KR20070058028A

KR20070058028A - 난용성 약물용 에멀젼 부형제

Info

Publication number: KR20070058028A
Application number: KR1020077011731A
Authority: KR
Inventors: 카렐 제이 램버트; 파나요티스 피. 콘스탄티니데스; 스티븐 씨. 퀘이; 알렉산더 케이. 투스티안
Original assignee: 소너스파머슈티칼즈인코포레이티드
Priority date: 1999-05-24
Filing date: 2000-05-17
Publication date: 2007-06-07
Also published as: CA2373994A1; WO2000071163A1; AU5273200A; BR0010794A; TWI290052B; EP1185301A1; MXPA01011981A; JP2003500368A

Abstract

실질적으로 에탄올이 없으며 여러가지 경로를 통해 동물 또는 인간에 투여될 수 있는, 하나 이상의 토콜, 공용매를 포함하며 그리고 생체적합성 계면활성제에 의해 안정화된, 치료약물을 위한 부형제 또는 담체로서의 에멀젼을 개시한다. 또한 에멀젼내에 PEG화된 비타민 E를 포함한다. PEG화된 α-토코페롤은 비타민 E의 고리 히드록실에서 숙신산 디에스테르에 의해 부착된 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛을 포함하며 토콜에멀젼중에서 1차 계면활성제, 안정제 및 2차 용매로서 작용한다.

토코페롤, 폴리에틸렌글리콜, 에멀젼, 종양, TPGS

Description

난용성 약물용 에멀젼 부형제{EMULSION VEHICLE FOR POORLY SOLUBLE DRUGS}

본 발명은 다음과 같은 도면을 참고하면 더욱 잘 이해될 것이다:

도 1a는 7℃에서 시간에 따른 파클리탁셀 에멀젼(QWA)의 입자크기를 보여부며;

도 1b는 25℃에서 시간에 따른 파클리탁셀 에멀젼(QWA)의 입자크기를 보여주며;

도 2는 실시예 5에서 기술하는 바와 같은 에멀젼중의 파클리탁셀의 인테그러티를 보여주는 HPLC 크로마토그램이며;

도 3a는 4℃에서 시간에 따른 파클리탁셀 에멀젼(QWA)의 파클리탁셀 농도를 보여주며;

도 3b는 25℃에서 시간에 따른 파클리탁셀 에멀젼(QWA)의 파클리탁셀 농도를 보여주며;

도 4는 3가지의 다른 에멀젼으로부터 방출되는 파클리탁셀의 퍼센트를 시간에 따라 보여준다. 표시 ●는 Bristol Myers Squibb에서 상업적으로 구입할 수 있는 에멀젼으로부터 시간에 따라 방출되는 파클리탁셀의 퍼센트를 나타낸다. 표시 ▲는 실시예 6에 나타낸 바와 같은 6mg/ml 파클리탁셀(QWA)을 함유하는 본 발명의 에멀젼(QWA)으로부터 시간에 따라 방출되는 파클리탁셀의 퍼센트를 나타낸다. 표시 ◇는 실시예 7에 나타낸 바와 같은 7mg/ml 파클리탁셀을 함유하는 본 발명의 에멀젼(QWB)으로부터 시간에 따라 방출되는 파클리탁셀의 퍼센트를 나타낸다.

도 5는 마우스에서 B16 흑색종에 대한 PEG-400/비타민 E/파클리탁셀 에멀젼의 효험을 나타낸다

본 발명은 약제분야에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 하나 이상의 토콜이 1차 용매로 사용되는 약제에 관한 것이다.

해마다 수백개의 의학적으로 유용한 화합물이 발견되고 있지만, 이들 약물의 임상적인 사용은 오로지 약물송달 부형제가 인체내의 치료표적으로 이들을 운반하도록 개발될 경우에만 가능하다. 이 문제는 이들의 치료표적에 도달하기 위해 정맥내 주사 또는 복용이 요구되지만 수불용성 또는 수난용성인 약물에 특히 중요하다. 이러한 소수성 화합물에 대해, 직접주사는 불가능하거나, 매우 위험할 수 있으며, 용혈, 정맥염, 과민증, 기관파괴 및/또는 사망을 일으킬 수 있다. 이러한 화합물은 약사들에 의해 "친유성", "소수성", 또는 가장 복잡한 형태로 "양쪽 소매성(amphiphobic)" 이라 명명되고 있다.

이러한 범주중 치료물질의 소수의 예는 이부프로펜, 디아제팜, 그리세오풀빈, 시클로스포린, 코르티손, 프로루킨, 에토포시드 및 파클리탁셀이다. Kagkadis, KA et al. (1996) PDA J Pharm Sci Tech 50 (5): 317323; Dardel, O. 1976. Anaesth Scand 20: 221-24. Sweetana, S and MJU Akers. (1996) PDA J Pharm Sci Tech 50 (5): 330-342.

수용액으로서 조제될 수 없는 약물을 위한, 에멀젼은 전형적으로 비록 이들이 정맥내 주사로 투여될 수 있도록 이들을 무균 및 무내독소 상태로 만들어야하는 어려운 문제가 있지만 투여하기에 가장 경제적이고 적절하다. 약제학적 에멀젼용으로 사용된 오일은 전형적으로 트리글리세리드군 예를 들어, 콩기름, 참깨씨기름, 목화씨기름, 잇꽃 기름 등으로 부터의 비누화성 오일이다. Hansrani, PK et al., (1983) J. Parenter Sci. Technol 37:145-150. 하나 이상의 계면활성제를 사용하여 에멸션을 안정화시키며, 부형제를 첨가하여 에멀젼에 보다 많은 생친화성, 안정성 및 더욱 작은 독성을 부여한다. 달걀 노른자 또는 대두로 부터의 레시틴은 일반적으로 사용되는 계면활성제이다. 무균제조는 제조전에 모든 성분을 완전히 무균처리한후, 모든 제조단계에서 비전염성처리를 함으로써 달성될 수 있다. 그러나, 제조의 개선된 용이성 및 무균성의 보장은 위생제조후의 가열하거나 여과에 의한 최종적인 무균화처리에 의해 얻어진다. 불행하게도, 모든 에멀젼이 가열 또는 여과처리에 적합한 것은 아니다.

안정성은 에멀젼의 크기 및 균질성에 의해 영향받는 것으로 알려져 있다. 바람직한 에멀젼은 평균 액적 직경 200 나노미터 이하를 갖는 1미크론 미만의 현탁액으로 구성된다. 이러한 크기범위의 안정한 분산은 쉽게 얻어지지 않지만, 혈류에서의 더욱 긴 순환이 기대된다는 이점을 갖는다. 더욱이, 이러한 크기범위의 안정한 분산이 부족하면 세망세포계에 의해 비특이적으로 식세포화된다. 결과적으로 약물은 아마 그것의 표적에 다가갈 가망성이 더욱 많다. 따라서, 바람직한 약물 에멀젼은 표적세포 또는 기관에 의해 활동적으로 섭취되도록 고안될 것이며, RES로 부터 떨어져 표적을 정한다.

에멀젼중 비타민 E의 사용은 공지이다. 비타민 E가 소량(예를 들어, 1%미만, Lyons, R.T., Pharm Res 13(9): S-226,(1996)"친유성 항독소제 α-토코페롤 및 β-카로틴을 함유하는 주사가능한 오일-인-워터 에멀젼의 조처리물 개발")으로 에멀젼중의 항산화제로서 사용되는 수 많은 예와 더불어, 최초의 원시적인 주사가능한 비타민 E 에멀젼 그 자체는 양에서의 식이적 보충을 위해 그리고 비타민 E 및 이것의 유도체의 약물동태학에 관한 연구를 위해 Hidiroglou가 제조하였다. Hidiroglou M. 및 Karpinski K.(1998) Brit J Nutrit 59:509 - 518.

마우스에 대한 주사가능한 형태의 비타민 E 는 Kato 및 그 동료들에 의해 제조되었다. Kato Y., et al.(1993) Chem Pharm Bull 41(3): 599-604. 미셀용액은 Tween 80, Brij 58 및 HCO-60으로 조제되었다. 이소프로판올이 공용매로서 사용되었고, 그 다음 진공증발에 의해 제거되었으며: 그 다음 잔류 오일 글래스는 와동하면서 미셀현탁액으로서 물중에 흡수되었다. 에멀젼은 또한 콩 포스파티디콜린(레시틴) 및 콩기름을 사용하여 비타민 E를 용해함으로써 제조되었다. 물이 가해지고 에멀젼은 초음파 처리를 사용하여 제조되었다.

1983년에, 비타민 E 에멀젼 E-Ferol이 신생아의 비타민 E 보충 및 요법을 위해 소개되었다. Alade S.L. et al.(1986)Pediatrics 77(4): 593-597. 수개월 동안 30 명의 아이가 이 제품의 투여결과로 사망하였으며, 이 제품은 FDA의 명령으로 즉시 회수되었다. 25mg/mL를 에멀젼화하기 위해 E-Ferol에 사용된 계면활성제 혼합물은 9% Tween 80 및 1% Tween 20으로 구성되었다. 결국 이들 계면활성제의 사용량이 불행한 죽음의 원인이었던 것 같다. 이 경험으로 개선된 조제물 및 적절한 생체적합 계면활성제를 선택하는 것과 비경구적 에멀젼중 이들의 양을 주의깊히 감시하는 것의 중요성이 요구되게 되었다.

수난용성 화합물 용해의 대안적인 수단은 비수성환경, 예를 들어 알콜(에탄올과 같은) 디메틸술폭시드 또는 트리아세틴에서의 직접용해이다. PCT 출원 WO 95/11039 에서의 한 예는 에탄올 및 면역업압제 분자 시클로스포린의 조합중 비타민 E 및 비타민 E 유도체 TPGS의 사용을 설명한다. 미국 특허 5,689,846은 파클리탁셀의 여러가지 알콜용액을 개시한다. 미국 특허 5,573,781은 에탄올, 부탄올 및 헥산올중 파클리탁셀의 분해 및 에탄올에 비해 부탄올 및 헥산올중에서 송달될 때 파클리탁셀의 항종양 활성에서의 증가를 개시한다. 알콜-함유 용액은 주의하며 투여될 수 있지만, 이들 용액의 일시주사와 관련된 고통, 혈관자극 및 독성을 피하기 위해 전형적으로 정맥내 점적으로 투여된다.

미국 특허 4,439,432는 토코페롤중의 고농도의 프로게스테론 용액의 제조를 개시한다. 에멀젼은 전신성 프로게스테론 결핍에 대한 피부치료제로서의 사용을 위해, 건선과 같은 국부적인 피부이상을 치료하기 위해 또는 질 적용을 위해 이들 용액으로부터 제조될 수 있다. 이 용액은 또한 경구투여를 위해 캡슐로 제조될 수 있다.

유럽 특허출원 001,851(Akzo N.V.)은 정상온도에서 액체인 토콜 및 토콜 유도체를 포함하는 오에스트란, 안드로스탄, 및 (19-노르-) 프레그난 계열의 스테로이드 고농축 용액을 개시한다.

PCT 공보 WO 95/21217(Dumex Ltd)는 토코페롤이 실질적으로 물에 불용성인 약물의 용매 및/또는 에멀젼화제로서 특히 국소조제물의 제조를 위해 사용될 수 있다는 것을 개시한다. 고수준의 α-토코페롤을 함유하는 조제물에서 에멀젼화제로서 비타민 E-TPGS의 사용은 명세서(7 내지 8 및 12 쪽)에서 언급된다. 실시예 1 내지 5는 지질층(α-토코페롤), 약물 및 에멀젼화제로서 조제물의 25% w/w 미만의 양으로 비타민 E-TPGS를 포함하는 국부투여용 조제물을 개시하였다.

PCT 공보 WO 97/03651(Danbiosyst UK Ltd)는 적어도 5가지 성분을 포함하는 지질 약물송달 조성물을 개시한다: 치료약물, 비타민 E, 약물과 비타민 E가 용해되는 오일, 안정제(인지질, 레시틴이거나, 폴리옥시에틸렌-폴리옥시프로필렌 공중합체인 폴록사머) 및 물. 개시된 치료약물은 이트라코나졸 및 파클리탁셀이다. "치료 에멀젼" 조성물은 치료약물이 존재하는 분산상내에 2가지의 오일, 즉 비타민 E 및 콩기름과 같은 전형적으로 트리글리세리드인 다른 오일을 필요로 한다. 파클탁셀을 사용하는 유일한 작업예인 실시예 16은 또한 비타민 E 및 콩기름을 모두 함유한다.

WO 97/03651은 또한 비타민 E활성을 가지는 토콜유도체 및 토코트리에놀이 공보에서 사용된 바와 같이 "비타민 E"의 정의로 간주되는 것을 부수적으로 개시한다.

PCT 공보 WO 97/22358(Sherman)은 토콜, 토코페롤, 토코트리에놀, 및 이들의 유도체로부터 선택된 친수성 성분을 포함할 수 있는 용매시스템중에 용해된 시클로스포린의 마이크로에멀젼 예비농축물을 개시한다. α-토코페롤과 더불어, 공보는 또한 β-, δ- 및 γ-토코페롤, 그리고 α-, β-, δ- 및 γ-토코트리에놀 또는 이들의 혼합물을 언급한다. 이들 조성물은 또한 친수성용매, 바람직하게는 1000 미만의 평균분자량을 가지는 폴리에틸렌 글리콜 또는 프로필렌 카보네이트를 포함한다. Sherman의 두번째 PCT 공보(WO 98/30204)는 시클로스포린의 마이크로에멀젼 예비농축물을 개시하며 여기에서 용매시스템은 2가지의 소수성 용매를 포함할 수 있으며, 이중 한가지는 토콜, 토코페롤, 토코트리에놀 및 이들의 유도체에서 선택된다.

상품명 Pharmosolve^TM라는 이름으로 N-메틸-2-피롤리돈(NMP)이 약학조제물중의 난용성 약물의 용해성을 개선시키기 위해 사용될 수 있으며 이것은 향후 인간에의 적용과 함께 수의학에서의 사용에 대한 최근의 문헌에서 등장하였다. 더욱이, 수성의 주사가능한 기제 1 내지 5 퍼센트(w/v) 농도로 2,500 내지 100,000 사이의 분자량을 가지는 상품명 Povidone^TM이라는 이름의 폴리비닐피롤리돈(PVP)은 NMP와 함께 공용해제로서 사용될 수 있다. 미국 특허 5,726,181은 항종양 조성물 및 NMP와 고도의 친유성 캄프토테신 유도체를 포함하는 현탁액을 개시한다.

폴리에틸렌글리콜(PEG) 및 PVP는 파클리탁셀을 포함하는 약물의 용해성 거동을 변경하기 위해 종종 사용되는 2가지의 수용성 중합체의 예이다. 비록 두 용매 모두에서 파클리탁셀의 용해성이 비교적 높지만, 비경구적 투여에 적합한 희석된 수용액에서 약물의 용해성은 낮으며 희석중 약물이 침전될 가망성이 높다. PEG 400 및 50 내지 100% PEG 400을 함유하는 물의 혼합물에서, 파클리탁셀의 용해성은 각각 0.2에서 175mg/ml로 변한다. 따라서 다량의 물이 사용되는 경우 파클리탁셀 용해성은 상당히 낮으며, 예를 들어 물중의 35% PEG 400 및 30% PVP인 경우에는 각각 0.03mg/ml 및 ≤0.3mg/ml이다. "폴리에틸렌 글리콜400/물 혼합물중 파클리탁셀의 용해성"(Straubinger, R.M. Biopharmacuitics of paclitaxcel(Taxol

); Science and Applications, Taxol

중 p.244, 조제물, 활성도 및 약물동태학.(M. Suffness ed.), CRC Press, New York, 1995). PEG-400의 사용은 파클리탁셀에 한정되지 않으며 폴리에틸렌 글리콜에서의 양호한 용해성을 나타내는 다른 치료제(예를 들어 Etoposide)에 적용될 수 있다. 폴리에틸렌 글리콜 유도체를 포함하는 파클리탁셀의 유도체 형태는 미국 특허 5,614,549에 기술되어 있다.

불량한 용해성 및 계면활성제와 더불어 알콜(에탄올, 이소프로판올, 벤질알콜 등)과 같은 비수성 용매에서 약물의 약학조성물과의 침전가망성 이외에, 또 하나의 문제점은 이들 용매가 이들의 용기로 부터 독성물질, 예를 들어 가소제를 추출하는 것이다. 예를 들어 현재 시판되는 항암약 파클리탁셀에 대한 조제물은 히드록실화 피마자유 및 에탄올의 혼합물로 구성되며, 범용되는 정맥내 주입 튜브 및 백으로부터 디-(2-에틸헥실)-프탈레이트와 같은 가소제를 신속하게 추출한다. 호흡곤란과 같은 가소제에 대한 해로운 반응이 보고되었고, 부수적인 비용 및 시간이 요구되는 특수한 주입시스템의 사용이 필요하게 되었다. Waugh, et al.(1991) Am J. Hosp. Pharmacists 48: 1520.

이들 문제를 비추어, 이상적인 에멀젼 부형제는 저렴하고, 비자극적이며 또는 심지어 영향적이며 본질적으로 고식적이며, 열이나 여과에 의해 최종적으로 무균화될 수 있으며, 제어된 저장조건에서 적어도 1년 동안 안정하며, 광범위한 수불용성 및 난용성 약물을 수용하며 실질적으로 에탄올이 없는 것이라는 것을 알 수 있다. 친유성이며 오일에 용해되는 약물이외에, 에멀젼 형태로 지질 및 물에 난용성인 약물을 안정화시킬 부형제가 필요하다.

발명의 개요

이들 요구를 충족시키기 위해, 본 발명은 다음을 포함하는 약학조성물에 관련된다: 수상을 갖거나 갖지 않는 하나 이상의 토콜, 계면활성제 또는 공용매를 포함하는 계면활성제들의 혼합물 및 치료제. 본 발명의 조성물은 에멀젼형태, 즉 미셀용액 또는 자가-유화 약물 송달시스템일 수 있다. 토콜(또는 토코페롤) 분자는 바람직하게는 α-토코페롤이다. 본 발명 조성물은 대체로 실질적으로 어떠한 1가알콜도 없다.

공용매는 수용성 중합체, 바람직하게는 폴리에틸렌 클리콜 또는 N-메틸-2-피롤리돈을 갖거나 갖지 않는 폴리비닐피롤리돈을 포함할 수 있다. 분자량 100 내지 10,000을 갖는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)은 가장 바람직한 공용매이다. 조제물에 대해 1 중량% 보다 많은 양의 PEG-400이 가장 바람직하다.

약학 조성물은 음이온성, 비이온성, 양이온성, 및 양성이온성(zwitterionic) 계면활성제를 포함하는 여러가지 양쪽친화성 분자의 첨가에 의해 안정화될 수 있다. 바람직하게는, 이들 분자는 PEG화된 계면활성제 및 선택적으로 PEG화된 α-토코페롤이다.

양쪽친화성 분자는 아스코르빌-6-팔미테이트; 스테아릴아민; 수크로스 지방산 에스테르, 페길화된 인지질, 여러가지 토콜 유도체 및 폴리옥시프로필렌-폴리옥시에틸렌 글리콜 비이온성 블록 공중합체와 같은 계면활성제를 더 포함한다. 유용한 계면활성제는 또한 폴록사머, 테트록닉, TPGS, 글루타밀 스테아레이트, 페길화된 모노- 및 디글리세리드, 프로필렌 글리콜 모노-/디에스테르, 폴리글리세릴 에스테르, Soutol HS-15, 인지질, 레시틴, 페길화된 인지질, 페길화된 스테롤, 페길화된 콜레스테롤, 및 다른 토콜 에스테르, 수크로스 에스테르, 지방산, 담즙산 및 콘주게이트 담즙산, 비이온성 및 음이온성 계면활성제를 포함한다.

치료제는 화학용법제, 항생제(항바이러스성, 항박테리아성, 항기생충성, 항 말라이아원충성, 항진균성), 진통제, 항우울제, 항정신제, 호르몬, 스테로이드, 혈관강장제, 맥관형성 억제제, 시토메신, 시토킨일 수 있다.

더욱 이해할 수 있는, 그러나 한정되지 않는, 본 발명에서의 사용에 적합한 약물 형태의 목록이 PCT 출원 WO 98/30205에 수록되어 있다.

토콜 기제의 에멀젼은 심장혈관 또는 암치료제를 송달하기 위해 사용될 때 상승적인 생물학적 및 치료학적 효과에 특히 유리하다.

화학요법제의 송달을 위한 미립자 에멀젼의 부가된 이점은 멤브레인-결합된 약물 송달자인 P-글리코프로틴을 억제함으로써 다약물 내성을 극복하기 위해 에멀젼에 사용된 계면활성제의 광범위한 특성이다.

본 발명의 에멀젼은 에멀젼 또는 미셀용액 형태일 때 수성매체를 포함할 수 있다. 이 매체는 에멀젼을 안정화시키고 조제물에 생체적합성을 부여하는 것을 돕기 위해 여러가지의 첨가제를 포함할 수 있다.

한 형태로, 본 발명은 α-토코페롤과, 탁소이드, 탁신 및 탁산에서 선택된 화학요법제, 물 및 D-α-토코페롤 폴리에틸렌클리콜 1000 숙시네이트로 이루어지는 약학조성물에 관련된다. 또 다른 형태에서, 본 발명은 α-토코페롤, 공용매, 하나이상의 계면활성제, 수상 및 조성물이 에멀젼 또는 미셀용액의 형태이고 용액은 실질적으로 1가 알콜이 없는 치료제를 포함하는 약학조성물에 관련된다.

바람직한 형태에서, 공용매는 폴리에틸렌 글리콜, N-메틸-2-피롤리돈, 폴리비닐-피롤리돈 또는 이들의 혼합물일 수 있다.

바람직한 형태에서 계면활성제는 α-토코페롤 유도체이며 폴리에틸렌 글리콜은 100 내지 10,000 가장 바람직하게는 약 200 내지 1000의 분자량을 갖는다.

바람직한 형태에서 치료제는 탁소이드, 탁신 및 탁산에서 선택된 화학요법제이다.

본 발명의 약학조성물은 전형적으로 치료제를 공용매중에서 용해하여 치료제 용액을 형성하고; 그 다음 하나 이상의 토콜을 하나 이상의 계면활성제와 함께 치료제 용액에 첨가하여 친수성 공용매중에서 치료제의 오일용액을 형성함으로써 형성된다. 오일용액은 그 다음 수상과 함께 혼합되어 예비-에멀젼을 형성한다. IV 송 달을 위해 예비-에멀젼은 더욱 균질화되어 미세한 에멀젼을 형성한다. 경구송달을 위해, 계면활성제와 함께 공용매중의 치료제의 오일 용액은 전형적으로 젤라틴 캡슐로 싸여진다.

본 발명 방법의 바람직한 형태에서 치료제는 용매로서 1가 알콜의 사용을 피할 수 있는 폴리에틸렌 글리콜 또는 토콜오일에 직접 용해된다.

(발명의 상세한 설명)

본 발명의 완전한 이해를 위해 다음의 정의를 제공한다:

토코페롤: 토코페롤은 천연 또는 합성화합물중의 한 패밀리이며 또한 통칭명 토콜 또는 비타민 E로서 알려져 있다. α-토코페롤은 이 부류의 화합물중 가장 풍부하고 활성적인 형태이며 이것은 다음과 같은 화학구조를 가진다(화학식 1):

분자는 3개의 구조원소, 페놀알콜을 갖는 크로만 헤드 및 피틸 테일을 포함한다. 모든 토코페롤 이성체가 크로만 헤드상에 3개의 메틸기를 갖는 것은 아니다. 가장 단순한 이성체는 크로만 고리, 즉 6-히드록시-2-메틸-2-피틸크로만상에 메틸기를 함유하지 않으며 비록 하기에서는 더욱 넓은 부류의 화합물을 나타내기 위해 "토콜들"이라는 용어를 사용하지만 이것은 종종 단순히 "토콜"로서 지칭된다. 이부 류의 다른 구성원들은 α-, β-, γ-, 및 δ-토코페롤 그리고 토코페롤 아세테이트, 포스페이트, 숙시네이트, 니코티네이트, 및 리놀리에이트와 같은 α-토코페롤 유도체를 포함한다. 1차 용매로서 이들을 사용하는 것 이외에, 토코페롤 및 이들의 유도체들은 치료제로서 유용하다.

토코페놀은 3,7,11 트리-엔 테일을 갖는 것을 제외하고는 토코페롤과 관련된 구조를 가진다. d-알파-토코페놀의 구조를 화학식 2에 나타낸다.

다시, 토코페롤의 경우와 같이, 모든 토코페놀 이성체가 크로만 헤드상에 3개의 메틸기를 가지는 것은 아니다. α-, β-, γ-, 및 δ-토코트리에놀이라는 4가지의 주요 토코트리에놀이 있다. 데스메틸토코트리에놀 및 디데스메틸토코트리에놀과 같은 더욱 적은 메틸기를 갖는 유사화합물은 토코트리에놀의 정의내에 포함된다.

토코페롤 부류의 구성원은 부가적인 이점을 제공할 수 있으며 특수한 생물학적 기능을 수행할 수 있다.

게다가, 이들 토코페롤의 사용으로 에멀젼이 낮은 점도를 가질 수 있고, 따라서 더욱 쉽게 생성 및/또는 처리된다.

이 기의 바람직한 구성원은 d-γ- 및 d-δ-토코페롤, d-β-, d-δ- 및 d-γ-토코트리에놀을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.

토콜 : 모든 토코페롤 및 토코트리에놀은 기본적으로 가장 간단한 토코페롤, 즉 6-히드록시-2-메틸-2-피틸크로만(종종 "토콜"이라 지칭됨)의 유도체이기 때문에, "토콜"은 여기에서 넓은 의미로 토코페롤과 토코페놀 및 이들의 유도체 패밀리를 나타내는데 사용된다. 토콜은 또한 토코페롤 또는 토코페롤 유도체를 포함하며, 크로만 고리상의 6-히드록실에서 에스테르화된 이들의 공통 유도체를 포함한다.

계면활성제 : 화학적 방법에 의해 제조되거나 자연적인 소스 또는 방법으로부터 정제되는 양쪽친화성 분자의 표면 활성부류. 이들은 음이온성, 양이온성, 비이온성, 및 양성이온성일 수 있다. 전형적인 계면활성제는 Emulsions에 기술되어 있다: 이론 및 실습, Paul Becher, Robert E. Krieger 발행, Malabar, Florida, 1965; Pharmaceutical Dosage Forms: Dispersed Systems Vol. I, Martin M. Rigear, 계면활성제 및 본 발명의 양수인 Sonus Pharmaceuticals에 수탁된 미국 특허 제 5,595,723 호. 이들 모든 참고데이타는 여기에서 참고로서 포함된다.

TPGS : TPGS 및 PEG화된 비타민 E는 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛이 비타민 E 분자의 고리 히드록실에서 숙신산 디에스테르에 의해 부착된 비타민 E 유도체이다. TPGS는 D-α-토코페롤 폴리에틸렌 글리콜 1000 숙시네이트(MW=1513)을 나타낸다. TPGS는 화학식 3의 구조를 가지는 비이온성 계면활성제(HLB=16-18)이다:

에테르 및 여러가지 화학 부분의 에테르 결합을 포함하는 비타민 E TPGS의 여러가지 화학 유도체들은 비타민 E TPGS의 범위에 포함된다.

폴리에틸렌 글리콜 : 폴리에틸렌글리콜(PEG)은 화학구조--(CH₂-CH₂-O)의 반복단위로 구성되는 에킬렌글리콜의 친수성 중합형태이다. 폴리에틸렌글리콜에 대한 일반식은 HOCH₂(CH₂OCH₂)_nCH₂-OH 또는 H(OCH₂OCH₂)_nOH이다. 분자량은 200 내지 10,000에 이른다. 이러한 여러 형태는 PEG-200, PEG-400등으로서 기술된다.

N- 메틸 -2- 피롤리돈 : N-메틸-2-피롤리돈(NMP)은 다음의 화학구조를 가지는 유기분자이다:

이 화합물의 GMP급은 Pharmasolve^TM이라는 이름으로 구입될 수 있으며 약학조성물중의 난용성 약물의 용해성을 개선하기 위해 사용된다. 어떤 약물의 강화된 용해성은 분자의 질소 및 카르보닐 반응성 중심과의 복합화 작용으로 기인될 수 있다.

폴리비닐 피롤리돈 : 폴리비닐 피롤리돈(PVP) 또는 Povidone은 수용성 중합체이며, 다음 화학구조의 반복단위로 구성된다:

평균 MW는 2500 내지 비경구적 투여를 위해 사용될 수 있는 3×10⁶의 특급 무피로겐 포비돈까지 다양할 수 있다. 5%w/v 까지의 농도는 난용성 약물을 위한 공용매로서 사용될 수 있다.

폴록사머 또는 플루로닉 : 이것은 다음의 일반구조를 가지는 에틸렌 옥사이드 및 프로필렌 옥사이드의 합성 블록 공중합체이다.

a 및 b의 값을 기초로 한 다음의 이형체들은 상표명 Pluronic이라는 이름으로 BASF Performance Chemicals(Parsippany, New Jersey)로 부터 구입될 수 있으며 CTFA 명칭 Poloxamer 108, 188, 217, 237, 238, 288, 338, 407, 101, 105, 122, 123, 124, 181, 182, 183, 184, 212, 231, 282, 331, 401, 402, 185, 215, 234, 235, 284, 333, 334, 335, 및 403 으로 지칭된 개면활성제군으로 구성된다. 가장 일반적으로 사용되는 폴록사머 124, 188, 237, 338 및 407에 대한 a 및 b의 값은 각각 12/20, 79/28, 64/37, 141/44 및 101/56이다.

Solutol HS-15 : 이것은 BASF(Parsippany, NJ)제 폴리에틸렌 글리콜 660 히드록시스테아레이트이다. 자유 폴리에틸렌 글리콜 및 이것의 모노에스테르 이외에, 디-에스테르도 또한 검출될 수 있다. 제작자에 따르면, Soluble HS-15의 전형적인 로트는 대략 30%의 자유 폴리에틸렌 클리콜 및 70%의 폴리에틸렌 글리콜 에스테르를 함유한다.

다른 계면활성제 : 본 발명에 유용한 다른 계면활성제는 아스코르빌-6-팔미테이트(Roche Vitamines, Nutley NJ), 스테아릴아민, 및 수크로스 지방산 에스테르(Mitsubishi Chemicals)를 포함한다. 통상의 계면활성제는, 고리 히드록실에 부착된 펩티드 결합된 폴리글루타메이트 및 페길화된 피토스테롤을 포함하는 비타민 E 유도체와 같은, 극성의 친수성 헤드 및 소수성 테일을 가진 화합물을 포함한다. 다른 펩티드 역시 비타민 E 에 결합될 수 있다. 또한 페길화된 인지질은 유용한 계면활성제이다. 페길화된 인지질의 예는 지방 아크릴 사슬이 포화, 불포화될 수 있는 C₆-C₂₄ 지방산, 이들의 혼합물을 포함하는 포스파티딜에탄올아민의 PEG 2000 또는 PEG 5000 유사체를 포함한다.

친수성- 친유성 균형 : 경험적인 방식이 계면활성제를 색인하기 위해 사용되었다. 그 값은 1 내지 45로 여러가지이며 비이온성 계면활성제의 경우에는 약 1 내지 20이다. 일반적으로 친유성 계면활성제에 대한 HLB는 10 미만이며 친수성 계면활성제에 대한 HLB는 10 보다 크다.

생체적합성의 : 이것은 불필요한 독성 또는 생리적인 또는 약학적인 영향없이 생체 기관내에서 또는 이것상에서 수용할 수 있는 방식으로 기능을 수행할 수 있는 것이다.

실질적으로 전무한 1가 알콜 : 이것은 약 1.0%(w/v)미만의 1가 알콜 농도의 1가 알콜을 가지는 조성물이다. 여기에서 사용된 바와 같은, 용어 "1가"알콜은 에탄올, 부탄올, 이소프로판올과 같은 하지만 이들에 한정되지 않는 하나의 히드록실기를 함유하는 알콜이다. 용어 "다가" 알콜 또는 "폴리올"은 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 또는 폴리에틸렌 글리콜(PEG)과 같은 하지만 이에 한정되지 않는 2개 이상의 히드록실기를 함유하는 알콜이다. PEG는 또한 중합 단위로서 에틸렌 글리콜을 가지는 "폴리글리콜"이다. 여기에서 사용을 위한 다른 적절한 다가 알콜은 에틸렌 글리콜(2개의-OH기), 글리세롤(3개의-OH기), 소르비톨(6개의-OH기) 및 만니톨(6개의-OH기)를 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.

에멀젼 : 대체로 직경이 0.1 내지 0.3 미크론이며 분산된 연속상이 정합된 굴절률이 아닐 경우 전형적으로 광학적으로 투명한 액적형태의 2가지의 불혼성 액체의 콜로이드 분산액. 이러한 시스템은 본 출원 또는 관련 문헌시스템에 의해 일반적으로 정의된 유한한 안정성을 가지며, 이것은 양쪽친화성 분자 또는 점도 강화제의 첨가에 의해 강화될 수 있다.

마이크로에멀젼 : 오일 및 물과 같은, 계면활성제 분자의 계면필름에 의해 안정화된, 2가지 불혼성 액체의 열역학적으로 안정한 등방성의 투명한 분산액. 마이크로에멀젼은 평균 액적직경 200nm 미만, 대체로 10 내지 50nm를 가진다. 물의 부재상태에서, 오일과 비이온성 계면활성제의 혼합물은 자가-유화 약물송달 시스 템(SEDDS; self-emulsifying drug delivery system)로 알려진 투명하고 등방성인 용액을 형성하며 친유성 약물 용해 및 경구흡수 개선에 성공적으로 사용되어 왔다.

페길화된 : 페길화된 또는 에톡시화된은 화학결합을 통해 주어진 화합물에 부착된 폴리에틸렌 글리콜 서브유닛을 의미한다.

수성매체 : 약학적으로 산성화제, 알칼리화제, 버퍼링제, 킬레이트제, 복합제 및 가용화제, 산화방지제 및 항균성 방부제, 보습제 현탁 및/또는 점도개질제, 삼투성 및 습윤성 또는 그 밖의 생체적합성 물질과 같은 수용가능한 첨가제를 포함할 수 있는 물-함유 액체이다.

치료제 : 이것은 생물학적 활성을 가지는 합성된 천연화합물로서, 오일상에 용해될 수 있고 치료제가 수상보다는 오일상에 우선적으로 용해되는 것을 확실히 하기 위해 적어도 2의 옥타놀-버퍼 분배계수(Log P)를 갖는다. 이것은 펩티드, 비-펩티드 및 뉴클레오티드를 포함한다. 지방산 및 지질 콘주게이트/전구약물과 같은 수용성 분자의 소수성 유도체는 치료제의 범위내에 있다.

화학요법제 : 이것은 하나 이상의 암형태에 대해 효과적인 천연 또는 합성 분자, 특히 약간 또는 완전히 친유성이거나 친유성으로 변경될 수 있는 분자이다. 이 정의는 이들의 작용메커니즘에 의해 세포독성물질(항암제)인 분자, 면역시스템을 자극하는 것(면역자극자) 및 맥관형성의 변조자를 포함한다. 어느 경우의 결과도 암세포의 성장을 둔화시킨다.

화학요법제는 파클리탁셀 및 집합명사로 탁소이드, 탁신 또는 탁산으로 칭해지는 관련된 분자를 포함한다. 파클리탁셀의 구조는 하기의 그림에서 보여주고 있 다(화학식 6).

"탁소이드"의 정의내에는 여러가지 변경 및 암세포 성장을 감소시키는데 효험을 보이고 오일(지방상)로의 분할을 나타낼 수 있는 바와 같은 기본 고리구조(탁소이드 핵)에의 부착이 포함되며 이것은 당해분야에서 당업자들에게 공지인 유기화학기법에 의해 구성될 수 있다. 이들은 2-데벤조일-2-아로일 및 C-2-아세톡시-C-4-벤조에이트 파클리탁셀, 7-데옥시탁솔, C-4 아지리딘 파클리탁셀과 같은 파클리탁셀의 벤조에이트 유도체, 특히 BMS-188797로 알려진 파클리탁셀의 메틸 카보네이트 유도체 뿐만아니라 천연 및 합성 중합체, 특히 지방산, 인지질, 및 글리세리드와 1.2-디아실록시프로판-3-아민과의 여러가지 파클리탁셀 콘주게이트를 포함하지만 이에 한정되지는 않는다. 탁소이드 핵의 구조를 화학식 7에 나타나있다.

본 발명의 범위내에는 파클리탁셀과 구조적인 유사성을 공유하는 천연제품이 포함되며, 즉 이들은 미소관-안정제을 위해 제안된 통상의 약물송달제를 포함한다. 이들 화합물은 에포틸론 A 및 B, 디스코데르몰리드, 노나탁셀 및 엘레우테로빈(Chem. Eng. News 1999, 77(17): 33-36)을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.

화학요법제는 포도필로톡신과 이들의 유도체 및 유사체를 포함한다. 이들 분자의 코어고리구조를 다음의 그림에 나타낸다(화학식 8):

본 발명에서 유용한 화학요법제의 또 하나의 중요한 부류는, 다음의 그림에서 그것의 공통 고리구조를 나타낸 캄포테신이며, 하기 분자(화학식 9)의 효험을 보유하며 친유성 특성을 보존하는 이 기본구조에 대한 변형도 포함된다.

본 발명에서 유용한 화학요법제의 또 하나의 바람직한 부류는 친유성 안트라 시클린이며, 이것의 기본 고리구조를 다음 그림(화학식 10)에 나타낸다:

화학식 10의 적절한 친유성 변경은 고리 히드록실기 또는 당아미노기에서의 치환을 포함한다.

화학요법제의 또 하나의 중요한 부류는 친유성이거나 또는 당해분야에서 당업자들에게 잘 알려진 분자화학 합성변경에 의해, 예를 들어 조합화학 및 분자 모델링에 의해 친유성으로 될 수 있으며, 다음의 목록에서 도출된다: Taxotere, Amonafide, Illudin S, 6-히드록시메틸아실풀벤 Bryostatin 1,26-숙시닐브리오스타틴 1, Palmitoyl Rhizoxin, DUP 941, Mitomycin B, Mitomycin C, Penclomedine. 인터페론 α2b, 맥관생성 억제제 화합물, 염화백금을 가진 2-히드라지노-4.5-디히드로-1H-이미다졸과 같은 소수성 복합물 및 염화백금을 가진 5-히드라지노-3,4-디히드로-2H-피롤, 비타민 A, 비타민 E 및 이것의 유도체, 특히 토코페롤 숙시네이트.

본 발명에 유용한 다른 화합물은 다음을 포함한다: 1,3-비스(2-클로로에틸)-1-니트로수레아("카르무스틴" 또는 "BCNU"), 5-플루오로우라실, 독소루비신("아드리아마이신"), 에피루비신, 아클라루비신, Bisantrene(비스(2-이미다졸렌-2-일히드 라존)9,10-안트라센디카르복스알데히드, 미톡스안트론, 메토트렉세이트, 에다트렉세이트, 무라밀 트리펩티드, 무라밀 디펩티드, 리포폴리사카라이드, 9-b-d-아라비노푸라노실아데닌("비다라빈") 및 이것의 2-플루오로 유도체, 레스베라트롤, 레티노산 및 레티놀, Cartenids, 타목시펜.

본 발명의 적용에 유용한 그 밖의 화합물은 다음을 포함한다: Decarbazine, Lonidamine, Proxantrone, Anthrapyrazoles, Etoposide, Camptothecine, 9-아미노캄프토테신, 9-니트로캄프토테신, 캄프토테신-11("Irinotecan"), Topotecan, Bleomycin, Vinca 알칼로이드 및 이들의 유사체[Vincristine, Vinorelbine, Vindesine, Vintripol, Vinxaltine, Ancitabine], 6-아미노크리센, 및 나벨빈.

본 발명의 적용에 유용한 다른 화합물은 탁솔, 엘레우테로빈, 사크로딕틴, 디스코데르몰리드 및 에포티올론의 의태물이다. 본 발명에 유용한 다른 화합물은 미소관 표적화제이다. 미소관 표적화제는 튜블린이라 불리는 단백질에 결합하여 미소관 중합화를 방지한다. 대표적인 미소관 결합제는 에포틸론, 엘루테로빈 및 디스코데르몰리드를 포함한다.

발프로산, 타크롤리무스, 라파마이신, 클라리트로마이신, 에리트로마이신, 네오마이신, 바시트라신, 티로트로핀, 소마토스타틴, 테스토스테론, 프로게스테론, 코르티손, 폴리케티드 부류, 퀴놀론 부류, 시프로플록사신, 벤조디아제핀 부류, 디아제팜, 칼시트리올, 클로자핀, 안드로세핀 또한 유용하다.

이들 정의를 고려하여, 본 발명은 에멀젼, 미셀용액 또는 실질적으로 에탄올 용매가 없는 자가-유화 약물 송달시스템형태의 약학 조성물에 관련된다.

본 발명 조성물의 치료제는 초기에 공용매중에서 용해된다. 오일상의 제조중 에탄올이 처리용매로서 사용될 때의 경우에, 에탄올은 제거되고 실질적으로 무에탄올 조성물이 형성된다. 에탄올 농도는 1%(w/v), 바람직하게는 0.5% 미만, 가장 바람직하게는 0.3% 미만이다. 치료제는 또한 메탄올, 프로판올, 클로로포름, 이소프로판올, 부탄올 및 펜탄올에 용해될 수 있다. 이들 용매는 또한 사용전에 제거된다.

바람직한 구체예에서, 본 발명의 치료제 조성물은 벤질알콜, 벤질 벤조에이트, 디메틸술폭시드(DMSO), 디메틸아미드(DMA), 프로필렌 글리콜(PG), 폴리에틸렌 글리콜(PEG), N-메틸-2-피롤리돈(NMP) 및 폴리비닐피롤리돈(PVP)과 같은 비휘발성 공용매에 용해될 수 있다. NMP 또는 PEG 또는 PVP(표 1)와 같은 수용성 중합체는 특히 바람직하다.

치료제를 용해하기 위해 에탄올과 같은 알콜 보다는 PEG-400을 사용하는 것의 주요 이점/개선점은 치료제 투여전에 휘발성 용매를 제거하거나 희석할 필요가 없다는 것이다. 에멀젼중의 최종 폴리에틸렌 글리콜 수준은 1 내지 50%, 바람직하게는 1 내지 25% 더욱 바람직하게는 1 내지 10%(w/w)로 변할 수 있다. 적합한 폴리에틸렌 글리콜 용매는 평균분자량 200 내지 600 바람직하게는 300 내지 400(표 1)을 가지는 것들이다. 경구투여를 위한 자가-유화된 시스템의 경우에, 고분자량 PEG(1,000-10,000)가 또한 응고제로서 포함되어 단단한 젤라틴 캡슐에 채워질 수 있는 반고체 조제물을 형성할 수 있다.

저분자량 폴리에틸렌 글리콜의 물리적 특성

물리적 특성	PEG 200	PEG 300	PEG 400	PEG 600
분자량	190-210	285-315	380-420	570-630
점도(mPas)	46-53	66-74	85-95	130-150
굴절률(25℃)	1.459	1.463	1.465	1.467
빙점(℃)	-50	-16 내지 -12	-3 내지 8	15 내지 25

폴리에틸렌 글리콜 또는 다른 비-휘발성 공용매(PVP, NMP)에서 본 발명 치료제의 가용화로 에탄올과 같은 1가 알콜 또는 다른 휘발성 용매에서 본 발명의 치료제를 가용화할 필요성이 사라진다. 폴리에틸렌 글리콜 또는 N-메틸-2-피롤리돈은 치료상 에멀젼의 사용전에 용매를 제거할 필요성을 제거한다.

에멀젼중의 최종 폴리에틸렌 글리콜 수준은 1 내지 50%, 바람직하게는 1 내지 25% 더욱 바람직하게는 1 내지 10%(w/w)로 변동할 수 있다.

본 발명 조성물은 치료약물용 담체로서 토코페롤(바람직하게는 α-토코페롤)을 함유하며, 혈관내, 경구, 근육내, 피부 및 피하경로를 통해 동물 또는 인간에 투여될 수 있다. 구체적으로, 에멀젼은 다음의 경로에 의해 제공될 수 있다: 복강내, 동맥내, 관절내, 포내, 경부내, 두개내, 관내, 경막내, 병소내, 소내, 엽내, 벽내, 안내, 수술중, 벽측내, 복막내, 흉막내, 폐내, 수강내, 흉곽내, 수막강내, 고실내, 자궁내, 및 심실내 경피내. 본 발명의 에멀젼은 친유성 화합물의 폐송달을 위한 당해분야에서 공지인 적절한 에어로졸 추진장치를 사용하여 분무될 수 있다.

첫번째 측면에서, 본 발명은 수불용성, 수난용성 치료제, 더 낮은 수용성으로 개질된 치료제 또는 이들의 혼합물을 함유하는 에멀젼의 소수성 분산상으로서 토코페롤의 사용에 관련된다. 바람직한 구체예에서 α-토코페롤이 사용된다. 또한 "비타민 E"로 불리는 α-토코페롤은 전형적인 지질오일은 아니다. 이것은 대부분의 지질오일, 특히 트리글리세리드 보다 높은 분극성을 나타내며 비누화할 수 없다. 이것은 실질적으로 물에 용해되지 않는다.

두번째 측면에서, 본 발명은 자가-유화 시스템 형태인 토코페롤 에멀젼이며 이 시스템은 바람직한 경우 수불용성(또는 수난용성 또는 더 낮은 수용성으로 개질된 수용성 약제 또는 이들의 혼합물)약물의 경구투여를 위해 사용될 수 있다. 이 구체예에서, 계면활성제 및 약물 또는 약물 혼합물을 가지는 오일상은 부드럽거나 단단한 젤라틴 캡슐에 싸여질 수 있다. 고분자량 폴리에틸렌 글리콜(MW＞1000)과 같은 40 내지 60℃의 융점을 가지는 적절한 응고제 및 상품명 Gelucire(Gattefose Corp, Saint Priest, France)라는 이름으로 구입될 수 있는 것과 같은 글리세리드가 첨가되어 고온에서 단단한 젤라틴 캡슐에 조제물을 채울 수 있다. 반고체 조제물은 실온 평형상태에서 형성된다. 위와 십이지장에서 젤라틴의 용해중, 오일이 방출되고 자연적으로 평균 액적 직경 2 내지 5 미크론을 가지는 미세한 에멀젼을 형성한다. 그 다음 에멀젼은 장의 미세융모에 의해 섭취되고 혈류로 방출된다.

세번째 측면에서, 본 발명은 하나 이상의 토콜, 바람직하게는 α-토코페롤을 함유하는 마이크로에멀젼을 포함한다. 마이크로에멀젼은 에멀젼 현탁액이 본질적으로 투명하고 그것에 분산된 극히 작은 크기의 오일/약물의 미세응집체 덕분에 무한히 안정한 에멀젼의 아류를 가리킨다.

본 발명의 네번째 측면에서, PEG화된 비타민 E(TPGS)는 비타민 E 에멀젼에서 1차 계면활성제로서 사용된다. PEG화된 비타민 E는 비타민 E 에멀젼에서 1차 계면활성제, 안정제로서 그리고 또한 보조 용매로서 사용된다. 폴리에틸렌 글리콜(PEG)은 또한 본 발명의 에멀젼에서 공용매로서 유용하다. 특히 폴리에틸렌 글리콜 200, 300, 400 또는 이들의 혼합물이 사용된다.

본 발명의 에멀젼중 α-토코페롤 및/또는 다른 토콜의 농도는 약 1 내지 약 20%w/w 일 수 있다. TPGS가 조성물에 존재할 때, TPGS에 대한 토코페롤의 비는 선택적으로 약 1:1 내지 약 20:1이다.

본 발명의 에멀젼은 아스코르빌-6-팔미테이트, 스테아릴아민, 페길화된 인지질, 수크로스 지방산 에스테르, 여러가지 토콜 유도체 및 폴리옥시프토필렌-폴리옥시에틸렌 글리콜 비이온성 공중합체와 같은 비이온성, 합성 계면활성제 혼합물일 수 있다.

본 발명의 에멀젼은 수성매체를 포함할 수 있다. 수상은 대체적으로 300mOsm의 오스몰농도를 가지며 염화나트륨, 소르비톨, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜 알부민, 폴리펩 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 이 매체는 여러가지 첨가제를 포함하여 에멀젼을 안정화하고 또는 조성물에 생체적합성을 부여하는데 도움을 줄 수 있다. 수용가능한 첨가제는 산성화제, 알칼리화제, 항균성 방부제, 산화방지제, 버퍼링제, 킬레이트제, 현탁화 및/또는 점도-증가제, 및 삼투성제를 포함할 수 있다. 바람직하게는, pH, 삼투성을 제어하고 점도를 증가시키는 약제가 포함된다. 선택적으로, 적어도 250 mOsm의 삼투성이 점도 또한 증가시키는 소르비톨 또는 수크로스와 같은 약제를 사용하여 얻어진다.

정맥내 주사를 위한 본 발명의 에멀젼은 10 내지 500nm, 바람직하게는 10 내지 200nm 및 가장 바람직하게는 10 내지 100 nm의 입자크기(평균 액적직경)를 가진다. 정맥내 에멀젼에 대해, 비장 및 간은 500 nm보다 큰 입자를 제거할 것이다.

본 발명의 바람직한 형태는 파클리탁셀, 즉 자궁암 및 다른 암종의 치료에 사용되는 물에 매우 불용성인 시토톡신을 포함한다. 본 발명의 에멀젼 조성물은, 에멀젼 미세액적이 0.2 미크론 미만이고 여과에 의해 최종적으로 무균화될 수 있도록, 현재 처방약으로 구입할 수 있는 것의 4배인 20 mg/mL 까지의 농도로 파클리탁셀을 함유하는 비타민 E, 및 생체적합성 계면활성제로 이루어진 용액을 포함한다.

바람직한 주사가능한 조성물은 다음을 포함한다: 0.1 내지 1.0% 파클리탁셀(1 내지 10mg/ml); 1 내지 10% PEG 400; 1 내지 20% 비타민 E; 1 내지 10% TPGS 및 0.5 내지 2.5% Poloxamer 407. 또 하나의 바람직한 조성물은 다음을 포함한다: 1.0% 파클리탁셀(10mg/ml), 6% PEG 400, 8% 비타민 E, 5% TPGS, 1% Pluronic F127 및 80% 수용액.

자가-유화 시스템을 위한 바람직한 조제물은 다음과 같다: 0.1 내지 20% 파클리탁셀, 10 내지 90% 비타민 E, 10 내지 90% PEG 400 또는 N-메틸-2-피롤리돈, 5 내지 50% TPGS, Polysorbates(Tween 80), Pluronics(Pluronic F127) 또는 Cremophor EL/RH40, Solutol HS-15와 같은 5 내지 50% 2차 친수성 계면활성제. 오일상(비타민 E)은 선택적으로 폴리비닐피롤리돈, 글리세롤 그리고 모노-/디-/ 트리글리세리드 및 모노-디에스테르와 같은 프로필렌 글리콜 에스테르를 함유한다. 더욱이, 고분자량 PEG(1,000 내지 10,000 MW) 및 고융점 글리세롤 에스테르가 반고체 지속성을 가지는 조제물을 제공하기 위해 포함될 수 있다.

본 발명의 또 다른 구체예는 수주의 치료과정에 걸쳐 하루에 한번 또는 이틀에 한번 정맥내 주사에 의한 PEG화된 비타민 E를 갖거나 갖지 않는 비타민 E 에멀젼중의 파클리탁셀 거환의 비경구적 투여를 포함하는 암종의 치료방법이다. 이러한 방법은 유방, 폐, 피부 및 자궁의 암종 치료를 위해 사용될 수 있다..

실시예

본 발명의 대체적인 원리는 다음의 비제한적인 실시예를 참조함으로써 더욱 충분히 이해될 수 있다.

실시예 1

α- 토코페롤중 파클리탁셀의 용해

α-토코페롤을 피톨로 제조된 95% 순도의 합성 디-α-토코페롤의 형태로 Sigma Chemical Company(St Louis MO)로 부터 구입하였다. 이 오일은 호박색이고 매우 점성이 있었다. 파클리탁셀은 Hauser Chemical Research(Boulder CO)로 부터 구매하였으며, 이것은 HPLC에 의해 99.9% 순도였다. 파클리탁셀 200mg을 6mL의 드라이 무수에탄올(Spectrum Chemical Manufacturing Corp. Gardena CA)에 용해하고 1gm의 α-토코페롤에 가하였다. 그 다음 잔사가 일정한 질량을 가질 때까지 에탄올을 42℃에서 진공으로 제거하였다. 독립적인 연구는 에탄올 함량이 0.3%(w/v)미만이었다는 것을 보여주었다.

결과의 용액은 투명하고, 호박색이며 매우 점성이 있었으며 α-토코페롤중 200 mg/gm(w/w)의 공칭농도를 가졌다. 더욱 높은 파클리탁셀 농도(400 mg/gm, w/w)가 α-토코페롤중에 용해될 수 있다.

실시예 2

α-토코페롤 에멀젼을 제조하기 위해 사용된 음이온성 계면활성제

실시예 1에 기술된 바와 같이 제조된 10gm α-토코페롤중의 파클리탁셀 2gm을 다음의 방법에 의해 트리에탄올아민염으로서 아스코르빌 팔미테이트를 사용하여 에멀젼화하였다. 아스코르브산 20mM로 이루어진 용액을 자유 염기로서 트리에탄올아민을 사용하여 pH 6.8로 버퍼링하여 2x 버퍼를 형성하였다. 50 mL의 2x 버퍼를 Waring blender에 배치하였다. 음이온 계면활성제인 0.5 gm의 아스코르빌-6-팔미테이트(Roche Vitamins and Fine Chemicals, Nutley NJ)를 가하고 용액을 아르곤하에서 40℃에서 고속으로 2분 동안 혼합하였다. 그 다음 파클리탁셀을 함유하는 α-토코페롤을 계면활성제 및 버퍼와 함께 혼합기에 가하였다. 40℃에서 대략 1분후인 조입자의 우유같은 예비에멀젼이 얻어질 때까지 혼합을 계속하였다. 그 다음 주사용 물을 가하여, 최종 체적이 100ml가 되게 하였다.

프리에멀젼을 공급용기 Microfluidizer Model 110Y(MicroFluidics Inc, Newton MA)으로 운반하였다. 균질화동안 유닛을 대략 60℃의 공정온도를 유지하기 위해 욕에 침적하고, 사용전에 아르곤으로 세척하였다. 준비작업후, 상호작용 헤드을 가로질러 약 18kpsi의 압력구배로 10분동에 연속하여 에멀젼을 균질화기를 통해 재순환하였다. 유속은 약 300mL/분 이었고, 이것은 결과적으로 균질화기를 약 25회의 통과량을 가리킨다.

α-토코페롤 부형제중의 결과의 파클리탁셀 에멀젼을 아르곤하에서 호박색의 약병에 담고 7℃ 및 25℃에서 냉장보관하였다. 입자크기 및 화학분석을 위해 샘플을 별개의 시간주기로 취하였다.

Nicomp Model 370 Submicron Particle Sizer(Particle Sizing Systems Inc. Santa Barbara CA)로 얻은 데이타는 에멀젼이 280nm의 평균 입경을 가진다는 것을 보여주었다.

실시예 3

PEG 화된 비타민 E( TPGS )의 사용

α-토코페롤, PEG화된 비타민 E(TPGS, 비타민-E 폴리옥시에틸렌글리콜-1000-숙시네이트, Eastman Chemical Co., Kingsport TN에서 구입), 및 물에 대한 3성분계 상태도를 제작하였다. TPGS를 42℃에서 우선 용융하였고, 잔부가 α-토코페롤인 1 내지 100%의 TPGS의 다양한 부분으로 α-토코페롤과 중량으로 혼합하였다. 혼합물은 모든 조성에서 혼화성이었다. 그 다음 물을 최종의 물 농도가 0에서 97.5%로 단계별로 증가되는 방식으로 각 혼합물에 가하였다. 각 단계에서, 혼합물의 상거동을 관찰하였다. 적절하게, 와류 및 초음파처리에 의해 혼합하고, 혼합물을 가열 또는 원심분리하여 그것의 상조성을 산정하였다.

비경구적 투여에 적합한 2상 o/w 에멀젼의 넓은 영역이 80%가 넘는 물농도에서 발견되었다. 형성된 에멀젼은 우유같은 하얀 자유유동 액체였으며 비이온성 계면화활성제에 의해 안정화된 분산 α-토코페롤 미세입자를 함유하였다. 또한 이 영역에서는 약물담체로서 적합할 수 있는 미세에멀젼이 약 1:1이 넘는 오일에 대한 TPGS의 비에서 관찰되었다. 낮은 물 함량에서는 투명한 겔(리버스 에멀젼)을 함유하는 넓은 영역이 나타났다. 두 영역(높은 물함량 및 낮은 물 함량)을 분리하는 것은 불투명한 비누같은 액체결정이다.

α-토코페롤과 계면활성제 조합, 예를 들어 비이온성, 음이온성 또는 양이온성 공동-계면활성제(예를 들어 글루타밀 스테아레이트, 아스코르빌 팔미테이트 또는 플루로닉 F-68)을 가지는 TPGS 또는 약물과의 상태도가 유사한 방식으로 제조될 수 있다.

실시예 4

파클리탁셀의 정맥내 송달을 위한 α-토코페롤 에멀젼

다음 조성의 조제물을 제조하였다:

파클리탁셀 1.0 gm%

α-토코페롤 3.0 gm%

TPGS 2.0 gm%

아스코르빌-6-팔미테이트 0.25 gm%

소르비톨 5.0 gm%

트리에탄올아민 pH6.8로

물 100 mL qs로

제조방법은 다음과 같다: 합성 α-토코페롤(Roche Vitamins, Nutley NJ), 파클리탁셀(Hauser, Boulder CO), 아스코르빌6-팔미테이트(Aldrich Chemical Co, Milwaukee WI) 및 TPGS를 40 내지 45℃로 가열하면서 10 체적의 무수의 변성되지 않은 에탄올(Spectrum Quality Products, Guardenia CA)에 용해하였다. 그 다음 에탄올을 0.3중량 % 이하로 잔류할 때까지 진공을 사용하여 배출하였다.

생체적합성 삼투물질 및 버퍼를 함유하는 미리-가온된 수용액을 온건하게 혼합하면서 가하여 즉시 백색의 우유상을 형성하였다. 이 혼합물은 40 내지 45℃로 연속적으로 가온기하면서 10분 동안의 온건한 회전으로 더욱 개선될 수 있다. 그 다음 pH 7에서 이 예비혼합물을 하기와 같이 더욱 에멀젼화하였다.

40 내지 45℃의 예비혼합물을 44℃에서 12분 동안 26Kpsi로 Avestine C5 균질화기(Avestin, Ottawa Canada)중에서 균질화 하였다. 결과의 혼합물은 평균 입자크기 약 200nm를 가지는 α-토코페롤 미세입자를 함유하였다. 1 M의 트리에탄올아민(Spectrum Quality Products) 알칼리 용액을 사용하여 pH를 더 조절하였다.

에멀젼화 초기단계중 TPGS의 겔화를 피하기 위해, 모든 작업을 40℃가 넘는 온도에서 수행하였으며 혼합물을 함유하는 모든 용기를 덮음으로써 용액이 찬 공기에 노출되지 않도록 주의하였다. 두번째로, 2% 미만의 TPGS가 일반적으로 예비에멀젼화전에 α-토코페롤 오일중에 용해되어야 하며, 잔부의 TPGS는 예비에멀젼이 제조되기 전에 수성버퍼중에 가장 먼저 용해된다. 용액은 2%가 넘는 TPGS의 농도에서 겔이된다.

그 다음 다수의 약병을 4℃ 및 25℃에서 보관함으로써 에멀젼의 물리적인 안정성을 관찰하였다. 수 개월에 걸쳐, 정기적으로 약병을 꺼내어 입자크기를 측정하였다. Nicomp Model 370(Particle Sizing Systems Inc. Santa Barbara CA)으로 측정된 바와 같이 평균입자크기를 도 1에서 2개의 저장온도에 대해 나타낸다. 입자크기 분포는 2가지 모드였다.

실시예 5

에러! 정의되지 않은 북마크, α-토코페롤 에멀젼중 파클리탁셀의 화학적 안정성

에멀젼화 이후, 실시에 4의 조제물을 Phenosphere CN 컬럼(5 미크론, 150×4.6mm)상의 파클리탁셀에 대해 분석하였다. 유동상은 메탄올/물 구배로 구성되며, 1.0 mL/분의 유속을 가졌다. 230nm에 설정된 UV 검출기를 사용하여 파클리탁셀을 검출하고 양을 측정하였다. 단일 피크가 검출되었으며(도 2), 이것은 Hauser Chemical(Boulder CO)로부터 구입된 천연의 참조 파클리탁셀과 일치하는 보유 시간 및 질량스펙트럼 사진을 가졌다.

실시예 4 에멀젼의 화학안정성을 저장동안 HPLC에 의해 측정하였다. 도 3의 데이타는 파클리탁셀이 저장온도에 상관없이 적어도 3개월의 기간 동안 에멀젼에 안정하게 남아있는 것을 보여준다. 이와 함께, 도 2 및 도 3은 4℃에서 적어도 3개월의 기간동안 저장하였을 때 약물 효험의 성공적인 유지 및 에멀젼 안정성을 나타낸다.

실시예 6

파클리탁셀 에멀젼 조제물 QWA

다음의 조성을 가지는, 정맥내 약물송달을 위한 10mg/ml의 파클리탁셀 에멀젼을 실시예 4에 기술된 바와 같이 제조하였다.

파클리탁셀 1.0 gm%

α-토코페롤 3.0 gm%

TPGS 1.5 gm%

아스코르빌-6-팔미테이트 0.25 gm%

소르비톨 4.0 gm%

트리에탄올아민 pH6.8로

물 100 mL qs로

실시예 7

파클리탁셀 에멀젼 조제물 QWB

다음의 조성을 가지는, 정맥내 약물송달을 위한 10mg/ml의 파클리탁셀의 두번째 에멀젼을 실시예 4에 기술된 바와 같이 제조하였다.

파클리탁셀 1.0 gm%

α-토코페롤 3.0 gm%

TPGS 1.5 gm%

Solutol HS-15 1.0 gm%

소르비톨 4.0 gm%

트리에탄올아민 pH6.8로

물 100 mL qs로

Solutol HS-15는 BASF Corp.(Mount Olive NJ) 제품이다.

실시예 8

10 mg/mL 파클리탁셀 에멀젼 조제물 QWC

10mg/ml 파클리탁셀의 세번째 에멀젼을 공동-계면활성제로서 Poloxamer(BASF Corp, Parsipany NJ)를 사용하여 다음과 같이 제조하였다.

파클리탁셀 1.0 gm%

α-토코페롤 6.0 gm%

TPGS 3.0 gm%

Poloxamer 407 1.0 gm%

소르비톨 4.0 gm%

트리에탄올아민 pH6.8로

주사용 물 100 mL qs로

이 실시예에서, 1.0mg Poloxamer 407 및 1.0mg 파클리탁셀을 10체적의 에탄올을 가지는 6.0 gm α-토코페롤중에 적절히 가열하면서 용해하였다. 그 다음 에탄올을 진공하에서 제거하였다. 독립하여, 3.0 gm TPGS 및 4.0 gm 소르비톨을 최종체적 90mL의 주사용 물에 용해함으로써 수성버퍼를 제조하였다. 오일 및 물 용액 모두를 45℃로 가온하고 초음파처리로 혼합하여 예비에멀젼을 제조하였다. 진공을 사용하여 균질화처리전에 예비에멀젼으로부터 과량의 공기를 제거하였다.

균질화처리를 이미 기술된 Avestine C5에서 수행하였다. 균질화처리 밸브를 가로지르는 압력차이는 25Kpsi이었고 공급온도는 42 내지 45℃였다. 균질화기에서 나온 생성물이 50℃의 온도를 초과하지 않도록 칠러(chiller)를 사용하였다. 균질화처리동안 50 mL/분의 유속이 얻어졌다. 재순환 모드에서 약 20회의 통과후에, 에멀젼은 더욱 흐려졌다. 샘플을 채취하고 상기와 같이 약병에 넣어 밀봉하였다. 파클리탁셀의 정맥내 송달을 위한 미세한 α-토코페롤 에멀젼이 얻어졌다. 에멀젼의 평균입경은 77nm 였다. 0.22 미크론 Durapore 필터(Millipore Corp, Bedford MA)를 통한 무균여과후, 에멀젼을 약병에 채우고 정맥내 주사를 위해 사용될 때까지 4℃에서 보관하였다.

실시예 9

5 mg/mL 파클리탁셀 에멀젼 조제물 QWC

약물 10mg/ml 대신 5mg/ml을 혼입한 것을 제외하고 실시예 8에서 기술된 바와 같이 부가의 파클리탁셀 에멀젼을 제조하였다. 에멀젼의 조성은 다음과 같다:

파클리탁셀 0.5 gm%

α-토코페롤 6.0 gm%

TPGS 3.0 gm%

Poloxamer 407 1.0 gm%

소르비톨 4.0 gm%

트리에탄올아민 pH6.8로

주사용 물 100 mL qs로

실시예 8에 기술된 바와 같이 균질화처리후, 평균입경 52 nm를 가지는 α-토코페롤 및 파클리탁셀의 다소 흐린 에멀젼을 얻었다. 0.22 미크론 Durapore 필터(Millipore Corp, Bedford MA)를 통한 무균여과후, 에멀젼을 약병에 채우고 정맥내 주사를 위해 사용될 때까지 4℃에서 보관하였다. 여과중의 약물손실은 1% 미만이었다.

실시예 10

파클리탁셀 에멀젼 조제물 QWD

파클리탁셀의 정맥내 투여를 위한 α-토코페롤의 다섯번째 에멀젼을 다음과 같이 제조하였다:

파클리탁셀 0.5 gm%

α-토코페롤 6.0 gm%

TPGS 3.0 gm%

Poloxamer 407 1.5 gm%

소르비톨 4.0 gm%

트리에탄올아민 pH6.8로

주사용 물 100 mL qs로

Roche Vitamines(Nutley, NJ)로 부터 구입한 합성 α-토코페롤 USP-FCC를 이 조제물에 사용하였다. 폴리에틸렌글리콜 200(PEG-200)을 Sigma Chemical Co.로 부터 구입하였다.

균질화처리후, 평균입경 60nm를 가지는 다소 흐린 에멀젼을 얻었다. 0.22 미크론 Durapore 필터(Millipore Corp, Bedford MA)를 통한 무균여과후, 에멀젼을 약병에 채우고 정맥내 주사를 위해 사용될 때까지 4℃에서 보관하였다. 여과중 약물손실은 1%미만이었다.

실시예 11

TGPS 중 파클리탁셀의 용해 및 미셀용액의 제조

발명자들은 1.0 TGPS당 약 100mg 약물인 TGPS중의 파클리탁셀의 양호한 용해성을 관찰하였다. 파클리탁셀을 함유하는 TGPS의 미셀용액은 다음과 같이 제조되었다. TGPS중 파클리탁셀의 스톡 용액을 진공하에서 제거될 에탄올을 사용하여 45℃에서 1.0gm TPGS중에 90mg 파클리탁셀을 용해함으로써 제조하였다. 그 다음 파클리탁셀 스톡을 부가의 TGPS로 희석함으로써 일련의 희석물을 제조하여 TPGS중의 파클리탁셀을 0.1, 1, 5, 10, 25, 50, 75 및 90mg/mL의 농도로 얻었다. 새로운 시험관을 사용하여 TPGS중 각 100 mg의 파클리탁셀농축액을 0.9mL물에 용해하였다. 모든 시험관을 45℃에서 와류 및 초음파처리에 의해 혼합하였다. 0.01, 0.1, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 7.5 및 9.0 mg/mL의 최종 파클리탁셀 농도에 상당하는 물중의 투명한 미셀용액을 얻었다.

Nicomp Model 370 laser particle sizer(Particle Sizing Systems Inc. Santa Barbara CA)를 사용하여 용액을 조사하였다. 대략 10 nm의 입자크기가 얻어졌으며, 이것은 TPGS 및 파클리탁셀의 미셀의 존재와 일치한다.

2.5mg/mL 까지의 파클리탁셀을 함유하는 TPGS중의 파클리탁셀 미셀용액은 적어도 24시간동안 안정하였고 반면 5.0, 7.5 및 9.0 mg/mL에서는 불안정하였고 약물결정이 신속하게 비가역적으로 생성되었다. 이들 관찰결과는 파클리탁셀이 에멀젼 입자내에 α-토코페롤-풍부 도메인이 존재할 경우에만 용해된 상태로 잔류한다는 것을 암시한다. 따라서, 고농도의 파클리탁셀이 안정화될 수 있는 에멀젼을 생성하기 위해 TPGS에 대한 α-토코페롤의 최적의 비가 요구된다.

적절한 삼투성 및 pH로 조절될 때, 미셀 용액은 비록 AUC가 낮을 것으로 예상되지만 암환자에게 파클리탁셀의 느린 IV 점적투여에 효과적이다.

α-토코페롤중 TPGS의 유효성은 여러 바람직한 특성들의 상승작용이다. 첫번째로, 그것은 파클리탁셀에 대한 그것 자신의 친화성을 가지며, 이것은 아마도 그것의 분자구조중 소수성부분을 형성하는 α-토코페롤 덕분이다. 두번째로, 물중의 TPGS와 α-토코페롤의 계면장력이 약 10dynes/cm이며, 이 장력은 특히 공동 계면활성제와 함께 사용될 때 자유 α-토코페롤을 에멀젼화하기에 충분하다. 세번째로, TPGS와 같은 폴리옥시에틸화된 계면활성제는 당해분야에서 잘 알려진 바와 같이 간 및 비장중에서 입자의 트랩을 극적으로 감소시킴으로써 주사가능한 입자에 대한 "은밀한 피막"으로서 잘 형성된 우수한 특성을 가진다. 그러나 α-토코페롤 에멀젼을 위한 계면활성제로서 TPGS의 예상치 못한 독특한 발견은 단일 분자내에서 세가지 특성 모두의 발견이었다. TPGS의 부가적인 이점은 이것이 오일 및 프로필렌 글리콜 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 용매와의 혼합물중에서 안정한 자가-유화 시스템을 형성한다는 사실이며, 이것은 경구 약물송달을 위한 α-토코페롤과 함께 사용될때 상승작용을 시사한다.

실시예 12

20 mg/mL 파클리탁셀 에멀젼 조제물

α-토코페롤중의 20 mg/mL 파클리탁셀을 함유하는 조입자 에멀젼을 5% α-토코페롤 및 5% TPGS를 사용하여 실시예 4에 기술된 방법으로, 즉 단순히 농도를 증가시킴으로써 얻었다. 단지 더 이상의 농도증가가 임상적으로 유용한 정맥내 에멀젼에 필요치 않기 때문에, 더욱 높은 농도를 시험하고자 하는 노력은 하지 않았다.

실시예 13

α-토코페롤 에멀젼중 다른 PEG 계면활성제의 사용

다양한 다른 페길화된 계면활성제, 예를 들어 Trioton X-100, PEG 25 프로필렌 글리콜 스테아레이트, Brij 35(Sigma Chemical Co), Myrj 45, 52 및 100, Tween 80(Spectrum Quality Products), PEG 25 글리세릴 트리올레이드(Goldschmit Chemical Corp. Hopewell VA)은 α-토코페롤을 에멀젼화하는데 유효하다.

그러나, 몇몇 다른 페길화된 계면활성제를 사용한 실험은 α-토코페롤 에멀젼중의 파클리탁셀의 안정화에 완전히 실패하였다. TPGS의 독특한 유효성을 나타내기 위해 3가지의 에멀젼을, 각 에멀젼에서 1차 계면활성제로서 TPGS를 Tween 80 및 Myrj 52로 치환한 것을 제외하고, 실시예 9에 기술된 바와 같이 제조하였다. 이들 두 계면활성제는 Tween 80 및 Myrj 52가 TPGS와 본질적으로 동일한 HLB값을 가져 상당히 좋은 α-토코페롤 에멀젼을 생성하기 때문에 선택되었다. 그러나, 5mg/mL 파클리탁셀이 조제물중에 포함될 경우, 예비에멀젼의 제조후 약물의 결정화가 매우 급속히 나타나며, Tween 80 및 Myrj 52의 처리된 에멀젼은 길이가 수미크론에 달하는 막대형(rod-shaped) 입자를 가지며, 파클리탁셀 결정과 일치하는 조입자를 특징으로 한다. 0.22 미크론 필터를 1% 미만의 약물손실로 쉽게 통과하는 TPGS 에멀젼과 달리, Tween 및 Myrj 에멀젼은 이 결정질 약물재료의 존재 때문에 여과할 수 없었다.

TPGS를 가지는 α-토코페롤 파클리탁셀 에멀젼의 예상치 못한 개선에 대한 몇가지 가능한 설명이 있다. 약물은 TPGS중 약 100 mg/mL에 달하는 양호한 용해성을 가진다. 아마도 그것은 약물 및 담체의 복합물을 안정화시키는 TPGS 분자중 평면구조의 α-토코페롤 페놀고리와의 파클리탁셀 벤질 측쇄의 친화성 강도이다. α-토코페롤과 PEG 테일간의 숙시네이트 연결자외에도 이 분자의 신규한 특징은 시험된 다른 페길화된 계면활성제와 그것의 구조가 다르다는 것이다.

실시예 14

폴록사머 -기제 α-토코페롤 에멀젼

α-토코페롤 6.0 gm%

Poloxamer 407 2.5 gm%

아스코르빌 팔미테이트 0.3 gm%

소르비톨 6.0 gm%

트리에탄올아민 pH7.4로

물 100 mL qs로

α-토코페롤 에멀젼을 1차 계면활성제로서 Poloxamer 407(BASF)를 사용하여 제조하였다. 백색의 우유같은 에비혼합물을 공급온도를 45℃ 그리고 생성물에 대한 칠러 출구가 15℃로 설정된 C5 균질화기(Avestin, Ottawa Canada)중에서 25 Kpsi로 10분간 연속 재순화하여 균질화하였다. α-토코페롤 미세입자의 미세한, 무균여과 가능한 에멀젼이 얻어졌다. 그러나, 이 조제물을 파클리탁셀을 사용하여 제조할 경우, 냉장고에서 밤새 보관한 후 파클리탁셀의 침전이 나타나며, 이것은 다시 주 계면활성제로서 TPGS의 우수한 유효성에 뒤지는 것이다.

실시예 15

냉동건조된 에멀젼 조제물

Maltrin M100(Grain Processing Corporation, Muscatine IA)을 물중의 2x 스톡으로서 실시예 14의 에멀젼에 가하였다. 그 다음 등분량을 셸 냉동기에서 동결하고 진공하에서 냉동건조하였다. 물에 녹이는 동안 미세한 에멀젼이 회수되었다.

냉동건조된 조제물은 냉동건조 제제의 불명료한 보관수명이 바람직한 곳에 효과적이다. 만니톨, 알부민 또는 Sigma Chemicals, St.Louis, Mo.제의 PolyPep과 같은 다른 당류를 함유하는 냉동건조 가능한 조제물 또한 제조할 수 있다.

실시예 16

α-토코페롤 에멀젼으로부터 파클리탁셀의 체외방출

약물송달 부형제의 하나의 바람직한 특성은 혼입된 약물의 지속적인 방출을 제공하는 것이며, 이것은 개선된 약물동태학 및 효험과 매우 자주 관련된 특성이다. 특히, 장시간 순환하는 파클리탁셀 에멀젼은 체내의 암자리로의 약물의 송달을 개선시킬 수 있다. 발명자들은 놀랍게도 본 발명의 에멀젼이 현재 유일한 FDA 승인된 파클리탁셀 조제물[Taxol

, Bristol Myers Squibb(BMS), Princeton NJ]에 비해 파클리탁셀의 지속적인 방출을 제공한다는 것을 발견하였다. 6mg/mL(QWA) 및 7mg/mL(QWB)의 파클리탁셀 농도를 가지는 에멀젼을 제조하였다. 비교로서, Taxol

은 에탄올:크레모포어 EL 1:1(v/v)에 용해된 6mg/mL의 파클리탁셀을 함유한다. 다른 조제물로부터 37℃에서 인산염-버퍼링된 식염수용액(PBS)으로의 체외 방출을 파클리탁셀에 자유롭게 투과할 수 있는 투석 멤브레인(MW 10킬로달톤의 컷-오프)을 사용하여 감시하였다. 투석 전과 후의 샘플에서 약물의 정량화를 HPLC로 행하였다. 약물의 방출형상을 퍼센트방출 및 시간에 따라 방출된 파클리탁셀의 농도 모두의 항으로 생성하였다. 도 4에서의 자료로부터 알 수 있는 바와 같이, 5% 미만의 파클리탁셀이 에멀젼으로 부터 24시간에 걸쳐 투석되었고, 한편 약 12%가 상용의 BMS 조제물로부터 투석 백의 외부에서 회수되었다. 이것은 에멀젼으로부터의 약물방출이 상업적으로 구입할 수 있는 용액에 비해 상당히 느렸다는 것을 나타낸다.

실시예 17

파클리탁셀을 함유하는 α- 토코페롤에멀젼의 생체적합성

심각한 단일-투여량 독성 연구를 수행하였다. 20 내지 25gm의 마우스 각각을 구입하고 승인된 동물시설에서 적응하게 하였다. 마우스군(n=3)을 실시예 6에 기술된 바와 같이 제조된 α-토코페롤 에멀젼중의 30 내지 90 mg/kg을 함유하는 조제물을 투여시켰다. 모든 주입은 꼬리정맥 거환에 의해 정맥내로 하였다.

비록 모든 주입이 거환 IV 푸시로 행해지지만, 어떠한 사망 또는 즉각적인 독성은 어떠한 복용, 심지어 90mg/kg에서도 관찰되지 않았다. 체중에 대한 결과를 표 2에 나타낸다. 군중 가장 많은 체중감소는 17%였으나 모든 군 심지어 90mg/kg에서도 주입후 10일의 기간에 걸쳐 체중이 회복되거나 증가하였다.

부형제 독성연구도 또한 행하였다. 약물이 없는 에멀젼이 투여된 동물은 빠르게 성장하였으며, 식염수가 투여되거나 또는 주입되지 않은 동물에 비해 약간 체중이 늘었다. 이것은 조제물의 비타민 및 칼로리 함량에 의한 것이었다.

발명자들은 부작용이 나타나지 않는 90mg/kg을 초과하는 파클리탁셀에 대한 최고의 수용가능한 복용량(MTD)를 관찰하였다. 이것은 훨씬 적은 복용량에서 사망이 관측된 보고된 문헌상 최상 값의 2배 이상이었다. FDA-승인된 Taxol

조제물은 10 mg/kg의 거환 정맥내 복용의 마우스에서 사망을 유발하였으며, 이 발견은 발명자들의 방법에서 반복되었다. 래트에서, Taxol

은 실험된 모든 희석액 및 복용영역에서 치명성이 일정하지 않았다. 역으로, 실시예 6의 조성물은 래트에서 잘 수용되었고, Rhone-Poulenc Rorer에 의해 상용화된 독성이 덜한 파클리탁셀 유사체인 심지어 Taxotere보다 개선된다.

높은 약물내성에 대한 하나의 가능한 설명은 에멀젼이 실시예 16에서의 체외방출 데이타로부터 나타난 바와 같이 약물에 대한 서방 저장소로서 거동하고 있다는 것이다.

실시예 18

파클리탁셀 에멀젼의 효능평가

실시예 6의 파클리탁셀 에멀젼을 무모마우스에서 단계 B16 흑색종 종양에 대한 효능에 대해 평가하였으며 데이타를 표 3에 나타낸다. 다시한번 시판제품 Taxol

을 참고 조제물로서 사용하였다. 종양세포를 피하에 투여하고 지시된 복용스케쥴로 종양투여후 4일에 꼬리정맥 주입으로 치료를 시작하였다. 효능을 수명의 퍼센트 증가(% ILS)로 나타냈다.

다음의 결과가 표 3에서의 데이터에서 도출된다: a) 약 10%의 증가된 수명이 10mg/kg Q2Dx4로 Taxol

을 투여함으로써 얻어졌고, b)%ILS 값은 30, 40 또는 50mg/kg Q2Dx4로 파클리탁셀의 α-토코페롤 에멀젼을 투여함으로써 30 내지 50%로 증가하였으며, c)에멀젼이 30, 50 및 70mg/kg Q4Dx3로 투여될 때 좋은 복용반응이 관찰되되며 더불어 70mg/kg에서 약 80% ILS가 관찰되며, d)4일에 단 한번 복용된 90mg/kg에서 조차 약 36% ILS였다. 이들 데이터는 본 발명의 에멀젼이 파클리탁셀의 효능을 실질적으로 개선시킬 가능성을 명백하게 나타낸다.

실시예 19

파클리탁셀 에멀젼의 효능평가

실시예 6, 7 및 8(각각 QWA,QWB 및 QWC)의 에멀젼을 마우스에서 B16 흑색종에 대한 효능에 대해 비교하였고; Taxol

을 참고 조제물로서 다시 사용하였다. 실시예 18의 것과 본질적으로 동일한 방법을 사용하였다. 이 연구로부터의 데이터를 표 3에 요약하였다. 효능을 다음과 같이 나타내었다: a)퍼센트 종양성장 억제(%T/C, 여기에서 T 및 C는 각각 처리동물 및 대조동물을 나타낸다); b)종양성장 지연값(T-C), 및 c) 3.32x 종양 배가 시간에 대한 T-C 값의 비로서 정의되는 Log 세포 죽임(log cell kill). 이 특이한 종양모델에 대한 후자의 패라미터는 1.75일이 되도록 계산되었다. 표 4의 결과로부터 알 수 있듯이, 모든 효능의 측정: 종양 성장억제, 종양 성장 지연값 및 Log 세포 죽임은 특히 에멀젼이 매 4일마다 70mg/kg으로 복용될 경우 Taxol

에 대한 약물송달 부형제로서 α-토코페롤 에멀젼의 우수한 효능을 나타낸다. 실시예 16에서 설명된 바와 같이, 이 증가된 효능은 개선된 약물 생체적합성 및/또는 유지된 방출의 결과일 것이다.

^aSEM= 평균의 표준에러

^b% ILS= 수명의 %증가=[(T-C)/C]x100 여기에서:

T=처리동물의 평균 생존

C=대조동물의 평균 생존

NCI 표준에 따른 50%보다 큰 ILS 값은 중대한 항-종양 활성을 나타낸다.

종양 배가 시간은 1.75일이 되도록 계산된다.

%T/C= 종양성장억제(15 일)=(처리군의 종양 중간무게/대조군의 종양 중간무게)X 100

T-C= 종양성장 지연값= 처리군(T) 및 대조군(C) 종양이 소정의 크기(항상 750 내지 1000mg)에 이르는 중간시간.

Log 세포 죽임=(T-C값)/(3.32x종양 배증 시간)

실시예 20

α-토코페롤/ Tagat TO 혼합물의 자가-유화

α-토코페롤 2.0gm 및 Tagat TO(Goldschmidt Chemical Corp, Hopewell VA) 800mg을 함께 용해하였다. 약 80mg의 오일상 혼합물을 시험관에 옮긴후 물을 가하였다. 온건하게 손으로 혼합하자, 풍부한 우유상 에멀젼이 즉시 발생하였고, 이것은 계면활성제-오일 혼합물이 수성매체에의 노출중 자발적으로 에멀젼을 형성하는 약물송달 시스템으로서 제시된 "자가-유화 시스템"과 일치하였다.

실시예 21

파클리탁셀을 함유하는 자가-유화 조제물

파클리탁셀 50mg/ml를 실시예 1에 기술된 방법으로 α-토코페롤중에서 제조하였다. Tagat 20%(w/w)을 가하였다. 결과의 혼합물은 투명하고, 점성있고 호박색이었다. 오일상 혼합물 100mg의 양을 시험관으로 옮겼다. 와류 혼합을 하면서, 1mL의 물을 가하는 동안 미세한 에멀젼이 얻어졌다.

실시예 22

파클리탁셀의 자가- 에멸션화 조성물

파클리탁셀 50mg/ml를 실시예 1에 기술된 방법으로 α-토코페롤중에서 제조하였다. 진공하에서 에탄올을 제거한 후, 20% TPGS 및 10% 폴리옥시에틸렌글리콜 200(Sigma Chemical Co)를 중량으로 가하였다. 그 다음 20mL의 탈이온수를 37℃에서 100mg의 오일상 혼합물에 가함으로써 본 시스템의 자가-유화가 수행되었다. 온건하게 혼합하는 동안, Malvern Mastersizer(Malvern Instruments, Worcester MA)로 2 미크론의 평균입경, 및 10 누적분포의 90%가 10미크론 미만을 나타내는 미세한 에멀젼 입자로 구성된 얇은 에멀젼이 형성되었다.

실시예 23

α-토코페롤의 Etoposide 에멀젼 조제물

에토포시드 4mg(Sigma Chemical Co)을 다음의 계면활성제-오일 혼합물중에 용해하였다:

에토포시트 4 mg

α-토코페롤 300 mg

TPGS 50 mg

폴록사머 407 50 mg

에탄올 및 온건한 가온을 사용하여 투명한 호박색 약물용액을 오일에서 형성하였다. 그 다음 에탄올을 진공하에서 제거하였다.

45℃에서 초음파처리를 사용하여 4% 소르비톨 및 100mg TPGS를 함유하는 물 4.5mL를 가함으로써 예비에멀젼을 형성하였다. 입자크기는 Emulsiflex 1000(Avestin, Ottawa Canada)에서 처리함으로써 더욱 감소하였다. Emulsiflex 1000 본체를 한 쌍의 5mL 주사기와 조립하고 전체 장비를 사용전에 45℃로 가열하였다. 그 다음 5mL의 에멀젼을 그것에 손으로 대략 10회 통과시켰다. α-토코페롤 부형제중의 자유 유동성의, 실용적인 에토포시드 에멀젼이 얻어졌다.

발명자들은 α-토코페롤중에 용해된 형태의 에토포시드가 상기 실시예들의 방법을 적합시킴으로써 경구투여 형태로서 또한 사용될 수 있다는 것을 주목한다.

실시예 24

α- 토코페롤중의 Ibuprofen 또는 Griseofulvin 의 용해

이부프로펜은 진통제이며, 위를 자극할 위험이 있다면 필요시 주사에 의해 투여될 수 있다. 다음의 α-토코페롤중의 이부프로펜 용액은 정맥내 투여를 위해 에멸션화될 수 있다.

12 mg의 결정질 Ibuprofen (Sigma Chemicals)을 용매 없이 120 mg의 α-토코페롤중에서 온건하게 가열함으로써 용해하였다. 비타민 E중의 결과의 10% 이부프로펜 용액은 실시예 4, 6, 7, 8 또는 22에 기술된 방법에 의해 에멸션화 될 수 있다.

항진균성 화합물 그리세오풀빈 12 mg을 우선 3 mL의 무수에탄올에 용해한후; 180 mg의 α-토코페롤을 가하고 에탄올을 진공상태에서 온건하게 가열하면서 제거하였다. α-토코페롤중의 결과의 그리세오풀빈용액은 투명하고 실시예 4, 6, 7, 8 또는 22에 기술된 방법에 의해 에멀젼화될 수 있다.

실시예 25

비타민 E 숙시네이트 에멀젼 조제물

비타민 E 숙시네이트가 림프종 및 백혈병의 치료를 위한 그리고 암의 화학적예방을 위한 치료제로서 제시되었다. 다음은 α-토코페롤중의 비타민 E의 에멀젼화를 위한 조성물 및 방법이다. 수크로스 에스테르 S 1170은 Mitsubishi Kagaku Foods Corp, Tokyo Japan의 제품이다. 자유산으로서 비타민 E 숙시네이트를 ICN Biomedicals, Aurora, OH.로부터 백색분말로서 구입하였다. 플루로닉과 같은 다른 계면활성제, 및 α-토코페롤과 α-토코페롤 숙시네이트와 더불어 TPGS 포함하는 에멀젼은 치료제를 가지거나 가지지 않는 것 모두 유사한 방법으로 제조될 수 있다.

α-토코페롤 8 gm and 비타민 E 숙시네이트 0.8 gm을 둥근바닥 플라스크중의 에탄올에서 함께 용해하였다. 용매를 제거한 후 100 mL의 수성버퍼를 가하였다. 알칼리성 버퍼는 2% 글리세롤, 10 mM 트리메탄올아민, 및 0.5 gm % 수크로스 에스테르 Sl170로 구성된다. 2분 동안 혼합한후, 예비에멀젼을 Avestin Model C-5 균질화기로 운반하고 58 ℃의 공정 공급온도에서 약 12분 동안 균질화하였다. 상호반응 헤드를 가로지르는 압력차이는 25 내지 26 kpsi였다. 균질화처리중 pH를 주의깊게 관찰하고, 요구에 따라 pH 7.0으로 조절하였다. 공정중 산소를 차단하는데 주의하였다. 미세한 백색 에멀젼이 얻어졌다.

실시예 26

에스테르중의 α-토코페롤 수준

상업적으로 구입할 수 있는 에스테르: 토코페롤-아세테이트, -숙시네이트, 니코티네이트, -포스페이트 및 TPGS중의 α-토코페롤의 수준은 판매상에 의해 제공되거나 또는 HPLC에 의해 측정되었다. 이들 용액중의 자유 α-토코페롤 농도는 1.0% 미만, 대체로 0.5% 미만이었다.

실시예 27

Resveratrol 에멀젼 조제물

Resveratrol은 포도껍질의 추출물로서 맨처음 발견된 암의 화학예방제이다. 이것은 식이 보충물로서 제안되었다.

Resveratrol은 Sigma Chemical Co.에서 구입하였다. 비록 이것이 에탄올에 난용성이지만 10 mg의 resveratrol, 100 mg의 α-토코페롤, 100 mg의 TPGS 및 에탄올을 가하자 투명한 용액이 급속히 형성된다. 에탄올을 제거하자 투명한 호박색 오일이 남았다.

Resveratrol의 오일상 용액은 상기 실시예의 여러가지 방법에 의해 경구 송달을 위한 자가-유화 시스템으로서 조제될 수 있다.

실시예 28

Muramyl 디펩티드 조제물

무라밀 디펩티드는 미코박테리아로부터 유도되며 무라밀 펩티드 미콜산 및 리포폴리사카라이드를 대표하는 효험있는 면역자극제이다. 예를 들어, 이들은 암을 표적으로 제거하는 면역시스템을 자극함으로써 암의 치료에서, 특히 항암 백신과 관련하여 사용된다. 더욱 최근에, 합성유사체 무록타신이 박테리아성 벽추출물의 비특이성 부작용을 감소시키기 위해 제시되었다.

N-아세틸무라밀-6-O-스테로일-1-알라닐-d-이소글루타민을 Sigma Chemical Co.로부터 구입하고 10 mg을 100 mg의 α-토코페롤 및 80 mg의 TPGS중에서 용해하였다. 에탄올을 공용매로서 사용하여 디펩티드의 용해를 보조하고, 진공하에서 증류에 의해 제거하여, α-토코페롤 및 계면활성제중의 투명한 용액을 얻었다.

약물의 이 오일용액은 상기 실시예들의 여러가지 방법에 의해 비경구적 투여를 위해 에멀젼화 될 수 있다.

실시예 29

알콜 -함유 에멀젼

PCT WO 95/11039의 교시를 파클리탁셀의 경구투여에 적합시키기 위한 시도중, 다음의 조제물이 제작되었다.

파클리탁셀 0.125 gm

α-토코페롤 0.325 gm

TPGS 0.425 gm

에탄올 0.125 gm

전과 같이, 파클리탁셀을 에탄올을 사용하여 α-토코페롤 및 TPGS중에 용해한후, 에탄올을 진공하에서 제거하였다. 건조 중량으로 잔류 에탄올은 3 mg (0.3% w/w)미만이었다. 그 다음 새로운 무수에탄올 0.125 gm을 조제물에 되채웠다. 혼합후, 젤라틴 갭슐로서 경구투여에 대한 조제물 적합성을 다음 시험에 의해 모사하였다. 100 mg분량의 자유-유동 오일을 37℃에서 20 mL의 물에 가하고 와류믹서를 사용하여 온건하게 혼합하였다. 미세한 에멀젼이 얻어졌다. 그러나 20분 후, 현미경 검사는 로제트에서 다수의 결정성장을 보여주었으며, 이것은 파클리탁셀 침전의 특징이다. 다량의 약물이 결정 형태로 십이지장으로 유입되고 십이지장에서 그것은 그것의 물리적 형태로 인해 섭취되지 않기 때문에, 이 조성물은 파클리탁셀의 경구투여에 적합하지 않다고 결론지어졌다. 발명자들은 α-토코페롤에 대한 TPGS의 높은 비와 함께 과량의 에탄올이 이 조제물로부터 관측된 약물의 결정화의 원인이라고 생각한다.

실시예 30

알콜 -함유 α-토코페롤 에멀젼

PCT WO 95/11039의 교시를 파클리탁셀의 정맥내투여에 적합시키기 위한 시도중, 다음의 조제물이 제작되었다.

파클리탁셀 0.050 gm

α-토코페롤 0.100 gm

레시틴 0.200 gm

에탄올 0.100 gm

부탄올 0.500 gm

전과 같이, 파클리탁셀을 에탄올을 사용하여 α-토코페롤 및 TPGS중에 용해한후, 에탄올을 진공하에서 제거하였다. 건조 중량으로 잔류 에탄올은 2 mg (0.5% w/w)미만이었다. 그 다음 새로운 무수에탄올 0.100 gm 및 n-부탄올 0.500 gm을 조제물에 되채웠다. 투명한 오일이 얻어졌다. 주사농축물을 식염수와의 혼합물의 표준 약학실시에 의해 투여에서의 생체적합성에 대해 시험하였다. 약 200 mg의 오일을 20 mL의 식염수에 넣고 혼합하였다. 불용성물질의 큰 플레이크가 즉시 생성되었고 물질의 가장 큰 양이 시험관 벽상에 농후한 퇴적물을 형성하였다. 혼합물은 어떠한 경로에 의해서도 비경구적 투여에 명백하게 부적합하였으며, 발명자들은 그래서 이것이 조제물에 함유된 약물의 동일성과 무관하다고 생각한다. 시행착오를 거쳐 발명자들은 레시틴이 이것의 낮은 HLB (약 4) 때문에 α-토코페롤에 대한 계면활성제로서 좋지 않은 선택이라는 것을 알았다. 비경구적 투여에 적합한 미세한 에멀젼에 대해 여기에 기술된 다른 성공적인 예들은 모두 높은 HLB의 계면활성제를 사용하여 제조되었다. 이들 계면활성제는 TPGS(HLB 17 근처), 폴록사머 407(HLB 약 22) 및 Tagat TO(HLB 약 14.0)를 포함한다. 전반적으로, 발명자들은 α-토코페롤 에멀젼화가 HLB > 10, 바람직하게는 12 보다 큰 주 계면활성제를 사용하여 가장 잘 수행되는 것을 발견하였다. 레시틴은 비록 공용매로서 사용될 수 있지만 이 부류에 있지는 않다. 비교로, 트리글리세리드의 전형적인 o/w 에멀젼은 HLB 7 내지 12의 계면활성제로 제조되며, 이것은 α-토코페롤 에멀젼이, 또한 α-토코페롤중 친지질 및 약극성 친지질 약물의 용해성을 선호하는 요소인, α-토코페롤의 분극성 및 극도의 소수성 덕분에 유일한 부류라는 것을 나타낸다. Emulsions: Theory and Practice, 2nd Ed. p. 248 (1985)를 참조한다.

실시예 31

발명에 유용한 다양한 조제물(표 5)을 다음과 같이 제조한다:

조제물 A - 분할 계면활성제

1) 1.25g TPGS 및 1.01g Pluronic F127을 가열 및 교반에 의해 주사용 물 79.00g에 용해하였다.

2) 0.533g 파클리탁셀을 75℃에서 혼합(저 전단)에 의해 6.354g PEG400에 용해하였다.

3) 3.992g TPGS 및 8.490g 비타민 E를 가하고, TPGS가 용융하여 혼합물이 균질하게 보일때까지 45℃에서 혼합(저 전단)하였다. 이 오일상은 단계 4로의 불완전한 이동을 고려하여 약간 과량에 상당한다.

4) 수상(단계 1)을 45℃로 가열하고, 45℃ 오일상(단계 2+3)을 1분에 걸쳐 부으면서 중간 전단(실험용 혼합 모터)에서 혼합하였다. 혼합을 2분 이상 계속하여 미정제 에멀젼을 형성하였다.

5) 에멀젼을 22Kpsi 피크 스트로크 압력에서 1시간 동안 연속 재순환 모드로 Avestin C5에서 균질화하였다.

6) 표에 나타낸 실제 양 및 퍼센트는 단계 4 동안 오일상의 불완전한 이동을 정정한 것이다.

분할 계면활성제를 이용하는 이런 방법은 오일상에서 특정 계면활성제의 용해성이 제한되는 경우 유용하다.

조제물 B - 오일상중의 모든 계면활성제

1) 1.066g 파클리탁셀을 75℃에서 혼합(저 전단)에 의해 12.887g PEG400에 용해하였다.

2) 10.739g TPGS 및 2.157g Pluronic F127을 가하고, 두 계면활성제가 완전히 용융/용해될때까지 50 내지 60℃에서 혼합(저 전단)하였다.

3) 17.176g 비타민 E를 가하고, 혼합물이 균질하게 보일때까지 45 내지 50℃에서 혼합(저 전단)하였다.

4) 단계 1-4에서 생성된 오일상 21.8g을 중간 전단(실험용 혼합 모터)에서 혼합하면서 1분에 걸쳐 79.5g 물에 가하였다. 혼합을 총 3분 동안 계속하여 미정제 에멀젼을 형성하였다.

5) 에멀젼을 22Kpsi 피크 스트로크 압력에서 30분간 연속 재순환 모드로 Avestin C5에서 균질화하였다.

공정처리의 전체적 견지에서 보면, 오일상중에 모든 계면활성제를 갖는다는 이점이 있다. 예비-에멀젼의 분산 및 이어지는 균질화가 모두 용이해지고, TPGS와 같은 고융점 계면활성제의 잠재적 겔화를 피할 수 있다.

실시예 32

Etoposide 에멀젼

Etoposide 2mg/ml을 포함한 비타민 E 에멀젼(6.0% 비타민 E, 3.5% TPGS, 6.0% PEG400, 8% Pluronic F-127)을 다음과 같이 제조하였다:

1) Etoposide 0.1044g을 PEG400 3.1435g에 용해하였다(65℃에서 5분).

2) TPGS 2.0447g 및 비타민 E 3.1563g을 가하고, 완전히 용해할때까지 혼합하였다.

3) 오일상을 44℃에서 Pluronic F-127 0.5g을 포함한 주사용 물 42.4g(수상은 오일상과 혼합하기 전에 끓여서 기체를 제거하였다)과 혼합하고, 예비-에멀젼을 간단한 초음파처리에 의해 형성하였다.

4) 22 내지 24Kpsi로 Avestin CS에서 균질화하여, 미세한 에멀젼을 형성하였다.

실시예 33

Etoposide 에멀젼

PEG300을 함유하고 Etoposide 2mg/ml를 조합한 α-토코페롤 에멀젼을 다음과 같이 제조하였다.

우선 Etoposide를 PEG300에 용해하였다(72℃에서 10분). 다음에, TPGS 및 비타민 E를 약물 용액에 가하였다. 수상(Poloxamer 407을 함유한 WFI)은 사용하기 전에 끓여서 기체를 제거하였다. 예비-에멀젼을 45℃에서 물 45g에 오일상 5g을 첨가하여 제조하였다. 3분간 혼합한 후, 예비-에멀젼을 30분간 25Kpsi에서 균질화하여 미세한 에멀젼을 생성하였다. 에멀젼의 최종 조성을 아래에 나타낸다:

성분조성(%, w/w)

Etoposide 0.2

비타민 E 3.0

TPGS 1.5

PEG300 3.0

Poloxamer 407 1.0

WFI(주사용 물) 92.3

실시예 34

추가의 주사용 파클리탁셀 에멀젼을 표 6에 나타낸다.

실시예 35

본 발명의 유용한 여러가지 자가-유화 에멀젼의 조성을 표 7에 나타낸다.

표 7에 설명된 에멀젼을 다음과 같이 합성하였다.

SEFP -1

Paclitaxel 및 PEG 400을 60 내지 67℃에서 함께 가열하고, 약물이 PEG에 용해될때까지 교반하였다(15분). 다음에, TPGS 및 Pluronic F127을 가하고, 10 내지 15분간 70℃에서 교반하여 계면활성제를 용해시켰다. 마지막으로, 비타민 E(α-토코페롤)를 가하고, 혼합물이 투명하고 균질해질때까지 55℃에서 5 내지 10분간 혼합하였다. 수상으로 희석하여 미세한 에멀젼을 얻을 수 있다.

SEFP -2

우선 Paclitaxel 및 PEG400을 45분간 65 내지 75℃에서 교반하고, TPGS를 가하고 교반을 또 30분간 계속하여 3 성분 모두를 완전히 용해시켜 투명한 용액을 생성하였다. 마지막으로, Solutol HS-15 및 비타민 E를 가하고, 55℃에서 약 5분간 혼합하여 투명한 균질 액체를 얻었다. 수상으로 희석하여 미세한 에멀젼을 얻을 수 있다.

실시예 36

추가의 파클리탁셀의 자가-유화 에멀젼 조성을 표 8에 나타낸다.

SEFP-3 및 SEFP-4를 우선 60 내지 70℃(<30분)에서 저 전단 혼합에 의해 Solutol HS-15 + PEG400에 파클리탁셀을 용해시켜 제조하고, 다음에 TPGS 및 α-토코페롤을 가하고, 간단히 혼합하여 투명한 용액을 형성하였다. 실온에서는 TPGS 고화가 관찰될 수 있지만, 37℃에서는 투명한 액체로 남아있다.

SEFP-3 및 SEFP-4를 희석하여 에멀젼의 입자 크기를 다음과 같이 측정하였다: SEFP-3 또는 SEFP-4 0.2ml를 5분간 교반 막대를 사용하여 저 전단 혼합함으로써 37℃에서 인산 완충된 식염수 100ml에 희석하였다. 에멀젼을 빠르게 형성하고, 이것의 입자 크기를 Malvern Mastersizer에 의해 측정하였다. SEFP-3 및 SEFP-4의 부피 평균 직경이 각각 2.49 및 1.55㎛인 것을 알았다.

효과적인 자가-유화 시스템에 대한 결과의 에멀젼의 평균 액적 직경은 10㎛ 미만, 바람직하게는 5㎛ 미만이어야 한다.

실시예 37

페길화된 인지질을 포함한 파클리탁셀 에멀젼

에멀젼을 포함한 DMPE-PEG₂₀₀₀(디미리스토일 포스파티딜 에탄올아민-폴리에틸렌 글리콜 2000)을 제조하였다(표 9). 존재시, Paclitaxel을 우선 75℃에서 저 전단 혼합에 의해 PEG400에 용해하였다. 다른 성분을 가하고, 간단히 혼합하여(TPGS를 용융시킨 후, 그리고 DMPEG-2의 경우에는 P 407) 투명한 용액을 형성하였다. 진공을 적용하여 유화전에 오일상에서 기체를 제거하고, 오일상을 45℃에 이르게 하였다. 물을 15분간 끓여서 기체를 제거한 후, 또한 45℃에 이르게 하였다. 2개 상을 저 내지 중간 전단에서 45℃에서 혼합하여 예비-에멀젼을 형성하였다. 조제물 DMPE-PEG-P2, DMPE-PEG-P3 및 DMPE-PEGP-4에 대해, 이것을 오일상에 따뜻한 물을 단순히 첨가하고, 초음파처리하면서 손으로 휘저어 달성하였다. DMPE-PEG2 용 예비-에멀젼을 실험용 혼합 모터로 교반하면서 물에 오일상을 부어서 제조하였다. 예비-에멀젼을 즉시 20 내지 22Kpsi 피크 스트로크 압력에서 Avestin C5 균질화기에서 균질화하여 200nm 미만의 평균 액적 직경 및 99% 누적 분포를 갖는 미세한 에멀젼을 생성하였다.

실시예 37

효능 데이타

조제물 D(표 6)를 실시예 18 및 실시예 19에 설명된 바와 같은 마우스에서 B16 흑색종에 대한 효능에 대해 평가했고, 이 데이타를 도 5에 요약한다. 비교 효능 데이타는 표 10에 나타낸다.

% T/C = 종양 성장 억제(처리군 중간 종양 중량/대조군 중간 종양 중량) x 100

T-C = 종양 성장 지연값(처리군(T) 및 대조군(C) 종양이 소정의 크기(>750mg )에 도달하는 중간 시간)

Log 세포 죽임 = (T-C 값)/(3.32 x 종양 배증 시간) 종양 배증 시간은 1.75일이 되도록 계산됨

표 4의 데이타와 일치된, 종양 성장 억제, 종양 성장 지연 및 Log 세포 죽임에 의한 효능 평가는 Taxol

을 능가하는 조제물 D의 중대한 개선을 표시한다.

실시예 38

물리적 안정성 데이타

조제물 D의 물리적 안정성을 저장시의 잠재적 입자 크기 변화에 의해 평가했고, 이 데이타를 표 11에 나타낸다.

입자 크기를 Nicomp 370 서브-미크론 입자 크기 분석기를 사용하여 측정하였다. 표 11의 데이타로부터 알 수 있는 바와 같이, 입자의 평균 액적 직경 또는 99% 누적 분포에서 중대한 변화는 관찰되지 않았다. 후자의 파라미터는 주로 입자 응집 및 성장의 표시자로서 사용된다. 게다가, 침전 또는 다른 큰 변화는 저장 동안 관찰되지 않았다. 장기간 안정성이 진행중이다.

실시예 39

화학적 안정성

조제물 D(표 6)의 화학적 안정성을 실시예 5의 과정을 사용하여 HPLC에 의해 모니터했고, 이 데이타를 표 12에 나타낸다. HPLC를 파클리탁셀 및 분해물의 농도를 정량하기 위해 이용한다. 표 12에서, 약물 농도는 약물 효능과 동등하다.

조제물 D의 약물 효험이 이들 저장 조건하에서 변하지 않고 유지된다는 것이 이 데이타로부터 명백하다.

게다가, 약물의 분해가 이 저장 시간 동안 관찰되지 않았다.

실시예 40

PEG300 또는 NMP 를 함유하는 에멀젼

PEG300 또는 NMP(N-메틸-2-피롤리돈)을 함유하고 10mg/ml 파클리탁셀을 포함한 α-토코페롤 에멀젼을 표 13에 나타낸다.

두 경우에, 우선 파클리탁셀을 저 전단 혼합하면서 용매(PEG300 또는 NMP)에 용해시켰다. PEG300을 사용한 것은 용해를 빠르게하기 위해 60℃로 가열했지만, NMP를 사용한 조제물은 실온에서 몇분이면 약물을 충분히 용해시켰다. 다음에, 나머지 성분(물을 제외하고)을 가하고, 혼합물을 저 전단 혼합하면서 60 내지 65℃로 가열하여 고체 계면활성제를 용융시키고 균질의 투명한 용액을 생성하였다. 이 용액을 45℃에 이르게 한 후, 45℃ 물을 그것에 가하였다. 결과의 혼합물을 중간 전단하에 처리하여 조제물 D(표 6)의 예비-에멀젼과 외관이 매우 유사한, 농후 흰색 미정제 에멀젼을 생성하였다. 이들 에멀젼을 고압에서 더 균질화하여 미세한 에멀젼을 생성할 수 있다.

실시예 41

조제물 D( QW8184 )의 대규모 제조

이전 실시예에 설명된 것들과 유사한 과정을 사용하여, 조제물 D(표 6)를 다음의 조성을 갖는 2 x 2L 서브-로트로 대규모 제조하였다(음영 영역은 에멀젼의 기름 및 수상 함량을 표시한다).

예비-에멀젼의 제조를 위해서, 서브-로트 1의 오일상 416.8g 및 서브로트 2의 오일상 413.2g을 주사용 물 1580g과 혼합하였다(46℃에서 5분). 균질화에 의해서, 소규모일 때의 조제물 D의 평균 액적 직경(표 11)과 매우 유사한, 약 70nm의 평균 액적 직경을 갖는 미세한 에멀젼을 생성하였다. 이 규모화된 조제물을 0.2 미크론 필터를 통해 여과하여 더 무균처리하였다.

실시예 42

약물-미함유 에멀젼의 용혈 활성 평가

파클리탁셀의 부재하에 대규모(2.5L)의 조제물 D를 다음 조성으로 실시예 41에 설명된 바와 같이 제조하였다.

예비-에멀젼의 제조를 위해서, 오일상 496.7g을 주사용 물 2000g과 혼합하였다 (46℃에서 5분). 균질화 및 필터 살균하고, 이 조제물을 다음 과정을 사용하여 인간 혈액과의 총 용혈 반응에 대해 평가하였다.

지원자의 건강한 혈액을 Vacutainer 막대로 헤파린을 사용하여 수집하였다. 혈장은 처음에 담황색이었고, 용혈 현상에 대해 음성이었다. 몇방울의 전혈 및 약물-미함유 에멀젼을 함께 커버글래스 아래에 두고 수분간 현미경으로 관찰하였다. 접촉하고 있는 동안, 적혈구(RBC)는 정상적혈구로 남아있었다. 에멀젼 입자의 명백한 응집은 나타나지 않았다. 혈소판 또는 WBC 형태에서의 그로스 변화도 주목되지 않았다. 다음에, 시험 튜브에서 전혈 및 부형제를 1:1 및 5:1(v/v)로 혼합하였다. 대조군으로서, 전혈을 주사용 식염수와 1:1로 혼합하였다. 모든 혼합물을 37℃에서 인큐베이션하고, 10 및 30분에서 시험하였다. 3개 튜브 모두의 상청액은 담황색이었고 투명하였다. 에멀젼 부형제와 혈액 사이에 즉각적 총체적인 용혈 반응이 없음을 이 연구로부터 결론지을 수 있다. RBC의 계면활성제-유도 용혈 현상에 대한 문헌의 몇몇 보고와는 달리, 이것은 적혈구 멤브레인의 형태가 에멀젼에 존재하는 계면활성제에 의해 교란되지 않음을 시사한다.

실시예 43

물리적 안정성 데이타

표 16은 4℃ 또는 25℃에서 9개월 저장시의 실시예 41의 대규모 조제물의 장기간 안정성을 나타낸다. 이것은 적어도 이 저장 시간 동안 평균 방울 직경 및 99% 누적 분포가 각각 약 65 및 150nm인 그것의 초기 값으로부터 주목할만하게 변하지 않았다는 것을 증명하며, 이 에멀젼은 여전히 명세서의 범위내에 있다.

실시예 44

화학적 안정성

파클리탁셀 효능 및 공지된 분해물의 수준에 관한 실시예 41의 대규모 조제물의 9개월 화학적 안정성 데이타를 표 17 및 표 18에 나타낸다. 이들 결과로부터 알 수 있는 바와 같이, 약물 효험 또는 공지된 분해물의 수준에 중대한 변화는 없었고, 이 생성물은 여전히 두 저장 온도에서 명세서의 범위내에 있다.

실시예 45

효능 평가

실시예 41의 조제물을 실시예 18, 실시예 19 및 실시예 37에 기술된 바와 같은 B16 흑색종에 대한 효능에 대해 평가했고, 그 결과를 표 18에 요약한다.

a : % T/C = (처리군의 중간 종양 중량/대조군의 중간 종양 중량) x 100

b : % TGI = 100 - (% T/C)

c : T-C = 종양 성장 지연값(처리군(T) 및 대조군(C)가 정해진 크기(>750mg)에 도달하는 중간 시간)

d : Log 세포 죽임 = (T-C 값)/(3.32 x 종양 배증 시간)

모든 효능의 종료점까지, QW8184는 Taxol

의 MTD를 포함하거나 또는 상당히 초과하지만 내성이 있는 투여량으로 마우스에서 우수한 항종양 활성을 나타냈다. 그러한 효과는 이전의 주사가능한 파클리탁셀 에멀젼에 대해서는 보고되지 않았다. MTD는 정확한 독성 연구로부터 측정된 최대 내성 투여량이다.

실시예 46

효능 평가

인간 난소 종양 이종이식편 IGROV-1에 대한 QW8184(실시예 41)의 항종양 활성은 기준 조제물로서 시제품인 Taxol

을 사용하였다. 무모마우스 숙주에서 피하적으로 성장한 종양으로부터 수집된 IGROV-1 인간 난소 암종의 단편을 무모마우스에 투관침에 의해 피하적으로 이식하였다. 종양이 대략 5 x 5mm 크기였을 때, 동물을 귀에 꼬리표가 달린 종양을 지니는 마우스가 군 당 9 마리씩 함유된 처리 및 대조군으로 나누었다. QW8184를 20, 40 및 60mg/kg으로 q3dx5, q4dx5 및 qdx5 스케쥴에 따라 정맥내 투여하였다. Taxol

을 최대 내성 투여량인 20mg/kg으로 동일한 스케쥴에 따라 정맥내 투여하였다. 매주 2번 마우스의 중량을 재고, 종양 측정은 1일을 시작으로 캘리퍼스에 의해 행하고, mg 종양 중량으로 환산했다. 대조군 종양이 대략 1gr에 도달했을 때 실험을 종료하고, 종양을 절제하여 중량을 재고 군 당 평균 종양 중량을 계산하였다. 이 데이타를 표 20에 요약한다.

q3dx5 또는 q4dx5 스케쥴에 따른 20, 40 및 60mg/kg으로의 QW8184의 투여는 모든 투여량에서 거의 100% 종양 성장 억제를 가져왔고, 각각 2, 8 및 7, 그리고 3, 9 및 8 마리의 완전 종양 반응을 가진다. 비교로, Taxol

의 투여는 2개 스케쥴에 대해 3 마리의 완전 종양 반응을 가져왔다. qdx5 스케쥴에 대해서, QW8184 및 Taxol

의 항종양 활성은 유사하였다. 그러나, QW8184는 중독성 사망이 없음에 따라 더 내성이 있었고, 반면 Taxol

은 6 마리의 중독성 사망이 기록되었다. QW8184는 투여 스케쥴과 관계없이 투여량-의존 방식에서 IGROV-1 인간 난소 이종이식편 모델에 대해 매우 활성이었고, Taxol

보다 더 내성이 있었다.

실시예 47

약물동태학 연구

실시예 41의 조제물(QW8184)의 약물동태학을 래트에서 1회 10mg/kg 정맥내 투여시에 기준 조제물로서 Taxol

을 사용하여 측정하였다. 약물을 3시간 주입(Taxol

) 또는 거환 투여(QW8184)로서 수컷 또는 암컷 래트에 정맥내 투여하였다. 혈액 샘플을 투여량 투여 후 0 내지 72시간 수집하고, 혈장을 원심분리에 의해 제조하고 LC/MS/MS 검출기를 갖는 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)법을 사용하여 파클리탁셀 농도에 대해 분석하였다. 약물동태학 분석을 모델 독립적 방법을 사용하여 평균 복합 혈장 농도-시간 프로필에 대해 수행하였다. 유도된 약물동태학 파라미터를 표 21에 나타낸다. 측정된 약물동태학 파라미터는 다음과 같았다:

T_max : 최대 혈장 수준(C_max)에 도달하는데 필요한 시간

C_max : 약물의 최대 혈장 농도

AUC₀ _-t : 시간 0에서 혈장 샘플 수집의 종료 시간 t까지 혈장 농도-시간 곡선하의 비-외삽 영역

AUC₀ _-∞ : 시간 0에서 무한대까지 혈장 농도-시간 곡선하의 외삽 영역

K_e : 제거 속도 상수

T₁ _/2 : 제거 반감기

V_d : 분포 부피

CL : 혈장 클리어런스

V_ss : 정상상태에서의 분포 부피

QW8184의 정맥내 거환투여 후의 C_max 및 AUC₀ _-∞ 값은 모두 Taxol

의 정맥내 주입 후의 상응하는 값보다 상당히 높았다. 혈장에서 파클리탁셀의 말기 T₁ _/2는 2개 처리에 대해 유사하였다. 조직 결합은 정상상태에서의 분포 부피(V_ss)의 차이로부터 표시되는 바와 같이 QW8184 보다 Taxol

에서 더 광범위하였다. 파클리탁셀의 약물동태학 파라미터에서의 중대한 차이는 수컷 및 암컷 동물간에 관찰되지 않았다.

실시예 48

정맥내 투여를 위한 파클리탁셀의 토코트리엔올 에멀젼

다음의 5mg/mL 파클리탁셀을 함유하는 토코트리엔올 에멀젼을 제조했고, 이것은 마우스에서 정맥내 암 치료요법에 적합하다.

Gold Tri-E

토코트리엔올 농축물을 Golden Jomalina Food Industries (Kuala Lumpur, Malaysia)로부터 입수했다. 붉은 빛을 띤 갈색 오일의 HPLC 분석은 4개의 주요한 피크를 나타냈다. 대부분의 부분에서 약 20%의 잔류 d-α-토코페롤 함량으로 인해, 발명자들의 오일에 대한 추정 αTE는 ~0.3이다. 그것을 2부의 δ-토코페롤(Sigma Chemicals)로 희석하여 αTE를 0.1로 조정하였다. 약물 오일 용액을 우선 가열 및 초음파처리하면서 PEG-400에 파클리탁셀을 용해시킴으로써 제조하였다. 다음에, TPGS 및 토코트리엔올 오일을 가하였다. 마지막으로, poloxamer를 가하고 72℃에서 용융시켜 균질 투명한 호박색 기름을 얻었다. 혼합물을 rotevap에서 진공하에 기체를 제거하고, 사용할 때까지 45℃에 유지하였다.

5mM 시트레이트 TEA 버퍼(pH 6.8) 40mL로 구성된 수상을 첨가 전에 45℃에 이르게 하였다. 첨가시 결과의 혼합물을 격렬하게 혼합하여 플라스크 벽상의 어떤 점착성 오일을 유리시켰다. 다음에, 이 현탁액을 공급 용기에 두고, 연속 재순환하면서 10분간 C5 균질화기에서 처리하였다. 처리 조건은 45℃ 공급 온도, 20Kpsi 처리 압력, 120mL/분 흐름 속도였다. 22℃로 설정한 열 교환기를 출구 포트에 두어 균질화기에서 발생된 과잉의 열을 제거하였다. 공급 용기의 온도는 정상상태 균질화 동안 44℃로 측정되었다.

처리 후, 생성물을 수집하고 실온으로 냉각하였다. 다음에, 에멀젼을 마지막에 0.2um 필터를 통해 여과하여 무균처리했으며, 에멀젼은 Nicomp 370 광자 상관 분광광도계상에서 측정했을 때 ~70nm의 평균 입자 크기를 갖는다. 취급의 편의를 위해서, Gen tamycin 15ug/mL을 방부제로서 가하였다.

그것의 낮은 점도의 결과로서, 토코트리엔올 부화 부분(Gold Tri-E)의 사용은 이 에멀젼을 오일상으로서 d,l-α-토코페롤(Roche Vitamins)을 사용하여 만들어진 비슷한 에멀젼보다 실질적으로 더욱 처리하기 쉽게 만들었다.

실시예 49

정맥내 투여를 위한 파클리탁셀의 δ-토코페롤 에멀젼

소규모 혼합물은 조제물 개발에 있어 가치가 있다. 이 실시예에서, ~0.0의 αTE 함량을 갖는 d-δ-토코페롤을 90% 순도로 Sigma Chemical로부터 구입했다. 약물 용액을 다음 표에 따라서 각각의 혼합물로 제조하였다.

탈수 에탄올을 사용하여 우선 약물 결정을 용해하였다. 다음에, 샘플을 중량측정시 모든 에탄올이 제거될 때까지 rotevap 상의 진공하에 두었다. 모든 샘플을 냉각하고 조사하였다. 각 샘플은 무거운 호박색 오일의 δ-토코페롤 중의 파클리탁셀 용액으로 구성되어 있었고, 시각적으로 투명하였다. 계산된 기름중의 파클리탁셀 농도를 아래에 나타낸다.

이들 오일/약물 혼합물에 50mg TPGS 및 10mg Poloxamer 407을 계면활성제로서 가하였다. PEG-400 60mg을 오스몰라이트로서 가하였다. 혼합물을 가열하면서 용해하여 황금색 오일을 형성하였다. 이들 기름의 αTE 함량은 TPGS 계면활성제가 선택적으로 고려되는 경우 0.08 αTE 유니트이고, 토코페롤 오일상 단독으로 측정에 사용되는 경우 0.0 αTE 유니트이다.

다음에, 이 오일-약물 농축물을 45℃로 냉각하고, 온수 850㎕를 가하였다. 마이크로팁 초음파처리 혼(horn)을 사용하여, 조입자의 예비-에멀젼을 제조하였다. 현미경 조사는 입자가 실질적으로 10㎛ 직경 미만인 농후 현탁액을 나타냈고, 이것은 균질화기에서 더 처리하고, pH 및 삼투 강도의 조정, 및 최종적인 무균처리 여과로 비경구용 주사에 적합해진다.

실시예 50

정맥내 투여를 위한 파클리탁셀의 메틸카르보네이트 유도체( BMS -188797)의 에멀젼 조제물

BMS-188797을 우선 에탄올에 용해하고, 다음에 α-토코페롤, Myvacet 9-45(존재할 때), TPGS, poloxamer 407 및 PEG400을 가하고 고온(약 60℃)에서 혼합하였다. 다음에, 에탄올을 고온에서 진공하에 제거하여 약물을 포함한 투명한 오일상을 얻었다. 이어서, 이것을 45℃에서 주사용 물과 혼합하여 예비-에멀젼을 제조하였다. 최종 에멀젼은 온도를 35에서 45℃ 사이로 유지하면서 19 내지 20Kpsi로 10 내지 15분간 Avestin C5 균질화기에서 균질화함으로써 제조하였다. 일부의 대표적 에멀젼의 조성을 아래 표에 나타낸다. 이들 에멀젼의 평균 액적 직경 및 99% 누적 분포는 각각 0.1 및 0.2㎛ 미만으로 측정되었다. 이들 에멀젼은 여과하여 무균처리할 수 있고, 실온에서 안정하며, 동물에서 충분히 내성이 있으며, 효능이 있다.

실시예 52

클라리트로마이신의 에멀젼 조제물

매크롤리드 항생제인 클라리트로마이신을 Wockhardt(Delhi, India)로부터 자유 염기로서 구입하였다. 비타민 E 숙시네이트(VESA)를 Eastman(Freeport TN)으로부터 구입하였다. Abitec(Janesville WI)로부터 Capmul MCM을; BASF(Parsippany NJ)로부터 Poloxamer F127을; Spectrum Chemicals(Gardenia CA)로부터 PEG400을; 그리고 Sigma Chemic als(St Louis MO)로부터 d-δ-토코페롤을 구입하였다. d-δ-토코페롤 및 Capmul MCM으로 구성된 오일상을 2부의 δ-토코페롤을 사용하여 제조하였다. 오일상의 αTE는 0.0이다. 다음에, 계면활성제 및 클라리트로마이신을 아래 표에 나타낸 바와 같이 가하였다. 드라이 에탄올을 사용하여 70℃에서 성분들을 용해하고, 다음에 에탄올을 진공하에 제거하였다.

5mM 시트레이트 TEA 버퍼(pH 6.8) 40mL로 구성된 수상을 첨가 전에 45℃에 이르게 하였다. 첨가시 결과의 혼합물을 격렬하게 혼합하여 플라스크 벽상의 어떤 점착성 기름을 유리시켰다. 다음에, 이 현탁액을 공급 용기에 두고, 연속 재순환하면서 3분간 C5 균질화기(Avestin, Ottawa CA)에서 처리하였다. 처리 조건은 45℃ 공급 온도, 20Kpsi 처리 압력, 120mL/분 유속이었다. 22℃로 설정한 열교환기를 출구 포트에 두어 균질화기에서 발생된 과잉의 열을 제거하였다. 공급 용기의 온도는 정상상태 균질화 동안 44℃로 측정되었다.

처리 후, 생성물을 수집하고 실온으로 냉각하였다. 다음에, 에멀젼을 0.2um 필터를 통해 최종적으로 여과하여 무균처리했으며, 에멀젼은 Nicomp 370 광자 상관 분광광도계상에서 측정했을 때 52nm미만의 평균 입자 크기를 가졌다.

본 발명에 따른 에멀젼 부형제는 저렴하고, 비자극적이며 또는 심지어 영향적이며 본질적으로 고식적이며, 열이나 여과에 의해 최종적으로 무균화될 수 있으며, 제어된 저장조건에서 안정하며, 광범위한 수불용성 및 난용성 약물을 수용하며 실질적으로 에탄올이 없는 효과를 달성한다.

Claims

수 불용성인 치료제;

알파-토코페롤, 델타-토코페롤, 감마-토코페롤, 베타-토코트리에놀, 델타-토코트리에놀, 감마-토코트리에놀, 데스메틸토코트리에놀 및 디데스메틸토코트리에놀에서 선택되는 토콜;

디메틸 술폭시드, 디메틸 아미드, 에틸렌 글리콜, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 소르비톨, 만니톨, 폴리에틸렌 글리콜, N-메틸-2-피롤리돈 및 폴리비닐피롤리돈에서 선택되는 공용매; 그리고

토코페롤과 폴리에틸렌 글리콜의 유도체를 포함하는 계면활성제를 포함하며, 에탄올이 없는 것을 특징으로 하는 약학조성물.
제 1 항에 있어서, 공용매는 100 내지 10,000의 분자량을 갖는 폴리에틸렌 글리콜을 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 2 항 중 어느 한 항에 있어서, 수상을 더 포함하며, 에멀젼, 마이크로에멀젼 또는 미셀 용액의 형태인 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 2 항 중 어느 한 항에 있어서, 자가-유화되는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 4 항에 있어서, 캡슐에 싸여있는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 2 항 중 어느 한 항에 있어서, 치료제는 화학요법제인 것을 특징으로 하는 조성물.
제 6 항에 있어서, 화학요법제는 탁산, 탁신 및 탁소이드에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 6 항에 있어서, 화학요법제는 파클리탁셀 및 파클리탁셀의 유사체에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 6 항에 있어서, 화학요법제는 파클리탁셀, 파클리탁셀의 메틸카보네이트 유도체, 2-데벤조일-2-아로일 및 C-2-아세톡시-C-4-벤조에이트 파클리탁셀, 7-데옥시탁솔, C-4 아지리딘 파클리탁셀, 및 천연 또는 합성 중합체, 지방산, 인지질, 또는 1,2-디아시클로옥시프로판-3-아민과의 파클리탁셀 콘주게이트에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 6 항에 있어서, 화학요법제는 파클리탁셀인 것을 특징으로 하는 조성물.
제 6 항에 있어서, 화학요법제는 도세탁셀 및 도세탁셀의 유사체에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 내지 제 2 항 중 어느 한 항에 있어서, 치료제는 에포틸론 A 및 B, 디스코데르몰리드, 노나탁셀 및 엘레우테로빈에서 선택되는 미소관 표적화제인 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 치료제는 클라리트로마이신, 에리트로마이신, 시프로플록사신, 캄프토테신, 독소루비신, 발프로산 및 이들의 유사체에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 치료제는 2 이상의 옥타놀/물 분배계수를 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 토코페롤과 폴리에틸렌 글리콜의 유도체는 토코페롤의 에스테르, 또는 에테르, 또는 에스테르 및 에테르 둘 다를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 토코페롤과 폴리에틸렌 글리콜의 유도체는 알파-토코페롤의 에스테르, 또는 에테르, 또는 에스테르 및 에테르 둘 다를 포함하 는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 토코페롤과 폴리에틸렌 글리콜의 유도체는 알파-토코페롤 폴리에틸렌 글리콜 숙시네이트를 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 토코페롤과 폴리에틸렌 글리콜의 유도체에 대한 토콜의 비는 1:1 내지 20:1 w/w인 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 폴리옥시프로필렌-폴리옥시에틸렌 비이온성 블록 공중합체, 지방산 에스테르, 지방산 아민, 글리세롤 에스테르, 프로필렌 글리콜 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 에스테르, 수크로스 지방산 에스테르, 인지질 및 페길화된 인지질에서 선택된 제 2의 계면활성제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 폴록사머 407, 폴리에틸렌 글리콜 660 히드록시스테아레이트, 레시틴 및 디미리스토일 포스파티딜 에탄올아민-폴리에틸렌 글리콜에서 선택되는 제 2의 계면 활성제를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 에멀젼의 형태이며, 실질적으로 모든 치료 제가 오일상 중에 있는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 에멀젼의 형태이거나, 또는 10 내지 500nm의 입자크기를 가지는 에멀젼을 형성하는 것을 특징으로 하는 조성물.
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 에멀젼의 형태이거나, 또는 10 내지 100nm의 입자크기를 가지는 에멀젼을 형성하는 것을 특징으로 하는 조성물.