такой раствор можно хранить в течение периода времени 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, 18, 20, 24, 30, 36, 40, 48, 54, 60, 66, 72 ч или более. Кроме того, это изобретение относится к изделию, содержащему упаковочный материал, первый флакон, содержащий по меньшей мере одно лиофилизированное антитело против 1Ь-23р19, и второй флакон, содержащий водный разбавитель, состоящий из предусмотренного буфера или консерванта, где указанный упаковочный материал содержит этикетку, на которой приведена инструкция для пациента о том, что необходимо разбавить по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 в водном разбавителе с получением раствора, который можно хранить в течение периода времени 24 ч или более.
По меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19, используемое в соответствии с настоящим изобретением, можно получать рекомбинантными способами, в том числе из клетки млекопитающего или трансгенных препаратов, или его можно очищать из других биологических источников, как описано в настоящем описании или как известно в данной области.
Количество по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 в продукте по настоящему изобретению включает количества, которые после разбавления приводят в случае влажной/сухой системы к концентрациям от приблизительно 1,0 до приблизительно 1000 мг/мл, хотя более низкие и более высокие концентрации являются пригодными и они зависят от предполагаемого носителя для доставки, например составы раствора различаются для способа с трансдермальным пластырем, легочного способа, способа доставки через слизистые или осмотического способа либо способа с микродозатором.
Предпочтительно водный разбавитель, кроме того, необязательно содержит фармацевтически приемлемый консервант. Предпочтительные консерванты включают консерванты, выбранные из группы, состоящей из фенола, м-крезола, п-крезола, о-крезола, хлоркрезола, бензилового спирта, алкилпарабена (метил, этил, пропил, бутил и т.п.), хлорида бензалкония, хлорида бензетония, дегидроацетата натрия и тимеросала или их смесей. Концентрация консерванта, используемая в составе, представляет собой концентрацию, достаточную для достижения противомикробного эффекта. Такие концентрации зависят от выбранного консерванта, и их легко определит квалифицированный специалист.
В разбавитель необязательно и предпочтительно можно добавлять другие эксципиенты, например изотонические вещества, буферы, антиоксиданты и усилители консервантов. Изотоническое вещество, такое как глицерин, широко используют в известных концентрациях. Физиологически допустимый буфер предпочтительно добавляют для обеспечения повышенного контроля рН. Составы могут охватывать широкий диапазон значений рН, такой как от приблизительно рН 4 до приблизительно рН 10, предпочтительный диапазон составляет от приблизительно рН 5 до приблизительно рН 9 и наиболее предпочтительный диапазон составляет от приблизительно рН 6,0 до приблизительно рН 8,0. Предпочтительно составы по настоящему изобретению обладают рН между приблизительно 6,8 и приблизительно 7,8. Предпочтительные буферы включают фосфатные буферы, наиболее предпочтительно фосфат натрия, в частности фосфатно-солевой буфер (РВ8).
В составы или композиции можно добавлять другие добавки, такие как фармацевтически приемлемые солюбилизаторы, такие как Т\гееп 20 (полиоксиэтилен (20) монолаурат сорбитана), Т\гееп 40 (полиоксиэтилен (20) монопальмитат сорбитана), Т\гееп 80 (полиоксиэтилен (20) моноолеат сорбитана), Р1игошс Р68 (блок-сополимеры полиоксиэтилена и полиоксипропилена) и РЕС (полиэтиленгликоль) или неионные поверхностно-активные вещества, такие как полисорбат 20 или 80 или полоксамер 184 или 188, полиолы Р1игои1с®, другие блок-сополимеры и хелатирующие агенты, такие как ЕИТА и ЕСТА, для снижения агрегации. Эти добавки особенно пригодны в случае, когда для введения состава используют дозатор или пластиковый контейнер. Наличие фармацевтически приемлемого поверхностно-активного вещества снижает склонность белка к агрегации.
Составы по настоящему изобретению можно получать посредством процесса, который включает смешивание по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 и консерванта, выбранного из группы, состоящей из фенола, м-крезола, п-крезола, о-крезола, хлоркрезола, бензилового спирта, алкилпарабена,
- 28 019476 (метил, этил, пропил, бутил и т.п.), хлорида бензалкония, хлорида бензетония, дегидроацетата натрия и тимеросала или их смесей в водном разбавителе. Смешивание по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 и консерванта в водном разбавителе проводят с использованием общепринятых способов растворения и смешивания. Для получения пригодного состава, например, рассчитанное количество по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 в буферном растворе смешивают с требуемым консервантом в буферном растворе в количествах, достаточных для получения требуемой концентрации белка и консерванта. Варианты этого способа будут понятны среднему специалисту в данной области. Например, порядок добавления компонентов, использование дополнительных добавок, температура и рН, при которых получают состав, представляют собой факторы, которые можно оптимизировать для используемой концентрации и способа введения.
Заявленные составы могут быть предоставлены пациентам в виде прозрачных растворов или в виде двух флаконов, содержащих флакон по меньшей мере с одним лиофилизированным антителом против 1Ь-23р19, которое разбавляют находящейся во втором флаконе водой, консервантом и/или эксципиентами, предпочтительно фосфатным буфером и/или физиологическим раствором и выбранной солью, в водном разбавителе. Как флакон с единым раствором, так и два флакона, в случае которых требуется разбавление, можно повторно использовать несколько раз и их может быть достаточно для одного или нескольких курсов лечения пациента, таким образом они могут обеспечить более удобную схему лечения, чем доступные в настоящее время средства.
Заявленные изделия по настоящему изобретению пригодны для введения в течение периода времени, находящегося в диапазоне от немедленного введения до 24 ч или более. Таким образом, заявленные изделия по настоящему изобретению обладают значительными преимуществами для пациента. Составы по этому изобретению необязательно могут безопасно храниться при температурах от приблизительно 2 до приблизительно 40°С и сохранять биологическую активность белка в течение длительных периодов времени, что таким образом позволяет указывать на этикетке на упаковке, что раствор можно хранить и/или использовать в течение периода времени 6, 12, 18, 24, 36, 48, 72 или 96 ч или более. Если используют поддающийся хранению разбавитель, то такая этикетка может включать указание о применении в течение вплоть до 1-12 месяцев, полугода, полутора и/или двух лет.
Растворы по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 по этому изобретению можно получать посредством процесса, который включает смешивание по меньшей мере одного антитела с водным разбавителем. Смешивание проводят с использованием общепринятых способов растворения и смешивания. Для получения пригодного разбавителя, например, рассчитанное количество по меньшей мере одного антитела в воде или буфере смешивают в количествах, достаточных для получения белка и необязательно консерванта или буфера в требуемых концентрациях. Варианты этого способа будут понятны среднему специалисту в данной области. Например, порядок добавления компонентов, использование дополнительных добавок, температура и рН, при которых получают состав, представляют собой факторы, которые можно оптимизировать для используемой концентрации и способа введения.
Заявленные продукты могут быть предоставлены пациентам в виде прозрачных растворов или в виде двух флаконов, содержащих флакон по меньшей мере с одним лиофилизированным антителом против 1Ь-23р19, которое разбавляют находящимся во втором флаконе водным разбавителем. Как флакон с единым раствором, так и два флакона, в случае которых требуется разбавление, можно повторно использовать несколько раз и их может быть достаточно для одного или нескольких курсов лечения пациента, таким образом они могут обеспечить более удобную схему лечения, чем доступные в настоящее время схемы.
Заявленные продукты могут быть предоставлены не непосредственно пациентам посредством снабжения аптек, клиник или других таких институтов и учреждений прозрачными растворами или двумя флаконами, содержащими по меньшей мере одно лиофилизированное антитело против 1Ь-23р19, которое разбавляют водным разбавителем, находящимся во втором флаконе. Объем прозрачного раствора в этом случае может составлять вплоть до одного литра или даже более, что предусматривает большой резервуар, из которого меньшие порции по меньшей мере одного раствора антитела можно извлекать один или несколько раз для переноса в меньшие флаконы и распространять через аптеки или клиники среди их потребителей и/или пациентов.
Общепризнанные устройства, содержащие системы с одним флаконом, включают устройство для инъекций карандашного типа ΒΌ Репз, ΒΌ Аи1о|ес1ог®, Нита|ес1® NονοΡеη®, В-Э®Реп, Аи1оРеп® и ОрбРеп®, ОепобортРеп®, Оепобопогт Реп®, Нита!го Реп®, Яесо-Реп®, ЯоГегоп Реп®, ВкдесЮг®, 1)ес1®, Л-Пр №еб1е-Ргее 1п|ес(ог®, 1п1га|ес1®, МебЫес!®, например, которые изготовлены и разработаны ВесЮп Э|скеп5еп (РгапкНп Ьакез, N1, \\л\л\\Ьес1опб1скеп5оп.сот), Окебошс (ВигдбогГ, ЕлуН/егк-тб, \\л\л\\б15е1гошс.сот; Вю^еск, Рогбапб, Огедоп (\\л\л\\Ыо|ес1.сот); №-Июпа1 Мебюа1 РгобисЦ Ае^Юп Меб1са1 (РекегЬогоидк, ИК, ААА.Ае51оп-теб1са1.сот), МебЫеск Согр (МюпеароШ, ΜΝ, \\л\л\\теб0ес1.сот) и сходные пригодные устройства. Общепринятые устройства, содержащие систему с двумя флаконами, включают системы для инъекций карандашного типа для разбавления лиофилизированного лекарственного средства в резервуаре для доставки разбавленного раствора, такие как НитакгоРеп®. Примеры дру
- 29 019476 гих пригодных устройств включают предварительно заполненные шприцы, автоматические устройства для инъекций, безыгольные устройства для инъекций и безыгольные устройства для внутривенных инфузий.
Продукты, заявленные в настоящем изобретении, включают упаковочный материал. Упаковочный материал предусматривает в дополнение к информации, которую требуют контролирующие органы, условия, в которых продукт можно использовать. Упаковочный материал по настоящему изобретению предусматривает инструкции для пациента о том, что необходимо разбавить по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 в водном разбавителе с получением раствора и использовать раствор в течение периода времени 2-24 ч или более для двух флаконов с жидким/сухим продуктом. В случае одного флакона с продуктом в виде раствора на этикетке указывают, что такой раствор можно использовать в течение периода времени 2-24 ч или выше. Заявленные в настоящем изобретении продукты пригодны для фармацевтического применения продукта у человека.
Составы по настоящему изобретению можно получать с помощью процесса, который включает смешивание по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 и выбранного буфера, предпочтительно фосфатного буфера, содержащего физиологический раствор или выбранную соль. Смешивание по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 и буфера в водном разбавителе проводят с использованием общепринятых способов растворения и смешивания. Для получения пригодного состава, например, рассчитанное количество по меньшей мере одного антитела в воде или буфере объединяют с требуемым буферным веществом в воде в количествах, достаточных для получения белка и буфера в требуемых концентрациях. Варианты этого способа будут понятны среднему специалисту в данной области. Например, порядок добавления компонентов, использование дополнительных добавок, температура и рН, при которых получают состав, представляют собой факторы, которые можно оптимизировать для используемой концентрации и способа введения.
Заявленные стабильные или поддающиеся хранению составы могут быть предоставлены пациентам в виде прозрачных растворов или в виде двух флаконов, содержащих флакон по меньшей мере с одним лиофилизированным антителом против 1Ь-23р19, которое разбавляют находящимся во втором флаконе консервантом или буфером и эксципиентами в водном разбавителе. Как флакон с единым раствором, так и два флакона, для которых требуется разбавление, можно повторно использовать несколько раз и их может быть достаточно для одного или нескольких курсов лечения пациента, таким образом они могут обеспечить более удобную схему лечения, чем доступные в настоящее время схемы.
Другие составы или способы для стабилизации антитела против 1Ь-23р19 могут приводить к средству, отличному от прозрачного раствора лиофилизированного порошка, содержащего антитело. Среди непрозрачных растворов находятся составы, содержащие суспензии твердых частиц, где указанные твердые частицы представляют собой композицию, содержащую антитело против 1Ь-23р19, в виде структуры с непостоянными размерами и широко известной как микросфера, микрочастица, наночастица или липосома. Такие относительно гомогенные, по существу, сферические составы в виде твердых частиц, содержащие активное вещество, можно получать контактированием водной фазы, содержащей активное вещество, и полимера и неводной фазы с последующим выпариванием неводной фазы для обеспечения коалесценции частиц из водной фазы, как указано в И.8. 4589330. Пористые микрочастицы можно получать с использованием первой фазы, содержащей активное вещество, и полимера, диспергированного в однородном растворителе, и с удалением указанного растворителя из суспензии посредством лиофилизации или разбавления-экстракции-осаждения, как указано в И.8. 4818542. Предпочтительные полимеры для такого осаждения представляют собой синтетические сополимеры или полимеры, выбранные из группы, состоящей из желатинового агара, крахмала, арабиногалактана, альбумина, коллагена, полигликолевой кислоты, полимолочной кислоты, гликолид-Ь-лактида полиэпсилон-капролактона, сополимера эпсилонкапролактона и молочной кислоты, сополимера эпсилон-капролактона и гликолевой кислоты, поли-βгидроксимасляной кислоты, оксида полиэтилена, полиэтилена, полиалкил-2-цианоакрилата, полигидроксиэтилметакрилата, полиамидов, полиаминокислот, поли-2-гадроксиэтил-ЭЬ-аспартамида, полимера сложного эфира мочевины, поли-Ь-фенилаланин/этиленгликоль/1,6-диизоцианатгексана и полиметилметакрилата. Особенно предпочтительными полимерами являются полимеры сложных эфиров, такие как полигликолевая кислота, полимолочная кислота, гликолид-Ь-лактид полиэпсилон-капролактона, сополимер эпсилон-капролактона и молочной кислоты и сополимер эпсилон-капролактона и гликолевой кислоты. Растворители, пригодные для растворения полимера и/или активного вещества, включают воду, гексафторизопропанол, метиленхлорид, тетрагидрофуран, гексан, бензол или сесквигидрат гексафторацетона. Процесс диспергирования, содержащий активное вещество фазы со второй фазы, может включать пропускание под давлением указанной первой фазы через отверстие в насадке для достижения образования капель.
Составы сухих порошков можно получать в результате процесса, отличного от лиофилизации, такого как высушивание распылением или экстракция растворителя посредством выпаривания или посредством осаждения кристаллической композиции с последующей одной или несколькими стадиями удаления водного или неводного растворителя. Получение высушенного распылением антитела описано в И.8. 6019968. Композиции сухих порошков на основе антитела можно получать с помощью высушивания
- 30 019476 распылением растворов и суспензий антитела и необязательно эксципиентов в растворителе в условиях, позволяющих получить пригодный для вдыхания сухой порошок. Растворители могут включать полярные соединения, такие как вода и этанол, которые можно быстро высушить. Стабильность антител можно повышать посредством проведения процессов высушивания распылением в отсутствие кислорода, таких как, например, высушивание слоем азота, или применением азота в качестве газа для высушивания. Другой относительно сухой состав представляет собой дисперсию множества перфорированных микроструктур, диспергированных в среде, которая, как правило, содержат пропеллент на основе гидрофторалкана, как описано в АО 9916419. Стабилизированные дисперсии можно вводить в легкое пациента с использованием ингалятора с измеряемой дозой. Оборудование, пригодное для коммерческого изготовления высушенных распылением лекарственных средств, изготавливают в ВисЫ Ыб. или Ы1го Согр.
По меньшей мере одно антитело против ГЬ-23р19 либо в стабильных составах или в составах, поддающихся хранению, либо в растворах, описанных в настоящем описании, можно вводить пациенту в соответствии с настоящим изобретением посредством множества способов доставки, включая инъекцию ЗС или ГМ; трансдермальный, легочный способ, способ доставки через слизистую оболочку, способ посредством имплантата, осмотического дозатора, кассеты, микродозатора или других способов, понятных специалисту в данной области, как хорошо известно в данной области.
Терапевтическое применение.
Также настоящее изобретение относится к способу модулирования или лечения по меньшей мере одного связанного с ΙΕ-23 заболевания в клетке, ткани, органе, у животного или у пациента, как известно в данной области или как описано в настоящем описании, с использованием по меньшей мере одного антитела против Ш-23р19 по настоящему изобретению, например посредством введения или контактирования клетки, ткани, органа, животного или пациента с терапевтически эффективным количеством антитела против Ш-23р19. Также настоящее изобретение относится к способу модулирования или лечения по меньшей мере одного связанного с Ш-23 заболевания в клетке, ткани, органе, у животного или пациента, включая, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере одно заболевание из ожирения, опосредуемого иммунной системой заболевания, сердечно-сосудистого заболевания, инфекционного заболевания, злокачественного заболевания или неврологического заболевания.
Также настоящее изобретение относится к способу модулирования или лечения по меньшей мере одного связанного с Ш-23 опосредуемого иммунной системой заболевания в клетке, ткани, органе, у животного или у пациента, включая, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере одно заболевание из ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита с генерализованным началом, псориатического артрита, акилозирующего спондилита, язвы желудка, серонегативных артропатий, остеоартрита, остеолизиса, асептического ослабления ортопедических имплантатов, воспалительного заболевания кишечника, язвенного колита, системной красной волчанки, антифосфолипидного синдрома, иридоциклита/увеита/оптического неврита, идиопатического фиброза легких, системного васкулита/гранулематоза Вегенера, саркоидоза, орхита/обратных процессов при вазэктомии, аллергических/атопических заболеваний, астмы, аллергического ринита, экземы, аллергического контактного дерматита, аллергического конъюнктивита, пневмонита вследствие гиперчувствительности, трансплантатов, отторжения трансплантированного органа, реакции трансплантат против хозяина, синдрома системного воспалительного ответа, септического синдрома, вызванного грамположительными бактериями, сепсиса, вызванного грамотрицательными бактериями, негативного в отношении культуры сепсиса, вызванного грибами сепсиса, нейтропенической лихорадки, уросепсиса, менингококкемии, травмы/геморрагии, ожогов, воздействия ионизирующей радиации, острого панкреатита, взрослого респираторного дистресс-синдрома, ревматоидного артрита, вызванного алкоголем гепатита, хронических воспалительных патологий, саркоидоза, болезни Крона, серповидно-клеточной анемии, диабета, нефроза, атопических заболеваний, реакций гиперчувствительности, аллергического ринита, сенной лихорадки, хронического ринита, конъюнктивита, эндометриоза, астмы, крапивницы, системной анафилаксии, дерматита, пернициозной анемии, гемолитического заболевания, тромбоцитопении, отторжения трансплантата любого органа или ткани, отторжения трансплантата почки, отторжения трансплантата сердца, отторжения трансплантата печени, отторжения трансплантата поджелудочной железы, отторжения трансплантата легких, отторжения трансплантата костного мозга (ВМТ), отторжения аллотрансплантата кожи, отторжения трансплантата хряща, отторжения трансплантата кости, отторжения трансплантата тонкого кишечника, отторжения имплантата эмбрионального тимуса, отторжения трансплантата паращитовидной железы, отторжения ксенотрансплантата любого органа или ткани, отторжения аллотрансплантата, реакций гиперчувствительности против рецептора, болезни Грэйва, болезни Рейно, устойчивого к инсулину диабета типа В, астмы, миастении, опосредуемой антителами цитотоксичности, реакций гиперчувствительности ΙΙΙ типа, синдрома РОЕМЗ (полиневропатия, органомегалия, эндокринопатия, моноклональная гаммопатия и синдром изменений кожи), полиневропатии, органомегалии, эндокринопатии, моноклональной гаммопатии, синдрома изменений кожи, антифосфолипидного синдрома, пемфигуса, склеродермии, смешанного заболевания соединительной ткани, идиопатической болезни Аддисона, диабета, хронического активного гепатита, первичного биллиарного цирроза, витилиго, васкулита, синдрома пост-МТ кардиотомии, гиперчувствительности ΙΥ типа, контактного дерматита, пневмонита вследствие
- 31 019476 гиперчувствительности, отторжения аллотрансплантата, гранулем вследствие внутриклеточных организмов, чувствительности к лекарственному средству, метаболической/идиопатической болезни Вильсона, гемахроматоза, дефицита альфа-1-антитрипсина, диабетической ретинопатии, тиреоидита Хашимото, остеопороза, обследования гипоталамо-гипофизарно-надпочочениковой системы, первичного биллиарного цирроза, тиреоидита, энцефаломиелита, кахексии, кистозного фиброза, хронического заболевания легких новорожденных, хронического обструктивного заболевания легких (СОРИ), семейного гематофагоцитарного лимфогистоцитоза, дерматологических состояний, псориаза, алопеции, нефротического синдрома, нефрита, гломерулярного нефрита, острой почечной недостаточности, гемодиализа, уремии, токсичности, преэклампсии, терапии ок!3, терапии против сб3, цитокиновой терапии, химиотерапии, лучевой терапии (например, включая, но не ограничиваясь ими, астению, анемию, кахексию и т.п.), хронической интоксикации салицилатами и т.п.; см., например, Мегск Мапиа1, 12(Н-17(Н ЕбШопк, Мегск & Сотрапу, Кайтау, Ν1 (1972, 1977, 1982, 1987, 1992, 1999), РйагтасоГйегару НапбЬоок, Ае11к еГ а1., ебк., 8есопб ЕбШоп, Арр1е!оп и Ьапде, 81атГогб, Сопп. (1998, 2000), все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Также настоящее изобретение относится к способу модулирования или лечения по меньшей мере одного сердечно-сосудистого заболевания в клетке, ткани, органе, у животного или у пациента, включая, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере одно заболевание из синдрома оглушения сердца, инфаркта миокарда, застойной сердечной недостаточности, инсульта, ишемического инсульта, кровоизлияния, острого коронарного синдрома, артериосклероза, атеросклероза, рестеноза, диабетического атеросклеротического заболевания, гипертензии, артериальной гипертензии, вазоренальной гипертензии, обморока, шока, сифилиса сердечно-сосудистой системы, сердечной недостаточности, легочного сердца, первичной легочной гипертензии, аритмий сердца, эктопической экстрасистолии предсердий, трепетания предсердий, фибрилляции предсердий (постоянной или пароксизмальной), постперфузионного синдрома, воспалительного ответа на сердечно-легочный шунт, беспорядочной или многоочаговой тахикардии предсердий, регулярной тахикардии с узким ОК8, определенных видов аритмий, фибрилляции желудочков, аритмий пучка Гиса, атриовентрикулярной блокады, блокады ножки пучка, ишемических нарушений миокарда, болезни коронарных артерий, стенокардии, инфаркта миокарда, кардиомиопатии, застойной кардиомиопатии с дилятацией, кардиомиопатии с сужением, заболеваний клапанов сердца, эндокардита, заболевания перикарда, опухолей сердца, аневризмы аорты и периферических аневризм, расслоения аорты, воспаления аорты, окклюзии брюшного отдела аорты и ее ветвей, нарушений периферических сосудов, окклюзионных нарушений артерий, периферического атеросклеротического заболевания, облитерирующего тромбангиита, функциональных нарушений периферических сосудов, феномена и болезни Рейно, акроцианоза, эритромеалгии, заболеваний вен, тромбоза вен, варикозного расширения вен, артериовенозного свища, лимфодермы, жирового отека, нестабильной стенокардии, реперфузионного повреждения, постперфузионного синдрома, повреждения вследствие ишемии-реперфузии и т.п. Такой способ необязательно может включать введение эффективного количества композиции или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно антитело против ЕЕ-23р19, в клетку, ткань, орган, животному или пациенту, нуждающемуся в таком модулировании, воздействии или терапии.
Также настоящее изобретение относится к способу модулирования или лечения по меньшей мере одного связанного с ГЕ-23 инфекционного заболевания в клетке, ткани, органе, у животного или пациента, включая, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере одно заболевание из острой или хронической бактериальной инфекции, острого и хронического паразитарного или инфекционного процессов, включая бактериальные, вирусные и грибковые инфекции, ВИЧ инфекцию/ВИЧ невропатию, менингит, гепатит (например, А, В или С или сходные с ними), септический артрит, перитонит, пневмонию, эпиглоттит, Е. со11 0157:117, гемолитический уремический синдром/тромболитическую тромбоцитопеническую пурпуру, малярию, геморрагическую лихорадку денге, лейшманиоз, лепру, синдром токсического шока, стрептококковый миозит, газовую гангрену, тусоЬасГегшт ГиЬегси1о818, тусоЬасГегшт аушт тГгасе11и1аге, пневмонию РпеитосукОк саппи, воспалительное заболевание таза, орхит/эпидермит, легионеллу, болезнь Лайма, грипп, вирус Эпштейн-Барра, ассоциированный с вирусом гемофагоцитарный синдром, вирусный энцефалит/асептический менингит и т.п.
Также настоящее изобретение относится к способу модулирования или лечения по меньшей мере одного связанного с [Б-23 злокачественного заболевания в клетке, ткани, органе, у животного или у пациента, включая, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере одно заболевание из лейкоза, острого лейкоза, острого лимфобластного лейкоза (АЬЬ), острого лимфоцитарного лейкоза, В-клеточного, Тклеточного или ЕАВ АЬЬ, острого миелоидного лейкоза (АМЬ), острого миелогенного лейкоза, хронического миелоцитарного лейкоза (СМЬ), хронического лимфоцитарного лейкоза (СЬЬ), волосатоклеточного лейкоза, миелодиспластического синдрома (МЭ8), лимфомы, болезни Ходжкина, злокачественной лимфомы, неходжскинской лимфомы, лимфомы Беркитта, множественной миеломы, саркомы Капоши, колоректальной карциномы, панкреатической карциномы, назофарингеальной карциномы, злокачественного гистоцитоза, паранеопластического синдрома/гиперкальциемии при злокачественной опухли, солидных опухолей, рака мочевого пузыря, рака молочной железы, рака ободочной и прямой кишки, рака эндометрия, рака головы, рака шеи, наследственного неполипозного рака, лимфомы Ходжкина, рака
- 32 019476 печени, рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, рака яичника, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, почечноклеточного рака, рака яичка, аденокарцином, сарком, злокачественной меланомы, гемангиомы, метастатизирующего заболевания, обусловленной злокачественной опухолью резорбции костей, обусловленной злокачественной опухолью болью в костях и т.п.
Также настоящее изобретение относится к способу модулирования или лечения по меньшей мере одного связанного с ГБ-23 неврологического заболевания в клетке, ткани, органе, у животного или пациента, включая, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере одно заболевание из нейродегенеративного заболевания, рассеянного склероза, мигренозной боли, СПИД-дементного комплекса, демиелинизирующего заболевания, такого как рассеянный склероз и острый поперечный миелит; экстрапирамидных и мозжечковых нарушений, таких как очаги повреждения в кортикоспинальной системе; нарушений базальных ганглиев; нарушений с гиперкинетическими движениями, таких как хорея Гентингтона и сенильная хорея; индуцированных лекарственными средствами двигательных нарушений, таких как нарушения, индуцированные лекарственными средствами, которые блокируют рецепторы для дофамина в ЦНС; гипокинетических двигательных нарушений, таких как болезнь Паркинсона; прогрессирующего супрануклеарного паралича; структурных очагов повреждения в мозжечке; спиномозжечковых дегенераций, таких как спинальная атаксия, атаксия Фридрейха, церебеллярные кортикальные дегенерации, множественные системные дегенерации (Менцеля, Дежерина-Томаса, Шай-Дрэгера и Мачадо-Джозефа); системных нарушений (болезнь Рефсума, абеталипопротемия, атаксия, телеангиэктозия, митохондриальное мультисистемное нарушение); центральных демиелинизирующих нарушений, таких как рассеянный склероз, острый поперечный миелит; и нарушений мотонейрона, таких как неврогенные мышечные атрофии (клеточная дегенерация переднего рога, такая как боковой амиотрофический склероз, детская спинальная мышечная атрофия и ювенильная спинальная мышечная атрофия); болезни Альцгеймера; синдрома Дауна в среднем возрасте; диффузного заболевания с тельцами Леви; сенильной деменции по типу деменции с тельцами Леви; синдрома Вернике-Корсакова; хронического алкоголизма; болезни Крейтцфельда-Якоба; подострого склерозирующего панэнцефалита, болезни Галлервордена-Шпатца; деменции боксеров; нейротравматического повреждения (например, повреждения спинного мозга, повреждения головного мозга, сотрясения мозга, повторного сотрясения мозга); боли; воспалительной боли; аутизма; депрессии; инсульта; когнитивных нарушений; эпилепсии и т.п. Такой способ необязательно может включать введение эффективного количества композиции или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно антитело против Т№ или определенный участок или вариант в клетку, ткань, орган, животному или пациенту, нуждающемуся в таком модулировании, воздействии или терапии; см., например, Μе^ск Μαηιιαί. 16111 ЕййГои, Μе^ск & Сотрапу, Какгау, Νί (1992).
Настоящее изобретение также относится к способу модулирования или лечения по меньшей мере одной связанной с ГБ-23 раны, травмы или повреждения ткани или сходного хронического состояния, в клетке, ткани, органе, у животного или пациента, включая, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере одно из телесного повреждения или травмы, ассоциированной с хирургической операцией в полости рта, в том числе с периодонтальной хирургической операцией, удалением(ями) зуба, эндодонтическим лечением, вставкой зубных имплантатов, наложением и применением зубных протезов; или где рана выбрана из группы, состоящей из асептических ран, ушибленных ран, резаных ран, рваных ран, непроникающих ран, открытых ран, проникающих ран, сквозных ран, колющих ран, септических ран, инфекций и подкожных ран; или где рана выбрана из группы, состоящей из ишемических язв, пролежней, свищей, тяжелых укусов, термических ожогов и ран в области донорского лоскута; или где рана представляет собой афтозную рану, травматическую рану или ассоциированную с герпесом рану.
Раны и/или язвы в норме находятся в качестве выступов на коже или на слизистой поверхности либо в результате инфаркта в органе (инсульта). Рана может быть результатом дефекта мягких тканей или очага повреждения либо основного состояния. В контексте настоящего изобретения термин кожа относится к самой внешней поверхности тела животного, в том числе человека, и охватывает неповрежденную или почти неповрежденную кожу, а также поврежденную поверхность кожи. Термин слизистая оболочка относится к неповрежденной или поврежденной слизистой оболочке животного, такого как человек, и может представлять собой слизистую оболочку полости рта, щеки, уха, носа, легкого, глаза, желудочно-кишечного тракта, влагалища или прямой кишки.
В контексте настоящего изобретения термин рана означает телесное повреждение с разрушением нормальной целостности тканевых структур. Также подразумевают, что термин включает термины очаг воспаления, очаг повреждения, некроз и язва. В норме термин очаг воспаления является общим термином почти для любого очага повреждения кожи или слизистых оболочек и термин язва представляет собой локальный дефект поверхности органа или ткани или углубление, которое возникает вследствие отторжения некротической ткани. Очаг повреждения, как правило, относится к любому дефекту ткани. Некроз относится к гибели ткани вследствие инфекции, повреждения, воспаления или инфарктов.
Термин рана, используемый в контексте настоящего изобретения, означает любую рану (см. ниже классификацию ран) и находящуюся на любой конкретной стадии процесса заживления, в том числе на стадии до начала какого-либо заживления или даже до получения определенного ранения, такого как хирургический разрез (профилактическое лечение). Примеры ран, которые можно предотвращать и/или
- 33 019476 лечить в соответствии с настоящим изобретением, например, представляют собой асептические раны, ушибленные раны, резаные раны, рваные раны, непроникающие раны (т.е. раны, в которых нет разрушения кожи, однако есть повреждение лежащих ниже структур), открытые раны, проникающие раны, сквозные раны, колющие раны, септические раны, подкожные раны и т.д. Примерами очагов воспаления являются пролежни, афтозный стоматит, изъязвление, герпетическая лихорадка, травматический дифтерит и т.д. Примерами язв являются, например, пептическая язва, дуоденальная язва, язва желудка, язва при подагре, диабетическая язва, гипертоническая ишемическая язва, варикозная язва, трофическая язва (венозная язва), подъязычная язва, язва подслизистой оболочки, симптоматическая язва, трофическая язва, тропическая язва и венерическая язва, например, вызванная гонореей (включая уретрит, эндоцервицит и проктит). Состояния, связанные с ранами или очагами воспаления, которые можно успешно лечить в соответствии с этим изобретением, представляют собой ожоги, сибирскую язву, столбняк, газовую гангрену, скарлатину, рожу, сикоз, фолликулит, контагиозное импетиго или буллезное импетиго и т.д. Часто существует определенное совпадение в применении терминов рана и язва и рана и очаг воспаления и, более того, термины часто используют случайным образом. Таким образом, как упоминалось выше, в контексте настоящего изобретения термин рана включает термины язва, очаг повреждения, очаг воспаления и инфаркт и термины используют без проведения различий, если нет иных указаний.
Типы ран, подлежащие лечению в соответствии с этим изобретением, также включают (1) неспецифические раны, такие как, например, хирургические, травматические, инфекционные, ишемические, термические, химические и буллезные раны; (ίί) раны, специфичные для полости рта, такие как, например, постэкстракционные раны, эндодонтические раны, особенно связанные с лечением кист и абсцессов, язв и очагов повреждения бактериального, вирусного или аутоиммунного происхождения, механических, химических, термических, инфекционных и лихеноидных ран; конкретные примеры представляют собой герпетические язвы, афтозный стоматит, острый некротический язвенный гингивит и синдром жжения в полости рта; и (ш) раны кожи, такие как, например, неоплазия, ожоги (например, химические, термические), очаги повреждения (бактериальный, вирусный, аутоиммунный), укусы и хирургические разрезы. Другим способом классификации является (ί) небольшая потеря тканей вследствие хирургических разрезов, небольшие эрозии и небольшие укусы или (ίί) значительная потеря тканей. Последняя группа включает ишемические язвы, пролежни, свищ, рваные раны, тяжелые укусы, термические ожоги и раны области донорского лоскута (в мягких и твердых тканях) и инфаркты.
Другие раны, которые представляют интерес с точки зрения настоящего изобретения, представляют собой раны, такие как ишемические язвы, пролежни, свищи, тяжелые укусы, термические ожоги и раны области донорского лоскута. Ишемические язвы и пролежни представляют собой раны, которые даже в норме заживают очень медленно, и в таких случаях особенно усовершенствованный и более быстрый процесс заживления, безусловно, имеет большое значение для пациента. Более того, затраты, связанные с лечением пациентов, страдающих от таких ран, значительно снижаются, если процесс заживления является усиленным и происходит более быстро.
Раны области донорского лоскута представляют собой раны, которые, например, возникают в связи с перемещением твердой ткани из одной части организма в другую часть организма, например, в связи с трансплантацией. Раны, возникающие вследствие таких операций, являются очень болезненными и усиленное заживление, таким образом, является наиболее ценным. Термин кожа используют в наиболее широком смысле, охватывающем эпидермальный слой кожи, и в случаях, когда поверхность кожи является более или менее поврежденной, - также дермальный слой кожи. Помимо рогового слоя, эпидермальный слой кожи представляет собой наружный (эпителиальный слой), а более глубокий слой соединительной ткани кожи называют дермой.
Также настоящее изобретение относится к способу модулирования или лечения псориаза, псориатического артрита, болезни Крона, рассеянного склероза и оптического неврита, среди прочих заболеваний, представленных выше в качестве связанных с 1Ь-23 заболеваний, в клетке, ткани, органе, у животного или пациента, включая, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере одно из опосредуемого иммунной системой заболевания, сердечно-сосудистого заболевания, инфекций, злокачественного и/или неврологического заболевания. Такой способ необязательно может включать введение эффективного количества по меньшей мере одной композиции или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 в клетку, ткань, орган, животному или пациенту, нуждающемуся в таком модулировании, воздействии или терапии.
Любой способ по настоящему изобретению может включать введение эффективного количества композиции или фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно антитело против 1Ь23р19 в клетку, ткань, орган, животному или пациенту, нуждающемуся в таком модулировании, воздействии или терапии. Такой способ необязательно может дополнительно включать совместное введение или комбинированную терапию для лечения такого заболевания или нарушения, где введение указанного по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19, его определенного участка или варианта, кроме того, включает введение до, одновременно и/или после по меньшей мере одного средства, выбранного из по меньшей мере одного антагониста ΤΝΡ (например, но не ограничиваясь ими, химического или белкового антагониста ΤΝΡ, моноклонального или поликлонального антитела против ΤΝΡ или фрагмента, раство
- 34 019476 римого рецептора для ΊΝΡ (например, р55, р70 или р85) или фрагмента, его слитых полипептидов или низкомолекулярного антагониста ТИР, например, связывающего ТИР белка Ι или ΙΙ (ТВР-Ι или ТВР-ΙΙ), нерелимонмаба, инфликсимаба, этанерцепта (ЕпЬге1™), адалимулаба (Нитка™), СИР-571, СИР-870, афелимомаба, ленерцепта и т.п.), противоревматического средства (например, метотрексата, ауранофина, ауротиоглюкоза, азатиоприна, золота натрия тиомалата, гидроксихлороквина сульфата, лефлуномида, сульфасалзина), мышечного релаксанта, наркотического средства, нестероидного противовоспалительного лекарственного средства (Ν8ΑΙΠ), обезболивающего средства, анестетика, седативного средства, местного анестетика, нервно-мышечного блокатора, противомикробного средства (например, аминогликозида, противогрибкового средства, противопаразитарного средства, противовирусного средства, карбапенема, цефалоспорина, фторхинолона, макролида, пенициллина, сульфонамида, тетрациклина, другого противомикробного средства), противопсориазного средства, кортикостероида, анаболического стероида, средства против диабета, минерального средства, питательного средства, средства для щитовидной железы, витамина, связанного с кальцием гормона, средства против диареи, средства против кашля, противорвотного средства, средства против язвы, слабительного средства, антикоагулянта, эритропоэтина (например, эпоэтина альфа), филграстима (например, С-С8Б, №иродеп), сарграмостима (СМ-С8Р, Беикте), средства для иммунизации, иммуноглобулина, иммунодепрессанта (например, базиликсимаба, циклоспорина, даклизумаба), гормона роста, заместительного гормонального лекарственного средства, модулятора рецепторов эстрогена, мидриатика, средства против циклоплегии, алкилирующего средства, антиметаболита, ингибитора митоза, радиофармацевтического средства, антидепрессанта, средства против мании, антипсихотического средства, анксиолитического средства, гипнотического средства, симпатомиметика, стимулирующего средства, донепезила, такрина, лекарственного средства против астмы, бета-агониста, стероида для ингаляции, ингибитора лейкотриена, метилксантина, кромолина, адреналина или аналога, дорназы альфа (пульмозима), цитокина или антагониста цитокина. Пригодные дозы хорошо известны в данной области; см., например, ^е11к е! а1., ейк., Ркагтасо!кегару НапйЬоок, 2'1 ЕИШоп, Арр1е!оп апй Бапде, 8!атГогй, СТ (2000), РИЯ Ркагтасорое1а, Тагаксоп Роске! Ркагтасорое1а 2000, Ие1ихе Εάί!юп, Тагаксоп РиЬБкЫпд, Бота Бтйа, СА (2000), Шгктд 2001 НапйЬоок оГ Игидк, 21к! еййюп, Зргшдкоике Согр., Зргшдкоике, РА, 2001, Неа1!к РгоГеккюпаГк Игид СиИе 2001, ей., Зкаппоп, ^йкоп, 81апд, РгепйсеНа11, Ис, Иррег 8айй1е Кгуег, Ν1, все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Антагонисты Т№, пригодные для композиций, комбинированной терапии, совместного введения, устройств и/или способов по настоящему изобретению (кроме того, содержащих по меньшей мере одно антитело, его определенный участок и вариант по настоящему изобретению), включают, но не ограничиваются ими, антитела против Т№ (например, по меньшей мере один антагонист Т№, как определено выше), их антигенсвязывающие фрагменты и молекулы рецепторов, которые специфично связываются с Т№; соединения, которые предотвращают и/или ингибируют синтез Т№, его высвобождение Т№ или его действие на клетки-мишени, такие как талидомид, тенидап, ингибиторы фосфодиэстеразы (например, пентоксифиллин и ролипрам), агонисты рецепторов для аденозина А2Ь и усиливающие рецептор для аденозина А2Ь средства; соединения, которые предотвращают и/или ингибируют передачу сигнала рецептора для Т№, такие как ингибиторы киназы активируемого митогеном белка (МАР); соединения, которые блокируют и/или ингибируют расщепление мембранного Т№, такие как ингибиторы металлопротеиназы; соединения, которые блокируют и/или ингибируют активность Т№, такие как ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (АСЕ) (например, каптоприл); и соединения, которые блокируют и/или ингибируют продукцию и/или синтез ΪΝΕ, такие как ингибиторы МАР-киназы.
Как используют в настоящем описании, антитело против фактора некроза опухоли, антитело против ЮТ, антитело против ΨΝΡα или фрагмент и т.п. снижает, блокирует, ингибирует, устраняет активность ΨΝΡα или препятствует ей, ш уйго, ΐπ кйи и/или предпочтительно ΐπ у1уо. Например, пригодное антитело против ЮТ человека по настоящему изобретению может связывать ΊΝΕα и включает антитела против ЮТ, их антигенсвязывающие фрагменты и их определенные мутантные формы или домены, которые специфично связываются с ΨΝΡα. Пригодное антитело против ΨΝΡ или фрагмент также может снижать, блокировать, устранять, препятствовать, предотвращать и/или ингибировать синтез РНК, ДНК или белка ЮТ, высвобождение ΨΝΕ. передачу сигнала рецептора ΨΝΕ. расщепление мембранного ЮТ, активность ΨΝΡ, продукцию и/или синтез ΨΝΕ.
Примером антитела против ЮТ или антагониста ΨΝΡ является химерное антитело сА2. Дополнительные примеры моноклональных антител против ЮТ, которые можно использовать в соответствии с настоящим изобретением, описаны в данной области (см., например, патент США № 5231024, Мо11ег, А. е! а1., Су!ок1пе 2(3): 162-169 (1990), заявку США № 07/943852 (поданную 11 сентября 1992 года), Яа!к)еп е! а1., международная заявка № \¥О 91/02078 (опубликованная 21 февраля 1991 года), ЯиЬш е! а1., патентная заявка ЕРО № 0218868 (опубликованная 22 апреля 1987 года), Уопе е! а1., патентная заявка ЕРО № 0288088 (26 октября 1988 года), Б1апд, е! а1., Вюскет. Вюркук. Яек. Сотт. 737:847-854 (1986), Меадег е! а1., НуЬгИота 5:305-311 (1987), Бепй1у е! а1., НуЬпйота 6:359-369 (1987), Вппдгаап е! а1., НуЬпйота 5:489-507 (1987) и Нищ е! а1., 1. ]ттипо1. Ме!к. 96:57-62 (1987).
- 35 019476
Молекулы рецептора для ЮТ.
Предпочтительные молекулы рецептора для ЮТ, пригодные в соответствии с настоящим изобретением, представляют собой молекулы, которые связывают Т№а с высокой аффинностью (см., например, РеИтапп е! а1., международную заявку № ν0 92/07076 (опубликованую 30 апреля 1992 года), 8сЬа11 е! а1., Се11 61:361-370 (1990) и Ьое!8сЬег е! а1., Се11 57:351-359 (1990), все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме) и необязательно обладают низкой иммуногенностью. В частности, в соответствии с настоящим изобретением пригодными являются рецепторы клеточной поверхности для ЮТ массой 55 кДа (р55 Т№-К) и 75 кДа (р75 Т>-К). Укороченные формы этих рецепторов, содержащие внеклеточные домены (ЕСЭ) рецепторов или их функциональные части (см., например, Согсогап е! а1., Еиг. 1. ВюсЬега. 223:831-840 (1994)), также являются пригодными в соответствии с настоящим изобретением. Укороченные формы рецепторов для ЮТ, содержащие ЕСЭ. выявлены в моче и сыворотке в качестве ингибиторных связывающих Т№а белков массой 30 и 40 кДа (Епде1тапп, Н. е! а1., 1. Вю1. СЬет. 255:1531-1536 (1990)). Мультимерные молекулы рецептора для ЮТ и слитые молекулы иммунорецептора для ЮТ, производные и их фрагменты или участки являются дополнительными примерами молекул рецептора для ЮТ, которые пригодны в способах и композициях по настоящему изобретению.
Мультимерные молекулы рецептора для ЮТ, пригодные в соответствии с настоящим изобретением, содержат целый ЕСЭ или функциональную часть ЕСЭ двух или более рецепторов для Т№, связанных с помощью одного или нескольких полипептидных линкеров или других непептидных линкеров, таких как полиэтиленгликоль (РЕС). Примерами такой слитой молекулы иммунорецептора для ЮТ является слитый белок рецептор для Т№ЛдС. Слитые молекулы иммунорецептора для ЮТ и способы их продукции описаны в данной области (Ье881аиег е! а1., Еиг. 1. Iттиηо1. 27:2883-2886 (1991), Л811кепа/1 е! а1., Ргос. N311. Лсаб. 8с1. И8Л, 88:10535-10539 (1991), Реρρе1 е! а1., 1. Еxρ. Меб., 174:1483-1489 (1991), Ко118 е! а1., Ргос. №!1. Асаб. 8ά. И8Л, 91:215-219 (1994), Ви!1ег е! а1., СуЮкте 6, (6):616-623 (1994), Вакег е! а1., Еиг. 1. Iттипо1., 24:2040-2048 (1994), Веи!1ег е! а1., патент США № 5447851 и заявка США № 08/442133 (поданная 16 мая 1995 года), все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме). Способы получения слитых молекул иммунорецептора также можно найти в Саρоη е! а1., патент США № 5116964; Саρоη е! а1., патент США № 5225538 и Саρоη е! а1., №!иге 337:525-531 (1989), все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Цитокины включают любые известные цитокины; см., например, Соρеν^!ЬСу!ок^ηе8.сот. Антагонисты цитокинов включают, но не ограничиваются ими, любое антитело, фрагмент или миметик, любой растворимый рецептор, фрагмент или миметик, любой низкомолекулярный антагонист или любое их сочетание.
Терапевтические способы лечения.
Любой способ по настоящему изобретению может включать лечение опосредуемого Ш-23 нарушения, включающее введение эффективного количества композиции или фармацевтический композиции, содержащей по меньшей мере одно антитело против Ш-23р19 в клетку, ткань, орган, животному или пациенту, нуждающемуся в таком модулировании, воздействии или терапии. Такой способ необязательно может дополнительно включать совместное введение или комбинированную терапию для лечения таких заболеваний или нарушений, где введение указанного по меньшей мере одного антитела против Ш23ρ19, его определенного участка или варианта, кроме того, включает введение до, одновременно и/или после по меньшей мере одного средства, выбранного из противоинфекционного лекарственного средства, лекарственного средства для сердечно-сосудистой (СУ) системы, лекарственного средства для центральной нервной системы (ЦНС), лекарственного средства для автономной нервной системы (АНС), лекарственного средства для дыхательных путей, лекарственного средства для желудочно-кишечного (СЦ тракта, гормонального лекарственного средства, лекарственного средства для жидкостного или электролитного баланса, гематологического лекарственного средства, противоопухолевого средства, иммуномодулирующего лекарственного средства, лекарственного средства для глаз, ушей и носа, лекарственного средства для местного применения, диетологического лекарственного средства или сходных с ними, по меньшей мере одного антагониста ТОТ (например, но не ограничиваясь ими, антитела или фрагмента против ЮТ, растворимого рецептора или фрагмента для ЮТ, их слитых белков или низкомолекулярного антагониста ТОТ), противоревматического средства (например, метотрексата, ауранофина, ауротиоглюкозы, азатиоприна, этанерцепта, золота натрия тиомалата, гидроксихлороквина сульфата, лефлуномида, сульфасалзина), мышечного релаксанта, наркотического, нестероидного противовоспалительного лекарственного средства (№ЛГО), обезболивающего средства, анестетика, седативного средства, местного анестетика, нервно-мышечного блокатора, противомикробного средства (например, аминогликозида, противогрибкового средства, противопаразитарного средства, противовирусного средства, карбапенема, цефалоспорина, фторхинолона, макролида, пенициллина, сульфонамида, тетрациклина, другого противомикробного средства), противопсориазного средства, кортикостероида, анаболического стероида, относящегося к лечению диабета средства, минерального средства, питательного средства, средства для щитовидной железы, витамина, связанного с кальцием гормона, средства против диареи,
- 36 019476 средства против кашля, средства против рвоты, средства против язвы, слабительного средства, антикоагулянта, эритропоэтина (например, эпоэтина альфа), филграстима (например, 6-СБР, ^иродем), сарграмостима (СМ-СБР, Есикте), средства для иммунизации, иммуноглобулина, иммунодепрессанта (например, базиликсимаба, циклоспорина, даклизумаба), гормона роста, заместительного гормонального лекарственного средства, модулятора рецепторов эстрогена, мидриатика, средства против циклоплегии, алкилирующего средства, антиметаболита, ингибитора митоза, радиофармацевтического средства, антидепрессанта, средства против мании, антипсихотического средства, анксиолитического средства, гипнотического средства, симпатомиметика, стимулирующего средства, донепезила, такрина, лекарственных средств против астмы, бета-агониста, стероида для ингаляции, ингибитора лейкотриена, метилксантина, кромолина, адреналина или аналога, дорназы альфа (пульмозима), цитокина или антагониста цитокина. Такие лекарственные средства хорошо известны в данной области, включая составы, показания, дозирование и введение для каждого из представленных в настоящем описании (см., например, Ш1Г5тд 2001 НаЫЬоок оГ Эгидх, 2Г’1 с61!1оп Бргтдкоизс Согр., Бргтдкоикс, РА, 2001; Нса1!1 Р^οΓс55^οηа1'5 Эгид Сшбе 2001, еб., Бкц-топ ^йкоп, Битд, Ртейше-НаИ, 1пс, Иррег Бабб1с И|усг, ΝΕ РкагтсоШегару Наг1бЬоок, №с11§ с! а1., еб., Арр1с!оп & Ьа^с, 81атГогб, СТ, все из которых включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме).
Как правило, лечение патологических состояний проводят посредством введения эффективного количества или дозы по меньшей мере одной композиции антитела против 1Ь-23р19, общее количество которого, в среднем, находится в диапазоне по меньшей мере приблизительно от 0,01 до 500 мг по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 на 1 кг пациента на дозу и предпочтительно по меньшей мере приблизительно от 0,1 до 100 мг антитела/килограмм пациента для однократного или многократного введения в зависимости от специфичной активности активного вещества, содержащегося в композиции. Альтернативно, эффективная сывороточная концентрация может включать концентрацию 0,1-5000 мкг/мл сыворотки для однократного или многократного введения. Пригодные дозы известны врачам и, безусловно, зависят от конкретной стадии заболевания, конкретной активности композиции, подлежащей введению и конкретного пациента, подвергающегося лечению. В некоторых случаях для достижения требуемого терапевтического количества может быть необходимым проведение повторного введения, т.е. повторных отдельных введений конкретной контролируемой или измеренной дозы, где отдельные введения повторяют до достижения требуемой суточной дозы или эффекта.
Предпочтительные дозы могут необязательно включать приблизительно 0,1-99 и/или 100-500 мг/кг/введение, или любой диапазон, значение или часть этого диапазона, или количество для достижения концентрации в сыворотке приблизительно 0,1-5000 мкг/мл на однократное введение или многократные введения, или любой диапазон, значение или часть этого диапазона. Предпочтительный диапазон дозировки анититела против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению составляет от приблизительно 1 до приблизительно 3, приблизительно 6 или приблизительно 12 мг/кг массы тела пациента.
Альтернативно, вводимые дозы могут варьировать в зависимости от известных факторов, таких как фармакодинамические свойства конкретного средства, и способ и путь его введения; возраст, состояние здоровья и масса реципиента; природа и степень выраженности симптомов, тип сопутствующего лечения, частота введения и требуемый эффект. Как правило, доза активного ингредиента может составлять приблизительно от 0,1 до 100 мг на 1 кг массы тела. Как правило, доза от 0,1 до 50 и предпочтительно от 0,1 до 10 мг на 1 кг на одно введение или форму с замедленным высвобождением является эффективной для получения требуемых результатов.
В качестве неограничивающего примера лечение человека или животных можно проводить в виде однократного или периодического дозирования по меньшей мере одного антитела по настоящему изобретению приблизительно от 0,1 до 100 мг/кг, или любой диапазон, значение или часть этого диапазона, в сутки, в течение по меньшей мере одного периода из 1-40 суток, или, альтернативно или дополнительно, по меньшей мере одного периода из 1-52 недель, или, альтернативно или дополнительно, по меньшей мере в течение одного периода из 1-20 лет, или любого их сочетания, с использованием однократной, инфузионной или повторяющейся доз.
Дозированные формы (композиции), пригодные для внутреннего введения, как правило, содержат от приблизительно 0,001 до приблизительно 500 мг активного ингредиента на единицу или контейнер. В этих фармацевтических композициях активный ингредиент, как правило, находится в количестве приблизительно 0,5-99,999% по массе от общей массы композиции.
В случае парентерального введения антитело можно составлять в виде раствора, суспензии, эмульсии, частицы, порошка или лиофилизированного порошка, предоставляемого совместно с фармацевтически приемлемым парентеральным носителем или отдельно от него. Примерами таких носителей являются вода, физиологический раствор, раствор Рингера, раствор декстрозы и приблизительно 1-10% сывороточный альбумин человека. Также можно использовать липосомы и неводные носители, такие как жирные масла. Носитель или лиофилизированный порошок может содержать добавки, которые поддерживают изотоничность (например, хлорид натрия, маннит) и химическую стабильность (например, буферы и консерванты). Состав стерилизуют известными или пригодными способами.
Пригодные фармацевтические носители описаны в самом последнем издании Κст^ηдΐοη'8 РНагта
- 37 019476 сеи!1са1 ^иенсек. А. Око1, которое является стандартным руководством для ссылок в данной области. Альтернативные способы введения.
В соответствии с настоящим изобретением для введения фармацевтически эффективных количеств по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 в соответствии с настоящим изобретением можно использовать множество известных и разработанных способов ведения. Несмотря на то что в последующем описании используют легочный способ введения, в соответствии с настоящим изобретением можно использовать другие способы введения с приемлемыми результатами. Антитела против 1Ь-23р19 по настоящему изобретению можно доставлять в носителе в качестве раствора, эмульсии, коллоида или суспензии или в качестве сухого порошка с использованием любого из множества устройств и способов, пригодных для введения посредством ингаляции или других способов, описанных в настоящем описании или известных в данной области.
Парентеральные составы и введение.
Составы для парентерального введения могут содержать в качестве общих эксципиентов стерильную воду или физиологический раствор, полиалкиленгликоли, такие как полиэтиленгликоль, масла растительного происхождения, гидрогенизированные нафталины и т.п. Водные или масляные суспензии для инъекции можно получать с использованием пригодного эмульгатора или увлажнителя и суспендирующего вещества в соответствии с известными способами. Средства для инъекции могут представлять собой нетоксичный не перорально вводимый разбавитель, такой как водный раствор, стерильный инъецируемый раствор или суспензия в растворителе. В качестве пригодного носителя или растворителя допустимы вода, раствор Рингера, изотонический физиологический раствор и т.д.; в качестве обычного растворителя или суспендирующего растворителя можно использовать стерильное нелетучее масло. Для этих целей можно использовать нелетучее масло и жирную кислоту любого типа, в том числе нейтральные или синтетические либо полусинтетические жирные масла или жирные кислоты; нейтральные или синтетические либо полусинтетические моно- или ди- или триглицериды. Парентеральное введение известно в данной области и включает, но не ограничивается ими, общепринятые способы инъекций, безыгольное устройство для инъекций с давлением газа, как описано в патенте США № 5851198, и лазерное перфорационное устройство, как описано в патенте США № 5839446, включенном в настоящее описание в качестве ссылки в полном объеме.
Альтернативные способы доставки.
Кроме того, это изобретение относится к введению по меньшей мере одного антитела против Ш23р19 посредством парентерального, подкожного, внутримышечного, внутривенного, внутрисуставного, интрабронхиального, интраабдоминального, интракапсулярного, внутрихрящевого, внутриполостного, внутрибрюшного, внутримозжечкового, интрацеребровентрикулярного способа, введения в толстую кишку, интрацервикального, внутрижелудочного, внутрипеченочного, внутримиокардиального, внутрикостного, внутритазового, интраперикардиального, внутрибрюшинного, интраплеврального способа, введения в простату, внутрилегочного, интраректального, интраренального, интраретинального, интраспинального, интрасиновиального, внутригрудного, внутриматочного, внутрипузырного способа, введения внутрь пораженных тканей, болюсного, вагинального, ректального способа, буккального, подъязычного, интраназального или чрескожного способов. По меньшей мере одну композицию антитела против Ш-23р19 можно получать для применения с парентеральным (подкожным, внутримышечным или внутривенным) или любым другим способом введения, особенно в форме жидких растворов или суспензий; для применения с вагинальным или ректальным способом введения, особенно в полутвердых формах, таких как, но не ограничиваясь ими, кремы и суппозитории; с буккальным введением или сублингвальным введением, таким как, но не ограничиваясь ими, в форме таблеток или капсул; или с интраназальным способом, таким как, но не ограничиваясь ими, формы порошков, капель в нос или аэрозолей или определенных средств; или с чрескожным способом, таким как, но не ограничиваясь ими, гель, мазь, лосьон, суспензия или система для доставки посредством пластыря с химическими усиливающими доставку веществами, такими как диметилсульфоксид, либо для модификации структуры кожи, либо для повышения концентрации лекарственного средства в трансдермальном пластыре (Лшдтдег е! а1. Ιη Бгид РегтеаНог! Εηΐιηικχιικηΐ. Нией, Б.8., Ебк., р. 59-90 (Магсе1 Беккет, 1пс. Νον Уогк 1994, включенная в настоящее описании в качестве ссылки в полном объеме), или с окисляющими средствами, которые облегчают нанесение составов, содержащих белки и пептиды, на кожу (УО 98/53847), или посредством применения электрического поля для обеспечения временных транспортных путей, таких как электропорация, или для повышения подвижности заряженных лекарственных средств через кожу, таких как ионофорез, или посредством применения ультразвука, такого как сонофорез (патенты США № 4309989 и 4767402) (приведенные выше публикации и патенты включены в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме).
- 38 019476
Легочное/назальное введение.
В случае легочного введения предпочтительно по меньшей мере одну композицию антитела против ГЬ-23р19 доставляют в виде частиц с размером, эффективным для достижения наиболее низких дыхательных путей легкого или пазух. В соответствии с этим изобретением для введения лекарственного средства посредством ингаляции по меньшей мере одно антитело против ГЬ-23р19 можно доставлять с помощью любого из множества устройств для ингаляции или назальных устройств, известных в данной области.
Эти устройства, способные приводить к оседанию распыленных составов в полости пазухи или альвеолах пациента, включают ингаляторы с измеряемой дозой, устройства для распыления, генераторы сухих порошков, распылителей и т.п. Другие устройства, пригодные для обеспечения легочного или назального введения антител, также известны в данной области. Во всех таких устройствах можно использовать пригодные для введения составы для измельчения антитела в аэрозоль. Такие аэрозоли могут состоять либо из растворов (как водных, так и неводных), либо из твердых частиц.
В ингаляторах с измеряемой дозой, таких как ингалятор с измеряемой дозой Vеηΐο1^η®, как правило, используется газ для распыления, и для них требуется воздействие в процессе вдыхания (см., например, νθ 94/16970, νθ 98/35888). В ингаляторах для сухого порошка, таких как ТигЬика1ег™ (Айга), Яо1аба1ег® (О1ахо), ЭЬкик® (О1ахо), ингалятор 8р1гоз™ (Эига), устройства, поставляемые !пНа1е Ткегареи11С5, и ингалятор для порошка 8р1пЪа1ег® (Ркопк), осуществляют воздействие при вдохе смешанного порошка (из 4668218 Айга, ЕР 237507 Айга, νθ 97/25086 О1ахо, νθ 94/08552 Эига, И8 5458135 ^к, νθ 94/06498 Р18оп8, включенные в настоящее описании в качестве ссылок в полном объеме). Устройства для распыления, такие как АЕЯх™ Агаб1дт, устройство для распыления ИНгауеШ® (МаШпскгоб!) и устройство для распыления Асогп II® (Мащиез! Меб1са1 Ргобис!з) (И8 5404871 Агаб1дт, νθ 97/22376), все из указанных выше ссылок включены в настоящее описание в полном объеме, производят аэрозоли из растворов, в то время как ингаляторы с измеряемой дозой и т.д. формируют аэрозоли в виде мелких частиц. Подразумевают, что эти конкретные примеры коммерчески доступных устройств для ингаляции являются репрезентативными примерами конкретных устройств, пригодных для применения на практике этого изобретения, и они не предназначены для ограничения объема этого изобретения.
Предпочтительно композицию, содержащую по меньшей мере одно антитело против ГЕ-23р19, доставляют посредством ингалятора с сухим порошком или устройства для распыления.
Существует несколько желательных характеристик устройства для ингаляции в целях введения по меньшей мере одного антитела по настоящему изобретению. Например, доставка с помощью устройства для ингаляции преимущественно является надежной, воспроизводимой и точной. Устройство для ингаляции необязательно может доставлять частицы небольших размеров, например менее чем приблизительно 10 мкм, предпочтительно приблизительно 1-5 мкм, для возможности правильного вдыхания.
Введение композиций антитела против ГЕ-23р19 в качестве аэрозоля.
Аэрозоль, содержащий композицию антитела против ГЕ-23р19, можно получать посредством пропускания суспензии или раствора по меньшей мере одного антитела против ГЕ-23р19 через распылитель под давлением. Для достижения требуемого выхода и размера частиц размер и форму распылителя, применяемое давление и скорость подачи жидкого вещества можно подбирать. Электрораспыление можно проводить, например, с помощью электрического поля, соединенного с устройством для подачи в виде капилляра или распылителя. Предпочтительно частицы по меньшей мере одной композиции антитела против ГЕ-23р19, доставленные с помощью устройства для распыления, обладают размером частиц менее приблизительно 10 мкм, предпочтительно в диапазоне приблизительно от 1 до приблизительно 5 мкм и наиболее предпочтительно приблизительно от 2 до приблизительно 3 мкм.
Составы по меньшей мере одной композиции антитела против ГЕ-23р19, пригодные для применения с устройством для распыления, как правило, включают композиции антитела в водном растворе в концентрации от приблизительно 0,1 до приблизительно 100 мг по меньшей мере одной композиции антитела против ГЕ-23р19 на 1 мл раствора или 1 мг/г, или любой диапазон, значение или часть этого диапазона. Состав может включать вещества, такие как эксципиент, буфер, изотоническое вещество, консервант, поверхностно-активное вещество и предпочтительно цинк. Также состав может включать эксципиент или вещество для стабилизации композиции антитела, такие как буфер, восстановитель, объемный белок или углевод. Объемные белки, пригодные для составления композиций антитела, включают альбумин, протамин или сходные с ними. Типичные углеводы, пригодные для составления композиций антитела, включают сахарозу, маннит, лактозу, трегалозу, глюкозу или сходные с ними. Состав композиции антитела также может включать поверхностно-активное вещество, которое может снижать или предотвращать поверхностно-индуцируемую агрегацию композиции антитела, вызванную распылением раствора при образовании аэрозоля. Можно использовать различные общепринятые поверхностно-активные вещества, такие как сложные эфиры жирных кислот и спиртов полиоксиэтилена и сложные эфиры жирных кислот сорбита полиоксиэтилена. Количества, как правило, находятся в диапазоне между 0,001 и 14 мас.% состава. Особенно предпочтительные поверхностно-активные вещества для целей этого изобретения представляют собой моноолеат сорбитана полиоксиэтилена, полисорбат 80, полисорбат 20 или сход
- 39 019476 ные с ними. Дополнительные вещества, известные в данной области для составления белка, такие как антитела против 1Ь-23р19, или определенные участки или варианты также можно включать в состав.
Введение композиций антитела против 1Ь-23р19 с помощью устройства для распыления.
Композиции антитела по этому изобретению можно вводить посредством устройства для распыления, такого как струйное устройство для распыления или ультразвуковое устройство для распыления. Как правило, в струйном устройстве для распыления используют источник сжатого воздуха для создания воздушного потока через отверстие с высокой скоростью. По мере того как газ расширяется после распылителя, создается область с низким давлением, которая прокачивает раствор композиции антитела через капиллярную трубку, соединенную с емкостью с жидкостью. При нахождении в трубке поток жидкости из капиллярной трубки разделяется на нестабильные струи и капли, создавая аэрозоль. Для достижения требуемых эксплуатационных характеристик из данного струйного устройства для распыления можно использовать ряд форм, скоростей потока и типов дефлектора. В ультразвуковом устройстве для распыления используют высокочастотную электрическую энергию для достижения вибрационной механической энергии, как правило, с использованием пьезоэлектрического преобразователя. Эту энергию передают составу композиции антитела либо непосредственно, либо посредством передающей жидкости, получая аэрозоль, включающий композицию антитела. Предпочтительно частицы композиции антитела, доставляемые посредством устройства для распыления, обладают размером частиц менее чем приблизительно 10 мкм, предпочтительно в диапазоне от приблизительно 1 до приблизительно 5 мкм и наиболее предпочтительно приблизительно от 2 до приблизительно 3 мкм.
Составы по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19, пригодные для применения совместно с либо струйным, либо ультразвуковым устройством для распыления, как правило, включают концентрацию от приблизительно 0,1 до приблизительно 100 мг по меньшей мере одного белка антитела против 1Ь-23р19 на 1 мл раствора. Состав может включать вещества, такие как эксципиент, буфер, изотоническое вещество, консервант, поверхностно-активное вещество и предпочтительно цинк. Также состав может включать эксципиент или вещество для стабилизации композиции по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19, такие как буфер, восстановитель, объемный белок или углевод. Объемные белки, пригодные для составления композиции по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19, включают альбумин, протамин или сходные с ними. Типичные углеводы, пригодные для составления по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19, включают сахарозу, маннит, лактозу, трегалозу, глюкозу или сходные с ними. Состав по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 также может включать поверхностноактивное вещество, которое может снижать или предотвращать поверхностно-индуцируемую агрегацию по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19, вызываемую распылением раствора при образовании аэрозоля. Можно использовать различные общепринятые поверхностно-активные вещества, такие как сложные эфиры жирных кислот и спиртов полиоксиэтилена и сложные эфиры жирных кислот сорбита полиоксиэтилена. Количества, как правило, находятся в диапазоне между приблизительно 0,001 и 14% по массе состава. Особенно предпочтительные поверхностно-активные вещества для целей этого изобретения представляют собой моноолеат сорбитана полиоксиэтилена, полисорбат 80, полисорбат 20 или сходные с ними. Также в состав можно включать дополнительные вещества, известные в данной области, для составления белка, такие как антитела против 1Ь-23р19, или определенные участки или варианты.
Введение композиции антитела против 1Ь-23р19 посредством ингалятора с измеряемой дозой.
В ингаляторе с измеряемой дозой (ΜΌΙ) пропеллент, по меньшей мере одно антитело против 1Ь23р19 и любые эксципиенты или другие добавки находятся в контейнере в виде смеси, включающей сжиженный сжатый газ. Действие дозирующего клапана приводит к высвобождению смеси в качестве аэрозоля, предпочтительно содержащего частицы с размером, находящимся в диапазоне от менее чем приблизительно 10 мкм, предпочтительно от приблизительно 1 до приблизительно 5 мкм и наиболее предпочтительно от приблизительно 2 до приблизительно 3 мкм. Требуемый размер частиц аэрозоля можно получать с использованием состава композиции антитела, изготавливаемого различными способами, известными специалистам в данной области, включающими измельчение на струйной мельнице, высушивание распылением, конденсацию в критической точке или сходные с ними. Предпочтительные ингаляторы с измеряемой дозой включают ингаляторы, изготавливаемые 3М или С1ахо, и в которых применяют пропеллент на основе гидрофторуглерода. Составы по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 для применения совместно с устройством для ингаляции с измеряемой дозой, как правило, включают высокодисперсный порошок, содержащий по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 в виде суспензии в неводной среде, например, суспендированное в пропелленте с помощью поверхностноактивного вещества. Пропеллент может представлять собой любое общепринятое вещество, используемое для этой цели, такое как хлорфторуглерод, гидрохлорфторуглерод, гидрофторуглерод или углеводород, в том числе трихлорфторметан, дихлордифторметан, дихлортетрафторэтанол и 1,1,1,2тетрафторэтан, НРА-134а (гидрофторалкан-134а), НРА-227 (гидрофторалкан-227) или сходные с ними. Предпочтительно пропеллент представляет собой гидрофторуглерод. Поверхностно-активное вещество можно выбирать для стабилизации по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 в виде суспензии в пропелленте для защиты активного вещества от химической деградации и т.п. Пригодные поверхностноактивные вещества включают триолеат сорбитана, соевый лецитин, олеиновую кислоту или сходные с
- 40 019476 ними. В некоторых случаях раствор аэрозоля является предпочтительным с использованием растворителей, таких как этанол. Дополнительные вещества, известные в данной области для составления белка, также можно включать в состав. Средний специалист в данной области поймет, что способы по настоящему изобретению можно осуществлять посредством легочного введения композиции по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 посредством устройств, которые не описаны в настоящем описании.
Пероральные составы и введение.
Составы для перорального введения основаны на совместном введении адъювантов (например, резорцина и неионных поверхностно-активных веществ, таких как олеиловый эфир полиоксиэтилена и эфир н-гексадецилполиэтилена) для искусственного повышения проницаемости стенок кишечника, а также на совместном введении ингибиторов ферментов (например, ингибиторов панкреатического трипсина, диизопропилфторфосфата (ΌΡΡ) и тразилола) для ингибирования ферментативной деградации. Составы для доставки гидрофильных веществ, включающих белки и антитела и сочетание по меньшей мере двух поверхностно-активных веществ, предназначенные для перорального введения, введения на слизистую, для назального, легочного, вагинального, трансмембранного или ректального введения, описаны в патенте США 6309663. Активный компонент соединения дозированной формы твердого типа для перорального введения можно смешивать по меньшей мере с одной добавкой, в том числе с сахарозой, лактозой, целлюлозой, маннитом, трегалозой, рафинозой, мальтитом, декстраном, крахмалами, агаром, аргинатами, хитинами, хитозанами, пектинами, трагакантовой камедью, гуммиарабиком, желатином, коллагеном, казеином, альбумином, синтетическим или полусинтетическим полимером и глицеридом. Эти дозированные формы также могут содержать добавки другого типа(ов), например неактивный разбавитель, смазывающее вещество, такое как стеарат магния, парааминобензойная кислота, консервант, такой как сорбиновая кислота, аскорбиновая кислота, альфа-токоферол, антиоксидант, такой как цистеин, дезинтегрирующее вещество, связующее вещество, загуститель, буферное средство, подсластитель, вкусовую добавку, ароматизирующую добавку и т.д.
Таблеткам и пилюлям можно дополнительно придавать форму покрытых растворимой в кишечнике оболочкой препаратов. Жидкие препараты для перорального введения включают эмульсию, сироп, эликсир, суспензию и растворимые препараты, приемлемые для медицинского применения. Эти препараты могут содержать неактивные разбавители, обычно используемые в указанной области, например воду. Также в качестве систем для доставки лекарственного средства для инсулина и гепарина описаны липосомы (патент США № 4239754). Позднее, для доставки фармацевтических средств применили микросферы из искусственных полимеров смешанных аминокислот (протеноидов) (патент США № 4925673). Более того, в данной области известны соединения носителей, описанные в патенте США № 5879681 и патенте США № 55871753 и используемые для пероральной доставки биологически активных веществ.
Составы и введение на слизистую оболочку.
Состав для перорального введения биологически активного вещества инкапсулируют в один или несколько эксципиентов на основе биологически совместимых полимеров или сополимеров, предпочтительно биологически деградируемого полимера или сополимера, с получением микрокапсул, которые вследствие соответствующего размера полученных микрокапсул приводят к достижению веществом скоплений лимфатических фолликулов и захвату вещества скоплениями лимфатических фолликулов, иначе известных как Пейеровы бляшки или САБТ животного без утраты эффективности при прохождении вещества через желудочно-кишечный тракт. Сходные скопления лимфатических фолликулов можно найти в бронхиальных трубках (ВАЬТ) и в толстом кишечнике. Описанные выше ткани, как правило, называют ассоциированными со слизистой оболочкой лимфоретикулярными тканями (МАЬТ). Для всасывания через поверхности слизистых оболочек композиции и способы введения по меньшей мере одного антитела против 1Ь-23р19 включают эмульсию, содержащую множество субмикронных частиц, мукоадгезивную макромолекулу, биологически активный пептид и водную однородную фазу, которая обеспечивает всасывание через поверхности посредством осуществления адгезии к слизистой оболочке частиц эмульсии (патенты США № 5514670). Поверхности слизистых оболочек, пригодные для применения эмульсий по настоящему изобретению, могут включать корнеальный, конъюнктивальный способ введения, введение на слизистую оболочку щеки, сублингвальный, назальный, вагинальный, легочный, желудочный, кишечный и ректальный способы введения. Составы для вагинального или ректального введения, например суппозитории, в качестве эксципиентов могут содержать, например, полиалкиленгликоли, вазелин, масло какао и т.п. Составы для интраназального введения могут представлять собой твердые составы и в качестве эксципиентов могут содержать, например, лактозу или они могут представлять собой водные или масляные растворы в виде капель для носа. В случае введения на слизистую оболочку щеки эксципиенты включают сахара, стеарат кальция, стеарат магния, прежелатинизированный крахмал и т.п. (патенты США № 5849695).
Трансдермальные составы и введение.
В случае чрескожного введения по меньшей мере одно антитело против 1Ь-23р19 инкапсулируют в средство для доставки, такое как липосома или полимерные наночастицы, микрочастица, микрокапсула или микросферы (в собирательном значении обозначаемые как микрочастицы, если нет иных указаний). Известно множество пригодных средств, включающих микрочастицы, изготовленные из синтетических
- 41 019476 полимеров, таких как полигидроксикислоты, такие как полимолочная кислота, полигликолевая кислота и их сополимеры, полиортоэфиры, полиангидриды и полифосфазены и нейтральные полимеры, такие как коллаген, полиаминокислоты, альбумин и другие белки, альгинат и другие полисахариды и их сочетание (патенты США № 5814599).
Введение и составы для пролонгированного введения.
Может быть желательной доставка соединения по настоящему изобретению субъекту в течение пролонгированных периодов времени, например в течение периодов от одной недели до одного года при однократном введении. Можно использовать различные дозированные формы с замедленным высвобождением, депонируемые или имплантируемые дозированные формы. Например, дозированная форма может содержать фармацевтически приемлемую нетоксичную соль соединений, которая обладает низкой растворимостью в жидкостях организма, например (а) кислотно-аддитивную соль с многоосновной кислотой, такой как фосфорная кислота, серная кислота, лимонная кислота, винно-каменная кислота, таниновая кислота, памовая кислота, альгиновая кислота, полиглутаминовая кислота, нафталин моно- или дисульфоновые кислоты, полигалактуроновая кислота и т.п.; (Ь) соль с поливалентным катионом металла, такого как цинк, кальций, висмут, барий, магний, алюминий, медь, кобальт, никель, кадмий и т.п., или с органическим катионом, образованным, например, из Ν,Ν'-дибензилэтилендиамина или этилендиамина; или (с) сочетание (а) и (Ь), например соль танната цинка. Кроме того, соединения по настоящему изобретению или предпочтительно относительно нерастворимая соль, такая как соли, описанные выше, может быть изготовлена в геле, например в геле моностеарата алюминия, например, с кунжутным маслом, пригодным для инъекции. Особенно предпочтительные соли представляют собой соли цинка, соли танната цинка, соли памоата и т.п. Другой тип депонируемого состава с замедленным высвобождением для инъекций может содержать соединение или соль, диспергированную для инкапсулирования в медленно деградируемом нетоксичном неантигенном полимере, таком как полимер полимолочной кислоты и полигликолевой кислоты, например, как описано в патенте США № 3773919. Соединения или предпочтительно относительно нерастворимые соли, такие как соли, описанные выше, также можно изготавливать в драже на основе силастика с холестериновым матриксом, в частности, для применения у животных.
Дополнительные составы с медленным высвобождением, депонируемые или имплантируемые составы, например газовые или жидкостные липосомы, известны в литературе (патенты США № 5770222 и 8и8!атеб апб Сои!го11еб Ре1еа8е Эгид Ьейуегу Зуйепъ. ЬР. РоЬиъоп еб., Магсе1 Эеккег. 1пс, Ν.Υ., 1978).
После описания, в целом, этого изобретения оно будет более понятным с помощью следующих примеров, которые предоставлены в качестве иллюстрации и не предназначены для ограничения.
Примеры
Пример 1. Выделение человеческих специфичных антител против 1Ь-23 с помощью фагового дисплея.
Основные способы описаны для селекции антигенспецифичных антител из библиотек НиСАЬ™, созданных в МогрйоЗук (Кпарр1к е! а1., 2000, КгеЬк е! а1., 2001, РаисйепЬегдег е! а1., 2003). Для селекции антител против рекомбинантного 1Ь-23 человека (йг1Ь-23) использовали специфичные к УЪ-участку субпулы библиотеки НиСАЬ Оо1б™ РаЬ (Кге1/5сйтаг & уоп Рибеп, 2002). Использовали несколько различных стратегий селекции и они включают:
1) селекцию против рекомбинантного белка ЫЬ-23, который был иммобилизован непосредственно на пластике, с предварительной адсорбцией библиотеки на рекомбинантный белок 1Ь-12 человека (Ы1Ь12), также адсорбированном непосредственно на пластике, или без нее. Рекомбинантные белки ЫЬ-23 и ЫЬ-12 были получены в Сеп!осог;
2) селекцию с рекомбинантным человеческим белком 1Ь-23 в растворе с последующим выделением связанного фага захватом белка ЫЬ-23 иммобилизованным Ьг1Ь-12р40тАЬ. Селекцию проводили с предварительной адсорбцией библиотеки на рекомбинантном белке йг1Ь-12, захваченным тем же тАЬ, либо без нее;
3) селекцию с химически биотинилированным белком йг1Ь-23 в растворе с последующим улавливанием связанного фага покрытыми 8А магнитными гранулами. Селекцию проводили с белком йг1Ь-12 или без него в молярном избытке в качестве конкурента.
Выделенную фагмидную ДНК превращали целиком в экспрессирующий РаЬ вектор и отдельные клоны после трансформации подвергали скринингу в отношении связывания с йг1Ь-23 и не с йг1Ь-12. Секвенирование положительных клонов выявило 76 уникальных РаЬ.
Пример 2. Охарактеризация РаЬ.
Получали положительные РаЬ и очищали, как описано ранее (Кпарр1к е! а1., 2000, РгеЬк е! а1., 2001, РаисйепЬегдег е! а1., 2003) и специфичность связывания с йг1Ь-23, но не с йг1Ь-12 или с субединицей р40 йг1Ь-12 (Ыр40) подтверждали в анализах, сходных с анализами, описанными в примере 3, ниже. Подтвержденные РаЬ тестировали в отношении (1) ингибирования связывания йг1Ь-23 с человеческим рецептором для 1Ь-23 (ЫЬ-23Р) или с человеческим рецептором для ΣΠ-12β 1 (ЫЬ-12Р31), (2) отсутствия ингибирования связывания йг1Ь-12 с 1Ь-12Р1Ьв1, (3) ингибирования связывания йг1Ь-23 с клетками ТАЬЬ-104 естественным образом эксперессирующих 1Ь-23Р и 1Ь-12Рв 1, и (4) аффинность связывания с
- 42 019476
МЬ-23, МЬ-12 и субъединицей Нгр40. Специфичность и аффинность связывания приведена в табл. 1 и ингибирование связывания МЬ-23 с ЫЬ-23К приведено в табл. 2. РаЬ12А в табл. 1 представляет собой стандарт для сравнения, источником которого является специфичное к ГЬ-12р40 тАЬ. 1Ь-23К-РС в табл. 2 представляет собой стандарт для сравнения, соответствующий внеклеточному домену ГЬ-23К человека, слитому с Рс человека.
Главным образом, анализы ингибирования рецептора были сходными с анализами, описанными ниже в примере 4 для производных тАЬ для этих РаЬ. Один дополнительный анализ проводили для измерения ингибирования связывания гЫЬ-23 с клетками ТАЬЬ 104. Эти клетки экспрессируют как ГЬ-23 человека, так и рецепторы для ГЬ-12К-бета 1. 10 из 13 РаЬ-кандидатов обладали требуемым профилем активности, представляющим собой отсутствие реактивности с белками ГЬ-12 или р40 человека в любом анализе, и, по меньшей мере, частичным ингибированием связывания МЬ-23 с рецептором для ГЬ-23. Последовательности СЭК шести из РаЬ (4083, 4190, 4205, 4217, 4649 и 4658) представлены в табл. 4 (полужирный шрифт). Полные последовательности У-области для этих РаЬ представлены в табл. 8.
Продукция РаЬ в форме 1дО1 человека.
РаЬ-кандидаты клонировали в векторы для структур тАЬ 1дО1/каппа или лямбда и продуцировали временной трансфекцией в клетках НЕК293 для последующего анализа в качестве тАЬ. В общем, одиннадцать из 13 активных РаЬ показывают требуемый профиль в качестве тАЬ. Они являются специфичными для к 1Ь-23 и, по меньшей мере, частично ингибируют связывание 1Ь-23 человека с слитым белком человеческий ГЬ-23К-Рс (табл. 3). Анализы и их результаты приведены в следующих ниже примерах.
Пример 3. Специфичность к субъединицам ЫЬ-23р19 тАЬ, полученного посредством фагового дисплея антитела.
Очищенные тАЬ мыши против ЫЬ-23 оценивали в анализе улавливания ЕЫЗА в целях определения их антигенной специфичности к субъединицам. В кратком изложении, тАЬ против 1Ь-23 наносили на планшеты и инкубировали со 100 нг/мл МЬ-23, Ьг1Е-12 и 11гр40 соответственно. После инкубации с биотинилированным тАЬ против-р40 связывание подвергали детекции с использованием НКРконъюгированного стрептавидина. тАЬ против-р40 и тАЬ против 1Ь-12 (20С2, Са1а1од №. 555065, ΒΌ Рйагштдеп, Зап Э1едо, СА) с известной специфичностью использовали в качестве контролей.
На фиг. 1А и 1В показана специфичность связывания для двух из этих тАЬ, М0К04083 (то же, что и 4083) и М0К04190 (то же, что и 4190). На фиг. 1А показано, что тАЬ специфично связывают МЬ-23, но не МЬ-П или мономер 11гр40. Поскольку для секреции из клеток млекопитающих субъединица ГЬ23р19 должна ковалентно связываться с р40, тАЬ против 1Ь-23, которые не распознают мономер р40, должны связывать либо субъединицу 1Ь-23р19 отдельно, либо объединенный эпитоп гетеродимера р19р40. Таким образом, эти 1Ь-23 тАЬ обозначают как тАЬ против 1Ь-23р19. При сравнении, все 3 белка (МЬ-23, МЬ-12 и 11гр40) связывались с тАЬ 12А специфичным нейтрализующим антителом против р40 человека. На фиг. 1В показано, что указанные тАЬ не связываются с мышиным 1Ь-23 или с мышиным р40. Наоборот, иммобилизованные тАЬ обладают сходными кривыми связывания с МЬ-23 в растворе (фиг. 2), что согласуется с их сравнимой с РаЬ аффинностью связывания (табл. 1). Специфичность связывания этих и других тАЬ-кандидатов приведена в табл. 3.
Пример 4. Ингибирование связывания рецептора для 1Ь-23 посредством тАЬ против 1Ь-23р19.
Для того чтобы показать, что тАЬ против 1Ь-23р19 представляют собой нейтрализующие антитела против субъединицы р19, тАЬ тестировали в отношении ингибирования ими связывания 1Ь-23 и ГБ-23К. В этом эксперименте слитый белок ГЬ-23К-РС человека иммобилизовывали на планшете. Этот слитый белок состоит из внеклеточного домена рецептора для 1Ь-23 человека, слитого с Рс-сегментом человека. В планшет добавляли биотинилизованный МЬ-23 либо отдельно, либо после предварительной инкубации с индивидуальными тАЬ против 1Ь-23р19. В качестве положительного контроля использовали растворимый ГБ-23К (ГЬ-23К-Рс). Связывание 1Ь-23 выявляли с помощью НКР-конъюгированного стрептавидина. Как показано на фиг. 3А, тАЬ М0К04083 и М0К04190 препятствуют связыванию 1Ь-23/1Ь-23К с эффективностью, приблизительно в 3 раза меньшей эффективности растворимого ГБ-23К-РС. Не происходило ингибирования посредством В21М, тАЬ с неродственной специфичностью. Напротив, когда ΙΕ-12Κβ1 иммобилизовывали на планшете, эти тАЬ не ингибировали связывание ΙΕ-23/ΙΕ-12Κβ1 (фиг. 3В). Связывание 1Ь-23 ингибировалось нейтрализующим р40 тАЬ ('ΝΤ0 1275 (то же, что и тАЬ 12А), как и ожидали. Аналогично, эти тАЬ не блокируют связывание ΙΕ-12/ΙΕ-12Κβ1 (фиг. 3С). ('ΝΤ0 1275 снова служило в качестве положительного контроля. Селективное ингибирование связывания 1Ь-23/1Ь23К и отсутствие противодействия связыванию 1Ь-12 или 1Ь-23 с ГЬ-12Кр1 далее показывает, что эти тАЬ против ГЬ-23р19 не связывают субъединицу р40 и, таким образом, представляют собой нейтрализующие антитела против ГЬ-23р19 человека. Исследования ингибирования рецептора с этими тАЬ обобщены в табл. 3.
Пример 5. Нейтрализация биологической функции Ш-23 посредством тАЬ против !Б-23р19.
Известно, что Ш-23 индуцирует внутриклеточное фосфорилирование ЗΤΑΤ3 и продукцию Ш-17 Тклетками. Таким образом, тАЬ против ГЬ-23р19 тестировали в отношении их способности ингибировать эти биологические функции Ш-23 человека.
- 43 019476
В одном эксперименте естественные киллерные (ЫКЬ) клетки стимулировали »-23 либо отдельно, либо после предварительной инкубации с тАЬ МОК0408 3 и МОКО 190 в концентрации 20 и 10 мкг/мл соответственно. МАЬ 12А (1 мкг/мл) представляло собой положительный контроль, и С8.3 (10 мкг/мл), нейтрализующее тАЬ против р40 человека, представляло собой отрицательный контроль. Обработанные клетки окрашивали конъюгированными с флуорохромом антителами против фосфо-ЗТАТ3 и анализировали посредством внутриклеточной проточной цитометрии (фиг. 4). Эти тАЬ полностью ингибируют фосфорилирование ЗТАТ3, хотя и с более низкой эффективностью, чем нейтрализующее тАЬ 12А против р40. Более низкая эффективность 1Ь-23р19 тАЬ, вероятно, отражает их относительно слабую аффинность. В другом эксперименте свежие выделенные спленоциты мыши обрабатывали Ьт1Ь-23, предварительно инкубированным с титрованными тАЬ против 1Ь-23р19 или контрольными тАЬ. Ьт1Ь-23 без предварительной инкубации с антителом использовали в качестве положительного контроля. После 3 суток в культуре клеточные супернатанты собирали и анализировали посредством ЕЫЗА с использованием двойного набора 1Ь-17 ЕЫЗА (Κ&Ό ЗузГетз). Как показано на фиг. 5А, тАЬ против 1Ь-23р19 МОК04083 и МОК04190 ингибировали опосредуемую ЬтГЬ-23 продукцию 1Ь-17. Также эти тАЬ ингибировали продукцию 1Ь-17, индуцированную нативным 1Ь-23, продуцированным РВМС человека (фиг. 5В) и яванской макаки (фиг. 5С).
Для сравнения, 1Ь-23р19 тАЬ тестировали в отношении их способности ингибировать индуцируемую Ьт1Ь-12 продукцию 1ЕЫу. В кратком изложении, клетки ЫК92М1 обрабатывали 1Ь 12, предварительно инкубированным с титрованными тАЬ против 1Ь-23р19 или контрольными тАЬ (фиг. 6). В качестве отрицательного контроля использовали 1Ь-12 без предварительной инкубации с антителом и в качестве положительного контроля использовали СЫТО 1275. Анализ ЕЫЗА, проведенный через 24 ч после стимуляции, показал отсутствие эффекта тАЬ против 1Ь-23р19 МОК04083 и 4190 на индуцируемую 1Ь-12 продукцию 1ЕЫу, демонстрируя, что антитела не связывают и не нейтрализуют субъединицу р40, общую для 1Ь-12 и 1Ь-23. Результаты этих анализов приведены в табл. 3.
Пример 6. Идентификация эпитопа тАЬ против 1Ь-23р19.
Конкурентный анализ связывания проводили в целях определения наличия связывания тАЬ против 1Ь-23р19 со сходными или отличающимися эпитопами 1Ь-23р19. Результаты для тАЬ МОК04083, МОК04190 и МОК04217 представлены на фиг. 7. тАЬ против 1Ь-23 наносили по отдельности на планшеты для ЕЬГЗА. Добавляли конкурирующие тАЬ, а затем добавляли биотинилированный Ьт1Ь-23. Для положительного контроля в качестве конкурирующего тАЬ использовали то же тАЬ, что и для нанесения (собственная конкуренция). Связывание 1Ь-23 выявляли с использованием стрептавидина. Все три тАЬ показывают перекрестную конкуренцию в различной степени, демонстрируя связывание с пространственно разделенными участками.
Пример 7. Созревание аффинности нейтрализующих ЕаЬ-кандидатов.
ЕаЬ МОК04083, 04190, 04649 и 04658 выбирали для независимого созревания аффинности на основе указанной выше охарактеризации как ЕаЬ, так и тАЬ. С использованием кассетного элемента системы НиСа1™ (Кпарр1к е! а1., 2000) конструировали два варианта фаговых библиотек для каждого ЕаЬ, один для СИЕ3 вариабельного участка легкой цепи (УЬ) и другой для СИЕ2 вариабельного участка тяжелой цепи (УН). Эти библиотеки подвергали селекции против биотинилированного Ьт1Ь-23 в растворе при промывании и концентрации антигена различной строгости. Было выделено 35 уникальных ЕаЬ, каждый из которых показывал повышенную активность связывания относительно исходного родительского ЕаЬ. После этого во втором раунде скрининга было выбрано три дополнительных ЕаЬ (5267, 5268 и 5269; все варианты У1-СИК3 4083). Последовательности СИК исходных ЕаЬ, производные после созревания из библиотек У1-СИК3 или УН-СОЕ2, и варианты этих последовательностей представлены в табл. 4А и 4В. Полные последовательности У-области представлены в табл. 8.
Пример 8. Продукция и охарактеризация ЕаЬ после созревания аффинности.
выбранных ЕаЬ продуцировали, очищали и охарактеризовывали, по существу, как описано в примерах 2-4, выше. Десять из ЕаЬз привели к небольшому выходу и/или показали гетерогенные паттерны при гель-фильтрации, и они были исключены из последующего анализа. Остальные 28 ЕаЬ анализировали в отношении специфичности связывания, аффинности и ингибирования связывания рецептора. Все ЕаЬ были специфичными к 1Ь-23р19 и обладали в 10-500 раз большей аффинностью к Ьг1Ь-23, чем соответствующий исходный ЕаЬ (табл. 5 и 6). Все из них показали повышенные значения 1С50 в отношении ингибирования связывания Ьт1Ь-23 со слитым белком 1Ь-23К-ЕС и подобно исходным ЕаЬ не ингибировали связывание ни 1Ь-23, ни 1Ь-12 со слитым белком рецептора для 1Ь-12КЬ1 и Ес (табл. 5 и 6). Как и ожидали из этих результатов, ни один ЕаЬ не ингибировал связывание Ьт1Ь-23 с клетками ТАЕЬ-104, как определяли проточной цитометрией, что согласуется со сходным отсутствием ингибирования исходными ЕаЬ.
Пример 9. Продукция и охарактеризация АЬ после созревания аффинности в форме тАЬ.
из 35 выбранных ЕаЬ клонировали в структуры векторов тАЬ 1дС/каппа или лямбда и продуцировали в виде тАЬ посредством временной трансфекции в клетках НЕК293 для последующего анализа. Все антитела оценивали в отношении ингибирования продукции ГЬ-17, как описано в примере 5, выше,
- 44 019476 (табл. 7). В большинстве случаев каждое из производных после созревания было более эффективным, чем их соответствующее исходное антитело, с повышением 1С50 вплоть до 200 раз. Биохимические свойства 34 тАЬ оценивали посредством 8Э8-РАСЕ и гель-фильтрации в отношении признаков агрегации, гетерогенности цепей и неполного образования дисульфидных связей между тяжелыми и легкими цепями в шарнирной области.
Исходя из комбинированного анализа активности и биохимического анализа было выбрано 7 тАЬ для более детального анализа, по меньшей мере по одному от каждого исходного родительского антитела. Антитела ΜΟΚ05058 и 05059, полученные из библиотек разнообразия УЬ С1Ж3 ΜΟΚ04649, исключали из этого набора (см. примеры 10 и 11). Все выбранные кандидаты ингибировали продукцию ΙΉ-17, индуцированную природным ΙΉ-23 из РВМС человека (фиг. 8) и яванской макаки (не представлено). Как и ожидалось, все они ингибировали связывание йг1Ь-23 со слитым белком йг1Ь-23К и Рс с эффективностью, превышающей эффективность контрольного тАЬ против 1Ь-23А (фиг. 9). С возможным исключением ΜΟΚ05053 эти выбранные тАЬ не ингибировали биологическую активность нативного ΙΉ-12 (не представлено), что согласуется с отсутствием связывания тех тАЬ, доступных в качестве РаЬ, с белком йг1Ь-12.
Пример 10. Продукция и охарактеризация комбинированных тАЬ с перекрестными цепями.
Исходные РаЬ ΜΟΚ04190, 04649 и 4658 приводили к улучшенным РаЬ из библиотек разнообразия как УН СЭК2, так и УЬ С1Ж3. РаЬ, образованные из ΜΟΚ04649, представляли особый интерес вследствие относительно высокой активности из библиотек обоих типов. Однако исходный РаЬ ΜΟΚ04649 содержит предсказанный, но потенциально неблагоприятный участок Ν-связанного гликозилирования в УН СЭК2, который не представлен в каком-либо из 6 улучшенных РаЬ, образованных из библиотеки УН СЭК2. Для удаления этого участка гликозилирования и тестирования в отношении потенциальной улучшенной активности тяжелые цепи ΜΟΚ05042 и 05045 экспрессировали с легкими цепями ΜΟΚ05058 и 5059 в клетках НЕК293 (табл. 4С - тАЬ 42-58, 42-59, 45-58 и 45-59). Ни одно из сочетаний не было более эффективными антагонистами (продукция ΙΕ-17 и ингибирование связывания ΙΉ-23 с ΙΉ-23Κ), чем соответствующие тАЬ донорной цепи, и посредством гель-фильтрации все из них показали большую тенденцию к агрегации (не представлено).
Пример 11. Мутагенез с замещением выбранных тАЬ после созревания и их охарактеризация.
Аминокислотные замены вносили в выбранные тАЬ в целью устранения предсказанного участка Ν-связанного гликозилирования и/или для соответствия Ν-концов вариабельных участков их наиболее близкой последовательности У-области эмбрионального типа человека. Предсказанный участок Νсвязанного гликозилирования в Уй 5058 и 5059 (ΝΥ8 в СЭК2, то же, что и в исходном Уй ΜΟΚ04649) устраняли замещением аргинина (4649г) или аспарагиновой кислоты (46 9ά) аспарагином в положении 59 (прямая нумерация). Последовательности СЭК этих УН-участков представлены в табл. 4А и полные последовательности У-области приведены в табл. 8. Эти варианты продуцировали временной экспрессией в клетках НЕК293 и очищали аффинной хроматографией с белком А. Эти тАЬ показали повышенную эффективность относительно исходных антител в отношении их ингибирования продукции ΙΕ-17. Замещение аргинина в ΜΟΚ05059 имело наилучший профиль исходя из активности и биохимической охарактеризации, и это тАЬ назвали 3759 (табл. 4С).
ΜΛ6 5040 и 3759 выбирали в качестве наивысших позиций исходя из их активности и биохимической охарактеризации. Аминокислотные замены вносили для соответствия последовательности антитела эмбрионального типа человека и замену одной аминокислоты проводили в = УЬ-участке 5040 для обратной мутации каркасной области до эмбрионального типа, замещая валин треонином в положении 86.
Аминокислотные последовательности, измененные по сравнению с исходным тАЬ, были следующими:
Антитело УН УЬ
5040 Е(3) на О ϋ(1) на Е, Е (86) на V
3759 О(1)Е(3) на Е<2 ϋ(1)Ι(2) на 03
Замена Е3 на О в УН обоих антител представляет собой обратную замену Е, внесенную при клонировании РаЬ в вектор для тАЬ. В этом положении в исходных РаЬ находилась О и ее можно использовать в качестве варианта для замещения Е в различных тАЬ. Эти варианты обозначают как 5040(ЕЕЕ и 3759ΉΎ Составляющими У-областями 5040(ЕЕЕ являются 5040 УН и 4190ЕУ УЕ (табл. 4С). Составляющими У-областями 3759ΕΩ/Ω8 являются 46491е УН и 5059Ω8 УЕ (табл. 4С). Последовательности СЭК и полных У-участков составляющих цепей обоих антител представлены в табл. 4 и 8 соответственно. Сходные замены можно идентифицировать для любого из кандидатов посредством сравнения с их предсказанными последовательностями эмбрионального типа человека.
тАЬ 5040(ЕЕЕ и 3759е Е(Е продуцировали посредством временной экспрессии в клетках НЕК293 и очищали аффинной хроматографией с белком А. Эти тАЬ полностью сохраняют специфичность к ΙΕ-23 человека относительно ΙΙ.-12 и р40, как представлено на фиг. 10. Эти тАЬ ингибируют связывание рекомбинантного ΙΕ-23 человека с Ж23К-РС и являются более эффективными, чем контроль тАЬ23А (фиг. 11А). Как ожидалось из профиля их специфичности, они не ингибируют связывание ΙΕ-23 (фиг.
- 45 019476
11В) или №12 (фиг. 11С) с Ш-12Кв1. В соответствии с этим паттерном ингибирования рецептора эти тАЬ не ингибируют индуцируемой Ш-12 продукции ΣΡΝγ из клеток ИК92М1 (фиг. 12), но они ингибируют индуцируемую как рекомбинантным (фиг. 13), так и нативным (фиг. 14) №23 продукцию Ш-17 из спленоцитов мыши. Также эти тАЬ показывают очень сильное ингибирование индукции Ш-17 нативным Ш-23 яванской макаки (фиг. 15), демонстрируя высокую степень перекрестной реактивности с Ш-23 из яванской макаки. Также эти тАЬ ингибировали фосфорилирование 8ТАТ3, индуцированное в ΝΚклетках рекомбинантным Ш-23 человека (не представлено).
тАЬ 5040''1 1'22 и 37591'12 12,2 распознают близко расположенные эпитопы на Ш-23, как показали по их ингибированию связывания тАЬ23А (фиг. 16А) и их реципрокной конкуренции друг с другом (фиг. 16В и 16С). Эпитоп тАЬ23А был картирован на р19 человека в области №-6105: [9,3,Н^6^[ЕΎЕI<^^6|05.
Результаты конкуренции показывают, что эпитопы для тАЬ 5040''1 1'22 и 3759Е,'<,'<'А находятся в одном участке.
Пример 12. Варианты кодирующих последовательностей для тАЬ 50402122 и 3759Е°;°8 и их охарактеризация.
Кодирующую последовательность вариабельных участков антител встраивали в три различных варианта кодирующих последовательностей в целях оценки влияния на экспрессию этих белков. В первом варианте использовались кодоны, полученные из исходной библиотеки, с несколькими нуклеотидными заменами для удаления консенсусных участков сплайсинга мРНК. Второй вариант, замену кодона эмбрионального типа (ОСЕ), конструировали выравниванием аминокислотной последовательности вариабельного участка с генами эмбрионального типа, идентифицируя наиболее близкое совпадение гена эмбрионального типа, и заменой кодонов в исходной кодирующей последовательности синонимическими кодонами, которые используют в гене эмбрионального типа. В положениях, где аминокислотный остаток не имел совпадений с генами эмбрионального типа, кодоном, который используется с наибольшей частотой в высокоэкспрессируемых белках человека, заменяли исходный кодон. Третий вариант кодонов конструировали заменой исходных кодонов антитела кодоном, который используется с наибольшей частотой в высокоэкспрессируемых белках человека. Каждый вариант кодона экспрессировался, как определяли посредством временной трансфекции в клетках НЕК293 и клетках СНО. Этот результат показывает, что в этих и, вероятно, других клетках-хозяевах могут быть установлены трансфектанты стабильной клеточной линии, и вариант с наиболее высокой экспрессией можно использовать для разработки продуцирующей клеточной линии. тАЬ оценивают, как описано в примере 11, в дополнение к другим функциональным анализам и анализам биохимических и биофизических свойств. В табл. 9 показаны вариабельные нуклеотидные последовательности тяжелой и легкой цепей для вариантов тАЬ 50402122 и 37591'12 22.
Для целей этого изобретения, 70-100% аминокислотную или нуклеотидную идентичность последовательностей (т.е. 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 или любой диапазон или значение в этом диапазоне) определяют с использованием пригодного компьютерного алгоритма, как известно в данной области.
Пример 13. Антитело против Ш23р19 в модели псориаза на мышах.
Вариант тАЬ 37591'12 22 оценивали в отношении его способности подавлять признаки псориаза в гуманизированной модели на мышах. Неповрежденную кожу от пациентов с псориазом трансплантировали иммунодефицитным мышам и после приживления трансплантатов запускали псориатический процесс посредством внутрикожной инъекции аутологичных активированных Т-клеток. Мышей лечили внутрибрюшинным введением один раз в неделю 10 мг/кг антитела. Контрольным мышам вводили носитель или циклоспорин А. Массу тела мышей оценивали раз в неделю.
После 3 недель введения мышей умерщвляли и трансплантированные биоптаты кожи оценивали в отношении толщины эпидермы, цитокератина-16 и количеств положительных по НЬА-ЭК и К1-67 клеток в эпидермисе.
Это исследование показывает, что антитело против Ш23р19 является эффективным в отношении ингибирования утолщения эпидермы и пролиферации кератиноцитов (например, окрашивание К1-67) в дозировке 10 мг/кг. Степень ингибирования была сравнима с ингибированием, достигаемым с помощью циклоспорина А. Введение антитела не было ассоциировано со значительным подавлением НЬА-ЭК или цитокератина-16. Введение циклоспорина А также не оказывало значимого эффекта на НЬА-ЭК и цитокератин-16. Эти данные подтверждают, что антитело может быть эффективным для подавления гиперплазии эпидермы при псориазе. Гуманизированная модель псориаза на мышах основана на экспериментах Агопе-8гайй е! а1., 1996, Оеппа1 1п)есОоп ойттипосуГек тбисек ркопакк, 1. С1т. Iпνекΐ., 98:1878-1887. Эта модель представляет собой единственную доступную доклиническую модель, в которой эффекты лекарственных средств на развитие псориатического повреждения человека можно подвергать мониторингу т у1уо. Для осуществления этой модели неповрежденные биоптаты кожи (5 мм) от пациентовдобровольцев с псориазом трансплантируют иммунодефицитным реципиентным мышам.
Одновременно пациенты служат донорами крови, из которой выделяют мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) и замораживают. РВМС стимулируют суперантигеном в течение 48 ч перед внутрикожной инъекцией в аутологичную трансплантированную кожу (3 недели после трансплан
- 46 019476 тации). Инъецированные активированные клетки реагируют с кожей человека, что приводит к гиперпролиферации эпидермиса. Очаг повреждения характеризуется удлиненными выступами (нерегулярными и регулярными) и выраженной гиперплазией эпидермиса кератиноцитов с измененной дифференцировкой.
Материалы и способы.
Тестируемое вещество.
Молекулярная масса АЬ: 150,000 дальтон.
Растворимость в воде: 20 мг/мл.
Сопровождающий контроль: РВЗ.
Контрольное соединение: Циклоспорин А.
Молекулярная масса: 1202,63 дальтон.
Поставщик: Мако СтЬН.
Номер партии: ЕДОР5926.
Каталожный номер: 039-16301.
Условия хранения: 2-10°С.
Носитель для контрольного соединения: гидроксипропилцеллюлоза (НРС).
Поставщик: Νίρροη 5ос1а Со., ЬШ Иарап.
Номер партии: НРС-Ь 9004-64-2.
Каталожный номер: ΝϋΑ-1011.
Условия хранения: ±21°С
Тестируемое вещество тестировали в гуманизированной модели псориаза на мышах в одном веществе состава. Соединения хранили при 4°С до применения. Циклоспорин А и раствор гидроксипропилцеллюлозы (носитель СкА) предоставляли и изготавливали в ΤΝΟ. 0,5% гидроксипропилцеллюлозу изготавливали в дистиллированной воде и стерилизовали при температуре 120°С в течение 25 мин. После стерилизации НРС хранили при 4°С до применения. Непосредственно перед внутрибрюшинным введением требуемое количество СкА взвешивали и смешивали с использованием ступки. Стабильную гомогенную суспензию получали смешиванием требуемого количества размолотого СкА с носителем НРС до общего объема 200 мкл на мышь (ресуспендировали в течение нескольких секунд перед введением).
Мыши.
Номенклатура: ΝΐΙ 1-1ук1Ьд Рохп1пц В!кх1д, код штамма 201 (гомозиготный). Источник: наиболее часто называемый ΝΙΗ-ΙΙΙ, был разработан в ^1^^1 ^кШШек о£ Неа1!й, Ве!йекда. В дополнение к гену ниде. который приводит к отсутствию тимуса и Т-клеточной функции, эта мышь обладает двумя другими мутациями, важными для регуляции функции иммунной системы. Их обозначали как х-1ткед ίηιιιιιιικ с!еГес1 (χιά) и Ье1де (Ьд). Мыши Ье1де имеют тяжелый дефицит естественных киллерных (ΝΚ) клеток (Кодег е! а1., 1979). Мыши с мутацией χιά имеют функциональные дефекты в В-лимфоцитах (Зсйег е! а1., 1980). Этот тройной дефицит оказывает тот эффект, что эти мыши могут служить в качестве хозяев для опухолевых линий, которые не будут расти или растут очень медленно у мышей ниде. Пересадка мышам Ьдηυ-χιά гемопоэтических стволовых клеток человека описана Кате1-Ке1д аηά Э1ск (1988). Степень Тнезависимых дефицитов В-лимфоцитов и ΝΚ-клеток у ΝΙΗ-ΙΙΙ не была определена. Цвет: лишенные волос, кожа, пигментированная от светло-серого до темно-серого цвета.
Самцы мышей ΒΝΧ (ΝΙΗ ΙΙΙ, гомозиготные) в возрасте 8 недель поставлялись Сйаг1ек КАег (ИЗ) и доставлялись в ΤΝΟ. Их акклиматизировали к лабораторным условиям в течение по меньшей мере 7 суток перед трансплантацией. Мышей держали в вентилируемых комнатах с воздухообменом, составляющим 9-11 в 1 ч, и поддерживали при температуре 22 ± 3°С и относительной средней влажности 55% (4070%). Освещение было искусственным с последовательностью 12 ч света и 12 ч темноты. Перед трансплантацией мышей по отдельности содержали в клетках из макролона 2 типа на опилках. После трансплантации мышей содержали по отдельности в вентилируемых клетках. Данные о состоянии здоровья этих мышей, полученные от поставщика, показали отсутствие патогенов в этих животных.
Перед трансплантацией у мышей их подвергали акклиматизации в течение 1 недели. После трансплантации мышей с приживленными трансплантатами (как оценивали при макроскопическом обследовании в отношении общего внешнего вида, повреждений, ран, уплотнения и покраснения) случайным образом разделяли по группам введения. Использованные критерии рандомизации представляли собой предотвращение:
1) объединения совпавших донорных биоптатов в группу;
2) распределения совпавших донорных биоптатов в группы с повышающимися дозами, насколько это возможно.
Шестьдесят одну подвергшуюся трансплантации мышь (всего из 72 подвергшихся трансплантации мышей) считали пригодными для включения в исследование и это привело к 9 группам мышей (от 6 до 7 мышей на группу). Затем активированные РВМС от пациентов (0,5х106/трансплантат) инъецировали в аутологичные трансплантаты (0 сутки). Как правило, фенотипы активированных РВМС (после культивирования в течение 48 ч и перед инъекцией) как регулярно определяли проточной цитометрией (не оценивали в этом исследовании) показывают клетки СЭ3+ (20-85% от общей популяции клеток), клетки СЭ4+
- 47 019476 (20-60% от общей популяции СО3), клетки 0Ό8+ (20-55% от общей популяции СО3), 0Ό4+0Ό8+ (5-20% от общей популяции СО3), клетки СО25+ (30-65% от общей популяции СО3), клетки ΗΕΑ-ΌΚ+ (5-20% от общей популяции 0Ό3), объединенные клетки СП69+НЬА-ЭК+ (10-55% от общей популяции 0Ό3), клетки ΟΌ54+ (50-85% от общей популяции 0Ό3) и клетки СЭ49б+ (10-60% от общей популяции СО3). Кроме того, большинство маркеров активации и миграции, упомянутых выше, активируются по сравнению с 0 сутками или после 1 суток активации 8ΕΒ ш νίΙΐΌ.
Мышам проводили введение с -1 суток до 21 суток внутрибрюшинным введением 200 мкл соединения или носителя. В контрольной группе перорально вводили СТА. Эффект введения антитела против 1Ь23р19 оценивали в исследовании в течение 21 суток при еженедельном внутрибрюшинном дозировании 10 мг/кг. Мыши, которым вводили носитель (РВ8), служили в качестве отрицательного контроля. Циклоспорин А (20 мг/кг, перорально) вводили один раз в сутки в течение 21 суток, и он служил в качестве положительного контроля. Массу тела измеряли раз в неделю, начиная за трое суток до начала лечения.
Параметры исхода:
толщина эпидермиса (мкм);
НЬА-ЭВ (эпидермис);
К1-67 (эпидермис);
Цитокератин-16 (эпидермис).
Получение биоптатов кожи и трансплантация.
От всех доноров кожи получали информированное согласие. Все взрослые пациенты были диагностированы дерматологом как пациенты, страдающие псориазом. Пациенты не страдали обширным псориазом и их показатель РА81 не превышал 6. Пациентам не проводили фототерапию или какую-либо системную терапию (например, метотрексатом, циклоспорином или любой направленной на ΤΝΕ-α терапией). Пациентов принимали в качестве доноров, если они местно применяли кортикостероиды, когда необходимо, или основные кремы для профилактики высушивания кожи. Пол, возраст или анамнез течения/анамнез жизни заболевания не были частью критериев для включения или исключения.
От каждого пациента с псориазом получали три биоптата неповрежденной кожи (диаметром 5 мм) и приблизительно 30 мл крови. После забора биоптатов кожи и удаления подкожного жира биоптаты кожи хранили в стерильных пробирках, содержащих стерильные хирургические бинты, смоченные физиологическим раствором при температуре приблизительно +4°С. Перевозку кожи и крови в лабораторию проводили в течение 7 ч после сбора. Мононуклеарные клетки периферической крови (РВМС) выделяли из крови центрифугированием в градиенте плотности и замораживали при -140°С.
Биоптаты кожи трансплантировали иммунодефицитным мышам ΒΝΧ на уровне поверхностного слоя кожи (задняя область шеи) после хирургического удаления кожи мышей по всей толщине. Биоптатами кожи человека заменяли частично удаленную кожу мыши и покрывали хирургической лентой Ор5Йе (8ιηί11ι апб №р11е\\', НооГббогр, Тйе №1йег1апб§) с последующим регулярным нанесением хирургической ленты. Мышей проверяли один раз в сутки в отношении целостности бинтов. В случае потери или повреждения бинта сразу использовали новый бинт.
Через три недели после трансплантации биоптаты хорошо встраивались в ткань мыши; они сохраняли все человеческие свойства и не зарастали тканью мыши. Перед разделением случайным образом мышей в различные группы по введению биоптаты подвергали скринингу и регистрировали их общий внешний вид, повреждения или раны и отличия окраски кожи биоптатов, принадлежащих донору. После этого в исследование включали только интактные биоптаты и их случайным образом разделяли, как описано выше. Биоптаты не включали в случае повреждения/ран или в случае биоптатов, принадлежащих одному донору, значительно отличающихся по окраске кожи. Затем в эти встроенные и включенные в исследование трансплантаты инъецировали активированные аутологичным суперантигеном РВМС (см. ниже).
Донорные мононуклеарные клетки периферической крови.
РВМС от доноров культивировали в течение 48 ч в 1МЭМ (Β^ο^Ыίаке^, серия №. 2ΜΒ0103), дополненной эмбриональной телячьей сывороткой (10%) и стимулированной 1 мкг/мл энтеротоксином В. 81арйу1ососси5 (8ΕΒ; Тох1п Тес11по1оду, Иопба, И8А; серия № 51497В) в присутствии 40 Е/мл рекомбинантного 1Ь-2 человека (Ргерго!есй 1пс., поставляемый ТеЬи-Ью, каталожный № 200-02). Клетки культивировали в 24-луночных культуральных планшетах с плоским дном (Сойаг). После культивирования в течение 48 ч клетки собирали и промывали два раза РΒ8, содержащим 0,5% бычий сывороточный альбумин, и один раз только РΒ8. РВМС ресуспендировали в РΒ8 в количестве 5х106 жизнеспособных клеток на 1 мл и 100 мкл инъецировали внутрикожно в аутологичные трансплантаты кожи для инициации аномальной псориатической дифференцировки.
Замораживание тканей биоптатов и коллекции сыворотки.
Для получения человеческих тканей биптатов мышей умерщвляли асфиксией посредством СО2. Биоптаты вырезали с сохранением небольшой границы прикрепленной кожи мыши. Сразу после рассечения биоптаты погружали в ТЬкие-Тес и замораживали в жидком азоте для хранения в алюминиевых кон
- 48 019476 тейнерах с этикетками. Сразу после умерщвления кровь собирали в не вызывающие коагуляции пробирки посредством пункции сердца. Образцам крови позволяли сворачиваться при комнатной температуре в течение 45 мин. Перед центрифугированием (1400 об/мин в течение 10 мин при 4°С) образцы помещали в тающий лед на 1 ч. Сразу после центрифугирования супернатанты сыворотки собирали и хранили при 80°С.
Г истологическая оценка.
Проводили гистологическое окрашивание замороженных тканей. Изготавливали диагональные поперечные срезы (10 мкм), охватывающие все слои кожи (не показано: расположенные в верхней части рогового слоя и эпидермиса трансплантированного биоптата; ткани мыши формируют основу для трансплантированной кожи человека).
Окрашивание гематоксилином для определения толщины эпидермиса.
Три среза, выбранных из центра биоптата, окрашивали гематоксилином-эозином и оценивали при 200-кратном увеличении. Измерение толщины проводили с использованием системы для обработки и анализа изображений ΡΌ^-ιΟνοι (Ьеюа Ипадшд 8у8!ет8 Ь!б., уег81оп 2.2а, СатЬпбде, Епд1апб). Толщину уплотнения измеряли в качестве репрезентативного примера развития повреждений. Если имелись явные уплотнения (или области между уплотнениями), одно среднее значение приводится исходя из предположения, что эпидермис представляет собой одно длинное уплотнение. Из каждого среза результат минимум из 4 микроскопических полей включали в показатель средней толщины. Из этого среднюю толщину эпидермиса (скоррекированную) вычисляют коррекцией по микроскопическому увеличению.
Окрашивание НЬЛ-ЭК.
Два среза на биоптат окрашивали антителом мыши против НЬЛ-ЭК человека (антиген ИЪ-ЬК) №уа Са8!га, партия 109207) и оценивали при микроскопическом увеличении 400х. Общее количество положительных клеток в эпидермисе в репрезентативных срезах определяли и представляли в качестве количества положительных по НЬЛ-ЭК клеток на поле. Для каждого среза результат минимум из 4 микроскопических полей включали в показатель среднего значения. [Иммуногистохимическое окрашивание эпидермы и дермы очага повреждения пациентов с псориазом показывает повышенную экспрессию НЬЛ-ЭК, обеспечивая дополнительно подтверждение гипотезы о том, что иммунологические механизмы играют важную роль в патогенезе псориаза, см. также СоШеЬ е! а1., 1. Еxρ. Меб, 1986].
Окрашивание К1-67 (пролиферация кератиноцитов).
Два среза окрашивали антителом мыши против К1-67 человека (ВО Вю8с1епсе8 556003) и оценивали при микроскопическом увеличении 400х. Общее количество положительных клеток в эпидермисе в репрезентативных срезах определяли и представляли в качестве количества положительных по К1-67 клеток на 1 мм2. Для каждого среза результат минимум из 4 микроскопических полей включали в показатель среднего значения. [К1-67 представляет собой специфичный к клеточному циклу белок, который может выявлять активно делящиеся клетки. В псориатических повреждениях кожи К1-67 представляет собой высоко специфичный маркер гиперпролиферации кератиноцитов или эпидермиса, которая является ключевым признаком псориаза, см. также V^а^дЬ! е! а1., 1. Шуе8!. ОегтаЮЕ 1997].
Окрашивание СК-16 (экспрессия цитокератина 16).
Один репрезентативный срез окрашивали антителом мыши против цитокератина-16 человека (СЬетюоп, каталожный № СВЬ273, еxρ ба!е РеЬ 2007) и оценивали при микроскопическом увеличении 400х . Экспрессию цитокератина-16 в эпидермисе определяли в соответствии со способом измерения с оценкой распределения СК-16 по 3-бальной шкале, описанной бе 1опдЬ е! а1., 1. Шуе8!. ОегтаЮЕ 125:1163-1173, 2005. В соответствии с оценочной шкалой показатель 0 соответствует отсутствию СК-16, показатель 1 соответствует неоднородному распределению СК-16 и показатель 2 соответствует непрерывному распределению СК-16. Для каждого среза биоптата оценивали полную длину эпидермиса. Определяли и представляли совокупные показатели и встречаемость на группу. [Регуляция дифференцировки кератиноцитов особенно важна при псориазе и одним из важных маркеров гиперпролиферативной и дифференцирующейся псориатической кожи является цитокератин-16, см. также В1д11агб1 е! а1., 1. Ιπуе8!. ОегтаЮЕ 2000].
Статистические анализы.
Основные статистические анализы проводили следующим образом: значимость отличий между всеми группами по лечению тестировали с использованием вариационного анализа (ΑN0VΑ). После каждого значимого ΑNΟVΑ следовали тесты ЬБЭ (наименьшего значимого отличия) с целью определения значимости отличий между группой введения и контрольной группой. Весь статистический анализ проводили с использованием статистического программного обеспечения 8Р88 11.5 для V^ηбоν8 (8Р88 Шс., СЫсадо, ГЬ, И8А).
Интерпретация значений р:
ρ<0,05 указывает на статистически значимые отличия,
0,05<р< 0,10 рассматривали как тенденцию, р>0,10 считали незначимым.
Мыши, которым вводили РВ8, представлены как Носитель. Мыши, которым вводили 20 мг/кг
- 49 019476 циклоспорина А, представлены как СТА (20 мг/кг).
Трансплантация.
Для этого исследования от каждого из 24 пациентов с псориазом получали три биоптата неповрежденной крови и от 26 до 30 мл крови. Таким образом, всего трансплантировали 72 биоптата. Через три недели после трансплантации 11 трансплантатов считали непригодными для включения в исследование. Таким образом, в это исследование можно было включить всего 61 мышь (85%). Для разделения случайным образом и критериев включения см. также 2.2 схема исследования и 2.5 препараты биоптатов кожи и трансплантация.
Вследствие фонового окрашивания (даже после повторного окрашивания свежих новых образцов тканей) некоторые срезы, окрашенные по НЬА-ΌΚ, нельзя было оценить. Окрашенные контроли показали отсутствие неравномерности (см. ниже) и, к сожалению, этому нет объяснения. Контроли, которые использовали, представляли собой контрольный срез ткани, который показал результаты, сходные с результатами предшествующих экспериментов, контрольный срез ткани поврежденной кожи, который показал соответствующую экспрессию НЬА-ΌΚ, как в предшествующих исследованиях, и в заключение, на гистологические стекла был включен срез ткани с контрольным антителом изотипа 1дС2Ь, который не показал ложноположительных результатов или высокого фонового окрашивания.
Характеристики тестируемой модели.
Г истологическая оценка мышей, которым вводили носитель, через 21 сутки после инъекции РВМС, активированных посредством БЕБ, показала среднюю толщину эпидермиса 176,8 ± 28,1, 29,7 ± 8,0 положительных по К1-67 клеток на 1 мм2 в эпидермисе, 14,9 ± 7,1 положительных по НЬА-ΌΚ клеток на 1 мм2 в эпидермисе и суммарный показатель 6 для экспрессии СК-16 в эпидермисе.
Введение СТА приводило к значимому снижению толщины эпидермиса до 105,5 ± 11,3 мкм (р=0,003) по сравнению с мышами, которым вводили носитель. Эти результаты соответствуют 40% снижению по сравнению с носителем. Количество положительных по К1-67 клеток значимо снизилось до 15,6 ± 4,3 на 1 мм2; р=0,027.
Количество положительных по НЬА-ΌΚ клеток снижалось до 9,6 ± 4,6 на 1 мм2, но этот эффект не достиг статистической значимости. Экспрессия СК-16 снизилась до суммарного показателя 3, но этот эффект не достиг значимости. Ни одно из введений не показало значимых изменений массы тела по сравнению с носителем.
Эффект лечения антителом.
Толщина эпидермиса.
Лечение антителом против 1Ь23р19 показало значительное подавление толщины эпидермиса (120,0 ± 17,4 мкм) при дозе 10 мг/кг (р=0,020).
К1-67.
Внутрибрюшинное введение антитела против Ь23р19 в дозировке 10 мг/кг привело к значимому подавлению пролиферации кератиноцитов (р=0,010).
НЬА-ΌΚ.
Введение не было ассоциировано со значительным подавлением НЬА-ЭК.
СК-16.
Хотя экспрессия СК-16 была отчетливо ассоциирована с ингибиторным эффектом после введения СТА и антитела против 1Ь23р19, эффект введения не достиг статистической значимости.
Заключения.
В этом исследовании антитело против 1Ь23р19, вводимое внутрибрюшинно один раз в неделю в дозировке 10 мг/кг, оценивали в отношении его эффекта на развитие псориаза в неповрежденной коже от пациентов с псориазом, трансплантированной иммунодефицитным мышам.
Лечение начинали за 1 сутки до инъекции аутологичных активированных Т-клеток и продолжали до 21 суток после инъекции РВМС. Введение РББ (носитель) служило в качестве отрицательного контроля. Циклоспорин А (20 мг/кг, перорально) служил в качестве положительного контроля. Оценивали массу тела, толщину эпидермиса, пролиферацию кератиноцитов (положительные по К1-67 клетки), показатель цитокератина-16 и количество положительных по НЬА-ΌΚ клеток.
Введение СТА значимо подавляло утолщение эпидермиса и пролиферацию кератиноцитов (положительные по К1-67 клетки) на 40% (р=0,007) и 53% (р=0,027) соответственно по сравнению с контролем в виде носителя. Введение антитела против 1Ь23р19 в количестве 10 мг/кг показало значимый эффект на подавление эпидермального утолщения на 32% и пролиферацию кератиноцитов (К1-67) на 41% по сравнению с контролем в виде носителя.
Ни один из способов введения не показал значимого ингибирования экспрессии НЬА-ΌΚ или СК16. Отсутствие эффективности СТА или любого из соединений в отношении экспрессии НЬА-ΌΚ может быть ассоциировано с недостаточной иммунологической активностью, как определяют, главным образом, по экспрессии НЬА-ΌΚ во время умерщвления мышей, через 21 сутки после инъекции РВМС. По сравнению с ранее проводимыми исследованиями результаты показывают меньшую экспрессию НЬАΌΚ без существенного объяснения. Кроме того, ни одно из соединений не показало эффекта на массу тела. Массу тела оценивали с учетом состояния животного. Снижение массы или ингибирование роста
- 50 019476 является обычным побочным эффектом, главным образом, введения мышам СкА или иммунодепрессивных средств. В общем, лечение антителом против 1Ь23р19 кажется перспективным подходом для лечения псориаза.
Таблица 11
Введение Толщина эпидермиса (мкм) Среднее значение ±8ЕМ Κί-67 (1) Среднее значение ±8ЕМ ΗΙΑ-ϋΚ (1) Среднее значение 18ЕМ Суммарный показатель и встречаемость СК-16 (2) Масса тела в конечный момент времени (% от исходной массы) ±8ϋ
Носитель 176.8 + 28.1 29.7 1 8.0 14.917.1 6 (4/7) 109.910.7
СзА (20 мг/кг) 105.5 ± 11.3 5 15.614.35 9.614.6 3 (2/7) 105.912.1
Антитело против 11_23р19 (10 мг/кг) 120.0117.4* 12.313.7* 7.9 14.9 3 (2/6) 112.311.0
1. Количество положительных клеток на 1 мм2 эпидермиса.
2. Гистологическая система оценки в соответствии с ЛотдИ е! а1.; I. Ыуек!. Эетта!о1., 125:1163-1173, 2005.
Толщина эпидермиса:
АКОУА Р=0,010 последующие тесты Ь5Ц;
$ р= 0,003 по сравнению с носителем * р= 0,001 по сравнению с носителем ** р= 0,025 по сравнению носителем # р< 0,001 по сравнению с носителем ## р= 0,063 по сравнению с носителем & р=0,020 по сравнению с носителем
Κΐ-67:
ΑΝΟνΑ Р=0,009 последующие тесты Ώ5Ό:
$ р= 0,027 по сравнению с носителем * р= 0,008 по сравнению с носителем ** р= 0,048 по сравнению с носителем # р= 0,007 по сравнению с носителем ## р= 0,031 по сравнению с носителем & р=0,010 по сравнению с носителем
НЬА-ЭК:
ΑΝθνΑΡ=0,768
СК-16:
ΑΝΟνΑ Р-0,573
ΒΟϋΥ ΡίΕΙΟΗΤ:
ΑΝΟνΑ Р=0,691
Будет понятно, что это изобретение можно применять на практике иным образом, чем конкретно описано в предшествующем описании и примерах. Возможно множество модификаций и вариантов по настоящему изобретению с учетом представленных выше указаний, и, таким образом, они находятся в объеме прилагаемой формулы изобретения.
- 51 019476
Таблица 1
Специфичность связывания РаЬ-кандидатов
Специфичный ЕЫ8А: антигены в растворе и иммобилизованным РаЬ Вгасоге (захват ЕаЬ)
моно# 1Ь-23 1Ь-23 1Ь-12 1Б-12 Р40 1Ь-23 11,-12
СЫТО Κ&ϋ СЫТО к&э Κ&ϋ СЫТО СЫТО
4083 + н/о н/о н/о 16 нет связывания
4086 + н/о н/о н/о 36 нет связывания; п:3
4185 + н/о н/о н/о 79 нет связывания
4190 + н/о н/о н/о 11 нет связывания
4205 + + 140 небольшое связывание*
4217 + + - 41 небольшое связывание*
4235 + + - 65 небольшое связывание*
4491 + + - 190 нет связывания
4647 + + 12 нет связывания
4649 + + - 7 нет связывания
4651 + + - 160 нет связывания
4655 + + - + 66 нет связывания
4658 + + - - 11 нет связывания
ГаЫ2А + + + + + 1.1 0.6
Таблица 2
ТС50 РаЬ-кандидатов в анализе ШР-23/ЫР-23К
ΜΟΚΟ# 1С50 [нМ]
4083 4.6 +/- 3.9
4086 Отсутствие полного ингибирования
4185 280
4190 4.8 +/- 2
4205 38
4217 16
4235 190
4491 10 ~ 50% ингибирование
4647 2.1
4649 0.2 +/- 0.2
4651 36
4655 286
4658 0.7
1Б-23К-ЕС 1.8+/-1.8
Таблица 3 Охарактеризация исходных антител в форме тАЬ
- 52 019476
Таблица 4А
Последовательности СЭЯ Нс У-области антител-кандидатов
Н-СИКЗ
Примечания
ΡΙΥΑΟΜΏν 40 зкксмуееитурьмм аффинности
-хнАнъдатожхз аффинности
Плюс замены
Δ участок аффинности
N1ЕНКУЬС ΥΑΤ5 ΥΑΑ5 УК аффинности
Основной вариант
Основной вариант
Основной вариант □КЕОС!! 16
ΝΙΚΡ(30δϋΤΚΥ8Ρ8ΕΈ(3
Основной вариант
Созревание аффинности
Основной вариант
Созревание
Основной вариант
Δ участок
Созревание аффинности
Созревание аффинности
Созревание аффинности аффинности
Созревание аффинности аффинности
Созревание аффинности
Созревание аффинности
Созревание аффинности
Созревание аффинности аффинности
Созревание аффинности аффинности
Созревание аффинности аффинности аффинности
Предсказанный аффинности
Созревание аффинности
Предсказанный
Созревание
Созревание ** Х1 представляет собой Ώ или 8; Х2 представляет собой 8, У, Ώ или Т; Х3 представляет собой Ν, 8 или О; Х4 представляет собой У, Т, Н, У, 8 или А;
!! Ζ1 представляет собой О, I или Р; Ζ2 представляет собой I или 8; Ζ3 представляет собой I, Р, N или ϋ; Ζ4 представляет собой Р, О или А; Ζ5 представляет собой I, М, Р, Т, Н, N или У; Ζ6 представляет собой Р, I, О или Р; Ζ7 О или I; Ζ8 представляет собой Н, У, N или О; Ζ9 представляет собой А или Т; Ζ10 представляет собой N № или У;
++ а1 представляет собой 8 или А; а2 представляет собой Т или О; а3 представляет собой Р или Р; ад представляет собой 8 или N а5 представляет собой 8, М или Р; а6 представляет собой I или У;
## Ь1 представляет собой Т, Р, Ώ или 8; Ь2 представляет собой 8, I, А, Т, Я или Р; Ь3 представляет собой N Т, Ь, 8 или О; Ь4 представляет собой Т, У, 8 или I;
Ь5 представляет собой Р или Р; Ь1 представляет собой Р или Р.
Все антитела, экспрессированные как РаЬ, имеют Р в 3 остатке в У1, а при экспрессии в качестве тАЬ большинство из них имеют Е в 3 остатке.
- 53 019476
Таблица 4В
Последовательности СЭЯ Ьс У-области антител-кандидатов
Клон # УЪ ь-сцщ (8Е(2 ГО ΝΟ:) Е-С1Ж2 (8ЕО ГО ΝΟ;) ь-сгжз (8Е<2 ГО ΝΟ:) Примечания
4083 кЗ КАЗОЗУЪСИУЬА (46) САЗЗР.АТ (52) ΗΩΥ68Ι8ΤΤ (58) Основной вариант
5267 ООУЗНЬЫТ (59) Созревание аффинности
5268 (20Υ3ΗΙ8ΙΖΓ (6 0) Созревание аффинности
5269 ООЕАН1ЪЪТ (61) Созревание аффинности
4190 кЗ КАЗОЗУЗЗЫУЬА (47) ΥΑ8ΚΚΑΤ (53) 00Τ3ΝΤΡΓΤ (62) Основной вариант
4190Εν ΟΏΤ3ΝΤΡΕΤ Плюс замены Е1 и У86
5029 ΏφΕΙΤΥΙιΡΤ (63) Созревание аффинности
5030 (ХДОАЪЗРГТ (64) Созревание аффинности
5031 ООРКСТРГТ (65) Созревание аффинности
5032 003ΗΝΙΡΕΤ (66) Созревание аффинности
5057 аОРТЗЗРЕТ (67) Созревание аффинности
4190х (68) Предсказанный
4205 λΐ 30535ΝΙ03ΥΥν N (48) 6ΝΤΗΡΡ3 (54) ОТУАЗЬСРСЕУ (69) Основной вариант
4217 к1 ΚΑ803ΙΓΥΝ1Α (49) САЗЯКАТ (55) Ώ0Υ83ΕΡνΤ (70) Основной вариант
4649 λΐ ΤΘ888ΝΙ686Υϋ УН (50) СЫЗККРЗ (56) 53ИТ—РЗЗУУ (71) Основной вариант
5058 ЗЗи’ТРТРЕМ1У (72) Созревание аффинности
5059 Азтятоеъзъуу (73) Созревание аффинности
5059ой АЗЖГЕСЪЗЬУУ Плюс замены 01, 82
4649х а18ГОа.а.аа.аУ+ + (74) Предсказанный
4658 λ2 τετ88ονεεγΝ8 УЗ (51) ЗУЗЗЯРЗ (57) 38ΥϋΤΝΚΡΕνν (75) Основной вариант
5060 ΕδΥϋνΎΟΚΕΥν (76) Созревание аффинности
5061 δδΥΎΕΎΏΟΗΐν (77) Созревание аффинности
5062 0ΤΥΥΓ8Υ36Ρν (78) Созревание аффинности
5063 бЗТОРГЕЗУЕУ (79) Созревание аффинности
- 54 019476
Таблица 4С
Продуцированные, очищенные и оцененные антитела
МАЬ*
Примечания ртодгеаз) ргодгезз) ртодгеза)
5040^ участка гликозилирования СРк2
Пара 5058 VI- с νΗ, лишенном
5029**
5030**
5032**
5057**
Пара 5058 VI. с νΗ, лишенном участка гликозилирования СРК2
Пара5059 УЬ с νΗ, лишенном участка гликозилирования СРК2 участка гликозилирования СРК2 * За исключением указанного в столбце Примечания, положение 3 в тяжелой цепи представляло собой (3 в РаЬ и Е в тАЬ.
** Легкие цепи каппа после созревания аффинности 4083 и 4190 содержат замену Т на V относительно исходных последовательностей в Ρν3 (РАVΥΥС). V представляет собой остаток эмбрионального типа в этом положении.
# Несколько РаЬ, приведенных в качестве РаЬ после созревания аффинности, показали небольшую агрегацию в процессе очистки и, таким образом, их не оценивали. Ранее их оценивали в качестве вариантов в виде неочищенных образцов.
- 55 019476
Таблица 5
Охарактеризация РаЬ после созревания аффинности: специфичность, нейтрализация рецептора и аффинность
ΜΟΚΟ# Библиотека Ко [пМ] ЗЕТ (п:1) И.-23/ И.-23К 1С$о [нМ] (п:1-4) П_-23/ 1Ь-12КР1 1Ь-12 (Κ&ϋ)/ ΙΙ_-12Κβ1 Специфичные ΕΙ.Ι3Α РАС8 (ТАЬЬ104)
4083 1600 7.1 ±8.3 О. К. О.К. О.К. -
5028 Н-СОК2 133 0.43 ± 0.58 О. К. О.К. О.К.
5267 ь-сокз 2000 0.14 О.К. О.К. О.К. н/о
5268 660 0.15 О.К. О.К. О.К. н/о
5269 960 0.2 О.К. О.К. О.К. н/о
4190 4400 1.3± 1.5 О.К. О.К. О.К.
5034 Н-СОК2 126 0.4 + 0.15 О.К. О.К. О.К.
5036 32 0.32 ± 0.02 О.К. О.К. О.К.
5038 38 0.17 ±0.05 О.К. О.К. О.К.
4649 1100 1.2 О.К. О.К. О.К.
5041 Н-СОК2 41 0.07 ± 0.04 О.К. О.К. О.К.
5042 4 0.06 ± 0.03 О.К. О.К. О.К.
5043 18 0.05 ±0.03 О.К. О.К. О.К.
5044 43 0.05 ± 0.04 О.К. О.К. О.К.
5045 9 0.05 ± 0.02 О.К. О.К. О.К.
5046 23 0.08 ±0.01 О.К. О.К. О.К.
5058 1.-СОКЗ 33 0.11 ±0.08 О.К. О.К. О.К.
5059 93 0.69 ± 0.72 О.К. О.К. О.К.
Таблица 6
Охарактеризация РаЬ после созревания аффинности: специфичность, нейтрализация рецептора и аффинность
ΜΟΚΟ# Библиотека Ко [пМ] ЗЕТ (п:1) 11.-23/ 11.-23 К 1С50 [НМ] (п:1-4) 11.-23/ 1Ь-12Кр1 11_-12 (Κ&ϋ)/ ΙΙ_-12Κβ1 Специфичные Е1_18А ГАСЗ (ТАСЬКИ)
4658 4300 14 О.К. О.К. О.К.
5039 27 0.1 ±0.09 О.К. О.К. О.К.
5047 36 0.13± 0.1 О.К. О.К. О.К.
5048 20 0.1 ±0.1 О.К. О.К. О.К.
5049 7 0.39 ± 0.62 О.К. О.К. О.К.
5050 Н-СОК2 23 0.89 ±1.15 О.К. О.К. О.К.
5052 10 0.58 ± 0.74 О.К. О.К. О.К.
5053 27 0.98 ±1.3 О.К. О.К. О.К.
5055 29 0.79 ±1.0 О.К. О.К. О.К.
5056 65 0.52 ± 0.68 О.К. О.К. О.К.
5060 142 1.0± 1.14 О.К. О.К. О.К.
5061 Ь-СОНЗ 58 1.25 ±1.49 О.К. О.К. О.К.
5062 98 1.34 ±1.5 О.К. О.К. О.К.
5063 69 0.32 ± 0.25 О.К. О.К. О.К.
- 56 019476
Таблица 7
Охарактеризация антител после созревания аффинности в формате тАЬ: ингибирование продукции ГЬ-17. Ингибирование связывания ЬгГЬ-23 с иммобилизованным слитым белком 1Ь-23К-РС. Значения 1С50 из кривых титрования
тАЬ 1С50, мкг/мл
5042 0.00127
5045 0.001396
5040 0.002641
5058 0.002847
5041 0.003007
5054 0.003227
5053 0.00493
5059 0.01062
5044 0.01414
5043 0.01439
5049 0.01616
5048 0.01624
5052 0.0178
5047 0.02342
5050 0.02766
5038 0.02815
5046 0.04281
5029 0.04907
тАЬ23А 0.05415
5030 0.06458
5051 0.0663
5055 0.09155
5056 0.09198
5028 0.1039
5057 0.1103
5039 0.1606
5036 0.1702
5032 0.1716
5034 0.1854
5063 0.1981
5062 0.1989
5031 0.2149
4190 0.218
4649 0.2758
5033 0.2834
5061 0.3087
5037 0.3364
4083 1.395
4658 1.956
тАЬ (см. табл. 4С) приведены в порядке снижения эффективности. Антитела после созревания сгруппированы в соответствии их соответствующими исходными антителами: розовый цвет (5028 от 4083); (5040, 5038, 5029, 5030, 5057, 5036, 5032, 5034, 5033 и 5037 с 4190); (5042, 5045, 5058, 5041, 5059, 5044, 5043, 5046 и 4083 с 4649); (5054, 5053, 5049, 5048, 5052, 5047, 5050, 5051, 5055, 5056, 5039, 5063, 5062 и 5061 с 4658). МаЬ 23А представляет собой контрольное тАЬ мыши против ΙΙ.-23 человека.
- 57 019476
Таблица 8
Последовательности исходных тАЬ 1Ь-23р19 и их производные после созревания аффинности и сконструированные производные Семейство МОК04083 (ЗЕО Ю N05: 80 & 81)
117 4083 УЬ (1)
РУ0ЬУр56ЛЕУККР65ВУКУ5СКД655ТГ5ИУА15НУК0аР60еЬЕИМ6611РМГ6УАЫУА0КГ06КУТ1ТЛРЕ8Т8ТА
УМЕЬ521Ж5Е РТАУУУСАКР! УАЕМРУИБОБТРУТУЗ 5
502В УЬ (1) ОУОЬУ08ЕАЕУККРЕ83УКУЗСКАЗЕЕТЕЗЫУА15ИУВ.аАВБОБЬЕНМБЕ11₽УЕЕ£ЬЬУА<ЭКЕОСРУТ1ТАРЕЗТЗТА УМЕЬ58ЬК8ЕРТАУУУСАЙР1УАеМРУИеОБТ1>УТУ85 (5Е0 Ю N05: 82-85)
108
4083 Ук (1)
Р1УЪТ05РАТЬЗЬЗРБЕКАТЬ8СКА508УЬ6НХЬАт00КРБ0АРК1ЫУБА88НАТБУРАКР8Б8Б86ТРГТЬТ138Ь
ЕРЕРЕАУУУСНОХЕБ13ТТЕБОБТКУЕ1К
5268 Ук (1)
В1УЬТ05РАТР8ЬЗР6ЕКАТЪ5СКА803У0БМУЬАИУ00КР60АРВЬЫУЕА88ЕАТБУРАЕГ8БЗЕ5БТРРТЬТ133Ъ ΕΡΕΟϊΆνΥΥΟςΟΥεΜ3ΡΤΓ0οετΚνΕΙΚ 5267 Ук (1)
О1УЬТ05РАТЬ8ЬЗРЙЕКАТЬ8СНА808УЬеЦУ1ЛИУ0аКР50АРК1>ЫУСА88НАТ6УРАКГ8БЗС8СгаГТЬТ138Ь ЕРЕРЕАУУУСд0УзШ11ТЕБ0БТКУЕ1К
5269 Ук (1)
Р1УЬТОЗРАТРЗЬЗРСЕНАТЬЗСКА8ОЗУЪБКХЬАИХООКРБОАРКЬЫУЕАЗЗНАТБУРАНРЗБЗБ8БТРУТИ133Ъ
ЕРЕРЕАУТХСдО£аЫ11ТЕСОЕТКУЕ1К
Семейство МОН04190 (5ΕΩ Ю N05: 86-92)
127
4190 УЬ (1)
ОУОЬУ08ЕАЕУККРС53УКУ8СКАЗеЕТР83ЫУ15ИУКОАРЕОЕЬЕИМЕБ11Р1РЕНАЯУАОКРЕЕКУТ1ТАРЕ8Т8ТА УМЕЪЗЗЬНЗЕРТАУУУСАКЗККБМУББИТУРЪММУРЬИБОБТЪУТУЗЗ
5033 УЬ (1)
0У0ЬУ05БАЕУККРЕ88УКУ8СКА8ББТЕ88НХ13ИУК0АРБ0СЪВИМ6111Рр16пАиУА0КР06КУТ1ТАРЕ8Т8ТА
УМЕЬ83ЬКЗЕРТАУУУСАВ.ЗККБМУБ0ИТУРЬММГРЬИЕ0ЕТЬУТУ88
5040 УЬ (1) 0У0ЬУО8БАЕУККРЕ58УКУ8СКА866ТЕ88ЫУ18ИУВДАРБО6ЬЕИМ618рдЬд1ьАуУА0КЕ0БКУТ1ТАРЕЗТЗТА
ХМЕЬ88ЬНЗЕРТАУУУСАК8ККБМХ66ИТУРЬММГРЬИБ0ЕТЬУТУ88
5038 УЬ (1) ОУОЬУ086АЕУККР638УКУ8СКАЗБ6ТЕЗЗНУ13НУКОАР60БЬЕНМБ1паЫЕдЬиУА0КР0БКУТ1ТАРЕ8Т8ТАУМЕЬ83ЬКЗЕРТАУУУСАК8ККЕМУББНТУРЬММЕР1.ИЕ06ТРУТУ58
5034 УЬ (1)
0У0ЬУ056АЕУККР655УКУ8СКА5ББТР88»Х18ИУК0АРе(261>ЕНМ611с1РпГ6дАуГА0К1Х2бКУТ1ТАРЕ5Т5ТА
УМЕЬ58ЬКЗЕВТАУУХСАК8ККБМУЕБИТУРЬММРРЬЙ60БТЬУТУ38
5036 УЬ (1)
ОУОЬУОЗЕАЕУККРБ88УКУЗСКА8БЕТЕЗЗИ Υ 13№ЛЮАР60БЬЕИМ611йРУ?БдАу УАОКЕЙЕЯУТI ТАРЕ 5Т ЭТА УМЕЬЗЗЬКЗЕРТАУУУСАКЗККБМУббНТУРЬММГРРИБОБТЬУТУЗЗ
5037 УЬ (1) аУОЬУО8БАЕУККРБ88УКУ8СКА5ББТЕ58НУ18ИУКОАР60БЬЕИМБ11аРтГЕдАуУАОКРС2БКУТ1ТАРЕ8Т8ТА
УМЕРЗЗРН8ЕРТАУУУСАК8ККБМУ6БИТХРЬММЕРЬН606ТЬУТУ88 (5Е0 Ю N05: 93-98)
108
4190 Ук (1)
Р1У1,Т08РАТ1,51,8Р6ЕКАТ1.8СКА808У88МУ1ЛНУ(20КРБОАРК11ЫУУА8ККАТ6УРАКР56868БТРт.Т185Ь
Е РЕ РРАТΥУСБОТЗЫТРЕТРБОБТКУЕΙΚ
4190Ενν)ς (1)
Е1УЕТО8РАТЬЗЕЗРЕЕНАТЬ8СКА808У53КУ1АИТ00КР60АРНЕЫУУА5ККАТБУРАКРЗЕЗЕ56ТРЕТЕТ158Ь ΕΡΕΡΕΑνΥΥΕΟΟΤΕΝΤΡΕΤΕεΟεΤΚνΕΙΚ
5029 Ук (1)
Р1УЪТ08РАТЬЗЪ8Р6ЕРАТЬЗСНА803У38МУ1ЛИУ00КРБ0АРКЬЫУУАЗКНАТ6УРАКР5Б8БЗБТРРТЬТ133Ь ЕРЕ0ЕАуУУС00£1Ьу1рТЕБ0БТКУЕ1К
5030 Ук (1>
Р1УЪТ08РАТЬ5Ь8Р6ЕНАТЕЗСНА503У85ЦУ1>АНХ00КР60АРКЬЫУУАЗКНАТБУРАР.РЗБЗЕ36ТРЕТЬТ138Ъ ЕРЕРЕАуУУСООС1а1 ЗРРТР606ТКУЕ1К
5031 Ук (1)
Р1УЪТ08РАТЬ8Ь8Р6ЕКАТЬ8СНА808У88КУ1ЛЯУ00КРБаАРЕЫ>1ХУА31ЩАТЕУРАВ.ЕЗЕ8Е8БТРРТЫ138Р ЕРЕРЕАУУУСОО<1гдТРЕТУ60БТКУЕ1К
5032 Ук (1)
Р1УЫ08РАТЬ8Ь8Р6ЕКАТЬ8СВА808У88»У1АИХаОКР60АРВ1<ЫУУА81ЖАТБУРАВР868686ТРРТЬТ188Ь
ΕΡΕΡΡΑνΥΥΟΟΟεΙΝΙΡΡΤΡβΟβΤΚνΕΙΚ
МОК04205 (5Е0 Ю ΝΟ: 99) ι
116
4205 УЬ (1)
ОУОЬУОЗбАЕУККрдЕЗЬКГЗСКбЗСУЗРТМУИГЗНУКаАРбКбЬЕЯМбЯТНРБРЗРТКУЗРЗГЕСОУТГЗАРКЗгЗТА
УЬ0И581|КА8РТаМУУСАКНУ¥6МРУИБ0БТ1<УТУ58 (5Е0 Ю N0: 100)
110
4205 VI (1)
Р1У1>Т0РР8У5БАРБ0КУТ18С86888Я1Б8УУУХИУ00ЬР6ТАРКЬЫУ6МТНКР8БУРРКГ868К86Т5А81.А1ТЕЬ
03ЕРЁАРУУС0ТУА51СР5ЕУге56ТКЫУ1
МОК04217 (5Е0 Ю N0: 101)
121
4217 УЬ (1)
ОУОЬУЕ8ББ6ЬУОР663Ыа.8САА8БГТР38УИ1ТИУаОАРБК6ЬЕ»УЗУ1333538ТУУАРЗУКБКРТ13НРМЗККТ1
УЬОМИБЬКАЕРТАУУУСАКБТРИЗГбЫУРАЫНБОБТЬУТУЗЗ (3ΕΩ Ю N0: 102)
107
4217 Ук (1)
Р1УЬТ03РАТЬ81.8РеЕКАТЬЗСКА8031РУКЬАИУй0КР60АРАЬЫУ6А5ЫВАТСУРАаРЗС8686ТРГТЬТ1881Е
РЕРРАТУУС00У88ЕРУТЕБ0БТКУЕ1К
Семейство МОК04649 (5ΕΏ ΙΟ N05: 103-112)
117
4649 УЬ (1)
0ν0Ρνθ55ΑΕνΚΚΡ5Ε3ΑΚΙ8σΚ535Υ8Γ5ΝΥΜΙ5Ιί?νΚ0ΜΡ5Κ51ΕΜΜΒΙΙΡΡ8Ν3ΥΤΝΥ8Ρ8Γ050νΤΙ8ΑΡΚ3Ι5ΤΑ
УЬ0И58ЬКА8РТАМУУСААИУУКРРРУИ606ТЬУТУ38
46490 УЬ (1) 0У01У08САЕУККРСЕ81К18СКС8СУБР8ЫУИ1СИУН0МРСКСЬЕИМС11РРЗ№УТС1УЗР8Е0С0УТ13АРК818ТА
УЬ0ИЗЗЬКА8РТАМУУСАР.ИУУКРЕРУЯБ0БТЬУТУ38
4649г УЬ (1) ОУаЬУО8САЕУККРСЕЗЬК13СКО8БУЗР5МУИ15ИУПаМРСКСЬЕИМе11РР8Н8УТгУ8Р8Р0Б0УТ13АРК515ТА
УЬ0И55БКА8РТАМУУСАЙИУУКРЕРУИ60еТЬУТУ85
4649ге УЬ (1) еУ0ЬУ056АЕУККРБЕ81К13СК63БУЗГ8ЫУН1БНУН0МРБКБЬЕИМБИРРЗИ8УТгУ8РЗЕ060УТ18АРК313ТА
УЬ0И88ЬКАЗРТАМУУСАВ.ИУУКРЕРУ«50СТЬУТУ38
5046 УЬ (1)
0У0ЬУ05еАЕУККР6Е8ЬК15СКС8е¥8ГЗМУИ1СИУК0МРеК6РЕ»МС11РР^85»ТкУ8Р8Р050УТ18АРК318ТА
УЬОИЗЗЬКАЗРТАМУУСАКИУУКРРРУИБОбТЬУТУЗЗ
5044 УЬ (1)
0У0ЬУ08еАЕУККРСЕ8ЬК18СКе86У8Е8МУИ16ИУй0МР6К6ЬЕ«®16115Р8д5ЪТ»У5Р5Р060УТ15АРК515ТА
УЬ0И85ЬКА8РТАМУУСАКИУУКРЕ0У«Б0СТЪУТУ58
5043 УЬ (1)
ОУОЬУОзеАЕУккреЕзькхзсксзЕУЗРзмуихсиУкомрекеьЕимепзрадзьтмУЗРЗГОСОУпзАРкзгзтА
УЬ0»83ЬКА8РТАМУУСАКИУУКРГРУИБавТЬУТУ58
5041 УЬ (1)
ОУОЬУО8САЕУККР6Е81|К15СК68еУ8Р8КУИ1(И»УКОМ₽0К61>ЕИМе:1:1вРЬд5УТ1»У8Р8РО(5ОУТ15АРК815ТА
УЬОЙЗЗЬКАЗРТАМУУСААИУУКРГРУИбОбТЬУТУЗЗ
- 59 019476
5042 УЬ (1)
0У0ЬУ08ВАЕУККРВЕ8ЪК18СКВ86У8Р8НУН16ИУКОМР6К61>ВИМ611вРЪд88Т»¥8Р8Р0ЕОУТ18АРК818ТА
УИИЗЗЬКАЗРТАМУУСАКИУУКРРРУИЕОЕТЬУТУЗЗ
5045 УЬ (1)
ОУОЬУОЗЕАЕУККРЕЕЗЬКХЗСКЕБЕУЗЕЗЫУИХЕИУВДМРЕКЕЬЕИМЕИвРЬдЗаТмУЗРЗРОЕОУПЗАРКЗХЗТА УЬОИЗЗЬКАЗРТАМУУСАКИУУКРРРУИЕОЕТЬУТУЗЗ * Сопзепзиз Ν-Ипкей д1усозу1аЪ1оп зДЬе 1п 4649 УЬ (ЗЕ<2 Ιϋ N03: 113-116)
111
4649 УЬ (1)
Р1УЪТОРРБУЗЕАРЕ0НУТ13СТБ8Б5Н1ЕБЕУРУНИ¥001РЕТАРКЬЫУЕНЗККР5ЕУРРЯЕ5ЕБК8ЕТЗАЗЬА1ТО
ЬОЗЕРЕАРУУСЗЗИТ—РЗЗУУРЕЕЕТКЬТУЬ
5058 УЬ (1)
РХУЪТОРРЗУЗЕАРЕОНУТХБСТЕЗББНХЕБЕУРУНИУООЬРЕТАРКЬЫУЕМЗКЯРЗЕУРРВУБЕБКЗЕТЗАЗЬАХТЕ
Ь03ЕРЕАРУУС35НМЪРпт1УРСС5ТКЬТУЪ
5059 УЬ (1)
Р1УЬТаРР8У86АР60&УТ18СТВ888К168ЕУСУНИХ0аЬРеТАРКЬЬ1Х<ЗК8ККР8<=УРИи?8<38К8<5Т5А6ЬА1Т6
Ь03ЕРЕАРУУСа5ИМд151УУР66СТКЬТУЬ
5059о5УЬ (1) двУЬТ0РРЗУ8ЕАРе0ЯУТ13СТЕ838К1ЕЗЕУОУНИ¥00ЬРЕТАРКЬЫУЕМЗКВРЗЕУРО&Р8ЕЗКЗЕТЗАЗЪА1ТЕ
Ь03ЕРЕАРУУСа5ИТс1д131УУГ&ебТКЬТУЬ
Семейство МОП04658 (8Е<3 Ю N03: 117-127)
123
4658 УЬ (1) ОУОЬУЕ5ЕЕЕЬУОРЕЕЗЬКЬ5САА5ЕРТР55РЕМ5ИУКОАРЕКБЬЕИУ5М1883—
ЕЗЗ'ГУУАРЗУК5КГТ13КРМЗКМТЬУХ,ОМИ31КАЕРТАУУУСАКТИСТРТЬМ0ЕРМН6О5ТЬУТУ55
5048 УЬ (1) аУ0ЬУЕ8С®5ЬУ0РЕЕ8ЪВЬ8СААЗСГТЕЗЗРеМЗИУКС1АРСКСЬЕИУЗЫ1еНк;£теуИУУАадУКеМ”Г13КРК5КМ
ТЬУЬОМКЗЬКАЕРТАУУУСААУЯЕТРУЬМОГРНИЕОЕТЬУТУЗЗ
5050 УЬ 11)
0У0ЬУЕЗЕБЕЬУ0РЕБЗЬВЬ5СААЗЕЕТРЗЗРЕМБИУК0АРЕКЕЬЕИУЗв1еЬкуТЕу£ТУУАарУКЕИРТХЗКРКБЮ1
ТЬУЬС2МКЗЬКАЕРТАУУУСАВ.УИ5ТРУЬМ0ЕРЫИЕ0ЕТЬУТУЗЗ
5053 УЬ (1)
0У0ЬУЕЗЕЕЕЬУ0РЕЕЗЬВЬБСААЗЕРТРБ5РЕМ8ИУК0АРЕКЕЬЕИУ8Н1еЬкуЪвурТУ¥АаБУКЕЯЕТ15КРИ8КМ
ТЬУЬОМНЗЬНАЕРТАУУУСАНУИЕТРУЬМОРРЫИЕОЕТЬУТУЗЗ
5039 УЬ (1)
0У0ЬУЕЗСЕСЬУ<1РЕеЗЬКЬ8САА8ЕРТЕЗЗЕЕМ6ИУКаАРЕКЕЬЕКУЗК1еНку1пуаТУУАаЗУКЕВ.ГТ13АРКЗКК
ТЬУЬОМКЗЬКАЕБТАУУУСАНУИЕТРУЬМОРОИИЕОЕТЬУТУЗЗ
5055 УЬ (1)
0У0ЬУЕ8ЕЕЕЬУ0РЕСЗЬКЬ8САА5ЕРТГЗЗЕЕМ8НУП0АРЕКЕЪЕИУЗЫ1еЬку1ЕуаТуУАа8УКЕКГТ18АРКЗКИ
ТЬУЬОМЫЗЬЯАЕРТАУУУСАНУИЕТРУЬМЕРРЫНЕОЕТЬУТУЗЗ
5056 УЬ (1)
0У0ЬУЕ36ЕЕЬУ0РЕО8ЬНЪ5СААЗЕГТР58ЕЕМ5НУВДАРЕКЕЬЕИУ381еЪку1вуаТУУАадУКЕЮТ13аРЫЗКК
ТЬУЬОМКЗЬКАЕРТАУУУСАЯУИЕТРУЬМОРРМИЕОЕТЬУТУЗЗ
5052 УЬ (1) аУОЬУЕЗОЕ6ЬУОРЕБ5ЬИЬ5САА5ЕГТР83РЕМ8ИУВ.ОАРеКЕЬЕНУЗз1е11ку1ву£ТГУАаБУКЕЯРТ13КОМЗКК
ТЬУЬОМИЗЪЙАЕРТАУУУСАНУИВТРУЬМОГРННЕОЕТЬУТУЗЗ
5049 УЬ (1)
0У0ЬУЕЗЕЕЕЬУ0РЕЕЗЬМ.ЗСАА8ЕРТР35РЕМЗНУК0АРЕКЕЬЕИУ5д1еЬку15у£ТЬУАа8УКЕКРТ18ЕРМЗКЫ
ТЬУЬдааГЗЬААЕРТАУУУСАВУНСТРУЬМОРРМНЕООТЬУТУЗЗ
5051 УЬ (1)
ОУОЬУЕЗЕВЕЬУОРЕЕ8ЬАЬЗСАА8ВГТРЗЗРЕМ8ЯтаОАРЕКЕЬЕИУЗд1еЬку13у£Т1УАаЗУКЕЕРТ13М>КЗЮ1
ТЬУЬОМЫЗЬНАЕРТАУУУСАКУИЕТРУЪМОГРНИЕОЕТЬУТУЗЗ
5054 УЬ (1) аУаьУЕЗЕЕЕЬУ0РЕЕЗЬКЬЗСАА8ЕРТРЗЗГВМ8НУК0АРЕКеЬЕЮЛЗд1еЬку1вуаТ1УАаЗУК6КРТ13КОМЗ№
ТЬУЬОММЗЬКАЕРТАУУУСАКУИЕТРУЬМОРРШЯВОВТЬУТУЗЗ (ЗЕО Ю N0: 147)
5047 УЬ (1)
0У0ЬУЕ8ЕЕЕЬУ0РЕЕЗЬКЬЗСАА36РТЕ88РЕМЗИУК0АРЕКЕЬЕИУЗН1еЬку1ОуаТВУАаЗУКЕНГТ13НРЫЗКМТЬУЬ0МНЗЬ
НАЕРТАУУУСАВ.УИЕТРУЬМОРРКИЕОЕТЬУТУЗЗ (ЗЕ<2 Ιϋ N05: 128-132)
111
4658 УЬ (1)
РХАЬТОРАЗУЗЕЗРЕО.ЗХТХЗСТЕТЗЗРУЕЕУНБУЗЯУОЕНРБКАРКЬМХУЗУЗЗЯРЗЕУЗКНРЗЕЗКБЕНТАЗХТХЗЕ
ЕОАЕРЕАРУУСЗЗУРтаКРЬУУРЕЕЕТКЫ'УЬ
5061 УЬ (1)
Р1АЪТОРА8У5ОЗРСО31Т15СТЕТ85РУЕОУМЗУЗИ¥0ОНРЕКАРКЬМ1УЗУЗЗЯР8ЕУЗККРЗЕЗК8ЕНТАЗЬТГ8Е
ЬОАВ РЕАРУ УСЗЗУу£у1дгаУРЕЕЕТКЬТУХ
5062 УЬ (1)
01АЬТОРА8У5Е5РВ031Т13СТЕТЗБРУЕЕУЫ5У8ИУ00НРВКАРКЬМ1У5У55ЯР8ЕУ8№РЗЕЗК8ЕМТА81.Т18Е
ЬОАЕРЕАР У УСд£ Уу £з у 3 дрУРЕ ЕЕТКЬТУЬ
5060 УЬ (1)
Р1АЬТ0РА8УЗЕ8РЕ031Т15СТЕТЗБРУЕБУЫ5У5ИУ00НРЕКАРКЬМ1УЗУ38ЯР8СУ8КЯРЗЕЗК5Е14ТАЗЬТ18Е
ЬОАЕРЕАРУУСдЗУРУудгХуУГЕСБТКЬТУЬ
5063 УЬ (1)
Р1АЬТ0РАЗУЗЕЗРБО31Т13СТБТ85РУЕБУЫ5УЗНУООНРаКАРКЬМ1УЗУ55КР8ЕУЗ№Р8ЕЗК5ЕМТА8ЬТ18Е
ЬОАЕРЕАРУХСдЗиРраГзуеУРЕЕЕТКЪт
- 60 019476
Таблица 9
Нуклеотидные последовательности
11-23 р19 504 0°/Εν *
УН-ЕСЕ (5ЕО Ю N0:133) : (Аминокислотная последовательность ΥΗ представляет собой 5040ΥΗ)
V 0 ]
САЕСТЕСАЕС ЕТССАСЕТСЕ
Ь V о 5 БАЕ : ТЕЕТЕСАБТС ТЕЕСЕСТЕАЕ 5 АССАСЕТСАЕ АССССЕАСТС
V К К Р ЕТЕААЕААЕС ( САСТТСТТСЕ ( > Е 3 5 СТЕЕЕТССТС ЕАСССАЕЕАЕ срк1 • V К V ЕЕТЕААЕЕТС ССАСТТССАЕ
С К А ТССТЕСААЕЕ ( АЕЕАСЕТТСС ( ι ЗЕБ СТТСТЕЕАЕЕ ЕААЕАССТСС
Т Г 5 САССТТСАЕС ЕТССААЕТСС
N Υ I АЕСААСТАСА ТСЕТТБАТЕТ
101 • 5 И V
ТСАЕСТЕЕЕТ АЕТСЕАСССА
К0А ЕСЕАСАЕЕСС СЕСТЕТССЕЕ
Р Е О Е ЬЕИ ССТЕЕАСААЕ ЕССТТЕАЕТС ЕЕАССТЕТТС ССЕААСТСАС
Μ Е I ЕАТЕЕЕЕАТС СТАССССТАЕ
151
БРЕТ АЕСССТЕЕСА I ТСЕЕЕАССЕТ I
201 • V Т I АЕТСАСЕАТТ ТСАЕТЕСТАА • 5 Ь К
251 ЕСА6ССТЕАЕ
СЕТСЕЕАСТС
СРК2 ’ Е I N А Υ Υ ССЕЕТАТСАА СЕСАТАСТАС ЕЕССАТАЕТТ ЕСЕТАТЕАТЕ
А 0 К 1 ЕСАСАЕААСТ СЕТЕТСТТСА
Т А ϋ I АССССЕСАСЕ ТЕЕСЕССТЕС
Е 5 Т 3 5 ААТССАСЕАЕ : ТТАБЕТЕСТС
Т А Υ САСАЕССТАС ЕТЕТСЕЕАТЕ
Μ Е Ь 5 · АТЕЕАЕСТЕА ТАССТСЕАСТ
СРЕЗ
Е Р АТСТЕАЕЕАС ТАЕАСТССТЕ
Т А V Υ Υ С А АСБЕССЕТЕТ АТТАСТБТЕС ТЕССЕЕСАСА ТААТЕАСАСЕ
К 5 К ЕАБААЕСААЕ СТСТТСЕТТС
СРКЗ к е м υ се
301 ААВЕЕСАТЕТ ТТСССЕТАСА
И Т Υ Р
АСЕЕСЕЕСТЕ ЕАССТАСССС ТЕССЕССЕАС СТЕЕАТЕЕЕЕ
Ь Μ Μ Е Р Ь И СТЕАТСАТСТ ТСЕАССТЕТЕ ЕАСТАСТАСА АЕСТБЕАСАС •БОЕ
351 ЕЕЕССАЕЕЕС СССЕЕТСССЕ
Т Ь V Т V 3 5
АСССТЕЕТЕА ССЕТЕАЕСАЕ ТЕЕЕАССАСТ ЕЕСАСТСЕТС
1Ь-23 р!9 5040°/Εν УН-НСО (ЗЕО I Р N0:134) : (Аминокислотная последовательность ΥΗ представляет собой 5040Уй)
О V О ] САБЕТЕСАЕС ЕТССАСЕТСЕ
Ь V 0 5 БАЕ : ТЕЕТЕСАЕАС СЕЕСЕССЕАЕ Ϊ АССАСЕТСТС ЕССЕСЕЕСТС
V К К Р ЕТЕААЕААЕС ( САСТТСТТСЕ ( ’ е 3 5 ССЕЕСАЕСАЕ СССССТССТС
СРН1 • V К V СЕТЕААЕБТЕ ЕСАСТТССАС
С К А АЕСТЕСААЕБ ( ТСЕАСЕТТСС ( >. ЗЕБ ССАЕСЕЕСБЕ ЕЕТСЕССЕСС
ТЕЗ
САССТТСАЕС ЕТЕЕААЕТСЕ
N Υ I АЕСААСТАСА ТСЕТТЕАТЕТ
101 • 5 И V
ТСАЕСТЕЕЕТ АЕТСЕАСССА
К О А ЕСЕССАЕЕСС СЕСЕЕТССЕЕ
Р Е О Е Ь Е К СССЕЕССАЕ6 ЕССТЕЕАЕТЕ ЕЕЕССЕЕТСС СЕЕАССТСАС
Μ Е I ЕАТЕЕЕСАТС СТАСССЕТАЕ
151
Р Е Т АЕССССЕЕСА < ТСЕСБЕССЕТ <
201 • V Т I СЕТЕАССАТС ЕСАСТЕБТАЕ • 5 Ь К
251 ЕСАЕССТЕСЕ
СЕТСЕЕАСЕС
СРК2 ! Е I N А Υ Υ ССЕЕСАТСАА СЕССТАСТАС ЕЕССЕТАЕТТ ЕСЕЕАТЕАТЕ
А О К Р ЕСССАЕААЕТ ' СЕЕЕТСТТСА ;
’ О Е К · ТССАЕЕБССЕ АЕЕТСССЕОС
ТАРЕ АССЕССЕАСЕ I ТЕЕСЕССТЕС ' ; 5 Т 3 АЕАЕСАССАЕ ТСТСЕТЕЕТС
Т А Υ САССЕССТАС ЕТЕЕСБЕАТЕ
Μ Е Ь 8 АТЕЕАЕСТЕА ТАССТСЕАСТ
Е Р САССЕАБСАС БТСЕСТССТЕ
Т А V Υ УСА АССЕССЕТЕТ АСТАСТЕСЕС ТЕЕСЕЕСАСА ТЕАТЕАСЕСЕ
К 5 К ССЕСАБСААЕ ЕЕСЕТСЕТТС
СРЕЗ
К Е Μ Υ БЕИ 301 ААЕЕЕСАТЕТ ТТСССЕТАСА
Т Υ Р АСЕЕСЕЕСТЕ ЕАССТАСССС ТЕССЕССЕАС СТЕЕАТЕЕЕЕ
Ь Μ Μ Е Р Ь И СТЕАТСАТСТ ТСЕАССТЕТЕ ЕАСТАСТАСА АЕСТБЕАСАС • Е О В
351 ЕЕЕССАЕЕЕС СССЕЕТСССЕ
Т Ь V Т V 3 5 АСССТЕЕТЕА ССБТЕАЕСАЕ ТЕЕЕАССАСТ ЕЕСАСТСЕТС
11,-23 р19 5Ο4Οο;Εν
УН-МОК (5Е6 ΙΏ N0 :135) : (Аминокислотная последовательность УН представляет собой 5040УЬ)
О ν О 1 САббТбСААТ 6ТССАС6ТТА
Ъ V б 5 6 А Е ? ТббТТСАбТС ТббСбСббАА 1 АССААбТСАб АССЕСЕССТТ
V К К Р СТбААААААС I САСТТТТТТб <
> 6 5 3 ССббСАОСАб 6ССС6ТС6ТС
ΟϋΗΙ
- V К V СЗТОАААвТС 6САСТТТСАС
С К А АССТССАААб ( ТСОАССТТТС С и 2 С 6 сстссеслсе ббАбСССТСС
Т Г 5 САСТТТТТСТ 6Τ6ΑΑΑΑΑΘΑ
N У I ТСТААТТАТА АбАТТААТАТ
101 • 5 И V
ТТТСТТбббТ ААА6ААСССА
К б А 6ССССАА6СС СбСббТТСбб
Р б б 6 Ь Е И
ССТ66БСА66 6ТСТС6А6Т6
66АССС6ТСС СА6А6СТСАС
М Б I САТСбССАТТ СТАСССбТАА
6ϋΚ2
151
Р б Т ТСТССТбСТА I АбАббАССАТ I ' б I N
СТббТАТТАА
6АССАТААТТ АСбААТААТА
А У У ТССТТАТТАТ
А б К Г ССТСА6АА6Т ' С6А6ТСТТСА 3 1 оса ТТСАбббТСб АА6ТСССА6С
201 • ν т I 66Т6АССАТТ ССАСТббТАА
Т А ϋ Е АССОССбАТб : Т66С6ССТАС ' : 5 Т 5 АААбСАССАб ТТТСбТбОТС
Т А Υ САССбСбТАТ 6Т66С6САТА
Μ Е Ъ 5
АТ66ААСТ6А ТАССТТбАСТ • 5 Ь К
251 бСАСССТССб
СбТСССАССС
Е ϋ ТАССбААбАТ АТСССТТСТА
Т А V Υ УСА АСббССбТбТ АТТАТТбССС ТбССбОСАСА ТААТААСбСС
К 5 К
СС6ТТСТААС
С6САА6АТТС
СОЯЗ
К 6 М У б б и
301 АА6Б6ТАТ6Т
ТТСССАТАСА
ТУ? АТббТббТТб БАСТТАТССТ ТАССАССААС СТОААТАббА
Ъ Μ Μ Е ϋ Ь И · СТТАТбАТбТ ТТбАТСТТТб 6ААТАСТАСА ААСТАСАААС • б б а
351 ОббССААббС сссоеттссс
Т Ъ V Т V 5 5
АСССТббТбА СббТТАбСТС ТбббАССАСТ СССААТСБАЕ
11,-23 р19 5040ο/Εν νΚ-НСО (БЕб Ю N0:136) : (Аминокислотная последовательность УК представляет собой 4190Εν)
Е I V 3 САбАТСбТбС СТСТАССАСб
Ъ Т о Б РАТ : Т6АСССА6А6 СССС6ССАСС СТ6А6ССТ6А бССССббСбА ; АСТбббТСТС Б66БС6БТБС бАСТСббАСТ С66С6ССЕСТ
СОК1 •КАТ бСбббССАСС СССбСббТбб
Ъ Б С 1 СТбАбСТЕСС едстсаАссс
К А 5 б : 6С6ССА6ССА 6А6С6Т6А6С ; сбсббтсббт
СТСбСАСТСб
Б Ν Υ Ъ АбСААСТАСС ТСбТТбАТбб
101 • А И Υ
Т66ССТ66ТА АССббАССАТ б б к ССАбСАбААб 66ТС6ТСТТС
Ρ б б А СССббССАбб ( бббССббТСС (
Р к ь ссссссссст сесссссссА
Ь I Υ
6СТ6АТСТАС СбАСТАбАТб
ΟϋΚ2
151
Υ А 5 К ТАСбССАбСС ( АТбСббТСбб (
I КАТ б V Р 6СС6С6ССАС СббСбТбССС сббсббббтб ессосАСббб
А К Г 5 бСССбСТТСА I СбббСбААбТ I ; с ε с бСббСАбСбб сбссбтсбсс
201 • Б б Т САбСббСАСС бТСбССбТбб ϋ Е Т !> Т I Б 6АСТТСАССС ТбАССАТСАб СТбААбТббб АСТббТАбТС
Ь Е САбССТббАб бтсбблсстс
Ρ Е ϋ Г СССбАббАСТ бббстсстбА
6ϋΚ3
251
Υ С 0 СТАСТ6ССА6 6АТ6АС66ТС б Т 5 N ТРГ Т Е б САбАССАбСА АСАСССССТТ САССТТСбЕС ОТСТббТСбТ ТбТбббббАА 6Т66АА6ССС
301 б б Т К V Е I САбббСАССА Α66Τ6ΘΑ6ΑΤ бТСССбТббТ ТССАССТСТА к СААб 6ТТС
- 62 019476
ΙΚ-23 ρ19 5Ο4Οο/Εν νκ-нсо (5Εβ Ю N0:137) : (Аминокислотная последовательность УК представляет собой 4190Ευ)
Е I V I. Т 0 5 РАТ Ь 3 Ъ 3 РОЕ1 6АААТТСТСТ ТбАСАСАбТС ТССАСССАСС СТСТСТТТСТ СТССАСССЗА
СТТТААСАСА АСТСТСТСАС АССТС55ТСЗ САСАбАААСА ОАббТССССТ
СРК1 •КАТ Ь 8 С К А Б 0 8 V 5 Б Ν Υ 1>
ААбАСССАСС СТСТССТССА 6ССССАСТСА САСТСТТАСС А6СААСТАСТ ттстссстсс сдбАСблсбт ссссбтсаст стсасаатсс тссттсатса • А И Υ о о К Р б <2 А Р К Ъ Ъ I Υ
1.01 ТАСССТБ6ТА ССААСАБААА ССТЙбССАбС СТСССА66СТ ССТСАТСТАТ АТС66АССАТ 6СТТСТСТТТ ССАССббТСС САСССТСССА СБАбТАбАТА
СОК2
Υ А 8 К КАТ б V Р А К Е 8 686151 ТАС6САТССС 0СА6С0ССАС ТбОСБТСССА БССА6СТТСА СТС6СА6Т6С
АТССбТАССС ССТССССбТС АССССАСббТ СббТССААбТ САССбТСАСС • 5 б Т ϋ Е Т Ь Т I 8 ЗЪЕ Р Е ϋ Г 201 СТСТбббАСА САСТТСАСТС ТСАССАТСАС САСССТАСАб ССТ6АА6АТТ
СА6АСССТБТ СТбААбТбАО АбТббТАбТС 6ТС6БАТСТС 66АСТТСТАА
СйКЗ
- А V Υ Υ С О О Т Б N ТРЕ ТЕС
251 ТТ6СА6ТТТА ТТАСТ6ТСАС СА6АСТТСТА АТАСТССТТТ ТАССТТТЕСС ААСОТСАААТ ААТбАСАбТС 6ТСТ6АА6АТ ТАТбАббААА АТССАААССС
О 6 Т К V Е I К
301 САОббТАСбА АА6ТТ6АААТ ТААА 6ТСССАТ6СТ ТТСААСТТТА АТТТ
1Ъ-23 р19 5040°т УК-НСО(8Е0 Ю N0:138) : (Аминокислотная последовательность УК представляет собой 4190Εν)
Е I V Ь Т 0 5 РАТ ЬЗЬБ РСЕ·
САСАТССТСС ТСАСССАСАС СССССССАСС СТСАСССТСТ СТСССССССА СТСТАССАСС АСТСССТСТС СССССССТСС САСТСССАСА САСССССССТ
СОК1 •КАТ Ь 5 С К А 5 0 5 V 5 5ΝΥ1
АССТ6ССАСС СТСАССТССА САСССАСССА СТСТСТТТСТ ТСТААТТАТС ТССАСССТСС САСТССАССТ СТСССТСССТ САСАСАААСА АСАТТААТАС • А И Υ О О К Р С О А РКЬ Ь I Υ
101 ТСССТТССТА ССАССАСААА ССАССТСААС САСССССТСТ АТТААТТТАТ АСССААССАТ ССТССТСТТТ ССТССАСТТС СТСССССАСА ΤΑΑΤΤΑΆΑΤΑ
СОК2
Υ А 5 К КАТ СУР А К Р 5 С 5 С 151 ТАТССТТСТС СТССТССААС ТССССТСССС СССССТТТТА СССССТСТСС
АТАССААСАС САССАССТТС АССССАСССС СССССААААТ СССССАСАСС
- 5 С Т ϋ Г Т Ь ΤΙ5 5 Ιί Е РЕБГ
201 АТСССССАСС САТТТТАССС ТСАССАТТАС САСССТССАА ССТСААСАСТ
ТАСССССТСС СТААААТССС АСТССТААТС СТСССАССТТ ССАСТТСТСА
С№3 • А V Υ У С О О Т 5 N ТРЕ ТЕС
251 ТТССССТСТА ТТАТТСССАС САСАСТТСТА АТАСТССТТТ ТАССТТТССС ААССССАСАТ ААТААСССТС СТСТСААСАТ ТАТСАССААА АТССАААССС
О 6 Т К V Е I К
301 САСССТАССА ААСТТСАААТ ТААА
СТСССАТССТ ТТСААСТТТА АТТТ
- 63 019476
1Б-23 р19 3 759“'ов
УН-ССЕ( 5Е<2 ΙϋΝΟ :139): Аминокислотная последовательность УН представляет собой 4649г5)
Е V 0 ]
БАБ6Т0САБС стссАсетсе
V К К Р 6Т6ААААА6С ( САСТТТТТС6 ( сши.
• Ь К I
ТСТ6АА6АТС
А6АСТТСТА6 ; 5 Θ У БТТСТББАТА СААБАССТАТ
Ν Υ И I · ААСТАСТ66А ТТСАТБАССТ
101
И V
ТССБСТ6ССТ А6СС6АСССА ₽ 6 К 6 ЬЕИ ССССББАААБ 6ССТ66А6Т6 6ББСССТТТС С66АССТСАС
И 6 I
САТБ6Б6АТС стАсссстде
151
201 • V Т I 66ТСАССАТС ССАБТБбТАБ
25:
301
СРК2
N 5 У Т К У 6СААСТСТТА САССАОАТАС С6ТТ6А6ААТ БТСБТСТАТБ
А ϋ К 5 18 ТСА6СССАСА АСТССАТСАБ АБТСББСТБТ ТСАББТА6ТС
Ъ К
6САСССТБАА сстсселстт
Р 5 Г А6ССС6ТССТ ' ТС666СА66А ί ? 0 6 0 ТССААББССА А66ТТСС66Т
ΤΑΥ
САСС6ССТАС етбосеоАтс
1| О И 8
СТ6САБТС6А БАС6ТСАССТ
А ε В ТАМУ 66ССТСБ6АС АСС6ССАТ6Т ί СС66АБССТБ ТББСББТАСА ’
I Υ С А АТТАСТ6Т6С ТААТ6АСАС6
К Π У 6А6АТ66ТАС СТСТАССАТ6 связ р19 3 759е0'03
11,-23 _
УН-НСО(5Е0 Ю N0:140) :(Аминокислотная последовательность УН представляет собой 4649гЕ) .1
Е V О Ь V О 3 БАЕ 6АС6Т6СА5С ТББТ6САБА6 С66СБССБАБ СТССАСБТС6 АССАСБТСТС 6СС6СБССТС
V К К Р 6Т6ААБААБС ( САСТТСТТСБ С ? Б Е 8
ССБ6СБА6А6 ББССБСТСТС
СОК1 • Ь К I 8 С К Б ССТБААБАТС А6СТ6САА66 С БСАСТТСТА6 ТС6АСБТТСС <
; 8 Б Υ БСАБСББСТА СБТСБССБАТ
САБСТТСАБС БТСБААБТСБ
N У Η I · ААСТАСТБ6А ТТБАТБАССТ
101 • Б И V КОМ ТСББСТБББТ 6СБССА6АТБ АСССБАСССА С6С66ТСТАС
Р 6 К Б ЬЕИ СССББСААББ БССТББАБТБ БББССБТТСС С6БАССТСАС
И Б I
БАТБББСАТС
СТАСССБТА6
151
201
2'
301
351
СОК2
I О Р 8 N 8 У ТКУ АТСБАССССА БСААСАБСТА САСССБСТАС ТАБСТББББТ СБТТ6ТС6АТ БТБББСБАТБ
Р 3 ΐ ОБ АБССССАБСТ ТССАБ6БССА ТСБСББТС6А А66ТССС6БТ
Т А У Ъ 0 И Е САСС6ССТАС СТБСАБТББА БТББСБ6АТ6 6АСБТСАССТ • 3 Ь К АЗО ТАМУ БСАБССТБАА ББССАБСБАС АССБССАТБТ 1 СБТСББАСТТ ССББТС6СТ6 ТББСББТАСА
I УСА К И У АСТАСТБСБС СС6СТБ6ТАС ТБАТБАСБСБ 6БС6АССАТ6
СОКЗ у к р г υ ν и боб ТАСААБСССТ ТСБАСБТБТБ 666ССАБ6БС АТБТТСБББА А6СТБСАСАС СССББТСССБ
Т Ь V Т V 3 3 АСССТСНТСА ССБТБАБСАБ Т6Б6АССАСТ ББСАСТСБТС
- 64 019476
11>-23 р19 3759'®
УН-МОК (ЗЕО Ю N0:141): (Аминокислотная последовательность УН представляет собой 4649гЕ)
Е V О Ь V 0 3 БАЕ V К К Р ОАББТБСААТ ТББТТСАБАБ СБ6С6С66АА 6ТБААААААС С СТССАСБТТА АССААБТСТС БСС6СБССТТ САСТТТТТТ6 С ? Б Е 3 СБББСБАААБ 6СССБСТТТС
ΟβΚΙ ; 8 Б Υ 5 Г 5
БТТСС6БАТА ТТССТТТТСТ СААОБССТАТ ААББААААБА
Ν Υ И I · ААТТАТТ6БА ТТААТААССТ
101
Б И V КОМ ТТ66ТТБББТ БСБССАБАТБ ААССААСССА СБСББТСТАС
СВК2 ; ьеи бтстсбабтб САБАБСТСАС
М Б I БАТБББСАТТ СТАСССБТАА
151
I β Р 5 Ν8Υ Т К Υ АТС6АТССБТ СТААТА6СТА ТАСССБСТАТ ТАБСТАББСА БАТТАТСБАТ АТБББСБАТА
Р 8 Е ОБ ТСТССБАБСТ ТТСАБББССА АБАБ6СТСЕА ААБТСССБ6Т
201
Т I 8 А ϋ К 818 66ТБАССАТТ А6С6СББАТА АААБСАТТАБ ССАСТББТАА ТС6СБССТАТ ТТТСБТААТС
Т А Υ Ь О И £ САСС6С6ТАТ СТТСААТББА БТ6БСБСАТА БААБТТАССТ
251 • 8 1> К А 8 О Т А Μ Υ УСА К И Υ
БСА6ССТ6АА АБСБА6СБАТ АСББССАТСТ АТТАТТБСБС БСБТТ66ТАТ СБТСБ6АСТТ ТС6СТС6СТА Т6СС6БТАСА ТААТААС6С6 С6СААССАТА
ΟΌΚ3
301
Υ К Р Е В V И БОБ Т Ь V Т V 8 ТАТААБССТТ ТТБАТБТТТБ Б66ССААББС АСССТББТБА СББТТА6СТС АТАТТС6БАА ААСТАСАААС СССББТТСС6 Т6ББАССАСТ БССААТСБАБ
351
- 65 019476
1Б-23 р!9 3 759“'°*
УБ-ОСЕ (ЗЕО Ю ΝΟ: 142)ί (Аминокислотная последовательность УБ представляет собой 5О5905) а ТОР Р 3 V ТбАСССАбСС ЗСССТСАСТЕ АСТбСбТСбб СбббАбТСАС сыи • V Τ 1 ббТСАССАТС ССАбТббТАб ε с т в ТССТбСАСТС С А6САС6ТСАС ( б Υ I АбСббТТАТб ТСбССААТАС
101 • V Н И
АТОТАСАСТб
ТАСАТ6Т6АС
У О О ЗТАССАССАб САТббТССТС
Ь Р б Т СТТССАС6АА < 6АА66ТССТТ ( ? АРК
САССССССАА ОТСбббббТТ
11 I
АСТССТСАТС ΤΘΑΘ6Α6ΤΑ6
151
У б N 5 КНР 3 С V ТАТ66ТААСА бСААбСббСС СТСАббббТС АТАССАТТСТ СбТТСбССбб 6А6ТССССА6
Г 5 С Б ’ ТСТСТббСТС ι А6А6АСС6А6
201 δ А I ! СССТ66ССАТ I 6С6АСС66ТА
Т 6 ь САСТ666СТС 6Т6АССС6А6
О 8 Ε β · САбАбСбАбб 6ТСТС6СТСС сокз
251
А 3 И 1 6ССА6СТ66А СббТСбАССТ
Τ β б Б 1 ССбАСббССТ ? ббСТСССОЕА
Ь V 6А6ССТ66Т5 СТСббАССАС
301
V У б б О Т К 6Т6ТТСС6С6 бСббСАССАА САСААбССбС СбССбТбСТТ
Ь Т V 6СТ6АСС6Т6 С6АСТС6САС ъ с стбббс САСССС
759вд'08
1Б-23 р19
У11-НСО (БЕС Ю N0:143): (Аминокислотная последовательность УБ представляет собой 505905)
3 V Ъ ι С6Т6С
ХАСС 1 , ТОР Р 8 V ТбАСССАбСС ССССА6С6Т6 лстееетсбе бееетсесдс
СОВ.1 ,Ί
V Т I
СбТбАССАТС
6САСТ66ТА6 δ 6 У I А6С66СТАС6 ТС6СС6АТ6С ίο:
У о о 6ТАССА6СА6 САТ66ТС6ТС
Ь Р с т стзсссеесА < зАСбссссет ( : арк ССбСССССАА бббббббСТТ
1> β I 6СТ6СТ6АТС СбАСбАСТАб
СШ2
151
201
У б N 3 ТАСббСААСА ( АТбССбТТСТ ( • К 5 6
СААбАбСОбС ; 6ТТСТС6СС6 ' > Ь А I есстесссАт С66АСС60ТА
Р β К 1 СССбАССбСТ 666СТС6С6А
Т б 11
САСС66ССТС 6Т66ССО6А6
Г 5 6 3· ’ ТСАбСббСАб т А6ТС6СС6ТС
О 8 Ε β : САбАбСбАбб ; бтстсбстсс
СйАЗ
251 • Е А β
АССА66СС6А тсстсссзст
У У С
СТАСТАСТ6Т САТСАТбАСА
А 3 « Τ
6ССА6СТ6СА ( С66ТС6АССТ <
? β б Б ССбАСббССТ ббСТбССббА
Б V бАбССТббТС СТС66АССАС
301
V Ε 6 О 5 Т К СТСТТСббСб 6С66САССАА САСААбССбС СбССбТббТТ
Ь Т V бСТбАССбТб СбАСТбЕСАС
Ь 6
СТбббС
ОАСССб
11,-23 р19 3759“'®
УЬ-ΜΟΗ (5Е0 Ю ΝΟ: 144): (Аминокислотная последовательность УБ представляет собой 5059м)
СОК1
V Г I Б С Т В ТБТБАССАТС ТСБТБТАСББ С АСАСТ66ТАБ АБСАСАТ5СС С ; 8 3 3 N15 3 6 Υ I 5СА5САССАС СААСАТТСБТ ТСТ65ТТАТС С5ТС5ТС5ТС 5ГТ5ТААССА А5АССААТАС • ν н и υ а о АТ6Т5САТТ5 5ТАССАССАБ ТАСАСБТААС САТБСТСБТС
Ь Р Б Т АРК Ь Ь I ТТ6ССС55СА С56С5СССАА АСТТСТБАТТ ААС66ССССТ БССБСББСТТ ТБААБАСТАА
251
301
СОК2
ΟβΚ3
Г 5 0 3· ? ТТАБСББАТС Т ААТССССТАб
О 5 Ε β ·
САААБСБААО : бтгтсссттс • Е А β У У С АБИТ β Б П АС6ААССББА ТТАТТАТТ5С БСТТСТТББА СТ6АТ6БТСТ ТБСТТСБССТ ААТААТААСБ С5АА5ААССТ 5АСТАССА6А
Ь V ттстсттстт ААСА6ААСАА
V Е Б С СТК Ь Τ V ЬС 6Т6ТТТ65С5 БСБ6САС6АА БТТААССБТТ СТТББС САСАААСССС СБССБТБСТТ СААТТББСАА БААССБ
- 66 019476
8ЕЦ П> N0:145 (Субъединица 1Ь-23р19 человека)
Таблица 10
МеЕ Ьеи С1у Зег Агд А1а Уа1 МеЕ Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Ьеи Рго Тгр ТЬг
1 5 10 15
А1а С1п С1у Агд А1а Уа1 Рго С1у 61у Зег Зег Рго А1а Тгр ТЬг б1п
20 25 30
Суз 01п 01п Ьеи Зег С31п Ьуз Ьеи Суз ТЬг Ьеи А1а Тгр Зег А1а Н15
35 40 45
Рго Ьеи Уа1 С1у ΗΪ8 Мей Азр Ьеи Агд С1и 01и 01 у Азр 01и 01и ТЬг
50 55 60
ТЬг Азп Азр Уа1 Рго Низ 11е С1п Суз 01у Азр е1у Суз Азр Рго 01п
65 70 75 80
С1у Ьеи Агд Азр Азп Зег О1п РЬе Суз Ьеи С1п Агд 11е ΗΪ3 01п С1у
85 90 95
Ьеи Не РЬе Туг С1и Ьуз Ьеи Ьеи С1у Зег Азр 11е РЬе ТЬг С1у 51и
100 105 110
Рго Зег Ьеи Ьеи Рго Азр Зег Рго Уа1 А1а С1п Ьеи Ηί8 А1а Зег Ьеи
115 120 125
Ьеи С1у Ьеи Зег С1п Ьеи Ьеи 61п Рго 01и С1у ΗΪ8 Н18 Тгр С1и ТЬг
130 135 140
01п 61п 11е Рго Зег Ьеи Зег Рго Зег С1п Рго Тгр 01п Агд Ьеи Ьеи
145 150 155 160
Ьеи Агд РЬе Ьуз 11е Ьеи Агд Зег Ьеи С1п А1а РЬе Уа1 А1а Уа1 А1а
165 170 175
А1а Агд Уа1 РЬе А1а Н18 С1у А1а А1а ТЬг Ьеи Зег Рго
180 185
- 67 019476
Список последовательностей <110> СЕЫТОСОП, ΙΝΟ.
<120> ЧЕЛОВЕЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ 1Ц-23,
КОМПОЗИЦИИ, СПОСОБЫ И ПРИМЕНЕНИЕ <130> СЕЫ5117РСТ <140> ТО ВЕ Α33ΙΟΝΕΟ <141> 2006-12-28 <150> 60/754,889 <151> 2005-12-29 <160> 147 <170> ЕазЛЗЕО Еог ШпПоиз Уегзтоп 4.0 <210> 1 <211> 5 <212> РКТ <213> Ното зартепз <400> 1
Азп Туг А1а Не Зег
5 <210> 2 <211> 5
- 68 019476 <212> РЕТ <213> Ното зардепз <400> 2
Зег Азп Туг Не Зег
5 <210> 3 <211> 5 <212> РЕТ <213> Ното заргепз <400> 3
Азп Туг Тгр Не Зег
5 <210> 4 <211> 5 <212> РИТ <213> Ното зархепз <400> 4
Зег Туг Тгр Не ТНг
5
<210> 5
<211> 5
<212> РК.Т
<213> Ното зартепз
- 69 019476 <400> 5
Азп Туг Тгр Не С1у
5 <210> 6 <211> 5 <212> РВ.Т <213> Ното зархепз <400> 6
Зег РНе С1у Мек Зег
5 <210> 7 <211> 17 <212> РКТ <213> Ното зартепз <400> 7
С1у Не Не Рго МеН РНе С1у Туг А1а Азп Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п
10 15
С1у <210> 8 <211> 17 <212> РКТ <213> Ното зартепз
- 70 019476 <400> 8
С1у Не 11е Рго Уа1 РНе С1у РНе
5
С1у
ТНг ΗΪ3 Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п
15 <210> 9 <211> 17 <212> РРТ <213> Ното зартепз <400> 9
61у 11е Не Рго Не РНе С1у Нхз
5
С1у <210> 10 <211> 17 <212> РРТ <213> Ното зартепз <400> 10
Не Не Не Рго Рго Не С1у Азп
5
С1у
А1а Азп Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п
15
А1а Тгр Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п
15
<210> 11
<211> 17
<212> РРТ
<213> Ното зартепз
<400> 11
Ьеи 11е Азр Рго Азп РНе С1у С1у А1а Туг Туг А1а С1п Ьуз РЬе С1п
1 5 10 15
С1у <210> 12 <211> 17 <212> РРТ <213> Ното зариепз <400> 12
Ьеи Не Азр Рго Уа1 РЬе С1у С1у А1а Туг Туг А1а С1п Ьуз РЬе С1п
10 15
С1у
<210> 13
<211> 17
<212> РРТ
<213> Ното зариепз
<400> 13
Ьеи 11е Азр Рго Мек РЬе С1у С1у А1а Туг Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п
10 15
- 72 019476
С1у <210> 14 <211> 16 <212> РЕТ <213> Ното зардепз <400> 14
Не Азп А1а Ндз Ьеи С1у С1у ТНг Тгр Туг А1а С1п Ьуз РЬе С1п С1у
10 15 <210> 15 <211> 17 <212> РЕТ <213> Ното зардепз <400> 15
Не Зег Рго С1у ТНг б1у Не Азп А1а Туг Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п
10 15
С1у
<210> 16
<211> 17
<212> РЕТ
<213> Ното зардепз
<220>
- 73 019476 <221> ипзиге <222> (1)
<223> ЗупЬНезигеЬ Иитап зедиепсе нЬеге Хаа сап Ье С, I, ог Ь
<220>
<221> ипзиге
<222> (2)
<223> ЗупЫэезигеЬ Иитап зедиепсе мНеге Хаа сап Ье I ог 3
<220>
<221> ипзиге <222> (3) <223> ЗупЬИезхгеЬ Иитап зедиепсе «Неге Хаа сап Ье I, Р, Ν, ог ϋ <220>
<221> ипзиге <222> (4) <223> ЗупЫтезигеЬ Иитап зе^иеηсе мИеге Хаа сап Ье Р, С, ог А <220>
<221> ипзиге <222> (5)
<223> <223> ЗупЬИезигеЬ Ьитап зедиепсе иНеге Хаа сап Ье I, М, Р,
Т, Η, Ν, ог V
<220>
<221> ипзиге
<222> (б)
<223> ЗупЬЬезигеЬ Иитап зедиепсе «Неге Хаа сап Ье Г, I, С, ог Ь
<220>
- 74 019476 <221> ипзиге <222> (7) <223> 5γηϋϊΐθ3ίζθά Иитап зедиепсе мНеге Хаа сап С ог I <220>
<221> ипзиге <222> (8)
<223> ЗупЫтезигеЬ Иитап зериепсе иИеге Хаа сап Ье Η, Υ, Ν, ог
<220>
<221> ипзиге
<222> (9)
<223> ЗупЕИезигей Иитап зедиепсе мИеге Хаа сап Ье А ог Т
<220>
<221> ипзиге
<222> (10)
<223> ЗупЫтезхгеЬ Иитап зедиепсе нИеге Хаа сап Ье Ν, к, ог Υ
<400> 16
Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п
10 15
С1у
<210> 17
<211> 17
<212> РКТ
<213> Ното зариепз
- 75 019476 <400> 17
Тгр 11е Агд Рго С1у Азр Зег Азр
5
С1у
Тйг Агд Туг Зег Рго Зег Рйе С1и
15 <210> 18 <211> 19 <212> РРТ <213> Ното зархепз <400> 18
Уа1 Зег Туг Не Зег Зег Зег С1у
5
Уа1 Ьуз С1у <210> 19 <211> 17 <212> РРТ <213> Ното зарЬепз <400> 19
Не Не Азр Рго Зег Азп Зег Туг
5
61у
Зег Зег Тйг Туг Туг А1а Азр Зег
15
Тйг Азп Туг Зег Рго Зег Рйе С1п
15 <210> 20
- 76 019476 <211> 17 <212> ΡΚΤ <213> Ното зардепз <400> 20
Не Не Азр Рго Зег
Азп
Зег
Туг
ТНг
Агд
Туг
Зег
Рго Зег
РНе С1п
10 15
С1у <210> 21 <211> 17 <212> РЕТ <213> Ното зардепз <400> 21
Не Не Азр Рго Зег Азп Зег Туг ТНг Азр Туг Зег Рго Зег РНе 61п
10 15
С1у
<210> 22
<211> 17
<212> РКТ
<213> Ното зардепз
<400> 22
Не Не Зег Рго ТНг С1у Зег Уа1 ТНг Тгр Туг Зег Рго Зег РНе С1п
- 77 019476
С1у <210> 23 <211> 17 <212> РНТ <213> Ното зархепз <400> 23
Не Не Зег Рго ТНг С1у Зег
5
С1у <210> 24 <211> 17 <212> РНТ <213> Ното зархепз <400> 24
РНе 11е Зег Рго Азр 61у Зег
5
С1у
Зег ТНг Тгр Туг Зег Рго Зег РНе С1п
15
ТНг Тгр Туг Зег Рго Зег РНе С1п
15 <210> 25 <211> 17 <212> РКТ <213> Ното зартепз
- 78 019476 <400> 25
Не Не Зег Рго Зег С1у Зег Тйг
5
С1у
Тйг Тгр Туг Зег Рго Зег Рйе С1п
15
<210> 26
<211> 17
<212> РРТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 26
Не Не Зег Рго Тйг С1у Зег А1а
1 5
С1у
Тйг Тгр Туг Зег Рго Зег Рйе С1п
15 <210> 27 <211> 17
<212> РРТ <213> Ното зархепз
<400> 27 11е Не Азр Рго Уа1 Зег Зег Тгр
1 С1у 5
Тйг Ьуз Туг Зег Рго Зег Рйе С1п
15
- 79 019476
<210> 28
<211> 17
<212> РКТ
<213> Ното зариепз
<220>
<221> ипзиге <222> (3)
<223> ЗупЫаезхгеЬ Ьитап зедиепсе мНеге Хаа сап Ье ϋ ог 3
<220>
<221> ипзиге
<222> (5)
<223> ЗупОкезхгес) Ьитап зедиепсе ибеге Хаа сап Ье 3, V, ϋ, ог Т
<220>
<221> ипзиге <222> (6)
<223> ЗупЫ1ез1гес1 Ьитап зедиепсе ибеге Хаа сап Ье Ν, 8, ог 3
<220>
<221> ипзиге
<222> (8)
<223> ЗупЫаезигес! Ьитап зедиепсе мбеге Хаа сап Ье Υ, И, Т, Η, V, 3, ог А
<220>
<221> ипзиге <222> (10) <223> ЗупЕЬезигеЬ Ьитап зедиепсе ибеге Хаа сап Ье Ν, ϋ, К, К, ог И
- 80 019476 <400> 28
Не Не Хаа Рго Хаа Хаа Зег Хаа ТНг Хаа Туг Зег Рго Зег РНе С1п
10 15
С1у <210> 29 <211> 17 <212> РКТ <213> Ното заргепз <400> 29
Азп Не Зег Зег Зег С1у Зег Зег ТНг Туг Туг А1а Азр Зег Уа1 Ьуз
10 15
С1у <210> 30 <211> 19 <212> РКТ <213> Ното зархепз <400> 30
Азп Не С1и ΗΪ3 Ьуз Туг Ьеи Азп Туг А1а ТНг Туг Туг А1а А1а Зег
10 15
Уа1 Ьуз С1у <210> 31
<211> 19
<212> РКТ
<213> Ното зартепз
<400> 31
Азп Не С1и ΗΪ3 Ьуз РНе МеЬ 61у Туг ТНг ТИг Туг Туг А1а А1а 61у
1 5 10 15
Уа1 Ьуз С1у <210> 32 <211> 19 <212> РКТ <213> Ното зарьепз <400> 32
С1у 11е С1и Н1з Ьуз Туг Ьеи Зег Туг ТНг ТНг Н1з Туг А1а А1а Зег
1 5 10 15
Уа1 Ьуз С1у
<210> 33
<211> 19
<212> РКТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 33
Зег 11е С1и ΗΪ3 Ьуз Туг ТНг С1у Туг ТНг ТИг Туг Туг А1а А1а Рго
1 Уа1 Ьуз С1у 5 10 15
- 82 019476 <210> 34 <211> 19 <212> ΡΕΤ <213> Ното зардепз <400> 34
С1п 11е С1и Ндз Ьуз Туг Ьеи Зег Туг ТИг ТНг Ьеи Туг А1а А1а Зег
10 15
Уа1 Ьуз С1у <210> 35 <211> 19 <212> РЕТ <213> Ното зардепз <400> 35
Зег 11е С1и Ндз Ьуз Туг Ьеи Зег Туг ТНг ТНг РНе Туг А1а А1а Зег
10 15
Уа1 Ьуз С1у
<210> 36
<211> 19
<212> РЕТ
<213> Ното зардепз
- 83 019476 <400> 36
Азп Не <31и С1у Ьуз Туг ТИг Зег
5
Уа1 Ьуз С1у
Туг ТНг ТНг Туг Туг А1а А1а Зег
15 <210> 37 <211> 19 <212> РВ.Т <213> Ното зарЬепз <400> 37
С1у Не С1и Нтз Ьуз Туг Ьеи Зег
5
Уа1 Ьуз С1у
Туг А1а ТНг Ьеи Туг А1а А1а Зег
15 <210> 38 <211> 19 <212> РКТ <213> Ното зариепз <400> 38
Азп Не С1и Низ Ьуз Туг Ьеи С1у
5
Уа1 Ьуз С1у
Туг А1а ТНг Уа1 Туг А1а А1а Зег
15 <210> 39 <211> 19 <212> ΡΚΤ <213> Ното зариепз <400> 39
5ег 11е С1и Ηίε Ьуз Туг Ьеи Зег
5
Уа1 Ьуз С1у <210> 40 <211> 8 <212> РНТ <213> Ното зариепз <400> 40
Азр 11е Туг А1а С1у МеЕ Азр Уа1
5 <210> 41 <211> 18 <212> РКТ <213> Ното заргепз <400> 41
Зег Ьуз Ьуз С1у Мек Туг 61у С1у
5
Азр Ьеи
Туг А1а ТНг Туг Туг А1а А1а С1у
15
Тгр ТИг Туг Рго Ьеи МеЬ МеЬ РНе
15
- 85 019476
<210> 42
<211> 7
<212> РРТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 42
Н18 Туг Туг С1у Мей Азр Туг
5 <210> 43 <211> 12 <212> РРТ <213> Ното зардепз <400> 43
С1у Тйг Рйе Тгр Зег Рйе С1у Азп Туг Рйе А1а Азп
10 <210> 44 <211> 8 <212> РРТ <213> Ното зархепз <400> 44
Тгр Туг Туг Ьуз Рго Рйе Азр Уа1
5
- 86 019476 <210> 45 <211> 12 <212> ΡΚΤ <213> Ното зариепз <400> 45
Туг Тгр С1у ТИг Рго Туг Ьеи Мек С1п РНе Азр Азп
1 5 10
<210> 46
<211> 12
<212> РКТ
<213> Ното зариепз
<400> 46
Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Ьеи С1у Азп Туг Ьеи А1а
1 5 10
<210> 47 <211> 12 <212> ΡΚΤ <213> Ното зариепз <400> 47
Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп Туг Ьеи А1а
10
<210> 48
<211> 13
<212> РРТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 48
Зег С1у Зег Зег Зег Азп 11е С1у Зег Туг Туг Уа1 Азп
1510
<210> 49
<211> 11
<212> РРТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 49
Агд А1а Зег С1п Зег 11е Рйе Туг Азп Ьеи А1а
1510
<210> 50
<211> 14
<212> РРТ
<213> Ното зархепз
<400> 50
Тйг (31у Зег Зег Зег Азп 11е С1у Зег С1у Туг Азр Уа1 ΗΪ3
1510 <210> 51 <211> 14
- 88 019476 <212> ΡΚΤ <213> Ното заргепз <400> 51
ТНг С1у ТИг Зег Зег Азр Уа1 С1у С1у Туг Азп Зег Уа1 Зег
10 <210> 52 <211> 7 <212> РК.Т <213> Ното зархепз <400> 52
С1у А1а Зег Зег Агд А1а ТИг
5 <210> 53 <211> 7 <212> РКТ <213> Ното зархепз <400> 53
Туг А1а Зег Агд Агд А1а ТНг
5
<210> 54
<211> 7
<212> РКТ
<213> Ното зараепз
- 89 019476 <400> 54
С1у Азп ТНг Ндз Агд Рго 5ег
5 <210> 55 <211> 7 <212> РЕТ <213> Ното зардепз <400> 55
С1у А1а Зег Азп Агд А1а ТНг
5 <210> 56 <211> 7 <212> РЕТ <213> Ното зардепз <400> 56
01у Азп Зег Ьуз Агд Рго Зег
1 5
<210> <211> <212> <213> 57 7 РЕТ Ното зардепз
- 90 019476 <400> 57
Зег Уа1 Зег Зег Агд Рго Зег
5 <210> 58 <211> 9 <212> РКТ <213> Ното зархепз <400> 58
ΗΪ3 С1п Туг С1у Зег 11е Зег ТНг ТНг
5 <210> 59 <211> 9 <212> РНТ <213> Ното зарЬепз <400> 59
С1п 31п Туг Зег Н13 Ьеи Ьеи 11е ТНг
5 <210> 60 <211> 9 <212> РК.Т <213> Ното зарЬепз <400> 60
- 91 019476
31η 51η Туг Зег Η15 Не Зег Ьеи ТЬг
5
<210> 61
<211> 9
<212> РНТ
<213> Ното зариепз
<400> 61
31п С1п РЬе А1а Н13 11е Ьеи Ьеи ТЬг
1 5
<210> 62
<211> 9
<212> РКТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 62
31η 31п ТЬг Зег Азп ТЬг Рго РЬе ТЬг
1 5
<210> 63
<211> 9
<212> РКТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 63
31η 31п РЬе Не ТЬг Туг Ьеи Рго ТЬг
- 92 019476
1 5
<210> 64
<211> 9
<212> РКТ
<213> Ното зартепз
<400> 64
01η С1п Азр А1а Ьеи Зег Рго РНе ТНг
5 <210> 65 <211> 9 <212> РК.Т <213> Ното зариепз <400> 65
С1п С1п Азр Агд С1у ТНг Рго РНе ТНг
5 <210> 66 <211> 9 <212> РКТ <213> Ното зариепз <400> 66
С1п С1п Зег Ьеи Азп Не Рго РНе ТНг
5
- 93 019476 <210> 67 <211> 9 <212> ΡΡΤ <213> Ното зарбепз <400> 67
С1п С1п Азр Тйг Зег Зег Рго Рйе Тйг
5 <210> 68 <211> 10 <212> РРТ <213> Ното заргепз <220>
<221> ипзиге <222> (3)
<223> Зупййезлгеб йитап зедиепсе ийеге Хаа сап Ье Т, Г, о, ог 3
<220>
<221> ипзиге
<222> (4)
<223> Зупййезхгеб йитап зедиепсе ийеге Хаа сап Ье 3, I, А, т, К, ог Ь
<220>
<221> ипзиге
<222> (5)
<223> ЗупЬйезйгеЬ йитап зедиепсе ийеге Хаа сап Ье Ν, т, Ь, 3, ог 3
<220>
- 94 019476 <221> ипзиге <222> (6) <223> ЗупЫэезигеЬ Иитап зедиепсе иНеге Хаа сап Ье Т
Υ, 3, ог I <220>
<221> ипзиге <222> (7) <223> ЗупЫтезтгеЬ Иитап зедиепсе «Неге Хаа сап Ье Р ог Ь <220>
<221> ипзиге <222> (8) <223> ЗупЕИезигеЬ Ьитап зедиепсе мИеге Хаа сап Ье Е ог Р <400> 68
С1п С1п Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа РНе ТНг
10
<210> 69
<211> 11
<212> РКТ
<213> Ното заргепз
<400> 69
С1п ТИг Туг А1а Зег Ьеи С1у Рго С1у С1и Уа1
10 <210> 70 <211> 9
- 95 019476 <212> РКТ <213> Ното зартепз <400> 70
С1п С1п Туг Зег Зег С1и Рго Уа1 ТНг
5 <210> 71 <211> 9 <212> РКТ <213> Ното зарьепз <400> 71
Зег Зег Тгр ТНг Рго Зег Зег Уа1 Уа1
5
<210> 72
<211> 11
<212> РКТ
<213> Ното зарьепз
<400> 72
Зег Зег Тгр ТНг Азр ТНг
Рго Азп МеН 11е Уа1 <210> 73 <211> 11 <212> РКТ
- 96 019476 <213> Ното зархепз <400> 73
А1а Зег Тгр ТНг Азр С1у Ьеи Зег Ьеи Уа1 Уа1
1 5 10
<210> 74
<211> 11
<212> РК.Т
<213> Ното зариепз
<220>
<221> ипзиге
<222> (1)
<223> ЗупЬИезхгеЬ Ьитап зедиепсе иИеге Хаа сап Ье 3 ог А
<220>
<221> ипзиге <222> (б) <223> ЗупЫгезЬгеб Иитап зедиепсе мИеге Хаа сап Ье Т ог 5 <220>
<221> ипзиге <222> (7)
<223> ЗупЫгезигеЬ Иитап зедиепсе иИеге Хаа сап Ье Р ог Ь
<220>
<221> ипзиге
<222> (8)
<223> ЗупЬИезигеЬ Иитап зедиепсе мИеге Хаа сап Ье 3 ог N
- 97 019476 <220>
<221> ипзиге <222> (9) <223> ЗупЕНездгеб Нитап зедиепсе мНеге Хаа сап Ье 3, М, ог Ь <220>
<221> ипзиге <222> (10) <223> ЗупЬИездгеЬ Нитап зедиепсе мНеге Хаа сап Ье I ог V <400> 74
Хаа Зег Тгр ТИг Азр Хаа Хаа Хаа Хаа Хаа Уа1
10
<210> 75
<211> 11
<212> РЕТ
<213> Ното зардепз
<400> 75
Зег Зег Туг Азр ТИг Азп Ьуз Рго Ьеи Уа1 Уа1
10
<210> 76
<211> 11
<212> РЕТ
<213> Ното зардепз
- 98 019476 <400> 76
С1у Зег Туг Азр Уа1 Туг С1у Агд РНе Туг Уа1
1 5 10
<210> 77
<211> 11
<212> РЕТ
<213> Ното заргепз
<400> 77
Зег Зег Туг Туг РНе Туг Ьеи С1п Агд 11е Уа1
1 5 10
<210> 78
<211> 11
<212> РЕТ
<213> Ното зариепз
<400> 78
С1п ТНг Туг Туг РНе Зег Туг Зег С1у Рго Уа1
1 5 10
<210> 79
<211> 11
<212> РЕТ
<213> Ното заргепз
<400> 79
С1у Зег Тгр Азр Рго 11е РНе Зег Туг С1и Уа1
10 <210> 80 <211> 117 <212> РКТ <213> Ното зарЬепз <400> 80
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 σΐη Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у Зег
1 5 10 15
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у 61у ТЬг РЬе Зег Азп Туг
20 25 30
А1а 11е Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр МеЬ
35 40 45
С1у 61у 11е 11е Рго Меб РЬе С1у Туг А1а Азп Туг А1а С1п Ьуз РЬе
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 ТЬг 11е ТЬг А1а Азр С1и Зег ТЬг Зег ТЬг А1а Туг
65 70 75 80
Мей С1и Ьеи Зег Зег Ьеи Агд Зег С1и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Азр 11е Туг А1а С1у Меб Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТЬг Ьеи
100 105 но
Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115
<210> 81
<211> 113
<212> РКТ
<213> Ното зарЬепз
100 019476 <400> 81
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у Зег
1 5 10 15
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1 а Зег С1у С1у ТНг РНе Зег Азп Туг
20 25 30
А1а Не Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр МеЬ
35 40 45
С1у С1у Не Не Рго РНе С1у Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п 61у Агд Уа1
50 55 60
ТНг Не ТНг А1а Азр С1и Зег ТНг Зег ТНг А1а Туг Мек С1и Ьеи Зег
65 70 75 80
Зег Ьеи Агд Зег С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Азр Не
85 90 95
Туг А1а С1у Мек Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег
100 105 НО
Зег <210> 82 <211> 108 <212> РКТ <213> Ното зартепз <400> 82
Азр 1 Не Уа1 Ьеи ТНг С1п 5 Зег Рго А1а ТНг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 61у
С1и Агд А1а ТНг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Ьеи 61у Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
- 101 019476
11е Туг С1у 50 А1а Зег Зег Агд 55 А1а Тйг С1у Уа1 Рго 60 А1а Агд Рйе Зег
С1у Зег С1у Зег С1у Тйг Азр Рйе Тйг Ьеи Тйг Не Зег Зег Ьеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр Рйе А1а Уа1 Туг Туг Суз ΗΪ3 С1п Туг С1у Зег Не Зег
85 90 95
Тйг Тйг Рйе С1у Θ1Π С1у Тйг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105
<210> 83
<211> 105
<212> РРТ
<213> Ното заргепз
<400> 83
Азр 1 Не Уа1 Ьеи Тйг С1п Зег Рго А1а Тйг Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
5 10
С1и Агд А1а Тйг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Ьеи С1у Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
11е Туг С1у А1а Зег Зег Агд А1а Тйг С1у Уа1 Рго А1а Агд Рйе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у Тйг Азр Рйе Тйг Ьеи Тйг Не Зег Зег Ьеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр Рйе А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п Туг Не Зег Ьеи Тйг Рйе
85 90 95
С1у С1п С1у Тйг Ьуз Уа1 С1и Не Ьуз
100 105
102 <210> 84 <211> 103 <212> ΡΚΤ <213> Ното зархепз <400> 84
Азр 1 11е Уа1 Ьеи ТНг 5 С1п Зег Рго А1а ТНг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а ТИг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Ьеи С1у Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
Не Туг С1у А1а Зег Зег Агд А1а ТИг С1у Уа1 Рго А1а Агд РНе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у ТИг Азр РИе ТНг Ьеи ТИг 11е Зег Зег Ьеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр РИе А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п Туг 11е ТНг РНе С1у 61п
85 90 95
С1у ТИг Ьуз Уа1 С1и Не Ьуз
100 <210> 85 <211> 102 <212> ΡΡΤ <213> Ното зариепз <400> 85
Азр 1 11е Уа1 Ьеи ТНг 5 С1п Зег Рго А1а ТНг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а ТНг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Ьеи С1у Азп
103 019476
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
Не Туг С1у А1а Зег Зег Агд А1а Ткг С1у Уа1 Рго А1а Агд Рке Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у Ткг Азр Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Зег Зег Ьеи 61и
65 70 75 80
Рго С1и Азр Рке А1а Уа1 Туг Туг Суз С1п 11е Ткг Рке С1у Θΐη С1у
85 90 95
Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100
<210> 86
<211> 127
<212> РКТ
<213> Ното зар1епз
<400> 86
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а О1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у Зег
1 5 10 15
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у С1у Ткг Рке Зег Зег Азп
20 25 30
Туг 11е Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у С1у 11е 11е Рго 11е Рке С1у ΗΪ3 А1а Азп Туг А1а О1п Ьуз Рке
50 55 60
С1п С1у Агд Уа1 Ткг Не Ткг А1а Азр С1и Зег Ткг Зег Ткг А1а Туг
65 70 75 80
Мер С1и Ьеи Зег Зег Ьеи Агд Зег С1и Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Зег Ьуз Ьуз С1у Мек Туг С1у С1у Тгр Ткг Туг Рго Ьеи Мек
- 104 019476
100
105
НО
Мек РНе Азр Ьеи Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи
Уа1
ТНг Уа1
Зег Зег
115
120
125 <210> 87 <211> 122 <212> РКТ <213> Ното зарЬепз <400> 87
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у Зег
1 5 10 15
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у С1у ТНг РНе Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Не Зег Тгр Уа1 Агд Θΐη А1а Рго С1у Θΐη С1у Ьеи С1и Тгр МеЬ
35 40 45
С1у Не Не Рго С1у А1а Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п С1у Агд Уа1 ТНг
50 55 60
Не ТНг А1а Азр С1и Зег ТНг Зег ТНг А1а Туг Мер С1и Ьеи Зег Зег
65 70 75 80
Ьеи Агд Зег С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Зег Ьуз Ьуз
85 90 95
С1у МеЬ Туг С1у С1у Тгр ТНг Туг Рго Ьеи МеЬ Мер РНе Азр Ьеи Тгр
100 105 110
С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 88 <211> 118 <212> РКТ
- 105 019476 <213> Ното зариепз <400> 88
Θΐη 1 Уа1 С1п Ьеи Уа1 5 С1п Зег С1у А1а С1и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 Зег
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у С1у Ткг Рке Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Не Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у А1а 50 Туг А1а Θΐη Ьуз Рке С1п С1у 55 Агд Уа1 Ткг 60 11е Ткг А1а Азр
С1и Зег Ткг Зег Ткг А1а Туг МеЬ С1и Ьеи Зег Зег Ьеи Агд Зег С1и
65 70 75 80
Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Зег Ьуз Ьуз С1у Мек Туг С1у
85 90 95
С1у Тгр Ткг Туг Рго Ьеи МеЬ МеЬ Рке Азр Ьеи Тгр С1у С1п С1у Ткг
100 105 но
Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
115 <210> 89 <211> 119 <212> РКТ <213> Ното зархепз <400> 89
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у Зег
1 5 10 15
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у С1у Ткг Рке Зег Зег Азп
- 106 019476
20 25 30
Туг Не Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у 11е С1у Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п С1у Агд Уа1 ТНг 11е ТНг А1а
50 55 60
Азр 61и Зег ТНг Зег ТНг А1а Туг МеЬ С1и Ьеи Зег Зег Ьеи Агд Зег
65 70 75 80
С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Зег Ьуз Ьуз С1у МеЬ Туг
85 90 95
С1у С1у Тгр ТНг Туг Рго Ьеи Мек Мек РНе Азр Ьеи Тгр С1у С1п С1у
100 105 но
ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 <210> 90 <211> 122 <212> РИТ <213> Ното зархепз <400> 90
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у Зег
1 5 10 15
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у С1у ТНг РНе Зег Зег Азп
20 25 30
Туг 11е Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр МеЬ
35 40 45
61у Не Рго РНе С1у А1а Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п С1у Агд Уа1 ТНг
50 55 60
11е ТНг А1а Азр С1и Зег ТНг Зег ТНг А1а Туг Мек С1и Ьеи Зег Зег
65 70 75 80
- 107 019476
Ьеи Агд Зег С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Зег Ьуз Ьуз
85 90 95
С1у Мек Туг С1у С1у Тгр ТНг Туг Рго Ьеи Мек Мек РНе Азр Ьеи Тгр
100 105 110
61у С1п С1у ТИг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 91
<211> 122
<212> РКТ
<213> Ното зардепз
<400> 91
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у Зег
1 5 10 15
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у С1у ТНг РНе Зег Зег Азп
20 25 30
Туг 11е Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у 11е Рго РНе С1у А1а Туг А1а С1п Ьуз РНе С1п С1у Агд Уа1 ТНг
50 55 60
11е ТНг А1а Азр 61и Зег ТНг Зег ТНг А1а Туг Мек 61и Ьеи Зег Зег
65 70 75 80
Ьеи Агд Зег С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Зег Ьуз Ьуз
85 90 95
С1у Мек Туг С1у С1у Тгр ТНг Туг Рго Ьеи Мек Мек РНе Азр Ьеи Тгр
100 105 110
С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег Зег
115 120
- 108 019476 <210> 92 <211> 122 <212> ΡΚΤ <213> Ното зариепз <400> 92
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 Зег
5 10
Зег Уа1 Ьуз Уа1 Зег Суз Ьуз А1а Зег С1у С1у Ткг Рке Зег Зег Азп
20 25 30
Туг 11е Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у С1п С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у 11е Рго Рке С1у А1а Туг А1а С1п Ьуз Рке С1п С1у Агд Уа1 Ткг
50 55 60
11е Ткг А1а Азр С1и Зег Ткг Зег Ткг А1а Туг Мек С1и Ьеи Зег Зег
65 70 75 80
Ьеи Агд Зег С1и Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Зег Ьуз Ьуз
85 90 95
С1у Мек Туг С1у С1у Тгр Ткг Туг Рго Ьеи Мек Мек Рке Азр Ьеи Тгр
100 105 110
С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
115 120 <210> 93 <211> 108 <212> ΡΗΤ <213> Ното заргепз <400> 93
Азр Не Уа1 Ьеи Ткг С1п Зег Рго А1а Ткг Ьеи Зег Ьеи Зег Рго С1у
10 15
- 109 019476
С1и Агд А1а ТИг 20 Ьеи Зег Суз Агд А1а 25 Зег С1п Зег Уа1 Зег 30 Зег Азп
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
Не Туг Туг А1а Зег Агд Агд А1а ТНг С1у Уа1 Рго А1а Агд РНе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у ТНг Азр РНе ТНг Ьеи ТНг Не Зег Зег Ьеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр РНе А1а ТНг Туг Туг Суз С1п С1п ТНг Зег Азп ТНг Рго
85 90 95
РНе ТИг РНе С1у С1п С1у ТНг Ьуз Уа1 С1и Не Ьуз
100 105
<210> 94
<211> 107
<212> РЕТ
<213> Ното зариепз
<400> 94
С1и Не Уа1 Ьеи ТНг С1п Зег Рго А1а ТНг Ьеи Зег Ьеи Зег Рго С1у
1 5 10 15
С1и Агд А1а ТНг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
Не Туг Туг А1а Зег Агд Агд А1а ТНг С1у Уа1 Рго А1а Агд РНе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у ТНг Азр РНе ТНг Ьеи ТНг Не Зег Зег Ьеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр РНе А1а Туг Туг Суз С1п С1п ТНг Зег Азп ТИг Рго РНе
90 95
- 110 019476
Ткг РНе С1у С1п О1у Тйг Ьуз Уа1 С1и Не Ьуз
100 105 <210> 95 <211> 101 <212> РКТ <213> Ното зарЬепз <400> 95
Азр 1 11е Уа1 Ьеи Ткг 5 С1п Зег Рго А1а Ткг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а Ткг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
11е Туг Туг А1а Зег Агд Агд А1а Ткг С1у Уа1 Рго А1а Агд РЬе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у Ткг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр РЬе А1а Туг Туг Суз С1п С1п ТЬг Рке С1у С1п С1у ТЬг
85 90 95
Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100
<210> 96
<211> 103
<212> РКТ
<213> Ното зариепз
<400> 96
- 111 019476
Азр 1 11е Уа1 Ьеи Тйг С1п Зег 5 Рго А1а Тйг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а Тйг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
11е Туг Туг А1а Зег Агд Агд А1а Тйг С1у Уа1 Рго А1а Агд Рйе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у Тйг Азр Рйе Тйг Ьеи Тйг Не Зег Зег Ьеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр Рйе А1а Туг Туг Суз С1п С1п Рго Рйе Тйг Рйе С1у С1п
85 90 95
С1у Тйг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100
<210> 97
<211> 104
<212> РКТ
<213> Ното зархепз
<400> 97
Азр 1 Не Уа1 Ьеи Тйг 5 С1п Зег Рго А1а Тйг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а Тйг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
Не Туг Туг А1а Зег Агд Агд А1а Тйг С1у Уа1 Рго А1а Агд Рйе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у ТЙГ Азр Рйе Тйг Ьеи Тйг Не Зег Зег Ьеи С1и
- 112 019476
65 70 75 80
Рго С1и Азр РЬе А1а Туг Туг Суз С1п 61п ТЬг Рго РЬе ТЬг РЬе С1у
85 90 95
С1п С1у ТЬг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100
<210> 98
<211> 104
<212> РКТ
<213> Ното зархепз
<400> 98
Азр 1 11е Уа1 Ьеи ТЬг С1п 5 Зег Рго А1а ТЬг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а ТЬг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег Уа1 Зег Зег Азп
20 25 30
Туг Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи
35 40 45
11е Туг Туг А1а Зег Агд Агд А1а ТЬг С1у Уа1 Рго А1а Агд РЬе Зег
50 55 60
С1у Зег С1у Зег С1у ТЬг Азр РЬе ТЬг Ьеи ТЬг 11е Зег Зег Ьеи С1и
65 70 75 80
Рго С1и Азр РЬе А1а Туг Туг Суз С1п Θΐη Азп Рго РЬе ТЬг РЬе С1у
85 90 95
С1п С1у ТЬг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100
<210> 99 <211> 116 <212> РКТ
- 113 019476 <213> Ното зархепз <400> 99
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у С1и
1 5 10 15
Зег Ьеи Ьуз 11е Зег Суз Ьуз С1у Зег С1у Туг Зег РНе ТНг Азп Туг
20 25 30
Тгр 11е Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр МеЕ
35 40 45
С1у Тгр 11е Агд Рго С1у Азр Зег Азр ТИг Агд Туг Зег Рго Зег РНе
50 55 60
С1и С1у С1п Уа1 ТИг 11е Зег А1а Азр Ьуз Зег Не Зег ТНг А1а Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Тгр Зег Зег Ьеи Ьуз А1а Зег Азр ТИг А1а Мек Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Низ Туг Туг С1у МеН Азр Туг Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1
100 105 110
ТНг Уа1 Зег Зег
115 <210> 100 <211> 110 <212> РКТ <213> Ното зартепз <400> 100
Азр Не Уа1 Ьеи ТНг С1п Рго Рго Зег Уа1 Зег С1у А1а Рго С1у 61п
1 5 10 15
Агд Уа1 ТНг Не Зег Суз Зег С1у Зег Зег Зег Азп 11е С1у Зег Туг
25 30
- 114 019476
Туг Уа1 Азп 35 Тгр Туг С1п С1п Ьеи 40 Рго С1у Ткг А1а Рго 45 Ьуз Ьеи Ьеи
Не Туг С1у Азп Ткг ΗΪ3 Агд Рго Зег С1у Уа1 Рго Азр Агд Рке Зег
50 55 60
С1у Зег Ьуз Зег С1у Ткг Зег А1а Зег Ьеи А1а Не Ткг С1у Ьеи С1п
65 70 75 80
Зег С1и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз С1п Ткг Туг А1а Зег Ьеи С1у
85 90 95
Рго 61у С1и Уа1 Рке С1у С1у С1у Ткг Ьуз Ьеи Ткг Уа1 Ьеи
100 105 110
<210> 101
<211> 121
<212> РКТ
<213> Ното зариепз
<400> 101
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег 61у С1у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у Рке’ Ткг Рке Зег Зег Туг
20 25 30
Тгр 11е Ткг Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Туг 11е Зег Зег Зег С1у Зег Зег Ткг Туг Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз С1у Агд Рке Ткг Не Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи 61п Мек Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд С1у Ткг Рке Тгр Зег Рке С1у Азп Туг Рке А1а Азп Тгр С1у
100 105 110
- 115 019476
С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
115 120 <210> 102 <211> 107 <212> РКТ <213> Ното зараепз <400> 102
Азр 1 11е Уа1 Ьеи Ткг С1п Зег 5 Рго А1а Ткг 10 Ьеи Зег Ьеи Зег Рго 15 С1у
С1и Агд А1а Ткг Ьеи Зег Суз Агд А1а Зег С1п Зег 11е Рке Туг Азп
20 25 30
Ьеи А1а Тгр Туг С1п С1п Ьуз Рго С1у С1п А1а Рго Агд Ьеи Ьеи 11е
35 40 45
Туг С1у А1а Зег Азп Агд А1а Ткг С1у Уа1 Рго А1а Агд Рке Зег С1у
50 55 60
Зег С1у Зег С1у Ткг Азр Рке Ткг Ьеи Ткг 11е Зег Зег Ьеи С1и Рго
65 70 75 80
С1и Азр Рке А1а Ткг Туг Туг Суз С1п С1п Туг Зег Зег С1и Рго Уа1
85 90 95
Ткг Рке С1у С1п С1у Ткг Ьуз Уа1 С1и 11е Ьуз
100 105 <210> 103 <211> 117 <212> РК.Т <213> Ното зариепз <400> 103
- 116 019476
61η Уа1 61п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а 61и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у С1и
1 5 10 15
Зег Ьеи Ьуз 11е Зег Суз Ьуз 61у Зег С1у Туг Зег РНе Зег Азп Туг
20 25 30
Тгр Не 61у Тгр Уа1 Агд 61п Мек Рго 61у Ьуз 61у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
61у 11е 11е Азр Рго Зег Азп Зег Туг ТНг Азп Туг Зег Рго Зег РЬе
50 55 60
61п С1у 61п Уа1 ТНг 11е Зег А1а Азр Ьуз Зег 11е Зег ТНг А1а Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п Тгр Зег Зег Ьеи Ьуз А1а Зег Азр ТНг А1а Мек Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Тгр Туг Туг Ьуз Рго Рке Азр Уа1 Тгр 61у 61п С1у ТНг Ьеи
100 105 но
Уа1 ТИг Уа1 Зег Зег
115
<210> 104
<211> 116
<212> РЕТ
<213> Ното зариепз
<400> 104
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег 5 С1у А1а С1и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 61и
Зег Ьеи Ьуз 11е Зег Суз Ьуз С1у Зег С1у Туг Зег РНе Зег Азп Туг
20 25 30
Тгр 11е С1у Тгр Уа1 Агд 61п Мек Рго 61у Ьуз С1у Ьеи 61и Тгр МеЬ
35 40 45
61у 11е 11е Азр Рго Зег Азп Зег Туг ТНг Туг Зег Рго Зег РНе С1п
- 117 019476
50 55 60
С1у С1п Уа1 ТИг 11е Зег А1а Азр Ьуз Зег 11е Зег ТНг А1а Туг Ьеи
65 70 75 80
Θΐη Тгр Зег Зег Ьеи Ьуз А1а Зег Азр ТНг А1а МеН Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд Тгр Туг Туг Ьуз Рго РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п 61у ТНг Ьеи Уа1
100 105 110
ТИг Уа1 Зег Зег
115
<210> 105
<211> 116
<212> РКТ
<213> Ното зархепз
<400> 105
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго 61у С1и
1 5 10 15
Зег Ьеи Ьуз 11е Зег Суз Ьуз С1у Зег С1у Туг Зег РНе Зег Азп Туг
20 25 30
Тгр 11е С1у Тгр Уа1 Агд Θΐη МеЬ Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр МеЬ
35 40 45
С1у 11е 11е Азр Рго Зег Азп Зег Туг ТНг Туг Зег Рго Зег РНе С1п
50 55 60
С1у С1п Уа1 ТНг Не Зег А1а Азр Ьуз Зег 11е Зег ТНг А1а Туг Ьеи
65 70 75 80
С1п Тгр Зег Зег Ьеи Ьуз А1а Зег Азр ТНг А1а МеЬ Туг Туг Суз А1а
85 90 95
Агд Тгр Туг Туг Ьуз Рго РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1
100 105 110
ТНг Уа1 Зег Зег
- 118 019476
115 <210> 106 <211> 115 <212> РКТ <213> Ното зариепз <400> 106
Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у С1и Зег
1 5 10 15
Ьеи Ьуз Не Зег Суз Ьуз С1у Зег С1у Туг Зег РНе Зег Азп Туг Тгр
20 25 30
Не С1у Тгр Уа1 Агд С1п Мек Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Мек С1у
35 40 45
Не Не Азр Рго Зег Азп Зег Туг ТНг Туг Зег Рго Зег РНе С1п С1у
50 55 60
С1п Уа1 ТНг Не Зег А1а Азр Ьуз Зег Не Зег ТНг А1а Туг Ьеи С1п
65 70 75 80
Тгр Зег Зег Ьеи Ьуз А1а Зег Азр ТНг А1а Мек Туг Туг Суз А1а Агд
85 90 95
Тгр Туг Туг Ьуз Рго РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг
100 105 но
Уа1 Зег Зег
115
<210> 107
<211> 113
<212> РКТ
<213> Ното зариепз
- 119 019476 <400> 107
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 С1и
5 10
Зег Ьеи Ьуз Не Зег Суз Ьуз С1у Зег С1у Туг Зег РНе Зег Азп Туг
20 25 30
Тгр Не С1у Тгр Уа1 Агд Θΐη Мек Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у Не Не Азр Рго Зег ТНг Туг Зег Рго Зег РНе С1п С1у С1п Уа1
50 55 60
ТНг Не Зег А1а Азр Ьуз Зег Не Зег ТНг А1а Туг Ьеи С1п Тгр Зег
65 70 75 80
Зег Ьеи Ьуз А1а Зег Азр ТНг А1а Мек Туг Туг Суз А1а Агд Тгр Туг
85 90 95
Туг Ьуз Рго РНе Азр Уа1 Тгр С1у Θΐη С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег
100 105 НО
Зег <210> 108 <211> 113 <212> РК.Т <213> Ното зарЬепз <400> 108
С1п 1 Уа1 С1п Ьеи Уа1 5 С1п Зег С1у А1а 51и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 С1и
Зег Ьеи Ьуз Не Зег Суз Ьуз С1у Зег С1у Туг Зег РНе Зег Азп Туг
20 25 30
Тгр Не С1у Тгр Уа1 Агд С1п Мек Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Мек
- 120 019476
35 40
С1у Не 11е Рго Зег Зег Ткг Туг
50 55
Ткг 11е Зег А1а Азр Ьуз Зег Не
65 70
Зег Ьеи Ьуз А1а Зег Азр Ткг А1а
85
Туг Ьуз Рго Рке Азр Уа1 Тгр С1у
100
Зег
45
Зег Рго Зег Рке С1п С1у С1п Уа1
60
Зег Ткг А1а Туг Ьеи Θΐη Тгр Зег
75 80
Мек Туг Туг Суз А1а Агд Тгр Туг
90 95
С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег
105 110
<210> 109 <211> 111 <212> ΡΚΤ <213> Ното зариепз
<400> 109 Уа1 5 С1п Зег С1у
С1п Уа1 1 С1п Ьеи
Зег Ьеи Ьуз Не Зег Суз Ьуз С1у
20
Тгр Не С1у Тгр Уа1 Агд С1п Мек
35 40
С1у 11е Рго Зег Ткг Туг Зег Рго
50 55
Зег А1а Азр Ьуз Зег Не Зег Ткг
65 70
Ьуз А1а Зег Азр Ткг А1а Мек Туг
85
А1а С1и Уа1 10 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 С1и
Зег С1у Туг Зег Рке Зег Азп Туг
25 30
Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Мек
45
Зег Рке С1п С1у Θ1Π Уа1 Ткг Не
60
А1а Туг Ьеи С1п Тгр Зег Зег Ьеи
75 80
Туг Суз А1а Агд Тгр Туг Туг Ьуз
90 95
- 121 019476
Рго Рке Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
100 105 110
<210> 110
<211> 112
<212> РКТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 110
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у С1и
1 5 10 15
Зег Ьеи Ьуз Не Зег Суз Ьуз С1у Зег С1у Туг Зег Рке Зег Азп Туг
20 25 30
Тгр Не С1у Тгр Уа1 Агд С1п Мек Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у Не Не Рго Зег Ткг Туг Зег Рго Зег Рке С1п С1у С1п Уа1 Ткг
50 55 60
Не Зег А1а Азр Ьуз Зег 11е Зег Ткг А1а Туг Ьеи С1п Тгр Зег Зег
65 70 75 80
Ьеи Ьуз А1а Зег Азр Ткг А1а Мек Туг Туг Суз А1а Агд Тгр Туг Туг
85 90 95
Ьуз Рго Рке Азр Уа1 Тгр С1у Θΐη С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
100 105 но
<210> 111 <211> 112 <212> РКТ <213> Ното зарЬепз <400> 111
- 122 019476
61η Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1п Зег С1у А1а С1и Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у С1и
1 5 10 15
Зег Ьеи Ьуз Не Зег Суз Ьуз С1у Зег С1у Туг Зег РЬе Зег Азп Туг
20 25 30
Тгр Не С1у Тгр Уа1 Агд С1п Мек Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у Не Не Рго Зег ТЪг Туг Зег Рго Зег РЬе С1п С1у С1п Уа1 ТЬг
50 55 60
Не Зег А1а Азр Ьуз Зег Не Зег ТИг А1а Туг Ьеи С1п Тгр Зег Зег
65 70 75 80
Ьеи Ьуз А1а Зег Азр ТЬг А1а Мек Туг Туг Суз А1а Агд Тгр Туг Туг
85 90 95
Ьуз Рго Рйе Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
100 105 НО
<210> 112
<211> 112
<212> РКТ
<213> Ното зариепз
<400> 112
С1п Уа1 1 С1п Ьеи Уа1 5 61п Зег С1у А1а С1и 10 Уа1 Ьуз Ьуз Рго С1у 15 61и
Зег Ьеи Ьуз Не Зег Суз Ьуз 61у Зег 61у Туг Зег РЬе Зег Азп Туг
20 25 30
Тгр Не С1у Тгр Уа1 Агд 61п Мек Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Мек
35 40 45
С1у Не Не Рго Зег ТНг Туг Зег Рго Зег РЬе С1п С1у С1п Уа1 Ткг
50 55 60
Не Зег А1а Азр Ьуз Зег Не Зег Ткг А1а Туг Ьеи С1п Тгр Зег Зег
65 70 75 80
- 123 019476
Ьеи Ьуз А1а Зег Азр 85 Ткг А1а Мек Туг Туг Суз А1а Агд Тгр Туг Туг
90 95
Ьуз Рго РНе Азр Уа1 Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
100 105 110
<210> 113
<211> 109
<212> РКТ
<213> Ното зархепз
<400> 113
Азр 1 Не Уа1 Ьеи ТЬг 5 С1п Рго Рго Зег Уа1 10 Зег С1у А1а Рго С1у 15 С1п
Агд Уа1 ТНг 11е Зег Суз ТНг С1у Зег Зег Зег Азп 11е С1у Зег С1у
20 25 30
Туг Азр Уа1 Н13 Тгр Туг С1п С1п Ьеи Рго С1у ТНг А1а Рго Ьуз Ьеи
35 40 45
Ьеи 11е Туг С1у Азп Зег Ьуз Агд Рго Зег С1у Уа1 Рго Азр Агд РЬе
50 55 60
Зег С1у Зег Ьуз Зег С1у ТЬг Зег А1а Зег Ьеи А1а 11е ТЬг С1у Ьеи
65 70 75 80
С1п Зег С1и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз Зег Зег Тгр ТЬг Рго Зег
85 90 95
Зег Уа1 Уа1 РЬе С1у С1у С1у ТЬг Ьуз Ьеи Ткг Уа1 Ьеи
100 105
<210> 114 <211> 106 <212> РКТ
- 124 019476 <213> Ното заргепз <400> 114
Азр Не Уа1 Ьеи Тйг С1п Рго Рго Зег Уа1 Зег С1у А1а Рго С1у С1п
1 5 10 15
Агд Уа1 Тйг 11е Зег Суз Тйг С1у Зег Зег Зег Азп Не С1у Зег С1у
20 25 30
Туг Азр Уа1 ΗΪ8 Тгр Туг С1п С1п Ьеи Рго С1у Тйг А1а Рго Ьуз Ьеи
35 40 45
Ьеи 11е Туг С1у Азп Зег Ьуз Агд Рго Зег С1у Уа1 Рго Азр Агд Рйе
50 55 60
Зег С1у Зег Ьуз Зег С1у Тйг Зег А1а Зег Ьеи А1а Не Тйг С1у Ьеи
65 70 75 80
С1п Зег С1и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз Зег Зег Тгр Тйг Рго Уа1
85 90 95
Рйе С1у С1у С1у Тйг Ьуз Ьеи Тйг Уа1 Ьеи
100 105
<210> 115
<211> 106
<212> РРТ
<213> Ното : заргепз
<400> 115
Азр 11е Уа1 Ьеи Тйг С1п Рго Рго Зег Уа1 Зег 61у А1а Рго С1у С1п
1 5 10 15
Агд Уа1 Тйг 11е Зег Суз Тйг С1у Зег Зег Зег Азп Не С1у Зег С1у
20 25 30
Туг Азр Уа1 Низ Тгр Туг С1п С1п Ьеи Рго С1у Тйг А1а Рго Ьуз Ьеи
35 40 45
Ьеи 11е Туг С1у Азп Зег Ьуз Агд Рго Зег С1у Уа1 Рго Азр Агд Рйе
- 125 019476
50 55
Зег С1у Зег Ьуз Зег С1у ТНг Зег
65 70
С1п Зег С1и Азр С1и А1а Азр Туг
85
РНе С1у С1у С1у ТИг Ьуз Ьеи ТНг
100
60
А1а Зег Ьеи А1а Не ТНг С1у Ьеи
75 80
Туг Суз Зег Тгр ТНг Зег Уа1 Уа1
90 95
Уа1 Ьеи
105
<210> 116
<211> 104
<212> РЕТ
<213> Ното зардепз
<400> 116
Уа1 1 Ьеи ТНг С1п Рго 5 Рго Зег Уа1 Зег С1у А1а 10 Рго С1у С1п Агд 15 Уа1
ТНг Не Зег Суз ТНг С1у Зег Зег Зег Азп Не С1у Зег С1у Туг Азр
20 25 30
Уа1 Ндз Тгр Туг С1п С1п Ьеи Рго С1у ТНг А1а Рго Ьуз Ьеи Ьеи Не
35 40 45
Туг С1у Азп Зег Ьуз Агд Рго Зег С1у Уа1 Рго Азр Агд РНе Зег С1у
50 55 60
Зег Ьуз Зег С1у ТНг Зег А1а Зег Ьеи А1а Не ТНг С1у Ьеи С1п Зег
65 70 75 80
С1и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз Зег Тгр ТНг Зег Уа1 Уа1 РНе С1у
85 90 95
С1у С1у ТНг Ьуз Ьеи ТНг Уа1 Ьеи
100
<210> 117
- 126 019476 <211> 121 <212> РКТ <213> Ното зартепз <400> 117
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у С1у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у РЬе ТЬг РЬе Зег Зег РЬе
20 25 30
31у Меб Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Азп Не Зег Зег Зег С1у Зег Зег ТЬг Туг Туг А1а Азр Зег Уа1
50 55 60
Ьуз С1у Агд РЬе ТЬг Не Зег Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТЬг Ьеи Туг
65 70 75 80
Ьеи С1п МеЬ Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и Азр ТЬг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85 90 95
А1а Агд Туг Тгр 31у ТЬг Рго Туг Ьеи Меб С1п РЬе Азр Азп Тгр С1у
100 105 110
С1п С1у ТЬг Ьеи Уа1 ТЬг Уа1 Зег Зег
115 120
<210> 118 <211> 114 <212> РКТ <213> Ното зарЬепз <400> 118
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 31и Зег С1у С1у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у 31у
- 127 019476
1 5
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а
20
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а
35 40
Зег Азп Не С1у Ткг Туг Туг А1а
50 55
Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи
65 70
А1а С1и Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг
85
Туг Ьеи Мек С1п Рке Азр Азп Тгр
100
Зег Зег
10 15
Зег 61у Рке Ткг Рке Зег Зег Рке
25 30
Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
45
Уа1 Ьуз С1у Агд Рке Ткг Не Зег
60
Туг Ьеи С1п МеЬ Азп Зег Ьеи Агд
75 80
Суз А1а Агд Туг Тгр С1у Ткг Рго
90 95
С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1
105 110
<210> 119 <211> 113 <212> ΡΚΤ <213> Ното зараепз
<400> 119
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у
1 5
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а
20
С1у МеЬ Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а
35 40
Зег Не С1у Ткг Туг Туг А1а Уа1
50 55
Азр Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг
61у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
10 15
Зег С1у Рке Ткг Рке Зег Зег Рке
25 30
Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
45
Ьуз С1у Агд Рке Ткг Не Зег Агд
60
Ьеи С1п МеЬ Азп Зег Ьеи Агд А1а
- 128 019476
65 70 75 80
С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Туг Тгр С1у ТНг Рго Туг
85 90 95
Ьеи Мек С1п РНе Азр Азп Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 Зег
100 105 НО
Зег <210> 120 <211> 114 <212> РЕТ <213> Ното зарЬепз
<400> 120
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег 61у
1 5
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а
20
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а
35 40
Зег Азп Не ТНг Туг Туг А1а Зег
50 55
Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТНг Ьеи
65 70
А1а С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг
85
Туг Ьеи Мер С1п РНе Азр Азп Тгр
100
Зег Зег
С1у С1у 10 Ьеи Уа1 С1п Рго С1у 15 С1у
Зег С1у РНе ТНг РНе Зег Зег РНе
25 30
Рго С1у Ьуз С1у Ьеи (Ии Тгр Уа1
45
Уа1 Ьуз С1у Агд РНе ТНг Не Зег
60
Туг Ьеи С1п МеЪ Азп Зег Ьеи Агд
75 80
Суз А1а Агд Туг Тгр С1у ТНг Рго
90 95
С1у С1п (Ну ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1
105 но
- 129 019476 <210> 121 <211> 114 <212> ΡΚΤ <213> Ното зариепз <400> 121
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у С1у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у РНе ТНг РНе Зег Зег РНе
20 25 30
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Азп 11е ТИг Туг Туг А1а Зег Уа1 Ьуз С1у Агд РНе ТНг 11е Зег
50 55 60
Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТИг Ьеи Туг Ьеи С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд
65 70 75 80
А1а С1и Азр ТИг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Туг Тгр С1у ТНг Рго
85 90 95
Туг Ьеи МеЕ С1п РИе Азр Азп Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1
100 105 но
Зег Зег
<210> 122
<211> 114
<212> РКТ
<213> Ното заргепз
<400> 122
130 019476
С1п Уа1 61п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у 61у
1 5
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег
20 25
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго
35 40
Зег Азп 11е С1у ТНг Туг А1а Зег Уа1
50 55
Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТНг Ьеи Туг
65 70
А1а С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз
85
Туг Ьеи Мек С1п РНе Азр Азп Тгр С1у
100 105
Зег Зег
С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
10 15
С1у РНе ТНг РНе Зег Зег РНе
30
С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
45
Ьуз С1у Агд РНе ТНг 11е Зег
60
Ьеи С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд
75 80
А1а Агд Туг Тгр С1у ТНг Рго
90 95
С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1 но <210> 123 <211> 112 <212> ΡΚΤ <213> Ното зархепз <400> 123
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у С1у
1 5
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег
20 25
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго
35 40
Зег 11е ТНг Туг Туг А1а Уа1 Ьуз С1у
50 55
С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
10 15
С1у РНе ТНг РНе Зег Зег РНе
30
С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
45
Агд РНе ТНг 11е Зег Агд Азр
- 131 019476
Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг Ьеи С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и
65 70 75 80
Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Туг Тгр С1у Ткг Рго Туг Ьеи
85 90 95
Мек С1п Рке Азр Азп Тгр С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
100 105 НО
<210> 124
<211> 112
<212> РИТ
<213> Ното зархепз
<400> 124
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у С1у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у Рке Ткг Рке Зег Зег Рке
20 25 30
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Не Ткг Туг А1а Зег Уа1 Ьуз С1у Агд Рке Ткг Не Зег Агд Азр
50 55 60
Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг Ьеи С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и
65 70 75 80
Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Туг Тгр С1у Ткг Рго Туг Ьеи
85 90 95
Мек С1п Рке Азр Азп Тгр С1у 61п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
100 105 но
<210> 125 <211> 112
- 132 019476 <212> ΡΗΤ <213> Ното зартепз
<400> 125 С1у
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег
1 5
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а
20
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а
35 40
Зег 11е Ткг Туг А1а Зег Уа1 Ьуз
50 55
Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг Ьеи
65 70
Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а
85
Мек С1п Рке Азр Азп Тгр С1у С1п
100
С1у С1у 10 Ьеи Уа1 С1п Рго С1у 15 С1у
Зег С1у Рке Ткг Рке Зег Зег Рке
25 30
Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
45
С1у Агд Рке Ткг 11е Зег Агд Азр
60
С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и
75 80
Агд Туг Тгр С1у Ткг Рго Туг Ьеи
90 95
С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
105 110
<210> 126 <211> 112 <212> ΡΗΤ
<213> Ното : зартепз
<400> 126
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у
1 5
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а
20
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а
С1у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
10 15
Зег С1у Рке Ткг Рке Зег Зег Рке
25 30
Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
- 133 019476
35 40 45
Зег Не Ткг Туг А1а Зег Уа1 Ьуз С1у Агд Рке Ткг Не Зег Агд Азр
50 55 60
Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг Ьеи С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и
65 70 75 80
Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Туг Тгр С1у Ткг Рго Туг Ьеи
85 90 95
Мек С1п Рке Азр Азп Тгр С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
100 105 НО
<210> 127
<211> 112
<212> РНТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 127
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у С1у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег 61у Рке Ткг Рке Зег Зег Рке
20 25 30
С1у Мек Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Не Ткг Туг А1а Зег Уа1 Ьуз С1у Агд Рке Ткг Не Зег Агд Азр
50 55 60
Азп Зег Ьуз Азп Ткг Ьеи Туг Ьеи С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд А1а С1и
65 70 75 80
Азр Ткг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Туг Тгр С1у Ткг Рго Туг Ьеи
85 90 95
Мек С1п Рке Азр Азп Тгр С1у С1п С1у Ткг Ьеи Уа1 Ткг Уа1 Зег Зег
100 105 110
134 019476
<210> 128
<211> 111
<212> РРТ
<213> Ното заргепз
<400> 128
Азр Не А1а Ьеи Тйг С1п Рго А1а Зег Уа1 Зег С1у Зег Рго С1у С1п
1 5 10 15
Зег Не Тйг Не Зег Суз Тйг С1у Тйг Зег Зег Азр Уа1 С1у С1у Туг
20 25 30
Азп Зег Уа1 Зег Тгр Туг С1п С1п Н13 Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи
35 40 45
Мей Не Туг Зег Уа1 Зег Зег Агд Рго Зег С1у Уа1 Зег Азп Агд Рйе
50 55 60
Зег С1у Зег Ьуз Зег С1у Азп Тйг А1а Зег Ьеи Тйг Не Зег С1у Ьеи
65 70 75 80
С1п А1а С1и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз Зег Зег Туг Азр Тйг Азп
85 90 95
Ьуз Рго Ьеи Уа1 Уа1 Рйе С1у С1у С1у Тйг Ьуз Ьеи Тйг Уа1 Ьеи
100 105 НО <210> 129 <211> 104 <212> РРТ <213> Ното заргепз <400> 129
Азр Не А1а Ьеи Тйг С1п Рго А1а Зег Уа1 Зег С1у Зег Рго С1у С1п
1 5 10 15
135 019476
Зег 11е ТИг 11е Зег 20 Суз ТНг С1у ТНг 25 Зег Зег Азр Уа1 С1у 30 С1у Туг
Азп Зег Уа1 Зег Тгр Туг С1п С1п ΗΪ3 Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи
35 40 45
Мек 11е Туг Зег Уа1 Зег Зег Агд Рго Зег С1у Уа1 Зег Азп Агд РНе
50 55 60
Зег С1у Зег Ьуз Зег С1у Азп ТНг А1а Зег Ьеи ТНг Не Зег С1у Ьеи
65 70 75 80
С1п А1а 61и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз Зег Зег Туг Уа1 РНе С1у
85 90 95
С1у С1у ТИг Ьуз Ьеи ТНг Уа1 Ьеи
100
<210> 130
<211> 102
<212> РНТ
<213> Ното зарЬепз
<400> 130
Азр Не А1а Ьеи ТНг С1п Рго А1а Зег Уа1 Зег С1у Зег Рго С1у С1п
1 5 10 15
Зег Не ТНг Не Зег Суз ТНг С1у ТНг Зег Зег Азр Уа1 С1у С1у Туг
20 25 30
Азп Зег Уа1 Зег Тгр Туг С1п С1п Низ Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи
35 40 45
МеЬ Не Туг Зег Уа1 Зег Зег Агд Рго Зег С1у Уа1 Зег Азп Агд РНе
50 55 60
Зег С1у Зег Ьуз Зег С1у Азп ТНг А1а Зег Ьеи ТНг Не Зег С1у Ьеи
65 70 75 80
С1п А1а С1и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз Туг Уа1 РНе С1у С1у С1у
90 95
136
ТНг Ьуз Ьеи ТНг Уа1 Ьеи
100 <210> 131 <211> 104 <212> РКТ <213> Ното зарЬепз <400> 131
Азр 1 11е А1а Ьеи ТИг 5 С1п Рго А1а Зег Уа1 10 Зег С1у Зег Рго С1у 15 С1п
Зег 11е ТНг 11е Зег Суз ТИг С1у ТНг Зег Зег Азр Уа1 С1у С1у Туг
20 25 30
Азп Зег Уа1 Зег Тгр Туг С1п С1п Низ Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи
35 40 45
Мек 11е Туг Зег Уа1 Зег Зег Агд Рго Зег С1у Уа1 Зег Азп Агд РНе
50 55 60
Зег 61у Зег Ьуз Зег С1у Азп ТНг А1а Зег Ьеи ТНг 11е Зег С1у Ьеи
65 70 75 80
С1п А1а С1и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз Зег Туг Азр Уа1 РНе С1у
85 90 95
С1у С1у ТНг Ьуз Ьеи ТНг Уа1 Ьеи
100
<210> 132
<211> 103
<212> РКТ
<213> Ното зариепз
<400> 132
- 137 019476
Азр 11е А1а Ьеи ТЬг С1п Рго А1а Зег Уа1 Зег С1у Зег Рго С1у С1п
1 5 10 15
Зег 11е ТЬг Не Зег Суз ТЬг С1у ТЬг Зег Зег Азр Уа1 С1у 51у Туг
20 25 30
Азп Зег Уа1 Зег Тгр Туг С1п С1п Ηί3 Рго С1у Ьуз А1а Рго Ьуз Ьеи
35 40 45
Мей 11е Туг Зег Уа1 Зег Зег Агд Рго Зег 01у Уа1 Зег Азп Агд РЬе
50 55 60
Зег С1у Зег Ьуз Зег С1у Азп ТЬг А1а Зег Ьеи ТЬг 11е Зег С1у Ьеи
65 70 75 80
С1п А1а С1и Азр С1и А1а Азр Туг Туг Суз Зег Азр Уа1 РЬе С1у С1у
85 90 95
С1у Ткг Ьуз Ьеи ТЬг Уа1 Ьеи
100
<210> 133
<211> 381
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 133
саддкдсадс ЬддЬдсадкс ЬддддсЬдад дЬдаадаадс сЬдддЬссЬс ддБдааддЪс 60
ЬссЬдсаадд сЕЕсЬддадд сассЕЕсадс адсааскаса ЬсадсЬддд'Ь дсдасаддсс 120
ссЬддасаад ддсЬЬдадЬд даЬддддайс адсссбддса ссддЬаксаа сдса1:ас1:ас 180
дсасадаадЬ Ессадддсад адЬсасдаЪЕ ассдсддасд аабссасдад сасадсс^ас 240
аЬддадсбда дсадссЬдад аЬсЬдаддас асддссдкдЬ аЬЬасЬдЬдс дадаадсаад 300
аадддсаЬдЬ асддсддсбд дассЬасссс сЬдаЬдаЬдЬ ЬсдассЬдЬд дддссадддс 360
асссЬддбда ссдбдадсад с 381
<210> 134
<211> 381
- 138 019476 <212> ДНК <213> Ното заргепз <400> 134
саддкдсадс кддкдсадад сддсдссдад дкдаадаадс ссддсадсад сдкдааддкд 60
адскдсаадд ссадсддсдд сасскксадс адсааскаса ксадскдддк дсдссаддсс 120
сссддссадд дсскддадкд дакдддсакс адссссддса ссддсаксаа сдсскаскас 180
дсссадаадк кссадддссд сдкдассакс ассдссдасд ададсассад сассдсскас 240
акддадскда дсадсскдсд садсдаддас ассдссдкдк аскаскдсдс ссдсадсаад 300
аадддсакдк асддсддскд дасскасссс скдакдакдк ксдасскдкд дддссадддс 360
ассскддкда ссдкдадсад с 381
<210> 135
<211> 381
<212> ДНК
<213> Ното заргепз
<400> 135
саддкдсаак кддкксадкс кддсдсддаа дкдаааааас сдддсадсад сдкдааадкд 60
адскдсааад сскссддадд саскккккск кскааккака ккксккдддк дсдссаадсс 120
сскдддсадд дксксдадкд дакдддсакк ксксскддка скддкаккаа кдсккаккак 180
дсксадаадк кксадддксд ддкдассакк ассдсддакд ааадсассад сассдсдкак 240
акддааскда дсадсскдсд кадсдаадак асддссдкдк аккаккдсдс дсдккскаад 300
аадддкакдк акддкддккд дасккаксск сккакдакдк ккдакскккд дддссааддс 360
ассскддкда сддккадскс а
381
<210> 136
<211> 324
<212> ДНК
<213> Ното зархепз
<400> 136
- 139 019476
дадаксдкдс кдасссадад ссссдссасс скдадсскда дссссддсда дсдсдссасс 60
скдадскдсс дсдссадсса дадсдкдадс адсааскасс кддсскддка ссадсадаад 120
сссддссадд ссссссдсск дскдакскас касдссадсс дссдсдссас сддсдкдссс 180
дсссдсккса дсддсадсдд садсддсасс даскксассс кдассаксад садсскддад 240
сссдаддаск ксдссдкдка скаскдссад садассадса асассссскк сасскксддс 300
садддсасса аддкддадак саад 324
<210> 137
<211> 324
<212> ДНК
<213> Ното зараепз
<400> 137
даааккдкдк кдасасадкс кссадссасс скдкскккдк скссадддда аададссасс 60
сксксскдса дддссадкса дадкдккадс адсааскаск кадсскддка ссаасадааа 120
сскддссадд сксссаддск ссксакскак касдсакссс дсадддссас кддсдкдсса 180
дссаддккса дкддсадкдд дкскдддаса даскксаскс ксассаксад садсскадад 240
сскдаадакк ккдсадккка ккаскдксад садасккска акаскссккк касскккддс 300
садддкасда аадккдааак кааа 324
<210> 138
<211> 324
<212> ДНК
<213> Ното зараепз
<400> 138
дадаксдкдс кдасссадад сссддсдасс скдадсскдк скссдддсда асдкдсдасс 60
скдадскдса дадсдадсса дкскдкккск кскааккакс кддсккддка ссадсадааа 120
ссаддксаад сассдсдкск аккаакккак какдсккскс дксдкдсаас кддддксссд 180
дсдсдкккка дсддскскдд акссддсасд даккккассс кдассаккад садсскддаа 240
сскдаадаск ккдсддкдка ккаккдссад садасккска акаскссккк касскккддс 300
садддкасда аадккдааак кааа 324
- 140 019476
<210> 139
<211> 351
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 139
даддбдсадс ЕддЕдсадЕс Еддадсадад дбдааааадс ссддддадкс ЕсЕдаадаЕс 60
ЕссЕдЕаадд дЕЕсЪддаба садсНЕадс ааскасЕдда ЕсддсЕдддЕ дсдссадабд 120
сссдддааад дссЕддадбд дабддддаЬс аксдасссЕа дсаасЕсЕЕа сассадабас 180
адсссдбсск Ессааддсса ддбсассабс Есадссдаса адЬссабсад сассдссбас 240
сЪдсадкдда дсадссбдаа ддссксддас ассдссаЬдб аНаскдЪдс дадаЕддЕас 300
ЕасаадсссЕ ЕсдасдЕдЕд дддссадддс асссЪддкда ссдЪдадсад с 351
<210> 140
<211> 351
<212> ДНК
<213> Ното
<400> 140
даддкдсадс ЕддЕдсадад сддсдссдад дбдаадаадс ссддсдадад ссЕдаадакс 60
адсбдсаадд дсадсддска садс££саде аасЪасбдда ЕсддсЕдддЕ дсдссадабд 120
сссддсаадд дссЕддадбд даЪдддса^с аксдасссса дсаасадсЕа сасссдскас 180
адссссадсЕ Ьссадддсса дд^дасса^с адсдссдаса ададсаЕсад сассдссбас 240
сЕдсадбдда дсадссбдаа ддссадсдас ассдссабдк асЕасЕдсдс ссдсЕддкас 300
ЕасаадсссЕ ЪсдасдЕдЕд дддссадддс асссбддкда ссдкдадсад с 351
<210> 141
<211> 351
<212> ДНК
<213> Ното
- 141 019476 <400> 141
даддкдсаак кддкксадад сддсдсддаа дкдаааааас сдддсдааад сскдаааакк 60
адскдсааад дккссддака ккссккккск ааккаккдда ккддккдддк дсдссадакд 120
сскдддаадд дксксдадкд дакдддсакк аксдакссдк скаакадска касссдскак 180
кскссдадск кксадддсса ддкдассакк адсдсддака ааадсаккад сассдсдкак 240
скксаакдда дсадсскдаа адсдадсдак асддссакдк аккаккдсдс дсдккддкак 300
какаадсскк ккдакдкккд дддссааддс ассскддкда сддккадскс а 351
<210> 142
<400> 142
ООО
<210> 143
<211> 336
<212> ДНК
<213> Ното зардепз
<400> 143
садкскдкдс кдасдсадсс дсссксадкд кскддддссс садддсадад ддксассакс 60
ксскдсаскд ддадсадскс саасаксддд адсддккакд акдкасаскд дкассадсад 120
сккссаддаа садсссссаа аскссксакс какддкааса дсаадсддсс сксаддддкс 180
сскдассдак кскскддскс саадкскддс ассксадсск ссскддссак саскдддскс 240
сададсдадд акдаддскда ккаккаскдс дссадскдда ссдасддсск дадсскддкд 300
дкдкксддсд дсддсассаа дскдассдкд скдддс 336
<210> 144
<211> 336
<212> ДНК
<213> Ното зардепз
<400> 144
- 142 019476 сададсдйдс Ьдасссадсс дссЬЬсадйд адйддсдсас саддйсадсд Ьдйдассайс60 йсдйдйасдд дсадсадсад саасаййддЬ ЬсйддПайд айдйдсаЬЬд дйассадсад120 ййдсссддда сддсдссдаа асПсйдаЫ: ЬайддйааЫ: сйаадсдЬсс сйсаддсдйд180 ссддаЬсдЬЬ ЬЬадсддайс саааадсддс ассадсдсда дссПдсдай йасдддссйд240 сааадсдаад асдаадсдда ЬЬаЬЬаПдс дсййсййдда сйдайддЪсЬ ЬЪсЬсйЬдЫ:300 дйдЬПддсд дсддсасдаа дЬЬаассдйЬ сййддс336
<210> 145
<211> 189
<212> РРТ
<213> Ното
<400> 145
Мей 1 Ьеи С1у Зег Агд 5 А1а Уа1 Мей Ьеи Ьеи 10 Ьеи Ьеи Ьеи Рго Тгр 15 Тйг
А1а С1п С1у Агд А1а Уа1 Рго С1у С1у Зег Зег Рго А1а Тгр Тйг С1п
20 25 30
Суз Θΐη С1п Ьеи Зег С1п Ьуз Ьеи Суз Тйг Ьеи А1а Тгр Зег А1а НЬз
35 40 45
Рго Ьеи Уа1 С1у НЬз МеЬ Азр Ьеи Агд С1и С1и С1у Азр С1и С1и Тйг
50 55 60
Тйг Азп Азр Уа1 Рго НЬз Не С1п Суз С1у Азр 61у Суз Азр Рго С1п
65 70 75 80
С1у Ьеи Агд Азр Азп Зег С1п Рйе Суз Ьеи С1п Агд Не ΗΪ3 С1п С1у
85 90 95
Ьеи Не Рйе Туг С1и Ьуз Ьеи Ьеи С1у Зег Азр Не Рйе Тйг С1у С1и
100 105 но
Рго Зег Ьеи Ьеи Рго Азр Зег Рго Уа1 А1а С1п Ьеи НЬз А1а Зег Ьеи
115 120 125
Ьеи С1у Ьеи Зег С1п Ьеи Ьеи С1п Рго С1и С1у НЬз Н13 Тгр С1и Тйг
130 135 140
С1п С1п Не Рго Зег Ьеи Зег Рго Зег С1п Рго Тгр С1п Агд Ьеи Ьеи
- 143 019476
145 150 155 160
Ьеи Агд РНе Ьуз 11е Ьеи Агд Зег Ьеи С1п А1а РНе Уа1 А1а Уа1 А1а
165 170 175
А1а Агд Уа1 РНе А1а ΗΪ5 С1у А1а А1а ТНг Ьеи Зег Рго
180 185 <210> 146 <211> 19 <212> РЕТ <213> Ното зариепз <400> 146
Азп 11е С1и Ηίδ Ьуз Туг Ьеи С1у Туг А1а ТНг Зег Туг А1а А1а Зег
10 15
Уа1 Ьуз С1у
<210> 147
<211> 114
<212> РЕТ
<213> Ното зариепз
<400> 147
С1п Уа1 С1п Ьеи Уа1 С1и Зег С1у С1у С1у Ьеи Уа1 С1п Рго С1у С1у
1 5 10 15
Зег Ьеи Агд Ьеи Зег Суз А1а А1а Зег С1у РНе ТНг РНе Зег Зег РНе
20 25 30
С1у МеЬ Зег Тгр Уа1 Агд С1п А1а Рго С1у Ьуз С1у Ьеи С1и Тгр Уа1
35 40 45
Зег Азп Не С1у ТНг Туг А1а Зег Уа1 Ьуз С1у Агд РНе ТНг Не Зег
50 55 60
Агд Азр Азп Зег Ьуз Азп ТНг Ьеи Туг Ьеи С1п Мек Азп Зег Ьеи Агд
65 70 75 80
А1а С1и Азр ТНг А1а Уа1 Туг Туг Суз А1а Агд Туг Тгр С1у ТНг Рго
85 90 95
Туг Ьеи Мек С1п РНе Азр Азп Тгр С1у С1п С1у ТНг Ьеи Уа1 ТНг Уа1
100 105 но
Зег Зег
- 144 019476

Claims (34)

1. Выделенное антитело против 1Ь-23р19, содержащее вариабельный участок легкой цепи и вариабельный участок тяжелой цепи, причем указанный вариабельный участок легкой цепи содержит аминокислотную последовательность определяющего комплементарность участка легкой цепи 1 (СИКШ) БЕС) ΙΌ N0: 50;
аминокислотную последовательность СИКЕ2 8Е0 ΙΌ N0: 56 и аминокислотную последовательность С0ЕБ3 8Е0 ΙΌ N0: 73, а указанный вариабельный участок тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность определяющего комплементарность участка тяжелой цепи 1 (СИНЮ) БЕС) ΙΌ N0: 5;
аминокислотную последовательность СИКН2 БЕО ΙΌ N0: 20 и аминокислотную последовательность СИКН3 БЕО ΙΌ N0: 44.
2. Выделенное антитело против ГЕ-23р19 по п.1, дополнительно содержащее по меньшей мере одну каркасную область антитела человека, смежную с определяющим комплементарность участком.
3. Выделенное антитело против ГЕ-23р19, содержащее вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность БЕР ΙΌ N0: 116.
4. Выделенное антитело против ГЕ-23р19, содержащее вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность БЕР ΙΌ N0: 106.
5. Выделенное антитело против ГЕ-23р19, содержащее вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность БЕР ΙΌ N0: 116, и вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность БЕР ΙΌ N0: 106.
6. Выделенное антитело против ГЕ-23р19, содержащее вариабельный участок тяжелой цепи, содержащий аминокислотную последовательность БЕР ΙΌ N0: 106, имеющую до 3 замен в остатках 50-66 аминокислотной последовательности БЕР ΙΌ N0: 106.
7. Выделенное антитело против ГЕ-23р19, содержащее вариабельный участок легкой цепи, содержащий аминокислотную последовательность БЕР ΙΌ N0:116, и вариабельный участок тяжелой цепи по п.6.
8. Антитело против ГЕ-23р19 по любому из пп.1-7, где указанное антитело связывает ГЕ-23р19 по меньшей мере с одной аффинностью, выбранной по меньшей мере из 10-9 М, по меньшей мере 10-10 М, по меньшей мере 10-11 М, по меньшей мере 10-12 М, по меньшей мере 10-13 М, по меньшей мере 10-14 М и по меньшей мере 10-15 М, как определено посредством поверхностного плазмонного резонанса или методом Кшеха.
9. Антитело против ГЕ-23р19 по любому из пп.1-7, где указанное антитело, по существу, модулирует активность полипептида ΙΕ-23, где указанная активность выбрана из группы, состоящей из связывания с рецептором Ш-23 (Ш-23К), индукции фосфорилирования БТАТ3 и продукции Ш-17.
10. Композиция, содержащая выделенное антитело против Ш-23р19 по п.7 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
11. Композиция по п.10, дополнительно содержащая по меньшей мере одно соединение или полипептид, выбранные из поддающейся детекции метки или репортера, антагониста ТИР, противоинфекционного лекарственного средства, лекарственного средства для сердечно-сосудистой (СУ) системы, лекарственного средства для центральной нервной системы (ЦНС), лекарственного средства для автономной нервной системы (АЯЗ), лекарственного средства для дыхательных путей, лекарственного средства для желудочно-кишечного (0Ι) тракта, гормонального лекарственного средства, лекарственного средства для баланса жидкостей или электролитов, гематологического лекарственного средства, антинеопластического лекарственного средства, иммуномодулирующего лекарственного средства, лекарственного средства для глаз, лекарственного средства для ушей или лекарственного средства для носа, местного лекарственного средства, диетологического лекарственного средства, цитокина и антагониста цитокина.
12. Изделие для фармацевтического или диагностического применения у человека, содержащее упаковочный материал и контейнер, содержащий раствор или лиофилизированную форму антитела против Ш-23р19 по любому из пп.1-7.
13. Изделие по п.12, где указанный контейнер представляет собой компонент устройства или системы для парентеральной, подкожной, внутримышечной, внутривенной, внутрисуставной, интрабронхиальной, интраабдоминальной, внутрикапсулярной, внутрихрящевой, внутриполостной, внутрибрюшной, внутримозжечковой, интрацеребровентрикулярной, внутрикишечной, интрацервикальной, внутрижелудочной, внутрипеченочной, интрамиокардиальной, внутрикостной, внутритазовой, интраперикардиальной, интраперитониальной, интраплевральной, внутрипростатической, внутрилегочной, интраректальной, интраренальной, интраретинальной, интраспинальной, интрасиновиальной, внутригрудной, внутриматочной, внутрипузырной, интралезиональной, болюсной, вагинальной, ректальной, буккальной, сублингвальной, интраназальной и трансдермальной доставки.
14. Выделенное антитело против ГЕ-23р19, содержащее аминокислотную последовательность ва
- 145 019476 риабельного участка легкой цепи, кодируемую нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО NО: 142-144.
15. Выделенное антитело против №23)319, содержащее аминокислотную последовательность вариабельного участка тяжелой цепи, кодируемую нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО NО: 139-141.
16. Выделенное антитело против №23р19, содержащее последовательность вариабельного участка легкой цепи по п.14 и аминокислотную последовательность вариабельного участка тяжелой цепи, кодируемую нуклеотидной последовательностью, выбранной из группы, состоящей из 8ЕС ГО NО: 139-141.
17. Антитело против ГО-23р19 по п.16, где указанное антитело связывает ГО-23р19 по меньшей мере с одной аффинностью, выбранной по меньшей мере из 10-9 М, по меньшей мере 10-10 М, по меньшей мере 10-11 М и по меньшей мере 10-12 М, по меньшей мере 10-13 М, по меньшей мере 10-14 М и по меньшей мере 10-15 М, как определено посредством поверхностного плазмонного резонанса или методом Ктеха.
18. Антитело против ГО-23р19 по п.16, где указанное антитело, по существу, модулирует активность полипептида ГО-23, где указанная активность выбрана из группы, состоящей из связывания с рецептором ГО-23 (ГО-23К,), индукции фосфорилирования 2ТАТ3 и продукции ГО-17.
19. Композиция для диагностики или лечения связанного с ГО-23р19 состояния, выбранного из группы, состоящей из псориаза, псориатического артрита, болезни Крона, язвенного колита, саркоидоза, оптического неврита и клинически изолированного синдрома, содержащая выделенное антитело против ЕЕ-23р19 по любому из пп.1-9 и 14-18 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
20. Композиция по п.19, дополнительно содержащая по меньшей мере одно соединение или полипептид, выбранные из поддающейся детекции метки или репортера, антагониста ΈΝΕ, противоинфекционного лекарственного средства, лекарственного средства для сердечно-сосудистой (СУ) системы, лекарственного средства для центральной нервной системы (ЦНС), лекарственного средства для автономной нервной системы (ΛΝ8), лекарственного средства для дыхательных путей, лекарственного средства для желудочно-кишечного (СО тракта, гормонального лекарственного средства, лекарственного средства для баланса жидкостей или электролитов, гематологического лекарственного средства, антинеопластического лекарственного средства, иммуномодулирующего лекарственного средства, лекарственного средства для глаз, лекарственного средства для ушей или лекарственного средства для носа, местного лекарственного средства, диетологического лекарственного средства, цитокина и антагониста цитокина.
21. Изделие для фармацевтического или диагностического применения у человека, содержащее упаковочный материал и контейнер, содержащий раствор или лиофилизированную форму антитела против ГО-23р19 по любому из пп.1-9 и 14-18.
22. Изделие по п.21, где указанный контейнер представляет собой компонент устройства или системы для парентеральной, подкожной, внутримышечной, внутривенной, внутрисуставной, интрабронхиальной, интраабдоминальной, внутрикапсулярной, внутрихрящевой, внутриполостной, внутрибрюшной, внутримозжечковой, интрацеребровентрикулярной, внутрикишечной, интрацервикальной, внутрижелудочной, внутрипеченочной, интрамиокардиальной, внутрикостной, внутритазовой, интраперикардиальной, интраперитониальной, интраплевральной, внутрипростатической, внутрилегочной, интраректальной, интраренальной, интраретинальной, интраспинальной, интрасиновиальной, внутригрудной, внутриматочной, внутрипузырной, интралезиональной, болюсной, вагинальной, ректальной, буккальной, сублингвальной, интраназальной и трансдермальной доставки.
23. Композиция по п.20, где антитело конъюгировано с поддающейся детекции меткой или репортером.
24. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело против ГО-23р19 по любому из пп.1-9 и 14-18.
25. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело против ГО-23р19 по п.1, содержащая нуклеотидную последовательность определяющего комплементарность участка легкой цепи 1 (СГОЕЕ1), содержащую нуклеотиды 67-108 любой из нуклеотидных последовательностей 8ЕС ГО NО: 142-144;
нуклеотидную последовательность СЭКЬ2, содержащую нуклеотиды 154-174 любой из нуклеотидных последовательностей 8ЕС ГО NО: 142-144;
нуклеотидную последовательность СЭКЬ3, содержащую нуклеотиды 271-303 любой из нуклеотидных последовательностей 8ЕС ГО NО: 142-144;
нуклеотидную последовательность определяющего комплементарность участка тяжелой цепи 1 (СГОЕН1), содержащую нуклеотиды 91-105 любой из нуклеотидных последовательностей 8ЕС ГО NО: 139-141;
нуклеотидную последовательность СЭКН2, содержащую нуклеотиды 148-198 любой из нуклеотидных последовательностей 8ЕС ГО NО: 139-141; и нуклеотидную последовательность СЭКН3, содержащую нуклеотиды 295-318 любой из нуклеотидных последовательностей 8ЕС ГО NО: 139-141.
- 146 019476
26. Выделенная молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело против 1Ь-23р19 по п.16, содержащая нуклеотидную последовательность вариабельного участка легкой цепи, выбранную из группы, состоящей из 8Ер Ю N0: 142-144; и нуклеотидную последовательность вариабельного участка тяжелой цепи, выбранную из группы, состоящей из 8Ер Ю N0: 139-141.
27. Вектор, содержащий выделенную молекулу нуклеиновой кислоты по любому из пп.24-26.
28. Прокариотическая или эукариотическая клетка-хозяин, содержащая вектор по п.27.
29. Клетка-хозяин по п.28, выбранная из группы, включающей клетки С08-1, С08-7, НЕК293, ВНК21, СНО, В8С-1, Нер 02, 653, 8Р2/0, 293, НеЬа, клетки миеломы или лимфомы или их производные.
30. Способ получения антитела против 1Ь-23р19 по любому из пп.1-18, включающий встраивание молекулы нуклеиновой кислоты по любому из пп.24-26 в вектор, трансформацию указанным вектором клетки-хозяина, трансгенного животного или трансгенного растения с целью экспрессии антитела и выделение экспрессированного антитела.
31. Средство для диагностики связанного с 1Ь-23р19 состояния в клетке, ткани, органе или организме животного, содержащее эффективное количество антитела по любому из пп.1-9 и 14-18.
32. Средство по п.31, где указанное эффективное количество антитела составляет приблизительно 0,001-50 мг/кг веса указанного животного.
33. Лекарственное средство для лечения связанного с 1Ь-23р19 состояния у животного или человека, содержащее эффективное количество антитела по любому из пп.1-9 и 14-18.
34. Лекарственное средство по п.33, где указанное эффективное количество составляет приблизительно 0,001-50 мг/кг веса указанных животного или человека.
Связывание цитокина с иммобилизованными на планшете тАЬ в ЕЫЗА тАЬ наносили на планшеты, цитокины использовали в концентрации 100 нг/мл, связывание содержащего р40 цитокина человека выявляли с помощью тАЬ 12В-биотина, связывание содержащего р40 цитокина мыши выявляли с помощью 17.8-биотина
EA200870129A 2005-12-29 2006-12-28 АНТИТЕЛА ПРОТИВ IL-23p19 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ EA019476B9 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US75488905P 2005-12-29 2005-12-29
PCT/US2006/062674 WO2007076524A2 (en) 2005-12-29 2006-12-28 Human anti-il-23 antibodies, compositions, methods and uses

Publications (3)

Publication Number Publication Date
EA200870129A1 EA200870129A1 (ru) 2009-10-30
EA019476B1 true EA019476B1 (ru) 2014-04-30
EA019476B9 EA019476B9 (ru) 2020-07-14

Family

ID=38218878

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201301072A EA035459B1 (ru) 2005-12-29 2006-12-28 Антитело против il-23p19
EA200870129A EA019476B9 (ru) 2005-12-29 2006-12-28 АНТИТЕЛА ПРОТИВ IL-23p19 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201301072A EA035459B1 (ru) 2005-12-29 2006-12-28 Антитело против il-23p19

Country Status (36)

Country Link
US (10) US7935344B2 (ru)
EP (4) EP3760230A1 (ru)
JP (1) JP5193881B2 (ru)
KR (1) KR101210395B1 (ru)
CN (2) CN101389351B (ru)
AU (1) AU2006330411B2 (ru)
BR (1) BRPI0620946B8 (ru)
CA (1) CA2635692C (ru)
CR (1) CR10181A (ru)
CY (4) CY1115935T1 (ru)
DK (3) DK3219328T3 (ru)
EA (2) EA035459B1 (ru)
EC (1) ECSP088591A (ru)
ES (3) ES2622602T3 (ru)
GT (1) GT200800132A (ru)
HN (1) HN2008000988A (ru)
HR (3) HRP20140982T1 (ru)
HU (3) HUE049832T2 (ru)
IL (5) IL192458A (ru)
LT (3) LT2548577T (ru)
LU (1) LUC00071I2 (ru)
MX (2) MX2008008621A (ru)
MY (2) MY163032A (ru)
NI (1) NI200800193A (ru)
NL (1) NL300935I2 (ru)
NO (5) NO20240354A1 (ru)
NZ (1) NZ569546A (ru)
PL (3) PL3219328T3 (ru)
PT (3) PT1971366E (ru)
RS (3) RS60616B1 (ru)
SG (1) SG10201505755YA (ru)
SI (3) SI1971366T1 (ru)
SV (1) SV2008002972A (ru)
UA (1) UA101301C2 (ru)
WO (1) WO2007076524A2 (ru)
ZA (1) ZA200806556B (ru)

Families Citing this family (121)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7090847B1 (en) 1999-09-09 2006-08-15 Schering Corporation Mammalian cytokines; related reagents and methods
EP3501537A1 (en) 2005-06-30 2019-06-26 Janssen Biotech, Inc. Anti-il23 antibodies, compositions, methods and uses
WO2007024846A2 (en) * 2005-08-25 2007-03-01 Eli Lilly And Company Anit-il-23 antibiodies
WO2007027714A2 (en) 2005-08-31 2007-03-08 Schering Corporation Engineered anti-il-23 antibodies
WO2007027761A2 (en) 2005-09-01 2007-03-08 Schering Corporation Use of il-23 and il-17 antagonists to treat autoimmune ocular inflammatory disease
RS60616B1 (sr) 2005-12-29 2020-09-30 Janssen Biotech Inc Humana anti-il-23 antitela, kompozicije, postupci i upotrebe
US7910703B2 (en) 2006-03-10 2011-03-22 Zymogenetics, Inc. Antagonists to IL-17A, IL-17F, and IL-23P19 and methods of use
WO2007147019A2 (en) 2006-06-13 2007-12-21 Zymogenetics, Inc. Il-17 and il-23 antagonists and methods of using the same
TWI426918B (zh) 2007-02-12 2014-02-21 Merck Sharp & Dohme Ｉｌ-２３拮抗劑於治療感染之用途
JP2010518858A (ja) 2007-02-23 2010-06-03 シェーリング コーポレイション 操作された抗−ｉｌ−２３ｐ１９抗体
ES2388837T3 (es) 2007-02-23 2012-10-19 Merck Sharp & Dohme Corp. Anticuerpos anti-IL-23p19 diseñados por ingeniería genética
MX2009009167A (es) 2007-02-28 2009-09-04 Schering Corp Terapia de combinacion para el tratamiento de trastornos inmunes.
EP2666783B1 (en) * 2007-09-25 2019-06-26 Genzyme Corporation Compositions for inhibiting interleukin-23 pathways
WO2009068631A1 (en) 2007-11-27 2009-06-04 Ablynx N.V. Method for obtaining polypeptide constructs comprising two or more single domain antibodies
TR201808046T4 (tr) 2008-04-11 2018-06-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd İki veya daha fazla sayıda antijen molekülüne tekrar tekrar bağlanabilen antijen bağlanma molekülü.
CN102202655B (zh) * 2008-08-27 2013-06-19 默沙东公司 基因工程抗IL-23p19抗体的冻干制剂
WO2010036226A1 (en) * 2008-09-26 2010-04-01 George Nelson Process for treatment of rheumatoid arthritis, tremors/parkinson's disease and multiple sclerosis
TWI440469B (zh) 2008-09-26 2014-06-11 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Improved antibody molecules
MX2011003277A (es) * 2008-10-14 2012-09-21 Salubrious Pharmaceuticals LLC Proceso para el tratamiento de la artritis reumatoide, temblores/enfermedad de parkinson, esclerosis multiple y cancer de tipo no viral.
WO2010071800A1 (en) 2008-12-19 2010-06-24 Schering Corporation Feed supplement for mammalian cell culture and methods of use
WO2011017294A1 (en) 2009-08-07 2011-02-10 Schering Corporation Human anti-rankl antibodies
JO3244B1 (ar) * 2009-10-26 2018-03-08 Amgen Inc بروتينات ربط مستضادات il – 23 البشرية
ES2728115T3 (es) * 2009-10-30 2019-10-22 Janssen Biotech Inc Antagonistas de IL-17A
GB201013975D0 (en) 2010-08-20 2010-10-06 Imp Innovations Ltd Method of treating desease
EP2516624B1 (en) 2009-12-23 2020-02-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Cell line 3m
US20110311527A1 (en) 2010-06-16 2011-12-22 Allergan, Inc. IL23p19 ANTIBODY INHIBITOR FOR TREATING OCULAR AND OTHER CONDITIONS
WO2012051111A2 (en) * 2010-10-13 2012-04-19 Janssen Biotech, Inc. Human oncostatin m antibodies and methods of use
EP3281954A1 (en) 2010-11-04 2018-02-14 Boehringer Ingelheim International GmbH Anti-il-23 antibodies
AU2011337704B2 (en) 2010-11-30 2017-06-15 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule capable of binding to plurality of antigen molecules repeatedly
BR112013021526B1 (pt) 2011-02-25 2021-09-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Polipeptídio variante, métodos para manter ou diminuir as atividades de ligação a fcgriia (tipo r) e fcgriia (tipo h) e aumentar a atividade de ligação a fcgriib de um polipeptídio e para a supressão da produção de um anticorpo contra um polipeptídio compreendendo a região fc do anticorpo, métodos para a produção do referido polipeptídio com atividades de ligação mantidas ou diminuídas e aumentada e para a produção suprimida de um anticorpo, composição farmacêutica e uso de um polipeptídio
EP2762493B1 (en) 2011-09-30 2021-06-09 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antigen-binding molecule promoting disappearance of antigens having plurality of biological activities
TW201817745A (zh) 2011-09-30 2018-05-16 日商中外製藥股份有限公司 具有促進抗原清除之ＦｃＲｎ結合域的治療性抗原結合分子
WO2013165791A1 (en) 2012-05-03 2013-11-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti-il-23p19 antibodies
WO2014004436A2 (en) 2012-06-27 2014-01-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Crystalline anti-human il-23 antibodies
MX2015006738A (es) 2012-11-29 2015-08-05 Bayer Healthcare Llc Anticuerpos monoclonales humanizados contra la proteina c activada y sus usos.
UA117466C2 (uk) 2012-12-13 2018-08-10 Мерк Шарп Енд Доме Корп. СТАБІЛЬНИЙ СКЛАД У ВИГЛЯДІ РОЗЧИНУ АНТИТІЛА ДО IL-23p19
US9113892B2 (en) 2013-01-08 2015-08-25 Covidien Lp Surgical clip applier
TWI636063B (zh) * 2013-03-08 2018-09-21 美國禮來大藥廠 結合ｉｌ－２３之抗體
AP2015008801A0 (en) * 2013-03-15 2015-10-31 Amgen Inc Methods for treating crohn's disease using an anti-il23 antibody
US20160060337A1 (en) 2013-03-15 2016-03-03 Amgen Inc. Methods for treating psoriasis using an anti-il-23 antibody
HK1215868A1 (zh) 2013-05-10 2016-09-23 Numab Ag 双特异性构建体及其用於治疗多种疾病的用途
CN105007895B (zh) 2013-11-22 2017-11-17 玫琳凯有限公司 用于敏感皮肤的组合物
WO2015114426A2 (en) * 2014-01-30 2015-08-06 Massimo Zanotti A method for monitoring the respect of well-being of live poultry intended for slaughter
WO2015120392A1 (en) 2014-02-10 2015-08-13 Patara Pharma, LLC Mast cell stabilizers for lung disease treatment
CA2938994A1 (en) 2014-02-10 2015-08-13 Patara Pharma, LLC Inhalable formulations of sodium cromolyn with improved bioavailability
JP2017524359A (ja) 2014-07-24 2017-08-31 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｉｌ−２３ａ関連疾患の処置に有用なバイオマーカー
EA202193002A2 (ru) 2014-09-03 2022-03-31 Бёрингер Ингельхайм Интернациональ Гмбх Соединение, нацеленное на ил-23a и фно-альфа, и его применение
AR102417A1 (es) 2014-11-05 2017-03-01 Lilly Co Eli Anticuerpos biespecíficos anti-tnf- / anti-il-23
TW201809008A (zh) 2014-12-19 2018-03-16 日商中外製藥股份有限公司 抗ｃ５抗體及使用方法
UA127961C2 (uk) 2014-12-19 2024-02-28 Чугей Сейяку Кабусікі Кайся Антитіло до латентного міостатину
CN113559258A (zh) 2015-02-04 2021-10-29 勃林格殷格翰国际有限公司 治疗炎性疾病的方法
TWI844732B (zh) 2015-02-05 2024-06-11 日商中外製藥股份有限公司 包含離子濃度依賴之抗原結合域的抗體、Fc區變體、IL-8結合抗體與其用途
RU2730590C2 (ru) 2015-02-27 2020-08-24 Чугаи Сейяку Кабусики Кайся Композиция для лечения заболеваний, связанных с ил-6
WO2016168282A1 (en) 2015-04-14 2016-10-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Methods of treating diseases
WO2017027387A1 (en) 2015-08-07 2017-02-16 Patara Pharma, LLC Methods for the treatment of mast cell related disorders with mast cell stabilizers
WO2017027402A1 (en) 2015-08-07 2017-02-16 Patara Pharma, LLC Methods for the treatment of systemic disorders treatable with mast cell stabilizers, including mast cell related disorders
MX2018003376A (es) 2015-09-17 2018-08-15 Amgen Inc Prediccion de la respuesta clinica a antagonistas de il23 mediante el uso de biomarcadores de la via de il23.
TWI733695B (zh) 2015-09-18 2021-07-21 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司 治療發炎性疾病之方法
US11077187B2 (en) 2015-11-17 2021-08-03 Oklahoma Medical Research Foundation Epitope of optimized humanized monoclonal antibodies against activated protein C and uses thereof
CN108472367A (zh) 2015-12-22 2018-08-31 美国安进公司 作为对il23拮抗剂的临床应答的预测因子的ccl20
EP3394098A4 (en) 2015-12-25 2019-11-13 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha ANTI-MYOSTATIN ANTIBODIES AND METHODS OF USE
EP3436477A2 (en) 2016-03-29 2019-02-06 Janssen Biotech, Inc. Method of treating psoriasis with increased interval dosing of anti-il12 and/or -23 antibody
EP3744733A3 (en) 2016-04-15 2021-02-24 Boehringer Ingelheim International GmbH Methods of treating inflammatory diseases
KR102102734B1 (ko) 2016-08-05 2020-04-22 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 Il-8 관련 질환의 치료용 또는 예방용 조성물
CN110139646A (zh) 2016-08-31 2019-08-16 瑞思皮万特科学有限责任公司 用于治疗由特发性肺纤维化引起的慢性咳嗽的色甘酸组合物
IL316408A (en) 2016-09-30 2025-01-01 Janssen Biotech Inc A safe and effective method for treating psoriasis with a specific anti-IL23 antibody
CN109803724A (zh) 2016-10-07 2019-05-24 瑞思皮万特科学有限责任公司 用于治疗肺纤维化的色甘酸组合物
JP2019536756A (ja) 2016-10-14 2019-12-19 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｉｌ−２３ａ抗体を用いて疾患を処置する方法
MX2019005661A (es) 2016-11-16 2019-10-07 Janssen Biotech Inc Método para tratar la psoriasis con el anticuerpo específico anti-il23.
US11840565B2 (en) 2016-12-29 2023-12-12 University Of Miami Methods and compositions for treating virus-associated inflammation
JP7191833B2 (ja) 2017-01-30 2022-12-19 中外製薬株式会社 抗スクレロスチン抗体およびその使用
JOP20190260A1 (ar) 2017-05-02 2019-10-31 Merck Sharp & Dohme صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها
SG11201909955XA (en) 2017-05-02 2019-11-28 Merck Sharp & Dohme Formulations of anti-lag3 antibodies and co-formulations of anti-lag3 antibodies and anti-pd-1 antibodies
JP7185884B2 (ja) 2017-05-02 2022-12-08 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター Ｉｌ－６及び好中球の関連する疾患の治療効果の予測及び判定方法
EP3459968A1 (en) * 2017-09-20 2019-03-27 Numab Innovation AG Novel stable antibody variable domain framework combinations
TW201922780A (zh) 2017-09-25 2019-06-16 美商健生生物科技公司 以抗ｉｌ１２／ｉｌ２３抗體治療狼瘡之安全且有效之方法
EP3706794A4 (en) 2017-11-06 2021-08-11 Janssen Biotech, Inc. SAFE AND EFFECTIVE METHOD OF TREATING PSORIASIC ARTHRITIS WITH A SPECIFIC ANTIBODY ANTI-IL23
EP3762015A4 (en) * 2018-03-05 2022-04-27 Janssen Biotech, Inc. METHODS OF TREATING CROHN'S DISEASE WITH SPECIFIC ANTI-IL23 ANTIBODY
TWI837532B (zh) 2018-03-30 2024-04-01 美商美國禮來大藥廠 治療潰瘍性結腸炎之方法
EP3790587A4 (en) 2018-05-11 2022-01-26 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating depression using il-23 antibodies
SG11202100185VA (en) 2018-07-13 2021-02-25 Astrazeneca Collaboration Ventures Llc Treating ulcerative colitis with brazikumab
US20200025776A1 (en) 2018-07-18 2020-01-23 Janssen Biotech, Inc. Sustained Response Predictors After Treatment With Anti-IL23 Specific Antibody
US20200061015A1 (en) 2018-08-23 2020-02-27 Janssen Biotech, Inc. Lipase Degradation Resistant Surfactants for Use in Large Molecule Therapeutic Formulations
AU2019368287B2 (en) * 2018-10-23 2025-09-18 Scholar Rock, Inc. RGMc-selective inhibitors and use thereof
KR20210089215A (ko) 2018-11-07 2021-07-15 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 항-lag3 항체 및 항-pd-1 항체의 공동-제제
MA55149A (fr) 2018-11-20 2021-09-29 Janssen Biotech Inc Procédé sûr et efficace de traitement du psoriasis avec un anticorps spécifique anti-il-23
JP7517999B2 (ja) 2018-11-27 2024-07-17 イノベント バイオロジックス （スウツォウ） カンパニー，リミテッド 抗ＩＬ－２３ｐ１９抗体およびその使用
US20200197517A1 (en) 2018-12-18 2020-06-25 Janssen Biotech, Inc. Safe and Effective Method of Treating Lupus with Anti-IL12/IL23 Antibody
NZ778977A (en) 2019-02-18 2025-06-27 Lilly Co Eli Therapeutic antibody formulation
WO2020183418A1 (en) 2019-03-14 2020-09-17 Janssen Biotech, Inc. Manufacturing methods for producing anti-il12/il23 antibody compositions
EP3946547A4 (en) 2019-03-26 2023-01-18 Pocket Naloxone Corp. Devices and methods for delivering pharmaceutical compositions
CN113874073A (zh) * 2019-05-23 2021-12-31 詹森生物科技公司 用针对IL-23和TNFα的抗体的联合疗法治疗炎性肠病的方法
CN110564694B (zh) * 2019-09-23 2021-07-13 华东师范大学 分泌il-23抗体的靶向前列腺癌的car-t细胞药物
JP2023509373A (ja) * 2019-12-20 2023-03-08 ノヴァロック バイオセラピューティクス， リミテッド 抗インターロイキン－２３ ｐ１９抗体およびそれの使用方法
BR112022022378A2 (pt) 2020-05-05 2022-12-13 Janssen Biotech Inc Métodos para tratamento da doença de crohn com anticorpo específico anti-il23
KR20230009897A (ko) * 2020-05-13 2023-01-17 이노벤트 바이오로직스 (쑤저우) 컴퍼니, 리미티드 항-IL-23p19 항체를 포함하는 제제, 이의 제조방법 및 용도
CN115768466A (zh) 2020-05-21 2023-03-07 詹森生物科技公司 用抗IL-23和TNFα抗体的联合疗法治疗炎性肠病的方法
CN112807428B (zh) * 2020-06-12 2024-08-27 江苏荃信生物医药股份有限公司 包含抗人白介素23单克隆抗体的药物组合物
CA3189402A1 (en) 2020-07-13 2022-01-20 Janssen Biotech, Inc. Safe and effective method of treating psoriatic arthritis with anti-il23 specific antibody
TW202428304A (zh) 2020-09-10 2024-07-16 美商美國禮來大藥廠 治療性抗體調配物
CA3213278A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Janssen Biotech, Inc. Method of treating psoriatic arthritis patients with inadequate response to tnf therapy with anti-il23 specific antibody
IL305802A (en) 2021-03-12 2023-11-01 Janssen Biotech Inc A safe and effective method for the treatment of rheumatoid arthritis with a specific anti-IL23 antibody
US11278709B1 (en) 2021-03-12 2022-03-22 Pocket Naloxone Corp. Drug delivery device and methods for using same
JP2024521748A (ja) 2021-05-28 2024-06-04 イーライ リリー アンド カンパニー 潰瘍性大腸炎に関与する遺伝子の抗ｉｌ－２３ｐ１９抗体調節
KR20240034215A (ko) 2021-07-09 2024-03-13 얀센 바이오테크 인코포레이티드 항-il12/il23 항체 조성물을 생산하기 위한 제조 방법
CN115785267B (zh) * 2021-09-10 2023-12-15 三优生物医药(上海)有限公司 一种靶向IL-23p19的抗体或其抗原结合片段及其应用
EP4410841A4 (en) * 2021-09-30 2025-08-13 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co Ltd ANTI-IL23 ANTIBODY FUSION PROTEIN AND USES THEREOF
JP2024536166A (ja) 2021-09-30 2024-10-04 イーライ リリー アンド カンパニー 潰瘍性大腸炎における腸切迫感に関与する遺伝子の抗ｉｌ－２３ｐ１９抗体による調節
AU2022374890A1 (en) 2021-10-29 2024-06-13 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating crohn's disease with anti-il23 specific antibody
JP2024544555A (ja) * 2021-11-15 2024-12-03 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗ｉｌ２３特異的抗体によるクローン病を処置する方法
IL313021A (en) 2021-11-23 2024-07-01 Janssen Biotech Inc A method for treating ulcerative colitis with a specific anti-IL23 antibody
US20230212280A1 (en) * 2021-12-17 2023-07-06 Janssen Biotech, Inc. IL-23 Specific Antibodies for the Treatment of Systemic Sclerosis
CN119698430A (zh) 2022-03-30 2025-03-25 詹森生物科技公司 用il-23特异性抗体治疗轻度至中度银屑病的方法
WO2023223265A1 (en) 2022-05-18 2023-11-23 Janssen Biotech, Inc. Method for evaluating and treating psoriatic arthritis with il23 antibody
WO2024073588A1 (en) * 2022-09-28 2024-04-04 Board Of Regents, The University Of Texas System Respiratory dry powder delivery
WO2024077113A1 (en) 2022-10-06 2024-04-11 Eli Lilly And Company Methods of treating fatigue in ulcerative colitis
AU2023383916A1 (en) 2022-11-22 2025-07-10 Janssen Biotech, Inc. Method of treating ulcerative colitis with anti-il23 specific antibody
AU2024224464A1 (en) 2023-02-22 2025-08-14 Eli Lilly And Company Regulation of genes in ulcerative colitis and the uses thereof
WO2025083549A1 (en) 2023-10-16 2025-04-24 Sun Pharma Advanced Research Company Limited Methods and combinations of inhibitors of il-23 pathway and modulators of s1p signaling pathway for the treatment of autoimmune disorders
WO2025117506A1 (en) 2023-11-29 2025-06-05 Gilead Sciences, Inc. Therapies for the treatment of inflammatory bowel disease
WO2025196691A1 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating crohn's disease with anti-il23 specific antibody

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20020042386A1 (en) * 2000-01-31 2002-04-11 Rosen Craig A. Nucleic acids, proteins, and antibodies
US20030124617A1 (en) * 2000-01-21 2003-07-03 Hermann Gram Antibodies to human il 1-beta
US20040156849A1 (en) * 2002-10-30 2004-08-12 Gurney Austin L. Inhibition of IL-17 production
US20040185506A1 (en) * 2003-03-21 2004-09-23 Heavner George A. Epitope mapping using nuclear magnetic resonance
US20050049402A1 (en) * 2002-12-02 2005-03-03 Babcook John S. Antibodies directed to tumor necrosis factor and uses thereof
US20050137385A1 (en) * 2003-05-09 2005-06-23 Jacqueline Benson IL-23p40 specific immunoglobulin derived proteins, compositions, methods and uses

Family Cites Families (160)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4309989A (en) 1976-02-09 1982-01-12 The Curators Of The University Of Missouri Topical application of medication by ultrasound with coupling agent
FR2374910A1 (fr) 1976-10-23 1978-07-21 Choay Sa Preparation a base d'heparine, comprenant des liposomes, procede pour l'obtenir et medicaments contenant de telles preparations
FR2413974A1 (fr) 1978-01-06 1979-08-03 David Bernard Sechoir pour feuilles imprimees par serigraphie
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
GB2097032B (en) 1981-04-22 1984-09-19 Teron International Urban Dev A combined ceiling air and services distribution system mechanical chasse and structural roof member
US4656134A (en) 1982-01-11 1987-04-07 Board Of Trustees Of Leland Stanford Jr. University Gene amplification in eukaryotic cells
US5149636A (en) 1982-03-15 1992-09-22 Trustees Of Columbia University In The City Of New York Method for introducing cloned, amplifiable genes into eucaryotic cells and for producing proteinaceous products
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4818542A (en) 1983-11-14 1989-04-04 The University Of Kentucky Research Foundation Porous microspheres for drug delivery and methods for making same
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
US4965188A (en) 1986-08-22 1990-10-23 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences using a thermostable enzyme
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4683202A (en) 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
GB2183661B (en) 1985-03-30 1989-06-28 Marc Ballivet Method for obtaining dna, rna, peptides, polypeptides or proteins by means of a dna recombinant technique
SE448277B (sv) 1985-04-12 1987-02-09 Draco Ab Indikeringsanordning vid en doseringsanordning for lekemedel
US4766067A (en) 1985-05-31 1988-08-23 President And Fellows Of Harvard College Gene amplification
US4870163A (en) 1985-08-29 1989-09-26 New York Blood Center, Inc. Preparation of pure human tumor necrosis factor and hybridomas producing monoclonal antibodies to human tumor necrosis factor
US4676980A (en) 1985-09-23 1987-06-30 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Target specific cross-linked heteroantibodies
US5618920A (en) 1985-11-01 1997-04-08 Xoma Corporation Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use
US5576195A (en) 1985-11-01 1996-11-19 Xoma Corporation Vectors with pectate lyase signal sequence
DE3600905A1 (de) 1986-01-15 1987-07-16 Ant Nachrichtentech Verfahren zum dekodieren von binaersignalen sowie viterbi-dekoder und anwendungen
GB8601597D0 (en) 1986-01-23 1986-02-26 Wilson R H Nucleotide sequences
US4800159A (en) 1986-02-07 1989-01-24 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or cloning nucleic acid sequences
SE453566B (sv) 1986-03-07 1988-02-15 Draco Ab Anordning vid pulverinhalatorer
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US4767402A (en) 1986-07-08 1988-08-30 Massachusetts Institute Of Technology Ultrasound enhancement of transdermal drug delivery
NL8720442A (nl) 1986-08-18 1989-04-03 Clinical Technologies Ass Afgeefsystemen voor farmacologische agentia.
US4889818A (en) 1986-08-22 1989-12-26 Cetus Corporation Purified thermostable enzyme
US5260203A (en) 1986-09-02 1993-11-09 Enzon, Inc. Single polypeptide chain binding molecules
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US4704692A (en) 1986-09-02 1987-11-03 Ladner Robert C Computer based system and method for determining and displaying possible chemical structures for converting double- or multiple-chain polypeptides to single-chain polypeptides
DE3631229A1 (de) 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
US5763192A (en) 1986-11-20 1998-06-09 Ixsys, Incorporated Process for obtaining DNA, RNA, peptides, polypeptides, or protein, by recombinant DNA technique
US4921794A (en) 1987-01-14 1990-05-01 President And Fellows Of Harvard College T7 DNA polymerase
US4795699A (en) 1987-01-14 1989-01-03 President And Fellows Of Harvard College T7 DNA polymerase
EP0279582A3 (en) 1987-02-17 1989-10-18 Pharming B.V. Dna sequences to target proteins to the mammary gland for efficient secretion
US5075236A (en) 1987-04-24 1991-12-24 Teijin Limited Method of detecting kawasaki disease using anti-tumor necrosis antibody
US4873316A (en) 1987-06-23 1989-10-10 Biogen, Inc. Isolation of exogenous recombinant proteins from the milk of transgenic mammals
US4939666A (en) 1987-09-02 1990-07-03 Genex Corporation Incremental macromolecule construction methods
US6010902A (en) 1988-04-04 2000-01-04 Bristol-Meyers Squibb Company Antibody heteroconjugates and bispecific antibodies for use in regulation of lymphocyte activity
US4956288A (en) 1988-04-22 1990-09-11 Biogen, Inc. Method for producing cells containing stably integrated foreign DNA at a high copy number, the cells produced by this method, and the use of these cells to produce the polypeptides coded for by the foreign DNA
US5130238A (en) 1988-06-24 1992-07-14 Cangene Corporation Enhanced nucleic acid amplification process
US5601819A (en) 1988-08-11 1997-02-11 The General Hospital Corporation Bispecific antibodies for selective immune regulation and for selective immune cell binding
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
US5091310A (en) 1988-09-23 1992-02-25 Cetus Corporation Structure-independent dna amplification by the polymerase chain reaction
US5142033A (en) 1988-09-23 1992-08-25 Hoffmann-La Roche Inc. Structure-independent DNA amplification by the polymerase chain reaction
US5066584A (en) 1988-09-23 1991-11-19 Cetus Corporation Methods for generating single stranded dna by the polymerase chain reaction
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US4994370A (en) 1989-01-03 1991-02-19 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services DNA amplification technique
US5116964A (en) 1989-02-23 1992-05-26 Genentech, Inc. Hybrid immunoglobulins
US5225538A (en) 1989-02-23 1993-07-06 Genentech, Inc. Lymphocyte homing receptor/immunoglobulin fusion proteins
US5266491A (en) 1989-03-14 1993-11-30 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. DNA fragment and expression plasmid containing the DNA fragment
DE3909708A1 (de) 1989-03-23 1990-09-27 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur herstellung bispezifischer antikoerper
CA2016841C (en) 1989-05-16 1999-09-21 William D. Huse A method for producing polymers having a preselected activity
CA2016842A1 (en) 1989-05-16 1990-11-16 Richard A. Lerner Method for tapping the immunological repertoire
AU652539B2 (en) 1989-05-16 1994-09-01 Medical Research Council Co-expression of heteromeric receptors
WO1991000360A1 (en) 1989-06-29 1991-01-10 Medarex, Inc. Bispecific reagents for aids therapy
DE10399036I1 (de) 1989-08-07 2004-04-01 Peptide Technology Ltd Bindeligande für Tumornekrosisfaktor.
CA2067194C (en) 1989-10-05 2003-03-18 Glenn Kawasaki Cell-free synthesis and isolation of novel genes and polypeptides
US5859205A (en) * 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US5580575A (en) 1989-12-22 1996-12-03 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic drug delivery systems
JP3112463B2 (ja) * 1990-03-27 2000-11-27 雪印乳業株式会社 モノクローナル抗体の作製方法
TW212184B (ru) 1990-04-02 1993-09-01 Takeda Pharm Industry Co Ltd
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
ES2109945T3 (es) 1990-06-01 1998-02-01 Chiron Corp Composiciones y procedimientos para identificar moleculas biologicamente activas.
US5723286A (en) 1990-06-20 1998-03-03 Affymax Technologies N.V. Peptide library and screening systems
JPH06500011A (ja) 1990-06-29 1994-01-06 ラージ　スケール　バイオロジー　コーポレイション 形質転換された微生物によるメラニンの製造
US5580734A (en) 1990-07-13 1996-12-03 Transkaryotic Therapies, Inc. Method of producing a physical map contigous DNA sequences
WO1992005258A1 (en) 1990-09-20 1992-04-02 La Trobe University Gene encoding barley enzyme
GB9022648D0 (en) 1990-10-18 1990-11-28 Charing Cross Sunley Research Polypeptide and its use
DE69128253T2 (de) 1990-10-29 1998-06-18 Chiron Corp Bispezifische antikörper, verfahren zu ihrer herstellung und deren verwendungen
ES2113940T3 (es) 1990-12-03 1998-05-16 Genentech Inc Metodo de enriquecimiento para variantes de proteinas con propiedades de union alteradas.
US5582996A (en) 1990-12-04 1996-12-10 The Wistar Institute Of Anatomy & Biology Bifunctional antibodies and method of preparing same
WO1992014843A1 (en) 1991-02-21 1992-09-03 Gilead Sciences, Inc. Aptamer specific for biomolecules and method of making
US5404871A (en) 1991-03-05 1995-04-11 Aradigm Delivery of aerosol medications for inspiration
WO1992016221A1 (en) 1991-03-15 1992-10-01 Synergen, Inc. Pegylation of polypeptides
DE4118120A1 (de) 1991-06-03 1992-12-10 Behringwerke Ag Tetravalente bispezifische rezeptoren, ihre herstellung und verwendung
US5637481A (en) 1993-02-01 1997-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Expression vectors encoding bispecific fusion proteins and methods of producing biologically active bispecific fusion proteins in a mammalian cell
CA2444415A1 (en) 1991-07-02 1993-01-21 Nektar Therapeutics Method and device for delivering aerosolized medicaments
US5270170A (en) 1991-10-16 1993-12-14 Affymax Technologies N.V. Peptide library and screening method
WO1993008829A1 (en) 1991-11-04 1993-05-13 The Regents Of The University Of California Compositions that mediate killing of hiv-infected cells
US5641670A (en) 1991-11-05 1997-06-24 Transkaryotic Therapies, Inc. Protein production and protein delivery
US5733761A (en) 1991-11-05 1998-03-31 Transkaryotic Therapies, Inc. Protein production and protein delivery
US5932448A (en) 1991-11-29 1999-08-03 Protein Design Labs., Inc. Bispecific antibody heterodimers
PT1696031E (pt) 1991-12-02 2010-06-25 Medical Res Council Produção de auto-anticorpos a partir de reportórios de segmentos de anticorpo e exibidos em fagos
JP4157160B2 (ja) 1991-12-13 2008-09-24 ゾーマ テクノロジー リミテッド 改変抗体可変領域の調製のための方法
DE4207475A1 (de) 1992-03-10 1993-09-16 Goldwell Ag Mittel zum blondieren von menschlichen haaren und verfahren zu dessen herstellung
US5447851B1 (en) 1992-04-02 1999-07-06 Univ Texas System Board Of Dna encoding a chimeric polypeptide comprising the extracellular domain of tnf receptor fused to igg vectors and host cells
AU4829593A (en) 1992-09-23 1994-04-12 Fisons Plc Inhalation device
AU5322494A (en) 1992-10-02 1994-04-26 Trustees Of Dartmouth College Bispecific reagents for redirected targeting of low density lipoprotein
PL172758B1 (pl) 1992-10-19 1997-11-28 Dura Pharma Inc Inhalator do proszków suchych PL PL PL PL PL PL PL
US5643252A (en) 1992-10-28 1997-07-01 Venisect, Inc. Laser perforator
WO1994012520A1 (en) 1992-11-20 1994-06-09 Enzon, Inc. Linker for linked fusion polypeptides
US5849695A (en) 1993-01-13 1998-12-15 The Regents Of The University Of California Parathyroid hormone analogues useful for treatment of osteoporosis and disorders of calcium meatabolism in mammals
DE69414369T2 (de) 1993-01-19 1999-05-27 Glaxo Group Ltd., Greenford, Middlesex Aerosol-spender und verfahren zu seiner herstellung
JP3824633B2 (ja) 1993-02-12 2006-09-20 ザ・ボード・オブ・トラスティーズ・オブ・ザ・リランド・スタンフォード・ジュニアー・ユニバーシティ 標的遺伝子の調節的転写および他の生物学的結果
US5514670A (en) 1993-08-13 1996-05-07 Pharmos Corporation Submicron emulsions for delivery of peptides
DE4337197C1 (de) 1993-10-30 1994-08-25 Biotest Pharma Gmbh Verfahren zur selektiven Herstellung von Hybridomazellinien, die monoklonale Antikörper mit hoher Zytotoxizität gegen humanes CD16-Antigen produzieren, sowie Herstellung bispezifischer monoklonaler Antikörper unter Verwendung derartiger monoklonaler Antikörper und des CD30-HRS-3-Antikörpers zur Therapie menschlicher Tumore
US5814599A (en) 1995-08-04 1998-09-29 Massachusetts Insitiute Of Technology Transdermal delivery of encapsulated drugs
US5827690A (en) 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
WO1995024220A1 (en) 1994-03-07 1995-09-14 Medarex, Inc. Bispecific molecules having clinical utilities
US5763733A (en) 1994-10-13 1998-06-09 Enzon, Inc. Antigen-binding fusion proteins
US5549551A (en) 1994-12-22 1996-08-27 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Adjustable length balloon catheter
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US6037453A (en) 1995-03-15 2000-03-14 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants
US5656730A (en) 1995-04-07 1997-08-12 Enzon, Inc. Stabilized monomeric protein compositions
US6019968A (en) 1995-04-14 2000-02-01 Inhale Therapeutic Systems, Inc. Dispersible antibody compositions and methods for their preparation and use
US5730723A (en) 1995-10-10 1998-03-24 Visionary Medical Products Corporation, Inc. Gas pressured needle-less injection device and method
GB9526100D0 (en) 1995-12-20 1996-02-21 Intersurgical Ltd Nebulizer
BR9612410A (pt) 1996-01-03 1999-07-13 Glaxo Group Ltd Aparelho para inalação
US5714352A (en) 1996-03-20 1998-02-03 Xenotech Incorporated Directed switch-mediated DNA recombination
ES2169299T3 (es) 1996-09-03 2002-07-01 Gsf Forschungszentrum Umwelt Procedimiento para la destruccion de celulas tumorales contaminantes en transplantes de celulas madre utilizando anticuerpos especificos.
US5879681A (en) 1997-02-07 1999-03-09 Emisphere Technolgies Inc. Compounds and compositions for delivering active agents
US5921447A (en) 1997-02-13 1999-07-13 Glaxo Wellcome Inc. Flow-through metered aerosol dispensing apparatus and method of use thereof
IL120943A (en) 1997-05-29 2004-03-28 Univ Ben Gurion A system for administering drugs through the skin
CO4810232A1 (es) 1997-07-25 1999-06-30 Schering Corp Citoquinas de mamiferos y sus secuencias codificadoras
US6060284A (en) 1997-07-25 2000-05-09 Schering Corporation DNA encoding interleukin-B30
AU750567B2 (en) 1997-09-29 2002-07-25 Novartis Ag Stabilized preparations for use in nebulizers
WO1999040195A1 (en) 1998-02-06 1999-08-12 Schering Corporation Mammalian receptor proteins; related reagents and methods
DE69942607D1 (de) 1998-04-14 2010-09-02 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Neues cytokinartiges protein
DE69942021D1 (de) 1998-04-20 2010-04-01 Glycart Biotechnology Ag Glykosylierungs-engineering von antikörpern zur verbesserung der antikörperabhängigen zellvermittelten zytotoxizität
CA2339047A1 (en) 1998-08-14 2000-02-24 Genetics Institute, Inc. Secreted proteins and polynucleotides encoding them
IL144056A0 (en) 1999-01-15 2002-04-21 Genentech Inc Polypeptide variants with altered effector function
US6800460B1 (en) 1999-03-11 2004-10-05 Schering Corporation Mammalian cytokine complexes
ATE420894T1 (de) 1999-03-11 2009-01-15 Schering Corp Cytokine aus säugetieren, verwandte reagenzien und verfahren
JP2002543840A (ja) 1999-05-19 2002-12-24 インサイト・ゲノミックス・インコーポレイテッド 細胞外シグナル伝達分子
US6309663B1 (en) 1999-08-17 2001-10-30 Lipocine Inc. Triglyceride-free compositions and methods for enhanced absorption of hydrophilic therapeutic agents
MXPA02002684A (es) 1999-09-09 2002-07-30 Schering Corp Citocinas de mamifero; reactivos y metodos relacionados.
US7090847B1 (en) 1999-09-09 2006-08-15 Schering Corporation Mammalian cytokines; related reagents and methods
US7422743B2 (en) 2000-05-10 2008-09-09 Schering Corporation Mammalian receptor protein DCRS5;methods of treatment
CN101654479A (zh) 2000-05-10 2010-02-24 先灵公司 哺乳动物细胞因子受体亚单位蛋白、相关试剂及方法
EP1383800A4 (en) 2001-04-02 2004-09-22 Idec Pharma Corp RECOMBINANT ANTIBODIES CO-EXPRESSED WITH GNTIII
ITPD20010108A1 (it) 2001-05-08 2002-11-08 Fidia Advanced Biopolymers Srl Biomateriali polimerici elettricamente conduttori, loro processo di preparazione ed impiego nel settore biomedico sanitario.
MXPA04001072A (es) 2001-08-03 2005-02-17 Glycart Biotechnology Ag Variantes de glicosilacion de anticuerpos que tienen citotoxicidad celulares dependiente de anticuerpos incrementada.
ATE515514T1 (de) 2002-12-23 2011-07-15 Schering Corp Verwendungen von säuger-cytokin il-23 ; verwandte reagenzien
US20040219150A1 (en) 2003-02-06 2004-11-04 Cua Daniel J. Uses of mammalian cytokine; related reagents
TR201808801T4 (tr) * 2003-02-10 2018-07-23 Biogen Ma Inc İmmünoglobulin formülasyonu ve bunun hazırlanış yöntemi.
DK1601694T3 (da) 2003-03-10 2009-12-14 Schering Corp Anvendelser af IL23-antagonister, relaterede reagenser
US20050033029A1 (en) 2003-06-30 2005-02-10 Jin Lu Engineered anti-target immunoglobulin derived proteins, compositions, methods and uses
DE10355251A1 (de) * 2003-11-26 2005-06-23 Merck Patent Gmbh Pharmazeutische Zubereitung enthaltend einen Antikörper gegen den EGF-Rezeptor
PL2511297T3 (pl) * 2004-02-06 2015-08-31 Morphosys Ag Ludzkie przeciwciała anty-CD38 i ich zastosowania
ATE533502T1 (de) 2004-02-17 2011-12-15 Schering Corp Verfahren zur modulation der il-23-aktivität; relevante reagenzien
BRPI0510617A (pt) 2004-05-03 2007-10-30 Schering Corp uso de expressão de il-17 para prever inflamação de pele; processos de tratamento
WO2005108425A1 (en) * 2004-05-10 2005-11-17 Cytos Biotechnology Ag Il-23 p19 antigen array and uses thereof
AR051444A1 (es) 2004-09-24 2007-01-17 Centocor Inc Proteinas derivadas de inmunoglobulina especifica de il-23p40, composiciones, epitopos, metodos y usos
GT200600031A (es) * 2005-01-28 2006-08-29 Formulacion anticuerpo anti a beta
US20060194981A1 (en) * 2005-02-26 2006-08-31 Jass Paul A Process for preparation of probucol derivatives
EP3501537A1 (en) 2005-06-30 2019-06-26 Janssen Biotech, Inc. Anti-il23 antibodies, compositions, methods and uses
WO2007024846A2 (en) 2005-08-25 2007-03-01 Eli Lilly And Company Anit-il-23 antibiodies
WO2007027714A2 (en) 2005-08-31 2007-03-08 Schering Corporation Engineered anti-il-23 antibodies
RS60616B1 (sr) * 2005-12-29 2020-09-30 Janssen Biotech Inc Humana anti-il-23 antitela, kompozicije, postupci i upotrebe
JP5470817B2 (ja) 2008-03-10 2014-04-16 日産自動車株式会社 電池用電極およびこれを用いた電池、並びにその製造方法
JP6136279B2 (ja) 2013-01-15 2017-05-31 株式会社ジェイテクト 転がり軸受装置
TWI503850B (zh) 2013-03-22 2015-10-11 Polytronics Technology Corp 過電流保護元件
TWI510996B (zh) 2013-10-03 2015-12-01 Acer Inc 控制觸控面板的方法以及使用該方法的可攜式電腦
US9353645B1 (en) 2015-02-16 2016-05-31 Borgwarner Inc. Vane ring thermal strain relief cuts
US9816280B1 (en) 2016-11-02 2017-11-14 Matthew Reitnauer Portable floor

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030124617A1 (en) * 2000-01-21 2003-07-03 Hermann Gram Antibodies to human il 1-beta
US20020042386A1 (en) * 2000-01-31 2002-04-11 Rosen Craig A. Nucleic acids, proteins, and antibodies
US20040156849A1 (en) * 2002-10-30 2004-08-12 Gurney Austin L. Inhibition of IL-17 production
US20050049402A1 (en) * 2002-12-02 2005-03-03 Babcook John S. Antibodies directed to tumor necrosis factor and uses thereof
US20040185506A1 (en) * 2003-03-21 2004-09-23 Heavner George A. Epitope mapping using nuclear magnetic resonance
US20050137385A1 (en) * 2003-05-09 2005-06-23 Jacqueline Benson IL-23p40 specific immunoglobulin derived proteins, compositions, methods and uses

Also Published As

Publication number Publication date
US10954297B2 (en) 2021-03-23
US20180291096A1 (en) 2018-10-11
LT2548577T (lt) 2017-04-10
LTPA2018010I1 (lt) 2018-05-25
RS53685B1 (en) 2015-04-30
IL236427A (en) 2016-11-30
GT200800132A (es) 2011-03-29
EA201301072A1 (ru) 2014-06-30
MY162559A (en) 2017-06-15
HRP20140982T1 (hr) 2014-12-05
ES2807928T3 (es) 2021-02-24
US20170362316A1 (en) 2017-12-21
ES2622602T3 (es) 2017-07-06
NO20190992A1 (no) 2008-09-29
RS55963B1 (sr) 2017-09-29
RS60616B1 (sr) 2020-09-30
SV2008002972A (es) 2010-01-18
US20070218064A1 (en) 2007-09-20
HUE049832T2 (hu) 2020-10-28
US8221760B2 (en) 2012-07-17
SI1971366T1 (sl) 2014-10-30
NO20240354A1 (no) 2024-04-12
CN102887954A (zh) 2013-01-23
HRP20170675T1 (hr) 2017-07-14
CA2635692A1 (en) 2007-07-05
ES2517420T3 (es) 2014-11-03
AU2006330411B2 (en) 2012-07-12
US20110040249A1 (en) 2011-02-17
CY2018013I1 (el) 2018-09-05
NO343345B1 (no) 2019-02-04
NZ569546A (en) 2011-09-30
UA101301C2 (ru) 2013-03-25
CN101389351B (zh) 2012-10-10
EP3219328B1 (en) 2020-06-17
NI200800193A (es) 2012-01-30
PL3219328T3 (pl) 2020-12-14
US20110195455A1 (en) 2011-08-11
JP2009523012A (ja) 2009-06-18
IL192458A (en) 2015-01-29
SI3219328T1 (sl) 2020-10-30
ZA200806556B (en) 2009-11-25
CN102887954B (zh) 2015-02-04
US20120251454A1 (en) 2012-10-04
NO2019029I1 (no) 2019-07-10
US20110287028A1 (en) 2011-11-24
LT3219328T (lt) 2020-09-10
SI2548577T1 (sl) 2017-05-31
WO2007076524A3 (en) 2008-03-27
US9783607B2 (en) 2017-10-10
KR101210395B1 (ko) 2012-12-11
NO20083266L (no) 2008-09-29
CA2635692C (en) 2013-06-18
CY1118880T1 (el) 2018-01-10
US20240199733A1 (en) 2024-06-20
HUE034269T2 (en) 2018-02-28
EP2548577A1 (en) 2013-01-23
BRPI0620946B1 (pt) 2019-04-09
PL2548577T3 (pl) 2017-08-31
US7993645B2 (en) 2011-08-09
CY1115935T1 (el) 2017-01-25
CR10181A (es) 2009-01-14
ECSP088591A (es) 2008-07-30
NL300935I2 (nl) 2018-10-25
CY2018013I2 (el) 2018-09-05
IL219890A (en) 2016-03-31
IL258718A (en) 2018-06-28
CN101389351A (zh) 2009-03-18
LUC00071I2 (ru) 2018-06-28
HK1124548A1 (en) 2009-07-17
BRPI0620946A8 (pt) 2019-01-15
PL1971366T3 (pl) 2015-01-30
IL219890A0 (en) 2012-06-28
HN2008000988A (es) 2011-11-14
IL236427A0 (en) 2015-02-26
EA200870129A1 (ru) 2009-10-30
IL248917A0 (en) 2017-01-31
EA019476B9 (ru) 2020-07-14
IL192458A0 (en) 2009-02-11
PT3219328T (pt) 2020-08-28
US20160237151A1 (en) 2016-08-18
NO344118B1 (no) 2019-09-09
EP2548577B1 (en) 2017-02-15
US7935344B2 (en) 2011-05-03
DK2548577T3 (en) 2017-03-13
EP3760230A1 (en) 2021-01-06
LTC1971366I2 (lt) 2019-06-25
PT2548577T (pt) 2017-05-29
MY163032A (en) 2017-07-31
US9353181B2 (en) 2016-05-31
HUS1800021I1 (hu) 2018-06-28
EA035459B1 (ru) 2020-06-19
HRP20201215T1 (hr) 2020-11-13
US8106177B2 (en) 2012-01-31
EP1971366A4 (en) 2010-03-31
SG10201505755YA (en) 2015-09-29
WO2007076524A2 (en) 2007-07-05
NO20190011A1 (no) 2008-09-29
JP5193881B2 (ja) 2013-05-08
US10030070B2 (en) 2018-07-24
KR20080080672A (ko) 2008-09-04
EP1971366A2 (en) 2008-09-24
PT1971366E (pt) 2014-11-06
AU2006330411A1 (en) 2007-07-05
BRPI0620946B8 (pt) 2021-05-25
US12129293B2 (en) 2024-10-29
CY1123400T1 (el) 2021-12-31
DK3219328T3 (da) 2020-07-13
EP3219328A1 (en) 2017-09-20
EP1971366B1 (en) 2014-07-30
MX2008008621A (es) 2008-11-27
DK1971366T3 (da) 2014-10-13
BRPI0620946A2 (pt) 2011-11-29
US20210188966A1 (en) 2021-06-24
MX342595B (es) 2016-10-05
NO347867B1 (no) 2024-04-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA019476B1 (ru) АНТИТЕЛА ПРОТИВ IL-23p19 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
US11479880B2 (en) Fibronectin type III domain based scaffold compositions, methods and uses
EA016022B1 (ru) Выделенное антитело млекопитающего против il-12 и способ изменения его активности
JP4810428B2 (ja) ヒトｅｐｏ模倣ヒンジコアミメティボディ、組成物、方法および使用
EA015262B1 (ru) Выделенное антитело к il-6 и его применение
RU2562700C2 (ru) Композиции, способы получения и применение каркаса на основе домена фибронектина типа iii
US8071103B2 (en) Pharmaceutical composition comprising a human GLP-1 mimetibody
EA011583B1 (ru) Миметические антитела glp-1 человека, композиции, способы и применения
US20070128193A1 (en) GLP-1 agonists, compositions, methods and uses
JP2006516084A (ja) Ｃｎｇｈ０００４ポリペプチド、抗体、組成物、方法および使用
US20100249032A1 (en) Human EPO Mimetic Hinge Core Mimetibodies, Compositions, Methods and Uses
JP2007508011A (ja) ヒトヒンジコアミメティボディ、組成物、方法および用途
JP2005536992A (ja) 哺乳動物のｅｐｏ模倣ｃｈ１欠失ミメティボディ、組成物、方法および使用
KR20060054174A (ko) 항-아밀로이드 항체, 조성물, 방법 및 용도
KR20080074136A (ko) 항체의 생성에 있어서의 ｂ 세포 팽창제의 사용
JP2006512051A (ja) Ｃｎｇｈ０００５ポリペプチド、抗体、組成物、方法および使用
JP2010513301A (ja) Ｉｌ−４若しくはｉｌ−１３関連の線維症関連の病状を処置するための方法および組成物
JP2008546373A (ja) ヒトｇｌｐ−１ミメティボディ、組成物、方法および用途

Legal Events

Date Code Title Description
PD4A Registration of transfer of a eurasian patent in accordance with the succession in title
TC4A Change in name of a patent proprietor in a eurasian patent
ND4A Extension of term of a eurasian patent
TH4A Publication of the corrected specification to eurasian patent