KR101490573B1 - 포유류 피부의 상태를 조절하기 위한 조합된 에너지 및 국소 조성물 적용 - Google Patents

Abstract

제1 개인 케어 조성물을 조절이 요구되는 피부 영역에 적용하는 단계에 의해 포유류 피부의 상태를 조절하는 방법이 개시된다. 제1 개인 케어 조성물은 겔 조성물을 함유한다. 다른 단계에서 에너지는 진피에 전달되어 진피 내의 콜라겐을 가열하여서, 피부 각질층이 약 37℃ 내지 약 48℃의 외부 온도에 도달할 때까지 진피 내의 가열된 콜라겐이 표피 및 피부 각질층을 가열한다. 그 후 진피에의 에너지 전달을 제어하여 피부 각질층의 온도를 약 37℃ 내지 약 48℃의 범위에서 유지한다.

Description

포유류 피부의 상태를 조절하기 위한 조합된 에너지 및 국소 조성물 적용{COMBINED ENERGY AND TOPICAL COMPOSITION APPLICATION FOR REGULATING THE CONDITION OF MAMMALIAN SKIN}

본 발명은 포유류 피부의 상태를 조절하기 위한 상기 피부에의 에너지 및 국소 조성물의 조합된 적용에 관한 것이다. 에너지 전달 기구의 가장 효율적인 사용을 위한 요법 및 요법, 조성물 및 에너지 전달 기구의 효능을 결정하는 방법이 또한 개시된다.

피부의 내인성의 자연 노화 및 외인성의 환경적 노화의 효과를 회피하거나 감소시키기 위한 피부의 처리는 새로운 기술의 개발 및 검증에서의 더욱 더 많은 달러 투자에 의해 지탱되는 수십억 달러의 상업적 산업(commercial industry)이다. 피부 표면에의 인가를 통한 피부에의 전자기(electromagnetic; EM) 에너지의 투입은 수십년 동안 공지되어 왔으며, 광범위한 형태로 그리고 다양한 전달 기구를 통하여 구현되었다. 일반적으로, EM-기반 피부 처리 방법은 절제 방식(ablative procedure) 및 비절제 방식으로 나누어질 수 있지만, 이들 둘 모두는 EM 에너지 인가의 열분해 효과를 활용한다.

소비자들은 피부의 상태를 개선시키고 전형적인 노화 징조들을 지연 및/또는 방지하기 위한 다양한 제품을 입수할 수 있다. 그러한 징조는, 예를 들어 잔주름, 주름살, 과다 색소 침착, 창백함, 처짐, 눈밑 다크서클, 부은 눈, 고르지 않은 피부 톤, 확대된 모공, 표피 세포의 교체 속도 감소, 및 비정상적인 표피 박리 또는 박피를 포함한다. 그러나, 몇몇 소비자에 있어서, 매우 다양한 입수가능한 제품들 및 피부 케어 기술의 진보가 여전히 요망하는 결과를 가져오지 못하고 있어, 일부는 보다 침습성의 의학적 치료 절차로 전환해야 할 필요성을 느끼고 있다.

절제 방식, 예를 들어 박피 레이저(ablative laser)는 흉터 및 문신 제거 절차에서와 같이 피부의 엄청난 형태적 재생(resurfacing) 또는 제거에 효과적인 방법인 것으로 입증되었으며, 또한 노화된 그리고 광-손상된 피부의 외관의 처리 및 개선에 효과적인 것으로 입증되었다. 절제 방식이 얼굴 피부의 미용적으로 취약한 입주위 및 안와주위 영역에서의 잔주름 및 주름살의 출현을 개선시키는 데 효과적이지만, 주요 약점은 바람직하지 못하게 오랜 시간 동안 소비자에게 심각하게 손상된 미용적 외관을 부과하는 장기간의 치유 및 회복을 포함한다. 또한, 생길 수 있는 감염, 흉터 및 색소침착 이상의 잠재적인 부작용은 흔히 소비자에게 미용적으로 허용불가능한 것으로 간주되며, 이는 특히 얼굴 피부가 연루될 경우 그러하다.

따라서, 최근의 연구 및 개발 노력은 소비자에게 더욱 저렴하고, 더욱 편리하고, 더욱 안전한 비절제식 피부 노화 방지 및 회춘 처리를 제공하는 것에 초점을 맞추었다. 피부의 개선된 외관을 촉진할 목적으로 피부에 열에너지를 투입하는 것을 포함하는 미용 요법은 당업계에 잘 알려져 있다. 소비자 가정용을 목표로 하는 핸드헬드(handheld) 기구 형태의 전자기 에너지 전달 기술은 거의 십년 동안 시장에서 입수가능하였다. 상기 기술의 개선 및 진보는 표면 조직 및 말초 조직에 대한 표적 조직 둘 모두에 대한 바람직하지 못한 손상을 최소화하면서 더욱 심부의 표적 피부 조직에 열 유도된 효과를 최대화하는 것에 집중된다. 선택적인 열처리는 새로운 콜라겐 형성을 유도하며 선택적인 열손상은 특히 피부 매트릭스 리모델링을 유도하는 것으로 여겨진다. 그러나, 현재 이용가능한 기술은 과열, 화상, 홍반 및 색소 이상을 포함하는 문제시되는 손상의 바람직하지 못한 지속된 부정적 부작용으로 이어지는 것으로 공지되어 있다.

과거에는, 이들 기구 및 구성물의 효능은 단지 외부적 방법에 의해 결정되었다. 즉, 피부 외층에서 가시적 개선이 있었을 경우, 에너지 전달 기구는 작동되고 있음에 틀림없다. 그러나, 이들 에너지 전달 기구에 있어서의 최적 시간, 온도 및 구성을 결정하는 몇몇 방법이 있다. 게다가, 상기 피부 표면 상에서 일어나는 다수의 가시적 변화는 피부의 진피 및 표피 층에서 표면 아래에서 일어나는 변화의 결과인 것으로 일반적으로 받아들여진다. 이것이 피부의 하부 층들에 어떻게 영향을 주는지를 알지 못하고서 기구의 성능을 정확하게 제어하고 최대화하는 방법을 아는 것은 어렵다.

피부 조직의 선택적 광열분해는 특히 단색 레이저 에너지 및 광범위 스펙트럼의 강한 펄스광(intense pulsed light; IPL) 에너지의 투입을 포함하는 처리에서 널리 실행되는 미용적 처리 형태이다. 이들 기술에서, 광에너지는 피부의 표면에 직접 인가되며, 침투는 표피의 투과 및 진피에서의 흡수에 의존한다. 검은 피부 및 표피 상의 과다 색소 침착 반점은 에너지를 흡수함으로써 투과를 방해하고 처리의 효능을 저해할 수 있으며, 또한 색소 침착 영역의 과열로 이어져 수포, 화상, 및 기타 미용적으로 바람직하지 못한 효과를 초래할 수 있다.

EM 기반 열분해에 대한 대안으로서, 전기 전도 고주파(RF) 전류가 미용적 피부 처리 양식으로서 또한 조사되었다. 의료 분야에서 RF 전류 및 펄스 고주파(pRF)의 이용은 공지되어 있지만, 소비자에 의한 자가 전달용의 비절제식 피부 회춘 기술로서의 RF 전류의 이용은 여전히 상대적으로 혁신적이다. 피부에의 RF 전류의 인가에서, 양극성 RF 전류의 이전이 피부에 직접 적용된 두 전극을 통하여 일어난다. 따라서, 상기 전류는 전극으로부터 전극으로 전도되어 진피층을 통하여 직접 진행하며, 이것이 표피를 통과하는 것에 집중되고 파장 침투 깊이에 영향을 주는 요인들에 의해 한정되는 EM 에너지의 인가와 구별되게 한다.

RF 전류 투입은 이론적으로는 EM 에너지 인가에 비해 유의한 피부 처리 이점을 제공하는 것으로 보인다. 전자기 에너지와는 달리, 예를 들어 전기 전도 RF 에너지는 발색단과 관계가 없으며, 이는 색소 침착된 피부와 색소 비침착된 피부 사이의 차등 흡수의 존재에 관련된 병발 및 효능 문제와, 더 많은 에너지를 흡수하는 멜라닌을 갖는 더욱 검은 피부 및 광파장을 반사할 수도 있는 더욱 흰 피부의 처리에서의 생성된 문제를 회피한다. 둘 모두의 경우에서, 결과의 일관성은 손상되며, 발색단 함유 피부에서의 열제어는 여전히 문제시된다.

그러나, 열처리 효능을 제공할 수 있는 에너지 수준으로 피부에 RF 전류를 투입하는 것은 연구자들이 바람직하지 못한 피부 손상 없이 원하는 효과를 성취하도록 파라미터들을 최적화할 수 없다는 것으로 괴로워한다. RF 전류는 피부 표면 아래의 진피 조직을 통하여 전달되는 반면에, 온도 또는 수분 센서에 의한 효과 모니터링은 피부의 접근가능한 표면에 한정된다. RF 전류 임피던스(impedance)는 콜라겐 밀도 및 완전성(integrity), 수화 수준 등을 포함하는 다양한 피부 조직 속성 및 조직 구성의 함수이다. 전극들 사이의 거리 및 파라미터들, 예를 들어 펄스 길이 및 주파수의 제어는 이론적으로는 효과를 최적화하고 안전상 문제(safety concern)를 회피하도록 조정될 수 있지만, 그러한 조정은 조직 상태의 변화를 모니터링하기 위한 장치 또는 기타 수단의 도움 없이는 거의 불가능하다. EM 에너지 기반 전달의 경우, 표면 피부는 전형적으로 최고 처리 온도에 도달하여, 상기 표면에서의 온도 모니터링은 표피하 조직에 대한 원하지 않는 손상을 방지할 수 있다. 그러나, RF 전류의 경우, 표피하 조직은 실제로 표면 피부보다 더 높은 처리 온도에 도달하여, 손상은 표면에서 측정가능하게 나타나지 않고서 더욱 심부의 조직에서 일어날 수 있다. 따라서, 고도로 훈련된 의료인의 감독 하에서 그리고 복잡한 기계류를 사용하는 임상 환경 외부에서는, RF 전류 단독의 전달을 기반으로 하는, 소비자에 의한 개인 사용을 목표로 하는 기구 및 요법은 일반적으로 회피되었는데, 그 이유는 안전상 고려사항이 적절한 표피하 모니터링 기작의 부재 하에 유효 처리 수준에서 계속하여 존재하기 때문이다. RF-전류를 유일한 처리 양식으로 제공하는 그리고 가정용 소비자 사용을 목표로 하는 핸드헬드 에너지 전달 기구는 사실상 공지되어 있지 않다. 하나의 그러한 알려진 기구(스탑(STOP™), 울트라젠 리미티드(Ultragen Ltd))가 유럽에서 개인 용도로 소비자에게 시판되지만, 이 기구의 처리 내성은 바람직하지 못한 손상을 회피하기 위하여 너무 낮게 설정되어서, 제어된 조건 하에서의 임상 효능의 객관적인 증거는 입수가능하지 않다.

따라서, 피부 처리에서의 RF의 역할은 다른 열분해 절차와 조합되어 보조적인 또는 예비적인 기능으로 실질적으로 한정된다. 예를 들어, 2002년에, 비터(Bitter) 및 멀홀랜드(Mulholland) (문헌["Report of a new technique for enhanced non-invasive skin rejuvenation using a dual mode pulsed light and radio frequency energy sources: selective radiothermolysis," J. Cosmet Dermatol 2002; 1: 142-145])는 RF 전류와 IPL의 조합을 기반으로 한 처리 프로토콜을 제안하였으며, 100명의 시험 대상의 얼굴 처리에 기초한 결과를 보고하였지만, 상기 저자들은 특정 처리 설계 파라미터들을 개시하지는 못하였다. 상기 연구에서, RF는 IPL 처리의 효과를 증대시키는 것으로 보고되었다. 부작용은 미용적으로 바람직하지 못한 색소 침착 효과에 대한 보고를 포함하였으며, 소비자의 통증 지각은 표면상의 냉각에 의해 제어되었다.

또한 RF는 목표로 하는 광에너지 인가와 함께 미용적 피부 처리에 유용한 것으로 제안되었고 조사되었다. 일반적으로, 이러한 처리 프로토콜 계획에 따르면, RF는 광에너지에 대하여 보조적으로 사용되며 광에너지의 일부 파라미터에 따라 인가된다. 예를 들어, 문헌[Hammes et al., "Electro-optical synergy (ELOS™) for nonablative skin rejuvenation: a preliminary prospective study," Journal of European Academy of Dermatology. and Venereology 2006, 20, 1070-1075]에서, 저자들은 RF 전류와 광에너지 사이의 조율 펄스 주파수(coordinating pulse frequency)에 초점을 맞추고 있으며, 더욱 낮고 덜 침습적인 수준의 광에너지의 사용을 가능하게 할 수 있는 이들 에너지 형태들 사이에는 상승 작용이 존재함을 제안하고, RF 인가 단독과 관련된 부작용은 조합된 프로토콜에 의해 감소되거나 또는 회피됨을 추가로 제안한다. 추가로, 이들 기구를 이용하는 요법은 과열에 응답하여 피부를 기계적으로 냉각시키거나 또는 과열을 방지하는 수단을 포함한다.

다른 예에서, 알트슐러(Altshuler)의 미국 특허 출원 공개 제2008/0033516 A1호에는 전자기 방사선을 이용한 표적 영역의 조사 및 표적 깊이까지의 피부의 가열의 조합을 포함하는 피부 조직의 "온도 제어된 광생체자극"(temperature controlled photobiostimulation)이 개시되어 있다. 알트슐러는 일반적으로 ATP 생성, 세포 증식 및 단백질 생성을 증가시키고, 이외에도 낮은 등급의 염증성 응답의 유도에 의해 성장 응답을 트리거링하는 것으로 생각되는 저수준 광, 저수준 레이저, 단색 및 준단색 광자극 기반의 피부 처리 방법의 기존 기술을 주목하고 있지만, 효능의 임상 확인의 결여 및 일관성이 없는 결과에 대한 보고서를 주목한다. 알트슐러는 열에너지 인가가 광자극 응답을 향상시킬 수 있다고 단정한다. 알트슐러는 일정 체적의 피부의 발열 요법이 그 체적의 온도를 바람직하게는 37 내지 45℃로 상승시킬 수 있는 임의의 공지된 공급원에 의해 성취될 수 있으며, 구체적으로는 고온 공기, AC 또는 DC 전류에 의한 가열, 전도성 열원, 초음파 또는 마이크로파 방사선 또는 380-2700 ㎚의 범위의 EM 방사선의 임의의 적합한 파장 또는 파장들의 사용을 예로 든다. 그러나, 모든 알트슐러의 실시 형태에서, EM 에너지에 의존하여 원하는 처리 효과를 성취한다. 알트슐러는 열이 원하는 효과의 광자극의 상승작용적 향상을 제공함을 교시하고 있지만, EM의 부재 하에서의 열은 바람직하지 못한 생체자극, 예를 들어 방사선-유도된 DNA 손상의 복구의 지연, 후속적인 열 인가에 대한 내성을 형성하는 열충격(heat shock) 단백질의 생성, 및 피부 조직 재생 및 복구에 연루된 것들을 포함하는 효소적 과정들의 변경으로 이어질 수 있음을 또한 제안하고 있고, 일반적으로 피부 처리 양식으로서 광의 부재 하에서 열로부터 벗어남을 교시하고 있다. 알트슐러는 표피하 피부 상태의 평가 또는 모니터링을 할 수 없음과 관련된 결점을 극복하는 방법을 제안하지 못하고 있다.

게다가, 소비자 순응성은 항상 현재 이용가능한 기구에 있어서의 쟁점이다. 소비자는 그의 미용 요법에 있어서 매일 제한된 양의 시간을 갖는다. 기구 제조업자는 소비자가 최대 효과를 얻는 것을 보장하기 위하여 장기간 동안 그의 기구를 사용하는 것을 권장하고 싶겠지만, 소비자는 따를 것 같지 않다. 따라서, 기구의 장기간 사용을 권장하는 것과 소비자가 기구를 사용하는 하루 중의 제한된 양의 자유 시간을 갖는 것을 인지하는 것 사이에는 절충이 존재한다.

소비자 경험은 기구, 구성물 및 요법을 설계할 때 또한 중요하다. 예를 들어, 소노그램(sonogram)은 일반적으로 수행되는 절차이며, 엄청난 의학적 효과를 제공한다. 그러나, 소노그램 절차에 사용되는 겔은 진하며 제거가 어려워 소비자에게 불편을 야기한다. 게다가, 많은 에너지 전달 기구는 외부 피부를 너무 빠르게 또는 너무 뜨겁게 가열하여 소비자의 불쾌한 경험을 야기한다.

그러므로, 피부의 상태를 충분히 개선시켜 더 침습성인 절차에 대한 필요성 및 이와 관련된 위험을 피하는 방법이 계속해서 필요하다. 그리고, 에너지 전달 기구의 효능을 결정하는 더 나은 방법에 대한 필요성이 존재하며, 게다가 이 방법은 개선된 피부 외관의 원하는 결과를 성취하면서 소비자의 더 허용가능한 경험을 나타내게 하는 데 사용될 수 있다.

소비자에 의한 개인 사용에 적합한 안전하고 효과적인 비절제식 피부 처리 및 회춘 기구, 치료법 및 요법에 대한 당업계의 필요성이 남아있다. 특히, 처리된 표적 조직에 또는 주변 조직에 대한 바람직하지 못한 손상을 야기하지 않고서 진피 리모델링 및 콜라겐 합성을 향상시켜 표피하 피부 조직을 처리하는 수단에 대한 필요성이 남아있다. 원하는 효과의 제공을 위하여 RF-전류 투입을 최적화하기 위하여 소비자가 행하는 RF-전류 기반의 처리의 효과를 평가 및 모니터링하는 방법에 대한 당업계의 특정 필요성이 있으며, 처리와 함께 하는 기계적 냉각에 의존하지 않고 EM-기반의 치료법에 관련된 문제를 회피하는 최적화된 RF 전류 기반의 치료법에 대한 필요성이 남아있다.

본 발명은 포유류 피부의 상태를 조절하는 방법에 관한 것이다. 피부는 적어도 3개의 층, 즉 피부 각질층 외층; 표피; 및 진피를 갖는다. 그리고 본 방법은 조절이 요구되는 피부 영역에 제1 개인 케어 조성물을 적용하는 단계를 포함하며, 여기서 제1 개인 케어 조성물은 겔 조성물을 포함한다. 다른 단계는 에너지를 진피에 전달하여 진피 내의 콜라겐을 가열하여서, 피부 각질층이 약 37℃ 내지 약 48℃의 외부 온도에 도달할 때까지 진피 내의 가열된 콜라겐이 표피 및 피부 각질층을 가열하는 것을 포함한다. 그 후 진피에의 에너지 전달을 제어하여 피부 각질층의 온도를 약 37℃ 내지 약 48℃의 범위에서 유지한다. 전달되는 에너지는 RF 에너지 기구로부터의 것일 수 있으며, RF 에너지는 겔 조성물을 통하여 피부 각질층과 접촉하는 2개 이상의 전극을 통하여 전달된다. 때로, 에너지 전달 기구는 광을 방출하지 않으며, 이 기구는 전자기 에너지를 생성하지 않는 것이 바람직하다. 그리고 일 실시 형태에서, 겔 조성물은 전기 전도도가 약 1,000 내지 약 2, 000 μS/㎝이다.

본 발명의 다른 실시 형태에서, RF 에너지 기구가 켜질 때, 이 기구는 약 20 내지 약 50초 동안 최대 출력의 35% 내지 약 65%의 범위의 RF에너지를 전달하며, 그 후 상기 출력은 약 20 내지 약 50초 동안 약 65% 내지 약 100%로 증가되며, 그 후 에너지 전달은 피부 각질층의 온도가 약 37℃ 내지 약 48℃의 범위로 유지되도록 제어된다.

본 발명의 또 다른 실시 형태에서, 에너지 전달 기구는 핸드헬드형이며, 소비자의 눈 아래에 적용되고, 눈 밑에서 눈가 주름 영역 바로 위까지 이동되고, 그 후 방향은 반대로 되며, 에너지 전달 기구는 약 3 내지 약 6분 동안 이 경로를 가로질러 전후로 이동된다. 이 방법은 소비자의 다른 눈 밑에서 반복될 수 있다. 게다가, 에너지 전달 기구는 소비자의 눈 위에 적용되고, 그 눈 위에서 눈가 주름 영역 바로 아래까지 이동되며, 그 후 방향은 반대로 되고, 에너지 전달 기구는 약 3 내지 약 6분 동안 이 경로를 가로질러 전후로 이동된다. 이 방법은 소비자의 다른 눈 위에서 반복될 수 있다.

에너지 전달 기구를 소비자의 하나의 눈 아래에 적용하고 상기 기구를 약 3 내지 약 6분 동안 계속적인 전후 작동으로 눈가 주름 바로 위까지 이동시키는 단계, 그 후 에너지 전달 기구를 소비자의 눈 위에 적용하고 상기 기구를 약 3 내지 약 6분 동안 계속적인 전후 작동으로 눈가 주름 영역 바로 아래까지 이동시키는 단계, 이들 두 단계를 소비자의 다른 눈에서 반복하여 소비자의 양눈에 인접한 눈가 주름을 약 6 내지 약 12분 동안 각각 처리하는 단계를 포함하는 다단계 요법이 개시된다. 이러한 다단계 요법은 약 3주 내지 약 6주 동안 주당 3 내지 5일의 요법 기간 동안 일일 1회 이상 완료될 수 있다. 그 후 소비자는 약 2 내지 약 8개월 동안 기다릴 수 있으며, 그 후 다단계 요법을 요법 기간 동안 반복한다. 바람직하게는, 소비자의 눈 주위의 잔주름 및 주름살은 각각의 요법 기간 후 눈에 띄게 감소된다.

본 명세서는 본 발명을 구체적으로 지시하며 명확하게 청구하는 특허청구범위로 결론을 맺지만 본 발명은 첨부 도면과 함께 취해지는 하기의 발명을 실시하기 위한 구체적인 내용으로부터 더 잘 이해될 것으로 믿어진다.
<도 1>
도 1은 인간 피부에 있어서 자연 발생 손상 및 복구 사이클의 개략도이며;
<도 2a 및 도 2b>
도 2a 및 도 2b는 인간 콜라겐의 특성을 도시하고;
<도 3>
도 3은 RF 전류 투입 효능의 생물학적 모델의 개략도이며;
<도 4a 및 도 4b>
도 4a 및 도 4b는 컴필레이션(compilation) 유전자의 24시간 평균 변화 배수이고;
<도 5a 및 도 5b>
도 5a 및 도 5b는 예시적인 유전자의 24시간 평균 변화 배수이며;
<도 6a 및 도 6b>
도 6a 및 도 6b는 컴필레이션 유전자의 1개월 평균 변화 배수이고;
<도 7a 및 도 7b>
도 7a 및 도 7b는 예시적인 유전자의 1개월 평균 변화 배수이며;
<도 8a 및 도 8b>
도 8a 및 도 8b는 RF 단순 열전달에 대한 2개의 그래프이고;
<도 9>
도 9는 RF 단순 열전달의 개략도이며;
<도 10>
도 10은 소비자의 눈 주위의 눈가 주름(Crow's Feet) 영역의 개략도이고;
<도 11>
도 11은 소비자 피부의 구역 A이며;
<도 12>
도 12는 소비자 피부의 구역 B이고;
<도 13>
도 13은 소비자 피부의 구역 C이며;
<도 14>
도 14는 소비자 피부의 구역 D이고;
<도 15>
도 15는 소비자 피부의 구역 E이며;
<도 16>
도 16은 소비자 피부의 구역 F이다.

본 발명의 모든 실시 형태에서, 달리 구체적으로 기술되지 않으면 모든 백분율은 전체 조성물의 중량 기준이다. 달리 구체적으로 기술되지 않으면 모든 비는 중량비이다. 모든 범위는 포함하는 것이고 조합가능하다. 유효 숫자의 갯수는 나타낸 양에 대한 제한을 전하는 것도 아니고 측정의 정확성에 대한 제한을 전하는 것도 아니다. 달리 구체적으로 지시되지 않으면 모든 수치적 양은 "약"이라는 단어로 수식됨이 이해된다. 모든 측정은 25℃에서 그리고 주변 조건에서 행해짐이 이해되며, 여기서 "주변 조건"은 1기압 하의 그리고 50%의 상대 습도의 조건을 의미한다.

본 명세서에 첨부된 임의의 방법 청구항들에서 상술된 단계들은 달리 명시되지 않는 한 임의의 순서로 실시될 수 있다는 것을 이해하여야 한다. 예를 들어, 단계 (a), (b) 및 (c)를 상술하는 방법 청구항에서, 단계 (c)는 단계 (a) 및 (b) 이전에 또는 그 사이에 실시될 수 있다. 더욱이, 개별 단계들은, 별개의 단계들로서 상술되지만, 소정 기간 동안 일부가 중복되게 또는 완전히 중복되게 실시될 수 있다.

본 명세서에서, "피부의 상태 조절"은 피부의 상태를 개선시키고/시키거나 피부의 상태를 예방적으로 조절하는 것을 의미하며, 예를 들어 자외선으로부터의 조직 보호 및 피부 노화 징조의 조절을 포함한다. 본 명세서에서, "포유류 피부의 상태 개선"은 조직의 외관 및 느낌의 시각적 및/또는 촉각적으로 지각할 수 있는 긍정적인 변화를 의미한다. 조절 및/또는 개선될 수 있는 상태는 다음 중 하나 이상을 포함하지만, 이로 한정되는 것은 아니다: 주름살 및 거칠고 깊은 주름, 잔주름, 균열, 융기(bumps), 및 확대된 모공의 출현의 감소; 피부의 두꺼워짐(예를 들어, 피부의 표피층 및/또는 진피층 및/또는 피하층, 및 적용가능한 경우 손발톱 및 모간의 각질층을 구축시켜 피부, 모발 또는 손발톱의 위축을 감소시킴); 진피-표피 경계의 주름(convolution)(융선망(rete ridges)으로도 공지됨)의 증가; 탄력섬유증, 처짐, 변형에 의한 피부 또는 모발 반동(recoil)의 손실과 같은 상태로 이어지는, 예를 들어, 기능성 피부 엘라스틴의 손실, 손상 및/또는 불활성화로 인한 피부 또는 모발 탄력성 손실의 방지; 셀룰라이트의 감소; 피부, 모발 또는 손발톱에 대한 변색, 예를 들어 눈밑 다크서클(under-eye circle), 반점(blotching)(예를 들어, 빨간 코로 인한 불균일한 붉은 착색), 창백함, 모세혈관 확장증 또는 거미상 혈관에 의해 야기된 변색, 건조, 푸석푸석함(brittleness), 및 흰머리를 방지.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 노화 징조"는 피부 노화로 인한 임의의 거시적 또는 미시적 결과 뿐만 아니라 외향적으로 가시적으로 그리고 촉각적으로 지각할 수 있는 모든 징후를 포함한다. 이러한 징조는 주름살 및 거칠고 깊은 주름살, 잔주름, 피부 주름, 균열, 융기, 큰 모공, 불균일성 또는 거칠음과 같은 피부결 불균일성의 발생; 비늘화(flaking); 건조; 피부 탄력성 손실; 변색(눈밑 다크서클 포함); 반점; 창백함; 검버섯 및 주근깨와 같은 과다 색소 침착된 피부 부위; 각질; 비정상적 분화; 과다각질화; 탄력섬유증; 콜라겐 분해, 및 피부각질층, 진피, 표피, 혈관계(예를 들어, 모세혈관 확장증 또는 거미상 혈관), 및 하부 조직(예를 들어, 지방 및/또는 근육), 특히 피부에 가까운 조직에서의 기타 조직학적 변화를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 과정으로부터 생길 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "과다 색소 침착"은 색소 침착이 피부의 인접 부위의 색소 침착보다 큰 피부 부위(예를 들어, 색소성 반점, 검버섯 등)를 말한다.

본 명세서에서, "개인 케어" 조성물은 포유류 피부 상에 국소 도포하기에 적합한 조성물을 의미한다. 본 명세서에 설명된 개인 케어 조성물은 하나 이상의 피부 케어 활성제를 함유할 수도 있다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "피부 케어 활성제" 또는 "활성제"는 예를 들어 피부에 효과 또는 개선을 제공함으로써 피부 및 기타 포유류 피부의 상태를 조절하는데 도움을 주는 화합물을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "에너지 전달 장치"는 에너지를 포유류의 피부 및/또는 모발에 전달하기 위하여 사용되는 임의의 장치를 의미한다. 본 명세서에서, "에너지 전달"은 피부 표면 및/또는 피부층이 에너지 전달 장치로부터 발산되는 에너지에 노출됨을 의미하며, 여기서 에너지는 모간 및/또는 모낭을 포함하는 피부의 요망되는 층에 침투할 수도 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "연속적 수준"은 장치에 의해 전달되는 에너지 또는 에너지 출력이 기구 작동 시간과 기구 정지(deactivation) 시간 사이에서 본질적으로 일정한 수준으로 남아 있음을 의미한다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "펄스화된"이라는 것은 기구 작동 시간과 기구 정지 시간 사이에서 에너지 출력이 예측가능한 방식으로 변화함을 의미하며, 이는 더 높은 출력의 기간(펄스)이 더 낮은 출력의 기간과 번갈아 일어나는 것을 특징으로 한다. 펄스의 시작은 갑작스럽거나 점진적일 수 있다. "예측가능한"이라는 것은 펄스 피크 강도, 펄스 형상, 펄스 지속 기간, 및 펄스들 사이의 시간적 간격이 실질적으로 동일함을 의미한다. 펄스들의 지속 기간 및 펄스들 사이의 시간은 변할 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "핸드헬드"라는 것은 장치가 보통의 성인이 편안하게 잡기에 적합한 중량 및 치수의 것임을 의미한다.

인간 피부는 2개의 주요 구조 층, 즉 표피 및 표피하 또는 하부 진피로 나눌 수 있다. 피부 각질층을 갖는 표피는 환경에 대한 생물학적 장벽으로서의 역할을 한다. 표피의 기저층에서, 멜라닌 세포로 불리우는 색소 형성 세포가 존재하며, 이는 피부색의 주요 결정자이다.

하부 진피는 피부의 주요한 구조적 지지체를 제공한다. 이것은 콜라겐으로 불리우는 세포외 단백질로 주로 구성된다. 콜라겐은 섬유아세포에 의해 생성되며, 열불안정성 및 열안정성 화학 결합으로 연결된 3개의 폴리펩티드 사슬을 갖는 삼중 나선으로 합성된다. 콜라겐 함유 조직이 가열될 때, 이 단백질 매트릭스의 물리적 특성의 변경이 특징적인 온도에서 일어난다. 콜라겐 수축의 구조적 변이 및 콜라겐 매트릭스의 리모델링이 열에 의해 일어난다.

피부 내에서, 약간의 양의 복구 활동이 계속적인 콜라겐 생성의 촉진을 위하여 일어난다. 노화 동안, 손상이 일어나는 속도는 복구 활동보다 더 빠르게 증가할 수 있거나, 또는 손상은 실질적으로 일정한 속도로 계속하여 일어날 수 있지만 복구 활동은 느려진다. 어느 경우에나, 그 결과는 콜라겐 감소와, 잔주름, 주름살 및 과다 색소 침착 반점과 같은 표면 결함의 출현을 포함하는 노화 징조로서 나타나는 손상된 외관이다. 정상적인 복구 활동 사이클 및 시간이 지남에 따른 외관에 대한 생성된 영향이 도 1 및 도 3에 도시되어 있다.

도 1에서, 박스는 콜라겐 생성의 정상적인 원인을 나타낸다. 많은 이유로, 피부에서의 콜라겐의 증가, 및 이것이 복구 및 대체되는 속도는 더욱 생기있고, 더욱 건강하고, 더욱 매력적으로 보이는 피부에 기여한다. 진행 중인 증식 및 진피 리모델링은 자연적으로 일어나지만, 불행하게도, 이들 과정은 노화됨에 따라 느려진다. 콜라겐은 피부가 손상될 때, 예를 들어, 예컨대 태양으로부터의 방사선에 의한 상해 또는 염증 후 또한 생성된다. 도 1에서의 원은 콜라겐이 형성되는 기작들 중 일부와, 그의 형성을 추적할 수 있는 방법을 나타낸다. MMP 및 사이토카인 활성은 콜라겐 복구 및 보충 사이클의 추적을 돕는 단지 2가지의 측정가능한 양이다.

도 3은 일루어(elure) 효능(20)의 이중 작용 생물 모델의 개략도이다. 피부(21)는 3개의 층, 피부 각질층(30), 표피(32) 및 진피(34)로 나누어진다. 콜라겐 리모델링 및 새로운 콜라겐의 생성이 진피층에서 일어난다. 피부(21)에의 정상적인 상해(22)가 끊임없이 일어나며, 이는 정상적인 노화, UV 상해, pH 변화, 화학적 상해 및 기타의 것을 포함한다. 정상적인 상해(22)는 손상된 콜라겐(24)으로 이어진다. 이와 마찬가지로, 정상적인 낮은 수준의 염증(26)이 일어나며, 이는 사이토카인, HSP 및 HSF 활성으로 이어진다. 궁극적으로, 반복된 낮은 열에너지는 증가된 MMP 활성(36)을 생성하며, 이는 콜라겐 단편의 생성으로 이어진다. 열 증가는 콜라겐의 형성 및 복구를 야기하는 세포 활성의 상향조절(38)을 야기한다. 둘 모두의 기작(36, 38)은 건강한 콜라겐(28)의 형성 및 리모델링으로 이어진다.

콜라겐의 용융 온도가 50℃ 이하인 것으로 측정되지만, 복구 사이클은 더욱 낮은 수준의 열 부가에 의해 변경되어 향상될 수 있다. 분자내 수소 결합 가교결합의 열적 절단은 절단 사건과 완화 사건(수소 결합의 재형성) 사이의 균형에 의해 생성된다. 외부 힘은 이 과정이 일어나는 데 필요로 하지 않는다. 그 결과, 분자간 응력(intermolecular stress)이 분자내 수소 결합의 열적 절단에 의해 생성된다. 가교결합된 분자의 3차 구조체의 수축에 의해 수축의 초기 분자간 벡터가 생성된다. RF 모델 가열 곡선이 도 8a, 8b 및 9에 도시되어 있다.

진피 구조체는 콜라겐 1(50)로 주로 이루어진다(도 2a 및 도 2b). 콜라겐은 섬유아세포에 의해 단일 가닥 단백질인 프로콜라겐(52)으로 발현된다. 프로콜라겐(52)은 발현시에 콜라겐 1(50)로 절단되며, "트로포콜라겐"(54)으로 불리우는 삼중 나선 형태로 폴딩된다. 이 과정은 도 2a 및 도 2b에 도시되어 있다.

콜라겐 가교결합은 분자내(공유 또는 수소 결합) 또는 분자간(공유 또는 이온 결합) 가교결합일 수 있다. 연령의 함수로서의 콜라겐 변성의 원인은 열에너지 상해, 기계적 상해, 콜라게나아제 및 MMP 속도에 대한 pH의 영향, 수화 상태, 및 콜라겐 미소섬유가 MMP 소화에 대하여 취약해지게 하는, "집"(zip)하거나 또는 "언집"(unzip)할 수 있는 콜라겐 미소섬유의 자연적인 평형의 일반적인 교란을 포함한다. 이들은 다수의 상해 유형을 나타내지만, 모든 것은 온도에 의해 제어되는 속도이다. 또한, 정상적인 콜라겐 턴오버(turnover) 사이클은 <37℃ - 43℃의 온도 범위 내에서 조절될 수 있다.

콜라겐 결합의 절단은 또한 더욱 낮은 온도에서 그러나 더욱 낮은 속도로 일어난다. 낮은 수준의 열적 절단은 결합이 분자 길이의 순변화 없이 재형성되는 완화 현상과 빈번하게 관련된다.

진피 리모델링은 세포 및 분자 수준에서 일어나는 생물물리학적 현상이다. 콜라겐의 분자적 수축 또는 부분적 변성은 에너지 공급원의 인가를 포함하며, 이는 삼중 나선의 열불안정성 결합을 절단함으로써 분자의 종축을 불안정화시킨다. 그 결과, 응력이 생성되어 매트릭스의 분자간 결합을 파괴한다. 이는 본질적으로 세포외 과정이며, 반면에 세포 수축은 손상된 영역 내로의 섬유아세포의 이주 및 배가에 있어서 지연기를 요구한다. 치유 응답은 일반적으로 초기 염증 과정을 포함하며, 이는 세포 잔해를 제거하는 백혈구 세포 또는 백혈구에 의한 침윤으로 이루어진다. 이것에는 상해를 입은 부위에서의 섬유아세포의 증식 및/또는 침적에 이용가능한 콜라겐의 궁극적 증가에 의한 턴오버의 증가가 뒤따른다. 섬유아세포는 수축성 근섬유아세포로 분화되며, 이는 세포 연조직 수축의 공급원이다. 세포 수축 후, 콜라겐은 팽팽해진 연조직 구조체에서의 정적 지지 매트릭스로서 놓여진다. 이러한 발생기 흉터 매트릭스의 침적 및 후속 리모델링은 심미적 목적을 위하여 연조직의 일관성 및 기하학적 특성을 변경시키는 수단을 제공한다.

피부 표면 외관의 개선을 궁극적으로 성취하기 위하여 손상 및 복구 캐스케이드(cascade)가 개시되도록 열에너지를 인가하는 것은 당업계에 공지되어 있지만, 현재 이용가능한 기술은 공지된 결함과 관련된다. 예를 들어, 레이저 전달 기구는 피부를 관통하고, 특정 발색단에 결합하고, 선택적 광열분해로 불리우는 과정을 통하여 다양한 색 및 색소를 피부로부터 제거하는 광의 특정 파장들을 이용한다. 레이저는 대형이고 고가의 자본 설비 부품이며, 피부 내의 특정 문제 또는 색상을 단지 공격할 뿐이고, 레이저에 의한 화상, 흉터가 생기기 쉬우며, 색소 과다 및/또는 색소 과소 침착을 야기할 수 있고, 사용자 및 환자 눈 상해로 이어질 수도 있다. 강한 광대역의 광 시스템은 다수 파장의 광을 방출하며, 또한 선택적 광열분해를 통하여 피부 변색을 개선시키고, 피부 가열을 통하여 비특이적 피부결 개선으로 이어진다. 또한 상기 시스템은 더욱 크고 고가이며, 피부결 및 주름살 개선은 최소이고, 또한 피부 화상, 색소 과소 또는 색소 과다 침착 및 흉터의 위험이 있다. 일반적으로, 전자기 에너지의 인가는 표피층을 통하여 성취되며, 이때 침투는 진피층의 구성물 및 표면에서의 색소 침착 인자에 의해 제한된다.

또한 고주파 기술은 피부 처리 분야에 공지되어 있다. RF 기술은 전류를 이용하여 진피를 가열하고 콜라겐 및 엘라스틴 섬유의 생성을 자극하는데, 상기 콜라겐 및 엘라스틴 섬유는 피부를 견고하게 하고 팽팽해지게 한다. 그러나, 처리 파라미터를 최적화할 수 없음으로 인하여 상당한 결점이 현재 상태의 당업계에 존재한다. RF 전류 인가는 다른 열에너지 전달 기술에 대하여 반대인 피부에서의 열 구배를 생성한다. RF 전류의 투입은 피부 상에서 약간의 거리만큼 떨어져서 배치된 전극들 사이에서 행해진다. 전류는 진피를 통하여 전극들 사이에서 전도되어서 진피의 온도는 피부 표면의 온도보다 더 빠르게 상승한다. 대부분의 피부 파라미터 측정 기구는 피부 표면 측정용으로 설계되기 때문에, 진피의 과도한 가열이 실감 전에 일어날 수 있다.

따라서, 열 급랭, 기계적 냉각 또는 내부 가열을 제어하도록 설계된 다른 기술의 부재 하에서의 RF 전류에 의한 처리는 당업계에서 회피되었다.

그러나, 게놈학 및 단백질체학의 생물공학에서의 최근의 진보를 이용하여, 본 발명자는 RF 전류의 진피 투입의 효과를 평가하는 방법을 개발하였다. 특히, 본 발명자는 진피 콜라겐 매트릭스, 진피 염증 및 리모델링에, 그리고 표피 분화에 연루된 것으로 확인된 잠재적인 유전자 군을 스크리닝하였다. 생성된 유전자 발현 프로파일을 기반으로 한 유전자 칩 구성요소 및 유전자 시그너쳐는 특정 RF 전류 처리 파라미터, 조건 및 요법에 처해질 때 잠재적인 유전자의 차등적 조절의 분석 및 점검에 의해 결정되었다.

피부층에 및/또는 피부층 내로 전달되는 에너지는 예를 들어 고주파 및 마이크로파를 포함하는 RF 에너지의 형태일 수 있다. RF 에너지 기구의 예가 하기 미국 특허 제6,889,090호; 제6,702,808호; 제6,662,054호; 제5,569,242호; 제5,755,753호; 제6,241,753호; 제6,430,446호; 제6,350,276호; 제5,919,219호; 제5,660,836호; 제6,413,255호; 제6,228,078호; 제5,366,443호; 및 제6,766,202호에 개시되어 있다.

본 발명의 방법은 포유류 피부 부위에 제1 개인 케어 조성물 및 선택적으로 제2 개인 케어 조성물을 도포하는 단계를 포함한다. 제1 및 제2 개인 케어 조성물은 로션, 크림, 세럼, 폼, 젤, 스프레이, 연고, 마스크, 스틱, 보습제, 패치, 파우더, 및/또는 와이프를 포함하지만 이로 한정되지는 않는 다양한 형태일 수 있다. 일 실시 형태에서, 제1 개인 케어 조성물은 에너지 전달 이전에 및/또는 에너지 전달 동안 도포된다. 대안적인 실시 형태에서, 제2 개인 케어 조성물은 제1 조성물의 도포 및 에너지 전달 이후에 적용된다. 선택적으로, 본 발명의 방법은 컨디셔닝제를 함유하는 제3 개인 케어 조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함할 수도 있다. 일 실시 형태에서, 제3 개인 케어 조성물은 제1 개인 케어 조성물의 도포 이전에 적용된다. 바람직하게는, 제3 개인 케어 조성물은 에너지를 전달하기 24시간 이상 이전에 도포된다. 대안적인 실시 형태에서, 제1 개인 케어 조성물은 하루에 두 번 도포되며, 에너지는 하루에 한 번, 대안적으로는 1주일에 한 번, 그리고 대안적으로는 1개월에 한 번 전달된다. 일 실시 형태에서, 제1 개인 케어 조성물은 하루에 두 번 피부에 도포되고, 에너지는 1주일에 한 번 피부에 전달된다.

제1, 제2 및 제3 개인 케어 조성물은 다양한 성분을 함유할 수 있으며, 이의 비제한적인 예는 문헌[The CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook, Tenth Edition (2004)]에서 찾아볼 수 있다.

본 발명의 조성물은 50% 내지 99.9%의 피부학적으로 허용가능한 담체를 함유할 수도 있다. 본 발명의 담체는 에멀젼 형태이다. 본 명세서에서, "에멀젼"은 일반적으로 수성 상 및 오일 상을 포함한다. 오일은 동물, 식물, 또는 석유로부터 유래된 것일 수 있으며, 천연 또는 합성 오일일 수 있고, 실리콘 오일을 포함할 수 있다. 에멀젼 담체는 수중유, 유중수, 수중유중수, 및 실리콘중수중유 에멀젼을 포함하지만, 이로 한정되는 것은 아니다. 일 실시 형태에서, 피부학적으로 허용가능한 담체는 수중유 에멀젼, 및 대안적으로는 수중실리콘 에멀젼을 포함한다. 에멀젼은 추가로 습윤제, 예를 들어 글리세린, 및 비이온성, 양이온성 및/또는 음이온성 유화제를 함유할 수도 있다. 적합한 유화제가 예를 들어, 디커트(Dickert) 등에게 허여된 미국 특허 제3,755,560호, 딕슨(Dixon) 등에게 허여된 미국 특허 제4,421,769호, 및 문헌[McCutcheon's Detergents and Emulsifiers, North American Edition, pages 317-324 (1986)]에 개시되어 있다.

광범위한 양의 본 발명의 조성물을 이용하여 피부 상태를 개선시킬 수 있다. 피부에 도포되는 개인 케어 조성물의 양은 신체적 위치 및 요망되는 효과에 따라 달라질 수 있다. 예시적인 양은 0.1 ㎎/㎠ 내지 40 ㎎/㎠을 포함한다. 하나의 유용한 적용 양은 0.5 ㎎/㎠ 내지 10 ㎎/㎠이다.

피부에서 또는 대안적으로 피부 표면에 도포되는 조성물에서 온도 변화가 동시에 유발될 수도 있다. 이 온도 변화는 전달된 에너지 그 자체에 의해 유발되는 임의의 온도 변화 이외의 것이다. 예를 들어, 피부가 에너지 전달 이전에 가열될 수 있거나, 대안적으로는 피부가 에너지의 전달 전, 전달 동안 및/또는 전달 후에 냉각될 수 있다.

광범위한 소비자 연구뿐만 아니라 처리 후 유전자 시그너쳐 및 유전자 패널도 이용하여, 처리 영역의 크기를 최적화하는 요법 구역들을 개발하고 최적 처리 시간을 개발하였다. 당업계의 교시와는 반대로, 큰 영역에 걸친 기구의 사용은 최상의 처리 방법이 아님이 발견되었다. 너무 큰 영역이 처리될 때에는 소비자가 그 영역을 다시 스위핑하기 전에 시작 부분이 냉각되어 복원될 수 있다. 너무 작은 영역이 처리될 경우, 소비자는 과다처리 및 불필요한 손상의 위험을 무릅쓰게 된다. 게다가, 처리 그 자체는 소비자에게 있어서 노동 집약적이며, 상기 처리를 분별있는 일정 부분(discreet chunk)으로 나누는 것은 소비자가 당해 요법에 완전히 순응하게 하는 것을 더욱 용이하게 한다. 이와 마찬가지로, 기구에 사용되는 개인 케어 조성물은, 소비자가 이것을 작은 영역에 도포하고, 그 영역을 처리하고, 그 후 임의의 남아있는 개인 케어 조성물을 제거할 수 있다면 소비자에게 더욱 더 매력적이게 된다. 전체 얼굴, 또는 심지어 얼굴의 절반에 개인 케어 조성물을 바르는 것은 처리 경험을 불쾌하게 할 수 있다. 이는 다시 소비자 순응성에 부정적인 영향을 미친다.

이제 도 10으로 되돌아가면, 소비자(62)의 눈가 주름 영역(60)은 파선형 원으로 식별되고, 눈(64)의 위 및 아래와 각각의 눈의 외측 모서리에 인접하여 나타난다. 눈가 주름 영역(60)은 인간이 노화되어 환경적 상해에 처해지게 됨에 따라 주름살 및 잔주름이 형성되기 쉽다는 것이 잘 알려져 있다. 도 11에는 구역 A(70)가 도시되어 있으며, 여기서 구역 A 내의 화살표는 기구(도시되어 있지 않음)의 예시적인 처리 경로를 보여주도록 도시되어 있다. 처리 횟수가 위에 주어져 있다. 도 10에는 소비자(62)의 동일한 눈 위에 있는 그리고 눈가 주름 영역(60)과 겹치는 구역 B(72)가 도시되어 있다. 예시적인 화살표는 가능한 처리 경로를 예시하도록 도시되어 있다. 이러한 방식으로 구역 A(70) 및 구역 B(73)를 규정함으로써, 눈가 주름 영역(60)은 구역 A 및 구역 B의 눈가 주름 이외의 부분만큼 길게 2회 처리된다. 이는 중요한 발견인데, 그 이유는 처리를 필요로 하는 소비자 얼굴 상의 대부분의 잔주름 및 주름살이 눈가 주름 영역에 있기 때문이다.

도 13 및 도 14에는 소비자(62)의 다른 눈(64) 상의 구역 C(74) 및 구역 D(76)가 도시되어 있다. 기대되는 바와 같이, 이들 처리 영역은 구역 A 및 B와 실질적으로 유사하며 동일한 방식으로 처리된다.

대안적인 처리 프로토콜이 도 15 및 도 16에 도시되어 있으며, 여기서 구역 E(80) 및 구역 F(82)가 소비자(62) 상에 도시되어 있다. 이들 "C"형 처리 영역은 눈가 주름 영역(60; 도 10)을 각각의 패스(pass)에서 단지 1회 처리하지만, 더욱 긴 "C"형 처리 영역은 기구가 다른 패스를 위하여 되돌아가기 전에 처리된 각각의 피부 영역이 약간 냉각되게 한다. 따라서, 소비자의 편안함이 증가되지만, 눈가 주름 영역(60)(도 10)은 단지 1회의 처리 사이클 동안 처리된다.

제2 개인 케어 조성물은 선택적으로 상기에 설명된 방법과 함께 사용될 수도 있다. 제2 개인 케어 조성물은 제1 개인 케어 조성물 및 가열 기구를 이용하는 연속적인 처리 기간들 사이에 사용될 수도 있다. 제2 개인 케어 조성물은 바람직하게는 제1 개인 케어 조성물에 존재하지 않는 하나 이상의 피부 케어 활성제를 함유한다.

RF의 인가 및 진피를 통한 RF 전류의 투입을 포함하는 처리 요법은 RF 처리의 원하는 효과를 최적화하기 위하여 처음으로 설계될 수 있다. 유전자 발현 데이터의 분석 및 점검시에, 놀랍게도, 잠재적인 유전자 데이터세트가 더 문제시되는 염증성 사이토카인 손상 응답의 부재 하에서 원하는 호르메틱 스트레스-유도된(hormetic stress-induced) 진피 리모델링 및 진피 콜라겐의 증가를 제공하기 위하여 처리 요법을 최적화하는 데 있어서 특정한 유용성을 갖는 3가지의 하위세트로 줄여질 수 있음이 발견되었다. 본 발명자가 알고 있는 한, 이는 게놈학이 RF 전류 기술을 이용하는 미용적 처리에 적용된 처음임을 나타낸다. 발현 프로파일은, 바람직하지 못한 생물학적 효과와 관련된 전통적인 손상을 회피하면서 바람직한 진피 리모델링을 개시 및 유지하는 양성 호르메틱 스트레스를 제어되고 최적화된 투입이 제공함을 나타낸다. 본 발명은 신규한 유전자 칩, 유전자 시그너쳐, 스크리닝 방법, 및 이들 발견에 근거한 최적화가능한 요법을 제공한다.

잠재적인 유전자로 조사된 유전자는 진피 매트릭스의 완전성과 관련된 유전자(FBN1, FBLN1, TNXB, FN1, LOXL2, COL3A1, COL1A1, ELN 및 LOXL1), 진피 염증 개시되는 리모델링과 관련된 유전자(TIMP2, IL1A, TIMP1, TNF, MMP1, MMP9, MMP3, SOD2 및 IL1B) 및 표피 장벽 기능과 관련된 유전자(KRT2, KRT6A, CLDN1, LOR, FLG, IVL, DRT10, AQP3, 및 KRT14)를 포함한다. 이들 유전자의 발현 데이터의 분석에서 나오는 하위세트는 표 1(진피 마커), 표 2(매트릭스 리모델링 마커, 즉 양성 호르메틱 스트레스 개시자) 및 표 3(염증성 사이토카인 응답의 마커, 즉 복구 응답 밖의 손상)에 개시되어 있다.

유전자 발현 프로파일은 소정 세트의 조건들에 대한 세포 응답에 관한 정보를 제공한다. 유전자는 메신저(messenger) RNA(mRNA)를 만드는 것에 대한 지시를 함유한다. 그러나, 임의의 주어진 시점에서, 각각의 세포는 그가 지닌 유전자들의 단지 일부로부터 mRNA를 만든다. 유전자는 이것이 mRNA를 생성하는 데 사용될 경우 "턴온(turn on)된" 것으로 지칭되며, 그렇지 않으면 "턴오프(turn off)된" 것으로 지칭된다. 용어 "조절"은 유전자 제어 상태와 상이한 전사 상태의 트리거링을 말한다. 예를 들어, "상향조절"은 단순히 턴온을 포함할 수 있거나, 또는 대조 또는 기준 조건에서 나오는 기저선 속도보다 큰 전사 속도의 증가를 말할 수 있다.

발현 프로파일링에서, 2가지 이상의 실험 조건에서 발현되는 mRNA의 상대적인 양이 측정된다. 변경된 수준의 mRNA는 mRNA에 의해 코딩되는 단백질에 있어서의 변화된 필요성을 시사한다. 예를 들어, 효소 촉매 또는 보조인자의 증가된 전사가 세포 환경에서의 효소 기질의 증가된 수준에 응답하여 관찰된다.

일반적으로, 유전자 발현 프로파일은 변화된 실험 조건 하에서 상당한 차이를 보이는 유전자를 포함한다. 이는 전형적으로 전체 게놈을 포함할 수도 있는 일부 데이터세트의 하위세트이다. 소정 유형의 세포에 있어서, 조합된 발현 패턴이 주어진 조건에 특유하게 특징적인 유전자 군은 이 조건의 유전자 시그너쳐를 구성한다. 유전자 시그너쳐는 예를 들어 특정 처리에서 이득을 볼 수 있는 환자를 선발하기 위하여, 또는 원하는 시그너쳐를 최대화하도록 처리 프로토콜을 설계하기 위하여 사용될 수 있다.

잠재적인 유전자 데이터세트의 유전자 발현 프로파일은 마이크로어레이를 이용하여 결정될 수 있다. 예시적인 cDNA 마이크로어레이는 구매가능하며, 애질런트 테크놀로지즈(Agilent Technologies), 어피메트릭스 인크.(Affymetrix Inc.; 미국 캘리포니아주 산타 클라라 소재), 나노겐(Nanogen; 미국 캘리포니아주 샌디에고 소재) 및 프로토진 래보러토리즈(Protogene Laboratories; 미국 캘리포니아주 팔로 알토 소재)와 같은 회사로부터 구매될 수 있다. 본 발명의 방법에서 이용되는 발현 프로파일을 생성하기 위하여 또한 실행될 수 있는 특정 혼성화 기술은 개시 내용이 본 명세서에 참고로 포함된 미국 특허 제5,143,854호; 제5,288,644호; 제5,324,633호; 제5,432,049호; 제5,470,710호; 제5,492,806호; 제5,503,980호; 제5,510,270호; 제5,525,464호; 제5,547,839호; 제5,580,732호; 제5,661,028호; 제5,800,992호와; 국제특허 공개 WO 95/21265호; WO 96/31622호; WO 97/10365호; WO 97/27317호; 유럽 특허 제373 203호; 및 유럽 특허 제785 280호에 개시된 기술을 포함한다. 일반적으로 이들 방법에서, 발현이 분석되는 표현형 결정 유전자들 각각에 대한 프로브를 포함하는 "프로브" 핵산의 어레이는 상기에 개시된 바와 같이 표적 핵산과 접촉된다. 접촉은 혼성화 조건, 예를 들어 엄격한 혼성화 조건 하에서 실시되며, 미결합 핵산은 그 후 제거된다. 혼성화된 핵산의 생성된 패턴은 프로빙된 유전자들 각각의 발현에 관한 정보를 제공하며, 여기서 발현 정보는 유전자가 발현되는지의 여부, 그리고 전형적으로 어느 수준에서인지에 관한 것이며, 발현 데이터, 즉 발현 프로파일은 정성적인 것 및 정량적인 것 둘 모두일 수 있다. 대안적으로, 발현 프로파일은 mRNA를 측정하는 정량적 PCR법 또는 다른 정량적 방법에 의해 결정된다.

본 발명의 일 실시 형태는 포유류 피부의 조직 볼륨을 처리 온도로 가열하기에 충분한 상기 조직 볼륨에서의 고주파 전류의 발생에 응답하여 포유류 피부에서 조절되는 유전자를 포함하는 유전자 패널을 제공한다. 적어도 하나의 유전자는 표 1 또는 표 2로부터 선택되며, 적어도 하나의 유전자는 표 3으로부터 선택된다. 특정 실시 형태에서, 적어도 하나의 유전자는 상기 3개의 표 각각으로부터 선택된다. 본 발명에 따른 모든 유전자 패널은 표 3으로부터의 적어도 하나의 유전자를 포함하는 것으로 고려되며, 그 이유는 이들 유전자에서의 발현 쉬프트(shift)의 결여가 "불량한" 손상 응답의 결여를 나타내기 때문이다. 프로브는 원하는 효과를 위하여 또는 처리된 대상에서 처리 요법의 검증을 위하여 처리 요법을 설계, 스크리닝, 수정 또는 모니터링하는 것에서 유용성을 갖는 매우 특이한 마이크로어레이를 제작하기 위하여 본 발명의 유전자 칩을 구성하는 각각의 유전자를 목표로 하도록 설계될 수 있다. 본 발명에 따른 유전자 패널을 구성하는 유전자에 혼성화하여 그를 검출할 수 있는 고정화된 핵산 프로브의 세트를 포함하는 마이크로어레이가 고려된다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, "프로브"는 자연 발생적이든지 합성에 의해 생성되든지 간에 올리고뉴클레오티드, 폴리뉴클레오티드 또는 DNA 분자를 말하며, 이는 프로브에 대하여 상보성인 서열을 갖는 핵산에 특이적으로 혼성화할 수 있다. 본 발명의 프로브는 DNA 마이크로어레이 기재 내의 고형 지지체에 부착된 올리고뉴클레오티드를 특정적으로 말한다. 프로브는 단일 가닥 또는 이중 가닥 중 어느 하나일 수 있다. 전형적으로 프로브는 15-25개 이상의 뉴클레오티드를 함유하지만, 이것은 더 적은 뉴클레오티드를 함유할 수도 있다. 본 발명에서 프로브는 특정 표적 핵산 서열의 상이한 가닥들에 대하여 상보성이도록 선택되며, 따라서 소정의 조건의 세트 하에 각각의 표적 가닥과 특이적으로 혼성화될 수 있도록 충분히 상보성이어야 한다. 따라서, 프로브 서열은 표적의 정확한 상보성 서열을 반영할 필요는 없다. 예를 들어, 비상보성 뉴클레오티드 단편은 프로브의 5′ 또는 3′ 말단에 부착될 수 있으며, 이때 프로브 서열의 나머지는 표적 가닥에 대하여 상보성이다. 대안적으로, 비상보성 염기 또는 더욱 긴 서열은 프로브 내에 산재될 수 있되, 단, 프로브 서열은 표적 핵산의 서열과의 상보성이 충분하여서 그와 특이적으로 어닐링된다.

본 발명의 다른 실시 형태는 효과를 포유류 피부에 제공하는 방법을 포함한다. 효과는 피부 손상성 염증성 사이토카인 응답의 부재 하에 포유류 피부의 진피층에서의 진피 리모델링 및/또는 콜라겐 형성의 유도를 포함하고, 본 방법은 표 3에 열거된 유전자의 발현의 상향조절은 피하면서 포유류 피부의 조직 볼륨을 처리 온도로 가열하기에 충분한 처리 사이클 동안 상기 조직 볼륨에서의 고주파 전류의 발생 단계를 포함한다. RF 전류는 하나의 처리 사이클에서 복수회 발생될 수 있다.

본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "처리하다" 및 "처리" 등은 일반적으로 목표로 하는 생물학적 응답을 토대로 하여 원하는 미용 효과 또는 심미적 효과를 얻는 것을 말한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "처리"는 포유류, 특히 인간에서의 처리를 커버하며, (a) 미용적으로 바람직하지 못한 피부 상태, 예를 들어 잔주름, 주름살, 색소 과다 침착된 반점, 및 자연 노화(chronological aging) 또는 환경적 노화에서 생기는 다른 피부 불규칙성 또는 피부 상에의 영향의 예방 또는 회피, (b) 미용적으로 바람직하지 못한 피부 상태의 출현의 억제, 개선 또는 지연; (c) 미용적으로 바람직하지 못한 피부 상태의 퇴행의 역전 또는 야기를 포함한다.

본 발명에 따른 하나 이상의 처리 사이클은 처리 기간에 걸쳐 행해질 수 있다. 처리 사이클은 원하는 응답을 달성하는 데 필요한 만큼 짧은 지속 기간일 수 있다. 특정 실시 형태에서, 처리 사이클은 약 1분 이하인 반면, 다른 특정 실시 형태에서, 처리 사이클은 약 1분 초과이다. 다른 특정 실시 형태에서, 처리 사이클은 약 1분 내지 약 6분간 지속되며, 다른 실시 형태에서 약 2분 내지 약 6분간 지속된다. 본 발명에 따른 처리 기간은 1회 이상의 처리 사이클을 포함하며, 특정 실시 형태에서는 1주 이상이고, 적어도 1회의 처리 사이클을 포함한다. 다른 특정 실시 형태에서, 처리 기간은 1주 내지 12주이다. 더욱 특정한 실시 형태에서, 처리 기간은 3주 내지 8주이다. 소정의 실시 형태에서, 처리 기간의 각각의 주는 1 내지 6회 처리 사이클을 포함하지만, 당업계에서는 이것이 처리되는 개체의 특유한 특징에 따라 달라질 수 있음이 이해된다.

일반적으로, RF 전류 투입은 피부 표면에서보다 진피에서 더욱 높은 온도를 달성하지만, 피부 온도는 표면에서 가장 편리하게 그리고 비침습적으로 측정된다. 따라서, 소정의 실시 형태에서, RF 전류가 전도되는 조직 볼륨의 온도로서 본 명세서에서 정의되는 처리 온도는 조직 볼륨 위에서의 피부 표면 온도가 약 45℃ 미만이 되도록 한다. 더욱 특정한 실시 형태에서, 처리 온도는 조직 볼륨 위의 피부 표면 온도가 약 37℃ 내지 약 43℃가 되도록 한다.

본 발명에 따른 원하는 효과는 RF 전류가 전도되는 조직 볼륨으로부터 얻어지는 샘플로부터 mRNA를 추출하고; 표 1 및/또는 표 2로부터 선택되는 적어도 하나의 유전자 및 표 3으로부터 선택되는 적어도 하나의 유전자로 이루어진 유전자 패널의 발현 프로파일을 결정함으로써 평가될 수 있다. 발현 프로파일이 표 1 및/또는 표 2로부터 선택되는 유전자의 상향조절을 반영할 경우 효과를 나타내며, 이와 조합하여 표 3으로부터 선택되는 유전자의 발현이 실질적으로 변화가 없는 것은 효과가 제공되고 있음을 나타낸다.

일반적으로, 본 발명에 따른 유전자의 조절은 발현 배수 변화 데이터에서 반영된다. 많은 방법이 조건들 사이에서 차등적으로 발현되는 유전자를 확인하는 마이크로어레이 기반의 실험의 분석용으로 존재하고, 방법의 선택은 확인되는 유전자 세트에 영향을 줄 수도 있음이 당업계에 공지되어 있다. 변화 배수는 가장 재현가능한 결과를 제공하는 것으로 보인다. 변화 배수는 평균 대조군 관찰치와 평균 처리군 관찰치의 비로서 (또는 평균 로그 대조군 데이터와 평균 로그 처리군 데이터의 차이로서) 정의될 수 있다. 따라서, 1의 변화 배수는 대조군 관찰치에 비하여 변화가 없음을 나타낸다. 양의 변화 배수는 본 명세서에서 상향조절로 지칭되는 소정 시간 기간에 걸친 발현의 증가를 나타내며, 음의 변화 배수는 본 명세서에서 하향조절로 지칭되는 소정 시간 기간에 걸친 발현의 감소를 나타낸다. 변화 배수의 유의성은 통상적인 통계적 방법에 의해 결정될 수 있다.

본 발명의 소정 태양에 따르면, 효과는 처리 온도 및/또는 발현 프로파일에 응답하는 다른 처리 파라미터를 조정함으로써 최적화될 수 있으며, 여기서 표 1 및/또는 표 2로부터 선택되는 유전자들의 상향조절은 최대화되는 반면 표 3으로부터 선택되는 유전자들의 발현은 실질적 무변화에서 유지된다. 본 발명의 처리 요법은 유지 처리(maintenance treatment)를 포함할 수 있으며, 여기서 하나 이상의 유지 처리에 의해 처리 기간을 넘어서 효과가 유지되는데, 각각의 유지 처리는 적어도 하나의 유지 사이클을 포함한다.

본 발명의 피부 처리 요법은 핸드헬드 RF 전류 전달 기구를 통하여 전기 전도 RF 전류에 의해 열에너지를 인가하는 것을 고려한다. 본 발명에 따른 바람직한 RF 전달 기구는 피부 상에서 서로로부터 약간의 거리를 두고서 배치된 두 전극들 사이에서 전기적으로 전도되는 전류로서 RF를 전달한다. 본 발명의 효과를 달성하는 상기 전달 기구는, 기계적 냉각이 없을 때뿐만 아니라 전자기 스펙트럼의 가시광 또는 자외광 주파수의 전자기 방사선이 없을 때 그리고 조직 볼륨 쪽으로 향하는 보완적 단색광원 또는 다색광원이 없을 때에도 조직 볼륨을 통하여 고주파 전류를 전도한다.

본 발명의 소정의 실시 형태는 본 발명에 따른 효과의 제공에 있어서 임의의 에너지 전달 기구 또는 에너지 전달 기술들의 조합의 효능을 평가하는 능력을 제공한다. 따라서, 피부를 가열함으로써 피부에 효과를 제공하도록 설계된 에너지 전달 기구의 처리 효능을 평가하는 특정 방법은 에너지 전달 기구의 적용에 의해 피부를 처리하는 단계; mRNA를 처리된 피부의 샘플로부터 추출하는 단계; 및 본 발명에 따른 유전자 패널의 발현 프로파일을 생성하는 단계. 하기 실시예 3에 예시된 바와 같이, 본 발명에 따른 발현 프로파일을 생성하도록 조정(dial in)될 수 있는 파라미터 사양 내성을 포함하는 RF 전류 전달 기구가 존재한다. 적합한 기구는 시너론(Syneron)에 의해 제조된다. 본 발명의 게놈 응답 목표를 성취하도록 설계되지 않은 기구의 일례로는 스탑(STOP™)이라는 브랜드로 유럽에서 유통하고자 하는 울트라젠 리미티드(Ultragen Ltd)에 의해 제조된 핸드헬드 개인 용도 RF 전달 기구가 있다. 비교 목적으로 실시예 3에 또한 예시된 이 기구는 표 1 및 표 2의 유전자의 상향조절을 논리적으로 도출해 내지 못한다. 기구 사양은, 더욱 큰 피부 면적에 걸쳐 인가되는 실질적으로 더 적은 열에너지의 제공을 기반으로 하며 본 발명에 따른 기구 및 요법에 의해 성취되는 양성 호메오틱(homeotic) 효과를 성취하기 위해 요구되는 수준에는 도달하지 못할 수도 있는 요법을 수용하도록 설계된다.

본 발명의 다른 실시 형태에 따르면, 얼굴 피부 처리 요법의 스크리닝 방법이 제공된다. 본 방법은 피부 손상성 염증성 사이토카인 응답을 자극하지 않고서 포유류 피부에 콜라겐 및/또는 진피 리모델링 효과를 제공하는 데 있어서의 효능에 대하여 스크리닝된다. 본 방법은 일반적으로 얼굴 피부를 처리 요법에 따라 처리하는 단계; mRNA를 처리된 얼굴 피부의 샘플로부터 추출하는 단계; 본 발명에 따른 유전자 패널의 유전자 발현 프로파일을 생성하는 단계; 유전자 발현 프로파일을 기준 프로파일과 비교하는 단계; 및 발현 프로파일이 표 1 및/또는 표 2로부터 선택되는 유전자들의 상향조절 및 표 3으로부터 선택되는 유전자들의 조절의 상당한 결여를 반영하는 경우 얼굴 처리 요법이 유효하다고 결정하는 단계를 포함한다. 특정 실시 형태에서, 얼굴 피부 처리 요법은 고주파 전류 발생 기구를 이용하여 처리 사이클에 걸쳐 얼굴 피부의 제1 조직 볼륨을 관통하여 펄스화된 고주파 전류를 발생시키는 단계를 포함한다. 처리 요법은 고주파 전류 발생 기구를 이동시키는 단계 및 처리 사이클 동안 얼굴 피부의 제2 조직 볼륨을 관통하여 펄스화된 고주파 전류를 발생시키는 단계를 포함할 수 있다.

스크리닝 방법에서, 피부 영역은 표적 처리 영역, 특히 얼굴의 특징에 따라 선택된다. 얼굴 피부의 미용적으로 취약한 영역은 안와주위 및 입주위 영역을 포함한다. 따라서, 귀주위 피부로도 공지된 귀 주위의 얼굴 피부는 구조 면에서 처리 표적 영역에 가깝지만, 대수롭지 않은 생검 절차에서 생길 수 있는 흠의 경우 쉽게 보이지 않는다. 따라서 생검을 요구하는 본 발명의 태양에서, 요구되는 샘플은 처리된 귀주위 피부의 생검에 의해 얻어지며, 기준물은 전처리되거나 또는 비처리된 귀주위 피부의 생검에 의해 얻어진다. 일반적으로, 전처리되거나 또는 비처리된 귀주위 기준 피부는 처리된 귀주위 피부에 실질적으로 인접한 피부를 포함한다. 매우 특정한 실시 형태에서, 표 1 및/또는 표 2로부터 선택되는 유전자의 발현 프로파일은 기준물에 대한 변화 배수를 나타내는데, 이는 통계적으로 1보다 더 크다.

명백하게는, 본 발명은 얼굴 피부 이외의 피부에 효과를 제공할 수 있지만, 얼굴 피부가 예시적인 실시예에서 강조되는데, 그 이유는 이것이 가장 쉽게 자연적 및 환경적 노화 및 손상 둘 모두의 결과를 나타낸다는 점에서 가장 큰 미용적 처리상의 난제를 제기하고, 신체의 다른 영역 위의 피부보다 처음에 더 얇고 더 취약하기 때문이다. 또한, 얼굴 피부는 미용적 처리 기술의 소비자에게 가장 중요한 심미적 유의성의 영역이다.

소정 실시 형태에서, RF 전류의 인가에 의해 제공되는 효과는 펄스화된 고주파 전류의 발생과 함께 얼굴 피부에 미용적 활성제 또는 구성물을 적용함으로써 증대되거나 또는 향상될 수 있다. 상기 활성제 또는 구성물은 본 발명에 따른 유전자 발현 프로파일에 강화 또는 상승적 영향을 미칠 수 있다. 적합한 미용적 활성제의 비제한적 예에는 레티놀 프로피오네이트 및 이의 유도체, 카페인, 히알루론산, 및 일반적으로 식물 추출물이 포함된다.

본 발명에 따른 스크리닝 방법은 원하는 스크린 내성에 대하여 조정된, 처리 사이클, 처리 기간, 처리 온도 및 전달 기구와 관련하여 본 발명에 따른 처리 방법과 실질적으로 동일한 파라미터를 포함한다.

본 발명의 추가의 실시 형태에 따르면, 미용적 피부상 효과를 확인하는 데 적합한 차등 발현 유전자의 유전자 시그너쳐가 제공된다. 상기 효과는 피부 손상성 염증성 사이토카인 응답의 부재 하에서의 포유류 피부의 진피층에서의 진피 리모델링 및/또는 콜라겐 형성의 유도를 포함하며, 상기 유전자 시그너쳐는 표 1, 표 2 및 표 3 각각으로부터 선택되는 적어도 하나의 유전자를 포함한다. 일반적으로 유전자 시그너쳐는 특정한 특징, 형질 또는 생물학적 기능에 관련된 유전자의 데이터세트로부터 얻어진 유전자의 하위세트이다. 유전자 시그너쳐는 전부의 또는 일부분의 유전자 데이터세트로부터 얻어질 수 있으며, 본 발명에 따른 시그너쳐는 적어도 약 2가지의 유전자 또는 전체 데이터세트를 구성하는 수 이하의 임의의 수의 유전자로부터의 정보를 포함할 수 있다. 데이터세트의 하위세트가 사용될 경우, 하위세트는 상향조절되는 유전자, 하향조절되는 유전자, 실질적으로 조절되지 않는 유전자 또는 이들의 조합을 포함할 수 있다.

하기 실시예는 본 발명의 다양한 실시 형태들의 소정의 특징 및 이점을 예시하기 위하여 제공되며, 그 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.

실시예

실시예 1: 처리 프로토콜

본 실시예는 게놈 및 조직학적 평가를 행하기 위하여 얼굴 피부의 귀주위 영역을 처리하는 것을 예시한다. 따라서, 모든 처리는 대조 목적을 위하여 임상 환경에서 기술자에 의해 투입된다. 처리는 6주 동안 주당 3회, 구역당 4분으로 하여 총 16분 동안 처리 영역 내의 4개의 구역에 투입한다. 프로토콜은 대상내 대조 설계에서 분할된 얼굴/목 연구에 따르며, 이때 처리는 한 쪽의 귀주위 영역에만 적용되고, 모의(sham) 처리는 겔과 다른 한 쪽의 상응하는 귀주위 영역에 적용된 비동력 기구를 더한 것으로 이루어진다. 처리를 열 영상 카메라로 모니터링하여, 40-43℃의 표적 피부 표면 온도가 처음의 분 단위 시간(first minute) 내에 도달되고 유지되지만 각각의 4분간 처리 동안 초과되지는 않는 것을 보장한다.

처리 부위를 귀 바로 아래에 위치시키고 그에 중심을 둔다. 상기 부위는 폭이 대략 3.81 ㎝(1.5 in)이고 길이가 약 10.2 ㎝(4 in)이다. 처리된 피부의 영역이 너무 건조하거나 또는 너무 뜨거워질 경우, 가외의 겔을 적용할 수 있다. 대상의 얼굴 및 목은 청결하며, 로션, 방향제 등이 없다. 모발을 처리 영역으로부터 뒤로 클립핑(clip)한다.

기구 처리:

1. 하나의 펌프 (대략 1.4 g의 겔)를 처리 부위에 적용하고, 문지르지 않고서 고르게 펴바른다. 처리 영역 위의 볼로의 겔의 추가의 펌핑 공급(pump)을, 대상에 의해 표현되는 바와 같이 피부가 너무 뜨거울 경우 피부를 냉각시키기 위하여 처리 동안 필요할 경우 적용할 수 있다.

2. 기구를 켜고, 4분 타이머를 설정한다.

3. 기구 어플리케이터 헤드를 피부에 적용하고, 전후 움직임 및 가벼운 터치를 이용하여 처리 부위를 따라 이동시킨다. 처리 영역 전체에 걸쳐서 기구 헤드를 조작하면서 연속성을 유지한다. 피부와의 적당한 접촉은 접촉을 나타내기 위하여 계속하여 적색 신호를 보내야 하는 어플리케이터 상의 렌즈에 의해 나타낸다.

4. 열 카메라 영상을 처리 동안 모니터링한다. 30-60초 내에, 처리 영역 내의 피부는 40-43℃의 최적 온도에 도달한다. 열 영상 상의 색 패턴은 온도를 나타낸다. 일반적으로, 기구가 가온됨에 따라, 어플리케이터를 피부 전체에 걸쳐 빠르게 이동시켜 온도 상승에 의한 불편을 피하게 한다. 처리가 계속됨에 따라, 이동을 늦추어서 이상적인 온도를 유지한다. 기구가 따뜻하다고 느낄 것이지만 화상을 입히지는 않을 것임을 대상에게 경고한다.

5. 열 영상이 완전 적색인 영역을 나타낼 경우 온도는 43℃ 초과이다. 온도는 전후 움직임의 처리 속도를 증가시킴으로써, 처리 영역의 크기를 약간 증가시킴으로써, 전후 움직임과 8자 패턴을 번갈아 함으로써, 또는 이러한 만일의 사태를 위하여 볼 위에 침적시킨 가외의 겔에 어플리케이터 헤드가 터치하게 하여 더 많은 겔을 부가함으로써 제어한다.

6. 처리 영역이 최적 온도에 도달하지 못할 경우 또는 그 영역이 식을 경우, 전후 움직임은 처리 영역의 대부분이 표적 온도가 될 때까지 늦추어야 한다.

실시예 2: 생검 프로토콜

본 실시예는 본 발명의 소정의 태양들에 따라 평가 및 모니터링 목적으로 샘플을 수집하고 본 명세서에 개시된 데이터를 지원하기 위하여 사용되는 상대적으로 부드러운 생검 프로토콜을 예시한다.

30명의 성인 여성 대상에서 RF 전류 전달 기구를 사용하여 임상 생검 연구를 행하였다. 처리를 얼굴 피부의 귀주위(귀 주변) 영역에서 제공하였다. 귀주위 피부는 미용 분야에서 적합한 안와주위 대체물로서 공지되어 있다. 처리는 시너론 V8 기구 (실시예 3 참조), 및 표적 프로파일로서 4분간 가열 프로파일을 이용하여 임상적으로 투입하였다. 대상은 총 6주 동안 주당 3회 처리를 받았다. 생검을 행하여 피부의 조직학적 특성을 처리의 함수로서 점검하고, 게놈학적 프로파일을 생성하였다.

생검 절차:

목의 우측 및 좌측 둘 모두로부터의 귀주위 영역으로부터 하나의 4 ㎜ 생검체를 취하였다(이 영역은 귀 바로 아래에 위치함). 30 게이지(guage) 살균 니들을 이용하여, 2% 자일로카인을 에피네프린과 함께 함유하는 마취제를 생검할 피부 바로 아래에 주사한다. 일단 그 영역이 무감각함을 대상이 나타내면, 표준 무균 기술을 이용하여 적절한 크기의 펀치 생검체를 수집하고 이어서 봉합한다. 염화알루미늄의 20% 수용액을 필요할 경우 호메오스타시스(homeostasis)에 근거하여 사용한다. 생검 후, 펀치 부위를 정상적인 치유에 대하여 모니터링하고, 봉합사를 7일 후에 제거한다.

생검 후 샘플 취급:

생검 조직을 별도의 두 샘플로 분할하는데, 하나는 유전자 발현 검사용이고 다른 하나는 조직학적 평가용이다. 샘플은 피부 각질층으로부터 진피까지 그은 선에 대하여 평행한 선을 따라 동일한 절반으로 나눈다. 샘플 취급은 산업 표준에 따른다.

실시예 3: mRNA 추출 및 분석

본 실시예는 유전자 칩, 유전자 시그너쳐, 및 RF 전달 요법 설계를 인도하는 생물학적 모델의 발견을 포함하는 본 발명의 소정 실시 형태를 뒷받침하는 RNA 생체마커의 확인 및 분석을 예시한다.

실시예 2에 따른 4 ㎜ 생검체를 상기에 설명한 바와 같이 귀 바로 아래의 양쪽의 얼굴/목으로부터 2회 취하였는데, 한 번은 최종 처리 후 24시간에, 그리고 한 번은 처리 후 4주에 하였다.

생검 샘플은 1.5 ㎖ 조직 보관 시약(알엔에이레이터(RNAlater)(등록상표) 용액, 인비트로겐, 라이프 테크놀로지즈(Invitrogen, Life Technologies), 미국 캘리포니아주 칼스바드 소재)을 함유하는 2 ㎖ 원심분리 튜브로 옮겼다. 튜브를 2-8℃에서 하룻밤 냉장시켰다. 보관 시약을 제거하고, 샘플을 프로세싱할 때까지 냉동기 내에 -80℃에 두었다. 프로세싱 직전에, 샘플을 냉동기로부터 꺼내고, 페놀과 구아니딘 아이소티오시아네이트의 1.5 ㎖ 단일상 용액 (트라이졸(TRIzol)(등록상표) 시약, 인비트로겐, 라이프 테크놀로지즈, 미국 캘리포니아주 칼스바드 소재) 및 하나의 3 mM 탄화텅스텐 비드 (3 mM 텅스텐 카바이드(Tungsten Carbide) 비드, 퀴아젠(Qiagen), 카탈로그 번호 69997)를 각각의 튜브에 첨가하였다. 샘플을 믹서 밀(퀴아젠 인크.)에서 즉각 균질화하였으며, 이때 30/sec에서 4회의 3분간 쉐이드(shade)를 하고 어댑터를 각각의 쉐이드 이후에 젖혔다. 샘플을 12,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 잔해를 제거하였다. 그 후 상청액을 사전 스피닝한 페이즈 록 겔 헤비 튜브(Phase Lock gel heavy tube)(페이즈 록 겔 헤비 튜브, 에펜도르프(Eppendorf), 미국 뉴욕주 뉴욕 소재, 카탈로그 번호 0032-005-152)로 옮기고, 300 ㎕ 클로로포름(시그마(Sigma))에 첨가하고, 튜브를 과다 와동 없이 격렬하게 진탕시켰다. 샘플을 12,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하고, 그 후 상청액을 새로운 2 ㎖ 원심분리 튜브 내로 옮겼다.

800 ㎕의 70% 에탄올을 첨가함으로써 결합 조건을 조정하고, 튜브를 와동시켜 혼합하고, 그 후 잠깐 스피닝하였다. 830 ㎖의 샘플을 진공 매니폴드(manifold) 내의 알엔이지(RNeasy) 미니 스핀 컬럼으로 옮기고, 진공을 인가하였다. 남아있는 샘플(대략 21.1 ㎜(830 mil)을 동일한 알엔이지 컬럼 상으로 옮기고, 진공을 인가하였다. 오염물질은 알엔이지 컬럼 상에 700 ㎕ 및 500 ㎕의 완충제 RW1을 순차적으로 피펫팅함으로써 제거하였으며, 이때 각각의 헹굼 후에 진공을 인가하였다.

알엔이지 스핀 컬럼을 새로운 0.05 ㎜(2 mil) 수집 튜브로 옮기고, 상기 튜브를 14,000 rpm에서 2분 동안 원심분리하고, 상기 컬럼을 새로운 1.5 ㎖ 수집 튜브 내로 옮겼다. 잔류 에탄올을 각각의 컬럼의 내부 릿지(ridge)로부터 흡인하였다. 30 ㎕의 예열 무Rnase 물을 알엔이지 막 상에 직접적으로 피펫팅하고, 상기 막을 5분 동안 인큐베이션하고, 그 후 14,000 rpm에서 2분 동안 원심분리하였다. 그 후 용출물을 수집하여 즉시 사용가능한 물 중 RNA를 제공하였다.

단리 후, RNA 수율은 미국 캘리포니아주 산타 클라라 소재의 애질런트 테크놀로지즈, 인크.(Agilent Technologies, Inc.)로부터 입수가능한 RNA 6000 나노 랩칩(Nano LabChip)(등록상표) 키트 번호 5065-4476을 사용하여 결정하였다. RNA를 1단계 RT-PCR에 의해 평가하였다. RT-PCR 생체마커 분석에 있어서, RNA를 5 ng/웰의 최종 농도로 희석시켰다.

정제한 RNA를 RT-PCR 키트(큐스크립트(QScript™) 원스텝 패스트(One-Step Fast) MGB qRT-PCR 키트, 퀀타 바이오사이언스, 인크.(Quanta BioScience, Inc.), 미국 메릴랜드주 게터스버그 소재)를 이용하여 cDNA로 전환시켰다. 그 후 500 ng의 RNA를 큐스크립트 효소/완충제 믹스와 혼합하고, 키트 설명서에 따라 서멀 사이클러(thermal cycler)에서 진행시켰다. 그 후 1 ㎕의 생성된 cDNA를 퀀타 퍼펙타 마스터 믹스(Quanta Perfecta Master Mix)와 혼합하고, 하기 유전자를 위한 사전 검증된 프라이머를 함유하는 커스텀 어레이 플레이트(custom array plate)(미국 메릴랜드주 페더릭 소재의 에스에이바이오사이언시즈, 코포레이션(SABiosciences, Corp.)으로부터 입수가능한 커스텀 알티 프로파일러(Custom RT Profiler™) PCR 어레이) 전체에 걸쳐 분취시켰다: KRT2, KRT6A, CLDN1, LOR, FLG, IVL, KRT10, AQP3, KRT14, FBN1, FBNL1, TNXB, FN1, LOXL2, COL3A1, COL1A1, ELN, LOXL1, TIMP2, IL1A, TIMP1, TNF, MMP1, MMP9, MMP3, SOD2, 및 IL1B. 그 후 어레이 플레이트를 밀봉하고, 서멀 사이클러(미국 캘리포니아주 포스터 시티의 어플라이드 바이오시스템즈, 인크.(Applied Biosystems, Inc.)로부터의 스텝원플러스(StepOnePlus™) 리얼-타임 피시알 시스템 업그레이드(Real-Time PCR System Upgrade)에서 진행시켰다.

미국 메릴랜드주 프레더릭 소재의 에스에이바이오사이언시즈에 의해 제공된 데이터 분석 소프트웨어를 사용하여 데이터 분석을 수행하였다.

24시간 및 4주 표적 시점에서 상기에 열거한 27가지의 컴필레이션 유전자에 있어서의 발현 배수 변화 데이터는 위에 각각 도 4a 및 도 4b와 도 6a 및 도 6b에 개시되어 있다. 진피 매트릭스와 관련된 유전자는 90 및 91로 분류하며, 진피 염증 리모델링과 관련된 유전자는 92 및 93으로 분류하며, 표피 분화와 관련된 유전자는 함께 94 및 95로 분류한다. 예시적인 유전자의 배수 변화 데이터는 도 5a의 콜라겐 1A1, 도 5b의 엘라스틴, 및 도 7a의 콜라겐 1A1 및 도 7b의 엘라스틴에 개시되어 있다. 다수의 콜라겐 e1A1 유전자들과 엘라스틴 유전자들 사이의 동시 조절을 주목하라.

배수 변화 데이터를 점검 및 분석과 분류에 처하였으며, 놀랍게도, 당해 처리에 응답하여 매우 적은 조절을 보이는 유전자들이 분리될 때(IL1A, IL1B 및 TNF), 이들은 염증성 사이토카인 응답 유전자를 포함하는 반면, 콜라겐 합성 및 턴오버와 진피 리모델링에 관련된 유전자는 처리 조건 하에서 상향조절되었음이 발견되었다. 그에 따라, 배수 변화 데이터를 기초로 하여 선택된 유전자는 하기 표 1, 2 및 3에서 표로 만들어져 있다.

또한, 놀랍게도, 24개월에 존재하는 유전자 발현에 대한 처리 요법의 긍정적인 영향은 1개월 표적에서 거의 완화되지 않은 채 유지됨이 밝혀졌다. 유지 처리는 이를 넘어선 기간 동안 게놈상의 효과를 유지하는 데 바람직할 수 있다.

유전자 발현 프로파일은 번역 생성물에 있어서의 하류 상향조절을 반영함이 고려된다. 관찰된 배수 변화는 상대적으로 낮을 수 있지만, 장기간의 시간에 걸친 소정 단백질 및 효소의 합성에 있어서의 지속된 상향조절은 실질적으로 영속적인 미용 효과를 피부에 부여하는 것으로 여겨진다.

실시예 4: 개인 케어 조성물

하기는 본 발명의 기구에서 사용하기 위한 예시적인 개인 케어 조성물이다.

본 명세서에 개시된 치수 및 값은 언급된 정확한 수치 값으로 엄격하게 제한되는 것으로 이해되어서는 안 된다. 대신에, 달리 규정되지 않는 한, 각각의 그러한 치수는 언급된 값 및 그 값 부근의 기능적으로 등가인 범위 모두를 의미하고자 한다. 예를 들면, "40 ㎜"로 개시된 치수는 "약 40 ㎜"를 의미하고자 한다.

발명을 실시하기 위한 구체적인 내용에서 인용된 모든 문헌은 관련 부분에서 본 명세서에 참고로 포함되며; 임의의 문헌의 인용은 본 발명과 관련하여 이것이 종래 기술임을 용인하는 것으로 해석되어서는 안된다. 또한, 문서로 된 본 문헌의 용어의 임의의 의미 또는 정의가 참고로 포함된 문헌의 용어의 임의의 의미 또는 정의와 상충되는 경우에는 문서로 된 본 문헌의 용어에 부여된 의미 또는 정의가 우선할 것이다.

본 발명의 특정 실시 형태들이 예시되고 설명되었지만, 다양한 다른 변경 및 수정이 본 발명의 사상 및 범주로부터 벗어남이 없이 이루어질 수 있음이 당업자에게 자명할 것이다. 따라서, 본 발명의 범주 내에 있는 모든 이러한 변경 및 수정을 첨부된 특허청구범위에서 포함하도록 의도된다.

[표 1]

[표 2]

[표 3]

SEQUENCE LISTING <110> Weisgerber, David J. Annunziata, Nikki E. Maurer, Tia J. <120> Combined Energyand Topical Composition Application for Regulating the Condition of Mammalian Skin <130> 11689M <140> 13.089,908 <141> 2011-04-19 <150> 61/324,540 <151> 2010-04-19 <160> 43 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 11626 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(11626) <223> fibrillin 1 <400> 1 gggagccgcg gcagagactg tgggtgccac aagcggacag gagccacagc tgggacagct 60 gcgagcggag ccgagcagtg gctgtagcgg ccacgactgg gagcagccgc cgccgcctcc 120 tcgggagtcg gagccgccgc ttctccactg gcaggggccg cctgaagtgg gagcagcgcc 180 tggagaaggc gggaggagcc cggcccgggg gacgggcggc gggatagcgg gaccccggcg 240 gcgcggtgcg cttcagggcg cagcggcggc cgcagaccga gccccgggcg cggcaagagg 300 cggcgggagc cggtggcggc tcggcatcat gcgtcgaggg cgtctgctgg agatcgccct 360 gggatttacc gtgcttttag cgtcctacac gagccatggg gcggacgcca atttggaggc 420 tgggaacgtg aaggaaacca gagccagtcg ggccaagaga agaggcggtg gaggacacga 480 cgcgcttaaa ggacccaatg tctgtggatc acgttataat gcttactgtt gccctggatg 540 gaaaacctta cctggcggaa 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<221> cDNA <222> (1)..(2485) <223> bibulin 1, transcript variant A <400> 5 ctcctcccgg gcgggataat tgaacggcgc ggccctggcc cagcgttggc tgccgaggct 60 cggccggagc gtggagcccg cgccgctgcc ccaggaccgc gcccgcgcct ttgtccgccg 120 ccgcccaccg cccgtcgccc gccgcccatg gagcgcgccg cgccgtcgcg ccgggtcccg 180 cttccgctgc tgctgctcgg cggccttgcg ctgctggcgg ccggagtgga cgcggatgtc 240 ctcctggagg cctgctgtgc ggacggacac cggatggcca ctcatcagaa ggactgctcg 300 ctgccatatg ctacggaatc caaagaatgc aggatggtgc aggagcagtg ctgccacagc 360 cagctggagg agctgcactg tgccacgggc atcagcctgg ccaacgagca ggaccgctgt 420 gccacgcccc acggtgacaa cgccagcctg gaggccacat ttgtgaagag gtgctgccat 480 tgctgtctgc tggggagggc ggcccaggcc cagggccaga gctgcgagta cagcctcatg 540 gttggctacc agtgtggaca ggtcttccgg gcatgctgtg tcaagagcca ggagaccgga 600 gatttggatg tcgggggcct ccaagaaacg gataagatca ttgaggttga ggaggaacaa 660 gaggacccat atctgaatga ccgctgccga ggaggcgggc cctgcaagca gcagtgccga 720 gacacgggtg acgaggtggt ctgctcctgc ttcgtgggct accagctgct gtctgatggt 780 gtctcctgtg 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cctaccgctg catcaacatc cctggaagct tccagtgcag ctgcccctcg 1680 tctggctaca ggctggcccc caatggccgc aactgccaag acattgatga gtgtgtgact 1740 ggcatccaca actgctccat caacgagacc tgcttcaaca tccagggcgg cttccgctgc 1800 ctggccttcg agtgccctga gaactaccgc cgctccgcag ccacatgatc gtagggaact 1860 ctgcatgagg ccatcggtgc aggctggaga agagaaggca agttggcagg agtggagacc 1920 acgggcattt gagccacttc ctcatgtaac ttaacttgtg ccttcaggac ctgctcaagc 1980 ccgatcacgt atataccact tccatttgat gatggaatgc tgctgttcat gaccaacttt 2040 atggctagat gggtcagaaa gcacccagtt catgataggc agttcaggtc atatggtgac 2100 ttgatgaccc agagtcaaac attcagtttc caccaaagcc cagtaacagg ccaagagctg 2160 tctctcaaaa ggagagtagt tatctgcaga agatggcagg gccttgctcc gaaagcctag 2220 agaccgccac tgtgattcac ctatgggggc ctgccaaagg ctgcagccag catccttatc 2280 tgccactgac acctcaagca acattggatc tgctgggtca tatggcccaa gtggcagagc 2340 aacttgcaca acagcctgga cctgtcatag agctttctcc tgttctggac cccactcaaa 2400 actggcagcc tttcaggtca ctcgataaat gtgctggagt aacactcaaa cgaggaatgt 2460 gttgcctcca aaatccaata ggccc 2485 <210> 6 <211> 13143 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(13143) <223> tenascin XB, transcript variant XB <400> 6 tcctcccctt ctcctcccct gctcgctgca gactccctcc tcactgtcgc tgccgagatc 60 cacagtcggt tgtggctcag cccctgttgc aggggacaag tgagggagac ttccctgtcc 120 tgccctgaga cgccgccctc ccggggttgg ggacagagca ggtgcagagg cactgcagct 180 gctcggttgc ccagcctcct gaatgatgcc agcccagtat gctctaacct ccagcctggt 240 tctcctggtg ctgctgagca cagccagagc aggccccttc tcttcacggt ccaatgtgac 300 actgccagcc ccccggcccc ctccccagcc agggggccac acagtggggg ctggagtggg 360 aagcccctct tctcagcttt acgagcacac agtggaagga ggggagaagc aggtggtatt 420 cacccaccgc attaacctgc ccccttccac tggctgtggc tgtcccccag gcaccgagcc 480 cccagtcctt gcttcagagg tacaggccct gagggtccgt ctagagatcc tggaggagtt 540 ggtgaagggg ctcaaggaac agtgcactgg gggatgttgt cctgcctctg cccaagctgg 600 cacaggtcag acagatgtgc ggaccctctg cagtctccat ggtgtgtttg atctgagccg 660 ctgcacctgt tcctgtgagc caggctgggg tgggcccacc tgctcagacc ccacagatgc 720 tgagatccct ccctcttccc caccctcagc ctcggggtcc tgcccagatg actgcaatga 780 tcagggtcgc tgtgtccgtg gtcgttgcgt gtgctttccc ggctacactg gccccagctg 840 tggctggcca tcctgtcccg gggactgcca aggccgtggg cgctgcgtgc agggcgtgtg 900 tgtgtgccgg gcaggcttct caggccccga ctgcagccag cgctcctgcc ctcgaggttg 960 cagccagagg ggacgctgtg agggtgggcg ctgcgtgtgt gacccaggct acactggtga 1020 cgactgtggc atgaggagct gccctcgcgg ttgcagtcag agggggcgct gtgagaatgg 1080 gcgctgcgtg tgtaaccccg gctacactgg cgaggactgt ggggtgagga gctgccctcg 1140 gggctgcagc cagcggggac gctgcaagga cgggcgctgc gtgtgtgacc ccggctacac 1200 tggcgaggac tgtggtacgc ggagctgccc ctgggactgt ggcgagggcg ggcgctgcgt 1260 ggacggccgc tgcgtgtgct ggcccgggta cacaggcgag gactgcagca cgcggacatg 1320 tccgagggac tgccggggcc gcgggcgctg cgaggacggc gaatgcattt gcgacacggg 1380 ctacagcggg gacgactgcg gcgtgcgcag ctgccctggc gactgcaacc aaaggggccg 1440 ctgcgaggac ggccgctgcg tgtgctggcc ggggtacact ggaaccgatt gcggctcgcg 1500 cgcctgccca cgcgactgta gaggtcgcgg gcgctgcgag aacggcgtgt gtgtttgcaa 1560 tgcgggctac agcggcgagg actgcggtgt gcgcagctgt cctggggact gtcgtggccg 1620 gggccgctgt gagagtggcc gctgcatgtg ttggccgggg tacacaggcc gggactgcgg 1680 cacgcgcgcc tgtcctggcg actgtcgcgg gcgcgggcgc tgcgtggatg gccgctgcgt 1740 gtgcaacccg ggcttcaccg gtgaggactg tgggagccgt cgctgtcccg gggactgccg 1800 tgggcacggc ctttgcgagg atggcgtgtg cgtgtgtgac gcaggctact caggggaaga 1860 ctgcagcacg cgcagctgcc ccgggggctg ccgaggccgc ggccagtgcc tagatgggcg 1920 gtgtgtgtgc gaggacggct actctggcga ggattgcggt gtgaggcagt gcccgaatga 1980 ctgcagccag cacggcgtgt gccaggacgg tgtgtgcatc tgttgggaag gctacgtgag 2040 tgaggactgc agcatccgca cctgcccctc caactgccac gggaggggcc gctgtgagga 2100 agggcgctgc ctgtgcgacc caggctacac cggccctacc tgtgccaccc gcatgtgccc 2160 ggctgactgc cggggacgtg ggcggtgtgt gcaaggagtg tgcctgtgcc acgtgggcta 2220 tggcggtgag gactgcgggc aggaagagcc tccagccagc gcctgccctg gaggctgcgg 2280 gccccgggaa ctgtgccggg caggccagtg tgtgtgtgta gagggcttcc gaggccctga 2340 ctgtgccatc cagacatgcc caggggactg ccgtggccga ggagagtgtc acgatggcag 2400 ctgtgtctgc aaagatgggt atgctggcga agactgcgga gaagaggtgc caaccattga 2460 gggcatgagg atgcatctct tggaggagac aacagttcgg acagagtgga ccccggctcc 2520 tggccccgtg gatgcctatg aaattcagtt catccccacg acagaggggg cgagcccccc 2580 attcacagca cgggttccaa gctctgcctc agcctatgac cagagaggac tggcccctgg 2640 acaggagtac caggtcactg tccgagccct tcgagggacc agctggggcc ttcctgcctc 2700 caagaccatc accaccatga tcgatgggcc ccaggacctc cgagtggtgg ctgtgacacc 2760 gacaacactg gagcttggct ggctgcgtcc ccaggctgag gtggaccgat ttgtggtgtc 2820 ctacgtcagt gccggcaacc agagggtgag gctggaagtg ccccctgaag cagacgggac 2880 gctgctgact gacctgatgc caggcgtaga atatgtggtg actgtcacag cggagcgggg 2940 ccgggcagtc agctacccag cttctgtcag ggccaacaca gggtcctcac ccttgggcct 3000 cttggggact accgatgagc ctcctccctc aggcccctcg acgacgcaag gggcccaggc 3060 tcctctcctg cagcagcgcc cccaggagct gggagagttg agggtgctgg gcagagatga 3120 gacagggcgc ctccgtgtgg tctggaccgc ccagcctgac acctttgcct acttccaact 3180 gcgcatgcgg gtgcccgagg ggccgggggc acatgaggaa gtgctgccag gggacgtccg 3240 ccaggctctg gtgcctccac cccctcctgg aaccccgtat gagctgtcac ttcatggggt 3300 ccctcctggg ggcaagccct ctgaccccat catctaccaa ggcattatgg acaaggatga 3360 ggagaagcct gggaagtcct caggcccacc acgcctgggt gagctgacgg tgacagacag 3420 gacctccgac tccttgctcc tgcgctggac ggtccccgag ggcgagtttg actccttcgt 3480 gatccagtac aaagacaggg acgggcagcc ccaggtggtg cccgtggaag gaccccagcg 3540 ctcggccgtc atcacctccc tggatcctgg ccgcaagtac aaatttgtcc tgtatgggtt 3600 tgttggcaag aagaggcatg gtccgctggt ggctgaagcc aagatcttgc ctcagagtga 3660 cccaagtcca gggactccac cccacctggg aaacctgtgg gtgacagacc ctaccccaga 3720 ttcactgcac ctctcctgga ctgtccctga gggccagttt gacaccttca tggtccagta 3780 cagggacagg gatggacggc cccaggtggt acctgtggaa gggcccgagc gttcatttgt 3840 tgtctcctca ctggaccctg accacaagta cagattcact ctgtttggaa ttgcgaacaa 3900 gaagcggtat ggccccctca cggccgatgg caccactgct ccagagagga aagaggagcc 3960 cccccgccct gagttcctgg agcagcccct cctgggggaa ctgacagtga ccggcgtgac 4020 cccagactcc ttgcgtctct catggacagt ggcccagggc cccttcgact cattcatggt 4080 ccagtacaag gatgcacagg ggcagcccca ggcagtgcct gttgcggggg atgagaatga 4140 ggttactgtc cccggcctgg atcccgaccg gaagtataag atgaacctct acgggcttcg 4200 tggcaggcag cgtgtggggc ccgagtctgt ggtggccaag actgctcctc aggaggatgt 4260 ggacgagacc cccagcccca cagaactggg cacggaggcc ccggagtccc ccgaggagcc 4320 gctcctgggg gagctgacag tgacaggatc ctcccctgat tcgctgagcc tcttctggac 4380 cgtcccccag ggcagcttcg actctttcac cgtgcagtac aaggacaggg atgggcggcc 4440 ccgggcggtg cgtgttgggg gcaaggagag tgaggtcacc gtgggaggcc tagagcccgg 4500 gcacaagtac aagatgcacc tgtacggcct ccacgagggg cagcgcgtgg gcccggtgtc 4560 cgccgtgggc gtgacagccc cacaacaaga agagacccct ccagccactg agtccccgct 4620 ggagccacgc ctaggagagc tgacagtgac agatgtgacc cccaactctg tgggcctctc 4680 ctggacagtc cccgagggcc agtttgactc cttcatagtc cagtacaagg acaaggacgg 4740 gcagccccag gtggtgccgg tggcggcaga ccagcgagag gtcacagtct acaacctgga 4800 gcctgagaga aaatataaga tgaacatgta tggactacat gatgggcaac gcatgggccc 4860 cctgtctgtg gtcatcgtga cggctcccct cccaccagcc ccagccacag aggcctccaa 4920 gcctcccctg gagccacgcc taggggagct gacagtgacg gatataaccc ctgactctgt 4980 gggcctctca tggacagtcc ctgagggtga attcgactcc tttgtggttc agtacaagga 5040 cagggacggg cagccccagg tggtgcccgt ggctgcagat cagcgggagg tcactatccc 5100 tgacctggaa ccctcccgca agtacaagtt cctgctcttt gggatccagg atgggaaacg 5160 acgcagccca gtctctgtgg aggcaaagac ggttgcccga ggtgacgcca gcccaggggc 5220 cccaccccgc cttggggagc tgtgggtgac agaccccacc ccagactcac tgcgcctctc 5280 ctggacggtt cctgagggcc agttcgactc ttttgtggtc cagttcaagg acaaagacgg 5340 gccccaggtg gtgcccgtgg agggccatga gcgctctgtc actgtcaccc ctctggatgc 5400 cggccgcaag tacagattcc tcctctatgg cctcctgggc aagaagcgcc atggccctct 5460 cactgccgac ggcaccacgg aagcccggag tgctatggat gatactggaa caaagcgtcc 5520 cccaaaaccc cgtctggggg aggagctgca ggtgaccacc gtgacccaga actccgtggg 5580 cctctcctgg acagtccctg agggccagtt tgactccttt gtggtccagt acaaagacag 5640 ggacgggcag ccccaggtgg tgcccgtgga gggcagcctc agggaggtca gcgtgccggg 5700 cctggaccct gcccacaggt acaagctgct gctctacggg ctgcaccacg gcaagcgtgt 5760 gggccccatc tcggccgtcg ccattactgc cggcagggaa gaaacggaaa ctgagaccac 5820 ggccccgacc cctccagcgc ctgagcccca cctcggggag ttgacagtgg aggaggccac 5880 gtcacacacc ctgcatctct cctggatggt gactgaggga gaatttgact ccttcgaaat 5940 ccagtacaca gatagagacg ggcaactcca aatggtccgc ataggaggtg accggaatga 6000 catcaccctc tctggcctgg aatccgacca cagatacctg gtgaccctgt atggtttcag 6060 tgatgggaag catgtaggtc ctgtccatgt cgaggccctg acagtcccgg aggaggagaa 6120 gccttcagaa cctcccaccg caacccccga gccccccatc aagcctcgcc tgggggagct 6180 gaccgtgaca gatgccaccc ctgactccct cagcctgtcc tggacagttc ccgagggaca 6240 gtttgaccac ttcctggtcc agtacaggaa tggagatggg cagcccaagg cagtgagggt 6300 gccagggcac gaggaagggg tcaccatctc gggcctggag ccagaccata aatacaagat 6360 gaacctgtac ggcttccacg gtggccagcg catgggccct gtgtctgtcg tcggggtgac 6420 agctgcagag gaagagaccc ccagccccac agaacccagc atggaggccc cggagcccgc 6480 tgaggagccg ctcctggggg agctaacagt gacaggatcc tcccctgact cgctgagcct 6540 ctcctggacc gtcccccagg gccgcttcga ctccttcacc gtgcagtaca aggacaggga 6600 cgggcggccc caggtggtgc gtgttggggg cgaggagagt gaagtcaccg tggggggcct 6660 ggagcctggg cgcaagtaca agatgcacct gtacggcctc cacgaggggc ggcgcgtggg 6720 cccagtgtct gctgtgggcg tcacggcccc cgaagaggag tcccctgatg ctcctcttgc 6780 aaagctgcgc ctagggcaga tgacagtgag agacatcacc tccgactccc tcagcctctc 6840 ctggacagtc cccgagggcc agtttgacca tttcttggtc cagtttaaga atggggacgg 6900 gcagcccaag gcggtgcggg tgccgggaca cgaggatggg gtcaccatct cgggcctgga 6960 gccagaccac aagtacaaga tgaacctgta cggcttccac ggtggccagc gcgtgggccc 7020 cgtgtctgct gttggtttaa ctgccccagg aaaggatgaa gaaatggccc cagcctcgac 7080 agaacctccc acccctgaac cccccatcaa gcctcgcctg gaggagctga ccgtgacaga 7140 tgcgacccct gactccctca gcctgtcctg gacggttccc gagggacagt ttgaccactt 7200 cctggtccag tacaagaatg gggatgggca gcccaaggca acacgggtgc caggacatga 7260 ggacagggtc accatctccg gcctggagcc agacaacaag tacaagatga acctgtacgg 7320 cttccacggt ggccagcgtg tgggccccgt gtctgccatc ggggtgacag ctgcagagga 7380 agagaccccc agccccacag aacccagcat ggaggccccg gagccccctg aggagccgct 7440 cctgggggag ctaacagtga caggatcctc ccctgactcg ctgagcctct cctggaccgt 7500 cccccagggc cgcttcgact ccttcaccgt gcagtacaag gacagggacg ggcggcccca 7560 ggtggtgcgt gttgggggcg aggagagcga ggtcaccgtg gggggcctgg agcctgggcg 7620 caaatacaag atgcacctgt atggcctcca cgaggggcgg cgcgtgggcc cggtgtccac 7680 cgtgggcgtg actgccccac aagaggatgt ggacgagacc cccagcccta cagaaccagg 7740 cacagaggcc ccagggcccc ccgaggagcc tctcctgggg gagctgacag tgacaggatc 7800 ctcccctgac tcgctgagcc tttcctggac cgtcccccag ggccgctttg actccttcac 7860 cgtgcagtac aaggacaggg acgggcggcc ccaggcggtg cgtgttgggg gccaggagag 7920 caaggtcact gtgaggggcc tggagcctgg gcgcaagtac aagatgcacc tgtacggcct 7980 ccacgagggg cggcgcctgg gcccggtgtc tgccgtgggc gtcacagagg atgaagccga 8040 gaccacccaa gcagtgccta ccatgacccc tgagcccccc atcaagcctc gcctggggga 8100 gctgaccatg acagatgcca cccctgactc cctcagcctg tcctggacgg ttcccgaggg 8160 ccagtttgac cacttcctgg tccagtacag gaatggggat gggcagccca aggcggtgcg 8220 ggtgccgggg cacgaggacg gggtcaccat ctcaggcctg gagccagacc ataaatacaa 8280 gatgaacctg tacggcttcc acggtggcca gcgcgtgggc cccatctctg tcattggggt 8340 gacggctgca gaggaagaga cccccagccc cacggaactc agcactgagg ccccggagcc 8400 ccctgaggag ccgctcctgg gggagctgac agtgacagga tcctcccctg actcgctgag 8460 cctctcctgg accatccccc agggccactt cgactccttc accgtgcagt acaaggacag 8520 ggacgggcgg ccccaggtga tgcgtgtcag gggcgaggag agcgaggtca ccgtgggggg 8580 cctggagccc gggcgcaaat acaagatgca cctgtacggc ctccacgagg ggcggcgtgt 8640 gggcccggtg tccaccgtgg gtgtgacaga ggatgaagca gagaccaccc aagcagtgcc 8700 caccacaacc cctgagcccc ccaacaagcc tcgcctcggg gagctgaccg tgacagatgc 8760 cacccctgac tccctcagcc tgtcctggat ggtccccgag ggccagtttg accacttcct 8820 ggtccagtac aggaatgggg atgggcagcc caaggtggtg cgggtgccgg ggcacgagga 8880 cggggtcacc atctcaggcc tggagccaga ccacaagtac aagatgaacc tgtacggctt 8940 ccacggtggc cagcgcgtgg gccccatctc tgtcattggg gtgacagctg cagaggaaga 9000 aactcccgcc cccacagaac ccagcacgga ggccccggag ccccctgagg agccgctcct 9060 gggggagctg acagtgacag gatcctcccc tgactcgctg agcctctcct ggaccatccc 9120 ccagggccgc ttcgactcct tcactgtgca gtacaaggac agggacgggc ggccccaggt 9180 ggtgcgtgtc aggggcgagg agagcgaggt caccgtgggg ggcctggagc ccgggtgcaa 9240 atacaagatg cacctgtacg gcctccacga ggggcagcgc gtgggcccag tgtccgctgt 9300 gggtgtgaca gctccaaagg atgaagccga gaccacccaa gcagtgccta ccatgacccc 9360 tgagcccccc atcaagcctc gcctggggga gctgaccgtg acagatgcca cccccgactc 9420 cctcagcctg tcctggatgg ttcccgaggg ccagtttgac cacttcctgg tccagtacag 9480 gaatggggat gggcagccca aggcggtgcg ggtgccgggg cacgaggacg gggtcaccat 9540 ctcaggcctg gagccagacc ataaatacaa gatgaacctg tacggcttcc acggtggcca 9600 gcgcgtaggc cctgtgtctg ccattggggt gacggaggaa gagaccccca gccccacaga 9660 acccagcact gaggccccgg aggcccctga ggagccgctc ctgggggagt tgacagtgac 9720 aggatcctcc cctgactcgc tgagcctctc ctggaccgtc ccccagggcc gcttcgactc 9780 cttcaccgtg cagtacaagg acagggacgg gcagccccag gtggtgcgtg tcaggggcga 9840 ggagagcgag gtcaccgtgg ggggcctgga gcccgggcgc aaatacaaga tgcatctgta 9900 cggcctccac gaggggcagc gcgtgggccc agtgtccacc gtgggcatca cggcgcccct 9960 gcccacacca ctgccggtgg agccccgcct gggggagctg gcggtggcgg ccgtgacctc 10020 ggactcagtg ggcctctcat ggacggtggc ccagggcccc tttgactcct tcctggtaca 10080 gtacagggac gcgcaggggc agccccaggc agtgcctgtg agcggagacc tccgagcggt 10140 cgccgtctcg gggctggacc cggcccgcaa gtacaagttc ctgctctttg gactccagaa 10200 tgggaaacgc cacggcccag tccctgtgga ggccaggacc gccccagaca ccaaaccgtc 10260 tccccgcctg ggggagctga ctgtgacaga tgcgacccct gactccgtgg gcctctcgtg 10320 gacggtccct gagggcgaat tcgactcctt cgtggtccag tacaaggata aggatggtcg 10380 gctccaggtg gtgccggtgg cagccaacca gcgggaggtc acagtccagg gcctggagcc 10440 cagtaggaaa tacaggttcc tgctctatgg tctgtcaggc aggaaacgac tgggccccat 10500 ctctgctgac agcaccacag ctcccctgga gaaggagcta cctccccacc tgggggaact 10560 gaccgtggct gaggagacct ccagctctct gcgcctgtcc tggacggtag cccagggccc 10620 ctttgactcc ttcgtggtcc agtacaggga cacggacggg cagcccaggg cagtgcctgt 10680 ggccgcagac cagcgcacag tcaccgtaga ggacctggag cctggcaaga aatacaagtt 10740 tctgctctac gggctccttg ggggaaagcg cctgggcccg gtctctgccc tgggaatgac 10800 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agtgggaaag cgccagccga gcggccagcc agtgcggggc 60 tggccatgta aggcccacag gcggtcctgc ccgcccggtg ccctgcggag agcctcgtgc 120 agccctgggc accgcccctg ccctgccctg accccttggc cttgaaatgc tgtcatcgga 180 ggagccgtcc cgctcgggac aaggccagca tggacaaagc tagagctggg gcaagcaagg 240 agccttcctg tcctcgaggc cgtgggaaga gaagcacgcc cagggggcca ctcctgagag 300 cctctctgtc caccaggcct ctgcagaggg gtcaccatgg ctctggcccg aggcagccgg 360 cagctggggg ccctggtgtg gggcgcctgc ctgtgcgtgc tggtgcacgg gcagcaggcg 420 cagcccgggc agggctcgga ccccgcccgc tggcggcagc tgatccagtg ggagaacaac 480 gggcaggtgt acagcttgct caactcgggc tcagagtacg tgccggccgg acctcagcgc 540 tccgagagta gctcccgggt gctgctggcc ggcgcgcccc aggcccagca gcggcgcagc 600 cacgggagcc cccggcgtcg gcaggcgccg tccctgcccc tgccggggcg cgtgggctcg 660 gacaccgtgc gcggccaggc gcggcaccca ttcggctttg gccaggtgcc cgacaactgg 720 cgcgaggtgg ccgtcgggga cagcacgggc atggcccggg cccgcacctc cgtctcccag 780 caacggcacg ggggctccgc ctcctcggtc tcggcttcgg ccttcgccag cacctaccgc 840 cagcagccct cctacccgca gcagttcccc tacccgcagg cgcccttcgt cagccagtac 900 gagaactacg accccgcgtc gcggacctac gaccagggtt tcgtgtacta ccggcccgcg 960 ggcggcggcg tgggcgcggg ggcggcggcc gtggcctcgg cgggggtcat ctacccctac 1020 cagccccggg cgcgctacga ggagtacggc ggcggcgaag agctgcccga gtacccgcct 1080 cagggcttct acccggcccc cgagaggccc tacgtgccgc cgccgccgcc gccccccgac 1140 ggcctggacc gccgctactc gcacagtctg tacagcgagg gcacccccgg cttcgagcag 1200 gcctaccctg accccggtcc cgaggcggcg caggcccatg gcggagaccc acgcctgggc 1260 tggtacccgc cctacgccaa cccgccgccc gaggcgtacg ggccgccgcg cgcgctggag 1320 ccgccctacc tgccggtgcg cagctccgac acgcccccgc cgggtgggga gcggaacggc 1380 gcgcagcagg gccgcctcag cgtgggcagc gtgtaccggc ccaaccagaa cggccgcggt 1440 ctccctgact tggtcccaga ccccaactat gtgcaagcat ccacttatgt gcagagagcc 1500 cacctgtact ccctgcgctg tgctgcggag gagaagtgtc tggccagcac agcctatgcc 1560 cctgaggcca ccgactacga tgtgcgggtg ctactgcgct tcccccagcg cgtgaagaac 1620 cagggcacag cagacttcct ccccaaccgg ccacggcaca cctgggagtg gcacagctgc 1680 caccagcatt accacagcat ggacgagttc agccactacg acctactgga tgcagccaca 1740 ggcaagaagg tggccgaggg ccacaaggcc agtttctgcc tggaggacag cacctgtgac 1800 ttcggcaacc tcaagcgcta tgcatgcacc tctcataccc agggcctgag cccaggctgc 1860 tatgacacct acaatgcgga catcgactgc cagtggatcg acataaccga cgtgcagcct 1920 gggaactaca tcctcaaggt gcacgtgaac ccaaagtata ttgttttgga gtctgacttc 1980 accaacaacg tggtgagatg caacattcac tacacaggtc gctacgtttc tgcaacaaac 2040 tgcaaaattg tccaatcctg atctccggga gggacagatg gccaatctct ccccttccaa 2100 agcaggccct gctccccggg cagcctcccg ccgaggggcc cagcccccaa cccacaggca 2160 cggaggggca tccctccctg ccggcctcag ggagcgaacg tggatgaaaa ccacagggat 2220 tccggacgcc agaccccatt ttatacttca cttttctcta cagtgttgtt ttgttgttgt 2280 tggtttttat tttttatact ttggccatac cacagagcta gattgcccag gtctgggctg 2340 aataaaacaa ggtttttcta c 2361 <210> 24 <211> 3670 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(3670) <223> TIMP metallopeptidase inhibitor 2 (TIMP2) <400> 24 cgcagcaaac acatccgtag aaggcagcgc ggccgccgag aaccgcagcg ccgctcgccc 60 gccgcccccc accccgccgc cccgcccggc gaattgcgcc ccgcgcccct cccctcgcgc 120 ccccgagaca aagaggagag aaagtttgcg cggccgagcg gggcaggtga ggagggtgag 180 ccgcgcggga ggggcccgcc tcggccccgg ctcagccccc gcccgcgccc ccagcccgcc 240 gccgcgagca gcgcccggac cccccagcgg cggcccccgc ccgcccagcc ccccggcccg 300 ccatgggcgc cgcggcccgc accctgcggc tggcgctcgg cctcctgctg ctggcgacgc 360 tgcttcgccc ggccgacgcc tgcagctgct ccccggtgca cccgcaacag gcgttttgca 420 atgcagatgt agtgatcagg gccaaagcgg tcagtgagaa ggaagtggac tctggaaacg 480 acatttatgg caaccctatc aagaggatcc agtatgagat caagcagata aagatgttca 540 aagggcctga gaaggatata gagtttatct acacggcccc ctcctcggca gtgtgtgggg 600 tctcgctgga cgttggagga aagaaggaat atctcattgc aggaaaggcc gagggggacg 660 gcaagatgca catcaccctc tgtgacttca tcgtgccctg ggacaccctg agcaccaccc 720 agaagaagag cctgaaccac aggtaccaga tgggctgcga gtgcaagatc acgcgctgcc 780 ccatgatccc gtgctacatc tcctccccgg acgagtgcct ctggatggac tgggtcacag 840 agaagaacat caacgggcac caggccaagt tcttcgcctg catcaagaga agtgacggct 900 cctgtgcgtg gtaccgcggc gcggcgcccc ccaagcagga gtttctcgac atcgaggacc 960 cataagcagg cctccaacgc ccctgtggcc aactgcaaaa aaagcctcca agggtttcga 1020 ctggtccagc tctgacatcc cttcctggaa acagcatgaa taaaacactc atcccatggg 1080 tccaaattaa tatgattctg ctcccccctt ctccttttag acatggttgt gggtctggag 1140 ggagacgtgg gtccaaggtc ctcatcccat cctccctctg ccaggcacta tgtgtctggg 1200 gcttcgatcc ttgggtgcag gcagggctgg gacacgcggc ttccctccca gtccctgcct 1260 tggcaccgtc acagatgcca agcaggcagc acttagggat ctcccagctg ggttagggca 1320 gggcctggaa atgtgcattt tgcagaaact tttgagggtc gttgcaagac tgtgtagcag 1380 gcctaccagg tccctttcat cttgagaggg acatggccct tgttttctgc agcttccacg 1440 cctctgcact ccctgcccct ggcaagtgct cccatcgccc cggtgcccac catgagctcc 1500 cagcacctga ctccccccac atccaagggc agcctggaac cagtggctag ttcttgaagg 1560 agccccatca atcctattaa tcctcagaat tccagtggga gcctccctct gagccttgta 1620 gaaatgggag cgagaaaccc cagctgagct gcgttccagc ctcagctgag tctttttggt 1680 ctgcacccac ccccccaccc cccccccccc gcccacatgc tccccagctt gcaggaggaa 1740 tcggtgaggt cctgtcctga ggctgctgtc cggggccggt ggctgccctc aaggtccctt 1800 ccctagctgc tgcggttgcc attgcttctt gcctgttctg gcatcaggca cctggattga 1860 gttgcacagc tttgctttat ccgggcttgt gtgcagggcc cggctgggct ccccatctgc 1920 acatcctgag gacagaaaaa gctgggtctt gctgtgccct cccaggctta gtgttccctc 1980 cctcaaagac tgacagccat cgttctgcac ggggctttct gcatgtgacg ccagctaagc 2040 atagtaagaa gtccagccta ggaagggaag gattttggag gtaggtggct ttggtgacac 2100 actcacttct ttctcagcct ccaggacact atggcctgtt ttaagagaca tcttattttt 2160 ctaaaggtga attctcagat gataggtgaa cctgagttgc agatatacca acttctgctt 2220 gtatttctta aatgacaaag attacctagc taagaaactt cctagggaac tagggaacct 2280 atgtgttccc tcagtgtggt ttcctgaagc cagtgatatg ggggttagga taggaagaac 2340 tttctcggta atgataagga gaatctcttg tttcctccca cctgtgttgt aaagataaac 2400 tgacgatata caggcacatt atgtaaacat acacacgcaa tgaaaccgaa gcttggcggc 2460 ctgggcgtgg tcttgcaaaa tgcttccaaa gccaccttag cctgttctat tcagcggcaa 2520 ccccaaagca cctgttaaga ctcctgaccc ccaagtggca tgcagccccc atgcccaccg 2580 ggacctggtc agcacagatc ttgatgactt ccctttctag ggcagactgg gagggtatcc 2640 aggaatcggc ccctgcccca cgggcgtttt catgctgtac agtgacctaa agttggtaag 2700 atgtcataat ggaccagtcc atgtgatttc agtatataca actccaccag acccctccaa 2760 cccatataac accccacccc tgttcgcttc ctgtatggtg atatcatatg taacatttac 2820 tcctgtttct gctgattgtt tttttaatgt tttggtttgt ttttgacatc agctgtaatc 2880 attcctgtgc tgtgtttttt attacccttg gtaggtatta gacttgcact tttttaaaaa 2940 aaggtttctg catcgtggaa gcatttgacc cagagtggaa cgcgtggcct atgcaggtgg 3000 attccttcag gtctttcctt tggttctttg agcatctttg ctttcattcg tctcccgtct 3060 ttggttctcc agttcaaatt attgcaaagt aaaggatctt tgagtaggtt cggtctgaaa 3120 ggtgtggcct ttatatttga tccacacacg ttggtctttt aaccgtgctg agcagaaaac 3180 aaaacaggtt aagaagagcc gggtggcagc tgacagagga agccgctcaa ataccttcac 3240 aataaatagt ggcaatatat atatagttta agaaggctct ccatttggca tcgtttaatt 3300 tatatgttat gttctaagca cagctctctt ctcctatttt catcctgcaa gcaactcaaa 3360 atatttaaaa taaagtttac attgtagtta ttttcaaatc tttgcttgat aagtattaag 3420 aaatattgga cttgctgccg taatttaaag 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ctactattag aactattatt 540 attaataaat tcctctccaa atctagcccc ttgacttcgg atttcacgat ttctcccttc 600 ctcctagaaa cttgataagt ttcccgcgct tccctttttc taagactaca tgtttgtcat 660 cttataaagc aaaggggtga ataaatgaac caaatcaata acttctggaa tatctgcaaa 720 caacaataat atcagctatg ccatctttca ctattttagc cagtatcgag ttgaatgaac 780 atagaaaaat acaaaactga attcttccct gtaaattccc cgttttgacg acgcacttgt 840 agccacgtag ccacgcctac ttaagacaat tacaaaaggc gaagaagact gactcaggct 900 taagctgcca gccagagagg gagtcatttc attggcgttt gagtcagcaa agaagtcaag 960 atggccaaag ttccagacat gtttgaagac ctgaagaact gttacagtga aaatgaagaa 1020 gacagttcct ccattgatca tctgtctctg aatcagaaat ccttctatca tgtaagctat 1080 ggcccactcc atgaaggctg catggatcaa tctgtgtctc tgagtatctc tgaaacctct 1140 aaaacatcca agcttacctt caaggagagc atggtggtag tagcaaccaa cgggaaggtt 1200 ctgaagaaga gacggttgag tttaagccaa tccatcactg atgatgacct ggaggccatc 1260 gccaatgact cagaggaaga aatcatcaag cctaggtcag caccttttag cttcctgagc 1320 aatgtgaaat acaactttat gaggatcatc aaatacgaat tcatcctgaa tgacgccctc 1380 aatcaaagta taattcgagc caatgatcag tacctcacgg ctgctgcatt acataatctg 1440 gatgaagcag tgaaatttga catgggtgct tataagtcat caaaggatga tgctaaaatt 1500 accgtgattc taagaatctc aaaaactcaa ttgtatgtga ctgcccaaga tgaagaccaa 1560 ccagtgctgc tgaaggagat gcctgagata cccaaaacca tcacaggtag tgagaccaac 1620 ctcctcttct tctgggaaac tcacggcact aagaactatt tcacatcagt tgcccatcca 1680 aacttgttta ttgccacaaa gcaagactac tgggtgtgct tggcaggggg gccaccctct 1740 atcactgact ttcagatact ggaaaaccag gcgtaggtct ggagtctcac ttgtctcact 1800 tgtgcagtgt tgacagttca tatgtaccat gtacatgaag aagctaaatc ctttactgtt 1860 agtcatttgc tgagcatgta ctgagccttg taattctaaa tgaatgttta cactctttgt 1920 aagagtggaa ccaacactaa catataatgt tgttatttaa agaacaccct atattttgca 1980 tagtaccaat cattttaatt attattcttc ataacaattt taggaggacc agagctactg 2040 actatggcta ccaaaaagac tctacccata ttacagatgg gcaaattaag gcataagaaa 2100 actaagaaat atgcacaata gcagttgaaa caagaagcca cagacctagg atttcatgat 2160 ttcatttcaa ctgtttgcct tctactttta agttgctgat gaactcttaa tcaaatagca 2220 taagtttctg ggacctcagt tttatcattt tcaaaatgga gggaataata cctaagcctt 2280 cctgccgcaa cagtttttta tgctaatcag ggaggtcatt ttggtaaaat acttcttgaa 2340 gccgagcctc aagatgaagg caaagcacga aatgttattt tttaattatt atttatatat 2400 gtatttataa atatatttaa gataattata atatactata tttatgggaa ccccttcatc 2460 ctctgagtgt gaccaggcat cctccacaat agcagacagt gttttctggg ataagtaagt 2520 ttgatttcat taatacaggg cattttggtc caagttgtgc ttatcccata gccaggaaac 2580 tctgcattct agtacttggg agacctgtaa tcatataata aatgtacatt aattaccttg 2640 agccagtaat tggtccgatc tttgactctt ttgccattaa acttacctgg gcattcttgt 2700 ttcaattcca cctgcaatca agtcctacaa gctaaaatta gatgaactca actttgacaa 2760 ccatgagacc actgttatca aaactttctt ttctggaatg taatcaatgt ttcttctagg 2820 ttctaaaaat tgtgatcaga ccataatgtt acattattat caacaatagt gattgataga 2880 gtgttatcag tcataactaa ataaagcttg caacaaaatt ctctgacaaa aaaaaaaaaa 2940 <210> 26 <211> 931 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(931) <223> TIMP metallopeptidase inhibitor 1 (TIMP1) <400> 26 tttcgtcggc ccgccccttg gcttctgcac tgatggtggg tggatgagta atgcatccag 60 gaagcctgga ggcctgtggt ttccgcaccc gctgccaccc ccgcccctag cgtggacatt 120 tatcctctag cgctcaggcc ctgccgccat cgccgcagat ccagcgccca gagagacacc 180 agagaaccca ccatggcccc ctttgagccc ctggcttctg gcatcctgtt gttgctgtgg 240 ctgatagccc ccagcagggc ctgcacctgt gtcccacccc acccacagac ggccttctgc 300 aattccgacc tcgtcatcag ggccaagttc gtggggacac cagaagtcaa ccagaccacc 360 ttataccagc gttatgagat caagatgacc aagatgtata aagggttcca agccttaggg 420 gatgccgctg acatccggtt cgtctacacc cccgccatgg agagtgtctg cggatacttc 480 cacaggtccc acaaccgcag cgaggagttt ctcattgctg gaaaactgca ggatggactc 540 ttgcacatca ctacctgcag ttttgtggct ccctggaaca gcctgagctt agctcagcgc 600 cggggcttca ccaagaccta cactgttggc tgtgaggaat gcacagtgtt tccctgttta 660 tccatcccct gcaaactgca gagtggcact cattgcttgt ggacggacca gctcctccaa 720 ggctctgaaa agggcttcca gtcccgtcac cttgcctgcc tgcctcggga gccagggctg 780 tgcacctggc agtccctgcg gtcccagata gcctgaatcc tgcccggagt ggaagctgaa 840 gcctgcacag tgtccaccct gttcccactc ccatctttct tccggacaat gaaataaaga 900 gttaccaccc agcagaaaaa aaaaaaaaaa a 931 <210> 27 <211> 1669 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(1669) <223> tumor necrosis factor (TNF superfamily, member 2) (TNF) <400> 27 ctccctcagc aaggacagca gaggaccagc taagagggag agaagcaact acagaccccc 60 cctgaaaaca accctcagac gccacatccc ctgacaagct gccaggcagg ttctcttcct 120 ctcacatact gacccacggc tccaccctct ctcccctgga aaggacacca tgagcactga 180 aagcatgatc cgggacgtgg agctggccga ggaggcgctc cccaagaaga caggggggcc 240 ccagggctcc aggcggtgct tgttcctcag cctcttctcc ttcctgatcg tggcaggcgc 300 caccacgctc ttctgcctgc tgcactttgg agtgatcggc ccccagaggg aagagttccc 360 cagggacctc tctctaatca gccctctggc ccaggcagtc agatcatctt ctcgaacccc 420 gagtgacaag cctgtagccc atgttgtagc aaaccctcaa gctgaggggc agctccagtg 480 gctgaaccgc cgggccaatg ccctcctggc caatggcgtg gagctgagag ataaccagct 540 ggtggtgcca tcagagggcc tgtacctcat ctactcccag gtcctcttca agggccaagg 600 ctgcccctcc acccatgtgc tcctcaccca caccatcagc cgcatcgccg tctcctacca 660 gaccaaggtc aacctcctct ctgccatcaa gagcccctgc cagagggaga ccccagaggg 720 ggctgaggcc aagccctggt atgagcccat ctatctggga ggggtcttcc agctggagaa 780 gggtgaccga ctcagcgctg agatcaatcg gcccgactat ctcgactttg ccgagtctgg 840 gcaggtctac tttgggatca ttgccctgtg aggaggacga acatccaacc ttcccaaacg 900 cctcccctgc cccaatccct ttattacccc ctccttcaga caccctcaac ctcttctggc 960 tcaaaaagag aattgggggc ttagggtcgg aacccaagct tagaacttta agcaacaaga 1020 ccaccacttc gaaacctggg attcaggaat gtgtggcctg cacagtgaag tgctggcaac 1080 cactaagaat tcaaactggg gcctccagaa ctcactgggg cctacagctt tgatccctga 1140 catctggaat ctggagacca gggagccttt ggttctggcc agaatgctgc aggacttgag 1200 aagacctcac ctagaaattg acacaagtgg accttaggcc ttcctctctc cagatgtttc 1260 cagacttcct tgagacacgg agcccagccc tccccatgga gccagctccc tctatttatg 1320 tttgcacttg tgattattta ttatttattt attatttatt tatttacaga tgaatgtatt 1380 tatttgggag accggggtat cctgggggac ccaatgtagg agctgccttg gctcagacat 1440 gttttccgtg aaaacggagc tgaacaatag gctgttccca tgtagccccc tggcctctgt 1500 gccttctttt gattatgttt tttaaaatat ttatctgatt aagttgtcta aacaatgctg 1560 atttggtgac caactgtcac tcattgctga gcctctgctc cccaggggag ttgtgtctgt 1620 aatcgcccta ctattcagtg gcgagaaata aagtttgctt agaaaagaa 1669 <210> 28 <211> 1973 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(1973) <223> matrix metallopeptidase 1 (interstitial collagenase) (MMP1) <400> 28 gggatattgg agtagcaaga ggctgggaag ccatcactta ccttgcactg agaaagaaga 60 caaaggccag tatgcacagc tttcctccac tgctgctgct gctgttctgg ggtgtggtgt 120 ctcacagctt cccagcgact ctagaaacac aagagcaaga tgtggactta gtccagaaat 180 acctggaaaa atactacaac ctgaagaatg atgggaggca agttgaaaag cggagaaata 240 gtggcccagt ggttgaaaaa ttgaagcaaa tgcaggaatt ctttgggctg aaagtgactg 300 ggaaaccaga tgctgaaacc ctgaaggtga tgaagcagcc cagatgtgga gtgcctgatg 360 tggctcagtt tgtcctcact gaggggaacc ctcgctggga gcaaacacat ctgacctaca 420 ggattgaaaa ttacacgcca gatttgccaa gagcagatgt ggaccatgcc attgagaaag 480 ccttccaact ctggagtaat gtcacacctc tgacattcac caaggtctct gagggtcaag 540 cagacatcat gatatctttt gtcaggggag atcatcggga caactctcct tttgatggac 600 ctggaggaaa tcttgctcat gcttttcaac caggcccagg tattggaggg gatgctcatt 660 ttgatgaaga tgaaaggtgg accaacaatt tcagagagta caacttacat cgtgttgcgg 720 ctcatgaact cggccattct cttggactct cccattctac tgatatcggg gctttgatgt 780 accctagcta caccttcagt ggtgatgttc agctagctca ggatgacatt gatggcatcc 840 aagccatata tggacgttcc caaaatcctg tccagcccat cggcccacaa accccaaaag 900 cgtgtgacag taagctaacc tttgatgcta taactacgat tcggggagaa gtgatgttct 960 ttaaagacag attctacatg cgcacaaatc ccttctaccc ggaagttgag ctcaatttca 1020 tttctgtttt ctggccacaa ctgccaaatg ggcttgaagc tgcttacgaa tttgccgaca 1080 gagatgaagt ccggtttttc aaagggaata agtactgggc tgttcaggga cagaatgtgc 1140 tacacggata ccccaaggac atctacagct cctttggctt ccctagaact gtgaagcata 1200 tcgatgctgc tctttctgag gaaaacactg gaaaaaccta cttctttgtt gctaacaaat 1260 actggaggta tgatgaatat aaacgatcta tggatccagg ttatcccaaa atgatagcac 1320 atgactttcc tggaattggc cacaaagttg atgcagtttt catgaaagat ggatttttct 1380 atttctttca tggaacaaga caatacaaat ttgatcctaa aacgaagaga attttgactc 1440 tccagaaagc taatagctgg ttcaactgca ggaaaaattg aacattacta atttgaatgg 1500 aaaacacatg gtgtgagtcc aaagaaggtg ttttcctgaa gaactgtcta ttttctcagt 1560 catttttaac ctctagagtc actgatacac agaatataat cttatttata cctcagtttg 1620 catatttttt tactatttag aatgtagccc tttttgtact gatataattt agttccacaa 1680 atggtgggta caaaaagtca agtttgtggc ttatggattc atataggcca gagttgcaaa 1740 gatcttttcc agagtatgca actctgacgt tgatcccaga gagcagcttc agtgacaaac 1800 atatcctttc aagacagaaa gagacaggag acatgagtct ttgccggagg aaaagcagct 1860 caagaacaca tgtgcagtca ctggtgtcac cctggatagg caagggataa ctcttctaac 1920 acaaaataag tgttttatgt ttggaataaa gtcaaccttg tttctactgt ttt 1973 <210> 29 <211> 2387 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(2387) <223> matrix metallopeptidase 9 (gelatinase B, 92kDa gelatinase, 92kDa type IV collagenase (MMP9) <400> 29 agacacctct gccctcacca tgagcctctg gcagcccctg gtcctggtgc tcctggtgct 60 gggctgctgc tttgctgccc ccagacagcg ccagtccacc cttgtgctct tccctggaga 120 cctgagaacc aatctcaccg acaggcagct ggcagaggaa tacctgtacc gctatggtta 180 cactcgggtg gcagagatgc gtggagagtc gaaatctctg gggcctgcgc tgctgcttct 240 ccagaagcaa ctgtccctgc ccgagaccgg tgagctggat agcgccacgc tgaaggccat 300 gcgaacccca cggtgcgggg tcccagacct gggcagattc caaacctttg agggcgacct 360 caagtggcac caccacaaca tcacctattg gatccaaaac tactcggaag acttgccgcg 420 ggcggtgatt gacgacgcct ttgcccgcgc cttcgcactg tggagcgcgg tgacgccgct 480 caccttcact cgcgtgtaca gccgggacgc agacatcgtc atccagtttg gtgtcgcgga 540 gcacggagac gggtatccct tcgacgggaa ggacgggctc ctggcacacg cctttcctcc 600 tggccccggc attcagggag acgcccattt cgacgatgac gagttgtggt ccctgggcaa 660 gggcgtcgtg gttccaactc ggtttggaaa cgcagatggc gcggcctgcc acttcccctt 720 catcttcgag ggccgctcct actctgcctg caccaccgac ggtcgctccg acggcttgcc 780 ctggtgcagt accacggcca actacgacac cgacgaccgg tttggcttct gccccagcga 840 gagactctac acccaggacg gcaatgctga tgggaaaccc tgccagtttc cattcatctt 900 ccaaggccaa tcctactccg cctgcaccac ggacggtcgc tccgacggct accgctggtg 960 cgccaccacc gccaactacg accgggacaa gctcttcggc ttctgcccga cccgagctga 1020 ctcgacggtg atggggggca actcggcggg ggagctgtgc gtcttcccct tcactttcct 1080 gggtaaggag tactcgacct gtaccagcga gggccgcgga gatgggcgcc tctggtgcgc 1140 taccacctcg aactttgaca gcgacaagaa gtggggcttc tgcccggacc aaggatacag 1200 tttgttcctc gtggcggcgc atgagttcgg ccacgcgctg ggcttagatc attcctcagt 1260 gccggaggcg ctcatgtacc ctatgtaccg cttcactgag gggcccccct tgcataagga 1320 cgacgtgaat ggcatccggc acctctatgg tcctcgccct gaacctgagc cacggcctcc 1380 aaccaccacc acaccgcagc ccacggctcc cccgacggtc tgccccaccg gaccccccac 1440 tgtccacccc tcagagcgcc ccacagctgg ccccacaggt cccccctcag ctggccccac 1500 aggtcccccc actgctggcc cttctacggc cactactgtg cctttgagtc cggtggacga 1560 tgcctgcaac gtgaacatct tcgacgccat cgcggagatt gggaaccagc tgtatttgtt 1620 caaggatggg aagtactggc gattctctga gggcaggggg agccggccgc agggcccctt 1680 ccttatcgcc gacaagtggc ccgcgctgcc ccgcaagctg gactcggtct ttgaggagcg 1740 gctctccaag aagcttttct tcttctctgg gcgccaggtg tgggtgtaca caggcgcgtc 1800 ggtgctgggc ccgaggcgtc tggacaagct gggcctggga gccgacgtgg cccaggtgac 1860 cggggccctc cggagtggca gggggaagat gctgctgttc agcgggcggc gcctctggag 1920 gttcgacgtg aaggcgcaga tggtggatcc ccggagcgcc agcgaggtgg accggatgtt 1980 ccccggggtg cctttggaca cgcacgacgt cttccagtac cgagagaaag cctatttctg 2040 ccaggaccgc ttctactggc gcgtgagttc ccggagtgag ttgaaccagg tggaccaagt 2100 gggctacgtg acctatgaca tcctgcagtg ccctgaggac tagggctccc gtcctgcttt 2160 ggcagtgcca tgtaaatccc cactgggacc aaccctgggg aaggagccag tttgccggat 2220 acaaactggt attctgttct ggaggaaagg gaggagtgga ggtgggctgg gccctctctt 2280 ctcacctttg ttttttgttg gagtgtttct aataaacttg gattctctaa cctttaaaaa 2340 aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaa 2387 <210> 30 <211> 1828 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(1828) <223> matrix metallopeptidase 3 (stromelysin 1, progelatinase) (MMP3) <400> 30 ctacaaggag gcaggcaaga cagcaaggca tagagacaac atagagctaa gtaaagccag 60 tggaaatgaa gagtcttcca atcctactgt tgctgtgcgt ggcagtttgc tcagcctatc 120 cattggatgg agctgcaagg ggtgaggaca ccagcatgaa ccttgttcag aaatatctag 180 aaaactacta cgacctcaaa aaagatgtga aacagtttgt taggagaaag gacagtggtc 240 ctgttgttaa aaaaatccga gaaatgcaga agttccttgg attggaggtg acggggaagc 300 tggactccga cactctggag gtgatgcgca agcccaggtg tggagttcct gatgttggtc 360 acttcagaac ctttcctggc atcccgaagt ggaggaaaac ccaccttaca tacaggattg 420 tgaattatac accagatttg ccaaaagatg ctgttgattc tgctgttgag aaagctctga 480 aagtctggga agaggtgact ccactcacat tctccaggct gtatgaagga gaggctgata 540 taatgatctc ttttgcagtt agagaacatg gagactttta cccttttgat ggacctggaa 600 atgttttggc ccatgcctat gcccctgggc cagggattaa tggagatgcc cactttgatg 660 atgatgaaca atggacaaag gatacaacag ggaccaattt atttctcgtt gctgctcatg 720 aaattggcca ctccctgggt ctctttcact cagccaacac tgaagctttg atgtacccac 780 tctatcactc actcacagac ctgactcggt tccgcctgtc tcaagatgat ataaatggca 840 ttcagtccct ctatggacct ccccctgact cccctgagac ccccctggta cccacggaac 900 ctgtccctcc agaacctggg acgccagcca actgtgatcc tgctttgtcc tttgatgctg 960 tcagcactct gaggggagaa atcctgatct ttaaagacag gcacttttgg cgcaaatccc 1020 tcaggaagct tgaacctgaa ttgcatttga tctcttcatt ttggccatct cttccttcag 1080 gcgtggatgc cgcatatgaa gttactagca aggacctcgt tttcattttt aaaggaaatc 1140 aattctgggc tatcagagga aatgaggtac gagctggata cccaagaggc atccacaccc 1200 taggtttccc tccaaccgtg aggaaaatcg atgcagccat ttctgataag gaaaagaaca 1260 aaacatattt ctttgtagag gacaaatact ggagatttga tgagaagaga aattccatgg 1320 agccaggctt tcccaagcaa atagctgaag actttccagg gattgactca aagattgatg 1380 ctgtttttga agaatttggg ttcttttatt tctttactgg atcttcacag ttggagtttg 1440 acccaaatgc aaagaaagtg acacacactt tgaagagtaa cagctggctt aattgttgaa 1500 agagatatgt agaaggcaca atatgggcac tttaaatgaa gctaataatt cttcacctaa 1560 gtctctgtga attgaaatgt tcgttttctc ctgcctgtgc tgtgactcga gtcacactca 1620 agggaacttg agcgtgaatc tgtatcttgc cggtcatttt tatgttatta cagggcattc 1680 aaatgggctg ctgcttagct tgcaccttgt cacatagagt gatctttccc aagagaaggg 1740 gaagcactcg tgtgcaacag acaagtgact gtatctgtgt agactatttg cttatttaat 1800 aaagacgatt tgtcagttat tttatctt 1828 <210> 31 <211> 918 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(918) <223> superoxide dismutase 2, mitochondrial (SOD2), nuclear gene encoding mitochondrial protein, transcript variant 3 <400> 31 gcggtgccct tgcggcgcag ctggggtcgc ggccctgctc cccgcgcttt cttaaggccc 60 gcgggcggcg caggagcggc actcgtggct gtggtggctt cggcagcggc ttcagcagat 120 cggcggcatc agcggtagca ccagcactag cagcatgttg agccgggcag tgtgcggcac 180 cagcaggcag ctggctccgg ttttggggta tctgggctcc aggcagaagc acagcctccc 240 cgacctgccc tacgactacg gcgccctgga acctcacatc aacgcgcaga tcatgcagct 300 gcaccacagc aagcaccacg cggcctacgt gaacaacctg aacgtcaccg aggagaagta 360 ccaggaggcg ttggccaagg gggagttgct ggaagccatc aaacgtgact ttggttcctt 420 tgacaagttt aaggagaagc tgacggctgc atctgttggt gtccaaggct caggttgggg 480 ttggcttggt ttcaataagg aacggggaca cttacaaatt gctgcttgtc caaatcagga 540 tccactgcaa ggaacaacag gccttattcc actgctgggg attgatgtgt gggagcacgc 600 ttactacctt cagtataaaa atgtcaggcc tgattatcta aaagctattt ggaatgtaat 660 caactgggag aatgtaactg aaagatacat ggcttgcaaa aagtaaacca cgatcgttat 720 gctgatcata ccctaatgat cccagcaaga taatgtcctg tcttctaaga tgtgcatcaa 780 gcctggtaca tactgaaaac cctataaggt cctggataat ttttgtttga ttattcattg 840 aagaaacatt tattttccaa ttgtgtgaag tttttgactg ttaataaaag aatctgtcaa 900 ccatcaaaaa aaaaaaaa 918 <210> 32 <211> 1035 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(1035) <223> superoxide dismutase 2, mitochondrial (SOD2), nuclear gene encoding mitochondiral protein, transcript variant 2 <400> 32 gcggtgccct tgcggcgcag ctggggtcgc ggccctgctc cccgcgcttt cttaaggccc 60 gcgggcggcg caggagcggc actcgtggct gtggtggctt cggcagcggc ttcagcagat 120 cggcggcatc agcggtagca ccagcactag cagcatgttg agccgggcag tgtgcggcac 180 cagcaggcag ctggctccgg ttttggggta tctgggctcc aggcagaagc acagcctccc 240 cgacctgccc tacgactacg gcgccctgga acctcacatc aacgcgcaga tcatgcagct 300 gcaccacagc aagcaccacg cggcctacgt gaacaacctg aacgtcaccg aggagaagta 360 ccaggaggcg ttggccaagg gagatgttac agcccagata gctcttcagc ctgcactgaa 420 gttcaatggt ggtggtcata tcaatcatag cattttctgg acaaacctca gccctaacgg 480 tggtggagaa cccaaagggg agttgctgga agccatcaaa cgtgactttg gttcctttga 540 caagtttaag gagaagctga cggctgcatc tgttggtgtc caaggctcag gttggggttg 600 gcttggtttc aataaggaac ggggacactt acaaattgct gcttgtccaa atcaggatcc 660 actgcaagga acaacaggcc ttattccact gctggggatt gatgtgtggg agcacgctta 720 ctaccttcag tataaaaatg tcaggcctga ttatctaaaa gctatttgga atgtaatcaa 780 ctgggagaat gtaactgaaa gatacatggc ttgcaaaaag taaaccacga tcgttatgct 840 gatcataccc taatgatccc agcaagataa tgtcctgtct tctaagatgt gcatcaagcc 900 tggtacatac tgaaaaccct ataaggtcct ggataatttt tgtttgatta ttcattgaag 960 aaacatttat tttccaattg tgtgaagttt ttgactgtta ataaaagaat ctgtcaacca 1020 tcaaaaaaaa aaaaa 1035 <210> 33 <211> 1593 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(1593) <223> superoxide dismutase 2, mitochondrial (SOD2), nuclear gene encoding mitochondrial protein, transcript variant 1 <400> 33 gcggtgccct tgcggcgcag ctggggtcgc ggccctgctc cccgcgcttt cttaaggccc 60 gcgggcggcg caggagcggc actcgtggct gtggtggctt cggcagcggc ttcagcagat 120 cggcggcatc agcggtagca ccagcactag cagcatgttg agccgggcag tgtgcggcac 180 cagcaggcag ctggctccgg ttttggggta tctgggctcc aggcagaagc acagcctccc 240 cgacctgccc tacgactacg gcgccctgga acctcacatc aacgcgcaga tcatgcagct 300 gcaccacagc aagcaccacg cggcctacgt gaacaacctg aacgtcaccg aggagaagta 360 ccaggaggcg ttggccaagg gagatgttac agcccagata gctcttcagc ctgcactgaa 420 gttcaatggt ggtggtcata tcaatcatag cattttctgg acaaacctca gccctaacgg 480 tggtggagaa cccaaagggg agttgctgga agccatcaaa cgtgactttg gttcctttga 540 caagtttaag gagaagctga cggctgcatc tgttggtgtc caaggctcag gttggggttg 600 gcttggtttc aataaggaac ggggacactt acaaattgct gcttgtccaa atcaggatcc 660 actgcaagga acaacaggcc ttattccact gctggggatt gatgtgtggg agcacgctta 720 ctaccttcag tataaaaatg tcaggcctga ttatctaaaa gctatttgga atgtaatcaa 780 ctgggagaat gtaactgaaa gatacatggc ttgcaaaaag taaaccacga tcgttatgct 840 gagtatgtta agctctttat gactgttttt gtagtggtat agagtactgc agaatacagt 900 aagctgctct attgtagcat ttcttgatgt tgcttagtca cttatttcat aaacaactta 960 atgttctgaa taatttctta ctaaacattt tgttattggg caagtgattg aaaatagtaa 1020 atgctttgtg tgattgaatc tgattggaca ttttcttcag agagctaaat tacaattgtc 1080 atttataaaa ccatcaaaaa tattccatcc atatactttg gggacttgta gggatgcctt 1140 tctagtccta ttctattgca gttatagaaa atctagtctt ttgccccagt tacttaaaaa 1200 taaaatatta acactttccc aagggaaaca ctcggctttc tatagaaaat tgcacttttt 1260 gtcgagtaat cctctgcagt gatacttctg gtagatgtca cccagtggtt tttgttaggt 1320 caaatgttcc tgtatagttt ttgcaaatag agctgtatac tgtttaaatg tagcaggtga 1380 actgaactgg ggtttgctca cctgcacagt aaaggcaaac ttcaacagca aaactgcaaa 1440 aaggtggttt ttgcagtagg agaaaggagg atgtttattt gcagggcgcc aagcaaggag 1500 aattgggcag ctcatgcttg agacccaatc tccatgatga cctacaagct agagtattta 1560 aaggcagtgg taaatttcag gaaagcagaa gtt 1593 <210> 34 <211> 1498 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(1498) <223> interleukin 1, beta <400> 34 accaaacctc ttcgaggcac aaggcacaac aggctgctct gggattctct tcagccaatc 60 ttcattgctc aagtgtctga agcagccatg gcagaagtac ctgagctcgc cagtgaaatg 120 atggcttatt acagtggcaa tgaggatgac ttgttctttg aagctgatgg ccctaaacag 180 atgaagtgct ccttccagga cctggacctc tgccctctgg atggcggcat ccagctacga 240 atctccgacc accactacag caagggcttc aggcaggccg cgtcagttgt tgtggccatg 300 gacaagctga ggaagatgct ggttccctgc ccacagacct tccaggagaa tgacctgagc 360 accttctttc ccttcatctt tgaagaagaa cctatcttct tcgacacatg ggataacgag 420 gcttatgtgc acgatgcacc tgtacgatca ctgaactgca cgctccggga ctcacagcaa 480 aaaagcttgg tgatgtctgg tccatatgaa ctgaaagctc tccacctcca gggacaggat 540 atggagcaac aagtggtgtt ctccatgtcc tttgtacaag gagaagaaag taatgacaaa 600 atacctgtgg ccttgggcct caaggaaaag aatctgtacc tgtcctgcgt gttgaaagat 660 gataagccca ctctacagct ggagagtgta gatcccaaaa attacccaaa gaagaagatg 720 gaaaagcgat ttgtcttcaa caagatagaa atcaataaca agctggaatt tgagtctgcc 780 cagttcccca actggtacat cagcacctct caagcagaaa acatgcccgt cttcctggga 840 gggaccaaag gcggccagga tataactgac ttcaccatgc aatttgtgtc ttcctaaaga 900 gagctgtacc cagagagtcc tgtgctgaat gtggactcaa tccctagggc tggcagaaag 960 ggaacagaaa ggtttttgag tacggctata gcctggactt tcctgttgtc tacaccaatg 1020 cccaactgcc tgccttaggg tagtgctaag aggatctcct gtccatcagc caggacagtc 1080 agctctctcc tttcagggcc aatccccagc ccttttgttg agccaggcct ctctcacctc 1140 tcctactcac ttaaagcccg cctgacagaa accacggcca catttggttc taagaaaccc 1200 tctgtcattc gctcccacat tctgatgagc aaccgcttcc ctatttattt atttatttgt 1260 ttgtttgttt tattcattgg tctaatttat tcaaaggggg caagaagtag cagtgtctgt 1320 aaaagagcct agtttttaat agctatggaa tcaattcaat ttggactggt gtgctctctt 1380 taaatcaagt cctttaatta agactgaaaa tatataagct cagattattt aaatgggaat 1440 atttataaat gagcaaatat catactgttc aatggttctg aaataaactt cactgaag 1498 <210> 35 <211> 2459 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> cDNA <222> (1)..(2459) <223> keratin 2 (KRT2) <400> 35 agcctgtgac tttcctccct ggacaaaggc atcatgagtt gtcagatctc ttgcaaatct 60 cgaggaagag gaggaggtgg aggaggattc cggggcttca gcagcggctc agctgtggtg 120 tctggtggaa 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ctatgatgcg gagatatccc agatacatca gagtgtcact 1020 gacaccaacg tcatcctctc catggacaac agccgcaacc tggacttgga tagcatcatc 1080 gccgaggtca aggcccagta tgaggagatc gcccagagga gcaaggaaga agcggaggcc 1140 ctgtaccaca gcaagtatga ggagctccag gtgactgtcg ggagacatgg agacagcctg 1200 aaagagatca agatagagat cagcgagctg aaccgcgtga tccagaggct gcagggggag 1260 atcgcacatg tgaagaagca gtgtaagaat gtgcaagatg ccatcgcaga tgccgagcag 1320 cgtggggagc atgccctcaa ggatgccagg aacaagttga atgacctgga ggaggccctg 1380 cagcaggcca aggaggactt ggcgcggctg ctgcgtgact accaggagct gatgaacgtg 1440 aagctggccc tagatgtgga gatcgccacc taccgcaaac tgctggaggg cgaggagtgc 1500 aggatgtctg gagacctcag cagcaatgtg actgtgtctg tgacaagcag caccatttca 1560 tcaaatgtgg catccaaggc tgcctttgga ggttctggag gtagagggtc cagttccgga 1620 ggaggataca gctctggaag cagcagttat ggctctggag gccgacagtc tggctccaga 1680 ggcggtagtg gaggaggagg ttctatctct ggaggaggat atggctctgg cggtggttct 1740 ggaggaagat acggatctgg tggtggctct aagggagggt ccatctctgg aggaggatat 1800 ggctctggag gtggaaaaca 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ggcacagcct cccttatcgt gtgtgtgctg gccattgttg 600 acccctacaa caaccccgtc ccccgaggcc tggaggcctt caccgtgggc ctggtggtcc 660 tggtcattgg cacctccatg ggcttcaact ccggctatgc cgtcaaccct gcccgggact 720 ttggcccccg cctttttaca gcccttgcgg gctggggctc tgcagtcttc acgaccggcc 780 agcattggtg gtgggtgccc atcgtgtccc cactcctggg ctccattgcg ggtgtcttcg 840 tgtaccagct gatgatcggc tgccacctgg agcagccccc accctccaac gaggaagaga 900 atgtgaagct ggcccatgtg aagcacaagg agcagatctg agtgggcagg ggccatctcc 960 ccactccgct gccctggcct tgagcatcca ctgactgtcc aagggccact cccaagaagc 1020 ccccttcacg atccaccctt tcaggctaag gagctcccta tctaccctca ccccacgaga 1080 cagccccttc aggatttcca ctggaccttg cccaaatagc accttaggcc actgccccta 1140 agctggggtg gaaccggaat ttgggtcaat acatcctttt gtctcccaag ggaagagaat 1200 gggcagcagg tatgtgtgtg tgtgcatgtg tgtgcatgtg tgtgcatgtg tgtgcagggg 1260 tgtgtgtgtg tggggggggt tcccagatat tcagggcaag ggaccagtcg gaagggattc 1320 tggctattgg gggagcccag agacagggga aggcagcctg tccatctgtg cataaggaga 1380 ggaaagttcc agggtgtgta tgtttcaggg 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Claims (13)

1. 치료용을 제외한 포유류 피부의 상태를 조절하는 미용 방법에 있어서,
   (a) 에너지 전달 전(前), 에너지 전달 동안, 또는 에너지 전달 전(前)과 전달 동안에, 겔 조성물을 포함하는 제1 개인 케어 조성물을 조절이 요구되는 피부 영역에 적용하는 단계; 및
   (b) 에너지를 진피에 전달하여 진피 내의 콜라겐을 가열하여서, 피부 각질층이 37℃ 내지 48℃의 외부 온도에 도달할 때까지 진피 내의 가열된 콜라겐이 표피 및 피부 각질층을 가열하는 단계 (여기서, 그 후 진피에의 에너지 전달을 제어하여 피부 각질층의 온도를 37℃ 내지 48℃의 범위에서 유지함)를 포함하는, 적어도 3개의 층, 피부 각질층 외층; 표피; 및 진피를 갖는 포유류 피부의 상태를 조절하는 미용 방법.
2. 제1항에 있어서, 에너지를 RF 에너지 전달 기구에 의해 전달하며, RF 에너지는 겔 조성물을 통하여 피부 각질층과 접촉하는 2개 이상의 전극을 통하여 전달하는 미용 방법.
3. 제2항에 있어서, RF 에너지 전달 기구를 켤 때, 상기 기구는 20 내지 50초 동안 최대 출력의 35% 내지 65%의 범위의 RF 에너지를 전달하며, 그 후 상기 출력은 20 내지 50초 동안 65% 내지 100%로 증가시키며, 그 후 에너지 전달은 피부 각질층의 온도를 37℃ 내지 48℃의 범위로 유지하도록 제어하는 미용 방법.
4. 제1항에 있어서, 에너지 전달 기구는 핸드헬드형이며, 상기 기구를 소비자의 눈 아래에 적용하고 눈 밑에서 눈가 주름 영역 바로 위까지 이동시키고, 그 후 방향을 반대로 하며, 에너지 전달 기구를 3 내지 6분 동안 이 경로를 가로질러 전후로 이동시키는 미용 방법.
5. 제1항에 있어서, 에너지 전달 기구는 핸드헬드형이며, 상기 기구를 소비자의 눈 위에 적용하고 눈 위에서 눈가 주름 영역 바로 아래까지 이동시키고, 그 후 방향을 반대로 하며, 에너지 전달 기구를 3 내지 6분 동안 이 경로를 가로질러 전후로 이동시키는 미용 방법.
6. 제4항에 있어서, 소비자의 다른 눈 밑에서 반복하는 미용 방법.
7. 제5항에 있어서, 소비자의 다른 눈 위에서 반복하는 미용 방법.
8. 제1항에 있어서, 겔 조성물은 전기 전도도가 1,000 내지 2,000 μS/㎝인 미용 방법.
9. 제1항에 있어서, 에너지 전달 기구는 핸드헬드형이며, 에너지 전달 기구를 소비자의 하나의 눈 아래에 적용하고 에너지 전달 기구를 3 내지 6분 동안 계속적인 전후 작동으로 눈가 주름 바로 위까지 이동시키는 단계, 그 후 에너지 전달 기구를 소비자의 눈 위에 적용하고 에너지 전달 기구를 3 내지 6분 동안 계속적인 전후 작동으로 눈가 주름 영역 바로 아래까지 이동시키는 단계, 이들 두 단계를 소비자의 다른 눈에서 반복하여 소비자의 양 눈에 인접한 눈가 주름을 6 내지 12분 동안 각각 처리하는 단계를 포함하는 다단계 요법에 에너지 전달 기구를 사용하는 미용 방법.
10. 제9항에 있어서, 다단계 요법을 3주 내지 6주 동안 주당 3 내지 5일의 요법 기간 동안 일일 1회 이상 완료하는 미용 방법.
11. 제10항에 있어서, 소비자는 2 내지 8개월 동안 기다리며, 그 후 요법 기간 동안 다단계 요법을 반복하는 미용 방법.
12. 삭제
13. 제2항에 있어서, RF 에너지 전달 기구는 광을 방출하지 않으며, 상기 기구는 전자기 에너지를 생성하지 않는 미용 방법.

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