JP2002544173A

JP2002544173A - 抗ｃｄ２２抗体を用いたｂ細胞悪性腫瘍の免疫療法

Info

Publication number: JP2002544173A
Application number: JP2000616820A
Authority: JP
Inventors: ゴールデンバーグ，デイヴィッド・エム
Original assignee: イムノメディクス，インコーポレイテッド
Priority date: 1999-05-10
Filing date: 2000-05-10
Publication date: 2002-12-24
Also published as: US20020071807A1; AU774044B2; US7837995B2; US20110165073A1; US20030124058A1; WO2000067795A1; CA2373618A1; US7910103B2; CA2373618C; US20060057136A1; US6306393B1; EP1178826A1; US20120183472A1; US20020041847A1; US8105596B2; EP1178826B1; AU4829600A; US7939073B2

Abstract

(57)【要約】非ホジキンリンパ腫および慢性リンパ性白血病のＢ細胞サブタイプのようなＢ細胞悪性腫瘍は、癌死亡率へ著しく寄与する一因である。種々の治療形態へのＢ細胞悪性腫瘍の応答は、混合している。化学療法および放射線療法を含む伝統的なＢ細胞悪性腫瘍を治療する方法は、毒性の副作用のために利用が制限されてきた。抗ＣＤ２０抗体を用いる免疫治療法もまた限られた成功しか提供していない。しかし、ＣＤ２２またはＣＤ１９抗原と結合する抗体を利用することは、無痛性および急速進行性様態のＢ細胞リンパ腫、並びに急性および慢性リンパ性白血病などのＢ細胞悪性腫瘍を治療するための効果的な手段を提供する。更に、抗ＣＤ２２抗体及び／又は抗ＣＤ１９抗体を用いる免疫療法は、比較的低用量の抗体蛋白を必要とし、多様式な治療において効果的に用いられることが可能である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（発明の分野）本発明は、Ｂ細胞悪性腫瘍を治療するための免疫療法の方法に関する。特に、
本発明は、ＣＤ２２抗原に結合したり或いは、ＣＤ１９抗原に結合する比較的低
用量の抗体量を投与することによりＢ細胞悪性腫瘍を治療するための方法を企図
している。本発明は又、抗ＣＤ２２投与又は抗ＣＤ１９投与が、化学療法に補足
される複合様態の治療法であり、又、免疫複合体及び抗体融合蛋白のような治療
的蛋白を投与することによる複合様態の治療的方法をも企図している。

【０００２】（発明の背景）非ホジキンリンパ腫のＢ細胞サブタイプのようなＢ細胞リンパ腫は、癌死亡率
に大いに寄与している。治療の様々な形態へのＢ細胞悪性腫瘍の応答は、混在し
ている。例えば、非ホジキンリンパ腫の適切な臨床的ステージングが可能である
場合、フィールド放射線治療は、満足のゆく治療を提供することが可能である。
しかしまだ、このＢ細胞悪性腫瘍の病気で、およそ半分の患者が死亡する。Ｄｅ
ｖｅｓａら、Ｊ．Ｎａｔ’ｌＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ．７９：７０１（１９８
７）。

【０００３】慢性リンパ性白血病の殆どは、Ｂ細胞系譜由来である。Ｆｒｅｅｄｍａｎ，Ｈ
ｅｍａｔｏｌ，Ｏｎｃｏｌ．Ｃｌｉｎ．ＮｏｒｔｈＡｍ．４：４０５（１９９
０）。このタイプのＢ細胞悪性腫瘍は、西洋においては最もありきたりな白血病
である。Ｇｏｏｄｍａｎら、Ｌｅｕｋｅｍｉａ及びＬｙｍｐｈｏｍａ２２：１
（１９９６）。慢性リンパ性白血病の自然発達は、いくつかの段階に分かれる。
初期の段階では、慢性リンパ性白血病は無痛性の病気であり、寿命が長くなった
小さな成熟した機能不全の悪性Ｂ細胞の蓄積によって特徴付けられる。

【０００４】結局のところ、悪性Ｂ細胞の倍増時間が減少し、患者はますます症状を呈する
ようになる。治療が症状の緩和を提供することが可能である一方、全体の患者生
存率にはほとんど影響しない。慢性リンパ性白血病の最終段階は、顕著な貧血及
び／又は血小板減少が特徴である。この時点で、平均生存期間は２年以下である
。Ｆｏｏｎら、ＡｎｎａｌｓＩｎｔ．Ｍｅｄｉｃｉｎｅ１１３：５２５（１
９９０）。細胞増殖速度が非常に遅いため慢性リンパ性白血病は、治療に抵抗性
である。

【０００５】化学治療及び放射線治療を含む伝統的なＢ細胞悪性腫瘍の治療方法は、毒性副
作用があるために使用に制限がある。放射性核種、毒素、又はその他の治療剤を
指向させるモノクローナル抗体の使用は、そのような剤が腫瘍部位に選択的に送
達されうる可能性を提供するものであり、このようにして正常組織への毒性を制
限することが可能となる。

【０００６】ＣＤ２０抗原に対する抗体はＢ細胞リンパ腫の治療のために研究されてきてい
る。例えば、「ＩＤＥＣ−Ｃ２Ｂ８」と命名された抗ＣＤ２０キメラ抗体は、非
複合抗体として一回注射あたり５００ｍｇを超える量を反復注射すると、Ｂ細胞
リンパ腫に対して活性を有する。Ｍａｌｏｎｅｙら、Ｂｌｏｏｄ８４：２４５
７（１９９４）：Ｌｏｎｇｏ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．８：３５３（
１９９６）。軽度で、無活動の形態を有し、この養生法で治療されたおよそ５０
パーセントの非ホジキン患者は、応答反応を示した。治療的応答は、また、¹³¹
ＩラベルＢ１抗ＣＤ２０マウスモノクローナル抗体を一回注射あたり６００ｍｇ
を超える量を反復投与された時にも得られた。Ｋａｍｉｎｓｋｉら、Ｎ．Ｅｎｇ
ｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２９：４５９（１９９３）：Ｐｒｅｓｓら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．
Ｊ．Ｍｅｄ．３２９：１２１９（１９９３）：Ｐｒｅｓｓら、Ｌａｎｃｅｔ３
４６：３３６（１９９５）。しかし、これらの抗体は、非複合体であろうと放射
性ラベル化体であろうと、中間型又は急速進行型の、より優勢で致命的なＢ細胞
リンパ腫の様態を有する患者には、目標とする応答を示さなかった。

【０００７】Ｂ細胞悪性腫瘍にたいする、比較的抗体投与量の少ない反復投与を可能にする
免疫治療法、又、有意な期間、治療的応答を達成するのに毒性剤を追加しないで
も済む免疫治療法を開発する必要性が存在する。

【０００８】（発明の要約）従って、本発明の目的は、比較的低用量の抗ＣＤ２２抗体及び／又は抗ＣＤ１
９抗体の投与でＢ細胞悪性腫瘍を治療する方法を提供することにある。

【０００９】本発明の更なる目的は、治療において、抗ＣＤ２２抗体及び／又は抗ＣＤ１９
抗体の低用量が、免疫複合体又は抗体融合蛋白のような治療的蛋白の投与で補足
され、或いはこれらの抗体が、化学療法的養生法により補足されるＢ細胞悪性腫
瘍の治療に複合様式の治療法を提供することにある。

【００１０】これらの、及び他の目的は、本発明の一実施例に従い、Ｂ細胞悪性腫瘍を有す
る被験者に抗ＣＤ２２抗体及び薬学的に許容される担体を投与する段階から成る
Ｂ細胞悪性腫瘍の治療法を提供することにより達成される。

【００１１】１．概要上述したように、抗ＣＤ２０抗体は、複合体化していなくても放射性核種でラ
ベル化してしていてもどちらでも、Ｂ細胞リンパ腫の中間的な又は急速進行性様
態の患者には目標とする応答反応を提供できていない。驚くことに、非ホジキン
リンパ腫（不活動型および急速進行性様態の両方）、又は、急性のリンパ性白血
病を患っている患者での臨床上の研究は、比較的低用量（一回投与あたり、例え
ば、２０〜１００ｍｇの蛋白）の「ＥＰＢ−２」又は、「ＬＬ−２」と称される
非複合体のマウス又は、ヒト化抗ＣＤ２２抗体の投与が、２４ケ月間持続する部
分的または完全な寛解を誘導することが可能であることを証明した。このような
患者が積極的な化学療法のコースを多数回した後に、又は骨髄移植をした後です
ら、しばしば再発するという事実にもかかわらず、上述したことが証明された。
非複合体の又は放射性ラベルの抗ＣＤ２０抗体では、特に低蛋白用量で、そのよ
うな効果が得られていなかったので、非複合体の抗ＣＤ２２抗体を用いたこの肯
定的な結果は、非ホジキンリンパ腫の急速進行性（中間的な）様態を有する進行
患者、並びに慢性及び急性リンパ性白血病においては驚くべきものである。さら
に、抗ＣＤ２２抗体でのこの肯定的な結果は、Ｂ細胞型の慢性リンパ性白血病は
普通ＣＤ２２を発現しないとするＦｒｅｅｄｍａｎ，Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏ
ｌ．Ｃｌｉｎ．ＮｏｒｔｈＡｍ．４：４０５（１９９０）による言明からする
と予期しえないことである。

【００１２】２．定義以下の記述において、またそこで、参考文献により取り込んだ文書において多
数の学術用語が広範囲に使用されている。本発明の理解を容易にするために以下
のような定義が提供されている。

【００１３】構造遺伝子はメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）に転写されるＤＮＡ配列であ
り、ｍＲＮＡは次に特定のポリペプチドに特徴的なアミノ酸配列に翻訳される。

【００１４】プロモーターは構造遺伝子の転写を支配するＤＮＡ配列である。典型的には、
プロモーターは遺伝子の５’領域に位置し、構造遺伝子の転写開始位置の近位に
ある。プロモーターが誘導型プロモーターの時には、誘発剤に呼応して転写速度
が増大する。反対に、もしプロモーターが構成性プロモーターの時には、転写速
度は誘発剤によって調節されることは無い。

【００１５】単離ＤＮＡ分子は生物のゲノムＤＮＡに組み込まれていないＤＮＡの断片であ
る。例えば、クローン化された抗体遺伝子は哺乳動物細胞のゲノムＤＮＡから分
離されたＤＮＡ断片である。単離ＤＮＡ分子のもう一つ別の例は化学的に合成さ
れたＤＮＡ分子であり、これは生物のゲノムＤＮＡに組み込まれていないもので
ある。

【００１６】エンハンサーは、転写開始位置に対するエンハンサーの距離や方位に関わらず
、転写の効率を増大させることが出来るＤＮＡ調節要素である。

【００１７】相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）は逆転写酵素によりｍＲＮＡ鋳型から作られる一本
鎖ＤＮＡ分子である。典型的には、ｍＲＮＡの部分に相補的なプライマーが逆転
写を開始するために使われる。当業者は、また、学術用語である「ｃＤＮＡ」を
そのような一本鎖ＤＮＡとそれに相補的なＤＮＡ鎖からなる二重鎖ＤＮＡ分子を
引用するのに使用する。

【００１８】発現という用語は遺伝子産物の生合成を意味する。例えば、構造遺伝子の場合
には、発現は構造遺伝子のｍＲＮＡへの転写、およびｍＲＮＡから一つ又はそれ
以上のポリペプチドへの翻訳を意味する。

【００１９】クローニングベクターは宿主細胞中で自律的に複製する能力を有するプラスミ
ド、コスミド、或いはバクテリオファージのようなＤＮＡ分子である。クローニ
ングベクターは、典型的には、一つ或いは少数の制限酵素認識部位を含んでおり
、その部位に、クローニングベクターで形質転換した細胞の同定や選択に用いる
のに適したマーカー遺伝子のみならず、外来のＤＮＡ配列をベクターの本質的な
生物学的機能を損なうことなく確定的様式で挿入することが出来る。マーカー遺
伝子は、典型的には、テトラサイクリン抵抗性、或いはアンピシリン抵抗性を供
与する遺伝子を包含する。

【００２０】発現ベクターは宿主細胞中で発現される遺伝子からなるＤＮＡ分子である。典
型的には、遺伝子発現は、構成性または誘導性プロモーター、組織特異的な調節
要素、及びエンハンサーを含むある種の調節要素の制御下に置かれる。そのよう
な遺伝子は調節要素に「挙動的にリンク（operably linked to）」していると言
われている。

【００２１】組換え宿主はクローニングベクターまたは発現ベクターのいずれかを含むいか
なる原核生物または真核生物であってもよい。この用語は、また、宿主細胞の染
色体またはゲノム中にクローン化した遺伝子（類）を含むように遺伝子操作され
た原核生物または真核生物を包含する。

【００２２】抗体断片はＦ（ａｂ’）₂、Ｆ（ａｂ）2、Ｆａｂ’、Ｆａｂなどのような抗体の
一部分である。構造によらず抗体断片は完全な抗体によって認識されるのと同一
の抗原と結合する。例えば、抗ＣＤ２２モノクローナル抗体断片はＣＤ２２のエ
ピトープと結合する。

【００２３】「抗体断片」という用語は、また、抗体のように特定の抗原と結合することに
よって複合体を形成するように作用する合成または遺伝子操作された蛋白のいか
なるものをも包含する。例えば、抗体断片はＬ鎖可変領域からなる単離された断
片、Ｈ鎖及びＬ鎖の可変領域からなる「Ｆｖ」断片、Ｌ鎖及びＨ鎖の可変領域を
ペプチドリンカーで繋げた組換え一本鎖ポリペプチド分子（「ｓＦｖ蛋白」）及
び超可変領域に似たアミノ酸残基からなる最小認識単位を包含する。

【００２４】キメラ抗体は齧歯類の抗体から導入された可変領域と相補性決定領域を含む組
換え蛋白である。一方、抗体分子の残りの部分はヒト抗体から導かれる。

【００２５】ヒト化抗体はネズミのモノクローナル抗体の相補性決定部位をネズミの免疫グ
ロブリンのＨ、Ｌ可変鎖からヒトの可変領域に移し変えた組換え蛋白である。

【００２６】ここで使用されるように、治療剤とは治療に有用である複合体を作るために抗
体部分に複合体化される分子、又は原子である。治療剤の例は、薬剤、毒素、免
疫調節剤、キレート化剤、ホウ素化合物、光活性剤又は色素、及び放射性同位元
素を含む。

【００２７】裸の抗体（naked antibody）は、抗体断片に対立するものとして、抗体全体で
あり、裸の抗体は治療剤と複合体化していない。裸の抗体は、キメラ及びヒト化
抗体のようなある種の組換え抗体のみならずポリクローナル抗体及びモノクロー
ナル抗体を包含する。

【００２８】抗体成分とは、ここで使用されるように、抗体全体、及び抗体断片の両方を包
含する。

【００２９】免疫複合体は抗体成分の治療剤との複合体である。

【００３０】ここで使用されるように、抗体融合蛋白という用語は一つ又はそれ以上の成分
及び治療剤からなる組換え分子のことを指す。そのような融合蛋白に適する治療
剤の例は免疫調節剤（「抗体−免疫調節剤融合蛋白」）及び毒素（「抗体−毒素
融合蛋白」）を含む。融合蛋白は単一の抗体成分、異なった抗体成分の多価の組
み合わせ、又は同じ抗体成分の多重のコピーを包含する。

【００３１】３．抗ＣＤ２２及び抗ＣＤ１９モノクローナル抗体、ヒト化抗体、霊長類抗体
、及びヒト抗体の生産ＣＤ２２及びＣＤ１９に対する齧歯類のモノクローナル抗体は当業者にとって
良く知られた方法で入手することが出来る。一般的には、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ
及びＭｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ２５６：４９５（１９７５），及びＣｏ
ｌｉｇａｎら（ｅｄｓ．），ＣＵＲＲＥＮＴＰＲＯＴＯＣＯＬＳＩＮＩＭ
ＭＵＮＯＬＯＧＹ，ＶＯＬ．１，ｐａｇｅｓ２．５．１−２．６．７（Ｊｏｈ
ｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ１９９１）［「Ｃｏｌｉｇａｎ」］である。簡
潔に言うと、モノクローナル抗体は、マウスにＣＤ２２又はＣＤ１９からなる組
成物を注射し、血清試料を取り出して抗体産生の存在を確かめ、Ｂリンパ球を得
るために脾臓を摘出し、ハイブリドーマを作るためにＢリンパ球をミエローマ細
胞と融合させ、ハイブリドーマをクローニングし、抗ＣＤ２２又は抗ＣＤ１９抗
体の産生陽性細胞を選択し、その抗原に対する抗体を産生するクローンを培養し
、ハイブリドーマの培養液からその抗体を単離することによって得ることが出来
る。

【００３２】モノクローナル抗体は種々の良く確立された技術によってハイブリドーマ培養
液から単離、精製することが出来る。そのような単離の技術はＰｒｏｔｅｉｎ−
Ａを使ったアフィニティー・クロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー
、及びイオン交換クロマトグラフィーを含む。例えば、Ｃｏｌｉｇａｎのページ
２．７．１−２．７．１２，及びページ２．９．１−２．９．３を参照せよ。ま
た、Ｂａｉｎｅｓら、「ＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆＩｍｍｕｎｏｇｌｏ
ｂｕｌｉｎＧ（ＩｇＧ），」ｉｎＭＥＴＨＯＤＳＩＮＭＯＬＥＣＵＬＡ
ＲＢＩＯＬＯＧＹ，ＶＯＬ．１０，ｐａｇｅｓ７９−１０４（ＴｈｅＨｕ
ｍａｎＰｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．１９９２）を参照せよ。

【００３３】抗体産生のために使う良く特徴付けられたＣＤ２２又はＣＤ１９抗原の適切な
量は標準化された技術を使って得ることが出来る。一例として、Ｔｅｄｄｅｒら
、米国特許Ｎｏ．５，４８４，８９２（１９９６）に記載されている析出させた
抗体を使ってＢリンパ球蛋白からＣＤ２２を免疫沈澱させることが可能である。

【００３４】もう一つ別の選択肢として、ＣＤ２２又はＣＤ１９蛋白を過剰に産生する形質
移入培養細胞からＣＤ２２蛋白又はＣＤ１９蛋白を得ることも可能である。ＣＤ
２２又はＣＤ１９をコードするＤＮＡ分子からなる発現ベクターは公表されたＣ
Ｄ２２及びＣＤ１９のヌクレオチド配列を使って構築することが可能である。例
えば、Ｗｉｌｓｏｎら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１７３：１３７（１９９１）：Ｗ
ｉｌｓｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：５０１３（１９９３）を参照せよ
。引例として、ＣＤ２２又はＣＤ１９をコードするＤＮＡ分子は、相互にプライ
ミングする長鎖のオリゴヌクレオチドを使ってＤＮＡ分子を合成することが可能
である。例えば、Ａｕｓｕｂｅｌら、（ｅｄｓ．），ＣＵＲＲＥＮＴＰＲＯＴ
ＯＣＯＬＳＩＮＭＯＬＥＣＵＬＡＲＢＩＯＬＯＧＹ，ｐａｇｅｓ８．２
．８−８．２．１３（１９９０）［「Ａｕｓｂｅｌ」］を参照せよ。また、Ｗｏ
ｓｎｉｃｋら、Ｇｅｎｅ６０：１１５（１９８７）：及びＡｕｓｂｅｌら（ｅ
ｄｓ．），ＳＨＯＲＴＰＲＯＴＯＣＯＬＳＩＮＭＯＬＥＣＵＬＡＲＢＩ
ＯＬＯＧＹ，３ｒｄＥｄｉｔｉｏｎ，ｐａｇｅｓ８−８ｔｏ８−９（Ｊ
ｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．１９９５）も参照せよ。ポリメラ
ーゼ連鎖反応を使用した確立された技術は長さが１．８キロベ―スもの大きな遺
伝子を合成する能力を提供することができる。Ａｄａｎｇら、ＰｌａｎｔＭｏ
ｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．２１：１１３１（１９９３）：Ｂａｍｂｏｒら、ＰＣＲＭ
ｅｔｈｏｄｓ及びＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ２：２６６（１９９３）：Ｄｉｌ
ｌｏｎら、「ＵｓｅｏｆｔｈｅＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅ
ａｃｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅＲａｐｉｄＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆ
ＳｙｎｔｈｅｔｉｃＧｅｎｅｓ，」ｉｎＭＥＴＨＯＤＳＩＮＭＯＬＥ
ＣＵＬＡＲＢＩＯＬＯＧＹ，Ｖｏｌ．１５：ＰＣＲＰＲＯＴＯＣＯＬＳ：Ｃ
ＵＲＲＥＮＴＭＥＴＨＯＤＳ及びＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＳ，Ｗｈｉｔｅ（ｅ
ｄ．），ｐａｇｅｓ２６３−２６８，（ＨｕｍａｎａＰｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．
１９９３）。

【００３５】この手法の変形として、抗ＣＤ２２モノクローナル抗体、又は、抗ＣＤ１９モ
ノクローナル抗体はＣＤ２２ｃＤＮＡ又はＣＤ１９ｃＤＮＡを安定的に形質移入
したネズミのプレＢ細胞株で免疫したマウスから取り出した脾臓とミエローマ細
胞を細胞融合することによっても得ることが可能である。Ｔｅｄｄｅｒら、米国
特許Ｎｏ．５，４８４，８９２（１９９６）を参照せよ。

【００３６】適切なマウスの抗ＣＤ２２モノクロナール抗体の一つの例は、ＬＬ２（以前の
ＥＰＢ−２）モノクロナール抗体であり、これは、Ｂｕｒｋｉｔｔリンパ腫に由
来するヒトラジ細胞に対して作製された。Ｐａｗｌａｋ−Ｂｙｃｚｋｏｗｓｋａ
ら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４９：４５６８（１９８９）。このモノクロナール
抗体はＩｇＧ２_aアイソタイプを有し、この抗体は、速やかに細胞の内部に取り
込まれる。Ｓｈｉｈら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ５６：５３８（１９９４）
。免疫染色法及び、インビボでの放射性免疫検出法による研究は、Ｂ細胞リンパ
腫を検出する際にＬＬ２の優れた感度を証明した。Ｐａｗｌａｋ−Ｂｙｃｚｋｏ
ｗｓｋａら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４９：４５６８（１９８９）：Ｍｕｒｔｈ
ｙら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．１９：３９４（１９９２）。更に、^99m
Ｔｃラベル化ＬＬ２−Ｆａｂ’断片は、Ｂ細胞リンパ腫のアップステージングを
フォローするのに有用であることが証明された。一方、¹³¹Ｉラベル化完全型Ｌ
Ｌ２及びＬＬ２Ｆ（ａｂ’）₂ 断片はリンパ腫部位を標的にしたり、治療的
応答を誘導するのに用いられてきた。Ｍｕｒｔｈｙら、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．
Ｍｅｄ．１９：３９４（１９９２）：Ｍｉｌｌｓら、Ｐｒｏｃ．Ａｍ．Ａｓｓｏ
ｃ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．３４：４７９（１９９３）［Ａｂｓｔｒａｃｔ２
８５７］：Ｂａｕｍら、Ｃａｎｃｅｒ７３（Ｓｕｐｐｌ．３）：８９６（１９
９４）：Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．９：５４８（１
９９１）。更に、シュードモナス菌体外毒素の誘導体と複合化したＦａｂ’ＬＬ
２断片は、ヌードマウスで成長する測定可能なヒトリンパ腫異種移植片を完全寛
解に導くことが示された。Ｋｒｅｉｔｍａｎら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．５３：
８１９（１９９３）。

【００３７】更なる実施形態では、本発明の抗体は、ヒト抗体の可変領域が齧歯類の抗ＣＤ
２２又は抗ＣＤ１９抗体の可変領域により置換されているキメラの抗体である。
キメラ抗体の利点は、免疫原性が減じること、及びインビボでの安定性が増大す
ることを含む。

【００３８】キメラの抗体を構成する技術は、当業者に公知である。一例として、Ｌｅｕｎ
ｇら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ１３：４６９（１９９４）は、それぞれヒトκ及び
ＩｇＧ₁定常領域を、ＬＬ２モノクローナル抗体のＶ_K及びＶ_H領域をコードする
ＤＮＡ配列と組み合わせることにより、ＬＬ２キメラを作製する方法を説明して
いる。この刊行物は又、ＬＬ２のＬ鎖及びＨ鎖可変領域、それぞれＶ_K及びＶ_H、
のヌクレオチド配列も提供している。

【００３９】また別の実施形態では、本発明の抗体は人間に近い霊長類抗体である。ヒヒに
おける治療的に有用な抗体を誘起する一般的な技術を、例えば、Ｇｏｌｄｅｎｂ
ｅｒｇら、国際特許公報Ｎｏ．ＷＯ９１／１１４６５（１９９１），及びＬｏｓ
ｍａｎら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ４６：３１０（１９９０）に見ることも
可能である。

【００４０】さらに別の実施形態では、本発明の抗体は「ヒト化」モノクローナル抗体であ
る。つまり、マウス相補性決定領域は、マウス免疫グロブリンのＨ可変鎖及びＬ
可変鎖からヒトの可変領域に移し変え、続いてフレームワーク領域にあるヒトの
残基をいくつかそれらマウスの相対物に置き換える。本発明によるヒト化したモ
ノクロナール抗体は、治療的方法に用いることに適している。マウスの免疫グロ
ブリンをクローニングする一般的な技術は、例えば、Ｏｒｌａｎｄｉら、Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｉ’ｌＡｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８６：３８３３（１９８９）の
刊行物に説明されている。ヒト化したモノクロナール抗体を作製する技術は、例
えば、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ３２１：５２２（１９８６），Ｒｉｅｃｈ
ｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ３３２：３２３（１９８８），Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ
ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２３９：１５３４（１９８８），Ｃａｒｔｅｒら、Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔ’ｌＡｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８９：４２８５（１９９２），Ｓ
ａｎｄｈｕ，Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．１２：４３７（１９９２），
及びＳｉｎｇｅｒら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎ．１５０：２８４４（１９９３）により説
明されている。Ｌｅｕｎｇら、Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．３２：１４１３（１９
９５）の刊行物はヒト化したＬＬ２抗体の構築を説明している。

【００４１】別の実施形態では、本発明の抗体は、ヒトモノクローナル抗体である。このよ
うな抗体は、抗原チャレンジに応答して、特定のヒト抗体を作製するために、「
人工改変した」トランスジェニックマウスから得られる。この技術では、ヒトＨ
鎖及びＬ鎖部位の要素が、内生のＨ鎖及びＬ鎖部位を標的にして欠失させた胚幹
細胞株から導かれたマウスの系統に導入される。トランスジェニックマウスは、
ヒト抗原に特異的なヒト抗体を合成することが可能であり、又、そのマウスをヒ
ト抗体分泌性のハイブリドーマを作製するのに用いることも可能である。トラン
スジェニックマウスからヒト抗体を得る方法は、Ｇｒｅｅｎら、Ｎａｔｕｒｅ
Ｇｅｎｅｔ．７：１３（１９９４），Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ３６８
：８５６（１９９４）及びＴａｙｌｏｒら、Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎ．６：５７９（
１９９４）により説明されている。

【００４２】４．抗体断片の生産本発明は、抗ＣＤ２２抗体及びＣＤ１９抗体又は、別の治療的に有用な抗体の
断片を用いることを企図している。抗体の断片は、抗体の蛋白質加水分解、又は
、断片をコードするＤＮＡをＥ．ｃｏｌｉで発現させることにより調製すること
が可能である。

【００４３】抗体の断片は、従来の方法により、抗体全体のペプシン又はパパイン消化によ
って得ることが可能である。例えば、抗体をペプシンで酵素的に開裂することに
より抗体断片を作製して、Ｆ（ａｂ’）₂ 命名された５Ｓ断片を供与すること
が可能である。この断片を更に、チオール還元剤及び、ジスルフィド結合の開裂
の結果生じるスルフヒドリル基の保護基を随意に用いて開裂し、３．５ＳＦａ
ｂ’一価断片を作製することが可能である。別の選択肢として、ペプシンを用い
る酵素開裂では、２つの一価Ｆａｂ断片及びＦｃ断片が直接に生成する。これら
の方法は、例えばＧｏｌｄｅｎｂｅｒｇ，米国特許Ｎｏ．４，０３６，９４５及
び４，３３１，６４７並びにそれらに記載の参照文献に説明されている。又、Ｎ
ｉｓｏｎｏｆｆら、ＡｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．８９：２３０
（１９６０）：Ｐｏｒｔｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．７３：１１９（１９５９）
，Ｅｄｅｌｍａｎら、ｉｎＭＥＴＨＯＤＳＩＮＥＮＺＹＭＯＬＯＧＹＶ
ＯＬ．１，ｐａｇｅ４２２（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ１９６７）並び
に、Ｃｏｌｉｇａｎのページ２．８．１−２．８．１０及び２．１０−２．１
０．４も参照のこと。断片が完全抗体により認識される抗原に結合する限り、
Ｈ鎖を分離して一価Ｌ−Ｈ鎖断片を作製したり、更なる断片の開裂、或いは別の
酵素的、化学的、遺伝子的技術のような抗体開裂のための他の方法を用いてもよ
い。

【００４４】例えば、Ｆｖ断片は、Ｖ_H鎖Ｖ_L鎖の会合から成る。この会合はＩｎｂａｒら、
Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌＡｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ６９：２６５９（１９７２
）に記載されているように非共有結合でありえる。また一方、その可変鎖は分子
間ジスルフィド結合により架橋し得るし、又は、グルタルアルデヒドのような化
学物質により架橋結合することが可能である。例えば、上記のＳａｎｄｈｕを参
照のこと。

【００４５】そのＦｖ断片はペプチドリンカーにより連結するＶ_H鎖とＶ_L鎖から成ることが
好ましい。これらの単鎖抗原結合蛋白（ｓＦＶ）は、オリゴヌクレオチドにより
連結されるＶ_H領域とＶ_L領域をコードするＤＮＡ配列から成る構造的遺伝子を
構成することにより調製される。構造的遺伝子を発現ベクターに組み込み、続い
てＥ．ｃｏｌｉのような宿主細胞に導入する。組み替え宿主細胞は、２つのＶ領
域を橋渡しするリンカーペプチドを有する単一ポリペプチト鎖を合成する。ｓＦ
ｖを生産する方法は、例えば、Ｗｈｉｔｌｏｗら、Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＡＣｏｍ
ｐａｎｉｏｎｔｏＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２：９７
（１９９１）により説明されている。また、Ｂｉｒｄら、Ｓｃｉｅｎｃｅ２４
２：４２３（１９８８），Ｌａｄｎｅｒら、米国特許Ｎｏ．４，９４６，７７８
，Ｐａｃｋら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ１１：１２７１（１９９３），
及び上記のＳａｎｄｈｕも又参照のこと。

【００４６】抗体断片の別の形体は、単一の相補性決定部位（ＣＤＲ）をコードするペプチ
ドである。ＣＤＲペプチド（「最小認識単位」）は、関与する抗体のＣＤＲをコ
ードする遺伝子を構築することにより得ることが可能である。このような遺伝子
は、例えば、抗体産生細胞のＲＮＡから可変領域を合成するのにポリメラーゼ連
鎖反応を使って調製される。例えば、Ｌａｒｒｉｃｋら、Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ａ
ＣｏｍｐａｎｉｏｎｔｏＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ２
：１０６（１９９１）：Ｃｏｕｒｔｅｎａｙ−Ｌｕｃｋ，「ＧｅｎｅｔｉｃＭ
ａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎｏｆＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ
，」ｉｎＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ：ＰＲＯＤＵＣＴＩ
ＯＮ，ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ及びＣＬＩＮＩＣＡＬＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮ
，Ｒｉｔｔｅｒら（ｅｄｓ．），ｐａｇｅｓ１６６−１７９（Ｃａｍｂｒｉｄ
ｇｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ１９９５）とＷａｒｄら、「Ｇｅｎ
ｅｔｉｃＭａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ及びＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＡｎｔ
ｉｂｏｄｉｅｓ，」ｉｎＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ：Ｐ
ＲＩＮＣＩＰＬＥＳ及びＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＳ，Ｂｉｒｃｈら、（ｅｄｓ．
），ｐａｇｅｓ１３７−１８５（Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９９５）
を参照のこと。

【００４７】５．免疫複合体の調製本発明は、Ｂ細胞悪性腫瘍の治療効果を得るために免疫複合体を用いるのと同
様に、「裸の」抗ＣＤ２２抗体及び抗ＣＤ１９抗体を用いることを企図している
。このような免疫複合体は抗体成分に治療剤を間接的に複合体化することにより
調製することが可能である。一般的な技術は、Ｓｈｉｈら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎ
ｃｅｒ４１：８３２−８３９（１９８８）：Ｓｈｉｈら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎ
ｃｅｒ４６：１１０１−１１０６（１９９０）：及び、Ｓｈｉｈら、米国特許
Ｎｏ．５，０５７，３１３に説明されている。この一般的な技術は、酸化された
炭水化物部分を有する抗体成分を、少なくとも１つの遊離アミン官能基を有し、
複数の薬剤、毒素、キレート化剤、ホウ素付加物、又はその他の治療剤を負荷し
た担体ポリマーと反応させることを含んでいる。この反応は、まず、Ｓｃｈｉｆ
ｆ塩基（イミン）結合を生じるが、このＳｃｈｉｆｆ塩基（イミン）結合は、第
二級アミンに還元されて安定化し、最終複合体を形成することが可能である。

【００４８】担体ポリマーは、アミノデキストランか、又は少なくとも５０アミノ酸残基か
らなるポリペプチドであることが好ましいが、その他の本質的に等価であるポリ
マー担体も又用いることが可能である。最終免疫複合体は、投与を容易にしたり
、治療用の効果的な標的化のために哺乳動物の血清のような水溶液に溶解するこ
とが好ましい。担体ポリマー上の可溶化官能基は、このようにして最終免疫複合
体の血清溶解度を向上させるであろう。特に、アミノデキストランが好ましい。

【００４９】アミノデキストラン担体を用いて免疫複合体を調製する過程は、典型的にはデ
キストランポリマー、利便性上、およそ１０，０００〜１００，０００の平均分
子量のデキストランで始まる。このデキストランを、酸化剤と反応させ、その炭
水化物環の一部分の制御的な酸化で、効果的にアルデヒト基を発生させる。この
酸化は従来の手順によって、ＮａＩＯ₄のようなグリコール開裂作用のある化学
試薬で便宜的に効果的に行う。

【００５０】酸化されたデキストランはその後、ポリアミン、好ましくは、ジアミンと、更
に好ましくは、モノ又はポリヒドロキシジアミンと反応を起こさせる。適切なア
ミンは、エチレンジアミン、プロピレンジアミン、或いはポリメチレンジアミン
のようなジアミンジエチレントリアミン、又はポリアミンのようなアミン，１，
３−ジアミノ−２−ヒドロキシプロパン、或いは、他のヒドロキシル化ジアミン
又はポリアミンのようなアミン等を含む。アルデヒド官能基をＳｃｈｉｆｆ塩基
グループにほぼ完全に変換することを確実にするためにデキストランのアルデヒ
ド基に比して過剰のアミンが用いられる。

【００５１】ＮａＢＨ₄、ＮａＢＨ₃ＣＮなどのような還元剤を、合成Ｓｃｈｉｆｆ塩基中間
体の還元的安定化に効果的に用いられる。合成された付加物は、通常のサイジン
グコラムを通過て精製し架橋結合したデキストランを取り除くことが可能である
。

【００５２】デキストランを誘導体化してアミン官能基を導入する別の従来の方法、例えば
、ブロモシアンとの反応の後にジアミンと反応させる方法もまた用いることが可
能である。

【００５３】アミノデキストランは、次に活性型の、好ましくは、従来の手段、例えば、ジ
シクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）又はその水溶性変化体を用いる手段に
よりカルボキシル基が活性化された誘導体の形にした負荷しようとする特定の薬
剤、毒素、キレート化剤、免疫調節剤、ホウ素付加物又は、他の治療剤の誘導体
と反応し、中間付加体を形成する。

【００５４】また別の選択肢として、アメリカヤマゴボウの抗ウイルス蛋白、又はリシンＡ
−鎖などのようなポリペプチド毒素をグルタアルデヒド縮合によって、アミノデ
キストランに結合させることも可能であるし、また、その蛋白の活性化したカル
ボキシル基をアミノデキストランのアミンと反応させて結合させることも可能で
ある。

【００５５】放射性金属又は磁気共鳴エンハンサーのためのキレート化剤は、当分野では公
知である。典型的なものは、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）及びジエチレ
ントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）の誘導剤である。これらのキレート化剤は、一
般に側鎖上に基を有しており、それより、キレート化剤を担体に付けることが可
能である。この様な基は、例えばベンジルイソチオシアネートを含み、それによ
り、ＤＴＰＡ又はＥＤＴＡを担体のアミン基に結合させることが可能である。又
別の選択肢として、キレート化剤上のカルボキシ基又はアミン基を、活性化又は
前もっての誘導体化、その後の結合により、全て既知の手段で担体に結合させる
ことが可能である。

【００５６】カルボランのようなホウ素付加物を従来の方法で抗体成分に付けることが可能
である。例えば、カルボランは、当分野において既知であるように、ぶら下がり
側鎖にカルボキシル基官能基をもって、調製されることが可能である。担体、例
えば、アミノデキストロランのような担体にカルボランを取り付けることは、カ
ルボランのカルボキシル基の活性化と担体上のアミンとの縮合により達成され、
中間複合体を作製することが可能である。このような中間複合体は、次に抗体成
分に付けられ、以下に説明するように、治療的に有用な免疫複合体を作製するこ
とが可能である。

【００５７】ポリペプチド担体を、アミノデキストランの代わりに用いることが可能である
が、ポリペプチド担体は、少なくとも５０のアミノ酸残基を、好ましくは、１０
０−５０００のアミノ酸残基を鎖上に有しなければならない。少なくともいくつ
かのアミノ酸は、リジン残基又はグルタミン酸残基又はアスパラギン酸残基でな
ければならない。リジン残基のぶら下がりアミン、並びにグルタミン酸及びアス
パラギン酸のぶら下がりカルボキシル基は、薬剤、毒素、免疫調節剤、キレート
化剤、ホウ素付加物又は、他の治療剤を付けるのに都合がよい。適切なポリペプ
チド担体の例は、ポリリジン、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸、その共
重合体並びに、これらのアミノ酸とその他、例えば、セリン、の混合ポリマーを
含み、合成される負荷担体及び免疫複合体に所望の溶解性質を付与する。

【００５８】抗体成分と中間複合体との結合は、抗体成分の炭水化物部分を酸化することに
より、そして生成したアルデヒド（ケトン）のカルボニルを、薬剤、毒素、キレ
ート化剤、免疫調節剤、ホウ素付与物又は、他の治療剤で負荷した後に担体上に
残留しているアミン基と反応させることにより効果的に行われる。又別の選択肢
として、中間複合体は、治療剤を負荷した後に中間複合体に導入されていたアミ
ノ基を介して、酸化された抗体成分に付けることが可能である。酸化は、例えば
、ＮａＩＯ₄又は別の解裂作用のある試薬を使って化学的に、又は、例えば、ノ
イラミニターゼ、及びガラクトースオキシターゼを使って酵素的に、のいずれか
によって便宜的に達成される。アミノデキストラン担体の場合、アミノデキスト
ランの全てのアミンが、治療剤を負荷するのに使われるわけではない。アミノデ
キストランの残留アミンは、酸化された抗体成分と縮合し、Ｓｃｈｉｆｆ塩基付
加体を形成する。その後、このＳｃｈｉｆｆ塩基付加体は還元的に、通常ボロハ
イドライド還元剤を用いて安定化される。

【００５９】本発明に従って、類似した手順を用いて別の免疫調節剤を作製する。負荷され
たポリペプチド担体は、抗体成分の酸化された炭水化物部分との縮合のために残
留している遊離リジン残基を有するのが好ましい。ポリペプチド担体上にあるカ
ルボキシル基は、必要な場合に、例えば、ＤＣＣで活性化し、ジアミンの過剰量
との反応によりアミンに変換することが可能である。

【００６０】最終の免疫複合体は、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ−３００でのゲル濾過クロマト
グラフィーのような従来の技術を用いて精製される。

【００６１】或いは又、免疫複合体を、直接に抗体成分を治療剤に複合体化して調製するこ
とが可能である。一般の手順は、治療剤を直接に酸化された抗体成分に付けるこ
とを除いて間接的な複合体化の方法に類似している。

【００６２】別の治療剤をここで説明したキレート化剤に代用できることは十分認識される
であろう。当業者は、実験することなく複合体化のスキームを工夫することが可
能である。

【００６３】更なる例証として、治療剤はジスルフィド結合形成を介して還元された抗体成
分のヒンジ領域に付けることが可能である。例えば、破傷風菌毒素ペプチドは、
抗体成分にペプチトを付けるのに用いられる唯一のシステイン残基を用いて構築
することが可能である。別の選択肢として、このようなペプチドは、Ｎ−スクシ
ニル３−（２−ピリジルジチオ）プロピオン酸（ＳＰＤＰ）のような異種二官能
性架橋剤を用いて、抗体成分に付けることが可能である。Ｙｕら、Ｉｎｔ．Ｊ．
Ｃａｎｃｅｒ５６：２４４（１９９４）。この様な複合体化にたいする一般的
な技術は、その技術において既知である。例えば、Ｗｏｎｇ，ＣＨＥＭＩＳＴＲ
ＹＯＦＰＲＯＴＥＩＮＣＯＮＪＵＧＡＴＩＯＮ及びＣＲＯＳＳ−ＬＩＮＫ
ＩＮＧ（ＣＲＣＰｒｅｓｓ１９９１）：Ｕｐｅｓｌａｃｉｓら、Ｍｏｄｉｆ
ｉｃａｔｉｏｎｏｆＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓｂｙＣｈｅｍｉｃａｌＭｅ
ｔｈｏｄｓ，」ｉｎＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ：ＰＲＩＮ
ＣＩＰＬＥＳ及びＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＳ，Ｂｅｒｃｈら（ｅｄｓ．），ｐａ
ｇｅｓ１８７−２３０（Ｗｉｌｅｙ−Ｌｉｓｓ，Ｉｎｃ．１９９５）：及びＰ
ｒｉｃｅ，「Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ及びＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏ
ｆＳｙｎｔｈｅｔｉｃＰｅｐｔｉｄｅ−ＤｅｒｉｖｅｄＡｎｔｉｂｏｄｉ
ｅｓ」ｉｎＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳ：ＰＲＯＤＵＣＴＩ
ＯＮ，ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ及びＣＬＩＮＩＣＡＬＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮ
，Ｒｉｔｔｅｒら（ｅｄｓ．），ｐａｇｅｓ６０−８４（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ
ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ１９９５）を参照のこと。

【００６４】上述したように、抗体のＦｃ領域にある炭水化物部分は、治療剤を複合体化す
るのに用いることが可能である。しかし、もし抗体断片が免疫複合体の抗体成分
として用いられる場合、Ｆｃ領域はない。しかし、炭水化物部分を抗体又は抗体
断片のＬ鎖可変領域に導入することは、可能である。例えば、Ｌｅｕｎｇら、Ｊ
．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４：５９１９（１９９５）：及びＨａｎｓｅｎら、米国
特許Ｎｏ．５，４４３，９５３（１９９５）を参照のこと。技術的に作られた炭
水化物部分は、その後、治療剤を付けるのに用いられる。

【００６５】更に、当業者は複合体化方法の数多くの可能な変形を認識するであろう。例え
ば、炭水化物部分は、完全抗体又はその抗原結合断片の血液、リンパ液、又はそ
の他の細胞外液中での半減期を延長させるために、ポリエチレングリコールを付
けるのに用いられることが可能である。さらに、治療剤を炭水化物部分及び遊離
スルフヒドリル基に付けることで「二価の免疫複合体」を構築することが可能で
ある。この様な遊離フルフヒドリル基は抗体成分のヒンジ部位にあってもよい。

【００６６】６．融合蛋白の調製本発明は、一つ又はそれ以上の抗体部分及び免疫調節剤又は毒素部分から成る
融合蛋白を用いることを企図している。有用な抗体部分は、ＣＤ１９、ＣＤ２０
、ＣＤ２２、ＣＤ５２又はＣＤ７４を結合する抗体成分を含有し、融合蛋白は、
これらの抗体型の一、二、三、四、又は五つ全ての型から成ってもよい。本発明
に応じて、二価、三価、四価、及び五価の構成物を用いることが可能である。

【００６７】抗体−免疫調節剤融合蛋白を作る方法は、当業者に知られている。例えば、イ
ンターロイキン−２部分から成る抗体融合蛋白は、Ｂｏｌｅｔｉら、Ａｎｎ．Ｏ
ｎｃｏｌ．６：９４５（１９９５），Ｎｉｃｏｌｅｔら、ＣａｎｃｅｒＧｅｎ
ｅＴｈｅｒ．２：１６１（１９９５），Ｂｅｃｋｅｒら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’
ｌＡｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９３：７８２６（１９９６），Ｈａｎｋら、Ｃ
ｌｉｎ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．２：１９５１（１９９６），及びＨｕら、Ｃａ
ｎｃｅｒＲｅｓ．５６：４９９８（１９９６）により説明されている。更に、
Ｙａｎｇら、Ｈｕｍ．ＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓＨｙｂｒｉｄｏｍａｓ６：１２
９（１９９５）は、Ｆ（ａｂ‘）₂ 断片及び腫瘍壊死因子アルファ部分を含有
する融合蛋白を記している。さらに、ｈＬＬ２−ＩＬ−２融合蛋白の治療的使用
は、本発明の適用の実施例５で説明されている。

【００６８】抗体毒素融合蛋白中の組み替え分子が、一つ又はそれ以上の抗体成分及び毒素
又は化学療法剤から成る抗体−毒素融合蛋白を作る方法は、又当業者に知られて
いる。例えば、抗体−シュードモナス外毒素Ａ融合蛋白は、Ｃｈａｕｄｈａｒｙ
ら、Ｎａｔｕｒｅ３３９：３９４（１９８９），Ｂｒｉｎｋｍａｎｎら、Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔ’ｌＡｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８８：８６１６（１９９１），
Ｂａｔｒａら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌＡｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８９：５８
６７（１９９２），Ｆｒｉｅｄｍａｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５０：３０５
４（１９９３），Ｗｅｌｓら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎ．６０：１３７（１９９５）
，Ｆｏｍｉｎａｙａら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：１０５６０（１９９
６），Ｋｕａｎら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ３５：２８７２（１９９６）、
及び、Ｓｃｈｍｉｄｔら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎ．６５：５３８（１９９６）で説
明されている。ジフテリア毒素部分を含有する抗体−毒素融合蛋白は、Ｋｒｅｉ
ｔｍａｎら、Ｌｅｕｋｅｍｉａ７：５５３（１９９３），Ｎｉｃｈｏｌｌｓら
、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：５３０２（１９９３），Ｔｈｏｍｐｓｏｎ
ら、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７０：２８０３７（１９９５）、及び、Ｖａｌ
ｌｅｒａら、Ｂｌｏｏｄ８８：２３４２（１９９６）で説明されている。Ｄｅ
ｏｎａｒａｉｎら、ＴｕｍｏｒＴａｒｇｅｔｉｎｇ１：１７７（１９９５）
は、ＲＮａｓｅ部分を有する抗体−毒素融合蛋白を記述している。一方、Ｌｉｎ
ａｒｄｏｕら、ＣｅｌｌＢｉｏｐｈｙｓ．２４−２５：２４３（１９９４）は
、ＤＮａｓｅＩ成分から成る抗体−毒素融合蛋白を作製した。ゲロニンは、
Ｗａｎｇら、Ａｂｓｔｒａｃｔｓｏｆｔｈｅ２０９ｔｈＡＣＳＮａｔ
ｉｏｎａｌＭｅｅｔｉｎｇ，Ａｎａｈｅｉｍ，ＣＡ，２−６Ａｐｒｉｌ，１
９９５，Ｐａｒｔ１，ＢＩＯＴ００５の抗体−毒素融合蛋白中の毒素部分と
して用いられた。更なる例として、Ｄｏｈｌｓｔｅｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ９１：８９４５（１９９４）は、Ｓｔａｐｈｙｌ
ｏｃｏｃｃｕｓ腸毒素−Ａから成る抗体−毒素融合蛋白を報告した、

【００６９】このような複合体の調製に適切に用いられた毒素の例は、リシン、アブリン、
リボヌクレアーゼ、ＤＮａｓｅＩ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ腸毒素−Ａ
、アメリカヤマゴボウ抗ウイルス蛋白、ゲロニン、ジフテリア毒素、シュードモ
ナス外毒素、及び、シュードモナス内毒素である。例えば、Ｐａｓｔａｎら、Ｃ
ｅｌｌ４７：６４１（１９８６）及び、Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇ，ＣＡ−ＡＣ
ａｎｃｅｒＪｏｕｎａｌｆｏｒＣｌｉｎｉｃｉａｎｓ４４：４３（１９
９４）を参照のこと。別の適切な毒素は、当業者に知られている。

【００７０】７．抗体、免疫複合体、及び融合蛋白の脂質エマルジョンへの結合ポリ（エチレングリコール）で修飾されたフォスファチジルエタノールアミン
（ＰＥＧ−ＰＥ）を用いて安定化された長循環のスブミクロン脂質エマルジョン
は、本発明の抗ＣＤ２２及び抗ＣＤ１９抗体成分、免疫複合体、並びに融合蛋白
のための薬剤担体として用いることが可能である。エマルジョンは、二つの主な
部分から成っている。例えば、リン脂質のような乳化剤で安定化されたトリグリ
セリドのような油中子である。貧弱なリン脂質の乳化性質を、ポリソルベート８
０のような生物学的適合性のある共乳化剤を添加することにより、高めることが
可能である。好適実施形態では、抗ＣＤ２２抗体成分、及び抗ＣＤ１９抗体成分
、免疫複合体、並びに融合蛋白は、ポリ（エチレングリコール）を基礎とした異
種二官能性結合剤、ポリ（エチレングリコール）−ビニルスルフォン−Ｎ−ヒド
ロキシ−スクシンイミジルエステル（ＮＨＳ−ＰＥＧ−ＶＳ）を用いて資質エマ
ルジョン小球体の表面に複合体化される。

【００７１】サブミクロンの脂質エマルジョンは、説明したように調製され特徴づけられる
。Ｌｕｎｄｂｅｒｇ，Ｊ．ＰｈａｒｍＳｃｉ．，８３：７２（１９９３）：Ｌｕ
ｎｄｂｅｒｇら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．，１３４：１１９（１９９６）。脂
質エマルジョンの基本的な組成は、トリオレイン：ＤＰＰＣ：ポリソルベート８
０，２：１：０．４（ｗ／ｗ）である。指示があれば、ＰＥＧ−ＤＰＰＥが脂質
混合物にＤＰＰＥ換算で２〜８ｍｏｌ％の量で添加される。

【００７２】結合手順は、ＮＨＳ−ＰＥＧ−ＶＳのＮＨＳエステル基をジステアロイルフォ
スファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）のアミノ基と反応させることで始ま
る。２５μｍｏｌのＮＨＳ−ＰＥＧ−ＶＳを、１ｍｌのクロロホルムの中で４０
℃で６時間、２３μｍｏｌのＤＰＰＥと５０μｍｏｌのトリエチルアミンと反応
させて、ポリエチレングリコール鎖（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＶＳ）の遠位末端にビ
ニルスルフォン基を有するフォスファチジルエタノールアミンのポリエチレング
リコール誘導体が生成する。抗体複合体化のために、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＶＳは
、２ｍｏｌ％のＤＰＰＣで脂質エマルジョン中に含まれる。この成分を、−２０
℃での貯蔵溶液からバイアルに分配し、溶剤を減圧下で蒸発乾燥する。リン酸緩
衝生理食塩水（ＰＢＳ）が添加され、この混合物は、５０℃に加熱され、３０秒
間ボルテックス攪拌され、１分間、ＭＳＥプローブ超音波破砕機でソニケーショ
ンされる。エマルジョンは、４℃で貯蔵され、２４時間以内に複合体化のために
用いられるのが好ましい。

【００７３】抗ＣＤ２２抗体又は抗ＣＤ１９抗体のエマルジョン小球体への結合は、小球体
の表面上の遠位ＰＥＧ末端にあるビニルスルフォン基と抗体上の遊離チオール基
との間での反応を介して行われる。ビニルスルフォンは、チオール基への選択的
なカップリングに魅力的な誘導体である。およそ中性のｐＨで、ＶＳは、チオー
ル基を含有する蛋白に１５〜２０分の半減期で結合するであろう。ＶＳの反応性
は、マレイミドより僅かに劣るが、ＶＳ基は、水中でより安定であり、チオール
基との反応から安定な結合が生成される。

【００７４】複合体化の前に、抗体は、０．２Ｍトリス緩衝液（ｐＨ８．７）の中で４℃で
１０分間、５０ｍＭ２−メルカプトエタノールにより還元される。還元された抗
体は、５０ｍＭ酢酸ナトリウムで緩衝化した０．９％生理食塩水（ｐＨ５．３）
で平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘＧ−２５スピンカラムで過剰の２−メルカプト
エタノールから分離される。この製品は、２８０ｎｍで、その吸光度を測定（及
び１ｍｇ／ｍｌの抗体溶液が１．４と仮定して）することにより、又は¹²⁵Ｉ−
ラベル化した抗体の定量により蛋白濃度がアッセイされる。チオール基は、Ａｌ
ｄｒｉｔｈｉｏｌ（登録商標）を用いて３４３ｍｎでの吸光度における変化及び
標準としてシステインを用いて、決定される。

【００７５】結合反応は、アルゴン下、周囲温度で一晩ＨＥＰＥＳ緩衝化生理食塩水（ｐＨ
７．４）の中で行われる。過剰のビニルスルフォン基を、３０分間２ｍＭの２−
メルカプトエタノールで消滅させ、過剰の２−メルカプトエタノール及び抗体は
、ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ−４８カラムでのゲルクロマトグラフィーにより取
り除かれる。免疫複合体は、カラムのボイドボリューム近くで集められ、０．４
５μｍ滅菌フィルタを通過することにより滅菌され、４℃で貯蔵される。

【００７６】結合の効率は、¹²⁵Ｉ−ラベル化した抗体を用いて算出される。エマルジョン
の回収率は、平行する実験での［¹⁴Ｃ］ＤＰＰＣの測定から推定される。表面を
接合させたＤＳＰＥ−ＰＥＧ−ＶＳのＶＳ基への還元ＬＬ２の複合体化は、典型
的効率がほぼ８５％でかなり再現可能である。

【００７７】８．単純及び多様式養生法での抗ＣＤ２２抗体及び抗ＣＤ２２抗体の治療的使
用本発明は、裸の抗ＣＤ２２抗体及び抗ＣＤ１９抗体、又は抗ＣＤ２２抗体及び
抗ＣＤ１９抗体から成る免疫複合体、或いは融合蛋白の使用を、Ｂ細胞悪性腫瘍
の治療のために一次性の治療組成物として用いることを企図している。このよう
な組成物はポリクロナール抗ＣＤ２２抗体又は抗ＣＤ１９抗体、或いはモノクロ
ナール抗ＣＤ２２抗体又は抗ＣＤ１９抗体を含むことが可能である。

【００７８】更に、本発明の治療組成は、いくつかの異なったブロックされていないＣＤ２
２エピトープに向けられたモノクロナール抗ＣＤ２２抗体の混合物又は、いくつ
かの異なったブロックされていないＣＤ１９エピトープに向けられたモノクロナ
ール抗ＣＤ１９抗体の混合物を含有することが可能である。モノクロナール抗体
の交叉阻害研究は、エピトープＡ−Ｅと命名された五つのエピトープをＣＤ２２
上に同定した。例えば、Ｓｃｈｗａｒｔｚ−Ａｌｂｉｅｚら、「ＴｈｅＣａｒ
ｂｏｈｙｄｒａｔｅＭｏｉｅｔｙｏｆｔｈｅＣＤ２２Ａｎｔｉｇｅｎ
ＣａｎＢｅＭｏｄｕｌａｔｅｄｂｙＩｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆｔ
ｈｅＧｌｙｃｏｓｙｌａｔｉｏｎＰａｔｈｗａｙ，」ｉｎＬＥＵＫＯＣＹ
ＴＥＴＹＰＩＮＧＩＶ．ＷＨＩＴＥＣＥＬＬＤＩＦＦＥＲＥＮＴＩＡＴ
ＩＯＮＡＮＴＩＧＥＮＳ，Ｋｎａｐｐら（ｅｄｓ．），ｐ．６５（Ｏｘｆｏｒ
ｄＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ１９８９）を参照のこと。例として、
ＬＬ２抗体はエピトープＢと結合する。Ｓｔｅｉｎら、ＣａｎｃｅｒＩｍｍｕ
ｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３７：２９３（１９９３）。つまり、本発明は
、少なくとも二つのＣＤ２２エピトープに結合するモノクロナール抗ＣＤ２２抗
体の混合物から成る治療的組成を企図している。例えば、このような混合物は、
エピトープＡ、エピトープＢ、エピトープＣ、エピトープＤ及びエピトープＥか
ら成るグループから選択された少なくとも二つのＣＤ２２エピトープと結合する
モノクロナール抗体を含むことが可能である。同様に、本発明は、少なくとも二
つのＣＤ１９エピトープを結合するモノクロナール抗ＣＤ１９抗体の混合物から
成る治療的組成を企図している。

【００７９】抗ＣＤ２２抗体の結合特異性を決定する方法は、当業者には公知である。一般
的な方法は、例えば、ＭＥＴＨＯＤＳＩＮＭＯＬＥＣＵＬＡＲＢＩＯＬＯ
ＧＹ，ＶＯＬＵＭＥ１０：ＩＭＭＵＮＯＣＨＥＭＩＣＡＬＰＲＯＴＯＣＯＬ
Ｓ，Ｍａｓｏｎ（ｅｄ．）ｐａｇｅｓ１０５−１１６（ＴｈｅＨｕｍａｎａ
Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．１９９２）に記載のＭｏｌｅによる「Ｅｐｉｔｏｐｅ
Ｍａｐｐｉｎｇ」により供与されている。更に具体的には、ＣＤ２２エピトープ
特異性を決定する拮抗的ブロッキングアッセイは、Ｓｔｅｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ
Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３７：２９３（１９９３），及びＴ
ｅｄｄｅｒら、米国特許Ｎｏ．５，４８４，８９２（１９９６）により説明され
ている。

【００８０】Ｔｅｄｄｅｒ特許は、一つ又はそれ以上の免疫グロブリン様領域を欠失するＣ
Ｄ２２変異体の作製も又説明している。これらの変異蛋白は、免疫グロブリン様
領域１、２、３及び４がエピトープＡ、Ｄ、Ｂ及びＣそれぞれに対応することを
決定するのに用いられた。このようにして、ＣＤ２２のエピトープ特異性は、試
験抗体を特定の免疫グロブリン様領域を欠失する一連のＣＤ２２蛋白の結合によ
り同定することもまた可能である。

【００８１】裸の抗ＣＤ２２抗体又は抗ＣＤ１９抗体は、Ｂ細胞悪性腫瘍の第一の治療組成
であるが、このような抗体治療の有効性は、裸の抗体をここに記載の免疫複合体
、融合蛋白および別の補助的治療を補うことにより、高められることが可能であ
る。このような多様式養生法では、補助的な治療組成物は、裸の抗ＣＤ２２抗体
又は抗ＣＤ１９抗体を投与する前又は同時又は後に投与されることが可能である
。

【００８２】ここに記載の治療的組成物は、無痛性のＢ細胞リンパ腫、急速進行性のＢ細胞
リンパ腫、慢性リンパ性白血病及び急性リンパ性白血病の治療に特に有益である
。例えば、抗ＣＤ２２抗体成分及び免疫複合体は、非ホジキンリンパ腫の無痛型
と急速進行型との両方を治療するのに用いることが可能である。

【００８３】放射性ラベル化した抗体、免疫複合体又は融合蛋白は、α−放射の放射性同位
元素、β−放射の放射性同位元素、γ−放射の放射性同位元素、Ａｕｇｅｒ電子
エミッター、α−粒子を放射する中性子捕捉剤、又は電子の捕捉により衰退する
放射性同位元素から成ってもよい。適切な放射性同位元素は、¹⁹⁸Ａｕ、³²Ｐ、¹ ²⁵ Ｉ、¹³¹Ｉ、⁹⁰Ｙ、¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ、⁶⁷Ｃｕ、²¹¹Ａｒ、²¹³Ｂｉ、²²⁴Ａｃな
どを含む。

【００８４】上述したように、放射性同位元素は、キレート化剤を介して抗体成分に直接又
は間接に付けることが可能である。例えば、⁶⁷Ｃｕは半減期が６１．５時間であ
るのと、ベータ粒子及びガンマ線が豊富なことから、放射線免疫治療用のより有
望な放射性同位元素の一つと考えられている⁶⁷Ｃｕは、キレート化剤、パラ−ブ
ロモアセトアミド−ベンジル−テトラエチルアミン四酢酸（ＴＥＡ）を使って複
合体化されることが可能である。ＭｅｄｉｃａｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ
ｏｆＲａｄｉｏｉｓｏｔｏｐｅｓ，」ｉｎ「ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’ＳＰＨＡ
ＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳＣＩＥＮＣＥＳ，１８ｔｈＥｄｉｔｉｏｎ，Ｇｅ
ｎｎａｒｏら（ｅｄｓ．），ｐａｇｅｓ６２４−６５２（ＭａｃｋＰｕｂｌ
ｉｓｈｉｎｇＣｏ．１９９０）を調べて下さい。又、⁹⁰Ｙは、活発なベータ粒
子を発生するが、この⁹⁰Ｙは、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）を用い
て抗体成分に結合することが可能である。更に、¹³¹Ｉで抗体成分を直接放射性
ラベル化のための方法は、Ｓｔｅｉｎら、ＡｎｔｉｂｏｄｙＩｍｍｕｎｏｃｏ
ｎｊ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．４：７０３（１９９１）により説明されている。

【００８５】また、カルボランのようなホウ素付加物は、上述したように抗体成分に付ける
ことが可能である。

【００８６】好ましい免疫複合体及び融合蛋白は、抗体成分並びに、抗ＣＤ２２抗体成分又
は抗ＣＤ１９抗体成分と免疫調節剤の複合体を含有する。ここに用いられている
ように、「免疫調節剤」の用語は、サイトカイン、幹細胞成長因子、腫瘍壊死因
子（ＴＮＦ）のようなリンフォトキシン、及びインターロイキン（例えば、イン
ターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、
及びＩＬ−１２）のような造血因子、コロニー刺激因子（例えば、顆粒球コロニ
ー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）及び、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ
−ＣＳＦ）、インターフェロン（例えば、インターフェロン−α，−β，及び、
−γ）、「Ｓ１因子」と命名された幹細胞成長因子、エリスロポイエチン及びト
ロンボポイエチンを含む。適切な免疫調節剤部分の例には、ＩＬ−２、ＩＬ−６
、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、インターフェロン−γ、ＴＮＦ−α、などを含む。
又、被験者は、裸の抗ＣＤ２２抗体又は裸の抗ＣＤ１９抗体、並びに別途投与さ
れるサイトカインの投与を受け、このサイトカインは、裸の抗ＣＤ２２抗体又は
裸の抗ＣＤ１９抗体の投与の前、同時又は後に投与されることが可能である。サ
イトカインは、ヒトＩｇＧ１抗体のＦｃ領域、ｈＬＬ２に存在する領域、に結合
することにより、腫瘍細胞を殺す効果のあるエフェクター細胞、ＡＤＣＣ／ＮＫ
、の活性化を高める。

【００８７】抗体−免疫調節剤免疫複合体及び抗体−免疫調節剤融合蛋白は、免疫複合体を
標的細胞に送達する手段を提供し、腫瘍細胞にたいして特に有用である。免疫調
節剤のサイトカイン効果は、当業者には公知である。例えば、Ｋｌｅｇｅｒｍａ
ｎら、「Ｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅｓ及びＭｏｎｏｋｉｎｅｓ，」ｉｎＢＩＯＴＥ
ＣＨＮＯＬＯＧＹ及びＰＨＡＲＭＡＣＹ，Ｐｅｓｓｕｔｏら（ｅｄｓ．），ｐａ
ｇｅｓ５３−７０（Ｃｈａｐｍａｎ＆Ｈａｌｌ１９９３）を参照のこと
。例として、インターフェロンは、種々の細胞表面上にあるクラスＩ組織適合性
抗原の発現の増大を誘起することにより、細胞の増殖を阻害することが可能であ
り、従って、細胞障害性Ｔリンパ球による細胞の破壊率を高めることが可能であ
る。更に又、ＴＮＦ−αのような腫瘍壊死因子は、ＤＮＡ断片化を誘発すること
により細胞障害性効果を生じると考えられている。

【００８８】免疫複合体及び融合蛋白の調製のための有益な癌化学療法剤は、ナイトロジェ
ンマスタード、アルキルスルフォネート、ニトロソウレア、トリアゼン、葉酸類
縁体、ピリミジン類縁体、プリン類縁体、抗生物質、エピポドフィロトキシン、
白金配位錯体、ホルモンなどを含む。適切な化学療法剤は、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ
’ＳＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳＣＩＥＮＣＥＳ，１９ｔｈＥｄ．（
ＭａｃｋＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．１９９５）及び、ＧＯＯＤＭＡＮ及び
ＧＩＬＭＡＮ’ＳＴＨＥＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＩＣＡＬＢＡＳＩＳＯ
ＦＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，７ｔｈＥｄ．（ＭａｃＭｉｌｌａｎＰｕｂ
ｌｉｓｈｉｎｇＣｏ．１９８５）に説明されている。実験的薬剤のような他の
適切な化学療法剤は当業者に既知である。

【００８９】更に、治療的に有用な免疫複合体は、光活性剤又は色素を抗体複合物に結合さ
せることにより得ることが可能である。可視光に感受性のポルフィリンのような
蛍光体及び他の色原体又は色素は、病巣に適切な光を当てることにより、病巣を
検出したり治療したりするのに用いられてきている。治療では、これは光照射、
光線治療、又は光力学治療（Ｊｏｒｉら（ｅｄｓ．），ＰＨＯＴＯＤＹＮＡＭＩ
ＣＴＨＥＲＡＰＹＯＦＴＵＭＯＲＳ及びＯＴＨＥＲＤＩＳＥＡＳＥＳ（
ＬｉｂｒｅｒｉａＰｒｏｇｅｔｔｏ１９８５）：ｖａｎｄｅｎＢｅｒｇ
ｈ，Ｃｈｅｍ．Ｂｒｉｔａｉｎ２２：４３０（１９８６）と称されている。さ
らに、モノクローナル抗体は、光線治療を達成するために、光活性化色素と結合
させられた。Ｍｅｗら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３０：１４７３（１９８３）：
同著者による，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４５：４３８０（１９８５）：Ｏｓｅｒ
ｏｆｆら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ８３：８７４４
（１９８６）：同著者によるＰｈｔｏｃｈｅｍ．Ｐｈｏｔｏｂｉｏｌ．４６：
８３（１９８７）：Ｈａｓａｎら、Ｐｒｏｇ．Ｃｌｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓ．２
８８：４７１（１９８９）：Ｔａｔｓｕｔａら、ＬａｓｅｒｓＳｕｒｇ．Ｍｅ
ｄ．９：４２２（１９８９）：Ｐｅｌｅｇｒｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ６７：２５
２９（１９９１）。しかし、これらの初期の研究は、内視鏡治療応用、特に抗体
の断片又は亜断片の使用、を含まなかった。従って、本発明は、光活性剤又は色
素から成る免疫複合体の治療的使用を企図している。本発明の多様な治療法は、
更に裸の抗体形体で又は免疫複合体として、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ５２及び／
又は抗ＣＤ７４抗体の同時投与のみならず、抗ＣＤ１９抗体及び抗ＣＤ２２抗体
それぞれの投与で補充される裸の抗ＣＤ２２抗体及び裸の抗ＣＤ１９抗体での免
疫治療を含む。抗ＣＤ１９抗体及び抗ＣＤ２０抗体は、当業者に公知である。例
えば、Ｇｈｅｔｉｅら、ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．４８：２６１０（１９８８）：
Ｈｅｋｍａｎら、ＣａｎｃｅｒＩｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３２
：３６４（１９９１）：Ｋａｍｉｎｓｋｉら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２
９：４５９（１９９３）：Ｐｒｅｓｓら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２９：
１２１９（１９９３）：Ｍａｌｏｎｅｙら、Ｂｌｏｏｄ８４：２４５７（１９
９４）：Ｐｒｅｓｓら、Ｌａｎｃｅｔ３４６：３３６（１９９５）：Ｌｏｎｇ
ｏ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．８：３５３（１９９６）を参照のこと。

【００９０】別の多様な治療では、被験者は、裸の抗ＣＤ２２抗体又は裸のＣＤ１９抗体、
及び／又は免疫複合体或いは融合蛋白を、標準的な癌化学療法とともに、投与さ
れる。例えば、「ＣＶＢ」（１．５ｇ／ｍ²シクロフォスファミド、２００〜４
００ｍｇ／ｍ²エトポシド、及び１５０〜２００ｍｇ／ｍ²カルムスチン）は、非
ホジキンリンパ腫を治療するために用いられる養生法である。Ｐａｔｔｉら、Ｅ
ｕｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．５１：１８（１９９３）。他の適切な組み合わせ
化学療法的養生法は、当業者には公知である。例えば、Ｆｒｅｅｄｍａｎら、「
Ｎｏｎ−Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓＬｙｍｐｈｏｍａｓ」，ｉｎＣＡＮＣＥＲＭ
ＥＤＩＣＩＮＥ，ＶＯＬＵＭＥ２，３ｒｄＥｄｉｔｉｏｎ，Ｈｏｌｌａｎｄ
ら（ｅｄｓ．），ｐａｇｅｓ２０２８−２０６８（Ｌｅａ及びＦｅｂｉｇｅｒ
１９９３）を参照のこと。例として、中間グレードの非ホジキンリンパ腫を治
療するための第一世代の化学療法的養生法は、Ｃ−ＭＯＰＰ（シクロフォスファ
ミド、ビンクリスチン、プロカルバジン、及びプレドニゾン）及び、ＣＨＯＰ（
シクロフォスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、及びプレドニゾン）
を含む。有益な第二世代の化学療法的養生法は、ｍ−ＢＡＣＯＤ（メトトレキセ
ート、ブレオマイシン、ドキソルビシン、シクロフォスファミド、ビンクリスチ
ン、デキサメタゾン、及びロイコボリン）である一方、適切な第三世代養生法は
、ＭＡＣＯＰ−Ｂ（メトトレキセート、ドキソルビシン、シクロフォスファミド
、ビンクリスチン、プレドニゾン、ブレオマイシン及びロイコボリン）である。
更なる有益な薬剤は、フェニル酪酸及びブロスタチン−１である。好適な多様式
治療では、化学療法薬剤及びサイトカインの両方が、本発明に従って、抗体、免
疫複合体、又は融合蛋白と共に投与される。サイトカイン、化学療法的薬剤、及
び抗体、免疫複合体又は融合蛋白を、如何なる順番でも又は一緒に投与すること
が可能である。

【００９１】一般に、投与される抗ＣＤ２２及び抗ＣＤ１９抗体、抗ＣＤ２２及び抗ＣＤ１
９抗体成分、免疫複合体及び融合蛋白の投与量は、患者の年齢、体重、身長、性
別、一般的な医学的状態、及び以前の医療歴のような要因により変化する。典型
的には、状況次第で、投与量は上下するが、レシピエントに、およそ１ｐｇ／ｋ
ｇから１０ｍｇ／ｋｇ（薬剤量／患者の体重）までの範囲の抗体成分、免疫複合
体、又は融合蛋白の投与量を供与することが好ましい。

【００９２】患者に対する抗体成分、免疫複合体、又は融合蛋白の投与は、静脈注、動脈注
、腹腔内注、筋肉内注、皮下注、胸膜腔内注、髄腔内注、局部のカテーテルを介
する灌流又は直接の病巣内注射である。治療蛋白を注射で投与する時、投与は、
持続注入或いは、単回又は多回ボーラスによってもよい。

【００９３】当業者は、素早く抗体を分布させる際に循環が徹底することから、静脈注射が
有益な投与様式を提供することに気づいている。しかし、静脈投与は、血管系の
内皮細胞及び内皮細胞下のマトリックスからなる血管のバリアにより制限対象と
なる。更に、血管のバリアは、固形腫瘍による治療用抗体の取り込みにたいして
、より顕著な課題である。リンパ腫は効果的な抗体送達に寄与する比較的高血流
速度を有する。皮下注射又は筋肉内注射のような投与、或いはリンパ管のカテー
テル化による投与のようなリンパ内投与経路もまた、リンパ腫を治療する有用な
手段を提供する。

【００９４】好ましくは、裸の抗ＣＤ２２抗体又は裸の抗ＣＤ１９抗体は、一投与につき２
０〜１５００ミリグラムの低蛋白投与量で、単回又は繰り返し非経口的に投与さ
れる。代替的に、裸の抗ＣＤ２２抗体又は裸の抗ＣＤ１９抗体は、一投与につき
２０〜１０００ミリグラムの投与量で、又は、一投与につき２０〜５００ミリグ
ラムの投与量で、又は一投与につき２０〜１００ミリグラムの投与量で投与され
る。

【００９５】上述したように、本発明は又、裸の抗ＣＤ２２抗体成分又は裸の抗ＣＤ１９抗
体成分が免疫複合体投与又は融合蛋白投与で補強される治療方法もまた企図して
いる。一の変形では、裸の抗ＣＤ２２抗体又は裸の抗ＣＤ１９抗体は、低用量の
放射性ラベル化した抗ＣＤ２２又は抗ＣＤ１９抗体又は断片と共に投与される。
二つ目の代替として、裸の抗ＣＤ２２抗体又は裸の抗ＣＤ１９抗体は、低用量の
放射性ラベル化した抗ＣＤ２２−サイトカイン免疫複合体又は抗ＣＤ１９−サイ
トカイン免疫複合体と共に投与される。三つ目の代替として、裸の抗ＣＤ２２抗
体又は裸の抗ＣＤ１９抗体は、放射性ラベル化されていない抗ＣＤ２２−サイト
カイン免疫複合体又は抗ＣＤ１９−サイトカイン免疫複合体と共に投与される。 ¹³¹ Ｉ−ラベル化した免疫複合体の「低用量」に関して、好適な投与量は、１５
から４０ｍＣｉの範囲である一方、最も好適な範囲は、２０〜３０ｍＣｉである
。対照的に、⁹⁰Ｙ−ラベル化した免疫複合体の好ましい投与量は、１０から３０
ｍＣｉの範囲である一方、最も好適な範囲は、１０から２０ｍＣｉである。好ま
しい抗体成分は、マウスのＬＬ２モノクローナル抗体、キメラのＬＬ２抗体、及
びヒト化したＬＬ２抗体を含有するＬＬ２抗体に由来する抗体及び断片を含む。

【００９６】熱中性子放射化治療のためのホウ素付加物を負荷した担体を有する免疫複合体
は、通常同様の方法で、効果をもたらすであろう。しかし、中性子照射が行われ
る前に標的化によって集まっていない免疫複合体が消失するまで待つのが有利で
ある。クリアランスは、その免疫複合体に結合する抗体を用いて加速されること
が可能である。この一般的な原理の説明を得るためには、米国特許Ｎｏ．４，６
２４，８４６を参照のこと。

【００９７】単独の又はリポソームへ複合体化された抗ＣＤ２２又は抗ＣＤ１９抗体成分、
免疫複合体、及び融合蛋白は、既知の方法に従って、製剤化して薬学的有用な組
成物を調製することが可能である。それにより、治療用の蛋白は、混合物内で薬
学的に許容される担体との混合物にされる。もし、被験患者が組成物の投与に耐
えうる場合、組成物は「薬学的に許容される担体」である、と言われている。無
菌のリン酸緩衝化した生理食塩水は、薬学的に許容される担体の一例である。他
の適切な担体は、当業者に公知である。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’ＳＰＨ
ＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳＣＩＥＮＣＥＳ，１９ｔｈＥｄ．（１９９５）
を参照のこと。

【００９８】治療の目的のために、抗体組成物（又は免疫複合体／融合蛋白）及び薬学的に
許容される担体は治療的に効果をもたらす量で、患者に投与される。場合によっ
ては、抗体組成物の免疫複合体／融合蛋白及び薬学的に許容される担体との組み
合わせは、もし、投与される量が生理学的に意義がある場合、「治療的に効果を
もたらす量」で、投与されると言われている。剤は、もし、被験患者の生理学に
おいて、検出可能な変化をその存在がもたらす場合、生理学的に意義がある。こ
れに関して、剤は、もしその存在が標的腫瘍細胞の成長阻害をもたらす場合、生
理学的に意義がある。

【００９９】更なる薬学的な方法が、治療的な応用で抗体成分、免疫複合体、又は融合蛋白
の作用継続期間を制御するために用いられる。制御放出調製物は、ポリマーを用
いて抗体成分、免疫複合体、又は融合蛋白を複合体化したり吸着させることを介
して調製することが可能である。例えば、生体適合性のポリマーは、エチレン−
−ビニル酢酸共重合体のマトリックス、ステアリン酸二量体及びセバチン酸のポ
リ無水物共重合体のマトリックスを含む。Ｓｈｅｒｗｏｏｄら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｙ１０：１４４６（１９９２）。このようなマトリックスからの
抗体成分（又は免疫複合体）の放出速度は、蛋白の分子量、マトリックス内の抗
体成分／免疫複合体／融合蛋白の量、及び分散された粒子の大きさによる。Ｓａ
ｌｔｓｚｍａｎら、Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｊ．５５：１６３（１９８９）：及び上述
のＳｈｅｒｗｏｏｄらを参照せよ。その他の固形投与形態は、ＲＥＭＩＮＧＴ
ＯＮ’ＳＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳＣＩＥＮＣＥ，１９ｔｈｅｄ．
（１９９５）に説明されている。

【０１００】本発明は、又、免疫調節剤が、放射線で誘発された、又は薬剤で誘発された正
常細胞の、特に造血細胞の、毒性を防止したり、軽減したり、又は後退させるた
めに投与される治療の方法をも企図している。免疫調節剤の補助治療は、被験哺
乳動物の耐性増加によって、細胞毒性剤の多めの量の投与を可能にする。さらに
、免疫調節剤の補助治療は、投与量を制限する骨髄毒性を防止したり、緩和した
り、又は後退させたりすることが可能である。補助的治療に適した免疫調節剤の
例は、Ｇ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、トロンボポイエチン、ＩＬ−１、ＩＬ−３、
ＩＬ−１２などを含む。補助的な免疫調節剤治療の方法は、Ｇｏｌｄｅｎｇｅｒ
ｇ，米国特許Ｎｏ．５，１２０，５２５により開示されている。

【０１０１】例えば、組み替えＬＩ−２は、６ｘ１０⁵ＩＵ／ｋｇでボーラスとして、又は
、１８ｘ１０⁶ＩＵ／ｍ²／ｄの投与量で持続注入として静脈内に投与してもよい
。Ｗｅｉｓｓら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１０：２７５（１９９２）。又、
組み替えＩＬ−２は、１２ｘ１０⁶ＩＵの投与量で皮下に投与してもよい。Ｖｏ
ｇｅｌｚａｎｇら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１１：１８０９（１９９３）。
更に、ＩＮＦ−γを１．５ｘ１０⁶Ｕの投与量で皮下に投与してもよい。Ｌｉｅ
ｎａｒｄら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．１０：５２（１９９２）。更に又、Ｎ
ａｄｅａｕら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２７４：７８（１
９９５）は、アカゲザルにおいて単回の組み替えＩＬ−１２（４２．５ μｇ／
ｋｉｌｏｇｒａｍ）の静脈内投与がＩＮＦ−γレベルを上昇させたことを示して
いる。

【０１０２】適切なＩＬ−２製剤はＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（ＣｈｉｒｏｎＣｏｒｐ．／Ｃｅ
ｔｕｓＯｎｃｏｌｏｇｙＣｏｒｐ．：Ｅｍｅｒｙｖｉｌｌｅ，ＣＡ）及び、
ＴＥＣＥＬＥＵＫＩＮ（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−ＬａＲｏｃｈｅ，Ｉｎｃ：Ｎｕｔ
ｌｅｙ，ＮＪ）を含む。ＡＣＴＩＭＭＵＮＥ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．：
ＳｏｕｔｈＳａｎＦｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ）は、適したＩＮＦ−γ調製剤
である。

【０１０３】このように一般的に説明された本発明は、以下の実施例を参照にして、更に容
易に理解されるであろうが、以下の実施例は例を用いて提示されており、本発明
を制限することを意図するものではない。

【０１０４】実施例１リンパ節及び骨髄に無痛性リンパ腫を有する患者の治療患者はビマン性の大細胞急速進行性リンパ腫を呈している。患者をＣＯＰに置
いて、最小限の応答があった。７ヶ月後に、患者は、ＣＤＡ治療を受け、良好な
応答があった。しかし、１５ヶ月後に患者は、進行性のリンパ節症の特徴を呈し
、この７ヶ月後に骨髄の広範囲にわたるリンパ腫の浸潤、広範囲にわたる首、胸
、腹部、骨盤のリンパ節腫張、並びに肝脾肥大があることが判明した（０日目）
。

【０１０５】患者はその後、ヒト化したＬＬ２モノクローナル抗体を用いた治療を開始した
。６３４ｍｇのヒト化ＬＬ２抗体を患者に静脈注射した。この治療は、この最初
の治療に続いて、６、１３、および２０日目に繰り返された。最終投与の直後に
、ｈＬＬ２の血清値は、３８９．７μｇ／ｍｌであり、最終投与の１ヶ月後には
ｈＬＬ２の血清値は１８６．５μｇ／ｍｌであった。

【０１０６】ｈＬＬ２の最終投与の５ヶ月後には、患者が受けたＣＴスキャンは、リンパ腫
の明証が無く、巨脾腫が消散し、肝臓異常が無いことを示し、続いて行なったパ
ラフィン処理組織のＣＤ２０及びＣＤ３のイムノパーオキシダーゼ染色を用いた
組織学的検索は、骨髄にリンパ腫の明証を示さなかった。ｈＬＬ２での治療前の
血液中の正常なＢ細胞は、治療後２ヶ月時点では血液から完全に枯渇していた。
治療後５ヶ月で最小限の正常Ｂ細胞が再出現した。結果を以下の表に示す。

【０１０７】

【表１】

【０１０８】

【表２】

【０１０９】実施例２肺及び肝臓に急速進行性ビマン性大細胞リンパ腫を有する患者への治療患者は肺及び肝臓に広範囲にわたる大細胞悪性リンパ腫を呈している。患者は
ＣＨＯＰに対して良好だが短かい応答がある。７ヶ月後に患者は骨髄移植ととも
に高投与量の化学療法を受けた。１０ヶ月後に患者は肺、肝臓に、及びリンパ節
腫張で再発し、患者をＲｉｔｕｘａｎの標準投与量を４回用いて治療した。患者
にはＲｉｔｕｘａｎに対して僅かな応答があったが、その応答は３ヶ月足らずし
か持続しなかった。患者はその後、Ｒｉｔｕｘａｎを用いた２回目の治療はうま
く行かず、患者は肺、肝臓に、及びリンパ節腫張で進行性のリンパ腫を有する特
徴が見られた（０日目）。

【０１１０】患者はその後、ヒト化したＬＬ２モノクローナル抗体を用いた治療を開始した
。患者に５５６ｍｇのヒト化したＬＬ２モノクローナル抗体を静脈内に持続注入
した。治療はこの初回の治療に続いて５、１２、及び１９日目に繰り返された。
最終投与の直後のｈＬＬ２の血清値は２７９．８μｇ／ｍｌであり、最終投与の
１ヶ月後のｈＬＬ２の血漿値は９９．１μｇ／ｍｌであった。

【０１１１】治療前の患者のＣＴスキャンは、三つの肺の病巣がそれぞれ３．９６ｃｍ²、
４．８３ｃｍ²、及び４．６ｃｍ²であることを示した。ｈＬＬ２の最終投与後１
ヶ月後の患者のＣＴスキャンは、肺の病巣がそれぞれ０ｃｍ²、１．２１ｃｍ²、
及び０．８１ｃｍ²に減少したことを示した。ｈＬＬ２の最終投与後４ヶ月半で
は、ＣＴスキャンは三つの病巣がそれぞれ０ｃｍ²、１ｃｍ²、及び０ｃｍ²に減
少したことを示した。

【０１１２】治療前の血中における正常なＢ細胞は、著しく減少していたが、それは恐らく
Ｒｉｔｕｘａｎ治療のせいと思われる。治療後１ヶ月後に、正常なＢ細胞が最小
限再出現した。結果は以下の表に示されている。

【０１１３】

【表３】

【０１１４】

【表４】

【０１１５】

【表５】

【０１１６】実施例３再発した中級の非ホジキンリンパ腫を有する患者の治療中級の非ホジキンリンパ腫のある患者は前に行われたＣＨＯＰｘ６からなる積
極的な化学療法でうまくいかなかったが、この治療では、ＣＨＯＰｘ６で５ヶ月
間寛解となり、別のＣＨＯＰｘ６コースで進展し、Ｄ−ＭＯＰＰｘ２で６ヶ月間
の安定した病状となり、抹消血幹細胞移植を併用したＣＶＢで４ヶ月間の部分的
な軽快が得られていた。患者は、胸部及び頸部リンパ結節にＣＴ及び触診それぞ
れで測定可能な再発したリンパ腫を呈する。

【０１１７】患者は、５０ｍｇのヒト化したＬＬ２モノクローナル抗体をの２日、５日、９
日、１２日目と連続２週間副作用が見られることなく注射を受ける。３週間後の
頸部肥大結節の触診では、およそ６０％の測定可能な減少があり、一方、繰り返
し行った胸部のＣＴスキャンでは、腫瘍の７０％の著しい減少があった。治療後
１０週目に行われた追跡測定では、胸部及び頸部で疾患の明証はなかった。何処
にも新発の疾患は検出されないので、患者は完全寛解の状態にあるとみなされる
。１０〜１２週間毎の追跡調査では少なくとも治療後１６ヶ月間の完全寛解を確
認している。

【０１１８】実施例４瀰漫性大細胞急速進行性リンパ腫を有する患者のＣＨＯＰ及びｈＬＬ２を用い
た治療患者はビマン性大細胞急速進行性リンパ腫を呈しており、腹部に大きい疾患、
その他の数多くの部位にリンパ節外性疾患、及び血清乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）
の上昇を有する思わしくない予後をもつと診断される。患者はＣＨＯＰに置かれ
、３サイクルの治療後に、部分的応答が腹部外での数多くの部位の節外性疾患の
消散で観察される。しかし、腹部の大きい疾患は、増大し続け、血清ＬＤＨは上
昇したままである。

【０１１９】ＣＨＯＰの３サイクル目を開始次第、患者に５０ｍｇのヒト化したＬＬ２モノ
クローナル抗体を１、５、９、及び１２日目に持続注入する。このｈＬＬ２の治
療的養生法は、ＣＨＯＰをあと４サイクル付随して繰り返される。治療中に血清
ＬＤＨレベルは、正常領域に落ちる。ＣＨＯＰ及びｈＬＬ２の３サイクル目の１
ヶ月後に、腹部にある大きい腫瘍のＣＴスキャンは、この塊の９０％を超える退
縮を示す。１０〜１２週間毎の追跡調査は、治療後９ヶ月間以上にわたって完全
寛解を確認する。

【０１２０】実施例５再発した急速進行性大細胞リンパ腫を有する患者のｈＬＬ２およびｈＬＬ２−
ＩＬ２を用いた治療瀰漫性大細胞急速進行性リンパ腫がある患者は、初めのライン（ＣＨＯＰ）化
学療法及び二番目のライン（ｍ−ＢＡＣＯＤ）化学療法に応答するが、三番目の
ライン化学療法（ＭＡＣＯＰ−Ｂ）はうまく行かない。三番目のライン化学療法
の完了後、患者は骨髄に瀰漫性疾患、大きな塊の脾腫、触診可能な肥大したリン
パ節を数多くの部位に持つ。患者はその後５０ｍｇのヒト化したＬＬ２を２、５
、９、および１２日目に持続注入される。この養生法は、２週間毎に４週間繰り
返される。骨髄疾患は、ｈＬＬ２治療に漸次応答し、結節の大きさも小さくなる
。しかし、多くの結節はまだ触診が可能で、脾臓の大きさにはほとんど減少が観
察されない。２週間毎のｈＬＬ２治療が続く間に患者は、１０ｍｇのｈＬＬ２−
ＩＬ２融合蛋白での治療も受ける。初回の治療の後に脾臓の大きさに顕著な減少
があり、また、第二回目のｈＬＬ２／ｈＬＬ２−ＩＬ２治療の後に結節は触診出
来なくなり、脾臓は更に大きさが減少していた。疾患の進行は６ヶ月間以上観察
されない。

【０１２１】前述したことは、特定の好適実施形態を参照にしているが、本発明はそのよう
に制限されないことを理解されよう。開示された実施形態に種々の変形がなされ
たり、また、この変形が本発明の範囲内においてなされることは一般の当業者に
あり得ようが、それは以下の請求項に定義されるものである。

【０１２２】この明細書に言及した全ての刊行物、特許申請は、本発明が関係する当業者の
熟練レベルを表すものである。これらの個々の刊行物及び特許出願は、それぞれ
が、明確にかつ個別に、その全体がそのまま引用され、これらの全ての刊行物及
び特許出願は、本明細書の記載の一部とされる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/475 Ａ６１Ｋ 31/475 31/519 31/519 31/573 31/573 31/675 31/675 31/7048 31/7048 38/00 Ａ６１Ｐ 35/02 38/21 Ａ６１Ｋ 37/02 51/00 37/66 ＧＡ６１Ｐ 35/02 43/00 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷＦターム(参考） 4C084 AA02 AA03 AA12 BA44 CA62 DA01 DA12 DA13 DA14 DA15 DA18 DA21 DA22 DA23 DA24 DA28 MA17 MA21 MA66 NA14 ZB272 ZC752 4C085 AA14 AA15 AA16 AA25 AA26 AA27 BB36 BB43 BB44 CC02 CC13 CC22 CC23 CC24 CC29 CC32 DD33 DD34 DD35 DD62 DD63 EE01 EE03 GG02 GG03 GG04 GG05 GG06 4C086 AA01 AA02 CB09 CB21 DA10 DA35 EA11 MA01 MA02 MA03 MA04 MA17 MA21 MA66 NA14 ZB27 ZC75 4C206 AA01 AA02 DA17 HA03 HA26 MA01 MA02 MA03 MA04 MA37 MA41 MA86 NA14 ZB27 ZC75

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】Ｂ細胞悪性腫瘍を治療する方法であって、Ｂ細胞関連の悪性
腫瘍を有する被験者に薬学的に許容される担体および少なくとも１つの裸の抗Ｃ
Ｄ１９抗体からなる治療的な組成物を投与する段階から成るＢ細胞悪性腫瘍の治
療方法。
【請求項２】治療的組成物が少なくとも１つの裸の抗ＣＤ１９抗体と抗Ｃ
Ｄ２０抗体との組み合わせから成る請求項１の方法。
【請求項３】前記抗ＣＤ２０抗体が、裸の抗Ｄ２０抗体である請求項２の
方法。
【請求項４】前記治療的組成物が前記抗体の組み合わせである融合蛋白か
ら成る請求項２の方法。
【請求項５】前記治療的組成物がさらにサイトカインから成る請求項１の
方法。
【請求項６】Ｂ細胞悪性腫瘍を治療する方法であって、１投与につき２０
〜１５００ｍｇの投与量で非経口的に投与する、薬学的に許容される担体および
少なくとも１つの裸の抗ＣＤ２２抗体から成る治療的組成物を、Ｂ細胞悪性腫瘍
を有する被験者に投与する段階から成るＢ細胞悪性腫瘍の治療方法。
【請求項７】前記ＣＤ２２抗体が、１投与につき２０〜５００ｍｇの蛋白
の投与量で非経口的に投与される請求項６の方法。
【請求項８】前記放射性ラベル化した免疫複合体が¹⁹⁸Ａｕ、³²Ｐ、¹²⁵Ｉ
、¹³¹Ｉ、⁹⁰Ｙ、¹⁸⁶Ｒｅ、¹⁸⁸Ｒｅ、⁶⁷Ｃｕ、²¹¹Ａｔ、²¹³Ｂｉおよび²²⁵Ａｃか
ら成る群から選択される放射性核種から成る請求項６の方法。
【請求項９】前記放射性ラベル化した抗ＣＤ２２免疫複合体はさらにサイ
トカイン部分を含み、前記サイトカイン部分は、インターロイキン−１（ＩＬ−
１）、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、インターフェ
ロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、および、ＧＭ−ＣＳ
Ｆから成る群から選択される請求項６の方法。
【請求項１０】前記治療的組成物が、少なくとも１つの裸の抗ＣＤ２２抗
体と１つの抗ＣＤ１９抗体との組み合わせ、少なくとも１つの裸の抗ＣＤ２２抗
体と１つの抗ＣＤ２０抗体との組み合わせ、または少なくとも１つの裸の抗ＣＤ
２２抗体、１つの抗ＣＤ１９抗体および１つの抗ＣＤ２０抗体との組み合わせか
ら成る請求項６の方法。
【請求項１１】前記治療的組成物が、抗体の前記組み合わせの融合蛋白か
ら成る請求項１０の方法。
【請求項１２】前記抗ＣＤ２２抗体がヒトに近い霊長類抗体、ネズミのモ
ノクローナル抗体、キメラ抗体およびヒト化抗体から成る群から選択されること
を請求項６の方法。
【請求項１３】前記抗ＣＤ２２抗体がＬＬ２抗体であることを特徴とする
請求項１２の方法。
【請求項１４】前記治療的組成物が、区別可能なＣＤ２２エピトープで結
合する少なくとも２つのモノクローナル抗体から成り、前記ＣＤ２２エピトープ
が、エピトープＡ、エピトープＢ、エピトープＣ、エピトープＤおよびエピトー
プＥから成る基から選択される請求項６の方法。
【請求項１５】前記Ｂ細胞悪性腫瘍が、Ｂ細胞リンパ腫の無痛型、Ｂ細胞
リンパ腫の急速進行型、慢性リンパ性白血病および急性リンパ性白血病から成る
群から選択される請求項６の方法。
【請求項１６】前記Ｂ細胞悪性腫瘍が、非ホジキンリンパ腫であることを
請求項１５の方法。
【請求項１７】治療的蛋白投与または化学療法治療の段階をさらに含み、
前記治療的蛋白が、抗体、免疫複合体、抗体−免疫調節剤融合蛋白および抗体−
毒素融合蛋白からなる群から選択される請求項６の方法。
【請求項１８】前記治療的蛋白または前記化学療法治療が、前記抗ＣＤ２
２抗体を投与する前に投与される請求項１７の方法。
【請求項１９】前記治療的蛋白または前記化学療法治療が、抗ＣＤ２２抗
体を投与するのと同時に投与されることを特徴とする請求項１７の方法。
【請求項２０】前記治療的蛋白または前記化学療法治療が、抗ＣＤ２２抗
体を投与した後に投与されることを特徴とする請求項１７の方法。
【請求項２１】前記化学療法治療が、シクロフォスファミド、エトポシド
、ビンクリスチン、プロカルバジン、プレドニゾン、カルムスチン、ドキソルビ
シン、メトトレキセート、ブレオマイシン、デキサメタゾン、フェニル酪酸、ブ
ロスタチン−１およびロイコボリンから成る群から選択される少なくとも１つの
薬剤の投与から成る請求項１７の方法。
【請求項２２】前記治療的組成物が、抗ＣＤ２２抗体から成る三価構築物
から成ることを特徴とする請求項１１の方法。
【請求項２３】前記治療的組成物が、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ２２抗体、
抗ＣＤ１９抗体の多特異的構築物から成る請求項１１の方法。