RU2018121653A - Улучшенное разделение белков при ионообменной хроматографии - Google Patents
Улучшенное разделение белков при ионообменной хроматографии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2018121653A RU2018121653A RU2018121653A RU2018121653A RU2018121653A RU 2018121653 A RU2018121653 A RU 2018121653A RU 2018121653 A RU2018121653 A RU 2018121653A RU 2018121653 A RU2018121653 A RU 2018121653A RU 2018121653 A RU2018121653 A RU 2018121653A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gradient
- proteins
- running
- salt
- mixture
- Prior art date
Links
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims 19
- 238000000926 separation method Methods 0.000 title claims 7
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 13
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims 6
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 4
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims 2
- UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]propane-1-sulfonate Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCC[N+](C)(C)CCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 UMCMPZBLKLEWAF-BCTGSCMUSA-N 0.000 claims 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 claims 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 claims 1
- 239000007993 MOPS buffer Substances 0.000 claims 1
- 239000012615 aggregate Substances 0.000 claims 1
- 238000005349 anion exchange Methods 0.000 claims 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims 1
- 239000006177 biological buffer Substances 0.000 claims 1
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 claims 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 claims 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 claims 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims 1
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction, e.g. ion-exchange, ion-pair, ion-suppression or ion-exclusion
- B01D15/361—Ion-exchange
- B01D15/362—Cation-exchange
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction, e.g. ion-exchange, ion-pair, ion-suppression or ion-exclusion
- B01D15/361—Ion-exchange
- B01D15/363—Anion-exchange
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/165—Extraction; Separation; Purification by chromatography mixed-mode chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
- C07K16/065—Purification, fragmentation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/55—Fab or Fab'
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Claims (23)
1. Способ разделения и очистки белка из смеси белков, с помощью этапов:
а) обеспечение образца, содержащего по меньшей мере два различных белка,
б) нанесение этой смеси на ионообменный материал с общим содержание белка ≥5 мг/мл, в особенности ≥30 мг/мл, в частности ≥60 мг/мл,
в) прогон противоположного градиента рН-соль путем повышения рН и снижения концентрации соли для разделения белков, или наоборот, прогон снижающегося рН и повышающейся концентрации соли, или прогон возрастающего градиента рН, или прогон понижающегося рН градиента,
г) использование данных разделения из в) для определения и прогона профиля стадии элюирования для разделения белков и
д) разделение белков путем ступенчатого элюирования.
2. Способ разделения и очистки белка из смеси белков, с помощью этапов:
а) обеспечение образца, содержащего по меньшей мере два различных белка,
б) нанесение этой смеси на ионообменный материал с общим содержание белка ≥5 мг/мл, в особенности ≥30 мг/мл, в частности ≥60 мг/мл,
в) прогон противоположного градиента рН-соль путем повышения рН и снижения концентрации соли для разделения белков, или наоборот, прогон снижающегося рН и повышающейся концентрации соли, или прогон возрастающего градиента рН, или прогон понижающегося рН градиента,
г) разделение белков путем градиентного элюирования.
3. Способ по п. 1 или 2, в котором смесь белков адсорбирована или связана с и элюируется из ионообменного материала.
4. Способ по п. 1 или 2, в котором смесь белков адсорбирована и элюируется из катионообменного материала.
5. Способ по п. 1 или 2, в котором смесь белков адсорбирована и элюируется из анионообменного материала.
6. Способ по п. 1, в котором смесь белков адсорбирована или связана и элюируется из хроматографического материала смешанного режима.
7. Способ по пп. 1-6, в котором в
в) противоположный рН-солевой градиент индуцирован буферной системой, использующей MES, MOPS, CHAPS и аналогичные биологические буферы и системы изменения электропроводимости с применением хлорида натрия.
8. Способ по пп. 1-6, в котором в в) рН изменяют в диапазоне от 4-10,5 и концентрацию соли в диапазоне 0-1М соли.
9. Способ по пп. 1-6, в котором градиент рН индуцирован путем применения буферной системы, доведенной до рН 5 и 9,5.
10. Способ по одному или нескольким пп. 1-9, в котором солевой градиент индуцирован в интервале концентрации в диапазоне 0-0,25 М.
11. Способ по одному или нескольким пп. 1-10, в котором градиент рН индуцирован путем применения буферной системы по крайней мере двух буферных растворов, таким образом адсорбция или связывание белков осуществляется в присутствии одного буферного раствора, а элюирование осуществляется в присутствии возрастающих концентраций другого буферного раствора, при этом значение рН возрастает, а концентрация соли снижается одновременно.
12. Способ по одному или нескольким пп. 1-10, в котором градиент рН индуцирован путем применения буферной системы по крайней мере двух буферных растворов, таким образом адсорбция или связывание белков осуществляется в присутствии одного буферного раствора, а элюирование осуществляется в присутствии возрастающих концентраций другого буферного раствора, при этом рН снижается и концентрация соли возрастает одновременно.
13. Способ по одному или нескольким пп. 1-12, где белки, в частности моноклональные антитела (mAB), разделяют и очищают от их ассоциированных заряженных вариантов, вариантов гликозилирования, и/или вариантов растворимых размеров, димеров и агрегатов, мономеров, 2/3 фрагментов, 
фрагментов, фрагментов в общем, антигенсвязывающих фрагментов (Fab) и Fc фрагментов.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP15195242 | 2015-11-18 | ||
| EP15195242.1 | 2015-11-18 | ||
| PCT/EP2016/001803 WO2017084737A1 (en) | 2015-11-18 | 2016-10-28 | Improved protein separation in ion exchange chromatography |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2018121653A true RU2018121653A (ru) | 2019-12-19 |
| RU2018121653A3 RU2018121653A3 (ru) | 2020-01-31 |
Family
ID=54608366
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2018121653A RU2018121653A (ru) | 2015-11-18 | 2016-10-28 | Улучшенное разделение белков при ионообменной хроматографии |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20180327447A1 (ru) |
| EP (1) | EP3377513A1 (ru) |
| JP (1) | JP2018538268A (ru) |
| KR (1) | KR20180083409A (ru) |
| CN (1) | CN108350026A (ru) |
| AU (1) | AU2016355739A1 (ru) |
| BR (1) | BR112018009881A2 (ru) |
| CA (1) | CA3005483A1 (ru) |
| IL (1) | IL259180A (ru) |
| MX (1) | MX2018005834A (ru) |
| RU (1) | RU2018121653A (ru) |
| SG (1) | SG11201804082XA (ru) |
| WO (1) | WO2017084737A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3876996A1 (en) * | 2018-11-05 | 2021-09-15 | Bristol-Myers Squibb Company | Method for purifying pegylated protein |
| IL294901A (en) * | 2020-01-24 | 2022-09-01 | Alkermes Pharma Ireland Ltd | Methods of purification |
| WO2021210662A1 (ja) * | 2020-04-17 | 2021-10-21 | 小野薬品工業株式会社 | タンパク質製剤原薬の着色除去方法 |
| US20230167153A1 (en) * | 2020-05-01 | 2023-06-01 | Kashiv Biosciences, Llc | An improved process of purification of protein |
| WO2022239704A1 (ja) * | 2021-05-10 | 2022-11-17 | 株式会社カイオム・バイオサイエンス | 抗体組成物の精製方法 |
| WO2024261724A1 (en) * | 2023-06-23 | 2024-12-26 | Lupin Limited | Ion-exchange chromatography for separation and analysis of charge variants |
| US20250251376A1 (en) * | 2024-01-26 | 2025-08-07 | Mriglobal | Systems and methods for separation of crispr/cas components |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ATE321066T1 (de) * | 1998-05-06 | 2006-04-15 | Genentech Inc | Anti-her2 antikörperzusammensetzung |
| CN1234725C (zh) * | 2004-04-07 | 2006-01-04 | 陈志南 | 一种高效快速纯化制备片段抗体的方法 |
| TWI320788B (en) * | 2005-05-25 | 2010-02-21 | Hoffmann La Roche | Method for the purification of antibodies |
| BR112012024956A2 (pt) * | 2010-03-30 | 2016-07-12 | Octapharma Ag | processo para a purificação de uma proteína de fator de crescimento |
| SG10201701224UA (en) * | 2012-03-12 | 2017-04-27 | Merck Patent Gmbh | Removal of protein aggregates from biopharmaceutical preparations in a flowthrough mode |
| US9150645B2 (en) * | 2012-04-20 | 2015-10-06 | Abbvie, Inc. | Cell culture methods to reduce acidic species |
| KR102133699B1 (ko) * | 2012-09-11 | 2020-07-14 | 코히러스 바이오사이언시즈, 인코포레이티드 | 고순도 및 탁월한 수율의 정확하게 폴딩된 에타너셉트 |
| BR112015011011A2 (pt) * | 2012-11-15 | 2019-12-17 | Genentech Inc | cromatografia por troca de íon com gradiente de ph mediada por força iônica |
| CN104628846B (zh) * | 2013-11-06 | 2019-12-06 | 三生国健药业（上海）股份有限公司 | 重组蛋白质的纯化方法 |
| DK2905289T3 (en) * | 2014-02-11 | 2017-01-30 | Richter-Helm Bio Tec Gmbh & Co Kg | Method of Purifying Teriparatide (PTH1-34) |
| EP3377514A1 (en) * | 2015-11-18 | 2018-09-26 | Merck Patent GmbH | Opposite ph-salt gradients for improved protein separations |
-
2016
- 2016-10-28 CN CN201680067565.9A patent/CN108350026A/zh active Pending
- 2016-10-28 JP JP2018526200A patent/JP2018538268A/ja active Pending
- 2016-10-28 WO PCT/EP2016/001803 patent/WO2017084737A1/en active Application Filing
- 2016-10-28 KR KR1020187017147A patent/KR20180083409A/ko not_active Withdrawn
- 2016-10-28 AU AU2016355739A patent/AU2016355739A1/en not_active Abandoned
- 2016-10-28 RU RU2018121653A patent/RU2018121653A/ru not_active Application Discontinuation
- 2016-10-28 BR BR112018009881A patent/BR112018009881A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2016-10-28 MX MX2018005834A patent/MX2018005834A/es unknown
- 2016-10-28 SG SG11201804082XA patent/SG11201804082XA/en unknown
- 2016-10-28 CA CA3005483A patent/CA3005483A1/en not_active Abandoned
- 2016-10-28 EP EP16788429.5A patent/EP3377513A1/en not_active Withdrawn
- 2016-10-28 US US15/776,941 patent/US20180327447A1/en not_active Abandoned
-
2018
- 2018-05-07 IL IL259180A patent/IL259180A/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2018121653A3 (ru) | 2020-01-31 |
| SG11201804082XA (en) | 2018-06-28 |
| EP3377513A1 (en) | 2018-09-26 |
| JP2018538268A (ja) | 2018-12-27 |
| CN108350026A (zh) | 2018-07-31 |
| BR112018009881A2 (pt) | 2018-11-13 |
| AU2016355739A1 (en) | 2018-07-05 |
| MX2018005834A (es) | 2018-08-01 |
| KR20180083409A (ko) | 2018-07-20 |
| WO2017084737A1 (en) | 2017-05-26 |
| IL259180A (en) | 2018-07-31 |
| CA3005483A1 (en) | 2017-05-26 |
| US20180327447A1 (en) | 2018-11-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2018121653A (ru) | Улучшенное разделение белков при ионообменной хроматографии | |
| RU2018121657A (ru) | ПРОТИВОПОЛОЖНЫЕ ГРАДИЕНТЫ pH-СОЛЬ ДЛЯ УЛУЧШЕННОГО РАЗДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВ | |
| DK2791176T3 (en) | PROCEDURE FOR CLEANING ANTIBODIES | |
| US10246484B2 (en) | Method for purifying recombinant protein | |
| ES2826123T3 (es) | Método de purificación de anticuerpos | |
| Jungbauer et al. | Ion-exchange chromatography | |
| JP2015537212A5 (ru) | ||
| JP2018510867A5 (ru) | ||
| US9695216B2 (en) | Materials and methods for removing endotoxins from protein preparations | |
| RU2015122726A (ru) | ОПОСРЕДОВАННАЯ ИОННОЙ СИЛОЙ рН-ГРАДИЕНТНАЯ ИОНООБМЕННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ | |
| JP2015503524A5 (ru) | ||
| HRP20192217T1 (hr) | ULTRA-PROČIŠĆENI DsbA I DsbC TE POSTUPCI NJIHOVE IZRADE I UPORABE | |
| JP2018516229A5 (ru) | ||
| JP2016513643A (ja) | 漏出したアフィニティ精製リガンドの除去 | |
| Walch et al. | Continuous desalting of refolded protein solution improves capturing in ion exchange chromatography: a seamless process | |
| Mönster et al. | One-step-purification of penicillin G amidase from cell lysate using ion-exchange membrane adsorbers | |
| Ralla et al. | Application of conjoint liquid chromatography with monolithic disks for the simultaneous determination of immunoglobulin G and other proteins present in a cell culture medium | |
| CN113166200A (zh) | 一种提高蛋白a层析法去除聚集体的方法 | |
| US20130164827A1 (en) | Protein separation via ion-exchange chromatography and associated methods, systems, and devices | |
| Yoshimoto et al. | Connected flow-through chromatography processes as continuous downstream processing of proteins | |
| Mönster et al. | Isolation and purification of blood group antigens using immuno-affinity chromatography on short monolithic columns | |
| Srour et al. | Histidine based adsorbents for selective removal of monoclonal immunoglobulin IgM antibodies from Waldenstrom's macroglobulinemia patient sera: A preliminary study | |
| Vajda et al. | Hydrophobic interaction chromatography for the purification of antibodies | |
| Boschetti et al. | Mixed-bed chromatography as a way to resolve peculiar protein fractionation situations | |
| Bresolin et al. | Purification of anti-interleukin-6 monoclonal antibody using precipitation and immobilized metal-ion affinity chromatography |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA92 | Acknowledgement of application withdrawn (lack of supplementary materials submitted) |
Effective date: 20200818 |