KR19980703290A

KR19980703290A - 생리 활성 펩티드를 함유하는 경점막 투여 제제

Info

Publication number: KR19980703290A
Application number: KR1019970706694A
Authority: KR
Inventors: 나까유끼 야마모또; 데루오미 이또
Original assignee: 야마모또가즈모또; 아사히가세이고교가부시끼가이샤; 나까또미히로따까; 히사미쯔세이야꾸가부시끼가이샤
Priority date: 1995-08-15
Filing date: 1996-08-12
Publication date: 1998-10-15
Anticipated expiration: 2016-08-12
Also published as: TW438595B; JPH11292787A; EP0845265A4; KR100256934B1; WO1997006813A1; EP0845265A1

Abstract

생리 활성 펩티드에 적어도 흡수 촉진제와 혈관 확장 작용을 갖는 화합물을 배합하여 이루어지는 경점막 투여 제제로서, 흡수 촉진제 및 혈관 확장 작용을 갖는 화합물과의 병용에 의해 목적으로 하는 생리 활성 펩티드의 흡수를 증대할 수 있으며, 따라서, 주사에 의한 환자의 고통을 없게 하여 자기 투여할 수 있기 때문에, 장기 투여가 필요한 생리 활성 펩티드 제제로서 매우 유용하다.

여기에서, 생리 활성 펩티드로서는 인슐린, 칼시토닌, 사람 PTH, 소마토스타틴, 글루카곤 등을 들 수 있으며, 흡수 촉진제로서는 담즙산 염류, 시클로덱스트린, 인지질, 비이온성 계면활성제, 고급 지방산 등을 들 수 있으며, 혈관 확장 작용을 갖는 화합물로서는 칼슘 채널 저해제, 프로스타글란딘 E1, 질산 이소소르비드, 니트로글리세린 등을 들 수 있다.

Description

생리 활성 펩티드를 함유하는 경점막 투여 제제

산업상의 이용 분야

본 발명은 생리 활성 펩티드에 적어도 비점막 또는 직장 점막에 대하여 생리 활성 펩티드의 흡수 촉진 작용을 갖는 흡수 촉진제와 혈관 확장 작용을 갖는 화합물을 배합하는 것을 특징으로 하는 경점막 투여 제제에 관한 것으로, 생리 활성 펩티드를 점막에서 효율좋게 흡수시킴으로써 의료상 유효한 효과를 갖는 펩티드 경점막 투여 제제에 관한 것이다.

종래의 기술

인슐린, 칼시토닌 등의 생리 활성 펩티드는 통상 주사제의 형태로 투여되고 있다. 그러나, 주사제에 의한 투여는 환자의 통원을 필요로 하며 고통을 동반하므로, 재택 투여를 할 수 있는 투여제형이 요망되고 있다.

또한, 생리 활성 펩티드의 경구 투여 제제는 소화관에서의 흡수가 현저히 낮고, 단백 분해 효소에 의한 분해, 간장에 의한 1 차 통과 효과를 받기 때문에 실용화에는 이르지 못하였다.

따라서, 이러한 문제를 해결하고자 경점막 투여 제제로서 비점막 또는 직장 점막에서 각종 흡수 촉진제를 사용하여 흡수를 증가시키는 것이 시도되고 있다. 흡수 촉진제로서는 계면 활성 작용을 갖는 담즙산 염류, 예를 들면 타우로콜산 나트륨, 콜산 나트륨, 디옥시콜산 나트륨, 케노데옥시콜산 나트륨, 케노데옥시콜산 라이신, 글리코콜산 나트륨, 글리코데옥시콜산 나트륨, 타우로콜산 라이신 등 (일본 특허 공개 공보 (소) 59-130820호, EP 공개 115627호 명세서, 일본 특허 공개 공보 (평) 1-228919호, 미국 특허 제5149537호 명세서) 또는 예를 들어 세틸트리메틸암모늄브로마이드, 도데실메틸암모늄브로마이드와 같은 에틸렌옥시드 부가 장쇄 아민 축합 산물 및 4급 암모늄 화합물의 양이온 계면활성제, 알킬벤젠술폰산염, N-아실-n-알킬타우린산염, α-올레핀술폰산염 등의 음이온 계면활성제, 폴리옥시알킬렌 고급 알코올 에테르, 폴리알킬렌페놀류와 같은 비이온 계면활성제 등의 계면활성제 (일본 특허 공개 공보 (평) 제4-247034호)등을 사용한 경비 (nasal) 투여제가 많이 보고되어 있다.

또한, 글리시리진산 디암모늄, 글리시리진산 알칼리염 (일 또는 이나트륨, 일 또는 이칼륨) 등의 글리시리진산 염류 (일본 특허 공개 공보 (평) 2-42027호 공보, 특개평 3-5427호 공보), α-시클로덱스트린, β-시클로덱스트린, γ-시클로덱스트린, 모노 또는 디메틸화 시클로덱스트린 (α-, β- 또는 γ-) 등의 시클로덱스트린류 (일본 특허 공개 공보 (소) 58-189118호 공보, EP 공개 94157호 명세서), 탄소수 8 내지 18의 아실기를 갖는 O-아실-L-카르니틴류 (일본 특허 공개 공보 (평) 63-10735호, EP 공개 215697호 명세서) 또는 킬레이트제, 폴리아크릴산 겔, 카프린산 나트륨 (US 4476116호 명세서)을 비점막 또는 직장 점막에서의 흡수 촉진제로써 사용한 경점막 투여제가 많이 보고되어 있다.

또한 하기 화학식 [1]

(식 중, R은 알킬기, m은 2 내지 4의 정수, n은 1 내지 15의 정수를 나타낸다. 단, n이 1 내지 3인 경우에 R은 탄소수 5 내지 11의 알킬기를 나타낸다)로 표시되는 아자시클로알칸 유도체 (일본 특허 공개 공보 (소) 62-238261호)가 뛰어난 흡수 촉진 작용을 갖는다는 것이 알려져 있다.

다시 예를 들면, 담즙산 염류 및 푸시드산 유도체의 사용예로서 J. Japan Diab. Soc., 20 (2), 146-152 (1977)/Proc. Nati. Acad. Sci. USA, 82, No. 21:7419-7423 (1985)/pharm. Res., 9 (1), 52-57 (1992) 등이 있다. 그러나, 이들 흡수 촉진제는 코에 대한 자극 및 점막에 대한 손상을 불러 일으키기 때문에 사용할 수 없다는 것을 알았다.

이와 같이, 흡수 촉진제를 사용한 제제는 흡수성 또는 국소 자극성의 점에서는 충분하다고는 할 수 없어 아직 실용화되기에는 이르지 못하고 있는 것이 실상이었다. 그러므로, 펩티드 의약품의 흡수성을 향상시킬 수 있는지가 실용화의 커다란 열쇠가 되고 있다.

발명이 해결하고자 하는 과제

본 발명은 생리 활성 펩티드를 비점막, 구강 점막, 폐 점막, 직장 점막, 질 점막, 안 점막 및 소화관 점막을 통해 전신에 충분한 약효를 나타내도록 흡수가 좋으며 또한 점막에 대한 장해성이 적은 경점막 흡수 제제로서 제공하고자 하는 것이다.

과제를 해결하기 위한 수단

본 발명자는 상기 과제를 해결하기 위하여 흡수성 및 안전성이 뛰어나고 부작용이 적은 생리 활성 펩티드를 함유하는 경점막 투여제를 개발하고자 예의 연구를 거듭한 결과, 놀랍게도 공지된 흡수 촉진제와 혈관 확장 작용을 갖는 화합물, 예를 들면, 칼슘 채널 저해재 또는 프로스타글란딘 E1, 질산 이소소르비드 (isosorbide dinitrate), 니트로글리세린을 배합함으로써 의외로 펩티드류의 흡수성을 현저히 향상시키는 것을 발견하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉, 본 발명은 생리 활성 펩티드에 공지된 흡수 촉진제와 혈관 확장 작용을 갖는 화합물의 조합으로 이루어지는 생리 활성 펩티드 함유 경점막 투여 제제를 제공하는 것이다. 한편, 혈관 확장 작용을 갖는 화합물 그 자체에는 점막에서의 흡수 촉진 작용은 거의 없거나 또는 촉진시킨다 해도 아주 작기 때문에 종래 기술에서는 전혀 예측할 수 없는 것이었다.

본 발명에 사용되는 흡수 촉진제란, 약물의 생체막 투과성을 변화시켜 흡수를 현저히 증가시키고 생체 이용율을 증가시키는 것의 총칭이며, 흡수 촉진제로서 비점막 또는 직장 점막에 대하여 생리 활성 펩티드의 흡수 촉진 작용을 가짐으로써 , 생리 활성 펩티드로서 인슐린을 사용한 비점막 또는 직장 점막에서의 흡수 개선율은 흡수 촉진제를 사용하지 않는 약제에 대하여 200 % 이상의 흡수 촉진 작용을 갖는 것이 바람직하고, 더욱 바람직하게는 500 % 이상의 흡수 촉진 작용을 갖는다.

이와 같은 흡수 촉진제로서는 비점막 또는 직장 점막에 대하여 생리 활성 펩티드의 흡수 촉진 작용을 갖는 것으로서 공지된 흡수 촉진제를 들 수 있으며 예를 들면, 계면 활성 작용을 갖는 담즙산 염류, 예를 들면 타우로콜산 나트륨, 콜산 나트륨, 데옥시콜산 나트륨, 케노데옥시콜산 나트륨, 케노데옥시콜산 라이신, 글리코콜산 나트륨, 글리코데옥시콜산 나트륨, 타우로콜산 라이신 등 또는 예를 들면, 세틸트리메틸암모늄브로마이드, 도데실메틸암모늄브로마이드와 같은 에틸렌옥시드 부가 장쇄아민 축합 산물 및 4급 암모늄 화합물의 양이온 계면활성제, 알킬 벤젠 술폰산염, N-아실-n-알킬타우르산염, α-올레핀술폰산염 등의 음이온 계면활성제, 폴리옥시알킬렌 고급 알코올에테르, 폴리알킬렌알킬페놀류와 같은 비이온 계면활성제 등의 계면활성제, 글리시리진산 이암모늄, 글리시리진산 알칼리염 (일 또는 이나트륨, 일 또는 이칼륨) 등의 글리시리진산 염류, α-시클로덱스트린, β-시클로덱스트린, γ-시클로덱스트린, 모노 또는 디메틸화 시클로덱스트린 (α-, β- 또는 γ-) 등의 시클로덱스트린류, 탄소수 8 내지 18의 아실기를 갖는 O-아실-L-카르니틴류 또는 킬레이트제, 폴리아크릴산 겔, 카프르산 나트륨 등을 들 수 있다.

더욱 바람직한 흡수 촉진제로서는 예를 들면, 담즙산 염류, 푸시드산 염류, 글리시리진산 염류, O-아실-L-카르니틴염류, 인지질, 비이온성 계면활성제, 시클로덱스트린류, 고급 지방산, 1-알킬-2-피롤리돈 유도체, 1-도데실아자시클로헵탄-2-온 (Azone), 바시트라신, 아줄렌술폰산 나트륨 및 하기 화학식 [1]

화학식 1

(식 중, R은 알킬기, m은 2 내지 4의 정수, n은 1 내지 15의 정수를 나타낸다. 단, n이 1 내지 3인 경우에 R은 탄소수 5 내지 11의 알킬기를 나타낸다)로 표시되는 아자시클로알칸 유도체로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있다.

또한, 담즙산 염류로서는 예를 들면, 타우로콜산 나트륨, 글리코콜산 나트륨, 데옥시콜산 나트륨으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있다.

푸시드산 염류로서는 예를 들면, 푸시드산 나트륨, 타우로-24, 25-디히드로푸시드산 나트륨으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있다.

글리시리진산 염류로서는 예를 들면, 글리시리진산염, 3-숙시닐옥시글리시리진산디나트륨 (카르베녹솔론)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있다.

O-아실-L-카르니틴 염류로서는 예를 들면, 아실기의 탄소수 8 내지 18의 O-아실-L-카르니틴 염류를 들 수 있으며, 바람직하게는 O-옥타노일-L-카르니틴 염산염, O-라우로일-L-카르니틴 염산염, O-팔미토일-L-카르니틴 염산염을 들 수 있다.

인지질로서는 예를 들면, 포스파티딜콜린 (레시틴), 리소포스파티딜콜린 (리소레시틴), 리소포스파티딜글리세롤로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있다.

비이온성 계면활성제로서는 예를 들면 폴리옥시알킬렌 고급 알코올에테르류, 폴리옥시알킬렌 알킬페놀류, 자당지방산 에스테르류로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있으며, 바람직하게는 폴리옥시에틸렌 (9) 라우릴에테르 (Laureth-9), 폴리옥시에틸렌 (24) 콜레스테릴에테르 (Choleth-24)를 들 수 있다.

또한, 시클로덱스트린류로서는 예를 들면, α-시클로덱스트린, β-시클로덱스트린, γ-시클로덱스트린, 디메틸-β-시클로덱스트린으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있다.

고급 지방산으로서는 예를 들면, 탄소수 16 내지 20의 고급 지방산을 들 수 있으며, 바람직하게는 올레산, 리놀산, 리놀레산으로부터 선택되는 탄소수 18의 고급 불포화 지방산의 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있다.

1-알킬-2-피롤리돈 유도체로서는 알킬기가 탄소수 4 내지 12로 이루어지는 군으로부터 선택되는 화합물의 1 종 또는 2 종 이상을 들 수 있으며 예를 들면, 부틸기, 펜틸기, 헥실기, 헵틸기, 옥틸기, 노닐기, 데실기, 운데실기 및 도데실기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 알킬기를 갖는 화합물을 들 수 있다.

또한, 화학식 1로 표시되는 아자시클로알칸 유도체에서 그의 R이 의미하는 알킬기로서는 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 펜틸, 헥실, 헵틸, 옥틸, 노닐, 데실, 운데실, 도데실, 트리데실, 테트라데실, 펜타데실, 헥사데실, 헵타데실, 옥타데실, 나노데실, 에이코실 등의 직쇄상 또는 분지쇄상 알킬기를 들 수 있으며, 바람직하게는 R이 탄소수 10의 알킬기, m이 3, n이 2로 표시되는 1-[2-(데실티오)에틸]아자시클로펜탄-2-온(1-[2-(decylthio)ethyl]azacyclopentane-2-one, 일반명: 피로티오데칸, 오일 상태 물질)을 들 수 있다.

또한, 점막에 대하여 흡수 촉진 작용을 갖는 화합물이면 어떤 것도 좋으며, 상기 구체적인 예로 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 배합되는 흡수 촉진제는 점막에 대한 자극성이 적고 안전성이 높은 것이 바람직하며, 1-[2-(데실티오)에틸]아자시클로펜탄-2-온, 글리코콜산 나트륨, 리소레시틴, 아줄렌술폰산 나트륨 등을 들 수 있다. 본 발명의 경점막 투여 제제 중의 특히 바람직한 흡수 촉진제는 1-[2-(데실티오)에틸]아자시클로펜탄-2-온, 리소레시틴이다. 이러한 제제에 대한 배합량은 0.01 내지 5 중량%이다.

또한, 화학식 1로 표시되는 아자시클로알칸 유도체, 바람직하게는 1-[2-(데실티오)에틸]아자시클로펜탄-2-온을 사용하여 에멀젼 용액 제제로 만드는 경우에는 적절히 글리시리진 또는 그의 염, 예를 들면, 이칼륨염을 제제 중 0.01 내지 10 % (w/v), 바람직하게는 0.1 내지 5 % (w/v) 농도로써 사용해도 좋다.

본 발명에 사용되는 혈관 확장 작용을 갖는 화합물로서는 분자량 200 내지 700의 화합물을 들 수 있으며, 특히 칼슘 채널 저해제가 있다. 일반적으로 칼슘 채널 저해제는 세포내로의 Ca 유입을 억제함으로써 혈관 확장 작용 및 방실 결절 전도 시간의 연장 작용을 나타내며 고혈압, 부정맥에 효과를 나타내고, 각종 순환기 질환의 치료에 널리 사용되고 있다. 구체적으로는, 벤조디아제핀 유도체로서 염산 딜티아젬 등, 페닐알킬아민 유도체로서 염산 베라파밀, 염산 베프리딜 등, 디히드로피리딘 유도체로서 염산 니페디핀, 염산 니카르디핀, 염산 니모디핀 등, 피페라진 유도체로서 신나리진, 플루나리진 등, 기타 염산 파수딜을 들 수 있다.

그외의 강력한 혈관 확장 작용을 갖는 약물로서는 질산 이소소르비드, 니트로글리세린, 프로스타글란딘 E1를 들 수 있다. 이러한 질산 이소소르비드, 니트로글리세린은 종래부터 주사제, 경구제, 테입 (tape)제로서 허혈성 심장 질환, 협심증에 널리 사용되고 있다. 이 작용은 혈관 평활근에 직접 작용하여 혈관을 확장하는 것이며, 비교적 굵은 관동맥을 확장하고 관혈관 저항을 감소시킴과 동시에 측부혈 행로도 확장하여, 허혈부 심근으로의 산소 공급을 증가시킴으로써 심장 기능의 개선을 가져온다. 또한, 프로스타글란딘 E1 (PGE1)은 강력한 혈관 확장 작용 및 혈소판 응집 억제 작용을 가지며, 만성 동맥 폐색증에 따른 지혈성 궤양 등의 치료에 임상 응용되고 있다. 또한, 혈관 확장 작용을 갖는 화합물이면 어떤 것도 좋으며, 상기 구체예로 한정되는 것은 아니다.

본 발명에 배합되는 혈관 확장 작용을 갖는 화합물은 통상, 순환기 질환의 치료로 대량 시판되고 있는 의약품이며, 점막으로의 국소 투여를 위한 제제에 첨가되는 경우에 첨가제로서의 배합량은 배합되는 혈관 확장 작용을 갖는 화합물이 생리 활성 펩티드를 점막에서 효율좋게 흡수시키는 양이면 특별히 한정되는 것은 아니지만, 바람직하게는 약효 성분으로서 최저 상용량의 1/2 이하이면 좋고, 바람직하게는 1/5 이하이다. 구체적으로는 예를 들면, 염산 딜티아젬 주사제의 1 회 최저 사용량은 10 ㎎인데, 그의 1/2 이하가 바람직하고, 적합하게는 1/5 이하를 배합할 수 있다. 또한, 프로스타글란딘 E1 주사제의 1 회 최저 사용량은 20 ㎍이지만, 그의 1/2 (10 ㎍)이 바람직하고, 적합하게는 1/5 (4 ㎍) 이하를 배합할 수 있으며, 하한 농도로서는 1회 투여용의 정제 중 0.1 ㎍ 이상, 적합하게는 1 ㎍ 이상이면 좋다.

본 발명에 사용되는 생리 활성을 갖는 펩티드로서는 3 개 이상의 아미노산으로 구성되는 생리 활성을 갖는 펩티드가 사용된다. 분자량은 300 내지 10,000인 것이 바람직한 대상으로서 들 수 있다. 상기한 펩티드의 예로서는 인슐린, 칼시토닌, 사람 PTH (1→34), 칼시토닌 유전자 관련 펩티드 (CGRP), 안지오텐신 II, 바소프레신, 아세트산 데스모프레신, 아세트산 부세렐린, 아세트산 고세렐린, 아세트산 나파렐린, 아세트산 류프로렐린, 소마토스타틴, 글루카곤, 옥시토신, 세크레틴, 황체 형성 호르몬 방출 호르몬 (LH-RH), 부신피질 자극 호르몬 (ACTH), 갑상선 호르몬 방출 호르몬 (TRH), 갑상선 자극 호르몬 (TSH), 심방 나트륨 이뇨 펩티드 (ANP) 및 이들의 합성물 및 반합성물을 포함하는 유도체 등을 들 수 있다.

또한, 본 발명의 칼시토닌으로서는 예를 들면, 뱀장어 칼시토닌, 연어 칼시토닌, 사람 칼시토닌, 돼지 칼시토닌, 닭 칼시토닌 등의 천연형 칼시토닌 및 ASU^1-7뱀장어 칼시토닌 (엘카토닌), ASU^1-7닭 칼시토닌 등의 반합성 칼시토닌을 들 수 있다. 또한, 인슐린으로서는 사람 인슐린, 돼지 인슐린, 소 인슐린 등을 들 수 있다.

본 발명의 경점막 투여 제제 중의 특히 바람직한 펩티드는 엘카토닌과 사람 인슐린이다.

이하에 본 발명의 경점막 투여 제제의 제제화에 대하여 설명한다.

본 발명 제제에 있어서 생리 활성 펩티드의 배합량은 펩티드의 활성 및 치료량의 필요성에 따라 선택하면 좋은데, 비점막에서의 펩티드의 흡수율이 차이에 따라 임의로 변화시키면 좋다. 예를 들면, 본 경점막 투여 제제에 있어서 생리 활성 펩티드의 수용액으로 하였을 때의 바람직한 사용 농도는 0.000001 내지 5 % (w/v)를 들 수 있으며, 더욱 바람직하게는 0.00001 내지 1 % (w/v)를 들 수 있다.

본 발명의 경점막 투여 제제는 비점막, 구강 점막, 폐 점막, 직장 점막, 질 점막, 안 점막 등의 제제로써 사용할 수 있으며, 제제화에 따라서는 용액 또는 고형, 반고형이어도 좋으며 일반적으로 분무 또는 적하에 적합한 수용액 또는 좌제의 형태인 것이 편리하고 수용액 또는 좌제의 형태로 제조함에 있어서, 간편하게는 기제로서 증류수, 글리세린, 프로필렌글리콜, 위텝 졸, 카카오 기름, 대두유, 중쇄 지방산 트리글리세리드, 폴리비닐피롤리돈 등의 수용액 또는 유용성 기제를 사용하면 좋다.

또한, 이와 같은 수용액의 제제는 생리 활성 펩티드를 함유하고, 상기의 흡수 촉진제 중에서 선택된 1 종 또는 2 종 이상과 상기의 혈관 확장 작용을 갖는 화합물 중에서 선택된 1 종 또는 2 종 이상, 다시 필요에 따라 pH 조정제, 등장화제, 보존제, 안정화제, 가용화제, 유화제 등을 첨가하여 소정의 농도가 되도록 적절한 양의 증류수를 사용하여 용해 또는 현탁하여 조제하면 좋으며, 에멀젼 용액으로 만들 수도 있다. 특히 용액 중에서의 안정성이 문제가 될 때는 다시 동결 건조, 분무 건조 등에 의해 고형으로 만들 수도 있다.

상기 제제의 pH는 생리 활성 펩티드의 안정성에 영향을 주지 않으며, 비점막에 대한 충격이 적은 범위에서 침전물 등을 발생하지 않는 pH를 선택하면 좋다. 통상 pH 4 내지 8인 것이 바람직하며, pH 조정제로서는 수산화 나트륨, 수산화 칼륨, 탄산 나트륨, 탄산수소 나트륨, 염산, 황산 또는 적당한 완충제 예를 들면, 인산, 아세트산, 젖산, 시트르산을 첨가할 수 있다. 또한, 침투압은 등장인 것이 바람직하며, 등장화제로서는 글리세린, 염화나트륨, 만니톨, 포도당 등을 필요에 따라 첨가할 수 있다. 다시 보존제를 첨가해도 좋고 치료학상 허용될 수 있는 보존제가 일반적으로 사용된다. 예를 들면, 파라옥시 벤조산메틸, 파라옥시벤조산 에틸, 파라옥시벤조산 프로필, 파라옥시벤조산부틸, 염화벤잘코늄, 염화벤제토늄, 페닐에틸알코올, 클로로부탄올, 페놀, 크레졸, 티메로살, 데히드로 아세트산, 소르브산 등을 들 수 있다. 보존제의 적절한 농도는 선택된 보존제에 따라 다소 차이가 있으나, 0.01 % 내지 2 % (w/v)이다.

본 발명 제제의 제조법으로서는 자체 공지된 수단에 따라 임의의 순서로 각 성분을 용해하여 제조할 수 있다. 본 발명 제제를 제조하기 위해서 수용액 제제의 제조법으로서는 예를 들면, 인슐린, 리졸레시틴, 프로스타글란딘 E1 및 본 발명에 관한 상기 첨가물에 적절한 양의 주사용 증류수를 첨가하고 교반하면서 용해시킨 후, 수산화 나트륨 또는 염산 등의 pH 조정제를 첨가하여 소정의 pH로 조정한다. 거기에서 얻어진 수용액을 예를 들면, 0.22 ㎛의 멤브란 필터에 의해 무균 여과시켜, 산고반사 제품 (U-SAVE: 바이알 병)에 충전하여 수용액 제제로서의 제품으로 만들 수 있다.

수용액 제제의 투여량은 투여 목적에 따라 각각 다른데, 비점막 투여 제제로서 예를 들면, 사람에게 있어서 정량 분무기 (0.05 내지 0.1 ml/한번 누름)를 사용하여 한쪽 또는 양쪽 비강내에 1 회 씩 하루 1 내지 3 회 분무함으로써 확실히 투여할 수 있다.

직장 점막 또는 질 점막 투여용의 좌제 제제의 제조법으로서는 위텝졸 (Witepsol), 카카오 기름, 마크로골 (macrogol), 프로필렌글리콜, 글리세린 등을 필요에 따라 사용할 수 있으며, 통상법에 따라 조제하면 좋다.

본 발명의 제제 투여 방법으로서는 일반적으로 스프레이 분무 장치에 의해 안개상으로써 점막에 투여하고, 전신 작용을 목적으로 한다. 또한, 본 발명 제제는 점막의 광범위에 부착시킴으로써 확실히 점막을 투과하여 전신에 펩티드를 분포시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 펩티드 함유 경점막 투여 제제는 펩티드의 투여 대상 환자에 대하여 주사 투여에 의한 아픔과 고통 등의 문제점이 없으며 자기 투여가 가능하고, 경점막 투여 제제로서 비점막, 구강 점막, 폐 점막, 직장 점막, 질 점막, 안 점막 투여 제제 등으로써 제공할 수 있다.

도 1은 엘카토닌 경비 투여 후의 혈중 농도의 프로필.

도 2는 엘카토닌 피하 주사 (AUC)에 대한 흡수율 (%).

도 3은 사람 인슐린 경비 투여 후의 혈중 농도의 프로필.

도 4는 사람 인슐린 경비 투여 후의 혈중 농도의 프로필.

도 5는 LH-RH 경비 투여 후의 혈중 농도의 프로필.

이하에 실시예 및 참고예를 들어, 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하고 있지만, 본 발명이 이들에 한정되는 것은 아니다. 또한 실험예를 들어 본 발명 제제의 효과를 구체적으로 나타낸다.

참고예 1

글리코콜산 나트륨 (SGC: 시그마사 제품, 미국)을 pH 6.0 등장 인산 완충액 1 ml에 대하여 5 ㎎의 비율로 용해하였다. 이 용액 1 ml를 엘카토닌 400 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 엘카토닌 400단위/ml의 액제 (대조 1)를 얻었다.

참고예 2

염산 딜티아젬 (DTZ: 시그마사 제품, 미국) 10 ㎎을 pH 6.0 등장 인산 완충액 2 ml에 용해하였다. 이 용액 1 ml를 엘카토닌 400 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 엘카토닌 400단위/ml의 액제 (대조 2)를 얻었다.

실시예 1

염산 딜티아젬 (DTZ: 시그마사 제품, 미국) 10 ㎎을 0.5 % 글리코콜산 나트륨 수용액 (pH 6.0 등장 인산 완충액) 2 ml에 용해하여 0.5 % SGC와 0.5 % DTZ를 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml를 엘카토닌 400 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 엘카토닌 400단위/ml의 액제를 얻었다.

실시예 2

염산베라파밀 (VP: 시그마사 제품, 미국) 10 ㎎을 미리 N-비닐-2-피롤리돈 (와꼬 준야꾸사 제품, 일본)과 글리코콜산나트륨 (SGC: 시그마사 제품, 미국)을 pH 6.0 등장 인산 완충액 1 ml에 대하여 각각 50 ㎎와 5 ㎎의 비율로 용해하여 얻은 0.5 % 글리코콜산 나트륨 용액 2 ml에 용해하여 0.5 % SGC와 0.5 % VP를 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml를 엘카토닌 400 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 엘카토닌 400단위/ml의 액제를 얻었다.

실시예 3

염산베프리딜 (BP: 시그마사 제품, 미국) 10 ㎎을 미리 N-비닐-2-피롤리돈 (와꼬 준야꾸사 제품, 일본)과 글리코콜산 나트륨 (SGC: 시그마사 제품, 미국)을 pH 6.0 등장 인산 완충액 1 ml에 대하여 각각 100 ㎎과 5 ㎎의 비율로 용해하여 얻은 0.5 % 글리코콜산 나트륨 용액 2 ml에 용해하여 0.5 % SGC와 0.5 % BP를 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml를 엘카토닌 400 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 엘카토닌 400단위/ml의 액제를 얻었다.

실시예 4

염산파스딜 (FS: 아사히 가세이 고교사 제품, 일본) 10 ㎎을 0.5 % 글리코콜산 나트륨 수용액 (pH 6.0 등장 인산 완충액) 2 ml에 용해하여 0.5 % SGC와 0.5 % FS를 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml를 엘카토닌 400 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 엘카토닌 400단위/ml의 액제를 얻었다.

실험예 1

래트에 의한 엘카토닌의 생체 흡수 실험

[생체 흡수 실험]

하룻 밤 절식한 위스타 (Wistar)계 수컷 래트 (일본 SLC: 체중 200 내지 250 g)를 1 군 4 마리, 펜토바르비탈 (넴부탈 주사액, 다이니뽄 세이야꾸사 제품, 일본)로 마취시켜 경부를 절개하여 기관에 폴리에틸렌 튜브를 삽입하였다. 이어서, 식도를 절개하고 튜브를 후비강 쪽으로 삽입하였다. 투여는 우측 비강에 마이크로 피펫을 사용하여 사용시에 조제된 약물액을 25 ㎕ 주입하였다. 약물 투여전 및 투여 후, 경시적으로 대퇴 정맥에서 200 ㎕ 채혈하였다. 그 후, 혈액은 원심 분리 (15,000 rpm/10 min/5 ℃)하여 얻어진 혈장을 분석할 때 까지, -30 ℃에 보존하였다.

또한, 흡수율의 비교를 위하여 엘카토닌 20 단위/ml (생리 식염수) 0.25 ml (비교 1)를 피하 투여하였다.

정량법

혈중 농도의 측정은 RIA법에 따라 정량하였다.

결과

혈중 엘카토닌 농도의 시간 추이를 도 1에 나타냈다. 엘카토닌 및 0.5 % 글리코콜산 나트륨을 포함하는 대조 1의 제제 투여군 (■-■)과 비교하여 엘카토닌, 0.5 % 글리코콜산 나트륨 및 0.5 % 염산 딜티아젬을 첨가한 실시예 1의 제제 투여군 (▲-▲)은 현저한 혈중 엘카토닌 농도의 상승이 관찰되고, 혈중 농도-시간 곡선하 면적 (AUC)은 대조 1 투여군과 비교하여 각각 약 3.6배로 엘카토닌의 비점막에서의 현저한 흡수 증가를 나타냈다. 그러나, 엘카토닌과 염산 딜티아젬을 포함하는 대조 2의 제제 투여군 (●-●)은 거의 엘카토닌의 비점막에서의 흡수는 관찰되지 않았다. 즉, 염산 딜티아젬 그 자체에는 흡수 촉진 작용을 갖지 않는다는 것을 알 수 있었다. 이로 부터 흡수 촉진제인 글리코콜산 나트륨과 혈관 확장 작용을 갖는 칼슘 채널 저해제의 1 종인 염산 딜티아젬과의 병용에 의해 매우 양호한 흡수 촉진 작용을 나타낸다는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 염산 베라파밀 (도 1 중 (○-○)으로 나타낸다), 염산 베프리딜 (도 1 중 (△-△)으로 나타낸다), 염산 파스딜 (도 1 중 (□-□)으로 나타낸다)을 포함하는 실시예 2, 실시예 3, 실시예 4의 제제 투여군도 염산 딜티아젬과 동일한 흡수 증가를 나타냈다.

또한, 도 2는 각 종 칼슘 채널 저해제의 흡수 촉진 증강 작용을 나타낸 것이다.

흡수율은 비교 1의 혈중 농도-시간 곡선하 면적 (AUC)값을 이용하여 이하의 계산식으로부터 구하였다.

(단, I.N.: 경비 투여, S.C.: 피하 투여를 의미한다)

도 2에서 밝혀졌듯이, 흡수 촉진제인 글루코콜산 나트륨 단독과 비교하여 칼슘 채널 저해제를 공존시킴으로써 엘카토닌의 비점막에서의 흡수가 2 배 이상 촉진되는 것이 나타났다.

참고예 3

r-사람 인슐린 (유전자 재조합 효모 유래 : 비활성 26 U/㎎: 베링거 만하임사 제품, 독일) 10 단위/바이알 (동결 건조)에 pH 7.4 등장 인산 완충액 1ml을 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제 (대조 3)를 얻었다.

참고예 4

L-α-리소레시틴 (LPC:시그마사 제품, 미국)을 pH 7.4 등장 인산 완충액 1ml에 대하여 5 ㎎의 비율로 용해하여 0.5 % LPC를 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 사람 인슐린 10단위/ml의 액제 (대조 4)를 얻었다.

실시예 5

염산 딜티아젬 (DTZ: 시그마사 제품, 미국) 10 ㎎를 0.5 % L-α 리소레시틴 수용액 (pH 7.4 등장 인산 완충액) 2 ml에 용해하여 0.5% LPC와 0.5 % DTZ를 포]함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 용액을 얻었다.

실시예 6

주사용 프로스타글란딘 R20 (프로스타글란딘 E1 : PGE1: 오노 야꾸힝 고교사 제품, 일본) 20 ㎍을 0.5 % L-α리소레시틴 (LPC) 수용액 (pH 7.4 등장 인산 완충액) 2 ml에 용해하여 0.5 % LPC와 0.001 % 농도 PGE 1을 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제를 얻었다.

실험예 2

래트에 의한 인슐린의 생체 흡수 실험

[생체 흡수 실험]

하룻 밤 절식한 위스타계 수컷 래트 (일본 SLC: 체중 200 내지 250 g)를 1 군 4 마리, 펜토바르비탈 (넴부탈 주사액, 다이니뽄 세이야꾸사 제품, 일본)로 마취시켜 경부를 절개하고 기관에 폴리에틸렌 튜브를 삽입하여 기도를 확보하였다. 이어서, 식도를 절개하고, 선단부를 탈지면으로 막은 튜브를 후비강 쪽으로 삽입하고, 비강에서 식도로의 약물액의 누출을 방지하였다. 투여는 우측 비강에 마이크로 피펫을 사용하여 조제된 약액을 25 ㎕ 주입하였다. 약물 투여 전 및 투여 후, 경시적으로 대퇴 정맥에서 200 ㎕ 채혈하였다. 그 후, 혈액은 원심 분리 (15,000 rpm/10 min/5 ℃)하여 얻어진 혈장을 분석할 때 까지, -30 ℃에 보존하였다.

정량법

혈중 농도의 측정은 2 종의 모노크로날 항체를 사용한 1 단계 샌드위치법을 기초로 한 EIA법에 의해서 사람 인슐린 측정 시약 (베링거 만하임사 제품, 독일)으로 정량하였다.

결과

혈중 인슐린 농도의 시간 추이를 도 3에 나타냈다. 도면 중 인슐린 수용액인 대조 3의 제제 투여군 (●-●)은 비점막에서 거의 흡수되지 않는다는 것을 나타내고 있다. 또한, 인슐린과 0.5 % L-α-리소레시틴 (LPC)을 포함하는 대조 4의 제제 투여군 (○-○)과 비교하여 인슐린 0.5 % 염산 딜티아젬 및 0.001 % PGE1을 첨가했을 때, 현저한 흡수 증가를 나타냈다. 또한, 0.5 % 염산 딜티아젬을 첨가한 실시예 5의 제제 투여군 (■-■) 및 0.001 % PGE1을 첨가한 실시예 6의 제제 투여군 (▲-▲)의 혈중 농도-시간 곡선하 면적 (AUC)은 대조 4 투여군과 비교하여 각각 약 1.7 배, 1.8 배로 유의하게 인슐린의 비점막에서의 현저한 흡수 증가를 나타냈다.

실시예 7

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. 엘카토닌 1000 단위

2. 글리코콜산 나트륨 5 ㎎

3. 염산딜티아젬 5 ㎎

4. 글리세린 22 ㎎

5. 파라옥시벤조산메틸 1 ㎎

6. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 5.5로 조정

7. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

또한, 얻어진 용액을 무균 여과 (0.22 ㎛의 멤브레인 필터)하여, 비강 투여용 정량 기계 분무 적용 바이알에 무균적으로 3 ml 충전하여 제품을 얻었다. 이 제품은 엘카토닌을 1000 단위/ml을 함유하며 어댑터를 한번 누름으로써 100 단위를 정확히 분무 투여할 수 있었다.

실시예 8

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. 엘카토닌 1000 단위

2. L-α-리소레시틴 5 ㎎

3. 프로스타글란딘 E1 10 ㎍

4. 글리세린 22 ㎎

5. 파라옥시벤조산메틸 1 ㎎

6. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 5.5로 조정

7. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

실시예 9

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. 엘카토닌 1000 단위

2. L-α-리소레시틴 5 ㎎

3. 질산 이소소르비드 0.1 ㎎

4. 글리세린 17.6 ㎎

5. D-소르비톨 10 ㎎

6. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 5.5로 조정

7. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

실시예 10

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 100 단위

2. 글리코콜산 나트륨 5 ㎎

3. 염산딜티아젬 5 ㎎

4. 글리세린 22 ㎎

5. 파라옥시벤조산메틸 1 ㎎

6. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0로 조정

7. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

또한, 얻어진 용액을 무균 여과 (0.22 ㎛의 멤브레인 필터)하여, 비강 투여용 정량 기계 분무 적용 바이알에 무균적으로 3 ml 충전하여 제품을 얻었다. 이 제품은 r-사람 인슐린을 100 단위/ml 함유하며 어댑터를 한번 누름으로써 10 단위를 정확히 분무 투여할 수 있었다.

실시예 11

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 100 단위

2. L-α-리소레시틴 5 ㎎

3. 프로스타글란딘 E1 10 ㎍

4. 글리세린 22 ㎎

5. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

6. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

7. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

또한, 얻어진 용액을 무균 여과 (0.22 ㎛의 멤브레인 필터)하여, 비강 투여용 정량 기계 분무 적용 바이알에 무균적으로 3 ml 충전하여 제품을 얻었다. 이 제품은 r-사람 인슐린을 100 단위/ml 함유하며 어댑터를 한번 누름으로써 100 단위를 정확히 분무 투여할 수 있었다.

실시예 12

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 100 단위

2. L-α-리소레시틴 5 ㎎

3. 질산 이소소르비드 0.1 ㎎

4. 글리세린 17.6 ㎎

5. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

6. D-소르비톨 10 ㎎

7. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

8. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

또한, 얻어진 용액을 무균 여과 (0.22 ㎛의 멤브레인 필터)하여, 비강 투여용 정량 기계 분무 적용 바이알에 무균적으로 3 ml 충전하여 제품을 얻었다. 이 제품은 r-사람 인슐린을 100 단위/ml을 함유하며 어댑터를 한번 누름으로써 10 단위를 정확히 분무 투여할 수 있다.

참고예 5

증류수 적당량에 흡수 촉진제로서 피로티오데칸 (1-[2-(decylthio)ethyl]azacyclopentane-2-one, 히사미쯔세이야꾸사 제품, 일본), 유화제로서 글리시리진산 디칼륨, 등장화제로서 글리세린을 용액 1ml에 대하여 각각 5 ㎎, 10 ㎎, 22 ㎎가 되도록 녹이고, 초음파 처리를 하여 균일한 용액이 되도록 조제하였다. 이어서, 1N 수산화 나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.5 % 프로티오데칸이 되도록 조제하였다. 이 용액 1 ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml (대조 5)을 얻었다.

참고예 6

1 ml 용액에 대하여 프로스타글란딘 E1 (PGE1: 주사용 프로스타글란딘 R20, 오노야꾸힝 고교사 제품, 일본)을 0.05 ㎎의 비율로 용해시키고 등장화제로서 글리세린을 25.7 ㎎ 첨가하여 최종적으로 1 N 수산화나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.005 % PGE1 용액을 조제하였다. 이 용액 1ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 용제 (대조 6)를 얻었다.

실시예 13

증류수 적당량에 흡수 촉진제로서 피로티오데칸, 유화제로서 글리시리진산 디칼륨, 등장화제로서 글리세린, 혈관 확장제인 프로스타글란딘 E1 (PGE1:주사용 프로스타글란딘 R20, 오노 야꾸힝 고교사 제품, 일본)을 각각 5 ㎎, 10 ㎎, 22㎎, 0.01 ㎎녹여 1 ml의 용액이 되도록 하고 초음파 처리를 하여 균일한 용액으로 조제하였다. 이어서, 1 N 수산화 나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.5 % 프로티오데칸, 0.001 % PGE1 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제를 얻었다.

실시예 14

증류수 적당량에 흡수 촉진제로서 피로티오데칸, 유화제로서 글리시리진산 디칼륨, 등장화제로서 글리세린, 혈관 확장제인 질산 이소소르비드 (ISDN: 니트롤 주사, 에이자이사 제품, 일본)를 각각 5 ㎎, 10 ㎎, 17.6 ㎎, 0.1 ㎎녹여 1 ml의 용액이 되도록 하고, 초음파 처리를 하여 균일한 용액으로 조제하였다. 이어서, 1 N 수산화 나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.5 % 피로티오데칸, 0.01 % ISDN 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제를 얻었다.

실시예 15

증류수 적당량에 흡수 촉진제로서 피로티오데칸, 유화제로서 글리시리진산 디칼륨, 등장화제로서 글리세린, 혈관 확장제인 질산 이소소르비드 (ISDN: 니트롤 주사, 에이자이사 제품, 일본)를 각각 5 ㎎, 10 ㎎, 13.2 ㎎, 0.2 ㎎녹여 1 ml의 용액이 되도록 하고, 초음파 처리를 하여 균일한 용액으로 조제하였다. 이어서, 1 N 수산화 나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.5 % 피로티오데칸, 0.02 % ISDN 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제를 얻었다.

실시예 16

증류수 적당량에 흡수 촉진제로서 피로티오데칸, 유화제로서 글리시리진산 디칼륨, 등장화제로서 글리세린, 혈관 확장제인 니트로글리세린 (밀리스롤 주사: 니뽄 가야꾸사 제품, 일본)을 각각 5 ㎎, 10 ㎎, 17.6㎎, 0.1 ㎎녹여 1 ml의 용액이 되도록 하고, 초음파 처리를 하여 균일한 용액이 되도록 조제하였다. 이어서, 1 N 수산화 나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.5 % 프로티오데칸, 0.01 % 니트로글리세린 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제를 얻었다.

실험예 3

래트에 의한 인슐린의 생체 흡수 실험 (2)

[생체 흡수 실험]

하룻 밤 절식한 위스타계 수컷 래트 (일본 SLC: 체중 200 내지 250 g)를 1 군 4 마리, 펜토바르비탈 (넴부탈 주사액, 다이니뽄 세이야꾸사 제품, 일본)로 마취시켜 경부를 절개하고 기관에 폴리에틸렌 튜브를 삽입하여 기도를 확보하였다. 이어서, 식도를 절개하고, 선단부를 탈지면으로 막은 튜브를 후비강 쪽으로 삽입하여 비강에서 식도로의 약물액 누출을 방지하였다. 투여는 우측 비강에 마이크로 피펫을 사용하여 사용시에 조제된 약물액을 25 ㎕ 주입하였다. 약물 투여 전 및 투여 후, 경시적으로 대퇴 정맥에서 200 ㎕ 채혈하였다. 그 후, 혈액은 원심 분리 (15,000 rpm/10 min/5 ℃)하여 얻어진 혈장을 분석할 때 까지, -30 ℃에 보존하였다.

정량법

혈중 농도 측정은 2 종의 모노크로날 항체를 사용한 1 단계 샌드위치법을 기토로 한 EIA법에 의해서 사람 인슐린 측정 시약 (베링거 만하임사 제품, 독일)으로 정량하였다.

결과

혈중 인슐린 농도의 시간 추이를 도 4에 나타냈다. 도면 중 인슐린 수용액인 대조 3의 제제 투여군 (●-●)은 비점막에서 거의 흡수되지 않는다는 것을 나타내고 있다. 마찬가지로, 인슐린과 0.005 % PGE1을 포함하는 대조 6의 제약 투여군 (○-○)에 대해서도 거의 흡수되지 않는다는 것을 나타내고 있다. 또한, 종래 기술인 인슐린과 0.5 % 피로티오데칸을 포함하는 대조 5의 제제 투여군 (△-△)과 비교하여 본 발명의 인슐린과 0.5 % 피로티오데칸에 0.001 % PGE1을 첨가한 실시예 13의 제제 투여군 (■-■) 및 0.01 % ISDN을 첨가한 실시예 14의 제제 투여군 (▲-▲) 및 0.02 % ISDN을 첨가한 실시예 15의 제제 투여군 (□-□) 및 0.01 % 니트로글리세린을 첨가한 실시예 16의 제제 투여군 (+-+)은 인슐린의 비점막에서의 현저한 흡수 증가를 나타내며, 이들의 혈중 농도-시간 곡선하 면적 (AUC; 0-2hr)은 대조 6 투여군과 비교하여 각각 약 1.7 배, 1.9 배, 2.0 배, 2.4 배로 유의하게 증가하였다.

실시예 17

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 100 단위

2. 피로티오데칸 5 ㎎

3. PGE1 0.005 ㎎

4. 글리시리진산 디칼륨 10 ㎎

5. 글리세린 22 ㎎

6. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

7. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

8. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

또한, 얻어진 용액을 무균 여과 (0.22 ㎛의 멤브레인 필터)하여, 비강 투여용 정량 기계 분무 적용 바이알에 무균적으로 3 ml 충전하여 제품을 얻었다. 이 제품은 r-사람 인슐린을 100 단위/ml을 함유하며 어댑터를 한번 누름으로써 10 단위를 정확히 분무 투여할 수 있었다.

실시예 18

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 500 단위

2. 피로티오데칸 5 ㎎

3. PGE1 0.01 ㎎

4. 글리시리진산 디칼륨 10 ㎎

5. 글리세린 22 ㎎

6. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

7. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

8. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

실시예 19

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 100 단위

2. 피로티오데칸 5 ㎎

3. 질산 이소소르비드 0.1 ㎎

4. 글리시리진산 디칼륨 10 ㎎

5. 글리세린 17.6 ㎎

6. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

7. D-소르비톨 10 ㎎

8. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

9. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

실시예 20

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 100 단위

2. 피로티오데칸 5 ㎎

3. 질산 이소소르비드 0.2 ㎎

4. 글리시리진산 디칼륨 10 ㎎

5. 글리세린 13.2 ㎎

6. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

7. D-소르비톨 20 ㎎

8. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

9. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

실시예 21

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 100 단위

2. 피로티오데칸 5 ㎎

3. 니트로글리세린 0.1 ㎎

4. 글리시리진산 디칼륨 10 ㎎

5. 글리세린 17.6 ㎎

6. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

7. D-소르비톨 10 ㎎

8. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

9. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

참고예 7

1 ml에 대해 질산 이소소르비드 (ISDN: 니트롤 주사, 에이자이사 제품, 일본)를 0.1 ㎎의 비율로 용해하고, 등장화제로 글리세린을 25.7 ㎎첨가하고, 최종적으로 1 N 수산화 나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.01 % ISDN 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 황체 형성 호르몬 (LH-RH 시그마사 제품, 미국) 100 ㎍/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 LH-RH 100㎍/ml의 액제 (대조 7)를 얻었다.

참고예 8

증류수 적당량에 흡수 촉진제로서 피로티오데칸, 유화제로서 글리시리진산 디칼륨, 등장화제로서 글리세린을 각각 5 ㎎, 10 ㎎, 22 ㎎녹여 1 ml의 용액이 되도록 하고, 초음파 처리를 하여 균일한 용액이 되도록 조제하였다. 이어서, 1 N 수산화 나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.5 % 피로티오데칸 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 황체 형성 호르몬 방출 호르몬 (LH-RH 시그마사 제품, 미국) 100 ㎍/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 LH-RH 100㎍/ml의 액제 (대조 8)를 얻었다.

실시예 22

증류수 적당량에 흡수 촉진제로서 피로티오데칸, 유화제로서 글리시리진산 디칼륨, 등장화제로서 글리세린, 혈관 확장제인 질산 이소소르비드 (ISDN:니트롤 주사, 에이자이사 제품을 사용, 일본)을 각각 5 ㎎, 10 ㎎, 17.6 ㎎, 0.1 ㎎녹여 1 ml의 용액이 되도록 하고, 초음파 처리를 하여 균일한 용액이 되도록 조제하였다. 이어서, 1 N 수산화 나트륨으로 pH 6.0으로 조정 후, 1 ml의 0.5 % 피로티오데칸, 0.01 % ISDN용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 황체 형성 호르몬 방출 호르몬 (LH-RH 시그마사 제품, 미국) 100 ㎍/바이알 (동결 건조)에 첨가하여 사람 인슐린 100㎍/ml의 액제를 얻었다.

실험예 4

래트에 의한 LH-RH의 생체 흡수 실험

[생체 흡수 실험]

하룻 밤 절식한 위스타계 수컷 래트 (일본 SLC: 체중 200 내지 250 g)를 1 군 4 마리, 펜토바르비탈 (넴부탈 주사액, 다이니뽄 세이야꾸사 제품, 일본)로 마취시켜 경부를 절개하고 기관에 폴리에틸렌 튜브를 삽입하여 기도를 확보하였다. 이어서, 식도를 절개하고 선단부를 탈지면으로 막은 튜브를 후비강 쪽으로 삽입하여, 비강에서 식도로의 약물액 누출을 방지하였다. 투여는 우측 비강에 마이크로 피펫을 사용하여 조제된 약물액을 10 ㎕/0.1 ㎎/㎏ 주입하였다. 약물 투여 전 및 투여 후, 경시적으로 대퇴 정맥에서 200 ㎕ 채혈하였다. 그 후, 혈액은 원심 분리 (15,000 rpm/10 min/5 ℃)하여 얻어진 혈장을 분석할 때 까지, -30 ℃에 보존하였다.

정량법

혈중 농도 측정은 경합형 EIA법에 의한 LH-RH 측정 시약 (페닌슐라사 제품, 미국)으로 정량하였다.

결과

혈중 LH-RH 농도의 시간 추이를 도 5에 나타냈다. 도면 중 LH-RH와 0.01 % ISDN을 포함하는 대조 7의 제제 투여군 (●-●)은 비점막에서 거의 흡수되지 않는다는 것을 나타내고 있다. 또한, 종래 기술인 LH-RH와 0.5 % 피로티오데칸을 포함하는 대조 8의 제약 투여군 (▲-▲)과 비교하여 본 발명의 인슐린과 0.5 % 피로티오데칸에 0.01 % ISDN을 첨가한 실시예 22의 제제 투여군 (■-■)은 LH-RH의 비점막에서 흡수 증가를 나타냈다. 이 혈중 농도-시간 곡선하 면적 (AUC; 0-2 시간)은 대조 8 투여군과 비교하여 약 1.5 배로 증가하였다.

실시예 23

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. LH-RH 5 ㎎

2. 피로티오데칸 5 ㎎

3. 질산 이소소르비드 0.1 ㎎

4. 글리시리진산 디칼륨 10 ㎎

5. 글리세린 17.6 ㎎

6. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

7. D-소르비톨 10 ㎎

8. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

9. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

또한, 얻어진 용액을 무균 여과 (0.22 ㎛의 멤브레인 필터)하여, 비강 투여용 정량 기계 분무 적용 바이알에 무균적으로 3 ml 충전하여 제품을 얻었다. 이 제품은 LH-RH을 5 ㎎/ml을 함유하며 어댑터를 한번 누름으로써 0.5 ㎎을 정확히 분무 투여할 수 있었다.

참고예 9

질산 이소소르비드 (ISDN: 니트롤 주사, 에이자이사 제품, 일본)를 pH 7.4 등장 인산 완충액 1 ml에 대하여 0.2 ㎎의 비율로 용해하여 0.02 % ISDN을 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제 (대조 9)를 얻었다.

실시예 24

질산 이소소르비드 (ISDN: 니트롤 주사, 에이자이사 제품, 일본) 0.1 ㎎를 0.5 % L-α 리소레시틴 수용액 (pH 7.4 등장 인산 완충액) 1 ml에 용해하여 0.5 % LPC와 0.01 % ISDN을 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml을 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제를 얻었다.

실시예 25

니트로글리세린 (밀리스롤 주사; 니뽄 가야꾸사 제품, 일본) 0.1 ㎎을 0.5 % L-α 리소레시틴 수용액 (pH 7.4 등장 인산 완충액) 1 ml에 용해하여 0.5 % LPC와 0.01 % 니트로글리세린을 포함하는 용액을 조제하였다. 이 용액 1 ml를 r-사람 인슐린 10 단위/바이알 (동결 건조)에 첨가하고 용해하여 사람 인슐린 10 단위/ml의 액제를 얻었다.

실험예 5

래트에 의한 인슐린의 생체 흡수 실험 (3)

[생체 흡수 실험]

하룻 밤 절식한 위스타계 수컷 래트 (일본 SLC: 체중 200 내지 250 g)를 1 군 4 마리, 펜토바르비탈 (넴부탈 주사액, 다이니뽄 세이야꾸사 제품, 일본)로 마취를 하여 경부를 절개하고 기관에 폴리에틸렌 튜브를 삽입하여 기도를 확보하였다. 이어서, 식도를 절개하고 선단부를 탈지면으로 막은 튜브를 후비강 쪽으로 삽입하여, 비강에서 식도로의 약물액 누출을 방지하였다. 투여는 우측 비강에 마이크로 피펫을 사용하여 사용시에 조제된 약물액을 25 ㎕을 주입하였다. 약물 투여 전 및 투여 후, 경시적으로 대퇴 정맥에서 200 ㎕ 채혈하였다. 그 후, 혈액은 원심 분리 (15,000 rpm/10 min/5 ℃)하여 얻어진 혈장을 분석할 때 까지, -30 ℃에 보존하였다.

정량법

혈중 농도 측정은 2 종의 모노클로날 항체를 사용한 1 단계 샌드위치법을 기초로 한 EIA법에 의해서 사람 인슐린 측정 시약 (베링거 만하임사 제품, 독일)으로 정량하였다.

결과

인슐린 수용액인 대조 3의 제제 투여군은 비점막에서 거의 흡수되지 않는다는 것을 나타내고 있다. 마찬가지로, 인슐린과 0.02 % 질산 이소소르비드 (ISDN)를 포함하는 대조 9의 제제 투여군에 대해서도 거의 흡수되지 않는다는 것을 나타내고 있다. 또한, 종래 기술인 인슐린과 0.5 % L-α 리소레시틴 (LPC)을 포함하는 대조 4 의 제제 투여군과 비교하여, 본 발명의 인슐린과 0.5 % LPC에 0.01 % ISDN 또는 0.01 % 니트로글리세린을 첨가한 실시예 24의 제제 투여군 및 0.01 % 니트로글리세린을 첨가한 실시예 25의 제제 투여군은 현저한 증가를 나타냈다. 이러한 혈중 농도-시간 곡선하 면적 (AUC; 0-2 시간)은 대조 4 투여군과 비교하여 각각 약 1.7 배, 1.5 배로 증가하였다.

실시예 26

경점막 투여 제제 1 ml 당

1. r-사람 인슐린 100 단위

2. L-α-리소레시틴 5 ㎎

3. 니트로글리세린 0.1 ㎎

4. 글리세린 17.6 ㎎

5. 염화벤잘코늄 0.1 ㎎

6. D-만니톨 10 ㎎

7. 염산/수산화 나트륨 적량 pH 6.0으로 조정

8. 주사용 증류수 총량 1ml로 하였다.

상기 조성을 갖는 농도로 조제하여 얻었다.

또한, 얻어진 용액을 무균 여과 (0.22 ㎛의 멤브레인 필터)하여, 비강 투여용 정량 기계 분무 적용 바이알에 무균적으로 3 ml 충전하여 제품을 얻었다. 이 제품은 r-인슐린을 100 단위/ml 함유하며 어댑터를 한번 누름으로써 10 단위를 정확히 분무 투여할 수 있었다.

발명의 효과

생리 활성을 갖는 펩티드를 함유하는 본 발명의 경점막 투여 제제는 흡수 촉진제의 사용량을 최소로 하여 점막에 대한 장해성을 나타내지 않고, 비점막에서 흡수를 증대할 수 있는 효과를 얻을 수 있다.

Claims

생리 활성 펩티드에 적어도 비점막 또는 직장 점막상으로의 생리 활성 펩티드의 흡수 촉진 작용을 갖는 흡수 촉진제와 혈관 확장 작용을 갖는 화합물이 배합되는 것을 특징으로 하는 경점막 투여 제제.
제1항에 있어서, 비점막 또는 직장 점막으로의 생리 활성 펩티드의 흡수 촉진 작용을 갖는 흡수 촉진제가 생리 활성 펩티드로서 인슐린을 사용한 비점막 또는 직장 점막에서의 흡수 개선율에 있어서 흡수 촉진제를 사용하지 않는 제제에 대하여 200 % 이상의 흡수 촉진 작용을 갖는 흡수 촉진제인 경점막 투여 제제.
제1항에 있어서, 흡수 촉진제가 담즙산 염류, 푸시드산 염류, 글리시리진산 염류, O-아실-L-카르니틴염류, 인지질, 비이온성 계면활성제, 시클로덱스트린류, 고급 지방산, 1-알킬-2-피롤리돈 유도체, 1-도데실아자시클로헵탄-2-온, 바시트라신, 아줄렌술폰산 나트륨 및 하기 화학식 [1]

화학식 1

(식 중, R은 알킬기, m은 2 내지 4의 정수, n은 1 내지 15의 정수를 나타내고, 단, n이 1 내지 3인 경우에 R은 탄소수 5 내지 11의 알킬기를 나타낸다)로 표시되는 아자시클로알칸 유도체로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 담즙산 염류가 타우로콜산 나트륨, 글리코콜산 나트륨, 데옥시콜산 나트륨으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 푸시드산 염류가 푸시드산 나트륨, 타우로 24, 25-디히드로 푸시드산 나트륨으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 글리시리진산 염류가 글리시리진산 염류, 3-숙시닐옥시글리시리진산 디나트륨 (카르베닉솔론)으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, O-아실-L-카르니틴 염류가 아실기의 탄소수 8 내지 18인 O-아실-L-카르니틴 염류인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, O-아실-L-카르니틴 염류가 O-옥타노일-L-카르니틴염산염, O-라우로일-L-카르니틴염산염, O-팔미토일-L-카르니틴 염산염으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 인지질이 포스파티딜콜린 (레시틴), 리소포스파티딜콜린 (리솔레시틴), 리소포스파티딜글리세롤으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 비이온성 계면활성제가 폴리옥시알킬렌 고급 알코올에테르류, 폴리옥시알킬렌알킬페놀류, 자당 지방산 에스테르류로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 비이온성 계면활성제가 폴리옥시에틸렌 (9) 라우릴에테르, 폴리옥시에틸렌 (24) 콜레스테릴에테르로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 시클로덱스트린류가 α-시클로덱스트린, β-시클로덱스트린, γ-시클로덱스트린, 디메틸-β-시클로덱스트린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 고급 지방산이 탄소수 16 내지 20의 고급 지방산인 경점막 투여 제제.
제13항에 있어서, 탄소수 16 내지 20인 고급 지방산이 올레산, 리놀산, 리놀레산으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 탄소수 18의 고급 불포화 지방산의 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 1-알킬-2-피롤리돈 유도체가 탄소수 4 내지 12의 알킬기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제15항에 있어서, 알킬기가 부틸기, 펜틸기, 헥실기, 헵틸기, 옥틸기, 노닐기, 데실기, 운데실기 및 도데실기로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제3항에 있어서, 화학식 1로 표시되는 아자시클로알칸 유도체가 R이 탄소수 10인 알킬기, m이 3, n이 2로 표시되는 1-[2-(데실티오)에틸]아자시클로펜탄-2-온인 경점막 투여 제제.
제1항에 있어서, 흡수 촉진제가 경점막 투여 제제 중 0.01 내지 5 중량%의 배합량인 경점막 투여 제제.
제1항에 있어서, 혈관 확장 작용을 갖는 화합물이 분자량 200 내지 700의 칼슘 채널 저해제, 프로스타글란딘 E1, 질산 이소소르비드 및 니트로글리세린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 1 종 또는 2 종 이상인 경점막 투여 제제.
제19항에 있어서, 칼슘 채널 저해재가 딜티아젬 염산염, 베라파밀 염산염, 베프리딜 염산염, 니페디핀 염산염, 니카르디핀 염산염 또는 파수딜 염산염인 경점막 투여 제제.
제1항에 있어서, 혈관 확장 작용을 갖는 화합물이 경점막 투여 제제 중 상기 화합물의 약효 성분으로서 최저 상용량의 1/2 이하로 배합되는 경점막 투여 제제.
제1항에 있어서, 생리 활성 펩티드의 분자량이 300 내지 10000인 경점막 투여 제제.
제1항에 있어서, 생리 활성 펩티드가 인슐린, 칼시토닌, 사람 PTH (1→34), 칼시토닌 유전자 관련 펩티드 (CGRP), 안지오텐신 Ⅱ, 바소프레신, 아세트산 데스모프레신, 아세트산 부세렐린, 아세트산 고세렐린, 아세트산 나파렐린, 아세트산 류프로렐린, 소마토스타틴, 글루카곤, 옥시토신, 세크레틴, 황체 형성 호르몬 방출 호르몬 (LH-RH), 부신피질 자극 호르몬 (ACTH), 갑상선 호르몬 방출 호르몬 (TRH), 갑상선 자극 호르몬 (TSH), 심방 나트륨 이뇨 펩티드 (ANP) 및 이들의 합성물 및 반합성믈을 포함하는 유도체로 이루어지는 군으로부터 선택된 펩티드인 경점막 투여 제제.
제23항에 있어서, 칼시토닌이 뱀장어 칼시토닌, 연어 칼시토닌, 돼지 칼시토닌, 사람 칼시토닌 및 닭 칼시토닌으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 경점막 투여 제제.
제24항에 있어서, 뱀장어 칼시토닌이 ASU^1-7뱀장어 칼시토닌 (엘카토닌)인 경점막 투여 제제.
제23항에 있어서, 인슐린이 사람 인슐린, 돼지 인슐린, 소 인슐린으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 경점막 투여 제제.
제1항에 있어서, 경점막 투여 제제가 비점막, 구강 점막, 폐점막, 직장 점막, 질 점막, 안 점막 투여 제제 등 중의 적어도 1 종인 경점막 투여 제제.